MX2008007081A - Derivados de acido antranilico utiles en el tratamiento de infeccion con virus de hepatitis c - Google Patents

Abstract

La presente invención estádirigida a compuestos de la fórmula (ver fórmula (I)) en donde R1 se selecciona del grupo que consiste de -C(O)R6 y (ver fórmula) en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de H, alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo o arilo, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, G se selecciona de H o hidroxilo, y es O, NH o S, X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo, cicloalquilo, perfluoroalquilo, alcoxi, alquiltio, amino, alquilamino, dialquilamino, y CN, y n es 0, 1, 2ó3, o un profármaco, una sal farmacéuticamente aceptable, o un metabolito farmacéuticamente activo del mismo;la invención también estádirigida a composiciones que contienen compuestos de la invención y métodos de uso tanto de los compuestos de la invención como composiciones de los mismos para tratar o prevenir infección por virus de hepatitis C, o para inhibir la replicación de virus de hepatitis C.

Description

DERIVADOS DE ACIDO ANTRANILICO UTILES EN EL TRATAMIENTO DE INFECCION CON VIRUS DE HEPATITIS C CAMPO DE LA INVENCION Esta invención está dirigida a una serie de compuestos de ácido antranílico que son útiles en el tratamiento de infecciones virales de hepatitis C.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La hepatitis C es una infección viral común que puede conducir á hepatitis crónica, cirrosis, insuficiencia hepática, y carcinoma hepatocelular. La infección por el virus de hepatitis C (HCV) conduce a hepatitis crónica en por lo menos 85% de los casos, es la razón principal para un trasplante de hígado, y es responsable de por lo menos 10,000 muertes anualmente en los Estados Unidos (Hepatology, 1997, 26 (Suppl. 1 ), 2S-10S). El virus de hepatitis C es un miembro de la familia Flaviviridae, y el genoma de HCV es un ARN lineal de una sola cadena de sentido positivo (Hepatology, 1997, 26 (Suppl. 1 ), 1 1 S-14S). HCV despliega heterogeneidad genética extensiva; por lo menos 6 genotipos y más de 50 subtipos han sido identificados. No hay vacuna efectiva para prevenir infección por HCV. La única terapia actualmente disponible es el tratamiento con ¡nterferón-a (INF-a) o terapia de combinación de INF-a con el análogo de nucleósido ribavirin (Antiviral Chemistry and Chemotherapy, 1997, 8, 281 -301 ). Sin embargo, sólo aproximadamente 40% de los pacientes tratados desarrollan una respuesta sostenida, por lo que hay necesidad de agentes terapéuticos anti-HCV más efectivos. El genoma de HCV contiene un número de proteínas no estructurales: NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A, y NS5B (J. General Virology, 2000, 81 , 1631 -1648). NS5B es una ARN polimerasa dependiente de ARN que es esencial para replicacion viral, y por lo tanto, la inhibición de NS5B es un objetivo adecuado para el desarrollo de agentes terapéuticos. En la patente de E.U.A. 5,741 ,926, los derivados de anilina, incluyendo ácidos antranílicos, de la siguiente fórmula, se reclaman y se establece que los compuestos tienen actividad antihiperglicémica, en donde Ri, R2, R3, R4 y 5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, ORn, CX3, un grupo alquilo de C C6, (CH2)nCH2OH, (CH2)nC02Ri2. y (CH2)n-5-tetrazolilo, en donde uno pero no más de R-i , R2, R3, R o R5 se selecciona del grupo que consiste de (CH2)nC02R)2- y (CH2)n-5-tetrazolilo; Rn y R12 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno y un grupo alquilo de C1 C-6; X es un halógeno; n es 0 ó 1 ; R6, R7, e, 9 y R10 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, OR13, S Ri 4 , C(Y)3, un grupo alquilo de C C6 y fenilo; Y es halógeno; A es C=0; y B se selecciona del grupo que consiste de NH, oxígeno y azufre. Esta referencia no enseña ni sugiere que estos compuestos se pueden usar para tratar o prevenir infecciones virales de hepatitis C.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION La presente invención está dirigida a compuestos de la fórmula (I): (1) en donde R1 se selecciona del grupo que consiste de -C(0)R6 y 7 donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de H, alquilo de Ci-C12, cicloalquilo de C3-Ci2 > heterocicloalquilo de Ci-C , heteroarilo de C2-C9 o arilo de C6-Ci2, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, G se selecciona de H o hidroxilo, Y es O, NH o S, X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de Ci-C 2, cicloalquilo de C3-Ci2, perfluoroalquilo de C Ci2, alcoxi de CT-C^, alquiltio de CrC 2, amino, alquilamino de C C6, dialquilamino de C2-C12, y CN, y n es 0, 1 , 2 ó 3, o un profármaco, una sal farmacéuticamente aceptable, o un metabolito farmacéuticamente activo del mismo. Esta invención también incluye los compuestos de la fórmula (II): en donde R1 se selecciona de-C(0)R6 y en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de alquilo de CrC6, cicloalquilo de C3-C 2, heterocicloalquilo de CrCn , heteroarilo de C2-Cg o arilo de C6-C 2, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, perfluoroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, alquiltio de 1 a 6 átomos de carbono, amino, alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono, dialquilamino de 2 a 8 átomos de carbono, y CN, y G se selecciona de H o hidroxilo, o un profármaco, una sal farmacéuticamente aceptable, o un metabolito farmacéuticamente activo del mismo. La presente invención también está dirigida a los compuestos de la fórmula (III): (iii) en donde R1 se selecciona de-C(O)R6 y en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de alquilo de C C6, cicloalquilo de C3-C 2, heterocicloalquilo de C-i-C-n , heteroarilo de C2-C9 o arilo de C6-C12, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, perfluoroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, alquiltio de 1 a 6 átomos de carbono, amino, alquilamino de 1 a 6 átomos de carbono, dialquilamino de 2 a 12 átomos de carbono, y CN, y G se selecciona de H o hidroxilo, o un profármaco, una sal farmacéuticamente aceptable, o un metabolito farmacéuticamente activo del mismo. La presente invención también incluye composiciones que contienen compuestos de la fórmulas (I), (II) y (III), y métodos de uso de estos compuestos y composiciones de los mismos para tratar o prevenir infección con virus de hepatitis C, o para inhibir la replicación de un virus de hepatitis C.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Para los propósitos de esta invención, el término "alquilo incluye porciones alquilo tanto de cadena recta como ramificada, que pueden contener tantos como 12 átomos de carbono. Preferiblemente, la porción alquilo contiene entre 1 a 6 átomos de carbono, hasta 1 a 4 átomos de carbono es más preferible. El término "cicloalquilo se refiere a grupos hidrocarburo alicíclico que tienen 3 a 12 átomos de carbono, pero muy preferiblemente contiene 3 a 6 átomos de carbono, e incluye pero no se limita a: ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, norbornilo o adamantilo. Estas porciones puedeN ser además sustituidas.

Para los propósitos de esta invención, el término "heterocicloalquilo se refiere a un sistema de anillo heterocíclico no aromático (monocíclico o biciclico) en donde las porciones contienen 1 a 4 heteroátomos seleccionados del grupo que consiste de S, N y O, e incluyen pero no se limitan a: pirrolidina, pirrolina, 1 ,3-dioxolano, imidazolina, imidazolidina, pirazolina, pirazolidina, pirano, piperidina, dioxano, morfolina, ditioxano, tiomorfolina, piperazina, azetidinilo, hexahidroazepinilo, dihidrobencimidazolilo, dihidrobenzofuranilo, dihidrobenzothienilo, dihidrobenzoxazolilo, dihidrofuranilo, dihidroimidazolilo, dihidroindolilo, dihidroisooxazolilo, dihidroisotiazolilo, dihidrooxadiazolilo, dihidrooxazolilo, dihidropirrazinilo, dihidropirazolilo, dihidropiridinilo, dihidropirimidinilo, dihidropirrolilo, dihidroquinolinilo, dihidrotetrazolilo, dihidrotiadiazolilo, dihidrotiazolilo, dihidrothienilo, dihidrotriazolilo, dihidroazetidinilo, dihidro- ,4-dioxanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotienilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo e indolina. Una porción heterocicloalquilo preferiblemente contiene 1 -1 1 átomos de carbono. Estas porciones pueden ser además sustituidas. Para los propósitos de esta invención, el término "arilo" se define como una porción hidrocarburo aromático y puede ser sustituida o no sustituida. Un grupo arilo preferiblemente contiene 6 a 12 átomos de carbono y se puede seleccionar de, pero no se limita al grupo: fenilo, a-naftilo, ß-naftilo, bifenilo, antrilo, tetrahidronaftilo, fenantrilo, fluorenilo, indanilo, bifenilenilo, acenaftenilo, acenaftilenilo o fenantrenilo. Un grupo arilo puede ser opcionalmente mono-, di-, tri- o tetra-sustituido con sustituyentes seleccionados de, pero no limitados al grupo que consiste de alquilo, acilo, alcoxicarbonilo, alcoxi, alcoxialquilo, alcoxialcoxi, arilalquilo, alquilarilo, arilo, heteroahlo, heteroarilalquilo, ciano, halógeno, hidroxi, nitro, trifluorometilo, trifluorometoxi, trifluoropropilo, amino, alquilamino, dialquilamino, dialquilaminoalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, alquiltio, -S03H, -S02NH2, -S02NHalquilo, -S02N(alquilo)2 ,-C02H, C02NH2, C02NHalquilo, y -C02N(alquilo)2. Los sustituyentes preferidos para porciones arilo incluyen: alquilo, alcoxi, halógeno, amino, alquilamino, dialquilamino, trifluorometilo y trifluorometoxi. Para los propósitos de esta invención, el término "heteroarilo" se define como un sistema de anillo heterocíclico aromático (monocíclico o bicíclico) en donde las porciones heteroarilo son anillos de cinco o seis miembros que contienen 1 a 4 heteroátomos seleccionados del grupo que consiste de S, N y O, e incluyen pero no se limitan a: (1 ) furano, tiofeno, indol, azaindol, oxazol, tiazol, isoxazol, isotiazol, imidazol, N-metilimidazol, piridina, pirimidina, pirazina, pirrol, N-metilpirrol, pirazol, N-metilpirazol, 1 ,3,4-oxadiazol, 1 ,2,4-triazol, 1 -metil-1 ,2,4-triazol, 1 H-tetrazol, -metiltetrazol, benzoxazol, benzotiazol, benzofurano, bencisoxazol, bencimidazol, N-metilbencimidazol, azabencimidazol, indazol, quinazolina, quinolina, pirrolidinilo; (2) un heterociclo aromático bicíclico en donde un anillo de fenilo, piridina, pirimidina o piridizina es: (i) fusionado a un anillo heterocíclico (insaturado) aromático de 6 miembros que tiene un átomo de nitrógeno; (ii) fusionado a un anillo heterocíclico (insaturado) aromático de 5 ó 6 miembros que tiene dos átomos de nitrógeno; (iii) fusionado a un anillo heterocíclico (insaturado) aromático de 5 miembros que tiene un átomo de nitrógeno junto con un átomo de oxígeno o un átomo de azufre; o (iv) fusionado a anillo heterocíclico (insaturado) aromático de 5 miembros que tiene un heteroátomo seleccionado de O, N o S. Preferiblemente, un grupo heterocíclico contiene 2 a 9 átomos de carbono. Estas porciones pueden ser además sustituidas de sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de alquilo, acilo, alcoxicarbonilo, alcoxi, alcoxialquilo, alcoxialcoxi, arilalquilo, alquilarilo, arilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, daño, halógeno, hidroxi, nitro, trifluoronietilo, trifluorometoxi, trifluoropropilo, amino, alquilamino, dialquilamino, dialquilaminoalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, alquiltio, -S03H, -SO2NH2, -SO2NHalquilo, -S02N(alquilo)2 ,-C02H, C02NH2, C02NHalquilo, y -C02N(alquilo)2. Sustituyentes preferidos para porciones heteroarilo incluyen: alquilo, alcoxi, halógeno, amino, alquilamino, dialquilamino, trifluorometilo y trifluorometoxi. Preferiblemente una porción heteroarilo contiene 1 a 9 átomos de carbono. Para los propósitos de esta invención, el término "alcoxi" se define como alquilo de C-i-C6-O-; el término "ariloxi" se define como arilo-O-; el término "heteroariloxi" se define como heteroarilo-O-; en donde alquilo, arilo, y heteroarilo son como se definió antes. Para los propósitos de esta invención, el término "arilalquilo se define como arilo-alquilo de Ci-C6-; las porciones arilalquilo incluyen bencilo, 1 -feniletilo, 2-feniletilo, 3-fenilpropilo, 2-fenilpropilo y similares. Para los propósitos de esta invención el término "alquilarilo" se define como alquilo de CrC6-a lo, tal como un grupo tolilo. Para los propósitos de esta invención el término "alquiltio" se define como alquilo de CrC6-S-. Para los propósitos de esta invención, los términos "tío" y mercapto" se refieren a un grupo -SH. Para los propósitos de esta invención, "alquiltioalquilo," y "alquiloxialquilo," denotan un grupo alquilo como se definió antes que es además sustituido con un alcoxi o alquiltio como se definió antes. Para los propósitos de esta invención, "ariltio" y "heteroariltio," denotan un grupo tio que es además sustituido con un grupo arilo o heteroarilo como se definió antes. Los términos "alquilamino" y "dialquilamino" se refieren a porciones con uno o dos grupos alquilo en donde la cadena de alquilo es 1 a 6 carbonos o 1 a 4 carbonos y los grupos pueden ser los mismos o diferentes.

