MX2013003833A

MX2013003833A - Combinaciones farmaceuticas.

Info

Publication number: MX2013003833A
Application number: MX2013003833A
Authority: MX
Inventors: Yan Chen; Leon Murphy; Xizhong Huang; Beat Nyfeler
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2010-10-04
Filing date: 2011-10-03
Publication date: 2013-06-28
Also published as: MA34554B1; NZ608375A; PE20140203A1; CA2812786A1; EP2624831A1; JP2013538876A; AR083267A1; BR112013008074A2; ECSP13012541A; TW201217374A; RU2013120357A; CL2013000895A1; WO2012047775A1; KR20130108330A; CO6710908A2; SG188521A1; US20130178479A1; AU2011312372A1; CN103153305A

Abstract

La presente invención, se refiere a una combinación farmacéutica que comprende: (a) un inhibidor catalítico de mTor, tal como una cinasa de fosfatidil-inositol-3 catalítica (PI3K), y un compuesto inhibidor de mTor, el cual es un derivado de imidazoquinolina, y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente, cuando menos un vehículo farmacéutica- mente aceptable, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia, en particular para el tratamiento de las enfermedades proliferativas dependientes de cinasa del objetivo de mamífero de rapamicina (mTOR); y a los usos de esta combinación en el tratamiento de las enfermedades proliferatívas dependientes de la cinasa mTor; a una composición farmacéutica, la cual comprende dicha combinación; al uso de esta combinación para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad proliferativa; a un paquete o producto comercial que comprende esta combinación como una preparación combinada, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia; y a un método para el tratamiento de un animal de sangre caliente, en especial de un ser humano.

Description

COMBINACIONES FARMACÉUTICAS Campo de la Invención La presente invención, se refiere a una combinación farmacéutica que comprende: (a) un compuesto inhibidor de cinasa de fosfatidil-inositol-3 catalítica (PI3K) / objetivo de mamífero de i rapamicina (mTOR), el cual es un derivado de imidazoquinolina de la fórmula (I), y (b) cuando menos un compuesto aloestéricp inhibidor de mTor, y opcionalmente, cuando menos un vehículo i farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia; y a los usos de esta combinación en el tratamiento de una enfermedad proliferativa, más específicamente 1 de una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor; a una composición farmacéutica, la cual comprende dicha combinación; al uso de esta combinación para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad proliferativa, más específicamente de una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor; a un método para el tratamiento de un sujeto que lo necesite, en especial un ser humano; y a un paquete o¡ producto comercial que comprende esta combinación como una preparación combinada, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia.

Antecedentes de la Invención En las células de mamífero, la cinasa del objetivo de rapamicina (mTOR) existe como un complejo de múltiples proteínas j descrito como el complejo mTORCI o el complejo mTORC2, que detecta la disponibilidad de nutrientes y energía, e integra las introducciones a partir de los factores de crecimiento y la señalización de estrés. El complejo mTORCI es sensible a los compuestos inhibidores aloestéricos de mTor (tales como la rapamicina); está compuesto de mTOR, GSL, y proteínas asociadas con la regulación de mTor (raptor); y se enlaza a la proteína FKBP12 de peptídil-prolil-isomerasa (una proteína 1A que se enlaza al FK506, de 12 kDa). En contraste, el complejo mTORC2 está compuesto de mTOR, GIJL, y proteínas compañeras de mTor insensibles a la rapamicina (rictor), y no se enlazan a la proteína FKBP12 in vitro.

Se ha demostrado que el complejo mTORCI está involucrado i en el control de traducción de proteínas, operando como un factor de crecimiento y como un aparato sensible a los nutrientes para la regulación del crecimiento y la proliferación. mTORCI regula la traducción de proteínas por medio de dos sustratos clave corriente abajo: cinasa S6, que a su vez fosforila la proteína riboso(mal S6, y la proteína 1 de enlace del factor de inicio de traducción éucariótica 4E (4EBP1), que tiene una función clave en la modulación de la traducción dependiente de cap regulada por elF4E. El complejo mTORCI regula el crecimiento celular en respuesta a la homeostasia de energía y nutrientes de la célula, y la desregulación del; complejo mTORCI es común en una amplia variedad de cánceres humanos. La función de mTORC2 involucra la regulación de la sobrevivencia celular por medio de la fosforilación de Akt (Sarbassov y colaboradores, Science, 2005, 307: 1098-1101), y la modulación de la dinámica del citoesqueleto de actina (Jacinto y colaboradores, Nat. Cell. Biol., 2004, 6: 1122-1128).

El complejo mTORCI es sensible a los compuestos inhibidores aloestéricos de mTor, tales como rapamicina y sus derivados, en gran parte debido al modo de acción del compuesto aloestérico inhibidor de mTor, el cual involucra la formación de un, complejo intracelular con la FKBP12 y el enlace al dominio de enlace de FKBP 12-rapamicina (FRB) de mTor (Choi y colaboradores, Science, 1996, 273: 239-242). Esto da como resultado un cambio de conformación en mTORCI, el cual se cree que altera y debilita la interacción con su proteína de andamiaje raptor, impidiendo a su vez que los sustratos tales como S6K1 tengan acceso a mTor y sean fosforilados (Hará y colaboradores, Cell, 2002, 110(2): 177-89; Kim y colaboradores, Cell, 2002, 110(2): 163-75; Oshiro y colaboradores, Genes células, 2004, 9(4): 359-66). La rapamicina y los rapálogos, tales como RAD001 o CCI-779, han alcanzado relevancia clínica por inhibir la h íper-activación de mTor asociada con los trastornos de proliferación tanto benignos como malignos (Dancey, Nature Reviews Clinical Oncology, 2010, 7: 209-219; Hidalgo y Rowinsky, Óncogene, 2000, 19: 6680-6686).

Everolimus (Afinitor®, Novartis) es un fármaco aprobado por la FDA para el tratamiento de cáncer de riñon avanzado y todavía se está investigando en otros diferentes estudios clínicos en fase III en oncología. Los estudios clínicos previos han demostrado que el Everolimus es capaz de inhibir la proliferación de una amplia i variedad de líneas celulares tumorales, tanto in vitro como in vivo, presumiblemente a través de la supresión de la función de mTORCI sensible a la rapamicina. El everolimus, como un derivado de rapamicina, es un compuesto aloestérico inhibidor de mTor que es altamente potente para inhibir parte de la función de mTORCI, es decir, la cinasa S6 (S6K), y el sustrato S6 corriente abajo de S6K. Sin embargo, el everolimus (y otros análogos de rapamicina) tiene poco o ningún efecto en la inhibición de los sucesos de fosforilación de preparación en 4EBP1 (T37/46), el cual recientemente se ha implicado en Hsieh y colaboradores, Cáncer Cell, 17(3): 249-261 (2010) como un impulsor clave en la tumorigénesis y en el mantenimiento. Y los compuestos inhibidores aloestéricos de mTor como everolimus (y otros análogos de rapamicina) tienen poco o ningún efecto en la inhibición de la senda de mTORC2¡ o en su activación resultante de la señalización de Akt.

En contraste, se ha encontrado que los compuestos inhibidores de mTor catalíticos que compiten con el ATP se dirigen al dominio de cinasa mTor directamente, y se dirigen tanto al mTORCI como al mTORC2 (Feldman y colaboradores, PLoS Biology, 2009, 7(2): e1000038; Garcia-Martinez y colaboradores, Biochem. J., 2009, 421(Pt. 1): 29-42; Thoreen y colaboradores, J. Biol. Chem., 2009, 284: 8023-8032; Yu y colaboradores, Cáncer Res., 2009, 69: 6232). Éstos son inhibidores de mTORCI más efectivos que los compuestos inhibidores aloestéricos de mTor, tales como rapamicina, debido a que modulan las producciones de mTORCI resistente a la rapamicina, tales como la fosforilación de 4EBP1-T37/46 y la traducción dependiente de cap.

Los derivados de imidazoquinolina específicos y su preparación se han descrito en la Publicación Internacional Número WO2006/122806 e incluyen los compuestos de la fórmula (l¡): en donde R,, R2, R3, R , R5, n, R6 y R7 se definen como se estipula en la presente, o un tautómero de los mismos, !0 una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato de los mismos. Se ha probado que los derivados de imidazoquinolina, tales como 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1 -¡ l-3-tr¡flu oróme til -fe ni l)-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona ("Compuesto A") son inhibidores de PI3K/mTOR efectivos, por ! ejemplo, Publicación Internacional Número WO2008/103636 y ; Maira y colaboradores, Mol. Cáncer Ther., 7(7): 1851-1863 (Julio de 2008), que exhiben una amplia actividad contra un gran panel ;de líneas celulares de cáncer humanas cultivadas.

Actuando como un inhibidor catalítico de PI3K/mTOR, el compuesto derivado de imidazoquinolina de 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1-il)-fenil]- propionitrilo es capaz de desactivar la función completa del complejo mTORCI, incluyendo tanto la función sensible a la ríapamicina (fosforilación de S6K, y subsiguientemente fosforilación de S6), como la función insensible a la rapamicina (fosforilación de 4ÉBP1). El compuesto derivado de imidazoquinolina de 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il)-fenil]-propionitrilo tiene un efecto diferencial de acuerdo con la concentración de fármaco utilizada, en donde la inhibición de mTor predomina en una concentración baja (menos de 100 nanomoles/ litro) pero se observa una inhibición doble de PI3K/mTor en concentraciones relativamente más altas (aproximadamjente 500 nanomoles/litro). (Por ejemplo, Serra y colaboradores, Caricer Res., 68(19): 8022-8030 (Octubre 1, 2008)).

A pesar de las numerosas opciones de tratamiento para los pacientes con enfermedades proliferativas, sigue existiendo una necesidad de agentes terapéuticos efectivos y seguros que se puedan administrar a los sujetos que lo necesiten en dosis bajas, y una necesidad de su uso preferencial en la terapia de combinación. De una manera sorprendente, se ha descubierto que la combinación de bajas cantidades del compuesto de la fórmula (I), con bajas cantidades de un compuesto aloestérico inhibidor de mTor,, tal como everolimus, da como resultado una mejora inesperada en el tratamiento de las enfermedades tumorales. Cuando se administra de una manera simultánea, en secuencia, o por separado, el compuesto de la fórmula (I), y el compuesto aloestérico inhibidor ¡de mTor interactúa de una manera sinérgica para inhibir la proliferación celular. Esta interacción sinérgica inesperada permite hacer una reducción en la dosis requerida de cada compuesto, conduciendo a una reducción in los efectos secundarios y a una mejora de la efectividad clínica de los compuestos y del tratamiento.

Breve Descripción de la Invención La presente invención, se refiere a una combinación farmacéutica novedosa, la cual comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I): en donde: R-i es naftilo o fenilo, en donde el fenilo está sustituido por uno I o dos sustituyentes seleccionados independientemente a partir del grupo que consiste en Halógeno; alquilo inferior insustituido o sustituido por halógeno, ciano, imidazolilo o triazolilo; cicloalquilo; amino sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente a partir del grupo que consiste en alquilo inferior, alquilo inferior-sulfonilo, alcoxilo inferior, y alcoxiló inferior-alquilo inferior-amino; piperazinilo insustituido o sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente a partir del i grupo que consiste en alquilo inferior, y alquilo inferior-sulfonilo; 2-oxo-pirrolidinilo; alcoxilo inferior-alquilo inferior; imidazolilo; pirazolilo; y triazolilo; R2 es O o S; R3 es alquilo inferior; R es piridilo insustituido o sustituido por halógeno, ciano, alquilo inferior, alcoxilo inferior, o piperazinilo insustituido o sustituido por alquilo inferior; pirimidinilo insustituido o sustituido por alcoxilo inferior; quinolinilo insustituido o sustituido por halógeno; quinoxalinilo; o fenilo sustituido con alcoxilo; R5 es hidrógeno o halógeno; n es 0 ó 1 ; R6 es óxido; con la condición de que, si n = 1, el radical portador del átomo de nitrógeno (N) R6 tiene una carga positiva; R7 es hidrógeno o armiño; o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, en donde el compuesto mencionado de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia, en particular para el tratamiento de una enfermedad proliferátiva, más específicamente de una enfermedad proliferátiva dependiente de la cinasa del objetivo de mamífero de rapamicina (mTOR).

En una modalidad preferida, la combinación de la ¡invención pertenece a una combinación farmacéutica que comprende: (a) el compuesto de 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 -il)-fenil]-propionitrilo (referido como I "Compuesto A" en la presente), o su sal de mono-tosilato, y (b) el I compuesto aloestérico inhibidor de mTor, everolimus (RAD001), en donde se administra el Compuesto A en una cantidad ! de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o j de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria, para el tratamiento de una enfermedad proliferátiva dependiente de la cinasa mTor. En una modalidad adicional, el compuesto aloestérico inhibidor de mTor, everolimus (RAD001), utilizado en la combinación, se administra en una cantidad terapéuticamente efectiva de aproximadamente 0.001 nM a aproximadamente 17.8 nM, o de aproximadamente 8:5 x 10"12 moles/kilogramo a aproximadamente 1.5 x 10"7 moles/ kilogramo, o de aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 10 miligramos/sujeto por dosis diaria.

En un aspecto, la presente invención proporciona el uso de una combinación farmacéutica que comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I), o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento o la prevención de una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor, eh donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10'8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.

En una modalidad preferida, la presente invención pertenece al uso de una combinación farmacéutica que comprende: (a) el Compuesto A o su sal de mono-tosilato, y (b) el compuesto aloestérico inhibidor de mTor, everolimus (RAD001), en donde se administra el Compuesto A en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10~8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria, para el tratamiento de una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor. En una modalidad adicional, el compuesto aloestérico inhibidor de mTor, everolimus (RAD001), se administra en una cantidad terapéuticamente efectiva de aproximadamente 0.001 nM a i i aproximadamente 17.8 nM, o de aproximadamente 8.5 x 10 moles/kilogramo a aproximadamente 1.5 x 10~7 moles/kilogramo, o de aproximadamente 0.00056 miligramos/ sujeto a aproximadamente 10 miligramos/sujeto por dosis diaria.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un método para el tratamiento o la prevención de una enfermedad próliferativa, el cual comprende administrar: (a) una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I) o de un tautómero del mismo, o de una sal farmacéuticamente aceptable, o de un hidrato, o de un solvato del mismo, y (b) una cantidad terapéuticamente efectiva de cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, a un sujeto que lo necesite, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10~8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria. De preferencia, el compuesto de la fórmula (I) es el compuesto A.

En un aspecto, la invención proporciona un método para mejorar la eficacia del tratamiento de una enfermedad próliferativa dependiente de la cinasa mTor, mediante la administración de: (a) un compuesto de la fórmula (I), o un tautómero del mismo, o: una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, a un sujeto que lo necesite, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria. De preferencia, el compuesto de la fórmula (I) es el compuesto A.

En un aspecto de la invención, la presente invención pertenece a una combinación farmacéutica, tal como una preparación combinada o una composición farmacéutica, la cual comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I), y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia, en particular para el tratamiento de una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10~6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria. De preferencia, el compuesto de la fórmula (I) es el compuesto A.

La presente invención proporciona además un paquete comercial que comprende como ingredientes activos, la COMBINACIÓN DE LA INVENCIÓN, junto con instrucciones para su uso simultáneo, separado, o en secuencia, en la dernora del progreso o en el tratamiento de una enfermedad proliferativa.

Descripción Detallada de las Figuras La Figura 1 muestra el efecto del tratamiento con él agente individual y el everolimus concomitante (RAD001 o PKF-222-6666-NX-2) y/o el compuesto inhibidor catalítico de PI3K/mTOR dé 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dih¡dro-im¡dazo-[4,5-c]-quinolin-1-il)-fenil]-propionitrilo (Compuesto A) sobre la fosforilación de 4EBP1 en los modelos de células humanas de cáncer pulmonar no microcelular NCI-H23 (KRAS y LKB1 mutantes), mediante el teñido i basado en inmunofluorescencia con un anticuerpo foto-específico T37/46 y la toma de imágenes y cuantificación automatizada (lectura de ensayo con alto contenido de p4EBP1 T37/46). ¡ La Figura 2 muestra los datos de matriz de dosis cómpleta a partir del análisis de alto contenido de p-4EBP1 en modelos de células humanas de cáncer pulmonar no microcelular NCI-H23.

La Figura 3 muestra el efecto del tratamiento con el agente i individual y el everolimus concomitante (RAD001) y/o el compuesto sobre la fosforilación de S6 en modelos de células humanas de cáncer pulmonar no microcelular NCI-H23 (KRAS y LKB1 mutantes) i utilizando una lectura de ensayo de alto contenido de pS6 S240/244.

