MX2007015196A

MX2007015196A - Derivados de fk 228 como inhibidores de hdac

Info

Publication number: MX2007015196A
Application number: MX/A/2007/015196A
Authority: MX
Inventors: Ganesan Arasu; Keith Packham Graham; Yurekgeorge Alexander; Richard Liam Cecil Alexander
Original assignee: Trust; University Of Southampton
Priority date: 2005-06-02
Filing date: 2007-11-30
Publication date: 2008-09-02

Abstract

Se encontróque compuestos que son análogos de FK228 de la fórmula general (I) o (I'), isósteros de los mismos y sales farmacéuticamente aceptables de ellos, inhiben HDAC, en donde R1, R2, R3 y R4 son los mismos o diferentes y representan una región de cadena lateral de aminoácidos y cada R6 es el mismo o diferente y representa hidrógeno o alquilo de C1-C4.

Description

DERIVADOS DE FK 228 COMO INHIBIDORES DE HDAC La presente invención se relaciona a depsipéptidos especificos que actúan como inhibidores de HDAC. Las desacetilasas de histona (HDACs) son metaloenzimas de zinc que catalizan la hidrólisis de residuos de lisina acetilados. En histonas, estas Usinas regresan a su estado protonado normal y es un mecanismo global de control transcripcional eucariótico, que da por resultado empaquetamiento ajustado de DNA en el nucleosoma. Adicionalmente, la acetilación de lisina reversible es un importante proceso regulatorio para las proteínas no de histona. Asi, los compuestos que son capaces de modular HDAC tienen importante potencial terapéutico. Dos depsipéptidos de producto natural, FK228 y Spiruchostatin A, se han reportado por tener potencial como inhibidores de HDAC. Sin embargo, las posibilidades para modificar químicamente estos productos naturales para proporcionar análogos adicionales es extremadamente limitado. Ahora sorprendentemente se ha encontrado que los compuestos de, las fórmulas generales (I) y (I') expuestas enseguida actúan como inhibidores de HDAC. Por consiguiente, la presente invención proporciona el uso de un compuesto que es un análogo de FK228 de la fórmula (I) o (I'), un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la manufactura de un medicamento para el uso como un inhibidor de HDAC en donde Ri, R2, R3 y R4 son los mismos o diferentes y representan una porción de cadena lateral de aminoácido, cada Re es el mismo o diferente y representa hidrógeno o alquilo de C?-C , y Pr1 y Pr2 son los mismos o diferentes y presentan hidrógeno o un grupo protector de tiol. La presente invención además proporciona el uso de un análogo de FK228 como es definido anteriormente o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la manufactura de un medicamento para el uso como un inhibidor de HDAC. Como se utiliza en la presente, el término "porción de cadena lateral de aminoácido" se refiere a cualquier cadena lateral de aminoácido presente en aminoácidos naturales y no naturales. Ejemplos de porciones de cadena lateral de aminoácido derivados de aminoácidos no naturales, con los aminoácidos a partir de los cuales ellos se derivan mostrados entre paréntesis, son - (CH2) 2-C (O) -O-C (CH3) 3 (ter-butoxicarbonilmetilanalina) , - (CH2) 4-NH-C (O) -O-C (CH3) 3 (Ne- (ter-butoxicarbonil) -lisina) , - (CH2) 3-NH-C (O) NH2 (citrulina), -CH2-CH2OH (homoserina) y - (CH2) 2-CH2NH2 (ornitina) . En particular se pueden mencionar - (CH2) 3-NH-C (0) NH2 (citrulina) , -CH2-CH2OH (homoserina) y - (CH2) 2-CH2NH2 (ornitina). Un grupo o porción alquilo de C?-C6 puede ser lineal o ramificada. Típicamente, es un grupo o porción alquilo de C?~C , por ejemplo metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, sec-butilo y t-butilo. Ejemplos preferidos incluyen metilo, i-propilo y t-butilo. Un grupo o porción alquenilo de C2-C6 puede ser lineal o ramificada. Típicamente, es un grupo o porción alquenilo de C2-C4. Se prefiere que los radicales alquenilo sean mono o diinsaturados, más de preferencia monoinsaturados . Ejemplos incluyen vinilo, alilo, 1-propenilo, isopropenilo, 1-butenilo, 2-butenilo y 3-butenilo. Un grupo alquileno es un grupo alquilo que es divalente. Un grupo protector de tiol es típicamente: (a) un grupo protector que forma un tioéter para proteger un grupo tiol, por ejemplo un grupo bencilo que es opcionalmente sustituido por alcoxi de Ci-Ce (por ejemplo metoxi), aciloxi de C?-C6 (por ejemplo acetoxi) , hidroxi y nitro, picolilo, picolil-N-óxido, antrilmetilo, difenilmetilo, fenilo, t-butilo, adamantilo, aciloximetilo de C?-C6 (por ejemplo pivaloiloximetilo, butoxicarboniloximetilo terciario) ; (b) un grupo protector que forma un monotio, ditio o aminotioacetal para proteger un grupo tiol, por ejemplo alcoximetilo de Cx-C6 (por ejemplo metoximetilo, isobutoximetilo) , tetrahidropiranilo, benciltiometilo, feniltiometilo, tiazolidina, acetamidemetilo, benzamidometilo; (c) un grupo protector que forma un tioéster para proteger un grupo tiol, tal como butoxicarbonilo terciario (BOC) , acetilo y sus derivados, benzoilo y sus derivados; o (d) un grupo protector que forma un ácido tioéster de ácido carbamina para proteger un grupo tiol, tal como carbamoilo, fenilcarbamoilo, alquilcarbamoilo de Ci-Cd (por ejemplo metilcarbamoilo y etilcarbamoilo) . Típicamente, Pr1 y Pr2 son los mismos o diferentes y cada uno representa hidrógeno o un grupo protector que forma un tioéter, un monotio, ditio o aminotioacetal, un tioéster o un tioéster de ácido carbamina para proteger un grupo tiol. De preferencia, Pr1 y Pr2 son los mismos o diferentes y cada uno representa hidrógeno o un grupo protector seleccionado de un grupo bencilo que es opcionalmente sustituido por alcoxi de CI-CÉ (por ejemplo metoxi) , aciloxi de C?~C6 (por ejemplo acetoxi) , hidroxi y nitro, picolilo, picolil-N-óxido, antrilmetilo, difenilmetilo, fenilo, t-butilo, adamantilo, aciloximetilo de C?-C6 (por ejemplo pivaloiloximetilo, butoxicarboniloximetilo terciario) , alcoximetilo de C?~C6 (por ejemplo metoximetilo, isobutoximetilo) , tetrahidropiranilo, benciltiometilo, feniltiometilo, tiazolidina, acetamidemetilo, benzamidometilo, butoxicarbonilo terciario (BOC) , acetilo y sus derivados, benzoilo y sus derivados, carbamoilo, fenilcarbamoilo y alquilcarbamoilo de C?-C5 (por ejemplo metilcarbamoilo y etilcarbamoilo) . Mucho más de preferencia, Pr1 y Pr2 son hidrógeno. En una modalidad, las porciones de cadena lateral de aminoácido son aquellas derivadas de aminoácidos naturales. Ejemplos de porciones de cadena latera de aminoácido derivados de aminoácidos naturales, con los aminoácidos a partir de los cuales ellos se derivan mostrados entre paréntesis, son -H (Glicina) , -CH3 (Alanina), -CH(CH3)2 (Valina), -CH2CH(CH3)2 (Leucina), CH(CH3)CH2CH3 (Isoleucina), -(CH2)4NH2 (Lisina), (CH2)3NHC(=NH)NH2 (Arginina), -CH2- ( 5-lH-imidazolilo) (Histidina), -CH2CONH2 (Asparagina), -CH2CH2CONH2 (Glutamina), -CH2COOH (Ácido aspártico) , -CH2CH2COOH (Ácido glutámico) , -CH2-fenilo (Fenilalanina) , -CH2- (4-OH-fenilo) (Tirosina), -CH2- (3-lH-indolilo) (Triptofano), -CH2SH (Cisteina) , CH2CH2SCH3 (Metioina), -CH20H (Serina) y -CH(OH)CH3 (Treonina) . En una modalidad, cada cadena lateral de aminoácido es una porción de cadena lateral de aminoácido presente en un aminoácido natural o es, - (CH2) 2-C (O) -0-C(CH3) 3 ( ter-butoxicarbonilmetilanalina) , - (CH2) 4-NH-C (O) -O-C (CH3) 3 (Ne- (ter-butoxicarbonil) -lisina) , - (CH2) 3-NH-C (O) NH2 (citrulina) , -CH2-CH2OH (homoserina) o - (CH2) 2-CH2NH2 (ornitina). En una modalidad preferida de la invención, cada cadena lateral de aminoácido es una porción seleccionada de -H, alquilo de C?-C6, alquenilo de C2-C6, -L-O-C (0) -R' , -L-C(0)-0-R", -L-A, -L-NR"R", -L-Het-C (0) -Het-R" y -L-Het-R", en donde L es un grupo alquileno de Ci-Ce, A es fenilo o un grupo heteroarilo de 5 a 6 miembros, cada R' es el mismo o diferente y representa alquilo de C?-C4, cada R" es el mismo o diferente y representa H o alquilo de Ci-Cß, cada -Het- es el mismo o diferente y es un espaciador de heteroátomo seleccionado de -0-, -N(R"')- y -S- y cada R"' es el mismo o diferente y representa H o alquilo de C?-C . Cuando el grupo A es un grupo heteroarilo de 5 a 6 miembros, puede ser, por ejemplo, furanilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, piridilo, piridazilo, pirimidinilo, pirazinilo, triazinilo. Típicamente, sin embargo, cada porción A es fenilo. El grupo espaciador de heteroátomo Het es típicamente -0- o -N(R"')-. Más típicamente es -0- o -N(H)-. De preferencia, cada cadena lateral de aminoácido es una porción seleccionada de -H, alquilo de -Ci-Ce, -L-C (0) -0-R", -L-A, -L-NR"R" y -L-N (R") -C (0) -0-R" , en donde L, A y R" son como se definen en lo anterior.

Típicamente las porciones de cadena lateral de amino de los compuestos de la invención se seleccionan de -(CH2)2-C(0)-0-C(CH3)3, -(CH2)4-NH-C(0)-0-C(CH3)3, ~(CH2)2-C(0)0H, -CH2-C6H5, -H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH (CH3) 2 , CH(CH3)CH2CH3, -(CH2)4NH2, CH2SH, -CH2CH2SCH3, -CH2OH y -CH(OH)CH3. Más típicamente las porciones de cadena lateral de aminoácido se seleccionan de -H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH (CH3) 2, -CH(CH3)CH2CH3, -(CH2)4NH2, CH2SH, -CH2CH2SCH3, -CH2OH y -CH(OH)CH3. De preferencia, las porciones de cadena lateral de aminoácido se seleccionan de -H, -CH3, - (CH2) 2~C (O) -O-C (CH3) 3, -(CH2)4-NH-C(0)-0-C(CH3)3, - (CH2) 2~C (O) OH, -CH2-C6H5, -(CH2)4NH2 y -CH(CH3)2- En una modalidad de la invención, las porciones de cadena lateral de aminoácido se seleccionan de -H, -CH3 y -CH(CH3)2. Típicamente, Rx es una porción de cadena lateral de aminoácido selecciona de -H, alquilo de -C?-C6, alquenilo de -C2-C6, -L-O-C(O) -R' , -L-C(O) -O-R", -L-A, -L-NR"R", -L-Het-C(0)-Het-R" y -L-Het-R", en donde L, R' , R", -Het- y R"' son como se definen en lo anterior. De preferencia, Ri es una porción seleccionada de -H, alquilo de -C?~C6, -L-C (O) -O-R", -L-A, -L-NR"R" y -L-N(R")- C(0)-0-R", en donde L, A y R" son como se definen en lo anterior. Más de preferencia Ri es una porción seleccionada de -H y alquilo de -C?-C6. Aun más de preferencia Ri es alquilo de -C?-C4, en particular isopropilo.

Típicamente, R2 es una porción de cadena lateral de aminoácido seleccionada de -H, alquilo de -Ci-Ce, alquenilo de -C2-C6, -L-O-C(O) -R' , -L-C(O) -0-R", -L-A, -L-NR"R", -L-Het-C(0)-Het-R" y -L-Het-R", en donde L, R' , R", -Het- y R"' son como se definen en lo anterior. De preferencia, R es una porción seleccionada de -H, alquilo de -C?-C6, -L-C (0) -0-R", -L-A, -L-NR"R" y -L-N(R")- C(0)-0-R", en donde L, A y R" son como se definen en lo anterior. Más de preferencia, R2 es una porción seleccionada de -H y alquilo de -C?-C4. Aun más de preferencia R2 es -H, -CH3 o -CH(CH3)2- Aun más de preferencia R2 es -H o -CH3. Típicamente, R3 es una porción de cadena lateral de aminoácido seleccionada de -H, alquilo de -C?~C6, alquenilo de -C2-C6, -L-O-C(O) -R' , -L-C(0)-0-R", -L-A, -L-NR"R", -L-Het-C(0)-Het-R" y -L-Het-R", en donde L,' R' , R", -Het- y R"' son como se definen en lo anterior. De preferencia, R3 es una porción seleccionada de -H, alquilo de -C?-C6, -L-C (0) -0-R", -L-A, -L-NR"R" y -L-N(R")- C(0)-0-R", en donde L, A y R" son como se definen en lo anterior. Más de preferencia, R3 es - (CH2)2-C(0)-0-C(CH3)3, -(CH2)4-NH-C(0)-0-C(CH3)3, -(CH2)2-C(0)0H, -CH2-C6H5, -CH3, -CH(CH3)2 o -(CH2)4NH2. Típicamente, R4 es una porción de cadena lateral de aminoácido seleccionada de -H, alquilo de -C±-C?, alquenilo de -C2-C6, -L-O-C(O) -R' , -L-C (0) -O-R", -L-A, -L-NR"R", -L-Het-C(0)-Het-R" y -L-Het-R", en donde L, R' , R", -Het- i R"' son como se definen en lo anterior. De preferencia, R4 es una porción seleccionada de -H, alquilo de -C?-C6, -L-C (0) -0-R", -L-A, -L-NR"R" y -L-N(R")- C(0)-0-R", en donde L, A y R" son como se definen en lo anterior. Más de preferencia, R es hidrógeno, alquilo de -Ci-Ce o alquenilo de -C2-C6- Aun más de preferencia, R4 es hidrógeno o alquilo de -C?-C4, más de preferencia hidrógeno. Típicamente, cada Rs es el mismo o diferente y es hidrógeno o alquilo de -C?-C . De preferencia, cada Rß es hidrógeno. En una modalidad la presente invención proporciona un análogo de FK228 como se define en lo anterior que es un compuesto de la fórmula (I), un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Los compuestos preferidos de la invención son análogos de FK228 como se definen en lo anterior en donde Ri se selecciona de -H y alquilo de -Ci-Cd, R2 se selecciona de -H y alquilo de -C?-C , R3 se selecciona de -H, alquilo de -Ci-C6, -L-C (0) -0-R", -L-A, -L-NR"R" y -L- N (R") -C (0) -0-R" en donde L, A y R" son como se definen en lo anterior, R4 se selecciona de -H y alquilo de -Ci-Cg y cada R& es el mismo o diferente y es hidrógeno o alquilo de -C?~C2, isósteros de los mismos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los compuestos además preferidos de la invención son re (a) los compuestos de la fórmula (I) en donde Ri es alquilo de -C?~C4, R2 se selecciona de -H y -CH3, R3 se selecciona de -H, alquilo de -C?-C6, -L-C (O) -O-R", -L-A, -L-NR"R" y -L-N (R") -C (O) -O-R" en donde L, A y R" son como se definen en lo anterior, R4 es -H y cada R6 es -H, isósteros de los mismos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y (b) los compuestos de la fórmula (I') en donde Ri es alquilo de -C?-C4, R2 se selecciona de -H y -CH3, R3 se selecciona de -H, alquilo de -C?-C6, -L-C (O) -O-R", -L-A, -L-NR"R" y -L-N (R") -C (O) -O-R" en donde L, A y R" son como se definen en lo anterior, R4 es -H, cada Rß es -H y Pr1 y Pr2 son hidrógeno, isósteros de los mismos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos . Los compuestos particularmente además preferidos de la fórmula (I) son aquellos en donde Ri es -CH(CH3)2, R2 es -CH3, R3 es -CH3, R4 es hidrógeno y R5 es -H; Rx es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es - (CH2) 2-C (O) -O-C (CH3) 3, R4 es hidrógeno y R? es -H; Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es - (CH2) 2-C (O) -OH, R4 es hidrógeno y R6 es -H; Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es -(CH2)-C6H5, R4 es hidrógeno y R? es -H; - Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es -CH(CH3)2, R4 es hidrógeno y R6 es -H; Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es - (CH2) 4-NH-C (O) -O-C (CH3) 3, R4 es hidrógeno y Rg es -H; o Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es -(CH2)4-NH2, R4 es hidrógeno y R? es -H; y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los compuestos particularmente además preferidos de la fórmula (I') son aquellos en donde Ri es -CH(CH3)2, R2 es -CH3, R3 es -CH , R4 es hidrógeno, R es -H y Pr1 y Pr2 son hidrógeno; Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es - (CH2) 2-C (O) -O-C (CH3) 3, R4 es hidrógeno, R6 es -H y Pr1 y Pr2 son hidrógeno; Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es - (CH2) 2-C (O) -OH, R4 es hidrógeno, R6 es -H y Pr1 y Pr2 son hidrógeno; - Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es -(CH2)-C6H5, R4 es hidrógeno, Rß es -H y Pr1 y Pr2 son hidrógeno; Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es -CH(CH3)2, R4 es hidrógeno, R6 es -H y Pr1 y Pr2 son hidrógeno; Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es - (CH2) 4-NH-C (O) -O-C (CH3) 3, R4 es hidrógeno, R6 es -H y Pr1 y Pr2 son hidrógeno; o Ri es -CH(CH3)2, R2 es -H3 R3 es -(CH2)4-NH2, R4 es hidrógeno, R6 es -H y Pr1 y Pr2 son hidrógeno; y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Un análogo de FK228 preferido es de la fórmula (2) o (2') Otro análogo de FK228 preferido es de la fórmula ;3) o (3') Otro análogo de FK228 preferido es de la fórmula Otro análogo de FK228 preferido de la fórmula (5) o :5') Otro análogo de FK228 preferido es de la fórmula (6) o (6' Otro análogo de FK228 preferido es de la fórmula [7) o (7' Otro análogo de FK228 preferido es de la fórmula (8) o (8' Otro análogo de FK228 preferido es de la fórmula 9) o (9' En una modalidad de la presente invención, los análogos de FK228 son de la fórmula (II) o (II') en donde Ri, R2, R3, R4, Re, Pr1 y Pr2 son como se definen en lo anterior. En otra modalidad de la presente invención, los análogos de FK228 son de la fórmula (III) o (III') en donde Rx, R2, R3, Pr1 y Pr2 son como se definen en lo anterior. En otra modalidad de la presente invención, los análogos de FK228 son de la fórmula (IV) o (IV ) en donde Ri, R2, R3, Pr1 y Pr2 son como se definen en lo anterior. En otra modalidad de la presente invención, los análogos de FK228 son de la fórmula (V) o (V) en donde Rí r R2, R , Pr y Pr son como se definen en lo anterior. En una modalidad adicional, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (VI), un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la manufactura de un medicamento para uso como un inhibidor de HDAC en donde Ri, R2 y R3 son los mismos o diferentes y representan una porción de cadena lateral de aminoácido y R4 es hidrógeno, alquilo de Ci-Cß o alquenilo de C2-C6. Típicamente en esta modalidad, Ri es una porción de cadena lateral de aminoácido derivada de un aminoácido natural. De preferencia en esta modalidad Rx es -H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH (CH3) CH2CH3, -(CH2)4NH2, -CH2SH, -CH2CH2SCH3, -CH2OH o -CH(OH)CH3. Más de preferencia, Rx es -H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2 o -CH (CH3) CH2CH3. Mucho más de preferencia, R1 es -CH(CH3)2. Típicamente en esta modalidad, R2 es una porción de cadena lateral de aminoácido derivada de un aminoácido natural. De preferencia R2 es -H, -CH3, -CH(CH3)2, CH2CH(CH3)2, -CH(CH3)CH2CH3, -(CH2)4NH2, -CH2SH, -CH2CH2SCH3, -CH2OH o -CH(OH)CH3. Más de preferencia, R2 es -H, -CH3 o -CH(CH3) . Mucho más de preferencia, R2 es -H. Típicamente en esta modalidad, R3 es una porción de cadena lateral de aminoácido derivado de un aminoácido natural. De preferencia R3 es -H, -CH3, -CH(CH3)2/ CH2CH(CH3)2, -CH(CH3)CH2CH3, -(CH2)4NH2, -CH2SH, -CH2CH2SCH3, -CH2OH o -CH(OH)CH3. Más de preferencia, R3 es -H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2 o -CH (CH3) CH2CH3. Mucho más de preferencia, R3 es -CH3. Típicamente en esta modalidad, R4 es hidrógeno o alquilo de C?-C6. De preferencia, R4 es hidrógeno o alquilo de C?~C2. Más de preferencia, R4 es hidrógeno. En esta modalidad los compuestos preferidos de la invención son los compuestos de la fórmula (VI) en donde: Ri es -H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH (CH3) 2, -CH (CH3) CH2CH3, - (CH2)4NH2, -CH2SH, -CH2CH2SCH3, -CH2OH o -CH(OH)CH3; R2 es -H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH (CH3) 2, -CH (CH3) CH2CH3, - (CH2)4NH2, -CH2SH, -CH2CH2SCH3, -CH2OH o -CH(OH)CH3; R3 es -H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH (CH3) 2, -CH (CH3) CH2CH3, - (CH2)4NH2, -CH2SH, -CH2CH2SCH3, -CH2OH o -CH(OH)CH3; y R4 es hidrógeno o alquilo de C?~C2. En un aspecto preferido de esta modalidad la presente invención proporciona los compuestos de la fórmula (VI) en donde:, Ri es -H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2 o -CH (CH3) CH2CH3; - R2 es -H, -CH3 o -CH(CH3)2; R3 es -H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2 o -CH (CH3) CH2CH3; y R4 es hidrógeno. Particularmente los compuestos preferidos de esta modalidad son aquellos de la fórmula (VI) en donde Rx es -CH(CH3)2, R2 es -H, R3 es -CH3 y R4 es hidrógeno.