El término "aminoalquilo se refiere a un grupo alquilo, como se define aquí, que es además sustituido con un grupo amino. Los términos "monoalquilaminoalquilo y "dialquilaminoalquilo se refieren a porciones monoalquilamino y dialquilamino con uno o dos grupos alquilo (los mismos o diferentes) unidos al átomo de nitrógeno que está unido a un grupo alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. "Acilo" es un radical de la fórmula -(C=O)-alquilo o -(C=O)-perfluoroalquilo en donde el radical alquilo o radical perfluoroalquilo es 1 a 6 átomos de carbono; ejemplos preferidos incluyen, pero no se limitan a, acetilo, propionilo, butirilo y trifluoroacetilo.

Para los propósitos de esta invención el término, "alquilsulfinilo" se define como un radical R'SO-, en donde R' es un radical alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. Alquilsulfonilo es un radical R1SO2-, en donde R1 es un radical alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. Para los propósitos de esta invención, el término "halogenoalquilo se define como un grupo alquilo, como se define aquí, que ha sido sustituido con por lo menos un átomo de halógeno. Esta porción también puede ser completamente sustituida por átomos de halógeno, tales como un grupo trifluorometilo. Para los propósitos de esta invención, el término "perfluoroalquilo se define como un grupo alquilo, como se define aquí, que ha sido completamente sustituido con átomos de flúor, y por lo tanto, es definido por la fórmula -CnF2n+i . Ejemplos incluyen -CF3 y -CF2CF3. Para los propósitos de esta invención, el término "hidroxialquílo se define como un grupo alquilo, como se define aquí, que ha sido sustituido con por lo menos un grupo hidroxi. Para los propósitos de esta invención, los términos "halogenoalcoxi" y "halogenoalquiltio" se definen como un grupo alcoxi o alquiltio, como se define aquí, sustituido además por lo menos un átomo de halógeno. Para los propósitos de esta invención, los términos "alcoxialcoxi" y "alquiltioalcoxi" se definen como un grupo alcoxi sustituido además por otro grupo alcoxi, tal como CH3-O-CH2CH2-O-, o un grupo alquiltio. Para los propósitos de esta invención, los términos "alcoxialquiltio" y "alquiltioalquiltio" se definen como un grupo alquiltio sustituido además por otro grupo alcoxi o un grupo alquiltio. Para los propósitos de esta invención, el término "oxo" se define como un grupo carbonilo (es decir, C=0). El término "sustituyente" se usa aquí para referirse a un radical de átomo, un radical de grupo funcional o un radical de porción que reemplaza a un radical hidrógeno en una molécula. A menos que se establezca expresamente otra cosa, se debe suponer que cualquiera de las porciones descritas aquí pueden ser opcionalmente sustituidas con uno o más grupos seleccionados de: alquilo, alquenilo, alquinilo, halógeno, halogenoalquílo, hidroxialquilo, nitro, amino, hidroxi, ciano, aminoalquilo, alquilamino, dialquilamino, monoalquilaminoalquilo, dialquilaminoalquilo, alcoxi, halogenoalcoxi, alcoxialquilo, alcoxialcoxi, alquiltioalcoxi, alcoxialquiltio, alquiltioalquiltio, oxo, alquiltio, -SH, halogenoalquiltio, arilo, ariloxí, ariltio, heteroarilo, heteroariloxi, heteroariltio, acilo, -C02-alquilo, -SO3H, -S02NH2, -S02NH-alquilo, -SO2NH-(alquilo)2, -C02H,-C02NH2, -C02NH-alquilo y -C02N-(alquilo)2. Para los propósitos de esta invención, el término "sustituido" se refiere a donde un radical hidrógeno en una molécula ha sido reemplazado por otro radical de átomo, un radical de grupo funcional o un radical de porción; estos radicales generalmente se refieren como "sustituyentes." Los compuestos de esta invención pueden contener un átomo de carbón asimétrico y por lo tanto pueden dar origen a estereoisómeros, tales como enantiómeros y diastereómeros. Los estereioisómeros de la presente invención se nombra de conformidad con el sistema Cahn-Ingold-Prelog. Aunque se muestra sin respecto a estereoquímica en las fórmulas (I), (II) y (III), las presente invención incluye todos los posibles estereoisómeros individuales; así como las mezclas racémicas y otras mezclas de estereoisómeros R y S (mezclas escalémicas que son mezclas de cantidades desiguales de enantiómeros) y profármacos, sales farmacéuticamente aceptables y metabolitos farmacéuticamente activos de los mismos. Cabe notar que los estereoisómeros de la invención que tienen la misma configuración relativa en un centro quiral sin embargo pueden tener diferentes designaciones R y S dependiendo de la sustitución en el centro quiral indicado. Una modalidad de la presente invención es donde el compuesto de la fórmula (I) es definido por R6 y R7 que son independientemente seleccionados de H, alquilo de C C6, cicloalquilo de C3-C12, heterocicloalquilo de C1-C1 1 , heteroarilo de C2-C9 o arilo de C6-C12, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de C C6, cicloalquilo de C3-C12, heterocicloalquilo de C1-C11 , perfluoroalquilo de C C6, alcoxi de C1 -C6, alquiltio de CrC6, amino, alquilamino de CrC6, dialquilamino de C2-C12, y CN, y los sustituyentes opcionales se seleccionan del grupo que consiste de alquilo de Ci-C6, halógeno, halogenoalquilo de Ci-C6, hidroxialquilo de C C6, nitro, amino, hidroxi, ciano, alquilamino de Ci-C6, dialquilamino de C2-C12, alcoxi de halogenoalcoxi de CrC6, alcoxialquilo de C2-Ci2, alcoxialcoxi de C2-Ci2, oxo, alquiltio de C C6, mercapto, halogenoalquiltio de CrC6, arilo de C6-Ci2, ariloxi de C6-Ci2, ariltio de C6-C-i2, heteroarilo de C2-C9, heteroariloxi de C2-C9, heteroariltio de C2-C9, acilo, -CO2-alquilo de d-C6, -SO3H, -SO2NH2, -S02NH-alquilo de C C6, -SO2NH-(alquilo de d-C6)2, -CO2H, -CO2NH2, -C02NH-alquilo de Ci-C6 y -CO2N-(alquilo de C-i-C6)2. Otra modalidad de los compuestos de la fórmula (I) es en donde Y es O o NH y X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de C C4, alcoxi de C C-4 , y haogenoalquilo de C C4. Una modalidad más específica de los compuestos de la fórmula (I) es donde n es 0, 1 ó 2, y G es H. Otra modalidad específica es donde R6 y R7 (cuando están presentes) son alquilo de C C4, en donde el metilo es preferible, Y es NH. Otra modalidad más específica es donde n es 2 y X es halógeno, preferiblemente Cl o F. Especialmente más preferible es donde un X es Cl y el otro X es F. Una modalidad de los compuestos de la fórmula (II) es donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de H, alquilo de C C6, cicloalquilo de C3-C-12, o arilo de C6-C12, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, aunque es más preferido que R6 o R7 sea alquilo de C C4. Otra modalidad de los compuestos de la fórmula (II) es donde G es H. Otra modalidad de los compuesto de la fórmula (II) es donde X se selecciona del grupo H, halógeno, alquilo de C C4, perfluoroalquilo de C1 -C4 y alcoxi de C-1 -C4 , con X siendo halógeno el más preferido. Una modalidad más específica es donde n es 0, 1 ó 2, y las modalidades más específicas son donde el compuesto de la fórmula (II) es ya sea ácido -{[N-(2-acetil-5-cloro-4-fluorofenil)glicil]amino}benzoico o ácido 2-(2-([5-cloro-4-fluoro-2-(1 -metoxiimino-etil)-fenilamino]acetilamino}benzoico. Una modalidad de los compuestos de la fórmula (III) es donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de H, alquilo de CrC6, cicloalquilo de C3-C 12, o arilo de C6-C12 , cualquiera de los cuales puede ser opcíonalmente sustituido, aunque es más preferido que R6 o R7 sean alquilo de C1 -C4. Una modalidad más específica de los compuestos de la fórmula (Hl) es donde G es H. Otra modalidad del compuesto de la fórmula (I II) es donde X se selecciona del grupo H, halógeno, alquilo de C-1-C4 , perfluoroalquilo de C C4 y alcoxi de C C4, con X siendo halógeno el más preferido. Una modalidad más específica es donde n es 1 , 2 ó 3 y por lo menos un X es halógeno, aunque es más preferible que n sea 1 ó 2. compuestos preferidos de esta invención son ácido 2-{[N-(6-acetil-1 ,3-benzodioxol-5-il)glicil]amino}benzoico; ácido 2-({[N-[2-acetil-4-cloro-5-(metiltio)fenil]glicil}amino) benzoico; 2-({[N-[2-acetil-4-cloro-5-(dimetilamino)fenil]glicil}amino) benzoico; ácido 2-({[N-[2-acetil-4-cloro-5-(metilamino)fenil]glicil}amino) benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-5-cloro-4-fluorofenil-N-metilglicil]amino} benzoico; ácido 2-({[N-[2-acetil-4-cloro-5-(metilsulfinil)fenil]glicil}amino)-benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetilfenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(5-cloro-4-metil-2-propionilfenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4,5-dimetilfenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-bromo-5-cloro fenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(5-cloro-4-fluoro-2-propionilfenil)glicil]amino}-benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4,5-difluorofenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-cloro-5-etoxifenil)glicil]amino}benzo¡co; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-cloro-5-fluorofenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4,5-diclorofenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-cloro-5-metoxifenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-fluoro-5-metilfenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-5-cloro-4-fluorofenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(4-cloro-2-propionilfenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-clorofenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-(2-([5-cloro-4-fluoro-2-(1 -metoxiimino-etil)-fen¡lamino]-acetilamino}-benzoico; ácido 2-({[4,5-dimetil-2-(trifluoroacetil)fenoxi]acetil}amino} benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4,5-dimetoxifenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-[2-(2-acetil-5-metilfenoxi)acetilamino]-benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4-etilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4-metilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-5-fluorofenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-5-metoxifenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-5-clorofenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-benzoil4-metilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4,5-dimetilfenoxi)acetil]amino}-5-hidroxi- ácido 2-{[(2-acetil-4,5-dimetilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-isobutiril-4,5-dimetilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-5-etilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(4,5-dimetil-2-pentanoilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-butiril-4,5-dimetilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(4,5-dimetil-2-propionilfenoxi)acetil]amino}benzoico ácido 2-{[(2-acetil-4-cloro-5-fluorofenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido; 2-{[(2-acetil-5-cloro-4-f]uorofenoxi)acetil]amino}benzoico ácido 2-{[(2-acetil-4-fluoro-5-metilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4,5-difluorofenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(4-cloro-2-propionilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4-cloro-5-metilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4-fluorofenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4-clorofenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-bromofenil)glicil]amino}benzoico; y ácido 2-{[(2-acetil-4-etil-3-hidroxfenoxi)acetil]amino}benzoico. Los compuestos de la invención son ácidos y una sal deseada se puede preparar por cualquier método adecuado conocido en la técnica, incluyendo el tratamiento del ácido libre con una base inorgánica u orgánica, tal como una amina (primaria, secundaria o terciaria); un hidróxido de metal alcalino o metal alcalinotérreo; o similares. Ejemplos ilustrativos de sales adecuadas incluyen sales inorgánicas derivadas de aminoácidos tales como glicina y arginina; amoniaco; aminas primaria, secundaria y terciaria; y aminas cíclicas, tales como piperidina, morfolina y piperazina; así como sales inorgánicas derivadas de sodio, calcio, potasio, magnesio, manganeso, hierro, cobre, zinc, aluminio y litio. Si un compuesto de la invención es una base, una sal deseada se puede preparar por cualquier método adecuado conocido en la técnica, incluyendo el tratamiento de la base libre con un ácido inorgánico, tal como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares, o con un ácido orgánico tal como ácido acético, ácido maleico, ácido succínico,, ácido mandélico, ácido fumárico, ácido masónico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido glicólico, ácido salicílico, ácido piranosidilo, tal como ácido glucuronico o ácido galacturónico, alfa-hidroxi ácido, tal como ácido cítrico o ácido tartárico, aminoácido, tal como ácido aspártico o ácido glutámico, ácido aromático, tal como ácido benzoico o ácido cinámico, ácido sulfónico tal como ácido p-toluensulfónico o ácido etansulfónico, o similares. Un "profármaco" significa un compuesto que es convertido bajo condiciones fisiológicas o por solvolisis o metabolicamente a un compuesto especificado que es farmacéuticamente activo. Un profármaco puede ser un derivado de uno de los compuestos de esa invención que contiene una porción tal como por ejemplo -C02R, -PO(OR)2 o -C=NR, que puede ser digerida bajo condiciones fisiológicas o por solvolisis. Cualquier sustituyente R adecuado se puede usar que provea un producto de solvolisis o digestión farmacéuticamente aceptable. Un profármaco que contiene dicha porción se puede preparar de conformidad con procedimientos convencionales mediante tratamiento de un compuesto de esta invención que contiene, por ejemplo, un amido, ácido carboxílico, o porción hidroxilo con un reactivo adecuado. Un "metabolito farmacéuticamente activo" significa un compuesto farmacológicamente activo producido a través del metabolismo en el cuerpo de un compuesto especificado. Los profármacos y metabolitos activos de compuestos de esa invención dé las fórmulas anteriormente descritas se pueden determinar usando técnicas conocidas en el campo, por ejemplo, a través de estudios metabólicos. Véase, v.gr., "Design of Prodrugs", (Bundgaard, ed.), 1985, Elsevier Publishers B.V., Amsterdam, Países Bajos. Una "sal farmacéuticamente aceptable" significa una sal que retiene la efectividad biológica de los ácidos y bases libres de un compuesto especificado y que no es biológicamente o de otra manera indeseable. Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen sulfatos, pirosulfatos, bisulfatos, sulfitos, bisulfitos, fosfatos, fosfatos monoácidos, fosfatos diácidos, metafosfatos, pirofosfatos, cloruros, bromuros, yoduros, acetatos, propionatos, decanoatos, caprilatos, acrilatos, formatos, isobutiratos, caproatos, heptanoatos, propiolatos, oxalatos, malonatos, succinatos, suberatos, sebacatos, fumaratos, maleatos, butin-1 ,4-dioatos, hexin-1 ,6-dioatos, benzoatos, clorobenzoatos, metilbenzoatos, dinitrobenzoatos, hidroxibenzoatos, metoxibenzoatos, ftalatos, sulfonatos, xilensulfonatos, fenilacetatos, fenilpropionatos, fenilbutiratos, citratos, lactatos, ?-hidroxibutiratos, glicolatos, tartratos, metan-sulfonatos (mesilatos), propansulfonatos, naftalen-1 -sulfonatos, naftalen-2-sulfonatos, y mandelatos. En el caso de compuestos o sales que son sólidos, los expertos en la técnica entienden que los compuestos de la invención o sales pueden existir en diferentes formas de cristal, todas las cuales se pretende que estén incluidas dentro del alcance de la presente invención y fórmulas especificadas. En una modalidad, la presente invención también provee un método para inhibir la ARN polimerasa NS5B dependiente de ARN de hepatitis C. El método comprende poner en contacto una célula con una cantidad de un compuesto de las fórmulas (I), (II) ó (III) efectiva para disminuir o prevenir la función de NS5B. la célula puede ser una célula de mamífero y muy específicamente una célula humana. La célula también puede ser una célula bacteriana tal como por ejemplo E coli. La célula puede incluir pero no se limita a una célula neuronal, una célula endotelial, una célula glial, una célula microglial, una célula de músculo liso, una célula somática, una célula de médula ósea, una célula hepática, una célula intestinal, una célula germinal, un miocito, un fagocito mononuclear, una célula endotelial, una célula tumoral, un linfocito, una célula mesangial, una célula hepitelial retinal, una célula vascular retinal, una célula de ganglión o una célula madre. La célula puede ser una célula normal, una célula activada, una célula neoplásica, una célula enferma o una célula infectada. La presente invención además provee un compuesto de la invención para usarse como una sustancia terapéutica activa para tratar o prevenir infección de hepatitis C. Los compuestos de las fórmulas (I), (II) ó (III) son de uso particular para el tratamiento o prevención de infección con virus de hepatitis C. Una modalidad preferida del método de la presente invención implica tratar o prevenir una infección viral de hepatitis C en un mamífero que comprende proveer al mamífero con una cantidad efectiva de por lo menos un compuesto de la fórmula (I), (II), ó (III). Esta modalidad además puede comprender proveer al mamífero con por lo menos un agente biológicamente activo, que se puede seleccionar del grupo que consiste de interferón, un interferón pegilado, ribavirin, inhibidores de proteasa, inhibidores de polimerasa, compuestos de ARN de interferencia pequeños, compuestos antisentido, análogos de nucleótidos, análogos de nucleósido, inmunoglobulinas, inmunomoduladores, hepatoprotectores, agentes antiinflamatorios, antibióticos, antivirales y compuestos antiinfecciosos. Esta lista sólo provee ejemplos y no pretende ser exhaustiva.