La Figura 4 muestra los datos de matriz de dosis completa a partir del análisis de alto contenido de pS6 en modelos dé células humanas de cáncer pulmonar no microcelular NCI-H23. ¡ i La Figura 5 muestra los datos de proliferación celular de matriz de dosis completa a partir del tratamiento con el agente individual y el everolimus concomitante (RAD001) y/o el compuesto en modelos de células humanas de cáncer pulmonar no microcelular NCI-H23.

La Figura 6 muestra los efectos de combinar la dosis más baja de everolimus (RAD001) y el Compuesto A sobre la proliferación de modelos de células humanas de cáncer pulmonar no microcelular NCI-H23. En esta matriz de dosis extendida, se necesita tan poco como 1 pM de everolimus para cambiar la I C 5o del compuesto A.

La Figura 7 muestra los datos de matriz de dosis completa para I el tratamiento con el agente individual y el everolimus concomitante (RAD001) y/o el compuesto, sobre la fosforilación de 4EBP1 en los modelos de células humanas de cáncer endometrial ' MFE296 (PIK3CA y PTEN mutantes) utilizando una lectura de alto contenido.

La Figura 8 muestra los datos de proliferación celular de dosis extendida para los modelos de células humanas de cáncer endometrial para FE296 (PIK3CA y PTEN mutantes).

La Figura 9 muestra los datos de proliferación celular de matriz de dosis extendida para los modelos de células humanas de cáncer endometrial AN3 CA (FGFR2 y PTEN mutantes).

La Figura 10 muestra los datos de proliferación célular de matriz de dosis extendida para los modelos de células humanas de cáncer de linfoma no de Hodgkin GA-10.

La Figura 11 muestra los datos de proliferación célular de matriz de dosis extendida para los modelos de células humanas de i i cáncer de mieloma múltiple RPMI 8226.

La Figura 12 muestra los datos de proliferación celular de matriz de dosis extendida para los modelos de células humanas de cáncer de mieloma múltiple KMS-11 (FGFR3 mutante).

Descripción Detallada de la Invención A través de toda esta memoria descriptiva y en las reivindicaciones que siguen, los siguientes términos se definen con los siguientes significados, a menos que se informe explícitamente de otra manera: Los términos "comprendiendo" e "incluyendo" se utilizan en la presente en su sentido abierto, no limitante. ! Cuando se utiliza la forma plural para los compuestos;, sales, y similares, esto también significa un solo compuesto, sal, o similar.

El término "combinación" se define para referirse ya sea a una combinación fija en una forma unitaria de dosificación, o bien a una combinación no fija (o a un kit de partes) para la administración combinada, en donde el compuesto de la fórmula (I), y un componente de combinación, se pueden administrar independientemente al mismo tiempo o por separado dentro de intervalos de tiempo que permitan que los componentes de combinación muestren un efecto cooperativo, por ejemplo, sinérgico. El término "administración combinada" o similar, como se utiliza en la presente, pretende abarcar la administración del componente de combinación seleccionado a un solo sujeto que lo necesite (por ejemplo, a un paciente), y se pretende que incluya los regímenes de ! ! tratamiento en donde los agentes no necesariamente se administren por la misma vía de administración o al mismo tiempo. El término "combinación fija" significa que los ingredientes activos, por ejemplo, un compuesto de la fórmula (I), y un componente de combinación, se administran ambos a un paciente de una manera simultánea en la forma de una sola entidad o dosificación. El término "combinación no fija" significa que los ingredientes activos, por ejemplo, un compuesto de la fórmula (I), y un componente de combinación, se administran ambos a un paciente como entidades separadas, ya sea de una manera simultánea, concurrente, o en secuencia, sin límites de tiempo específicos, en donde esta administración proporcione niveles terapéuticamente efectivos de los dos compuestos en el cuerpo del paciente. Esto último también se aplica a la terapia de cóctel, por ejemplo, la administración de tres o más ingredientes activos.

El término "inhibidores catalíticos de PI3K/mTOR" se define en la presente como los compuestos que dirigen, reducen, o inhiben la actividad/función catalítica de las enzimas de PI3K y/o mTor mediante el enlace con la hendidura de enlace de ATP de estas enzimas. ! El término "compuestos aloestéricos inhibidores de mTor" se define en la presente como los compuestos que dirigen, reducen, o i inhiben la actividad/función de la cinasa mTor a través del enlace con un sitio de enlace aloestérico, de preferencia el sitio de enlace de FKBP12-rapamicina (FRB), del complejo mTORCI . i El término "sujeto" pretende incluir animales. Los ejemplos de los sujetos incluyen mamíferos, por ejemplo, seres humanos, perros, reses, caballos, cerdos, ovejas, cabras, gatos, ratones, conejos, ratas, y animales no humanos transgénicos. En ciertas modalidades, el sujeto es un ser humano, por ejemplo, un ser humano qué padezca de, que esté en riesgo de padecer de, o que sea potencialmente capaz de padecer de una enfermedad tumoral del cerebro. ' El término "miligramos/sujeto" se define en la presenté como la cantidad del compuesto referenciado en miligramos, como se estime para un sujeto que lo necesite, que tenga una masa corporal de aproximadamente 70 kilogramos. Se entiende que este término no está restringido a un sujeto que tenga una masa corporal de aproximadamente 70 kilogramos, y la cantidad del compuesto referenciado en miligramos sería ajustada por un experto ¡ordinario como equivalente a esta proporción en la masa corporal real del sujeto.

El término "aproximadamente" en relación con una ¡dosis de fármaco particular tendrá el significado de una dosis de fármaco en el intervalo de más/menos el 10 por ciento en peso/peso, de preferencia de más/menos el 5 por ciento en peso/peso o menos, de la dosis nominal del fármaco. A manera de ejemplo, una dosis nominal del fármaco de aproximadamente 0.01 miligramos de ingrediente activo, puede contener de 0.009 a 0.011 miligramos, de preferencia de 0.0095 a 0.0105 miligramos de ingrediente activo por dosis.

El término "composición farmacéutica" se define en la presente para referirse a una mezcla o solución que contiene cuando menos un compuesto terapéutico para administrarse a un mamífero, por ejemplo, a un ser humano, con el objeto de prevenir, tratar o controlar una enfermedad o condición particular que afecte al mamífero.

El término "farmacéuticamente aceptable" se define en la presente para referirse a los compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que, dentro del alcance de un buen juicio médico, son adecuados para estar en contacto con los tejidos de los mamíferos, en especial de los seres humanos, sin una toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica, y otras complicaciones problemáticas, de una manera conmensurada con una proporción razonable de beneficio/riesgo.

El término "una preparación combinada", como se utiliza en la presente, define en especial un "kit de partes" en el sentido de que los componentes de combinación (a) y (b), como se definen anteriormente, se pueden dosificar independientemente o mediante el uso de diferentes combinaciones fijas con cantidades distinguidas de los componentes de combinación (a) y (b), es decir, simultáneamente o en diferentes puntos del tiempo. Las partes del kit de partes se pueden administrar entonces, por ejemplo, de una manera simultánea o cronológicamente escalonada, es decir, en diferentes puntos del tiempo y con intervalos de tiempo iguales o diferentes para cualquier parte del kit de partes. La proporción de las cantidades totales del componente de combinación (a) al componente de combinación (b) para administrarse en la preparación combinada, se puede variar, por ejemplo, con el objeto de tratar con las necesidades de una sub-población de pacientes que se vaya a tratar, o con las necesidades del individuo.

El término "composición farmacéutica", como se utiliza en la presente, se referirá, por ejemplo, a una mezcla que contenga una cantidad especificada de un compuesto terapéutico, por ejemplo, una cantidad de un compuesto terapéutico en un vehículo farmacéuticamente aceptable, para administrarse a un mamífero, por ejemplo, a un ser humano, con el objeto de tratar las enfermedades proliferativas dependientes de la cinasa mTor.

El término "tratar" o "tratamiento", como se utiliza en la presente, comprende el tratamiento que efectúa una demora del progreso de una enfermedad. El término "demora de progreso", como se utiliza en la presente, significa la administración de la combinación a los pacientes que estén en una etapa previa p en una fase temprana de la enfermedad proliferativa que se vaya a tratar, en cuyos pacientes se diagnostique, por ejemplo, una pre-forma de la enfermedad correspondiente, o cuyos pacientes estén en una condición, por ejemplo, durante un tratamiento médico o una condición resultante de un accidente, bajo la cual sea probable que se desarrolle una enfermedad correspondiente.

El término "enfermedades proliferativas dependientes de la cinasa mTor", como se utiliza en la presente, se define para referirse a cualquier enfermedad o trastorno proliferativo mencionado en la presente; en particular cualquier enfermedad proliferativa significa que responde a los compuestos referenciados que inhiben la senda de la cinasa mTor, en especial, una enfermedad proliferativa seleccionada a partir de un cáncer o una enfermedad tumoral.

"Terapéuticamente efectiva" o "clínicamente efectiva", de preferencia se refiere a una cantidad que es terapéuticamente, o en un sentido más amplio también profilácticamente, efectiva contra el progreso de una enfermedad proliferativa.

"Conjuntamente activos terapéuticamente" o "efecto terapéutico conjunto" significa que los compuestos se pueden dar por separado (de una manera crónicamente escalonada, en especial; de una manera específica de la secuencia) a intervalos de tiempo tales que de preferencia, en el animal de sangre caliente, en especial, en el ser humano, que se vaya a tratar, todavía muestren una interacción (de preferencia sinérgica) (efecto terapéutico conjunto). El hecho de que sea éste el caso se puede determinar, entre otras cosas, siguiendo los niveles en sangre, que muestren que ambos compuestos están presentes en la sangre del ser humano que se vaya a tratar, cuando menos durante ciertos intervalos de tiempo. I La presente invención, se refiere a una combinación farmacéutica novedosa, la cual comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I), o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia, en particular para el tratamiento de una enfermedad proliferativa, más específicamente de una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10'8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.

Una combinación que comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I), o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o dé entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria, será referida posteriormente en la presente como una combinación de la invención.

De una manera sorprendente, se ha descubiertoi que la combinación de bajas cantidades (de aproximadamente 1 nM a aproximadamente 100 nM, o de aproximadamente 9.5 x 10"8 a aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de aproximadamente 3 a aproximadamente 315 miligramos/persona) del compuesto de la fórmula (I), con bajas cantidades (de 0.001 nM a aproximadamente 17.8 nM, o de aproximadamente 8.5 x 10"12 moles/kilogramo a aproximadamente 1.5 x 10"7 moles/kilogramo, o de aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 10 miligramos/sujeto) de cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, tal como everolimus, da como resultado una mejora inesperada en el tratamiento de las enfermedades proliferativas, en particular las enfermedades proliferativas dependientes de la cinasa mTor. Cuando se administra de una manera simultánea, en secuencia, o por separado, el compuesto de la fórmula (I), y el compuesto aloestérico inhibidor de mTor, interactúan de una manera sinérgica para inhibir la fosforilación de 4EBP1 y la proliferación celular. Esta interacción sinérgica inesperada permite que se haga una reducción en la dosis requerida de cada compuesto, conduciendo a una reducción en los efectos secundarios y a un mejoramiento de la efectividad clínica de los compuestos y del tratamiento. La COMBINACIÓ DE LA INVENCIÓN anterior es capaz de mejorar la inhibición de la proliferación de las células de cáncer hasta el intervalo en donde, como un solo agente, solamente se puedan alcanzar dosis altas (de aproximadamente 250 nM a aproximadamente 1000 nM, o de aproximadamente 2.4 x10'5 a 9.5 x 10"5 moles/kilogramo, o de aproximadamente 784 a 3136 miligramos/sujeto) del compuesto de la fórmula (I).

La determinación de una interacción sinérgica entre uno o más componentes, el intervalo óptimo para el efecto, y las cantidades de dosis absolutas de cada componente para el efecto, se pueden medir definitivamente mediante la administración de los componentes sobre diferentes intervalos de proporción en peso/peso y dosis, a los pacientes que necesiten tratamiento. Para los seres humanos, la complejidad y el costo de llevar a cabo estudios clínicos en los pacientes hace impráctico el uso de esta forma de prueba como un modelo primario para el sinergismo. Sin embargo, la observación del I sinergismo en una especie puede ser predictiva del efecto en otra especie, y existen modelos animales, como se describen en la presente, para medir un efecto sinérgico, y los resultados 1 de estos estudios también se pueden utilizar para predecir la dosis éfectiva y los intervalos de proporción de concentración en plasma, y la dosis absoluta y las concentraciones en plasma requeridas en otras especies, mediante la aplicación de los métodos farmacocinéticos/ farmacodinámicos. Las correlaciones establecidas entre los: modelos de tumores y los efectos que se ven en el hombre, sugieren que se puede demostrar el sinergismo en animales, por ejemplo, en el modelo de tumor humano de cáncer pulmonar no microcelular NCI-H23, el modelo de células humanas de cáncer endometrial FE 296 (el cual lleva ambas mutaciones de PIK3CA y PTEN), y el modelo de células de cáncer endometrial AN3CA, el modelo de células de cáncer de mieloma KMS11 y RPMI 8226, y el modelo de células de cáncer de linfoma de células-B no de Hodgkin GA-10, como se describe en los Ejemplos más adelante.

La combinación de la invención incluye un inhibidor catalítico de PI3K/mTOR. Los compuestos inhibidores catalíticos de PI3K/mTOR adecuados para la presente invención incluyen los compuestos de la fórmula (I): en donde: i Ri es naftilo o fenilo, en donde el fenilo está sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente a partir del grupo que consiste en Halógeno; alquilo inferior insusjtituido o sustituido por halógeno, ciano, imidazolilo o triazolilo; cicloalquilo; amino sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente a partir del grupo que consiste en alquilo inferior, alquilo ¡nferior-sulfonilo, alcoxilo inferior, y alcoxilo inferior-alquilo inferior-amino; piperazinilo insustituido o sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente a partir del grupo que consiste en alquilo inferior, y alquilo ¡nferior-sulfonilo; 2-oxo-pirrolidinilo; alcoxilo inferior-alquilo inferior; imidazolilo; pirazolilo; y triazolilo; ' R2 es O o S; R3 es alquilo inferior; R4 es piridilo ¡nsustituido o sustituido por halógeno, ciano, alquilo inferior, alcoxilo inferior, o piperazinilo ¡nsustituido o sustituido por alquilo inferior; pirimidinilo ¡nsustituido o sustituido por alcoxilo inferior; quinolinilo ¡nsustituido o sustituido por halógeno; quinoxalinilo; o fenilo sustituido con alcoxilo; I R5 es hidrógeno o halógeno; n es 0 ó 1 ; t R6 es óxido; con la condición de que, si n = 1, el radical portador del átomo de nitrógeno (N) R6 tiene una carga positiva; R7 es hidrógeno o amino; o un tautómero de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato de los mismos. Estos derivados de imidazoquinolina específicos adecuados para la presente invención, su preparación, y las formulaciones adecuadas farmacéuticas que los contienen, se describen en la Publicación I Internacional Número WO2006/122806, la cual se incorpora a la i presente como referencia en su totalidad.

Los radicales y símbolos, como se utilizan en la definición de un compuesto de la fórmula (I), tienen los significados como¡se dan a conocer en la Publicación Internacional Número WO2006/122806. Las siguientes definiciones generales se aplicarán en esta memoria descriptiva, a menos que se especifique de otra manera: "Inferior" se referirá a un radical que tiene hasta e incluyendo un máximo de 7, en especial hasta e ¡ncluyendo un máximo de 4 átomos de carbono, siendo los radicales en cuestión, lineales o ramificados con ramificación individual o múltiple.

En una modalidad preferida, alquilo tiene hasta un máximo de 12 átomos de carbono, y es en especial alquilo inferior.

"Alquilo inferior" es de preferencia alquilo con desde e ¡ncluyendo 1 hasta e incluyendo 7, de preferencia desde e incluyendo 1 hasta e ¡ncluyendo 4 átomos de carbono, y es lineal o ramificado; de preferencia, alquilo inferior es butilo, tal como butilo normal, butilo secundario, isobutilo, butilo terciario, propilo, tal como propilo normal o isopropilo, etilo, o de preferencia metilo.

"Cicloalquilo" es de preferencia cicloalquilo con desde e ¡ncluyendo 3 hasta e incluyendo 6 átomos de carbono en el anillo; cicloalquilo es de preferencia ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, o ciclohexilo.

"Alquilo" que está sustituido por halógeno es de preferencia perfluoro-alquilo, tal como trifluoro-metilo .

"Halógeno" es en especial flúor, cloro, bromo, o yodo, en especial flúor, cloro, o bromo.