Los compuestos preferidos adicionales de esta modalidad son los compuestos de la fórmula (III) en donde Ri, R2 y R3 son como se definen en lo anterior. Los compuestos además más preferidos de esta modalidad son los compuestos de la fórmula (IV) en donde Ri, R2 y R3 son como se definen en lo anterior. Los compuestos de la presente invención se creen que son novedosos y la presente invención asi proporciona un compuesto de la fórmula (I), un isóptero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La presente invención además proporciona un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La presente invención también proporciona un compuesto de la fórmula (I), un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en un método para tratar el cuerpo humano o animal. La presente invención además proporciona un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en un método para tratar el cuerpo humano o animal. Los compuestos de la presente invención son particularmente ventajosos puesto que ellos muestran altos efectos terapéuticos. Ellos también son ventajosos puesto que el núcleo de tetrapéptido puede ser fácilmente sintetizado. Como se utiliza en la presente, una sal farmacéuticamente aceptable es una sal con un ácido o base farmacéuticamente aceptable. Los ácidos farmacéuticamente aceptables incluyen tanto ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, sulfúrico, fosfórico, difosfórico, bromhidrico o nítrico y ácidos orgánicos tales como ácido cítrico, fumárico, maleico, málico, ascórbico, succinico, tartárico, benzoico, acético, metanosulfónico, etanosulfónico, bencensulfónico o p-toluensulfónico. Las bases farmacéuticamente aceptables incluyen metal alcalino (por ejemplo sodio o potasio) y metal alcalinotérreo (por ejemplo calcio o magnesio) hidróxidos y bases orgánicas tales como alquil aminas, aralquil aminas o aminas heterociclicas : Como se utiliza en la presente, el término "isóstero" se refiere a un compuesto que resulta del cambio de un átomo o un grupo de átomos entre si, ampliamente similar, átomo o grupo de átomos. En los compuestos de la fórmula (I), las porciones que contienen grupos isostéricos son de preferencia -NH-CHRi-CO-, -NH-CHR2-CO-0- y -NH-CO-CHR3-NH-CO-. En los compuestos de la fórmula (I), las porciones que contienen grupos isostéricos son más de preferencia -NH-CHRi-CO- y -NH-CHR2-CO-0-. Ejemplos de tales isósteros son los compuestos de la fórmula (I) en donde la porción -NH- se ha reemplazado por -CH2-, -O- o -S-, la porción -CO- se ha reemplazado por -CS- o -C(=NH)- y la porción -O- se ha reemplazado por -S-, CH2- o -NH-. Los compuestos de la presente invención tienen quiralidad mostrada en la fórmula (I) . Sin embargo, la posición espacial de los grupos Ri, R2 y R3 puede dar por resultado la formación de centros quirales adicionales en los compuestos. Para la prevención de duda, las estructuras químicas representadas en la presente se proponen para abarcar todas de las configuraciones de estereoisómeros asociadas con estos centros quirales adicionales, que incluyen mezclas racémicas y no racémicas y enantiómeros y/o diastereoisómeros puros. Para la prevención de duda, la presente invención también abarca profármacos que reaccionan in vi vo para dar un compuesto de la presente invención o un isóstero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos preferidos de la invención son isómeros ópticos. Asi, por ejemplo, los compuestos preferidos de la fórmula (I) que contienen solamente un centro quiral incluyen un isómero R en forma sustancialmente pura, un enantiómero S en forma sustancialmente pura y mezclas enantioméricas que contienen un exceso del enantiómero R o un exceso del enantiómero S. La presente invención también proporciona un compuesto de la fórmula (I), un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un portador o diluyente f rmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica típicamente contiene hasta 85% en peso de un compuesto de la invención. Más típicamente, contiene hasta 50% en peso de un compuesto de la invención. Las composiciones farmacéuticas preferidas son estériles y libres de pirógeno. Además, las composiciones farmacéuticas provistas por la invención típicamente contienen un compuesto de la invención que es un isómero óptico sustancialmente puro. De preferencia, la composición farmacéutica comprende una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la fórmula (I) o un isóstero del mismo. Los análogos de FK228 se pueden preparar mediante rutas convencionales, por ejemplo utilizando el siguiente esquema en donde los grupos Ri a R4 son como se definen en lo anterior: En la etapa (a), un éster de aminoácido que es el R2 de cadena lateral se condensa con un segundo aminoácido que es el Ri de cadena lateral para dar un dipéptido. En la etapa (b) , el dipéptido se condensa con un derivado de cisteina protegida para dar un tripéptido. En la etapa (c) el tripéptido se acopla con un aminoácido para proporcionar un tetrapéptido protegido. En la etapa (d) , el término N del tetrapéptido se desprotege, y la amina libre se acopla con un derivado de ácido ß-hidroxi en donde R5 es un grupo de bloqueo temporario que se puede remover para producir un compuesto en donde R5 es H, y X es un auxiliar quiral como es reportado en Yurek-George, A.; Habens, F. ; Brimmell, M. ; Packham, G.; Ganesan, A. J. Am . Chetn . Soc . 2004, 126, 1030-1031. En la etapa (e) , el grupo éster se hidroliza, después de la ciclización en la etapa (f) y la formación de enlace de disulfuro en (g) para completar la síntesis de los compuestos depsipéptidos biciclicos (I). Los compuestos de la invención en los cuales Rß es diferente a hidrógeno se pueden obtener ya sea al alquilar un compuesto correspondiente de la invención o intermediario en el cual Rß es hidrógeno o al utilizar materiales de partida apropiadamente sustituidos. Los compuestos de la fórmula (I') se pueden obtener mediante la reacción del producto de la etapa (g) arriba para segmentar el enlace de disulfuro. La segmentación del enlace de disulfuro típicamente se logra utilizando un compuesto de tiol generalmente utilizado para un tratamiento de reducción de una proteina que tiene un enlace de disulfuro, por ejemplo mercaptoetanol, ácido tioglicólico, 2-mercaptoetilamina, bencenotiol, paratiocresol y ditiotreitol . De preferencia, se utilizan mercaptoetanol y ditiotreitol. Un exceso del compuesto de tiol se puede remover mediante por ejemplo diálisis o filtración de gel. Alternativamente, electrólisis, tetrahidroborato de sodio, hidruro de aluminio litio o sulfita se puede, por ejemplo, utilizar para segmentar el enlace de disulfuro. Los compuestos de la fórmula (I') en los cuales Pr1 y/o Pr2 es diferente a hidrógeno se puede preparar al introducir un grupo protector de tiol en un compuesto correspondiente en el cual Pr1 y/o Pr2 es/son hidrógeno. En este aspecto un agente adecuado para introducir un grupo protector de tiol que es utilizado en esta reacción es apropiadamente determinado dependiendo del grupo protector que es introducido. Ejemplos incluyen cloruros del grupo protector correspondiente (por ejemplo cloruro de bencilo, cloruro de metoxibencilo, cloruro de acetoxibencilo, cloruro de nitrobencilo, cloruro de picolilo, óxido de N de cloruro de picolilo, cloruro de metil antrilo, cloruro de isobutoximetilo, cloruro de feniltiometilo) y alcoholes del grupo protector correspondiente (por ejemplo cloruro de difenilmetilo, alcohol adamantilico, alcohol acetamidemetilico, alcohol benzamidometilico) , dinitrofenilo, isobutileno, dimetoximetano, dihidropirano y cloroformiato de t-butilo. Como la persona experta apreciará, cuando uno de Ri R2/ R3 y R4 porta un grupo funcional tales como -OH, -SH, -NH2 o -COOH, entonces puede ser preferido para que el grupo a ser protegido para uno más de las etapas de reacción después de su introducción. En este caso el grupo en cuestión podria ser protegido en una etapa separada después de su introducción, o, podria ser protegido fácilmente en el tiempo que es introducido. La persona experta estará consiente de grupos protectores adecuados que se pueden utilizar en este respecto. Los análogos de FK228 asi obtenidos se pueden salificar mediante el tratamiento con un ácido o base apropiada. Las mezclas racémicas obtenidas por cualquiera de los procesos anteriores se pueden resolver mediante técnicas estándar, por ejemplo elución sobre una columna cromatográfica quiral. Los compuestos preferidos de la invención tienen una actividad inhibitoria de HDAC que es por lo menos igual a aquella exhibida por ácido hidroxámico de Suberoilanilida (SAHA). Asi, en una modalidad adicional, la presente invención proporciona un proceso para seleccionar un compuesto que tiene una actividad inhibitoria de HDAC que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA, que el proceso comprender preparar un compuesto de la fórmula (I) o d') al: (i) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VI) con un compuesto de la fórmula (VII) en donde Ri y R2 son como se definen en lo anterior, R7 es alquilo de C?-C o alquenilo de C2-C y Y es un grupo protector amino; (ii) desproteger el intermediario asi obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (VIII) en donde Y' es un grupo protector amino y Y" es hidrógeno o un grupo protector; (iii) desproteger el intermediario asi obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (IX) en donde R3 es como se define en lo anterior y Y"' es un grupo protector amino; (iv) desproteger el intermediario asi obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (X) en donde R4 es como se define en lo anterior, R5 es hidrógeno o un grupo protector hidroxi, LG es un grupo saliente y Y"" es hidrógeno o un grupo protector; (v) opcionalmente desproteger el grupo ß-hidroxi sobre el intermediario asi obtenido para remover el grupo protector R5 y reemplazarlo con H; (vi) hidrolizar y ciclizar el intermediario asi obtenido; (vii) opcionalmente hacer reaccionar el intermediario asi obtenido para efectuar la formación de enlace de disulfuro, y, si un enlace disulfuro se forma, opcionalmente segmentar el enlace de disulfuro en el compuesto asi obtenido, y si el compuesto asi obtenido contiene un grupo tiol, opcionalmente introducir un grupo protector de tiol; y (viii) clasificar el compuesto asi obtenido para medir sus actividad como un inhibidor de HDAC. Típicamente, en la etapa (vi), la hidrólisis del grupo éster se afecta antes de la ciclización. Típicamente en la etapa (vii) DTT (ditiotreitol) se utiliza para efectuar la segmentación del enlace de disulfuro . La persona de habilidad en la técnica apreciará que varias identidades se pueden utilizar para los grupos protectores Y, Y', Y", Y"' y Y"", y que la identidad preferida dependerá en cada caso de la naturaleza de los grupos particulares presentes. Los grupos Y, Y" y Y"' pueden ser, por ejemplo, t-butoxicarbonilo (Boc) o 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) . Típicamente, ellos son Fmoc. Los grupos Y" y Y" " pueden ser, por ejemplo, trifilo (Trt) . La persona experta estará consiente de identidades adecuadas para el grupo saliente LG. Esto puede ser, por ejemplo, un auxiliar quiral, tal como un grupo tiazolidinotiona unido por la via de su átomo N, como es explicado en Yurek-George, A. y colaboradores, (J. Ara. Chem . Soc. 2004, 126, 1030-1031). Alternativamente, puede ser un grupo -OH. El grupo R7 es típicamente un grupo alquilo de C?~C4 o alquenilo de C?~C4. Más típicamente es metilo o alilo. La persona experta apreciará que varios ensayos son adecuados para probar la inhibición de HDAC y se puede utilizar para medir la actividad de un compuesto obtenido de la etapa (vii) comparado con aquel inhibidor HDAC conocido SAHA. Asi, el IC50 de un compuesto de prueba contra HDAC puede ser, por ejemplo, determinado en un ensayo in vi tro, y comparado con el IC50 de SAHA bajo las mismas condiciones de ensayo. Si un compuesto de prueba tiene un valor IC50 igual a o menor que aquel de SAHA debe ser entendido como que tiene una actividad inhibitoria de HDAC que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA. En una modalidad preferida la presente invención proporciona un proceso para seleccionar un compuesto que tiene una actividad inhibitoria de HDAC que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA como se define en lo anterior, en donde en la etapa (viii) la etapa de clasificación es un ensayo de HDAC in vi tro . Típicamente, el ensayo comprende poner en contacto un compuesto de prueba y SAHA, en varias concentraciones, con Extracto Nuclear Hela diluido para determinar la IC50 del compuesto de prueba y de SAHA contra el Extracto Nuclear Hela. Un compuesto de prueba que tiene un valor IC50 medido contra el Extracto Nuclear Hela que es igual a, o menor que, la IC50 de SAHA bajo las mismas condiciones de ensayo debe ser entendió como que tiene una actividad inhibitoria que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA. Típicamente el ensayo se realiza utilizando un equipo de ensayo de actividad fluorescente de HDAC (Biomol, UK) y los compuestos de prueba se reducen antes del análisis. La prueba de ensayo se puede, por ejemplo, realizar como es descrito enseguida bajo el titulo "Ensayo de Actividad 5". En otra modalidad la presente invención proporciona un proceso para seleccionar un compuesto que tiene una actividad inhibitoria de crecimiento celular de cáncer humano que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA, que el proceso comprender preparar un compuesto de la fórmula (I) o (I') por la via de las etapas (i) a (vii) como es definido en lo anterior después de (viii) clasificar el compuesto asi obtenido para medir su actividad como un inhibidor de crecimiento celular de cáncer humano. La persona experta apreciará que varios ensayos son adecuados para probar la inhibición de crecimiento celular de cáncer humano y se puede utilizar para medir la actividad de un compuesto obtenido de la etapa (vii) comparado con aquel de SAHA. Asi, la IC50 de un compuesto de prueba contra el crecimiento celular de cáncer humano se puede, por ejemplo, determinar en un ensayo in vi tro, y comparado con la IC50 de SAHA bajo las mismas condiciones de ensayo. Si un compuesto de prueba tiene un valor IC50 igual a o menor que aquella de SAHA debe ser entendido como que tiene una actividad inhibitoria que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA. Típicamente en esta modalidad la etapa (viii) comprende un ensayo in vi tro que comprende poner en contacto un compuesto de prueba y SAHA, en varias concentraciones, con un seno MCF7, leucemia de célula T HUT78, ovario A2780, linea de célula de cáncer de próstata PC3 o LNCAP para determinar la IC50 del compuesto de prueba y de SAHA contra la linea celular. Un compuesto de prueba que tiene un valor IC50 medido contra cualquiera de estas lineas celulares que es igual a, o menor que, la IC50 de SAHA bajo las mismas condiciones de ensayo debe ser entendido como que tiene una actividad inhibitoria de por lo menos igual a aquella de SAHA. Típicamente en esta modalidad, el ensayo se realiza utilizando el sistema de ensayo CyQuantMR (Moelcular Probes, Inc. EUA) . La prueba de ensayo se puede, por ejemplo, realizar como es descrito enseguida bajo los títulos "Ensayo de Actividad 6" y/o "Ensayo de Actividad 1" . En otra modalidad preferida la presente invención proporciona un proceso para seleccionar un compuesto que tiene una actividad anti-inflamatoria que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA, que el proceso comprende preparar un compuesto de la fórmula (I) o (I') por la via de las etapas (i) a (vii) como se define en lo anterior después de (viii) clasificar el compuesto asi obtenido para medir su actividad anti-inflamatoria . La persona experta apreciará que varios ensayos son adecuados para estimar la actividad anti-inflamatoria de un compuesto. La actividad anti-inflamatoria de un compuesto de prueba relativo a SAHA se puede, por ejemplo, determinar al medir la actividad de un compuesto en inhibir la producción de TNFa de células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) relativa a SAHA. Asi, la habilidad de un compuesto de prueba para inhibir la producción de TNFa de PBMCs se puede, por ejemplo, determinar en un ensayo, y comparar con la actividad de SAHA bajo las mismas condiciones de ensayo. Si un compuesto de prueba tiene una actividad inhibitoria in vi tro de la producción de TNFa que es igual a o mayor que -aquella de SAHA bajo las mismas condiciones de ensayo debe ser entendido como que tiene un actividad anti-inflamatoria que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA. Típicamente la etapa (viii) se realiza utilizando el equipo de ensayo Quantikine® Human-a (R&D systems, Abingdon UK) . La prueba de ensayo se puede, por ejemplo, realizar como es descrito enseguida bajo el titulo "Ensayo de Actividad 1 " . En otro aspecto de esta modalidad, la actividad anti-inflamatoria de un compuesto de prueba relativo a SAHA se puede determinar al estimar la actividad de un compuesto en inhibir la inflamación en ratones Balb/c relativo a SAHA. Si un compuesto de prueba tiene una actividad inhibitoria in vivo que es igual a o mayor que aquella de SAHA bajo las mismas condiciones de prueba debe ser entendido como que tiene una actividad antiinflamatoria que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA. Típicamente, en esta modalidad la etapa (viii) se realizar al estimar la actividad in vivo de un compuesto de prueba y de SAHA en inhibir la inflamación en ratones Balb/c inducida por un cambio químico. Típicamente, el cambio químico involucra la administración tópica a los ratones de oxalazona o acetona. En esta modalidad, los compuestos bajo investigación se pueden aplicar antes o después del cambio químico. La evaluación de actividad anti-inflamatoria por tales lineas se puede, por ejemplo, realizar como es descrito enseguida bajo el titulo "Ensayo de Actividad 8". En otra modalidad preferida la presente invención proporciona un proceso para seleccionar un compuesto que tiene una actividad en inducir un paro G2/M predominante o muerte celular en células MCF7 que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA, que el proceso comprende preparar un compuesto de la fórmula (I) o (I') por la via de las etapas (i) a (vii) como es definido en lo anterior después de (viii) clasificar el compuesto asi obtenido para medir la actividad en inducir un paro de fase G2/M predominante o muerte celular en células MCF7 relativo a SAHA. Clasificar la etapa (viii) puede, por ejemplo, comprender un ensayo realizado como es descrito enseguida bajo el titulo "Ensayo de Actividad 3 " . En las etapas de clasificación descritas anteriormente, la forma preferida del compuesto de prueba depende de la naturaleza de la etapa de clasificación. Asi, si la etapa de clasificación es un ensayo in vi tro tal como aquella descrita enseguida bajo "Actividad de Ensayo 5", el compuesto de prueba es de preferencia de la fórmula (I') como es se define anteriormente. Sin embargo, si, la etapa de clasificación está contra una linea celular, entonces el compuesto de prueba es de preferencia de la fórmula (I). Los compuestos de la presente invención se encuentran que son inhibidores de HDAC. Los compuestos de la presente invención por lo tanto son terapéuticamente útiles. Los compuestos de la invención y las composiciones que los comprenden se pueden administrar en una variedad de formas de dosificación. En una modalidad, una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención se puede formular en un formato adecuado para la administración oral, rectal, parenteral, intranasal o transdérmica o administración mediante inhalación o mediante supositorio. Las rutas típicas de administración son administración parenteral, intranasal o transdérmica o administración mediante inhalación. Los compuestos de la invención se pueden administrar oralmente, por ejemplo como tabletas, trociscos, pastillas, suspensiones acuosas o aceitosas, polvos o granulos dispersables. Las composiciones farmacéuticas preferidas de la invención son composiciones adecuadas para la administración oral, por ejemplo tabletas y cápsulas. Los compuestos de la invención también se pueden administrar parenteralmente, ya sea subcutáneamente, intravenosamente, intramuscularmente, intrasternalmente, transdérmicamente o mediante técnicas de infusión. Los compuestos también se pueden administrar como supositorios. Una ruta preferida de administración es inhalación. Las mayores ventajas de medicaciones inhaladas son su suministro directo al área de suministrar sangre rica en comparación con muchas medicaciones tomadas mediante ruta oral. Asi, la absorción es muy rápida como el alveolo tiene una área de superficie enorme y suministrar sangre rica y primero pasar el metabolismo sea desviado.