En otra modalidad del método de la presente invención, implica inhibir la replicación de un virus de hepatitis C que comprende poner en contacto el virus de hepatitis C con una cantidad efectiva de por lo menos un compuesto de la fórmula (I), (II) ó (III). Esta modalidad además puede comprender proveer al mamífero con por lo menos un agente biológicamente activo que se puede seleccionar del grupo que consiste de interferón, un interferón pegilado, ribavirin, inhibidores de proteasa, inhibidores de polimerasa, compuestos de ARN de interferencia pequeños, compuestos antisentido, análogos de nucleótidos, análogos de nucleósido, inmunoglobulinas, inmunomoduladores, hepatoprotectores, agentes antiinflamatorios, antibióticos, antivirales y compuestos antiinfecciosos. Esta lista solo provee ejemplos y no pretende ser exhaustiva. Los compuestos o los profármacos, los metabolitos farmacéuticamente activos o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y las composiciones farmacéuticas de la presente invención se proveen preferiblemente por vía oral o subcutánea. Los compuestos se pueden proveer por inyección intralesional, intraperitoneal, intramuscular o intravenosa; infusión; suministro mediado por liposoma; suministro tópico, nasal, anal, vaginal, sublingual, uretral, transdérmico, intratecal, ocular u ótico. A fin de obtener consistencia para proveer el compuesto de esta invención, se prefiere que un compuesto de la invención esté en forma de una dosis unitaria. Las formas de dosis unitarias adecuadas incluyen tabletas, cápsulas y polvos en sachets o viales. Dichas formas de dosis unitarias pueden contener de 0.1 a 100 mg de un compuesto de la invención y preferiblemente de 2 a 50 mg. Las formas de dosis unitarias preferidas adicionales contienen 5 a 25 mg de un compuesto de la presente invención. Los compuestos de la presente invención se pueden administrar oralmente a un intervalo de dosis de aproximadamente 0.01 a 100 mg/kg o preferiblemente a un intervalo de dosis de 0.1 a 10 mg/kg. Dichos compuestos se pueden administrar de 1 a 6 veces al día, muy usualmente de 1 a 4 veces al día. La cantidad efectiva será conocida por un experto en la técnica; también dependerá de la forma del compuesto. Un experto en la técnica podría realizar rutinariamente pruebas de actividad empíricas para determinar la bioactividad del compuesto en bioensayos y por lo tanto determinar qué dosis administrar. Los compuestos o los profármacos, los metabolitos farmacéuticamente activos o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden formular con excipientes convencionales tales como un llenador, un agente desintegrador, un aglutinante, un lubricante, un agente saborizante, un aditivo de color o un vehículo. El vehículo puede ser por ejemplo un díluyente, un aerosol, un vehículo tópico, una solución acuosa, una solución no acuosa o un vehículo sólido. El vehículo puede ser un polímero o una pasta dental. Un vehículo en esta invención abarca cualquiera de los vehículos farmacéuticamente aceptables estándares, tales como solución salina regulada en su pH con fosfato, solución salina regulada en su pH con acetato, agua, emulsiones tales como emulsión de aceite/agua o una emulsión de triglicérido, varios tipos de agentes humectantes, tabletas, tabletas revestidas y cápsulas. Cuando se proveen por vía oral o tópica, dichos compuestos se proveerían a un sujeto suministrando en vehículos diferentes. Típicamente, dichos vehículos contienen excipientes tales como almidón, leche, azúcar, varios tipos de arcilla, gelatina, ácido esteárico, talco, grasas o aceites vegetales, gomas o glicoles. El vehículo específico necesitaría seleccionarse con base en el método deseado de suministro, por ejemplo, solución salina regulada en su pH con fosfato (PBS) se podría usar para el suministro intravenoso o sistémico y grasas vegetales, cremas, salvas, pomadas o geles se pueden usar para administración tópica. Los compuestos o los profármacos, los metabolitos farmacéuticamente activos o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos y las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden suministrar junto con diluyentes, conservadores, solubilizantes, emulsionantes, adyuvantes, vehículos adecuados útiles en el tratamiento o prevención de infección viral de hepatitis C. Dichas composiciones son líquidas o liofilizadas o de otra manera formulaciones secas e incluyen diluyentes de contenido de varios reguladores de pH (por ejemplo, Tris-HCI, acetato, fosfato), pH y concentración iónica, aditivos tales como albúminas o gelatina para prevenir absorción a las superficies, detergentes (por ejemplo, TWEEN 20, TWEEN 80, PLURONIC F68, sales de ácido biliar), agentes solubilizantes (por ejemplo, glicerol, políetilen glicerol), antioxidantes (por ejemplo ácido ascórbico, metabisulfato de sodio), conservadores (por ejemplo, timerosal, alcohol bencílico, parabenos), sustancias formadoras de cuerpo o modificadoras de tonicidad (por ejemplo, lactosa, manitol), unión covalente de polímeros tales como polietilenglicol, formación de complejo con iones metálicos, o la incorporación del compuesto en o sobre preparaciones en partículas de hidrogeles o liposomas, microemulsiones, micelas, vesículas unilaminares o multilaminares, fantasmas de eritrocitos o esferoplastos. Dichas composiciones influirán en el estado físico, solubilidad, estabilidad, tasa de liberación in vivo y tasa de aclaramiento in vivo del compuesto o composición. La elección de composiciones dependerá de las propiedades físicas y químicas del compuesto capaces de tratar o prevenir una infección viral de hepatitis C. El compuesto, o profármacos, los metabolitos farmacéuticamente activos o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden suministrar localmente mediante una cápsula que permita una liberación sostenida del compuesto durante un período. Las composiciones de liberación controlada sostenida incluyen formulación en depósitos lipofílicos (por ejemplo, ácidos grasos, ceras, aceites). La presente invención además provee formas de dosis terapéutica de liberación controlada para la composición farmacéutica en las cuales la composición se incorpora en el sistema de suministro. La forma de dosis controla la liberación de la composición farmacéutica de tal manera que la concentración efectiva de la composición en la sangre se puede mantener durante un período prolongado, pero también la liberación de la composición sería tal que la concentración en la sangre permaneciera relativamente constante durante un período prolongar los resultados terapéuticos y/o reducir al mínimo los efectos colaterales. Además, un sistema de liberación controlada afectaría el pico mínimo a fluctuaciones en los niveles del plasma sanguíneo de la composición farmacéutica. La presente invención además provee un método de tratamiento de infección de hepatitis C en humanos, que comprende administrar al individuo infectado una cantidad efectiva de un compuesto o composición farmacéutica de la invención. La presente invención también está dirigida a una composición farmacéutica que contiene un compuesto de la fórmula (I): en donde R1 se selecciona del grupo que consiste de -C(O)R6 y en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de H, alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo o arilo, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, G se selecciona de H o hidroxilo, Y es O, NH o S, X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo, cicloalquilo, perfluoroalquilo, alcoxi, alquiltio, amino, alquilamino, dialquilamino y CN y n es 0, 1 , 2 ó 3, o un profármaco, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un metabolito farmacéuticamente activo del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La presente invención también está dirigida a una composición farmacéutica que contiene un compuesto de la fórmula (II): (?) en donde R1 se selecciona de -C(O)R6 y en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de alquilo de C C6, cicloalquilo de C3-C12, heterocicloalquilo de C-i-C-n , heteroarilo de C2-C9 ó arilo de C6-C12, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, perfluoroalquilo, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, alquiltio de 1 a 6 átomos de carbono, amino, alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono, dialquilamino de 2 a 8 átomos de carbono, y CN, y G se selecciona de H o hidroxilo, o un profármaco, o una sal farmacéuticamente aceptable, o un metabolito farmacéuticamente activo del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La presente invención también está dirigida a una composición farmacéutica que contiene un compuesto de la fórmula (III): (III) en donde R se selecciona de -C(0)R6 y 7 en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de alquilo de C C6, cicloalquilo de C3-C-12, heterocicloalquilo de C C-n , heteroarilo de C2-C9 o arilo de C6-Ci2, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, perfluoroalquilo, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, alquiltio de 1 a 6 átomos de carbono, amino, alquilamino de 1 a 6 átomos de carbono, dialquilamino de 2 a 12 átomos de carbono, y CN, y G se selecciona de H o hidroxilo, o un profármaco, una sal farmacéuticamente aceptable, o un metabolito farmacéuticamente activo del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La presente invención provee un método de tratamiento o prevención de una infección viral de hepatitis C en un mamífero que comprende proveer al mamífero con cantidad efectiva de por lo menos una composición farmacéutica, en donde por lo menos una composición farmacéutica incluye un compuesto de la fórmula (I), (II), ó (III). El método de la presente invención además comprende proveer al mamífero con una cantidad efectiva de por lo menos un agente biológicamente activo. En una modalidad del método de la presente invención, por lo menos un agente biológicamente activo se provee antes de por lo menos una composición farmacéutica, concurrentemente con por lo menos una composición farmacéutica o después por lo menos una composición farmacéutica, en donde el agente biológicamente activo se selecciona del grupo que consiste de ¡nterferón, un ¡nterferón pegilado, ribavirin, inhibidores de proteasa, inhibidores de polimerasa, compuestos de ARN de interferencia pequeños, compuestos antisentido, análogos de nucleótidos, análogos de nucleósidos, inmunoglobulinas, inmunomoduladores, hepatoprotectores, agentes antiinflamatorios, antibióticos, antivirales y compuestos antiinfecciosos.