Las sales de los compuestos de la fórmula (I) se pueden utilizar de acuerdo con la presente invención. Estas sales se forman, por ejemplo, como las sales de adición de ácido, de preferencia con ácidos orgánicos o inorgánicos, a partir de los compuestos de la fórmula (I) con un átomo de nitrógeno básico, en especial las sales farmacéuticamente aceptables. Los ácidos inorgánicos adecuados son, por ejemplo, los ácidos de halógeno, tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, o ácido fosfórico. Los ácidos orgánicos adecuados son, por ejemplo, los ácidos carboxílicos, fosfónicos, sulfónicos o sulfámicos, por ejemplo ácido acético, ácido p^opiónico, ácido octanoico, ácido decanoico, ácido dodecanoico, ácido glicólico, ácido láctico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido malónico, ácido adípico, ácido pimélico, ácido subérico, ácido azelaico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, aminoácidos, tales como ácido glutámico o ácido aspártico, ácido maleico, ácido hidroxi-maleico, ácido metil-maleico, ácido ciclohexan-carboxílico, ácido adamantan-carboxílico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido 4-amino-salicílico, ácido itálico, ácido fenil-acético, ácido mandélico, ácido cinámico, ácido metan- o etan-sulfónico, ácido 2-hidroxi-etan-sulfónico, ácido etan-1 ,2-disulfónico, ácido bencen-sulfónico, ácido 4-toluen-sulfónico, ácido 2-naftalen-sulfónico, ácido 1 ,5-naftalen-disulfónico, ácido 2- ó 3-metil-bencen-sulfónico, ácido metil-sulfúrico, ácido etil-sulfúrico, ácido dodecil-sulfúrico, ácido N-ciclohexil-sulfámico, ácido N-metil-, N-etil- o N-propil-sulfámico, u otros ácidos protónicos orgánicos, tales como ácido ascórbico.

Un compuesto preferido de la presente invención es un compuesto - descrito en la Publicación Internacional Número WO2006/122806 - seleccionado a partir del grupo que consiste en: 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-piridin-4-il-2,3-dihidro-imidazo- [4,5-c]-quinolin-1 - il)-fenil]-propionitrilo; 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-piridin-3-il-2,3-d¡h¡dro-imidazo- ! í [4,5-c]-quinolin-1-il)-fenil]-propionitrilo; 2-{4-[8-(6-metoxi-pirid¡n-3-¡l)-3-metil-2-oxo-2,3-dihidroTÍm¡dazo-[4,5-c]-quinolin-1 - i l]-f en ¡!}-2-m eti l-p ro p i o n itri lo ; 2-{4-[8-(5-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 - ¡ l]-fen il}-2-m eti l-p rop ¡o nitri lo ; 2-metil-2-{4-[3-metil-2-oxo-8-(6-piperazin-1-il-piridin-3Hl)-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 -il]-fenil}-propionitrilo; 2-metil-2-(4-{3-metil-8-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-piridin-4-il]-2-oxo-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il}-fenil)-propionitrilo; 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il)-fenil]-propionitrilo; 2-{4-[8-(2-fluoro-quinolin-3-M)-3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]'-quinolin-1-il]-fenil}-2-metil-propionitrilo; 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-6-il-2,3-dihidro-irnidazo-[4, 5-c]-q uinoli n-1 -il)-fenil]-propionitrilo ; 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-5-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il)-fen¡l]-propi o nitrito; ; 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinoxalin-6-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 -il) -fe nil]- propio nit rilo; 2-etil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-piridin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1-il)-feni!]-butironitrilo; 2-etil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il)-fenil]-butironitrilo; 1-[3-fluoro-4-(2-oxo-pirrolidin-1-il)-fenil]-3-metil-8-piridin-3-M- i 1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-[3-fluoro-4-(2-oxo-pirrolidin-1-il)-fenil]-3-metil-8-quinolin-3-il-1,3-d¡h¡dro-¡m¡dazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-1 -[4-(2-oxo- pirro lid ¡n-1 -il)-fenil]-8-pirid¡n-3-¡l-1 ,3-dihidro-¡midazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-met¡l-1-[4-(2-oxo-pirrol¡din-1-il)-fenil]-8-quinolin-3-il-1,3-d¡hidro-im¡dazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1-{4-[Bis-(2-metoxi-etil)-amino]-3-fluoro-fenil}-3-met¡l-8-pirid¡n-3-il-1,3-dih¡dro-im¡dazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 1 -{4-[B¡s-(2-metoxi-et¡l)-am¡no]-3-fluoro-fenil}-3-metil-8-quinol¡n-3-¡l-1,3-d¡hidro-¡midazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1-{4-[Bis-(2-metoxi-etil)-amino]-fenil}-3-metil-8-piridin-3-il-1,3-d¡h¡dro-imidazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; ¡ 1-{4-[Bis-(2-metoxi-etil)-am¡no]-fen¡l}-3-metil-8-qu¡nolin-3-¡l-1 ,3-d¡hidro-¡m¡dazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 3-met¡l-1-naftalen-2-il-8-p¡ridin-3-il-1,3-dihidro-¡midazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3- metí 1-1 -nafta len-2-¡l-8-quinolin-3-¡l-1,3-dih¡dro-¡m ida Z;0- [4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 - (2-cloro-fenil)-3-metil-8-piridin-3-il-1 ,3-dihidro-imidaz'o-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(2-cloro-fenil)-3-metil-8-quinolin-3-il-1 ,3-d¡h¡dro-¡m¡dázo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 3-metil-8-piridin-3-il-1 -o-tolil-1 ,3-d¡h¡dro-¡m ¡dazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-8-quinol¡n-3-il-1 -o-tolil-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]- qu¡nolin-2-ona; 1-(2-et¡l-fen¡l)-3-metil-8-piridin-3-il-1 ,3-d¡hidro-imidazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1-(2-et¡l-fenil)-3-met¡l-8-quinol¡n-3-¡l-1,3-dih¡dro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-8-p¡ridin-3-¡l-1-(2-trifluoro-met¡l-fenil)-1 ,3-dihidro-¡midazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona¡ 3-met¡l-8-quinol¡n-3-il-1 -(2-trifluoro-metil-fen¡l)-1 ,3-d¡hidro-¡midazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 -(4-fluoro-2-metil-fenil)-3-metil-8-quinolin-3-il-1 ,3-d¡h¡dro-¡m¡dazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(4-fluoro-2-metil-fenil)-3-met¡l-8-qu¡nol¡n-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(2-cloro-4-fluoro-fenil)-3-met¡l-8-pirid¡n-3-¡l-1 ,3-dihidro-¡midazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 - (2-cloro-4-fluoro-fenil)-3-metil-8-quinolin-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(3-cloro-fenil)-3-metil-8-piridin-3-il-1 ,3-d¡h¡dro-¡midazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1-(3-cloro-fen¡l)-3-met¡l-8-quinol¡n-3-il-1 ,3-d¡h¡dro-imidazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 3-metil-8-pirid¡n-3-il-1-(3-trifluoro-metil-fenil)-1,3-d¡h¡dro-¡midazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-8-qu¡nolin-3-¡l-1 -(3-tr¡fluoro-metil-fenil)-1 ,3-dihidro-¡m¡dazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona¡ 1-(4-metoxi-met¡l-fen¡l)-3-metil-8-p¡r¡din-3-¡l-1 ,3-d¡h¡dro-imidazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 1 - (4-metox¡-metil-fenil)-3-metil-8-quinol¡n-3-il-1 ,3-dihidro-¡midazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-[2-cloro-4-(2-metoxi-etil)-fenil]-3-metil-8-p¡ridin-3-¡l-T,3-d¡hidro-im¡dazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1-[2-cloro-4-(2-metox¡-et¡l)-fenil]-3-metil-8-quinolin-3-¡lr1 ,3-d¡hidro-¡midazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-2-ona; 1-[4-(2-metoxi-etil)-fen¡l]-3-metil-8-quinol¡n-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; ' 1- [4-(2-metoxi-et¡l)-fenil]-3-metil-8-piridin-3-¡l-1 ,3-d¡hidro-im¡dazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 2- met¡l-2-[4-(3-met¡l-2-oxo-5-ox¡-8-pirid¡n-3-¡l-2,3-dih¡dro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1-¡l)-fenil]-propion¡trilo; 2-metil-2-[4-(3-met¡l-2-oxo-5-ox¡-8-qu¡nolin-3-¡l-2,3-dih¡dro-im¡dazo-[4,5-c]-quinolin-1-il)-fen¡l]-propionitrilo; 2-[4-(7-fluoro-3-met¡l-2-oxo-8-pirid¡n-3-il-2,3-dihidro-¡midazo- i [4,5-c]-quinolin-1 - il)-fenil]-2-met¡l-propionitrilo; 2-[4-(7-fluoro-3-metil-2-oxo-8-qu¡nolin-3-¡l-2,3-d¡hidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il)-fen¡l]-2-metil-propionitr¡lo; \ N-metil-N-[4-(3-metil-2-oxo-8-p¡ridin-3-¡l-2,3-dihidro-im¡dazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il)-fenil]-metan-sulfonamida; Terbutil-éster del ácido met¡l-[4-(3-met¡l-2-oxo-8-pir¡din-3-¡l-2,3-dih¡dro-¡midazo-[4,5-c]-quinol¡n-1-¡l)-fen¡l]-carbám¡co; Metil-[4-(3-met¡l-2-oxo-8-p¡rid¡n-3-il-2,3-dih¡dro-¡midazoj-[4,5-c]- qu¡nolin-1-íl)-fenil]-am¡da del ácido etan-sulfónico; Metil-[4-(3-metil-2-oxo-8-qu¡nolin-3-¡l-2,3-dihidro-¡midazo-[4,5-c]-qu¡nolin-1 -il)-fenil]-amida del ácido etan-sulfónico; N-etil-N-[4-(3-met¡l-2-oxo-8-piridin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5 c]-quinolin-1 - il)-fenil]-metan-sulfonamida; 1 N-et¡l-N-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dih¡dro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il)-fenil]-metan-sulfonamida; 2- [4-(3-etil-2-oxo-8-piridin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1-il)-fenil]-2-metil-propionitrilo; 1 - [3-fluoro-4-(4-metan-sulfonil-piperazin-1 - il)-fenil]-3-metil-8-quinolin-3-¡l-1 ,3-d¡h¡dro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 - [3-fluoro-4-(4-metan-sulfonil-piperazin-1 - il)-fenil]-3-metil-8-piridin-3-il-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(3-fluoro-4-piperazin-1-il-fenil)-3-metil-8-quinolin-3-il-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 -(3-fluoro-4-piperazin-1 - il-fenil)-3-metil-8-p¡ridin-3-il-1¡,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3- metil-1-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenil]-8-quinolin-3-il-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3- metí 1-1 - [4-(4-metil-piperazin-1 - il)-fenil]-8-piridin-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-[2-cloro-4-(4-metil-piperazin-1 -il)-fenil]-3-metil-8-quinolin-3-il 1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-[2-cloro-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenil]-3-metil-8-piridin-3-il-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-[3-cloro-4-(4-met¡l-piperazin-1-il)-fen¡l]-3-met¡l-8-qu¡nolin-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-[3-cloro-4-(4-met¡l-piperazin-1 -M)-fenil]-3-metil-8-piridin-3-il-1 ,3-di idro-¡m¡dazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1-(4-imidazol-1-il-2-metil-fenN)-3-metil-8-quinolin-3-il-1;,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 - (4-imidazol-1 -il-2-metil-fenil)-3-metil-8-piridin-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; i 3-metil-1 - (4- p i razo 1-1 -il-fen il)-8-q uinolin-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-1-(4-pirazol-1-il-fenil)-8-piridin-3-il-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-8-quinolin-3-il-1 -(4-[1 ,2,4]-triazol-1 -il-fenil)-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-8-piridin-3-il-1-(4-[1 ,2 ,4]-triazol- 1 -il-fenil)-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-1-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-3-trifluoro-metil-fenjl]-8-quinolin-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-1-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-3-trifluoro-metil-fenM]-8-piridin-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(3-cloro-4-piperazin-1-il-fenil)-3-metil-8-quinolin-3-il-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(3-cloro-4-piperazin-1-il-fenil)-3-metil-8-piridin-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; , 1 - (3-cloro-4-piperazin-1 - M-fenil)-8-(6-metoxi-pirid in-3-M)-3- metil-1,3-dihidro-im¡dazo-[4p5-c]-quinol¡n-2-ona; 1 - (3-cloro-4-p¡perazin-1 - ¡l-fenil)-8-(5-metox¡-pirid¡n-3-il)-3-metil-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinoliri-2-ona; 8-(6-metoxi-piridin-3-¡l)-3-metil-1 - [4-(4-metil-p¡peraz¡n-1 - il)-3-tr¡fluoro-metil-fenil]-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 8-(5-metox¡-p¡r¡d¡n-3-il)-3-metil-1 - [4-(4-metil-p¡peraz¡n-1 - il)-3-tr¡fluoro-met¡l-fen¡l]-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-oná; 1 - [2-cloro-4-(4-metil-piperazin-1 - il)-fenil]-8-(6-metoxi-p¡rid¡n-3-¡l)-3-metil-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1 - [2-cloro-4-(4-metil-p¡perazin-1 -M)-fen¡l]-8-(5-metox¡-pírid¡n-3-¡l)-3-met¡l-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-2-ona; 1-(3-cloro-4-p¡perazin-1-¡l-fenil)-3-metil-8-quinoxal¡n-6-¡l-1,3-dih¡dro-imidazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 3-metil-1-(4-piperazin-1-¡l-3-tr¡fluoro-met¡l-fenil)-8-qu¡nolin-3-il-1,3-dihidro-im¡dazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 3-met¡l-1 - (4-pi pe raz i n-1 - il-3-triflu oro-metí l-fenil)-8-p ¡r¡d¡n-3-¡l-1 ,3-díh¡dro-¡m¡dazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 8-(6-metoxí-piridin-3-il)-3-met¡l-1 - (4-p¡peraz¡n-1 - íl-3-trifiuoro-met¡l-fen¡l)-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 8-(5-metoxi-pir¡d¡n-3-¡l)-3-met¡l-1 - (4-piperazin-1 -i l-3-trif I u o ro-metil-fenil)-1,3-dihidro-im¡dazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-2-ona; ; 3- metí 1-1 -(4-piperazin-1 - ¡l-3-trifluoro-met¡l-fenil)-8-quinoxalin-6-¡1-1 ,3-d¡h¡dro-im¡dazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1-[3-cloro-4-(c s-3,5-d¡met¡l-p¡perazin-1 -il)-fen¡l]-3-metil-8-p¡r¡din-3-¡l-1,3-dih¡dro-¡m¡dazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; i 1-[3-cloro-4-(c/s-3,5-d¡metil-piperazin-1 -il)-fen¡l]-3-met¡l-8-quinolin-3-il-1 ,3-dih¡dro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 -[3-cloro-4-(4-etil-piperazin-1 -il)-fenil]-3-metil-8-piridin-3-il-1 ,3-d¡hidro-¡midazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1 -[3-cloro-4-(4-et¡l-piperaz¡n-1 -il)-fenil]-3-metil-8-quinol¡n-3-il-1 ,3-dihidro-im¡dazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-2-ona; 1-[3-cloro-4-(4-¡soprop¡l-piperazin-1 -il)-fen¡l]-3-metil-8-p¡ridin-3- ,3-dihidro-im¡dazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 -[3-cloro-4-(4-isopropil-p¡peraz¡n-1 - il)-fen¡l]-3-metil-8-quinolin-3- i 1-1 ,3-dih¡dro-¡midazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1-[3-cloro-4-(4-¡soprop¡l-piperaz¡n-1-il)-fen¡l]-3-met¡l-8-quinolin- i 3-ÍI-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 1 - [3-cloro-4-(4-isopropil-p¡perazin-1 - il)-fenil]-3-metil-8-qu¡nolin-3-ÍI-1 ,3-d¡hidro-¡midazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 1 - [4-(4-etil-piperaz¡n-1 -il)-3-tr¡fluoro-met¡l-fenil]-3-metilr8-pirid¡n-3-¡l-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-2-ona; 1-[4-(4-et¡l-piperazin-1 - il)-3-trifluoro-metil-fen¡l]-3-metil 8-quinol¡n-3-il-1,3-d¡hidro-¡m¡dazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 -[4-(4-etil-piperazin-1 - il)-3-tr¡fluoro-metil-fenil]-3-met¡lT8-p ir i d i ?-3-il- 1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 -[4-(4-et¡l-piperazin-1 - ¡l)-3-trifluoro-met¡l-fenil]-3-met¡U8-quinolin-3-il-1 ,3-dih¡dro-¡midazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 3-metil-8-(6-p¡perazin-1 - il-piridin-3-¡l)-1 -(3-tr¡fluoro-metil-fenil)-1 ,3-d¡hidro-¡midazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 8-(6-metox¡-p¡r¡d¡n-3-il)-3-met¡l-1 - (3-trifluoro-met¡l-fenil)-1 ,3- dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 8-(6-metox¡-p¡ridin-3-il)-3-metil-1 - (3-trifluoro-met¡l-fen¡l)-1 ,3-dihidro-¡midazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 1 -(3-cloro-4-imidazol-1 -i l-fe n i I )-3-m eti I -8- p i ri d i n-3-¡ I- 1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 -(3-cloro-4-im¡dazol-1 -il-fenil)-3-metil-8-q uinolin-3-il- 1 ,3-dihidro-im¡dazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 2-metil-2-[4-(3-metil-8-qu¡nol¡n-3-il-2-t¡oxo-2,3-dih¡dro-¡midazo-[4,5-c]-quinol¡n-1 - il)-fen¡l]-propionitrilo; 2-metil-2-{4-[3-metil-8-(2-metil-pir¡d¡n-4-¡l)-2-oxo-2,3-dihidro-¡m¡dazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il]-fenil}-propion¡tr¡lo; 5-{1 -[4-(C ¡ano-di m eti l-metil)-fen¡ l]-3-metil-2-oxo-2, 3-dihidro-1 H- i imidazo-[4,5-c]-quinolin-8-il}-piridin-2-carbonitrilo; 2-[4-(4-amino-3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1-il)-fenil]-2-metil-propionitrilo; 1-[4-(3-metil-2-oxo-8-piridin-3-il-2,3-dih¡dro-¡midazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il)-fenil]-ciclopropan-carbonitrilo; ! 1 - [4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1-¡l)-fenil]-ciclopropan-carbonitrilo; 1 -{4-[8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-2-oxo-2,3-dihidro4imidazo- [4,5-c]-quinolin-1-il]-fenil}-ciclopropan-carbon¡trilo; 1 - [3-cloro-4-(4-metil-piperazin-1 - il)-fenil]-8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 - [3-cloro-4-(4-metil-piperazin-1 - il)-fenil]-8-(5-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 - [3-cloro-4-(4-metil-piperazin-1 -il)-fenil]-3-metil-8-quinoxalin-6-il-l ,3-d¡h¡dro-¡midazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-2-ona; 1 -(3-cloro-4-piperazin-1 - il-fenil)-8-(2-metoxi-pirimidin-5-il)-3-metil-1 ,3-dih¡dro-im¡dazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 1 - (3-cloro-4-piperazin-1 - il-fen¡l)-3-metil-8-pirimidin-5-¡l-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 - (3-cloro-4-piperazin-1 -M-fenil)-8-(2-meto i-pirimidin-5-il)-3-metil-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 -(3-cloro-4-p¡perazin-1 -il-fen¡l)-3-met¡l-8-pir¡mid¡n-5-ií-1 ,3-dih¡dro-¡midazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 1-(3-cloro-4-piperazin-1-il-fenil)-3-metil-8-(2-metil-piridin-4-il)-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 - [3-cloro-4-(c/s-3,5-dimetil-piperazin-1 -M)-fenil]-8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 -[3-cloro-4-(c/s-3,5-dimetil-piperazin-1 - il)-fenil]-8-(5-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 -[4-(c/s-3,5-dimetil-piperazin-1 -il)-3-trifluoro-metil-fenil]-8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolm-2-ona; 1 -[4-(c/'s-3,5-dimetil-piperazin-1 - il)-3-trifluoro-metil-feml]-8-(5-metox¡-pir¡din-3-¡l)-3-met¡l-1 ,3-d¡h¡dro-im¡dazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-2-ona; 8-(2-metoxi-pirimidin-5-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluoro-metil-fen¡l)-1 ,3-di idro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-1 -(4-piperazin-1 -il-3-trifluoro-metil-fenil)-8-pirimidin-5-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 5-[3-metil-2-oxo-1 - (4-piperazin-1 - il-3-tn'fluoro-metil-fenil)-2,3- dih¡dro-1H-im¡dazo-[4,5-c]-quinolin-8-¡l]-piridin-2-carbonitr¡ló; 3-met¡l-8-(2-metil-p¡r¡din-4-¡l)-1-(4-p¡perazin-1-¡l-3-trif uoro-metil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 8-(3,4-d¡metoxi-fenil)-3-met¡l-1 - (4-piperazin-1 -?-3-trifluoro-metil-fenil)-1,3-dih¡dro-im¡dazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 3-metil-8-pir¡din-3-il-1-(4-[1 ,2,4]-triazol-1 -il-3-trif luoro-'metil-feni -I.S-dihÍdro-imidazo-^.S-cJ-quinolin^-ona.- S-metil-S-quinolin-S-il-l -(4-[1 ,2,4]-tr¡azol-1-¡l-3-tr¡fluoró-met¡l-fenil)-1,3-dih¡dro-¡midazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 8-(6-metoxi-p¡r¡d¡n-3-¡l)-3-metil-1-(4-[1 ,2,4]-triazol-1-il-3-tr¡fluoro-metil-fenil)-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 8-(5-metoxi-piridin-3-¡l)-3-metil-1-(4-[1 ,2,4]-triazol-1-¡l-3-trifluoro-metil-fenil)-1,3-dihidro-¡midazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 5-[3-metil-2-oxo-1-(4-[1 ,2,4]-tr¡azol-1-il-3-trifluoro-metil-fenil)-2,3-dihidro-1H-¡midazo-[4,5-c]-quinol¡n-8-¡l]-piridin-2-carbon¡tr¡lo; 8-(6-fluoro-pir¡d¡n-3-il)-3-metil-1-(4-[1 ,2,4]-triazol-1 - i I - 3-trifluoro-metil-fenil)-1 ,3-d¡hidro-imidazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 8-(2,6-dimetoxi-piridin-3-il)-3-met¡l-1-(4-[1 ,2,4]-triazol-1 - i I - 3-trifluoro-met¡l-fenil)-1,3-d¡hidro-im¡dazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-met¡l-8-pirim¡din-5-¡l-1 -(4-[1 ,2,4]-triazol-1 - il-3-trifluoro-met¡l-fen¡l)-1 ,3-dih¡dro-imidazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 8-(2-metoxi-p¡rim¡din-5-il)-3-metil-1-(4-[1 ,2,4]-triazol-1 -il-3-trifluoro-met¡l-fenil)-1,3-dihidro-im¡dazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-2-ona; 8-(2,4-dimetoxi-pirimidin-5-il)-3-metil-1 -(4-[1 ,2,4]-triazol-1-il-3-trifluoro-met¡l-fenil)-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; 3-metil-1 -(4-pirazol-1 -il-3-trifluoro-met¡l-fen¡l)-8-pir¡din-3-¡l-1 ,3-dih¡dro-¡m¡dazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-1 -(4-pirazol-1 -il-3-trifluoro-metil-fenil)-8-quinolin-3-il-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1 -(4-p¡ razo -1 -?-3-trifluo ro-metil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 8-(5-metoxi-p¡r¡din-3-il)-3-metil-1 - (4-p¡ razo -1 -il-3-trifluo ro-metil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(3-cloro-4-[1 , 2.4 ]-tri azol- 1 -i l-f eni l)-3-m etil-8-? i rid i ?-3-i l- 1 , 3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(3-cloro-4-[1 ,2,4]-triazol-1-il-fenil)-3-metil-8-quinolin-3-il-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1 - (4-imidazol-1 -il-3-trifluoro-metil-fenil)-3-metil-8-piridi,n-3-il-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(4-imidazol-1-il-3-trifluoro-metil-fenil)-3-metil-8-quinolin-3-il-1,3-dih¡dro-imidazo-[4,5-c]-qu¡nolin-2-ona; 1 -(4-imidazol-1 - il-3-trifluoro-metil-fenil)-8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(4-imidazol-1-il-3-trifluoro-metil-fenil)-8-(5-metoxi-piridin-3-¡l)-3-metil-1,3-d¡hidro-¡m¡dazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-2-ona; 3-met¡l-8-piridin-3-il-1-(4-[1 ,2,4]-triazol-1 -i l-m eti l-fe n ¡ I )- 1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 3-metil-8-quinolin-3-il-1-(4-[1 ,2,4]-triazol-1 -il-metil-fenil)-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; 1-(4-imidazol-1-il-metil-fenil)-3-metil-8-piridin-3-il-1 ,3-dihidro- I i imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona; y ¡ 1-(4-¡midazol-1-il-met¡l-fenil)-3-metil-8-quinol¡n-3-¡l-1,3-dih¡dro-imidazo-[4,5-c]-quinol¡n-2-ona; o un tautómero de los mismos, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato de los mismos.