Las composiciones farmacéuticas preferidas de la invención por lo tanto incluyen aquellas adecuadas para la inhalación. La presente invención también proporciona un dispositivo de inhalación que contiene tal una composición farmacéutica. Típicamente el dispositivo es un inhalador de dosis medida (MDI), que contiene un propelente químico farmacéuticamente aceptable para empujar la medicación fuera del inhalador. Típicamente, el propelente es un fluorocarbono . Los dispositivos de inhalación además preferidos incluyen nebulizadores . Los nebulizadores son dispositivos capaces de suministrar nieblas liquidas finas de medicación a través de una "mascara" que se ajusta sobre la nariz y la boca, utilizando aire u oxigeno bajo presión. Ellas son frecuentemente utilizadas para tratar aquellas con asma quien no puede utilizar un inhalador, que incluye infantes, niños jóvenes y pacientes agudamente enfermos de todas las edades. El dispositivo de inhalación también puede ser, por ejemplo, un inhalador rotatorio o un inhalador de polvo seco, capaz de suministrar un compuesto de la invención sin un propelente. Típicamente, el dispositivo de inhalación contiene un espaciador. Un espaciador es un dispositivo que permite individuales para inhalar una mayor cantidad de medicación directamente en las vias respiratorias inferiores, donde es propuesto para ir, más bien que en la garganta.

Muchos espaciadores se ajustan sobre el extremo de un inhalador; por algo, la cajita de medicación se ajusta en el dispositivo. Los -espaciadores con cámaras de contención y válvulas de una vía previenen a la medicación de que escape en el aire. Mucha gente, especialmente niños jóvenes y de avanzada edad, puede tener dificultades que coordinan su inhalación con la acción necesaria para accionar un resoplido de un inhalador de dosis medido. Para estos pacientes, el uso de un espaciador es particularmente recomendado. Otra ruta preferida de administración es la administración intranasal. El tejido permeable altamente de cavidad nasal es muy receptivo a la medicación y absorbe rápidamente y eficientemente, de modo que más fármacos en forma de tableta. El suministro de fármaco nasal es menos doloroso e invasivo que las inyecciones, generando menos ansiedad entre los pacientes . Los fármacos se pueden suministrar nasalmente en dosis más pequeñas que la medicación suministrada en forma de tableta. Por este método de absorción es muy rápido y primero el metabolismo pasa es biopasado, así reducir la variabilidad de inter-paciente . Los dispositivos de suministro nasal además permiten la medicación que es administrada en dosis precisas, medidas. Así, las composiciones farmacéuticas de la invención son típicamente adecuadas para la administración intranasal. Además, la presente invención también proporciona un dispositivo intranasal que contiene tal una composición farmacéutica . Una ruta preferida adicional de administración es la administración transdérmica. La presente invención por lo tanto también proporciona un parche transdérmico que contiene un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. También preferida es la administración sublingual. La presente invención por lo tanto también proporciona una tableta sub-lingual que comprende un compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Un compuesto de la invención es típicamente formulado para la administración con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. Por ejemplo, las formas orales sólidas pueden contener, junto con el compuesto activo, diluyentes, por ejemplo lactosa, dextrosa, sacarosa, celulosa, almidón de maíz o almidón de papa; lubricantes, por ejemplo sílice, talco, ácido esteárico, estearato de magnesio o calcio, y/o polietilenglicoles; agentes de enlace; por ejemplo almidones, gomas arábicas, gelatina, metilcelulosa, carboximetilcelulosa o polivinil pirrolidona; agentes de desagregación, por ejemplo almidón, ácido algínico, alginatos o glicolato de almidón de sodio; mezclas efervescentes; materias colorantes; edulcorantes; agentes de humectación, tales como lecitina, polisorbatos, laurilsulfatos; y, en general, sustancias no tóxicas y farmacológicamente inactivas utilizadas en formulaciones farmacéuticas. Tales preparaciones farmacéuticas se pueden manufacturar de manera conocida, por ejemplo, por medio de mezclado, granulación, formación de tabletas, recubrimiento de azúcar, o procesos de recubrimiento de película. Las dispersiones líquidas para la administración oral pueden ser jarabes, emulsiones y suspensiones. Los jarabes pueden contener como portadores, por ejemplo, sacarosa o sacarosa con glicerina y/o manitol y/o sorbitol. Las suspensiones y emulsiones pueden contener como portador, por ejemplo una goma natural, agar, alginato de sodio, pectina, metilcelulosa, carboximetilcelulosa, o alcohol polivinílico. La suspensión o soluciones para inyecciones intramusculares pueden contener, junto con el compuesto activo, un portador farmacéuticamente aceptable, por ejemplo agua estéril, aceite de olivo, oleato de etilo, glicoles, por ejemplo propilenglicol, y si se desea, una cantidad adecuada de clorhidrato de lidocaína. Las soluciones para inyección o infusión pueden contener como portador, por ejemplo, agua estéril o de preferencia pueden estar en la forma de soluciones salinas estériles, acuosas, isotónicas. Los compuestos de la presente invención son terapéuticamente útiles en el tratamiento o prevención de condiciones medidas por HDAC. Por consiguiente, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la manufactura de un medicamento para el uso en el tratamiento o prevención de una condición mediada por HDAC. También provisto es un método para tratar un paciente que sufre de o susceptible a una condición mediada por HDAC, que el método comprende administrar al paciente una cantidad efectiva de un compuesto de la fórmula (I), un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En una modalidad los compuestos de la presente invención se pueden utilizar en combinación con otro inhibidor conocido de HDAC, tal como SAHA. En esta modalidad, el producto de combinación se puede formular tal que comprende cada uno de los medicamentos para el uso simultáneo, separado r secuencial. La presente invención por lo tanto proporciona un producto que comprende (a) un análogo de FK228 de la invención como se define en lo anterior o un isóstero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y (b) otro inhibidor conocido de HDAC, tal como SAHA, para el uso simultáneo, separado o secuencial. La presente invención por lo tanto también proporciona el uso de un análogo de FK228 de la invención como se define en lo anterior o un isóstero o sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en la manufactura de un medicamento para el uso en la coadministración con otro inhibidor conocido de HDAC, tal como SAHA. La persona experta estará consiente de otros inhibidores conocidos de HDAC. US20040266769, por ejemplo, da ejemplos adecuados. Ejemplos incluyen espirucostatina A, FR-901228, tricostatina A y SAHA. Los compuestos de la presente invención se pueden utilizar en tanto el tratamiento como la prevención de cáncer y se pueden utilizar en una monoterapia o en una terapia de combinación. Cuando es utilizado en una terapia de combinación, los compuestos de la presente invención son típicamente utilizados junto con compuestos químicos pequeños, radiación, terapias basadas en anticuerpo (por ejemplo herceptina y rituximab) , vacunación anti-cáncer, terapia de gen, terapias celulares, terapias de hormona o terapia de citoquina. En una modalidad preferida de la invención un comp.uesto de la invención se utiliza en combinación con otro agente quimioterapéutico o antineoplásico en el tratamiento de un cáncer. Ejemplos de tales otros agentes quimioterapéuticos o antineoplásicos incluyen mitoxantrona, alcaloides vinca por ejemplo vincristina y vinblastina, antibióticos de antraciclina por ejemplo daunorubicina y doxorubicina, agentes alquilantes por ejemplo clorambucil y melfalan, taxanos por ejemplo paclitaxel, antifolatos por ejemplo metotrexato y tomudex, epipodofilotoxinas por ejemplo etopósido, camptotecinas por ejemplo irinotecan y su metabolito activo SN 38 e inhibidores de metilación de DNA por ejemplo los inhibidores de metilación de DNA divulgados en el documento WO 02/085400. De acuerdo con la invención, por lo tanto, los productos se proporcionan que contienen un compuesto de la invención y otro agente quimioterapéutico o antineoplásico como una preparación combinada para el uso simultáneo, separado o secuencial en aliviar un cáncer. También se proporciona de acuerdo con la invención el uso de un análogo de FK228 como se define en lo anterior o un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la manufactura de un medicamento para el uso en el alivio de cáncer mediante la coadministración con otro agente quimioterapéutico o antineoplásico. El compuesto de la invención y el otro agente se puede administrar en cualquier orden. En ambos casos el compuesto de la invención y el otro agente se puede administrar junto o, si es separado, en cualquier orden como es determinado por un médico. El HDAC se cree que contribuye a la patología y/o simptomología de varias enfermedades diferentes tal que la reducción de la actividad de HDAC en un sujeto a través de la inhibición se puede utilizar a una dirección terapéuticamente de estos estados de enfermedad. Ejemplos de varias enfermedades que se tratar utilizando los inhibidores de HDAC de la presente invención se describen en la presente. Se nota que las enfermedades adicionales más allá de aquellas divulgadas en la presente pueden ser más tarde identificadas como las funciones biológicas que desempeña HDAC en varias rutas que llegan a ser más completamente entendidas. Un conjunto de indicaciones que los inhibidores de HDAC de la presente invención se pueden utilizar para tratar son aquellos que involucran la proliferación celular no deseable o no controlada. Tales indicaciones incluyen tumores benignos, varios tipos de cánceres tales como tumores primarios y metástasis de tumor, restenosis (por ejemplo lesiones coronarias, carótidas y cerebrales), estimulación anormal de células endoteliales (aterosclerosis), ataques al tejido del cuerpo debido a la cirugía, curación de herida anormal, angiogénesis anormal, enfermedades que producen fibrosis de tejido, desordenes movimiento repetitivos, desordenes de tejidos que no son altamente vascularizados y respuestas proliferativas asociadas con transplantes de órgano. Más indicaciones especificas para los inhibidores de HDAC incluyen, pero no están limitados a cáncer de próstata, cáncer de pulmón, leucemia aguda, mieloma múltiple, carcinoma de vejiga, carcinoma renal, carcinoma dé pecho, carcinoma colorrectal, neuroblastoma y melanoma. En una modalidad, un método se proporciona para tratar enfermedades asociadas con proliferación celular no deseada y no controlada. El método comprende administrar a un sujeto que sufre de proliferación celular no controlada una cantidad terapéuticamente efectiva de un inhibidor de HDAC de acuerdo con la presente invención, tal que se reduce la proliferación celular no controlada. La dosificación particular del inhibidor que es utilizado dependerá de la severidad del estado de la enfermedad, la ruta de administración y factores relacionados que se pueden determinar por el médico que atiende. Generalmente, las dosis diarias aceptables y efectivas son cantidades suficientes para efectivamente dejar o eliminar la proliferación celular no controlada. Los inhibidores de HDAC de acuerdo con la presente invención también se pueden utilizar en conjunción con otros agentes para inhibir la proliferación celular no deseable y no controlada. Ejemplos de otros agentes de proliferación anti-celular que se pueden utilizar en conjunción con los inhibidores de HDAC de la presente invención -incluyen, pero no están limitados a, ácido retinoide y derivados de los mismos, 2-metoxiestradiol, proteina ANGIOSTATIN (MR) , proteina ENDOSTATIN (TM) , suramin, escualamina, inhibidor de tejido de metaloproteinasa-I, inhibidor de tejido de metaloproteinasa-2, inhibidor activador de plasminógeno 1, inhibidor de activador de plasminógeno 2, inhibidor derivado de cartílago., paclitaxel, factor de plaqueta 4, sulfato de protamina (clupeine) , derivados de citina sufatados (preparados de cascara de queen crab) , complejo de peptidoglicano de polisacárido sulfatado (sp-pg) , estaurosporina, moduladores de metabolismo de matriz, que incluyen por ejemplo, análogos de prolina ( (ácido l-azetidina-2-carboxilico (LACA) , cishidroxiprolina, d, 1-3, 4-dehidroprolina, tiaprolina), fumarato beta . -aminopropionitrilo, 4-propil-5- ( 4-piridinil) -2 (3H) -oxazolona; metotrexato, mitoxantrona, heparina, interferonas, 2 macroglobulin-suero, chimp-3, quimioestatina, tetradecasulfato de beta . -ciclodextrina, eponemicina; fumagilina, tiomalato de sodio de oro, d-penicilamina (CDPT) , beta . -1-anticolagenasa-suero, alfa .2-antiplasmina, bisantreno, lobenzarit disodio, disodio de ácido n-(2-carboxifenil-4-cloroantronílico o "CCA", talidomida; esteroide angostático, carboxiaminoimidazol; inhibidores de metaloproteinasa tal como BB94. Otros agentes anti-angiogénesis que se pueden utilizar incluyen anticuerpos, de preferencia anticuerpos monoclonales contra estos factores de crecimiento angiogénico: isoformas bFGF, aFGF, FGF-5, VEGF, VEGF-C, HGF/SF y Ang-l/Ang-2. Ferrara N. y Alitalo, K. "Clinical application of angiogenic growth factors and their inhibidores" (1999) Nature Medicine 5:1359-1364. Generalmente, las células en tumores benignos retienen sus características diferenciadas y no divide de una manera completamente no controlada. Un^ tumor benigno es usualmente localizado y no metastático. Tipos especificos de tumores benignos que se pueden tratar utilizando inhibidores de HDAC de la presente invención incluyen hemangiomas, adenoma hepatocelular, haemangioma cavernoso, hiperplasia nodular focal, neuromas acústicas, neurofibroma, adenoma de ducto de bilis, cistanoma de ducto de bilis, fibroma, lipomas, leiomiomas, mesoteliomas, teratomas, mixomas, hiperplasia regenerativa nodular, tracomas y granulomas biogénicas. En el caso de tumores malignos, las células llegan a ser no diferenciadas, no responden a las señales de control de crecimiento del cuerpo, y multiplicado de una manera no controlada. Los tumores malignos son invasivos y capaces de la dispersión a sitios distantes (metastasización) . Los tumores malignos son generalmente divididos en dos categorías: primario y secundario. Los tumores primarios surgen directamente del tejido en los cuales se encuentran. Los tumores secundarios, o metastasas, son tumores originados en otra parte en el cuerpo pero tienen ahora dispersión a órganos distantes. Las rutas comunes para la metástasis son de crecimiento directo en estructuras adyacentes, la dispersión a través de los sistemas vascular o linfático, y rastreo a lo largo de los planos de tejido y espacios de cuerpo (fluido peritoneal, fluido cerebroespinal, etc.).

