MX2011005406A - Antagonistas de il-6 para prevenir o tratar la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a métodos terapéuticos que usan anticuerpos y fragmentos de los mismos que tienen especificidad de unión por IL-6 para prevenir o tratar la caquexia, la fiebre, la debilidad y/o la fatiga en un paciente que lo necesita. En modalidades preferidas, los anticuerpos anti-IL-6 serán humanizados y/o serán aglicosilados. Además, en modalidades preferidas estos pacientes comprenderán aquellos que exhiben (o que están en riesgo de desarrollar) un nivel elevado de proteína C reactiva en suero. En otra modalidad preferida, la supervivencia o calidad de vida del paciente preferentemente se mejorará.

Description

ANTAGONISTAS DE IL-6 PARA PREVENIR O TRATAR LA CAQUEXIA, i LA DEBILIDAD, LA FATIGA Y/O LA FIEBRE I REFERENCIA CRUZADA con SOLICITUDES RELACIONADAS La presente solicitud reivindica el beneficio de prioridad a la solicitud de patente provisional de EUA No. 61/117,811, 61/117,861, y 61/117,839 todas presentadas el! 25 de noviembre de 2008; y además es una continuación en parte^ de la solicitud de EUA 12/502,581 presentada el 14 de Julio de; 2009, No. de serie de EUA 12/399, 156 presentada el 6 de marzo de 2009, No. de serie de EUA 12/391,717 presentada el 124 de febrero de 2009 y No. de serie de EUA 12/366,567 presentada el 5 de febrero de 2009, la descripción de todas ellas se incorpora a la presente en su totalidad a modo de referencia.

El listado de secuencias en el archivo denominado "67858o707002.txt" con un tamaño de 332,004 bites que fue creado el 24 de noviembre de 2009 se incorpora a la presente en su totalidad como referencia. ¡ ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Campo de la invención La presente invención es una extensión de una invención i anterior de los solicitantes descrita en las solicitudes de patente referidas anteriormente que se relacionan a anticuerpos anti-IL-6 novedosos y a terapias novedosas y protocolos terapéuticos que usan anticuerpos anti-IL-6, preferentemente aquellos descritos en la presente. En particular,! esta invención se refiere a métodos para prevenir o tratar la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre en un paciente que lo necesita, que comprenden administrarle al paciente un anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6, por lo cual se mejora la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre del paciente.

En otra modalidad, esta invención se refiere a métodos para prevenir o tratar la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre en un paciente que lo necesita, que comprenden administrarle al paciente un anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6, por lo cual se mejora la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre del paciente y monitorear al paciente para evaluar la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo: anti-IL-6 se une específicamente al/a los mismo (s) epitopo(s) lineal (es) o conformacional (es) y/o compite por unirse al;/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) en un polipéptido de IL-6 intacta humana o un fragmento del i mismo como un anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3> Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, ¡ Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, ; Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, A¿>35, o Ab36 y versiones humanizadas, humanas, quiméricas o de cadena simple de los mismos que se unen específicamente a IL-6. i Asimismo, la presente invención se refiere a métodos novedosos para prevenir o tratar la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre en un paciente que lo necesita usando anticuerpos anti-IL-6, preferentemente, anticuerpos aglicosilados y/o humanizados que poseen una semivida de I eliminación de al menos alrededor de 25 días. ; Descripción de la técnica relacionada La pérdida de peso, la fatiga y la debilidad muscular son síntomas muy comunes en pacientes con formas avanzadas de cáncer y estos síntomas pueden empeorar a medida que el cáncer progresa. La fatiga, la pérdida de peso y la debilidad muscular pueden tener efectos negativos considerables en la recuperación de los pacientes con formas avanzadas de cáncer, por e'jemplo I alterando estilos de vida y relaciones y afectando la voluntad o capacidad de los pacientes para continuar tratamientos contra el cáncer. Los métodos conocidos para ocuparse de la fatiga, pérdida de peso y debilidad muscular incluyen rutinas regulares I de entrenamiento y ejercicios, métodos para conservar la energía del paciente y tratamientos que abordan la fatiga inducida por anemia y la debilidad muscular. Sin embargo, i sigue i habiendo una necesidad en la técnica de métodos y/o tratamientos para mejorar la fatiga, la pérdida de peso y i debilidad muscular en pacientes con cáncer. \ La interleucina-6 (en lo sucesivo "IL-6") (también conocida como interferon-p2; factor de diferenciación de linfocitos B; factor estimulador-2 de linfocitos B; factor estimulador de hepatocitos; factor de crecimiento del hibridoma; y factor de crecimiento de plasmacitoma) es una citocina multifuncional involucrada en numerosos procesos biológicos tales como la- regulación de la respuesta inflamatoria aguda, la modulación de respuestas inmunológicas especificas incluyendo la diferenciación de linfocitos B y T, metabolismo óseo, trombopoyesis , proliferación epidérmica, menstruo, diferenciación de células neuronales, neuroprotección, envejecimiento, cáncer, y la reacción inflamatoria que ocurre en la enfermedad de Alzheimer. Véase A. Papassotiropoulos, et al, Neurobiology of Aging, 22:8,63-871 (2001) . i La IL-6 es un miembro de una familia de citocinás que promueven las respuestas celulares a través de un complejo de receptores que consiste en al menos una subunidad de la glicoproteina transductora de señales gpl30 y el receptor de IL-6 ("IL-6R") (también conocido como gp80) . La IL-6R ¡ puede también estar presente en forma soluble ("sIL-6R") . La 11,-6 se une a la IL-6R, que luego dimeriza el receptor transductor de i señales gpl30. Véase Jones, SA, J. Immunology, 175:3463-3468 (2005). ¡ En los seres humanos, el gen que codifica la IL-6 se organiza en cinco exones y cuatro intrones y mapea al brazo corto del cromosoma 7 en 7p21. La traducción del ARN de IL-6 y el procesamiento postraduccional da como resultado la formación de una proteina de 21 a 28 kDa con 184 aminoácidos en su; forma madura. Véase A. Papassotiropoulos, et al, Neurobiology of Aging, 22:863-871 (2001).

Como se expresa con mayor detalle en la presente, se cree que la IL-6 tiene un papel importante en el desarrollo de una multitud de enfermedades y trastornos que incluyen pero no se limitan a fatiga, caquexia, enfermedades autoinmunes, enfermedades del sistema óseo, cáncer, enfermedades coronarias, obesidad, diabetes, asma, enfermedad de Alzheimer y esclerosis múltiple. Debido a la participación percibida de la IL-6 en una gran variedad de enfermedades y trastornos, persiste la necesidad en la técnica de composiciones y métodos útiles para prevenir o tratar enfermedades asociadas con la IL-6, asi como también métodos de monitoreo para identificar pacientes con enfermedades o trastornos asociados con la IL-6., Las composiciones anti-IL-6 particularmente preferidas son aquellas que poseen efectos secundarios mínimos o reducidos al mínimo al administrarse al paciente. Las composiciones o métodos que reducen o inhiben las enfermedades o trastornos asociados con la IL-6 son beneficiosos para el paciente que los necesitan.

La función de la IL-6 no está restringida a la respuesta inmunológica ya que actúa en hematopoyesis, trombopoyesis, formación de osteoclastos, provocación de la respuesta hepática de fase aguda que da como resultado el aumento de la prpteina C-reactiva (CRP) y la proteina amiloide A sérica (SAA) . Es sabido que es un factor de crecimiento para queratinocitos epidérmicos, células mesangiales renales, células de mieloma y plasmacitorna (Grossman et al., 1989 Prot Nati Acad Scii, 86, (16) 6367-6371; Horii et al., 1989, J Immunol, 143, 12, 3949-3955; Kawano et al., 1988, Nature 332, 6159, 83-85) . La IL-6 es producida por una gran variedad de tipos de células incluyendo monocitos/macrófagos , fibroblastos, queratinocitos epidérmicos, células endoteliales vasculares, células mesangiales renales, células gliales, condrocitos, linfocitos T y B y algunas células tumorales (Akira et al, 1990, FASEB J. , 4, 11, ' 2860-2867) . Excepto por las células tumorales que producen constitutivamente la IL-6, las células normales no expresan la IL-6 a menos que se estimulen de manera adecuada. I Se han observado niveles elevados de IL-6 en varios; tipos de cáncer, que incluyen cáncer de mama, leucemia, cáncer de ovario, cáncer de próstata, cáncer pancreático, linfoma, cáncer de pulmón, carcinoma de células renales, cáncer colorrectal, y i mieloma múltiple (por ej . , Chopra et al., 2004, MJAFI 60 : Í45-49; Songur et al., 2004, Tumori 90:196-200; Blay et al., ! 1992, Cáncer Research 52:3317-3322; Nikiteas et al., 2005, Wo¿ld J. Gasterenterol . 11:1639-1643; analizado en Heikkila et; al., 2008, Eur J Cáncer, 44:937-945). Tal como se describe anteriormente, es sabido o se sospecha que la IL-6 juega un papel importante en promover la proliferación o supervivencia de al menos algunos tipos de cáncer. Asimismo, algunos de! estos estudios han demostrado correlación entre los niveles de ¡IL-6 y el desenlace clínico del paciente. En su conjunto, ' estos resultados sugieren la posibilidad de que la inhibición : de la IL-6 puede ser beneficiosa desde el punto de vista terapéutico. De hecho, estudios clínicos (analizados en Trikha et al., 2003, Clinical Cáncer Research 9:4653-4665) han demostrado alguna mejoría en el desenlace clínico del paciente debido a la administración de varios anticuerpos anti-IL-6, particularmente en aquellos cánceres en los que la IL-6 juega un papel directo al promover la proliferación o supervivencia de células cancerígenas.

Tal como se describe anteriormente, la IL-6 estimula la respuesta hepática de fase aguda, dando como resultado la producción aumentada de CRP y niveles elevados de CRP en suero. Por esta razón, se ha informado que la proteína C-reactiva (CRP) comprende un marcador sustituto de la actividad de la IL-6. Por consiguiente, es posible detectar la actividad elevada de la IL-6 mediante la medición de la CRP en suero. Por el contrario, es posible detectar la supresión efectiva e la actividad de la IL-6, por ej . , mediante la administración; de un anticuerpo anti-IL-6 neutralizante, mediante la disminución resultante en los niveles de la CRP en suero.

Un reciente estudio clínico demostró que la administración de rosuvastatina a individuos aparentemente sanos que poseen la CRP elevada (mayor a 2.0 mg/1) redujo sus i niveles de CRP en un 37% y disminuyo en gran medida la incidencia de infarto de miocardio, apopjlejia, revascularización arterial, hospitalización por 'angina inestable o muerte por causas cardiovasculares. Ridker et al., N Engl J Med. 9 de noviembre de 2008 [Publicación electrónica antes de su impresión] .

Además de su papel directo en la patogénesis de algunos cánceres y otras enfermedades, los niveles elevados de manera crónica de IL-ß parecen afectar desfavorablemente al bienestar y calidad de vida de los pacientes. Por ejemplo, se ha informado que los niveles elevados de IL-6 están asociados con caquexia y fiebre, y disminución de la albúmina en suero.

Gauldie et al., 1987, PNAS 84:7251-7253; Heinric et 1990, 265:621-636; Zamir et al., 1993, Metabolism 42 : 204-208 ; j Zamir et al., 1992, Arch Surg, 127:170-174. Se ha informado que la inhibición de la IL-6 mediante un anticuerpo neutralizante mejora la fiebre y caquexia en pacientes con cáncer, aunque no se ha informado la mejora del nivel de albúmina en suero en estos pacientes (Emille et al., 1994, Blood, 84:2472-2479; Blay et al., 1992, Cáncer Research 52:3317-3322; Bataille et al., 1995, Blood, 86: 685-691).

Numerosos estudios han sugerido que la CRP es un valioso factor de pronóstico en pacientes con cáncer, con niveles elevados de CRP que predicen un pobre desenlace clínico. ¡Véase, por e j.f Hefler et al, Clin Cáncer Res, 2008 Feb 1; 14 (3:) : 710-4; Nagaoka et al, Liver Int, 2007 Oct; 27 (8) : 1091-7; Heikkilá et al, J Epidemiol Community Health, 2007 Sep; 61 (9) : 824-33, Review; Hará et al, Anticancer Res, 2007 Jul-Ago; 27 ( 4C) ¡ 3001-4 ; Polterauer et al, Gynecol Oncol, 2007 Oct ; 107 ( 1) : 114-7 Epub 2007 Jul 6; Tingstedt et al, Scand J Gastroenterol , 2007 Jun;42 (6) : 754-9; Suh et al, Support Care Cáncer, 2007 Jun; 15 (6) : 613-20, Epub 2007 Ene 18; Gerhardt et al, World J Gastroenterol, 2006 Sep 14 ; 12 (34) : 5495-500; cArdle et al, Urol Int, 2006;77 (2) : 127-9; Guillem et al, Dis Esophagus, 2005; 18 (3) : 146-50; Brown et al, Cáncer, 2005 Ene 15; 103 (2) : 377-82. La disminución de albúmina en suero (hipoalbuminemia) í también está asociada con el aumento de la morbilijdad y mortalidad en varias enfermedades graves, incluyendo cánceres (por ej., Vigano et al., Arch Intern Med, 2000 Mar 27; 160 (6) : 861-8; Hauser et al., Support Care Cáncer,! 2006 Oct; 14 (10) : 999-1011; Seve et al., Cáncer, 2006 j Dic 1;107 (11) ¡2698-705) . El vinculo aparente entre1 la hipoalbuminemia y el pobre desenlace clínico del paciente sugiere que restablecer los niveles de albúmina mediante la infusión directa de albúmina podría promover la supervivencia de los pacientes, no obstante, la infusión de albúmina !no ha mejorado la supervivencia de pacientes con cáncer avanzado (Demirkazik et al., Proc Am Soc Clin Oncol 21: 2002 ¡(abstr 2892)) u otros grupos de pacientes gravemente enfermos (analizado en Wilkes et al., Ann Intern Med, 2001 Ago 7;135(3) :149-64) .

El Glasgow Prognostic Score [Escala de Pronóstico de Glasgow] (GPS) es una escala de pronóstico basada ien la inflamación que combina niveles de albúmina (< 35 mg/L = 1 punto) y CRP (> 10 mg/L = 1 punto) (Forrest et al., Br J Cáncer, 2004 May 4; 90 (9) : 1704-6) . Desde su introducción en 2004, ya se ha demostrado que la escala de pronóstico de Glasgow posee valor pronóstico como un indicador de la mortalidad en numerosos cánceres, incluyendo ¡cáncer gastro-esofágico, cáncer de pulmón no microcitico, cáncer colorrectal, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer broncogénico y cáncer renal metastático (Forrest et al.¿ Br J Cáncer, 4 de mayo de 2004; 90 (9) : 1704-6; Sharma et al. ; Clin Colorectal Cáncer, septiembre de 2008; 7(5):331-7; Sharma et i al., Eur J Cáncer, enero de 2008; 44(2):251-6; McMillan et al., Nutr Cáncer, 2001; 41 (1-2) : 64-9; McMillan, Proc Nutr Soc, ¡agosto de 2008; 67 (3) : 257-62; Ramsey et al., Cáncer, 15 de enero de 2007;109(2) :205-12) . ; La publicación de la solicitud de patente de EUA No. 20080081041 (relacionada al tratamiento del cáncer usando un anticuerpo anti-IL-6) describe que debido a que la IL-6 está asociada a la actividad de la enfermedad y ya que la CRP es un marcador sustituto de la actividad de la IL-6, la supresión sostenida de la CRP mediante la neutralización de la IL-6 a través de su anticuerpo anti-IL-6 (CNTO 328, Zaki et al.,' Int J Cáncer, 2004 Sep 10; 111 (4) : 592-5) puede suponerse necesaria para alcanzar la actividad biológica. La misma solicitud de patente indica que la relación entre la IL-6 y CRP en pacientes con enfermedad de próstata benigna y maligna fue examinada previamente por McArdle (McArdle et al. 2004 Br J Cáncer 91(10) .1755-1757) . Según se dice, McArdle no encontró diferencias considerables entre las concentraciones de IL-6 y CRP en los pacientes con enfermedad benigna en comparación con los pacientes con cáncer de próstata, en los pacientes con cáncer hubo un aumento considerable tanto en la concentración de IL-6 como en la de CRP con grado creciente de tumor. El valor medio de CRP en suero para los 86 sujetos con cáncer de próstata fue de 1.8 mg/L. Basándose en esto, los inventores de la presente solicitud de patente postulan una dosis y cronograma propuestos donde se administran 6 mg/kg de un anticuerpo anti-IL-6 (CNTO 328) cada 2 semanas y afirman que esto probablemente alcance la supresión sostenida de la CRP en j sujetos con HRPC metastático. ; La señalización de la IL-6 está mediada por la familia Jak-Tyk de tirosina cinasas citoplasmáticas, incluyendo ¡ JAK1, JA 2 y JAK3 (analizado en Murray J Immunol. Io de marzo de 2007; 178 (5) : 2623-9) . Sivash et al. informan la abrogación de la señalización JAK mediada por IL-6 por la prostaglandina ciclopentenona 15d-PGJ2 en las células de carcinoma escamoso oral. British Journal of Cáncer (2004) 91, 1074-1080.1 Estos resultados sugieren que los inhibidores de JAK1, JAK2, o JAK3 podrían emplearse como antagonistas de IL-6.

Ulanova et al. informan que la inhibición de la proteína i tirosina cinasa no receptora Syk (usando ARNsi) disminuyó la producción de IL-6 por las células epiteliales. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol marzo de 2005; 288 (3) :L497-507. , Estos resultados sugieren que se podría emplear un inhibidor de Syk como un antagonista de IL-6.

Kedar et al. informan que el tratamiento con talidomida reduce considerablemente los niveles en suero de CRP e IL-6 hasta niveles normales o casi normales en una fracción importante de pacientes con carcinoma de células renales.! Int J Cáncer. 10 de junio de 2004; 110 (2) : 260-5. Estos resultados sugieren que la talidomida y posiblemente los derivados i de la misma, tales como lenalidomida, podrían ser antagonistas ¡útiles de IL-6. ; Asimismo, otra solicitud de patente publicada', EUA 20070292420 enseña un estudio de aumento de dosis de fase I usando un anticuerpo anti-IL-6 (cCLB-8) para tratar pacientes que no responden al tratamiento con mieloma múltiple en: etapa avanzada (N=12) e indica que este estudio demuestra que algunos pacientes presentaron una estabilización de su enfermedad. La solicitud también informa que luego de la interrupción del tratamiento se produjo una aceleración en el aumento de los niveles de proteina M, lo que sugiere un rebote de la enfermedad luego del cese del tratamiento. El anticuerpo anti-IL-6 cCLB-8 inhibió la IL-6 que circula libremente. j La solicitud también indica que este ensayo de anticuerpos no dio como resultado toxicidad (excepto trombocitopenia transitoria en dos pacientes previamente tratados de forma intensiva) o reacciones alérgicas y disminuyó la proteina C-reactiva (CRP) por debajo del nivel de detección en todos los pacientes. Su anticuerpo (anticuerpo cpLB-8) supuestamente poseía una semivida circulante de 17.8 días y no se observó ninguna respuesta inmunologica al anticuerpo humano anti-quimérico (HACA) (van Zaanen et al. 1998) . Ellos afirman que la administración de CNTO 328 no provocó cambios 'en la presión sanguínea, pulsaciones, temperatura, hemoglobina, funciones hepáticas y funciones renales. Excepto^ por trombocitopenia transitoria en dos pacientes previamente tratados de forma intensiva, no se observaron supuestamente toxicidad o reacciones alérgicas, y no se observó ninguna respuesta inmunologica al anticuerpo humano anti-quimérico (HACA) . Tres pacientes en su estudio supuestamente desarrollaron complicaciones relacionadas con la infección durante el tratamiento, no obstante, los inventores concluyeron i que no era probable una posible relación con el anticuerpo anti-IL-6 cCLB-8 debido a que las complicaciones infecciosas son supuestamente comunes en el mieloma múltiple en etapa1 final y son una causa principal de muerte. Basándose en sus I resultados concluyeron que este anticuerpo anti-IL-6 cCLB-8 era seguro en los pacientes con mieloma múltiple.

Como se expresó anteriormente, la IL-6 elevada se implicó en la patogénesis de caquexia, debilidad, fatiga y fiebre. Las enfermedades y los trastornos asociados con la fatiga incluyen pero no se limitan a, fatiga general, fatiga inducida por ejercicio, fatiga relacionada con cáncer, fatiga relacionada con enfermedad inflamatoria y síndrome de fatiga crónica. Véase, por ejemplo, Esper DH, et al, The cáncer cachexia syndrome: a review of metabolic and clinical manifestaitions, Nutr Clin Pract., agosto de 2005 20 (4):369-76; Vgontzas AN, et al, IL-6 and its circadian secretion in húmans, Neuroimmunomodulation, 2005/12 (3) ;131-40; Robson-Ansley, PJ, et al, Acute interleukin-6 administration impairs athletic performance in healthy, trained male runners, Can J¡ Appl Physiol., agosto de 2004 ; 29 (4 ): 411-8 ; Shephard RJ., Cytokine responses to physical activity, with particular refererice to IL-6: sources, actions, and clinical implications, Crit Rev Immunol., 2002;22 (3) :165-82 ; Arnold, MC, et al, Usihg an interleukin-6 challenge to evalúate neuropsychológical performance in chronic fatigue syndrome, Psychol Med., agosto de 2002; 32 ( 6) : 1075-89; Kurzrock R., The role of cytokines in cancer-related fatigue, Cáncer, 15 de septiembre de 2001/92 (6 Suppl) : 1684-8; Nishimoto N, et al, Improvement in Castleman's disease by humanized anti-interleukin-6 receptor antibody therapy, Blood, Io de enero de 2000; 95 (1):56-61; Vgontzas AN, et al, Circadian interleukin-6 secretion and quantity and depth of sleep, J Clin Endocrinol Metab., agosto de 1999; 84(8)::2603-7 y Spath-Schwalbe E, et al, Acute effects of recombinant human interleukin 6 on endocrine and central nervous sleep furictions in healthy men, J Clin Endocrinol Metab., mayo de , 1998; 83 ( 5 ): 1573-9, cuyas descripciones se incorporan en su totalidad a la presente a modo de referencia. ¡ Las enfermedades y los trastornos asociados con la caquexia incluyen, pero no se limitan a, caquexia cancerosa, caquexia cardiaca, caquexia respiratoria, caquexia renal y caquexia relacionada con la edad. Véase, por ejemplo, Barton, BE., Interleukin-6 and new strategies for the treatmént of I cáncer, hyperproliferative diseases and paraneoplastic syndromes, Expert Opin Ther Targets, agosto de 2005; 9(4):737-52; Zaki MH, et al, CNTO 328, a monoclonal antibody to'IL-6, inhibits human tumor-induced cachexia in nude mice, •Int J Cáncer, 10 de septiembre de 2004; 111 (4 ): 592-5; Trikha M, et al, Targeted anti-interleukin-6 monoclonal antibody therapy for cáncer: a review of the rationale and clinical evidence Clin Cáncer Res., 15 de octubre de 2003; 9 (13) ;4653-65; Lelli G, et al, Treatment of the cáncer anorexia-cachexia syndróme: a i critical reappraisal, J Chemother . , junio de 2003; 15 (3) :220-5; Argües JM, et al, Cytokines in the pathogenesis of 'cáncer cachexia, Curr Opin Clin Nutr Metab Care, julio de: 2003; I I 6(4) : 401-6; Barton BE., IL-6-like cytokines and cáncer cachexia: consequences of chronic inflammation, Immuno Res., 2001/23 (1) .-41-58; Yamashita JI, et al, Medroxyprogesterone acétate and cáncer cachexia: interleukin-6 involvement, Breast Cáncer, 2000; 7 (2) : 130-5 ; Yeh SS, et al, Geriatric cachexia: the role of cytokines, Am J Clin Nutr., agosto de 1999; 70(2!) : 183-97; Strassmann G, et al, Inhibition of experimental cáncer cachexia by anti-cytokine and anti-cytokine-receptor therapy, Cytokines Mol Ther., junio de 1995; 1 (2) : 107-13; Fujita J, et al, Anti-interleukin-6 receptor antibody prevents muscle atrophy in colon-26 adenocarcinoma-bearing mice with modulation of lysosomal and ATP-ubiquitin-dependent proteolytic pathways, Int J Cáncer, 27 de noviembre 1996; 68 (5) : 637-43; Tsujinaka T, et al, Interleukin 6 receptor antibody inhibits muscle atrophy and modulates proteolytic systems in interleukin 6 transgenic ! mice, J Clin Invest., Io de enero de 1996; 97(l):244-9; Émilie D, et al, Administration of an anti-interleukin-6 monoclonal antibody to patients with acquired immunodeficiency syndróme and lymphoma: effect on lymphoma growth and on B clinical Symptoms, Blood, 15 de octubre de 1994; 84 (8) :2472-9 and i Strassmann G, et al, Evidence for the involvement of interleukin 6 in experimental cáncer cachexia, J Clin Invest., mayo de 1992; 89 (5) : 1681-4; cuyas descripciones se incorporan en su totalidad a la presente como referencia. ¡ Otra enfermedad relacionada con la caquexia es el síndrome del declive, también conocido como retraso del j crecimiento, donde un niño presenta una tasa de aumento dé peso menor a la esperada. El síndrome del declive se define típicamente como un peso inferior al tercer percentil p una disminución en el rango de percentil de 2 parámetros de crecimiento principales en un período acotado. El síndrome del declive se produce como resultado de causas psicosociales y médicas heterogéneas y, algunas veces, la causa elude el diagnóstico. Un estudio reciente (con un total de 34 pacientes) indicó un crecimiento considerable desde el punto de vista estadístico en los niveles de IL-6 en pacientes diagnosticados con síndrome del declive. Shaoul et al. J Pediatr Gastroenterol Nutr., octubre de 2003 ; 37 ( ) : 487-91. j I BREVE COMPENDIO DE LA INVENCIÓN La presente invención es una extensión de invenciones anteriores de los solicitantes dirigida a anticuerpos específicos, anticuerpos humanizados o quiméricos o de c'adena simple y fragmentos de los mismos que poseen especificidad de I unión por IL-6, en particular anticuerpos que pbseen i t t especificidad epitópica especifica y/o propiedades funcionales y terapias novedosas que usan estos y otros anticuerpos; anti-IL-6. Una modalidad de la invención comprende anticuerpos humanizados específicos y fragmentos de los mismos capaces de unirse a IL-6 y/o el complejo IL-6/IL-6R. Estos anticuerpos pueden unir IL-6 solubles o IL-6 expresadas en la superficie celular. Asimismo, estos anticuerpos pueden inhibir la formación o los efectos biológicos de una o más IL-6, complejos IL-6/IL-6R, complejos IL-6/IL-6R/gpl30 y/o multímeros de IL-6/IL-6R/gpl30. La presente invención se relaciona a terapias novedosas y protocolos terapéuticos que usan anticuerpos anti-IL-6, preferentemente aquellos descritos en la presente. En particular, la presente invención se refiere a métodos para prevenir o tratar la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la i fiebre en un paciente que lo necesita, por ej . , un paciente que muestra niveles elevados de CRP, que comprenden administrarle al paciente un anticuerpo o fragmento de anticuerpo antii-IL-6, por lo cual se previene o mejora la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre del paciente, o se restablecen a un estado normal . 1 En una modalidad preferida esto se efectúa mediante la administración de los anticuerpos descritos en la presenté, que comprenden las secuencias de los polipéptidos de VH, VL 'y CDR i descritas en la presente, o versiones humanizadas o quiméricas o de cadena simple de las mismas que contienen una o más de las CDR de las secuencias de anticuerpo anti-IL-6 ejemplificadas y i los polinucleótidos que las codifican. Preferentemente estos anticuerpos serán aglicosilados . En modalidades más específicas de la invención estos anticuerpos bloquearán la activación de i gpl30 y/o poseerán afinidades de unión (Kds) menores; a 50 picomolar y/o valores K0ff menores o iguales a 10"4 S"1. j En otra modalidad de la invención estos anticuerpos y versiones humanizadas provendrán de células inmunes de conejo (linfocitos B) y pueden seleccionarse basándose en su homología (identidad de secuencia) con las secuencias de línea ge'rminal humana. Estos anticuerpos pueden requerir modificaciones mínimas de secuencias, o pueden no requerir modificaciones, por lo cual facilitan la retención de propiedades funcionales; luego de la humanización. En ejemplos de modalidades estos anticuerpos humanizados comprenderán regiones flanquéantes humanas que son altamente homologas (poseen altos niveles de identidad de secuencia) a aquellas de un anticuerpo progenitor (por ej . conejo) tal como se describe más adelante. ¡ En otra modalidad de la invención los anticuerpos en cuestión pueden seleccionarse según su actividad en ensayos funcionales tales como ensayos de proliferación de j T1165 impulsados por IL-6, ensayos de producción de haptoglobina de células HepG2 simulada por IL-6, y similares. Una modalidad ) adicional de la invención está dirigida a fragmentos de anticuerpos anti-IL-6 que comprenden polipéptidos de VH,¡ VL y CDR, por ej . , que provienen de células inmunes de conejo! y los polinucleótidos que los codifican, asi como también al uso de estos fragmentos de anticuerpo y los polinucleótidos que los codifican en la creación de anticuerpos y composiciones de polipéptidos novedosas capaces de reconocer complejos Ili-6 y/o I IL-6/IL-6R o complejos IL-6/IL-6R/gpl30 y/o multimeros ele los mismos . ! La invención también contempla la administración de conjugados de anticuerpos anti-IL-6 y versiones humanizadas, quiméricas o de cadena simple de los mismos y otros fragmentos de unión de los mismos conjugados a uno o más restos funcionales o detectables. La invención también contempla métodos para realizar dichos anticuerpos anti-IL-6 humanizados o anticuerpos de complejo anti-IL-6/IL-6R y fragmentos -de unión de los mismos. En una modalidad, los fragmentos de | unión incluyen pero no se limitan a fragmentos Fab, Fab', F(ab ) 2, Fv y scFv. : Las modalidades de la invención se relacionan al uso de anticuerpos anti-IL-6 para el diagnóstico, evaluación y tratamiento de enfermedades y trastornos asociados con la IL-6 o la expresión aberrante de la misma. La invención también contempla el uso de fragmentos de anticuerpos anti-IL-6 para el diagnóstico, evaluación y tratamiento de enfermedades y I trastornos asociados con la IL-6 o la expresión aberrante! de la misma. Los usos preferidos de los anticuerpos en cuejstión, ! especialmente anticuerpos humanizados, quiméricos y de cadena simple son el tratamiento y la prevención de fatiga asociada con cáncer y/o caquexia y artritis reumatoide. j Otras modalidades de la invención se relacionan a la producción de anticuerpos anti-IL-6 en células hospedadoras recombinantes, preferentemente levadura diploide tal! como Pichia diploide y otras cepas de levadura.

Otra modalidad de la invención se relaciona a métodos para mejorar la capacidad de supervivencia y la calidad db vida de un paciente al que se le diagnosticó cáncer, que comprenden administrar al paciente un anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 , por lo cual el nivel de proteina C-reactiva (:"CRP") en suero del paciente se estabiliza y preferentemente se reduce, y monitorear al paciente para evaluar la reducción en el nivel de CRP en suero del paciente, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede unirse específicamente al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) y/o competir para unirse al/a los mismo (s) epítppo(s) lineal (es) o conformacional (es) en un polipéptido de' IL-6 intacta humana o fragmento del mismo como un anticuerpo! anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8¡, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, ¡Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, I Ab29, Ab30 , Ab31 , Ab32 , Ab33 , Ab34 , Ab35 , o Ab36 y anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple y fragmentos de los mismos (que contienen una o más CDR de los anticuerpos mencionados anteriormente) que se unen específicamente a! IL-6, que preferentemente son aglicosilados . j Otra modalidad de la invención se relaciona a métodos para mejorar la fuerza muscular de un paciente al que ¡ se le diagnosticó cáncer, que comprenden administrar al paciente un anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6, por lo cual mejora la fuerza muscular del paciente, y monitorear al paciente para evaluar la fuerza muscular, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede unirse específicamente al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) y/o competir para unirse al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) en un polipéptido de IL-6 intacta humana o fragmento del mismo como un anticuerpo; anti- IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8:, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, ÍAbl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, , Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 y anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple y fragmentos de los mismos (que contienen una o más CDR de los anticuerpos mencionados anteriormente) que se unen específicamente a la IL- 6, que preferentemente son aglicosilados. En tales métodos preferentemente la fuerza muscular de los pacientes mejora al i menos alrededor de 15% dentro de aproximadamente las 4 semanas a partir de la administración del anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 , tal como lo mide la prueba Hand Grip Strength [de fuerza de prensión] y más preferentemente la fuerza muscular de los pacientes mejora al menos alrededor de 20% dentro de aproximadamente las 4 semanas a partir ; de la administración del anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6, tal como lo mide la prueba de fuerza de prensión. ' Otra modalidad de la invención se relaciona a métodos para aumentar la albúmina en suero en un paciente que lo necesita, que comprenden administrar al paciente un anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6, por lo cual aumenta la albúmina en suero del paciente, y monitorear al paciente para evaluar el nivel de albúmina en suero, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede unirse específicamente al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) y/o competir para unirse al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) en un polipéptido dé IL-6 intacta humana o fragmento del mismo como un anticuerpo; anti- IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8,| Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28,; Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 y anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple y fragmentos de los mismos (que contienen una o más CDR de los anticuerpos mencionados anteriormente) que se unen específicamente a1 IL-6, que preferentemente son aglicosilados . Preferentemente, ; estos métodos se llevan a cabo en condiciones por las cuales !mejora la capacidad de supervivencia del paciente y/o en condiciones donde aumenta el nivel de albúmina en suero alrededor de j 5 g/L, dentro de aproximadamente 6 semanas a partir de la administración del anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6. Estos pacientes incluirán, sin limitación a ¡ellos, aquellos a los que se les diagnosticó artritis reumátoide, cáncer, cáncer avanzado, enfermedad hepática, enfermedad renal, enfermedad inflamatoria intestinal, enfermedad celiaca, i traumatismo, quemaduras, otras enfermedades asociadas con la disminución de albúmina en suero o cualquier combinación ; de las mismas .

Una modalidad de la invención se refiere a métodos para prevenir o tratar la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre en un paciente diagnosticado con un trastorno asociado con IL-6, que comprenden administrarle al pacieríte un i anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6, por lo cual se previene o mejora la caquexia, la debilidad, la fatiga <y/o la fiebre del paciente, y monitorear al paciente para evaluar la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede unirse específicamente al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) y/o competir para unirse al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) en un polipéptido de IL-6 intacta humana o un fragmento . del mismo como un anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, j Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27,¡ Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 y anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple y fragmentos ¡de los mismos (que contienen una o más CDR de los anticuerpos mencionados anteriormente) que se unen específicamente a¡ IL-6, que preferiblemente son aglicosilados . Tal como se discute más adelante, en un ejemplo de modalidad preferido el anticuerpo anti-IL-6 comprenderá un anticuerpo humanizado que contiene las CDR de Abl y más preferentemente comprenderá la cadena pesada y ligera variable en la SEQ ID NO: 657 y SEQ ID NO: 709 respectivamente y las regiones constantes en las SEQ ID NO: 588 y 586 respectivamente o variantes de las mismas donde uno o más aminoácidos se modifican mediante la sustitución o eliminación sin alterar sustancialmente la afinidad de unión a IL-6. j En una modalidad preferida el anticuerpo anti-IL-6 humanizado comprenderá las secuencias de cadena pesada variable y de cadena ligera variable respectivamente contenidas ien la SEQ ID NO: 657 y SEQ ID NO: 709, y preferentemente comprendiendo adicionalmente las regiones constantes de cadena pesada y cadena ligera respectivamente contenidas en las SEQ ID NO: 588 y SEQ ID NO: 586, y variantes de las mismas que comprenden luna o más sustituciones o eliminaciones de aminoácidos que no afectan ¡ sustancialmente la unión a IL-6 y/o la función eféctora deseada. La presente modalidad también contempla polinucleótidos que comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno o más ácidos nucleicos que codifican las secuencias de cadena pesada variable (SEQ ID NO: 700) y de cadena ligera variable (SEQ ID NO: 723) y las secuencias de región constante de cadena pesada (SEQ ID NO: 589) y de ¡región constante de cadena ligera (SEQ ID NO:587) . Esta modalidad i además contempla ácidos nucleicos que codifican variantes que comprenden una o más sustituciones o eliminaciones de aminoácidos a las secuencias de cadena pesada y 'ligera variables respectivamente contenidas en la SEQ ID NO:657¡ y SEQ ID NO: 709 y las regiones constantes de cadena pesada y cadena i ligera respectivamente contenidas en la SEQ ID NO: 588 y !SEQ ID NO: 586, que no afectan sustancialmente la unión a IL-6 y/o función efectora deseada.

En una modalidad de la invención, el anticuerpo antii-IL-6 puede unirse al/a los mismo (s) epitopo(s) lineal (es) o tj conformacional (es) y/o competir por unirse al/a los mismo (s) epitopo(s) lineal (es) o conformacional (es) en un polipéptido de IL-6 intacta humana o fragmento del mismo como Abl. ·' En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede unirse específicamente al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional Oes) en un polipéptido de IL-6 intacta humana o fragmento del! mismo como un anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3¡, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4 ¡ Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 y anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple y fragmentos de los mismos (que contienen una o más CDR de los anticuerpos antes mencionados) que se unen específicamente a la i IL-6, que preferentemente son aglicosilados .

En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede unirse específicamente al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) en un polipéptido de IL-6 intacta humana o un fragmento del' mismo como Abl o un anticuerpo humanizado o quimérico que comprende todas o la mayoría de las mismas CDR que Abl que sé unen específicamente a IL-6. 1 En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede unirse específicamente a los mismos epítopos lineales o conformacionales en un polipéptido de IL-6 intacta o fragmento de anticuerpo del: mismo que está(n) específicamente unidos por Abl y donde dichos epítopo(s), cuando se establecen por mapeo epitópico usando fragmentos de péptidos lineales superpuestos que abarcan todo el largo del polipéptido de IL-6 humana nativa, incluyen juno o más residuos comprendidos en fragmentos de IL-6 que se seleccionan de aquellos que respectivamente comprenden residuos de aminoácidos 37-51, residuos de aminoácidos 70-84, residuos de aminoácidos 169-183, residuos de aminoácidos 31-45 y/o residuos de aminoácidos 58-72. j En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede comprender al menos 2 regiones determinantes de complementariedad (CDR) eri cada región ligera variable y pesada variable que son idénticas a aquellas contenidas en un anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll,' Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 o una combinación de CDR de¦ uno o varios de dichos anticuerpos.

En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede comprender al menos 2 regiones determinantes de complementariedad (CDR) en cada región ligera variable y pesada variable que son idénticas a aquellas contenidas en Abl. j En una modalidad de la invención, todas las CDR i en el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 pueden ser idénticas a las CDR contenidas en un anticuerpo anti-IL÷-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, ; AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, ! Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, ! Ab30, I Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 y anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple y fragmentos de los mismos (que contienen una o más CDR de los anticuerpos antes mencionados) I que se unen específicamente a la IL-6, que preferentemente son aglicosilados .

Otra modalidad de la invención se relaciona con Abl, ! incluyendo formas humanizadas y de conejo de la misma, así como también cadenas pesadas, cadenas ligeras, fragmentos, variantes y CDR de las mismas. En los ensayos clínicos humanos i presentados en los Ejemplos, se administró una forma humanizada í de Abl. I En una modalidad de la invención, todas las CDRÍ en el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 pueden ser idénticas a las CDR contenidas en Abl. i En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede ser aglicosilado .j En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede contener una región Fe que ha sido modificada para alterar la función eféctora, semivida, proteólisis y/o glicosilación. Preferentemente la i región Fe se modifica para eliminar la glicosilación. ¡ En una modalidad de la invención, el anticuérpo o I fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede ser un anticuerpo humano, humanizado, de cadena simple o quimérico. j En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede ser un anticuerpo humanizado que proviene de un anticuerpo anti-IL-6 de ¡conejo (progenitor) .

En una modalidad de la invención, las regiones flanqueantes (FR) en la región ligera variable y regiones pesadas variables de dicho anticuerpo anti-IL-6 o fragmento de anticuerpo respectivamente pueden ser FR humanas sin modificar o que han sido modificadas mediante la sustitución de como i máximo 2 o 3 residuos de FR humana en la región de ¡cadena ligera o pesada variable con los correspondientes residuos de FR del anticuerpo progenitor de conejo, y las FR humanas pueden provenir de secuencias de anticuerpo de cadena pesada y 'ligera variable que han sido seleccionadas de una biblioteca de secuencias de anticuerpo germinales humanas basándose i en su alto nivel de homología con las correspondientes regiones de cadena pesada o' ligera variables de conejo relativas a otras secuencias de anticuerpo germinales humanas contenidas en la biblioteca. Tal como se describe en detalle más adelante, en una modalidad preferida el anticuerpo comprenderá FR humanas que se seleccionan basándose en su alto nivel de homblogia (grado de identidad de secuencia) a aquellos del anticuerpo i principal que es humanizado. 1 En una modalidad de la invención, el anticuerpo o i fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede administrarse al i paciente con una frecuencia de como máximo una vez por período de aproximadamente cuatro semanas, aproximadamente ; ocho semanas, aproximadamente doce semanas, aproximadamente i dieciséis semanas, aproximadamente veinte semanas o aproximadamente veinticuatro semanas.

En una modalidad de la invención, se puede mantener la mejora en la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre del paciente durante un periodo completo entré dos administraciones consecutivas del anticuerpo anti-IL-6.

En una modalidad de la invención, al paciente se le pudo haber diagnosticado cáncer seleccionado de acantoma, carcinoma de células acinicas, neuroma acústico, melanoma lentiginosó acral, acrospiroma, leucemia eosinofilica aguda, leucemia linfoblástica aguda, leucemia megacarioblástica aguda, léucemia monocitica aguda, leucemia mieloblástica aguda con maduración, leucemia mieloide aguda de células dendriticas, leucemia mieloide aguda, leucemia promielocitica aguda, adamant'inoma, adenocarcinoma, carcinoma quistico adenoide, adenoma, tumor odontogénico adenomatoide, carcinoma adrenocortical, leucemia de células T del adulto, leucemia agresiva de células NK, I I cánceres relacionados con SIDA, linforna relacionado con: SIDA, I sarcoma alveolar de partes blandas, fibroma ameloblástico, cáncer anal, linforna anaplásico de células grandes, cáncer anaplásico de tiroides, linforna angioinmunoblástic'o de linfocitos T, angiomiolipoma, angiosarcoma, cáncer de apéndice, astrocitoma, tumor rabdoide teratoide atipico, carcinoma de células básales, carcinoma de tipo basal, leucemia de células B, linfoma de células B, carcinoma de los conductos de Beílini, I cáncer del tracto biliar, cáncer de vejiga, blastoma, cáncer de hueso, tumor de hueso, glioma de tronco cerebral, ¡ tumor cerebral, cáncer de mama, tumor de Brenner, tumor bronquial, carcinoma bronquioloalveolar, tumor de Brown, linfoma de Burkitt, cáncer de sitio primario desconocido, ¡ tumor carcinoide, carcinoma, carcinoma in situ, carcinoma de¡ pene, carcinoma de sitio primario desconocido, carcinosarcoma, enfermedad de Castleman, tumor embrionario del sistema nervioso central, astrocitoma cerebeloso, astrocitoma cerebral, 'cáncer cervical, colangiocarcinoma, condroma, condrosarcoma, co!rdoma, coriocarcinoma, papiloma del plexo coroideo, leucemia linfocitica crónica, leucemia monocitica crónica, leucemia mielógena crónica, trastorno mieloproliferativo crónico, leucemia neutrofilica crónica, tumor de células claras, cáncer de colon, cáncer colorrectal, craniofaringioma, linfoma cutáneo de células T, enfermedad de Degos, dermatofibrosarcoma protuberans, quiste dermoide, tumor desmoplásico de células redondas pequeñas, linfoma difuso de células B grandes, j tumor neuroepitelial disembrioplásico, carcinoma embrionario, ¡ tumor de seno endodérmico, cáncer endometrial, cáncer uterino endometrial, tumor endometrioide, linfoma de células T asociado a enteropatia, ependimoblastoma, ependimoma, sarcoma epitelioide, eritroleucemia, cáncer de esófago, estesioneuroblastoma, tumor de la familia de Ewing, sarcoma de la familia de Ewing, sarcoma de Ewing, tumor extracrane'al de I células germinales, tumor extragonadal de células germinales, cáncer de ducto biliar extrahepático, enfermedad de j Paget extramamaria, cáncer de tubo falopiano, Fetus in fetu, fibroma, fibrosarcoma, linfoma folicular, cáncer folicular de tiroides, cáncer de vesícula biliar, cáncer de vesícula biliar, ganglioglioma, ganglioneuroma, cáncer gástrico, linfoma gástrico, cáncer gastrointestinal, tumor carcinoide i gastrointestinal, tumor carcinoide, tumor del estroma gastrointestinal, tumor del estroma gastrointestinal, tumor de células germinales, germinoma, coriocarcinoma gestacional, tumor trofoblástico gestacional, tumor óseo de células gigantes, glioblastoma multiforme, glioma, gliomatosis ce!rebri, tumor glómico, glucagonoma, gonadoblastoma, tumor de células granulosas, leucemia de células vellosas, leucemia de células vellosas, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de corazón, hemangioblastoma, hemangiopericlitoma, hemangiosarcoma, malignidad hematológica, carcinoma i hepatocelular, linfoma hepatoesplénico de células T, síndrome de cáncer de mama y ovario hereditario, linfoma Hodgkin, linfoma de Hodgkin, cáncer hipofaríngeo, glioma hipotalámico, cáncer de mama inflamatorio, melanoma intraocular, carcinoma de células de los islotes, tumor de células de los islotes, leucemia juvenil mielomonocítica, sarcoma Kaposi, sarcoma de Kaposi, cáncer de riñon, tumor de Klatskin, tumor de Krukenberg, cáncer de laringe, cáncer de laringe, meÍLanoma léntigo maligno, leucemia, leucemia, cáncer del labio y la cavidad oral, liposarcoma, cáncer de pulmón, lúteoma, linfangioma, linfangiosarcoma, linfoepitelioma, leucemia linfoide, linfoma, macroglobulinemia, histiocitoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno óseo, glioma maligno, mesotelioma maligno, I tumor maligno de vaina nerviosa periférica, tumor rabdoide maligno, tumor tritón maligno, linfoma MALT, linfoma de células del manto, leucemia de mastocitos, tumor mediastinal de células germinales, tumor mediastinal, cáncer medular de titoides, meduloblastoma, meduloblastoma, meduloepitelioma, melanoma, melanoma, meningioma, carcinoma de células de erkel, mesotelioma, mesotelioma, cáncer escamoso metastásico del cuello con tumor primario oculto, carcinoma urótelial metastásico, tumor ülleriano mixto, leucemia monocítica, cáncer de boca, tumor mucinoso, síndrome de neoplasia endocrina múltiple, mieloma múltiple, mieloma múltiple, micosis fungoides, micosis fungoides, enfermedad mielodispíásica, síndromes mielodisplásicos, leucemia mieloide, sarcoma mieloide, enfermedad mieloproliferativa, mixoma, cáncer \ de la cavidad nasal, cáncer nasofaríngeo, carcinoma nasofaríngeo, neoplasma, neurinoma, neuroblastoma, neuroblástoma, neurofibroma, neuroma, melanoma nodular, linfoma no Hcjdgkin, I linfoma no Hodgkin, cáncer de piel no melanoma, cáncer de pulmón no microcítico, oncología ocular, oligoastrocitoma, oligodendroglioma, oncocitoma, meningioma de la vaina del nervio óptico, cáncer oral, cáncer oral, cáncer orofaríngeo, osteosarcoma, osteosarcoma, cáncer de ovario, cáncer de ovario, cáncer epitelial de ovario, tumor de células germinales del ovario, tumor de ovario de bajo potencial maligno, enfermedad de Paget de la mama,, tumor de Pancoast, cáncer pancreático, cáncer pancreático, cáncer papilar de tiroides, papilomátosis, paraganglioma, cáncer de seno paranasal, cáncet de paratiroides, cáncer de pene, tumor perivascular de células epitelioides, cáncer faríngeo, feocromocitoma, tumor paré'nquima pineal de diferenciación intermedia, pineoblastoma, pituicitoma, adenoma pituitario, tumor pituitario, neoplasma de células plasmáticas, blastoma pleuropulmonar, poliembrioma, linfoma precursor linfoblástico de células T, linfoma primario del sistema nervioso central, linfoma de efusión primaria, cáncer hepatocelular primario, cáncer hepático primario, cáncer peritoneal primario, tumor neuroectodermal primitivo, cáncer de próstata, pseudomixoma peritoneal, cáncer rectal, carcinoma de células renales, carcinoma del tracto respiratorio relacionado con el gen NUT en el croomosoma 15, retinoblastoma, rabdojnioma, rabdomiosarcoma, transformación de Richter, teratoma sacrococcígeo, cáncer de la glándula salival, sarcoma, Schwannomatosis , carcinoma de glándulas sebáceas, neoplasma secundario, seminoma, tumor seroso, tumor de célulás de Sertoli-Leydig, tumor del estroma de los cordones sexuales, síndrome de Sézary, carcinoma de células en anillo de sello, cáncer de piel, tumor de células pequeñas, redondas y azules, carcinoma de células pequeñas, cáncer de pulmón microcítico, linfoma de células pequeñas, cáncer del intestino delgado, sarcoma de tejido blando, somatoestatinoma, verruga del deshollinador, tumor de la médula espinal, tumor espinal, linfoma de la zona marginal esplénica, carcinoma de células escamosas, cáncer de estómago, melanoma superficial diseminante, tumor neuroectodermal primitivo supratentorial, tumor epitelial superficial de ovario, sarcoma sinovial, leucemia linfoblástica aguda de células T, leucemia linfocítica granular grande de células T, leucemia de células T, linfoma de células T, leucemia prolinfocítica de células T, teratoma, cáncer linfático terminal, cáncer testicular, tecoma, cáncer de garganta, carcinoma tímico, timoma, cáncer de tiroides, cáncer de células de transición de la pelvis renal y el uréter, carcinoma de células de transición, cáncer uracal, cáncer i uretral, neoplasma urogenital, sarcoma uterino, melanoma uveal, cáncer vaginal, síndrome de Verner Morrison, carcinoma verrugoso, glioma de la vía visual, cáncer vülvar, macroglobulinemia de Waldenstróm, tumor de arthin, tumor de Wilms, o cualquier combinación de los mismos. · En una modalidad de la invención, al paciente' pudo habérsele diagnosticado cáncer que se selecciona de cáncer colorrectal, cáncer de pulmón no microcítico, colangiocarcinoma, mesotelioma, enfermedad de Castileman, carcinoma de células renales o cualquier combinación de los mismos.

En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede comprender una secuencia de polipéptido de VH que comprende: SEQ ID NO: 3, 18, 19, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 117, 118, 123, 139, 155, 171, 187, 203, 219, 235, 251, 267, 283, 299, 315, 331, 347, 363^ 379, 395, 411, 427, 443, 459, 475, 491, 507, 523, 539, 555^ 571, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 668, 672, 676, 680^ 684, 688, 691, 692, 704, o 708 o las secuencias de VH contenidas en los anticuerpos representados en las Figuras 34-37; y, puede comprender además una secuencia de polipéptido de VL que comprende: SEQ ID NO: 2, 20, 21, 37, 53, 69, 85, 101, 119:, 122, 138, 154, 170, 186, 202, 218, 234, 250, 266, 282, 298, 314, 330, 346, 362, 378, 394, 410, 426, 442,. 458, 474, 490¿ 506, 522, 538, 554, 570, 647, 651, 660, 666, 667, 671, 675 679, 683, 687, 693, 699, 702, 706, o 709 o las secuencias ¡de VH contenidas en los anticuerpos representados en las Figuras 34-37 o una variante de las mismas donde uno o más de los residuos flanqueantes (residuos de FR) en dicho polipéptido de VH 0 VL puede haber sido sustituido con otro residuo de aminoácido que da como resultado un anticuerpo o fragmento de anticuerpo! anti- IL-6 que se une específicamente a IL-6 humana. Preferentemente i las secuencias pesada y ligera variables comprenden aquellas en las SEQ ID NO: 657 y 709. j En una modalidad de la invención, uno o más de dichos residuos de FR pueden sustituirse por un aminoácido presente en el sitio correspondiente en un anticuerpo anti-IL-6 de -conejo progenitor desde donde provienen las regiones determinantes de complementariedad (CDR) contenidas en dichos polipéptidos: de VH o VL y por una sustitución consecutiva de aminoácidos. ! En una modalidad de la invención, dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede ser humanizado.

En una modalidad de la invención, dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede ser quimérico.

En una modalidad de la invención, dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede además comprender una Fe humana, por ej . , una región Fe que comprende las regiones constantes de cadena pesada y ligera variables contenidas; en la En una modalidad de la invención, dicha Fe humanal puede i provenir de IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgG5, IgG6, IgG7, : lgG8, IgG9, IgGlO, IgGll, IgG12, IgG13, IgG14, IgG15, IgG16, ;IgG17, IgG18 o IgG19. ¡ En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede comprender un polipéptido que tiene al menos 90% de homología de secuencia con una o más de las secuencies de polipéptidos de la SEQ ID NO: 3, 18, 19, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 117, 118, 123,; 139, 155, 171, 187, 203, 219, 235, 251, 267, 283, 299, 315, 331, 347, 363, 379, 395, 411, 427, 443, 459, 475, 491, 507!, 523, 539, 555, 571, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 668:, 672, 676, 680, 684, 688, 691, 692, 704, 708, 2, 20, 21, 37, 53, 69, 85, 101, 119, 122, 138, 154, 170, 186, 202, 218, 234, 25Ó, 266, 282, 298, 314, 330, 346, 362, 378, 394, 410, 426, 442!, 458, 474, 490, 506, 522, 538, 554, 570, 647, 651, 660, 666; 667, i 671, 675, 679, 683, 687, 693, 699, 702, 706, o 709 ! o las secuencias de VH y VL representadas en las Figuras 34-37.' En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede tener una semivida de eliminación de al menos alrededor de 22 días, al menos alrededor de 25 días, o al menos alrededor de 30 días. ; En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede ser administrado conjuntamente con un agente quimioterapéutico. ! En una modalidad de la invención, el agente quimioterapéutico se puede seleccionar de antagonistas dei VEGF, antagonistas de EGFR, platinos, taxoles, irinotecanó, 5-fluorouracilo, gemcitabina, leucovorina, esterbides, ciclofosfamida, melfalán, alcaloides de la vinca (por ejemplo, vinblastina, vincristina, vindesina y vinorelbina) , mustinas, inhibidores de tirosina cinasa, radioterapia, antagonistas de hormonas sexuales, moduladores selectivos del receptcr de andrógeno, moduladores selectivos del receptor de estrógeno, antagonistas de PDGF, antagonistas de TNF, antagonistas 'de IL-1, interleucinas (por ejemplo, IL-12 o IL-2) , antagonistas de IL-12R, anticuerpos monoclonales conjugados con toxinas, anticuerpos monoclonales específicos contra antígenos i tumorales, Erbitux™, Avastin™, Pertuzumab, anticuerpos , anti- CD20, Rituxan®, ocrelizumab, ofatumumab, DXL625, Herceptin® o cualquier combinación de los mismos. i i En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 que puede estar directa o indirectamente unido a una etiqueta detectable o agente terapéutico. ; En una modalidad de la invención, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede ser Abl o humanizado, quimérico, de cadena simple o fragmento del mismo) que comprende todas o la mayoría de las CDR de Abl.

En una modalidad de la invención, la enfermedad o afección se puede seleccionar de cáncer, artritis reumatoide, SIDA, enfermedad coronaria, deshidratación, desnutrición, exposición al plomo, malaria,' enfermedad respiratoria, vejez, hipotiroidismo, tuberculosis, hipopituitarismo, neurastienia, hipernatremia, hiponatremia, enfermedad renal, esplénica, espondilitis anquilosante, síndrome del declive (retraso del crecimiento) o cualquier combinación de las mismas. ! En una modalidad de la invención, el método puede incluir la administración de un antagonista de un factor asociado con la caquexia, un factor asociado con la debilidad, un factor asociado con la fatiga y/o un factor asociado con la fiebre. El factor asociado con la caquexia, el factor asociado con la debilidad, factor asociado con la fatiga y/o factor asociado con la fiebre se puede seleccionar de factor de necrosis tumoral alfa, interferón gama, interleucina 1 ¡ alfa, interleucina 1 beta, interleucina 6, factor que induce la i proteólisis, factor que inhibe la leucemia o cualquier combinación de los mismos.

En una modalidad de la invención, el método puede incluir la administración de un agente anti-caquexia seleccionado de cannabis, dronabinol (Marinol™) , nabilona (Cesamet), cannabidiol, cannabicromeno, tetrahidrocannabinol , Sativex, acetato de megestrol o cualquier combinación de los mismos.

En una modalidad de la invención, el método puede incluir la administración de un agente antináusea o antiemético seleccionado de antagonistas del receptor 5-HT3, ajwain, alizaprida, anticolinérgicos, antihistaminas, aprepitant, i benzodiazepinas, cannabicromeno, cannabidiol, cannabinoides, cannabis, casopitant, clorpromazina, ciclizina, dexametasona, dexametasona, dimenhidrinato (Gravol™) , difenhidrjamina, dolasetrón, domperidona, antagonistas de dopamina, doxilamina, dronabinol (Marinol™) , droperidol, emetrol, jenjibre, granisetrón, haloperidol, hidroxizina, hioscina, lora|zepam, meclizina, metoclopramida, midazolam, muscimol, nabilona I (Cesamet), antagonistas del receptor nkl, ondans;etrón, palonosetrón, menta, Fenergam, proclorperazina, Promacot, prometazina, Pentazina, propofol, sativex, tetrahidrocannabinol, trimetobenzamida, tropisetrón, nandrolona, stilbestrol, talidomida, lenalidomida, agonistas de grelina, antagonistas de miostatina, anticuerpos ' anti-miostatina, moduladores selectivos del receptor de andrógenos, moduladores selectivos del receptor de estrógeno, antagonistas de angiotensina AII, agonistas del receptor adrenérgicó beta dos, agonistas del receptor adrenérgicó beta tres o cualquier combinación de los mismos.

En una modalidad de la invención, la fiebre del paciente se puede evaluar mediante la medición de la temperatura corporal del paciente.

En una modalidad de la invención, el método puede incluir la medición de la temperatura corporal del paciente antes' de la administración del anticuerpo anti-IL-6 y administrar el anticuerpo o el fragmento de anticuerpo anti-IL-6 ¡si la temperatura corporal del paciente es mayor a aproximadamente 38° C. i En una modalidad de la invención, el método puede incluir i la medición de la temperatura corporal del paciente dentro de las 24 horas anteriores a la administración del anticuerpo anti-IL-6 y administrar el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 si la temperatura corporal del paciente indica la presencia de fiebre. : En una modalidad de la invención, el método ' puede incluir, adicionalmente, la medición del peso corporal del paciente antes de la administración del anticuerpo ant-IL-6 y i administrar el anticuerpo o el fragmento de anticuerpo anti-IL-6 si el peso del paciente disminuyó en más de aproximadamente 5% dentro de aproximadamente 30 días o si el índice de masa corporal magra del paciente es menor a aproximadamente 17 kg / m2 (paciente masculino) o menos a aproximadamente 14 kg / m2 (paciente femenina) .

En una modalidad de la invención, el método puede incluir la medición de la fuerza muscular del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-IL-6 y administrar el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 si la fuerza muscular del paciente disminuyó en un porcentaje mayor a aproximadamente el 20% dentro de aproximadamente 30 días.1 En una modalidad de la invención, el método puede dar como resultado una mejora prolongada de la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre del paciente. ! En una modalidad de la invención, la masa corporál del paciente se puede aumentar en aproximadamente 1 kilogramo dentro de aproximadamente 4 semanas desde la administración del anticuerpo o fragmento del anticuerpo anti-IL-6. j En una modalidad de la invención, la caquexia del paciente se puede mejorar de forma medible dentrjo de aproximadamente 4 semanas desde la administración del anticuerpo anti-IL-6.

En una modalidad de la invención, la caquexia del paciente se puede evaluar mediante la medición de la masa corporal total del paciente, la masa corporal magra, el ¡índice de masa corporal magra y/o la masa corporal magra apendicular.

En una modalidad de la invención, la medición de la masa corporal del paciente puede descontar (restar) el peso estimado del o de los tumores del paciente y/o la o las recolecciones de fluido extravascular . ' En una modalidad de la invención, la caquexia del paciente se puede mantener mejorada de forma medible aproximadamente 8 semanas después de la administración del anticuerpo anti-IL-6.

En una modalidad de la invención, la debilidad del paciente se puede mejorar de forma medible dentro de aproximadamente 4 semanas desde la administración del anticuerpo anti-IL-6.

En una modalidad de la invención, la debilidad del paciente se puede medir mediante la prueba de fuerza de presión. ¡ En una modalidad de la invención, la fuerza presión del paciente se puede mejorar en al menos aproximadamente un; 15% o al menos aproximadamente un 20%. j En una modalidad de la invención, la debilidad del paciente se puede mantener mejorada de forma medible aproximadamente 8 semanas después de la administración del anticuerpo anti-IL-6.

En una modalidad de la invención, la fatiga del paciente se puede mejorar de forma medible dentro de aproximadamente 1 semana desde la administración del anticuerpo anti-IL-6. j En una modalidad de la invención, la fatiga del paciente se puede medir mediante la prueba FACIT-F FS.

En una modalidad de la invención, la puntuación de 'FACIT-F FS del paciente se pude mejorar en al menos aproximadamente 10 puntos.

En una modalidad de la invención, la fatiga del paciente se puede mantener mejorada de forma medible aproximadamente 8 semanas después de la administración del anticuerpo anti-IL-6.

En una modalidad de la invención, la fiebre del paciente se puede mejorar de forma medible dentro de aproximadamente 1 semana desde la administración del anticuerpo anti-IL-6. ¡ En una modalidad de la invención, la fiebre del paciente se puede mantener mejorada de forma medible aproximadamente 8 i semanas después de la administración del anticuerpo anti-ÍL-6.

En una modalidad de la invención, la capacidad de supervivencia del paciente se puede mejorar.

En una modalidad de la invención, la calidad de vida del paciente se puede mejorar. ' BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS DISTINTAS VISTAS DE LOS DIBUJOS La Fig. 1 muestra que se reconoció una variedad de ¦ epitopos únicos por la recolección de anticuerpos anti-IL-6 preparados por el protocolo de selección de anticuerpos. La variabilidad de los epitopos se confirmó por medio de estudios de competencia de unión a anticuerpos anti-IL-6 (ForteBio Octet) .

La Fig. 2 muestra las alineaciones de secuencias de cadena ligera y pesada variables entre secuencias de cadena ligera variable y pesada variable de anticuerpo de conejo y secuencias humanas homologas y las secuencias humanizadas. Las regiones flanqueantes se identifican como FR1-FR4. Las regiones determinantes de complementariedad se identifican como CDR1- CDR3. Los residuos de amino ácido se enumeran tal como se muestra. Las secuencias iniciales de conejo se denominan RbtVL y RbtVH para las secuencias de cadena ligera y pesada variable respectivamente. Tres de las secuencias de anticuerpo germinales humanas más similares, que abarcan desde la Región Flanqueante 1 hasta el final de la Región Flanqueante 3, se alinean por debajo de las secuencias de conejo. La secuencia humana considerada la más similar a la secuencia de conejo se muestra en primer lugar. En el presente ejemplo, aquellas secuencias más similares son L12A para la cadena ligera y 3-64- 04 para la cadena pesada. No se muestran las secuencias CDR3 humanas. La secuencia de Región Flanqueante humana 4 más cercana se alinea por debajo de la secuencia de Región Flanqueante de conejo 4. Los guiones verticales indican un residuo donde el residuo de conejo es idéntico a uno o más de los residuos humanos en la misma posición. Los residuos en negrita indican que el residuo de humano en esa posición es idéntico al residuo de conejo en la misma posición. Las secuencias finales humanizadas se denominan VLh y VHh para las secuencias de cadena ligera y pesada variable respectivamente. Los residuos subrayados indican que el residuo es igual al residuo de conejo en esa posición pero distinto que los residuos humanos en esa posición en las tres secuencias humanas alineadas .

La Fig. 3 muestra la alta correlación entre la IgG producida y la especificidad del antigeno para un ejemplo de protocolo IL-6. 9 de 11 pocilios mostraron correlación especifica de IgG con el reconocimiento de antigenos.

La Fig. 4 proporciona la curva de respuesta a la dosis de a-2-macroglobulina (A2M) para el anticuerpo Abl administrado por vía intravenosa en diferentes dosis una hora luego de una dosis de IL-6 humano dé 100 µg kg s.c.

La Fig. 5 proporciona datos de supervivencia para los grupos de progresión del anticuerpo Abl contra los grupos de control .

La Fig. 6 proporciona datos adicionales de supervivencia para los grupos de regresión del anticuerpo Abl contra los grupos de control.

La Fig. 7 proporciona datos de supervivencia para IgG humana policlonal a 10 mg/kg i.v. cada tres días (tamaño del tumor de 270-320 mg) contra el anticuerpo Abl a 10 mg/kg i.v. cada tres días (tamaño del tumor de 270-320 mg) .

La Fig. 8 proporciona datos de supervivencia para IgG humana policlonal a 10 mg/kg i.v. cada tres días (tamaño del tumor de 400-527 mg) contra el anticuerpo Abl a 10 mg/kg i.v. cada tres días (tamaño del tumor de 400-527 mg) .

La Fig. 9 proporciona un perfil farmacocinético del anticuerpo Abl en monos macacos. Los niveles del anticuerpo Abl en plasma se cuantificaron mediante ELISA de captura de antigenos. Esta proteina muestra una semivida de entre 12 y 17 días que concuerda con otros anticuerpos humanizados de longitud completa.

La Fig. 10 (A-D) proporciona datos de unión para los anticuerpos Ab4, Ab3, Ab8 y Ab2, respectivamente. La Fig. 10 E proporciona datos de unión para los anticuerpos Abl, Ab6 y Ab7.

La Fig. 11 resume los datos de unión de la Fig. 10 (A-E) de forma tabular.

La Fig. 12 presenta las secuencias de los péptidos de 15 aminoácidos usados en el experimento de mapeo de péptidos del Ejemplo 14.

La Fig. 13 presenta los resultados de las bandas preparadas en. el Ejemplo 14.

La Fig. 14 presenta los resultados de las bandas preparadas en el Ejemplo 14.

La Fig. 15A muestra la afinidad y cinética de unión de Abl a IL-6 de varias especies.

La Fig. 15B muestra la inhibición de la IL-6 por Abl en el ensayo de proliferación celular de T1165.

La Fig. 16 muestra la concentración promedio de Abl en plasma que resulta de la administración única de Abl a sujetos masculinos saludables en varios grupos de dosis.

La Fig. 17 muestra el área promedio bajo la curva de tiempo de concentración (AUC) de Abl en plasma para los grupos de dosis de la Fig. 16.

La Fig. 18 muestra el pico promedio de concentración de Abl en plasma (CmáX) para los grupos de dosis de la Fig. 16.

La Fig. 19 resume las mediciones farmacocinéticas de Abl de los grupos de dosis de la Fig. 16.

La Fig. 20 muestra la concentración promedio de Abl en plasma que resulta de la administración única de Abl a pacientes con cáncer avanzado.

La Fig. 21 ilustra la semivida de eliminación sin precedentes de Abl en comparación con otros anticuerpos anti- IL-6.

La Fig. 22 muestra el aumento de la concentración de hemoglobina luego de la administración de Abl a pacientes con cáncer avanzado.

La Fig. 23 muestra las concentraciones promedio de lipidos en plasma luego de la administración de Abl a pacientes con. cáncer avanzado.

La Fig. 24 muestra los conteos promedio de neutrófilos luego de la administración de Abl a pacientes con cáncer avanzado .