Un compuesto muy preferido de la fórmula (I) de la presente invención es el 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1-il)-fenil]-propionitrilo (referido como "Compuesto A" en la presente), y su sal de mono-tosilato. La síntesis del 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 -il)-fenil]-propionitrilo y su sal de mono-tosilato se describe, por ejemplo, respectivamente, en la Publicación Internacional Número WO2006/122806 como los Ejemplos 7!y 152-3.

Otro compuesto muy preferido de la fórmula (I) de la presente invención es la 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1 -(4-piperazin-1— ? I— 3— trifluoro-metil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona (referida como "Compuesto B" en la presente). La síntesis de la 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1 - (4-piperazin-1 - il-3-trifluoro-metil-fenil)-1 ,3-dih¡dro-¡m¡dazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-2-ona se describe, por, ejemplo, en la Publicación Internacional Número WO2006/122806 , como el Ejemplo 86.

En cada modalidad descrita en la presente, la combinación de la invención comprende una cantidad del compuesto de la fórmula (I), o de un tautómero del mismo, o de una sal farmacéuticamente aceptable, o de un hidrato, o de un solvato del mismo, de preferencia el compuesto A, que está en el intervalo de cualquiera de aproximadamente 1 nM a aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10~6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria, para el tratamiento de una enfermedad proliferativa, más específicamente de una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor. La combinación de la invención puede incluir una cantidad del compuesto de la fórmula (I) que está en el intervalo de aproximadamente 10 a 315 miligramos/ sujeto, de 100 a 315 miligramos/sujeto, o de 200 a 315 miligramos/ sujeto por dosis diaria.

De conformidad con lo anterior, la cantidad de dosis del compuesto de la fórmula (I), o de un tautómero del mismo, o de una sal farmacéuticamente aceptable, o de un hidrato, o de un solvato del mismo, de preferencia del Compuesto A, en un sujeto que lo necesite, corresponde a una cantidad de dosis de aproximadamente 1 nM a aproximadamente 100 nM por dosis diaria, de aproximadamente 5 nM a aproximadamente 78 nM por dosis diaria, de aproximadamente 8 nM a aproximadamente 62 nM por dosis diaria, o de aproximadamente 16 nM a aproximadamente 50 nM por dosis diaria.

En una modalidad, la cantidad del compuesto de la fórmula (I), o de un tautómero del mismo, o de una sal farmacéuticamente aceptable, o de un hidrato, o de un solvato del mismo, de preferencia del Compuesto A, puede ser de aproximadamente 9.5 x 10"8 moles/kilogramo a aproximadamente 9.5 x 10~6 moles/kilogramo, de aproximadamente 4.8 x 10~7 moles/kilogramo a aproximadamente 7.4 x 10"6 moles/kilogramo, de aproximadamente 7.6 x 10"7 moles/ kilogramo a aproximadamente 5.9 x 10"6 moles/kilogramo, o de aproximadamente 1.5 x 10"6 moles/kilogramo a aproximadamente 4.7 x 10"6 moles/kilogramo por dosis diaria.

En una modalidad alternativa, la cantidad de dosis del compuesto de la fórmula (I), o de un tautómero del mismo, o de una sal farmacéuticamente aceptable, o de un hidrato, o de un solvato del mismo, de preferencia del Compuesto A, para un sujeto que lo necesite, puede ser de aproximadamente 3 miligramos/sujeto a aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria, de aproximadamente 15 miligramos/sujeto a aproximadamente 245 miligramos/sujeto por dosis diaria, de aproximadamente 25 miligramos/sujeto a aproximadamente 195 miligramos/sujeto por dosis diaria, o de aproximadamente 50 miligramos/sujeto a aproximadamente 157 miligramos/sujeto por dosis diaria. ;EI sujeto que lo necesite es de preferencia un ser humano.

En una modalidad alternativa, la cantidad de dosis del compuesto de la fórmula (I), o de un tautómero del mismo, o de una sal farmacéuticamente aceptable, o de un hidrato, o de un solvato del mismo, de preferencia del Compuesto A, para un sujeto que lo necesite, en donde se estima que el sujeto es de aproximadamente 70 kilogramos, puede ser de aproximadamente 10 a 315 miligramos/ sujeto, de 100 a 315 miligramos/sujeto, o de 200 a 315 miligramos/ sujeto por dosis diaria.

La combinación de la invención incluye los compuestos que dirigen, reducen, o inhiben la actividad/función de la cinasa mTor a través del enlace con el sitio de enlace aloestérico del complejo mTORCI. Estos compuestos serán referidos como los "compuestos aloestéricos inhibidores de mTor". Los inhibidores aloestéricos de mTor adecuados incluyen, por ejemplo: I. Rapamicina, la cual es un macrólido de lactama inmunosupresor que es producido por Streptomyces hygroscopicus.

II. Derivados de rapamicina, tales como: a. rapamicina sustituida, por ejemplo, una 40-O-rapamicina sustituida, por ejemplo, como se describe en lá Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número US 5,258,389, en las Publicaciones Internacionales Números WO 94/09010' y WO 92/05179, en las Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Números US 5,118,677, US 5,118,678, US 5,100,883, US 51,151,413, US 5,120,842, y en las Publicaciones Internacionales Números WO 93/11130, WO 94/02136, WO 94/02485 y WO 95/14023, todas las cuales se incorporan a la presente como referencia; b. una 16-O-rapamicina sustituida, por ejemplo, como se da a conocer en las Publicaciones Internacionales Números WO 94/02136, WO 95/16691 y WO 96/41807, el contenido de las cuales se incorpora a la presente como referencia; c. una rapamicina 32-hidrogenada, por ejemplo, como se describe en la Publicación Internacional Número WO 96/41807 y en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número US 5,256,790, incorporadas a la presente como referencia. d. Los derivados de rapamicina preferidos son los compuestos de la fórmula (II): en donde: R es CH3 o alquinilo de 3 a 6 átomos de carbono, R2 es H o -CH2-CH2-OH, 3-hidroxi-2-(hidroxi-metil)- 2-metil-propanoílo o tetrazolilo, y X es =0, (H,H) o (H,OH); en el entendido de que R2 es diferente de H cuando X es =0 y Ri es CH3, o un pro-fármaco de los mismos cuando R2 es -CH2-CH2-OH , por ejemplo, un éter fisiológicamente hidrolizable de los mismos.

Los compuestos de la fórmula (II) se dan a conocer, por ejemplo, en las Publicaciones Internacionales Números WO 94/09010, WO 95/16691 o WO 96/41807, las cuales se incorporan a la presente como referencia. Se pueden preparar como se da a conocer o por analogía a los procedimientos descritos en estas referencias.

Los compuestos preferidos son: 32-desoxo-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina y, más preferiblemente, 40-O-(¡2-hidroxi-etil)-rapamicina, dada a conocer como el Ejemplo 8 en la Publicación Internacional Número WO 94/09010.

Los derivados de rapamicina particularmente preferidos de la fórmula (II) son: 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, 40-[3-hidroxi-2-( ¡droxi-metil)-2-metil-propanoato]-rapamicina (también denominada como CCI779), 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (también denominada como ABT578), 32-desoxo-rapamicina, 16-pentt-2-iniloxi-32(S)-dihidro rapamicina, o TAFA-93. e. Los derivados de rapamicina también incluyen los denominados como rapálogos, por ejemplo, como se da a conocer en las Publicaciones Internacionales Números WO 98/02441 y WO 01/14387, por ejemplo, AP23573, AP23464, o AP23841. ' La rapamicina y sus derivados, con base en la actividad observada, por ejemplo, tienen enlace con la macrofilina-12 (también conocida como la proteína de enlace de FK-506 o FKBP-12), por ejemplo, como se describe en las Publicaciones Internacionales Números WO 94/09010, WO 95/16691 o WO 96/41807, y se ha encontrado que son útiles, por ejemplo, como inmunosupresores, por ejemplo, en el tratamiento de rechazo agudo de aloinjerto. i III. Ascomicina, la cual es un análogo etílico de FK506.

IV. AZD08055 y OSI127, los cuales son compuestos que inhiben la actividad de cinasa de mTor mediante su enlace directo con la hendidura de enlace de ATP de la enzima.