Los compuestos de la presente invención o los profármacos, los metabolitos farmacéuticamente activos o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos o los isómeros también son útiles en el tratamiento y prevención de infecciones virales, en particular infección de hepatitis C, y enfermedades en hospederos vivos cuando se usan en combinación con otros (es decir, composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos con los profármacos o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran concurrentemente unos con otros o secuencialmente, en cualquier orden). La combinación de compuestos provistos aquí se pueden proveer además a un sujeto en composiciones farmacéuticas respectivas, concurrentemente con o secuencialmente a otros agentes biológicamente activos, incluyendo pero sin limitarse al grupo que consiste de interferón, interferón pegilado, ribavirin, inhibidores de proteasa, inhibidores de polimerasa, compuestos de ARN de interferencia pequeños, compuestos de antisentido, análogos de nucleótidos, análogos de nucleósidos, inmunoglobulinas, inmunomoduladores, hepatoprotectores, agentes antiinflamatorios, antibióticos, antivirales y compuestos antiinfecciosos. La presente invención además provee terapia de combinación con uno o más derivados de ácido antranílico, es decir, por lo menos dos composiciones farmacéuticas y comprenden un compuesto diferente, o profármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de la presente invención se proveen a un sujeto que necesita el mismo ya sea concurrentemente unos con otros o secuencialmente y dicha terapia puede comprender además proveer concurrentemente o secuencialmente otros agentes medicinales o potenciadores, tales como aciclovir, famiciclovir, valganciclovir y compuestos relacionados, ribavirin y compuestos relacionados, amantadina y compuestos relacionados, varios interferones tales como, por ejemplo, ¡nterferón-alfa, interferón-beta, ¡nterferón-gamma y similares, así como formas alternativas de interferones tales como interferones pegilados. Además, combinaciones de, por ejemplo, ribavirin e interferón, se pueden administrar como una combinación adicional para una combinación de terapia múltiple con por lo menos uno de los compuestos de la presente invención. La terapia de combinación con cualquiera de los agentes biológicamente activos anteriormente descritos también puede ser secuencial, es decir el tratamiento con una primera composición farmacéutica que comprende un compuesto o profármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de la invención seguido por tratamiento con una segunda composición farmacéutica que comprende un segundo compuesto de la invención, en donde el segundo compuesto es diferente del primer compuesto; alternativamente, el tratamiento puede ser con dos o más composiciones farmacéuticas, en donde cada composición farmacéutica comprende un compuesto diferente, o profármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de la invención, al mismo tiempo. La terapia secuencial puede estar dentro de un tiempo razonable después de la composición de la primer terapia con la composición farmacéutica. El tratamiento con las composiciones farmacéuticas respectivas, cada una comprendiendo un compuesto diferente, o profármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de la presente invención, al mismo tiempo se puede proveer en la misma dosis diaria o en dosis separadas. La terapia de combinación también se puede proveer en donde una composición farmacéutica que comprende por lo menos un compuesto, o profármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de la presente invención se administra en una composición que comprende además por lo menos un agente biológicamente activo, es decir, en una sola dosis. Las dosis de la terapia de combinación concurrente y secuencial (para composiciones farmacéuticas combinadas que comprenden por lo menos dos compuestos, o los profármacos o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de la invención o composiciones que comprenden por lo menos un compuesto, o profármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de la invención y por lo menos un agente biológicamente activo) dependerá de las tasas de absorción, distribución, metabolismo y excreción de los componentes de la composición farmacéutica asi como otros factores conocidos por un experto en la técnica. Los valores de dosis de la composición farmacéutica también variará con la severidad de la condición que se ha de aliviar. Cabe entender además que para cualquier sujeto particular, los regímenes y programas de dosis específicos se pueden ajustar con el tiempo de conformidad con las necesidades del individuo y el juicio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las composiciones farmacéuticas. En una modalidad adicional, los compuestos de la invención se pueden usar para el tratamiento de HCV en humanos en modo de terapia de combinación con otros inhibidores de la HCV polimerasa. En una modalidad adicional, los compuestos o los profármacos, los metabolitos farmacéuticamente activos o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, de la presente invención se pueden usar para el tratamiento de HCV en humanos en modo de terapia de combinación con otros inhibidores de ciclo de vida de HCV tales como, por ejemplo, inhibidores de unión de HCV o entrada de virus, traducción de HCV, trascripción o replicación de ARN de HCV, maduración de HCV, ensamble o liberación de virus, o inhibidores de actividades enzimáticas de HCV tales como la HCV nucleotidil transferasa, helicasa, proteasa o polimerasa. Se pretende que las terapias de combinación de las composiciones farmacéuticas incluyen cualquier combinación químicamente compatible de un compuesto, o profármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, de este grupo inventivo con otros compuestos, o los profármacos o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, del grupo inventivo u otros compuestos fuera del grupo inventivo, siempre que la combinación no elimine la actividad antiviral del compuesto de este grupo inventivo o la actividad antiviral de la composición farmacéutica misma. El término "interferón-alfa" como se usa aquí significa la familia de proteínas específicas de especie altamente homologas que inhiben la replicación viral y proliferación celular y modulan la respuesta inmune. El interferón-alfa adecuado típico incluye, pero no se limita a interferón alfa-2b recombinante tal como INTRON-A INTERFERON disponible de Schering Corporation, Kenilworth, NJ, interferón alfa-2a recombinante tal como interferón Roferon disponible de Hofman-La Roche, Nutley, NJ, un interferón alfa-2C recombinante, tal como BEROFOR ALPHA 2 INTERFERON disponible de Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc., Ridgefield, Conn., interferón alfa-n1 , una mezcla purificada de interferones alfa naturales tales como SUMIFERON disponible de Sumitomo, Japón o un interferón alfa-n 1 de Wellferon (I NS) disponible de Glaxo-Wellcome Ltd., London, Gran Bretaña, o un interferón alfa de consenso tal como aquellos descritos en las patentes de E.U.A. Nos. 4,897,471 y 4,695,623 (cuyo contenido se incorpora aquí por referencia en su totalidad específicamente ejemplos 7, 8 ó 9 de los mismos) y el producto específico disponible de Amgen, Inc. , Newbury Park, Calif., o interferón alfa-n3, una mezcla de interferones naturales hecha por Interferón Sciences y disponible de Purdue Frederick Co. , Norwalk, Conn. , bajo la marca comercial ALFERON. El uso de interferón alfa-2a o interferón alfa-2b es preferido. El interferón alfa-2b, entre todos los interferones, tiene la más amplia aprobación en todo el mundo para el tratamiento de infección de hepatitis C crónica, es el más preferido. La fabricación de interferón alfa-2b se describe en la patente de E.U.A. No. 4,503,901 . El término "interferón pegilado" como se usa aquí significa conjugados de interferón modificados con polietilenglicol, preferiblemente interferón alfa-2a y alfa-2b. El conjugado de interferón alfa-2b-polietilenglicol preferido es PEG.sub.12000-interferón alfa-2b. La frase "PEG-sub.12000-IFN alpha" como se usa aquí significa conjugados tal como se prepara de conformidad con los métodos de la solicitud internacional No. WO 95/13090 y que contienen enlaces de uretano entre los grupos interferón alfa-2a o alfa-2b y polietilenglicol que tiene un peso molecular promedio de 12000. Los siguientes detalles experimentales se exponen para ayudar a entender la invención y no se pretende, y no debe considerarse, que limiten de alguna manera la invención expuesta en las reivindicaciones que se dan más adelante. Los compuestos de la presente invención se pueden preparar fácilmente de conformidad con los siguientes esquemas de reacción o modificación de los mismos. Los compuestos de la presente invención, en donde R1 es una porción que contienen carbonilo, se puede sintetizar como se describe en los esquemas siguientes (esquema 1 y 2). Subsecuentemente, esos compuestos se pueden convertir a las oximas correspondientes, en donde R1 es 7 por los métodos descritos a continuación en los esquemas 3-6, por otros métodos conocidos por expertos en la técnica.

ESQUEMA 1 9 Los derivados de fenilamina de esta invención se preparan por el método 1 , como se describe en el esquema 1 . Por consiguiente, un derivado de antranilato de metilo es acilado con un reactivo de la fórmula L1-CH2C(0)L2 para dar el compuesto 2, en donde L1 es un grupo residual tal como halógeno, O-mesilo, O-tolilo u O-triflato, y L2 es un grupo residual tal como halógeno. Preferiblemente, el reactivo es bromuro de bromoacetilo. La orto acilación del compuesto 3 se logra de conformidad con el método de Sugasawa, (Sugasawa, Tsuotomu, Toyoda, Tatsuo, Adachi, Makoto; Sasakura, Kazuyuki. Aminohaloborane in Organic Síntesis. 1 . Specific Ortho Substitution Reaction of Anilinas. J. Am. Chem. Soc. (1978), 100(15), 4842-52) mediante el tratamiento del compuesto con ácido de Lewis o una combinación de ácidos de Lewis, tales como tribromuro de boro, tricloruro de aluminio, y el nitrilo correspondiente, seguido por hidrólisis ácida para dar la aminocetona 4. La reacción de N-acetilantranilato de metilo 2 con aminocetona 4 en presencia de una base, preferiblemente una base de amina terciaria, tal como N,N-dietilisopropilamina, trietilamina y piridina, da el producto de alquilación 5. Un experto en la técnica reconocerá otras bases que se podrían usar para efectuar esta alquilación. La hidrólisis del éster bajo condiciones estándares da el producto final 1 . Estos compuestos pueden ser derivados además para formar las oximas correspondientes (véase esquemas 3 y 4). Los derivados de fenoxi y tiofenilo de esta invención se preparan por el método 2, como se ilustra en el esquema 2. Por consiguiente, el derivado de orto-acifenol u orto-aciltiofenol 7 se prepara haciendo reaccionar el cloruro ácido correspondiente y un ácido de Lewis con un fenol o tiofenol 6. Esta metodología se describe en Mewshaw, et al (Mewshaw, R.E.; Marquis, K.L.; Shi, X.; McGaughey, G.¡ Snack, G.; et al.; Tetrahedron; EN; 54; 25; 998; 7081 -7108). La alquilación con reactivo de la fórmula R'OC(0)L2, en donde R' se selecciona de alquilo o arilo y L2 es halógeno, da el éster 8. Preferiblemente, el reactivo es yodoacetato de etilo. El éster 8 es después convertido a ácido 9 por hidrólisis básica. El compuesto 9 es después acoplado a un derivado de ácido antranílico usando métodos de acoplamiento de péptido estándares para dar el producto final 10. Un ejemplo del método de acoplamiento estándar es convertir el compuesto 9 al halogenuro ácido correspondiente que después se puede hacer reaccionar con el derivado de ácido antranílico en un solvente no reactivo. Esa conversión se puede efectuar con reactivos como cloruro de oxalilo, cloruro de tionilo, tricloruro de fósforo, pentacloruro de fósforo, Ph3PBr2, Ph3P/CBrCI3, Ph3P/CCI4 y similares. Un experto en la técnica se percataría de otros reactivos similares que podrían usarse para formar un halogenuro ácido a partir de un ácido carboxílico. Estos compuestos después se pueden derivar para formar las oximas correspondientes, como se muestra en los esquemas 5 y 6.

ESQUEMA 3 ESQUEMA 4 13 ESQUEMA 5 ESQUEMA 6 ESQUEMA 7 G ¾!,^C02CH3 B[omu(0 de bromoacelilo 0 ^? El esquema 3 ¡lustra un método general de preparación de derivados de oxima 13 empezando a partir de la aminocetona correspondiente 4. La aminocetona 4 se hace reaccionar con hidroxilamina, o un derivado de la misma, tal como una alcoxiamina (es decir, CH3ONH2), H2NOSO3H o HON(S03)Na), en presencia de un ácido o una base para obtener oxima 1 1 . Es preferible el uso de un ácido, tal como HCI. La oxima después se hace reaccionar con éster bencílico 2 bajo condiciones básicas, como se describió anteriormente aquí, para formar éster de oxima 12, que después se saponifica para dar el producto final 13. El esquema 4 muestra métodos alternativos para producir el producto final 13 introduciendo la funcionalidad oxima en diferentes puntos de la síntesis descrita en el esquema 1 . Por lo tanto, el éster 5 se puede hacer reaccionar primero con hidroxilamina, o un derivado de la misma, como se describe aquí, para formar la oxima, que después se puede saponificar para obtener el compuesto final 13. Alternativamente, el compuesto de ácido 1 (que fue el producto final mostrado en el esquema 1 ), se puede hacer reaccionar con hidroxilamina, o un derivado de la misma, como se describe aquí, para formar el producto final de oxima. El esquema 5 muestra un método de preparación de las oximas correspondientes de los derivados de fenol o tiofenol de la presente invención. El 2-acifenol o 2-aciltiofenol 7 se hace reaccionar con hidroxilamina, o un derivado de la misma, tal como una alcoxiamina (es decir, CH3ONH2), H2NOS03H o HON(S03Na), en presencia de un ácido o una base, y después se hace reaccionar con el halogenuro ácido apropiado en presencia de un ácido de Lewis, como se describió anteriormente aquí, para obtener la oxima 14. El uso de un ácido es preferible, tal como HCI. La oxima después se hidroliza bajo condiciones básicas, como se describió anteriormente aquí, para formar ácido de oxima 15, que después se acopla a un derivado de ácido antranílico usando métodos de acoplamiento de péptido estándares, como se describe aquí, para dar el producto final 16. El esquema 6 ilustra un método de preparación de la oxima 16 a partir del ácido correspondiente 10 (que fue el producto final en el esquema 2) haciéndolo reaccionar con hidroxilamina, o un derivado de la misma, tal como alcoxiamina, H2NOSO3H o HON(S03Na), en presencia de un ácido o base. El uso de un ácido, tal como HCI, es preferible. El esquema 7 muestra la síntesis específica de ácido 2-{[N-(2-acetil-5-cloro-4-fluorofenil)glicil]amino} benzoico usando la metodología general descrita en el esquema 1 . Los siguientes son ejemplos de los compuestos de la presente invención. No se pretende que estos ejemplos abarquen el alcance completo de esta invención y no deben visualizarse como una limitación del alcance de la invención.