La Fig. 25 muestra la supresión de los niveles de CRP en suero en individuos saludables.

La Fig. 26 (A-B) muestra la supresión de los niveles de CRP en suero en pacientes con cáncer avanzado.

La Fig. 27 muestra la prevención de la pérdida de peso por Abl en un modelo de caquexia cancerosa de ratón.

La Fig. 28 muestra la apariencia física de ratones de control y tratados con Abl representativos en el modelo de caquexia cancerosa.

La Fig. 29 muestra que el Abl promueve el aumento de peso en pacientes con cáncer avanzado.

La Fig. 30 muestra que el Abl disminuye la fatiga en pacientes con cáncer avanzado.

La Fig. 31 muestra que el Abl promueve la fuerza de prensión en pacientes con cáncer avanzado.

La Fig. 32 muestra que el Abl suprime una proteína de fase aguda (amiloide A sérica) en ratones.

La Fig. 33 muestra que el Abl aumenta la concentración de albúmina en plasma en pacientes con cáncer avanzado.

Las Figs. 34 y 35 muestran alineaciones entre secuencias pesadas variables y ligeras de anticuerpo de conejo y secuencias humanas homologas y las secuencias humanizadas finales. Las regiones flanqueantes se identifican como FR1-FR4.

Las regiones determinantes de complementariedad se identifican como CDR1-CDR3.

Las Figs. 36 y 37 muestran alineaciones entre las secuencias pesadas variables y ligeras, de diferentes formas de Abl, respectivamente. Las regiones flanqueantes se identifican como FR1-FR4. Las regiones determinantes de complementariedad se identifican como CDR1-CDR3. Las diferencias de las secuencias dentro de las regiones CDR se encuentran destacadas.

La Fig. 38 muestra que el Abl aumenta la hemoglobina promedio a 80, 160 y 320 mg luego de 12 semanas de dosificación .

La Figura 39 muestra el cambio promedio desde la hemoglobina de referencia para los datos presentados en la Figura 38.

La Figura 40 muestra que el Abl aumenta la hemoglobina promedio a 160 y 320 mg luego de 12 semanas de dosificación en pacientes que tienen la hemoglobina de referencia por debajo de 11 g/1.

La Fig. 41 muestra que el Abl aumenta la hemoglobina promedio a 80, 160 y 320 mg luego de 16 semanas de dosificación.

La Figura 42 muestra los datos de cambio en el peso promediado de cada grupo de concentración de dosis (placebo, 80 mg, 160 mg, y 320 mg) del anticuerpo monoclonal Abl durante 12 semanas.

La Fig. 43 muestra el cambio porcentual promediado en el peso corporal de cada grupo de concentración de dosis correspondiente a la Fig. 42.

La Figura 44 muestra el cambio en los datos de masa corporal magra promediados para los grupos de concentración de dosis correspondientes a la Figura 42.

La Figura 45 muestra aumentos en la puntuación de subescala Facit-F FS promedio para algunos de los grupos de concentración de dosis en la población de pacientes luego de una dosificación de 80, 160 y 320 mg luego de 8 semanas.

La Fig. 46 muestra el cambio de la puntuación de subescala Facit-F FS desde el punto de referencia correspondiente a la Fig. 45.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS Definiciones Se debe entender que la presente invención no se limita a la metodología, protocolos, líneas celulares, especies o géneros animales y reactivos particulares descritos, ya que los mismos pueden variar. También debe entenderse que la terminología usada en la presente tiene el fin de describir solamente modalidades particulares y no pretende limitar el alcance de la presente invención que estará limitado solamente por las reivindicaciones adjuntas.

Tal como se usa en la presente las formas en singular "un/a", "y" y "el/la" incluyen referentes en plural a menos que el contexto claramente exprese lo contrario. Por consiguiente, por ejemplo, la referencia a "una célula" incluye una pluralidad de dichas células y la referencia a "la proteína" incluye la referencia a una o más proteínas y equivalentes de las mismas conocidas por los expertos en la técnica, y así sucesivamente. Todos los términos técnicos y científicos usados en la presente tienen el mismo significado tal como lo entiende el experto en la técnica a la que pertenece la presente invención a menos que se indique lo contrario.

Interleucina-6 {IL-6) : Tal como se usa en la presente, la interleucina-6 (IL-6 ) comprende no solo la siguiente secuencia de 212 aminoácidos disponible como acceso a la proteína GenBank No. NP_000591 : MNSFSTSAFGPVAFSLGLLLVLPAAFPAPVPPGEDSKDVAAPHRQPLTSSERID QIRYILDG ISALRKETCNKSN CESSKEALAENNLNLPKMAE DGCFQSGFNEETCLVKIITGLLEFEVYL EYLQNRFESSEEQARAVQMSTKVLIQFLQ KAKNLDAITTPDPTTNASLLTKLQAQNQ LQDM TTHLILRSFKEFLQSSLRALRQM (SEQ ID NO: 1 ) , sino también cualquier forma pre-pro, pro- y madura de esta secuencia de aminoácidos de IL-6, así como también mutantes y variantes que incluyen variantes alélicas de esta secuencia.

Enfermedad o afección: Tal como se usa en la presente, "enfermedad o afección" refiere a una enfermedad o afección que se le ha diagnosticado a un paciente o se sospecha que la tenga, particularmente una enfermedad o afección asociada con IL-6 elevada. Una enfermedad o afección comprende, sin limitación, los efectos secundarios de medicaciones o tratamientos (tales como terapia de radiación) , así como también afecciones idiopáticas caracterizadas por síntomas que incluyen IL-6 elevada.

Caquexia: Tal como se usa en la presente, caquexia, también conocida como enfermedad consuntiva, refiere a cualquier enfermedad marcada especialmente por demacración progresiva, debilidad, insalubridad general, desnutrición, pérdida de masa corporal, pérdida de masa muscular, o una pérdida acelerada de músculo esquelético en el contexto de una respuesta inflamatoria crónica (analizado en Kotler, Ann Intern Med. 2000 Oct 17 133 ( 8 ) : 622-34 ) . Las enfermedades y afecciones en las que se observa frecuentemente la caquexia incluyen cáncer, artritis reumatoide, SIDA, enfermedad coronaria, deshidratación, desnutrición, exposición al plomo, malaria, enfermedad respiratoria, vejez, hipotiroidismo, tuberculosis, hipopituitarismo, neurastenia, hipernatremia, hiponatremia, enfermedad renal, esplénica, espondilitis anquilosante, síndrome del declive (retraso del crecimiento) y otras enfermedades, particularmente enfermedades crónicas. La caquexia también puede ser idiopática (que surge de una causa incierta) . Se entiende que la evaluación del peso en un paciente excluye los tumores o acumulación de fluidos, por ej . , peso del tumor, acumulación de fluido extravascular, etc. La caquexia puede evaluarse mediante la medición de la masa corporal total del paciente (excepto los tumores o acumulación de fluidos) , masa magra total (sin grasa) masa corporal, masa magra de brazos y piernas (masa magra apendicular, por ej . , medida usando absorciometría de rayos x de energía dual o espectroscopia de impedancia bioeléctrica), y/o índice de masa corporal magra (masa corporal magra dividida entre la altura del paciente al cuadrado) . Véase Kotler, Ann Intern Med. 2000 Oct 17; 133 (8) : 622-34; Marcora et al., Rheumatology (Oxford). 2006 Nov;45 (11) : 1385-8.

Debilidad: Tal como se usa en la presente, la debilidad refiere a la fatiga física, que típicamente se manifiesta como una pérdida de fuerza y/o resistencia muscular. La debilidad puede ser central (que afecta la mayoría o todos los músculos del cuerpo) o periférica (que afecta un subgrupo de músculos) . La debilidad incluye "debilidad real" en la que los músculos del paciente disminuyen en alguna medida la producción de fuerza pico y/o sostenida, y "debilidad percibida", en la que el paciente percibe que se requiere un mayor esfuerzo para realizar una tarea aunque la fuerza medida de manera objetiva permanece casi igual, y el paciente puede medirla de manera objetiva o reportarla ,él mismo. Por ejemplo, la debilidad puede medirse de manera objetiva usando la prueba de fuerza de prensión (una prueba médicamente reconocida para evaluar la fuerza muscular) , típicamente utilizando un dinamómetro de prensión.

Fatiga: Tal como se usa en la presente, la fatiga refiere a fatiga mental (para fatiga física véase "debilidad") . La fatiga incluye sopor (somnolencia) y/o disminución de la atención. La fatiga puede medirse usando una variedad de pruebas conocidas en la técnica, tales como la prueba FACIT-F (Evaluación funcional del tratamiento de enfermedades crónicas - fatiga). Véase, por ej . , Celia, D., Lai, J.S., Chang, C.H., Peterman, A., & Slavin, M. (2002). Fatigue in cáncer patients compared with fatigue in the general population. Cáncer, 94(2), 528-538; Celia, D., Eton, D.T., Lai, F J-S., Peterman, A.H & Merkel, D.E. (2002). Combining anchor and distribution based methods to derive minimal clinically important differences on the Functional Assessment of Cáncer Therapy anemia and fatigue scales. Journal of Pain & Symptom Management, 24 (6) 547-561.).

Fiebre: Tal como se usa en la presente, "fiebre" refiere al punto de referencia de la temperatura corporal que aumenta al menos 1 a 2 grados Celsius. La fiebre se asocia comúnmente con una sensación subjetiva de hipotermia que se manifiesta como una sensación fría, temblores, aumento de la frecuencia cardíaca y de la frecuencia respiratoria por lo que el cuerpo del individuo alcanza el punto de referencia aumentado. Tal como se entiende en medicina, la temperatura corporal normal típicamente varía con el nivel de actividad y momento del día, con temperaturas máximas observadas en las horas de la tarde y antes de la noche, y temperaturas mínimas observadas durante la segunda mitad del ciclo de sueño, y las mediciones de temperatura pueden estar influenciadas por factores externos tales como respiración por la boca, consumo de comida o bebida, fumar o temperatura ambiente (dependiendo del tipo de medición) . Asimismo, el punto de referencia de la temperatura normal para los individuos puede variar hasta alrededor de 0.5 grados Celsius, por consiguiente un profesional médico puede interpretar la temperatura de un individuo según estos factores para diagnosticar si tiene fiebre. Por lo general, la fiebre se diagnostica típicamente por una temperatura interna corporal por encima de 38.0 grados Celsius, una temperatura oral por encima 37.5 grados Celsius, o una temperatura axilar por encima de 37.2 grados Celsius.

Mejorado: Tal como se usa en la presente, "mejorado/a", "mejoría" y otras variantes gramaticales incluyen cualquier cambio beneficioso que resulte de un tratamiento. Un cambio beneficioso es cualquier forma en la que el estado del paciente es mejor de lo que sería en ausencia del tratamiento.

"Mejorado/a" incluye la prevención de una afección indeseada, la ralentización del ritmo de empeoramiento de la afección, el retardo del desarrollo de una afección indeseada y el restablecimiento de un estado esencialmente normal. Por ejemplo, la mejoría de la caquexia comprende cualquier aumento de la masa del paciente, tal como la masa corporal total (con exclusión del peso que normalmente se excluye durante la evaluación de la caquexia, por ejemplo, el peso del tumor, la acumulación de fluido extravascular, etc.), la masa corporal magra y/o la masa magra apendicular, así como cualquier retraso o ralentización del ritmo de pérdida de masa, o prevención o ralentización de la pérdida de masa asociada a una enfermedad o afección que se diagnosticó al paciente. Para otro ejemplo, la mejoría en la debilidad comprende cualquier aumento en la fuerza del paciente, así como cualquier retardo o ralentización del ritmo de pérdida de fuerza o prevención o ralentización de la pérdida de fuerza asociado con una enfermedad o afección que se diagnosticó al paciente. Como un ejemplo adicional, la mejoría en la fatiga comprende cualquier disminución de la fatiga del paciente, así como cualquier retardo o ralentización del ritmo de aumento de la fatiga o prevención o ralentización del aumento de la fatiga asociado con una enfermedad o afección que se diagnosticó al paciente. Como otro ejemplo adicional, la mejoría en la fiebre comprende cualquier disminución de la fiebre del paciente, así como cualquier retardo o ralentización del ritmo de aumento de la fiebre o prevención o ralentización del aumento de la fiebre asociado con una enfermedad o afección que se diagnosticó al paciente.

Proteína C-reactiva (CRP) : Como se usa en la presente, la proteina C-reactiva (CRP) no solo comprende la siguiente secuencia de 224 aminoácidos disponible como No. De acceso GenBank a la proteina NP_000558: MEKLLCFLVLTSLSHAFGQTDMSRKAFVFPKESDTSYVSLKAPLTKPLKAFTVCLHFYTELSS TRGYSIFSYATKRQDNEILIF SKDIGYSFTVGGSEILFEVPEVTVAPVHICTSWESASGIVE FWVDGKPRVRKSLKKGYTVGAEASIILGQEQDSFGGNFEGSQSLVGDIGNVN WDFVLSPDEI NTIYLGGPFSPNVLNWRALKYEVQGEVFTKPQLWP (SEQ ID NO: 726), sino también cualquier forma pre-pro, pro- y madura de esta secuencia de aminoácidos de CRP, asi como mutantes y variantes que incluyen variantes alélicas de esta secuencia. Los niveles de CRP, por ej . , en suero, hígado, tumor o en cualquier otra parte del cuerpo, puede medirse fácilmente usando métodos de rutina y reactivos comercialmente disponibles, por ej . ELISA, tira de prueba del anticuerpo, inmunoturbidimetría, inmunodifusión rápida, aglutinación visual, Western blot, Northern blot, etc.

Receptor de interleucina-6 (IL-6R) , también denominado receptor de IL-6 alfa (IL-6RA) : Tal como se usa en la presente, "receptor de interleucina-6" ("IL-6R", también "receptor de IL-6 alfa" o "IL-6RA") no solo comprende la siguiente secuencia de 468 aminoácidos disponible como No. de acceso de Swiss-Prot a la proteína P08887: MLAVGCALLAALLAAPGAALAPRRCPAQEVARGVLTSLPGDSVTLTCPGVEPEDNATVHWVLR KPAAGSHPSRWAGMGRRLLLRSVQLHDSGNYSCYRAGRPAGTVHLLVDVPPEEPQLSCFRKSP LSNWCEWGPRSTPSLTTKAVLLVRKFQNSPAEDFQEPCQYSQESQKFSCQLAVPEGDSSFYI VSMCVASSVGSKFSKTQTFQGCGILQPDPPANITVTAVARNPRWLSVTWQDPHSWNSSFYRLR FELRYRAERSKTFTTWMVKDLQHHCVIHDAWSGLRHWQLRAQEEFGQGEWSEWSPEAMGTPW TESRSPPAENEVSTP QALTTNKDDDNILFRDSANATSLPVQDSSSVPLPTFLVAGGSLAFGT LLCIAIVLRFKKTW LRAL EGKTS HPPYSLGQLVPERPRPTPVLVPLISPPVSPSSLGSDN TSSHNRPDARDPRSPYDISNTDYFFPR (SEQ ID NO: 727), sino también cualquier forma pre-pro, pro- y madura de esta secuencia de aminoácidos, así como mutantes y variantes que incluyen variantes alélicas de esta secuencia. gpl30: Como se utiliza en la presente, el gpl30 (también denominado receptor de interleucina-6 subunidad beta) no solo comprende la siguiente secuencia precursora de 918 aminoácidos disponible como No. de acceso de Swiss-Prot a la proteína: P40189: MLTLQTWWQALFIFLTTESTGELLDPCGYISPESPVVQLHSNFTAVCVLKEKCMDYFHVNAN YIVWKTNHFTIPKEQYTIINRTASSVTFTDIASLNIQLTCNILTFGQLEQNVYGITIISGLPP EKPKNLSCIVNEGKKMRCEWDGGRETHLETNFTL SEWATHKFADCKA RDTPTSCTVDYSTV YFVNIEVWVEAENALGKVTSDHINFDPVY VKPNPPHNLSVINSEELSSILKLTWTNPSIKSV IILKYNIQYRTKDASTWSQIPPEDTASTRSSFTVQDLKPFTEYVFRIRCMKEDGKGYWSDWSE EASGITYEDRPSKAPSFWYKIDPSHTQGYRTVQLVWKTLPPFEANGKILDYEVTLTR KSHLQ NYTVNATKLTVNLTNDRYLATLTVRNLVGKSDAAVLTIPACDFQATHPVMDLKAFP DNMLWV EWTTPRESVKKYILEWCVLSDKAPCITDWQQEDGTVHRTYLRGNLAESKCYLITVTPVYADGP GSPESIKAYLKQAPPSKGPTVRTK VGKNEAVLEWDQLPVDVQNGFIRNYTIFYRTIIGNETA VNVDSSHTEYTLSSLTSDTLYMVR.4AAYTDEGG DGPEFTFTTPKFAQGEIEAIVVPVCLAFL LTTLLGVLFCFN RDLIKKHIWPNVPDPS SHIAQWSPHTPPRHNFNSKDQMYSDGNFTDVSV VEIEAND KPFPEDLKSLDLFKKE INTEGHSSGIGGSSCMSSSRPSISSSDENESSQNTSST VQYSTWHSGYRHQVPSVQVFSRSESTQPLLDSEERPEDLQLVDHVDGGDGILPRQQYFKQNC SQHESSPDISHFERSKQVSSVNEEDFVRL QQISDHISQSCGSGQMKMFQEVSAADAFGPGTE GQVERFETVGMEAATDEGMPKSYLPQTVRQGGYMPQ (SEQ ID NO: 728), sino también cualquier forma pre-pro, pro- y madura de esta secuencia de aminoácidos, tal como la forma madura codificada por los aminoácidos 23 a 918 de la secuencia mostrada, así como mutantes y variantes que incluyen variantes alélicas de esta secuencia.

Escala de Pronóstico de Glasgow (GPS) : Como se usa en la presente, la escala de pronóstico de Glasgow (GPS) se refiere a un valor basado en la inflamación que otorga un punto pronóstico a un nivel de albúmina en suero menor a < 35 mg/L y un punto a un nivel de CRP por encima de 10 mg/L. Por consiguiente, un GPS de 0 indica albúmina y CRP normales, un GPS de 1 indica menos albúmina o más CRP de lo normal y un GPS de 2 indica menos albúmina y más CRP de lo normal.

Cantidad efectiva: Como se usa en la presente, "cantidad efectiva", "cantidad efectiva para", "cantidad de X efectiva para" y similares, se refieren a una cantidad de un ingrediente activo efectivo para aliviar o reducir en alguna medida uno o más de los síntomas de la enfermedad que necesita tratamiento o para retardar el inicio de síntomas o marcadores clínicos de una enfermedad que necesita prevención, cuando se administra el compuesto. Por consiguiente, una cantidad efectiva se refiere a una cantidad del ingrediente activo que presenta efectos tales como (i) revertir el ritmo de avance de una enfermedad, (ii) inhibir en alguna medida un mayor avance de la enfermedad y/o (iii) aliviar en alguna medida (o, preferentemente, eliminar) uno o más síntomas asociados con la enfermedad. La cantidad eficaz puede determinarse empíricamente mediante la experimentación con los compuestos implicados en sistemas modelo in vivo e in vitro conocidos para una enfermedad que necesita tratamiento. El contexto en el que se usa la frase "cantidad efectiva" puede indicar un efecto deseado particular. Por ejemplo, "una cantidad de un anticuerpo anti-IL-6 efectiva para reducir la debilidad" y frases similares se refieren a una cantidad de anticuerpo anti-IL-6 que, cuando se administra a un sujeto, causa una disminución medible de la debilidad según lo determina la prueba de fuerza de prensión. De manera similar, "una cantidad de un anticuerpo anti-IL-6 efectiva para aumentar el peso" y frases similares se refieren a una cantidad de anticuerpo anti-IL-6 que, cuando se administra a un sujeto, provoca un aumento medible en el peso del paciente. Una cantidad efectiva variará de acuerdo con el peso, el sexo, la edad y el historial médico del individuo, así como la gravedad de la o las afecciones del paciente, el tipo, de enfermedad o enfermedades, el modo de administración y similares. Una cantidad efectiva se puede determinar fácilmente usando experimentos de rutina, por ejemplo, mediante titulación (administración de dosis crecientes hasta que se encuentra una dosis efectiva) y/o referencia a cantidades que fueron eficaces en pacientes anteriores. En general, los anticuerpos anti-IL-6 de la presente invención se administrarán en dosis que varíen entre alrededor de 0.1 mg/kg y alrededor de 20 mg/kg del peso corporal del paciente.

Mejoría prolongada de la caquexia: Como se usa en la presente, "mejoría prolongada de. la caquexia" se refiere a una mejoría medible de la masa corporal, la masa corporal magra, la masa corporal magra apendicular y/o el índice de masa corporal magra del paciente, con respecto al nivel inicial (es decir, el nivel antes del inicio del tratamiento) que se puede detectar dentro de aproximadamente 4 semanas y permanece mejorado durante un período prolongado, por ejemplo, al menos alrededor de 35 días, al menos alrededor de 40 días, al menos alrededor de 50 días, al menos alrededor de 60 días, al menos alrededor de 70 días, al menos alrededor de 11 semanas o al menos alrededor de 12 semanas a partir del inicio del tratamiento Mejoría prolongada en la debilidad: Como se usa en la presente, "mejoría prolongada de la debilidad" se refiere a una mejoría medible de la fuerza muscular, con respecto al nivel inicial (es decir, el nivel antes del inicio del tratamiento) que se puede detectar dentro de aproximadamente 2 semanas y permanece mejorada durante un período prolongado, por ejemplo, al menos alrededor de 21 días, al menos alrededor de 28 días, al menos alrededor de 35 días, al menos alrededor de 40 días, al menos alrededor de 50 días, al menos alrededor de 60 días, al menos alrededor de 70 días, al menos alrededor de 11 semanas o al menos alrededor de 12 semanas a partir del inicio del tratamiento .

Mejoría prolongada de la fatiga: Como se usa en la presente, "mejoría prolongada de la fatiga" se refiere a una mejoría medible de la fatiga, con respecto al nivel inicial (es decir, el nivel antes del inicio del tratamiento) que se puede detectar durante aproximadamente 1 semana y permanece mejorada durante un período prolongado, por ejemplo, al menos aproximadamente 14 días, al menos alrededor de 21 días, al menos alrededor de 28 días, al menos alrededor de 35 días, al menos alrededor de 40 días, al menos alrededor de 50 días, al menos alrededor de 60 días, al menos alrededor de 70 días, al menos alrededor de 11 semanas o al menos alrededor de 12 semanas a partir del inicio del tratamiento.

Mejoría prolongada de la fiebre: Como se usa en la presente, "mejoría prolongada de la fiebre" se refiere a una disminución medible de la fiebre (por ejemplo, la temperatura pico o la cantidad de tiempo en que la temperatura permanece alta) , con respecto al nivel inicial (es decir, el nivel antes del inicio del tratamiento) que se puede detectar dentro de aproximadamente 1 semana y permanece mejorada durante un periodo prolongado, por ejemplo, al menos alrededor de 14 días, al menos alrededor de 21 días, al menos alrededor de 28 días, al menos alrededor de 35 días, al menos alrededor de 40 días, al menos alrededor de 50 días, al menos alrededor de 60 días, al menos alrededor de 70 días, al menos alrededor de 11 semanas, o al menos alrededor de 12 semanas a partir del inicio del tratamiento.

Especies de levadura que pueden aparearse: La presente invención pretende comprender ampliamente cualquier levadura diploide o tetraploide que puede crecer en cultivo. Tales especies de levadura pueden existir en forma haploide, diploide o tetraploide. Las células de una determinada ploidia pueden, en condiciones apropiadas, proliferar en dicha forma por un número indeterminado de generaciones. Las células diploides también pueden esporular para formar células haploides. El apareamiento secuencial puede dar como resultado cepas tetraploides mediante apareamiento o fusión adicionales de cepas diploides. En la presente invención, las células de levadura diploides o poliploides son producidas preferentemente por apareamiento o fusión de esferoplastos. En una modalidad de la invención, la levadura que puede aparearse es miembro de la familia Saccharomycetaceae, que incluye los géneros Arxiozyma, Ascobotryozyma, Citeromyces, Debaryomyees, Dekkera, Eremothecium, Issatchenkia , Kazachstania, Kluyveromyces, Kodamaea, Lodderomyces, Pachysolen, Pichia, Saccharomyces, Saturnispora, Tetrapisispora , Torulaspora , Williopsis y Zygosaccharomyces. Otros tipos de levadura potencialmente útiles en la invención incluyen Yarrowia, Rhodosporidium, Candida, Hansenula, Filobasium, Filobasidellla, Sporidiobolus, Bullera, Leucosporidium y Filobasidella .

En una modalidad preferida de la invención, la levadura que puede aparearse es miembro del género Pichia. En una modalidad adicional preferida de la invención, la levadura que puede aparearse del género Pichia es una de las siguientes especies: Pichia pastoris, Pichia methanolica y Hansenula polymorpha {Pichia angusta) . En una modalidad particularmente preferida de la invención, la levadura que puede aparearse del género Pichia es la especie Pichia pastoris.

Célula de levadura haploide: Célula que tiene una copia única de cada gen de su complemento genómico (cromosómico) normal .

Célula de levadura poliploide: Célula que tiene más de una copia de su complemento genómico (cromosómico) normal.

Célula de levadura diploide: Célula que tiene dos copias (alelos) de esencialmente cada gen de su complemento genómico normal, típicamente formada por el proceso de fusión (apareamiento) de dos células haploides.

Célula de levadura tetraploide: Célula que tiene cuatro copias (alelos) de esencialmente cada gen de su complemento genómico normal, típicamente formada por el proceso de fusión (apareamiento) de dos células haploides. Las tetraploides pueden tener dos, tres, cuatro o más casetes de expresión diferentes. Tales tetraploides podrían obtenerse en S. cerevisiae mediante apareamiento selectivo de diploides homocigóticos heterotálicos a/a y alfa/alfa y en Pichia mediante apareamiento secuencial de haploides para obtener diploides auxotróficos . Por ejemplo, una haploide [met his] puede aparearse con una haploide [ade his] para obtener una diploide [his] y una haploide [met arg] puede aparearse con una haploide [ade arg] para obtener una diploide [arg] y luego la diploide [his] x diploide [arg] para obtener un prototrofo tetraploide. Los expertos en la técnica entenderán que la referencia a los beneficios y usos de células diploides también puede aplicar a células tetraploides.

Apareamiento de levadura: Proceso por el cual dos células de levadura haploides se fusionan naturalmente para formar una célula de levadura diploide.

Meiosis: Proceso por el cual una célula de levadura diploide se somete a división reductora para formar cuatro productos de esporas haploides. Cada espora puede luego germinar y formar una línea celular haploide vegetativamente en crecimiento .

Marcador seleccionable: Un marcador seleccionable es un gen o fragmento de gen que confiere un fenotipo de crecimiento (característica física de crecimiento) a una célula que recibe dicho gen, por ejemplo, mediante un evento de transformación. El marcador seleccionable permite que la célula sobreviva y crezca en un medio de crecimiento selectivo en condiciones en las que las células que no reciben dicho gen marcador seleccionable no pueden crecer. Los genes marcadores seleccionables generalmente están comprendidos en varios tipos, que incluyen genes marcadores seleccionables positivos, tales como un gen que confiere a una célula resistencia a un antibiótico u otro fármaco, temperatura cuando se cruzan dos mutantes ts o cuando se transforma un mutante ts; los genes marcadores seleccionables negativos, tales como un gen biosintético que confiere a una célula la capacidad de crecer en un medio sin un nutriente específico que necesitan todas las células que no tienen dicho gen biosintético o un gen biosintético mutagenizado que confiere a una célula la incapacidad de crecer mediante células que no tienen el gen de tipo salvaje y similares. Los marcadores adecuados incluyen pero no se limitan a: ZEO, G418, LYS3, METI, MET3a, ADE1, ADE3, URA3 y similares.

Vector de expresión; Estos vectores de ADN contienen elementos que facilitan la manipulación para la expresión de una proteína ext'raña dentro de la célula hospedadora objetivo. Convenientemente, la manipulación de secuencias y la producción de ADN para la transformación se lleva a cabo en primer lugar en un huésped bacteriano, por ejemplo, E. coli y, en general, los vectores incluirán secuencias para facilitar dichas manipulaciones, que incluyen un origen bacteriano de replicación y un marcador de selección bacteriano apropiado. Los marcadores de selección codifican proteínas necesarias para la supervivencia o el crecimiento de células hospedadoras transformadas cultivadas en un medio de cultivo selectivo. Las células hospedadoras no transformadas con el vector que contiene el gen de selección no sobrevivirán en el medio de cultivo. Los genes de selección típicos codifican proteínas que (a) brindan resistencia a antibióticos u otras toxinas, (b) complementan deficiencias auxotróficas o (c) suministran nutrientes críticos no disponibles a partir de medios complejos. Los ejemplos de vectores y métodos de transformación de levadura se describen, por ejemplo, en Burke, D., Dawson, D., & Stearns, T. (2000). Methods in yeast genetics: a Cold Spring Harbor Laboratory course manual. Plainview, N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratory Press.

Los vectores de expresión para uso en métodos de la invención incluirán, adicionalmente, secuencias específicas de levadura que incluyen un auxotrófico o marcador de fármaco seleccionable para identificar las cepas de levadura transformadas. Un marcador de fármaco puede usarse adicionalmente para ampliar el número de copias del vector en una célula hospedadora de levadura.

La secuencia de interés que codifica el polipéptido está operativamente enlazada a secuencias reguladoras transcripcionales y traduccionales que proporcionan la expresión del polipéptido en células de levadura. Estos componentes de vectores pueden incluir, a modo no taxativo, uno o más de los siguientes: un elemento potenciador, un promotor y una secuencia de terminación de la transcripción. También pueden estar incluidas secuencias para la secreción del polipéptido, por ejemplo, una secuencia de señal y similares. Un origen de replicación de levadura es opcional, ya que los vectores de expresión están comúnmente integrados al genoma de la levadura.

En una modalidad de la invención, el polipéptido de interés está operativamente enlazado o fusionado, a secuencias que proporcionan secreción optimizada del polipéptido a partir de células diploides de levadura.

Los ácidos nucleicos están "operativamente enlazados" cuando se colocan en una relación funcional con otra secuencia de ácido nucleico. Por ejemplo, el ADN de una secuencia de señal está operativamente enlazado al ADN de un polipéptido si se expresa como una preproteina que participa en la secreción del polipéptido; un promotor o potenciador está operativamente enlazado a una secuencia de codificación si afecta la transcripción de la secuencia. Generalmente, "operativamente enlazado" significa que las secuencias de ADN que están enlazadas son contiguas, y, en el caso de un líder secretor, contiguas y en marco de lectura. Sin embargo, los potenciadores no tienen que ser contiguos. El enlace se logra mediante la ligadura en sitios de restricción convenientes o, de manera alternativa, mediante un método de PCR/recombinación conocido por aquellos expertos en la técnica (GatewayR Technology; Invitrogen, Carlsbad California) . Si dichos sitios no existen, los adaptadores o enlaces de oligonucleótidos sintéticos se usan de acuerdo con la práctica convencional.

Los promotores son secuencias sin traducir situadas corriente arriba (5') del codón inicial de un gen estructural (generalmente entre alrededor de 100 y 1000 bp) que controlan la transcripción y la traducción de secuencias de ácidos nucleicos particulares a las que están operativamente enlazadas. Dichos promotores están comprendidos en varias clases: promotores inducibles, constitutivos y represibles (que aumentan los niveles de transcripción en respuesta a la ausencia de un represor) . Los promotores inducibles pueden iniciar los niveles aumentados de transcripción de ADN bajo su control en respuesta a algún cambio en las condiciones de cultivo, por ejemplo, la presencia o ausencia de un nutriente o un cambio en la temperatura.

El fragmento promotor de levadura puede también servir como sitio para la recombinación y la integración homólogas del vector de expresión en el mismo sitio en el genoma de levadura; de manera alternativa, se usa un marcador seleccionable como sitio para la recombinación homologa. La transformación de Pichia se describe en Cregg et al. (1985) Mol. Cell. Biol. 5:3376-3385.

Los ejemplos de promotores adecuados de Pichia incluyen el promotor AOX1 (Cregg et al. (1989) Mol. Cell. Biol. 9:1316-1323), el promotor ICL1 (Menendez et ai. (2003) Yeast 20 (13) : 1097-108) , promotor de gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa (GAP) (Waterham et al. (1997) Gene 186 (1) : 37-44) y promotor FLDl (Shen et al. (1998) Gene 216 (1) : 93-102) . El promotor GAP es un promotor constitutivo fuerte y los promotores AOX y FLDl son inducibles.

Otros promotores de levadura incluyen ADH1, alcohol deshidrogenasa II, GAL4 , PH03, PH05, Pyk y promotores quiméricos que provienen de los mismos. Adicionalmente, en la invención pueden usarse promotores que no son de levadura, tales como promotores de mamíferos, insectos, vegetales, reptiles, anfibios, virales y de aves. Más típicamente, el promotor comprenderá un promotor de mamífero (potencialmente endógeno a los genes expresados) o comprenderá un promotor de levadura o viral que proporcione una transcripción efectiva a los sistemas de levadura.

Los polipéptidos de interés pueden producirse de forma recombinante no solo directamente, sino también como un polipéptido de fusión con un polipéptido heterólogo, por ejemplo, una secuencia de señal u otro polipéptido que tiene un sitio de escisión especifico en el extremo N del polipéptido o la proteina maduros. En general, la secuencia de señal puede ser un componente del vector o puede ser una parte de la secuencia codificadora de polipéptidos introducida en el vector.. La secuencia de señal heteróloga seleccionada es preferentemente una que se reconoce y procesa a través de una de las vías estándar disponibles dentro de la célula hospedadora. La señal pre-pro del factor alfa de S. cerevisiae posee eficacia probada en la secreción de una variedad de proteínas recombinantes de P. pastoris. Otras secuencias de señal de levadura incluyen la secuencia de señal del factor de apareamiento alfa, la secuencia de señal de invertasa y las secuencias de señal que provienen de otros polipéptidos de levadura secretados. Adicionalmente, estas secuencias de péptidos de señal pueden diseñarse para proporcionar una secreción mejorada en los sistemas de expresión de levadura diploides. Otras señales de secreción de interés también incluyen secuencias de señal de mamíferos, que pueden ser heterólogas a la proteína que se secreta o pueden ser una secuencia nativa para la proteína que se secreta. Las secuencias de señal incluyen secuencias prepeptídicas y, en algunos casos, pueden incluir secuencias propeptidicas. Muchas de dichas secuencias de señal son conocidas en la técnica, incluyendo las secuencias de señal encontradas en cadenas de inmunoglobulina, por ejemplo, secuencia de preprotoxina K28, PHA-E, FACE, MCP-1 humana, secuencias de señal de albúmina en suero humana, cadena pesada Ig humana, cadena ligera Ig humana y similares. Por ejemplo, véase Hashimoto et. al. Protein Eng 11(2) 75 (1998) y obayashi et. ai. Therapeutic Apheresis 2(4) 257 (1998).

La transcripción se puede aumentar insertando una secuencia activadora de la transcripción en el vector. Estos activadores son elementos de ADN que actúan en cis, en general, de alrededor de 10 a 300 bp, que actúan en un promotor para aumentar su transcripción. Los potenciadores de transcripción son relativamente independientes en relación a la orientación y posición, habiéndose encontrado en posición 5' y 3' con respecto a la unidad de transcripción, dentro de un intrón, asi como dentro de la secuencia de codificación en si misma. El potenciador puede empalmarse en el vector de expresión en la posición 5' o 3' con respecto a la secuencia de codificación, pero está situado preferentemente en el sitio 5' del promotor.

Los vectores de expresión usados en células hospedadoras eucarióticas pueden también contener secuencias necesarias para la terminación de la transcripción y para estabilizar el ARNm. Dichas secuencias están comúnmente disponibles desde 3' hasta el codón de terminación de traducción, en regiones sin traducir de ADN o ADNc eucarióticos o virales. Estas regiones contienen segmentos de nucleótidos transcriptos como fragmentos poliadenilados en la porción sin traducir del ARNm.

La construcción de vectores adecuados que contienen uno o más de los componentes enumerados anteriormente emplea técnicas de ligadura o métodos de PCR/recombinación estándar. Los plásmidos aislados o fragmentos de ADN se escinden, hacen a medida y religan en la forma deseada para generar los plásmidos necesarios o mediante métodos de recombinación. Para el análisis para confirmar las secuencias correctas en plásmidos construidos, se usan las mezclas de ligadura para transformar células hospedadoras y los transformadores satisfactorios seleccionados por resistencia a un antibiótico (por ejemplo, ampicilina o Zeocin™ (fleomicina) ) cuando corresponda. Los plásmidos de los transformadores se preparan, analizan mediante digestión con endonucleasas de restricción y/o secuencian.

Como una alternativa a la restricción y la ligadura de fragmentos, pueden usarse métodos de recombinación basados en sitios att y enzimas de recombinación para insertar secuencias de ADN en un vector. Dichos métodos son descritos, por ejemplo, por Landy (1989) Ann.Rev.Biochem. 58:913-949 y son conocidos por los expertos en la técnica. Dichos métodos utilizan recombinación de ADN intermolecular mediada por una mezcla de proteínas de recombinación codificadas por lambda y E.coli. La recombinación ocurre entre sitios de unión (att) específicos en las moléculas de ADN de interacción. Para una descripción de sitios att véase eisberg and Landy (1983) Site-Specific Recombination in Phage Lambda, in Lambda II, Weisberg, ed. (Cold Spring Harbor, NY:Cold Spring Harbor Press), pp.211-250. Los segmentos de ADN que flanquean los sitios de recombinación se cambian, de modo que luego de la recombinación, los sitios att son secuencias híbridas que comprenden secuencias donadas por cada vector parental. La recombinación puede ocurrir entre los ADN de cualquier topología.

Los sitios att pueden introducirse en una secuencia de interés mediante la ligadura de la secuencia de interés en un vector apropiado, la generación de un producto de PCR que contiene sitios att B mediante el uso de cebadores específicos, la generación de una biblioteca de ADNc clonada en un vector apropiado que contiene sitios att y similares.

El plegamiento, tal como se usa en la presente, se refiere a la estructura tridimensional de polipéptidos y proteínas, donde las interacciones entre los residuos de aminoácidos actúan para estabilizar la estructura. Mientras que las interacciones no covalentes son importantes para determinar la estructura, en general las proteínas de interés tendrán enlaces de disulfuro covalentes intra- y/o intermoleculares formados por dos residuos de cisteína. Para las proteínas y los polipéptidos de origen natural o derivados y variantes de los mismos, el plegamiento apropiado es típicamente el arreglo que da como resultado una actividad biológica óptima y puede controlarse de manera conveniente mediante ensayos de actividad, por ejemplo, unión de ligando, actividad enzimática, etc.

En algunos casos, por ejemplo cuando el producto deseado es de origen sintético, los ensayos basados en actividad biológica serán menos significativos. El plegamiento adecuado de dichas moléculas puede determinarse basándose en propiedades físicas, consideraciones energéticas, estudios de modelado y similares .

El hospedador de expresión se puede modificar adicionalmente mediante la introducción de secuencias que codifican una o más enzimas que potencian el plegamiento y la formación de enlaces de disulfuro, es decir, foldasas, chaperoninas, etc. Tales secuencias se pueden expresar de forma constitutiva o inducible en la célula hospedadora de levadura utilizando vectores, marcadores, etc., según se conoce en la técnica. Preferentemente las secuencias, incluyendo elementos de regulación transcripcional suficientes para el patrón deseado de expresión están integrados de forma estable en el genoma de levadura a través de una metodología dirigida.

Por ejemplo, la PDI eucariótica no solo es un catalizador eficaz de la oxidación de proteína cisteína e isomerización de unión de disulfuro, sino que también exhibe actividad chaperona. La expresión conjunta de PDI puede facilitar la producción de proteínas activas que poseen uniones múltiples de disulfuro. También es de interés la expresión de BIP (proteina de unión a cadena pesada de inmunoglobulina) , ciclofilina y similares. En una modalidad de la invención, cada una de las cepas parentales haploides expresa una enzima de plegamiento distintiva, por ejemplo, una cepa puede expresar BIP y la otra cepa puede expresar PDI o combinaciones de las mismas.

Los términos "proteína deseada" o "proteína objetivo" se usan de manera intercambiable y se refieren, generalmente, a un anticuerpo humanizado o a una porción de unión del mismo descrito en la presente. El término "anticuerpo" pretende incluir cualquier estructura molecular que contiene una cadena de polipéptidos con una forma especifica que se adecúa a y reconoce un epitopo, donde una o más interacciones de unión no covalente estabilizan, el complejo entre la estructura molecular y el epitopo. La molécula de anticuerpo arquetipica es la inmunoglobulina y todos los tipos de inmunoglobulinas, IgG, Ig , IgA, IgE, IgD, etc., de todas las fuentes, por ejemplo, de humano, roedor, conejo, vaca, oveja, cerdo, perro, otros mamíferos, pollos, otras aves, etc., se consideran "anticuerpos". Una fuente preferida para producir anticuerpos útiles como material de partida de acuerdo con la invención son los conejos. Se han descrito numerosas secuencias de codificación de anticuerpos y otras pueden surgir mediante métodos conocidos en la técnica. Ejemplos de las mismas incluyen anticuerpos quiméricos, anticuerpos humanos y otros anticuerpos mamíferos no humanos, anticuerpos humanizados, anticuerpos de cadena simple tales como scFvs, anticuerpos de camélidos, nanoanticuerpos, IgNAR (anticuerpos de cadena simple derivados de tiburones), productos farmacéuticos inmunológicos de molécula pequeña (SMIP) y fragmentos de anticuerpo tales como los Fab, Fab', F(ab' )2 y similares. Véase Streltsov VA, et al., Structure of a shark IgNAR antibody variable domain and modeling of an early-developmental isotype, Protein Sci. noviembre de 2005; 1 (11) : 2901-9. Epub 2005 Sep 30; Greenberg AS, et al., A new antigen receptor gene family that undergoes rearrangement and extensive somatic diversification in sharks, Nature. 9 de marzo de 1995; 374 (6518) : 168-73; Nuttall SD, et al., Isolation of the new antigen receptor from wobbegong sharks, and use as a scaffold for the display of protein loop librarles, Mol Immunol agosto de 2001; 38 (4 ): 313-26; Hamers-Casterman C, et al., Naturally occurring antibodies devoid of light chains, Nature 3 de junio de 1993; 363 (6428) : 446-8; Gilí DS, et al., Biopharmaceutical drug discovery using novel protein scaffolds, Curr Opin Biotechnol. diciembre de 2006; 17(6) :653-8. Publicación electrónica del 19 de octubre de 2006.

Por ejemplo, los anticuerpos o fragmentos de unión al antígeno pueden producirse mediante ingeniería genética. En esta técnica, al igual que con otros métodos, las células que producen anticuerpos se sensibilizan con el antígeno o inmunógeno deseados. El ARN mensajero aislado de las células que producen anticuerpos se usa como una plantilla para producir ADNc usando amplificación por PCR. Se produce una biblioteca de vectores, donde cada uno contiene un gen de cadena pesada y un gen de cadena ligera que retienen la especificidad inicial del antigeno, mediante inserción de secciones apropiadas del ADNc de inmunoglobulina amplificado en los vectores de expresión. Se construye una biblioteca combinatoria mediante la combinación de la biblioteca de genes de cadena pesada y la biblioteca de genes de cadena ligera. Esto da como resultado una biblioteca de clones que expresan conjuntamente una cadena ligera y pesada (que se asemeja al fragmento Fab o al fragmento de unión al antigeno de una molécula de anticuerpo) . Los vectores que llevan estos genes se cotransfectan en una célula hospedadora. Cuando la síntesis de gen de anticuerpos se induce en el huésped transfectado, las proteínas de cadena pesada y ligera se ensamblan a sí mismas para producir anticuerpos activos que pueden detectarse mediante análisis con el antígeno o inmunógeno.

Las secuencias de interés que codifican anticuerpos incluyen aquellas codificadas por secuencias nativas, así como ácidos nucleicos que, debido a la degeneración del código genético, no son idénticos en secuencia a los ácidos nucleicos descritos y variantes de los mismos. Los polipéptidos variantes pueden incluir sustituciones, adiciones o eliminaciones de aminoácidos (aa) . Las sustituciones de aminoácidos pueden ser sustituciones de aminoácidos conservadoras o sustituciones para eliminar aminoácidos no esenciales, como para alterar un sitio de glicosilación o para minimizar el mal plegamiento. mediante sustitución o eliminación de uno o más residuos de cisteina que no son necesarios para poder funcionar. Las variantes se pueden diseñar para retener o tener actividad biológica potenciada de una región particular de la proteina (por ejemplo, un dominio funcional, residuos de aminoácidos catalíticos, etc) . Las variantes también incluyen fragmentos de los polipéptidos descritos en la presente, en particular, fragmentos biológicamente activos y/o fragmentos correspondientes a dominios funcionales. Se conocen técnicas para mutagénesis in vitro de genes clonados. También se incluyen en la invención en cuestión polipéptidos que han sido modificados usando técnicas biológicas moleculares comunes para mejorar su resistencia a la degradación proteolítica, para optimizar las propiedades de solubilidad o para volverlos más adecuados como agentes terapéuticos.

Los anticuerpos quiméricos se pueden realizar a través de medios recombinantes combinando las regiones de cadena ligera y pesada variable (VL y VH) obtenidas de células que producen anticuerpos de una especie con las regiones constantes de cadena ligera y pesada de otras. Típicamente, los anticuerpos quiméricos utilizan regiones variables de roedores o conejos y regiones constantes humanas para producir un anticuerpo predominantemente con dominios humanos . La producción de dichos anticuerpos quiméricos es conocida en la técnica y puede lograrse a través de medios estándar (como se describe, por ejemplo, en la patente de EUA No. 5,624,659, incorporada en la presente en su totalidad a modo de referencia) . Adicionalmente, se contempla que las regiones constantes humanas de anticuerpos quiméricos de la invención pueden seleccionarse de las regiones constantes IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgG5, IgG6, IgG7, IgG8, IgG9, IgGlO, IgGll, IgG12, IgG13, IgG14, IgG15, IgG16, IgG17, IgG18 o IgG19.

Los anticuerpos humanizados están diseñados para contener aun más dominios de inmunoglobulina de tipo humano e incorporar solo las regiones determinantes de complementariedad del anticuerpo derivado de animal. Esto se logra examinando cuidadosamente la secuencia de los bucles hipervariables de las regiones variables del anticuerpo monoclonal y adecuándolos a la estructura de las cadenas de anticuerpo humanas. Aunque el proceso parezca complejo, es sencillo en la práctica. Véase, por ejemplo, la patente de EUA No. 6,187,287, incorporada a la presente en su totalidad a modo de referencia.

Además de inmunoglobulinas completas (o sus equivalentes recombinantes) pueden sintetizarse fragmentos de inmunoglobulina que comprenden el sitio de unión al epitopo (por ejemplo, Fab' , F(ab')2 u otros fragmentos). Se pueden diseñar "fragmentos" o inmunoglobulinas mínimas utilizando técnicas de inmunoglobulinas recombinantes . Por ejemplo, las inmunoglobulinas "Fv" para uso en la presente invención se pueden producir sintetizando una región de cadena ligera variable fusionada y una región de cadena pesada variable. También son de interés las combinaciones de anticuerpos, por ejemplo, los diacuerpos, que comprenden dos especificidades de Fv distintas. En otra modalidad de la invención, los SMIP (productos farmacéuticos inmunológicos de molécula pequeña) , los anticuerpos de camélidos, los nanoanticuerpos y los IgNAR están comprendidos en los fragmentos de inmunoglobulina.

Las inmunoglobulinas y los fragmentos de las mismas pueden modificarse postraduccionalmente, por ejemplo, para agregar restos efectores tales como enlaces químicos, restos detectables, tales como tintes fluorescentes, enzimas, toxinas, sustratos, materiales bioluminiscentes, materiales radiactivos, restos quimioluminiscentes y similares o pueden utilizarse los restos de unión específicos, tales como estreptavidina, avidina o biotina y similares en los métodos y las composiciones de la presente invención. En lo sucesivo se proporcionan ejemplos de moléculas efectoras adicionales.

El término "levadura poliploide que expresa de manera estable o expresa un polipéptido heterólogo secretado deseado durante un tiempo prolongado" se refiere a un cultivo de levadura que secreta dicho polipéptido durante al menos varios días hasta una semana, más preferentemente, al menos un mes, aun más preferentemente, al menos 1-6 meses y, aun más preferentemente, durante más de un año a niveles umbral de expresión, típicamente al menos 10-25 mg/litro y, preferentemente, considerablemente mayores.

El término "cultivo de levadura poliploide que secreta cantidades deseadas de polipéptido recombinante" se refiere a cultivos que secretan de manera estable o durante períodos prolongados al menos 10-25 mg/litro de polipéptido heterólogo, más preferentemente, al menos 50-500 mg/litro y, más preferentemente, 500-1000 mg/litro o más.

Una secuencia de polinucleótidos "se corresponde" con una secuencia de polipéptidos si la traducción de la secuencia de polinucleótidos de acuerdo con el código genético produce la secuencia de polipéptidos (es decir, la secuencia de polinucleótidos "codifica" la secuencia de polipéptidos) ; una secuencia de polinucleótidos "se corresponde" con otra secuencia de polinucleótidos si las dos secuencias codifican la misma secuencia de polipéptidos.

Una región o un dominio "heterólogo" de una construcción de ADN es un segmento identificable de ADN dentro de una molécula de ADN más grande que no se encuentra asociado a la molécula más grande en la naturaleza. Por consiguiente, cuando la región heteróloga codifica un gen de mamífero, el gen en general estará flanqueado por el ADN que no flanquea el ADN genómico de mamífero en el genoma del organismo original. Otro ejemplo de una región heteróloga es una construcción en la que la secuencia de codificación misma no se encuentra en la naturaleza (por ejemplo, un ADNc donde la secuencia de codificación genómica contiene intrones o secuencias sintéticas que poseen codones diferentes al gen nativo) . Las variaciones alélicas o los eventos mutacionales de origen natural no generan una región heteróloga de ADN como se define en la presente .

Una "secuencia de codificación" es una secuencia dentro del marco de codones que (en vista del código genético) se corresponde con o codifica una secuencia de péptido o proteina. Dos secuencias de codificación se corresponden entre si si las secuencias o sus secuencias complementarias codifican las mismas secuencias de aminoácidos. Una secuencia de codificación asociada a secuencias reguladoras apropiadas puede transcribirse y traducirse en un polipéptido. Una señal de poliadenilación y una secuencia de terminación de transcripción en general estarán situadas 3' con respecto a la secuencia de codificación. Una "secuencia promotora" es una región reguladora de ADN que puede unirse a la ARN polimerasa en una célula e iniciar la transcripción de una secuencia de codificación corriente abajo (dirección 3')· Las secuencias promotoras típicamente contienen sitios adicionales para unir moléculas reguladoras (por ejemplo, factores de transcripción) que afectan la transcripción de la secuencia de codificación.

Una secuencia de codificación está "bajo el control" de la secuencia promotora o "unida operativamente" al promotor cuando la ARN polimerasa enlaza la secuencia promotora en una célula y transcribe la secuencia de codificación en ARNm, la cual luego se traduce a su vez en la proteina codificada por la secuencia de codificación.

Los vectores se usan para introducir una sustancia extraña, tal como ADN, ARN o proteina en un organismo o una célula hospedadora. Los vectores típicos incluyen virus recombinantes (para polinucleótidos) y liposomas u otros agregados de lípidos (para polipéptidos y/o polinucleótidos) . Un "vector de ADN" es un replicón, tal como un plásmido, fago o cósmido, al que se le puede unir otro segmento de polinucleótido para provocar la replicación del segmento unido. Un "vector de expresión" es un vector de ADN que contiene secuencias reguladoras que dirigirán la síntesis de polipéptidos mediante una célula hospedadora apropiada. Esto en general significa un promotor para unir la ARN polimerasa e iniciar la transcripción de ARNm, así como sitios de unión a ribosomas y señales de iniciación para dirigir la traducción del ARNm en un o unos polipéptidos. La incorporación de una secuencia de polinucleótido en un vector de expresión en el sitio apropiado y en el marco de lectura correcto, seguido por la transformación de una célula hospedadora apropiada por el vector permiten la producción de un polipéptido codificado por dicha secuencia de polinucleótidos . Los ejemplos de vectores de expresión y técnicas para su uso se describen en las siguientes publicaciones: Oíd et al., Principies of Gene Manipulation: An Introduction to Genetic Engineering, Blackwell Scientific Publications, 4a edición, 1989; Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2a edición, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989; Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3a Edición, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001; Gorman, "High Efficiency Gene Transfer into Mammalian Cells," in DNA Cloning, Volumen II, Glover, D. M., Ed., IRL Press, Washington, D.C., pp. 143 190 (1985).

Por ejemplo, un liposoma u otro agregado lipidico puede comprender un lipido, tal como fosfatidilcolinas (lecitinas) (PC), fosfatidiletanolaminas (PE), lisolecitinas, lisofosfatidiletanolaminas, fosfatidilserinas (PS), fosfatidilgliceroles (PG), fosfatidilinositol (PI) , esfingomielinas, cardiolipina, ácidos fosfatidicos (PA), ácidos grasos, gangliósidos, glucolipidos, glicolipidos, mono-, di o triglicéridos, ceramidas, cerebrósidos y combinaciones de los mismos; un lipido catiónico (u otro anfifilo catiónico) tal como 1, 2-dioleiloxi-3- (trimetilamino) propano (DOTAP), N-colesteriloxicarbaril-3, 7, 12-triazapentadecan-l, 15-diamina (CTAP) , bromuro de N- [1- (2, 3, -ditetradeciloxi) propil] -N, -dimetil-N-hidroxietilamonio (DMRIE), bromuro de N-[l-(2,3,-dioleiloxi) propil] -N, -dimetil-N-hidroxi etilamonio (DORIE) , cloruro de N- [1- (2, 3-dioleiloxi) propil] -N, N, N-trimetilamonio (DOTMA), 3 beta [N- (N ' , 1 -dimetilaminoetano) carbamoilo] colesterol (DC-Choi) y dimetildioctadecilamonio (DDAB) , dioleoilfosfatidil etanolamina (DOPE) , DOPC que contiene colesterol y combinaciones de los mismos y/o un polímero hidrofilico tal como polivinilpirrolidona, polivinilmetiléter, polimetiloxazolina, polietiloxazolina, polihidroxipropiloxazolina, polihidroxipropilmetacrilamida, polimetacrilamida, polidimetilacrilamida, polihidroxipropilmetacrilato, polihidroxietilacrilato, hidroximetilcelulosa, hidroxietilcelulosa, polietileneglicol, poliaspartamida y combinaciones de los mismos. Otros lípidos catiónicos adecuados se describen en Miller, Angew. Chem. Int. Ed. 37:1768 1785 (1998), y Cooper et al., Chem. Eur. J. 4(1): 137 151 (1998) . Los liposomas pueden estar reticulados, parcialmente reticulados o no reticulados. Los liposomas reticulados pueden incluir componentes reticulados asi como no reticulados. Las citofectinas o liposomas catiónicos adecuados se encuentran comercialmente disponibles y también pueden prepararse tal como se describe en Sipkins et al., Nature Medicine, 1998, 4 (5): (1998), 623 626 o se describe en Miller, anteriormente. Los ejemplos de liposomas incluyen un lípido neutral o zwiteriónico polimerizable, un lípido que se dirige a la integrina polimerizable y un lípido catiónico polimerizable adecuado para unión de un ácido nucleico. Los liposomas pueden incluir opcionalmente péptidos que proporcionan mayor eficacia, por ejemplo, como se describe en la patente de EUA No. 7,297,759. Adicionalmente, los ejemplos de liposomas y otros agregados lipidíeos se describen en la patente de EUA No. 7,166,298.

La "amplificación" de secuencias de polinucleótidos es la producción in vitro de copias múltiples de una secuencia de ácido nucleico particular. La secuencia amplificada está, en general, en forma de ADN. Una variedad de técnicas para llevar a cabo dicha amplificación se describe en una reseña de Van Brunt (1990, Bio/Technol . , 8 ( 4 ) : 291-294 ) . La reacción en cadena de la polimerasa o PCR es un prototipo de amplificación de ácido nucleico y el uso de PCR en la presente debería considerarse un ejemplo de otras técnicas de amplificación adecuadas.

Actualmente, se entiende bien la estructura general de anticuerpos en vertebrados (Edelman, G. M., Ann. N.Y. Acad. Sci, 190: 5 (1971)). Los anticuerpos consisten en dos cadenas ligeras de polipéptidos idénticas con un peso molecular de aproximadamente 23,000 daltons (la "cadena ligera") y dos cadenas pesadas idénticas con un peso molecular de 53,000-70,000 (la "cadena pesada"). Las cuatro cadenas se juntan mediante uniones de disulfuro en una configuración "Y" donde las cadenas ligeras agrupan las cadenas pesadas comenzando en la boca de la configuración "Y". La porción "rama" de la configuración "Y" se designa como región Fab; la porción tallo de la configuración "Y" se designa como región Fe. La orientación de la secuencia de aminoácidos va desde el extremo N-terminal al comienzo de la configuración "Y" hasta el extremo C-terminal al final de cada cadena. El extremo N-terminal posee la región variable que tiene especificidad para el antigeno que lo provocó y tiene aproximadamente 100 aminoácidos de longitud. No obstante, existen pequeñas variaciones entre la cadena ligera y pesada, así como de anticuerpo a anticuerpo.

La región variable se enlaza en cada cadena a una región constante que se extiende en la longitud restante de la cadena y que dentro de una clase particular de anticuerpo no varía con la especificidad del anticuerpo (es decir, el antígeno que lo provoca) . Hay cinco clases principales conocidas de regiones constantes que determinan la clase de molécula de inmunoglobulina (IgG, IgM, IgA, IgD e IgE que corresponden a las regiones constantes de cadena pesada ?, µ, OÍ, d, y e (gamma, mu, alfa, delta o epsilon) . La región o clase constante determina la función efectora posterior del anticuerpo, que incluye la activación de complemento (Kabat, E. A. , Structural Concepts in Immunology and Immunochemistry, 2a Ed., p. 413-436, Holt, Rinehart, Winston (1976)), y otras respuestas celulares (Andrews, D. W., et al., Clinical Immunobiology, pp 1-18, W. B. Sanders (1980); Kohl, S., et al., Immunology, 48: 187 (1983)), mientras que la región variable determina el antigeno con el cual reaccionará. Las cadenas ligeras se clasifican como (kappa) o ? (lambda) . Cada clase de cadena pesada puede emparejarse con una cadena ligera kappa o lambda. Las cadenas ligera y pesada están covalentemente enlazadas entre si y las porciones de "cola" de las dos cadenas pesadas están enlazadas entre si por medio de enlaces disulfuro covalentes cuando las inmunoglobulinas son generadas por hibridomas o por linfocitos B.

La expresión "región variable" o "VR" se refiere a los dominios dentro de cada par de cadenas ligera y pesada en un anticuerpo que están directamente involucrados en la unión del anticuerpo al antigeno. Cada cadena pesada tiene en un extremo un dominio variable (VH) seguido por una cantidad de dominios constantes. Cada cadena ligera tiene un dominio variable (VL) en un extremo y un dominio constante en su otro extremo, el dominio constante de la cadena ligera está alineado con el primer dominio constante de la cadena pesada y el dominio variable de cadena ligera está alineado con el dominio variable de la cadena pesada.

Las expresiones "región determinante de complementariedad", "región hipervariable" o "CDR" refieren a una o más de las regiones determinantes de complementariedad (CDR) o hiper variables que se encuentran en las regiones variables de las cadenas ligera o pesada de un anticuerpo (Véase Kabat, E. A. et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda, Md., (1987)). Estas expresiones incluyen regiones hipervariables tal como se define en Kabat et al. ("Sequences of Proteins of Immunological Interest," Kabat E., et al., US Dept . of Health and Human Services, 1983) o los bucles hipervariables en estructuras tridimensionales de anticuerpos (Chothia and Lesk, J Mol. Biol. 196 901-917 (1987)). Las CDR de cada cadena se mantienen a gran proximidad mediante regiones flanqueantes y, con las CDR de la otra cadena, contribuyen a la formación del sitio de unión al antigeno. Dentro de las CDR hay aminoácidos selectos que han sido descritos como las regiones determinantes de selectividad (SDR) que representan los residuos de contacto críticos usados por las CDR en la interacción anticuerpo-antígeno (Kashmiri, S., Methods, 36:25-34 (2005)).

Las expresiones "región flanqueante" o "FR" refieren a una o más de las regiones flanqueantes dentro de las regiones variables de las cadenas ligera o pesada de un anticuerpo (Véase Kabat, E. A. et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda, Md., (1987)). Estas expresiones incluyen las regiones de secuencias de aminoácidos interpuestas entre las CDR dentro de las regiones variables de las cadenas ligera y pesada de un anticuerpo.

Anticuerpos anti-IL-6 y fragmentos de unión de los mismos La invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYD TQTPASVSAAVGGTVTIKCQASQSINNELSWYQQKPG QRPKLLIYRASTLASGVSSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQQGYSLRNIDNAFGGG TEVVVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNN (SEQ ID NO: 2) o AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQSINNELS YQQKPGKAPKLLIYRASTLASGVPSRFS GSGSGTDFTLTISSLQPDDFATYYCQQGYSLRNIDNAFGGGTKVEIKR (SEQ ID NO: 709) .

La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSNYYVT VRQAPG GL EWIGIIYGSDETAYATWAIGRFTISKTSTTVDLKMTSLTAADTATYFCARDDSSDWDAKFNLW GQGTLVTVSSAST GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLV (SEQ ID NO: 3) o EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSLSNYYVTWVRQAPGKGLEWVGIIYGSDETAYATSA IGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDDSSD DAKFNLWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 657) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 4/ SEQ ID NO: 5 y SEQ ID NO: 6 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 2 o 709, y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 7; SEQ ID NO: 8 y SEQ ID NO: 9 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 3 o 657 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 4; SEQ ID NO: 5 y SEQ ID NO: 6 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: ' 2 o 709, y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 7; SEQ ID NO: 8 y SEQ ID NO: 9 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 3 o 657 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 2 o 657. En otra modalidad de ¦ la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 3 o 709.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 4; SEQ ID NO: 5 y SEQ ID NO: 6 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: 709.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 7; SEQ ID NO: 8 y SEQ ID NO: 9 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 3 y la SEQ ID NO: 657.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 2 o 709; la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 3 o 657; las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 4; SEQ ID NO: 5 y SEQ ID NO: 6) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 2 o 709; y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 7; SEQ ID NO: 8 y SEQ ID NO: 9) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 657.

La invención también contempla variantes donde cualquiera de las secuencias de polipéptidos de cadena pesada de la SEQ ID NO: 18 o SEQ ID NO: 19 sustituyen a la secuencia de polipéptidos de cadena pesada de la SEQ ID NO: 3 o 657, la secuencia de polipéptido de cadena ligera de la SEQ ID NO: 20 sustituye a la secuencia de polipéptidos de cadena ligera de la SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: 709 y la secuencia de CDR de cadena pesada de SEQ ID NO: 120 sustituye a la secuencia de CDR de cadena pesada de SEQ ID NO: 8.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Abl, que comprende la SEQ ID NO: 2 y la SEQ ID NO: 3, o un anticuerpo que comprende la SEQ ID NO: 657 y SEQ ID NO: 709 (que están respectivamente codificadas por las secuencias de ácido nucleico en la SEQ ID NO: 700 y SEQ ID NO: 723) o uno comprendido de las secuencias SEQ ID NO alternativas establecidas en el párrafo anterior, o comprendido en las Figuras 34-37 y que tiene al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYD TQTPASVEVAVGGTVTINCQASETIYS LSWYQQ PG QPPKLLIYQASDLASGVPSRFSGSGAGTEYTLTISGVQCDDAATYYCQQGYSGSNVDNVFGGG TEVWKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFY (SEQ ID NO: 21) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQEQLKESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLNDHAMGWVRQAPGKG LEYIGFINSGGSARYASWAEGRFTISRTSTTVDLKMTSLTTEDTATYFCVRGGAVWSIHSFDP WGPGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK (SEQ ID NO: 22) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 23; SEQ ID NO: 24 y SEQ ID NO: 25 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 21 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 26; SEQ ID NO: 27 y SEQ ID NO: 28 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 22 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 23; SEQ ID NO: 24 y SEQ ID NO: 25 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 21 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 26; SEQ ID NO: 27 y SEQ ID NO: 28 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 22 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 21. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 22.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 23; SEQ ID NO: 24 y SEQ ID NO: 25 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 21.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 26; SEQ ID NO: 27 y SEQ ID NO: 28 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 22.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dós, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 21, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 22, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 23; SEQ ID NO: 24 y SEQ ID NO: 25) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 21 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 26; SEQ ID NO: 27 y SEQ ID NO: 28) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 22.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab2 que comprende la SEQ ID NO: 21 y la SEQ ID NO: 22, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVSISCQASQSVYDNNYLSWFQQK PGQPPKLLIYGASTLASGVPSRFVGSGSGTQFTLTITDVQCDDAATYYCAGVYDDDSDNAFGG GTEVW RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNN (SEQ ID NO: 37) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: ETGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSVYYMNWVRQAPG GL EWIGFITMSDNINYAS AKGRFTISKTSTTVDLKMTSPTTEDTATYFCARSRGWGTMGRLDLW GPGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLV (SEQ ID NO: 38) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 39; SEQ ID NO: 40 y SEQ ID NO: 41 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 37 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 42; SEQ ID NO: 4.3 y SEQ ID NO: 44 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 38 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 39; SEQ ID NO: 40 y SEQ ID NO: 41 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 37 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 42; SEQ ID NO: 43 y SEQ ID NO: 44 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 38 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 37. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 38.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 39; SEQ ID NO: 40 y SEQ ID NO: 41 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 37.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 42; SEQ ID NO: 43 y SEQ ID NO: 44 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 38.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 37, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 38, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 39; SEQ ID NO: 40 y SEQ ID NO: 41) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 37 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 42; SEQ ID NO: 43 y SEQ ID NO: 44) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 38. .