En una modalidad de la presente invención, la COMBINACIÓN DE LA INVENCIÓN comprende cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor seleccionado a partir del grupo que consiste en: Sirolimus (rapamicina, AY-22989, Wyeth), Everolimus (RAD001 , Novartis)), 40-[3-hidroxi-2-(hidroxi-meti()-2-metil-propanoato]-rapamicina (también denominada como Temsirolimus o CCI-779, Wyeth), Deferolimus (AP-23573/MK-8669, Ariad/Merck & Co.), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En la modalidad preferida de la presente invención, la COMBINACIÓN DE LA INVENCIÓN está comprendida del compuesto aloestérico inhibidor de mTor, everolimus. El everolimus (referido como "RAD001" o "PKF-222-6666-NX-2" en la presente), tiene el nombre químico: (1 R,9S , 12S , 15R, 16E, 18R , 19R ,21 R ,23S ;24E ,26E, 28E,30S,32S,35R)-1 , 18-d ¡hid rox¡-12-{( 1 R)-2-[(1 S ,3R ^RM-^-hidroxi-etoxiJ-S-metoxi-cicIohexill-l -m eti l-eti I}- 19,30-dimetoxi-15,17, 21 ,23,29,35-hexametil-11 ,36-dioxa-4-aza-tric¡clo-[30.3.1.04,9]-hexa-triaconta-16,24,26,28-tetraeno-2,3,10,14,20-pentaona ó : 40-O-(2-hidroxi-etil)-rapamicina. El everolimus y sus análogos se describen en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,665,772, en la columna 1, línea 39 a columna 3, línea 1, la cual se incorpora a la presente como referencia en su totalidad. El everolimus se puede preparar como se da a conocer o por analogía a los procedimientos descritos en esta referencia.

La estructura de los agentes activos identificados por números de código, nombres genéricos o comerciales, se puede tomar de la edición actual del compendio estándar "The Merck Index" o de las bases de datos, por ejemplo, Patents International (por ejemplo, IMS World Publications). El contenido correspondiente de las mismas se incorpora a la presente como referencia.

De la misma manera están comprendidas las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, los racematos correspondientes, diaestereoisómeros, enantiómeros, tautómeros, así como las modificaciones de cristal correspondientes de los compuestos anteriormente dados a conocer, en donde estén presentes, por ejemplo, solvatos, hidratos y polimorfos, los cuales se dan a conocer en las mismas. Los compuestos utilizados como ingredientes activos en las combinaciones de la invención, se pueden preparar y administrar como se describe en los documentos citados, respectivamente. También, dentro del alcance de esta invención, está la combinación de más de dos ingredientes activos separados como se estipula anteriormente, es decir, una combinación farmacéutica dentro del alcance de esta invención podría incluir tres ingredientes activos o más.

Se ha descubierto, de una manera sorprendente, que se logra una interacción sinérgica inesperada entre los compuestos de la fórmula (I) y los inhibidores aloestéricos de mTOR, en particular RAD001, cuando se combinan cantidades de dosis bajas de los compuestos de la fórmula (I) con los inhibidores aloestpricos de mTOR. La combinación de la invención puede comprender una cantidad de dosis de everolimus (RAD001), la cual comprende menos o igual a 10 miligramos/sujeto (por ejemplo, 8 miligramos/sujeto, 5 miligramos/sujeto, 2.5 miligramos/sujeto, 1 miligramo/sujeto) por dosis diaria.

La combinación de la invención puede comprender una cantidad de dosis del compuesto inhibidor aloestérico de mTor, en particular everolimus (RAD001), que es de aproximadamente 0.001 nM a aproximadamente 17.8 nM, o de aproximadamente 8.5 x 10'12 moles/kilogramo a aproximadamente 1.5 x 10'7 moles/kilogramo, o de aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 10 miligramos/sujeto por dosis diaria, para el tratamiento de una enfermedad proliferativa.

De conformidad con lo anterior, la cantidad de dosis del compuesto inhibidor aloestérico de mTor, en particular everolimus (RAD001), administrada a un sujeto que lo necesite, corresponde a una cantidad de dosis de 0.001 nM a aproximadamente 17.8 nM por dosis diaria, de aproximadamente 0.001 nM a aproximadamente 10nM por dosis diaria, o de aproximadamente 0.001 nM a aproximadamente 1 nM por dosis diaria. De una manera muy preferible, la cantidad de dosis del compuesto aloestérico inhibidor de mTor es de aproximadamente 0.001 nM a aproximadamente 1 nM por dosis diaria.

En una modalidad, la cantidad de dosis del compuesto inhibidor aloestérico de mTor, en particular everolimus (RAD001), puede ser de aproximadamente 8.5 x 10"12 moles/kilogramo a aproximadamente 1.5 x 10"7 moles/kilogramo por dosis diaria, de aproximadamente 8.5 x 10"12 moles/kilogramo a aproximadamente 8.5 x 10"8 moles/ kilogramo por dosis diaria, o de aproximadamente 8.5 x 10~12 moles/ kilogramo a aproximadamente 8.5 x 10"9 moles/kilogramo por dosis diaria. De una manera muy preferible, la cantidad de dosis del compuesto aloestérico inhibidor de mTor es de aproximadamente 8.5 x 10"12 moles/kilogramo a aproximadamente 8.5 x 10"9 por dosis diaria.

En una modalidad alternativa, la cantidad de dosis del compuesto inhibidor aloestérico de mTor, en particular everolimus (RAD001), administrada a un sujeto que lo necesite, puede ser de aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 10 miligramos/sujeto por dosis diaria, de aproximadamente; 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 5.6 miligramos/sujeto por dosis diaria, o de aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 0.56 miligramos/sujeto por dosis diaria. De una manera muy preferible, la cantidad de dosis del compuesto aloestérico inhibidor de mTor es de aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 0.56 miligramos/sujeto por dosis diaria. El sujeto que lo necesite es de preferencia un ser humano.

En una modalidad preferida, la combinación de la invención pertenece a una combinación farmacéutica que comprende: (a) el i Compuesto A o su sal de mono-tosilato, y (b) el compuesto aloestérico inhibidor de mTor, everolimus (RAD001), en donde el Compuesto A se proporciona en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10~8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/ kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria, para el tratamiento de una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor. En una modalidad adicional, el compuesto aloestérico inhibidor de mTor se proporciona en una cantidad terapéuticamente efectiva de aproximadamente 0.001 nM a aproximadamente 17.8 nM, o de aproximadamente 8.5 x 10"12 moles/kilogramo a aproximadamente 1.5 x 10~7 moles/kilogramo, o de aproximadamente 0.00056 miligramos/ sujeto a aproximadamente 10 miligramos/sujeto por dosis diaria.

En una modalidad adicional, la cantidad de dosis del Compuesto A corresponde a una cantidad de dosis de aproximadamente 1 nM a aproximadamente 100 nM por dosis diaria, de aproximadamente 5 nM a aproximadamente 78 nM por dosis diaria, de aproximadamente 8 nM a aproximadamente 62 nM por dosis diaria, o de aproximadamente 16 nM a aproximadamente 50 nM por dosis diaria.

En una modalidad adicional, la cantidad de dosis del Compuesto A puede ser de aproximadamente 9.5 x 10'8 moles/ kilogramo a aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, de aproximadamente 4.8 x 10"7 moles/kilogramo a aproximadamente 7.4 x 10"6 moles/kilogramo, de aproximadamente 7.6 x 10"7 moles/ kilogramo a aproximadamente 5.9 x 10"6 moles/kilogramo, o de aproximadamente 1.5 x 10"6 moles/kilogramo a aproximadamente 4.7 x 10"6 moles/kilogramo por dosis diaria.

En una modalidad alternativa, la cantidad de dosis del Compuesto A puede ser de aproximadamente 3 miligramos/sujeto a aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria, de aproximadamente 15 miligramos/sujeto a aproximadamente 245 miligramos/sujeto por dosis diaria, de aproximadamente 25 miligramos/sujeto a aproximadamente 195 miligramos/sujeto por dosis diaria, o de aproximadamente 50 miligramos/sujeto a aproximadamente 157 miligramos/sujeto por dosis diaria. El sujeto que lo necesita es de preferencia un ser humano.

En una modalidad alternativa, la cantidad de dosis del Compuesto A puede ser de aproximadamente 10 a 315 miligramos/ sujeto, de 100 a 315 miligramos/sujeto, o de 200 a 315 miligramos/ sujeto por dosis diaria.

En una modalidad adicional, la cantidad de dosis del compuesto aloestérico inhibidor de mTor, everolimus (RAD001), administrada a un sujeto que lo necesite, corresponde a una cantidad de dosis de aproximadamente 0.001 nM a aproximadamente 17.8 nM por dosis diaria, de aproximadamente 0.001 nM a aproximadamente 10nM por dosis diaria, o de aproximadamente 0.001 nM a aproximadamente 1 nM por dosis diaria. De una manera muy preferible, la cantidad de dosis del compuesto aloestérico! inhibidor de mTor es de aproximadamente 0.001 nM a aproximadamente 1 nM por dosis diaria.

En una modalidad, la cantidad de dosis del compuesto aloestérico inhibidor de mTor, everolimus (RAD001), puede ser de aproximadamente 8.5 x 10"12 moles/kilogramo a aproximadamente 1.5 x 10"7 moles/kilogramo por dosis diaria, de aproximadamente 8.5 x 10"12 moles/kilogramo a aproximadamente 8.5 x 10'8 moles/kilogramo por dosis diaria, o de aproximadamente 8.5 x 1012 moles/kilogramo a aproximadamente 8.5 x 10"9 moles/kilogramo por dosis diaria. De una manera muy preferible, la cantidad de dosis del compuesto aloestérico inhibidor de mTor es de aproximadamente 8.5 x 10"12 moles/kilogramo a aproximadamente 8.5 x 10"9 por dosis diaria.

En una modalidad alternativa, la cantidad de dosis del compuesto aloestérico inhibidor de mTor, everolimus (RAD001), en un sujeto que lo necesite, en donde se estima que el sujeto es de aproximadamente 70 kilogramos, puede ser de aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 10 miligramos/sujeto por dosis diaria, de aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 5.6 miligramos/sujeto por dosis diaria, o de aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 0.56 miligramos/sujeto por dosis diaria. De una manera muy preferible, la cantidad de dosis del compuesto aloestérico inhibidor de mTor es de aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto a aproximadamente 0.56 miligramos/sujeto por dosis diaria. El sujeto que lo necesita es de preferencia un ser humano.

De acuerdo con la presente invención, la combinación de la invención, se puede utilizar para el tratamiento de una enfermedad proliferativa, en particular de una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor. ' Las "enfermedades proliferativas dependientes de la cinasa mTor" incluyen, pero no se restringen a, enfermedades proliferativas, incluyendo cánceres y otras malignidades relacionadas, asociadas con las cascadas de señalización de mTor patológicas. Una lista no limitante de los cánceres asociados con las cascadas de señalización de mTor patológicas incluyen cáncer pulmonar no microcelular, cáncer endometrial, mieloma múltiple, linfoma de células-B no de Hodgkin, cáncer colo-rectal, cáncer de mama, carcinoma de células renales, tumores gástricos, tumores neuroendocrinos, linfomas, y cáncer de próstata.

Las enfermedades proliferativas dependientes de la cinasa mTor preferidas son de mama, glioblastomas, cáncer pulmonar no microcelular, cáncer endometrial, mieloma múltiple, y linfoma de células-B no de Hodgkin.

Otros ejemplos de enfermedades proliferativas son, por ejemplo, tumor benigno o maligno, carcinoma del cerebro, riñon, hígado, glándula suprarrenal, vejiga, estómago, ovarios, colon, recto, páncreas, pulmón (por ejemplo, cáncer pulmonar no microcelular), endometrial, linfoma de células-B no de Hodgkin, vagina o tiroides, sarcoma, glioblastomas, mieloma múltiple o cáncer gastrointestinal I gástrico, en especial carcinoma de colon o adenoma colo-rectal, o un tumor de cuello y cabeza, una híper-proliferación epidérmica, soriasis, hiperplasia de próstata, neuroendicrina, una neoplasia, una neoplasia de carácter epitelial, linfomas, un carcinoma mamario, o una leucemia.

En una modalidad, la presente invención, se refiere al uso de una combinación farmacéutica que comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I), o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, para el tratamiento o la prevención de una enfermedad proliferativa , en particular una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 n y aproximadamente 100 nM, o ,de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.

En otra modalidad, la presente invención, se refiere al uso de una combinación farmacéutica que comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I), o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente i aceptable, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento o la prevención de una enfermedad proliferativa, en particular una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10'8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/ kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un método para el tratamiento o la prevención de una enfermedad proliferativa, el cual comprende administrar: (a) una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I), o de un tautómero del mismo, o de una sal farmacéuticamente aceptable, o de un hidrato, o de un solvato del mismo, y (b) una cantidad terapéuticamente efectiva de cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, a un sujeto que lo necesite, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.

En otro aspecto, la presente invención proporciona una combinación que comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I), o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor seleccionado a partir del grupo que consiste en rapamicina RAD (sirolimus), y los derivados/análogos de la misma, tales como everolimus (o RAD001); CCI-779 y Deferolimus (AP-23573/M K-8669) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y opcionalmente cuando menos un , vehículo farmacéuticamente aceptable, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/ kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia, para el tratamiento de las enfermedades proliferativas.

En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un método para mejorar la eficacia del tratamiento de las enfermedades proliferativas dependientes de la cinasa mTor, mediante la administración de: (a) un compuesto de la fórmula (I), o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, a un sujeto que lo necesite, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.

En un aspecto adicional, la presente invención proporciona una combinación farmacéutica para su administración a seres humanos, la cual comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I), o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, como se describe anteriormente, en de aproximadamente el 0.31 por ciento a aproximadamente el 31 por ciento, de aproximadamente el 1.6 por ciento a aproximadamente el 24.4 por ciento, de aproximadamente el 2.5 por ciento a aproximadamente el 19.4 por ciento, o de aproximadamente el 5.0 por ciento a aproximadamente el 15.6 por ciento de la máxima dosis tolerable (MTD), y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor del mismo en de aproximadamente el 0.006 por ciento al 100 por ciento, de aproximadamente el 0.006 por ciento a aproximadamente el 56.3 por ciento, de aproximadamente el 0.006 por ciento a aproximadamente el 5.6 por ciento de la máxima dosis tolerable (MTD). En una modalidad preferida, el compuesto de la fórmula (I) es el compuesto que se dosifica en aproximadamente el 30 por ciento de la máxima dosis tolerable (MTD), y el compuesto aloestérico inhibidor de mTor se dosifica en aproximadamente el 5.6 por ciento de la máxima dosis tolerable (MTD). En la modalidad más preferida, el compuesto de la fórmula (I) es el compuesto que se dosifica en aproximadamente el 30 por ciento de la máxima dosis tolerable (MTD), y el compuesto aloestérico inhibidor de mTor es everolimus (RAD001) dosificado en el 5.6 por ciento de la máxima dosis tolerable (MTD). La máxima dosis tolerable (MTD) corresponde a la dosis más alta de un medicamento que se puede dar sin efectos secundarios inaceptables. Está dentro de la técnica la determinación de la máxima dosis tolerable (MTD). Por ejemplo, la máxima dosis tolerable (MTD) se puede determinar de una manera adecuada en un estudio en Fase I, que incluye una escala de la dosis, para caracterizar las toxicidades limitantes de la dosis y para determinar el nivel tolerado de dosis biológicamente activa.

En un aspecto de la invención, la presente invención pertenece a una combinación farmacéutica, tal como a una preparación combinada o a una composición farmacéutica, la cual comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I), y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia, en particular para el tratamiento de las enfermedades proliferativas dependientes de la cinasa de| objetivo de mamífero de rapamicina (mTOR), en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una( cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.

En una modalidad preferida, el compuesto de la fórmula (I) es el 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1-il)-fenil]-propionitrilo (Compuesto A), o su sal de mono-tosilato.

En una modalidad adicional, el compuesto de la fórmula (I) es la 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluoro-metil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona (Compuesto B).

En una modalidad adicional de la presente invención, el compuesto aloestérico inhibidor de mTor se selecciona a partir del grupo que consiste en la rapamicina RAD (sirolimus), y los derivados/análogos de la misma, tales como everolimus (o RAD001); CCI-779 y Deferolimus (AP-23573/M K-8669), o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma. El compuesto inhibidor aloestérico de mTor particularmente preferido de acuerdo con la presente invención, es everolimus.

En una modalidad preferida de la presente invención, el compuesto de la fórmula (I) es el 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1-il)-fenil]- ; propionitrilo (Compuesto A), o su sal de mono-tosilato, y el compuesto aloestérico inhibidor de mTor es everolimus (RAD001).

Las composiciones farmacéuticas o la combinación de acuerdo con la presente invención, se pueden probar en estudios clínicos. Los estudios clínicos adecuados pueden ser, por ejemplo, los estudios de escala de dosis, de etiqueta abierta, en pacientes con enfermedades proliferativas. Estos estudios prueban en particular el sinergismo de los ingredientes activos de la combinación de la invención. Los efectos benéficos, por ejemplo, el sinergismo, sobre las enfermedades proliferativas, se pueden determinar directamente a través de los resultados de estos estudios, los cuales son conocidos como tales por una persona experta en este campo. Estos estudios pueden ser, en particular, adecuados para comparar los efectos de una monoterapia utilizando los ingredientes activos y una combinación de la invención. Cada paciente puede recibir dosis del agente (a) ya sea diariamente, o bien de una forma intermitente. La eficacia del tratamiento se puede determinar en estos estudios, por ejemplo, después de 12, 18 ó 24 semanas, mediante la evaluación de los puntajes de síntomas cada 6 semanas.