CUADRO I Método ^P'0 Nombre de # síntesis 1 ácido 2-{[(2-acetil-4,5-2 dimetilfenoxi)acetil] amino} 2 benzoico 2 ácido 2-{[(2-acetil-4,5-dimetilfenoxi)acetil]amino} -5- 2 hidroxibenzoico 3 ácido 2-{[(2-benzoil-4-metilfenoxi)acetil] amino} 2 benzoico 4 ácido 2-{[(2-acetil-5-clorofenoxi)acetil]amino} benzoico 2 ácido 2-{[(2-acetil-4-clorofenoxi)acetil]amino} benzoico 2 6 ácido 2-{[(4-cloro-2-propionilfenoxi)acetil] amino} 2 benzoico 7 ácido 2-{[(2-acetil-4-fluorofenoxi)acetil]amino} benzoico 2 8 ácido 2-{[(2-acetil-5-metoxifenoxi)acetil] amino} 2 benzoico 9 ácido 2-{[(2-acetil-5-fluorofenoxi)acetil] amino} benzoico 2 ácido 2-{[(2-acetil-4-cloro-5-metilfenoxi)acetil]amino} 2 benzoico 1 1 ácido 2-{[(2-acetil-4-etil-3-hidroxifenoxi)acetil] amino} 2 benzoico 12 ácido 2-{[(2-acetil-4-etilfenoxi)acetil] amino} benzoico 2 13 ácido 2-{[N-(2-acetil-4,5-dimetilfenil)glicil] amino} 1 benzoico 14 ácido 2-{[(2-acetil-4-metilfenoxi)acetil]amino} benzoico 2 ácido 2-{[(2-acetil-4,5-dimetoxifenoxi)acetil] amino} 2 benzoico 16 ácido 2-[2-(2-acetil-5-metil-fenoxi)-acetilamino]- 2 benzoico 17 ácido 2-{[(4,5-dimetil-2-propionilfenoxi)acetil] amino} 2 benzoico 18 ácido 2-{[(2-butiril-4,5-dimetilfenoxi)acetil] amino} 2 benzoico 19 ácido 2-{[(4,5-dimetil-2-pentanoilfenoxi)acetil] amino} 2 benzoico 20 ácido 2-[2-(4,5-dimetil-2-propionil-fenilamino)- 1 acetilamino]-benzoico 21 ácido 2-{[(2-acetil-4,5-difluorofenoxi)acetil] amino} 2 benzoico 22 ácido 2-({[4,5-dimetil-2- 2 (trifluoroacetil)fenoxi]acetil}amino)benzoico ácido 2-{[(2-acetil-4-fluoro-5-metilfenoxi)acetil] amino} 3 benzoico ácido 2-{[(2-acetil-5-etilfenoxi)acetil] amino} benzoico 2 ácido 2-{[N-(2-acetil-4-clorofenil)glicil] amino} benzoico 2 ácido 2-{[N-(5-cloro-4-metil-2-propionilfenil)glicil] amino} 1 benzoico ácido 2-{[(2-¡sobutiril-4,5-dimet¡lfenoxi)acetil] amino} 2 benzoico ácido 2-{[N-(2-acetil-4-cloro-5-metilfenil)glicil] amino} 1 benzoico ácido 2-{[N-(2-acetil-4-bromofenil)glicil]amino} benzoico 1 ácido 2-{[N-(2-acetil-5-cloro-4-metilfenil)glicil] amino} 1 benzoico ácido 2-{[N-(4-cloro-2-propionilfenil)glicil] amino} 1 benzoico ácido 2-{[N-(2-acetil-5-cloro-4-fluorofenil)glicil] amino} 1 benzoico ácido 2-{[N-(2-acetil-4-fluoro-5-metilfenil)glicil] amino} 1 benzoico ácido 2-{[(2-acetil-4-cloro-5-fluorofenoxi)acetil] amino} 1 benzoico ácido 2-{[(2-acetil-5-cloro-4-fluorofenoxi)acetil] amino} 2 benzoico ácido 2-{[N-(2-acetil-4-cloro-5-fluorofenil)glicil] amino} 2 benzoico ácido 2-{[N-(2-acetil-4-cloro-5-metoxifenil)glicil] amino} 1 benzoico ácido 2-{[N-(6-acetil-1 ,3-benzodioxol-5-il)glicil]amino} 1 benzoico ácido 2-{[N-(2-acetil-4,5-diclorofenil)glicil] amino} 1 benzoico ácido 2-({N-[2-acetil-4-cloro-5-(metiltio)fenil]glicil} 1 amino)benzoico ácido 2-{[N-(5-cloro-4-fluoro-2-prop¡onilfenil)glicil] 1 amino} benzoico ácido 2-{[N-(2-acetil-4-cloro-5-etoxifenil)glicil) amino} 1 benzoico ácido 2-({N-[2-aceti!-4-cloro-5- 1 (dimetilamino)fenil]glicil}amino)benzoico ácido 2-({N-[2-acetil-4-cloro-5-(metilamino)fenil] glicil} 1 amino)benzoico ácido 2-{[N-(2-acetil-4-bromo-5-clorofenil)glicil] amino} 1 benzoico ácido 2-{[N-(2-acetil-4,5-difluorofenii)glicil] amino} 1 benzoico 48 ácido 2-{[N-(2-acetilfenil)glicil]amino} benzoico 1 49 ácido 2-{[N-(2-acetil-5-cloro-4-fluorofenil)-N- 1 metilglicil]amino} benzoico 50 ácido 2-({N-[2-acetil-4-cloro-5- (metilsulfinil)fenil]glicil}amino)benzoico Biología La capacidad de los compuestos de la presente invención para inhibir hepatitis C polimerasa fue establecido por el siguiente procedimiento experimental: NS5B de la cepa BK (genotipo Ib) se expresa en E. coli como una proteína en la cual los 21 aminoácidos C-terminales son reemplazados por un enlazador corto y una etiqueta de hexahistidina (GSHHHHHH; SEQ ID NO: 1 ). La proteína purificada se mezcla con nucleótidos radioactivos y se deja replicar un sustrato de ARN heteropolimérico, iniciado por pasador corto endógeno, dando por resultado un producto de aproximadamente 760 nt. El producto radioactivo es capturado en un filtro y cuantificado después de la remoción de los nucleótidos no incorporados.

Reactivos 0 mM de S'-trifosfato de uridina (UTP) (Promega # pi 16B) mM de 5'-tn'fosfato de adenina (ATP) (Promega # pi 13B) mM de 5'-trifosfato de citidina (CTP) (Promega # pi 14B) mM de 5'-trifosfato de guanina (GTP) (Promega # pi 15B) Albúmina de suero de bovino (BSA) 10 mg/ml de NEB (100X mg/ml) #007-BSA ARNseína (Promega #N25 IX) 40 U/µ? A-[33P]-GTP (NEN-easitidos NEG/606H 3000 Ci/mmol, 370 MBq/ml, 10 mCi/ml) Placas de 96 pozos de polipropileno Falcon (Becton Dickinson # 351 190) Placa de filtración de 96 pozos de sistema de prueba de tamices múltiples Millipore #MADE NOB 50 Optiphase Supermix (Wallac) formulado por el revestimidor Fisher Millipore Multiscreen para usarse en cassette microbeta 1450-106 [(Wallac) Perkin Elmer #1450-433] 1 M de ácido (N-[2-hidroxietil]piperazin-N'-[2-etansulfónico]) (HEPES), pH 7.3 Amersham Pharmacia Biotec (US 16924-500 mi) 1 M de MgCI2 (SIGMA #M1028) Ditiotreitol (DTT) (sólido) (SIGMA # D9779) Agua libre de ARNase (GIBCO-BRL #10977-023) Sulfóxido de dimetilo (Aldrich #27685-5) Azul de Basilen (Sigma, B5520) 0.5M de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), pH 8 (GIBCO-BRL #15575-020) Fosfato dibásico de sodio (7-hidrato) (Na2HPO4.7H2O; Baker#3824-07) Acido fosfórico (Baker, #0262.02) Preparación de reactivo adicional: 0.5 M de regulador de pH de fosfato de Na. Por litro, se pesan 1 34 g de Na2HP0 .7H20, se añade agua a 900 mi. Se ajusta el pH a 7.0 con ácido fosfórico. Se añade agua hasta un 1 litro. - Se diluyen los nucleotidos 1 : 1 000 a 10 µ? (GTP y CTP) o 1 :100 a 100 µ? (ATP y UTP) en agua sin ARNasa.

Procedimiento: (1 ) Compuestos 10 µ? a 10 µg/ml en 15 % de sulfóxido de dimetilo (DMSO) Cuando se empieza a partir de 100 µg/ml de abastecimiento de compuesto en DMSO al 1 %: Se suministran 5 µ? de DMSO al 30 % por pozo Se suministran 5 µ? de compuesto ( 100 9/???) por pozo. Cuando se empieza a partir de 50 µg/p^\ de abastecimiento de compuesto en DMSO al 1 5 %: Se añade 10 µ? compuesto por pozo. (2) Mezcla de enzima: Total: 20 µ? 12 ml Se añaden 20 µ? de mezcla de enzima en cada pozo de la placa de prueba. Se incuba el compuesto y enzima a temperatura ambiente durante 1 5 minutos (3) Mezcla de plantilla - se prepara Se hace girar un tubo de ARN (5 µg/tubo almacenado en etanol al 75% y acetato de sodio 0.3 M) en una microcentrífuga durante 20 minutos a 4°C. Un tubo es suficiente para 1-1 .5 placas. Se elimina tanto etanol del tubo como sea posible al invertir el tubo. Con mucho cuidado, el ARN en comprimidos pede no adherirse al tubo. Se seca al vacío el ARN. Se vuelve a suspender el ARN al añadir 1 mi de agua DEPC, se cierra la tapa del tubo herméticamente. Para disolver el ARN, se incuba la solución de ARN sobre hielo durante 60 minutos y se somete a acción de remolino suavemente. Se agita brevemente para asegurarse que toda la solución de ARN se vaya al fondo del tubo antes de abrir la tapa. Transferir suavemente la solución de ARN a un tubo de 5 mi o más grande. Se añaden otros 3 mi de agua DEPC (4 mi en total de volumen).