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab3 que comprende la SEQ ID NO: 37 y la SEQ ID NO: 38, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: DTRAPTQLLGLLLL LPGAICDPVLTQTPSPVSAPVGGTVSISCQASQSVYENNYLSWFQQK PGQPPKLLIYGASTLDSGVPSRFKGSGSGTQFTLTITDVQCDDAATYYCAGVYDDDSDDAFGG GTEWV RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNN (SEQ ID NO: 53) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQEQLKESGGGLVTPGGTLTLTCTASGFSLNAYYMNWVRQAPGKG LEWIGFITLNNNVAYANWAKGRFTFSKTSTTVDL MTSPTPEDTATYFCARSRGWGAMGRLDL GHGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK (SEQ ID NO: 54) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 55; SEQ ID NO: 56 y SEQ ID NO: 57 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 53 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 58; SEQ ID NO: 59 y SEQ ID NO: 60 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 54 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 55; SEQ ID NO: 56 y SEQ ID NO: 57 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 53 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 58; SEQ ID NO: 59 y SEQ ID NO: 60 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 54 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 53. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 54.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 55; SEQ ID NO: 56 y SEQ ID NO: 57 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 53.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 58; SEQ ID NO: 59 y SEQ ID NO: 60 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 54.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 53, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 54, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 55; SEQ ID NO: 56 y SEQ ID NO: 57) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 53 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 58; SEQ ID NO: 59 y SEQ ID NO: 60) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 54.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab4 que comprende la SEQ ID NO: 53 y la SEQ ID NO: 54, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAQVLTQTPSPVSAAVGGTVTINCQASQSVDDNNWLGWYQQK RGQPPKYLIYSASTLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISDLECDDAATYYCAGGFSGNIFAFGGG TEVWKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNF (SEQ ID NO: 69) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: ETGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYAMSWVRQAPGKGL EWIGIIGGFGTTYYAT AKGRFTIS TSTTVDLRITSPTTEDTATYFCARGGPGNGGDIWGQG TLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKD (SEQ ID NO: 70) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 71; SEQ ID NO: 72 y SEQ ID NO: 73 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 69 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 74; SEQ ID NO: 75 y SEQ ID NO: 76 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 70 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 71; SEQ ID NO: 72 y SEQ ID NO: 73 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 69 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 74; SEQ ID NO: 75 y SEQ ID NO: 76 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 70 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 69. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 70.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 71; SEQ ID NO: 72 y SEQ ID NO: 73 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 69.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 74; SEQ ID NO: 75 y SEQ ID NO: 76 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 70.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 69, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 70, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 71; SEQ ID NO: 72 y SEQ ID NO: 73) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 69 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 74; SEQ ID NO: 75 y SEQ ID NO: 76) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 70.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab5 que comprende la SEQ ID NO: 69 y la SEQ ID NO: 70, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSVPVGGTVTIKCQSSQSVYNNFLSWYQQKP GQPPKLLIYQASKLASGVPDRFSGSGSGTQFTLTISGVQCDDAATYYCLGGYDDDADNAFGGG TEVWKRTVAAPSVFIFPPSDEQL SGTASVVCLLNNF (SEQ ID NO: 85) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLR LLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGIDLSDYAMSWVRQAPG GL EWIGIIYAGSGSTWYASWAKGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARDGYDDYGDFDRL DLWGPGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLV D (SEQ ID NO: 86) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 87; SEQ ID NO: 88 y SEQ ID NO: 89 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 85 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 90; SEQ ID NO: 91 y SEQ ID NO: 92 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 86 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 87; SEQ ID NO: 88 y SEQ ID NO: 89 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 85 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 90; SEQ ID NO: 91 y SEQ ID NO: 92 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 86 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 85. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 86.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 87; SEQ ID NO: 88 y SEQ ID NO: 89 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 85.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 90; SEQ ID NO: 91 y SEQ' ID NO: 92 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 86.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 85, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 86, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 87; SEQ ID NO: 88 y SEQ ID NO: 89) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 85 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 90; SEQ ID NO: 91 y SEQ ID NO: 92) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 86.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab6 que comprende la SEQ ID NO: 85 y la SEQ ID NO: 86, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVSAAVGGTVTIKCQASQSINNELSWYQQKSG QRPKLLIYRASTLASGVSSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQQGYSLRNIDNAFGGG TEVW RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNF (SEQ ID NO: 101) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLSGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSNYYMTWVRQAPGKGL EWIGMIYGSDETAYANWAIGRFTISKTSTTVDLK TSLTAADTATYFCARDDSSDWDAKFNLW GQGTLVTVSSAST GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK (SEQ ID NO: 102) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 103; SEQ ID NO: 104 y SEQ ID NO: 105 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 101 y/o una o más dé las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 106; SEQ ID NO: 107 y SEQ ID NO: 108 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 102 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, , la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 103; SEQ ID NO: 104 y SEQ ID NO: 105 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 101 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 106; SEQ ID NO: 107 y SEQ ID NO: 108 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 102 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 101. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 102.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 103; SEQ ID NO: 104 y SEQ ID NO: 105 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 101.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más' secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 106; SEQ ID NO: 107 y SEQ ID NO: 108 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 102.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 101, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 102, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 103; SEQ ID NO: 104 y SEQ ID NO: 105) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 101 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 106; SEQ ID NO: 107 y SEQ ID NO: 108) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 102.

La invención también contempla variantes donde cualquiera de las secuencias de polipéptidos de cadena pesada de la SEQ ID NO: 117 o SEQ ID NO: 118 sustituyen a la secuencia de polipéptidos de cadena pesada de .la SEQ ID NO: 102; la secuencia de polipéptido de cadena ligera de la SEQ ID NO: 119 sustituye a la secuencia de polipéptidos de cadena ligera de la SEQ ID NO: 101 y la secuencia de CDR de cadena pesada de la SEQ ID NO: 121 sustituye a la secuencia de CDR de cadena pesada de la SEQ ID NO: 107.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab7 que comprende la SEQ ID NO: 101 y la SEQ ID NO: 102, o las secuencias SEQ ID NO alternativas establecidas en el párrafo anterior, y que tiene al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVTISCQSSQSVGNNQDLSWFQQR PGQPP LLIYEISKLESGVPSRFSGSGSGTHFTLTISGVQCDDAATYYCLGGYDDDADNA (SEQ ID NO: 122) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCHSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSRTMSWVRQAPGKGL EWIGYIWSGGSTYYATWAKGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARLGDTGGHAYATRL NL (SEQ ID NO: 123) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 124; SEQ ID NO: 125 y SEQ ID NO: 126 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 122 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 127; SEQ ID NO: 128 y SEQ ID NO: 129 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 123 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 124; SEQ ID NO: 125 y SEQ ID NO: 126 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 122 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 127; SEQ ID NO: 128 y SEQ ID NO: 129 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 123 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 122. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 123.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 124; SEQ ID NO: 125 y SEQ ID NO: 126 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 122.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 127; SEQ ID NO: 128 y SEQ ID NO: 129 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 123.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 122, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 123, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 124; SEQ ID NO: 125 y SEQ ID NO: 126) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 122 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 127; SEQ ID NO: 128 y SEQ ID NO: 129) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 123.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab8 que comprende la SEQ ID NO: 122 y la SEQ ID NO: 123, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSSVSAAVGGTVSISCQSSQSVYSN YLAWYQQK PGQPP LLIYWTS LASGAPSRFSGSGSGTQFTLTISGVQCDDAATYYCLGAYDDDADNA (SEQ ID NO: 138) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVKPDETLTLTCTASGFSLEGGYMTWVRQAPGKGL EWIGISYDSGSTYYAS AKGRFTISKTSSTTVDLKMTSLTTEDTATYFCVRSL YPTVTSDDL (SEQ ID NO: 139) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 140; SEQ ID NO: 141 y SEQ ID NO: 142 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 138 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 143; SEQ ID NO: 144 y SEQ ID NO: 145 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 139 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 140; SEQ ID NO: 141 y SEQ ID NO: 142 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SÉQ ID NO: 138 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 143; SEQ ID NO: 144 y SEQ ID NO: 145 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 139 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 138. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 139.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 140; SEQ ID NO: 141 y SEQ ID NO: 142 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 138.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 143; SEQ ID NO: 144 y SEQ ID NO: 145 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 139.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 138, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 139, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 140; SEQ ID NO: 141 y SEQ ID NO: 142) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 138 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 143; SEQ ID NO: 144 y SEQ ID NO: 145) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 139.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab9 que comprende la SEQ ID NO: 138 y la SEQ ID NO: 139, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVTISCQSSQSVYNNNDLAWYQQK PGQPPKLLIYYASTLASGVPSRF GSGSGTQFTLTISGVQCDDAAAYYCLGGYDDDADNA (SEQ ID NO: 154) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGLSLSSNTINWVRQAPG GL E IGYIWSGGSTYYASWVNGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARGGYASGGYPYATR LDL (SEQ ID NO: 155) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 156; SEQ ID NO: 157 y SEQ ID NO: 158 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 154 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 159; SEQ ID NO: 160 y SEQ ID NO: 161 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 155 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 156; SEQ ID NO: 157 y SEQ ID NO: 158 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 154 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 159; SEQ ID NO: 160 y SEQ ID NO: 161 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 155 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 154. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 155.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 156; SEQ ID NO: 157 y SEQ ID NO: 158 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 154.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 159; SEQ ID NO: 160 y SEQ ID NO: 161 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 155.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 154, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 155, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 156; SEQ ID NO: 157 y SEQ ID NO: 158) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 154 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 159; SEQ ID NO: 160 y SEQ ID NO: 161) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 155.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es AblO que comprende la SEQ ID NO: 154 y la SEQ ID NO: 155, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación : MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSSVSAAVGGTVTINCQSSQSVYNNDYLSWYQQR PGQRPKLLIYGAS LASGVPSRFKGSGSG QFTLTISGVQCDDAATYYCLGDYDDDADNT (SEQ ID NO: 170) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFTLSTNYYLSWVRQAPGKG LEWIGI IYPSGNTYCAKWAKGRFTISKTSSTTVDLK TSPTTEDTATYFCARNYGGDESL (SEQ ID NO: 171) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 172; SEQ ID NO: 173 y SEQ ID NO: 174 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 170 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 175; SEQ ID NO: 176 y SEQ ID NO: 177 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 171 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 172; SEQ ID NO: 173 y SEQ ID NO: 174 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 170 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 175; SEQ ID NO: 176 y SEQ ID NO: 177 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 171 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 170. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 171.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 172; SEQ ID NO: 173 y SEQ ID NO: 174 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 170.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 175; SEQ ID NO: 176 y SEQ ID NO: 177 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 171.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 170, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 171, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 172; SEQ ID NO: 173 y SEQ ID NO: 174) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 170 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 175; SEQ ID NO: 176 y SEQ ID NO: 177) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 171.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Abll que comprende la SEQ ID NO: 170 y la SEQ ID NO: 171, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCDVVMTQTPASVEAAVGGTVTIKCQASETIGNALAWYQQKSG QPPKLLIYKASKLASGVPSRFKGSGSGTEYTLTISDLECADAATYYCQWCYFGDSV (SEQ ID NO: 186) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVTVLKGVQCQEQLVESGGGLVQPEGSLTLTCTASGFDFSSGYYMCWVRQAPGK GLEWIACIFTITTNTYYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYLCARGIYSDNNYY AL (SEQ ID NO: 187) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 188; SEQ ID NO: 189 y SEQ ID NO: 190 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 186 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 191; SEQ ID NO: 192 y SEQ ID NO: 193 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 187 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 188; SEQ ID NO: 189 y SEQ ID NO: 190 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 186 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 191; SEQ ID NO: 192 y SEQ ID NO: 193 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 187 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 186. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 187.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 188; SEQ ID NO: 189 y SEQ ID NO: 190 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 186.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 191; SEQ ID NO: 192 y SEQ ID NO: 193 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 187.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 186, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 187, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 188; SEQ ID NO: 189 y SEQ ID NO: 190) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 186 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 191; SEQ ID NO: 192 y SEQ ID NO: 193) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 187.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Abl2 que comprende la SEQ ID NO: 186 y la SEQ ID NO: 187, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCDWMTQTPASVEAAVGGTVTI CQASESIGNALAWYQQKPG QPP LLIYKASTLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISGVQCADAAAYYCQWCYFGDSV (SEQ ID NO: 202) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: ETGLRWLLLVAVLKGVQCQQQLVESGGGLVKPGASLTLTCKASGFSFSSGYYMCWVRQAPGK GLESIACIFTITDNTYYANWAKGRFTISKPSSPTVTLQ TSLTAADTATYFCARGIYSTDNYY AL (SEQ ID NO: 203) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 205 y SEQ ID NO: 206 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 202 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 207; SEQ ID NO: 208 y SEQ ID NO: 209 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 203 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 205 y SEQ ID NO: 206 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 202 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 207; SEQ ID NO: 208 y SEQ ID NO: 209 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 203 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 202. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 203.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 205 y SEQ ID NO: 206 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 202.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 207; SEQ ID NO: 208 y SEQ ID NO: 209 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 203.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 202, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 203, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 205 y SEQ ID NO: 206) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 202 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 207; SEQ ID NO: 208 y SEQ ID NO: 209) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 203.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Abl3 que comprende la SEQ ID NO: 202 y la SEQ ID NO: 203, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCDVVMTQTPASVEAAVGGTVTIKCQASQSVSSYLN YQQ PG QPPKLLIYRASTLESGVPSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQCTYGTSSSYJ3AA (SEQ ID NO: 218) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGISLSSNAISWVRQAPGKGL EWIGIISYSGTTYYASWA GRFTISKTSSTTVDL ITSPTTEDTATYFCARDDPTTVMVMLIP FGAGMDL (SEQ ID NO: 219).

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 220; SEQ ID NO: 221 y SEQ ID NO: 222 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 218 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 223; SEQ ID NO: 224 y SEQ ID NO: 225 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 219 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 220; SEQ ID NO: 221 y SEQ ID NO: 222 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 218 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 223; SEQ ID NO: 224 y SEQ ID NO: 225 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 219 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 218. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 219.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 220; SEQ ID NO: 221 y SEQ ID NO: 222 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 218.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 223; SEQ ID NO: 224 y SEQ ID NO: 225 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 219.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 218, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 219, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 220; SEQ ID NO: 221 y SEQ ID NO: 222) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 218 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 223; SEQ ID NO: 224 y SEQ ID NO: 225) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 219.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Abl4 que comprende la SEQ ID NO: 218 y la SEQ ID NO: 219, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: DTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAQVLTQTASPVSAAVGGTVTINCQASQSVYKNNYLSWYQQK PGQPPKGLIYSASTLDSGVPLRFSGSGSGTQFTLTISDVQCDDAATYYCLGSYDCSSGDCYA (SEQ ID NO: 234) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGDLVKPEGSLTLTCTASGFSFSSYWMCWVRQAPGKGL E IACIVTGNGNTYYANWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCAKAYDL (SEQ ID NO: 235) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 236; SEQ ID NO: 237 y SEQ ID NO: 238 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 234 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 239; SEQ ID NO: 240 y SEQ ID NO: 241 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 235 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 236; SEQ ID NO: 237 y SEQ ID NO: 238 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 234 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 239; SEQ ID NO: 240 y SEQ ID NO: 241 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 235 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 234. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 235.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 236; SEQ ID NO: 237 y SEQ ID NO: 238 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 234.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 239; SEQ ID NO: 240 y SEQ ID NO: 241 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 235.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 234, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 235, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 236; SEQ ID NO: 237 y SEQ ID NO: 238) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 234 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 239; SEQ ID NO: 240 y SEQ ID NO: 241) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 235.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Abl5 que comprende la SEQ ID NO: 234 y la SEQ ID NO: 235, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGSTFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVSISCQASQSVYDNNYLSWYQQK PGQPPKLLIYGASTLASGVPSRF GTGSGTQFTLTITDVQCDDAATYYCAGVFNDDSDDA (SEQ ID NO: 250) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVPKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTLSGFSLSAYY SWVRQAPGKGL EWIGFITLSDHISYAR AKGRFTISKTSTTVDLKMTSPTTEDTATYFCARSRGWGAMGRLDL (SEQ ID NO: 251) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 252; SEQ ID NO: 253 y SEQ ID NO: 254 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 250 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 255; SEQ ID NO: 256 y SEQ ID NO: 257 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 251 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 252; SEQ ID NO: 253 y SEQ ID NO: 254 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 250 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 255; SEQ ID NO: 256 y SEQ ID NO: 257 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 251 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-ß. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 250. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 251.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 252; SEQ ID NO: 253 y SEQ ID NO: 254 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 250.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 255; SEQ ID NO: 256 y SEQ ID NO: 257 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 251.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 250, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 251, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 252; SEQ ID NO: 253 y SEQ ID NO: 254) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 250 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 255; SEQ ID NO: 256 y SEQ ID NO: 257) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 251.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Abl6 que comprende la SEQ ID NO: 250 y la SEQ ID NO: 251, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVTISCQASQSVYNNKNLAWYQQK SGQPPKLLIYWASTLASGVSSRFSGSGSGTQFTLTVSGVQCDDAATYYCLGVFDDDADNA (SEQ ID NO: 266) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSSYSMTWVRQAPGKGL EYIGVIGTSGSTYYATWAKGRFTISRTSTTVALKITSPTTEDTATYFCVRSLSSITFL (SEQ ID NO: 267) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 268; SEQ ID NO: 269 y SEQ ID NO: 270 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 266 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 271; SEQ ID NO: 272 y SEQ ID NO: 273 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 267 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 268; SEQ ID NO: 269 y SEQ ID NO: 270 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 266 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 271; SEQ ID NO: 272 y SEQ ID NO: 273 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 267 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 266. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 267.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 268; SEQ ID NO: 269 y SEQ ID NO: 270 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 266.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 271; SEQ ID NO: 272 y SEQ ID NO: 273 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 267.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 266, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 267, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 268; SEQ ID NO: 269 y SEQ ID NO: 270) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 266 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 271; SEQ ID NO: 272 y SEQ ID NO: 273) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 267.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Abl7 que comprende la SEQ ID NO: 266 y la SEQ ID NO: 267, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAFELTQTPASVEAAVGGTVTINCQASQNIYRYLAWYQQKPG QPPKFLIYLASTLASGVPSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQSYYSSNSVA (SEQ ID NO: 282) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQEQLVESGGDLVQPEGSLTLTCTASELDFSSGYWIC VRQVPGK GLEWIGCIYTGSSGSTFYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARGYSGFGYF KL (SEQ ID NO: 283) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 284; SEQ ID NO: 285 y SEQ ID NO: 286 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 282 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 287; SEQ ID NO: 288 y SEQ ID NO: 289 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 283 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 284; SEQ ID NO: 285 y SEQ ID NO: 286 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 282 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 287; SEQ ID NO: 288 y SEQ ID NO: 289 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 283 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 282. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 283.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 284; SEQ ID NO: 285 y SEQ ID NO: 286 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 282.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 287; SEQ ID NO: 288 y SEQ ID NO: 289 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 283.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 282, la región de .cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 283, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 284; SEQ ID NO: 285 y SEQ ID NO: 286) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 282 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 287; SEQ ID NO: 288 y SEQ ID NO: 289) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 283.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Abl8 que comprende la SEQ ID NO: 282 y la SEQ ID NO: 283, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVEVAVGGTVTIKCQASEDIYRLLAWYQQKPG QPPKLLIYDSSDLASGVPSRFKGSGSGTEFTLAISGVQCDDAATYYCQQAWSYSDIDNA (SEQ ID NO: 298) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSSYYMSWVRQAPGKGL EWIGIITTSGNTFYASWAKGRLTISRTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARTSDIFYYRNL (SEQ ID NO: 299) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 300; SEQ ID NO: 301 y SEQ ID NO: 302 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 298 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 303; SEQ ID NO: 304 y SEQ ID NO: 305 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 299 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 300; SEQ ID NO: 301 y SEQ ID NO: 302 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 298 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 303; SEQ ID NO: 304 y SEQ ID NO: 305 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 299 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 298. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 299.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 300/ SEQ ID NO: 301 y SEQ ID NO: 302 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 298.

En una modalidad adicional de . la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 303; SEQ ID NO: 304 y SEQ ID NO: 305 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 299.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 298, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 299, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 300; SEQ ID NO: 301 y SEQ ID NO: 302) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 298 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 303; SEQ ID NO: 304 y SEQ ID NO: 305) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 299.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Abl9 que comprende la SEQ ID NO: 298 y la SEQ ID NO: 299, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida¦ a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTASPVSAAVGATVTINCQSSQSVYND DLAWFQQK PGQPP LLIYSASTLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISGVQCDDAATYYCLGAFDDDADNT (SEQ ID NO: 314) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLTRHAITWVRQAPGKGL E IGCIWSGGSTYYATWAKGRFTISKTSTTVDLRITSPTTEDTATYFCARVIGDTAGYAYFTG LDL (SEQ ID NO: 315) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 316; SEQ ID NO: 317 y SEQ ID NO: 318 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 314 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 319; SEQ ID NO: 320 y SEQ ID NO: 321 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 315 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 316; SEQ ID NO: 317 y SEQ ID NO: 318 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 314 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 319; SEQ ID NO: 320 y SEQ ID NO: 321 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 315 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 314. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 315.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 316; SEQ ID NO: 317 y SEQ ID NO: 318 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 314.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 319; SEQ ID NO: 320 y SEQ ID NO: 321 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 315.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 314, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 315, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 316; SEQ ID NO: 317 y SEQ ID NO: 318) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 314 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 319; SEQ ID NO: 320 y SEQ ID NO: 321) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 315.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab20 que comprende la SEQ ID NO: 314 y la SEQ ID NO: 315, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVEVAVGGTVTIKCQASQSVYNWLSWYQQKPG QPPKLLIYTASSLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISGVECADAATYYCQQGYTSDVDNV (SEQ ID NO: 330) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEEAGGRLVTPGTPLTLTCTVSGIDLSSYAMGWVRQAPGKGL EYIGIISSSGSTYYATWAKGRFTISQASSTTVDLKITSPTTEDSATYFCARGGAGSGGV LLD GFDP (SEQ ID NO: 331) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 332; SEQ ID NO: 333 y SEQ ID NO: 334 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 330 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 335; SEQ ID NO: 336 y SEQ ID NO: 337 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 331 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 332; SEQ ID NO: 333 y SEQ ID NO: 334 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 330 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 335; SEQ ID NO: 336 y SEQ ID NO: 337 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 331 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 330. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 331.

En una modalidad adicional de la invención,' los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 332; SEQ ID NO: 333 y SEQ ID NO: 334 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 330.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 335; SEQ ID NO: 336 y SEQ ID NO: 337 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 331.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 330, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 331, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 332; SEQ ID NO: 333 y SEQ ID NO: 334) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 330 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 335; SEQ ID NO: 336 y SEQ ID NO: 337) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 331.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab21 que comprende la SEQ ID NO: 330 y la SEQ ID NO: 331, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: DTRAPTQLLGLLLLWLPGA CADWMTQTPASVSAAVGGTVTINCQASENIYN LAWYQQKP GQPPKLLIYTVGDLASGVSSRF GSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQQGYSSSYVDNV (SEQ ID NO: 346) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLR LLLVAVLKGVQCQEQLKESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLNDYAVGWFRQAPGKG LEWIGYIRSSGTTAYATWAKGRFTISATSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARGGAGSSGVWILD GFAP (SEQ ID NO: 347) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 348; SEQ ID NO: 349 y SEQ ID NO: 350 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 346 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 351; SEQ ID NO: 352 y SEQ ID NO: 353 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 347 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 348; SEQ ID NO: 349 y SEQ ID NO: 350 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 346 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 351; SEQ ID NO: 352 y SEQ ID NO: 353 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 347 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 346. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 347.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 348; SEQ ID NO: 349 y SEQ ID NO: 350 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 346.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 351; SEQ ID NO: 352 y SEQ ID NO: 353 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 347.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 346, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 347, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 348; SEQ ID NO: 349 y SEQ ID NO: 350) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 346 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 351; SEQ ID NO: 352 y SEQ ID NO: 353) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 347.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab22 que comprende la SEQ ID NO: 346 y la SEQ ID NO: 347, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAQVLTQTPSSVSAAVGGTVTINCQASQSVYQNNYLSWFQQK PGQPPKLLIYGAATLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISDLECDDAATYYCAGAYRDVDS (SEQ ID NO: 362) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGDLVKPGASLTLTCTASGFSFTSTYYIYWVRQAPGKG LE IACIDAGSSGSTYYATWVNGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCAK DYGGNVGW GYDL (SEQ ID NO: 363) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 364; SEQ ID NO: 365 y SEQ ID NO: 366 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 362 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 367; SEQ ID NO: 368 y SEQ ID NO: 369 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 363 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 364; SEQ ID NO: 365 y SEQ ID NO: 366 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 362 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 367; SEQ ID NO: 368 y SEQ ID NO: 369 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 363 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 362. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 363.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 364; SEQ ID NO: 365 y SEQ ID NO: 366 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 362.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 367; SEQ ID NO: 368 y SEQ ID NO: 369 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 363.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 362 , la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 363 , las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 364 ; SEQ ID NO: 365 y SEQ ID NO: 366 ) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 362 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 367; SEQ ID NO: 368 y SEQ ID NO: 369) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 363.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab23 que comprende la SEQ ID NO: 362 y la SEQ ID NO: 363, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: DTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAFELTQTPSSVEAAVGGTVTIKCQASQSISSYLAWYQQKPG QPPKFLIYRASTLASGVPSRF GSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQSYYDSVSNP ( SEQ ID NO: 378 ) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGDLVKPEGSLTLTC ASGLDLGTYWFMC VRQAPGKG LEWIACIYTGSSGSTFYASWVNGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARGYSGYGYFK L (SEQ ID NO: 379) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 380; SEQ ID NO: 381 y SEQ ID NO: 382 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 378 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 383; SEQ ID NO: 384 y SEQ ID NO: 385 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 379 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 380; SEQ ID NO: 381 y SEQ ID NO: 382 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 378 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 383; SEQ ID NO: 384 y SEQ ID NO: 385 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 379 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 378. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 379.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 380; SEQ ID NO: 381 y SEQ ID NO: 382 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 378.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 383; SEQ ID NO: 384 y SEQ ID NO: 385 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 379.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 378, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 379, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 380; SEQ ID NO: 381 y SEQ ID NO: 382) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 378 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 383; SEQ ID NO: 384 y SEQ ID NO: 385) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 379.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab24 que comprende la SEQ ID NO: 378 y la SEQ ID NO: 379, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGVTFAIEMTQSPFSVSAAVGGTVSISCQASQSVYKNNQLSWYQQ SGQPPKLLIYGASALASGVPSRFKGSGSGTEFTLTISDVQCDDAATYYCAGAITGSIDTDG (SEQ ID NO: 394) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: ETGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGDLVKPGASLTLTCTTSGFSFSSSYFICWVRQAPGKG LEWIACIYGGDGSTYYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCAREWAYSQGYFG AFDL (SEQ ID NO: 395) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 396; SEQ ID NO: 397 y SEQ ID NO: 398 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 394 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 399; SEQ ID NO: 400 y SEQ ID NO: 401 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 395 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 396; SEQ ID NO: 397 y SEQ ID NO: 398 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 394 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 399; SEQ ID NO: 400 y SEQ ID NO: 401 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 395 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 394. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 395.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 396; SEQ ID NO: 397 y SEQ ID NO: 398 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 394.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 399; SEQ ID NO: 400 y SEQ ID NO: 401 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 395.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 394, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 395, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 396; SEQ ID NO: 397 y SEQ ID NO: 398) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 394 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 399; SEQ ID NO: 400 y SEQ ID NO: 401) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 395.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-ß es Ab25 que comprende la SEQ ID NO: 394 y la SEQ ID NO: 395, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: DTRAPTQLLGLLLLWLPGARCDWMTQTPASVEAAVGGTVTIKCQASEDISSYLAWYQQKPG QPPKLLIYAASNLESGVSSRFKGSGSGTEYTLTISDLECADAATYYCQCTYG ISISDGNA (SEQ ID NO: 410) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: ETGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYFMTWVRQAPGEGL EYIGFINPGGSAYYASWVKGRFTIS SSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARVLIVSYGAFTI (SEQ ID NO: 411) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 412; SEQ ID NO: 413 y SEQ ID NO: 414 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 410 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 415; SEQ ID NO: 416 y SEQ ID NO: 417 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 411 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 412; SEQ ID NO: 413 y SEQ ID NO: 414 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 410 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 415; SEQ ID NO: 416 y SEQ ID NO: 417 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 411 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 410. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 411.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 412; SEQ ID NO: 413 y SEQ ID NO: 414 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 410.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 415; SEQ ID NO: 416 y SEQ ID NO: 417 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 411.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 410, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 411, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 412; SEQ ID NO: 413 y SEQ ID NO: 414) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 410 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 415; SEQ ID NO: 416 y SEQ ID NO: 417) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 411.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab26 que comprende la SEQ ID NO: 410 y la SEQ ID NO: 411, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCDVVMTQTPASVSAAVGGTVTI CQASEDIESYLA YQQKPG QPPKLLIYGASNLESGVSSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQCTYGIISISDGNA (SEQ ID NO: 426) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLR LLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYFMTWVRQAPGEGL EYIGFMNTGDNAYYASWAKGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARVLVVAYGAFNI (SEQ ID NO: 427) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 428; SEQ ID NO: 429 y SEQ ID NO: 430 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 426 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 431; SEQ ID NO: 432 y SEQ ID NO: 433 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 427 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 428; SEQ ID NO: 429 y SEQ ID NO: 430 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 426 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 431; SEQ ID NO: 432 y SEQ ID NO: 433 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 427 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 426. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 427.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 428; SEQ ID NO: 429 y SEQ ID NO: 430 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 426.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 431; SEQ ID NO: 432 y SEQ ID NO: 433 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 427.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 426, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 427, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 428; SEQ ID NO: 429 y SEQ ID NO: 430) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 426 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 431; SEQ ID NO: 432 y SEQ ID NO: 433) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 427.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab27 que comprende la SEQ ID NO: 426 y la SEQ ID NO: 427, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSEPVGGTVSISCQSSKSVMNNNYLAWYQQK PGQPPKLLIYGASNLASGVPSRFSGSGSGTQFTLTISDVQCDDAATYYCQGGYTGYSDHGT (SEQ ID NO: 442) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVL GVQCQSVEESGGRLVKPDETLTLTCTVSGIDLSSYPMNWVRQAPG GL EWIGFINTGGTIVYASWAKGRFTISKTSTTVDLKMTSPTTEDTATYFCARGSYVSSGYAYYFN V (SEQ ID NO: 443) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 444; SEQ ID NO: 445 y SEQ ID NO: 446 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 442 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 447; SEQ ID NO: 448 y SEQ ID NO: 449 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 443 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 444; SEQ ID NO: 445 y SEQ ID NO: 446 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 442 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 447; SEQ ID NO: 448 y SEQ ID NO: 449 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 443 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 442. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 443.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 444; SEQ ID NO: 445 y SEQ ID NO: 446 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 442.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 447; SEQ ID NO: 448 y SEQ ID NO: 449 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 443.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de. manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 442, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 443, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 444; SEQ ID NO: 445 y SEQ ID NO: 446) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 442 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 447; SEQ ID NO: 448 y SEQ ID NO: 449) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 443.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab28 que comprende la SEQ ID NO: 442 y la SEQ ID NO: 443, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera, variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVSISCQSSQSVYNNNWLSWFQQK PGQPPKLLIYKASTLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISDVQCDDVATYYCAGGYLDSVI ( SEQ ID NO: 458) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSTYSINWVRQAPGKGL EWIGIIANSGTTFYANWAKGRFTVSKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARESGMYNEYGKFNI (SEQ ID NO: 459) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 460; SEQ ID NO: 461 y SEQ ID NO: 462 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 458 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 463; SEQ ID NO: 464 y SEQ ID NO: 465 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 459 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 460; SEQ ID NO: 461 y SEQ ID NO: 462 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 458 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 463; SEQ ID NO: 464 y SEQ ID NO: 465 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 459 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 458. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 459.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 460; SEQ ID NO: 461 y SEQ ID NO: 462 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 458.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 463; SEQ ID NO: 464 y SEQ ID NO: 465 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 459.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 458, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 459, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 460; SEQ ID NO: 461 y SEQ ID NO: 462) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 458 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 463; SEQ ID NO: 464 y SEQ ID NO: 465) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 459.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab29 que comprende la SEQ ID NO: 458 y la SEQ ID NO: 459, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCASDMTQTPSSVSAAVGGTVTINCQASENIYSFLAWYQQKPG QPPKLLIFKASTLASGVSSRFKGSGSGTQFTLTISDLECDDAATYYCQQGATVYDIDNN (SEQ ID NO: 474) La invención, también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGIDLSAYAMIWVRQAPGEGL EWITIIYPNGITYYANWAKGRFTVSKTSTAMDLKITSPTTEDTATYFCARDAESSKNAYWGYF NV (SEQ ID NO: 475) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 476; SEQ ID NO: 477 y SEQ ID NO: 478 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 474 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 479; SEQ ID NO: 480 y SEQ ID NO: 481 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 475 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 476; SEQ ID NO: 477 y SEQ ID NO: 478 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 474 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 479; SEQ ID NO: 480 y SEQ ID NO: 481 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 475 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 474. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 475.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 476; SEQ ID NO: 477 y SEQ ID NO: 478 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 474.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 479; SEQ ID NO: 480 y SEQ ID NO: 481 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 475.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 474, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 475, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 476; SEQ ID NO: 477 y SEQ ID NO: 478) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 474 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 479; SEQ ID NO: 480 y SEQ ID NO: 481) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 475.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab30 que comprende la SEQ ID NO: 474 y la SEQ ID NO: 475, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCASDMTQTPSSVSAAVGGTVTINCQASENIYSFLAWYQQKPG QPPKLLIFRASTLASGVSSRFKGSGSGTQFTLTISDLECDDAATYYCQQGATVYDIDNN (SEQ ID NO: 490) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGIDLSAYA IWVRQAPGEGL E ITIIYPNGITYYANWAKGRFTVSKTSTAMDLKITSPTTEDTATYFCARDAESSKNAY GYF NV (SEQ ID NO: 491) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 492; SEQ ID NO: 493 y SEQ ID NO: 494 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 490 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 495; SEQ ID NO: 496 y SEQ ID NO: 497 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 491 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 492; SEQ ID NO: 493 y SEQ ID NO: 494 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 490 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 495; SEQ ID NO: 496 y SEQ ID NO: 497 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 491 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 490. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 491.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 492; SEQ ID NO: 493 y SEQ ID NO: 494 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 490.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 495; SEQ ID NO: 496 y SEQ ID NO: 497 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 491.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 490, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 491, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 492; SEQ ID NO: 493 y SEQ ID NO: 494) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 490 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 495; SEQ ID NO: 496 y SEQ ID NO: 497) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 491.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab31 que comprende la SEQ ID NO: 490 y la SEQ ID NO: 491, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAIEMTQTPSPVSAAVGGTVTINCQASESVFNNMLSWYQQKP GHSPKLLIYDASDLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISGVECDDAATYYCAGYKSDSNDGDNV (SEQ ID NO: 506) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLR LLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLNRNSITWVRQAPGEGL E IGIITGSGRTYYANWAKGRFTISKTSTTVDLKMTSPTTEDTATYFCARGHPGLGSGNI (SEQ ID NO: 507) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 508; SEQ ID NO: 509 y SEQ ID NO: 510 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 506 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 511; SEQ ID NO: 512 y SEQ ID NO: 513 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 507 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 508; SEQ ID NO: 509 y SEQ ID NO: 510 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 506 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 511; SEQ ID NO: 512 y SEQ ID NO: 513 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 507 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 506. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 507.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 508; SEQ ID NO: 509 y SEQ ID NO: 510 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 506.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 511; SEQ ID NO: 512 y SEQ ID NO: 513 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 507.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 506, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 507, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 508; SEQ ID NO: 509 y SEQ ID NO: 510) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 506 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 511; SEQ ID NO: 512 y SEQ ID NO: 513) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 507.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab32 que comprende la SEQ ID NO: 506 y la SEQ ID NO: 507, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAQVLTQTASSVSAAVGGTV INCQSSQSVYNNYLSWYQQKP GQPPKLLIYTASSLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISEVQCDDAATYYCQGYYSGPIIT (SEQ ID NO: 522) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLNNYYIQWVRQAPGEGL E IGIIYAGGSAYYAT ANGRFTIAKTSSTTVDLKMTSLTTEDTATYFCARGTFDGYEL (SEQ ID NO: 523) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 524; SEQ ID NO: 525 y SEQ ID NO: 526 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 522 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 527; SEQ ID NO: 528 y SEQ ID NO: 529 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 523 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 524; SEQ ID NO: 525 y SEQ ID NO: 526 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 522 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 527; SEQ ID NO: 528 y SEQ ID NO: 529 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 523 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 522. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 523.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 524; SEQ ID NO: 525 y SEQ ID NO: 526 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 522.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 527; SEQ ID NO: 528 y SEQ ID NO: 529 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 523.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 522, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 523, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 524; SEQ ID NO: 525 y SEQ ID NO: 526) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 522 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 527; SEQ ID NO: 528 y SEQ ID NO: 529) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 523.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab33 que comprende la SEQ ID NO: 522 y la SEQ ID NO: 523, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAQVLTQTPSPVSVPVGDTVTISCQSSESVYSNNLLSWYQQ PGQPPKLLIYRASNLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISGAQCDDAATYYCQGYYSGVINS (SEQ ID NO: 538) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYFMSWVRQAPGEGL EYIGFINPGGSAYYASWASGRLTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARILIVSYGAFTI (SEQ ID NO: 539) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 540; SEQ ID NO: 541 y SEQ ID NO: 542 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 538 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 543; SEQ ID NO: 544 y SEQ ID NO: 545 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 539 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos . En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 540; SEQ ID NO: 541 y SEQ ID NO: 542 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 538 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 543; SEQ ID NO: 544 y SEQ ID NO: 545 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 539 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 538. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 539.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 540; SEQ ID NO: 541 y SEQ ID NO: 542 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 538.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 543; SEQ ID NO: 544 y SEQ ID NO: 545 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 539.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 538, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 539, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 540; SEQ ID NO: 541 y SEQ ID NO: 542) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 538 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 543; SEQ ID NO: 544 y SEQ ID NO: 545) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 539.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab34 que comprende la SEQ ID NO: 538 y la SEQ ID NO: 539, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: DTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYD TQTPASVEVAVGGTVTIKCQATESIGNELSWYQQKPG QAPKLLIYSASTLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTITGVECDDAATYYCQQGYSSANIDNA (SEQ ID NO: 554) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: ETGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSKYYMSWVRQAPEKGL KYIGYIDSTTVNTYYATWARGRFTISKTSTTVDLKITSPTSEDTATYFCARGSTYFTDGGHRL DL (SEQ ID NO: 555) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 556; SEQ ID NO: 557 y SEQ ID NO: 558 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 554 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 559; SEQ ID NO: 560 y SEQ ID NO: 561 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 555 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 556; SEQ ID NO: 557 y SEQ ID NO: 558 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 554 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 559; SEQ ID NO: 560 y SEQ ID NO: 561 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 555 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 554. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 555.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 556; SEQ ID NO: 557 y SEQ ID NO: 558 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 554.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 559; SEQ ID NO: 560 y SEQ ID NO: 561 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 555.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 554, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 555, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 556; SEQ ID NO: 557 y SEQ ID NO: 558) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 554 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 559; SEQ ID NO: 560 y SEQ ID NO: 561) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 555.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab35 que comprende la SEQ ID NO: 554 y la SEQ ID NO: 555, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

En otra modalidad, la invención incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena ligera variable que comprende la secuencia establecida a continuación: DTRAPTQLLGLLLL LPGARCAYDMTQTPASVEVAVGGTVTIKCQATESIGNELSWYQQKPG QAPKLLIYSASTLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTITGVECDDAATYYCQQGYSSANIDNA (SEQ ID NO: 570) La invención también incluye anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 y una secuencia de cadena pesada variable que comprende la secuencia establecida a continuación: METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSTYNMGWVRQAPGKGL EWIGSITIDGRTYYASWAKGRFTVSKSSTTVDL MTSLTTGDTATYFCARILIVSYGAFTI (SEQ ID NO: 571) .

La invención contempla adicionalmente anticuerpos que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 572; SEQ ID NO: 573 y SEQ ID NO: 574 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 570 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 575; SEQ ID NO: 576 y SEQ ID NO: 577 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 571 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias, de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 572; SEQ ID NO: 573 y SEQ ID NO: 574 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 570 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 575; SEQ ID NO: 576 y SEQ ID NO: 577 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 571 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente.

La invención también contempla fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en, la secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 570. En otra modalidad de la invención, los fragmentos de anticuerpo de la invención comprenden, o de manera alternativa consisten en una secuencia de polipéptidos de la SEQ ID NO: 571.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 572; SEQ ID NO: 573 y SEQ ID NO: 574 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 570.

En una modalidad adicional de la invención, los fragmentos del anticuerpo que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 575; SEQ ID NO: 576 y SEQ ID NO: 577 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 571.

La invención también contempla fragmentos de anticuerpo que incluyen uno o más fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los fragmentos de los anticuerpos que poseen especificidad de unión a IL-6 comprenden o, de manera alternativa, consisten en uno, dos, tres o más fragmentos de anticuerpo, incluidos todos los siguientes: la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 570, la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 571, las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 572; SEQ ID NO: 573 y SEQ ID NO: 574) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 570 y las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 575; SEQ ID NO: 576 y SEQ ID NO: 577) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 571.

En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 es Ab36 que comprende la SEQ ID NO: 570 y la SEQ ID NO: 571, que posee al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente.

Las secuencias de anticuerpos anti-IL-6 de la presente invención se muestran en la Tabla 1. Se muestran ejemplos de variantes de secuencias y otras formas alternativas de las cadenas pesada y ligera de Abl a Ab7. Los anticuerpos de la presente invención comprenden variantes de secuencia adicionales que incluyen sustituciones conservadoras, sustituciones de una o más secuencias de CDR y/o secuencias de FR, etc.

Los ejemplos de modalidades de Abl incluyen un anticuerpo que comprende una variante de la cadena ligera y/o la cadena pesada. Los ejemplos de variantes de la cadena ligera de Abl incluyen la secuencia de cualquiera de las cadenas ligeras de Abl que se muestran (es decir, cualquiera de las SEQ ID NO: 2, 20, 647, 651, 660, 666, 699, 702, 706 o 709) donde se remplaza la totalidad de la secuencia de CDRl o donde se sustituye uno o más residuos en la secuencia CDRl con el residuo en la posición correspondiente de cualquiera de las otras secuencias de CDRl de cadena ligera establecidas (es decir, cualquiera de las SEQ ID NO: 23, 39, 55, 71, 87, 103, 124, 140, 156, 172, 188, 204, 220, 236, 252, 268, 284, 300, 316, 332, 348, 364, 380, 396, 412, 428, 444, 460, 476, 492, 508, 524, 540, 556 o 572) y/o donde se remplaza la totalidad de la secuencia de CDR2 o donde uno o más residuos en la secuencia de CDR2 se sustituye con el residuo en la posición correspondiente de cualquiera de las otras secuencias de CDR2 de cadena ligera establecidas (es decir, cualquiera de las SEQ ID NO: 24, 40, 56, 72, 88, 104, 125, 141, 157, 173, 189, 205, 221, 237, 253, 269, 285, 301, 317, 333, 349, 365, 381, 397, 413, 429, 445, 461, 477, 493, 509, 525, 541, 557 o 573) y/o donde se remplaza la totalidad de la secuencia de CDR3 o donde se sustituye uno o más residuos en la secuencia de CDR3 con el residuo en la posición correspondiente de cualquiera de las otras secuencias de CDR3 de cadena ligera establecidas (es decir, cualquiera de las SEQ ID NO: 25, 41, 57, 73, 89, 105, 126, 142, 158, 174, 190, 206, 222, 238, 254, 270, 286, 302, 318, 334, 350, 366, 382, 398, 414, 430, 446, 462, 478, 494, 510, 526, 542, 558 o 574).

Los ejemplos de variantes de la cadena pesada de Abl incluyen la secuencia de cualquiera de las cadenas pesadas de Abl que se muestran (es decir, cualquiera de las SEQ ID NO: 3, 18, 19, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 704 o 708) donde se remplaza la totalidad de la secuencia de CDR1 o donde se sustituye uno o más residuos en la secuencia de CDR1 con el residuo en la posición correspondiente de cualquiera de las otras secuencias de CDR1 de cadena pesada establecidas (es decir, cualquiera de las SEQ ID NO: 26, 42, 58, 74, 90, 106, 127, 143, 159, 175, 191, 207, 223, 239, 255, 271, 287, 303, 319, 335, 351, 367, 383, 399, 415, 431, 447, 463, 479, 495, 511, 527, 543, 559 o 575) y/o donde se remplaza la totalidad de la secuencia de CDR2 o donde se sustituye uno o más residuos en la secuencia de CDR2 con el residuo en la posición correspondiente de una CDR2 de cadena pesada de Abl, como se establece en la Tabla 1 (es decir, cualquiera de las SEQ ID NO: 8 o 120) o cualquiera de las otras secuencias de CDR2 de cadena pesada establecidas (es decir, cualquiera de las SEQ ID NO: 27, 43, 59, 75, 91, 107, 121, 128, 144, 160, 176, 192, 208, 224, 240, 256, 272, 288, 304, 320, 336, 352, 368, 384, 400, 416, 432, 448, 464, 480, 496, 512, 528, 544, 560 o 576) y/o donde se remplaza la totalidad de la secuencia de CDR3 o donde se sustituye uno o más residuos en la secuencia de CDR3 con el residuo en la posición correspondiente de cualquiera de las otras secuencias de CDR3 de cadena pesada establecidas (es decir, cualquiera de las SEQ ID NO: 28, 44, 60, 76, 92, 108, 129, 145, 161, 177, 193, 209, 225, 241, 257, 273, 289, 305, 321, 337, 353, 369, 385, 401, 417, 433, 449, 465, 481, 497, 513, 529, 545, 561 o 577) .

En otra modalidad, la invención contempla otros anticuerpos como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos o humanizados que comprenden una o más secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 4; SEQ ID NO: 5 y SEQ ID NO: 6 que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO:. 2 y/o una o más de las secuencias de polipéptidos de la SEQ ID NO: 7 (CDRl); SEQ ID NO: 8 (CDR2); SEQ ID NO: 120 (CDR2) ; y SEQ ID NO: 9 (CDR3) que corresponden a las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 3 o SEQ ID NO: 19 o combinaciones de estas secuencias de polipéptidos. En otra modalidad de la invención, los anticuerpos de la invención incluyen combinaciones de las CDR y las secuencias de cadenas ligeras y pesadas variables establecidas anteriormente, incluidas aquellas establecidas en las Figuras: 2 y 34-37, asi como aquellas identificadas en la Tabla 1.

En otra modalidad, el anticuerpo anti-IL-6 de la invención es uno que comprende al menos una de las siguientes: una cadena ligera de CDRl codificada por la secuencia en SEQ ID NO: 12 o SEQ ID NO: 694, una cadena ligera de CDR2 codificada por la secuencia en SEQ ID NO: 13, una cadena ligera de CDR3 codificada por la secuencia en SEQ ID NO: 14 o SEQ ID NO: 695, una cadena pesada de CDRl codificada por la secuencia en SEQ ID NO: 15, una cadena pesada de CDR2 codificada por la SEQ ID NO: 16 o SEQ ID NO: · 696 y una cadena pesada de CDR3 codificada por la SEQ ID NO: 17 o SEQ ID NO: 697. Adicionalmente, la invención abarca dichas secuencias de ácido nucleico y variantes de las mismas.

En otra modalidad, la invención se dirige a secuencias de aminoácidos que corresponden a las CDR de dicho anticuerpo anti-IL-6 que se seleccionan de la SEQ ID NO: 4 (CDR1) , SEQ ID NO: 5 (CDR2), SEQ ID NO: 6 (CDR3) , SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 120 y la SEQ ID NO: 9.

En otra modalidad, el anticuerpo anti-IL-6 de la invención comprende una secuencia de ácido nucleico de cadena ligera de la SEQ ID NO: 10, 662, 698, 701, 705, 720, 721, 722 o 723 y/o una secuencia de ácido nucleico de cadena pesada de las SEQ ID NO: 11, 663, 700, 703, 707, 724 o 725. Adicionalmente, la invención se dirige a los polipéptidos correspondientes codificados por cualquiera de las secuencias de ácido nucleico anteriores y combinaciones de las mismas.

En una modalidad especifica de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 o una porción de los mismos estarán codificados por una secuencia de ácido nucleico seleccionada de las comprendidas en SEQ ID NO: 10, 12, 13, 14, 662, 694, 695, 698, 701, 705, 720, 721, 722, 723, 11, 15, 16, 17, 663, 696, 697, 700, 703, 707, 724 y 725. Por ejemplo, la CDR1 en la cadena ligera puede estar codificada por la SEQ ID NO: 12 o 694, la CDR2 en la cadena ligera puede estar codificada por la SEQ ID NO: 13, la CDR3 en la cadena ligera puede estar codificada por la SEQ ID NO: 14 o 695, la CDR1 en la cadena pesada puede estar codificada por la SEQ ID NO: 15, la CDR2 en la cadena pesada puede estar codificada por la SEQ ID NO: 16 o 696, la CDR3 en la cadena pesada puede estar codificada por la SEQ ID NO: 17 o 697. Como se discute a continuación, los anticuerpos que contienen estas CDR pueden crearse usando regiones flanqueantes humanas apropiadas basadas en los métodos de humanización descritos en la presente.

En otra modalidad especifica de la invención, la cadena ligera variable estará codificada por la SEQ ID NO: 10, 662, 698, 701, 705, 720, 721, 722 o 723 y la cadena pesada variable de los anticuerpos anti-IL-6 estará codificada por las SEQ ID NO: 11, 663, 700, 703, 707, 724 o 725.

En una modalidad más especifica, las cadenas pesada y ligera variables del anticuerpo anti-IL-6 estarán codificadas por la SEQ ID NO: 10 y 11 o SEQ ID NO: 698 y la SEQ ID NO: 700 o SEQ ID NO: 701 y la SEQ ID NO: 703 o SEQ ID NO: 705 y la SEQ ID NO: 707.

En otra modalidad especifica, la invención abarca construcciones de ácido nucleico que contienen cualquiera de las secuencias de ácido nucleico precedentes y combinaciones de las mismas, asi como células recombinantes que contienen estas secuencias y construcciones de ácido nucleico, donde estas secuencias o construcciones de ácido nucleico pueden ser extracromosomales o pueden estar integradas en el genoma de la célula hospedadora.

En otra modalidad especifica, la invención abarca polipéptidos que contienen cualquiera de las CDR o combinaciones de las mismas descritas en la SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 9 o polipéptidos que comprenden cualquiera de los polipéptidos de cadena ligera variable comprendidos en las SEQ ID NO: 2, 20, 647, 651, 660, 666, 699, 702, 706 o 709 y/o los polipéptidos de cadena pesada variable comprendidos en las SEQ ID NO: 3, 18, 19, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 704 o 708. Opcionalmente estos polipéptidos pueden estar unidos, directa o indirectamente, a otros polipéptidos de inmunoglobulina o restos efectores, tales como entidades terapéuticas o detectables.

En otra modalidad, el anticuerpo anti-IL-6 es uno que comprende al menos una de las siguientes: una cadena ligera variable codificada por la secuencia en SEQ ID NO: 10 o SEQ ID NO: 698 o SEQ ID NO: 701 o SEQ ID NO: 705 y una cadena variable codificada por la secuencia en SEQ ID NO: 11 o SEQ ID NO: 700 o SEQ ID NO: 703 o SEQ ID NO: 707.

En otra modalidad, el anticuerpo anti-IL-6 es una variante de las secuencias precedentes que incluye una o más sustituciones en las secuencias flanqueantes y/o de CDR y que tiene una o más de las propiedades de Abl in vitro y/o luego de la administración in vivo.

Estas propiedades in vitro e in vivo se describen con más detalle en los ejemplos a continuación e incluyen: competir con Abl para la unión a IL-6 y/o a péptidos de esta, tener una afinidad de unión (Kd) para IL-6 o menor a aproximadamente 50 picomolar y/o una tasa de disociación (K0ff) de IL-6 menor o igual a 10"4 S"1, tener una semivida in vivo de al menos alrededor de 22 días en un ser humano saludable, contar con capacidad para prevenir o tratar hipoalbuminemia, capacidad para prevenir o tratar una CRP elevada, capacidad para prevenir o tratar la coagulación anormal y/o capacidad para disminuir el riesgo de trombosis en un individuo con una enfermedad o afección asociada con el riesgo aumentado de trombosis. Ejemplos adicionales no limitantes de la actividad anti-IL-6 se establecen en la presente, por ejemplo, bajo el titulo "Actividad anti-IL-6".

En otra modalidad, el anticuerpo anti-IL-6 incluye una o más de las secuencias de CDR de cadena ligera y/o pesada de Abl (véase Tabla 1) o una variante o variantes de las mismas que tiene/n una o más de las propiedades de Abl in vitro y/o luego de la administración in vivo (ejemplos de dichas propiedades se discuten en el párrafo anterior) . Un experto en la técnica entenderla cómo combinar estas secuencias de CDR para formar una superficie de unión al antigeno, por ejemplo, por medio del enlace a uno o más andamiajes que pueden comprender secuencias flanqueantes humanas o de otro mamífero o sus ortólogos funcionales que provienen de un SMIP, anticuerpos de camélido, nanoanticuerpo, IgNAR u otra inmunoglobulina u otro anticuerpo diseñado. Por ejemplo, las modalidades pueden unirse específicamente a la IL-6 humana e incluyen una, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más de las siguientes secuencias de CDR o variantes de las mismas: un polipéptido que posee al menos una identidad de 72,7% (es decir, 8 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR1 de la SEQ ID NO: 4; un polipéptido que posee al menos una identidad de 81,8% (es decir, 9 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR1 de la SEQ ID NO: 4; un polipéptido que posee al menos una identidad de 90.9% (es decir, 10 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR1 de la SEQ ID NO: 4; un polipéptido que posee al menos una identidad de 100% (es decir, 11 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR1 de la SEQ ID NO: 4; un polipéptido que posee al menos una identidad de 85.7% (es decir, 6 de 7 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR2 de la SEQ ID NO: 5; un polipéptido que posee al menos una identidad de 100% (es decir, 7 de 7 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR2 de la SEQ ID NO: 5; un polipéptido que posee al menos una identidad del 50% (es decir, 6 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee al menos una identidad del 58,3% (es decir, 7 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee al menos una identidad del 66,6% (es decir, 8 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee al menos una identidad del 75% (es decir, 9 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee al menos una identidad del 83,3% (es decir, 10 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee al menos una identidad del 91.6% (es decir, 11 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee al menos una identidad del 100% (es decir, 12 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee al menos una identidad del 80% (es decir, 4 de 5 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR1 de la SEQ ID NO: 7; un polipéptido que posee al menos una identidad del 100% (es decir, 5 de 5 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR1 de la SEQ ID NO: 7; un polipéptido que posee al menos una identidad del 50% (es decir, 8 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos una identidad del 56,2% (es decir, 9 de 16 aminoácidos) con la cadena pesadá' dé CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos una identidad del 62,5% (es decir, 10 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos una identidad del 68,7% (es decir, 11 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos una identidad del 75% (es decir, 12 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos una identidad del 81,2% (es decir, 13 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos una identidad del 87,5% (es decir, 14 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos una identidad del 93.7% (es decir, 15 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos una identidad del 100% (es decir, 16 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos una identidad del 33,3% (es decir, 4 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos una identidad del 41,6% (es decir, 5 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos una identidad del 50% (es decir, 6 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos una identidad del 58,3% (es decir, 7 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos una identidad del 66,6% (es decir, 8 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos una identidad del 75% (es decir, 9 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos una identidad del 83,3% (es decir, 10 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos una identidad del 91.6% (es decir, 11 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos una identidad del 100% (es decir, 12 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos un 90.9% de semejanza (es decir, 10 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDRl de la SEQ ID NO: 4; un polipéptido que posee un 100% de semejanza (es decir, 11 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDRl de la SEQ ID NO : 4 ; un polipéptido que posee al menos un 85.7% de semejanza (es decir, 6 de 7 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR2 de la SEQ ID NO: 5; un polipéptido que posee al menos un 100% de semejanza (es decir, 7 de 7 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR2 de la SEQ ID NO: 5; un polipéptido que posee al menos un 66,6% de semejanza (es decir, 8 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee al menos un 75% de semejanza (es decir, 9 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee al menos un 83,3% de semejanza (es decir, 10 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee al menos un 91.6% de semejanza (es decir, 11 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polipéptido que posee 100% de semejanza (es decir, 12 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO : 6 ; un polipéptido que posee al menos un 80% de semejanza (es decir, 4 de 5 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR1 de la SEQ ID NO: 7; un polipéptido que posee al menos 100% de semejanza (es decir, 5 de 5 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR1 de la SEQ ID NO: 7; un polipéptido que posee al menos 56,2% de semejanza (es decir, 9 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos 62,5% de semejanza (es decir, 10 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2' de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos 68,7% de semejanza (es decir, 11 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos 75% de semejanza (es decir, 12 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos 81,2% de semejanza (es decir, 13 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos 87,5% de semejanza (es decir, 14 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos 93,7% de semejanza (es decir, 15 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee 100% de semejanza (es decir, 16 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polipéptido que posee al menos un 50% de semejanza (es decir, 6 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos un 58,3% de semejanza (es decir, 7 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos un 66,6% de semejanza (es decir, 8 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos un 75% de semejanza (es decir, 9 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos un 83,3% de semejanza (es decir, 10 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee al menos un 91,6% de semejanza (es decir, 11 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polipéptido que posee 100% de semejanza (esto es, 12 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9.

Otros ejemplos de modalidades incluyen uno o más polinucleótidos que codifican cualquiera de las anteriores, por ejemplo, un polinucleótido que codifica un polipéptido que se une de manera especifica a la IL-6 humana e incluye una, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más de las siguientes CDR o variantes de las mismas: un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 72,7% de identidad (es decir, 8 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDRl de la SEQ ID NO: 4; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 81,8% de identidad (es decir, 9 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDRl de la SEQ ID NO: 4; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 90,9% de identidad (es decir, 10 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDRl de la SEQ ID NO: 4; un polinucleótido que codifica un polipéptido con 100% de identidad (es decir, 11 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDRl de la SEQ ID NO: 4; un polinucleótido que codifica un polipéptido con al menos 85.7% de identidad (es decir, 6 de 7 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR2 de la SEQ ID NO: 5; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene un 100% de identidad (es decir, 7 de 7 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR2 de la SEQ ID NO: 5; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 50% de identidad (es decir, 6 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 58,3% de identidad (es decir, 7 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 66,6% de identidad (es decir, 8 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 75% de identidad (es decir, 9 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 83,3% de identidad (es decir, 10 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6/ un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 91,6% de identidad (es decir, 11 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene 100% de identidad (es decir, 12 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 80% de identidad (es decir, 4 de 5 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR1 de la SEQ ID NO: 7; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene un 100% de identidad (es decir, 5 de 5 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR1 de la SEQ ID NO: 7; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 50% de identidad (es decir, 8 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 56,2% de identidad (es decir, 9 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 62,5% de identidad (es decir, 10 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 68.7% de identidad (es decir, 11 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 75% de identidad (es decir, 12 de 6 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 81,2% de identidad (es decir, 13 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 87,5% de identidad (es decir, 14 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada, de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 93,7% de identidad (es decir, 15 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene 100% de identidad (es decir, 16 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 33,3% de identidad (es decir, 4 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 41,6% de identidad (es decir, 5 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 50% de identidad (es decir, 6 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 58,3% de identidad (es decir, 7 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 66,6% de identidad (es decir, 8 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 75% de identidad (es decir, 9 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 83,3% de identidad (es decir, 10 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos un 91,6% de identidad (es decir, 11 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene 100% de identidad (es decir, 12 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 90,9% de semejanza (es decir, 10 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDRl de la SEQ ID NO: 4; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene 100% de semejanza (es decir, 11 de 11 aminoácidos) con la cadena ligera de CDRl de la SEQ ID NO: 4; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 85,7% de semejanza (es decir, 6 de 7 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR2 de la SEQ ID NO: 5; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene 100% de semejanza (es decir, 7 de 7 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR2 de la SEQ ID NO: 5; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 66,6% de semejanza (es decir, 8 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 75% de semejanza (es decir, 9 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 83,3% de semejanza (es decir, 10 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 91,6% de semejanza (es decir, 11 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene 100% de semejanza (es decir, 12 de 12 aminoácidos) con la cadena ligera de CDR3 de la SEQ ID NO: 6; un polinucleótido que codifica un" polipéptido que tiene al menos 80% de semejanza (es decir, 4 de 5 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR1 de la SEQ ID NO: 7; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene 100% de semejanza (es decir, 5 de 5 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR1 de la SEQ ID NO: 7; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 56,2% de semejanza (es decir, 9 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 62,5% de semejanza (es decir, 10 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 68,7% de semejanza (es decir, 11 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 75% de semejanza (es decir, 12 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 81,2% de semejanza (es decir, 13 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 87,5% de semejanza (es decir, 14 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 93,7% de semejanza (es decir, 15 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene 100% de semejanza (es decir, 16 de 16 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR2 de la SEQ ID NO: 120; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 50% de semejanza (es decir, 6 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 58,3% de semejanza (es decir, 7 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 66,6% de semejanza (es decir, 8 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 75% de semejanza (es decir, 9 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 83,3% de semejanza (es decir, 10 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene al menos 91,6% de semejanza (es decir, 11 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9; un polinucleótido que codifica un polipéptido que tiene 100% de semejanza (es decir, 12 de 12 aminoácidos) con la cadena pesada de CDR3 de la SEQ ID NO: 9.

Tabla 1. Secuencias de ejemplos de anticuerpos anti 666 722 4 12 5 13 6 14 699 698 4 694 5 13 6 695 702 ,701 4 694 5 13 6 695 706 705 4 694 5 13 6 695 709 723 4 12 5 13 6 14 Cadenas 648 710 713 ligeras 649 711 714 humanas usadas en humanización de Abl 650 712 715 Cadenas 3 11 7 15 8 16 9 17 pesadas de Abl 18 7 15 8 16 9 17 19 724 7 15 120 696 9 17 652 725 7 15 8 16 9 17 656 7 15 8 16 9 17 657 700 7 15 659 696 9 697 658 7 15 120 696 9 17 661 663 7 15 8 16 9 17 664 7 15 8 16 9 17 665 7 15 120 696 9 17 704 703 7 15 120 696 9 697 708 707 7 15 120 696 9 697 Cadenas 653 716 717 pesadas 654 716 717 humanas usadas en la humanización de Abl 655 74 82 718 Cadenas 21 29 23 31 24 32 25 33 ligeras de Ab2 667 669 23 31 24 32 25 33 Cadenas 22 30 26 34 27 35 28 36 pesadas de Ab2 668 670 26 34 27 35 28 36 Cadenas 37 45 39 47 40 48 41 49 ligeras de Ab3 671 673 39 47 40 48 41 49 Cadenas 38 46 42 50 43 51 44 52 pesadas de Ab3 672 674 42 50 43 51 44 52 Cadenas 53 61 55 63 56 64 57 65 ligeras de Ab4 675 677 55 63 56 64 57 65 Cadenas 54 62 58 66 59 67 60 68 pesadas de Ab4 676 678 58 66 59 67 60 68 Cadenas 69 77 71 79 72 80 73 81 ligeras de Ab5 679 681 71 79 72 80 73 81 Cadenas 70 78 74 82 75 83 76 84 pesadas de Ab5 680 682 74 82 75 83 76 84 Cadenas 85 93 87 95 88 96 89 97 ligeras de Ab6 683 685 87 95 88 96 89 97 Cadenas 86 94 90 98 91 99 92 100 pesadas de Ab6 684 686 90 98 91 99 92 100 101 109 103 111 104 112 105 113 Cadenas 119 103 111 104 112 105 113 ligeras de Ab7 687 689 103 111 104 112 105 113 693 103 111 104 112 105 113 102 110 106 114 107 115 108 116 117 106 114 107 115 108 116 Cadenas 118 106 114 121 108 116 pesadas de Ab7 688 690 106 114 107 115 108 116 691 106 114 107 115 108 116 692 106 114 121 108 116 Cadena ligera de Ab8 122 130 124 132 125 133 126 134 Cadena pesada de Ab8 123 131 127 135 128 136 129 137 Cadena ligera de Ab9 138 146 140 148 141 149 142 150 Cadena pesada de Ab9 139 147 143 151 144 152 145 153 Cadena ligera de AblO 154 162 156 164 157 165 158 166 Cadena pesada de AblO 155 163 159 167 160 168 161 169 Cadena ligera de Abll 170 178 172 180 173 181 174 182 Cadena pesada de Abll 171 179 175 183 176 184 177 185 Cadena ligera de Abl2 186 194 188 196 189 197 190 198 Cadena pesada de Abl2 187 195 191 199 192 200 193 201 Cadena ligera de Abl3 202 210 204 212 205 213 206 214 Cadena pesada de Abl3 203 211 207 215 208 216 209 217 Cadena ligera de Abl4 218 226 220 228 221 229 222 230 Cadena pesada de Abl4 219 227 223 231 224 232 225 233 Cadena ligera de Abl5 234 242 236 244 237 245 238 246 Cadena pesada de Abl5 235 243 239 247 240 248 241 249 Cadena ligera de Abl6 250 258 252 260 253 261 254 262 Cadena pesada de A l6 251 259 255 263 256 264 257 265 Cadena ligera de Abl7 266 274 268 276 269 277 270 278 Cadena pesada de Abl7 267 275 271 279 272 280 273 281 Cadena ligera de Abl8 282 290 284 292 285 293 286 294 Cadena pesada de Abl8 283 291 287 295 288 296 289 297 Cadena ligera de Abl9 298 306 300 308 301 309 302 310 Cadena pesada de Abl9 299 307 303 311 304 312 305 313 Cadena ligera de Ab20 314 322 316 324 317 325 318 326 Cadena pesada de Ab20 315 323 319 327 320 328 321 329 Cadena ligera de Ab21 330 338 332 340 333 341 334 342 Cadena pesada de Ab21 331 339 335 343 336 344 337 345 Cadena ligera de Ab22 346 354 348 356 349 357 350 358 Cadena pesada de Ab22 347 355 351 359 352 360 353 361 Cadena ligera de A 23 362 370 364 372 365 373 366 374 Cadena pesada de Ab23 363 371 367 375 368 376 369 377 Cadena ligera de A 24 378 386 380 388 381 389 382 390 Cadena pesada de Ab24 379 387 383 391 384 392 385 393 Cadena ligera de Ab25 394 402 396 404 397 405 398 406 Cadena pesada de Ab25 395 403 399 407 400 408 401 409 Cadena ligera de Ab26 410 418 412 420 413 421 414 422 Cadena pesada de Ab26 411 419 415 423 416 424 417 425 Cadena ligera de Ab27 426 434 428 436 429 437 430 438 Cadena pesada de Ab27 427 435 431 439 432 440 433 441 Cadena ligera de Ab28 442 450 444 452 445 453 446 454 Cadena pesada de Ab28 443 451 447 455 448 456 449 457 Cadena ligera de Ab29 458 466 460 468 461 469 462 470 Cadena pesada de A 29 459 467 463 471 464 472 465 473 Cadena ligera de Ab30 474 482 476 484 477 485 478 486 Cadena pesada de A 30 475 483 479 487 480 488 481 489 Cadena ligera de Ab31 490 498 492 500 493 501 494 502 Cadena pesada de Ab31 491 499 495 503 496 504 497 505 Cadena ligera de Ab32 506 514 508 516 509 517 510 518 Cadena pesada de Ab32 507 515 511 519 512 520 513 521 Cadena ligera de A 33 522 530 524 532 525 533 526 534 Cadena pesada de Ab33 523 531 527 535 528 536 529 537 Cadena ligera de Ab34 538 546 540 548 541 549 542 550 Cadena pesada de Ab34 539 547 543 551 544 552 545 553 Cadena ligera de Ab35 554 562 556 564 557 565 558 566 Cadena pesada de Ab35 555 563 559 567 560 568 561 569 Cadena ligera de Ab36 570 578 572 580 573 581 574 582 Cadena pesada de Ab36 571 579 575 583 576 584 577 585 * Ejemplos de formas de variantes de secuencia de cadenas pesadas y ligeras se muestran en lineas separadas.

PRT. : Secuencia de polipéptidos Nuc: Ejemplos de secuencia de codificación.

Como referencia, los identificadores de secuencia distintos a los incluidos en la Tabla 1, se resumen en la Tabla 2.

Tabla 2. Resumen de los identificadores de secuencia en la presente solicitud. pesada constante gamma-1 secuencia de polinucléotido de cadena 589 pesada constante gamma-1 Péptidos de IL-6 humana (véase FIG. 12 590-646 y Ejemplo 14) Secuencia de polipéptido de cadena pesada constante gamma-1 (difiere de la 719 SEQ ID NO: 518 en dos posiciones) Secuencia de polipéptido de la proteina 726 C reactiva 727 Receptor de IL-6 alfa 728 Receptor de IL-6 beta / gpl30 Dichos fragmentos de anticuerpo pueden estar presentes en una o más de las siguientes formas no restrictivas: Fab, Fab', F(ab' )2/ Fv y formas de anticuerpo de cadena simple Fv. En una modalidad preferida, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente comprenden adicionalmente la secuencia de cadena ligera constante kappa que comprende la secuencia establecida a continuación: VAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQ DS DSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVT SFNRGEC (SEQ ID NO: 586) .