La administración de una combinación farmacéutica de la invención puede dar como resultado no solamente un efecto benéfico, por ejemplo, un efecto terapéutico sinérgico, por ejemplo, con respecto a aliviar, demorar el progreso de, o inhibir, los síntomas, sino también efectos benéficos adicionales sorprendentes, por ejemplo, más pocos efectos secundarios, una mejor calidad de vida, o una patología reducida, comparándose con una monoterapia que aplique solamente uno de los ingredientes farmacéuticamente activos utilizados en la combinación de la invención.

Es un objetivo de esta invención proporcionar una composición farmacéutica, la cual comprende una cantidad que puede ser conjuntamente efectiva terapéuticamente para resolver o prevenir las enfermedades proliferativas dependientes de la cinasa mTor, de una combinación de la invención. En esta composición, el agente (a) y el agente (b) se pueden administrar juntos, uno después del otro, o por separado, en una forma de dosificación unitaria combinada, o en dos formas de dosificación unitaria separadas. La forma de dosificación unitaria también puede ser una combinación fija.

Las composiciones farmacéuticas para la administración separada del componente de combinación (a) y el componente de combinación (b), o para la administración en una combinación fija, es decir, una sola composición galénica que comprende cuando menos dos componentes de combinación (a) y (b), de acuerdo con la invención, se pueden preparar de una manera conocida por sí misma, y son aquéllas adecuadas para su administración ehteral, tal como oral o rectal, y parenteral a mamíferos (animales de sangre caliente), incluyendo a seres humanos, las cuales comprenden una cantidad de cuando menos un componente de combinación farmacológicamente activo solo, por ejemplo, como se indica anteriormente, o en combinación con uno o más vehículos o diluyentes farmacéuticamente aceptables, en especial adecuados para la aplicación enteral o parenteral.

Las preparaciones farmacéuticas para la terapia de combinación para su administración enteral o parenteral ; son, por ejemplo, aquéllas que están en formas de dosificación unitaria, tales como tabletas recubiertas con azúcar, tabletas, cápsulas o supositorios, o ampolletas. Si no se indica de otra manera, éstas se preparan de una manera conocida por sí misma, por ejemplo, por medio de los procesos convencionales de mezcla, granulación, recubrimiento con azúcar, disolución, o liofilización. Se apreciará que el contenido unitario de un componente de combinación contenido en una dosis individual de cada forma de dosificación no necesita constituir por sí mismo una cantidad efectiva debido a que se puede alcanzar la cantidad efectiva necesaria mediante la administración de una pluralidad de unidades de dosificación.

En la preparación de las composiciones para la forma de dosificación oral, se pueden agregar cualesquiera vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables típicos a los componentes de la composición, los cuales pueden ser sólidos o líquidos. Las preparaciones en forma sólida comprenden, por ejemplo, polvos, cápsulas y tabletas. Los ejemplos del vehículo farmacéuticamente aceptable incluyen agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes saborizantes, conservadores, agentes colorantes; o vehículos tales como almidones, azúcares, celulosa microcristalina, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes, agentes desintegrantes, y similares, en el caso de las preparaciones sólidas orales, prefiriéndose las preparaciones orales sólidas sobre las preparaciones líquidas. Debido a su facilidad de administración, las tabletas y cápsulas representan la forma unitaria de dosificación oral más conveniente, en cuyo caso, obviamente se emplean vehículos farmacéuticos sólidos. Las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto inhibidor catalítico de PI3K/mTÓR de la fórmula (I), y más preferiblemente el Compuesto A, en asociación con cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, se pueden elaborar de una manera convencional, mezclando con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Las preparaciones en forma líquida comprenden soluciones, suspensiones, y emulsiones. Las composiciones líquidas se pueden formular en solución mediante la disolución del componente activo en agua, y la adición de colorantes, agentes saborizantes, estabilizantes, y agentes espesantes adecuados, según sea deseado. Las suspensiones acuosas para uso oral se pueden hacer mediante la dispersión del componente activo finamente dividido en agua, junto con un material viscoso, tal como gomas sintéticos naturales, resinas, metil-celulosa, y otros agentes de suspensión conocidos en la técnica de la formulación farmacéutica.

En particular, se puede administrar cualquier cantidad de cada uno de los componentes de la combinación de la invención, de una manera simultánea o en secuencia y en cualquier orden, y los componentes se pueden administrar por separado o como una combinación fija. Por ejemplo, el método para prevenir o tratar una enfermedad proliferativa dependiente de la cinasa mTor de acuerdo con la invención puede comprender: (i) la administración del componente de combinación (a) en forma libre o de sal farmacéuticamente aceptable, y (ii) la administración de un componente de combinación (b) en forma libre o de sal farmacéuticamente aceptable, de una manera simultánéa o en secuencia, en cualquier orden, en cantidades conjuntamente efectivas, de preferencia en cantidades sinérgicamente efectivas, por ejemplo, en dosificaciones diarias o intermitentes correspondientes a las cantidades descritas en la presente. Los componentes de combinación individuales de la combinación de la invención, se pueden administrar por separado en diferentes tiempos durante el curso de la terapia, o de una manera concurrente en formas de combinación divididas o individuales. Adicionalmente, el término "administración" también abarca el uso de un pro-fármaco de un componente de combinación que se convierte in vivo hasta el componente de combinación como tal. Por consiguiente, se debe entender que la presente invención abarca todos los regímenes de tratamiento simultáneo o alternado, y el término "administración" se debe interpretar de conformidad con lo anterior. Además, él término "dosis diaria" abarca la cantidad de los componentes de combinación individuales de la combinación de la invención, así como por separado en diferentes tiempos durante el curso de la terapia, o de una manera concurrente en formas unitarias de dosis divididas o individuales, administradas de tal forma que es igual o equivalente a la cantidad especificada durante cualquier período de 24 horas.

La dosificación efectiva de cada uno de los componentes de combinación empleados en la combinación de la invención puede variar dependiendo del compuesto o de la composición farmacéutica particular empleada, del modo de administración, de la condición que se esté tratando, y de la gravedad de la condición que se esté tratando. Por consiguiente, el régimen de dosificación de la combinación de la invención, se selecciona de acuerdo con una variedad de factores, incluyendo la vía de administración y ja función renal y hepática del paciente. Un clínico o médico de una experiencia ordinaria puede determinar fácilmente y prescribir la cantidad efectiva de los ingredientes activos individuales requeridos para aliviar, contrarrestar, o detener el progreso de la condición. La precisión óptima para alcanzar la concentración de los ingredientes activos dentro del intervalo que proporcione la eficacia sin toxicidad requiere un régimen basado en la cinética de la disponibilidad de los ingredientes activos para los sitios objetivo.

En otra modalidad, la invención pertenece a un kit de partes, el cual comprende una composición farmacéutica, la cual comprende: (a) un compuesto de la fórmula (I), y (b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, junto con instrucciones sobre la manera de administrar esa composición farmacéutica, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10~8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre i aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria. Estas instrucciones explicarán con detalle el régimen de dosificación en el que se deba administrar la combinación.

En una modalidad, la invención pertenece a un kit de partes, el cual comprende una composición farmacéutica, la cual comprende el Compuesto A, y cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, de preferencia everolimus (RAD001), junto con instrucciones sobre la manera de administrar esa composición farmacéutica, en donde se administra el Compuesto A a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria. Estas instrucciones explicarán con detalle el régimen de dosificación en el que se deba administrar la combinación.

La presente invención proporciona además un paquete comercial que comprende, como ingredientes activos, la combinación de la invención, junto con instrucciones para su uso simultáneo, separado, o en secuencia, en la demora del progreso o en el tratamiento de una enfermedad proliferativa dependiente dé la cinasa mTor.

Los siguientes ejemplos ilustran la invención descrita anteriormente; sin embargo, no pretenden limitar el alcance de la invención de ninguna manera. Los efectos benéficos de la combinación farmacéutica de la presente invención también se pueden determinar mediante otros modelos de prueba conocidos como tales por la persona experta en la técnica pertinente.

Ejemplo 1 Material y Métodos Las líneas celulares utilizadas en este estudio se adquirieron en la American Type Cell Collection, incluyendo la línea de células de cáncer pulmonar no microcelular NCI-H23 (la cual lleva ambas mutaciones de KRAS y LKB1), las líneas celulares tumorales endometriales MFE 296 (las cuales llevan ambas mutaciones de PIK3CA y PTEN), y AN 3CA (la cual lleva ambas mutaciones de FGFR2 y PTEN), las líneas celulares de mieloma múltiple KMS 11 (las cuales llevan mutaciones de FGFR3), y la línea de linfoma de células-B no de Hodgkin GA-10 en RPMI 8226. Todas las líneas celulares se cultivaron a 37°C en una incubadora con CO? al 5 por ciento en un medio de RPMI 1640 (ATCC #30-2001) complementado con suero bovino fetal al 10 por ciento, 2 milimoles/litro de glutamina, y piruvato de sodio al 1 por ciento.

Ensayo de proliferación celular: Se determinó la viabilidad celular mediante la medición del contenido de ATP celular utilizando el Ensayo de Viabilidad Celular Luminiscente CelITiter-Glo® (Promega #G7573) de acuerdo con el protocolo del fabricante. Dicho de una manera breve, se aplicaron de 1,500 a 50,000 células en placas ya sea de 384 o de 96 pozos, en 30 microlitros (384 pozos) o en 100 microlitros (96 pozos) del medio de crecimiento; las células se dejaron adherirse durante la noche, seguido por 72 horas de incubación con diferentes concentraciones de fármacos o de combinaciones de fármacos (10 microlitros por pozo en las placas de 384 pozos); al final del tratamiento con el fármaco, se agregaron 30 microlitros del reactivo CelITiter-Glo a cada pozo (placas de 384 pozos) para lisar las células, y se registraron las señales de luminiscencia en un lector de placas Envision. i Ensayo de toma de imágenes automatizada (o ensayo de alto contenido) para pS6 S240/244 y p4EBP1 T37/46: Se sembraron 2-4 x 103 células en placas negras de 384 pozos de fondo transparente (Greiner #781091) en 30 microlitros por pozo del medio de crecimiento, 24 horas antes del tratamiento. Los compuestos se agregaron a las células en 10 microlitros del medio de crecimiento, y se incubaron durante la noche; las células se fijaron entonces mediante la adición de 10 microlitros por pozo de fijador de Mirsky (National Diagnostics # HS-102) durante 1 hora, se lavaron siete veces con 30 microlitros/pozo de regulador TBS utilizando un lavador de placas BioTek, y se bloquearon con 100 microlitros/pozo de regulador de bloqueo (TBS con albúmina de suero bovino (BSA) al 0.1 por ciento, y Tritón X-100 al 0.1 por ciento). El anticuerpo anti-Ser 240/244-RPS6 (CST #4838, dilución a 1:150) o el anticuerpo anti-Thr 37/46-p4EBP1 (CST #2855, dilución a 1:150) se incubaron entonces durante la noche a 4°C. Después de lavar siete veces con TBS, las células se tiñeron con el segundo anticuerpo de IgG de cabra anti-conejo conjugado con Cy5 (Millipore #AP187S, dilución a 1:150), y teñido del ADN con el tinte Hoechst 33342 durante 1.5 horas. Se tomaron las imágenes de las señales del fosfo-S6 y del fosfo-4EBP1 utilizando el Analizador InCell 1000 (BN_teñido_protocolo_1 Ox) a una amplificación 10x, a 3 campos por pozo, después de lavarse siete veces con TBS. Para la señal Hoechst 33342: las longitudes de onda de excitación y emisión son de 360 nanómetros (filtro D360_40x), y de 460 nanómetros (filtro HQ460_40M), respectivamente, y para Cy5, de 620 nanómetros (filtro HQ620_60x) para ambas longitudes de onda de excitación y emisión. El análisis de las imágenes se hizo utilizando el software InCell Investigator.

Método para calcular el efecto de la combinación: Con el fin de evaluar el efecto de la combinación de everolimus y el Compuesto A de una manera no forzada, y de identificar el efecto sinérgico en todas las concentraciones posibles, se condujeron los estudios de la combinación con una "matriz de dosis", en donde se prueba una combinación en todas las posibles permutaciones de dosis diluidas en serie del agente individual de everolimus y el Compuesto A, en todos los ensayos de combinación, los compuestos se aplicaron de una manera simultánea. Las curvas de respuesta a la dosis del agente individual, la IC50, la IC90, y el sinergismo, se analizan todos utilizando el software Chalice (CombinatoRx, Cambridge, MA). El sinergismo se calculó mediante la comparación de la respuesta a una combinación con aquéllas de sus agentes individuales, contra el modelo de referencia de dosis aditiva del fármaco consigo mismo. Las desviaciones de la aditividad de la dosis se pueden evaluar visualmente en un Isobolograma, o numéricamente con un Indice de Combinación. El exceso de inhibición comparado con la aditividad también se puede graficar como un diagrama de matriz de dosis completa, para capturar el lugar en el que se presentan los sinergismos. Con el fin de cuantificar la fuerza global de los efectos de la combinación, también se calcula un puntaje del volumen 1/HSA = S?.? In x ln Y ( dato. - /HSA)> entre los datos y la superficie del agente individual más alto, normalizado para los factores de dilución del agente individual fx,fY [ref].

Resultados: A. Efecto de la combinación en el modelo de células humanas de cáncer pulmonar no microcelular (NSCLC) NCI-H23 Señal de p4EBP1 : El efecto del tratamiento con everolimus/Compuesto A en un solo agente y concomitantes, sobre la señal de p4EBP1, se evaluó utilizando el ensayo de alto contenido de p4EBP1 T37/46 descrito anteriormente. Las células se aplicaron a 3,000 células por pozo en placas de 384 pozos por cuadruplicado, y se trataron con el compuesto durante 18 horas antes de la medición (Figuras 1 y 2). En este estudio de "matriz de dosis", el everolimus se sometió a una dilución en serie de 5 dosis 4X con la dosis alta a 1.2 µ? y la dosis baja a aproximadamente 5 nM, y el Compuesto A se sometió a una dilución en serie de 9 dosis 2X con la dosis alta a 1.2 µ? y la dosis baja a aproximadamente 5 nM. El Compuesto A solo provocó una reducción dependiente de la concentración de la señal de p4EBP1 (ICS0 = 10 nM, y IC90 = 80 nM), y la reducción de la señal llegó a una planicie en concentraciones de 156 nM y mayores, en donde evidentemente se logra una inhibición completa; el everolimus como un solo agente, solamente ejerció un efecto muy marginal sobre las señales de p4EBP1 en todas las concentraciones probadas (de 5 nM a 1.2 µ?, una reducción de señal de aproximadamente el 30 por ciento). Esto es consistente con los reportes anteriores de que la fosforilación de los residuos de 4EBP1 T37/46, que tiene una función clave en la regulación de la traducción dependiente de cap, solamente se puede modular mediante los inhibidores catalíticos de mTOR, pero no mediante los inhibidores aloestéricos como everolimus. El tratamiento concomitante con everolimus/Compuesto A ha mejorado notoriamente él efecto inhibidor, comparándose con tanto el everolimus en todas las dosis (de 5 nM a 1.2 µ?, o de 0.042 a 10.08 nanomolar/kilogramo, o de 2.82 a 676.44 miligramos/persona), como las dosis sub-óptimas del Compuesto A (de 5 nM a 78 nM, o de 0.47 a 7.44 nanomolar/kilogramo, o de 15.68 a 244.62 miligramos/persona), en concentraciones más altas del Compuesto A (de 156 nM a 1.2 µ?, o de 14.88 a 114.50 nanomolar/kilogramo, ó de 489.24 a 3763.44 miligramos/persona), la combinación no exhibió beneficio alguno adicional, comparándose con los tratamientos con el agente individual del Compuesto A, cuando se ha alcanzado e| máximo i efecto. Basándose en este patrón, el efecto sinérgico observado se puede clasificar como de "dispersión de la dosis" para el Compuesto A, en lugar del "refuerzo del efecto global": tan poco como 5 nM de everolimus puede cambiar la IC90 para el Compuesto A desde 80 nM hasta 5 nM, logrando una reducción de 16 veces.

Señal de pS6 S240/244: El efecto del tratamiento con everolimus/Compuesto A en un solo agente y concomitantes¡ sobre la señal de pS6, se evaluó utilizando el ensayo de alto contenido de pS6 S240/244 descrito anteriormente. El establecimiento del experimento es idéntico al ensayo de p4EBP1 utilizado para el modelo de células NCI-H23. (Figuras 3 y 4). Y se aplicó la misma "matriz de dosis" (everolimus: 5 dosis, 4X, de 1.2 µ? a 5 n ; Compuesto A: 9 dosis, 2X, de 1.2 µ? a 5 nM). A diferencia de la inhibición sobre p4EBP1, tanto el Compuesto A como el everolimus, como los agentes individuales, desplazaron un efecto inhibidor muy potente sobre la señal de pS6: la IC50 para el Compuesto A es de 5 nM, y la IC90 es de aproximadamente 20 nM, mientras que la IC50 del everolimus es <5 nM, y la IC90 es de aproximadamente 10 nM. Los tratamientos concomitantes con everolimus/Compuesto A no dieron como resultado una mejor inhibición, en ; especial comparándose con el tratamiento con el agente individual de everolimus.