Tipos específicos de cánceres de tumores malignos, ya sea primarios o secundarios, que se pueden tratar utilizando los inhibidores de HDAC de la presente invención incluyen, pero no están limitados a, leucemia, cáncer de seno, cáncer de piel, cáncer de hueso, cáncer de próstata, cáncer de hígado, cáncer de pulmón, cáncer de cerebro, cáncer de la laringe, vesícula biliar, páncreas, recto, paratiroides, tiroides, adrenal, tejido neural, cabeza y cuello, colon, estómago, bronquios, riñones, carcinoma de célula basal, carcinoma de célula escamosa de tanto tipo ulcerada como papilar, carcinoma de la piel metastático, sarcoma osteo, sarcoma de Ewing, sarcoma de célula de vetículo, mieloma, tumor de célula gigante, tumor de pulmón de célula pequeña, cálculo biliar, tumor de célula de isleta, tumor de cerebro primario, tumores agudos y linfociticos crónicos y granulociticos, tumor de célula pilosa, adenoma, hiperplasia, carcinoma medular, feocromocitoma, neuronas mucosales, ganglioneuromas intestinales, tumor nervioso de cornea hiperplásica, tumor de hábito marfanoide, tumor de Wilm, seminoma, tumor de ovario, tumor de leiomiomater, desplacía cervical y carcinoma in si tu, neuroblastoma, retinoblastoma, sarcoma de tejido suave, carcinoide maligno, lesión de la piel tópica, micosis fungoide, rabdomiosarcoma, sarcoma 'de Kaposi, sarcoma osteogénico y otro, hipercalcemia maligna, tumor de célula renal, policitemia vera, adenocarcinoma, glioblastoma multiforma, leucemias, linfomas, melanomas malignas, carcinomas epidermoides y otros carcinomas y sarcomas. También se pueden utilizar los inhibidores de HDAC de la presente invención para tratar la proliferación de célula anormal debido a ataques al tejido del cuerpo durante la cirugía. Estos ataques pueden surgir como un resultado de una variedad de procedimientos quirúrgicos tales como cirugía de juntura, cirugía de intestino, y cicatrización queloide. Enfermedades que producen tejido fibrótico incluyen enfisema. Los desórdenes de movimiento repetitivo que se pueden tratar utilizando la presente invención incluyen, síndrome de túnel carpal. Un ejemplo de un desorden proliferativo celular que se puede tratar utilizando la invención es un tumor de hueso. Las respuestas proliferativas asociadas con el transplante de órgano que se puede tratar utilizando inhibidores de HDAC de la invención incluyen respuestas proliferativas que contribuyen a rechazo de órgano potencial o complicaciones asociadas. Específicamente, estas respuestas proliferativas pueden ocurrir durante el transplante del corazón, pulmón, hígado, riñon y otros órganos del cuerpo o sistemas de órgano. La angiogénesis anormal que se puede tratar utilizando esta invención incluye aquella angiogénesis anormal que acompañan la artritis reumatoíde, edema y lesión de cerebro relacionado isquemia-reperfusión, isquemia cortical, hiperplasia e hipervascularidad ovárica, (síndrome de ovario policistico) , endometriosis, psoriasis, retinopatia diabética, y otras enfermedades angiogénicas oculares tales como retinopatia de premadurez (retrolental fibroplástico) , degeneración macular, rechazo de injerto de cornea, glaucoma neuroscular y síndrome de Oster Webber. Ejemplos de enfermedades asociadas con angiogénesis no controlada que se puede tratar de acuerdo con la presente invención incluyen, pero no están limitadas a neovascularización retinal/coroidal y neovascularización de cornea. Ejemplos de neovascularización retinal/coroidal incluyen, pero no limitados a, enfermedades Mejores, miopia, fosos ópticos, enfermedades Stargarts, enfermedad Pagets, oclusión de veina, oclusión de arteria, anemia de célula falciforme, sarcoide, sífilis, enfermedades estructivas de apo carótida elástico caropseudoxantoma, uveitis/vitritis crónica, infecciones micobacterianas, enfermedad de Lyme, eritematoso de lupus sistémico, retinopatía de premadurez, enfermedad Eales, retinopatía diabética, degeneración macular, enfermedades Bechets, infecciones que causan una retinitis o croiditis, histoplasmosis ocular presumed, planitis pares, separación retinal crónica, síndromes de hiperviscosidad, toxoplasmosis, trauma y complicaciones de post-láser, enfermedades asociadas con rubesis (neovascularización del ángulo) y enfermedades causadas por la proliferación anormal de tejido fibrovascular o fibroso que incluyen todas las formas de vitreoretinopatía proliferativa . Ejemplos de neovascularización corneal incluyen, pero no están limitados a, ceratoconjunctivitis epidémica, deficiencia de Vitamina A, desgastar lentes de contacto, cetatitis atópica, ceratitis límbica superior, sicca de cetatitis pterigio, sjogrenos, rosácea de acné, filectenulosis, retinopatia diabética, retinopatía de premadurez, rechao de injerto de cornea, úlcera Mooren, degeneración marginal de Terrien, ceratolisis marginal, poliarteritis, sarcoidosis Wegener, Escleritis, ceratotomi radial perifígoide, glaucoma neovascular y fibroplasia retrolental, sífilis, infecciones de Micobacterias, degeneración de lípido, quemadas químicas, úlceras bacterianas, úlceras fúngales, infecciones de Herpes simple, infecciones de Herpes zoster, infecciones protozoarias y sarcoma de Kaposi. Las enfermedades inflamatorias crónicas asociadas con la angiogénesis no controlada también se puede tratar utilizando inhibidores de HDAC de la presente invención. La inflamación crónica depende de la formación continua de brotes capilares para mantener un influjo de células inflamatorias. El influjo y la presencia de las células inflamatorias produce granulomas y asi mantiene el estado inflamatorio crónico. La inhibición de angiogénesis utilizando un inhibidor de HDAC solo o en conjunción con otros agentes antiinflamatorios pueden prevenir la formación de los granulosmas y asi aliviar la enfermedad. Ejemplos de enfermedades inflamatorias crónicas incluyen, pero no están limitados a, enfermedades de intestino inflamatorio tales como enfermedad de Crohn y colitis ulcerativa, psoriasis, sarcoidosis y artritis reumatoide. Las enfermedades de intestino inflamatorio tales como enfermedad de Crohn y colitis ulcerativa se caracterizan mediante inflamación crónica y angiogénesis en varios sitios en el tracto gastrointestinal. Por ejemplo, enfermedad de Crohn ocurre como una enfermedad inflamatoria transmural crónica que la mayoría de los efectos comúnmente el ileo distal y el colon pero también puede ocurrir en cualquier parte del tracto gastrointestinal de la boca al ano y área perianal. Los pacientes con enfermedad de Crohn generalmente tienen diarrea crónica asociada con dolor abdominal, fiebre, anorexia, pérdida de peso e hinchamiento abdominal. La colitis ulcerativa también es una enfermedad crónica, no especifica, inflamatoria y ulcerativa que surgen en la mucosa colónica y se caracteriza por la presencia de diarrea sangrienta. Estas enfermedades de intestino inflamatorio son generalmente causados por la inflamación granulomatosa crónica por todo el tracto gastrointestinal, que involucra nuevos brotamientos capilares cercados por un cilindro de células inflamatorias. La inhibición de angiogénesis por estos inhibidores debe inhibir la formación de los brotamientos y prevenir la formación de granulomas. Las enfermedades de intestino inflamatorio también exhiben manifestaciones extra intestinales, tales como lesiones de la piel. .Tales lesiones se caracterizan mediante inflamación y angiogénesis y puede ocurrir en muchos otros sitios del tracto gastrointestinal. La inhibición de angiogénesis mediante los inhibidores de HDAC de acuerdo con la presente invención puede conducir el influjo de células inflamatorias y prevenir la formación de lesión. La sarcoidosis, otra enfermedad inflamatoria crónica, se caracteriza como un desorden granulomatoso multisistema . Los granulomas de esta enfermedad pueden formar en cualquier parte del cuerpo. Asi, los síntomas dependen del sitio de los granulomas y si la enfermedad es activa. Los granulomas se crean mediante los brotamientos capilares angiogénicos que proporcionan un constante suministro de células inflamatorias. Al utilizar inhibidores de HDAC de acuerdo con la presente invención para inhibir la angionesis, tal formación de granulomas se puede inhibir. La psoriasis, también una enfermedad inflamatoria crónica y recurrente, se caracteriza por pápulas y placas de varios tamaños. El tratamiento utilizando estos inhibidores solos o en conjunción con otros agentes anti-inflamatorios deben prevenir la formación de nuevos vasos sanguíneos necesarios para mantener las lesiones características y proporcionar la ayuda al paciente de los síntomas. La artritis reumatoide (RA) también es una enfermedad inflamatoria crónica caracterizada por inflamación no especifica de las junturas periféricas. Se cree que los vasos sanguíneos en el forro sinovial de las junturas a ser sometida la angiogénesis. Además de la formación de nuevas redes vasculares, las células endoteliales liberan factores y especies de oxigeno reactivas que permiten el crecimiento del pannus y destrucción de cartílago. Los factores involucrados en angiogénesis puede activamente contribuir a, y ayuda a mantener, el estado crónicamente inflamado de artritis reumatoide. El tratamiento utilizando inhibidores de HDAC de acuerdo con la presente invención solo o en conjunción con otros agentes anti-RA pueden prevenir la formación de nuevos vasos sanguíneos necesarios para mantener la inflamación crónica . Los compuestos de la presente invención pueden ser además utilizados en el tratamiento de enfermedades cardiacas/vasculaturas tales como hipertrofia, hipertensión, infarto miocardial, reperfusión, enfermedad de corazón isquémico, angina, arritmias, hipercolestremia, aterosclerosis y apoplejía. Los compuestos pueden ser además utilizados para tratar desórdenes neurodegenerativos/desórdenes de CNS tales como enfermedades neurológicas aguda y crónica, que incluyen apoplejía, enfermedad de Huntington, Esclerosis Lateral Amiotrófica y enfermedad de Alzheimer. Los compuestos de la presente invención también se pueden utilizar como agentes antimicrobianos, por ejemplo agentes antibacterianos. La invención por lo tanto también proporciona un compuesto para el uso en el tratamiento de una infección bacteriana. Los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como compuestos anti-infecciosos contra infecciones virales, bacterianas, fúngales y parasíticas. Ejemplos de infecciones incluyen infecciones parasíticas protozoarias (que incluyen Plasmodio, Cryptosporidium parvum, toxoplasma gondii, neurona sarcocistis y Eimeria sp.) Los compuestos de la presente invención son particularmente adecuados para el tratamiento de proliferación celular no deseable o no controlada, de preferencia para el tratamiento de tumores benignos/hiperplasías y tumores malignos, más de preferencia para el tratamiento de tumores malignos y mucho más de preferencia para el tratamiento de CCL, cáncer de seno y linfoma de célula T. En una modalidad preferida de la invención, los compuestos de la invención -se utiliza para aliviar cáncer, hipertrofia cardiaca, falla de corazón crónico, una condición inflamatoria, una enfermedad cardiovascular, una haemoglobinopatía, una talassemia, una enfermedad celular segadera, un desorden de CNS, una enfermedad autoinmune, diabetes, osteoporosis, MDS, hiperplasia prostética benigna, leucoplaquia oral, un desorden metabólico genéticamente relacionado, una infección, Rubens-Taybi, síndrome X frágil, o deficiencia antitripsina alfa-1, o para acelerar la sanación de heridas, para proteger los folículos del cabello o como un inmunosupresante . Típicamente, la condición inflamato.ria es una condición inflamatoria de la piel (por ejemplo psoriasis, acné y eczema) , asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) , artritis reumatoide (RA) , enfermedad de intestino inflamatorio (IBD), enfermedad de Crohn o colitis. Típicamente, el cáncer es leucemia linfocitica crónica, cáncer de seno, cáncer de próstata, cáncer de ovario, mesotelioma o linfoma de célula T. Típicamente, la enfermedad cardiovascular es hipertensión, infarto miocardial (MI), enfermedad de corazón isquémico (IHD) (reperfusión), pectoris de angina, arritmia, hipercolestremia, hiperlipidaemía, aterosclerosis, apoplejía, miocarditis, falla del corazón congestiva, cardiomiopatía primaria y secundaria es decir dilatada (congestiva) , cardiomiopatía hipertrófica, cardiomiopatía restrictiva, enfermedad vascular periférica, taquicardia, presión sanguínea alta o trombosis. Típicamente, el desorden metabólico genéticamente relacionado es fibrosis cística (CF) , desorden biogénesis de peroxisoma o adrenoleucodiestrofía . Típicamente, los compuestos de la invención se utilizan como un inmunosupresante después del transplante de órgano. Típicamente, la infección es una infección viral, bacterial, fungal o parasítica, en particular una infección por áureo S, acné P, Cándida o aspergilus. Típicamente, el desorden de CNS es enfermedad de Huntingdon, enfermedad de Alzheimer, esclerosis múltiple o esclerosis lateral amiotrófica. De preferencia, en esta modalidad, los compuestos de la invención se utilizan para aliviar cáncer, hipertrofia cardiaca, falla del corazón crónica, una condición inflamatoria, una enfermedad cardiovascular, una haemoglobinopatia, una talasemia, una enfermedad de célula falciforme, un desorden de CNS, una enfermedad autoinmune, diabetes o osteoporosis, o se utiliza como un inmunosupresante . Mucho más de preferencia, los compuestos de la invención se utilizan para aliviar leucemia linfocítica crónica, cáncer de seno, cáncer de próstata, cáncer de ovario, mesotelioma, linfoma de célula T, hipertrofia cardiaca, falla del corazón crónica o una condición inflamatoria de la piel, en particular psoriasis, acné o eczema . Los compuestos de la presente invención se pueden utilizar en el tratamiento de animales, de preferencia en el tratamiento de mamíferos y más de preferencia en el tratamiento de humanos. Los compuestos de la invención pueden ser, donde sean apropiados, utilizados profilácticamente para reducir la incidencia de tales condiciones. Una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención se administra a un paciente. Una dosis típica es de aproximadamente 0.001 a 50 mg por kg de. peso del cuerpo, de acuerdo con la actividad del compuesto especifico, la edad, peso y condiciones del sujeto a ser tratado, el tipo y severidad de la enfermedad y la frecuencia y ruta de administración. De preferencia, niveles de dosificación diaria son de 5 mg a 2 g . Los siguientes Ejemplos ilustran la invención. Sin embargo, ellos no limitan la invención de cualquier manera. En este respecto, es importante entender que los ensayos particulares utilizados en la selección de Ejemplos se designan solamente para proporcionar una indicación de actividad en inhibir HDAC. Hay muchos ensayos disponibles para determinar la actividad de los compuestos dados como antagonistas de HDAC, y un resultado negativo en cualquier ensayo particular es por lo tanto no determinativo. EJEMPLOS ( E) - (1S, IR, 10 S, 21R) -l-Isopropil-21-metil-2-oxa-12, 13-ditía-5, 8,20,23-tetraza-biciclo[8.7.6] trieos-16-en-3, 6, 9, 19, 22-pentaona, referido después en la presente como el compuesto 001, se preparó utilizando el esquema mostrado enseguida : Preparación de éster metílico de ácido [ (R) -2- ( 9H-Fluoren-9-ilmetoxicarbonilamino) -3-metil-butirilamino] -acético (2) A una solución agitada de D-valina protegida de Fmoc (2.70 g, 7.96 mmol) en CH2C12 (50 mL) se adicionó EDAC*HC1 (1.83 g, 9.55 mmol), HOBt (1.30 g, 9.55 mmol) y DIEA (3.8 mL, 27.86 mmol). Después de la agitación a rt . durante 15 minutos, éster metílico de glicina (1, 1.0 g, 7.96 mmol) luego se adicionó y la mezcla de reacción se agitó durante 4 h, se diluyó con CH2CI2 (50 mL) se lavó con agua (25 mL) , HCl al 10% (25 mL) , NaHC03 al 5% (25 mL) y NaCl sat. (25 mL) las soluciones, se secaron (Na2S04), se filtraron y se concentraron para dar un sólido blanquecino el cual se re-cristalizó de CH3CN para dar 2 como un sólido blanco (2.81 g, 86%): mp = 148-150°C; [a]22D -7.32 (c 0.50, CHC13) ; [a]22D -7.32 (c 0.50, CHC13); IR vmax 3287, 1750, 1690, 1649, 1535 cm" x ; lb NMR 400 MHz 7.75 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 7.57 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 7.39 (t, J= 7.0 Hz, 2H) , 7.28 (m, 2H) , 6.54 (s, ÍH) , 5.44 (s, ÍH), 7.43-4.38 (m, 2H) , 4.21 (t, J= 7.0 Hz, ÍH) , 4.01-3.96 (m, 3H) 3.72 (s, 3H) , 2.16 (m, ÍH) , 0.96 (t, J= 9.0 Hz, 6H) ; 13C NMR 100 MHz 171.7 (C) , 170.1 (C) , 156.6(0, 143.9(C), 141.4 (C) , 127.8(CH), 127.2(CH), 125.2(CH), 120.1(CH), 67.2(CH2), 60.4(CH), 52.5(CH), 47.3(CH3), 41.2 (CH2), 31.2(CH), 19.3(CH3), 17.9(CH); MS m/z 432.9 (M + Na)+, 842.8 (2M + Na)+. Preparación de éster metilico de ácido { (R) -2- [ (S) -2- (9H-fluoren-9-ilmetoxicarbonilamino) -3- (tritilsulfanil) -propionilamino]-3-metil-butirilamino} -acético (3) A una solución agitada de 2 (1.0 g, 2.44 mmol) en CH3CN (48.5 mL) a rt, se adicionó Et2NH (2.5 mL) . Después de la agitación durante 3 h a rt . la mezcla de reacción se diluyó con hexano (100 mL) y se concentró para dar la amina cruda como un aceite incoloro. A una solución agitada de Fmoc- (5Trt) -D-cisteína (1.70 g, 2.9 mmol) en CH3CN (25 mL) se adicionó EDAC«HC1 (561.0 mg, 2.93 mmol), HOBt (396 mg, 2.93 mmol) y DIEA (1.31 ml, 7.32 mmol). Después de la agitación a rt . durante 15 minutos, la amina cruda luego se adicionó y la mezcla de reacción se agitó durante 4 h, el solvente se removió y el residuo se disolvió hasta en CH2C12 (100 mL) , se lavó con agua (25 mL) , HCl al 10% (25 mL) , NaHC03 al 5% (25 mL) y NaCl sat. (25 mL) las soluciones, se secaron (Na2S04), se filtraron y el solvente se removió para dar un sólido blanco el cual se re-cristalizó de CH3CN para dar 3 como un sólido blanco (1.46 g, 79%): [a] 2D -2.35 (c 0.50, CHC13) ; IR vmax 3267, 1646, 1543 cm"1; XH NMR 400 MHz 7.76 (t, J= 1.0 Hz, 2H), 7.54 (d, J= 6.5 Hz, 2H) , 7.39-7.21 (m 19H), 6.87 (s, ÍH), 6.23 (d, J= 8.0, 2H) , 5.04 (d, J= 7.0, ÍH) , 4.37 (d, J= 7.0, 2H), 4.29 (dd, J= 8.6, J= 5.0, ÍH) , 4.17 (t, J= 6.5, ÍH), 3.96 (m, ÍH) , 3.72 (dd, J= 18.1, J= 5.0, ÍH) , 3.65 (s, 3H), 3.60 (m, ÍH) , 2.70 (d, J= 6.5, 2H) , 2.30 (m, ÍH) , 1.70 (s, ÍH), 0.87 (dd, J= 13.0, J = 7.0 Hz, 6H) ; 13C NMR 100 MHz 170.6(C) , 170.5(C) , 170.1(C) , 156.2(C) , 144.3(0, 143.8 (C) , 143.7(C) 141.4(C) , 129.6(CH), 128.4(CH) , 128.0(CH), 127.8(CH) 127.2(CH), 125.KCH) , 120.2(CH) , 67.6(CH) , 67.2(CH2), 58.4(CH) , 54.3(CH) , 52.4(CH3) , 47.1(CH), 40.9(CH2) , 33.6(CH2), 30.0(CH) , 19.4 (CH3) , 17.4 (CH3) ; MS m/z 777.8 (M + Na)+. Anal.