En otra modalidad preferida, los anticuerpos anti IL-6 descritos en la presente comprenden adicionalmente la secuencia de polipéptido de cadena pesada constante gamma-l que comprende una de las secuencias establecidas a continuación: AST GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLV DYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVL QSSGLYSLSSWTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGG PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTY RVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQV SLTCLV GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCS VMHEALHNHYTQ SLSLSPGK (SEQ ID NO: 588) y ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVL QSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGG PSVFLFPPKPKDTL ISRTPEVTCWVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTY RWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKA GQPREPQVYTLPPSRDELT NQV SLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCS VMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 719) .

Las modalidades de los anticuerpos descritos en la presente pueden incluir una secuencia líder, tal como, un líder Ig de conejo, un prepéptido de albúmina, una secuencia líder de secreción pre o pro del factor de apareamiento de la levadura (tal como P. pastoris o Saccharomyces cerevisiae o factor alfa) o un líder HAS humano. Los ejemplos de secuencias líder se muestran desalineados con respecto a FRl en el extremo N de los polipéptidos mostrados en las Figuras 36A y 37A como sigue: secuencias líder de Ig de ratón de la SEQ ID NOs: 2 y 660 (MD. . .) y SEQ ID NOs: 3 y 661 (ME. ..) y un prepéptido de albúmina en la SEQ ID NOs : 706 y 708, lo que facilita su secreción. También se pueden usar otras secuencias líder conocidas en la técnica para conferir propiedades deseadas, tales como secreción, estabilidad o semivida mejoradas, etc., solas o en combinaciones entre sí, en las cadenas pesadas y/o ligeras, que pueden escindirse opcionalmente antes de la administración a un sujeto. Por ejemplo, se puede expresar un polipéptido en un sistema de expresión celular o libre de células que también expresa o incluye (o se modifica para expresar o incluir) una proteasa, por ejemplo, una peptidasa de señal ligada a la membrana que escinde una secuencia líder.

En otra modalidad, la invención contempla un anticuerpo anti-IL-6 aislado que comprende una secuencia de polipéptido de VH que comprende: las SEQ ID NO: 3, 18, 19, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 117, 118, 123, 139, 155, 171, 187, 203, 219, 235, 251, 267, 283, 299, 315, 331, 347, 363, 379, 395, 411, 427, 443, 459, 475, 491, 507, 523, 539, 555, 571, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 668, 672, 676, 680, 684, 688, 691, 692, 704 o 708 y comprende también una secuencia de polipéptido de VL que comprende: las SEQ ID NO: 2, 20, 21, 37, 53, 69, 85, 101, 119, 122, 138, 154, 170, 186, 202, 218, 234, 250, 266, 282, 298, 314, 330, 346, 362, 378, 394, 410, 426, 442, 458, 474, 490, 506, 522, 538, 554, 570, 647, 651, 660, 666, 667, 671, 675, 679, 683, 687, 693, 699, 702, 706, o 709 o una variante de la misma donde uno o más de los residuos flanqueantes (residuos FR) en. dicho polipéptido de VH 0 VL fue sustituido por otro residuo de aminoácido que da como resultado un anticuerpo anti-IL-6 que se une específicamente a IL-6. La invención contempla formas humanizadas y quiméricas de estos anticuerpos. Los anticuerpos quiméricos pueden incluir un Fe derivado de las regiones constantes IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgG5, IgG6, IgG7, IgG8, IgG9, IgGlO, IgGll, IgG12, IgGl3, IgG14, IgG15, IgG16, IgG17, IgG18 y IgG19 y en particular una región constante de cadena pesada y ligera variable tal como la contenida en la SEQ ID NO:588 y SEQ ID NO:586.

En una modalidad de la invención, los anticuerpos o los polipéptidos de VH o VL se originan o se seleccionan de una o más poblaciones de linfocitos B de conejo antes del inicio del proceso de humanización nombrado en la presente.

En otra modalidad de la invención, los anticuerpos ánti- IL-6 y fragmentos de los mismos poseen especificidad de unión por homólogos de primate de la proteína IL-6 humana. Ejemplos no limitantes de homólogos de primate de la proteína IL-6 humana son IL-6 obtenidas a partir de Macaca fascicularis (también conocida como mono macaco) y el mono Rhesus. En otra modalidad de lá invención, los anticuerpos anti-IL-6 y fragmentos de los mismos inhiben la asociación de IL-6 con IL-6R, y/o la producción de complejos IL-6/IL-6R/gpl30 y/o la producción de multímeros IL-6/IL-6R/gpl30 y/o antagonizan los efectos biológicos de uno o más de los antemencionados.

Tal como se estableció anteriormente, los anticuerpos y fragmentos de los mismos pueden modificarse postraduccionalmente para agregar restos efectores tales como enlaces químicos, restos detectables tales como, por ejemplo, tintes fluorescentes, enzimas, sustratos, materiales bioluminiscentes, materiales radiactivos y restos quimioluminiscentes o restos funcionales tales como, por ejemplo, estreptavidina, avidina, biotina, una citotoxina, un agente citotóxico y materiales radiactivos.

En cuanto a restos detectables, ejemplos adicionales de enzimas incluyen, a modo no taxativo, peroxidasa de rábano picante, acetilcolinesterasa, fosfatasa alcalina, betagalactosidasa y luciferasa. Ejemplos adicionales de materiales fluorescentes incluyen, a modo no taxativo, rodamina, fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, umbelliferona, diclorotriazinilamina, ficoeritrina y cloruro de dansilo. Ejemplos adicionales de restos quimioluminiscentes incluyen, a modo no taxativo, luminol. Ejemplos adicionales de materiales bioluminiscentes incluyen, a modo no taxativo, luciferina y aequorina. Ejemplos adicionales de materiales radiactivos incluyen, a modo no taxativo, Yodo 125 (12 I) , Carbono 14 (14C) , Azufre 35 (35S) , Tritio (3H) y Fósforo 32 (32P).

En cuanto a restos funcionales, ejemplos de agentes citotóxicos incluyen, a modo no taxativo, metotrexato, aminopterina, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, citarabina, 5-fluorouracil dacarbazina, agentes alquilantes tales como mecloretamina, tioepa clorambucil, melfalán, carmustina (BSNU) , mitomicina C, lomustina (CCNU) , 1-metilnitrosourea, ciclofosfamida, mecloretamina, busulfán, dibromomanitol, estreptozotocina, mitomicina C, cis-diclorodiamina platino (II) (DDP) cisplatino y carboplatino (paraplatino) ; las antraciclinas incluyen daunorubicina (antiguamente daunomicina) , doxorubicina (adriamicina) , detorubicina, carminomicina, idarubicina, epirubicina, mitoxantrona y bisantreno; los antibióticos incluyen dactinomicina (actinomicina D) , bleomicina, caliqueamicina, mitramicina y antramicina (AMC) y agentes antimitóticos tales como los alcaloides de la vinca, vincristina y vinblastina. Otros agentes citotóxicos incluyen paclitaxel (taxol) , ricina, pseudomonas exotoxina, gemcitabina, citocalasina B, gramicidina D, bromuro de etidio, emetina, etoposida, tenoposida, colchicina, dihidroxi antracina diona, 1-dihidrotestosterona, glucocorticoides , procaina, tetracaina, lidocaina, propranolol, puromicina, procarbazina, hidroxiurea, asparaginasa, corticosteroides, mitotano (O, P1 - (DDD) ) , interferones y mezclas de estos agentes citotóxicos.

Agentes citotóxicos adicionales incluyen, a modo no taxativo, agentes quimioterapéuticos tales como carboplatino, cisplatino, paclitaxel, gemcitabina, calicheamicina, doxorubicina, 5-fluorouracilo, mitomicina C, actinomicina D, ciclofosfamida, vincristina, bleomicina, antagonistas de VEGF, antagonistas de EGFR, platinos, taxoles, irinotecano, 5-fluorouracilo, gemcitabina, leucovorina, esteroides, ciclofosfamida, melfalán, alcaloides de la vinca (por ejemplo, vinblastina, vincristina, vindesina y vinorelbina) , mustinas, inhibidores de tirosina cinasa, radioterapia, antagonistas de hormonas sexuales, moduladores selectivos del receptor de andrógeno, moduladores selectivos del receptor de estrógeno, antagonistas de PDGF, antagonistas de TNF, antagonistas de IL-1, interleucinas (por ejemplo, IL-12 o IL-2) , antagonistas de IL-12R, anticuerpos monoclonales conjugados con toxinas, anticuerpos monoclonales específicos contra antígenos tumorales, Erbitux™, Avastin™, Pertuzumab, anticuerpos anti-CD20, Rituxan®, ocrelizumab, ofatumumab, DXL625, Herceptin® o cualquier combinación de los mismos. Enzimas tóxicas de plantas y bacterias tales como ricina, toxina difteria y toxina Pseudomonas pueden conjugarse con los anticuerpos humanizados o fragmentos de unión de los mismos para generar reactivos para la destrucción específica de un tipo de células (Youle, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. EUA 77:5483 (1980); Gilliland, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. EUA 77:4539 (1980); Krolick, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. EUA 77:5419 (1980)).

Otros agentes citotóxicos incluyen ribonucleasas citotóxicas como describe Goldenberg en la Patente estadounidense No. 6,653,104. Las modalidades de la invención también se refieren a radioinmunoconjugados donde un radionúclido que emite partículas alfa o beta se encuentra acoplado de manera estable al anticuerpo, o fragmentos de unión del mismo, con o sin el uso de un agente formador de complejos. Tales radionúclidos incluyen emisores beta tales como Fósforo-32 (32P) , Escandio-47 (47Sc) , Cobre-67 (67Cu) , Galio-67 (67Ga) , Itrio-88 (88Y), Itrio-90 (90Y) , Yodo-125 (125I) , Yodo-131 (131I) , Samario-153 (153Sm) , Lutecio-177 (177Lu) , Renio-186 (186Re) o Renio-188 (188Re) , y emisores alfa tales como Astatina-211 (211At), Plomo-212 (212Pb) , Bismuto-212 (212Bi) o -213 (213Bi) o Actinio-225 (225Ac) .

Se conocen métodos en la técnica para la conjugación de un anticuerpo o un fragmento de unión del mismo a un resto detectable y similares, tal como, por ejemplo, los métodos descritos por Hunter et al, Nature 144:945 (1962); David et al, Biochemistry 13:1014 (1974); Pain et al, J. Immunol. eth. 40:219 (1981) y Nygren, J., Histochem. y Cytochem. 30:407 (1982) .

Las modalidades descritas en la presente incluyen adicionalmente variantes y equivalentes sustancialmente homólogos a los anticuerpos, fragmentos de anticuerpos, diacuerpos, S IPs, anticuerpos de camélido, nanoanticuerpos, IgNAR, polipéptidos, regiones variables y CDR establecidos en la presente. Estos pueden contener, por ejemplo, mutaciones de sustitución conservadora (es decir, la sustitución de uno o más aminoácidos por medio de aminoácidos similares) . Por ejemplo, la sustitución conservadora se refiere a la sustitución de un aminoácido por otro dentro de la misma clase general, por ejemplo, un aminoácido ácido por otro aminoácido ácido, un aminoácido básico por otro aminoácido básico o un aminoácido neutro por otro aminoácido neutro. Se conoce bien en la técnica lo que se pretende con una sustitución conservadora de un aminoácido.

En otra modalidad, la invención contempla secuencias de polipéptidos que poseen al menos 90% o más de homología de secuencia con una cualquiera o más de las secuencias de polipéptido de fragmentos de anticuerpos, regiones variables y CDR establecidos en la presente. Más preferentemente, la invención contempla secuencias de polipéptidos que poseen al menos 95% o más de homología de secuencia, más preferentemente, al menos 98% o más de homología de secuencia y, aun más preferentemente, al menos 99% o más de homología de secuencia con una cualquiera o más de las secuencias de polipéptido de fragmentos de anticuerpos, regiones variables y CDR establecidos en la presente. Los expertos en la técnica conocen bien los métodos para determinar la homología entre las secuencias de ácidos nucleicos y de aminoácidos.

En otra modalidad, la invención contempla adicionalmente los homólogos de polipéptidos antemencionados de los fragmentos de anticuerpo, las regiones variables y las CDR establecidas en la presente que poseen adicionalmente actividad anti-IL-6. Ejemplos no limitantes de la actividad anti-IL-6 se establecen en la presente, por ejemplo, bajo el titulo "Actividad anti-IL-6" a continuación.

En otra modalidad, la invención contempla adicionalmente la creación y el uso de anticuerpos anti-idiotipicos que se unen a cualquiera de las secuencias precedentes. En un ejemplo de modalidad, este anticuerpo anti-idiotipico puede administrarse a un sujeto que recibió un anticuerpo anti-IL-6 para modular, reducir o neutralizar el efecto del anticuerpo anti-IL-6. Dichos anticuerpos anti-idiotipicos también pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades autoinmunes caracterizadas por la presencia de anticuerpos anti-IL-6. Un ejemplo adicional de uso de tales anticuerpos anti-idotipicos es la detección de anticuerpos anti-IL-6 de la presente invención, por ejemplo, para controlar los niveles de anticuerpos anti-IL-6 presentes en la sangre u otros fluidos corporales de un sujeto.

La presente invención también contempla anticuerpos anti- IL-6 que comprenden cualquiera de las secuencias de polipéptidos o polinucleótidos descritas en la presente que sustituyen a cualquiera de las otras secuencias de polinucleótidos descritas en la presente. A modo de ejemplo y no taxativamente, la presente invención contempla anticuerpos que comprenden la combinación de cualesquiera secuencias de cadena ligera variable y pesada variable descritas en la presente y contempla, adicionalmente, anticuerpos que resultan de la sustitución de cualquiera de las otras secuencias de CDR descritas en la presente por cualquiera de las secuencias de CDR descritas en la presente.

Ejemplos de modalidades adicionales de la invención En otra modalidad, la invención contempla uno o más anticuerpos o fragmento de anticuerpo anti-IL-ß que pueden unirse específicamente al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) y/o competir para unirse al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) en un polipéptido de IL-6 humana intacta o fragmento del mismo como un anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25., Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 y anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple y fragmentos de los mismos (que contienen una o más CDR de los anticuerpos antes mencionados) que se unen específicamente a la IL-6, que preferentemente son aglicosilados . En una modalidad preferida, el anticuerpo anti-IL-6 o fragmento del mismo puede unirse específicamente al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) y/o competir por unirse al/a los mismo (s) epitopo(s) lineal (es) o conformacional (es) en un polipéptido de IL-6 humana intacta o un fragmento del mismo como Abl o un anticuerpo que comprende las CDR de Abl.

En otra modalidad de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 que se une específicamente a los mismos epítopos lineales o conformacionales en un polipéptido de IL-6 intacta o un fragmento del mismo que está unido específicamente por Abl, se une a un/unos epítopo/s de IL-6 determinados por el mapeo epitópico usando fragmentos del polipéptido lineales superpuestos que abarcan todo el largo del polipéptido de IL-6 humana nativa. En una modalidad de la invención, el epítopo de IL-6 comprende o, de manera alternativa, consiste en uno o más residuos comprendidos en fragmentos de IL-6 seleccionados a partir de aquellos que comprenden respectivamente los residuos de aminoácidos 37-51, los residuos de aminoácidos 70-84, los residuos aminoácidos 169-183, los residuos de aminoácidos 31-45 y /o los residuos de aminoácidos 58-72.

La invención también se dirige a un anticuerpo anti-IL-6 que se une al mismo epítopo de IL-6 y/o compite con un anticuerpo anti-IL-6 para unirse a IL-6 como un anticuerpo o fragmento de anticuerpo descrito en la presente, incluido pero sin limitación, un anticuerpo anti-IL-6 seleccionado a partir de Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 y anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple y fragmentos de los mismos (que contienen una o más CDR de los anticuerpos antes mencionados) que se unen específicamente a la IL-6, que preferentemente son aglicosilados .

En otra modalidad, la invención también se dirige a un anticuerpo aislado o un fragmento de anticuerpo anti-IL-6 que comprende una o más de las CDR contenidas en las secuencias de polipéptido de VH que comprenden: las SEQ ID NO: 3, 18, 19, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 117, 118, 123, 139, 155, 171, 187, 203, 219, 235, 251, 267, 283, 299, 315, 331, 347, 363, 379, 395, 411, 427, 443, 459, 475, 491, 507, 523, 539, 555, 571, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 668, 672, 676, 680, 684, 688, 691, 692, 704, o 708 y/ una o más de las CDR contenidas en la secuencia de polipéptidos de VL que comprende: 2, 20, 21, 37, 53, 69, 85, 101, 119, 122, 138, 154, 170, 186, 202, 218, 234, 250, 266, 282, 298, 314, 330, 346, 362, 378, 394, 410, 426, 442, 458, 474, 490, 506, 522, 538, 554, 570, 647, 651, 660, 666, 667, 671, 675, 679, 683, 687, 693, 699, 702, 706 o 709 y las secuencias de VH y VL representadas en las alineaciones de anticuerpos comprendidas en las Figuras 34-37 de la presente solicitud.

En una modalidad de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 al que se hizo referencia en los dos párrafos .anteriores comprende al menos 2 regiones determinantes de complementariedad (CDR) en cada región ligera variable y pesada variable que son idénticas a aquellas contenidas en un anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 y anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple y fragmentos de los mismos (que contienen una o más CDR de los anticuerpos antes mencionados) que se unen específicamente a IL-6, que preferentemente son aglicosilados .

En una modalidad preferida, el anticuerpo anti-IL-6 al que se hizo referencia anteriormente comprende al menos 2 regiones determinantes de complementariedad (CDR) en cada una de la región ligera variable y pesada variable que son idénticas a aquellas contenidas en Abl. En otra modalidad, todas las CDR del anticuerpo anti-IL-6 a las que se hizo referencia anteriormente son idénticas a las CDR contenidas en una anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 o anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple y fragmentos de los mismos (que contienen una o más CDR de los anticuerpos antes mencionados) que se unen específicamente a IL-6, que preferentemente son aglicosilados. En una modalidad preferida de la invención, todas las CDR del anticuerpo anti-IL-6 indicado anteriormente son idénticas a las CDR contenidas en Abl, por ejemplo, un anticuerpo que comprende las secuencias de VH y VL comprendidas en la SEQ ID NO: 657 y SEQ ID NO: 709 respectivamente.

La invención contempla adicionalmente que el o los anticuerpos anti-IL-6 indicados anteriormente sean aglicosilados, que contengan una región Fe que ha sido modificada para alterar la función efectora, la semivida, la proteólisis y/o la glicolisación, sean humanos, humanizados, de cadena simple o quiméricos y sean un anticuerpo humanizado que proviene de un anticuerpo anti-IL-6 de conejo (progenitor) . Ejemplos de regiones constantes que proporcionan la producción de anticuerpos aglicosilados en Pichia están comprendidos en la SEQ ID NO: 588 y SEQ ID NO: 586 que se codifican respectivamente por las secuencias de ácido nucleico en la SEQ ID NO: 589 y SEQ ID NO:587.

La invención contempla adicionalmente uno o más anticuerpos anti-IL-6 donde las regiones flanqueantes (FR) en la región ligera variable y las regiones pesadas variables de dicho anticuerpo son respectivamente FR humanas sin modificar o que han sido modificadas mediante la sustitución de como máximo 2 o 3 residuos FR humanos en la región de cadena ligera o pesada variables con los correspondientes residuos FR del anticuerpo de conejo progenitor y donde dichas FR humanas provienen de secuencias de anticuerpos de cadenas pesadas y ligeras variables humanas que se han seleccionado de una biblioteca de secuencias de anticuerpo germinales humanas, basándose en su alto nivel de homología con las regiones de cadenas pesadas o ligeras variables de conejo correspondientes con relación a otras secuencias de anticuerpo germinales humanas contenidas en la biblioteca.

En una modalidad de la invención, el anticuerpo anti-IL-6 o fragmento del mismo puede unirse específicamente a células humanas que expresan IL-6 y/o o a moléculas de IL-6 solubles circulantes, incluidas IL-6 expresadas en o por células humanas en un paciente que padece una enfermedad asociada con células que expresan IL-6.

En otra modalidad, la enfermedad se selecciona de fatiga general, fatiga inducida por el ejercicio, fatiga relacionada con el cáncer, fatiga relacionada con enfermedad inflamatoria, síndrome de fatiga crónica, fibromialgia, caquexia cancerosa, caquexia cardíaca, caquexia respiratoria, caquexia renal, caquexia relacionada con la edad, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico (SLE), artritis idiopática juvenil sistémica, psoriasis, artropatía psoriásica, espondilitis anquilosante, enfermedad inflamatoria intestinal (IBD), polimialgia reumática, arteritis de células gigantes, vasculitis autoinmune, enfermedad crónica de injerto versus huésped (GVHD) , síndrome de Sjogren, enfermedad de Still de comienzo en el adulto, artritis reumatoide, artritis idiopática juvenil sistémica, osteoartritis, osteoporosis, enfermedad ósea de Paget, osteoartritis, mieloma múltiple, linfoma de Hodgkin, linfoma no-Hodgkin, cáncer de próstata, leucemia, cáncer de células renales, enfermedad de Castleman multicéntrica , cáncer de ovario, tolerancia a fármacos en quimioterapia contra el cáncer, toxicidad de quimioterapia contra el cáncer, enfermedad cardiaca isquémica, ateroesclerosis, obesidad, diabetes, asma, esclerosis múltiple, enfermedad de Alzheimer, enfermedad cerebrovascular, fiebre, respuesta de fase aguda, alergias, anemia, anemia de inflamación (anemia de enfermedad crónica) , hipertensión, depresión, depresión asociada con enfermedad crónica, trombosis, trombocitosis, insuficiencia cardiaca aguda, síndrome metabólico, abortos naturales, obesidad, prostatitis crónica, glomerulonefritis, enfermedad inflamatoria pélvica, lesión por reperfusión, rechazo de transplante, enfermedad de injerto versus huésped (GVHD) , gripe aviar, viruela, gripe pandémica, síndrome de distrés respiratorio del adulto (ARDS) , síndrome respiratorio agudo severo (SARS) , sepsis y síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SIRS) . En una modalidad preferida, la enfermedad se selecciona de cáncer, trastorno inflamatorio, trastorno viral o trastorno autoinraune. En una modalidad particularmente preferida, la enfermedad es artritis, caquexia y síndrome de desgaste.

La invención contempla adicionalmente anticuerpos o fragmentos de anticuerpo anti-IL-6 directa o indirectamente unidos a una etiqueta detectable o a un agente terapéutico.

La invención también contempla una o más secuencias de ácido nucleico que dan como resultado la expresión de un anticuerpo o fragmento de anticuerpo tal como se estableció anteriormente, incluidas aquellas que comprenden, o de manera alternativa consisten en, codones preferidos de levadura o humanos. La invención también contempla vectores (incluidos vectores plásmidos o recombinantes virales) que comprenden dicha/s secuencia/s de ácido nucleico. La invención también contempla células hospedadoras o células hospedadoras recombinantes que expresan al menos uno de los anticuerpos establecidos anteriormente, incluidas células de mamíferos, de levadura, bacterianas y de insectos. En una modalidad preferida, la célula hospedadora es una célula de levadura. En una modalidad preferida adicional, la célula de levadura es una célula diploide de levadura. En una modalidad aún más preferida, la célula de levadura es una célula Pichia.

La invención también contempla un método de tratamiento que comprende administrar a un paciente que padece una enfermedad o afección asociada con células que expresan IL-6, una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un anticuerpo o fragmento de anticuerpo IL-6. Las enfermedades que pueden tratarse se presentan en la lista no taxativa establecida anteriormente. En una modalidad preferida, la enfermedad se selecciona de cáncer, enfermedad autoinmune o afección inflamatoria. En una modalidad particularmente preferida, la enfermedad es cáncer o infección viral. En otra modalidad, el tratamiento incluye adicionalmente la administración de otro agente o régimen terapéutico seleccionado a partir de quimioterapia, radioterapia, administración de citocina o terapia génica.

La invención contempla adicionalmente un método de imágenes in vivo que detecta la presencia de células que expresan IL-6 que comprende administrar una cantidad efectiva desde el punto de vista del diagnóstico de al menos un anticuerpo anti-IL-6. En una modalidad, dicha administración incluye adicionalmente la administración de un radionúclido o fluoróforo que facilita la detección del anticuerpo en sitios de la enfermedad que expresan IL-6. En otra modalidad de la invención, el método de imágenes in vivo se utiliza para detectar tumores o metástasis que expresan IL-6 o se usa para detectar la presencia de sitios de trastornos autoinmunes asociados con células que expresan IL-6. En una modalidad adicional, los resultados de tal método de imágenes in vivo se usan para facilitar el diseño de un régimen terapéutico apropiado que incluye regímenes terapéuticos incluyendo radioterapia, quimioterapia o una combinación de estos.

Pollnucleótldos que codifican pollpéptldos de anticuerpo anti- IL-6 La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 2: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCGGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAATTATCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGCGTCCCAAGCTCCTGATeTATAGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCC GATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTCTGAGGAATATTGATAATGCTTTCGGC GGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCA TCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTT ( SEQ ID NO: 10) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 3: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAACTACTACGTGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGAATCATTTATGGTAGTGATGAAACGGCCTACGCGACCTGGGCGATA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAGCC GCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGATAGTAGTGAGTGGGATGCAAAATTTAAC TTGTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTC CCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAG G (SEQ ID NO: 11) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 12; SEQ ID NO: 13 y SEQ ID NO: 14 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 2.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 15; SEQ ID NO: 16 y SEQ ID NO: 17 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 3.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 10 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 2, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 11 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 3; los polinucleótidos que codifican regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 12; SEQ ID NO: 13 y SEQ ID NO: 14) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 10; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 15; SEQ ID NO: 16 y SEQ ID NO: 17) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 11 y polinucleótidos que codifican las secuencias de cadena ligera y pesada variable en SEQ ID NO: 657 y SEQ ID NO: 709 respectivamente, por e . , las secuencias de ácido nucleico en SEQ ID NO: 700 y SEQ ID NO: 723 y fragmentos o variantes de los mismos, por ej . , basados en la degeneración de codones. Estas secuencias de ácido nucleico que codifican secuencias de cadena pesada y ligera variables pueden expresarse solas o en combinación y estas secuencias preferentemente se fusionan a secuencias constantes variables adecuadas, por ej . , aquellas en SEQ ID NO: 589 y SEQ ID NO: 587.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 21: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGACCATTTACAGTTGGTTATCCTGGTATCAGCAGAAG CCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACCAGGCATCCGATCTGGCATCTGGGGTCCCATCG CGATTCAGCGGCAGTGGGGCTGGGACAGAGTACACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGTGAC GATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTGGTAGTAATGTTGATAATGTTTTCGGC GGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCA TCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCC AGAGAGGCCAAAG (SEQ ID NO: 29) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 22: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGGAGCAGCTGAAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTTACC TGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAATGACCATGCAATGGGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGG AAGGGGCTGGAATACATCGGATTCATTAATAGTGGTGGTAGCGCACGCTACGCGAGCTGGGCA GAAGGCCGATTCACCATCTCCAGAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACA ACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGTCAGAGGGGGTGCTGTTTGGAGTATTCATAGTTTT GATCCCTGGGGCCCAGGGACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTC TTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTC AAG (SEQ ID NO: 30) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 31; SEQ ID NO: 32 y SEQ ID NO: 33 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 21.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 34; SEQ ID NO: 35 y SEQ ID NO: 36 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 22.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 29 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 21, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 30 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 22; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 31; SEQ ID NO: 32 y SEQ ID NO: 33) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 29; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 34; SEQ ID NO: 35 y SEQ ID NO: 36) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 30.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 37: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCCGCCGTGCTGACCCAGACTCCATCTCCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCAGCATCAGTTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATGACAACAACTACTTATCCTGGTTTCAG CAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTC CCATCGCGGTTCGTGGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCACAGACGTGCAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTATTGTGCAGGCGTTTATGATGATGATAGTGATAATGCCTTC GGCGGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCG CCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCT (SEQ ID NO: 45) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 38: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTGGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACCCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTGTCTACTACATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGATTCATTACAATGAGTGATAATATAAATTACGCGAGCTGGGCGAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGAGTCGTGGCTGGGGTACAATGGGTCGGTTGGAT CTCTGGGGCCCAGGCACCCTCGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTC CCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAG G (SEQ ID NO: 46) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 47; SEQ ID NO: 48 y SEQ ID NO: 49 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 37.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 50; SEQ ID NO: 51 y SEQ ID NO: 52 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 38.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 45 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 37, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 46 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 38; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 47; SEQ ID NO: 48 y SEQ ID NO: 49) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 37; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 50; SEQ ID NO: 51 y SEQ ID NO: 52) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 38.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 53: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCATATGTGACCCTGTGCTGACCCAGACTCCATCTCCCGTATCTGCACCTGTGGGAGGCACA GTCAGCATCAGTTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATGAGAACAACTATTTATCCTGGTTTCAG CAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCACTCTGGATTCTGGGGTC CCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATTACAGACGTGCAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTATTGTGCAGGCGTTTATGATGATGATAGTGATGATGCCTTC GGCGGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCG CCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTT (SEQ ID NO: 61) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 54: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTGGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGGAGCAGCTGAAGGAGTCCGGAGGAGGCCTGGTAACGCCTGGAGGAACCCTGACACTCACC TGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAATGCCTACTACATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGG AAGGGGCTGGAATGGATCGGATTCATTACTCTGAATAATAATGTAGCTTACGCGAACTGGGCG AAAGGCCGATTCACCTTCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACA CCCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGAGTCGTGGCTGGGGTGCAATGGGTCGGTTG GATCTCTGGGGCCATGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTC TTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTC AAGG (SEQ ID NO: 62) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 63; SEQ ID NO: 64 y SEQ ID NO: 65 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 53.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 66; SEQ ID NO: 67 y SEQ ID NO: 68 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones ipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 54.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 61 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 53, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 62 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 54; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 63; SEQ ID NO: 64 y SEQ ID NO: 65) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 53; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 66; SEQ ID NO: 67 y SEQ ID NO: 68) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 54.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 69: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCCCAAGTGCTGACCCAGACTCCATCGCCTGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAACTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTGATGATAACAACTGGTTAGGCTGGTATCAG CAGAAACGAGGGCAGCCTCCCAAGTACCTGATCTATTCTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTC CCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTGCAGGCGGTTTTAGTGGTAATATCTTTGCTTTCGGC GGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCA TCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCT ( SEQ ID NO: 77) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 70: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTCTCTGGCTTCTCCCTCAGTAGCTATGCAATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGAAAG GGGCTGGAGTGGATCGGAATCATTGGTGGTTTTGGTACCACATACTACGCGACCTGGGCGAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAGAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGTGGTCCTGGTAATGGTGGTGACATCTGGGGC CAAGGGACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCA CCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACT (SEQ ID NO: 78) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 79; SEQ ID NO: 80 y SEQ ID NO: 81 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, . o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 69.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 82; SEQ ID NO: 83 y SEQ ID NO: 84 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 70.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una . o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 77 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 69, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 78 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 70; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 79; SEQ ID NO: 80 y SEQ ID NO: 81) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 69; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 82; SEQ ID NO: 83 y SEQ ID NO: 84) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 70.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 85: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCGCCCGTGTCTGTACCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATAATTTCTTATCGTGGTATCAGCAG AAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACCAGGCATCCAAACTGGCATCTGGGGTCCCA GATAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGT GACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCGGTTATGATGATGATGCTGATAATGCTTTCGGC GGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCA TCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTC (SEQ ID NO: 93) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO : 86: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACGCTCACCTGC ACAGTCTCTGGAATCGACCTCAGTGACTATGCAATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGAATCATTTATGCTGGTAGTGGTAGCACATGGTACGCGAGCTGGGCG AAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACA ACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGGATACGATGACTATGGTGATTTCGAT CGATTGGATCTCTGGGGCCCAGGCACCCTCGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCA TCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGC CTGGTCAAGGACT (SEQ ID NO: 94).

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 95; SEQ ID NO: 96 y SEQ ID NO: 97 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 85.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 98; SEQ ID NO: 99 y SEQ ID NO: 100 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 86.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 93 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 85, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 94 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 86; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 95; SEQ ID NO: 96 y SEQ ID NO: 97) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 85; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 98; SEQ ID NO: 99 y SEQ ID NO: 100) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 86.

La invención se dirige adiciónalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 101: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCGGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAATGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAATTATCCTGGTATCAGCAGAAA TCAGGGCAGCGTCCCAAGCTCCTGATCTATAGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCC GATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTCTGAGGAATATTGATAATGCTTTCGGC GGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCA TCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTC (SEQ ID NO: 109) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 102: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCTCAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAACTACTACATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGAATGATTTATGGTAGTGATGAAACAGCCTACGCGAACTGGGCGATA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAGCC GCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGATAGTAGTGACTGGGATGCAAAATTTAAC TTGTGGGGCCAAGGGACCCTCGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTC CCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAG G (SEQ ID NO: 110) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 111; SEQ ID NO: 112 y SEQ ID NO: 113 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 101.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 114; SEQ ID NO: 115 y SEQ ID NO: 116 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 102.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 109 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 101, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 110 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 102; los polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 111; SEQ ID NO: 112 y SEQ ID NO: 113) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 101; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 114; SEQ ID NO: 115 y SEQ ID NO: 116) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 102.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 122: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCACCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAGTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTGGTAATAACCAGGACTTATCCTGGTTTCAG CAGAGACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACGAAATATCCAAACTGGAATCTGGGGTC CCATCGCGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACACTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTACAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCGGTTATGATGATGATGCTGATAATGCT (SEQ ID NO: 130) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 123: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CACTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAGTAGTCGTACAATGTCCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAGTGGATCGGATACATTTGGAGTGGTGGTAGCACATACTACGCGACCTGGGCGAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGATTGGGCGATACTGGTGGTCACGCTTATGCTACT CGCTTAAATCTC (SEQ ID NO: 131) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 132; SEQ ID NO: 133 y SEQ ID NO: 134 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 122.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 135; SEQ ID NO: 136 y SEQ ID NO: 137 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 123.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 130 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 122, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 131 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 123; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 132; SEQ ID NO: 133 y SEQ ID NO: 134) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 122; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 135; SEQ ID NO: 136 y SEQ ID NO: 137) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 123.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 138: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCGTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCAGCATCAGTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAGTAATAAGTACCTAGCCTGGTATCAG CAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACTGGACATCCAAACTGGCATCTGGGGCC CCATCACGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACAATTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCGCTTATGATGATGATGCTGATAATGCT (SEQ ID NO: 146) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 139: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAAGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCAAGCCTGACGAAACCCTGACACTCACCTGC ACAGCCTCTGGATTCTCCCTGGAGGGCGGCTACATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGAATCAGTTATGATAGTGGTAGCACATACTACGCGAGCTGGGCGAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAGACCTCGTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACA ACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGCGTCAGATCACTAAAATATCCTACTGTTACTTCTGAT GACTTG (SEQ ID NO: 147) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 148; SEQ ID NO: 149 y SEQ ID NO: 150 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 138.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6. comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 151; SEQ ID NO: 152 y SEQ ID NO: 153 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 139.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 146 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 138, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 147 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 139; los polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 148; SEQ ID NO: 149 y SEQ ID NO: 150) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 138; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 151; SEQ ID NO: 152 y SEQ ID NO: 153) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 139.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 154: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCACCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAGTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATAATAACGACTTAGCCTGGTATCAG CAGAAACCAGGGCAGCCTCCTAAACTCCTGATCTATTATGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTC CCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAG TGTGACGATGCTGCCGCTTACTACTGTCTAGGCGGTTATGATGATGATGCTGATAATGCT (SEQ ID NO: 162) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 155: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTATCTGGATTATCCCTCAGTAGCAATACAATAAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAGTGGATCGGATACATTTGGAGTGGTGGTAGTACATACTACGCGAGCTGGGTGAAT GGTCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGGGGTTACGCTAGTGGTGGTTATCCTTATGCC ACTCGGTTGGATCTC (SEQ ID NO: 163) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 164; SEQ ID NO: 165 y SEQ ID NO: 166 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 154.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 167; SEQ ID NO: 168 y SEQ ID NO: 169 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 155.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 162 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 154, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 163 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 155; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 164; SEQ ID NO: 165 y SEQ ID NO: 166) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 154; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 167; SEQ ID NO: 168 y SEQ ID NO: 169) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 155.

' La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 170: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAATTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATAACGACTACTTATCCTGGTATCAA CAGAGGCCAGGGCAACGTCCCAAGCTCCTAATCTATGGTGCTTCCAAACTGGCATCTGGGGTC CCGTCACGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGAAACAGTTTACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTGGGCGATTATGATGATGATGCTGATAATACT (SEQ ID NO: 178) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 171: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACTTGC ACAGTCTCTGGATTCACCCTCAGTACCAACTACTACCTGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGG AAGGGGCTAGAATGGATCGGAATCATTTATCCTAGTGGTAACACATATTGCGCGAAGTGGGCG AAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCG ACAACCGAGGACACAGCCACGTATTTCTGTGCCAGAAATTATGGTGGTGATGAAAGTTTG (SEQ ID NO: 179) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 180; SEQ ID NO: 181 y SEQ ID NO: 182 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 170.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 183; SEQ ID NO: 184 y SEQ ID NO: 185 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 171.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de p'olinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 178 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 170, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 179 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 171; los polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 180; SEQ ID NO: 181 y SEQ ID NO: 182) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 170; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 183; SEQ ID NO: 184 y SEQ ID NO: 185) de la región de. cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 171.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 186: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGACCATTGGCAATGCATTAGCCTGGTATCAGCAGAAA TCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACAAGGCATCCAAACTGGCATCTGGGGTCCCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTACACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCG GATGCTGCCACTTACTACTGTCAATGGTGTTATTTTGGTGATAGTGTT (SEQ ID NO: 194) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 187: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCACTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGGAGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCCTGGTCCAGCCTGAGGGATCCCTGACACTCACC TGCACAGCCTCTGGATTCGACTTCAGTAGCGGCTACTACATGTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCA GGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGCGTGTATTTTCACTATTACTACTAACACTTACTACGCGAGC TGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAGACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATGACC AGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATCTCTGTGCGAGAGGGATTTATTCTGATAATAAT TATTATGCCTTG (SEQ ID NO: 195) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 196; SEQ ID NO: 197 y SEQ ID NO: 198 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 186.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 199; SEQ ID NO: 200 y SEQ ID NO: 201 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 187.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 194 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 186, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 195 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 187; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 196; SEQ ID NO: 197 y SEQ ID NO: 198) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 186; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 199; SEQ ID NO: 200 y SEQ ID NO: 201) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 187.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 202: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGAGCATTGGCAATGCATTAGCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACAAGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCG CGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGTGCC GATGCTGCCGCTTACTACTGTCAATGGTGTTATTTTGGTGATAGTGTT (SEQ ID NO: 210) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 203: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGCAGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCCTGGTCAAGCCGGGGGCATCCCTGACACTCACC TGCAAAGCCTCTGGATTCTCCTTCAGTAGCGGCTACTACATGTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCA GGGAAGGGGCTGGAGTCGATCGCATGCATTTTTACTATTACTGATAACACTTACTACGCGAAC TGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAGCCCTCGTCGCCCACGGTGACTCTGCAAATGACC AGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAGGGGGATTTATTCTACTGATAAT TATTATGCCTTG (SEQ ID NO: 211) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 212; SEQ ID NO: 213 y SEQ ID NO: 214 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 202.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 215; SEQ ID NO: 216 y SEQ ID NO: 217 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 203.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 210 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 202, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 211 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 203; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 212; SEQ ID NO: 213 y SEQ ID NO: 214) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 202; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 215; SEQ ID NO: 216 y SEQ ID NO: 217) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 203.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 218: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTCAGAGCGTTAGTAGCTACTTAAACTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACAGGGCATCCACTCTGGAATCTGGGGTCCCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCC GATGCTGCCACTTACTACTGTCAATGTACTTATGGTACTAGTAGTAGTTATGGTGCTGCT (SEQ ID NO: 226) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 219: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACCGTCTCTGGTATCTCCCTCAGTAGCAATGCAATAAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGAATCATTAGTTATAGTGGTACCACATACTACGCGAGCTGGGGGAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACTAGTCCGACA ACCGAGGACACGGCCACCTACTTCTGTGCCAGAGATGACCCTACGACAGTTATGGTTATGTTG ATACCTTTTGGAGCCGGCATGGACCTC (SEQ ID NO: 227) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 228; SEQ ID NO: 229 y SEQ ID NO: 230 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 218.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 231; SEQ ID NO: 232 y SEQ ID NO: 233 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 219.

La invención también contempla secuencias de polinucleotidos que incluyen una o más secuencias de polinucleotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 226 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 218, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 227 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 219; los polinucleotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 228; SEQ ID NO: 229 y SEQ ID NO: 230) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 218; y los polinucleotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 231; SEQ ID NO: 232 y SEQ ID NO: 233) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 219.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleotidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 234: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCCCAAGTGCTGACCCAGACTGCATCGCCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAACTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATAAGAACAACTACTTATCCTGGTATCAG CAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAAGGCCTGATCTATTCTGCATCGACTCTAGATTCTGGGGTC CCATTGCGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACGTGCAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCAGTTATGATTGTAGTAGTGGTGATTGTTAT GCT (SEQ ID NO: 242) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 235: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGTTGGAGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCAAGCCTGAGGGATCCCTGACACTCACCTGC ACAGCCTCTGGATTCTCCTTCAGTAGCTACTGGATGTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAGTGGATCGCATGCATTGTTACTGGTAATGGTAACACTTACTACGCGAACTGGGCG AAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATGACCAGTCTG ACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTTTGTGCGAAAGCCTATGACTTG (SEQ ID NO: 243) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 244; SEQ ID NO: 245 y SEQ ID NO: 246 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 234.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 247; SEQ ID NO: 248 y SEQ ID NO: 249 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 235.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 242 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 234, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 243 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 235; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 244; SEQ ID NO: 245 y SEQ ID NO: 246) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 234; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 247; SEQ ID NO: 248 y SEQ ID NO: 249) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 235.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 250: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT TCCACATTTGCCGCCGTGCTGACCCAGACTCCATCTCCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCAGCATCAGTTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATGACAACAACTATTTATCCTGGTATCAG CAGAAACCAGGACAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTC CCATCGCGGTTCAAAGGCACGGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCACAGACGTGCAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTATTGTGCAGGCGTTTTTAATGATGATAGTGATGATGCC (SEQ ID NO: 258) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable, de la SEQ ID NO: 251: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCCCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACACTCTCTGGATTCTCCCTCAGTGCATACTATATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGATTCATTACTCTGAGTGATCATATATCTTACGCGAGGTGGGCGAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGAGTCGTGGCTGGGGTGCAATGGGTCGGTTGGAT CTC (SEQ ID NO: 259) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 260; SEQ ID NO: 261 y SEQ ID NO: 262 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 250.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 263; SEQ ID NO: 264 y SEQ ID NO: 265 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 251.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 258 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 250, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 259 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 251; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 260; SEQ ID NO: 261 y SEQ ID NO: 262) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 250; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 263; SEQ ID NO: 264 y SEQ ID NO: 265) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 251.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 266: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTCGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCGCCCGTGTCTGCGGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAGTTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATAACAACAAAAATTTAGCCTGGTATCAG CAGAAATCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACTGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTC TCATCGCGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCGTCAGCGGCGTGCAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCGTTTTTGATGATGATGCTGATAATGCT (SEQ ID NO: 274) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 267: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAATGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTACTCCATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATATATCGGAGTCATTGGTACTAGTGGTAGCACATACTACGCGACCTGGGCGAAA GGCCGATTCACCATCTCCAGAACCTCGACCACGGTGGCTCTGAAAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGTCAGGAGTCTTTCTTCTATTACTTTCTTG (SEQ ID NO: 275) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-ß comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 276; SEQ ID NO: 277 y SEQ ID NO: 278 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 266.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 279; SEQ ID NO: 280 y SEQ ID NO: 281 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 267.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 274 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 266, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 275 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 267; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 276; SEQ ID NO: 277 y SEQ ID NO: 278) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 266; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 279; SEQ ID NO: 280 y SEQ ID NO: 281) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 267.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 282: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCATTCGAATTGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTCAGAACATTTATAGATACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGTTCCTGATCTATCTGGCATCTACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCG CGGTTTAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCC GATGCTGCCACTTACTACTGTCAAAGTTATTATAGTAGTAATAGTGTCGCT (SEQ ID NO: 290) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de. polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 283: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGGAGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCCAGCCTGAGGGATCCCTGACACTCACC TGCACAGCTTCTGAGTTAGACTTCAGTAGCGGCTACTGGATATGCTGGGTCCGCCAGGTTCCA GGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGATGCATTTATACTGGTAGTAGTGGTAGCACTTTTTACGCG AGTTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATG ACCAGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAGAGGTTATAGTGGCTTTGGT TACTTTAAGTTG (SEQ ID NO: 291) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 292; SEQ ID NO: 293 y SEQ ID NO: 294 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 282.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 295; SEQ ID NO: 296 y SEQ ID NO: 297 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 283.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 290 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 282, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 291 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 283; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 292; SEQ ID NO: 293 y SEQ ID NO: 294) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 282; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 295; SEQ ID NO: 296 y SEQ ID NO: 297) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 283.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucléotidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 298: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGGACATTTATAGGTTATTGGCCTGGTATCAACAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGATTCATCCGATCTGGCATCTGGGGTCCCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCGCCATCAGCGGTGTGCAGTGTGAC GATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGCTTGGAGTTATAGTGATATTGATAATGCT (SEQ ID NO: 306) En otra modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucléotidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 299: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCGGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTACTACATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGAATCATTACTACTAGTGGTAATACATTTTACGCGAGCTGGGCGAAA GGCCGGCTCACCATCTCCAGAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAACTTCTGATATTTTTTATTATCGTAACTTG (SEQ ID NO: 307) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 308; SEQ ID NO: 309 y SEQ ID NO: 310 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 298.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 311; SEQ ID NO: 312 y SEQ ID NO: 313 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 299.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 306 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 298, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 307 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 299; los polinucleótidos que codifican las. regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 308; SEQ ID NO: 309 y SEQ ID NO: 310) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 298; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 311; SEQ ID NO: 312 y SEQ ID NO: 313) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 299.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 314: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACGTTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACTGCATCACCCGTGTCTGCCGCTGTGGGAGCCACA GTCACCATCAACTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATGACATGGACTTAGCCTGGTTTCAG CAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATTCTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTC CCATCGCGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCGCTTTTGATGATGATGCTGATAATACT (SEQ ID NO: 322) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 315: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTCTCTGGATTCTCCCTCACTAGGCATGCAATAACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGATGCATTTGGAGTGGTGGTAGCACATACTACGCGACCTGGGCGAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTCAGAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTACTTCTGTGCCAGAGTCATTGGCGATACTGCTGGTTATGCTTATTTT ACGGGGCTTGACTTG (SEQ ID NO: 323) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 324; SEQ ID NO: 325 y SEQ ID NO: 326 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 314.

En una modalidad adicional de la invención, , los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 327; SEQ ID NO: 328 y SEQ ID NO: 329 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 315.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una. o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 322 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 314, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 323 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 315; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 324; SEQ ID NO: 325 y SEQ ID NO: 326) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 314; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 327; SEQ ID NO: 328 y SEQ ID NO: 329) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 315.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 330: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATAATTGGTTATCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATACTGCATCCAGTCTGGCATCTGGGGTCCCATCG CGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGGAGTGTGCC GATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATACTAGTGATGTTGATAATGTT (SEQ ID NO: 338) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 331: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGGCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTCTCTGGAATCGACCTCAGTAGCTATGCAATGGGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATACATCGGAATCATTAGTAGTAGTGGTAGCACATACTACGCGACCTGGGCGAAA GGCCGATTCACCATCTCACAAGCCTCGTCGACCACGGTGGATCTGAAAATTACCAGTCCGACA ACCGAGGACTCGGCCACATATTTCTGTGCCAGAGGGGGTGCTGGTAGTGGTGGTGTTTGGCTG CTTGATGGTTTTGATCCC (SEQ ID NO: 339).

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 340; SEQ ID NO: 341 y SEQ ID NO: 342 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 330.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 343; SEQ ID NO: 344 y SEQ ID NO: 345 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 331.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 338 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 330, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 339 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 331; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 340; SEQ ID NO: 341 y SEQ ID NO: 342) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 330; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 343; SEQ ID NO: 344 y SEQ ID NO: 345) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 331.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 346: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAAATGTGCCGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGC ACAGTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGAACATTTATAATTGGTTAGCCTGGTATCAGCAG AAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATACTGTAGGCGATCTGGCATCTGGGGTCTCA TCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGT GCCGATGCTGCCACTTACTATTGTCAACAGGGTTATAGTAGTAGTTATGTTGATAATGTT (SEQ ID NO: 354) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 347: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGGAGCAGCTGAAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACC TGCACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAATGACTATGCAGTGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGG AAGGGGCTGGAATGGATCGGATACATTCGTAGTAGTGGTACCACAGCCTACGCGACCTGGGCG AAAGGCCGATTCACCATCTCCGCTACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACA ACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGGGGTGCTGGTAGTAGTGGTGTGTGGATC CTTGATGGTTTTGCTCCC (SEQ ID NO: 355) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 356; SEQ ID NO: 357 y SEQ ID NO: 358 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 346.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 359; SEQ ID NO: 360 y SEQ ID NO: 361 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia-- de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 347.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 354 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 346, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 355 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 347; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 356; SEQ ID NO: 357 y SEQ ID NO: 358) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 346; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 359; SEQ ID NO: 360 y SEQ ID NO: 361) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 347.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 362: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCTCAAGTGCTGACCCAGACTCCATCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATCAGAACAACTACTTATCCTGGTTTCAG CAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCGGCCACTCTGGCATCTGGGGTC CCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTGCAGGCGCTTATAGGGATGTGGATTCT (SEQ ID NO: 370) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 363: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGTTGGAGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCAAGCCTGGGGCATCCCTGACACTCACCTGC ACAGCCTCTGGATTCTCCTTTACTAGTACCTACTACATCTACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGG AAGGGGCTGGAGTGGATCGCATGTATTGATGCTGGTAGTAGTGGTAGCACTTACTACGCGACC TGGGTGAATGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATGACC AGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAAATGGGATTATGGTGGTAATGTT GGTTGGGGTTATGACTTG (SEQ ID NO: 371) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 372; SEQ ID NO: 373 y SEQ ID NO: 374 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 362.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 375; SEQ ID NO: 376 y SEQ ID NO: 377 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 363.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 370 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 362, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 371 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 363; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 372; SEQ ID NO: 373 y SEQ ID NO: 374) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 362; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 375; SEQ ID NO: 376 y SEQ ID NO: 377) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 363.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 378: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCATTCGAATTGACCCAGACTCCATCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAGTAGTTACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGTTCCTGATCTACAGGGCGTCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCG CGATTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCC GATGCTGCCACTTACTACTGTCAAAGCTATTATGATAGTGTTTCAAATCCT (SEQ ID NO: 386) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 379: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGTTGGAGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCAAGCCTGAGGGATCCCTGACACTCACCTGC AAAGCCTCTGGACTCGACCTCGGTACCTACTGGTTCATGTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGG AAGGGGCTGGAGTGGATCGCTTGTATTTATACTGGTAGTAGTGGTTCCACTTTCTACGCGAGC TGGGTGAATGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATGACC AGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACTTATTTTTGTGCGAGAGGTTATAGTGGTTATGGTTAT TTTAAGTTG (SEQ ID NO: 387).

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 388; SEQ ID NO: 389 y SEQ ID NO: 390 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 378.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 391; SEQ ID NO: 392 y SEQ ID NO: 393 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 379.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 386 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 378, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 387 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 379; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 388; SEQ ID NO: 389 y SEQ ID NO: 390) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 378; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 391; SEQ ID NO: 392 y SEQ ID NO: 393) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 379.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 394: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GTCACATTTGCCATCGAAATGACCCAGAGTCCATTCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCAGCATCAGTTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATAAGAACAACCAATTATCCTGGTATCAG CAGAAATCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCGGCTCTGGCATCTGGGGTC CCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACGTGCAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTGCAGGCGCTATTACTGGTAGTATTGATACGGATGGT (SEQ ID NO: 402) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 395: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGTTGGAGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCAAGCCTGGGGCATCCCTGACACTCACCTGC ACAACTTCTGGATTCTCCTTCAGTAGCAGCTACTTCATTTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGG AAGGGGCTGGAGTGGATCGCATGCATTTATGGTGGTGATGGCAGCACATACTACGCGAGCTGG GCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACGCTGCAAATGACCAGT CTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAGAGAATGGGCATATAGTCAAGGTTAT TTTGGTGCTTTTGATCTC (SEQ ID NO: 403).

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 404; SEQ ID NO: 405 y SEQ ID NO: 406 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 394.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 407; SEQ ID NO: 408 y SEQ ID NO: 409 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 395.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 402 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 394, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 403 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 395; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 404; SEQ ID NO: 405 y SEQ ID NO: 406) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 394; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 407; SEQ ID NO: 408 y SEQ ID NO: 409) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 395.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 410: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGGATATTAGTAGCTACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAATCTGGAATCTGGGGTCTCATCG CGATTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTACACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCC GATGCTGCCACCTATTACTGTCAATGTACTTATGGTACTATTTCTATTAGTGATGGTAATGCT (SEQ ID NO: 418) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 411: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAATGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTACTTCATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAG GGGCTGGAATACATCGGATTCATTAATCCTGGTGGTAGCGCTTACTACGCGAGCTGGGTGAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAGTCCTCGACCACGGTAGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGGTTCTGATTGTTTCTTATGGAGCCTTTACCATC (SEQ ID NO: 419) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 420; SEQ ID NO: 421 y SEQ ID NO: 422 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 410.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 423; SEQ ID NO: 424 y SEQ ID NO: 425 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 411.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 418 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 410, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 419 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 411; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 420; SEQ ID NO: 421 y SEQ ID NO: 422) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 410; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 423; SEQ ID NO: 424 y SEQ ID NO: 425) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 411.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 426: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGGACATTGAAAGCTATCTAGCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCAATCTGGAATCTGGGGTCTCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCC GATGCTGCCACTTACTATTGTCAATGCACTTATGGTATTATTAGTATTAGTGATGGTAATGCT (SEQ ID NO: 434) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 427: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTGTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTACTTCATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAG GGGCTGGAATACATCGGATTCATGAATACTGGTGATAACGCATACTACGCGAGCTGGGCGAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGGTTCTTGTTGTTGCTTATGGAGCCTTTAACATC (SEQ ID NO: 435) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 436; SEQ ID NO: 437 y SEQ ID NO: 438 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 426.

En una modalidad adicional . de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 439; SEQ ID NO: 440 y SEQ ID NO: 441 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 427.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 434 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 426, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 435 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 427; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 436; SEQ ID NO: 437 y SEQ ID NO: 438) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 426; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 439; SEQ ID NO: 440 y SEQ ID NO: 441) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 427.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 442: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCCGCCGTGCTGACCCAGACTCCATCTCCCGTGTCTGAACCTGTGGGAGGCACA GTCAGCATCAGTTGCCAGTCCAGTAAGAGTGTTATGAATAACAACTACTTAGCCTGGTATCAG CAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCAATCTGGCATCTGGGGTC CCATCACGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACGTGCAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCAAGGCGGTTATACTGGTTATAGTGATCATGGGACT (SEQ ID NO: 450) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 443: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCAAGCCTGACGAAACCCTGACACTCACCTGC ACAGTCTCTGGAATCGACCTCAGTAGCTATCCAATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGATTCATTAATACTGGTGGTACCATAGTCTACGCGAGCTGGGCAAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGCAGTTATGTTTCATCTGGTTATGCCTACTAT TTTAATGTC (SEQ ID NO: 451) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 452; SEQ ID NO: 453 y SEQ ID NO: 454 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 442.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 455; SEQ ID NO: 456 y SEQ ID NO: 457 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 443.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 450 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 442, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 451 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 443; los polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 452; SEQ ID NO: 453 y SEQ ID NO: 454) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 442; y los polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 455; SEQ ID NO: 456 y SEQ ID NO: 457) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 443.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 458: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCCGCCGTGCTGACCCAGACTCCATCTCCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCAGCATCAGTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATAACAACTGGTTATCCTGGTTTCAG CAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACAAGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTC CCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACGTGCAG TGTGACGATGTTGCCACTTACTACTGTGCGGGCGGTTATCTTGATAGTGTTATT (SEQ ID NO: 466) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 459: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAGTACCTATTCAATAAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGCCTGGAATGGATCGGAATCATTGCTAATAGTGGTACCACATTCTACGCGAACTGGGCGAAA GGCCGATTCACCGTCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGAGAGTGGAATGTACAATGAATATGGTAAATTT AACATC (SEQ ID NO: 467) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 468; SEQ ID NO: 469 y SEQ ID NO: 470 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 458.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 471; SEQ ID NO: 472 y SEQ ID NO: 473 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 459.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 466 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 458, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 467 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 459; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 468; SEQ ID NO: 469 y SEQ ID NO: 470) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 458; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 471; SEQ ID NO: 472 y SEQ ID NO: 473) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 459.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 474: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCCTCTGATATGACCCAGACTCCATCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGAACATTTATAGCTTTTTGGCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTTCAAGGCTTCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGAC GATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTGCTACTGTGTATGATATTGATAATAAT ( SEQ ID NO: 482) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 475: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTTTCTGGAATCGACCTCAGTGCCTATGCAATGATCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAG GGGCTGGAATGGATCACAATCATTTATCCTAATGGTATCACATACTACGCGAACTGGGCGAAA GGCCGATTCACCGTCTCCAAAACCTCGACCGCGATGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGCAGAAAGTAGTAAGAATGCTTATTGGGGC TACTTTAACGTC (SEQ ID NO: 483) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 484; SEQ ID NO: 485 y SEQ ID NO: 486 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 474.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 487; SEQ ID NO: 488 y SEQ ID NO: 489 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables ) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 475.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 482 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 474, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 483 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 475; los polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 484; SEQ ID NO: 485 y SEQ ID NO: 486) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 474; y los polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 487; SEQ ID NO: 488 y SEQ ID NO: 489) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 475.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 490: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCCTCTGATATGACCCAGACTCCATCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGAACATTTATAGCTTTTTGGCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTTCAGGGCTTCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGAC GATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTGCTACTGTGTATGATATTGATAATAAT ( SEQ ID NO: 498) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 491: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTTTCTGGAATCGACCTCAGTGCCTATGCAATGATCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAG GGGCTGGAATGGATCACAATCATTTATCCTAATGGTATCACATACTACGCGAACTGGGCGAAA GGCCGATTCACCGTCTCCAAAACCTCGACCGCGATGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGCAGAAAGTAGTAAGAATGCTTATTGGGGC TACTTTAACGTC (SEQ ID NO: 499) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 500; SEQ ID NO: 501 y SEQ ID NO: 502 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 490.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 503; SEQ ID NO: 504 y SEQ ID NO: 505 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 491.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 498 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 490, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 499 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 491; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 500; SEQ ID NO: 501 y SEQ ID NO: 502) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 490; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 503; SEQ ID NO: 504 y SEQ ID NO: 505) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 491.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 506: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCCATTGAAATGACCCAGACTCCATCCCCCGTGTCTGCCGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGAGTGTTTTTAATAATATGTTATCCTGGTATCAGCAG AAACCAGGGCACTCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGCATCCGATCTGGCATCTGGGGTCCCA TCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGTGGCGTGGAGTGT GACGATGCTGCCACTTACTATTGTGCAGGGTATAAAAGTGATAGTAATGATGGCGATAATGTT (SEQ ID NO: 514) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 507: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAACAGGAATTCAATAACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAG GGGCTGGAATGGATCGGAATCATTACTGGTAGTGGTAGAACGTACTACGCGAACTGGGCAAAA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGCCATCCTGGTCTTGGTAGTGGTAACATC (SEQ ID NO: 515) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 516; SEQ ID NO: 517 y SEQ ID NO: 518 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 506.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 519; SEQ ID NO: 520 y SEQ ID NO: 521 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CD , o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 507.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 514 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 506, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 515 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 507; los polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID. NO: 516; SEQ ID NO: 517 y SEQ ID NO: 518) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 506; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 519; SEQ ID NO: 520 y SEQ ID NO: 521) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 507.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 522: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCGCAAGTGCTGACCCAGACTGCATCGTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAATTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATAACTACTTATCCTGGTATCAGCAG AAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATACTGCATCCAGCCTGGCATCTGGGGTCCCA TCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGAAGTGCAGTGT GACGATGCTGCCACTTACTACTGTCAAGGCTATTATAGTGGTCCTATAATTACT (SEQ ID NO: 530) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 523: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAATAACTACTACATACAATGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAG GGGCTGGAATGGATCGGGATCATTTATGCTGGTGGTAGCGCATACTACGCGACCTGGGCAAAC GGCCGATTCACCATCGCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGGATCTGAAGATGACCAGTCTGACA ACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGGACATTTGATGGTTATGAGTTG (SEQ ID NO: 531) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 532; SEQ ID NO: 533 y SEQ ID NO: 534 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 522.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 535; SEQ ID NO: 536 y SEQ ID NO: 537 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 523.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 530 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 522, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 531 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 523; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 532; SEQ ID NO: 533 y SEQ ID NO: 534) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 522; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 535; SEQ ID NO: 536 y SEQ ID NO: 537) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 523.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 538: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCACATTTGCCCAAGTGCTGACCCAGACTCCATCCCCTGTGTCTGTCCCTGTGGGAGACACA GTCACCATCAGTTGCCAGTCCAGTGAGAGCGTTTATAGTAATAACCTCTTATCCTGGTATCAG CAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACAGGGCATCCAATCTGGCATCTGGTGTC CCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGCACAG TGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCAAGGCTATTATAGTGGTGTCATTAATAGT ( SEQ ID NO: 546) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID \ NO: 539: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTGTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTACTTCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAG GGGCTGGAATACATCGGATTCATTAATCCTGGTGGTAGCGCATACTACGCGAGCTGGGCGAGT GGCCGACTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTAGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACC GAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGATTCTTATTGTTTCTTATGGAGCCTTTACCATC (SEQ ID NO: 547) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 548; SEQ ID NO: 549 y SEQ ID NO: 550 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 538.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 551; SEQ ID NO: 552 y SEQ ID NO: 553 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 539.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 546 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 538, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 547 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 539; los polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 548; SEQ ID NO: 549 y SEQ ID NO: 550) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 538; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 551; SEQ ID NO: 552 y SEQ ID NO: 553) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 539.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 554: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCACTGAGAGCATTGGCAATGAGTTATCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGGCTCCCAAGCTCCTGATCTATTCTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCACCGGCGTGGAGTGTGAT GATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTAGTGCTAATATTGATAATGCT (SEQ ID NO: 562) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 555: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACCGTCTCTGGATTCTCCCTCAGTAAGTACTACATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGAGAAG GGGCTGAAATACATCGGATACATTGATAGTACTACTGTTAATACATACTACGCGACCTGGGCG AGAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAGATCACCAGTCCGACA AGTGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGAAGTACTTATTTTACTGATGGAGGCCAT CGGTTGGATCTC (SEQ ID NO: 563) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 564; SEQ ID NO: 565 y SEQ ID NO: 566 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, ó regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 554.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 567; SEQ ID NO: 568 y SEQ ID NO: 569 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 555.

La invención también contempla secuencias de polinucleótidos que incluyen una o más secuencias de polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucleótidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucleótidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 562 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 554, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 563 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 555; los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 564; SEQ ID NO: 565 y SEQ ID NO: 566) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 554; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 567; SEQ ID NO: 568 y SEQ ID NO: 569) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 555.

La invención se dirige adicionalmente a polinucleótidos que codifican polipéptidos de los anticuerpos que poseen una especificidad de unión a IL-6. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptidos de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 570: ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGT GCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACA GTCACCATCAAGTGCCAGGCCACTGAGAGCATTGGCAATGAGTTATCCTGGTATCAGCAGAAA CCAGGGCAGGCTCCCAAGCTCCTGATCTATTCTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCACCGGCGTGGAGTGTGAT GATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTAGTGCTAATATTGATAATGCT (SEQ ID NO: 578) En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 571: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGT CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTAACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAGTACCTACAACATGGGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGAAGTATTACTATTGATGGTCGCACATACTACGCGAGCTGGGCGAAA GGCCGATTCACCGTCTCCAAAAGCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAACC GGGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGATTCTTATTGTTTCTTATGGGGCCTTTACCATC (SEQ ID NO: 579) .

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucleótidos de la SEQ ID NO 580; SEQ ID NO: 581 y SEQ ID NO: 582 que corresponden a polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 570.

En una modalidad adicional de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa, consisten en una o más secuencias de polinucléotidos de la SEQ ID NO 583; SEQ ID NO: 584 y SEQ ID NO: 585 que corresponden a polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (CDR, o regiones hipervariables) de la secuencia de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 571.

La invención también contempla secuencias de polinucléotidos que incluyen una o más secuencias de polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo descritos en la presente. En una modalidad de la invención, los polinucléotidos que codifican fragmentos del anticuerpo que posee una especificidad de unión a IL-6 comprenden, o de manera alternativa consisten en, uno, dos, tres o más, incluidos todos los siguientes polinucléotidos que codifican fragmentos de anticuerpo: el polinucleótido de la SEQ ID NO: 578 que codifica la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 570, el polinucleótido de la SEQ ID NO: 579 que codifica la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 571; los polinucléotidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 580; SEQ ID NO: 581 y SEQ ID NO: 582) de la región de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 570; y los polinucleótidos que codifican las regiones determinantes de complementariedad (SEQ ID NO: 583; SEQ ID NO: 584 y SEQ ID NO: 585) de la región de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 571.

En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden adicionalmente o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de cadena ligera constante kappa de la SEQ ID NO: 586: GTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGA ACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAG GTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGAC AGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTC TACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGA GAGTGT (SEQ ID NO: 587) .

En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden adicionalmente o, de manera alternativa, consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada constante gamma-1 de la SEQ ID NO: 588: GCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCT GGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCG TGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGA CTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATC TGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGAGCCCAAATCTTGT GACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTC CTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTG GTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAG GTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACGCCAGCACGTACCGTGTGGTCAGC GTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAAC AAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCA CAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGC CTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAG AACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAAG CTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAG GCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA (SEQ ID NO: 589) .

En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden adicionalmente, o de manera alternativa consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 700: GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGA CTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAACTACTACGTGACCTGGGTCCGTCAGGCT CCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCGGCATCATCTATGGTAGTGATGAAACCGCCTACGCTACC TCCGCTATAGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACCCTGTATCTTCAAATG AACAGCCTGAGAGCTGAGGACACTGCTGTGTATTACTGTGCTAGAGATGATAGTAGTGACTGG GATGCAAAGTTCAACTTGTGGGGCCAAGGGACCCTCGTCACCGTCTCGAGC (SEQ ID NO: 700) .

En otra modalidad de la invención, los polinucleótidos de la invención comprenden adicionalmente, o de manera alternativa consisten en la siguiente secuencia de polinucleótidos que codifica la secuencia de polipéptido de cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 723: GCTATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTC ACCATCACTTGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAGTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCA GGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATAGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGG TTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGAT TTTGCAACTTATTACTGCCAACAGGGTTATAGTCTGAGGAACATTGATAATGCTTTCGGCGGA GGGACCAAGGTGGAAATCAAACGT (SEQ ID NO: 723).

En una modalidad, la invención se dirige a un polinucleótido aislado que comprende un polinucleótido que codifica una secuencia de aminoácido de anticuerpo VH anti-IL-6 seleccionada de la SEQ ID NO: 3, 18, 19, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 117, 118, 123, 139, 155, 171, 187, 203, 219, 235, 251, 267, 283, 299, 315, 331, 347, 363, 379, 395, 411, 427, 443, 459, 475, 491, 507, 523, 539, 555, 571, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 668, 672, 676, 680, 684, 688, 691, 692, 704, o 708 o codifica una variante de la misma donde al menos un residuo flanqueante (residuo FR) fue sustituido por un aminoácido presente en la posición correspondiente en un polipéptido de VH de anticuerpo anti-IL-6 de conejo o una sustitución conservadora de aminoácidos.