Proliferación celular: El efecto del tratamiento con everolimus/ Compuesto A en un solo agente y concomitantes, sobre la proliferación celular, se evaluó utilizando el ensayo CelITiter-Glo (CTG) descrito anteriormente. El establecimiento del experimento es idéntico al ensayo de alto contenido de p4EBP1, como se utiliza para el modelo de células NCI-H23. (Figura 5). Y se aplicó la misma "matriz de dosis" (everolimus: 5 dosis, 4X, de 1.2 µ? ;a 5 nM, Compuesto A: 9 dosis, 2X, de 1.2 µ? a 5 nM). El Compuesto A solo provocó una inhibición del crecimiento celular dependiente de la concentración con una IC50 = 78 nM, y Amax, la máxima fracción de inhibición = 0.7 (inhibición del crecimiento del 70 po¡r ciento, i i comparándose con el control de sulfóxido de dimetilp control (DMSO)); el everolimus solamente desplazó un efecto inhibidor del crecimiento menor sobre la proliferación celular como un solo agente, y nunca alcanzó una IC5o y Amax = 0.3. El tratamiento concomitante con everolimus/Compuesto A ha potenciado dramáticamente el efecto inhibidor, comparándose con tanto el everolimus en todas las dosis (de 5 nM a 1.2 µ o de 0.042 a 10.08 nanomolar/kilogramo, o de 2.82 a 676.44 miligramos/persona), como las dosis sub-óptimas del Compuesto A (de 5 nM a 78 nM, o de 0.47 a 7.44 nanomolar/kilogramo, o de 15.68 a 244.62 miligramos/ persona); en concentraciones más altas del Compuesto A (de 156 nM a 1.2 µ?, o de 14.88 a 114.50 nanomolar/kilogramo, ó de 489.24 a 3763.44 miligramos/persona), la combinación no exhibió beneficio alguno adicional, comparándose con los tratamientos con el agente individual del Compuesto A. Este patrón es altamente similar al patrón sinérgico de la inhibición de p4EBP1: las áreas de beneficio de la combinación casi se traslapan una con la otra, indicando que la inhibición sinérgica de p4EBP1 es cuando menos parte (si no es que todo) del mecanismo subyacente para el sinergismo observado sobre la inhibición del crecimiento. Y, como se discute anteriormente, este beneficio de la combinación se debe categorizar como la "dispersión de la dosis" para el Compuesto A en lugar del "refuerzo del efecto global": tan poco como 5 nM de everolimus puede lograr una reducción de 8 veces sobre la IC5o (de 80 nM a 10 nM), mientras que los efectos de la combinación en todas las dosis nunca excedieron el I efecto de la dosis individual del Compuesto A en una alta concentración (1.2 µ?).

Para investigar adicionalmente el efecto del tratamiento concomitante con everolimus/Compuesto A sobre la proliferación celular en concentraciones todavía más bajas de everolimus y el Compuesto A (la combinación 5 nM de everolimus y el Compuesto A ya evidenció ser altamente sinérgica, como se resume en los resultados de la proliferación celular anteriores para el modelo de células de cáncer NCI-H23). Se condujo otro experimento para evaluar el efecto de la combinación utilizando el ensayo CelITiter-Glo (CTG), y esta vez, las células se aplicaron en placas de 384 pozos a 1,000 células/pozo por triplicado, y se trataron con el compuesto durante 72 horas antes de la medición (Figura 6). En este estudio extendido de "matriz de dosis", el everolimus se sometió a una dilución en serie de 11 dosis 4X con la dosis más alta a 1 µ?, y la dosis baja a aproximadamente 1 pM, y el Compuesto A se sometió a una dilución en serie de 9 dosis 4X con la dosis alta a 1 µ , y la dosis baja a aproximadamente 16 pM. Las actividades de los agentes individuales tanto para el Compuesto A como para el everolimus, son consistentes con lo que se ha observado in los resultados de la proliferación celular anteriores para el modelo de células de cáncer NCI-H23: El Compuesto A solo provocó una inhibición del crecimiento celular dependiente de la concentración (IC50 = 80 nM, Amax = 0.7), y el everolimus tuvo solamente un efecto inhibidor del crecimiento menor como un solo agente (IC50 > 1 µ?, y Amax = 0.3); sin embargo, la adición de everolimus al Compuesto A en dosis baja (de 1 a 62 nM, o de 0.095 a 5.91 nanomolar/kilogramo, ó de 3.14 a 194.44 miligramos/persona) fue capaz de reforzar de una manera significativa el efecto anti-proliferativo del Compuesto A hasta un grado que es comparable con el Compuesto A en dosis alta (de 250 nM a 1 µ?, o de 23.85 a 95.41 nanomolar/kilogramo, o de 784.05 a 3136.20 miligramos/persona); la combinación en una cantidad sub-nanomolar (de 16 pM a 250 pM) del Compuesto A, o la dosis más alta (de 250 a 1 µ?) del Compuesto A no proporcionó ningún beneficio comparándose con el agente individual del Compuesto A. La cantidad de everolimus necesaria para lograr la dispersión de la dosis del Compuesto A también es asombrosamente baja, tan poco como de 1 pM, o de 0.0000084 nanomolar/kilogramo, o dé 0.00056 miligramos/persona de everolimus parece ser comparable con la cantidad en µ? de everolimus en términos de alcanzar una escala similar de sinergismo con el Compuesto A, sugiriendo que prácticamente, se puede agregar una cantidad de traza de everolimus (sub-nanomolar o incluso picomolar, de 1 pM a 1 nM, o de 0.0000084 a 0.0084 nanomolar/kilogramo, o de 0.00056 a 0.56 miligramos/persona) hasta una cantidad sub-óptima del Compuesto A (de aproximadamente 1 a 100 nM, o de 0.095 a 9.54 nánomolar/ kilogramo, ó de 3.14 a 313.62 miligramos/persona) para potenciar el efecto del Compuesto A sobre la inhibición completa de la actividad de mTORCI y subsiguientemente, una mejor inhibición sobre la inhibición del crecimiento.

B. Efecto de la combinación en el modelo de células humanas de cáncer endometrial MFE 296 Señal de P4EBP1: El efecto del tratamiento con everolimus/ Compuesto A en un solo agente y concomitantes, sobre la señal de p4EBP1, se evaluó utilizando el ensayo de alto contenido de p4EBP1 T37/46 descrito anteriormente. Las células se aplicaron a 4,000 células/pozo en placas de 384 pozos por duplicado, y se trataron con el compuesto durante 18 horas antes de la medición (Figura 7). De una manera similar al estudio de "matriz de dosis" llevado a cabo para el modelo de células de cáncer NCI-H23, en este estudio de "matriz de dosis", el everolimus se sometió a una dilución en serie de 11 dosis 4X con la dosis alta a 500 nM, y la dosis baja a aproximadamente 0.25 pM, y el Compuesto A se sometió a una dilución en serie de 9 dosis 4X con la dosis alta a 1 µ?, y la dosis baja a aproximadamente 16 pM. El Compuesto A solo provocó una reducción dependiente de la concentración de la señal de p4EBP1 (IC50 = 16 nM, e IC90 aproximadamente 100 nM), y alcanzó la inhibición completa en una concentración >250 µ?; el everolimus como un solo agente, solamente ejerció un efecto muy marginal sobre las señales de p4EBP1 en todas las concentraciones ¡probadas (de 0.5 pM a 500 nM, una reducción de la señal de aproximadamente el 20 por ciento). El tratamiento concomitante con everolimus/ Compuesto A ha mejorado notoriamente el efecto inhibidor, comparándose con tanto el everolimus en todas las dosis (de 0.5 pM a 500 nM, o de 0.0000042 a 4.2 nanomolar/kilogramo, o de 0.00028 a 281.84 miligramos/persona), como las dosis sub-óptimas del Compuesto A (de 16 pM a 62 nM, o de 0.0015 a 5.91 nanomolar/kilogramo, o de 0.050 a 194.44 miligramos/persona), la presencia de una cantidad de traza de everolimus fue capaz de cambiar la IC50 para el Compuesto A desde 16 nM hasta 0.24 nM, y la IC90 de aproximadamente 100 nM a 4 nM. En las concentraciones más altas del Compuesto A (de 250 nM a 1 µ?, o de 23.85 a 95.41 nanomolar/kilogramo, o de 784.05 a 3136.20 miligramos/persona), la combinación no exhibió beneficio alguno adicional, comparándose con los tratamientos con el agente individual del Compuesto A. Este patrón, el cual está en total acuerdo con lo que se ha observado en las células NCI-H23 descritas anteriormente, sugiriendo que el efecto sinérgico observado se puede categorizar como "dispersión de la dosis" para el Compuesto A sin ningún "refuerzo del efecto global". La combinación de dosis baja del everolimus y el Compuesto A se puede utilizar como un reactivo de inhibición de mTORCI altamente eficaz.

Proliferación celular: El efecto del tratamiento con everolimus/ Compuesto A en un solo agente y concomitantes sobre la proliferación celular, se evaluó utilizando el ensayo CelITiter-Glo (CTG) descrito anteriormente. El establecimiento del experimento es idéntico al ensayo de p4EBP1 como se describe anteriormente para el modelo de células de cáncer MFE296. (Figura 8). Y se aplicó la misma "matriz de dosis" (everolimus: 11 dosis, 4X, de 500 nM a 0.5 pM; Compuesto A: 9 dosis, 4X, de 1 µ? a 16 nM). El Compuesto A solo provocó una inhibición del crecimiento celular dependiente de la concentración (IC50 = 78 nM, Amax = 0.79); el everolimus como un solo agente es ligeramente menos eficaz (Amax = 0.6) en esta línea celular, y sin embargo, es extremadamente potente (IC50 < 0.25 pM). El tratamiento concomitante con everolimus/Compuesto A ha mejorado notoriamente el efecto inhibidor, comparándose con tanto el everolimus en todas las dosis (de 0.5 pM a 500 nM, o de 0.0000042 a 4.2 nanomolar/kilogramo, o de 0,00028 a 281.84 miligramos/persona), como las dosis sub-óptimas del Compuesto A (de 16 pM a 62 nM, o de 0.0015 a 5.91 nanomolar/kilogramo, o de 0.050 a 194.44 miligramos/persona); en concentraciones más altas del Compuesto A (de 250 nM a 1 µ?, o de 23.85 i a 95.41 nanomolar/kilogramo, o de 784.05 a 3136.20 miligramos/persona), la combinación no exhibió beneficio alguno adicional, comparándose con los tratamientos con el agente individual del Compuesto A. El patrón sinérgico, aquí nuevamente, sugirió que una cantidad de traza (picomolar) de everolimus fue capaz de reducir de una manera significativa la dosis efectiva completa del Compuesto A (desde 250nM hasta cerca del intervalo sub-nanomolar).

C. Efecto de la combinación en el modelo de células humanas de cáncer endometrial AN3 CA Proliferación celular: El efecto del tratamiento con everolimus/ Compuesto A en un solo agente y concomitantes sobre la proliferación celular, se evaluó utilizando el ensayo CelITiter-Glo (CTG) descrito anteriormente. Las células se aplicaron a 1,500 células/pozo en placas de 384 pozos por cuadruplicado, y se trataron con el compuesto durante 72 horas antes de la medición (Figura 9). Se aplicó la siguiente "matriz de dosis": Everolimus: 11 dosis, 4X, de 500 nM a 0.5 pM; Compuesto A: 9 dosis, 4X, de 1 µ? a 16 nM. El Compuesto A solo provocó una inhibición del crecimiento celular dependiente de la concentración (IC50 = 5 nM, Amax = 0.69); el everolimus como un solo agente no es muy eficaz (Amax = 0.3). El tratamiento concomitante con everolimus/Compuesto A ha potenciado dramáticamente el efecto inhibidor, comparándose con tanto el everolimus en todas las dosis (de 0.5 pM a 500 nM, o de 0.0000042 a 4.2 nanomolar/kilogramo, o de 0,00028 a 281.84 miligramos/persona), como las dosis sub-óptimas del Compuesto A (de 16 pM a 16 nM, o de 0.0015 a 1.53 nanomolar/kilogramo, o de 0.050 a 50.17 miligramos/persona), en concentraciones más altas del Compuesto A (de 64 nM a 1 µ?, o de 5.92 a 95.42 nanomolar/ kilogramo, o de 194.44 a 3136.20 miligramos/persona); la combinación no exhibió beneficio alguno adicional, comparándose con los tratamientos con el agente individual del Compuesto A. El patrón sinérgico, aquí nuevamente, sugirió un modelo de dispersión de la dosis en el que una cantidad de traza de (picomolar) de everolimus fue capaz de reducir de una manera significativa la cantidad de dosis efectiva completa del Compuesto A (desde >64 nM hasta cerca del intervalo nanomolar o sub-nanomolar).

D. Efecto de la combinación en el modelo de células de cáncer humanas de linfoma no de Hodqkin GA-10 Proliferación celular: El efecto del tratamiento con everolimus/ Compuesto A en un solo agente y concomitantes sobre la proliferación celular, se evaluó utilizando el ensayo CelITiter-Glo (CTG) descrito anteriormente. Las células se aplicaron a 50,000 células/pozo en placas de 96 pozos por triplicado, y se trataron con el compuesto durante 72 horas antes de la medición (Figura 10). Se aplicó la siguiente "matriz de dosis": Everolimus: 8 dosis, 3X, de 500 nM a 0.23 nM; Compuesto A: 8 dosis, 2X, de 1 µ? a 8 nM. El Compuesto A solo provocó una inhibición del crecimiento celular dependiente de la concentración, y en una alta concentración, eliminó casi todas las células sobrevivientes (IC50 de aproximadamente 25 nM, IC90 = 250 nM, Amax = 1); el everolimus como un solo agente no es muy eficaz (Amax = 0.3). El tratamiento concomitante con everolimus/Compuesto A ha potenciado dramáticamente el efecto inhibidor, comparándose con : tanto el everolimus en todas las dosis (de 0.23 nM a 500 nM, o de 0.0019 a 4.2 nanomolar/kilogramo, o de 0.13 a 281.84 miligramos/persona), como las dosis sub-óptimas del Compuesto A (de 8 nM a 62 nM, o de 0.76 a 5.92 nanomolar/kilogramo, o de 25.09 a 194.44 miligramos/ persona), cambió la IC90 para el Compuesto A desde aproximadamente 300 nM hasta 16 nM. En concentraciones más altas del Compuesto A (de 250 nM a 1 µ?, o de 23.85 a 95.41 nanomolar/kilogramo, o de 784.05 a 3136.20 miligramos/persona), la combinación no exhibió beneficio alguno adicional, comparándose con los tratamientos con el agente individual del Compuesto A. El patrón sinérgico, aquí nuevamente, sugirió un modelo de dispersión de la dosis en el que una cantidad de traza (sub-nanor olar) de everolimus fue capaz de reducir de una manera significativa la cantidad de dosis efectiva completa del Compuesto A (desde >250 nM hasta 16 a 62 nM).

E. Efecto de la combinación en el modelo de células de cáncer humanas de mieloma múltiple KMS-11 Proliferación celular: El efecto del tratamiento con everolimus/ Compuesto A en un solo agente y concomitantes sobre la proliferación celular, se evaluó utilizando el ensayo CelITiter-Glo (CTG) descrito anteriormente. Las células se aplicaron a 50,000 células/pozo en placas de 96 pozos por triplicado, y se trataron con el compuesto durante 72 horas antes de la medición (Figura 11). Se aplicó la siguiente "matriz de dosis": Everolimus: 8 dosis, 3X, de 500 nM a 0.23 nM; Compuesto A: 8 dosis, 2X, de 1 µ? a 8 nM. El Compuesto A solo provocó una inhibición del crecimiento celular dependiente de la concentración, y en una alta concentración (IC50 de aproximadamente 80 nM, Amax = 0.7); el everolimus como un solo agente no es muy eficaz (Amax = 0.28). El tratamiento concomitante con everolimus/Compuesto A ha potenciado dramáticamente el efecto inhibidor, comparándose con tanto el everolimus en todas las dosis (de 0.23 nM a 500 nM, o de 0.0019 a 4.2 nanomolar/kilogramo, o de 0.13 a 281.84 miligramos/persona), como las dosis sub-óptimas del Compuesto A (de 8 nM a 62 n , o de 0.76 a 5.92 nanomolar/ kilogramo, o de 25.09 a 194.44 miligramos/persona), cambió la IC50 para el Compuesto A desde aproximadamente 80 nM hasta 16 nM. En concentraciones más altas del Compuesto A (de 125 nM a 1 µ?, o de 11.93 a 95.42 nanomolar/kilogramo, o de 392.03 a 3136.20 miligramos/persona); la combinación no exhibió beneficio alguno adicional, comparándose con los tratamientos con el agente individual del Compuesto A. El patrón sinérgico, aquí nuevamente, sugirió un modelo de dispersión de la dosis en el que una cantidad de traza (sub-nanomolar) de everolimus fue capaz de reducir de una manera significativa la cantidad de dosis efectiva comípleta del Compuesto A (desde >125 nM hasta 16 a 62 nM).