Calculado para C45H45N306S: 71.50; H, 6.00; N, 5.56. Encontrado C, 71.42; H, 5.99; N, 5.55. Preparación de éster metilico de ácido ( (JR) -2-{ (S) -2- [ (JR) -2-(9H-fluoren-9-ilmetoxicarbonilamino) -propionilamino] -3-tritilsulfanil-propionilamino} -3-metil-butirilamino) -acético (4) A una solución agitada de 3 (400 mg, 0.53 mmol) en CH3CN (30 mL) a rt . se adicionó Et2NH (1.5 mL) . Después de la agitación durante 3 h a rt . la mezcla de reacción se diluyó con heptano (60 mL) y se concentró para dar la amina cruda como un aceite incoloro. A una solución agitada de Fmoc-D-alanina (198 mg, 0.636 mmol) en CH3CN (25 mL) se adicionó EDAC»HC1 (122.0 mg, 0.634 mmol), HOBt (86 mg, 0.636 mmol) y DIEA (502 µl, 1.91 mmol). Después de la agitación a rt . durante 15 minutos la amina cruda luego se adicionó y la mezcla de reacción se agitó durante 18 h, el solvente se removió y el residuo se disolvió hasta en CH2C12 (50 mL) , se lavó con agua (15 mL) HCl al 10% (15 mL) , NaHC03 al 5% (15 mL) y NaCl sat. (15 mL) las soluciones, se secaron (Na2S0 ) , se filtraron y el solvente se removió para dar un sólido blanco el cual se recristalizó de CH3CN para dar 4 como un sólido blanco (670 mg, 81%): mp = 195-197°C; [a]22D +5.1 (c 0.50, CHC13); IR vmax 3267, 3054, 1744, 1706, 1635, 1531.1 cm" 1 ; XH NMR 400 MHz 7.75 (d, J= 7.5 Hz, 2H) , 7.52 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.39 (m, 7H) , 7.26-7.15 (m, 13H) , 6.79 (s, ÍH) , 6.62 (s, ÍH) , 5.47 (s, ÍH) , 4.43-4.28 (m, 4H) , 4.13 (m, ÍH) , 4.01 (m, ÍH), 3.88 (s, 2H) , 3.63 (s, 3H) , 2.81 (m, ÍH) , 2.52 (m, ÍH), 2.26, (m, ÍH) , 1.30 (d, J= 6.0 Hz, 3H) , 0.94 (d, J= 6.0 Hz, 3H) , 0.89 (d, J= 7.0 Hz, 3H) ; 13C NMR 100 MHz 172.7, 171.1, 170.2, 156.1, 144.4, 143.9, 143.8, 141.4, 129.6, 128.3, 127.9, 127.2, 127.1, 125.1, 120.1, 58.5, 52.7, 52.3, 50.8, 47.2, 41.0, 33.5, 30.4, 19.3, 19.0, 17.7; MS m/z 849.2 (M + Na)+, 865.1 (M + K)+. Preparación de éster metílico de ácido ( (R) -2-{ (S) -2- [ (R) -2-( (E) - (S) -3-hidroxi-7-tritilsulfanil-hept-4-enoilamino) -propionilamino] -3- tritilsulf anil-propionilamino } -3-metil-butirilamino) -acético (6) A una solución agitada de 4 (137 mg, 0.166 mmol) en CHCN (10 mL) a rt . se adicionó Et2NH (0.5 mL) . Después de la agitación durante 5 h a rt . la mezcla de reacción se diluyó con heptano (30 mL) y el solvente se removió, CH2C12 (10 ml) se adicionó, se filtró y se concentró para dar la amina cruda como un aceite incoloro. A una solución agitada de la amina cruda en CH2C12 (4 ml) se adicionó 5 (84.0 mg, 0.149 mmol, se preparó de acuerdo con el procedimiento en Yurek-George, A.; Habens, F. ; Brimmell, M.; Packham, G.; Ganesan, A. J. Am. Chem. Soc. 2004, 126, 1030-1031) y DMAP (2.2 mg, 0.0176 mmol) a 0°C. Después de la agitación a rt . Durante 8 horas, el solvente se removió y el residuo se purificó mediante la cromatografía con evaporación instantánea (eluyente EtOAc/Hexanos al 30-40%) para dar 6 como un vidrio blanco (127 mg, 85%): mp = 191-193°C; [a]22D -18.0 (c 0.50, CHC13) ; IR vmax 3272, 3064, 1758, 1692, 1621 cm"1; ?H NMR 400 MHz (CD3OD al 5%/CDCl3) 7.40 (m, 12H) , 7.25 (m, 12H) , 7.20 (m, 6H), 6.96 y 6.88 (lábil NH, d, J= 8.0 Hz, ÍH) , 5.49 (dt, J= 15.0 Hz, 6.5 Hz, ÍH) , 5.37 (dd, J= 15.5 Hz, 6.0 Hz, ÍH) , 4.32 (m, 2H), 4.22 (d, J= 6.0 Hz, 1H) , 3.98 (t, J= 7.0 Hz, 1H) , 3.92 (d, J= 18.1 Hz, ÍH) , 3.72 (d, J= 17.6 Hz, ÍH) , 3.67 (s, 3H), 2.64 (dd, J= 13.0 Hz, 7.5 Hz, ÍH) , 2.58 (dd, J= 13.0 Hz, 7.5 Hz, ÍH) , 2.56-2.18 (m, 9H) , 2.11 ( q,- J= 6.5 Hz, 2H) , 1.31 (d, J= 7.5 Hz, 3H) , 0.91 (t, J= 7.0 Hz, 6H) ; 13C NMR 100 MHz (CD3OD al 5%/CDCl3) 173.0, 172.0, 171.3, 170.5, 170.2, 144.9, 144.2, 132.8, 129.9, 129.7, 129.6, 129.5, 128.2, 128.1, 127.9, 127.1, 126.7, 69.6, 67.1, 66.7, 58.9, 58.8, 52.7, 52.2, 50.0, 49.8, 49.6, 49.5, 49.4, 49.1, 43.7, 40.9, 40.8, 33.1, 31.5, 31.3, 30.0, 19.2, 17.5; MS m/z 1050.4 (M + 2Na)+. Preparación de ácido ( (R) -2- { (S) -2- [ (JR) -2- ( (E) - (S) -3-hidroxi-7-tritilsulfanil-hept-4-enoilamino) -propionilamino] -3-tritilsulfanil-propionilamino} -3-metil-butirilamino) -acético (7) A una solución agitada de 6 (220 mg, 0.222 mmol) en THF/H20 4:1 (4.0 mL) a 0°C se adicionó LiOH (11 mg, 0.440 mmol). Después de la agitación durante 1 hora, la mezcla de reacción se diluyó con H20 (30 ml), se acidificó a pH 4-5 con KHS04 2M, y se extrajo con EtOAc (3 x 30 mL) . La capa orgánica se lavó con NaCl sat. (15 mL) , se secó (Na2S04), se filtró y se concentró para dar un sólido blanco el cual se trituró con éter, para dar 7 como un sólido blanco (199.5 mg 91%) el cual se utilizó crudo directamente en la siguiente etapa, mp = 191-193°C; [a]22D -18.5 (c 0.50, CHC13) ; IR vmax 3413, 1711, 1678, 1630, 1451 cm"1; XH NMR 400 MHz (CD3OD al 5%/CDCl3) 7.30 (m, 12H) , 7.16 (m, 12H) , 7.13 (m, 6H) , 5.43 (dt, J= 15.5 Hz, 6.0 Hz, ÍH) , 5.30 (dd, J= 15.5 Hz, 6.0 Hz, ÍH) , 4.27 (m, 2H) , 4.21 (m, ÍH) , 3.99 (m, ÍH) , 3.75 (s, 2H) , 3.77 (m, br, 6H) , 2.55 (dd, J= 12.5 Hz, 6.5 Hz, ÍH) , 2.44 (dd, J= 12.5 Hz, 7.5 Hz, ÍH), 2.21 (m, 2H) , 2.12 (m, 3H) , 2.02 (m, 2H) , 1.23 (d, J= 7.0 Hz, 3H) , 0.83 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 0.80 (d, J= 7.0 Hz, 3H) ; 13C NMR 100 MHz (CD3OD al 5%/CDCl3) 173.0, 172.1, 171.6, 171.5, 170.5, 144.9, 144.3, 132.7, 129.8, 129.6, 129.5, 128.2, 127.9, 127.0, 126.7, 69.5, 67.1, 66.7, 58.7, 52.7, 43.5, 40.9, 33.2, 31.5, 31.3, 30.3, 19.2, 19.1, 17.6; MS m/z 1013.2 (M + Na)+. Preparación de (6R, 9S, 12R, 16S) -6-isopropil-12-metil-16- ( (E) - 4-tritilsulfanil-but-l-enil) -9-tritilsulfanilmetil-l-oxa- 4,7,10, 13-tetraaza-ciclohexadecan-2 ,5,8,11, 14-pentaona (8) A una solución agitada del ácido hidroxilo 7 (100 mg, 0.102 mmol) en CH2C12 (5 mL) a 0°C se adicionó una solución de DCC (28.2 mg, 0.137 mmol) en CH2C12 (0.5 mL) gota a gota. Después de la agitación durante 30 minutos a 0°C una solución de DMAP (2.5 mg, 0.0213 mmol) en CH2C12 (51 mL) se adicionó, luego se agitó durante 16 h a temperatura ambiente. El precipitado sólido se filtró, y el filtrado se lavó con CH2C1 (5 mL) . La capa orgánica se lavó con agua (10 mL) , KHS04 al 5% (10 mL) , NaHC03 al 5% (10 mL) y NaCl sat. (10 L) las soluciones, se secaron (Na2S04), se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante la cromatografía con evaporación instantánea (eluyente EtOAc/hexanos al 30-50%) para dar 8 como un vidrio blanco (37 mg, 38%) . Preparación de (E) - (1S, 7. , IOS, 21R) -7-isopropil-21-metil-2-oxa-12 , 13-ditia-5 ,8,20 , 23-tetraaza-biciclo [8.7.6] tricos-16-en-3 , 6, 9, 19,22-pentaona (compuesto 001). A una solución agitada vigorosamente de I2 (37.1 mg, 0.146 mmol) en MeOH (50 mL) se adicionó el ditiol protegido 8 (35 mg, 0.0365 mmol) en MeOH (20 mL) gota a gota durante 5 minutos. Después de la agitación durante unos 10 minutos adicionales, ascorbato 0.2 M en solución reguladora de ácido cítrico 0.2M (4 mL) se adicionó y la fase orgánica se concentró, se adicionó EtOAc:NaCl 1:1 (20 mL) , se extrajo con EtOAc (5 x 25 mL) , el extracto orgánico combinado se secó (Na2S04) , se filtró, y el solvente se removió. El residuo se purificó mediante la cromatografía con evaporación instantánea (eluyente MeOH/CHCl3 al 1-6%) para dar el compuesto 001 como un sólido blanco (11.8 mg, 67%): [a] 2D -98.0 (c 0.50, CHC13) ; IR vma, 3300, 2477, 1734, 1659, 1526, 1446 cm4; XH NMR 400 MHz 7.41 (d, J= 6.0 Hz, ÍH) , 7.23 (d, J= 8.5 Hz, ÍH) , 6.37 (s, ÍH) , 5.94 (dt, J= 16.5, 7.5 Hz, ÍH) , 5.78-5.71 (m, ÍH) , 4.86 (m, ÍH) , 4.26 (d, J= 7.5 Hz, 1H) , 4.17 (d, J= 14.0 Hz, ÍH) , 4.08 (d, J= 14.0 Hz, ÍH) , 3.44 (dd, J= 14.5 Hz, 10.0 Hz, ÍH) , 3.22 (d, J= 10.0 Hz, ÍH) , 2.88-2.56 (m, 8H) , 1.49 (d, J= 7.5 Hz, 3H) , 0.98 (d, J= 6.5 Hz, 3H) , 0.92 (d, J= 6.5 Hz, 3H) ; 13C NMR 100 MHz 173.2, 171.9, 170.9, 170.1, 168.3, 129.8, 70.2, 64.4, 55.9, 51.7, 41.7, 38.2, 37.9, 35.7, 31.0, 26.9, 20.2, 19.7, 15.4; HRMS m/z 509.1495 (M + Na)+ esperado 509.1499. Procedimiento general para la síntesis de análogos representados por la fórmula (I) . En la etapa (a) , un éster de aminoácido que lleva R2 de cadena lateral se condensa con un segundo aminoácido que lleva el Ri de la cadena lateral para dar un dipéptido. En la etapa (b) , el dipéptido se condensa con un derivado de cisteina protegido para dar un tripéptido. En la etapa (c) el tripéptido se condensa con un aminoácido para proporcionar un tetrapéptido protegido. En la etapa (d) , el termino N del tetrapéptido se desprotege, y la amina libre se acopla con un derivado de ácido ß-hidroxi. En la modalidad preferida de la invención, R4 y R5 son H, con X que es un auxiliar quíral como es reportado en Yurek-George, A.; Habens, F. ; Brimmell, M. ; Packham, G.; Ganesan, A. J Am . Chem . Soc . 2004, 126, 1030-1031. En la etapa (e), el grupo éster se hidroliza, después de la ciclización en la etapa (f) y la formación de enlace de disulfuro en (g) para completar la síntesis de los compuestos depsipéptidos bicíclicos (I).