En otra modalidad, la invención se dirige a un polinucleótido aislado que comprende la secuencia de polinucleótidos que codifica una secuencia de aminoácido de anticuerpo anti-IL-6 VL seleccionado de la SEQ ID NO: 2, 20, 21, 37, 53, 69, 85, 101, 119, 122, 138, 154, 170, 186, 202, 218, 234, 250, 266, 282, 298, 314, 330, 346, 362, 378, 394, 410, 426, 442, 458, 474, 490, 506, 522, 538, 554, 570, 647, 651, 660, 666, 667, 671, 675, 679, 683, 687, 693, 699, 702, 706 o 709 o codifica una variante de la misma donde al menos un residuo flanqueante (residuo FR) fue sustituido por un aminoácido presente en la posición correspondiente en un polipéptido de VL de anticuerpo anti-IL-6 de conejo o una sustitución conservadora de aminoácidos.

En aun otra modalidad, la invención se dirige a uno o más polinucleótidos heterólogos que comprenden una secuencia que codifica los polipéptidos contenidos en la SEQ ID NO: 2 y SEQ ID NO:3; SEQ ID N0:2 y SEQ ID NO:18; SEQ ID NO:2 y SEQ ID NO:19; SEQ ID NO:20 y SEQ ID NO: 3; SEQ ID NO:20 y SEQ ID NO: 18; SEQ ID NO:20 y SEQ ID NO:19; SEQ ID NO:21 y SEQ ID NO:22; SEQ ID NO:37 y SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:53 y SEQ ID NO:54; SEQ ID NO:69 y SEQ ID NO: 70; SEQ ID NO: 85 y SEQ ID NO: 86; SEQ ID NO: 101 y SEQ ID NO: 102; SEQ ID NO: 101 y SEQ ID NO: 117; SEQ ID NO: 101 y SEQ ID NO: 118; SEQ ID NO: 119 y SEQ ID NO: 102; SEQ ID NO: 119 y SEQ ID NO: 117; SEQ ID NO: 119 y SEQ ID NO: 118; SEQ ID NO: 122 y SEQ ID NO: 123; SEQ ID NO: 138 y SEQ ID NO: 139; SEQ ID NO: 154 y SEQ ID O: 155; SEQ ID NO: 170 y SEQ ID NO: 171; SEQ ID NO: 186 y SEQ ID O: 187; SEQ ID NO: 202 y SEQ ID NO: 203; SEQ ID NO: 218 y SEQ ID O: 219; SEQ ID NO: 234 y SEQ ID NO: 235; SEQ ID NO: 250 y SEQ ID O: 251; SEQ ID NO: 266 y SEQ ID NO: 267; SEQ ID NO: 282 y SEQ ID O: 283; SEQ ID NO: 298 y SEQ ID NO: 299; SEQ ID NO: 314 y SEQ ID O: 315; SEQ ID NO: 330 y SEQ ID NO: 331; SEQ ID NO: 346 y SEQ ID NO: 347; SEQ ID NO: 362 y SEQ ID NO: 363; SEQ ID NO: 378 y SEQ ID NO: 379; SEQ ID NO: 394 y SEQ ID NO: 395; SEQ ID NO: 410 y SEQ ID NO: 411; SEQ ID NO: 426 y SEQ ID NO: 427; SEQ ID NO: 442 y SEQ ID NO: 443; SEQ ID NO: 458 y SEQ ID NO: 459; SEQ ID NO: 474 y SEQ ID NO: 475; SEQ ID NO: 490 y SEQ ID NO: 491; SEQ ID NO: 506 y SEQ ID NO: 507; SEQ ID NO: 522 y SEQ ID NO: 523; SEQ ID NO: 538 y SEQ ID NO: 539; SEQ ID NO: 554 y SEQ ID NO: 555; O SEQ ID NO :570 y SEQ ID NO: 571.

En otra modalidad, la invención se dirige a un polinucleótido aislado que expresa un polipéptido que contiene al menos un polipéptido de CDR que proviene de un anticuerpo anti-IL-6, donde dicho polipéptido expresado se une solo de forma especifica a IL-6 o se une específicamente a IL-6 cuando se expresa asociado con otra secuencia de polinucleótidos que expresa un polipéptido que contiene al menos un polipéptido de CDR que proviene de un anticuerpo anti-IL-6, donde dicha al menos una CDR se selecciona de las contenidas en los polipéptidos de VL o VH contenidos en la SEQ ID NO: 3, 18, 19, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 117, 118, 123, 139, 155, 171, 187, 203, 219, 235, 251, 267, 283, 299, 315, 331, 347, 363, 379, 395, 411, 427, 443, 459, 475, 491, 507, 523, 539, 555, 571, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 668, 672, 676, 680, 684, 688, 691, 692, 704, 708, 2, 20, 21, 37, 53, 69, 85, 101, 119, 122, 138, 154, 170, 186, 202, 218, 234, 250, 266, 282, 298, 314, 330, 346, 362, 378, 394, 410, 426, 442, 458, 474, 490, 506, 522, 538, 554, 570, 647, 651, 660, 666, 667, 671, 675, 679, 683, 687, 693, 699, 702, 706, o [sic] . La secuencia de ácido nucleico de ejemplo que codifica los polipéptidos de VH y VL de la SEQ ID NO: 657 y SEQ ID NO: 709 están comprendidos en la SEQ ID NO: 700 y SEQ ID NO: 723, respectivamente También se contemplan células y vectores hospedadores que comprenden dichos polinucleótidos .

En otra modalidad especifica, la invención abarca construcciones de ácido nucleico que contienen cualquiera de las secuencias de ácido nucleico precedentes y combinaciones de las mismas, asi como células recombinantes que contienen estas secuencias y construcciones de ácido nucleico, donde estas secuencias o construcciones de ácido nucleico pueden ser extracromosomales o pueden estar integradas en el genoma de la célula hospedadora.

La invención contempla adicionalmente vectores que comprenden las secuencias de polinucleótidos que codifican las secuencias de polipéptidos de cadenas ligeras variables y pesadas variables, asi como las regiones determinantes de complementariedad (CDR o regiones hipervariables ) individuales establecidas en la presente, asi como células hospedadoras que comprenden dichas secuencias. En una modalidad de la invención, la célula hospedadora es una célula de levadura. En otra modalidad de la invención, la célula hospedadora de levadura pertenece al género Pichia.

En algunos casos se proporciona más de un ejemplo de polinucleótido que codifica una secuencia de polipéptidos determinada, como se resume en la Tabla 3.

Tabla 3. Múltiples ejemplos de polinucleótidos que codifican polipéptidos particulares.

Polipéptido de Ejemplos de SEQ ID NO SEQ ID NO: de codificación 4 12, 111, 694 5 13, 112, 389, 501 6 14, 113, 695 9 17, 116, 697 39 47, 260 40 48, 261 60 68, 265 72 80, 325, 565, 581 89 97, 134, 166 103 12, 111, 694 104 13, 112, 389, 501 105 14, 113, 695 108 17, 116, 697 126 97, 134, 166 158 97, 134, 166 190 198, 214 191 199, 215 205 213, 469, 485 206 198, 214 207 199, 215 252 47, 260 253 48, 261 257 68, 265 317 80, 325, 565, 581 333 341, 533 381 13, 112, 389, 501 415 423, 439 431 423, 439 461 213, 469, 485 475 483, 499 476 484, 500 477 213, 469, 485 478 486, 502 479 487, 503 480 488, 504 481 489, 505 491 483, 499 492 484, 500 493 13, 112, 389, 501 494 486, 502 495 487, 503 496 488, 504 497 489, 505 525 341, 533 545 553, 585 554 562, 578 556 564, 580 557 80, 325, 565, 581 558 566, 582 570 562, 578 572 564, 580 573 80, 325, 565, 581 574 566, 582 577 553, 585 En algunos casos, identificadores de secuencia múltiple se refieren a la misma secuencia de polipéptido o polinucleótido, tal como se resumen en la Tabla 4. Se entiende que las referencias a estos identificadores de secuencias son intercambiables, salvo cuando el contexto indique lo contrario.

Tabla 4. Secuencias repetidas. Cada celda enumera un grupo de secuencias repetidas incluidas en el listado secuencias .

SEQ ID NO de secuencias repetidas 4, 103 5, 104, 381, 493 6, 105 9, 108 12, 111 13, 112 14, 113 17, 116 39, 252 40, 253 48, 261 60, 257 68, 265 72, 317, 557, 573 80, 325, 565, 581 89, 126, 158 97, 134, 166 120, 659 190, 206 191, 207 198, 214 199, 215 205, 461, 477 213, 469 333, 525 415, 431 423, 439 475, 491 476, 492 478, 494 479, 495 480, 496 481, 497 483, 499 484, 500 486, 502 487, 503 488, 504 489, 505 545, 577 554, 570 556, 572 558, 574 562, 578 564, 580 566, 582 Algunos ejemplos de modalidades incluyen polinucleótidos que se hibridan en condiciones de hibridación de restricción moderada o alta a un polinucleótido que posee uno de los ejemplos de secuencias codificadoras citadas en la Tabla 1, y también incluyen polinucleótidos que se hibridan en condiciones de hibridación de restricción moderada o alta a un polinucleótido que codifica el mismo polipéptido como un polinucleótido que posee uno de los ejemplos de secuencias codificadoras citadas en la Tabla 1, o un polipéptido codificado por cualquiera de los polinucleótidos anteriores.

La expresión "condiciones de hibridación de restricción alta" se refiere a condiciones bajo las cuales una sonda se híbrida a su subsecuencia blanco, típicamente en una mezcla compleja de ácido nucleico pero no a otras secuencias. Las condiciones de restricción alta dependen de las secuencias y diferirán en circunstancias distintas. Las secuencias más largas se hibridan específicamente a temperaturas superiores. Una guía amplia para la hibridación de ácidos nucleicos se encuentra en Tijssen, Techniques in Biochemistry and Molecular Biology—Hybridization ith Nucleic Probes, "Overview of principies of hybridization and the strategy of nucleic acid assays" (1993) . En general, se establece que las condiciones de restricción alta son alrededor de 5-10 °C menos que el punto de fusión térmico (Tm) para la secuencia específica a un pH y fuerza iónica definidos. La Tm es la temperatura (según concentración nucleica, pH y fuerza iónica definidos) en la que el 50% de las sondas complementarias al objetivo hibridan la secuencia objetivo en equilibrio (como las secuencias objetivo están presentes en exceso, a Tm, el 50% de las sondas están ocupadas en equilibrio) . Las condiciones de restricción alta serán aquellas en donde la concentración salina es menor a alrededor de 1.0 M de concentración de ión de sodio, típicamente alrededor de 0.01 a 1.0 M de concentración de ión de sodio (u otras sales) a pH 7.0 a 8.3 y la temperatura es al menos alrededor de 30 "C para sondas cortas (por ej . , 10 a 50 nucleótidos) y al menos alrededor de 60 °C para sondas largas (por ej . , mayor a 50 nucleótidos). Las condiciones de restricción alta también pueden lograrse con la adición de agentes desestabilizadores tales como formamida. Para hibridación selectiva o específica, una señal positiva es al menos dos veces hibridación de fondo, opcionalmente 10 veces hibridación de fondo. Los ejemplos de condiciones de hibridación de restricción alta pueden ser como siguen: 50% de formamida, 5*SSC y 1% de SDS, incubando a 42 °C, o 5><SSC, 1% de SDS, incubando a 65 °C, con lavado en 0.2*SSC, y 0.1% de SDS a 65 °C. Tales etapas de hibridación y lavado pueden realizarse durante, por ej . , 1, 2, 5, 10, 15, 30, 60; o más minutos.

Los ácidos nucleicos que no se hibridan entre ellos en condiciones de restricción alta aún están sustancialmente relacionados si los polipéptidos que codifican están sustancialmente relacionados. Esto ocurre, por ejemplo, cuando se crea una copia de un ácido nucleico usando la máxima degeneración de codón permitida por el código genético. En estos casos, los ácidos nucleicos se hibridan típicamente en condiciones de hibridación de restricción moderada. Ejemplos de "condiciones de hibridación de restricción moderada" incluyen una hibridación en un tampón de 40% de formamida, 1 M de NaCl, 1% de SDS a 37 °C y un lavado en 1*SSC a 45 °C. Tales etapas de hibridación y lavado pueden realizarse durante, por ej . , 1, 2, 5, 10, 15, 30, 60, o más minutos. Una hibridación positiva es al menos dos veces hibridación de fondo. Los expertos en la técnica rápidamente reconocerán que pueden utilizarse condiciones alternativas de hibridación y lavado para proporcionar condiciones de restricción similar.

Ejemplos de modalidades de polipéptidos y pollnucleótidos de cadena pesada y ligera Esta sección describe ejemplos de modalidades de polipéptidos de cadena pesada y ligera, así como ejemplos de pollnucleótidos que codifican dichos polipéptidos. Estos ejemplos de pollnucleótidos son adecuados para su expresión en el sistema de expresión Pichia descrito.

En determinadas modalidades, la presente invención comprende pollnucleótidos que poseen al menos 70%, tal como al menos 75%, al menos 80%, al menos 85%, al menos 90%, al menos 91%, al menos 92%, al menos 93%, al menos 94%, al menos 95%, al menos 96%, al menos 97%, al menos 98%, al menos 99%, o 100% de identidad con los polinucleótidos descritos en esta solicitud o que codifican polipéptidos descritos en esta solicitud o que se hibridan con dichos polinucleótidos en condiciones de restricción baja, restricción moderada o restricción alta, preferentemente aquellos que codifican polipéptidos (por ej . una cadena pesada y ligera de inmunoglobulina, un anticuerpo de cadena simple, un fragmento de anticuerpo, etc.) que poseen al menos una de las actividades biológicas establecidas en la presente, que incluyen pero no se limitan a la unión especifica a un polipéptido de IL-6. En otro aspecto, la invención comprende una composición que comprende tal polinucleótido y/o un polipéptido codificado por tal polinucleótido. En aun otro aspecto, la invención comprende un método para el tratamiento de una enfermedad o afección asociada con IL-6 o que puede prevenirse, tratarse o mejorarse con un antagonista de IL-6 tal como Abl (por ej . caquexia, fatiga por cáncer, artritis, etc.) que comprende la administración de una composición que comprende tal polinucleótido y/o polipéptido.

En algunas modalidades preferidas, un polipéptido de cadena pesada comprenderá una o más secuencias de CDR de los polipéptidos de cadena pesada y/o ligera descritos en la presente (incluidos aquellos contenidos en los polipéptidos de cadena pesada y ligera descritos en la presente) y uno o más polipéptidos de la región flanqueante descritos en la presente, incluidos aquellos representados en las Figuras 2 y 34-37 o Tabla 1, y contenidos en las secuencias de polipéptidos de cadena pesada y ligera descritas en la presente. En determinadas modalidades preferidas, un polipéptido de cadena pesada comprenderá una o más secuencias de región flanqueante 4 tal como se representa en las Figuras 2 y 34-37 o Tabla 1, o según se contenga en polipéptidos de cadena pesada o ligera descritos en la presente. En determinadas modalidades preferidas, un polipéptido de cadena ligera comprenderá una o más de las secuencias de CDR de los polipéptidos de cadena pesada y/o ligera descritos en la presente (incluidos aquellos contenidos en los polipéptidos de cadena pesada y ligera descritos en la presente) y uno o más de los polipéptidos de la región flanqueante descritos en la presente, incluidos aquellos representados en las Figuras 2 y 34-37 o Tabla 1, y contenidos en las secuencias de polipéptidos de cadena pesada y ligera descritas en la presente. En determinadas modalidades preferidas, un polipéptido de cadena ligera comprenderá una o más secuencias de región flanqueante 4 tal como se representa en las Figuras 2 y 34-37 o Tabla 1, o según se contenga en polipéptidos de cadena pesada o ligera descritos en la presente .

En cualquiera de las modalidades descritas . en la presente, determinadas secuencias descritas pueden ser sustituidas entre ellas, a menos que el contexto indique lo contrario. El hecho de que secuencias particulares puedan sustituirse entre ellas, donde ocurrieran tales hechos, se entiende que son de carácter ilustrativo y no limitante y también se entiende que dichas sustituciones se encuentrajn comprendidas aun cuando no se describieran ejemplos ilustrativos de sustituciones, por ejemplo, donde se describe uno o más de los polipéptidos de cadena ligera de Abl, por ej . cualquiera de la SEQ ID NO: 2, 20, 647, 651, 660, 666, 699, 702, 706, o 709, otro polipéptido de cadena ligera de Abl puede j sustituirse a menos que el contexto indique lo contrario. De manera similar, donde se describe uno de los polipéptidos de cadena pesada de Abl, por ej cualquiera de la SEQ ID NO: 3, 18, 19, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 704, o 708, otro polipéptido de cadena pesada de Abl puede sustituirse a menos que el contexto indique lo contrario. Asimismo, donde se describe uno de los polinucleótidos de cadena ligera de Abl, por ej . cualquiera de la SEQ ID NO: 10, 662, 698, 701, o 705, otro polinucleótido de cadena ligera de Abl puede sustituirse 'a t menos que el contexto indique lo contrario. De manera similar, I donde se describe uno de los polinucleótidos de cadena pesada de Abl, por ej . cualquiera de la SEQ ID NO: 11, 663, 700, 703, i o 707, otro polinucleótido de cadena pesada de Abl puede i sustituirse a menos que el contexto indique lo contrarió.

I Adicionalmente, se entiende que la descripción de cualquier miembro de cualquiera de los siguientes grupos comprende sustitución por cualquier otro miembro del grupo, tal como sigue : polipéptidos de cadena ligera de Ab2 (SEQ ID NO: 21 y 667) ; polinucleótidos de cadena ligera de Ab2 (SEQ ID NO: 29 y 669) ; polipéptidos de cadena pesada de Ab2 (SEQ ID NO: 22 y 668) ; polinucleótidos de cadena pesada de Ab2 (SEQ ID NO: 30 y 670) ; polipéptidos de cadena ligera de Ab3 (SEQ ID NO: 37 y 671) ; polinucleótidos de cadena ligera de Ab3 (SEQ ID NO: 45 y 673) ; polipéptidos de cadena pesada de Ab3 (SEQ ID NO: 38 y 672) ; polinucleótidos de cadena pesada de Ab3 (SEQ ID NO: 46 y 674) ; polipéptidos de cadena ligera de Ab4 (SEQ ID NO: 53 y 675) ; polinucleótidos de cadena ligera de Ab4 (SEQ ID NO: 61 y 677) ; polipéptidos de cadena pesada de Ab4 (SEQ ID NO: 54 y 676) ; polinucleótidos de cadena pesada de Ab4 (SEQ ID NO: 62 y 678) ; polipéptidos de cadena ligera de Ab5 (SEQ ID NO: 69 y 679) ; polinucleótidos de cadena ligera de Ab5 (SEQ ID NO: 77 ,y 681) ; polipéptidos de cadena pesada de Ab5 (SEQ ID NO: 70 y 680) ; polinucleótidos de cadena pesada de Ab5 (SEQ ID NO: 78 y 682) ; polipéptidos de cadena ligera de Ab6 (SEQ ID NO: 85 y 683) ; polinucleótidos de cadena ligera de Ab6 (SEQ ID NO: 93 y 6851 ; polipéptidos de cadena pesada de Ab6 (SEQ ID NO: 86 y 684) ; polinucleótidos de cadena pesada de Ab6 (SEQ ID NO: 94 y 686) ; polipéptidos de cadena ligera de Ab7 (SEQ ID NO: 101, 119, 687, 693); polinucleótidos de cadena ligera de Ab7 (SEQ ID NO: 109 y 689); polipéptidos de cadena pesada de Ab7 (SEQ ÍD I NO: 102, 117, 118, 688, 691, y 692); polinucleótidos de cadena pesada de Ab7 (SEQ ID NO: 110 y 690); polinucleótidos CDR1 de cadena ligera de Abl (SEQ ID NO: 12 y 694); polinucleótidos CDR3 de cadena ligera de Abl (SEQ ID NO: 14 y 695); polinucleótidos CDR2 de cadena pesada de Abl (SEQ ID NO: 16 y 696) ; y polinucleótidos CDR3 de cadena pesada de Abl (SEQ ID NO: 17 y 697) .

Actividad anti-IL-6 Tal como se estableció previamente, la IL-6 es un miembro de la familia de las citocinas que promueve las respuestas celulares a través de un complejo de receptores que consiste en al menos una subunidad de la glicoproteina transductora de señales gpl30 y el receptor IL-6 (IL-6R) . La IL-6R puede también estar presente en forma soluble (sIL-6R) . La IL-6 se une a la IL-6R, que luego dimeriza el receptor transductor de señales gpl30.

Se cree que los anticuerpos anti-IL-6 de la invención, o fragmentos de unión a IL-6 de los mismos, son útiles al presentar actividad anti-IL-6. En una modalidad no limitante de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 de la invención o los fragmentos de unión a la IL-6 de los mismos, presentan actividad anti-IL-6 mediante la unión con IL-6 que puede ser IL-6 soluble o IL-6 expresadas en la superficie celular y/o pueden prevenir o inhibir la unión de IL-6 con IL-6R y/o la activación (dimerización) de la glicoproteina transductora de señales gpl30 y la formación de multimeros IL-6/IL-6R/gpl30 y los efectos biológicos de cualquiera de los anteriores. Los anticuerpos anti-IL-6 en cuestión pueden poseer distintas actividades antagonistas según dónde (esto es, epitopo) el anticuerpo particular se une a IL-6 y/o cómo afecta la formación de los complejos y/o multimeros de IL-6 anteriores y los efectos biológicos de los mismos. Como consecuencia, diferentes anticuerpos anti-IL-6 de acuerdo con la invención, por ej . pueden ser más adecuados para prevenir o tratar afecciones que involucren la formación y acumulación de IL-6 soluble sustancial tal como artritis reumatoide mientras que otros anticuerpos pueden ser favorables en tratamientos donde la prevención de IL-6/IL-6R/gpl30 o multimeros IL-6/IL-6R/gpl30 es el resultado terapéutico que se desea. Esto puede determinarse en ensayos de unión y otros.

La actividad anti-IL-6 del anticuerpo anti-IL-6 de la presente invención y fragmentos del mismo que poseen especificidad de unión a IL-6 pueden también estar descritos por su fuerza de unión o su afinidad por IL-6. Esto también puede afectar sus propiedades terapéuticas. En una modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 de la presente invención y fragmentos de los mismos que poseen especificidad de unión a IL-6, se unen a IL-6 con una constante de disociación (KD) menor o igual a 5xl0"7, 10"7, 5xl0"8, 10"8, 5x10" 9, 1(G9, 5xlO"10, 10"10, 5xl0-11, 10"11, 5xl0"12, 10~12, 5xl0~13, 10"13, 5xl0~14, 10"14, 5xl0"15 o 10"15. Preferentemente, los anticuerpos anti-IL-6 y fragmentos de los mismos se unen a IL-6 con una constante de disociación menor o igual a 5xl0"10.

En otra modalidad de la invención, la actividad anti-IL-6 de los anticuerpos anti-IL-6 de la presente invención y fragmentos de los mismos que poseen especificidad de unión a IL-6, se unen a IL-6 con una tasa de disociación menor o igual a 10"4 5xl0-5 S"1, 10"5 S"1, 5xl0"6 S"1, 10"6 S'1, 5xl0"7 S"1, o 10"7 S"1. En una modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 de la invención y fragmentos de los mismos que poseen especificidad de unión a IL-6, se unen a un epitopo lineal o conformacional de IL-6.

En una modalidad adicional de la invención, la actividad anti-IL-6 de los anticuerpos anti-IL-6 de la presente invención y fragmentos de los mismos que poseen especificidad de unión a IL-6, presentan actividad anti-IL-6 mediante la mejoría o reducción de los síntomas de, o que de manera alternativa tratan o previenen enfermedades y trastornos asociados con IL- 6. Se establecen más adelante ejemplos no limitantes de las enfermedades y trastornos asociados con IL-6. Tal como se observa, la fatiga relacionada con cáncer, caquexia y artritis reumatoide son indicaciones preferidas para los anticuerpos anti-IL-6 en cuestión.

En otra modalidad de la invención, los anticuerpos anti- IL-6 descritos en la presente, o los fragmentos de unión a IL-6 de los mismos, no poseen especificidad de unión para IL-6R o la glicoproteina transductora de señales gp-130.

Análisis y aislamiento de linfocitos B En una modalidad, la presente invención proporciona métodos de aislamiento de una población clonal de linfocitos B específicos para antígeno que pueden usarse para aislar al menos una célula específica para antígeno. Tal como se describe y ejemplifica más adelante, estos métodos contienen una serie de etapas de cultivo y selección que pueden ser usadas por separado, en combinación, de manera secuencial, repetitiva o periódica. Preferentemente, estos métodos se usan para aislar al menos una célula específica para antígeno que puede usarse para producir un anticuerpo monoclonal que es especifico para un anticuerpo deseado o una secuencia de ácido nucleico que se corresponde con tal anticuerpo.

En una modalidad, la presente invención proporciona un método que comprende las etapas de: a. preparar una población celular que comprende al menos un linfocito B específico para antígeno; b. enriquecer la población celular, por ej . , por cromatografía, para formar una población celular enriquecida que comprende al menos un linfocito B específico para antígeno; c. aislar el linfocito B simple a partir de la población enriquecida de linfocitos B; y d. determinar si el linfocito B simple produce un anticuerpo especifico para el antigeno.

En otra modalidad, la presente invención proporciona una mejora a un método para aislar un linfocito B simple, productor de anticuerpos, esta mejora comprende enriquecer la población de linfocitos B obtenida a partir de un hospedador que fue inmunizado o naturalmente expuesto a un antigeno, donde la etapa de enriquecer precede cualquier etapa de selección, comprende al menos una etapa de cultivo y trae como resultado una población clonal de linfocitos B que producen un anticuerpo monoclonal simple especifico para dicho antigeno.

A lo largo de esta solicitud, una "población clonal de linfocitos B" se refiere a una población de linfocitos B que solo secreta un anticuerpo simple especifico para un antigeno deseado. Esto es que estas células producen solamente un tipo de anticuerpo monoclonal especifico para el antigeno deseado.

En la presente solicitud, "enriquecer" una población celular significa aumentar la frecuencia de células deseadas, típicamente células específicas para antígeno, contenidas en una población celular mixta, por ej . , un aislamiento que contiene linfocitos B que provienen de un hospedador que se inmuniza contra un antígeno deseado. Por tanto, una población celular enriquecida comprende una población celular que posee una mayor frecuencia de células específicas para antígeno como resultado de una etapa de enriquecimiento, pero esta población de células puede contener y producir diferentes anticuerpos.

El término general "población celular" comprende poblaciones celulares previas y posteriores al enriquecimiento, teniendo presente que cuando se llevan a cabo múltiples etapas de enriquecimiento, una población celular puede ser previa o posterior al enriquecimiento. Por ejemplo, en una modalidad, la presente invención proporciona un método: a. que cultiva una población celular a partir de un hospedador inmunizado para obtener una población celular cultivada; b. que crea al menos una suspensión unicelular a partir de la población celular cultivada; c. que enriquece al menos una suspensión unicelular para formar una primera población celular enriquecida; d. que enriquece la primera población celular enriquecida para formar una segunda población celular enriquecida; e. que enriquece la segunda población celular enriquecida para formar una tercera población celular enriquecida; y f. que selecciona un anticuerpo producido por una célula especifica para antigeno de la tercera población celular enriquecida.

Cada población celular puede usarse directamente en la próxima etapa o puede congelarse parcial o totalmente para almacenamientos a corto o largo plazo o para etapas posteriores. Además, las células de una población celular pueden suspenderse individualmente para proporcionar suspensiones unicelulares. La suspensión unicelular puede enriquecerse en tal medida que una suspensión unicelular sirva como la población celular previa al enriquecimiento. Entonces, una o más de las suspensiones unicelulares especificas para el antigeno forman conjuntamente la población celular enriquecida; las suspensiones unicelulares especificas para el antigeno pueden agruparse, por ej . , colocarse nuevamente en placas para su posterior análisis y/o producción de anticuerpos.

En una modalidad, la presente invención proporciona un método para enriquecer una población celular para dar una población celular enriquecida que posee una frecuencia celular especifica para el antigeno de entre alrededor de 50% y alrededor de 100% o incrementos de los mismos. Preferentemente, la población celular enriquecida posee una frecuencia celular especifica para el antigeno mayor o igual a alrededor de 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 90%, 95%, 99% o 100%.

En otra modalidad, la presente invención proporciona un método para enriquecer una población celular por la cual se aumenta la frecuencia de las células especificas para el antigeno al menos 2 veces, 5 veces, 10 veces, 20 veces, 50 veces, 100 veces, o incrementos de los mismos.

A lo largo de esta solicitud, el término "incremento" se usa para definir un valor numérico en mayor o menor grado de precisión, por ej . , lo más cerca posible a 10, 1, 0.1, 0.01, etc. El incremento se puede redondear a cualquier grado de precisión mensurable y el incremento no debe redondearse al mismo grado de precisión en ambos extremos de un rango. Por ejemplo, el rango de 1 a 100 o incrementos de los mismos incluye rangos tales como 2 a 80, 5 a 50 y 0.4 a 98. Cuando un rango no tiene limite fijo, por ej . , un rango menor a 100, incrementos del mismo significa incrementos entre 100 y el limite mensurable. Por ejemplo, menos de 100 o incrementos del mismo significa 0 a 100 o incrementos del mismo a menos que la propiedad, por ej . , la temperatura, no esté limitada por 0.

La especificidad para antigeno puede medirse con respecto a cualquier antigeno. El antigeno puede ser cualquier sustancia a la que pueda unirse un anticuerpo que incluye pero no se limita a, péptidos, proteínas o fragmentos de los mismos, carbohidratos; moléculas orgánicas e inorgánicas; receptores producidos por células animales, células bacterianas y virus; enzimas; agonistas y antagonistas de las rutas biológicas; hormonas; y citocinas. Los ejemplos de antígenos incluyen pero no se limitan a IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-18, IFN-a, IFN-Y, BAFF, CXCL13, IP-10, VEGF, EPO, EGF, HRG, factor de crecimiento de hepatocitos (HGF) y Hepcidina. Los antígenos preferidos incluyen IL-6, IL-13, TNF- , VEGF-a, factor de crecimiento de hepatocitos (HGF) y Hepcidina. En un método que utiliza más de una etapa de enriquecimiento, el antígeno usado en cada etapa de enriquecimiento puede ser el mismo o diferente en cada etapa. Las múltiples etapas de enriquecimiento con el mismo antigeno pueden dar una población grande y/o diversa de células especificas para antigeno; las múltiples etapas de enriquecimiento con distintos antigenos pueden dar un población celular enriquecida con especificidad cruzada para los diferentes antigenos.

El enriquecimiento de una población celular puede llevarse a cabo por cualquier medio de selección celular conocido en la técnica para el aislamiento de células especificas para antigeno. Por ejemplo, una población celular puede enriquecerse por medio de técnicas cromatográficas, por ej . , tecnología de cuentas Miltenyi o cuentas magnéticas. Las cuentas pueden unirse directa o indirectamente al antígeno de interés. En una modalidad preferida, el método de enriquecimiento de una población celular incluye al menos una etapa de enriquecimiento cromatográfica .

Una población celular también puede enriquecerse por cualquier técnica de ensayo de especificidad para antígeno conocida en la técnica, por e . , un ensayo ELISA o ensayo de halógeno. Los ensayos ELISA incluyen pero no se limitan a la inmovilización selectiva de antígenos (por ej . , captura de antígeno biotinilado por placas revestidas con estreptavidina, avidina o neutravidina) , revestimiento de placa para antígeno no específico y a través de una estrategia de concentración de antígeno (por ej . , captura de antigeno selectivo seguido de la adición de un compañero de unión para generar un complejo heteromérico proteina-antigeno) . El antígeno puede estar unido directa o indirectamente a una matriz o soporte sólido, por ej . una columna. Un ensayo de halógeno comprende contactar las células con cuentas cargadas con antígeno y el anticuerpo anti-hospedador marcado específico para el hospedador usado para el cultivo de linfocitos B. La marca puede ser, por ej . , un fluoróforo. En una modalidad, al menos una etapa de enriquecimiento del ensayo se realiza en al menos una suspensión unicelular. En otra modalidad, el método de enriquecimiento de una población celular incluye al menos una etapa de enriquecimiento cromatográfico y al menos una etapa de enriquecimiento del ensayo.

Se conocen en la técnica métodos de "enriquecimiento" de una población celular por tamaño o densidad. Véase, por ej . , Patentes estadounidense 5,627,052. Estas etapas pueden usarse en el presente método adicionalmente para enriquecer la población celular por especificidad del antígeno.

Las poblaciones celulares de la presente invención contienen al menos una célula capaz de reconocer un antígeno. Las células que reconocen antígenos incluyen pero no se limitan a, linfocitos B, células plasmáticas y progenies de las mismas. En una modalidad, la presente invención proporciona una población celular clonal que contiene un único tipo de linfocitos B específicos para antígeno, esto es, la población celular produce un único anticuerpo monoclonal específico para un antígeno deseado.

En tal modalidad, se cree que la población clonal específica para antígeno de linfocitos B consiste predominantemente de células específicas para antígeno, células que secretan anticuerpos que se obtienen por medio del nuevo cultivo y el protocolo de selección provisto en la presente. Por consiguiente, la presente invención también proporciona métodos para la obtención de una población celular enriquecida que contiene al menos una célula especifica para antígeno y que secreta un anticuerpo. En una modalidad, la presente invención proporciona una población celular enriquecida que contiene alrededor de 50% a alrededor de 100%, o incrementos de los mismos, o más de o igual a alrededor de 60%, 70%, 80%, 90%, o 100% de células especificas para antígeno y que secretan un anticuerpo.

En una modalidad, la presente invención proporciona un método para aislar un linfocito B simple enriqueciendo una población celular obtenida a partir de un hospedador antes de las etapas de selección, por ej . , seleccionar un linfocito B particular de una población celular y/o seleccionar un anticuerpo producido por una célula particular. La etapa de enriquecimiento puede realizarse en una, dos, tres o más etapas. En una modalidad, se aisla un linfocito B simple a partir de una población celular enriquecida antes de confirmar si el linfocito B simple secreta un anticuerpo con especificidad de antigeno y/o una propiedad deseada.

En una modalidad, un método para enriquecer una población celular se usa en un método para la producción y/o selección de anticuerpos. Por tanto, la presente invención proporciona un método que comprende enriquecer una población celular antes de seleccionar un anticuerpo. El método puede incluir las etapas de: preparar una población celular que comprende al menos una célula especifica para antigeno, enriquecer la población celular mediante el aislamiento de al menos una célula especifica para antigeno para formar una población celular enriquecida, e inducir la producción de anticuerpos a partir de al menos una célula especifica para antigeno. En una modalidad preferida, la población celular enriquecida contiene más de una célula especifica para antigeno. En una modalidad, cada célula especifica para antigeno de la población enriquecida se cultiva en condiciones que proporcionan una población clonal de linfocitos B específicos para antígeno antes de aislar una célula que produce anticuerpos de estos y/o de producir un anticuerpo usando dicho linfocito B o una secuencia de ácido nucleico que corresponde a ese anticuerpo. A diferencia de técnicas previas donde los anticuerpos se producen a partir de una población celular con una baja frecuencia de células específicas para antígeno, la presente invención permite la selección de anticuerpos de entre una alta frecuencia de células especificas para antígeno. Debido a que se usa una etapa de enriquecimiento previo a la selección de anticuerpos, la mayoría de las células, preferente y virtualmente todas las células, usadas para la producción de anticuerpos son específicas para antígeno. Mediante la producción de anticuerpos a partir de una población de células con una frecuencia aumentada de especificidad de antígeno, la cantidad y variedad de anticuerpos aumenta.

En los métodos de selección de anticuerpos de la presente invención, se selecciona preferentemente un anticuerpo luego de una etapa de enriquecimiento y una etapa de cultivo que da como resultado una población clonal de linfocitos B específicos para antígeno. Los métodos pueden comprender adicionalmente una etapa de determinar la secuencia de un anticuerpo seleccionado o porciones de este a partir de una o más células específicas para antígeno, aisladas. Se puede emplear cualquier método conocido en la técnica para determinar secuencias y este puede incluir determinar la secuencia de la cadena pesada, cadena ligera, región/es variables/s y/o región/es determinante/s de complementariedad (CDR) .

Además de la etapa de enriquecimiento, el método de selección de anticuerpos también puede incluir una o más etapas de análisis de la población celular para reconocimiento de antígenos y/o funcionalidad del anticuerpo. Por ejemplo, los anticuerpos deseados pueden tener características estructurales específicas, tal como unión a un epítopo particular o mimetismo de una estructura particular; actividad antagonista o agonista o actividad neutralizante, por ej . , inhibir la unión entre el antígeno y un ligando. En una modalidad, el análisis de la funcionalidad del anticuerpo depende del ligando. El análisis de la funcionalidad del anticuerpo incluye pero no se limita a, un ensayo de interacción proteína-proteína in vitro que recrea la interacción natural del ligando antígeno con la proteína recombinante receptora; y una respuesta con base en la célula que depende del ligando y se monitorea fácilmente (por ej . , respuesta de proliferación) . En una modalidad, el método para la selección de anticuerpos incluye una etapa de análisis de la población celular para la funcionalidad del anticuerpo mediante la medición de la concentración inhibitoria (CI50) . En una modalidad, al menos una de las células aisladas específicas para antígeno produce un anticuerpo con un CI50 menor a aproximadamente 100, 50, 30, 25, 10 µg mL o incrementos de los mismos .

Además de la etapa de enriquecimiento, el método de selección de anticuerpos también puede incluir una o más etapas de análisis de la población celular para determinar la fuerza de unión al anticuerpo. La fuerza de unión al anticuerpo puede medirse por cualquier método conocido en la técnica (por ej . Biacore™) . En una modalidad, al menos una de las células aisladas y especificas para antigeno produce un anticuerpo ¡que posee una elevada afinidad al antigeno, por ej . , una constante de disociación ( d) menor a aproximadamente 5xl0"10 M-l, preferentemente alrededor de entre lxlO"13 y 5xl0"10, lxlO"12 y lxlO"10, lxlO"12 y 7.5xl0"n, lxlO"11 y 2xl0"n, alrededor de 1.5xl0"n o menos, o incrementos de los mismos. En esta modalidad, se dice que los anticuerpos son de afinidad madura. En una. modalidad preferida, la afinidad de los anticuerpos se puede comparar con o es mayor que la afinidad de cualquiera de Panorex® (edrecolomab) , Rituxan® (rituximab) , Herceptin® (traztuzumab) , Mylotarg® (gentuzumab) , Campath® (alemtuzumab) , Zevalin™ ( ibritumomab) , Erbitux™ (cetuximab) , Avastin™ (bevicizumab) , Raptiva™ (efalizumab) , Remicade® (infliximab) , Humira™ (adalimumab) y Xolair™ (omalizumab) . Preferentemente, la afinidad de los anticuerpos se puede comparar con o es mayor que la afinidad de Humira™. La afinidad de un anticuerpo también puede aumentarse por medio de técnicas de maduración de afinidad conocidas. En una modalidad, se analiza al menos una población celular para determinar, al menos una, preferentemente ambas, la funcionalidad del anticuerpo y la fuerza de unión al anticuerpo.

Además de la etapa de enriquecimiento, el método de selección de anticuerpos también puede incluir una o más etapas de análisis de la población celular para determinar la homología de secuencia de anticuerpos, en especial homología en humanos. En una modalidad, al menos una de las células aisladas y especificas para antigeno produce un anticuerpo que posee homología con un anticuerpo humano de alrededor de 50% a alrededor de 100%, o incrementos de estos, o más que alrededor de 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, o 95% homólogos. Los anticuerpos pueden humanizarse para aumentar la homología con una secuencia humana mediante técnicas conocidas en el arte tal como injerto de CDR o injerto de residuo determinante de selectividad (SDR) .

En otra modalidad, la presente invención también proporciona los anticuerpos mismos de acuerdo con cualquiera de las modalidades descritas anteriormente en cuanto a CI50, Kd y/o homología.

El protocolo de selección de linfocitos B descrito en la presente tiene varias ventajas intrínsecas con respecto a otros métodos para la obtención de linfocitos B que secretan anticuerpos y anticuerpos monoclonales específicos para los antígenos objetivo deseados. Estas ventajas incluyen, pero no se limitan a, las siguientes: En primer lugar, se ha descubierto que cuando se utilizan estos procedimientos de selección con un antígeno deseado tal como IL-6 o TNF-OÍ, estos métodos traen como resultado, de manera reproducible, linfocitos B específicos para antígeno capaces de generar lo que parece ser un complemento sustancialmente integral de los anticuerpos, esto es, anticuerpos que se unen a los distintos epítopos del antígeno.

Sin limitarse a la teoría, se plantea la hipótesis de que el complemento integral es atribuible a la etapa de enriquecimiento del antígeno que se realiza antes de la recuperación del linfocito B inicial. Además, esta ventaja permite el aislamiento y la selección de anticuerpos con diferentes propiedades ya que estas propiedades pueden variar dependiendo de la especificidad epitópica del anticuerpo particular .

En segundo lugar, se ha descubierto que el protocolo de selección de linfocitos B produce de manera reproducible un cultivo clonal de linfocitos B que contiene un linfocito B simple o su progenie, secretando un anticuerpo monoclonal simple que en general se une al antígeno deseado con una afinidad de unión relativamente alta, esto es, afinidades de unión al antígeno picomolares o mejores. En cambio, los métodos anteriores de selección de anticuerpos tienden a producir pocos anticuerpos de alta afinidad y por lo tanto requieren de procedimientos de análisis exhaustivo para aislar un anticuerpo con potencial terapéutico. Sin limitarse a la teoría, se plantea la hipótesis de que el protocolo trae como resultado la inmunización in vivo de linfocitos B del hospedador (inmunización primaria) seguida de una segunda estimulación in vitro de linfocitos B (etapa secundaria de cebado del antígeno) que puede mejorar la capacidad y la propensión de los linfocitos B clónales recuperados para secretar un anticuerpo monoclonal simple de afinidad alta especifico para el antigeno objetivo.

En tercer lugar, se ha observado (tal como se muestra en la presente con linfocitos B específicos para IL-6) que el protocolo de selección de linfocitos B proporciona de manera reproducible linfocitos B enriquecidos que producen IgG que son, en promedio, altamente selectivos (específico para antigeno) para el objetivo deseado. Se cree que los linfocitos B enriquecidos por antigeno recuperados por estos métodos contienen linfocitos B capaces de producir el complemento total deseado de especificidades epitópicas tal como se discute anteriormente .

En cuarto lugar, se ha observado que los protocolos de selección de linfocitos B, aun cuando son usados con antígenos pequeños, esto es, péptidos de 100 aminoácidos o menos, por ej . , 5-50 aminoácidos de largo, genera de manera reproducible un cultivo clonal de linfocitos B que secreta un anticuerpo simple de afinidad alta al antigeno pequeño, por ej . , un péptido. Esto causa sorpresa ya que en general es bastante difícil, cuesta mucho trabajo y a veces ni siquiera es posible producir anticuerpos de alta afinidad por péptidos pequeños. Por consiguiente, se puede usar la invención para producir anticuerpos terapéuticos a los objetivos péptidos deseados, por ej . , péptidos virales, bacterianos o autoantígenos, y de esta manera permitir la producción de anticuerpos monoclonales con propiedades de unión muy especificas o aun la producción de un cóctel de anticuerpos monoclonales para diferentes objetivos péptidos, por ej . , diferentes cepas virales. Esta ventaja puede ser útil especialmente en el contexto de la producción de una vacuna terapéutica o profiláctica que posee una valencia deseada, tal como una vacuna contra el HPV que induce la inmunidad protectora para distintas cepas del HPV.

En quinto lugar, el protocolo de selección de linfocitos B, en particular cuando se usa con linfocitos B derivados de conejos, tiende a producir de manera reproducible secuencias de anticuerpos específicos para antígeno que son muy similares a las inmunoglobulinas humanas endógenas (alrededor de 90% similar al nivel de aminoácidos) y que contienen CDR que poseen una longitud muy similar a las inmunoglobulinas humanas y por lo tanto requieren poca o ninguna modificación de secuencias (típicamente a lo sumo solo unos pocos residuos de CDR pueden modificarse en la secuencia de anticuerpo principal y no se introducen residuos exógenos flanqueantes) para poder eliminar posibles problemas de inmunogenicidad potencial. En particular, preferentemente el anticuerpo recombinante contendrá solo los residuos CDR1 y CDR2 del hospedador (conejo) requeridos para el reconocimiento del antígeno y la totalidad de CDR3. De ese modo, la alta afinidad de unión al antígeno de las secuencias de anticuerpo recuperadas producidas de acuerdo con el protocolo de selección de linfocitos B y anticuerpos permanece intacta o sustancialmente intacta aun con humanización.

En resumen, estos métodos pueden usarse para producir anticuerpos que exhiben mayores afinidades de unión con epitopos más distintos por el uso de un protocolo más eficaz que el ya conocido.

En una modalidad especifica, la presente invención proporciona un método para identificar un linfocito B simple que secreta un anticuerpo especifico para un antigeno deseado y que opcionalmente posee al menos una propiedad funcional deseada tal como afinidad, avidez, actividad citolitica y similares, por medio de un proceso que incluye las siguientes etapas : a. inmunizar un hospedador contra un antigeno; b. cultivar linfocitos B del hospedador; c. enriquecer los linfocitos B cultivados para aumentar la frecuencia de las células especificas para antigeno; d. crear al menos una suspensión unicelular; e. cultivar una subpoblación a partir de la suspensión unicelular en condiciones que favorecen la supervivencia de un único linfocito B especifico para antigeno por pocilio de cultivo; f. aislar linfocitos B de la subpoblación; y g. determinar si el linfocito B simple produce un anticuerpo especifico para el antigeno.

Típicamente, estos métodos comprenderán adicionalmente una etapa adicional de aislamiento y determinación de secuencia, parcial o total, de las secuencias de polipéptidos y ácidos nucleicos que codifican el anticuerpo deseado. Estas secuencias o versiones modificadas o porciones de las mismas pueden expresarse en células hospedadoras deseadas para producir anticuerpos recombinantes a un antigeno deseado.

Tal como se observó anteriormente, se cree que la población clonal de linfocitos B comprende predominantemente linfocitos B que secretan anticuerpos que producen un anticuerpo contra el antigeno deseado. También se cree, basándose en resultados experimentales obtenidos con diversos antigenos y con diferentes poblaciones de linfocitos B, que los linfocitos B producidos por clonación y los linfocitos B aislados específicos para antígeno que provienen de estos, producidos de acuerdo con la invención, secretan un anticuerpo monoclonal que típicamente tiene alta afinidad y además es capaz de producir eficazmente y de manera reproducible una selección de anticuerpos monoclonales de mayor variabilidad epitópica en comparación con otros métodos para obtener anticuerpos monoclonales a partir de linfocitos B cultivados específicos para antígeno. En un ejemplo de modalidad, la población de células inmunes usada en dichos métodos de selección de linfocitos B proviene de un conejo. Sin embargo, otros hospedadores que produce anticuerpos incluyendo hospedadores no humanos y humanos, pueden de manera alternativa ser usados como fuente de linfocitos B inmunes. Se cree que el uso de conejos como fuente de linfocitos B puede mejorar la diversidad de los anticuerpos monoclonales que pueden originarse por medio de estos métodos. También, las secuencias de anticuerpos que provienen de conejos de acuerdo con la invención, típicamente poseen secuencias con un alto grado de identidad de secuencia con secuencias de anticuerpos humanos haciéndolas favorables para su uso en humanos dado que deberían poseer baja antigenicidad. En el transcurso de la humanización, el anticuerpo humanizado final posee un contenido mucho menor de residuo extraño/hospedador, normalmente restringido a un subgrupo de los residuos CDR del hospedador que difieren dramáticamente debido a su naturaleza en comparación con la secuencia objetivo humana usada en injertos. Esto mejora la probabilidad de recuperación completa de actividad en la proteína de anticuerpo humanizada.

Los métodos de selección de anticuerpos que usan una etapa de enriquecimiento descrita en la presente incluyen una etapa para la obtención de una población celular que contiene células inmunes a partir de un hospedador inmunizado. Los métodos para la obtención de una población celular que contiene células inmunes a partir de un hospedador inmunizado son conocidos en la técnica y en general incluyen inducir una respuesta inmune en un hospedador y cultivar células a partir del hospedador para obtener una o más poblaciones celulares. La respuesta puede provocarse mediante la inmunización del hospedador contra un antigeno deseado. De manera alternativa, el hospedador usado como fuente de tales células inmunes puede exponerse naturalmente al antigeno deseado tal como un individuo que fue infectado con un patógeno particular tal como una bacteria o virus o de manera alternativa ha montado una respuesta de anticuerpo especifica para el cáncer sufrido por el individuo.

Los animales hospedadores son bien conocidos en la técnica e incluyen, pero no se limitan a, cobayos, conejos, ratones, ratas, primates no humanos, humanos, así como otros mamíferos y roedores, pollos, vacas, cerdos, cabras y ovejas. Preferentemente el hospedador es un mamífero, más preferentemente, un conejo, ratón, rata o humano. Al exponerse a un antígeno, el hospedador produce anticuerpos como parte de la respuesta inmune natural al antígeno. Tal como se mencionó, la respuesta inmune puede ser de origen natural, como resultado de una enfermedad o puede ser inducida por la inmunización con el antígeno. La inmunización puede realizarse por cualquier método conocido en la técnica, tal como, por una o más inyecciones del antígeno con o sin un agente para mejorar la respuesta inmune, tal como un adyuvante de Freund completo o incompleto. En otra modalidad, la invención también contempla la inmunización intraesplénica . Como una alternativa para inmunizar un animal hospedador in vivo, el método puede comprender inmunizar un cultivo de células hospedadoras in vitro .

Luego de permitir tiempo a la respuesta inmune (por ej . , según las mediciones de la detección de anticuerpos en suero) , las células hospedadoras de animales se cultivan para obtener una o más poblaciones celulares. En una modalidad preferida, se analiza una población celular cultivada para determinar la fuerza de unión al anticuerpo y/o funcionalidad de anticuerpo Una población celular cultivada es preferentemente de al menos uno de bazo, nodulos linfáticos, médula ósea y/o células mononucleares de sangre periférica (PBMC) . Las células pueden cultivarse a partir de más de una fuente y acumularse. Se pueden preferir algunas fuentes para ciertos antigenos. Por ejemplo, se prefiere el bazo, nodulos linfáticos y PBMC para IL-6 y se prefieren los nodulos linfáticos para TNF. La población celular se cultiva durante alrededor de 20 a alrededor de 90 días o incrementos de los mismos luego de la inmunización, preferentemente durante alrededor de 50 a alrededor de 60 días. Una población celular cultivada y/o una suspensión unicelular de la misma se puede enriquecer, analizar y/o cultivar para la selección de anticuerpos. La frecuencia de células específicas para antígeno dentro de una población celular cultivada es normalmente alrededor de 1% a alrededor de 5% o incrementos de los mismos.

En una modalidad, una suspensión unicelular de una población celular cultivada se enriquece, preferentemente usando cuentas Miltenyi. A partir de la población celular cultivada con una frecuencia de células especificas para antigeno de alrededor de 1% a alrededor de 5%, se obtiene una población celular enriquecida con una frecuencia de células especificas para antigeno que se acerca al 100%.

El método de selección de anticuerpos que usa una etapa de enriquecimiento incluye una etapa de producción de anticuerpos de al menos una célula especifica para antigeno de una población celular enriquecida. Los métodos de producción de anticuerpos in vitro son bien conocidos en la técnica y puede usarse cualquier método adecuado. En una modalidad, una población celular enriquecida, tal como una suspensión unicelular especifica para antigeno de una población celular cultivada, se colocó en placas a diversas densidades celulares, tal como 50, 100, 250, 500 u otros incrementos entre 1 y 1000 células por pocilio. Preferentemente, la subpoblación comprende no más de alrededor de 10,000 células que secretan anticuerpos especificas para antigeno, más preferentemente alrededor de 50-10,000, alrededor de 50-5,000, alrededor de 50- 1,000, alrededor de 50-500, alrededor de 50-250 células que secretan anticuerpos especificas para antigeno o incrementos de los mismos. Entonces, se cultivan estas subpoblaciones con un medio adecuado (por ej . , un medio acondicionado de linfocitos T activado, en particular 1-5% de un medio acondicionado de linfocitos T de conejo activado) en una capa de alimentación, preferentemente en condiciones que favorecen la supervivencia de una única célula de proliferación que secreta anticuerpos por pocilio de cultivo. La capa de alimentación, que en general comprende material celular irradiado, por ej . , células EL4B, no constituye parte de la población celular. Las células se cultivan en un medio adecuado por un periodo suficiente para la producción de anticuerpos, por ejemplo alrededor de 1 dia a alrededor de 2 semanas, alrededor de 1 dia a alrededor de 10 días, al menos alrededor de 3 días, alrededor de 3 a alrededor de 5 días, alrededor de 5 días a alrededor de 7 días, al menos alrededor de 7 días o incrementos de los mismos. En una modalidad, se cultiva simultáneamente más de una subpoblación. Preferentemente, sobrevive una única célula que produce anticuerpos y progenie de esta en cada pocilio, proporcionando así una población clonal de linfocitos B específicos para antígeno en cada pocilio. En esta etapa, la inmunoglobulina G (IgG) producida por la población clonal es altamente correlativa con la especificidad del antígeno. En una modalidad preferida, las IgG exhiben una correlación con la especificidad del antígeno que es mayor a alrededor del 50%, más preferentemente mayor al 70%, 85%, 90%, 95%, 99% o incrementos de los mismos. Véase Figura 3 que muestra un ejemplo de correlación para IL-6. Las correlaciones se mostraron colocando cultivos de linfocitos B en condiciones limitantes para establecer productos simples de anticuerpos específicos para antígeno por pocilio. Se compararon las síntesis específicas para antígeno con las de IgG generales. Se observaron tres poblaciones: una IgG que reconoció un formato simple de antígeno (revestimiento biotinilado y directo) , IgG detectable y reconocimiento de antígeno sin tomar en cuenta la inmovilización y producción de IgG únicamente. La producción de IgG fue altamente correlativa con la especificidad para antígeno.

Opcionalmente se recoge un sobrenadante que contiene anticuerpos que pueden enriquecerse, analizarse y/o cultivarse para la selección de anticuerpos de acuerdo con las etapas descritas anteriormente. En una modalidad, el sobrenadante se enriquece (preferentemente por medio de un ensayo de especificidad del antígeno, en especial un ensayo ELISA) y/o se analiza para determinar la funcionalidad del anticuerpo.

En otra modalidad, la población enriquecida, preferentemente clonal, de linfocitos B específicas para antígeno a partir de la cual se analiza opcionalmente un supernadante descrito anteriormente para detectar la presencia del anticuerpo monoclonal secretado deseado se utiliza para el aislamiento de unos pocos linfocitos B, preferentemente un único linfocito B que luego se prueba en un ensayo apropiado para confirmar la presencia de un único linfocito B que produce anticuerpos en la población clonal de linfocitos B. En una modalidad, se aislan alrededor de 1 a alrededor de 20 células a partir de la población clonal de linfocitos B, preferentemente menos de alrededor de 15, 12, 10, 5, o 3 células, o incrementos de los mismos, más preferentemente una única célula. El ensayo se efectúa preferentemente por un ensayo de especificidad del antigeno, en especial un ensayo de halógeno. El ensayo de halógeno se puede realizar con la proteina de longitud completa o un fragmento de esta. El sobrenadante que contiene anticuerpos puede también analizarse para determinar al menos uno de: afinidad de unión al antigeno; agonismo o antagonismo de la unión del ligando al antigeno, inducción o inhibición de la proliferación de un tipo celular objetivo especifico; inducción o inhibición de la lisis de una célula objetivo e inducción o inhibición de una vía biológica que involucre el antigeno.

La célula identificada especifica para antigeno puede usarse para obtener las correspondientes secuencias de ácido nucleico que codifican el anticuerpo monoclonal deseado. (Una digestión AluI puede confirmar que se produce solo un único tipo de anticuerpo monoclonal por pocilio) . Tal como se mencionó anteriormente, estas secuencias pueden mutarse, tal como por humanización, para hacerlas adecuadas para su uso en medicamentos para humanos.

Tal como se mencionó anteriormente, la población de linfocitos B enriquecida usada en el proceso también puede enriquecerse, analizarse y/o cultivarse adicionalmente para la selección de anticuerpos de acuerdo con las etapas descritas anteriormente que pueden repetirse o realizarse en distinto orden. En una modalidad preferida, se aisla, cultiva y se usa para la selección de anticuerpos al menos una célula de una población celular enriquecida, preferentemente clonal y especifica para antigeno.

Por tanto, en una modalidad, la presente invención proporciona un método que comprende: a. cultivar una población celular a partir de un hospedador inmunizado para obtener una población celular cultivada, b. crear al menos una suspensión unicelular a partir de una población celular cultivada; c. enriquecer al menos una suspensión unicelular, preferentemente por cromatografía, para formar una primera población celular enriquecida; d. enriquecer la primera población celular enriquecida, preferentemente por el ensayo ELISA, para formar una segunda población celular enriquecida que es preferentemente clonal, esto es, contiene solo un único tipo de linfocito B específico para antígeno. e. enriquecer la segunda población celular enriquecida, preferentemente por el ensayo de halógeno, para formar una tercera población celular enriquecida que contiene uno o pocos linfocitos B que producen un anticuerpo especifico para un antigeno deseado; y f. seleccionar un anticuerpo producido por una célula especifica para antigeno aislada de la tercera población celular enriquecida.

El método puede adicionalmente incluir una o más etapas de análisis de la población celular cultivada para la fuerza de unión al anticuerpo (afinidad, avidez) y/o la funcionalidad del anticuerpo. Las etapas de análisis adecuado incluyen pero no se limitan a métodos de ensayo que detectan: si el anticuerpo producido por el linfocito B identificado especifico para antigeno produce un anticuerpo que posee una mínima afinidad de unión al antígeno, si el anticuerpo agoniza o antagoniza la unión de un antígeno deseado al ligando; si el anticuerpo induce o inhibe la proliferación de un tipo celular específico; si el anticuerpo induce o provoca una reacción citolítica contra células objetivo; si el anticuerpo se une a un epítopo específico; y si el anticuerpo modula (inhibe o agoniza) vía/s biológica/s específica/s que involucren el antígeno.

De manera similar, el método puede adicionalmente incluir una o más etapas de análisis de la segunda población celular enriquecida para determinar la fuerza de unión al anticuerpo y/o la funcionalidad del anticuerpo.

El método puede adicionalmente incluir una etapa de secuenciar secuencias de polipéptidos o de la secuencia de ácido nucleico correspondiente del anticuerpo seleccionado. El método también puede incluir una etapa de producción de un anticuerpo recombinante usando la secuencia, un fragmento de la misma o una versión genéticamente modificada del anticuerpo seleccionado. Los métodos para la mutación de secuencias de anticuerpos para retener las propiedades deseadas son bien conocidos por los expertos en la técnica e incluyen humanización, quimerización, producción de anticuerpos de cadena simple; estos métodos de mutación pueden producir anticuerpos recombinantes que poseen la función efectora deseada, inmunogenicidad, estabilidad, eliminación o adición de glicosilación y similares. El anticuerpo recombinante puede producirse por cualquier célula recombinante adecuada que incluye pero no se limita a células de mamíferos tales como CHO, COS, BHK, HEK-293, células bacterianas, células de levadura, células vegetales, células de insecto y células anfibias. En una modalidad, los anticuerpos se expresan en células poliploides de levadura, esto es, células diploides de levadura, en particular Pichia.

En una modalidad, el método comprende: a. inmunizar un hospedador contra un antígeno para producir anticuerpos hospedadores; b. analizar los anticuerpos hospedadores para determinar la especificidad del antígeno y neutralización; b. cultivar linfocitos B del hospedador; d. enriquecer los linfocitos B cultivados para crear una población celular enriquecida con una frecuencia aumentada de células específicas para antígeno; e. cultivar una o más subpoblaciones de la población celular enriquecida en condiciones que favorecen la supervivencia de un linfocito B simple para producir una población clonal en al menos un pocilio de cultivo; f. determinar si la población clonal produce un anticuerpo específico para el antígeno. g. aislar un linfocito B simple; y h. secuenciar la secuencia de ácido nucleico del anticuerpo producido por el linfocito B simple.

Métodos de humanización de anticuerpos En otra modalidad de la invención, se proporciona un método para la humanización de cadenas pesada y ligera de anticuerpos. En esta modalidad, se sigue el siguiente método para la humanización de cadenas pesada y ligera: Cadena ligera 1. Identificar el aminoácido que es el primero que le sigue a la secuencia de péptidos de señales. Este es el comienzo de la Región Flanqueante 1. El péptido de señales comienza en la primera metionina de iniciación y tiene típicamente, pero no necesariamente, 22 aminoácidos de longitud para las secuencias de proteínas de cadena ligera de conejo. El comienzo del polipéptido maduro también puede determinarse de manera experimental secuenciando la proteina N-terminal o se puede prever usando un algoritmo de previsión. Este también es el comienzo de la Región Flanqueante 1 tal como se suele definir por los expertos en la materia.

Ejemplo: Residuo de aminoácido RbtVL 1 en la Figura 2, que comienza con "AYD " . 2. Identificar el final de la Región Flanqueante 3. Este tiene típicamente 86-90 aminoácidos que siguen al comienzo de la Región Flanqueante 1 y es típicamente un residuo de cisteina precedido por dos residuos de tirosina. Este es el final de la Región Flanqueante 3 tal como se suele definir por los expertos en la materia.

Ejemplo: Residuo de aminoácido RbtVL 88 en la Figura 2, que termina con "TYYC". 3. Usar la secuencia de cadena ligera de conejo del polipéptido comenzando por el principio de la Región Flanqueante 1 hasta el final de la Región Flanqueante 3 tal como se definió anteriormente y realizar una búsqueda de homología de secuencias para las secuencias de proteínas de anticuerpos más similares. Esta será típicamente una búsqueda contra secuencias germinales humanas antes de la maduración del anticuerpo para reducir la posibilidad de inmunogenicidad; sin embargo, se puede usar cualquier secuencia humana. Típicamente se puede usar un programa del estilo de BLAST para buscar en una base de datos de secuencias las más homologas. Las bases de datos de secuencias de anticuerpos humanos pueden encontrarse en varias fuentes tales como NCBI (Centro Nacional de Información Biotecnológica) .

Ejemplo: La secuencia de aminoácidos RbtVL de los residuos numerados 1 a 88 en la Figura 2 se compara en BLAST con una base de datos de lineas germinales de anticuerpos humanos. Las tres primeras secuencias únicas devueltas se muestran en la Figura 2 como L12A, VI y Vx02. 4. En general, la secuencia de cadena ligera variable de la linea germinal humana más homologa luego se usa como base de la humanización. Sin embargo, aquellos expertos en la técnica pueden decidir usar otra secuencia que no fuera de mayor homología tal como lo determina el algoritmo de homología, basado en otros factores que incluyen espacios de secuencias y similitudes en la región flanqueante.

Ejemplo: En la Figura 2, L12A era la secuencia de cadena ligera variable de línea germinal humana más homologa y se usa como base para humanización de RbtVL. 5. Determinar la Región Flanqueante y el arreglo de CDR (FR1, FR2, FR3, CDRl y CDR2) para el homólogo humano usado para humanización de cadena ligera. Esto es usar la distribución tradicional tal como se describe en la materia. Alinear la secuencia de cadena ligera variable de conejo con el homólogo humano, mientras se mantiene la distribución de las regiones flanqueantes y CDR.

Ejemplo: En la Figura 2, la secuencia RbtVL se alinea con la secuencia homologa humana L12A y se indican los dominios flanqueante y CDR. 6. Reemplazar las regiones CDR1 y CDR2 de la secuencia de cadena ligera homologa humana con las secuencias de CDR1 y CDR2 de la secuencia de conejo. Si existieran diferencias de longitud entre las secuencias de CDR humana y de conejo entonces usar la totalidad de las secuencias de CDR de conejo y sus longitudes. Es posible que la especificidad, afinidad y/o inmunogenicidad del anticuerpo humanizado resultante puedan no alterarse si se realizan intercambios de secuencias mayores o menores o si se alteran residuos específicos, sin embargo los intercambios tal como fueron descritos han sido usados exitosamente pero no se excluye la posibilidad de que se permitan otros cambios.

Ejemplo: En la Figura 2, los residuos de aminoácidos de CDR1 y CDR2 de la cadena ligera variable homologa humana L12A se reemplazan con las secuencias de aminoácidos de CDR1 y CDR2 de la secuencia de cadena ligera de anticuerpo de conejo RbtVL. Las regiones flanqueantes 1, 2 y 3 de L12A humanas no se modifican. La secuencia humanizada resultante se muestra a continuación como VLh de residuos enumerados del 1 al 88. Nótese que solo se subrayan los residuos que son distintos a la secuencia humana L12A y por tanto son los residuos de aminoácidos que provienen de conejo. En este ejemplo solo 8 de 88 residuos son diferentes de la secuencia humana. 7. Luego de la región, flanqueante 3 de la nueva secuencia híbrida creada en la Etapa 6, adjuntar la totalidad de la CDR3 de la secuencia de anticuerpos de cadena ligera de conejo. La secuencia de CDR3 puede tener diversas longitudes pero tiene típicamente 9 a 15 residuos de aminoácidos de longitud. La región CDR3 y el comienzo de la próxima región de la región flanqueante 4 se definen clásicamente y de manera que se puedan identificar por aquellos expertos en la técnica. Típicamente el comienzo de la región flanqueante 4 y por tanto luego del final de la CDR3 consiste en la secuencia " FGGG ... " , sin embargo puede existir alguna variación en estos residuos.

Ejemplo: En la Figura 2, la CDR3 de RbtVL (residuos de aminoácidos enumerados del 89 al 100) se agrega al final de la región flanqueante 3 en la secuencia humanizada indicada como VLh. 8. La Región Flanqueante 4 de la cadena ligera de conejo que es típicamente los últimos 11 residuos.de aminoácidos de la cadena ligera variable y comienza como se indica en la Etapa 7 anterior y termina típicamente con la secuencia de aminoácidos "...VVKR", se reemplaza con el homólogo de la Región Flanqueante 4 de cadena ligera humana más cercana, normalmente de la secuencia germinal. Frecuentemente, esta región flanqueante 4 de cadena ligera humana es de secuencia FGGGTKVEIKR' . Es posible que otras secuencias de la Región Flanqueante 4 de cadena ligera humana que no son las más homologas o de otra manera diferentes, puedan usarse sin afectar la especificidad, afinidad y/o inmunogenicidad del anticuerpo humanizado resultante. Esta secuencia de la Región Flanqueante 4 de cadena ligera humana se agrega al final de la secuencia humanizada de cadena ligera variable que sigue inmediatamente la secuencia de CDR3 de la Etapa 7 anterior. Este es el final de la secuencia de aminoácidos humanizados de cadena ligera variable.

Ejemplo: En la Figura 2, la región flanqueante 4 (FR4) de la secuencia de cadena ligera de conejo RbtVL se muestra sobre una secuencia de FR4 humana homologa. La secuencia de FR4 humana se agrega a la secuencia de cadena ligera variable humanizada (VLh) enseguida del final de la región CD3 agregada en la Etapa 7 anterior.

Cadena pesada 1. Identificar el aminoácido que es el primero que le sigue a la secuencia de péptidos de señales. Este es el comienzo de la Región Flanqueante 1. El péptido de señales comienza en la primera metionina de iniciación y tiene típicamente 19 aminoácidos de longitud para las secuencias de proteínas de cadena pesada de conejo. Típicamente, pero no necesariamente siempre, los últimos 3 residuos de aminoácidos de un péptido de señales de cadena pesada de conejo son "...VQC" seguido del comienzo de la Región Flanqueante 1. El comienzo del polipéptido maduro también se puede determinar de manera experimental secuenciando la proteína N-terminal o se puede prever usando un algoritmo de previsión. Este también es el comienzo de la Región Flanqueante 1 tal como se suele definir por los expertos en la materia.