Se añaden los siguientes volúmenes de reactivos Se añaden 20 µ? de mezcla de plantilla por reacción (es decir, 20 ng de pOF por reacción o ~3 nM) (4) Se incuba la reacción a temperatura ambiente (22-25°C) durante 2 horas. (5) Se detiene la reacción al añadir 50 µ? de EDTA 1 70 mM. La concentración final de EDTA es 85 mM. (6) Se pre-humedecen filtros de placa de prueba de tamices múltiples Millipore añadiendo 200 µ? de regulador de pH de fosfato de sodio 0.5 M, pH 7.0 en cada pozo. Se deja reposar a temperatura ambiente durante 2-3 minutos. (7) Se coloca la placa de filtro de tamices múltiples en un múltiple de Millipore y se enciende el vacío para permitir que el regulador de pH fluya. Se apaga el vacío. Se transfieren 80 µ? del producto de reacción en cada pozo de la placa de filtro. Se deja reposar durante 2-3 minutos. Se enciende el vacío para filtrara el producto de la reacción. (8) Se apaga el vacío. Se añaden 200 µ? de regulador de fosfato de sodio 0.5 M, pH 7.0 en cada pozo para lavar el filtro. Se apaga el vacío. Repetir el paso (8) tres veces más. (9) Se remueve el fondo de polipropileno. Se seca por puntos el filtro en el fondo con toalla de papel. Se seca con aire la placa de filtro en una mesa durante 1 hora. Se añaden 40 µ? de escintilante Super Mix. Se sella la parte superior de la palca con una cinta. Se coloca la placa en un veh ículo Packard o vehículo micro-beta . ( 1 0) Se cuenta la placa usando un contador Packard Topcount o micro-beta. Se cuenta (por ejemplo usando Programa 10) para 33P en contador superior o programa 33P en micro-beta. El por ciento de inhibición se calcula después de sustracción de fondo como por ciento de reducción de actividad en relación con el control positivo (valor promedio de la placa excluyendo los controles negativos). Para el primer tamiz se escogieron recomendaciones que mostraban >75 % de inhibición. Véase, Ferrari et al. 1999. J. Virology 73: 1649-1654: "Characterization of soluble Hepatitis C virus RNA-dependent RNA polymerase expressed in E. Coli, y Takamizawa et al 1991 " y J. Virology 65:1 105-1 1 13: "Structure and characterization of the Hepatitis C virus genome isolated from human carriers," ambas referencias se incorporan aquí por referencia. Los compuestos de la presente invención inhibieron polimerasa hepatitis C como se resume en el cuadro II: CUADRO II Datos biológicos Ejemplo [M+1]+ HCV Pol BK ELISA de replicón MTS 1 342 1.8 43.2 >147 2 358 0.23 136.3 >140 3 390 >6.4 4 348 0.53 21.9 > 44 348 0.86 53.0 >144 6 332 1.5 11.3 >151 7 344 1.2 44.1 83.2 8 332 3.5 63.9 >151 9 362 0.14 22.1 115.6 358 >28 12.9 >140 11 341 0.21 31.9 >147 12 362 0.16 13.7 64.2 13 328 2.8 48.1 >153 14 342 25.1 7.8 >147 328 1.9 70.8 >153 16 374 2.1 17 356 4.8 >141 >141 18 370 2.4 >136 >136 19 384 0.6 51.8 36.8 350 0.3 26.3 >143 21 355 0.9 18.5 87.5 22 396 1.8 23 346 0.4 14.4 >145 24 342 1.0 22.0 >147 347 0.23 11.7 >144 26 370 16.2 63.4 >136 27 375 0.8 5.8 44 28 361 0.1 3.1 >139 29 392 0.1 43.3 >128 361 3.4 31 365 0.017 2 >137 32 345 7.5 33 366 0.23 13.1 >137 34 366 0.11 11.5 131 377 >27 36 357 11.8 37 381 0.1 1 1.7 61 .7 38 365 0.18 16.7 >137 39 393 0.29 12.1 40 40 390 4.1 72.6 >128 41 391 0.14 8.5 122.6 42 376 0.17 21 .0 >133 43 358 0.199 13.9 >140 44 379 0.08 4.1 81 .0 45 426 0.1 1 2.0 61 .7 46 313 7.9 47 379 0.88 48 409 La capacidad de los compuestos de la presente invención para inhibir replicón de virus de hepatitis C constitutivamente expresado en una línea de células hepáticas humanas establecida por el siguiente procedimiento experimental: Células de clon A (con licencia de Apath, LLC) se derivan de células Huh-7 (línea de células de hepatoma humanas) y constitutivamente expresan proteínas de replicación de HCV con amplificación concomitante del genoma del replicón de HCV (Ib). Las células se mantienen y se hacen pasar en DMEM/ 10% FCS/ 1 mg/ml G4 8 (Geneticin de Gibco # 181 1 -023; otros componentes del medio como se describe más adelante en "media de ELISA"). Se debe tener cuidado de mantener monocapas de células en un estado subconfluente por pasajes de 1 :3 o 1 :4 cada 3-4 días. El replicón es extremadamente sensible al estado de metabolismo/proliferación celular y el número de copia del replicón declinará rápidamente en monocapas confluentes (células en reposo). Bajo condiciones ideales ideal cada célula tiene, en promedio, 1000 copias del genoma de replicón de HCV.

Reactivos: Medio de Elisa: Medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) (Gibco #12430-047) 2% de suero de ternera fetal (FCS) (HyClone #SH30070.03) IX penicilina/estreptomicina (Gibco #15140-122) IX Aminoácidos no esenciales (NEAA) (Gibco #1 1 140-050) no G41 8 Glutaraldehído (Fisher #02957-4) TWEEN-20, 10% (Roche #1 332465) TRITON X-100 (Sigma #T-8787) Superbloque en solución salina regulada en su pH con fosfato (PBS) (Pierce #37515) Anticuerpo monoclonal NS 5a (Virostat #1873) Anticuerpo monoclonal antiratón-HRP de cabra (BioRad #1 72- 101 1 ) Sustrato de 3,3\5,5' tetrametilbencidina (TMB) (Sigma #T-0440) Dilución de compuesto/placas de células: Preparación de placa de fármaco (placa madre) 10 µ? de compuestos (en DMSO) se añaden a la columna 3 de la placa madre. 5 µ? de DMSO se añaden a las columnas restantes. Las placas madre se ponen a un lado hasta que están listas para que se realice la dilución serial.

Fármacos de control Adición de fármacos y células: El procedimiento para cada placa implica: Preparar placas de células (placas hijas) al añadir 52 µ? de medio de Elisa a cada pozo. En las placas madre, se transfiere en serie 50 µ?/???? de la columna 3 a la columna 12. Se transfiere 8 µ? de la placa madre a las placas hijas (todos los 96 pozos). Se colocan las placas hijas en la incubadora hasta que se preparan las células. Se cosechan las células del Clon A y se colocan en placas hijas directamente a 0.7x105 células/ml, 100 µ?/????. Todas las placas se incuban a 37°C en 5% de CO2 durante 3 días.

Prueba de Elisa: Se remueve el medio de placas de 96 pozos (las células deben ser aprox. 80% confluentes) al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Se añaden 130 µ?/???? de IX PBS + 0.05% glutaraldehído. Se incuba a 37°C durante 1 hora. Se remueve al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Se lava 3X con 300 µ?/???? de PBS, agitando 5 min cada lavado. Se remueve al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Se añaden 130 µ?/???? de PBS + 0.05% de TWEEN-20 + 0.1 % de TRITON X-100. Se incuba a 37°C durante 10 minutos. Se remueve al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Se añade 300 µ?/???? de Superblock en PBS. Se incuba a 37°C durante 1 hora. Se remueve al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Se lava 3x con 300 µ?/???? de PBS, agitando durante 5 minutos cada lavado. Se remueve al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Durante el último lavado, se hace una dilución de 1 :100 de NS5a Anticuerpo monoclonal (Mab) en Superbioque + 0.02% TWEEN-20. Después del último lavado, se añaden 50 µ?/???? de Mab diluido. Se incuba a 37°C durante 1 hora. Se remueve al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Se lava 3X con 300 µ?/???? de PBS + 0.02% TWEEN-20, agitando durante 5 minutos cada lavado. Se remueve al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Durante el último lavado, se hace una dilución de 1 :500 de Mab de antiratón-HRP de cabra en el Superbioque + 0.02% TWEEN-20. Después del último lavado, se añaden 50 µ?/???? de Mab diluido. Se incuba a 37°C durante 1 hora. Se remueve al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Se lava 5X con 300 µ?/???? de PBS + 0.02% TWEEN-20, agitando durante 5 minutos cada lavado. Se remueve al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Se lava 3X con 300 µ?/???? de PBS, agitando durante 5 minutos cada lavado. Se remueve al golpear rápidamente y ligeramente en un vertedero. Después del último lavado, se añaden 130 µ?/???? de sustrato de sustrato de TMB a temperatura ambiente. Se incuba hasta que se desarrolla color azul. Se añaden 130 µ?/???? de HCl 1 N para detener la reacción (color cambia de azul a amarillo). Se leen las placas con densidad óptica (D.O.) filtro 450. Análisis de los resultados: CI5o (µ?); Cl50 ^g/vn\); % de inhibición Compuestos de referencia: lnterferón-a2; 4-30 U/ml Cl50