Síntesis de los análogos 9A-F mediante el esquema general R2 = H, 1A R2 = H, R = 'Pr, 2A R2 = H, R-, = 'Pr, 3A R2 = H, R-, = 'Pr, R3 = Me, 4A R2 = H, RT = 'Pr, R3 = Bn, 4B R2 = H, R, = 'Pr, R3 = 'Pr. 4C R2 = H, Ri = 'Pr, R3 = CH2(CHz)2CH2NHBoc, 4D R2 — H, R-] — Pr, R3 = Me, 6A R2 = H, R, = 'Pr, R3 = Me, 7A R = H, -) — Pr, R3 = Bn, 6B R2 = H, R, = 'Pr, R3 = Bn, 7B R2 = H, Ri = 'Pr, R3 = 'Pr, 7C R = H, R-) = Pr, R3 = 'Pr, 6C R2 = H, R, = 'Pr, R3 = CH2(CH2)2CH2NHBoc, 7D R2 = H, R, = 'Pr, R3 = CH2(CH2)2CH2NHBoc, 6D R2 = Me, R, = 'Pr, R3 = Me, 7E R2 = Me, Ri = 'Pr, R3 = Me, 6E R2 = H, R, = 'Pr, R3 = CH2CH2C02'Bu, 7F R2 = H, R, = 'Pr, R3 = CH2CH2C02'Bu, 6F R2 , R, = 'Pr, R3 = Me, 8A R2 H, R, = 'Pr, R3 = Me, 9A R2 = H, R, = 'Pr, R3 = Bn, 8B R2 = H, Rt = 'Pr, R3 = Bn, 9B R2 = H, Ri = 'Pr, R3 = 'Pr, 8C R2 = H, R, = 'Pr, R3 = 'Pr, 9C R2 = H, R., = 'Pr, R3 = CH2(CH2)2CH2NHBoc, 8D R2 = H, R, = 'Pr, R3 = CH2(CH2)2CH2NHBoc, 9D R2 = Me, R = 'Pr, R3 = Me, 8E R2 = Me, R, = 'Pr, R3 = Me, 9E R2 = H, R, = 'Pr, R3 = CH2CH2C02'Bu, 8F i — R2 = H, R, = 'Pr, R3 = CH2CH2C02'Bu, 9F L— R2 = H, R, = 'Pr, R3 = CH2CH2C02H, 10F Preparación de éster metílico de ácido [ (R) -2- (9H-f luoren-9-ilmetoxicarbonilamino) -3-metil-butirilamino] -acético (2A) . A una solución agitada de Fmoc protegido de D-valina (2.70 g, 7.96 mmol) en CH2C12 (50 mL) se adicionó EDAC»HC1 (1.83 g, 9.55 mmol), HOBt (1.30g, 9.55 mmol) y DIEA (3.8 mL, 27.86 mmol) . Después de la agitación a RT . durante 15 minutos, éster metílico de glicina (ÍA, 1.0 g, 7.96 mmol) luego se adicionó y la mezcla de reacción se agitó durante 4 h, se diluyó con CH2C12 (50 mL) se lavó con agua (25 mL) , HCl al 10% (25 mL) , NaHC03 al 5% (25 mL) y NaCl sat. (25 mL) las soluciones, se secaron (Na2S04), se filtraron y se concentraron para dar un sólido blanco el cual se re-cristalizó de CH3CN para dar 2A como un sólido blanco (2.81 g, 86%): mp = 148-150°C; [a]22D -7.32 (c 0.50, CHC13) ; IR vmax 3287, 1750, 1690, 1649, 1535 cm"1; 2H NMR (400 MHz, CDC13) d 7.75 (d, J = 7.5 Hz, 2H) , 7.57 (d, J= 7.0 Hz, 2H) , 7.39 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 7.28 (m, 2H) , 6.54 (s, ÍH) , 5.44 (s, ÍH) , 4.43-4.38 (m, 2H) , 4.21 (t, J = 7.0 Hz, ÍH) , 4.01-3.96 (m, 3H), 3.72 (s, 3H) , 2.16 (m, ÍH) , 0.96 (t, J = 9.0 Hz, 6H) ; 13C NMR (100 MHz, CDC13) d 171.7 (C), 170.1 (C), 156.6 (C) , 143.9 (C), 141.4 (C), 127.8 (CH) , 127.2 (CH) , 125.2 (CH) , 120.1 (CH), 67.2 (CH2), 60.4 (CH) , 52.5 (CH) , 47.3 (CH3) , 41.2 (CH2), 31.2 (CH) , 19.3 (CH3) , 17.9 (CH) ; MS m/z 842.8 (30%, [2M+Na]+), 432.9 (100%, [M+Na]+). Preparación de éster metílico de ácido { (R) -2- [ (S) -2- (9H-fluoren-9-ilmetoxicarbonilamino) -3- (tritilsulfanil) -propionilamino] -3-metil-butirilamino}acético (3A) . A una solución agitada de 2A (1.0 g, 2.44 mmol) en CH3CN (48.5 mL) a RT . se adicionó Et2NH (2.5 mL) . Después de la agitación durante 3 h a RT. la mezcla de reacción se diluyó con hexano (100 mL) y se concentró para dar la amina cruda como un aceite incoloro. A una solución agitada de Fmoc- (STrt) -D-cisteína (1.70g, 2.9 mmol) en CH3CN (25 mL) se adicionó EDAC-HC1 (561.0 mg, 2.93 mmol), HOBt (396 mg, 2.93 mmol) y DIEA (1.31 mL, 7.32 mmol). Después de la agitación a RT. durante 15 minutos, la amina cruda luego se adicionó y la mezcla de reacción se agitó durante 4 h, el solvente se removió y el residuo se disolvió hasta en CH2CI2 (100 mL) , se lavó con agua (25 mL) , HCl al 10% (25 mL) , NaHC03 al 5% (25 mL) y NaCl sat. (25 mL) las soluciones, se secaron (Na2S04) , se filtraron y el solvente se removió para dar un sólido blanco el cual se re-cristalizó de CH3CN para dar 3A como un sólido blanco (1.46 g, 79%): [a]22D -2.35 (c 0.50, CHC13) ; IR vmax 3267, 1646, 1543 cm"1; ?H NMR 400 MHz (400 MHz, CDC13) d 7.76 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 7.54 (d, J = 6.5 Hz, 2H) , 7.39-7.21 (m 19H), 6.87 (s, ÍH) , 6.23 (d, J = 8.0, 2H) , 5.04 (d, J = 7.0, ÍH) , 4.37 (d, J = 7.0, 2H) , 4.29 (dd, J = 8.6, 5.0, ÍH) , 4.17 (t, J = 6.5, ÍH), 3.96 (m, 1H) , 3.72 (dd, J = 18.1, 5.0, ÍH), 3.65 (s, 3H), 3.60 (m, ÍH) , 2.70 (d, J = 6.5, 2H) , 2.30 (m, ÍH) , 1.70 (s, ÍH), 0.87 (dd, J = 13.0, J = 7.0 Hz, 6H) ; 13C NMR (100 MHz, CDC13) d 170.6-(C) , 170.5 (C) , 170.1 (C) , 156.2(C), 144.3(C), 143.8(C), 143.7 (C) 141.4 (C) , 129.6(CH), 128.4(CH), 128.0(CH), 127.8(CH) 127.2(CH), 125.1(CH), 120.2(CH), 67.6(CH), 67.2(CH2), 58.4(CH), 54.3(CH), 52.4(CH3), 47.1(CH), 40.9(CH2), 33.6(CH2), 30.0(CH), 19.4 (CH3) , 17.4 (CH3); LRMS m/z 777.8 (100%, [M+Na]+); Anal. Calculado para C45H45N306S: 71.50; H, 6.00; N, 5.56. Encontrado C, 71.42; H, 5.99; N, 5.55. Preparación de éster metílico de ácido ( (R) -2-{ (S) -2- [ (iR) -2-(9H-fluoren-9-ilmetoxicarbonilamino) -propionilamino] -3-tritilsulfanil-propionilamino} -3-metil-butirilamino) -acético (4A). A una solución agitada de 3A (900 mg, 1.19 mmol) en CH3CN/CH2C12 (1:1, 60 mL) a RT . se adicionó Et2NH (3 mL) . Después de la agitación durante 3 h a RT . la mezcla de reacción se diluyó con heptano (60 mL) y se concentró para dar la amina cruda como un aceite incoloro. A una solución agitada de Fmoc-D-alanina (529 mg, 1.7 mmol) en CH2C12 (30 mL) se adicionó EDAC«HC1 (326 mg, 1.7 mmol ) J HOBt (230 mg, 1.7 mmol) y DIEA (627 µl, 3.6 mmol) . Después de la agitación a RT . durante 10 minutos una solución de la amina cruda en CH2C12 (20 mL) luego se adicionó y la mezcla de reacción se agitó durante 18 h. Donde en la reacción se lavó con agua (15 mL), HCl al 10% (15 mL) , NaHC03 al 5% (15 mL) y NaCl sat. (15 mL) las soluciones, se secaron (Na2S04), se filtraron, y el solvente se removió para dar un sólido blanco el cual se recristalizó de CH3CN para dar 4A como un sólido blanco (810 mg, 0.98 mmol, 82%): mp = 195-197°C; [a]22D +5.1 (c 0.50, CHC13); IR vmax 3267, 3054, 1744, 1706, 1635, 1531.1 cm"1; XH NMR (400 MHz, CDC13) d 7.75 (d, J = 7.5 Hz, 2H) , 7.52 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.39 (m, 7H) , 7.26-7.15 (m, 13H) , 6.79 (s, ÍH) , 6.62 (s, ÍH), 5.47 (s, ÍH) , 4.43-4.28 (m, 4H) , 4.13 (m, ÍH) , 4.01 (m, ÍH) , 3.88 (s, 2H) , 3.63 (s, 3H) , 2.81 (m, ÍH) , 2.52 (m, ÍH) , 2.26, (m, ÍH) , 1.30 (d, J = 6.0 Hz, 3H) , 0.94 (d, J = 6.0 Hz, 3H) , 0.89 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ; 13C NMR (100 MHz, CDC13) d 172.7, 171.1, 170.2, 156.1, 144.4, 143.9, 143.8, 141.4, 129.6, 128.-3, 127.9, 127.2, 127.1, 125.1, 120.1, 58.5, 52.7, 52.3, 50.8, 47.2, 41.0, 33.5, 30.4, 19.3, 19.0, 17.7; LRMS m/z 849.2 (100%, [M+Na]+), 865.1 (20%, [M+K]+). Preparación de éster metílico de ácido ( (R) -2-{ (S) -2- [ (JR) -2-( (22) - (S) -3-hidroxi-7-tritilsulfanil-hept-4-enoilamino) -propionilamino] -3-tritil-sulfanil-propionilamino}-3-metil-butirilamino) -acético (6A) . A una solución agitada de 4A (760 mg, 0.92 mmol) en CH2C12/CH3CN (3:2, 150 mL) a RT . se adicionó Et2NH (7.5 mL) . Después de la agitación durante 5 h a RT . la mezcla de reacción se diluyó con heptano (60 mL) y el solvente se removió, CH2C12 (50 mL) se adicionó, se filtró y se concentró para dar la amina cruda como un aceite incoloro. A una solución agitada de la amina cruda en CH2CI2 (30 mL) se adicionó una solución de 5 (672 mg, 1.20 mmol, preparada de acuerdo con el procedimiento en Yurek-George, A.; Habens, F. ; Brirnrnell, M.; Packham, G.; Ganesan, A. J Am . Chem . Soc . 2004, 126, 1030-1031) en CH2C12 (5 mL) y DMAP (15 mg, 0.12 mmol) a RT. Después de la agitación a RT . durante 12 horas, el solvente se removió y el residuo se purificó mediante la cromatografía con evaporación instantánea (eluyente EtOAc/CH2Cl2 al 10-100%) para dar 6A como un vidrio blanco (740 mg, 80%): mp = 191-193°C; [a]22D - 18.0 (c 0.50, CHC13) ; IR vmax 3272, 3064, 1758, 1692, 1621 cm"1; XH NMR (400 MHz, CD3OD al 5%/CDCl3) d 7.40 (m, 12H) , 7.25 (m, 12H) , 7.20 (m, 6H) , 6.96 y 6.88 (lábil NH, d, J= 8.0 Hz, ÍH) , 5.49 (dt, J= 15.0 Hz, 6.5 Hz, ÍH) , 5.37 (dd, J= 15.5 Hz, 6.0 Hz, ÍH) , 4.32 (m, 2H), 4.22 (d, J= 6.0 Hz, ÍH) , 3.98 (t, J= 7.0 Hz, ÍH) , 3.92 (d, J = 18.1 Hz, ÍH) , 3.72 (d, J= 17.6 Hz, ÍH) , 3.67 (s, 3H), 2.64 (dd, J= 13.0, 7.5 Hz, ÍH) , 2.58 (dd, J= 13.0, 7.5 Hz, ÍH) , 2.56-2.18 (m, 9H) , 2.11 (q, J= 6.5 Hz, 2H) , 1.31 (d, J= 7.5 Hz, 3H) , 0.91 (t, J = 7.0 Hz, 6H) ; 13C NMR (100 MHz, CD3OD al 5%/CDCl3) d 173.0, 172.0, 171.3, 170.5, 170.2, 144.9, 144.2, 132.8, 129.9, 129.7, 129.6, 129.5, 128.2, 128.1, 127.9, 127.1, 126.7, 69.6, 67.1, 66.7, 58.9, 58.8, 52.7, 52.2, 50.0, 49.8, 49.6, 49.5, 49.4, 49.1, 43.7, 40.9, 40.8, 33.1, 31.5, 31.3, 30.0, 19.2, 17.5; LRMS m/z. Preparación de ácido ( (R) -2-{ (S) -2- [ (R) -2- ( (E) - (S) -3-hidroxi-7-tritilsulfanil-hept-4-enoilamino) -propionilamino] -3-tritil-sulfanil-propionilamino}-3-metil-butirilamino) -acético (7A) . A una solución agitada de 6A (700 mg, 0.70 mmol) en THF (15 L) a 0°C se adicionó una solución de LiOH (25 mg, 1.05 mmol) en H2O (2.4 mL) . Después de la agitación durante 1 hora, la mezcla de reacción se diluyó con H20 (30 mL) , se acidificó a pH 3-4 con KHSO4 1M, y se extrajo con EtOAc (3 x 30 mL) . La capa orgánica se lavó con NaCl sat. (15 mL) , se secó (Na2S04), se filtró y se concentró para dar un sólido blanco el cual se trituró con éter, para dar 7A como un sólido blanco (693 mg, 99%) el cual se utilizó crudo directamente en la siguiente etapa, mp = 191-193°C; [a] D -18.5 (c 0.50, CHC13) ; IR vmax 3413, 1711, 1678, 1630, 1451 cm" \- XH NMR (400 MHz, CD30D al 5%/CDCl3) d 7.30 (m, 12H) , 7.16 (m, 12H), 7.13 (m, 6H) , 5.43 (dt, J = 15.5 Hz, 6.0 Hz, ÍH) , 5.30 (dd, J = 15.5 Hz, 6.0 Hz, ÍH) , 4.27 (m, 2H) , 4.21 (m, ÍH) , 3.99 (m, ÍH) , 3.75 (s, 2H) , 3.77 (m, br, 6H) , 2.55 (dd, J = 12.5 Hz, 6.5 Hz, ÍH) , 2.44 (dd, J = 12.5 Hz, 7.5 Hz, ÍH) , 2.21 (m, 2H) , 2.12 (m, 3H) , 2.02 (m, 2H) , 1.23 (d, J = 7.0 Hz, 3H) , 0.83 (d, J = 7.0 Hz, 3H) , 0.80 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ; 13C NMR (100 MHz, CD3OD al 5%/CDCl3) d 173.0, 172.1, 171.6, 171.5, 170.5, 144.9, 144.3, 132.7, 129.8, 129.6, 129.5, 128.2, 127.9, 127.0, 126.7, 69.5, 67.1, 66.7, 58.7, 52.7, 43.5, 40.9, 33.2, 31.5, 31.3, 30.3, 19.2, 19.1, 17.6; LRMS m/z 1013.2 (100%, [M+Na]+) . Preparación de (6R, 9S, 12.R, 16S) -6-isopropil-12-metil-16- ( (E) -4-tritilsulfanil-but-l-enil) -9-tritilsulfanilmetil-l-oxa-4,7,10, 13-tetraaza-ciclohexadecan-2 ,5,8,11, 14-pentaona (8A) . A una solución de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoíco (MNBA) (289 mg, 0.84 mmol) y DMAP (205 mg, 1.68 mmol) en CH2C12 (160 mL) se adicionó gota a gota una solución de ácido 7A (693 mg, 0.70 mmol) en CH2C12/THF (2:1, 600 mL) durante 5 horas. Después de 12 horas adicionales HCl 1M (150 mL) se adicionó, se extrajo con CH2C12 (3 x 100 mL) . La fase orgánica combinada luego se lavó con NaHC03 sat. (150 mL) después por salmuera (80 mL) , se secó (MgS04), se filtró y se concentró. El residuo purificó mediante la cromatografía con evaporación instantánea (eluyendo EtOAc/hexanos al 50/100%) para dar 8A como un vidrio blanco (478 mg, 0.49 mmol, 70%): [a]22D -7.0 (c T.50, CHC13) ; IR vmax 1735, 1659, 1526 cm"1; ?H NMR (400 MHz, CDC13) d 7.43-7.33 (m, 12H) , 7.32-7.13 (m, 20H) , 6.77 (d, J = 5.3 Hz, ÍH), 6.54 (d, J = 7.3 Hz, ÍH) , 5.58 (dt, J = 15.1, 6.8 Hz, ÍH) , 5.44-5.29 (m, 2H) , 4.55 (dd, J = 16.8, 9.0 Hz, ÍH) , 4.46 (dd, J = 9.5, 4.3 Hz, ÍH) , 3.89 (quin, (dd, J = 7.0 Hz, ÍH), 3.77 (dt, J = 8.3, 5.3 Hz, ÍH) , 3.43 (dd, J = 16.8, 2.8 Hz, ÍH) , 3.03 (dd, J = 12.6, 8.3 Hz, ÍH) , 2.61-2.49 (m, 3H), 2.18 (t, J = 7.5 Hz, 2H) , 2.11-1.95 (m, 2H) , 1.38 (d J = 7.0 Hz, 3H) , 0.94 (d, J = 6.8 Hz, 3H) , 0.90 (d, J = 6.8 Hz, 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CDC13) d 174.0 (C) , 170.9 (C) , 170.8 (C), 169.8 (C) , 169.3 (C) , 144.9 (C) , 144.3 (C) , 133.2 (CH) , 129.7 (CH) , 129.5 (CH) , 128.3 (CH) , 128.0 (CH) , 127.2 (CH) , 126.8 (CH) , 72.3 (CH) , 67.3 (C) , 66.8 (C) , 58.3 (CH) , 55.9 (CH), 50.5 (CH) , 41.7 (2 x CH2) , 32.5 (CH2) , 31.3 (CH2) , 31.2 (CH2), 28.8 (CH) , 19.8 (CH3) , 19.8 (CH3) , 17.2 (CH3) , 16.7 (CH3); RMS (ES+) m/z 996 (100%, [M+Na]+), 974 (10%, [M+H]+). Preparación de (E) - (1S, IR, IOS, 21R) -7-isopropil-21-metil-2-oxa-12 , 13-ditia-5 ,8,20 , 23-tetraaza-biciclo [8.7.6] tricos-16-en-3,6,9,19,22-pentaona (9A) . A una solución agitada vigorosamente de I2 (1120 mg, 4.42 mmol) en CH2Cl2/Me0H (9:1, 1000 mL) se adicionó el ditiol protegido 8A (430 mg, 0.44 mmol) en CH2Cl2/MeOH (9:1, 500 mL) gota a gota durante 30 minutos. Después de la agitación durante unos 30 minutos adicionales, tiosulfato de sodio 0.1M (300 mL) y NaCl sat. (100 mL) se adicionaron, extraida con CH2C12 (3 x 100 mL) . El extracto orgánico combinado se secó (MgS04), se filtró y el solvente se removió. El residuo se purificó mediante la cromatografía con evaporación instantánea (eluyente MeOH/CH2Cl2 al 1-6%) para dar 9A (205 mg, 0.42 mmol, 96%) como un sólido blanco: [ ]22D -98.0 (c 0.50, CHC13) ; IR vmax 3300, 2477, 1734, 1659, 1526, 1446 cm"1; XH NMR (400 MHz, CDC13) d 7.46 (d, J = 6.5 Hz, ÍH) , 7.33 (t, J = 5.3 Hz, ÍH), 7.28 (d, J = 8.8 Hz, ÍH) , 6.60 (d, J = 3.8 Hz, ÍH) , 5.95 (dtd, J = 16.1, 6.5, 2.0 Hz, ÍH) , 5.80-5.70 (m, 2H) , 4.85 (ddd, J = 9.8, 8.5, 3.8 Hz, ÍH) , 4.21 (qd, J = 7.3, 3.8 Hz, ÍH), 4.11 (d, J = 5.3 Hz, 2H) , 3.44 (dd, J= 15.6, 10.0 Hz, ÍH) , 3.20 (dd, J = 10.3, 6.8 Hz, ÍH) , 3.01-2.95 (m, 2H) , 2.92 (dd, J = 15.6, 4.0 Hz, ÍH) , 2.85-2.58 (m, 5H) 1.49 (d, J = 7.5 Hz, 3H) , 0.98 (d, J = 6.5 Hz, 3H) , 0.92 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ; 13C NMR 100 MHz 173.3 (C), 171.6 (C) , 171.0 (C) , 169.4 (C) , 168.2 (C) , 130.4 (CH) , 130.3 (CH) , 69.8 (CH), 64.9 (CH) , 54.5 (CH) , 52.0 (CH) , 42.4 (2 x CH2) , 38.7 (CH2), 38.6 (CH2), 32.7 (CH2) , 27.5 (CH) , 20.8 (CH3) , 20.1 (CH3), 16.7 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 995 (50%, [2M + Na]+), 509 (80%, [M+HNa]+), 487 (100%, [M+H]+); HRMS m/z 509.1495 (M + Na)+ esperado 509.1499.