Ejemplo: Residuo de aminoácido RbtVH 1 en la Figura 2, que comienza con "QEQL..." 2. Identificar el final de la Región Flanqueante 3. Este tiene típicamente 95-100 aminoácidos que siguen al comienzo de la Región Flanqueante 1 y típicamente tiene la secuencia final "...CAR" (aunque la alanina también puede ser una valina) . Este es el final de la Región Flanqueante 3 tal como se suele definir por los expertos en la materia.

Ejemplo: Residuo de aminoácido RbtVH 98 en la Figura 2, que termina con "... FCVR" . 3. Usar la secuencia de cadena pesada de conejo del polipéptido comenzando por el principio de la Región Flanqueante 1 hasta el final de la Región Flanqueante 3 tal como se definió anteriormente y realizar una búsqueda de homología de secuencias para las secuencias de proteínas de anticuerpos más similares. Esta será típicamente contra una base de datos de secuencias germinales humanas antes de la maduración del anticuerpo para reducir la posibilidad de inmunogenicidad; sin embargo se puede usar cualquier secuencia humana. Típicamente se puede usar un programa del estilo de BLAST para buscar en una base de datos de secuencias las más homologas. Las bases de datos de secuencias de anticuerpos humanos pueden encontrarse en varias fuentes tales como NCBI (Centro Nacional de Información Biotecnológica) .

Ejemplo: La secuencia de aminoácidos RbtVH de los residuos numerados 1 a 98 en la Figura 2 se compara en BLAST con una base de datos de líneas germinales de anticuerpos humanos. Las tres primeras secuencias únicas devueltas se muestran en la Figura 2 como 3-64-04, 3-66-04, y 3-53-02. 4. En general, la secuencia de cadena pesada variable de la línea germinal humana más homóloga luego se usa como base de la humanización. Sin embargo, aquellos expertos en la técnica pueden decidir usar otra secuencia que no fuera la más homóloga según lo determina el algoritmo de homología, basado en otros factores que incluyen espacios de secuencias y similitudes de región flanquante.

Ejemplo: 3-64-04 en la Figura 2, era la secuencia de cadena pesada variable de la línea germinal humana más homóloga y se usa como base para la humanización de RbtVH. 5. Determinar la región flanqueante y el arreglo de CDR (FR1, FR2 , FR3, CDRl y CDR2) para el homólogo humano usado para humanización de cadena pesada. Esto es usar la distribución tradicional tal como se describe en la materia. Alinear la secuencia de cadena pesada variable de conejo con el homólogo humano, mientras se mantiene la distribución de las regiones flanqueantes y CDR.

Ejemplo: En la Figura 2, la secuencia RbtVH se alinea con la secuencia homologa humana 3-64-04 y se indican los dominios flanqueantes y de CDR. 6. Reemplazar las regiones CDRl y CDR2 de la secuencia de cadena pesada homologa humana con las secuencias de CDRl y CDR2 de la secuencia de conejo. Si existieran diferencias de longitud entre las secuencias de CDR humana y de conejo entonces usar la totalidad de las secuencias de CDR de conejo y sus longitudes. Adicionalmente, puede ser necesario reemplazar los últimos tres aminoácidos de la región flanqueante 1 de cadena pesada humana con los últimos tres aminoácidos de la región flanqueante 1 de cadena pesada de conejo. Típicamente, pero no siempre, en la región flanqueante 1 de cadena pesada de conejo estos tres residuos . siguen un residuo de glicina precedido por un residuo de serina. Además, puede ser necesario reemplazar el aminoácido final de la región flanqueante 2 de cadena pesada humana con el aminoácido final de la región flanqueante 2 de cadena pesada de conejo. Típicamente, pero no necesariamente siempre, este es un residuo de glicina precedido por un residuo de isoleucina en la región flanqueante 2 de cadena pesada de conejo. Es posible que la especificidad, la afinidad y/o la inmunogenicidad del anticuerpo humanizado resultante puedan no estar modificadas si se realizan intercambios de secuencia más pequeños o más grandes o si se modifican residuos específicos; sin embargo los intercambios tal como fueron descritos fueron usados exitosamente pero no excluyen la posibilidad de que se permitan otros cambios. Por ejemplo, un residuo de aminoácido de triptófano ocurre típicamente cuatro residuos antes que el final de la región CDR2 de cadena pesada de conejo, mientras que el la CDR2 de cadena pesada humana este residuo es típicamente un residuo de serina. Se ha demostrado que el hecho de cambiar este residuo de triptófano de conejo por un residuo de serina humana en esta posición tiene un efecto mínimo o inexistente sobre la especificidad o afinidad del anticuerpo humanizado, y por tanto minimiza adicionalmente el contenido de los residuos de aminoácidos que provienen de la secuencia de conejo en la secuencia humanizada.

Ejemplo: En la Figura 2, los residuos de aminoácidos de CDRl y CDR2 de la cadena pesada variable homologa humana se reemplazan por las secuencias de aminoácidos de CDRl y CDR2 de la secuencia de cadena ligera de anticuerpo de conejo RbtVH, salvo el residuo secuenciado que es triptófano en la secuencia de conejo (número de posición 63) y serina en la misma posición en la secuencia humana y se mantiene como el residuo de serina humano. Adicionalmente a los cambios de CDRl y CDR2, los últimos tres aminoácidos de la región flanqueante 1 (posiciones 28-30) asi como el residuo final de la región flanqueante 2 (posición 49) se retienen como residuos de aminoácidos de conejo en vez de humanos. La secuencia humanizada resultante se muestra a continuación como VHh de residuos numerados del 1 al 98. Nótese que solo se subrayan los residuos que son distintos a la secuencia humana 3-64-04 y por tanto son residuos de aminoácidos que provienen de conejo. En este ejemplo solo 15 de los 98 residuos son diferentes a la secuencia humana. 7. Luego de la región flanqueante 3 de la nueva secuencia híbrida creada en la Etapa 6, adjuntar la totalidad de la CDR3 de la secuencia de anticuerpos de cadena pesada de conejo. La secuencia de CDR3 puede tener diversas longitudes pero tiene típicamente 5 a 19 residuos de aminoácidos de longitud. La región CDR3 y el comienzo de la próxima región flanqueante 4 se definen clásicamente y de manera que puedan identificarse por aquellos expertos en la técnica. Típicamente el comienzo de la región flanqueante 4 y por tanto luego del final de la CDR3 consiste en la secuencia " GXG..." (donde X es normalmente Q o P) ; sin embargo puede existir alguna variación en estos residuos.

Ejemplo: La CDR3 de RbtVH (residuos de aminoácidos numerados del 99 al 110) se agrega al final de la región flanqueante 3 en la secuencia humanizada indicada como VHh. 8. La región flanqueante 4 de la cadena pesada de conejo que son típicamente los últimos 11 residuos de aminoácidos de la cadena pesada variable y comienza como se indica en la Etapa 7 anterior y termina típicamente con la secuencia de aminoácidos "...TVSS" se reemplaza con el homólogo de la región flanqueante 4 de cadena pesada humana más cercana, normalmente de la secuencia germinal. Frecuentemente, esta región flanqueante 4 de cadena pesada humana es de secuencia XWGQGTLVTVSS" . Es posible que otras secuencias de la región flanqueante 4 de cadena pesada humana que no son las más homologas o de otra manera diferentes, puedan usarse sin afectar la especificidad, afinidad y/o inmunogenicidad del anticuerpo humanizado resultante. Esta secuencia de la región flanqueante 4 de cadena pesada humana se agrega al final de la secuencia humanizada de cadena pesada variable que sigue inmediatamente la secuencia de CDR3 de la Etapa 7 anterior. Este es el final de la secuencia de aminoácidos humanizados de cadena pesada variable.

Ejemplo: En la Figura 2, la región flanqueante 4 (FR4) de la secuencia de cadena pesada de conejo RbtVH se muestra sobre una secuencia de FR4 pesada humana homologa. La secuencia de FR4 humana se agrega a la secuencia de cadena pesada variable humanizada (VHh) enseguida del final de la región CD3 que se agrega en la Etapa 7 anterior.

Métodos para la producción de anticuerpos y fragmentos de los mismos La invención también se dirige a la producción de anticuerpos descritos en la presente o fragmentos de los mismos. Los polipéptidos recombinantes que corresponden a los anticuerpos descritos en la presente o fragmentos de los mismos se secretan a partir de cepas poliploides, preferentemente diploides o tetraploides de levadura capaz de apareamiento. En un ejemplo de modalidad, la invención se dirige a métodos para la producción de estos polipéptidos recombinantes en forma secretada por periodos prolongados usando cultivos que comprenden levadura poliploide, esto es, al menos varios días a una semana, más preferentemente al menos un mes o varios meses y aun más preferentemente al menos 6 meses a un año o más. Estos cultivos de levadura poliploide expresarán al menos 10-25 mg/litro del polipéptido, más preferentemente al menos 50-250 mg/litro, aun más preferentemente al menos 500-1000 mg/litro y más preferentemente un gramo por litro o más del/de los polipéptido/s recombinante/s .

En una modalidad de la invención, un par de células haploides de levadura marcadas genéticamente se transforman con vectores de expresión que comprenden subunidades de una proteina heteromultimérica deseada. Una célula haploide comprende un primer vector de expresión y una segunda célula haploide comprende un segundo vector de expresión. En otra modalidad, las células diploides de levadura serán transformadas con uno o más vectores de expresión que proporcionan la expresión y secreción de uno o más de los polipéptidos recombinantes . En aun otra modalidad, una célula haploide simple puede transformarse con uno o más vectores y usarse para producir una levadura poliploide mediante estrategias de fusión o apareamiento. En aun otra modalidad, un cultivo de levadura diploide puede transformarse con uno o más vectores que proporcionan la expresión y secreción de un/os polipéptido/s deseado/s. Estos vectores pueden comprender vectores, por ej . plásmidos linealizados u otros productos de ADN lineal que integran el genoma celular de la levadura al azar, a través de la recombinación homologa o usando una recombinasa tal como Cre/Lox o Flp/Frt. Opcionalmente, se pueden introducir vectores de expresión adicionales en las células haploides o diploides o el primer o segundo vector de expresión pueden comprender secuencias de codificación adicional para la síntesis de heterotrímeros ; heterotetrámeros; etc. Los niveles de expresión de los polipéptidos no idénticos pueden calibrarse individualmente y ajustarse a través de una selección apropiada, número de copia de vector, fuerza del promotor e/o inducción y similares. Las células haploides transformadas se cruzan o fusionan genéticamente. Las cepas diploides o tetraploides resultantes se utilizan para producir y secretar proteínas totalmente ensambladas y funcionales biológicamente, anticuerpos humanizados descritos en la presente o fragmentos de los mismos.

El uso de células diploides o tetraploides para la producción de proteínas proporciona beneficios inesperados. Las células se pueden cultivar con fines de producción, esto es, aumentadas a escala, y por períodos prolongados de tiempo, en condiciones que pueden ser perjudiciales para el cultivo de células haploides, cuyas condiciones pueden incluir una alta densidad celular; cultivo en medios mínimos; cultivo a bajas temperaturas; cultivo estable en ausencia de presión selectiva y que puede proporcionar el mantenimiento de una integridad de secuencia de genes heterólogos y mantenimiento de un alto nivel de expresión en el tiempo. Sin ánimo de limitarse a esto, los inventores teorizan acerca de que esos beneficios pueden surgir, al menos en parte, de la creación de cepas diploides a partir de dos cepas haploides parentales distintas. Tales cepas haploides pueden comprender varias mutaciones autotróficas de poca importancia; estas mutaciones se complementan en la diploide o tetraploide, posibilitando el crecimiento y la producción mejorada en condiciones altamente selectivas.

Las células haploides de levadura transformadas capaces de apareamiento proporcionan un método genético que permite el apareamiento de subunidades de una proteína deseada. Las cepas haploides de levadura se transforman con cada uno de los dos vectores de expresión, un primer vector para dirigir la síntesis de una cadena de polipéptido y un segundo vector para dirigir la síntesis de una segunda cadena de polipéptidos no idénticos. Las dos cepas haploides se aparean para proporcionar un hospedador diploide donde se puede obtener una producción de proteínas objetivo optimizadas.

Opcionalmente, se proporcionan secuencia/s de codificación no idénticas. Tales secuencias pueden estar presentes en vectores de expresión adicionales o en el primer o segundo vector de expresión. Tal como se conoce en la técnica, múltiples secuencias de codificación pueden expresarse independientemente a partir de promotores individuales; o se pueden expresar de manera coordinada a través de la inclusión de un "sitio interno de entrada al ribosoma" o "IRES" que es un elemento que promueve una entrada directa interna al ribosoma al codón de iniciación tal como ATG de un cistrón (una región que codifica una proteína) causando una traducción del gen independiente de cap. Se describen elementos IRES funcionales en levadura en Thompson et al. (2001) P.N.A.S. 98:12866-12868.

En una modalidad de la invención, las secuencias de anticuerpo se producen en combinación con una cadena secretora J, que proporciona estabilidad mejorada de IgA (véase Patentes estadounidenses N° 5,959,177; y 5,202,422).

En una modalidad preferida, las dos cepas haploides de levadura son cada una auxotróficas y requieren un complemento de medios para el cultivo de células haploides. El par de auxotróficos son complementarios, de manera que el producto diploide crecerá en la ausencia de los complementos requeridos para las células haploides. Muchos de estos marcadores genéticos son conocidos en la levadura, e incluyen requerimientos de aminoácidos (por ej . met, lys, his, arg, etc.), nucleósidos (por ej . ura3, adel, etc.); y similares. Los marcadores de aminoácidos se preferirán para los métodos de la invención. De manera alternativa, las células diploides que contienen los vectores deseados pueden seleccionarse por otros medios, por ej . , por el uso de otros marcadores tales como proteina verde fluorescente, genes resistentes a antibióticos, diversos marcadores seleccionables dominantes y similares.

Se pueden cruzan genéticamente dos células haploides transformadas y se pueden seleccionar cepas diploides que surgen de este evento de apareamiento por sus requerimientos nutricionales híbridos y/o espectro de resistencia a antibióticos. De manera alternativa, las poblaciones de las dos cepas haploides transformadas se someten a esferoplasto y se fusionan y se regenera y selecciona la progenie diploide. Por medio de cualquier método, se pueden identificar las cepas diploides y cultivarse de forma selectiva basándose en su capacidad de crecer en medios distintos de sus progenitores. Por ejemplo, las células diploides se pueden cultivar en un medio mínimo que puede incluir antibióticos. La estrategia de síntesis diploide tiene ciertas ventajas. Las cepas diploides tienen el potencial de producir niveles mejorados de proteína heteróloga a través de una complementación más amplia para mutaciones subyacentes que pueden impactar en la producción y/o secreción de proteina recombinante . Además, una vez que se obtienen las cepas estables, cualquier antibiótico usado para seleccionar esas cepas no deben necesariamente estar presentes continuamente en el medio de cultivo.

Tal como se observa anteriormente, en algunas modalidades, se puede transformar una levadura haploide con uno o múltiples vectores y aparearse o fusionarse con una célula no transformada para producir una célula diploide que contiene el o los vectores. En otras modalidades, se puede transformar una célula diploide de levadura con uno o más vectores que proporcionan la expresión y secreción de un polipéptido heterólogo deseado por medio de la célula diploide de levadura.

En una modalidad de la invención, se transforman dos cepas haploides con una biblioteca de polipéptidos, por ej . , una biblioteca de anticuerpo de cadenas pesada o ligera. Las células haploides transformadas que sintetizan los polipéptidos se aparean con las células haploides complementarias. Las células diploides resultantes se analizan para determinar la proteina funcional. Las células diploides proporcionan un medio para reunir rápida, conveniente y económicamente una gran cantidad de combinaciones de polipéptidos para pruebas funcionales. Esta tecnología es en especial aplicable para la creación de productos de proteína heterodimérica, donde los niveles de síntesis de subunidad optimizados son críticos para la expresión y secreción de proteínas funcionales.

En otra modalidad de la invención, la relación del nivel de expresión de las dos subunidades se regula para poder maximizar la creación de productos. Se ha demostrado anteriormente que los niveles de proteína de subunidad heterodimérica impactan en la creación de productos finales (Simmons LC, J Immunol Methods. mayo de 2002 1 ; 263 ( 1-2 ) : 133-47) . La regulación puede lograrse antes de la etapa de apareamiento mediante la selección de un marcador presente en el vector de expresión. Se puede aumentar el nivel de expresión aumentando de forma estable el número de copia del vector. En algunos casos, se puede desear aumentar el nivel de una cadena relativa a otra de manera de alcanzar una proporción balanceada entre las subunidades del polipéptido. Los marcadores de resistencia a antibióticos son útiles para este fin, por ej . marcador de resistencia a Zeocin™ ( fleomicina) , resistencia a G418, etc., y proporcionan un medio de enriquecimiento para cepas que contienen múltiples copias integradas de un vector de expresión en una cepa seleccionando transformadores resistentes a mayores niveles de Zeocin™ (fleomicina) o G418. La relación adecuada, por ej . 1:1, 1:2, etc. de los genes de la subunidad pueden resultar importantes para la producción eficiente de proteínas. Aun cuando se usa el mismo promotor para transcribir ambas subunidades, muchos otros factores contribuyen al nivel final de proteina expresada y por tanto puede ser útil para aumentar el número de copias de un gen codificado relativo al otro. De manera alternativa, se crean cepas diploides que producen mayores niveles de un polipéptido relativos a cepas de vector de copia simple, apareando dos cepas haploides y ambas tienen múltiples copias de los vectores de expresión.

Las células hospedadoras se transforman con los vectores de expresión antemencionados, apareados para formar cepas diploides y cultivados en medios nutritivos convencionales modificados según corresponda para la inducción de promotores, selección de los transformadores o amplificación de los genes que codifican las secuencias deseadas. Se conoce en la técnica un número de medios mínimos adecuados para el cultivo de levadura. Cualquiera de estos medios puede complementarse según sea necesario con sales (tales como cloruro de sodio, calcio, magnesio y fosfato), tampones (tales como fosfato, HEPES), nucleósidos (tales como adenosina y timidina) , antibióticos, elementos traza y glucosa o una fuente de energía equivalente. Cualquier otro suplemento necesario también puede incluirse en concentraciones apropiadas conocidas por aquellos expertos en la técnica. Las condiciones del cultivo, tales como temperatura, pH y similares son aquellas previamente usadas con la célula hospedadora seleccionada para la expresión y serán evidentes para los expertos en la técnica.

Las proteínas secretadas se recuperan del medio de cultivo. Un inhibidor de proteasa, tal como fluoruro de fenil metil sulfonilo (PMSF) puede ser útil para inhibir la degradación proteolitica durante la purificación y se pueden incluir antibióticos para prevenir el cultivo de contaminantes accidentales. La composición puede concentrarse, filtrarse, dializarse, etc., usando métodos conocidos en la técnica.

Las células diploides de la invención se cultivan para fines de producción. Tales fines de producción incluyen de forma deseada el cultivo en medios mínimos que carecen de aminoácidos preformados y otras biomoléculas complejas, por ej . , medios que comprenden amoníaco como fuente de nitrógeno y glucosa como fuente de energía y carbono y sales como fuente de fosfato, calcio y similares. Preferentemente, tales medios de producción carecen de agentes selectivos tales como antibióticos, aminoácidos, purinas, pirimidinas, etc. Las células diploides pueden cultivarse a una alta densidad celular, por ejemplo al menos alrededor de 50 g/L; más normalmente al menos de alrededor de 100 g/L; y al menos alrededor de 300, alrededor de 400, alrededor de 500 g/L o más.

En una modalidad de la invención, el cultivo de las células en cuestión para los fines de producción se realiza en temperaturas bajas que pueden bajarse durante la fase logarítmica, durante la fase estacionaria, o ambas. El término "baja temperatura" se refiere a temperaturas de al menos alrededor de 15 °C, más normalmente al menos alrededor de 17 °C y pueden ser de alrededor de 20 °C y normalmente no mayores a alrededor de 25 °C, más normalmente no mayores a alrededor de 22 °C. En otra modalidad de la invención, la baja temperatura normalmente no es mayor que alrededor de 28 °C. La temperatura de cultivo puede impactar la producción de proteínas secretadas de longitud completa en cultivos de producción y el hecho de reducir las temperaturas de crecimiento del cultivo puede aumentar fuertemente el rendimiento del producto intacto. La temperatura disminuida parece asistir el tráfico intracelular a través de las vías de procesamiento de plegamiento y postraduccionales usadas por el hospedador para generar el producto objetivo junto con una reducción de degradación de proteasa celular.

Los métodos de la invención proporcionan la expresión de proteína secretada activa preferentemente una proteína de mamífero. En una modalidad, los "anticuerpos activos" secretados, tal como se usan en la presente, se refieren a un multímero correctamente plegado de al menos dos cadenas arregladas apropiadamente en pares y que se unen con exactitud a su antígeno cognado. Los niveles de expresión de proteínas activas son normalmente al menos alrededor de 10-50 mg/litro del cultivo, más normalmente al menos alrededor de 100 mg/litro, preferentemente al menos alrededor de 500 mg/litro y pueden ser de 1000 mg/litro o más.

Los métodos de la invención pueden proporcionar una estabilidad aumentada de las secuencias hospedadoras y heterólogas de codificación durante la producción. La estabilidad se demuestra, por ejemplo, mediante el mantenimiento de altos niveles de expresión de tiempo, donde el nivel de expresión de partida disminuye en no más de alrededor de 20%, normalmente no más de alrededor de 10% y puede disminuir en no más de 5% más de alrededor de 20 duplicaciones, 50 duplicaciones, 100 duplicaciones o más.

La estabilidad de las cepas también proporciona el mantenimiento de la integridad de las secuencias de genes heterólogos con el paso del tiempo, donde se mantiene la secuencia de la secuencia de codificación activa y los elementos necesarios de regulación transcripcional en al menos alrededor del 99% de las células diploides, normalmente en al menos alrededor del 99.9% de las células diploides y preferentemente en al menos alrededor del 99.99% de las células diploides más de aproximadamente 20 duplicaciones, 50 duplicaciones, 100 duplicaciones o más. Preferentemente, sustancialmente todas las células diploides mantienen la secuencia de la secuencia de codificación activa y los elementos necesarios de regulación transcripcionales .

Otros métodos para la producción de anticuerpos son bien conocidos por aquellos expertos en la técnica. Por ejemplo, los métodos para la producción de anticuerpos quiméricos son ahora bien conocidos en la técnica (Véase, por ejemplo,, Patent estadounidense N° 4,816,567 de Cabilly et al.; Morrison et al., P.N.A.S. USA, 81:8651-55 (1984); Neuberger, M.S. et al., Nature, 314:268-270 (1985); Boulianne, G.L. et al., Nature, 312:643-46 (1984), cuyas descripciones se incorporan en la presente en su totalidad como referencia) .

Asimismo, otros métodos para la producción de anticuerpos humanizados son ahora bien conocidos en la técnica (Véase, por ejemplo, Patente estadounidense N° 5,530,101, 5,585,089, 5,693,762, y 6,180,370 de Queen et ai; Patente estadounidense N° 5,225,539 y 6,548,640 de Winter; Patente estadounidense N° 6,054,297, 6,407,213 y 6,639,055 de Cárter et al; Patente estadounidense N° 6,632,927 de Adair; Jones, P.T. et al, Nature, 321:522-525 (1986); Reichmann, L., et al, Nature, 332:323-327 (1988); Verhoeyen, M, et al, Science, 239:1534-36 (1988), cuyas descripciones se incorporan en la presente en su totalidad como referencia) .

Los polipéptidos del anticuerpo de la invención que poseen especificidad de unión a IL-6 también pueden producirse mediante la construcción de, usando técnicas convencionales bien conocidas por los expertos en la técnica, un vector de expresión que contiene un operón y una secuencia de ADN que codifica una cadena pesada de anticuerpo en donde la secuencia de ADN que codifica las CDR necesarias para la especificidad del anticuerpo proviene de una fuente celular no humana, preferentemente una fuente de linfocitos B de conejo, mientras que la secuencia de ADN que codifica las partes restantes de la cadena de anticuerpo proviene de una fuente celular humana.

Un segundo vector de expresión se produce usando los mismos medios convencionales bien conocidos por aquellos expertos en la técnica, dicho vector de expresión contiene un operón y una secuencia de ADN que codifica una cadena ligera de anticuerpo donde la secuencia de ADN que codifica las CDR necesarias para la especificidad del anticuerpo proviene de una fuente celular no humana, preferentemente una fuente de linfocitos B de conejo, mientras que la secuencia de ADN que codifica las partes restantes de la cadena de anticuerpo proviene de una fuente celular humana Los vectores de expresión se transfectan en una célula hospedadora mediante técnicas convencionales bien conocidas por los expertos en la técnica para producir una célula hospedadora transíectada; esta célula hospedadora transfectada cultivada mediante técnicas convencionales bien conocidas por los expertos en la técnica para producir dichos polipéptidos de anticuerpos .

La célula hospedadora puede transíectarse conjuntamente con los dos vectores de expresión descritos anteriormente, el primer vector de expresión contiene ADN que codifica un operón y un polipéptido que proviene de una cadena ligera y el segundo vector contiene ADN que codifica un operón y un polipéptido que proviene de una cadena pesada. Los dos vectores contienen diferentes marcadores selecciónateles, pero preferentemente alcanzan una expresión sustancialmente igual de los polipéptidos de cadena pesada y ligera. De manera alternativa, se puede usar un vector simple, este vector incluye ADN que codifica tanto el polipéptido de cadena pesada como el de ligera. Las secuencias de codificación para las cadenas pesada y ligera pueden comprenden ADNc.

Las células hospedadoras usadas para expresar los polipéptidos de anticuerpo pueden ser células bacterianas, como ser E.coli, o una célula eucariota. En una modalidad particularmente preferida de la invención, se puede usar una célula de mamífero de un tipo bien definido para este fin, tal como una célula de mieloma o línea celular de ovario de hámster chino (CHO) .

Los métodos generales por los cuales se pueden construir los vectores, métodos de transfeccion requeridos para producir la célula hospedadora y métodos de cultivo requeridos para producir los polipéptidos de anticuerpo a partir de dichas células hospedadoras, todos incluyen técnicas convencionales. Aunque preferentemente la línea celular usada para producir el anticuerpo es una línea celular de mamífero, cualquier otra línea celular adecuada, tal como una línea celular de bacteria como ser una cepa bacteriana que proviene de E.coli, o una línea celular de levadura, puede usarse de manera alternativa.

De manera similar, una vez que los polipéptidos de anticuerpo se producen pueden estar purificados de acuerdo con los procedimientos estándar de la técnica, tal como por ejemplo, filtración de flujo cruzado, precipitación de sulfato de amonio, cromatografía de afinidad de columna y similares.

Los polipéptidos de anticuerpo descritos en la presente también pueden usarse para el diseño y síntesis de miméticos peptídicos o no peptídicos que pueden ser útiles para las mismas aplicaciones terapéuticas que los polipéptidos de anticuerpo de la invención. Véase, por ejemplo, Saragobi et al, Science, 253:792-795 (1991), cuyo contenido se incorpora en su totalidad a modo de referencia.

Ensayos de análisis La invención también incluye ensayos de análisis diseñados para asistir a la identificación de enfermedades y trastornos asociados con IL-6 en pacientes que presentan síntomas de una enfermedad o trastorno asociado con IL-6.

En una modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 de la invención o fragmentos de unión a IL-6 de los mismos, se usan para detectar la presencia de IL-6 en una muestra biológica obtenida de un paciente que presenta síntomas de una enfermedad o trastorno asociado con IL-6. La presencia de IL-6 o niveles elevados de esta al compararse con niveles de IL-6 previos a la enfermedad en una muestra biológica comparable, puede ser beneficioso para el diagnóstico de una enfermedad o trastorno asociado con IL-6.

Otra modalidad de la invención proporciona un ensayo de diagnóstico o análisis para asistir al diagnóstico de enfermedades o trastornos asociados con IL-6 en pacientes que presentan síntomas de una enfermedad o trastorno asociado con IL-6 identificado en la presente, que comprende ensayar el nivel de expresión de IL-6 en una muestra biológica de dicho paciente usando un anticuerpo anti-IL-6 modificado postraduccionalmente o un fragmento de unión del mismo. El anticuerpo anti-IL-6 o el fragmento de unión del mismo pueden estar modificados postraduccionalmente para incluir un resto detectable tal como se establece previamente en la descripción.

El nivel de IL-6 en la muestra biológica se determina usando un anticuerpo anti-IL-6 modificado o un fragmento de unión del mismo tal como se establece en la presente y comparando el nivel de IL-6 en la muestra biológica contra un nivel estándar de IL-6 (por ej . , el nivel en muestras biológicas normales) . El médico experto entenderá que puede existir cierta variabilidad entre las muestras biológicas normales y lo tomará en cuenta al evaluar los resultados.

El ensayo mencionado anteriormente también puede ser útil en el monitoreo de una enfermedad o trastorno, donde el nivel de IL-6 obtenido en una muestra biológica de un paciente que se cree tiene una enfermedad o trastorno asociado con IL-6 se compara con el nivel de IL-6 en muestras biológicas anteriores en el mismo paciente, para poder establecer si el nivel de IL-6 en dicho paciente ha cambiado, por ejemplo, con un régimen de tratamiento.

La invención también se dirige a un método de diagnóstico por imágenes in vivo que detecta la presencia de células que expresan IL-6 que comprende administrar una cantidad efectiva desde el punto de vista del diagnóstico de una composición de diagnóstico. Dichos diagnósticos por imágenes in vivo son útiles para la detección y diagnóstico por imágenes de tumores y metástasis que expresan IL-6 y sitios inflamatorios que expresan IL-6, por ejemplo, y pueden usarse como parte de un régimen de planificación para diseñar un protocolo de tratamiento efectivo para artritis o cáncer. El protocolo de tratamiento puede incluir, por ejemplo, uno o más de radiación, quimioterapia, terapia con citocina, terapia genética y terapia con anticuerpos, asi como un anticuerpo anti-IL-6 o fragmento del mismo.

Un médico experto entenderá que una muestra biológica incluye, pero no se limita a, suero, plasma, orina, saliva, mucosa, fluido pleural, fluido sinovial y fluido espinal.

Métodos para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar, o prevenir enfermedades y trastornos asociados con, IL-6.

En una modalidad de la invención, los anticuerpos anti- IL-6 descritos en la presente, o fragmentos de los mismos, son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir enfermedades y trastornos asociados con IL-6. Los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente, o fragmentos de los mismos, pueden también administrarse en una cantidad terapéuticamente efectiva a pacientes que necesitan de un tratamiento para enfermedades y trastornos asociados con IL-6 en forma de una composición farmacéutica tal como se describe en más detalle a continuación.

En una modalidad de la invención, los antagonistas de IL-6 descritos en la presente son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir enfermedades y trastornos asociados con la proteína C-reactiva (CRP) elevada. Tales enfermedades incluyen cualquier enfermedad que presenta inflamación crónica, por ej . , artritis reumatoide, artritis reumatoide juvenil, psoriasis, artropatía psoriática, espondilitis anquilosante, lupus eritematoso sistémico, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, pénfigo, dermatomiositis, polimiositis, polimialgia reumática, arteritis de células gigantes, vasculitis, poliarteritis nodosa, granulomatosis de egener, enfermedad de Kawasaki, vasculitis aislada del sistema nervioso central, arteritis de Churg-Strauss, poliarteritis microscópica, poliangiitis microscópica, púrpura de Henoch-Schonlein, vasculitis crioglobulinémica esencial, vasculitis reumatoide, crioglobulinemia, policondritis recidivante, enfermedad de Behcet, arteritis de Takayasu, enfermedad cardiaca isquémica, apoplejía, esclerosis múltiple, sepsis, vasculitis causada por infecciones virales (por ej . , hepatitis B, hepatitis C, VIH, citomegalovirus, virus Epstein-Barr, virus Parvo B19, etc.), enfermedad de Buerger, cáncer, cáncer avanzado, osteoartritis, esclerosis sistémica, síndrome de CREST, enfermedad de Reiter, enfermedad ósea de Paget, síndrome de Sjogran, diabetes tipo 1, diabetes tipo 2, fiebre mediterránea familiar, trombocitopenia autoinmune, anemia hemolítica autoinmune, enfermedad tiroidea autoinmune, anemia perniciosa, vitíligo, alopecia areata, cirrosis biliar primaria, hepatitis activa crónica autoinmune, cirrosis alcohólica, hepatitis viral incluyendo hepatitis B y C, otras enfermedades autoinmunes específicas de órganos, quemaduras, fibrosis pulmonar idiopática, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, asma alérgico, otras afecciones alérgicas o cualquier combinación de los mismos. En una modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente, o fragmentos de los mismos, son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o prevenir enfermedades y trastornos asociados con albúmina en suero reducida, por ej . , artritis reumatoide, cáncer, cáncer avanzado, enfermedad hepática, enfermedad renal, enfermedad inflamatoria intestinal, enfermedad celíaca, traumatismo, quemaduras, otras enfermedades asociadas con albúmina en suero reducida o cualquier combinación de las mismas.

En otra modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente, o fragmentos de los mismos, se administran a un paciente en combinación con otro agente activo. Por ejemplo, un anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 puede administrarse conjuntamente con uno o más agentes quimioterapéuticos, tales como antagonistas de VEGF, antagonistas de EGFR, platinos, taxoles, irinotecano, 5-fluorouracilo, gemcitabina, leucovorina, esteroides, ciclofosfamida, melfalán, alcaloides de la vinca (por ej . , vinblastina, vincristina, vindesina y vinorelbina) , mustinas, inhibidores de tirosina cinasa, radioterapia, antagonistas de hormonas sexuales, moduladores selectivos del receptor de andrógeno, moduladores selectivos del receptor de estrógeno, antagonistas de PDGF, antagonistas de TNF, antagonistas de IL-1, interleucinas (por ej . IL-12 o IL-2) , antagonistas de IL-12R, anticuerpos monoclonales conjugados con toxinas, anticuerpos monoclonales específicos contra antígenos tumorales, Erbitux™, Avastin™, Pertuzumab, anticuerpos anti-CD20, Rituxan®, ocrelizumab, ofatumumab, DXL625, Herceptin®, o cualquier combinaciones de los mismos.

En una modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente, o fragmentos de los mismos, son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir enfermedades y trastornos asociados con la fatiga. Las enfermedades y los trastornos asociados con la fatiga incluyen pero no se limitan a, fatiga general, fatiga inducida por ejercicio, fatiga relacionada con cáncer, fibromialgia, fatiga relacionada con enfermedad inflamatoria y síndrome de fatiga crónica. Véase, por ejemplo, Esper DH, et al, The cáncer cachexia syndrome: a review of metabolic and clinical manifestations, Nutr Clin Pract., agosto de 2005;20 (4):369-76; Vgontzas AN, et al, IL-6 and its circadian secretion in humans, Neuroimmunomodulation, 2005/12 (3) : 131-40 ; Robson-Ansley, PJ, et al, Acute interleukin-6 administration impairs athletic performance in healthy, trained male runners, Can J Appl Physiol., agosto de 2004 ; 29 ( 4 ) : 411-8 ; Shephard RJ. , Cytokine responses to physical activity, with particular reference to IL-6: sources, actions, and clinical implications , Crit Rev Immunol., 2002/22 (3) :rl65-82; Arnold, MC, et al, Using an interleukin-6 challenge to evalúate neuropsychological performance in chronic fatigue syndrome, Psychol ed., agosto de 2002; 32 ( 6) : 1075-89; Kurzrock R. , The role of cytokines in cancer-related fatigue, Cáncer, 15 de septiembre de 2001/92 (6 Suppl) : 1684-8 ; Nishimoto N, et al, Improvement in Castleman' s disease by humanized anti-interleukin-6 receptor antibody therapy, Blood, Io de enero de 2000; 95 (1):56-61; Vgontzas AN, et al, Circadian interleukin-6 secretion and quantity and depth of sleep, J Clin Endocrinol Metab., agosto de 1999; 84 (8): 2603-7 y Spath-Schwalbe E, et al, Acute effects of recombinant human interleukin 6 on endocrine and central nervous sleep functions in healthy men, J Clin Endocrinol Metab., mayo de 1998; 83 (5) : 1573-9, cuyas descripciones se incorporan en su totalidad a la presente a modo de referencia.

En una modalidad preferida de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente, o fragmentos de los mismos, son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir la caquexia. Las enfermedades y los trastornos asociados con la caquexia incluyen, pero no se limitan a, caquexia cancerosa, caquexia cardíaca, caquexia respiratoria, caquexia renal y caquexia relacionada con la edad. Véase, por ejemplo, Barton, BE., Interleukin-6 and new strategies for the treatment of cáncer, hyperproliferative diseases and paraneoplastic syndromes, Expert Opin Ther Targets, agosto de 2005; 9(4):737-52; Zaki MH, et al, CNTO 328, a monoclonal antibody to IL-6, inhibits human tumor-induced cachexia in nude mice, Int J Cáncer, 10 de septiembre de 2004; 111 (4) :592-5; Trikha M, et al, Targeted anti-interleukin-6 monoclonal antibody therapy for cáncer: a review of the rationale and clinical evidence, Clin Cáncer Res., 15 de octubre de 2003; 9 (13) ;4653-65; Lelli G, et al, Treatment of the cáncer anorexia-cachexia syndrome: a critical reappraisal, J Chemother., junio de 2003; 15(3):220-5; Argües J , et al, Cytokines in the pathogenesis of cáncer cachexia, Curr Opin Clin Nutr Metab Care, julio de 2003; 6(4):401-6; Barton BE., IL-6-like cytokines and cáncer cachexia: consequences of chronic inflammation, Immunol Res., 2001 ;23 (1) :41-58 ; Yamashita JI, et al, Medroxyprogesterone acétate and cáncer cachexia: interleukin-6 involvement, Breast Cáncer, 2000; 7 (2) : 130-5 ; Yeh SS, et al, Geriatric cachexia: the role of cytokines, Am J Clin Nutr., agosto de 1999; 70 (2) : 183-97; Strassmann G, et al, Inhibition of experimental cáncer cachexia by anti-cytokine and anti-cytokine-receptor therapy, Cytokines Mol Ther., junio de 1995; 1(2): 107-13; Fujita J, et al, Anti-interleukin-6 receptor antibody prevents muscle atrophy in colon-26 adenocarcinoma-bearing mice with modulation of lysosomal and ATP-ubiquitin-dependent proteolytic pathways, Int J Cáncer, 27 de noviembre 1996/ 68 (5) : 637-43; Tsujinaka T, et al, Interleukin 6 receptor antibody inhibits muscle atrophy and modulates proteolytic systems in interleukin 6 transgenic mice, J Clin Invest., Io de enero de 1996/ 97 (1) :244-9; Emilie D, et al, Administration of an anti-interleukin-6 monoclonal antibody to patients with acquired immunodeficiency syndrome and lymphoma: effect on lymphoma growth and on B clinical Symptoms, Blood, 1994 Oct 15;84 (8):2472-9; and Strassmann G, et al, Evidence for the involvement of interleukin 6 in experimental cáncer cachexia, J Clin Invest., 1992 May; 89 (5) : 1681-4; cuyas descripciones se incorporan en su totalidad a la presente como referencia.

En otra modalidad de la invención, los anticuerpos anti- IL-6 descritos en la presente, o fragmentos de los mismos, son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir enfermedades y trastornos autoinmunes. Las enfermedades y los trastornos asociados con la autoinmunidad incluyen pero no se limitan a, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico (SLE), artritis idiopática juvenil sistémica, psoriasis, artropatia psoriática, espondilitis anquilosante, enfermedad inflamatoria intestinal (IBD), polimialgia reumática, arteritis de células gigantes, vasculitis autoinmune, enfermedades de injerto versus huésped (GVHD) , síndrome de Sjogren, enfermedad de Still de comienzo en el adulto. En una modalidad preferida de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 humanizados descritos en la presente, o fragmentos de los mismos, son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir artritis reumatoide y artritis idiopática juvenil sistémica. Véase, por ejemplo, Nishimoto N., Clinical studies in patients with Castleman's disease, Crohn' s disease, and rheumatoid arthritis in Japan, Clin Rev Allergy Immunol., 2005 Jun; 28 ( 3 ) : 221-30 ; Nishimoto N, et al, Treatment of rheumatoid arthritis with humanized anti-interleukin-6 receptor antibody: a multicenter, double-blind, placebo-controlled trial, Arthritis Rheum., 2004 Jun;50 (6) : 1761-9; Choy E., Interleukin 6 receptor as a target for the treatment of rheumatoid arthritis, Ann Rheum Dis., 2003 Nov;62 Suppl 2:ii68-9; Nishimoto N, et al, Toxicity, pharmacokinetics, and dose-finding study of repetitive treatment with the humanized anti-interleukin 6 receptor antibody MRA in rheumatoid arthritis. 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En otra modalidad de la invención, los anticuerpos anti- IL-6 descritos en la presente, o fragmentos de los mismos, son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir enfermedades y trastornos asociados con el sistema óseo. Las enfermedades y los trastornos asociados con el sistema óseo incluyen, pero no se limitan a, osteoartritis, osteoporosis y enfermedad ósea de Paget. En una modalidad preferida de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 humanizados descritos en la presente o fragmentos de los mismos son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir la osteoartritis. Véase, por ejemplo, Malemud CJ., Cytokines as therapeutic targets for osteoarthritis, BioDrugs, 2004;18 (1) :23-35; Westacott CI, et al, Cytokines in osteoarthritis: mediators or markers of joint destruction?, Semin Arthritis Rheum. , 1996 Feb;25 (4) :254-72; Sugiyama T., Involvement of interleukin-6 and prostaglandin E2 in particular osteoporosis of postmenopausal women with rheumatoid arthritis, J Bone Miner Metab., 2001; 19 (2) : 89-96; Abrahamsen B, et al, Cytokines and bone loss in a 5-year longitudinal study -hormone replacement therapy suppresses serum soluble interleukin-6 receptor and increases interleukin-l-receptor antagonist: the Danish Osteoporosis Prevention Study, J Bone Miner Res., agosto de 2000; 15 (8 ): 1545-54 ; Straub RH, et al, Hormone replacement therapy and interrelation between serum interleukin-6 and body mass index in postmenopausal women: a population-based study, J Clin Endocrinol Metab., marzo de 2000;85(3) :1340-4; Manolagas SC, The role of IL-6 type cytokines and their receptors in bone, Ann N Y Acad Sci., 1998 May 1/840: 194-204; Ershler WB, et al, Immunologic aspects of osteoporosis, Dev Comp Immunol., 1997 Nov-Dec; 21 ( 6) : 487-99; Jilka RL, et al, Increased osteoclast development after estrogen loss: mediation by interleukin-6, Science, 1992 Jul 3;257 (5066) :88-91; Kallen KJ, et al, New developments in IL-6 dependent biology and therapy: where do we stand and what are the options?, Expert Opin Investig Drugs, setiembre de 1999; 8 (9) : 1327-49; Neale SD, et al, The influence of serum cytokines and growth factors on osteoclast formation in Paget's disease, QJM, abril de 2002;95 (4):233 - 40; Roodman GD, Osteoclast function In Paget' s disease and múltiple myeloma, Bone, agosto de 1995;17(2 Suppl ) : 57S-61S ; Hoyland JA, et al, Interleukin-6, IL-6 receptor, and IL-6 nuclear factor gene expression in Paget's disease, J Bone Miner Res., enero de 1994; 9 (1) : 75-80; and Roodman GD, et al, Interleukin 6. A potential autocrine/paracrine factor in Paget's disease of bone, J Clin Invest., enero de 1992; 89 (1) : 46-52; cuyas descripciones se incorporan en la presente en su totalidad como referencia .

En otra modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente o fragmentos de los mismos son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir enfermedades y trastornos asociados con cáncer. Las enfermedades y los trastornos asociados con cáncer incluyen pero no se limitan a acantoma, carcinoma de células acínicas, neuroma acústico, melanoma lentiginoso acral, acrospiroma, leucemia eosinofílica aguda, leucemia linfoblástica aguda, leucemia megacarioblástica aguda, leucemia monocítica aguda, leucemia mieloblástica aguda con maduración, leucemia mieloide aguda de células dendríticas, leucemia mieloide aguda, leucemia promielocítica aguda, adamantinoma, adenocarcinoma, carcinoma quístico adenoide, adenoma, tumor odontogénico adenomatoide, carcinoma adrenocortical, leucemia de células T del adulto, leucemia agresiva de células NK, cánceres relacionados con SIDA, linfoma relacionado con SIDA, sarcoma alveolar de partes blandas, fibroma ameloblástico, cáncer anal, linfoma anaplásico de células grandes, cáncer anaplásico de tiroides, linfoma angioinmunoblástico de células T, angiomiolipoma, angiosarcoma, cáncer de apéndice, astrocitoma, tumor rabdoide teratoide atípico, carcinoma de células básales, carcinoma de tipo basal, leucemia de células B, linfoma de células B, carcinoma de los conductos de Bellini, cáncer del tracto biliar, cáncer de vejiga, blastoma, cáncer de hueso, tumor de hueso, glioma de tronco cerebral, tumor cerebral, cáncer de mama, tumor de Brenner, tumor bronquial, carcinoma bronquioloalveolar, tumor de Brown, linfoma de Burkitt, cáncer de sitio primario desconocido, tumor carcinoide, carcinoma, carcinoma in situ, carcinoma de pene, carcinoma de sitio primario desconocido, carcinosarcoma, enfermedad de Castleman, tumor embrionario del sistema nervioso central, astrocitoma cerebeloso, astrocitoma cerebral, cáncer cervical, colangiocarcinoma, condroma, condrosarcoma, cordoma, coriocarcinoma, papiloma del plexo coroideo, leucemia linfocitica crónica, leucemia monocitica crónica, leucemia mielógena crónica, enfermedad mieloproliferativa crónica, leucemia neutrofilica crónica, tumor de células claras, cáncer de colon, cáncer colorrectal, craniofaringioma, linfoma cutáneo de células T, enfermedad de Degos, dermatofibrosarcoma protuberans, quiste dermoide, tumor desmoplásico de células redondas pequeñas, linfoma difuso de células B grandes, tumor neuroepitelial disembrioplásico, carcinoma embrionario, tumor de seno endodérmico, cáncer endometrial, cáncer uterino endometrial, tumor endometrioide, linfoma de células T asociado a enteropatia, ependimoblastoma, ependimoma, sarcoma epitelioide, eritroleucemia, cáncer de esófago, estesioneuroblastoma, tumor de la familia de Ewing, sarcoma de la familia de Ewing, sarcoma de Ewing, tumor extracraneal de células germinales, tumor extragonadal de células germinales, cáncer de ducto biliar extrahepático, enfermedad de Paget extramamaria, cáncer de tubo falopiano, Fetus in fetu, fibroma, fibrosarcoma, linfoma folicular, cáncer folicular de tiroides, cáncer de vesícula biliar, cáncer de vesícula biliar, ganglioglioma, ganglioneuroma, cáncer gástrico, linfoma gástrico, cáncer gastrointestinal, tumor carcinoide gastrointestinal, tumor del estroma gastrointestinal, tumor del estroma gastrointestinal, tumor de células germinales, germinoma, coriocarcinoma gestacional, tumor trofoblástico gestacional, tumor óseo de células gigantes, glioblastoma multiforme, glioma, gliomatosis cerebri, tumor glómico, glucagonoma, gonadoblastoma, tumor de células granulosas, leucemia de células vellosas, leucemia de células vellosas, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de corazón, hemangioblastoma, hemangiopericitoma, hemangiosarcoma, malignidad hematológica, carcinoma hepatocelular, linfoma hepatoesplénico de células T, síndrome de cáncer de mama y ovario hereditario, linfoma Hodgkin, linfoma de Hodgkin, cáncer hipofaríngeo, glioma hipotalámico, cáncer de mama inflamatorio, melanoma intraocular, carcinoma de células de los islotes, tumor de células de los islotes, leucemia juvenil mielomonocítica, sarcoma Kaposi, sarcoma de Kaposi, cáncer de riñon, tumor de Klatskin, tumor de Krukenberg, cáncer de laringe, cáncer de laringe, melanoma léntigo maligno, leucemia, leucemia, cáncer del labio y la cavidad oral, liposarcoma, cáncer de pulmón, luteoma, linfangioma, linfangiosarcoma, linfoepitelioma, leucemia linfoide, linfoma, macroglobulinemia, histiocitoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno óseo, glioma maligno, mesotelioma maligno, tumor maligno de vaina nerviosa periférica, tumor rabdoide maligno, tumor tritón maligno, linfoma ALT, linfoma de células del manto, leucemia de mastocitos, tumor mediastinal de células germinales, tumor mediastinal, cáncer medular de tiroides, meduloblastoma, meduloblastoma, meduloepitelioma, melanoma, melanoma, meningioma, carcinoma de células de Merkel, mesotelioma, mesotelioma, cáncer escamoso metastásico del cuello con tumor primario oculto, carcinoma urotelial metastásico, tumor Mülleriano mixto, leucemia monocitica, cáncer de boca, tumor mucinoso, síndrome de neoplasia endocrina múltiple, mieloma múltiple, mieloma múltiple, micosis fungoides, micosis fungoides, enfermedad mielodisplásica, síndromes mielodisplásicos, leucemia mieloide, sarcoma mieloide, enfermedad mieloproliferativa, mixoma, cáncer de la cavidad nasal, cáncer nasofaríngeo, carcinoma nasofaríngeo, neoplasma, neurinoma, neuroblastoma, neuroblastoma, neurofibroma, neuroma, melanoma nodular, linfoma no Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer de piel no melanoma, cáncer de pulmón no microcítico, oncología ocular, oligoastrocitoma, oligodendroglioma, oncocitoma, meningioma de la vaina del nervio óptico, cáncer oral, cáncer oral, cáncer orofaríngeo, osteosarcoma, osteosarcoma, cáncer de ovario, cáncer de ovario, cáncer epitelial de ovario, tumor de células germinales del ovario, tumor de ovario de bajo potencial maligno, enfermedad de Paget de la mama, tumor de Pancoast, cáncer pancreático, cáncer pancreático, cáncer papilar de tiroides, papilomatosis, paraganglioma, cáncer de seno paranasal, cáncer de paratiroides, cáncer de pene, tumor perivascular de células epitelioides, cáncer faríngeo, feocromocitoma, tumor parénquima pineal de diferenciación intermedia, pineoblastoma, pituicitoma, adenoma pituitario, tumor pituitario, neoplasma de células plasmáticas, blastoma pleuropulmonar, poliembrioma, linfoma precursor linfoblástico de células T, linfoma primario del sistema nervioso central, linfoma de efusión primaria, cáncer hepatocelular primario, cáncer hepático primario, cáncer peritoneal primario, tumor neuroectodermal primitivo, cáncer de próstata, pseudomixoma peritoneal, cáncer rectal, carcinoma de células renales, carcinoma del tracto respiratorio relacionado con el gen NUT en el cromosoma 15, retinoblastoma, rabdomioma, rabdomiosarcoma, transformación de Richter, teratoma sacrococcígeo, cáncer de la glándula salival, sarcoma, Schwannomatosis, carcinoma de glándulas sebáceas, neoplasma secundario, seminoma, tumor seroso, tumor de células de Sertoli-Leydig, tumor del estroma de los cordones sexuales, síndrome de Sézary, carcinoma de células en anillo de sello, cáncer de piel, tumor de células pequeñas, redondas y azules, carcinoma de células pequeñas, cáncer de pulmón microcítico, linfoma de células pequeñas, cáncer del intestino delgado, sarcoma de tejido blando, somatoestatinoma, verruga del deshollinador, tumor de la médula espinal, tumor espinal, linfoma de la zona marginal esplénica, carcinoma de células escamosas, cáncer de estómago, melanoma superficial diseminante, tumor neuroectodermal primitivo supratentorial, tumor epitalial de ovario, sarcoma sinovial, leucemia aguda de células T, leucemia linfocitica granular grande de células T, leucemia de células T, linfoma de células T, leucemia prolinfocitica de células T, teratoma, cáncer linfático terminal, cáncer testicular, tecoma, cáncer de garganta, carcinoma timico, timoma, cáncer de tiroides, cáncer de células de transición de la pelvis renal y el uréter, carcinoma de células de transición, cáncer uracal, cáncer uretral, neoplasma urogenital, sarcoma uterino, melanoma uveal, cáncer vaginal, síndrome de Verner Morrison, carcinoma verrugoso, glioma de la vía visual, cáncer vulvar, macroglobulinemia de aldenstróm, tumor de Warthin, tumor de Wilms, o cualquier combinación de los mismos así como resitencia a los fármacos en quimioterapia contra el cáncer y toxicidad de quimioterapia contra el cáncer. Véase, por ejemplo, Hirata T, et al, Humanized anti-interleukin-6 receptor monoclonal antibody induced apoptosis of fresh and cloned human myeloma cells in vitro, Leuk Res., abril de 2003;27 (4) :343-9, Bataille R, et al, Biologic effects of anti-interleukin-6 murine monoclonal antibody in advanced múltiple myeloma, Blood, 15 de julio de 1995;86 (2):685-91; Goto H, et al, Mouse anti-human interleukin-6 receptor monoclonal antibody inhibits proliferation of fresh human myeloma cells in vitro, Jpn J Cáncer Res., setiembre de 1994;85 (9) : 958-65; Klein B, et al, Murine anti-interleukin-6 monoclonal antibody therapy for a patient with plasma cell leukemia, Blood, Io de setiembre de 1991 ; 78 (5) : 1198-204; Mauray S, et al, Epstein-Barr virus-dependent lymphoproliferative disease: critical role of IL-6, Eur J Immunol., julio de 2000;30 (7) : 2065-73; Tsunenari T, et al, New xenograft model of múltiple myeloma and efficacy of a humanized antibody against human interleukin-6 receptor, Blood, 15 de setiembre de 1997; 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En otra modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente o fragmentos de los mismos son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir enfermedad cardíaca isquémica, ateroesclerosis, obesidad, diabetes, asma, esclerosis múltiple, enfermedad de Alzheimer, enfermedad cerebrovascular, fiebre, respuesta de fase aguda, alergias, anemia, anemia de inflamación (anemia de enfermedad crónica) , hipertensión, depresión, depresión asociada con enfermedad crónica, trombosis, trombocitosis, insuficiencia cardíaca aguda, síndrome metabólico, abortos naturales, obesidad, prostatitis crónica, glomerulonefritis, enfermedad inflamatoria pélvica, lesión por reperfusión y rechazo de transplante. Véase, por ejemplo, Tzoulaki I, et al, C-reactive protein, interleukin-6, and soluble adhesión molecules as predictors of progressive peripheral atherosclerosis in the general population: Edinburgh Artery Study, Circulation, 2005 Aug 16/112 (7) : 976-83, Epub 2005 Ago 8; Rattazzi M, et al, C-reactive protein and interleukin-6 in vascular disease: culprits or passive bystanders?, J Hypertens., 2003 Oct;21 (10) : 1787-803; Ito T, et al, HMG-CoA reductase inhibitors reduce interleukin-6 synthesis in human vascular smooth muscle cells, Cardiovasc Drugs Ther., 2002 Mar; 16 (2) : 121-6; Stenvinkel P, et al, Mortality, malnutrition, and atherosclerosis in ESRD: what is the role of interleukin- 6?, Kidney Int Suppl., 2002 May; (80) : 103-8; Yudkin JS, et ai, Inflammation, obesity, stress and coronary heart disease: is interleukin-6 the link?, Atherosclerosis, febrero de 2000;248C2 ."209-14; Huber SA, et al, Interleukin-6 exacerbates early atherosclerosis in mice, Arterioscler Thromb Vasc Biol., octubre de 1999 ; 19 (10) : 2364-7; Kado S, et al, Circulating levéis of interleukin-6, its soluble receptor and interleukin-6/interleukin-6 receptor complexes in patients with type 2 diabetes mellitus, Acta Diabetol., junio de 1999 ;36 (1-2) : 67-72; Sukovich DA, et ai, Expression of interleukin-6 in atherosclerotic lesions of male ApoE-knockout mice: inhibition by 17beta-estradiol, Arterioscler Thromb Vasc Biol., 1998 Sept;8 (9) :1498-505; Klover PJ, et al, Interleukin-6 depletion selectively improves hepatic insulin action in obesity, Endocrinology, 2005 Aug;146(8) :r3417-27, Epub 2005 Abr 21; Lee YH, et al, The evolving role of inflammation in obesity and the metabolic syndrome, Curr Diab Rep., 2005 Feb;5 (1) : 70-5; Diamant M, et al, The association between abdominal visceral fat and carotid stiffness is mediated by circulating inflammatory markers in uncomplicated type 2 diabetes, J Clin Endocrinol Metab., 2005 Mar; 90 (3) : 1495-501, Epub 2004 Dic 21; Bray GA, Medical consequences of obesity, J Clin Endocrinol Metab., 2004 Jun; 89 (6) : 2583 9; Klover PJ, et al, Chronic exposure to interleukin-6 causes hepatic insulin resistance in mice, Diabetes, 2003 Nov;52 (11) : 2784.-9; Yudkin JS, et al, Inflammation, obesity, stress and coronary heart disease: is interleukin-6 the link?, Atherosclerosis, 2000 Feb;l 48 (2) :209-14; Doganci A, et al, Pathological role of IL-6 in the experimental allergic bronchial asthma in mice, Clin Rev Allergy Immunol., 2005 Jun;28 (3) : 257-70; Doganci A, et al, The IL-6R alpha chain controls lung CD4+CD25+ Treg development and function during allergic airway inflammation in vivo, J Clin Invest., 2005 Feb;115 (2) ; 313 25, (Erratum in: J Clin Invest., 2005 May;115 (5) :1388, Lehr, Hans A [added] ) ; Stelmasiak Z, et al, IL 6 and sIL-6R concentration in the cerebrospinal fluid and serum of S patients, Med Sci Monit., 2001 Sep-Oct;7 (5) : 914-8; Tilgner J, et al, Continuous interleukin-6 application in vivo via macroencapsulation of interleukin-6-expressing COS-7 cells induces massive gliosis, Glia, 2001 5ep;35 (3) : 234-45, Brunello AG, et al, Astrocytic alterations in interleukin-6 Soluble interleukin-6 receptor alpha double-transgenic mice, Am J Pathol., 2000 Nov;157 (5) : 1485-93; Hampel H, et al, Pattern of interleukin-6 receptor complex immunoreactivity between cortical regions of rapid autopsy normal and Alzheimer's disease brain, Eur Arch Psychiatry Clin Neurosci., 2005 Aug; 255 ( 4 ): 269-78 , Epub 2004 Nov 26; Cacquevel M, et al, Cytokines in neuroinflammation and Alzheimer's disease, Curr Drug Targets, .2004 Aug; 5 ( 6) : 529-34 ; Quintanilla RA, et al, Interleukin 6 induces Alzheimer-type phosphorylation of tau protein by deregulating the cdk5/p35 pathway, Exp Cell Res., 2004 Abr 15; 295 (l):245-57; Gadient RA, et al, Interleukin-6 (IL-6)—a molecule with both beneficial and destructive potentials, Prog Neurobiol., 1997 Ago; 52 (5) : 379-90; Hull M, et al, Occurrence of interleukin-6 in cortical plaques of Alzheimer' s disease patients may precede transíormation of diffuse into neuritic plaques, Ann N Y Acad Sci., 1996 Ene 17 ; 777 : 205-12 ; Rallidis LS, et al, Inflammatory markers and inhospital mortality in acute ischaemic stroke, Atherosclerosis, 2005 Dic 30; Emsley HC, et al, Interleukin-6 and acute ischaemic stroke, Acta Neurol Scand., 2005 Oct; 112 (4) :273-4; Smith CJ, et al, Peak plasma interleukin-6 and other peripheral markers of inflammation in the first week of ischaemic stroke correlate with brain infarct volume, stroke severity and long-term outcome, BMC Neurol., 2004 Ene 15; 4:2; Vila N, et al, Proinflammatory cytokines and early neurological worsening in ischemic stroke, Stroke, 2000 Oct;31 (10) :2325-9; and Tarkowski E, et al, Early intrathecal production of interleukin-6 predicts the size of brain lesión in stroke, Stroke, 1995 Ago; 26 (8 ): 1393-8 ; cuyas descripciones se incorporan en la presente en su totalidad como referencia.

En otra modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente o fragmentos de los mismos son útiles para mejorar o reducir los síntomas de, o tratar o prevenir enfermedades y trastornos asociados con una crisis de citocina. Las enfermedades y los trastornos asociados con una crisis de citocina incluyen pero no se limitan a, enfermedad de injerto versus huésped (GVHD) , gripe aviar, viruela, gripe pandémica, síndrome de distrés respiratorio del adulto (ARDS) , síndrome respiratorio agudo severo (SARS), sepsis y síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SIRS) . Véase, por ejemplo, Cecil, R. L., Goldman, L., & Bennett, J. C. (2000). Cecil textbook of medicine. Philadelphia: W.B. Saunders Ferrara JL, et al., Cytokine storm of graft-versus-host disease: a critical effector role for interleukin-1 , Transplant Proc. 1993 Feb;25(l Pt 2):1216-7; Osterholm MT, Preparing for the Next Pandemic, N Engl J ed. 2005 May 5;352 (18) : 1839-42; Huang KJ, et al., An interferon-gamma-related cytokine storm in SARS patients, J Med Virol. 2005 Feb; 75 (2) : 185-94; y Cheung CY, et al., Induction of proinflammatory cytokines in human macrophages by influenza A (H5N1) viruses: a mechanism for the unusual severity of human disease? Lancet. 2002 Dic 7; 360 (9348) : 1831-7.

En otra modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente o fragmentos de los mismos, son útiles como una ayuda al insomnio.

Administración En una modalidad de la invención, los anticuerpos anti- IL-6 descritos en la presente o fragmentos de unión a IL-6 de los mismos, así como combinaciones de dichos fragmentos de anticuerpo, se administran a un sujeto en una concentración de entre alrededor de 0.1 y 20 mg/kg, tal como alrededor de 0.4 mg/kg, alrededor de 0.8 mg/kg, alrededor de 1.6 mg/kg, o alrededor de 4 mg/kg, del peso corporal del sujeto receptor. En una modalidad preferida de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente o fragmentos de unión a IL-6 de los mismos, asi como combinaciones de dichos fragmentos de anticuerpo, se administran a un sujeto en una concentración de alrededor de 0.4 mg/kg del peso corporal del sujeto receptor. En una modalidad preferida de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente o fragmentos de unión a IL-6 de los mismos, asi como combinaciones de dichos fragmentos de anticuerpo, se administran a un sujeto receptor con una frecuencia de una vez cada veintiséis semanas o menos, tal como una vez cada dieciséis semanas o menos, una vez cada ocho semanas o menos, o una vez cada cuatro semanas o menos. En otra modalidad preferida de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente o fragmentos de unión a IL-6 de los mismos, asi como combinaciones de los mismos, se administran a un sujeto receptor con una frecuencia de como máximo una vez durante un periodo de aproximadamente una semana, como ser, como máximo una vez durante un periodo de aproximadamente dos semanas como ser, como máximo una vez durante un periodo de aproximadamente cuatro semanas, como ser, como máximo una vez durante un periodo de aproximadamente ocho semanas, como ser, como máximo una vez durante un periodo de aproximadamente doce semanas, como ser, como máximo una vez durante un periodo de aproximadamente dieciséis semanas, como ser, como máximo una vez durante un periodo de aproximadamente veinticuatro semanas.

Se entiende que la dosis efectiva dependerá de los atributos del sujeto receptor, tales como, por ejemplo, edad, sexo, estado de gravidez, índice de masa corporal, masa corporal magra, afección o afecciones para las que se proporciona la composición, otras afecciones médicas del sujeto receptor que puedan afectar el metabolismo o la tolerancia de la composición, niveles de IL-6 en el sujeto receptor y resistencia a la composición (por ejemplo, que surgen cuando el paciente desarrolla anticuerpos contra la composición) . Un experto en la técnica será capaz de determinar una dosis y una frecuencia de administración efectivas a través de experimentos de rutina, por ejemplo, guiándose por las descripciones de la presente y las enseñanzas en Goodman, L. S., Gilman, A., Brunton, L. L., Lazo, J. S., & Parker, K. L. (2006). Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics. Nueva York: McGraw-Hill; Howland, R. D., ycek, M. J., Harvey, R. A., Champe, P. C, & Mycek, M. J. (2006). Pharmacology. Lippincott's illustrated reviews. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins; and Golan, D. E. (2008) . Principies of pharmacology: the pathophysiologic basis of drug therapy. Philadelphia, Pa., [etc.]: Lippincott Williams & Wilkins.

En otra modalidad de la invención, los anticuerpos anti- IL-6 descritos en la presente o los fragmentos de unión a IL-6 de los mismos, así como combinaciones de dichos fragmentos de anticuerpo, se administran a un sujeto como una formulación farmacéutica.

Una "composición farmacéutica" se refiere a una composición química o biológica adecuada para administración a un mamífero. Tales composiciones pueden formularse específicamente para la administración mediante una o mas vías, que incluyen pero no se limitan a bucal, epicutánea, epidural, inhalación, intraarterial, intracardíaca, intracerebroventricular, intradermal, intramuscular, intranasal, intraoculár, ' intraperitoneal, intraespinal, intratecal, intravenosa, oral, parenteral, rectal mediante un enema o supositorio, subcutánea, subdermal, sublingual, transdermal y transmucosal . Además, la administración puede ocurrir por medios de inyección, polvo, líquido, gel, gotas u otros medios de administración.