F. Efecto de la combinación en el modelo de células de cáncer humanas de mieloma múltiple RPMI 8226 Proliferación celular: El efecto del tratamiento con everolimus/ Compuesto A en un solo agente y concomitantes sobre la proliferación celular, se evaluó utilizando el ensayo CelITiter-Glo (CTG) descrito anteriormente. Las células se aplicaron a 50,000 células/pozo en placas de 96 pozos por triplicado, y se trataron con el compuesto durante 72 horas antes de la medición (Figura 12). Se aplicó la siguiente "matriz de dosis": Everolimus: 8 dosis, 3X, de 500 nM a 0.23 nM, Compuesto A: 8 dosis, 2X, de 1 µ? a 8 nM. El Compuesto A solo provocó una inhibición del crecimiento celular dependiente de la concentración, y en una alta concentración (IC50 de aproximadamente 125nM, Amax = 0.7); el everolimus como un solo agente no es muy eficaz (Amax = 0.15). El tratamiento concomitante con everolimus/Compuesto A ha potenciado dramáticamente el efecto inhibidor, comparándose con tanto el everolimus en todas las dosis (de 0.23 nM a 500 nM, o de 0.0019 a 4.2 nanomolar/kilogramo, o de 0.13 a 281.84 miligramos/persona), como las dosis sub-óptimas del Compuesto A (de 8 nM a 62 nM, o de 0.76 a 5.92 nanomolar/ kilogramo, o de 25.09 a 194.44 miligramos/persona), cambió la IC50 para el Compuesto A desde aproximadamente 125 nM hasta 16 nM. En concentraciones más altas del Compuesto A (de 125 nM a 1 µ?, o de 11.93 a 95.42 nanomolar/kilogramo, o de 392.03 a 3136.20 miligramos/sujeto), la combinación no exhibió beneficio alguno adicional, comparándose con los tratamientos con el agente individual del Compuesto A. El patrón sinérgico, aquí nuevamente, sugirió un modelo de dispersión de la dosis en el que una cantidad de traza (sub-nanomolar) de everolimus fue capaz de reducir de una manera significativa la cantidad de dosis efectiva completa del Compuesto A (desde >125 nM hasta 16 a 62 nM).

Compendio y Discusión: Se evaluó el efecto anti-proliferativo de las combinaciones de everolimus y el Compuesto A en seis líneas celulares a partir de diferentes linajes de tejido que llevaban diferentes alteraciones genéticas, y se encontró un fuerte sinergismo en todas las líneas celulares probadas con un patrón similar: el everolimus fue capaz de mejorar la potencia del Compuesto A por 5 a 100 veces dependiendo de los tipos de células, y el nivel absoluto de mejora depende de las diferencias entre las máximas eficacias del Compuesto ¡ A y del everolimus. Solamente se necesitan cantidades de traza de everolimus (de pM a nM) para hacer sinergismo con el Compuesto A en dosis baja (nM). La evaluación del efecto de la combinación sobre la reducción de p4EBP1, una lectura clave para la función de mTORCI identificó un área de traslape de sinergismo con el análisis anti-proliferativo, sugiriendo que se contribuye cuando menos parcialmente al beneficio de la combinación mediante la inhibición sinérgica de la senda de traducción dependiente de cap regulada por elF4E. Clínicamente, la combinación de una dosis bajá fija de everolimus con el Compuesto A en una dosis baja óptima para lograr la inhibición completa de mTORCI (súper-inhibidor de mTORCI) debería ser una opción muy atractiva. Comparándose con el uso del Compuesto A como un solo agente en una alta dosis para alcanzar la misma meta, esta combinación proporcionará el mismo grado de inhibición de mTORCI, mientras que se eliminará la cuestión de la biodisponibilidad potencial del fármaco del Compuesto A y la posible toxicidad fuera del objetivo, que podría estar asociada con la alta dosis del Compuesto A.

Ejemplo 2 El efecto del tratamiento con everolimus/Compuesto A en un solo agente y concomitantes sobre la proliferación celular, se evaluó en células humanas de cáncer de mama SK-BR3 utilizando el ensayo CelITiter-Glo (CTG) descrito anteriormente. Las células se aplicaron a 2,000 células/pozo en placas de 96 pozos por triplicado, y se trataron con el compuesto durante 72 horas antes de la medición. Se aplicó la siguiente matriz de dosis: Everolimus: 8 dosis, 2X, de 2,000 nM a 15 n ; Compuesto A: 8 dosis, 2X, de 2 µ? a 15 nM. El Compuesto A solo provocó una inhibición del crecimiento celular dependiente de la concentración, y en una alta concentración ( I C so de aproximadamente 31 nM, Amax = 0.67); el everolimus como un solo agente también es eficaz (Amax = 0.50, IC5o <15 nM). El tratamiento concomitante con everolimus/Compuesto A potenció el efecto inhibidor, comparándose con tanto el everolimus en todas las dosis (de 15 nM a 2 µ?), como las dosis sub-óptimas del Compuesto A (de 15 nM a 60 nM), y cambió la IC5o para el Compuesto ¡A desde aproximadamente 31 nM hasta tan baja como <15 nM. En concentraciones más altas del Compuesto A (de 120 nM a 2 µ?), la combinación no exhibió beneficio alguno adicional, comparándose con los tratamientos con el agente individual del Compuesto A. El patrón sinérgico, aquí nuevamente, sugiere un modelo de dispersión de la dosis en donde el everolimus en dosis baja es capaz de reducir de una manera significativa el intervalo de dosis efectiva completa del Compuesto A (desde 120 nM hasta <15 nM).

Ejemplo 3 El efecto del tratamiento con everolimus/Compuesto A en un solo agente y concomitantes sobre la proliferación celular, se evaluó en las células humanas de cáncer de mama MDA-MB-361, utilizando el ensayo CelITíter-Glo (CTG) descrito anteriormente. Las células se aplicaron a 2,000 células/pozo en placas de 96 pozos por triplicado, y se trataron con el compuesto durante 72 horas antes de la medición. Se aplicó la siguiente "matriz de dosis": Everolimus: 8 dosis, 2X, de 2,000 nM a 15 nM; Compuesto A: 8 dosis, 2X, de 2 µ? a 15 nM. El Compuesto A solo provocó una inhibición del crecimiento celular dependiente de la concentración, y en una alta concentración (IC50 de aproximadamente 60 nM, Amax = 0.81); el everolimus como un solo agente no es altamente eficaz (Amai< <0.50). El tratamiento concomitante con everolimus/Compuesto A potenció el efecto inhibidor, comparándose con tanto el everolimus en todas las dosis (de 15 nM a 2 µ?), como las dosis sub-óptimas del Compuesto A (de 15 nM a 60 nM), cambió la IC50 para el Compuesto ¡A desde aproximadamente 60 nM hasta tan baja como <15 nM. En concentraciones más altas del Compuesto A (de 120 nM a 2 µ?), la combinación no exhibió beneficio alguno adicional, comparándose con los tratamientos con el agente individual del Compuesto A. El patrón sinérgico, aquí nuevamente, sugirió un modelo de dispersión de la dosis en donde el everolimus de dosis baja fue capaz de reducir de una manera significativa el intervalo de dosis efectiva completa del Compuesto A (desde 120 nM hasta <15 nM).

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una combinación farmacéutica, la cual comprende: a) un compuesto de la fórmula (I): en donde: Ri es naftilo o fenilo, en donde el fenilo está sustituido por uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste en Halógeno; alquilo inferior insustituido o sustituido por halógeno, ciano, imidazolilo o triazolilo; cicloalquilo; amino sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente a partir del grupo que consiste en alquilo inferior, alquilo inferior-sulfonilo, alcoxilo inferior, y alcoxilo inferior-alquilo inferior-amino; piperazinilo insustituido o sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente a partir del grupo que consiste en alquilo inferior, y alquilo inferior-sulfonilo; 2-oxo-pirrolidinilo; alcoxilo inferior-alquilo ; inferior; imidazolilo; pirazolilo; y triazolilo; ' R2 es O o S; R3 es alquilo inferior; R4 es piridilo insustituido o sustituido por halógeno, ciano, alquilo inferior, alcoxilo inferior, o piperazinilo insustituido o sustituido por alquilo inferior; pirimidinilo insustituido o sustituido por alcoxilo inferior; quinolinilo insustituido o sustituido por halógeno; quinoxalinilo; o fenilo sustituido con alcoxilo; R5 es hidrógeno o halógeno; n es 0 ó 1 ; R6 es óxido; con la condición de que, si n = 1 , el radical portador del átomo de nitrógeno (N) R6 tiene una carga positiva; R7 es hidrógeno o amino; ' o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, para utilizarse en el tratamiento de una enfermedad proliferativa, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5; x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.

2. Una combinación farmacéutica de la reivindicación 1, en donde el compuesto de la fórmula (I) es el 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-M-2,3-d¡hidro-¡midazo-[4,5-c]-qu¡nol¡n-1 - i I ) -fe n i I] -propionitrilo (Compuesto A), y su sal de mono-tosilato.

3. Una combinación farmacéutica de la reivindicación 1, en donde el compuesto de la fórmula (I) es la 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1 - (4-piperaz¡n-1-il-3-trifluoro-metil-fenil)-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona (Compuesto B).

4. Una combinación farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde el compuesto aloestérico inhibidor de mTor se selecciona a partir de rapamicina RAD (sirolimus), y los derivados/análogos de la misma, tales como everolimus (o RAD001); CCI-779 y Deferolimus (AP-23573/MK-8669).

5. Una combinación farmacéutica de la reivindicación 4, en donde el compuesto aloestérico inhibidor de mTor es everolimus (RAD001), el cual se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 0.001 nM y aproximadamente 17.8 nM, o de entre aproximadamente 8.5 x 10 2 moles/kilogramo y aproximadamente 1.5 x 10"7 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto y aproximadamente 10 miligramos/sujeto por dosis diaria.

6. Una combinación farmacéutica de la reivindicación 1, en donde la enfermedad proliferativa es una enfermedad próliferativa dependiente de la cinasa mTor.

7. Una combinación farmacéutica de la reivindicación 1, en donde la enfermedad proliferativa es un tumor benigno o maligno, carcinoma del cerebro, riñon, hígado, glándula suprarrenal, vejiga, estómago, ovarios, colon, recto, páncreas, pulmón (por ejemplo, cáncer pulmonar no microcelular), endometrial, linfoma de células-B no de Hodgkin, vagina o tiroides, sarcoma, glioblastomas, mieloma múltiple o cáncer gastrointestinal gástrico, en especial carcinoma de colon, o adenoma colo-rectal, o un tumor de cuello y cabeza, una híper-proliferación epidérmica, soriasis, hiperplasia de próstata, neuroendicrina, una neoplasia, una neoplasia de carácter epitelial, linfomas, un carcinoma mamario, o una leucemia.

8. El uso de una combinación farmacéutica, la cual com prende: a) un compuesto de la fórmula (I): en donde: F?! es naftilo o fenilo, en donde el fenilo está sustituido por uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste en Halógeno; alquilo inferior insustituido o sustituido por halógeno, ciano, imidazolilo o triazolilo; cicloalquilo; amino sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente a partir del grupo que consiste en alquilo inferior, alquilo inferior-sulfonilo, alcoxilo inferior, y alcoxilo inferior-alquilo inferior-amino; piperazinilo insustituido o sustituido por uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente a partir del grupo que consiste en alquilo inferior, y alquilo inferior-sulfonilo; 2-oxo-pirrolidinilo; alcoxilo inferior-alquilo inferior; ¡midazolilo; pirazolilo; y triazolilo; R2 es O o S; R3 es alquilo inferior; R4 es piridilo insustituido o sustituido por halógeno, ciano, alquilo inferior, alcoxilo inferior, o piperazinilo insustituido o sustituido por alquilo inferior; pirimidinilo insustituido o sustituido por alcoxilo inferior; quinolinilo insustituido o sustituido por halógeno; quinoxalinilo; o fenilo sustituido con alcoxilo; R5 es hidrógeno o halógeno; n es 0 ó 1 ; R6 es óxido; ' con la condición de que, si n = 1, el radical portador del átomo de nitrógeno (N) R6 tiene una carga positiva; 1 R7 es hidrógeno o amino; o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato o un solvato del mismo, y b) cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, para la elaboración i de un medicamento para el tratamiento y la prevención de las enfermedades proliferativas dependientes de la cinasa del objetivo de mamífero mTor, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o áe entre aproximadamente 9.5 x 10"8 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.

9· El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el compuesto de la fórmula (I) es el 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 - il)-fenil]- : propionitrilo (Compuesto A), y su sal de mono-tosilato.

10. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el compuesto de la fórmula (I) es la 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1 -(4-piperazin-1 -il-3-trifluoro-metil-fenil)-1 ,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-2-ona. j

11. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 8, 9 ó 10, en donde el inhibidor de mTor se selecciona a, partir de rapamicina RAD (sirolimus), y los derivados/análogos de a misma, tales como everolimus (o RAD001); CCI-779 y Deferolimus (AP-23573/MK-8669).

12. El uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el compuesto aloestérico inhibidor de mTor es everolimus (RAD001), el cual se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 0.001 nM y aproximadamente 17.8'nM, o de entre aproximadamente 8.5 x 10"12 moles/kilogramo y aproximadamente 1.5 x 10"7 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto y aproximadamente 10 miligramos/sujeto por dosis diaria.

13. Una composición farmacéutica, la cual comprende la combinación farmacéutica de acuerdo con cualquiera! de las reivindicaciones 1, 2, 3, 4 ó 5. ;

14. Una combinación farmacéutica, la cual comprende el 2-metil-2-[4-(3-metil-2-oxo-8-quinolin-3-il-2,3-dihidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1 -il)-fenil]-propionitrilo (Compuesto A), y un inhibidor de mTor seleccionado a partir del grupo que consiste en rapamicina RAD (sirolimus), y los derivados/análogos de la misma, tales como everolimus (o RAD001); CCI-779 y Deferolimus (AP-23573/MK-8669), en donde los ingredientes activos están presentes en cada caso en forma libre o en la forma de una sal farmacéuticamente aceptable, y opcionalmente cuando menos un vehículo farmacéuticamente aceptable, para su uso simultáneo, separado, o en secuencia, para el tratamiento de un tumor benigno o maligno, carcinoma del cerebro, riñón, hígado, glándula suprarrenal, vejiga, estómago, ovarios, colon, recto, páncreas, pulmón (por ejemplo, cáncer pulmonar no microcelular), endometrial, linfoma de células-B no de Hodgkin, vagina o tiroides, sarcoma, glioblastomas, mieloma múltiple o cáncer gastrointestinal gástrico, en especial carcinoma de colon, ojadenoma colo-rectal, o un tumor de cuello y cabeza, una híper-proliferación i epidérmica, soriasis, hiperplasia de próstata, neuroendicrina, una neoplasia, una neoplasia de carácter epitelial, linfomas, un carcinoma mamario o una leucemia, en donde se administra el Compuesto A a un sujeto que lo necesite, en una cantidad^ de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10~8 y aproximadamente 9.5 x 10~6 moles/ kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.

15. Una combinación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 13, en donde el compuesto aloestérico inhibidor de mTor es everolimus (RAD001), el cual se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 0.001 nM y aproximadamente 17.8 nM, o de entre aproximadamente 8 ? 5 x 10"12 moles/kilogramo y aproximadamente 1.5 x 10"7 moles/kilográmo, o de entre aproximadamente 0.00056 miligramos/sujeto y aproximadamente 10 miligramos/sujeto por dosis diaria.

16. Un método para mejorar la eficacia del tratamiento de una enfermedad proliferativa dependiente de cinasa del objetivo de mamífero de rapamicina (mTOR), el cual comprende administrar una combinación que comprende un compuesto de la fórmula (I), o un tautómero del mismo, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un hidrato, o un solvato del mismo, y cuando menos un compuesto aloestérico inhibidor de mTor, a un sujeto que lo necesite, en donde el compuesto de la fórmula (I) se administra a un sujeto que lo necesite, en una cantidad de entre aproximadamente 1 nM y aproximadamente 100 nM, o de entre aproximadamente 9.5 x 10 y aproximadamente 9.5 x 10"6 moles/kilogramo, o de entre aproximadamente 3 y aproximadamente 315 miligramos/sujeto por dosis diaria.