Preparación de éster metílico de ácido ( (R) -2- { (S) -2- [ (i?) -2-(9H-fluoren-9-ilmetoxicarbonilamino) -3-fenil-propionilamino] -3-tritilsulfanil-propionilamino} -3-metil-butirilamino) -acético (4B) . A una solución agitada de 3A (836 mg, 1.11 mmol) en CH3CN/CH2C12 (1:1, 60 mL) a RT . se adicionó Et2NH (3 mL) . Después de la agitación durante 3 h a RT . la mezcla de reacción se diluyó con heptano (60 mL) y se concentró para dar la amina cruda como un aceite incoloro. A una solución agitada de Fmoc-D-fenilalanina (650 mg, 1.7 mmol) en CH2C12 (30 mL) se adicionó EDAC»HC1 (326 mg, 1.7 mmol), HOBt (230 mg, 1.7 mmol) y DIEA (627 µl, 3.6 mmol) . Después de la agitación a RT. durante 10 minutos una solución de la amina cruda en CH2C12 (20 mL) luego se adicionó y la mezcla de reacción se agitó durante 12 h. Donde en la reacción se lavó con agua (15 mL) , HCl al 10% (15 mL) , NaHC03 al 5% (15 mL) y NaCl sat. (15 mL) las soluciones, se secaron (Na2S04) , se filtraron, y el solvente- se removió para dar un sólido blanco el cual se recristalizó de CH3CN para dar 4B como un sólido blanco (800 mg, 0.89 mmol, 80%): IR vmax 3264, 3053, 1742, 1701, 1636, 1532 cm"1; XH-NMR (400 MHz, CDC13) d 7.75 (d, J = 7.5 Hz, 2H) , 7.46 (t, J = 7.5 Hz, 2H) , 7.41-7.31 (m, 8H) , 7.30-7.07 (m, 16H) , 7.01 (br s, ÍH) , 6.54 (br s, 2H) , 5.29 (br s, ÍH), 4.48-4.32 (m, 3H) , 4.25-4.13 (m, ÍH) , 4.10 (t, J = 8.5 Hz, ÍH), 3.99-3.76 (m, 3H) , 3.65 (s, 3H) , 3.10-2.88 (m, 2H) , 2.83-2.69 (m, ÍH) , 2.49 (dd, J = 13.0, 6.3 Hz, ÍH) , 2.36-2.22, (m, ÍH) , 0.93 (t, J= 7.0 Hz, 6H) ; 13C NMR 100 MHz 171.2 (C) , 171.0 (C) , 170.2 (C) , 170.0 (C) , 156.2 (C) , 144.3 (C) , 143.9 (C) , 143.7 (C) , 141.4 (C) , 136.0 (C) , 129.5 (CH) , 129.3 (CH) , 129.0 (CH) , 128.3 (CH) , 127.9 (CH) , 127.4 (CH) , 127.2 (CH) , 127.1 (CH) , 125.2 (CH) , 120.1 (CH) , 67.3 (CH2) , 58.6 (CH) , 56.2 (CH) , 52.8 (CH) , 52.3 (CH3) , 47.2 (CH) , 41.0 (CH2), 38.3 (CH2) , 33.5 (CH2) , 30.2 (CH) , 19.4 (CH3) , 17.7 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 1828 (30%, [2M+Na]+), 925 (100%, [M+Na]+) . Preparación de éster metílico de ácido ( (JR) -2-{ (S) -2- [ (JR) -2-( (E) - (S) -3-hidroxi-7-tritilsulfanil-hept-4-enoilamino) -3-fenil-propionilamino] -3-tritilsulfanil-propionilamino} -3-metil-butirilamino) -acético (6B) . A una solución agitada de 4B (245 mg, 0.28 mmol) en CHCI3/CH3CN (1:1, 14 mL) a RT . se adicionó Et2NH (1 mL) . Después de la agitación durante 5 h a RT . la mezcla de reacción se diluyó con heptano (10 mL) y el solvente se removió para dar la amina cruda como un aceite incoloro. A una solución agitada de la amina cruda en CH2C12 (10 mL) se adicionó una solución de 5 (193 mg, 0.34 mmol) en CH2C12 (5 mL) y DMAP (4 mg, 0.034 mmol) a RT . Después de la agitación a RT . durante 12 horas, el solvente se removió y el residuo se purificó mediante la cromatografía con evaporación instantánea (eluyente MeOH/CH2Cl2 al 2-4%) para dar 6B (190 mg, 64%) como un sólido blanco: XH NMR (400 MHz, CDC13) d 7.46-7.05 (m, 37H) , 6.85 (br s, ÍH) , 6.34 (br s, ÍH) , 5.44 (dt, J= 15.3, 6.5 Hz, ÍH), 5.29 (dd, J= 15.3, 6.2 Hz, ÍH) , 4.74 (br d, J= 5.3 Hz, ÍH) , 4.37 (t, J= 7.0 Hz, ÍH) , 4.33-4.25 (m, ÍH) , 4.20-4.08 (m, ÍH) , 3.93-3.74 (m, 2H) , 3.65 (s, 3H), 3.31 (br s, ÍH) , 3.06 (dd, J = 14.3, 5.3 Hz, ÍH) , 2.96 (dd, J = 14.3, 7.3 Hz, ÍH) , 2.59 (dd, J= 12.5, 6.8 Hz, ÍH) , 2.33-2.08 (m, 5H) , 2.04 (q, J= 7.0 Hz, 2H) , 0.90 (t, J= 63 Hz, 6H) ; 13C NMR (100 MHz, CDC13) d 171.9 (C), 171.2 (C) , 171.1 (C) , 170.4 (2 x C) , 145.0 (C) , 144.3 (C) , 136.1 (C) , 132.5 (CH) , 130.1 (CH) , 129.7 (CH) , 129.5 (CH) , 129.3 (CH) , 128.8 (CH), 128.2 (CH) , 128.0 (CH) , 127.3 (CH) , 127.1 (CH) , 126.7 (CH) , 69.8 (CH) , 67.1 (C) , 66.8 (C) , 58.9 (CH) , 54.4 (CH) , 52.6 (CH), 52.3 (CH3) , 43.7 (CH2) , 41.0 (CH2) , 37.6 (CH2) , 33.8 (CH2), 31.5 (CH2) , 31.4 (CH2) , 30.3 (CH) , 19.3 (CH3), 17.9 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 1104 (100%, [M+Na]+), 1082 (50%, [M+H]+) . Preparación de (6JR, 9S, 12R, 16S) -12-bencil-6-isopropil-16- ( (E) -4-tritilsulfanil-but-l-enil) -9-tritilsulfanilmetil-l-oxa-4,7,10, 13-tetraaza-ciclohexadecan-2 ,5,8,11, 14-pentaona (8B) . A una solución de éster metílico 6B (180 mg, 0.17 mmol) en THF a 0°C (10 mL) se adicionó una solución de LiOH (6 mg, 0.25) en H20 (1.5 mL) . Después de 1 h. la reacción se enfrió mediante la adición de HCl 1 M (6 mL) . Se adicionó CHCI3 (50 mL) y la fase orgánica se separó, se extrajo con CHC13 (2 x 10 mL) . La fase orgánica se lavó con salmuera (15 mL) , se secó (MgS04), se filtró y se concentró in vacuo para dar el ácido crudo 7B (179 mg, cuantitativo) como un sólido blanco que se utilizó inmediatamente en la siguiente etapa: (ES") m/z 1066 (100%, [M-H]"). A una solución de MNBA (68 mg, 0.20 mmol) y DMAP (49 mg, 0.40 mmol) en CH2C12 (40 mL) se adicionó gota a gota una solución de ácido 7B (179 mg, 0.17 mmol) en CH2C12/THF (15:1, 160 mL) durante 3 h. (ácido disuelto de Nb en THF primero luego se adicionó CH2C12) . Después de unas 14 h. adicionales la reacción se enfrió mediante la adición de HCl 1 M (40 mL) . La fase orgánica se separó (extraída con CH2CI2) y se lavó secuencialmente con NaHC03 (30 mL) y salmuera (20 mL) . La fase orgánica combinada se secó (MgSÜ4), se filtró y se concentró in vacuo para dar un aceite amarillo. La purificación mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (EtOAc/CH2Cl2 al 30-70%) dio 8B (108 mg, 0.10 mmol, 60%) como un sólido blanco: XH-NMR (400 MHz, CDC13) d 7.42-7.08 (m, 35H), 7.05 (d, J = 7.3 Hz, 2H) , 6.96 (br s, ÍH) , 6.54 (br s, ÍH) , 5.46 (dt, J = 15.3, 6.5 Hz, 2H) , 5.21 (dd, J = 15.3, 6.6 Hz, ÍH), 4.49 (dd, J = 13.5, 4.3 Hz, ÍH) , 4.32 (dd, J = 16.8, 9.0 Hz, ÍH) , 4.16-4.06 (m, ÍH) , 3.85 (br q, J = 6.0 Hz, ÍH) , 3.02-2.82 (m, 4H) , 2.65-2.53 (m, 2H) , 2.40 (dd, J = 14.6, 3.3 Hz, ÍH) , 2.23 (dd, J = 14.6, 11.3 Hz, ÍH) , 2.10 (t, J = 7.0 Hz, 2H) , 1.97-1.84 (m, 2H) , 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H) , 0.92 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CDC13) d 173.5 (C), 170.8 (C) , 170.7 (C) , 169.9 (2 x C) , 144.9 (C) , 144.2 (C), 136.3 (C) , 132.7 (CH) , 129.6 (CH) , 129.5 (CH) , 129.3 (CH), 128.9 (CH) , 128.3 (CH) , 128.0 (CH) , 127.9 (CH) , 127.3 (CH), 127.1 (CH) , 126.7 (CH) , 72.2 (CH) , 67.3 (C) , 66.7 (C), 58.3 (CH), 55.8 (2 x CH) , 42.0 (CH2) , 41.4 (CH2) , 36.7 (CH2), 32.3 (CH2), 31.3 (CH2), 31.1 (CH2), 28.7 (CH) , 19.8 (CH3) , 17.2 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 1071 (100%, [M+Na]+) , 1066 (10%, [M+NH4]+), 1049 (10%, [M+H]+). Preparación de (E) - (1S, IR, IOS, 211?) -21-bencil-7-isopropil-2-oxa-12 , 13-ditia-5 ,8,20, 23-tetraaza-biciclo [8.7.6] tricos-16-en-3,6,9,19,22-pentaona (9B) . A una solución agitada vigorosamente de I2 (254 mg, 1.0 mmol) en CH2Cl2/MeOH (9:1, 230 mL) se adicionó gota a gota una solución de jbis-tritilo 8B (105 mg, 0.10 mmol) durante 30 minutos. Después de unos 30 min. adicionales la reacción se enfrió mediante la adición de tiosulfato de sodio (0.05 M, 100 mL) después por salmuera (10 mL) . La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con CH2C12 (3 x 15 mL) . La fase orgánica combinada se secó (MgS04) , se filtró y se concentró in vacuo para dar un sólido blanco. La purificación mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 1-3.5%) dio depsipéptido bicíclico 9B (43 mg, 0.08 mmol, 75%) como un sólido blanco: [a]25D -98 (c 0.05, MeOH/CHCl3 1:1) ; IR vmax 3280, 1732, 1627, 1538, 1445 cm"1; XH-NMR (400 MHz, CD3OD/CDCI319 : 1 ) d 7.35-7.18 (m, 5H) , 5.86-5.76 (m, ÍH), 5.74-5.66 (m, 2H) , 4.62 (dd, J = 11.3, 4.0 Hz, ÍH) , 4.45 (dd, J = 9.3, 5.3 Hz, ÍH) , 4.'28 (d, J = 17.6 Hz, ÍH) , 3.77 (d, J = 17.6 Hz, ÍH) , 3.39 (d, J = 10.5 Hz, ÍH) , 3.27-3.17 (m, 2H), 3.11-2.99 (m, 3H) , 2.97-2.83 (m, 2H) , 2.81 (dd, J = 13.6, 2.0 Hz, 1H), 2.70-2.53 (m, 3H) , 0.96 (d, J = 6.5 Hz, 3H) , 0.92 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CD3OD/CDCI3 19:1) d 173.8 (C) , 173.2 (C) , 172.9 (C) , 171.3 (C), 169.4 (C) , 137.7 (CH) , 131.3 (CH) , 131.3 (CH) , 129.7 (CH), 129.6 (CH), 128.0 (CH) , 71.9 (CH) , 65.9 (CH) , 58.3 (CH) , 58.1 (CH), 42.6 (CH2) , 39.3 (2 x CH2) , 36.9 (CH2) , 36.8 (CH2), 31.8 (CH2), 28.1 (CH) , 20.6 (CH3) , 20.5 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 580 (50%, [2M+Na]+), 563 (100%, [M+ NH4]+), 563 (10% [M+H]+) . Preparación de éster metílico de ácido ( (R) -2- { (S) -2- [ (R) -2- (9H-fluoren-9-ilmetoxicarbonilamino) -3-metil-butirilamino] -3-tritilsul-fanil-propionilamino} -3-metil-butirilamino) -acético (4C) . A una solución agitada de 3A (836 mg, 1.11 mmol) en CH3CN/CH2CI2 (1:1, 60 mL) a RT . se adicionó Et2NH (3 mL) . Después de la agitación durante 3 h. a RT . la mezcla de reacción se diluyó con heptano (60 mL) y se concentró para dar la amina cruda como un aceite incoloro. A una solución agitada de Fmoc-D-valina (577 mg, 1.7 mmol) en CH2C12 (40 mL) se adicionó EDAC»HC1 (326 mg, 1.7 mmol), HOBt (230 mg, 1.7 mmol) y DIEA (627 µl, 3.6 mmol). Después de la agitación a RT. durante 10 minutos una solución de la amina cruda en CH2C12 (20 mL) luego se adicionó y la mezcla de reacción se agitó durante 12 h. Donde en la reacción se lavó con agua (15 mL), HCl al 10% (15 mL) , NaHC03 al 5% (15 mL) y NaCl sat. (15 mL) las soluciones, se secaron (Na2S04), se filtraron y el solvente se removió para dar un sólido blanco el cual se recristalizó de CH3CN para dar 4C como un sólido blanco (734 mg, 0.86 mmol, 78%): XH-NMR (400 MHz, CDC13) d 7.74 (d, J= 7.5 Hz, 2H) , 7.53 (t, J = 7.5 Hz, 2H) , 7.42-7.32 (m, 9H) , 7.30-7.19 (m, 9H), 7.16 (t, J = 7.0 Hz, 2H) , 6.80 (d, J = 8.0 Hz, ÍH) , 6.57 (d, J = 7.0 Hz, ÍH), 5.52 (d, J = 8.0 Hz, ÍH) , 4.44 (t, J = 8.0 Hz, ÍH) , 4.38 (dd, J= 10.5, 7.5 Hz, ÍH) , 4.25 (dd, J= 10.5, 7.0 Hz, ÍH) , 4.17-3.95 (m, 3H) , 3.87 (dd, J = 18.1, 5.5 Hz, ÍH) , 3.78 (dd, J = 18.1, 5.5 Hz, ÍH) , 3.63 (s, 3H), 2.71 (dd, J = 12.5, 6.0 Hz, ÍH) , 2.53 (dd, J = 12.5, 6.0 Hz, ÍH) , 2.21 (sept, J = 6.4 Hz, ÍH) , 2.07-1.93 (m, ÍH) , 0.93-0.83 (m, 12H) ; 13C NMR 100 MHz 171.5 (C) , 171.1 (C) , 170.2 (2 x C) , 156.6 (C) , 144.4 (C) , 144.0 (C) , 143.8 (C) , 141.4 (C) , 129.6 (CH) , 128.3 (CH) , 127.9 (CH) , 127.2 (CH) , 127.1 (CH) , 125.2 (CH) , 120.1 (CH) , 67.3 (CH2) , 67.2 (C) , 60.3 (CH), 58.5 (CH) , 52.5 (CH) , 52.3 (CH) , 47.3 (CH) , 41.0 (CH2) , 33.8 (CH2) , 31.5 (CH) , 30.5 (CH) , 19.2 (2 x CH3) , 18.0 (CH3), 17.8 (CH3) ; LRMS (ES + ) /z 1832 (10%, [2M+Na]+) , 877.5 (100%, [M+Na]+) .