En una modalidad de la invención, los anticuerpos anti-IL-6 descritos en la presente, o los fragmentos de unión a IL-6 de los mismos, así como combinaciones de dichos fragmentos de anticuerpo, se pueden administrar opcionalmente en combinación con uno o más agentes activos. Dichos agentes activos incluyen agentes analgésicos, antipiréticos, antiinflamatorios, antibióticos, antivirales y anticitocina . Los agentes activos incluyen agonistas, antagonistas y moduladores de TNF-a, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-18, IFN- , IFN-?, BAFF, CXCL13, IP-10, VEGF, EPO, EGF, HRG, factor de crecimiento de hepatocitos (HGF) , Hepcidina, que incluyen anticuerpos reactivos contra cualquiera de los anteriores y anticuerpos reactivos contra cualquiera de sus receptores. Los agentes activos también incluyen ácidos 2-Arilpropiónicos , Aceclofenac, Acemetacina, ácido Acetilsalicilico (Aspirina) , Alclofenac, Alminoprofeno, Amoxiprina, Ampirona, ácidos Arilalcanoicos, Azapropazona, Benorilato/Benorilato, Benoxaprofeno, Bromfenac, Carprofeno, Celecoxib, salicilato de magnesio y colina, Clofezona, inhibidores de COX-2, Dexibuprofeno, Dexketoprofeno, Diclofenac, Diflunisal, Droxicam, Etenzamida, Etodolac, Etoricoxib, Faislamina, ácidos fenámicos, Fenbufeno, Fenoprofeno, ácido Flufenámico, Flunoxaprofeno, Flurbiprofeno, Ibuprofeno, Ibuproxam, Indometacina, Indoprofeno, Kebuzona, etoprofeno, etorolac, Lornoxicam, Loxoprofeno, Lumiracoxib, salicilato de Magnesio, ácido Meclofenámico, ácido Mefenámico, Meloxicam, Metamizol, salicilato de Metilo, Mofebutazona, Nabumetona, Naproxeno, ácidos N-Arilantranilicos, Oxametacina, Oxaprozin, Oxicams, Oxifenbutazona, Parecoxib, Fenazona, Fenilbutazona, Fenilbutazona, Piroxicam, Pirprofeno, profenos, Proglumetacina, derivados de Pirazolidina, Rofecoxib, salicilato de Salicilo, Salicilamida, Salicilatos, Sulfinpirazona, Sulindac, Suprofeno, Tenoxicam, ácido Tiaprófenico, ácido Tolfenámico, Tolmetin y Valdecoxib. Los antibióticos incluyen Amikacina, Aminoglicosidas, Amoxicilina, Ampicilina, Ansamicinas, Arsfenamina, Azitromicina, Azlocilina, Aztreonam, Bacitracina, Carbacefem, Carbapenems, Carbenicilina, Cefaclor, Cefadroxil, Cefalexina, Cefalotina, Cefalotina, Cefamandol, Cefazolina, Cefdinir, Cefditoren, Cefepima, Cefixima, Cefoperazona, Cefotaxima, Cefoxitin, Cefpodoxima, Cefprozil, Ceftazidima, Ceftibuten, Ceftizoxima, Ceftobiprol, Ceftriaxona, Cefuroxima, . Cefalosporinsa, Cloramfenicol, Cilastatina, Ciprofloxacina, Claritromicina, Clindamicina, Cloxacilina, Colistina, Co-trimoxazol, Dalfopristina, Demeclociclina, Dicloxacilina, Diritromicina, Doripenem, Doxiciclina, Enoxacina, Ertapenem, Eritromicina, Etambutol, Flucloxacilina, Fosfomicina, Furazolidona, ácido Fusidico, Gatifloxacina, Geldanamicina, Gentamicina, Glicopéptidos, Herbimicina, Imipenem, Isoniazida, Kanamicina, Levofloxacina, Lincomicina, Linezolida, Lomefloxacina, Loracarbef, Macrolidas, Mafenida, Meropenem, Meticilina, etronidazol, Mezlocilina, Minociclina, Monobactams, Moxifloxacina, Mupirocina, Nafcilina, Neomicina, Netilmicina, Nitrofurantoina, Norfloxacina, Ofloxacina, Oxacilina, Oxitetraciclina, Paromomicina, Penicilina, Penicilinas, Piperacilina, Platensimicina, Polimixina B, Polipéptidos, Prontosil, Pirazinamida, Quinolonas, Quinupristina, Rifampicina, Rifampina, Roxitromicina, Espectinomicina, Estreptomicina, Sulfacetamida, Sulfametizol, Sulfanilimida, Sulfasalazina, Sulfisoxazol, Sulfonamidas, Teicoplanina, Telitromicina, Tetraciclina, Tetraciclinas, Ticarcilina, Tinidazol, Tobramicina, Trimetoprim, Trimetoprim-Sulfametoxazol, Troleandomicina, Trovafloxacina y Vancomicina. Los agentes activos también incluyen Aldosterona, Beclometasona, Betametasona, Corticosteroides, Cortisol, acetato de Cortisona, acetato de Desoxicorticosterona, Dexametasona, acetato de Fludrocortisona, Glucocorticoides, Hidrocortisona, Metilprednisolona, Prednisolona, Prednisona, Esteroides y Triamcinolona. Los agentes antivirales incluyen abacavir, aciclovir, aciclovir, adefovir, amantadina, amprenavir, una combinación de dosis fija antiretroviral, un potenciador sinérgico antiretroviral, arbidol, atazanavir, atripla, brivudina, cidofovir, combivir, darunavir, delavirdina, didanosina, docosanol, edoxudina, efavirenz, emtricitabina, enfuvirtida, entecavir, inhibidores de entrada, famciclovir, fomivirsen, fosamprenavir, foscarnet, fosfonet, inhibidor de fusión, ganciclovir, gardasil, ibacitabina, idoxuridina, imiquimod, imunovir, indinavir, inosina, inhibidor de integrasa, interferón, interferón tipo I, interferón tipo II, interferón tipo III, lamivudina, lopinavir, lovirida, maraviroc, MK-0518, moroxidina, nelfinavir, nevirapina, nexavir, análogos de nucleósido, oseltamivir, penciclovir, peramivir, pleconaril, podofilotoxina, inhibidor de proteasa, inhibidor de transcriptasa inversa, ribavirina, rimantadina, ritonavir, saquinavir, stavudina, tenofovir, tenofovir disoproxilo, tipranavir, trifluridina, trizivir, tromantadina, truvada, valaciclovir, valganciclovir, vicriviroc, vidarabina, viramidina, zalcitabina, zanamivir y zidovudina. Se contempla también cualquier combinación adecuada de estos agentes activos.

Un "excipiente farmacéutico" o un "excipiente farmacéuticamente aceptable" es un portador, normalmente un liquido, donde se formula un agente terapéutico activo. En una modalidad de la invención, el agente terapéuticamente activo es un anticuerpo humanizado descrito en la presente, o uno o más fragmentos del mismo. El excipiente en general no proporciona ninguna actividad farmacológica a la formulación aunque puede proporcionar estabilidad química y/o biológica y características de liberación. Se pueden encontrar ejemplos de formulaciones, por ejemplo, en Remington' s Pharmaceutical Sciences, 19* Ed., Grennaro, A., Ed., 1995, que se incorpora en la presente a modo de referencia.

Tal como se usa en la presente un "portador farmacéuticamente aceptable" o un "excipiente" incluye cualesquiera y todos los solventes, medios de dispersión, revestimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardantes de la absorción que son fisiológicamente compatibles. En una modalidad, el portador es adecuado para administración parenteral. De manera alternativa, el portador puede ser adecuado para administración intravenosa, intraperitoneal, intramuscular o sublingual. Los portadores farmacéuticamente aceptables incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles y polvos estériles para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables estériles. El uso de dichos medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas se conocen bien en la técnica. Salvo en la medida en que cualquier medio o agente convencional sea incompatible con el compuesto activo, se contempla el uso del mismo en las composiciones farmacéuticas de la invención. También se pueden incorporar compuestos activos complementarios a las composiciones.

En una modalidad de la invención, estos pueden usarse para administrar anticuerpos de la invención de forma intravenosa, incluido Abl, para indicaciones en cáncer; la formulación de administración comprende, o de manera alternativa consiste en, alrededor de 10.5 mg/mL de anticuerpo, 25 mM de base de histidina, ácido fosfórico c.s.p. a pH 6 y 250 mM de sorbitol.

En otra modalidad de la invención, estos pueden usarse para administrar anticuerpos de la invención de forma intravenosa, incluido Abl, para indicaciones en cáncer; la formulación de administración comprende, o de manera alternativa consiste en, alrededor de 10.5 mg/mL de anticuerpo, 12.5 mM de base de histidina, 12.5 mM de clorhidrato de histidina (o 25 mM de base de histidina y ácido clorhídrico c.s.p. a pH 6), 250 mM de sorbitol y 0.015% (p/p) de polisorbato 80.

En una modalidad de la invención que puede usarse para administrar anticuerpos de la invención de forma subcutánea, incluido Abl, para indicaciones en artritis reumatoide, la formulación de administración comprende, o de manera alternativa consiste en, alrededor de 50 o 100 mg/mL de anticuerpo, alrededor de 5 mM de base de histidina, alrededor de 5 mM HCl de histidina para alcanzar un pH final de 6, 250 mM de sorbitol y 0.015% (p/p) de polisorbato 80.

En otra modalidad de la invención que puede usarse para administrar anticuerpos de la invención de forma subcutánea, incluido Abl, para indicaciones en artritis reumatoide, la formulación de administración comprende, o de manera alternativa consiste en, alrededor de 20 o 100 mg/mL de anticuerpo, alrededor de 5 mM de base de histidina, alrededor de 5 mMde HCl de histidina para alcanzar un pH final de 6, 250 a 280 mM de sorbitol (o sorbitol en combinación con sucrosa) y 0.015% (p/p) de polisorbato 80, dicha formulación posee un espacio libre de nitrógeno en los recipientes de envío.

Las composiciones farmacéuticas típicamente deben ser estériles y estables en condiciones de fabricación y almacenamiento. La invención contempla que la composición farmacéutica está presente en una forma liofilizada. La composición puede formularse como solución, microemulsión, liposoma u otra estructura ordenada adecuada para altas concentraciones del fármaco. El portador puede ser un solvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol liquido) y mezclas adecuadas de los mismos. La invención contempla adicionalmente la inclusión de un estabilizador en la composición farmacéutica.

En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tal como manitol, sorbitol o cloruro de sodio en la composición. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede ocasionarse mediante la inclusión en la composición de un agente que retarda la absorción, por ejemplo, sales de monoestearato y gelatina. Además, el polipéptido alcalino puede formularse en una formulación de liberación en el tiempo, por ejemplo en una composición que incluye un polímero de liberación lenta. Los compuestos activos pueden prepararse con portadores que protegerán el compuesto de la liberación rápida, tal como una formulación de liberación controlada que incluye implantes y sistemas microencapsulados de liberación. Pueden usarse polímeros biodegradables y biocompatibles, tal como acetato de etilenvinilo, polianhídridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres, ácido poliláctico y copolímeros polilácticos y poliglicólicos (PLG) . Muchos métodos para la preparación de dichas formulaciones son conocidos por aquellos expertos en la técnica.

Para cada una de las modalidades descritas, los compuestos pueden administrarse por una variedad de formas de dosificación. Se contempla toda forma de dosis biológicamente aceptable conocida por expertos en la técnica y combinaciones de la misma. Los ejemplos de dichas formas de dosificación incluyen pero no se limitan a, polvos reconstituibles, elixires, líquidos, soluciones, suspensiones, emulsiones, polvos, gránulos, partículas, micropartículas, gránulos dispersables, sellos, inhalantes, inhalantes en aerosol, parches, inhalantes en partículas, implantes, implantes de depósito, inyectables (que incluyen subcutáneos, intramusculares, intravenosos y intradermales) , infusiones y combinaciones de los mismos.

La descripción anterior de varias modalidades ilustradas de la invención no pretende ser taxativa ni limitar la invención a la forma concreta descrita. Mientras que modalidades específicas y ejemplos de la invención se describen en la presente con fines ilustrativos, es posible realizar varias modificaciones equivalentes dentro del alcance de la invención, como lo reconocerán aquellos expertos en la técnica correspondiente. Las enseñanzas de la invención proporcionadas en la presente pueden aplicarse con otros fines distintos de los ejemplos descritos anteriormente.

Estos y otros cambios se pueden realizar a la invención en vista de la descripción detallada antes mencionada. En general, en las reivindicaciones a continuación, los términos usados no deberán entenderse como que limitan la invención a las modalidades especificas descritas en la memoria descriptiva y en las reivindicaciones. Por consiguiente, su descripción no limita la invención pero en cambio el alcance de la invención será determinado totalmente por las reivindicaciones a continuación.

La invención puede ponerse en práctica en formas distintas de aquellas descritas particularmente en la descripción anterior y en los ejemplos. Son posibles numerosas modificaciones y variaciones de la invención en vista de las enseñanzas anteriores y por lo tanto se encuentran dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas.

Ciertas enseñanzas relacionadas con los métodos para obtener una población clonal de linfocitos B específicos para antígeno fueron descritos en la solicitud de patente provisional estadounidense N° 60/801,412 presentada el 19 de mayo de 2006, cuya descripción se incorpora en su totalidad a la presente como referencia.

Ciertas enseñanzas relacionadas con la humanización de anticuerpos monoclonales derivados del conejo y modificaciones preferidas de secuencias para mantener la afinidad de unión al antígeno fueron descritas en la solicitud internacional N° 12/124,723, correspondiente al N° de expediente del representante 67858.704001, titulado "Novel Rabbit Antibody Humanization Method and Humanized Rabbit Antibodies" [Nuevo método de humanización de anticuerpo de conejo y anticuerpos de conejo humanizados], presentada el 21 de mayo, 2008, cuya descripción se incorpora en su totalidad a la presente como referencia.

Ciertas enseñanzas relacionadas con la producción de anticuerpos o fragmentos de los mismos usando levadura capaz de apareamiento y métodos correspondientes fueron descritos en la solicitud de patente estadounidense N° 11/429,053 presentada el 8 de mayo de 2006, (publicación de solicitud de patente estadounidense N° US2006/0270045) , cuya descripción se incorpora en su totalidad a la presente como referencia.

Ciertas enseñanzas relacionadas con anticuerpos anti-IL-6, métodos para la producción de anticuerpos o fragmentos de estos usando levadura capaz de apareamiento y métodos correspondientes fueron descritos en la solicitud de patente provisional estadounidense N° 60/924,550 presentada el 21 de mayo de 2007, cuya descripción se incorpora en su totalidad a la presente como referencia.

Ciertas enseñanzas relacionadas con anticuerpos anti-IL-6 y métodos para el uso de esos anticuerpos o fragmentos de los mismos para tratar la caquexia, debilidad, fatiga y/o fiebre fueron descritos en la solicitud de patente provisional estadounidense N° 61/117,839 presentada el 25 de noviembre de 2008, cuya descripción se incorpora en su totalidad a la presente como referencia.

Ciertos polinucleótidos y polipéptidos de anticuerpos anti-IL-6 se describen en el listado de secuencias que acompaña esta presentación de solicitud de patente y su descripción se incorpora en su totalidad a la presente como referencia.

La totalidad de la descripción de cada documento citado (incluyendo patentes, solicitudes de patente, artículos de periódico, resúmenes, manuales, libros u otras descripciones) en Antecedentes de la Invención, Descripción Detallada y Ejemplos, se incorpora en la presente en su totalidad como referencia .

Los siguientes ejemplos se proponen para proporcionar a los expertos en la técnica una descripción completa de cómo hacer y usar la invención en cuestión y no se pretende que limiten el alcance de lo que se entiende por la invención. Se han realizado esfuerzos para asegurar la exactitud con respecto a las cifras usadas (por ej . , cantidades, temperaturas, concentraciones, etc.) pero se deberán tener en cuenta ciertos errores y desviaciones experimentales. A menos que se indique lo contrario, las partes son partes en peso, el peso molecular es peso molecular promedio, la temperatura se da en grados centígrados y la presión es de o cercana a la atmosférica.

EJEMPLOS Ejemplo 1 Producción de cultivos enriquecidos de anticuerpos de linfocitos B específicos para antígeno Los paneles de anticuerpos se obtienen inmunizando animales hospedadores de anticuerpos tradicionales para explotar la respuesta inmunitaria nativa a un antigeno objetivo de interés. Típicamente, el hospedador usado para la inmunización es un conejo u otro hospedador que produce anticuerpos usando un proceso de maduración similar y proporciona una población de linfocitos B específicos para antígeno produciendo anticuerpos de diversidad comparable, por ej . diversidad epitópica. La inmunización de antígeno inicial puede llevarse a cabo usando un adyuvante de Freund (CFA) y los refuerzos posteriores se pueden efectuar con un adyuvante incompleto. Alrededor de 50-60 días después de la inmunización, preferentemente el día 55, se prueban las titulaciones de anticuerpos y se inicia el proceso de Selección de Anticuerpos (ABS) si se establecen titulaciones apropiadas. Los dos criterios clave para la iniciación de ABS son el reconocimiento de antígenos potentes y la actividad modificadora de funciones en el suero policlonal.

En el momento en que se establecen titulaciones de anticuerpos positivas, se sacrifican animales y se aislan fuentes de linfocitos B. Estas fuentes incluyen: el bazo, nodulos linfáticos, médula espinal y células mononucleares de sangre periférica (PBMC) . Se generan suspensiones unicelulares y las suspensiones celulares se lavan para hacerlas compatibles para almacenamientos a largo plazo a baja temperatura. Luego las células se congelan típicamente.

Para iniciar el proceso de identificación de anticuerpos, una pequeña fracción de las suspensiones celulares congeladas se descongela, lava y se coloca en un medio de cultivo tisular. Estas suspensiones luego se mezclan con una forma biotinilada del antígeno usada para generar la respuesta inmunitaria del animal y se recuperan células específicas para antígeno usando los métodos de selección de células con cuentas magnéticas de Miltenyi. Se lleva a cabo un enriquecimiento específico usando cuentas de estreptavidina . La población enriquecida se recupera y se desarrolla en la siguiente fase de aislamiento de linfocitos B específicos.

Ejemplo 2 Producción de cultivos clónales que contienen linfocitos B específicos para antigeno Los linfocitos B enriquecidos producidos de acuerdo con el Ejemplo 1 luego se colocan en placas a diversas densidades celulares por pocilio en una placa de microtitulación de 96 pocilios. En general esto es a 50, 100, 250 o 500 células por pocilio con 10 placas por grupo. El medio se complementa con un medio acondicionado de 4% de linfocitos T activados de conejo junto con 50K de fibroblastos EL4B irradiados y congelados. Estos cultivos permanecen inalterados durante 5-7 días, en ese momento se recoge el anticuerpo secretado que contiene sobrenadante y se evalúa para determinar propiedades objetivo en un marco de ensayo separado. El sobrenadante remanente se deja intacto y la placa se congela a -70 °C. En estas condiciones, el proceso de cultivo resulta típicamente en pocilios que contienen una población celular mixta que comprende una población clonal de linfocitos B específicos para antígeno, esto es, un solo pocilio solo contendrá un único anticuerpo monoclonal específico para el antígeno deseado.

Ejemplo 3 Análisis de los sobrenadantes del anticuerpo para el anticuerpo monoclonal de especificidad deseada y/o propiedades funcionales Los sobrenadantes que contienen anticuerpos que proceden del pocilio que contiene una población de linfocitos B específicos para antígeno producida de acuerdo con el Ejemplo 2, se analizan inicialmente para reconocer antígenos usando métodos ELISA. Esto incluye la inmovilización selectiva de antígenos (por ej . , captura de antígeno biotinilado por placas revestidas por estreptavidina) , revestimiento de placa para antígeno no específico o de manera alternativa, a través de una estrategia de concentración de antígeno (por ej . , captura de antígeno selectivo seguido de la adición de un compañero de unión para generar un complejo heteromérico proteína-antígeno) .

Luego los sobrenadantes de pocilio positivo para antigeno opcionalmente se someten a prueba en un ensayo de modificación de función que depende estrictamente del ligando. Un ejemplo de estos es un ensayo de interacción proteina-proteina in vitro que recrea la interacción natural del ligando del antigeno con la proteina receptora recombinante . De manera alternativa, se utiliza una respuesta basada en la célula que depende del ligando y se monitorea fácilmente (por ej . , respuesta de proliferación) . El sobrenadante que muestre un reconocimiento significativo y potencia de antigeno se considera un pocilio positivo. Las células que proceden del pocilio positivo original luego efectúan una transición a la fase de recuperación del anticuerpo.

Ejemplo 4 Recuperación de un linfocito B simple que produce anticuerpos de especificidad del antigeno deseada Las células se aislan de un pocilio que contiene una población clonal de linfocitos B específicos para antígeno (producidos de acuerdo con el Ejemplo 2 o 3) que secretan una secuencia de anticuerpo simple. Las células aisladas luego se ensayan para aislar una célula simple que secreta anticuerpos. Las cuentas de estreptavidina Dynal se recubren con antigenos objetivo biotinilados en un medio tamponado para preparar microcuentas que contienen antígenos compatibles con viabilidad celular. Luego, las cuentas cargadas de antigeno, células que producen anticuerpos a partir de un pocilio positivo y un anticuerpo IgG H&L anti-hospedador marcado con isotiocianato de fluoresceina (FITC) (tal como se observa, el hospedador puede ser cualquier hospedador mamífero, por ej . , conejo, ratón, rata, etc.) se incuban juntos a 37 °C. Esta mezcla luego se coloca nuevamente en una pipeta en alícuotas en un portaobjetos de vidrio de manera tal que cada alícuota tiene como promedio un único linfocito B que produce anticuerpos. Las células específicas para antígeno y que secretan anticuerpos luego se detectan a través de microscopía de fluorescencia. El anticuerpo secretado se concentra localmente en cuentas adyacentes debido al antígeno unido y proporciona información de localización basándose en la señal fluorescente fuerte. Las células que secretan anticuerpos se identifican mediante detección de FITC de complejos anticuerpo-antígeno formados adyacente a la célula secretora. La célula simple encontrada en el centro de este complejo luego se recupera usando un micromanipulador . La célula se congela instantáneamente en un tubo PCR de Eppendorf para almacenamiento a -80 °C hasta que se inicie la recuperación de la secuencia de anticuerpos.

Ejemplo 5 Aislamiento de secuencias de anticuerpos a partir de linfocitos B específicos para antigeno Las secuencias de anticuerpos se recuperan usando un método combinado basado en RT-PCR a partir de un linfocito B simple aislado de acuerdo con el Ejemplo 4 o un linfocito B especifico antigénico aislado a partir de la población clonal de linfocitos B obtenidos de acuerdo con el Ejemplo 2. Se diseñan cebadores para hibridarse en regiones conservadas y constantes de los genes de inmunoglobulina objetivo (pesada y ligera), tal como secuencias de inmunoglobulina de conejo y se usa un paso de recuperación de PCR anidado en dos pasos. Se analizan amplicones de cada pocilio para determinar la integridad de recuperación y tamaño. Los fragmentos resultantes luego se digieren con AluI para identificar genéticamente la clonación de la secuencia. Las secuencias idénticas presentan un patrón de fragmentación común en su análisis electroforético . Significativamente, este patrón común de fragmentación que prueba la clonación de células se observa en general aun en los pocilios originalmente colocados en placas hasta 1000 células/pocilio. Los fragmentos de amplicón original de cadena pesada y ligera se digieren por enzima de restricción con HindIII y Xhol o HindIII y BsiWI para preparar las piezas respectivas de ADN para clonación. Las digestiones resultantes luego se ligan en un vector de expresión y se transforman en bacterias para la propagación y producción de plásmidos. Se seleccionan colonias para la caracterización de secuencias.

Ejemplo 6 Producción recombinan e de anticuerpo monoclonal de especificidad del antigeno deseada y/o propiedades funcionales Se establecen las secuencias de anticuerpo de longitud completa correcta para cada pocilio que contiene un anticuerpo monoclonal simple y se prepara una miniprep de ADN usando metodología de fase sólida de Qiagen. El ADN luego se usa para transfectar células de mamíferos para producir anticuerpos recombinantes de longitud completa. Se prueba el producto de anticuerpo bruto para determinar el reconocimiento de antígeno y las propiedades funcionales para , confirmar que las características originales se encuentran en la proteína recombinante de anticuerpo. Cuando fuera apropiado, se completan las transfecciones mamíferas transitorias a gran escala y se purifica el anticuerpo a través de cromatografía de afinidad de Proteína A. Se evalúa el Kd usando métodos estándar (ej. Biacore™) así como IC50 en un ensayo de potencia.

Ejemplo 7 Preparación de anticuerpos de unión a IL-6 humana Usando el protocolo de selección de anticuerpos descrito en la presente, se puede generar un panel extenso de anticuerpos. Los anticuerpos poseen alta afinidad para IL-6 (pM Kd de simple a doble dígito) y demuestran un potente antagonismo de IL-6 en múltiples sistemas de análisis basados en células (T1165 y HepG2) . Además, la recolección de anticuerpos presenta distintos modos de antagonismo hacia los procesos conducidos por IL-6.

Estrategia de inmunización Se inmunizaron conejos con huIL-6 (R&R) . La inmunización consistió en una primera inyección subcutánea (se) de 100 ]iq en un adyuvante de Freund completo (CFA) (Sigma) seguido de dos refuerzos, con dos semanas de separación, de 50 pg cada uno en adyuvante de Freund incompleto (IFA) (Sigma) . Los animales se desangraron el día 55 y se determinaron las titulaciones de suero mediante ELISA (reconocimiento de antigeno) y mediante ensayo de proliferación no radiactivo (Promega) usando la linea celular T1165.

Evaluación de la titulación en la selección de anticuerpos El reconocimiento del antigeno se determinó mediante el revestimiento de placas Immulon 4 (Thermo) con 1 pg/ml de huIL-6 (50 µ?/pocillo) en solución salina tamponada de fosfato (PBS, Hyclone) durante la noche a 4 °C. El día del ensayo, las placas se lavaron 3 veces con PBS /Tween 20 (tabletas PBST, Calbiochem) . Las placas luego se bloquearon con 200 µ?/pocillo de 0.5% de gelatina de piel de pescado (FSG, Sigma) en PBS durante 30 minutos a 37 °C. La solución de bloqueo se eliminó y las placas se transfirieron. Las muestras de suero se realizaron (sangrados y presangrados) en una dilución inicial de 1:100 (todas las diluciones se realizaron en FSG 50 µ?/pocillo) seguida de diluciones 1:10 a través de la placa (la columna 12 se dejó en blanco para control de fondo) . Las placas se incubaron durante 30 minutos a 37 °C. Las placas se lavaron 3 veces con PBS/Tween 20. Se agregó FC-HRP cabra anti-conejo (Pierce) diluido 1:5000 a todos los pocilios (50 µ?/pocillo) , y las placas se incubaron durante 30 minutos a 37 °C. Las placas se lavaron tal como se describe anteriormente. 50 µ?/pocillo de detención TMB-Stable (Fitzgerald Industries) se agregó a las placas y se dejó desarrollar el color, en general durante 3 a 5 minutos. La reacción de desarrollo se detuvo con 50 µ?/pocillo 0.5 M de HC1. Las placas se leyeron a 450 nm. La densidad óptica (OD) contra la dilución se gráfico usando un software Graph Pad Prizm y se determinaron las titulaciones.

Evaluación de la titulación funcional La actividad funcional de la muestras se determinó mediante un ensayo de proliferación T1165. Las células T1165 se mantuvieron de manera rutinaria en un medio RPMI modificado (Hyclone) complementado con Hepes, piruvato de sodio, bicarbonato de sodio, L-glutamina, glucosa alta, penicilina/estreptomicina, 10% de suero bovino fetal inactivado por calor (FBS) (todos complementos de Hyclone), 2-mercaptoetanol (Sigma) y 10 ng/ml de huIL-6 (R&D) El día del ensayo, la viabilidad celular se determinó mediante azul de tripano (Invitrogen) y las células se sembraron a una densidad fija de 20,000 células/pocilio. Antes del sembrado, las células se lavaron dos veces en el medio descrito anteriormente sin IL- 6 humana (centrifugando ¦ a 13000 rpm durante 5 minutos y desechando el sobrenadante) . Luego del último lavado, las células se volvieron a suspender en el mismo medio usado para el lavado en un volumen equivalente a 50 µ?/pocillo. Las células se separaron a temperatura ambiente.

En una placa de fondo redondo de 96 pocilios (Costar) , se agregaron muestras de suero comenzando en 1:100, seguido de una dilución de 1:10 a través de la placa (columnas 2 a 10) a 30 µ?/pocillo en replicas de 5 (filas B a F: dilución llevada a cabo en el medio descrito anteriormente sin huIL-6) . La columna 11 solo sirvió como medio para el control de IL-6. Se agregaron a todos los pocilios 30 µ?/pocillo de huIL-6 a una concentración de 4x de la CE50 final (concentración previamente determinada) (la huIL-6 se diluyó en el medio descrito anteriormente) . Los pocilios se incubaron durante 1 hora a 37 °C para permitir que ocurra la unión al anticuerpo. Luego de 1 hora, se transfirieron a una placa de fondo plano de 96 pocilios (Costar) 50 µ?/pocillo de complejo anticuerpo-antigeno (Ab-Ag) siguiendo el formato de mapa de la placa dispuesto en la placa de fondo redondo. En la fila G, se agregaron 50 µ?/pocillo de medio a todos los pocilios (columnas 2 a 11) para control de fondo. Se agregaron 50 µ?/pocillo de la suspensión celular separada a todos los pocilios (columnas 2 a 11, filas B a G) . En las columnas 1 y 12 y en las filas A y H, se agregaron 200 µ?/pocillo de medio para prevenir la evaporación de pocilios de prueba y para minimizar el efecto borde. Las placas se incubaron durante 72 h a 37 °C en 4% de C02. A las 72 h, se agregaron 20 µ?/pocillo de reactivos CellTiter96 (Promega) a todos los pocilios de prueba de acuerdo con el protocolo del fabricante y las placas se incubaron durante 2 h a 37 °C. A las 2 h, las placas se mezclaron delicadamente en un agitador orbital para dispersar las células y permitir la homogeneidad en los pocilios de prueba. Las placas se leyeron a una longitud de onda de 490 nm. Se gráfico la densidad óptica (OD) versus la dilución usando un software Graph Pad Prizm y se determinaron las titulaciones funcionales. Se llevó a cabo una placa de control de ensayo positiva tal como se describió anteriormente usando MAB2061 (R&D Systems) en una concentración inicial de 1 µg/ml (concentración final) seguida de diluciones 1:3 a través de la placa.

Cultivo de tejidos Una vez que se establecieron las titulaciones aceptables, se sacrificó el o los conejos. El bazo, los nodulos linfáticos y la sangre se cultivaron y procesaron de la siguiente manera: El bazo y los nodulos linfáticos se procesaron en una suspensión unicelular mediante disociación del tejido y apertura de un camino mediante una malla metálica estéril a 70 µp? (Fisher) con un émbolo de una jeringa de 20 ce. Las células se recogieron en el medio RPMI modificado descrito anteriormente sin huIL-6 pero con baja glucosa. Las células se lavaron dos veces mediante centrifugación. Luego del último lavado, la densidad celular se determinó mediante azul de tripano. Las células se centrifugaron a 1500 rpm durante 10 minutos; se descartó el sobrenadante. Las células se volvieron a suspender en el volumen apropiado de 10% dimetilsulfóxido (D SO, Sigma) en FBS (Hyclone) y se dispensaron a 1 ml/recipiente . Los recipientes luego se almacenaron a -70 °C durante 24 h antes de colocarlos en un tanque de nitrógeno liquido (LN2) para su almacenamiento a largo plazo.

Las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) se aislaron mezclando sangre con partes iguales del medio de baja glucosa descrito anteriormente sin FBS. 35 mi de la mezcla de sangre se colocó en capas cuidadosamente sobre 8 mi de Lympholyte Rabbit (Cedarlane) en un tubo cónico de 45 mi (Corning) y se centrifugó por 30 minutos a 2500 rpm a temperatura ambiente sin detenerse. Luego de la centrifugación, las capas PBMC se eliminaron cuidadosamente usando una pipeta de vidrio Pasteur (VWR) , se combinaron y colocaran en un recipiente limpio de 50 mi. Las células se lavaron dos veces con el medio modificado descrito anteriormente mediante centrifugación a 1500 rpm durante 10 minutos a temperatura ambiente y la densidad celular se determinó mediante tinción con azul de tripano. Tras el último lavado, las células se volvieron a suspender en un volumen apropiado de medio de 10% de DMSO/FBS y se congelaron tal como se describió anteriormente .

Cultivo de linfocitos B El dia en que se establece el cultivo de linfocitos B, se descongelaron recipientes de PBMC, esplenocito o nodulos linfáticos para su uso. Los recipientes se eliminaron del tanque LN2 y se colocaron en un baño de agua a 37 °C hasta descongelarse. El contenido de los recipientes se transfirió a un tubo de centrifugado cónico de 15 mi (Corning) y se agregó al tubo suavemente 10 mi de RP I modificado descrito anteriormente. Las células se centrifugaron durante 5 minutos a 1.5K rpm y se eliminó el sobrenadante. Las células se volvieron a suspender en 10 mi de un medio nuevo. La densidad y la viabilidad celular se determinaron mediante azul de tripano. Las células se lavaron nuevamente y se volvieron a suspender en células 1E07/80 µL de medio. Se agregó huIL-6 biotinilado (B huIL-6) a la suspensión celular a la concentración final de 3 g/mL y se incubó durante 30 minutos a 4°C. Se eliminó B huIL-6 no unido con dos lavados de 10 mi de fosfato tamponado ( PBF) : Ca/PBS libre de Mg (Hyclone) , 2 mM de ácido etilendiamina tetraacético (EDTA) , 0.5% de albúmina de suero bovino (BSA) (Sigma-libre de biotina) . Luego del segundo lavado, las células se volvieron a suspender en células 1E07/80 µ? de PBF. Se agregó 20 µ? de cuentas MACS® de estreptavidina (Milteni) /células 10E7 a la suspensión celular. Las células se incubaron a 4 °C durante 15 minutos. Las células se lavaron una vez con 2 mi de PBF/células 10E7. Luego de lavarse, las células se volvieron a suspender en células 1E08/500 µ? de PBF y se separaron. Se prelavó una columna MACS® MS (Milteni) con 500 mi de PBF en un mecano magnético (Milteni) . La suspensión celular se aplicó a la columna a través de un prefiltro y se recogió una fracción sin unir. La columna se lavó con 1.5 mi de tampón PBF. La columna se eliminó del mecano magnético y se colocó en un tubo limpio estéril de 5 mi de polipropileno tipo Falcon. Se agregó 1 mi de tampón PBF a la parte superior de la columna y se recogieron células seleccionadas positivas. El rendimiento y la viabilidad de las fracciones celulares positivas y negativas se determinaron mediante tinción con azul de tripano. La selección positiva proporcionó un promedio de 1% de la concentración celular inicial.

Se estableció un análisis celular piloto para proporcionar información acerca de los niveles de siembra para el cultivo. Se sembraron tres grupos de 10 placas (un total de 30 placas) a 50, 100 y 200 linfocitos B enriquecidos/pocilio. Adicionalmente, cada pocilio contenia 50K células/pocilio de células EL-4.B5 irradiadas (5,000 Rads) y un nivel apropiado de sobrenadante de linfocitos T (que variaba de 1-5% dependiendo de la preparación) en un medio modificado de alta glucosa RPMI a un volumen final de 250 µ?/pocillo. Los cultivos se incubaron durante.5 a 7 días a 37 °C en 4% de C02.

Identificación de linfocitos B que secretan ¦ anticuerpos selectivos Los cultivos se probaron entre los días 5 y 7 para determinar el reconocimiento de antígeno y la actividad funcional .

Análisis de reconocimiento de antígeno El formato ELISA utilizado es como se describió anteriormente, salvo porque se usaron 50 µ? de sobrenadante de los pocilios de cultivos de linfocitos B (BCC) (todas las 30 placas) como fuente del anticuerpo. El medio acondicionado se transfirió a placas revestidas de antígeno. Luego de que se identificaran placas positivas, el sobrenadante se eliminó y se transfirió a una o varias placas principales de 96 pocilios. Luego las placas de cultivo originales se congelaron eliminando todos los sobrenadantes salvo 40 µ?/pocillo y agregando 60 µ?/pocillo de 16% de DMSO en FBS . Las placas se envolvieron en toallas de papel para ralentizar el congelado y se colocaron a -70 °C.

Análisis de actividad funcional Luego se analizaron las placas principales para determinar la actividad funcional en el ensayo de proliferación T1165 como se describió anteriormente, salvo por la fila B que fue medio solo para el control de fondo, la fila C que fue medio + IL-6 para control positivo de proliferación y las filas D-G y columnas 2-11 que fueron los pocilios de BCC (50 µ?/pocillo, puntos únicos) . Se agregaron 40 µ? de IL-6 a todos los pocilios, salvo a la fila de medio, a 2.5 veces la concentración de CE50 determinada para el ensayo. Luego de 1 h de incubación, el complejo Ab/Ag se transfirió a una placa de fondo plano de 96 pocilios tratada con cultivo tisular (TC) . Se agregaron a todos los pocilios 20 µ? de suspensión celular en un medio RPMI modificado sin huIL-6 (T1165 a 20,000 células/pocilio) (100 µ? de volumen final por pocilio) . Se sustrajo el fondo y los valores de OD observados se transformaron en % de inhibición.

Recuperación de linfocitos B Las placas que contenían pocilios de interés se eliminaron a -70 °C y las células de cada pocilio se recuperaron con 5-200 µ? lavados de medio/pocilio. Los lavados se acumularon en un tubo de centrifugado estéril de 1.5 mi y las células se sedimentaron durante 2 minutos a 1500 rpm.

El tubo se invirtió, el giro se repitió y el sobrenadante se retiró cuidadosamente. Las células se volvieron a suspender en 100 µ?/tubo de medio. Se agregaron a la suspensión celular 100 µ? de dynabeads biotiniladas M280 de estreptavidina revestidas con IL-6 (Invitrogen) y 16 µ? de IgG-FITC H&L de cabra anti-conejo diluido 1:100 al medio.

Se eliminaron 20 µ? de una suspensión de célula/cuentas/FITC y se prepararon 5 µ? de gotitas en un portaobjetos de vidrio (Corning) previamente tratado con Sigmacote (Sigma), 35 a 40 gotitas/portaobjetos . Se agregó una barrera impermeable de queroseno (JT Baker) para sumergir las gotitas y se incubó el portaobjetos durante 90 minutos a 37 °C con 4% de CO2 en la oscuridad.

Los linfocitos B específicos que producen anticuerpos pueden identificarse mediante el anillo fluorescente a su alrededor debido a la secreción de anticuerpo, el reconocimiento del antxgeno biotinilado asociado con cuentas y la posterior detección mediante el reactivo de detección fluorescente IgG. Una vez que se identificó una célula de interés, la célula en el centro del anillo fluorescente se recuperó a través de un micromanipulador (Eppendorf) . La única célula que sintetizaba y exportaba el anticuerpo se transfirió a un tubo de microcentrifugado de 250 µL y se colocó en hielo seco. Luego de recuperar todas las células de interés, estas se transfirieron a -70 °C para almacenamiento a largo plazo.

Ejemplo 8 Expresión de células de levadura Genes de anticuerpos : Los genes se clonaron y se interpretó que dirigieron la síntesis de un anticuerpo monoclonal de conejo humanizado quimérico.

Vector de expresión: El vector contiene los siguientes componentes funcionales: 1) un origen de replicación mutante ColEl, que facilita la replicación del vector plásmido en células de la bacteria Escherichia coli, 2) un gen bacteriano Sh ble que confiere resistencia al antibiótico Zeocin™ (fleomicina) y sirve como marcador seleccionable para transformaciones tanto de E. coli como de P. pastoris, 3) un cásete de expresión compuesto por el promotor del gen de gliceraldehido deshidrogenasa {gen GAP) fusionado a las secuencias que codifican la secuencia líder de secreción pre pro del factor de apareamiento alfa de Saccharomyces cerevisiae, seguido de secuencias que codifican una señal transcripcional de terminación del gen de alcohol oxidasa I de P. pastoris (AOX1) . El gen marcador de resistencia Zeocin™ (fleomicina) proporciona un medio de enriquecimiento para cepas que contienen múltiples copias integradas de un vector de expresión en una cepa mediante la selección de transformadores resistentes a altos niveles de Zeocin™ (fleomicina) .

Cepas P. pastoris: Se pueden usar las cepas de P.pastoris metí, lys3, ura3 y adel. Aunque pueden usarse cualesquiera dos conjuntos complementarios de cepas auxotróficas para la construcción y el mantenimiento de cepas diploides, estas dos cepas son especialmente adecuadas para este método por dos razones. Primero, crecen más despacio que las cepas diploides que son el resultado de su apareamiento o fusión. Por tanto, si una pequeña cantidad de células haploides adel o ura3 siguen presentes en un cultivo o surgen a través de la meiosis u otro mecanismo, la cepa diploide debería crecer más en el cultivo.

Segundo, es fácil controlar el estado sexual de estas cepas, dado que las colonias diploides Ade+ que surgen de su apareamiento son de color blanco o crema regular, mientras que las células de cualquier cepa que son mutantes haploides adel formarán una colonia con un color rosado distintivo. Además, cualesquiera cepas que son mutantes haploides ura3 son resistentes al fármaco ácido 5-fluoro-orótico (FOA) y pueden identificarse sensiblemente colocando en placas muestras de un cultivo en un medio mínimo + placas de uracilo con FOA. En estas placas, solo las cepas mutantes ura3 que requieren uracilo (supuestamente haploides) pueden crecer y formar colonias. Por tanto, con cepas progenitoras haploides marcadas con adel y ura3, se puede controlar fácilmente el estado sexual de las cepas diploides resultantes que producen anticuerpos (haploide contra diploide) .

Métodos Construcción de vectores de expresión pGAPZ-alfa para la transcripción de genes de anticuerpo de cadena ligera y pesada. Los fragmentos de cadena ligera y pesada humanizada se clonaron en los vectores de expresión pGAPZ a través de un proceso dirigido a PCR. Las construcciones humanizadas recuperadas se sometieron a amplificación en condiciones de un kit de polimerasa KOD estándar (Novagen) ((1) 94 °C, 2 minutos; (2) 94 °C, 30 segundos (3) 55 °C, 30 segundos; (4) 72 °C, 30 segundos, alternados a través de las etapas 2-4 35 veces; (5) 72 °C 2 minutos) usando los siguientes cebadores (1) AGCGCTTATTCCGCTATCCAGATGACCCAGTC directos de cadena ligera-el sitio Afel tiene subrayado simple. El final de la secuencia de señal HSA se subraya dos veces, seguido de la secuencia de cadena ligera variable madura (no se subraya) ; la CGTACGTTTGATTTCCACCTTG inversa.

Cebador inverso de cadena ligera variable. Se subraya el sitio BsiWI, seguido del complemento inverso para el extremo 3' de la cadena ligera variable. Tras la digestión de la enzima de restricción con Afel y BsiWI se permite la inserción dentro del marco con el vector pGAPZ usando la secuencia líder HAS humana dentro del marco con la región constante de cadena ligera kappa humana para exportar. (2) Se realiza una estrategia similar para la cadena pesada. El cebador directo empleado es AGCGCTTATTCCGAGGTGCAGCTGGTGGAGTC. El sitio Afel tiene subrayado simple. El final de la secuencia de señal HSA se subraya dos veces, seguido de la secuencia para la cadena pesada variable madura (no se subraya) . El cebador de cadena pesada inverso es CTCGAGACGGTGACGAGGGT . Se subraya el sitio Xhol, seguido del complemento inverso para el extremo 3' de la cadena pesada variable. Es£o- -permite la clonación de la cadena pesada dentro del marco con la región IgG-Dl CH1-CH2-CH3 previamente insertada dentro de pGAPZ usando una estrategia de clonación direccional comparable.

Transformación de vectores de expresión en cepas hospedadoras haploides adel ura3, metí y lys3 de P. pastoris. Todos los métodos usados para la transformación de cepas haploides de P. pastoris y la manipulación genética del ciclo sexual de P. pastoris se describen en Higgins, D. R., and Cregg, J. M. , Eds. 1998. Pichia Protocols . Methods in Molecular Biology. Humana Press, Totowa, NJ.

Antes de la transformación, cada vector de expresión se linealiza dentro de las secuencias promotoras GAP con Avrll para dirigir la integración de los vectores en el locus promotor GAP del genoma P. pastoris . Luego las muestras de cada vector se transforman individualmente en cultivos electrocompetentes de cepas adel, ura3f metí y lys3 mediante electroporación y se seleccionan los transformadores exitosos en placas YPD Zeocin™ (fleomicina) por sus resistencia a este antibiótico. Las colonias resultantes se seleccionan, se estrian para colonias simples en placas de YPD Zeocin™ (fleomicina) y luego se examinan para determinar la presencia de un inserto de gen de anticuerpo mediante un ensayo PCR en ADN genómico extraído de cada cepa para el inserto de gen de anticuerpo adecuado y/o mediante la capacidad de cada cepa de sintetizar una cadena de anticuerpo mediante un método de transferencia/inmunotransferencia de colonias (Wung et al. Biotechniques 21 808-812 (1996). Las cepas haploides adel, metí y lys3 que expresan una de las tres construcciones de cadena pesada se recogen para construcciones diploides junto con una cepa haploide uraJ que expresa un gen de cadena ligera. Los genes de cadena pesada que expresan haploides se aparean con el haploide ura3 de cadena ligera apropiado para generar una proteina secretora diploide.

Apareamiento de cepas haploides que sintetizan una cadena de un solo anticuerpo y selección de derivados diploides que sintetizan anticuerpos funcionales tetraméricos . Para aparear las cepas haploides de P. pastoris, cada cepa que produce una cadena pesada adel (o metí o lys3) que se desea cruzar se estria a través de una placa rica en YPD y la cepa que produce una cadena ligera ura3 se estria a través de una segunda placa YPD (~10 estrias por placa) . Luego de uno o dos días de incubación a 30 °C, las células de una placa que contiene cepas de cadena pesada y una placa que contiene cepas de cadena ligera ura3 se transfieren a una tela de terciopelo estéril en un bloque de placas réplica en un patrón cruzado de incubación de manera que cada cepa de cadena pesada contenga un parche de células mezcladas con cada cepa de cadena ligera. Las células colocadas en placas réplica cruzadas y estriadas luego se transfieren a una placa de apareamiento y se incuban a 25 °C para estimular la iniciación del apareamiento entre las cepas. Luego de dos días, las células en las placas de apareamiento se transfieren nuevamente a un terciopelo estéril en un bloque de placas réplica y luego se transfieren a placas de medio mínimo. Estas placas se incuban a 30 °C durante tres días para permitir el crecimiento selectivo de colonias de cepas diploides prototróficas . Las colonias que surgieron se eligen y se estrían sobre una segunda placa de medio mínimo para aislar la única colonia y purificar cada cepa diploide. Luego las líneas celulares diploides resultantes se examinan para determinar la producción de anticuerpos.

Las supuestas cepas diploides se prueban para demostrar que son diploides y que contienen ambos vectores de expresión para la producción de anticuerpos. Para la diploidía, las muestras de una cepa se propagan en placas de apareamiento para estimularlas a someterse a meiosis y formar esporas. Los productos de esporas haploides se recogen y se prueben para determinar el fenotipo. Si un porcentaje significativo de los productos de espora resultantes son auxótrofos simples o dobles, se puede concluir que la cepa original debe haber sido diploide. Las cepas diploides se examinan para determinar la presencia de ambos genes de anticuerpo extrayendo el ADN genómico de cada una y utilizando este ADN en reacciones de PCR específicas para cada gen.

Fusión de cepas haploides que sintetizan una cadena de un solo anticuerpo y selección de derivados diploides que sintetizan anticuerpos funcionales tetraméricos . Como una alternativa al procedimiento de apareamiento descrito anteriormente, los cultivos individuales de anticuerpo de cadena simple que producen cepas haploides de adel y ura3 se someten a esferoplasto y sus esferoplastos resultantes se fusionan usando polietilenglicol/CaCl2. Las cepas haploides fusionadas luego se colocan en agar que contiene 1 M de sorbitol y un medio mínimo para permitir que las cepas diploides regeneren su pared celular y se desarrollen en colonias visibles. Las colonias resultantes se recogen del agar y se estrían en una placa de medio mínimo y las placas se incuban durante dos días a 30 °C para generar colonias a partir de células únicas de líneas celulares diploides. Las supuestas líneas celulares diploides resultantes luego se examinan para determinar la diploidía y la producción de anticuerpo como se describió anteriormente.

Purificación y análisis de anticuerpos. Se deriva una cepa diploide para la producción de anticuerpo de longitud completa a través del apareamiento de la cadena ligera metí y la cadena pesada lys3 usando los métodos descritos anteriormente. Los medios de cultivo de los cultivos del frasco agitador o termentador de cepas de expresión diploide de P. pastoris se recogen y examinan para determinar la presencia de la proteína de anticuerpo a través de SDS-PAGE e inmunotransferencia, usando anticuerpos dirigidos contra cadenas pesadas y ligeras de IgG humana o específicamente contra la cadena pesada de IgG.

Para purificar los anticuerpos secretados de levadura, los medios clarificados de cultivos que producen anticuerpo se pasan a través de una columna de proteína A y luego de lavarse con 20 mM de fosfato de sodio a pH 7.0 y tampón de unión, la proteína unida a la proteína A se eluye usando 0.1 M de tampón de glicina HC1, pH 3.0. Las fracciones que contienen la mayoría de la proteína total se examinan mediante SDS-PAGE teñido con azul de Coomasie e inmunotransferencia para proteínas de anticuerpos. El anticuerpo se caracteriza usando el ELISA descrito anteriormente para reconocimiento de IL-6.

Ensayo de actividad de anticuerpo. El anticuerpo recombinante derivado de levadura se evalúa para determinar la actividad funcional a través del ensayo de proliferación celular T1165 conducido por IL-6 y el ensayo de haptoglobina HepG2 estimulada con IL-6 descritos anteriormente.

Ejeaplo 9 Neutralización de la respuesta en fase aguda mediante administración intravenosa de anticuerpo anti-IL-6 Abl .

La IL-6 humana puede provocar una respuesta de fase aguda en ratas y una de las proteínas de fase aguda más importantes que se estimula en la rata es la macroglobulina a-2 (A2M) . Se diseñó un estudio para evaluar la dosis de anticuerpo Abl requerida para erradicar la respuesta de A2M a una única inyección s.c. de 100 de IL-6 humana administrada una hora después de las diferentes dosis (0.03, 0.1, 0.3, 1 y 3 mg/kg) del anticuerpo Abl administrada de forma intravenosa (n=10 ratas/nivel de dosis) o IgGl humana policlonal como control (n=10 ratas) . Se recuperó el plasma y la A2M se cuantificó mediante un kit intercalado de ELISA comercial (ICL Inc., Newberg OR; cat. no.- E-25A2M) . El criterio de valoración fue la diferencia en la concentración de A2M en plasma en el punto de tiempo de la hora 24 (luego de Abl) . Los resultados se muestran en la Figura 4.

La DI50 para el anticuerpo Abl fue de 0.1 mg/kg con supresión completa de la respuesta de A2M a 0.3 mg/kg. Esto establece firmemente que la neutralización in vivo de la IL-6 humana puede lograrse mediante el anticuerpo Abl.

Ejemplo 10 Estudio 1 de modelo de caquexia RXF393 Introducción La linea celular de cáncer renal humano, RXF393, produce una gran pérdida de peso al transplantarse a ratones lampiños atimicos. La pérdida de peso comienza alrededor del día 15 luego del transplante y el 80% de los animales pierden al menos el 30% de su peso corporal total alrededor de los días 18-20 luego del transplante. RXF393 secreta IL-6 humana y la concentración en plasma de IL-6 humana en estos animales es muy alta alrededor de 10 ng/ml. La IL-6 humana puede unir el receptor de IL-6 soluble murino y activar las respuestas de IL-6 en el ratón. La IL-6 humana es aproximadamente 10 veces menos potente que la IL-6 murina en la activación de respuestas de IL-6 en el ratón. Los objetivos de este estudio fueron determinar el efecto del anticuerpo Abl en los parámetros de supervivencia, peso corporal, proteína A amiloide sérica, hematología y crecimiento tumoral en ratones lampiños atímicos transplantados con la línea celular de cáncer renal humano RXF393.

Métodos A ochenta ratones lampiños atímicos macho de 6 semanas de edad se les implantaron fragmentos de tumor RXF393 (30-40 mg) de forma subcutánea en el lado derecho. Los animales luego se dividieron en ocho grupos de diez ratones. A tres grupos se les dio 3 mg/kg, 10 mg/kg o 30 mg/kg de anticuerpo Abl de forma intravenosa semanalmente el día 1, día 8, día 15 y día 22 luego del transplante (grupos de evolución) . A otros tres grupos se les dio 3 mg/kg, 10 mg/kg o 30 mg/kg de anticuerpo Abl de forma intravenosa semanalmente el día 8, día 15 y día 22 luego del transplante (grupos de regresión) . Finalmente, a un grupo de control se le dio 30 mg/kg de IgG humano policlonal y a un segundo grupo de control se le dio solución salina tamponada con fosfato de forma intravenosa semanalmente el día 1, el día 8, día 15 y día 22 luego del transplante.

Los animales se sometieron a eutanasia el día 28, cuando el tumor alcanzó los 4,000 mm3 o cuando se debilitaron (>30% de pérdida de peso corporal) . Los animales se pesaron en los días 1 y 6 y luego diariamente desde el día 9 al 28 luego del transplante. Se usó el promedio de porcentaje de peso corporal (MPBW) como parámetro principal para controlar la pérdida de peso durante el estudio. Se calculó de esta manera: (peso corporal-peso del tumor) /peso corporal de referencia x 100. El peso del tumor se midió en los días 1, 6, 9, 12, 15, 18, 22, 25 y 28 luego del transplante. Bajo anestesia se extrajo sangre de cinco ratones en cada grupo en los días 5 y 13 y de diez ratones en cada grupo cuando se sometieron a eutanasia (en la mayoría de los casos el día 28) . Se analizó la sangre para determinar la hematología y la concentración de proteína A amiloide y sérica (SAA) . A un grupo adicional de 10 ratones lampiños atímicos de 6 semanas de edad sin tumor se le extrajeron muestras de sangre para estimar la hematología y la concentración de SAA como conjunto de valores de referencia.

Resultados - Supervivencia No se sometieron a eutanasia ni murieron animales en ningún grupo de anticuerpo Abl antes de la fecha de finalización del estudio en el día 28. En los dos grupos de control, 15 animales (7/9 en el grupo de IgG humana policlonal y 8/10 en el grupo de solución salina tamponada con fosfato) se encontraron muertos o fueron sometidos a eutanasia debido a que estaban muy debilitados (>30% de pérdida de peso corporal) . El tiempo medio de supervivencia en ambos grupos de control fue de 20 días.

Las curvas de supervivencia para los dos grupos de control y los grupos de evolución del anticuerpo Abl (dosificados a partir del día 1 del estudio) se presentan en la Figura 5.

Las curvas de supervivencia de los dos grupos de control y los grupos de regresión del anticuerpo Abl (dosificados a partir del día 8 del estudio) se presentan en la Figura 6.

Hubo una diferencia estadísticamente significativa entre las curvas de supervivencia de los grupos de control de IgG humana policlonal (p=0.0038) y de solución salina tamponada con fosfato (p=0.0003) y la curva de supervivencia de los seis grupos del anticuerpo Abl. No hubo ninguna diferencia estadísticamente significativa entre los dos grupos de control (p=0.97) .

Resultados - Tamaño del tumor El tamaño del tumor en los ratones supervivientes se estimó por palpación. En los primeros 15 días del estudio, ninguno de los ratones de ningún grupo se encontró muerto ni se sometió a eutanasia y por tanto la comparación de los tamaños de tumor entre grupos en estos días estuvo libre de sesgos de muestreo. No se observó diferencia alguna en el tamaño del tumor entre los grupos de evolución o regresión del anticuerpo Abl y los grupos de control hasta el dia 15. No se realizó una comparación de los tamaños de tumor entre los ratones supervivientes en los grupos de control y tratamiento luego del comienzo de la mortalidad en los controles (el día 15) , dado que el tamaño del tumor en ratones de control supervivientes estaba supuestamente sesgado y por lo tanto los resultados de esa comparación no serían significativos.

Como la administración del anticuerpo Abl promovió la supervivencia sin reducción aparente del tamaño del tumor, la IL-6 sérica elevada puede contribuir a la mortalidad mediante mecanismos independientes de crecimiento tumoral. Estas observaciones soportan la hipótesis de que el anticuerpo Abl puede promover la supervivencia del paciente con cáncer sin afectar directamente el crecimiento tumoral, posiblemente potenciando el bienestar del paciente en general.

Resultados - Pérdida de peso El promedio del porcentaje de peso corporal (MPBW) (? SEM) contra el tiempo se muestra en la Figura 27. En comparación con los controles, los ratones dosificados con Abl se protegieron contra la pérdida de peso. El día 18, el MPBW en ratones de control era de 75%, correspondiente a una pérdida de peso promedio del 25%. En contraste, el mismo día, el MPB en grupos de tratamiento con Ab-1 había cambiado mínimamente (entre 97% y 103%) . Hubo una diferencia estadísticamente significativa entre las curvas de MPBW en los controles (que reciben IgG humana policlonal o PBS) y las del grupo de 10 mg/kg de dosificación (p<0.0001) o los grupos de dosificación de 3 mg/kg y 30 mg/kg (p<0.0005). No hubo ninguna diferencia estadísticamente significativa entre los dos grupos de control.

Las fotografías representativas de los ratones de control y tratados con Abl (Figura 28) ilustran la condición demacrada de los ratones de control comparados con la apariencia normal del ratón tratado con Abl al final del estudio (nótense los sitios de tumor visibles externamente en el lado derecho) .

Estos resultados sugieren que el Abl puede ser útil para prevenir o tratar la caquexia causada por una IL-6 elevada en humanos .

Resultados - Plasma amiloide sérica A La concentración promedio en plasma amiloide sérica A (± SEM) contra el tiempo en los dos grupos de control y los grupos de evolución (dosificados desde el día 1 del estudio) y de regresión (dosificados desde el día 8 del estudio) del anticuerpo Abl se presentan en la Tabla 5 y gráficamente en la Figura 32. 5: Plasma promedio SAA-anticuerpo Abl, todos los grupos SAA se sobre-regula a través de la estimulación de hIL-6 y esta respuesta se correlaciona directamente con niveles circulantes de hIL-6 que surgen del tumor implantado. El marcador sustituto proporciona una lectura indirecta de hIL-6 activa. Por tanto en los dos grupos de tratamiento descritos anteriormente existen niveles significativamente disminuidos de SAA debido a la neutralización de hIL-6 que proviene de un tumor. Este soporta adicionalmente la discusión de que el anticuerpo Abl muestra eficacia in vivo.

Ejemplo 11 Estudio 2 de modelo de caquexia RXF393 Introducción Se realizó un segundo estudio en el modelo de caquexia RXF-393 donde el tratamiento con el anticuerpo Abl comenzó en una etapa posterior (días 10 y 13 luego del transplante) y con una fase de tratamiento más prolongada (hasta 49 dias luego del transplante). El intervalo de dosificación con el anticuerpo Abl se acortó de 7 a 3 dias y también se midió el consumo diario de alimentos. También hubo un intento de estandarizar los tamaños de tumor al momento de iniciar la dosificación con el anticuerpo Abl.

Métodos A ochenta ratones lampiños atimicos macho de 6 semanas de edad se les implantaron fragmentos de tumor RXF393 (30-40 mg) de forma subcutánea en el lado derecho. Se seleccionaron 20 ratones cuyos tumores habían alcanzado entre 270-320 mg de tamaño y se dividieron en dos grupos. Un grupo recibió el anticuerpo Abl a 10 mg/kg i.v. cada tres días y el otro grupo recibió 10 mg/kg de IgG humana policonal cada 3 días desde ese momento (día 10 luego del transplante) . Se seleccionaron otros 20 ratones cuando el tamaño de su tumor había alcanzado 400-527 mg de tamaño y se dividieron en dos grupos. Un grupo recibió el anticuerpo Abl a 10 mg/kg i.v. cada tres días y el otro grupo recibió 10 mg/kg de IgG humana policonal cada 3 días desde ese momento (dia 13 luego del transplante) . Los 40 ratones restantes no fueron más parte del estudio y se sometieron a eutanasia el dia 49, cuando el tumor alcanzó los 4,000 mm3 o cuando se volvieron muy debilitados (>30% de pérdida de peso corporal) .

Los animales se pesaron cada 3-4 días a partir del dia 1 al dia 49 luego del transplante. Se usó el promedio de porcentaje de peso corporal (MPBW) como parámetro principal para controlar la pérdida de peso durante el estudio. Se calculó de esta manera: ((peso corporal - peso del tumor) /peso corporal de referencia) x 100. El peso del tumor se midió cada 3-4 días a partir del dia 5 al dia 49 luego del transplante. El consumo de alimentos se midió cada dia (cantidad consumida en 24 horas en peso (g) por cada grupo de tratamiento) a partir del dia 10 en los grupos de tumores de 270-320 mg y del dia 13 en los grupos de tumores de 400-527 mg.

Resultados - Supervivencia Las curvas de supervivencia para el anticuerpo Abl a 10 mg/kg i.v. cada tres dias (tamaño del tumor de 270-320 mg) y de 10 mg/kg i.v para la IgG humana policlonal i.v. cada tres dias (tamaño del tumor de 270-320 mg) se presentan en la Figura 7.

La supervivencia mediana para el anticuerpo Abl a 10 mg/kg i.v. cada tres días (tamaño del tumor de 270-320 mg) fue de 46 días y de 10 mg/kg i.v para la IgG humana policlonal cada tres días (tamaño del tumor de 270-320 mg) fue de 32.5 días (p=0.0071) .

Las curvas de supervivencia para el anticuerpo Abl a 10 mg/kg i.v. cada tres días (tamaño del tumor de 400-527 mg) y a 10 mg/kg i.v para la IgG humana policlonal cada tres días (tamaño del tumor de 400-527 mg) se presentan en la Figura 8. La supervivencia mediana para el anticuerpo Abl a 10 mg/kg i.v. cada tres días (tamaño del tumor de 400-527 mg) fue de 46.5 días y a 10 mg/kg i.v para la IgG humana policlonal cada tres días (tamaño del tumor de 400-527 mg) fue de 27 días (p=0.0481).

Ejemplo 12 Evaluación farmacocinética de dosificación múl'tiple de anticuerpo Abl en primates no humanos El anticuerpo Abl se dosificó en una única infusión de bolo a un solo mono macaco masculino y un solo femenino en solución salina tamponada con fosfato. Se eliminaron muestras de plasma en intervalos de tiempo fijos y el nivel de anticuerpo Abl se cuantificó a través del uso de un ensayo ELISA de captura de antígeno. Se capturó la IL-6 biotinilada (50 µ? de 3 pg/mL) en placas de microtitulación de 96 pocilios recubiertas con estreptavidina . Las placas se lavaron y bloquearon con 0.5% de gelatina de piel de pescado. Las muestras de plasma diluidas adecuadamente se agregaron e incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente. Los sobrenadantes se eliminaron y se aplicó un segundo anticuerpo anti-hFc-HRP conjugado y se dejó a temperatura ambiente.

Las placas luego se aspiraron y se agregó TMB para visualizar la cantidad de anticuerpo. Luego se determinaron los niveles específicos mediante el uso de una curva estándar. Una segunda dosis de anticuerpo Abl se administró el día 35 a los dos mismos monos macacos y se replicó el experimento usando un plan de muestreo idéntico. Las concentraciones resultantes son entonces gráfico contra tiempo, como se muestra en la Figura 9.

Este anticuerpo aglicosilado humanizado de longitud completa expresado y purificado Pichia pastoris muestra características comparables con la proteína mamífera expresada. Además, las dosis múltiples de este producto muestran semividas reproducibles, lo que infiere que esta plataforma de producción no genera productos que muestran inmunogenicidad mejorada.

Ejemplo 13 Caracterización mecánica de proteínas de anticuerpo con Octet La señalización de IL-6 depende de las interacciones entre IL-6 y dos receptores, IL-6R1 (CD126) y gpl30 (transductor de señales IL-6) . Para determinar el mecanismo de acción del anticuerpo, se realizaron estudios mecánicos usando inter erometría de biocapas con un instrumento Octet QK (ForteBio; Menlo Park, CA) . Se realizaron estudios en dos configuraciones diferentes. En esta primera orientación, la IL-6 biotinilada (número de partes de R&D systems 206-IL-OOlMG/CF, biotinilada usando Pierce EZ-link sulfo-NHS-LC-LC-biotina, número de producto 21338 de acuerdo con los protocolos del fabricante) se unió inicialmente a un biosensor recubierto con estreptavidina (número de parte ForteBiol8-5006) . La unión se controla como un aumento de señal.

La IL-6 unida al sensor luego se incubó con el anticuerpo en cuestión o con la solución diluyente sola. El sensor luego se incubó con una molécula de IL-6R1 soluble (número de producto de R&D systems 227-SR-025/CF) . Si la molécula de IL-6R1 no pudo unirse, se entendió que el anticuerpo bloqueaba las interacciones de IL-6/IL-6R1. Estos complejos se incubaron con gpl30 (R&D systems 228-GP-010/CF) en presencia de IL-6R1 con fines de estabilidad. Si la gpl30 no se unió, se concluyó que el anticuerpo bloqueó las interacciones de gpl30 con IL-6.

En la segunda orientación, el anticuerpo se unió a un biosensor recubierto con un reactivo especifico de Fe IgGl anti-humano (número de parte ForteBiol8-5001) . La IL-6 se unió al anticuerpo inmovilizado y el sensor se incubó con IL-6R1. Si la IL-6R1 no interactuó con la IL-6, entonces se concluyó que el anticuerpo de unión a IL-6 bloqueó las interacciones de IL- 6/IL-6R1. En las situaciones en que se observa anticuerpo/IL- 6/IL-6R1, el complejo se incubó con gpl30 en presencia de IL- 6R1. Si la gpl30 no interactuó, se concluyó entonces que el anticuerpo bloqueó las interacciones IL-6/gpl30. Todos los estudios se realizaron en un volumen final de 200 a 30°C y 1000 rpm. Para estos estudios, se diluyeron todas las proteínas usando una muestra de tampón diluyente ForteBio (número de parte 18-5028) .

Los resultados se presentan en la Fig. 10 (A-E) y en la Fig. 11.

Ejemplo 14 Mapeo peptidico Para determinar el epitopo reconocido por Abl en la IL-6 humana, se usó el anticuerpo en un ensayo basado en Western blot. La forma de la IL-6 humana utilizada en este ejemplo tuvo una secuencia de 183 aminoácidos de longitud (mostrado a continuación) . Se sintetizó comercialmente una biblioteca de 57 miembros de péptidos de 15 aminoácidos superpuestos que comprenden esta secuencia y se unió covalentemente a una membrana de nitrocelulosa PepSpots (JPT Peptide technologies, Berlín, Alemania) . Las secuencias de péptidos de 15 aminoácidos superpuestos se muestran en la Figura 12. Las bandas se prepararon y sondaron de acuerdo con recomendaciones del fabricante .

En resumen, las bandas se premo aron en metanol, se enjuagaron con PBS y se bloquearon por más de 2 horas en 10% de leche descremada en PBS/0.05% Tween (solución bloqueante). El anticuerpo Abl se usó en una dilución final de 1 mg/ml y se usó el anticuerpo secundario Anti-Humano-Kappa de ratón conjugado con HRP (Southern BioTech #9220-05) en una dilución de 1:5000. Las diluciones/incubaciones del anticuerpo se realizaron en una solución bloqueante. Las transferencias se realizaron usando reactivos previos de Amersham ECL (GE# RPN2135) y señal quimioluminiscente documentados usando una cámara CCD (Alphalnnotec) . Los resultados de las transferencias se muestran en las Figuras 13 y 14.

La secuencia de la forma de IL-6 humana utilizada para generar una biblioteca de péptidos se establece a continuación: VPPGEDS DVAAPHRQPLTSSERIDKQIRYILDGISALRKETCNKSNMCESSKEALAENNLNL PKMAE DGCFQSGFNEETCLVKIITGLLEFEVYLEYLQNRFESSEEQARAVQMSTKVLIQFLQ K AKNLDAITTPDPTTNASLLTKLQAQNQWLQDMTTHLILRSF EFLQSSLRALRQM (SEQ ID NO: 1) .

Ejemplo 15 Abl tiene alta afinidad para IL-6 Se usó una resonancia de plasmones superficiales para medir la tasa de asociación ( a) , tasa de disociación (Kd) y constante de disociación ( D) para Abl para IL-6 de rata, ratón, perro, humano y mono macaco a 25 °C (Figura 15A) . La constante de disociación de la IL-6 humana fue de 4 pM, lo que indica una afinidad muy alta. Como se esperaba, la afinidad en general disminuyó con la distancia filogenética del humano. Las constantes de disociación de Abl para IL-6 de monos macacos, ratas y ratones fueron de 31 pM, 1.4 nM y 0.4 nM, respectivamente. La afinidad de Abl para IL-6 de perro está por debajo del límite de cuantificación del experimento.

La alta afinidad de Abl para IL-6 de ratón, rata y mono macaco sugiere que el Abl puede usarse para inhibir la IL-6 de estas especies. Esta hipótesis se probó usando un ensayo de proliferación celular. En resumen, cada IL-6 de estas especies se usó para estimular la proliferación de células T1165 y se midió la concentración a la que Abl podía inhibir el 50% de la proliferación (CI50). La inhibición coincidió con las constantes de disociación medidas (Figura 15B) . Estos resultados demuestran que el Abl puede inhibir la IL-6 nativa de estas especies y sugieren el uso de estos organismos para realizar modelos in vi tro o in vivo de inhibición de IL-6 mediante Abl.

Ejemplo 16 Evaluación farmacocinética de dosificación múltiple del anticuerpo Abl en voluntarios humanos sanos.