Claims (5)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES 1 .- Un compuesto de la fórmula (I): (0 en donde R1 se selecciona del grupo que consiste de -C(0)R6 y 7 en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de H, alquilo de C1 -C12, cicloalquilo de C3-C12, heterocicloalquilo de C Cn , heteroarilo de C2-C9 o arilo de C6-C-i 2, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, G se selecciona de H o hidroxilo, Y es O, NH o S, X se selecciona del grupo que consiste de H , halógeno, alquilo de C1 -C12 , cicloalquilo de C3-C12, perfluoroalquilo de CrC12, alcoxi de C Ci 2, alquiltio de Ci-C12 l amino, alquilamino de C-i -C6, dialquilamino de C2-C 2, y CN , y n es 0, 1 , 2 ó 3, o un profármaco, una sal farmacéuticamente aceptable, o un metabolito farmacéuticamente activo del mismo.
2. 2. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque: R6 y R7se seleccionan independientemente de H, alquilo de CrC6, cicloalquilo de C3-C12, heterocicloalquilo de C-i-Cn, heteroarilo de C2-C9 o arilo de C6-C-|2, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido; X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de CrC6, cicloalquilo de C3-C12, heterocicloalquilo de CrCn, perfluoroalquilo de Ci-C6, alcoxi de C C-6, alquiltio de Ci-C6, amino, alquilamino de C C6, dialquilamino de C2-C12, y CN; y los sustituyentes opcionales se seleccionan del grupo que consiste de alquilo de C-1-C6, halógeno, halogenoalquilo de CrC6, hidroxialquilo de C C6, nitro, amino, hidroxi, ciano, alquilamino de C-i-C6, dialquilamino de C2-C12, alcoxi de C1 -C6, halogenoalcoxi de C1-C6, alcoxialquilo de C2-C 2, alcoxialcoxi de C2-C12, oxo, alquiltio de C C6, mercapto, halogenoalquiltio de C C6, arilo de C6-C12, ariloxi de C6-Ci2, ariltío de C6-C12, heteroarilo de C2-C9, heteroariloxi de C2-C9, heteroariltio de C2-C9, acilo de C2-C7, -C02-alquilo de d-C6, -S03H, -S02NH2, -S02NH-alquilo de C C6, -S02NH-(alquilo de C C6)2, -CO2H, -CO2NH2, -C02NH-alquilo de C C6 y -C02N-(alquilo de C C6)2.
3. 3. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque: Y es O o NH; y X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de C C4, alcoxi de Ci-C4, y haogenoalquilo
4. 4. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado además porque n es 0, 1 ó 2 y G es H.
5. 5. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado además porque: R6 es alquilo de C C4; R7 es alquilo de Ci -C4 , cuando están presentes; y Y es NH. 6. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque n es 2 y X es halógeno. 7. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque R6 es CH3 y, cuando está presente, R7 es CH3. 8. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque X se selecciona de Cl y F. 9. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado además porque un X es Cl y el otro X es F. 10. - Un compuesto de la fórmula (II): (I I) en donde R1 se selecciona de-C(0)R6 y OR' en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de alquilo de C 1-C6, cicloalquilo de C3-C 2, heterocicloalquilo de C Cn , heteroarilo de C2-C9 o arilo de C6-Ci2, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, perfluoroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, alquiltio de 1 a 6 átomos de carbono, amino, alquilamino de 1 a 4 átomos de carbono, dialquilamino de 2 a 8 átomos de carbono, y CN, y G se selecciona de H o hidroxilo, o un profármaco, una sal farmacéuticamente aceptable, o un metabolito farmacéuticamente activo del mismo. 1 1 . - El compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque R6 y R7 se seleccionan independientemente de alquilo de C C6, cicloalquilo de C3-C12, o arilo de C6-Ci2, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido. 12. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 1 , caracterizado además porque G es H. 13.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado además porque el compuesto es: ácido 2-{[N-6-acetil-1 ,3-benzodioxol-5-il)glicil]amino}benzoico; ácido 2-({[N-[2-acetil-4-cloro-5-(metiltio)fenil]glicil}amino)benzoico; ácido 2-({[N-[2-acetil-4-cloro-5-(dimetilamino)fenil]glicil}amino)benzoico; ácido 2-({[N-[2-acetil-4-cloro-5-(metilamino)fenil]glicil}amino)benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-5-cloro-4-(fluorofenil)-N-metilglicil]amino}benzoico; y ácido 2-({[N-[2-acetil-4-cloro-5-(metilsulfinil)fenil]glicil}amino)benzoico. 14.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado además porque X se selecciona del grupo H, halógeno, alquilo de C-1 -C4 , perfluoroalquilo de C C4 y alcoxi de C-1 -C4. 15.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado además porque R6 y R7 son alquilo de CrC4. 16.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado además porque el compuesto es: ácido 2-{[N-(2-acetil-4-cloro-5-etoxifenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-cloro-5-metoxifenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-fluoro-5-metilfenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetilfenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(5-cloro-4-metil-2-propionilfenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-[2-(4,5-dimetil-2-propionilfenilamino)-acetilamino]-benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-5-cloro-4-metilfenil)glicil]amino}benzoico; y ácido 2-{[N-(2-acetil-4,5-dimetilfenil)glicil]amino}benzoico. 17. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado además porque X es halógeno, si está presente. 18. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque n es 0, 1 ó 2. 19. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado además porque el compuesto es: ácido 2-{[N-(2-acetil-4-bromo-5-clorofenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(5-cloro-4-fluoro-2-propionilfenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4,5-difluorofenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-cloro-5-fluorofenil)glicil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acetil-4,5- d¡clorofenil)glic¡l]amino}benzo¡co; ácido 2-{[N-(2-acetil-5-cloro-4-fluorofenil)gl¡c¡l]amino}benzo¡co; ácido 2-{[N-(4-cloro-2-propionilfen¡l)gl¡cil]amino}benzoico; ácido 2-{[N-(2-acet¡l-4-cloro-5-met¡lfenil)gl¡cil]amino}benzo¡co; ácido 2-{[N-(2-acetil-4-clorofenil)gl¡cil]amino}benzoico; y ácido 2-{[N-(2-acetil-4-bromofenil)glicil]amino}benzoico. 20. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado además porque el compuesto es ácido 2-{[N-(2-acetil-5-cloro-4-fluorofenil)glicil]amino}benzoico. 21 . - El compuesto de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado además porque el compuesto es ácido 2-(2-([5-cloro-4-fluoro-2-(1 -metoxiimino-etil)-fenilamino]acetilamino}benzoico. 22. - Un compuesto de la fórmula (III): (HI) en donde R se selecciona de-C(O)R6 y en donde R6 y R7 se seleccionan independientemente de alquilo de Ci-C6, cicloalquilo de C3-C12, heterocicloalquilo de C Cn , heteroarilo de C2-C9 o arilo de C6-C12, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido, X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, perfluoroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, alquiltio de 1 a 6 átomos de carbono, amino, alquilamino de 1 a 6 átomos de carbono, dialquilamino de 2 a 12 átomos de carbono, y CN, y G se selecciona de H o hidroxilo, o un profármaco, una sal farmacéuticamente aceptable, o un metabolito farmacéuticamente activo del mismo. 23.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado además porque R6 y R7 se seleccionan independientemente de alquilo de C-1 -C6, cicloalquilo de C3-C12, y arilo de C6-C-|2, cualquiera de los cuales puede ser opcionalmente sustituido. 24. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado además porque G es H. 25. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado además porque el compuesto es ácido 2-{[(2-acetil-5-metilfenoxi)acetil]amino}benzoico. 26. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado además porque X se selecciona del grupo que consiste de H, halógeno, alquilo de C-1-C4, perfluoroalquilo de C C4 y alcoxi de CrC4. 27. - Los compuestos de conformidad con la reivindicación 26, caracterizados además porque R6 y R7 son alquilo de d-C4. 28.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado además porque el compuesto es: ácido 2-{[(2-acetil-5-etilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(4,5-dimetil-2-pentanoilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-butiril-4,5-dimetilfenoxi)acetil]amino}benzoico¡ ácido 2-{[(4,5-dimetil-2-propionilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-({[4,5-dimetil-2-(trifluoroacetil)fenoxi]acetil}amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4,5-dimetoxifenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-5-metilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4-etilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4-metilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-5-metoxifenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-benzoil-4-metilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4,5-dimetilfenoxi)acetil]amino}-5-hidroxibenzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4,5-dimetilfenoxi)acetil]amino}benzoico; y ácido 2-{[(2-isobutiril-4,5-dimetilfenoxi)acetil]amino}benzoico. 29. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado además porque n es 1 , 2 ó 3 y por lo menos un X es halógeno. 30. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado además porque n es 1 ó 2. 31 . - El compuesto de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado además porque el compuesto es: ácido 2-{[(2-acetil-4-cloro-5-fluorofenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-5-cloro-4- fluorofenox¡)acetil]amino}benzo¡co; ácido 2-{[(2-acetil-4-fluoro-5-metilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4,5-difluorofenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(4-cloro-2-propionilfenoxi)aceti!]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4-cloro-5-metilfenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-5-fluorofenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-5-clorofenoxi)acetil]amino}benzoico; ácido 2-{[(2-acetil-4-fluorofenoxi)acetil]amino}benzoico; y ácido 2-{[(2-acetil-4-clorofenoxi)acetil]amino}benzoico. 32.- Un método para inhibir la replicación de un virus de hepatitis C que comprende poner en contacto un virus de hepatitis C ¡n vitro con una cantidad efectiva de por lo menos un compuesto de una de las reivindicaciones 1 , 10 ó 22. 33. - El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado además comprende poner en contacto el virus de hepatitis C con por lo menos un agente biológicamente activo seleccionado del grupo que consiste de interferón, un interferón pegilado, ribavirin, inhibidores de proteasa, inhibidores de polimerasa, compuestos de ARN de interferencia pequeños, compuestos anti-sentido, análogos de nucleótido, análogos de nucleósido, inmunoglobulinas, inmunomoduladores, hepatoprotectores, agentes antiinflamatorios, antibióticos, antivirales, y compuestos antiinfecciosos. 34. - El uso de por lo menos un compuesto una de las reivindicaciones 1 , 10 ó 22, para la elaboración de una composición farmacéutica útil para tratar o prevenir una infección por virus de hepatitis C en un mamífero. 35. - El uso como se reclama en la reivindicación 34, en donde el medicamento está formulado para ser administrable con por lo menos un agente biológicamente activo seleccionado del grupo que consiste de interferón, un interferón pegilado, ribavirin, inhibidores de proteasa, inhibidores de polimerasa, compuestos de ARN de interferencia pequeños, compuestos anti-sentido, análogos de nucleótido, análogos de nucleósido, inmunoglobulinas, inmunomoduladores, hepatoprotectores, agentes antiinflamatorios, antibióticos, antivirales, y compuestos anti-infecciosos. 36. - Un método para inhibir la ARN polimerasa NS5B dependiente de ARN de hepatitis C, que comprende poner en contacto una célula in vitro con una cantidad efectiva de un compuesto de la reivindicación 1 para disminuir o prevenir la función de NS5B. 37. - Una composición farmacéutica, que comprende un compuesto de una de las reivindicaciones 1 , 10 ó 22, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.