El anticuerpo Abl se dosificó a voluntarios humanos sanos en una única infusión de bolo en histidina y sorbitol. Las dosis de 1 mg, 3 mg, 10 mg, 30 mg o 100 mg se administraron a cada individuo en grupos de dosificación que contenían cinco a seis individuos. Las muestras en plasma se eliminaron en intervalos de tiempo fijos por hasta doce semanas. El plasma humano se recogió a través de venipunción en un tubo de recolección al vacio que contiene EDTA. El plasma se separó y se usó para evaluar los niveles de circulación de Abl usando un anticuerpo monoclonal especifico para Abl, como sigue. Se recubrió una placa de microtitulación de 96 pocilios durante la noche con el anticuerpo monoclonal especifico para Abl en IX PBS durante la noche a 4 °C. Las etapas restantes se llevaron a cabo a temperatura ambiente. Los pocilios se aspiraron y se bloquearon posteriormente usando 0.5% de gelatina de piel de pescado (FSG) (Sigma) en IX de PBS durante 60 minutos. Las muestras de plasma humano luego se agregaron e incubaron durante 60 minutos, luego se aspiraron, posteriormente se agregaron 50 pL de 1 g/mL de IL-6 biotinilada a cada pocilio y se incubaron durante 60 minutos. Los pocilios se aspiraron y se agregaron 50 \iL de estreptavidina-HRP (Pharmingen) diluidos 1:5, 000 en 0.5% de FSG/PBS y se incubaron durante 45 minutos. El desarrollo se realizó usando métodos estándar empleando TMB para detección. Los niveles luego se determinaron mediante comparación con una curva estándar preparada en un formato comparable .

La concentración promedio de Abl en plasma para cada grupo de dosificación versus tiempo se muestra en la Figura 16. Los promedios de AUC y Cm¿x aumentaron de forma lineal con la dosificación (Figuras 17 y 18, respectivamente) . Para dosis de 30 mg y más, la semivida promedio de Abl en cada grupo de dosificación fue aproximadamente de entre 25 y 30 días (Figura 19) .

Ejemplo 17 Farmacocinótica de Abl en pacientes con cáncer avanzado El anticuerpo Abl se dosificó en una única infusión de bolo en solución salina tamponada con fosfato a cinco individuos con cáncer avanzado. Cada individuo recibió una dosis de 80 mg (n=2) o 160 mg (n=3) de Abl. Las muestras de plasma se extrajeron semanalmente y el nivel de anticuerpo Abl se cuantificó como en el Ejemplo 16.

La concentración promedio de Abl en plasma en estos individuos como función del tiempo se muestra en la Figura 20. El promedio de semivida de Abl fue de aproximadamente 31 días.

Ejeaplo 18 Semivida de Mol sin precedentes En general, la semivida promedio de Abl fue de aproximadamente 31 días en humanos (para dosificaciones de 10 mg y más) y de aproximadamente 15-21 días en monos macacos. La semivida de Abl en humanos y monos macacos no tiene precedentes cuando se compara con la semivida de otros anticuerpos anti-IL- 6 (Figura 21) . Como se describió anteriormenté, el Abl provino de la humanización de un anticuerpo de conejo y se produce a partir de Pichia pastoris en forma aglicosilada. Estas características dan como resultado un anticuerpo con muy poca inmunogenicidad en humanos. Además, la falta de glicosilación evita que el Abl interactúe con el receptor o complemento de Fe. Sin el ánimo de limitarse a la teoría, se cree que la semivida sin precedentes de Abl es al menos parcialmente atribuible a la humanización y falta de glicosilación. La secuencia y/o la estructura particular de las superficies de unión al antígeno también pueden contribuir a la semivida de Abl.

Ejemplo 19 Efecto de Abl en la concentración de hemoglobina, la concentración de lipidos en plasma y los conteos de neutrófilos en pacientes con cáncer avanzado El anticuerpo Abl se dosificó en una única infusión de bolo en solución salina tamponada de fosfato a ocho individuos con cáncer avanzado (NSCLC, cáncer colorrectal, colangiocarcinoma o mesotelioma) . Cada individuo recibió una dosis de 80 mg, 160 mg, o 320 mg de Abl. Se extrajeron muestras de sangre justo antes de la infusión y a intervalos de tiempo fijos durante seis semanas, y se determinaron la concentración de hemoglobina, la concentración de lipidos en plasma y los conteos de neutrófilos. La concentración promedio de hemoglobina aumentó levemente (Figura 22) , así como el colesterol total y los triglicéridos (Figura 23) , mientras que los conteos promedio de neutrófilos disminuyeron levemente (Figura 24) .

Estos resultados demuestran adicionalmente algunos de los efectos beneficiosos de la administración de Abl a individuos con enfermedades crónicas. Debido a que la IL-6 es la principal citocina responsable de la anemia en enfermedades crónicas (incluida la anemia relacionada con el cáncer), la neutralización de la IL-6 mediante Abl aumenta la concentración de hemoglobina en estos individuos. De manera similar, debido a que la IL-6 es muy importante en el aumento de los conteos de neutrófilos en la inflamación, la leve reducción observada en los conteos de neutrófilos confirma adicionalmente que el Abl inhibe la IL-6. Finalmente, la IL-6 causa anorexia asi como caquexia en estos pacientes; la neutralización de IL-6 mediante Abl hace que se recupere el apetito y se revierta la caquexia. El aumento en las concentraciones de lipidos en plasma refleja el estado nutricional mejorado de los pacientes. En su conjunto, estos resultados demuestran adicionalmente que el Abl revierte de forma eficaz estas consecuencias adversas de la IL-6 en estos pacientes.

Ejeaplo 20 El Abl suprime la CRP en suero en voluntarios sanos y en pacientes con cáncer avanzado Introducción Las concentraciones de CRP en suero han sido descritas como un fuerte indicador pronóstico en pacientes con algunas formas de cáncer. Por ejemplo, Hashimoto et ai. llevaron a cabo análisis univariado y multivariado de concentraciones de CRP en suero preoperatorias en pacientes con carcinoma hepatocelular para identificar factores que afectan la supervivencia y recurrencia de la enfermedad (Hashimoto, K., et al., Cáncer, 103 (9) :1856-1864 (2005)). Se clasificó a los pacientes en dos grupos, aquellos con niveles de CRP en suero > 1.0 mg/dL ("grupo con CRP positiva") y aquellos con niveles de CRP en suero < 1.0 mg/dL ("grupo con CRP negativa"). Los autores describieron "una correlación importante entre el nivel de CRP en suero preoperatorio y el tamaño del tumor". Id. Adicionalmente, los autores encontraron que "[l]as tasas de supervivencia general y supervivencia sin recurrencia en el grupo con CRP positiva fueron significativamente más bajas en comparación con las tasas del grupo con CRP negativa". Id. Los autores concluyeron que el nivel de CRP preoperatorio en pacientes es un indicador predictivo importante e independiente de prognosis pobre y recurrencia temprana en pacientes con carcinoma hepatocelular.

Otros investigadores han identificado correlaciones similares. Por ejemplo, Karakiewicz et al. determinaron que la CRP en suero era un indicador independiente e informativo de la mortalidad especifica del carcinoma de células renales (Karakiewicz, P.I., et al., Cáncer, 110 ( 6) : 1241-1247 (2007)). Por consiguiente, sigue habiendo necesidad en la técnica de métodos y/o tratamientos que reduzcan las concentraciones de proteina C-reactiva (CRP) en suero en pacientes con cáncer y, particularmente, en aquellos con cánceres avanzados.

Métodos Los voluntarios sanos recibieron una única infusión intravenosa (IV) de 1 hora de 100 mg (5 pacientes), 30 mg (5 pacientes), 10 mg (6 pacientes), 3 mg (6 pacientes) o 1 mg (6 pacientes) del anticuerpo monoclonal Abl, mientras que otros 14 voluntarios sanos recibieron placebo intravenoso. De manera comparativa, 2 pacientes con formas avanzadas de cáncer colorrectal recibieron una única infusión intravenosa (IV) de 1 hora de 80 mg del anticuerpo monoclonal Abl. No se administraron dosis adicionales del anticuerpo monoclonal Abl a la población de prueba.

Los pacientes se evaluaron antes de la administración de la dosis y a partir de ese momento semanalmente durante al menos 5 semanas luego de la dosis. Al momento de cada evaluación, se analizó la concentración de CRP en suero en los pacientes .

Resultados Voluntarios sanos Como se mencionó anteriormente, los niveles de CRP en suero son un marcador de inflamación, por consiguiente, los niveles de CRP de referencia son típicamente bajos en los individuos sanos. Los niveles de CRP de referencia bajos pueden hacer que sea difícil de detectar una reducción adicional en los niveles de CRP. No obstante, se detectó una reducción considerable de las concentraciones de CRP en suero en voluntarios sanos que recibieron todas las concentraciones del anticuerpo monoclonal Abl, en comparación con los controles (Figura 25) . La reducción de los niveles de CRP en suero fue rápida, ocurrió dentro de una semana a partir de la administración del anticuerpo y se prolongó al menos hasta que se realizó la medición final (8 o 12 semanas a partir de la administración del anticuerpo) .

Pacientes con cáncer A cinco pacientes con cáncer avanzado (cáncer colorrectal, colangiocarcinoma o NSCLC) con niveles elevados de CRP en suero se les dosificaron 80 mg o 160 mg de Abl. Los niveles de CRP en suero se redujeron en gran medida en estos pacientes (Figura 26A) . La reducción de los niveles de CRP en suero fue rápida, 90% de reducción ocurrió dentro de una semana a partir de la administración de Abl y se prolongó al menos hasta que se realizó la medición final (hasta doce semanas) . En la Figura 26B se muestran los niveles de CRP de dos individuos representativos. En esos individuos, los niveles de CRP se disminuyeron por debajo del rango de referencia normal (menos de 5 - 6 mg/1) dentro de una semana. Por consiguiente, la administración de Abl a pacientes con cáncer avanzado puede causar una supresión rápida y sostenida de los niveles de CRP en suero.

Ejemplo 21 El Abl mejoró la fuerza muscular, mejoró el peso y redujo la fatiga en pacientes con cáncer avanzado Introducción La pérdida de peso y la fatiga (y la debilidad muscular que viene con ellas) son síntomas muy comunes en pacientes con formas avanzadas de cáncer y estos síntomas pueden empeorar a medida que el cáncer avanza. La fatiga, la pérdida de peso y la debilidad muscular pueden tener efectos negativos considerables en la recuperación de pacientes con formas avanzadas de cáncer, por ejemplo, alterar estilos de vida y relaciones y afectar la voluntad o la capacidad de los pacientes de continuar tratamientos contra el cáncer. Los métodos conocidos para abordar la fatiga, la pérdida de peso y la debilidad muscular incluyen rutinas regulares de entrenamiento y ejercicios, métodos para conservar la energía de los pacientes y tratamientos que abordan la fatiga inducida por anemia y la debilidad muscular. No obstante, sigue habiendo necesidad en la técnica de métodos y/o tratamientos para mejorar la fatiga, la pérdida de peso y la debilidad muscular en pacientes con cáncer.

Métodos Cuatro pacientes con formas avanzadas de cáncer (cáncer colorrectal (2), NSCLC (1), colangiocarcinoma (1)) recibieron una única infusión intravenosa (IV) de 1 hora de 80 mg o 160 mg del anticuerpo monoclonal Abl. No se administraron dosis adicionales del anticuerpo monoclonal Abl a la población de prueba .

Los pacientes se evaluaron antes de la administración de la dosis y a partir de ese momento durante al menos 6 semanas luego de la dosis. Al momento de cada evaluación, se analizó a los pacientes para determinar lo siguiente: a.) cualquier cambio en el peso, b.) fatiga medida usando el cuestionario de la subescala de fatiga Facit-F, una prueba reconocida a nivel médico para evaluar la fatiga (Véase, por ejemplo, Celia, D., Lai, J.S., Chang, C.H., Peterman, A., & Slavin, M. (2002). Fatigue in cáncer patients compared with fatigue in the general population. Cáncer, 94(2), 528-538; Celia, D., Eton, D.T., Lai, F J-S., Peterman, A.H & Merkel, D.E. (2002). Combining anchor and distribution based methods to derive minimal clinically important differences on the Functional Assessment of Cáncer Therapy anemia and fatigue scales. Journal of Pain & Symptom Management, 24 (6) 547-561.) y la fuerza de prensión (una prueba reconocida a nivel médico para evaluar la fuerza muscular, típicamente empleando un dinamómetro de prensión) .

Resultados Cambio en el peso Los datos promediados para ambas concentraciones de dosis (80 mg y 160 mg) del anticuerpo monoclonal Abl demostraron un aumento de aproximadamente 2 kilogramos de peso por paciente durante el período de 6 semanas (Figura 29) .

Fatiga Los datos promediados para ambas concentraciones de dosis (80 mg y 160 mg) del anticuerpo monoclonal Abl demostraron un aumento en el resultado medio de la subescala de Facit-F FS de al menos aproximadamente 10 puntos en la población de pacientes durante el período de 6 semanas (Figura 30) .

Fuerza de prensión Los datos promediados para ambas concentraciones de dosis (80 mg y 160 mg) del anticuerpo monoclonal Abl demostraron un aumento en la fuerza de prensión media de al menos aproximadamente 10 por ciento en la población de pacientes durante el período de 6 semanas (Figura 31) .

Ejemplo 22 El Abl aumenta la concentración de albúmina en plasma en pacientes con cáncer avanzado Introducción Las concentraciones de albúmina en suero son reconocidas como indicadores predictivos de supervivencia y/o éxito en la recuperación en pacientes con cáncer. La hipoalbuminenia tiene una fuerte correlación con una mala evolución del paciente en diversas formas de cáncer. Por ejemplo, en un estudio ningún paciente sometido a quimioterapia sistémica por adenocarcinoma pancreático metastásico y con niveles de albúmina en suero menores a 3.5 g/dL respondió de forma satisfactoria a la quimioterapia sistémica (Fujishiro, M., et al., Hepatogastroenterology, 47 (36) : 1744-46 (2000)). Los autores concluyen que "[placientes con ... hipoalbuminemia ... podrían ser candidatos inapropiados para la quimioterapia sistémica y podrían tratarse con otros enfoques experimentales o cuidados paliativos". Id.

De manera similar, Sénior y Maroni expresan que "[l]a reciente apreciación acerca de que la hipoalbuminemia es el indicador más poderoso de la mortalidad en enfermedades renales en etapa terminal destaca la importancia crítica de asegurar el consumo adecuado de proteínas para esta población de pacientes". (J.R. Sénior and B.J. Maroni, Am. Soc. Nutr. Sci., 129:313S-314S (1999) ) .

En al menos un estudio, los intentos por rectificar la hipoalbuminemia en 27 pacientes con cáncer metastásico mediante la infusión de albúmina intravenosa diaria de 20 g hasta que se alcanzaran los niveles de albúmina en suero normales (>3.5 g/dL) no tuvieron mucho éxito. Los autores mencionan que "[l]a infusión de albúmina en pacientes con cáncer en etapa avanzada tiene valor limitado en la práctica clínica. Los pacientes con PS 4 e hipoalbuminemia tienen una peor prognosis". ( Demirkazik, A., et al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 21:Abstr 2892 (2002)).

Por consiguiente, sigue habiendo necesidad en la técnica de métodos y/o tratamientos que mejoren las concentraciones de albúmina en suero en pacientes con cáncer y que se ocupen de estados hipoalbuminémicos en pacientes con cáncer, particularmente, aquellos con cánceres avanzados.

Métodos Cuatro pacientes con formas avanzadas de cáncer (cáncer colorrectal (2), NSCLC (1), colangiocarcinoma (1)) recibieron una única infusión intravenosa (IV) de 1 hora de 80 mg o 160 mg del anticuerpo monoclonal Abl. No se administraron dosis adicionales del anticuerpo monoclonal Abl a la población de prueba .

Los pacientes se evaluaron antes de la administración de la dosis y a partir de ese momento durante al menos 6 semanas luego de la dosis. Al momento de cada evaluación, se analizó la concentración de albúmina en plasma en los pacientes.

Resultados Los datos promediados para ambas concentraciones de dosificación (80 mg y 160 mg) del anticuerpo monoclonal Abl demostraron un aumento de aproximadamente 5 g/L de concentración de albúmina en plasma por paciente durante el periodo de 6 semanas (Figura 33) .

Ejemplo 23 Abl aumenta la hemoglobina en pacientes con cáncer avanzado El anticuerpo Abl se dosificó a 80 mg, 160 mg o 320 mg de Abl en solución salina tamponada con fosfato a 93 individuos con carcinoma pulmonar no microcitico. El grupo tratado con placebo de 31 individuos con carcinoma pulmonar no microcitico se dosificó solo con solución salina tamponada con fosfato. Se extrajeron muestras de sangre justo antes de la dosificación (semana cero) y en las semanas dos, cuatro, ocho y doce y se determinó la concentración de hemoglobina. La concentración promedio de hemoglobina aumentó para aquellos que recibían el anticuerpo Abl mientras que la concentración promedio de hemoglobina de aquellos que reciben placebo no aumentó luego de las doce semanas al compararla con la concentración justo antes de la dosificación (semana cero) (Figuras 38 y 39) .

Un subgrupo de la población de estudio comenzó el estudio con niveles bajos de hemoglobina, definido como una concentración de hemoglobina de referencia por debajo de 11 g/1. La concentración promedio de hemoglobina aumentó por encima de 11 g/1 luego de ocho semanas para aquellos que recibieron el anticuerpo Abl en dosis de 160 mg y 320 mg, mientras que la concentración promedio de hemoglobina de aquellos que reciben anticuerpo Abl en dosis de 80 mg o placebo no aumentó por encima de 11 g/1 luego de ocho semanas (Fig. 40) .

Estos resultados demuestran adicionalmente algunos de los efectos beneficiosos de la administración de Abl a individuos con enfermedades crónicas. Debido a que la IL-6 es la principal citocina responsable de la anemia en enfermedades crónicas (incluida la anemia relacionada con el cáncer) , la neutralización de la IL-6 mediante Abl aumenta la concentración de hemoglobina en estos individuos.

Ejemplo 24 Abl aumenta la hemoglobina en pacientes con artritis reuma oide Los niveles de hemoglobina se analizaron en pacientes con artritis reumatoide durante el tratamiento con anticuerpo Abl. El anticuerpo Abl se dosificó a 80 mg, 160 mg o 320 mg en solución salina tamponada con fosfato a 94 individuos con artritis reumatoide. El grupo tratado con placebo de 33 individuos con artritis reumatoide se dosificó solo con solución salina tamponada con fosfato. Se extrajeron muestras de sangre justo antes de la dosificación (semana cero) y a la semana uno, dos, tres, cuatro, seis, ocho, diez, doce y dieciséis y se determinó la concentración de hemoglobina. La concentración promedio de hemoglobina aumentó para aquellos que reciben el anticuerpo Abl mientras que la concentración promedio de hemoglobina de aquellos que reciben placebo no aumentó perceptiblemente luego de las dieciséis semanas al compararla con la concentración justo antes de la dosificación (semana cero) (Figura 41) .

Estos resultados demuestran adicionalmente algunos de los efectos beneficiosos de la administración de Abl a individuos con enfermedades crónicas. Debido a que la IL-6 es la citocina principal responsable de la anemia de enfermedades crónicas (incluida la anemia relacionada con el cáncer) , la neutralización de IL-6 mediante Abl aumenta la concentración de hemoglobina .

Ejeaplo 25 Abl mejoró el peso y redujo la fatiga en pacientes con cáncer avanzado Introducción La pérdida de peso y fatiga son síntomas muy comunes en pacientes con formas avanzadas de cáncer y estos síntomas pueden empeorar a medida que el cáncer progresa. La fatiga y la pérdida de peso pueden tener efectos negativos considerables en la recuperación de los pacientes con formas avanzadas de cáncer, por ejemplo alterando estilos de vida y relaciones y afectando la voluntad o capacidad de los pacientes para continuar tratamientos contra el cáncer. Los métodos conocidos para abordar la fatiga y la pérdida de peso incluyen rutinas regulares de entrenamiento y ejercicios, métodos para conservar la energía de los pacientes y tratamientos que abordan la fatiga inducida por anemia. Sin embargo, sigue habiendo una necesidad en la técnica de métodos y/o tratamientos para mejorar la fatiga y la pérdida de peso en pacientes con cáncer.

Métodos Se dividieron ciento veinticuatro pacientes con cáncer de pulmón no microcítico (NSCLC) en 4 grupos de tratamiento. Los pacientes de un grupo recibieron una infusión intravenosa (IV) de 1 hora de placebo (n=31), 80 mg (n=29) , 160 mg (n=32) o 320 mg (n=32) del anticuerpo monoclonal Abl cada 8 semanas durante 24 semanas en un total de 3 dosis.

Los pacientes se evaluaron antes de la administración de la dosis y a partir de ese momento durante al menos 12 semanas luego de la dosis. Al momento de cada evaluación, se analizó a los pacientes para determinar lo siguiente: a.) cualquier cambio en el peso y b.) fatiga medida usando el cuestionario de la subescala de Facit-F fatiga, una prueba reconocida a nivel médico para evaluar la fatiga (Véase, e.g., Celia, D. , Lai, J.S., Chang, C.H., Peterman, A., & Slavin, M. (2002). Fatigue in cáncer patients compared with fatigue in the general population. Cáncer, 94(2), 528-538; Celia, D., Eton, D.T., Lai, F J-S., Peterman, A.H & erkel, D.E. (2002). Combining anchor and distribution based methods to derive minimal clinically important differences on the Functional Assessment of Cáncer Therapy anemia and fatigue scales. Journal of Pain & Symptom Management, 24 (6) 547-561.).

Resultados Cambio en el peso Los datos promediados de cambio en el peso de cada grupo de concentración de dosis (placebo, 80 mg, 160 mg y 320 mg) del anticuerpo monoclonal Abl durante 12 semanas se grafican en la Figura 42. El cambio de porcentaje promedio en el peso corporal de cada concentración de dosis se gráfica en la Figura 43. Los datos promediados de masa corporal magra para los grupos de concentración de dosis se grafican en la Figura 44.

Fatiga La fatiga promediada de cada grupo de concentración de dosis (placebo, 80 mg, 160 mg y 320 mg) del anticuerpo monoclonal Abl demostró aumentos en la puntuación de subescala Facit-F FS promedio para algunos de los grupos de concentración de dosis en la población de pacientes por un periodo de 8 semanas (Figura 45) . El cambio de la puntuación de se subescala Facit-F de referencia se gráfica en la Figura 46.

LISTADO DE SECUENCIAS Las secuencias biológicas referidas en la presente se proporcionan a continuación: SEQ ID NO: 1 VPPGEDSKDVAAPHRQPLTSSERIDKQIRYILDGISALRKETCNKSNMCESSKEALAENNLNL PKMAEKDGCFQSGFNEETCLVKIITGLLEFEVYLEYLQNRFESSEEQARAVQMST VLIQFLQ KKAKNLDAITTPDPTTNASLLTKLQAQNQWLQDMTTHLILRSF EFLQSSLRALRQ SEQ ID NO: 2 MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVSAAVGGTVTIKCQASQSINNELSWYQQKPG QRPKLLIYRASTLASGVSSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQQGYSLRNIDNAFGGG TEWVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNN SEQ ID NO : 3 ETGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSNYYVTWVRQAPGKGL EWIGIIYGSDETAYATWAIGRFTISKTSTTVDLKMTSLTAADTATYFCARDDSSDWDAKFNLW GQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK SEQ 10 NO: 4 QASQSINNELS SEQ ID NO: 5 RASTLAS SEQ ID NO: 6 QQGYSLRNIDNA SEQ ID NO: 7 NYYVT SEQ ID NO: 8 11YGSDETAYATWAIG SEQ ID NO: 9 DDSSD DAKFNL SEQ ID NO: 10 ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGA TGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCGGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACC ATCAAGTGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAATTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGG CAGCGTCCCAAGCTCCTGATCTATAGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCGCGGTTC AAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCT GCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTCTGAGGAATATTGATAATGCTTTCGGCGGAGGG ACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGAT GAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTT SEQ ID NO: 11 ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCG CTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGCC TCTGGATTCTCCCTCAGTAACTACTACGTGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTG GAATGGATCGGAATCATTTATGGTAGTGATGAAACGGCCTACGCGACCTGGGCGATAGGCCGA TTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAGCCGCGGAC. ACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGATAGTAGTGACTGGGATGCAAAATTTAACTTGTGG GGCCAAGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTG GCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGG SEQ ID NO: 12 CAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAATTATCC SEQ ID NO: 13 AGGGCATCCACTCTGGCATCT SEQ ID NO: 14 CAACAGGGTTATAGTCTGAGGAATATTGATAATGCT SEQ ID NO: 15 AACTACTACGTGACC SEQ ID NO: 16 ATCATTTATGGTAGTGATGAAACGGCCTACGCGACCTGGGCGATAGGC SEQ ID NO: 17 GATGATAGTAGTGACTGGGATGCAAAATTTAACTTG SEQ ID NO: 18 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSLSNYYVTWVRQAPGKGLEWVGIIYGSDETAYATWA IGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDDSSDWDAKFNL SEQ ID NO: 19 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSLSNYYVTWVRQAPGKGLEWVGIIYGSDETAYATSA IGRFTISRDNSKNTLYLQ NSLRAEDTAVYYCARDDSSD DAKF L SEQ ID NO: 20 IQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQSINNELSWYQQKPGKAPKLLIYRASTLASGVPSRFSG SGSGTDFTLTISSLQPDDFATYYCQQGYSLRNIDNA SEQ 10 NO: 21 MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVEVAVGGTVTINCQASETIYSWLSWYQQKPG QPPKLLIYQASDLASGVPSRFSGSGAGTEYTLTISGVQCDDAATYYCQQGYSGSNVDNVFGGG TEVWKRTVAAPSVFIFPPSDEQL SGTASVVCLLNNFYPREAK SEQ ID NO: 22 ETGLRWLLLVAVLKGVQCQEQL ESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLNDHAMG VRQAPGKG LEYIGFINSGGSARYASWAEGRFTISRTSTTVDLKMTSLTTEDTATYFCVRGGAV SIHSFDP WGPGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK SEQ ID NO: 23 QASETIYSWLS SEQ ID NO: 24 QASDLAS SEQ ID NO: 25 QQGYSGSNVDNV SEQ ID NO: 26 DHAMG SEQ ID NO: 27 FINSGGSARYASWAEG SEQ ID NO: 28 GGAVWSIHSFDP SEQ ID NO: 29 ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGA TGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACAGTCACC ATCAATTGCCAGGCCAGTGAGACCATTTACAGTTGGTTATCCTGGTATCAGCAGAAGCCAGGG CAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACCAGGCATCCGATCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGATTC AGCGGCAGTGGGGCTGGGACAGAGTACACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGTGACGATGCT GCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTGGTAGTAATGTTGATAATGTTTTCGGCGGAGGG ACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGAT GAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAG GCCAAAG SEQ ID NO: 30 ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGGAG CAGCTGAAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTTACCTGCACA GCCTCTGGATTCTCCCTCAATGACCATGCAATGGGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGG CTGGAATACATCGGATTCATTAATAGTGGTGGTAGCGCACGCTACGCGAGCTGGGCAGAAGGC CGATTCACCATCTCCAGAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAACCGAG GACACGGCCACCTATTTCTGTGTCAGAGGGGGTGCTGTTTGGAGTATTCATAGTTTTGATCCC TGGGGCCCAGGGACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCC CTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAG SEQ ID NO: 31 CAGGCCAGTGAGACCATTTACAGTTGGTTATCC SEQ ID NO: 32 CAGGCATCCGATCTGGCATCT SEQ ID NO: 33 CAACAGGGTTATAGTGGTAGTAATGTTGATAATGTT SEQ ID NO: 34 GACCATGCAATGGGC SEQ ID NO: 35 TTCATTAATAGTGGTGGTAGCGCACGCTACGCGAGCTGGGCAGAAGGC SEQ ID NO: 36 GGGGGTGCTGTTTGGAGTATTCATAGTTTTGATCCC SEQ ID NO: 37 MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVSISCQASQSVYDNNYLSWFQQ PGQPPKLLIYGASTLASGVPSRFVGSGSGTQFTLTITDVQCDDAATYYCAGVYDDDSDNAFGG GTEWV RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNF SEQ ID NO: 38 METGLRWLLLVAVL GVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSVYYMNWVRQAPG GL EWIGFITMSDNINYAS 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GAATGGATCGGATTCATTACAATGAGTGATAATATAAATTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCCGA TTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACAACCGAGGAC ACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGAGTCGTGGCTGGGGTACAATGGGTCGGTTGGATCTCTGG GGCCCAGGCACCCTCGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTG GCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGG SEQ ID NO: 47 CAGGCCAGTCAGAGTGTTTATGACAACAACTACTTATCC SEQ ID NO: 48 GGTGCATCCACTCTGGCATCT SEQ ID NO: 49 GCAGGCGTTTATGATGATGATAGTGATAATGCC SEQ ID NO: 50 GTCTACTACATGAAC SEQ ID NO: 51 TTCATTACAATGAGTGATAATATAAATTACGCGAGCTGGGCGAAAGGC SEQ ID NO: 52 AGTCGTGGCTGGGGTACAATGGGTCGGTTGGATCTC SEQ ID NO: 53 MDTRAPTQLLGLLLL LPGAICDPVLTQTPSPVSAPVGGTVSISCQASQSVYENNYLSWFQQK PGQPPKLLIYGASTLDSGVPSRFKGSGSGTQFTLTITDVQCDDAATYYCAGVYDDDSDDAFGG GTEVVVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNN SEQ ID NO: 54 METGLRWLLLVAVLKGVQCQEQLKESGGGLVTPGGTLTLTCTASGFSLNAYY NWVRQAPGKG LEWIGFITLNNNVAYANWAKGRFTFSKTSTTVDLKMTSPTPEDTATYFCARSRGWGAMGRLDL WGHGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK SEQ ID NO: 55 QASQSVYENNYLS SEQ ID NO: 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ID NO : 97 CTAGGCGGTTATGATGATGATGCTGATAATGCT SEQ ID NO : 98 GACTAT GCAAT GAGC SEQ ID NO : 99 ATCATTTATGCTGGTAGTGGTAGCACATGGTACGCGAGCTGGGCGAAAGGC SEQ ID NO: 100 GATGGATACGATGACTATGGTGATTTCGATCGATTGGATCTC SEQ ID NO: 101 MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVSAAVGGTVTIKCQASQSINNELSWYQQKSG QRPKLLIYRASTLASGVSSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQQGYSLRNIDNAFGGG TEWVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNF SEQ ID NO: 102 METGLRWLLLVAVLSGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSNYY TWVRQAPGKGL EWIGMIYGSDETAYANWAIGRFTIS TSTTVDLK TSLTAADTATYFCARDDSSDWDA FNLW GQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLV SEQ ID NO: 103 QASQSINNELS SEQ ID NO: 104 RASTLAS SEQ ID NO: 105 QQGYSLRNIDNA SEQ ID NO: 106 NYYMT SEQ ID NO: 107 MIYGSDETAYANWAIG SEQ ID NO: 108 DDSSD DAKFNL SEQ ID NO: 109 ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGA TGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCGGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACC ATCAAATGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAATTATCCTGGTATCAGCAGAAATCAGGG CAGCGTCCCAAGCTCCTGATCTATAGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCGCGGTTC 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VNGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCAK DYGGNVGW GYDL SEQ ID NO: 364 QASQSVYQNNYLS SEQ ID NO: 365 GAATLAS SEQ ID NO: 366 AGAYRDVDS SEQ ID NO: 367 STYYIY SEQ ID NO: 368 CIDAGSSGSTYYATWVNG SEQ ID NO: 369 DYGGNVGWGYDL SEQ ID NO: 370 ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACA TTTGCTCAAGTGCTGACCCAGACTCCATCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACC ATCAATTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATCAGAACAACTACTTATCCTGGTTTCAGCAGAAA CCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCGGCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCG CGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGAC GATGCTGCCACTTACTACTGTGCAGGCGCTTATAGGGATGTGGATTCT SEQ ID NO: 371 ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCG TTGGAGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCAAGCCTGGGGCATCCCTGACACTCACCTGCACAGCC TCTGGATTCTCCTTTACTAGTACCTACTACATCTACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGG CTGGAGTGGATCGCATGTATTGATGCTGGTAGTAGTGGTAGCACTTACTACGCGACCTGGGTG AATGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATGACCAGTCTG ACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAAATGGGATTATGGTGGTAATGTTGGTTGG 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ID NO: 426 MDTRAPTQLLGLLLL LPGARCDWMTQTPASVSAAVGGTVTIKCQASEDIESYLAWYQQKPG QPPKLLIYGASNLESGVSSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQCTYGIISISDGNA SEQ ID NO: 427 ETGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYFMTWVRQAPGEGL EYIGFMNTGDNAYYASWAKGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARVLWAYGAFNI SEQ NO: 428 QASEDIESYLA SEQ ID NO: 429 GASNLES SEQ ID NO: 430 QCTYGIISISDGNA SEQ ID NO: 431 SYF T SEQ ID NO: 432 F NTGDNAYYASWAKG SEQ ID NO: 433 VLVVAYGAFNI SEQ ID NO: 434 ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGA TGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACC ATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGGACATTGAAAGCTATCTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGG CAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCAATCTGGAATCTGGGGTCTCATCGCGGTTC AAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCT GCCACTTACTATTGTCAATGCACTTATGGTATTATTAGTATTAGTGATGGTAATGCT SEQ ID NO: 435 ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCG GTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTG 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ID NO: 698 GCTATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATC ACTTGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAGTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAA GCCCCTAAGCTCCTGATCTATAGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGC GGCAGTGGATCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCA ACTTATTACTGCCAACAGGGTTATAGTCTGAGGAACATTGATAATGCTTTCGGCGGAGGGACC AAGGTGGAAATCAAACGTACG SEQ ID NO: 699 AIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQSINNELSWYQQKPGKAPKLLIYRASTLASGVPSRFS GSGSGTDFTLTISSLQPDDFATYYCQQGYSLRNIDNAFGGGTKVEIKRT SEQ ID NO: 700 GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCC TGTGCAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAACTACTACGTGACCTGGGTCCGTCAGGCTCCAGGG AAGGGGCTGGAGTGGGTCGGCATCATCTATGGTAGTGATGAAACCGCCTACGCTACCTCCGCT ATAGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACCCTGTATCTTCAAATGAACAGC CTGAGAGCTGAGGACACTGCTGTGTATTACTGTGCTAGAGATGATAGTAGTGACTGGGATGCA AAGTTCAACTTGTGGGGCCAAGGGACCCTCGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 701 GCTATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATC 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GGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCTGCC ACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTCTGAGGAATATTGATAATGCTTTCGGCGGAGGGACC GAGGTGGTGGTCAAACGT SEQ ID NO: 722 ATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACT TGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAGTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCC CCTAAGCTCCTGATCTATAGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGC AGTGGATCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACT TATTACTGCCAACAGGGTTATAGTCTGAGGAACATTGATAATGCTTTCGGCGGAGGGACCAAG GTGGAAATCAAACGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAG TTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAA GTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAG GACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAG AAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGC TTCAACAGGGGAGAGTGT SEQ ID NO: 723 GCTATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATC ACTTGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAGTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAA GCCCCTAAGCTCCTGATCTATAGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGC GGCAGTGGATCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCA ACTTATTACTGCCAACAGGGTTATAGTCTGAGGAACATTGATAATGCTTTCGGCGGAGGGACC AAGGTGGAAATCAAACGT SEQ ID NO: 724 GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCC TGTGCAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAACTACTACGTGACCTGGGTCCGTCAGGCTCCAGGG AAGGGGCTGGAGTGGGTCGGCATCATCTATGGTAGTGATGAAACCGCCTACGCTACCTCCGCT ATAGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACCCTGTATCTTCAAATGAACAGC CTGAGAGCTGAGGACACTGCTGTGTATTACTGTGCTAGAGATGATAGTAGTGACTGGGATGCA AAGTTCAACTTG SEQ ID NO: 725 CAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGC ACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAACTACTACGTGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAG GGGCTGGAATGGATCGGAATCATTTATGGTAGTGATGAAACGGCCTACGCGACCTGGGCGATA GGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAGCC GCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGATAGTAGTGACTGGGATGCAAAATTTAAC TTGTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGC SEQ ID NO: 726 MEKLLCFLVLTSLSHAFGQTDMSRKAFVFP ESDTSYVSL APLTKPL AFTVCLHFYTELSS TRGYSIFSYATKRQDNEILIFWS DIGYSFTVGGSEILFEVPEVTVAPVHICTSWESASGIVE F VDGKPRVR SLK GYTVGAEASIILGQEQDSFGGNFEGSQSLVGDIGNVNMWDFVLSPDEI NTIYLGGPFSPNVLNWRALKYEVQGEVFTKPQL P SEQ ID NO: 727 MLAVGCALLAALLAAPGAALAPRRCPAQEVARGVLTSLPGDSVTLTCPGVEPEDNATVH VLR KPAAGSHPSRWAGMGRRLLLRSVQLHDSGNYSCYRAGRPAGTVHLLVDVPPEEPQLSCFRKSP LSNVVCEWGPRSTPSLTTKAVLLVRKFQNSPAEDFQEPCQYSQESQKFSCQLAVPEGDSSFYI VSMCVASSVGSKFSKTQTFQGCGILQPDPPANITVTAVARNPRWLSVTWQDPHSWNSSFYRLR FELRYRAERSKTFTTWMVKDLQHHCVIHDAWSGLRHVVQLRAQEEFGQGEWSEWSPEAMGTPW TESRSPPAENEVSTP QALTTNKDDDNILFRDSANATSLPVQDSSSVPLPTFLVAGGSLAFGT LLCIAIVLRFKKTWKLRALKEGKTSMHPPYSLGQLVPERPRPTPVLVPLISPPVSPSSLGSDN TSSHNRPDARDPRSPYDISNTDYFFPR SEQ ID NO: 728 MLTLQTWVVQALFIFLTTESTGELLDPCGYISPESPWQLHSNFTAVCVLKE C DYFHVNAN YIVWKTNHFTIPKEQYTIINRTASSVTFTDIASLNIQLTCNILTFGQLEQNVYGITIISGLPP EKPKNLSCIVNEG KMRCEWDGGRETHLETNFTL SEWATHKFADCKAKRDTPTSCTVDYSTV YFVNIEVWVEAENALGKVTSDHINFDPVYKVKPNPPHNLSVINSEELSSILKLT TNPSIKSV IILKYNIQYRT DAST SQIPPEDTASTRSSFTVQDLKPFTEYVFRIRCMKEDGKGYWSDWSE EASGITYEDRPSKAPSFWYKIDPSHTQGYRTVQLVWKTLPPFEANGKILDYEVTLTRWKSHLQ NYTVNATKLTVNLTNDRYLATLTVRNLVG SDAAVLTIPACDFQATHPVMDLKAFPKDNMLWV EWTTPRESVKKYILE CVLSDKAPCITDWQQEDGTVHRTYLRGNLAESKCYLITVTPVYADGP GSPESIKAYL QAPPSKGPTVRTKKVGKNEAVLE DQLPVDVQNGFIRNYTIFYRTIIGNETA VNVDSSHTEYTLSSLTSDTLYMVRMAAYTDEGGKDGPEFTFTTPKFAQGEIEAIWPVCLAFL LTTLLGVLFCFN RDLIKKHIWPNVPDPS SHIAQWSPHTPPRHNFNSKDQMYSDGNFTDVSV VEIEANDKKPFPEDLKSLDLFK EKINTEGHSSGIGGSSCMSSSRPSISSSDENESSQNTSST VQYSTWHSGYRHQVPSVQVFSRSESTQPLLDSEERPEDLQLVDHVDGGDGILPRQQYF QNC SQHESSPDISHFERSKQVS.SVNEEDFVRLKQQISDHISQSCGSGQMKMFQEVSAADAFGPGTE GQVERFETVGMEAATDEG PKSYLPQTVRQGGYMPQ

Claims (76)

REIVINDICACIONES

1. Un método para prevenir o tratar la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre en un paciente diagnosticado con un trastorno asociado con la IL-6, que comprende administrarle al paciente un anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6, por el cual se previene o mejora la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre, y monitorear al paciente para evaluar la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 se une específicamente al/a los mismo (s) epitopo(s) lineal (es) o conformacional (es) y/o compite para unirse al/a los mismo (s) epitopo(s) lineal (es) o conformacional (es) en un polipéptido de IL-6 intacta humana o un fragmento del mismo como un anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 y anticuerpos quiméricos, humanizados, de cadena simple o fragmentos de los mismos que se unen específicamente a IL-6.

2. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo anti-IL-6 se une al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) y/o compite por unirse al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es ) en un polipéptido de IL-6 intacta humana o un fragmento del mismo como Abl.

3. El método de la reivindicación 1 donde el anticuerpo anti-IL-6 comprende la cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 657 y la cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 709 respectivamente, o una variante de las mismas, donde dichas secuencias de cadena pesada o ligera variable comprenden una o más mutaciones de sustitución que no afectan sustancialmente la unión al anticuerpo IL-6 con respecto a un anticuerpo anti-IL-6 que no tiene dichas mutaciones.

4. El método de la reivindicación 3 donde el anticuerpo anti-IL-6 comprende la cadena pesada variable en la SEQ ID NO: 657 y la cadena ligera variable en la SEQ ID NO: 709 respectivamente.

5. El método de la reivindicación 3 o 4 donde el anticuerpo anti-IL-6 comprende adicionalmente las regiones constantes de cadena pesada y cadena ligera comprendidas en las SEQ ID NO: 588 y SEQ ID NO: 586 respectivamente.

6. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 se une específicamente al/a los mismo (s) epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es) en' un polipéptido de IL-6 intacta humana o fragmento del mismo como un anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35, o Ab36 y el anticuerpo quimérico, humanizado, de cadena simple o fragmentos del mismo que se une específicamente a la IL-6.

7. El método de la reivindicación 6, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 se une específicamente al/a los mismos epítopo(s) lineal (es) o conformacional (es ) en un polipéptido de IL-6 intacta humana o un fragmento del mismo como Abl.

8. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 se une específicamente a los mismos epítopos lineales o conformacionales en un polipéptido de IL-6 intacta o fragmento del mismo que está(n) específicamente unidos por Abl y donde dicho(s) .epítopo(s), cuando se establece (n) por mapeo epitópico usando fragmentos de péptidos lineales superpuestos que abarcan todo el largo del polipéptido de IL-6 humana nativa, incluye (n) uno o más residuos comprendidos en fragmentos de IL-6 que se seleccionan de aquellos que respectivamente comprenden residuos de aminoácidos 37-51, residuos de aminoácidos 70-84, residuos de aminoácidos 169-183, residuos de aminoácidos 31-45 y/o residuos de aminoácidos 58-72.

9. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 comprende al menos 2 regiones determinantes de complementariedad (CDR) en cada región ligera variable y pesada variable que son idénticas a aquellas contenidas en un anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28; Ab29, Ab30f Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35 o Ab36.

10. El método de la reivindicación 9, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 comprende al menos 2 regiones determinantes de complementariedad (CDR) en cada región ligera variable y pesada variable que son idénticas a aquellas contenidas en Abl.

11. El método de la reivindicación 9, donde todas las CDR en el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 son idénticas a las CDR contenidas en un anticuerpo anti-IL-6 que comprende Abl, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, AblO, Abll, Abl2, Abl3, Abl4, Abl5, Abl6, Abl7, Abl8, Abl9, Ab20, Ab21, Ab22, Ab23, Ab24, Ab25, Ab26, Ab27, Ab28, Ab29, Ab30, Ab31, Ab32, Ab33, Ab34, Ab35 o Ab36.

12. El método de la reivindicación 9, donde todas las CDR en el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 son idénticas a las CDR contenidas en Abl.

13. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 es aglicosilado .

14. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 contiene una región Fe que ha sido modificada para alterar la función efectora, semivida, proteólisis y/o glicosilación .

15. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 es un anticuerpo humano, humanizado, de cadena simple o quimérico.

16. El método de la reivindicación 15, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 es un anticuerpo humanizado que proviene de un anticuerpo anti-IL-6 de conejo (progenitor) .

17. El método de la reivindicación 16, donde las regiones flanqueantes (FR) en la región ligera variable y la región pesada variable de dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 respectivamente son FR humanas que no están modificadas o que han sido modificadas mediante la sustitución de como máximo 2 o 3 residuos de FR humanas en la región de cadena ligera o pesada variable con los correspondientes residuos de FR del anticuerpo progenitor de conejo, y donde dichas FR humanas provienen de secuencias de anticuerpo de cadena pesada y ligera variable que han sido seleccionadas de una biblioteca de secuencias de anticuerpo de linea germinal humanas basándose en su alto nivel de homología a las correspondientes regiones de cadena pesada o ligera variable de conejo relativas a otras secuencias de anticuerpo de línea germinal humanas contenidas en la biblioteca.

18. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 se administra al paciente con una frecuencia de como máximo una vez por período de aproximadamente cuatro semanas.

19. El método de la reivindicación 18, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 se administra al paciente con una frecuencia de como máximo una vez por periodo de aproximadamente ocho semanas.

20. El método de la reivindicación 19, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-ß se administra al paciente con una frecuencia de como máximo una vez por periodo de aproximadamente doce semanas.

21. El método de la reivindicación 20, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 se administra al paciente con una frecuencia de como máximo una vez por periodo de aproximadamente dieciséis semanas.

22. El método de cualquiera de las reivindicaciones 18-21 donde el anticuerpo administrado comprende las mismas CDR que Abl o cualquiera de las secuencias de anticuerpo pesada y ligera variable comprendidas en las Figuras 34-37.

23. El método de la reivindicación 22 donde el anticuerpo comprende las secuencias pesada variable y ligera variable en las SEQ ID NO: 657 o SEQ ID NO: 709 o cualquiera de las secuencias de anticuerpo pesada y ligera variable comprendidas en las Figuras 34-37.

24. El método de la reivindicación 22 o 23 donde dicho anticuerpo comprende adicionalmente las secuencias pesada constante y ligera constante en las SEQ ID NO: 588 y SEQ ID NO: 586 respectivamente.

25. El método de cualquiera de las reivindicaciones 18-24, donde la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre del paciente permanece mejorada durante un periodo completo entre dos administraciones consecutivas del anticuerpo anti-IL-6.

26. El método de la reivindicación 1, donde al paciente se le diagnosticó cáncer seleccionado de acantoma, carcinoma de células acinicas, neuroma acústico, melanoma lentiginoso acral, acrospiroma, leucemia eosinofilica aguda, leucemia linfoblástica aguda, leucemia megacarioblástica aguda, leucemia monocitica aguda, leucemia mieloblástica aguda con maduración, leucemia mieloide aguda de células dendriticas, leucemia mieloide aguda, leucemia promielocitica aguda, adamantinoma, adenocarcinoma, carcinoma quístico adenoide, adenoma, tumor odontogénico adenomatoide, carcinoma adrenocortical, leucemia de células T del adulto, leucemia agresiva de células NK, cánceres relacionados con SIDA, linfoma relacionado con SIDA, sarcoma alveolar de partes blandas, fibroma ameloblástico, cáncer anal, linfoma anaplásico de células grandes, cáncer anaplásico de tiroides, linfoma angioinmunoblástico de células T, angiomiolipoma, angiosarcoma, cáncer de apéndice, astrocitoma, tumor rabdoide teratoide atipico, carcinoma de células básales, carcinoma de tipo basal, leucemia de células B, linfoma de células B, carcinoma de los conductos de Bellini, cáncer del tracto biliar, cáncer de vejiga, blastoma, cáncer de hueso, tumor de hueso, glioma de tronco cerebral, tumor cerebral, cáncer de mama, tumor de Brenner, tumor bronquial, carcinoma bronquioloalveolar, tumor de Brown, linfoma de Burkitt, cáncer de sitio primario desconocido, tumor carcinoide, carcinoma, carcinoma in situ, carcinoma de pene, carcinoma de sitio primario desconocido, carcinosarcoma, enfermedad de Castleman, tumor embrionario del sistema nervioso central, astrocitoma cerebeloso, astrocitoma cerebral, cáncer cervical, colangiocarcinoma, condroma, condrosarcoma, cordoma, coriocarcinoma, papiloma del plexo coroideo, leucemia linfocitica crónica, leucemia monocitica crónica, leucemia mielógena crónica, enfermedad mieloproliferativa crónica, leucemia neutrofilica crónica, tumor de células claras, cáncer de colon, cáncer colorrectal, craniofaringioma, linfoma cutáneo de células T, enfermedad de Degos, dermatofibrosarcoma protuberans, quiste dermoide, tumor desmoplásico de células redondas pequeñas, linfoma difuso de células B grandes, tumor neuroepitelial disembrioplásico, carcinoma embrionario, tumor de seno endodérmico, cáncer endometrial, cáncer uterino endometrial, tumor endometrioide, linfoma de células T asociado a enteropatia, ependimoblastoma, ependimoma, sarcoma epitelioide, eritroleucemia, cáncer de esófago, estesxoneuroblastoma, tumor de la familia de Ewing, sarcoma de la familia de Ewing, sarcoma de Ewing, tumor extracraneal de células germinales, tumor extragonadal de células germinales, cáncer de ducto biliar extrahepático, enfermedad de Paget extramamaria, cáncer de tubo falopiano, Fetus in fetu, fibroma, fibrosarcoma, linfoma folicular, cáncer folicular de tiroides, cáncer de vesícula biliar, cáncer de vesícula biliar, ganglioglioma, ganglioneuroma, cáncer gástrico, linfoma gástrico, cáncer gastrointestinal, tumor carcinoide gastrointestinal, tumor carcinoide, tumor del estroma gastrointestinal, tumor del estroma gastrointestinal, tumor de células germinales, germinoma, coriocarcinoma gestacional, tumor trofoblástico gestacional, tumor óseo de células gigantes, glioblastoma multiforme, glioma, gliomatosis cerebri, tumor glómico, glucagonoma, gonadoblastoma, tumor de células granulosas, leucemia de células vellosas, leucemia de células vellosas, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de corazón, hemangioblastoma, hemangiopericitoma, hemangiosarcoma, malignidad hematológica, carcinoma hepatocelular , linfoma hepatoesplénico de células T, síndrome de cáncer de mama y ovario hereditario, linfoma Hodgkin, linfoma de Hodgkin, cáncer hipofaríngeo, glioma hipotalámico, cáncer de mama inflamatorio, melanoma intraocular, carcinoma de células de los islotes, tumor de células de los islotes, leucemia juvenil mielomonocítica, sarcoma Kaposi, sarcoma de Kaposi, cáncer de riñon, tumor de Klatskin, tumor de Krukenberg, cáncer de laringe, cáncer de laringe, melanoma léntigo maligno, leucemia, leucemia, cáncer del labio y la cavidad oral, liposarcoma, cáncer de pulmón, luteoma, linfangioma, linfangiosarcoma, linfoepitelioma, leucemia linfoide, linfoma, macroglobulinemia, histiocitoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno, histiocitoma fibroso maligno óseo, glioma maligno, mesotelioma maligno, tumor maligno de vaina nerviosa periférica, tumor rabdoide maligno, tumor tritón maligno, linfoma MALT, linfoma de células del manto, leucemia de mastocitos, tumor mediastinal de células germinales, tumor mediastinal, cáncer medular de tiroides, meduloblastoma, meduloblastoma, meduloepitelioma, melanoma, melanoma, meningioma, carcinoma de células de Merkel, mesotelioma, mesotelioma, cáncer escamoso metastásico del cuello con tumor primario oculto, carcinoma urotelial metastásico, tumor Mülleriano mixto, leucemia monocítica, cáncer de boca, tumor mucinoso, síndrome de neoplasia endocrina múltiple, mieloma múltiple, mieloma múltiple, micosis fungoides, micosis fungoides, enfermedad mielodisplásica, síndromes mielodisplásicos, leucemia mieloide, sarcoma mieloide, enfermedad mieloproliferativa, mixoma, cáncer de la cavidad nasal, cáncer nasofaríngeo, carcinoma nasofaríngeo, neoplasma, neurinoma, neuroblastoma, neuroblastoma, neurofibroma, neuroma, melanoma nodular, linfoma no Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer de piel no melanoma, cáncer de pulmón no microcítico, oncología ocular, oligoastrocitoma, oligodendroglioma, oncocitoma, meningioma de la vaina del nervio óptico, cáncer oral, cáncer oral, cáncer orofaríngeo, osteosarcoma, osteosarcoma, cáncer de ovario, cáncer de ovario, cáncer epitelial de ovario, tumor de células germinales del ovario, tumor de ovario de bajo potencial maligno, enfermedad de Paget de la mama, tumor de Pancoast, cáncer pancreático, cáncer pancreático, cáncer papilar de tiroides, papilomatosis , paraganglioma, cáncer de seno paranasal, cáncer de paratiroides, cáncer de pene, tumor perivascular de células epitelioides, cáncer faríngeo, feocromocitoma, tumor parénquima pineal de diferenciación intermedia, pineoblastoma, pituicitoma, adenoma pituitario, tumor pituitario, neoplasma de células plasmáticas, blastoma pleuropulmonar, poliembrioma, linfoma precursor linfoblástico de células T, linfoma primario del sistema nervioso central, linfoma de efusión primaria, cáncer hepatocelular primario, cáncer hepático primario, cáncer peritoneal primario, tumor neuroectodermal primitivo, cáncer de próstata, pseudomixoma peritoneal, cáncer rectal, carcinoma de células renales, carcinoma del tracto respiratorio relacionado con el gen NUT en el croomosoma 15, retinoblastoma, rabdomioma, rabdomiosarcoma, transformación de Richter, teratoma sacrococcigeo, cáncer de la glándula salival, sarcoma, Schwannomatosis, carcinoma de glándulas sebáceas, neoplasma secundario, seminoma, tumor seroso, tumor de células de Sertoli-Leydig, tumor del estroma de los cordones sexuales, síndrome de Sézary, carcinoma de células en anillo de sello, cáncer de piel, tumor de células redondas, pequeñas y azules , carcinoma de células pequeñas, cáncer de pulmón microcítico, linfoma de células pequeñas, cáncer del intestino delgado, sarcoma de tejido blando, somatoestatinoma, verruga del deshollinador, tumor de la médula espinal, tumor espinal, linfoma de la zona marginal esplénica, carcinoma de células escamosas, cáncer de estómago, melanoma superficial diseminante, tumor neuroectodermal primitivo supratentorial, tumor epitelial superficial del ovario, sarcoma sinovial, leucemia linfoblástica aguda de células T, leucemia linfocitica granular grande de células T, leucemia de células T, linfoma de células T, leucemia prolinfocitica de células T, teratoma, cáncer linfático terminal, cáncer testicular, tecoma, cáncer de garganta, carcinoma timico, timoma, cáncer de tiroides, cáncer de células de transición de la pelvis renal y el uréter, carcinoma de células de transición, cáncer uracal, cáncer uretral, neoplasma urogenital, sarcoma uterino, melanoma uveal, cáncer vaginal, síndrome de Verner Morrison, carcinoma verrugoso, glioma de la vía visual, cáncer vulvar, macroglobulinemia de Waldenstróm, tumor de Warthin, tumor de Wilms, o cualquier combinación de los mismos.

27. El método de la reivindicación 26, donde el cáncer se selecciona de cáncer colorrectal, cáncer de pulmón no microcítico, colangiocarcinoma, mesotelioma, enfermedad, de Castleman, carcinoma de células renales o cualquier combinación de los mismos.

28. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 comprende una secuencia de polipéptidos de VH que comprende: SEQ ID NO: 3, 18, 19, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 117, 118, 123, 139, 155, 171, 187, 203, 219, 235, 251, 267, 283, 299, 315, 331, 347, 363, 379, 395, 411, 427, 443, 459, 475, 491, 507, 523, 539, 555, 571, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 668, 672, 676, 680, 684, 688, 691, 692, 704, o 708; y comprende adicionalmente una secuencia de polipéptido VL que comprende: SEQ ID NO: 2, 20, 21, 37, 53, 69, 85, 101, 119, 122, 138, 154, 170, 186, 202, 218, 234, 250, 266, 282, 298, 314, 330, 346, 362, 378, 394, 410, 426, 442, 458, 474, 490, 506, 522, 538, 554, 570, 647, 651, 660, 666, 667, 671, 675, 679, 683, 687, 693, 699, 702, 706, o 709 o una variante de las mismas donde uno o más de los residuos flanqueantes (residuos FR) en dicho polipéptido de VH 0 VL fue sustituido por otro residuo de aminoácido que da como resultado un anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 que se une específicamente a IL-6 humana.

29. El método de la reivindicación 28, donde uno o más de dichos residuos FR se sustituyen por un aminoácido presente en el sitio correspondiente en un anticuerpo anti-IL-6 de conejo progenitor desde donde provinieron las regiones determinantes de complementariedad (CDR) contenidas en dichos polipéptidos de H o VL o por una sustitución conservadora de aminoácidos.

30. El anticuerpo de la reivindicación 28, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 es humanizado.

31. El anticuerpo de la reivindicación 28, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 es quimérico.

32. El anticuerpo de la reivindicación 31, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 comprende adicionalmente una Fe humana.

33. El método de la reivindicación 32, donde dicha Fe humana proviene de IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgG5, IgG6, IgG7, IgG8, IgG9, IgGlO, IgGll, IgG12, IgG13, IgG14, IgG15, IgG16, IgG17, IgG18 o IgG19.

34. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 comprende un polipéptido que tiene al menos 90% de homología de secuencia con una o más de las secuencies de polipéptidos de la SEQ ID NO: 3, 18, 19, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 117, 118, 123, 139, 155, 171, 187, 203, 219, 235, 251, 267, 283, 299, 315, 331, 347, 363, 379, 395, 411, 427, 443, 459, 475, 491, 507, 523, 539, 555, 571, 652, 656, 657, 658, 661, 664, 665, 668, 672, 676, 680, 684, 688, 691, 692, 704, 708, 2, 20, 21, 37, 53, 69, 85, 101, 119, 122, 138, 154, 170, 186, 202, 218, 234, 250, 266, 282, 298, 314, 330, 346, 362, 378, 394, 410, 426, 442, 458, 474, 490, 506, 522, 538, 554, 570, 647, 651, 660, 666, 667, 671, 675, 679, 683, 687, 693, 699, 702, 706, o 709 o cualquiera de las secuencias pesada variable y ligera variable contenidas en cualquiera de las Figuras 34-37.

35. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 tiene una semivida de eliminación de al menos alrededor de 22 días.

36. El método de la reivindicación 35, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-ß tiene una semivida de eliminación de al menos alrededor de 25 dias.

37. El método de la reivindicación 36, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 tiene una semivida de eliminación de al menos alrededor de 30 dias.

38. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 se administra conjuntamente con un agente quimioterapéutico .

39. El método de la reivindicación 38, donde el agente quimioterapéutico se selecciona de antagonistas de VEGF, antagonistas de EGFR, platinos, taxoles, irinotecano, 5-fluorouracilo, gemcitabina, leucovorina, esteroides, ciclofosfamida, melfalán, alcaloides de la vinca, vinblastina, mustinas, inhibidores de tirosina cinasa, radioterapia, antagonistas de hormonas sexuales, moduladores selectivos del receptor de andrógeno, moduladores selectivos del receptor de estrógeno, antagonistas de PDGF, antagonistas de TNF, antagonistas de IL-1, interleucinas , antagonistas de IL-12R, anticuerpos monoclonales conjugados con toxinas, anticuerpos monoclonales específicos contra antígenos tumorales, Erbitux™, Avastin™, Pertuzumab, anticuerpos anti-CD20, Rituxan®, ocrelizumab, ofatumumab, DXL625, Herceptin®, o cualquier combinación de los mismos.

40. El método de la reivindicación 39, donde el agente quimioterapéutico comprende un inhibidor de JAK1, JAK2, JAK3 o SYK.

• 41. El método de la reivindicación 39 donde dichas interleucinas incluyen IL-12 e IL-2.

42. El método de la reivindicación 39 donde el alcaloide de la vinca comprende vinblastina, vincristina, vindesina o vinorelbina .

43. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 está directa o indirectamente unido a una etiqueta detectable o un agente terapéutico .

44. El método de la reivindicación 1, donde el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 es Abl o un fragmento del mismo .

45. El método de la reivindicación 1, donde la enfermedad o afección se selecciona de cáncer, artritis reumatoide, SIDA, enfermedad coronaria, deshidratación, desnutrición, exposición al plomo, malaria, enfermedad respiratoria, vejez, hipotiroidismo, tuberculosis, hipopituitarismo, neurastenia, hipernatremia, hiponatremia, enfermedad renal, esplénica, espondilitis anquilosante, síndrome del declive (retraso del crecimiento) o cualquier combinación de las mismas.

46. El método de la reivindicación 1 que también comprende la administración de un antagonista de un factor asociado con la caquexia, un factor asociado con la debilidad, un factor asociado con la fatiga y/o un factor asociado con la fiebre .

47. El método de la reivindicación 45, donde el factor asociado con la caquexia, el factor asociado con la debilidad, el factor asociado con la fatiga y/o el factor asociado con la fiebre se selecciona de factor de necrosis tumoral alfa, interferón gama, interleucina 1 alfa, interleucina 1 beta, interleucina 6, factor que induce la proteólisis, factor que inhibe la leucemia o cualquier combinación de los mismos.

48. El método de la reivindicación 1, que también comprende la administración de un agente anti-caquexia seleccionado de cannabis, dronabinol (Marinol™) , nabilona (Cesamet) , cannabidiol, cannabicromeno, tetrahidrocannabinol, Sativex, acetato de megestrol o cualquier combinación de los mismos .

49. El método de la reivindicación 1, que comprende además la administración de un agente antináusea o antiemético seleccionado de antagonistas del receptor 5-HT3, ajwain, alizaprida, anticolinérgicos, antihistaminas , aprepitant, benzodiazepinas, cannabicromeno, cannabidiol, cannabinoides , cannabis, casopitant, clorpromazina, ciclizina, dexametasona, dexametasona, dimenhidrinato (Gravol™) , difenhidramina, dolasetrón, domperidona, antagonistas de dopamina, doxilamina, dronabinol (Marinol™) , droperidol, emetrol, jenjibre, granisetrón, haloperidol, hidroxizina, hioscina, lorazepam, meclizina, metoclopramida, midazolam, muscimol, nabilona (Cesamet) , antagonistas del receptor nkl, ondansetrón, palonosetrón, menta, Fenergam, proclorperazina, Promacot, prometazina, Pentazina, propofol, sativex, tetrahidrocannabinol, trimetobenzamida, tropisetrón, nandrolona, stilbestrol, talidomida, lenalidomida, agonistas de grelina, antagonistas de miostatina, anticuerpos anti-miostatina, moduladores selectivos del receptor de andrógenos, moduladores selectivos del receptor de estrógeno, antagonistas de angiotensina AII, agonistas del receptor adrenérgico beta dos, agonistas del receptor adrenérgico beta tres o cualquier combinación de los mismos.

50. El método de la reivindicación 1 donde la fiebre del paciente se evalúa mediante la medición de la temperatura corporal del paciente.

51. El método de la reivindicación 1, que comprende adicionalmente : medir la temperatura corporal del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-IL-6 y administrar el anticuerpo o fragmento del anticuerpo anti-IL-6 si la temperatura corporal del paciente es mayor que aproximadamente 38 °C.

52. El método de la reivindicación 1, que comprende adicionalmente: medir la temperatura corporal del paciente dentro de las 24 horas anteriores a la administración del anticuerpo anti-IL-6 y administrar el anticuerpo o fragmento del anticuerpo anti-IL-6 si la medición de la temperatura corporal del paciente indica que tiene fiebre.

53. El método de la reivindicación 1, que comprende adicionalmente : medir el peso corporal del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-IL-6 y administrar el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 si el peso del paciente disminuyó en más de aproximadamente 5% dentro de aproximadamente 30 días o si el índice de masa corporal magra del paciente es menor a aproximadamente 17 kg / m2 (paciente masculino) o menor a aproximadamente 14 kg / m2 (paciente femenina) .

54. El método de la reivindicación 1, que comprende adicionalmente: medir la fuerza muscular del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-IL-6 y administrar el anticuerpo o fragmento de anticuerpo anti-IL-6 si la fuerza muscular del paciente disminuyó en un porcentaje mayor a aproximadamente el 20% dentro de aproximadamente 30 días.

55. El método de la reivindicación 1, que da como resultado una mejora prolongada de la caquexia, la debilidad, la fatiga y/o la fiebre en el paciente.

56. El método de la reivindicación 1, donde la masa corporal del paciente se aumenta en aproximadamente 1 kilogramo dentro de aproximadamente 4 semanas desde la administración del anticuerpo o fragmento del anticuerpo anti-IL-6.

57. El método de la reivindicación 1, donde la caquexia del paciente se puede mejorar de forma medible dentro de aproximadamente 4 semanas desde la administración del anticuerpo anti-IL-6.

58. El método de la reivindicación 57, donde la caquexia del paciente se evalúa mediante la medición de la masa corporal total del paciente, la masa corporal magra, el índice de masa corporal magra y/o la masa corporal magra apendicular.

59. El método de la reivindicación 58, donde la medición de la masa corporal del paciente puede descontar (restar) el peso estimado del o de los tumores del paciente y/o la o las recolecciones de fluido extravascular .

60. El método de la reivindicación 57, donde la caquexia del paciente permanece mejorada de forma medible aproximadamente 8 semanas después de la administración del anticuerpo anti-IL-6.

61. El método de la reivindicación 1, donde la debilidad del paciente se puede mejorar de forma medible dentro de aproximadamente 2 semanas desde la administración del anticuerpo anti-IL-6.

62. El método de la reivindicación 61, donde la debilidad del paciente permanece mejorada de forma medible aproximadamente 12 semanas después de la administración del anticuerpo anti-IL-6.

63. El método de la reivindicación 1, donde la fatiga del paciente se puede mejorar de forma medible dentro de aproximadamente 1 semana desde la administración del anticuerpo anti-IL-6.

6 . El método de la reivindicación 63, donde la fatiga del paciente se mide por la prueba FACIT-F FS.

65. El método de la reivindicación 64, donde la puntuación de FACIT-F FS del paciente se mejora en al menos aproximadamente 10 puntos.

66. El método de la reivindicación 63, donde la fatiga del paciente permanece mejorada de forma medible aproximadamente 12 semanas después de la administración del anticuerpo anti-IL-6.

67. El método de la reivindicación 1, donde la fiebre del paciente se puede mejorar de forma medible dentro de aproximadamente 1 semana desde la administración del anticuerpo anti-IL-6.

68. El método de la reivindicación 67, donde la fiebre del paciente permanece mejorada de forma medible aproximadamente 12 semanas después de la administración del anticuerpo anti-IL-6.

69. El método de la reivindicación 1, por el cual se mejora la supervivencia del paciente.

70. El método de la reivindicación 1, por el cual se mejora la calidad de vida del paciente.

71. El método de cualquiera de las reivindicaciones 26-70 donde el anticuerpo anti-IL-6 comprende la cadena pesada variable de la SEQ ID NO: 657 y la cadena ligera variable de la SEQ ID NO: 709 respectivamente, o cualquiera de las secuencias pesada variable o ligera variable contenidas en las Figuras 34-37 o una variante de cualquiera de las anteriores, donde dichas variantes de dichas secuencias pesada variable y/o ligera variable comprenden una o más mutaciones de sustitución que no afectan sustancialmente la unión al anticuerpo IL-6 con respecto a un anticuerpo anti-IL-6 que no tiene dichas mutaciones .

72. El método de la reivindicación 71 donde el anticuerpo anti-IL-6 comprende la cadena pesada variable en la SEQ ID NO: 657 y la cadena ligera variable en la SEQ ID NO: 709 respectivamente.

73. El método de la reivindicación 71 donde el anticuerpo anti-IL-6 comprende adicionalmente las regiones constantes de cadena pesada y cadena ligera comprendidas en las SEQ ID NO: 588 y SEQ ID NO: 586 respectivamente.

74. El método de la reivindicación 72 donde el anticuerpo anti-IL-6 comprende adicionalmente las regiones constantes de cadena pesada y cadena ligera comprendidas en las SEQ ID NO: 588 y SEQ ID NO: 586 respectivamente.

75. El método de cualquiera de las reivindicaciones 1-74, donde el anticuerpo anti-IL-6 contiene todas las CDR contenidas en el anticuerpo humanizado contenido en las Figuras 34-37.

76. El método de cualquiera de las reivindicaciones 1-74 donde el anticuerpo anti-IL-6 contiene las secuencias pesada y ligera variable en las SEQ ID No. 657 y SEQ ID No. 709.