Preparación de éster metílico de ácido ( (R) -2- { (S) -2- [ {R) -2-( (E) - (S) -3-hidroxi-7-tritilsulfanil-hept-4-enoilamino) -3-metil-butirilamino] -3-tritilsulfanil-propionilamino}-3-metil-butirilamino) -acético (6C) . A una solución agitada de 4C (235 mg, 0.28 mmol) en CHC13/CH3CN (1:1, 14 mL) a RT . se adicionó Et2NH (1 mL) . Después de la agitación durante 5 h. a RT . la mezcla de reacción se diluyó con heptano (10 mL) y el solvente se removió para dar la amina cruda como un aceite incoloro. A una solución agitada de la amina cruda en CH2C12 (10 mL) se adicionó una solución de 5 (193 mg, 0.34 mmol) en CH2C12 (5 mL) y DMAP (4 mg, 0.034 mmol) a RT . Después de la agitación a RT . durante 12 horas, el solvente se removió y el residuo se purificó mediante la cromatografía con evaporación instantánea (eluyente MeOH/CH2Cl2 1-3%) para dar 6C (230 mg, 81%) como un sólido blanco: XH NMR (400 MHz, CDC13) d 7.42-7.38 (m, 12H), 7.30-7.14 (m, 20H), 6.74 (br s, ÍH) , 6.39 (br s, ÍH) , 5.49 (dtd, J= 15.3, 6.5, 0.8 Hz, ÍH) , 5.36 (dd, J= 15.3, 6.3 Hz, ÍH), 4.39-4.26 (m, 3H) , 4.16-4.06 (m, ÍH) , 3.83 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.65 (s, 3H) , 3.33 (br s, ÍH) , 2.60 (dd, J = 12.8, 7.3 Hz, ÍH), 2.54 (dd, J = 12.8, 6.8 Hz, ÍH) , 2.37 (dd, J= 14.0, 3.0 Hz, ÍH), 2.30-2.02 (m, 7H) , 0.90 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 0.89 (d, J= 7.0 Hz, 3H) , 0.88 (d,. J = 7.0 Hz, 3H) , 0.85 (d, J = 7.0 Hz, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDC13) d 172.1 (C), 171.4 (C), 171.2 (C), 170.5 (C) , 170.3 (C) , 145.0 (C) , 144.3 (C), 132.6 (CH) , 130.2 (CH) , 129.7 (CH) , 129.5 (CH) , 128.3 (CH), 128.0 (CH) , 127.1 (CH) , 126.8 (CH) , 69.8 (CH) , 67.1 (C), 66.8 (C), 59.0 (CH) , 58.9 (CH) , 52.5 (CH) , 52.3 (CH3), 43.9 (CH2), 41.0 (CH2) , 33.7 (CH2) , 31.5 (2 x CH2) , 30.4 (CH), 30.2 (CH2), 19.5 (CH3) , 19.3 (CH3) , 17.9 (2 x CH3)-; LRMS (ES+) m/z 1056 (100%, [M+Na]+), 1051 (50%, [M+NH4]+). Preparación de ( 6R, 9S, 12J , 16S) -6, 12-diisopropil-16- ( (JSJ) -4-tritilsulfanil-but-1-enil) -9-tritilsulfanilmetil-l-oxa-4 , 7 , -10 , 13-tetraaza-ciclohexadecan-2 , 5 , 8 , 11 , 14-pentaona (8C) . A 0°C a una solución de éster metílico 6B (220 mg, 0.21 mmol) en THF (12 mL) se adicionó una solución de LiOH (7.6 mg, 0.32) en H20 (2 mL) . Después de 1 h. la reacción se enfrió mediante la adición de HCl 1 M (6 mL) . Sé adicionó CHC13 (50 mL) y la fase orgánica se separó, extraída con CHC13 (2 x 15 mL) . La fase orgánica se lavó con salmuera (10 mL) , se secó (MgS04), se filtró y se concentró in va cuo para dar el ácido crudo 7C (217 mg, cuantitativo) como un sólido blanco que se utilizó inmediatamente en la siguiente etapa: (ES") m/z 1017 (100%, [M-H]"). A una solución de MNBA (90 mg, 0.26 mmol) y DMAP (62 mg, 0.51 mmol) en CH2C12 (50 mL) ' se adicionó gota a gota una solución de ácido 7C (217 mg, 0.21 mmol) en CH2C12/THF (15:1, 200 mL) -durante 3 h. (ácido disuelto de Nb. en THF primero luego se adicionó CH2C12) . Después de unas 14 h. adicionales la reacción se enfrió mediante la adición de HCl 1 M (40 mL) . La fase orgánica se separó (extraída con CH2C12) y se lavó secuencialmente con NaHC03 (30 mL) y salmuera (20 mL) . La fase orgánica combinada se secó (MgS04) , se filtró y se concentró in vacuo para dar un aceite amarillo. La purificación mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (EtOAc/CH2Cl2 al 30-70%) dio 8C (130 mg, 0.13 mmol, 62%) como un sólido blanco: XH-NMR (400 MHz, CDC13) d 7.88 (br s, 2H) , 7.42-7.34 (m, 12H) , 7.29-7.14 (m, 19H) , 6.20 (br d, J = 7.0 Hz, ÍH) , 5.62-5.50 (m, 2H), 5.31 (dd, J = 15.3, 6.4 Hz, ÍH), 4.36 (dd, J = 17.3, 8.3 Hz, ÍH) , 4.24 (dd, J = 8.5, 4.5 Hz, ÍH) , 4.11 (t, J = 7.3 Hz, ÍH) , 3.65-3.56 (m, ÍH) , 3.42 (d, J = 14.5 Hz, ÍH), 2.99 (t, J = 10.8 Hz, ÍH) , 2.64 (dd, J = 12.0, 6.3 Hz, ÍH), 2.50 (dd, J = 15.1, 2.5 Hz, ÍH) , 2.35 (dd, J = 14.8, 9.8 Hz, ÍH) , 2.17 (t, J = 7.5 Hz, 2H) , 2.06-1.86 (m, 3H), 1.84-1.72 (m, ÍH) , 0.91 (d, J = 6.8 Hz, 3H) , 0.88 (d, J = 6.3 Hz, 6H), 0.83 (d, J = 6.8 Hz, 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CDC13) d 173.8 (C) , 172.2 (C) , 171.0 (C) , 169.5 (C), 168.9 (C), 145.0 (C) , 144.4 (C) , 132.7 (CH) , 129.7 (CH) , 128.2 (CH), 128.1 (CH) , 128.0 (CH) , 127.0 (CH) , 126.8 (CH) , 72.2 (CH), 67.3 (C) , 66.8 (C) , 58.8 (CH) , 58.7 (CH) , 58.4 (CH), 42.1 (CH2) , 41.9 (CH2) , 32.0 (CH2) , 31.5 (CH2) , 31.3 (CH), 31.2 (CH2), 29.4 (CH), 19.6 (CH3) , 19.4 (CH3) 18.5 (CH3) , 17.0 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 1023 (100%, [M+Na]+), 1018 (60%, [M+NH4]+) . Preparación de (E) - (1S, IR, IOS, 21R) -7 , 21-diisopropil-2-oxa-12 , 13-ditia-5 ,8,20, 23-tetraaza-biciclo [8.7.6] tricos-16-en-3,6,9,19,22-pentaona (9C) . A una solución agitada vigorosamente de I2 (305 mg, 1.2 mmol) en CH2Cl2/MeOH (9:1, 280 mL) se adicionó gota a gota una solución de ¿is-tritilo 8C (120 mg, 0.12 mmol) durante 30 minutos. Después de unos 30 min. adicionales la reacción se enfrió mediante la adición de tiosulfato de sodio (0.05 M, 100 mL) después por salmuera (10 mL) . La fase orgánica se separó y la fase acuoso se extrajo con CH2CI2 (3 x 15 mL) . La fase orgánica combinada se secó (MgS04), se filtró y se concentró in vacuo para dar un sólido blanco. La purificación mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 1-4%) dio depsipéptido bicíclico 9C (60 mg, 0.12 mmol, 97%) como un sólido blanco: [a]25D -105.7 (MeOH/CHCl3 1:1, c 0.15); XH-NMR (400 MHz, CD3OD) d 5.76-5.63 (m, 3H), 4.52 (dd, J = 11.3, 4.7 Hz, ÍH) , 3.96 (d, J = 5.1 Hz, ÍH) , 3.74 (d, J = 17.5 Hz, ÍH) , 3.38 (d, J = 10.9 Hz, ÍH) , 3.19-3.11 (m, 2H) , 3.09-2.96 (m, 3H) , 2.90 (dd, J = 13.6, 2.5 Hz, ÍH) , 2.71-2.62 (m, 2H) , 2.58-2.44 (m, ÍH) , 2.31-2.18 (m, ÍH) , 1.11 (d, J = 7.0 Hz, 3H) , 1.09 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.6 Hz, 3H) , 0.91 (d, J = 6.6 Hz, 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CD3OD) d 171.8 (C) , 171.7 (C) , 170.7 (C) , 170.4 (C), 168.3 (C) , 130.0 (CH) , 129.6 (CH) , 69.8 (CH) , 64.6 (CH), 61.9 (CH), 54.8 (CH) , 42.2 (CH2) , 39.3 (CH2) , 37.5 (CH2), 37.1 (CH2), 32.1 (CH2), 29.2 (CH) , 27.3 (CH) , 20.6 (CH3) , 20.0 (CH3) , 19.4 (CH3) , 19.0 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 537 (100%, [M+Na]+), 515 (90%, [M+ H]+). Preparación de éster metílico de ácido ( (R) -2-{ (S) -2- [ (R) -6-ter-butoxicarbonilamino-2- (9H-fluoren-9-ilmetoxicarbonil-amino) -hexanoilamino] -3-tritilsulfanil-propionilamino}-3-metil-butirilamino) -acético (4D) . El tripéptido 3A (548 mg, 0.7 mmol) bajo argón se disolvió en CH2CI2/CH3CN (44 mL, 1:1), luego con dietilamina agitada (1.65 mL, 10 mmol) se adicionó y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4.5 h. Luego se adicionó hexano (100 mL) a la mezcla de reacción y el solvente se removió in vacuo, esto se repitió nuevamente con hexano (3 x 25 mL) . La amina cruda luego se secó bajo alto vacío durante 40 mins. Luego a una solución de PyBop (558 mg, 1.1 mmol) y Fmoc-D-Lisina (Boc) -OH (477 mg, 1 mmol) en CH3CN (16.5 mL) se adicionó diisopropiletilamina (0.45 L, 2.6 mmol) bajo argón con agitación. La amina desprotegeída resultante de 3 se adicionó en CHC12 (19 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. El solvente luego se removió in va cuo y el sólido formado se purificó mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente EtOAc/Hexano 6:4 para dar 4D (571 mg, 0.57 mmol, 81%) como un sólido blanco: Rf EtOAc/Hexano 0-17 (6:4): [a]D26 = +47 (c 0.3, MeOH); IR 3294, 1744, 1646, 1515, 1445 (m) ; XH NMR (400MHz, CDC13) d 7.74 (d, J = 8.0, 2H) , 7.56-7.51 (m, 2H), 7.42-7.34 (m, 8H) , 7.30-7.17 (m, HH) , 7.02 (br s, ÍH) , 6.94 (br s, 1H) , 6.59 (d, J = 8.03 Hz, ÍH) , 5.75 (s, ÍH), 4.38-4.21 (m, 2H) , 4.18 (dd, J= 8.5, 6.0 Hz, ÍH) , 4.15-4.05 (m, 2H), 3.87 (d, J= 5.5 Hz, 3H) , 3.55 (s, 3H) , 3.03 (br d, J= 8.0 Hz, 2H), 2.76-2.67 (m, ÍH) , 2.66-2.58 (m, ÍH) , 2.20-2.10 (m, ÍH) , 1.93- 1.84 (m, 2H) ,. 1.82-1.72 ( , 1H) , 1.70-1.59 (m, ÍH) , 1.43 (s, 9H) , 1.50-1.30 (m, 3H) , 0.89 (d, J= 7.02 Hz, 3H) , 0.84 (d, J= 7.03 Hz, 3H) , 13C NMR (100 MHz, CDC13) d 172.6 (C) , 171.4 (C) , 170.6 (C) , 170.6 (C) , 156.6 (C), 156.3 (CO) , 144.4 (C) , 144.3 (C) , 143.9 (C) , 143.8 (C) , 141.4 (C) , 129.7 (CH) , 129.5 (CH) , 128.3 (CH) , 128.2 (CH) , 127.2 (CH) , 127.1 (CH) , 125.2 (CH) , 120.0 (CH) , 67.4 (CH2) , 47.2 (CH3) , 41.1 (CH2) , 40.0 (CH2) , 33.5 (CH2) , 31.9 (CH2) , .3 (CH2) , 29.8 (CH) , 28.6 (CH3) , 22.5 (CH2) , 19.4 (CH3) , 17.9 (CH3) , 52.3 (CH) , 52.8 (CH) , 55.1(CH) , 59.0 (CH) ; LRMS (ES+) 1007.0 (100%, [M+Na]+) . Preparación de éster metílico de ácido ( (R) -2-{ (S) -2- [ {R) -6-ter-butoxicarbonilamino-2- ( (S) -3-hidroxi-7-tritilsulfanil-hept-4-enoilamino) -hexanoilamino] -3-tritilsulfanil-propionil-amino} -3-metil-butirilamino) -acético (6D) . A una solución de tetrapéptido 4D (201 mg, 0.2 mmol) en CH2C12 (13.5 mL) y CH3CN (16.5 mL) se adicionó trietilamina (1 mL, 9.6 mmol) bajo argón y la mezcla de reacción se agitó durante 5 h. El solvente luego se removió in vacuo y esto se repitió con hexano (2 x 10 mL) . Luego a una solución de la amina cruda en CH2C12 (7 mL) se adicionó DMAP (4 mg, 0.03 mmol) después de una solución de 5 (158 mg, 0.28 mmol) en CH2C12 (7 mL) . La reacción luego se agitó durante 18 h. El solvente luego se removió in vacuo y el sólido formado se purificó mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente EtOAc/Hexano 6:4-7:3) para dar 6D (136 mg, 0.12 mmol, 60%) como un sólido blanco: mp 85-87°C; Rf 0.29 de EtOAc/Hexano (8:2); [a]29D = +19 (c 0.49, CH2C12); IR (película delgada) 3289, 1751, 1687, 1634, 1521, 1490, 1443; ? NMR (400MHz, CDC13) d 7.42-7.35 (m, 15H) , 7.29-7.16 (m, 17H) , 6.95 (d, J= 7.5 Hz, ÍH) , 6.80 (d, J= 8.0 Hz, ÍH), 5.48 (dt, J= 15.1, 6.5 Hz, ÍH) , 5.35 (dd, J= 15.1, 6.0 Hz, 1H5) , 4.65 (s, ÍH), 4.46-4.35 (m, 2H) , 4.21 (dd, J= 8.5, 6.52 Hz, ÍH), 4.04-3.96 (m, ÍH) , 3.93 (d, J= 5.5 Hz, ÍH), 3.89-3.81 (m, 2H) , 3.62 (s, 3H) , 3.02 (d, J= 5.5 Hz, 2H) , 2.60-2.45 (m, 2H) , 2.35-2.00 (m, 9H) , 1.85-1.74 (m, ÍH) , 1.66-1.54 (m, ÍH), 1.40 (s, 9H) , 1.47-1.25 (m, 2H) , 0.88 (d, J= 7.0 Hz, 3H, ) , 0.84 (d, J= 7.0 Hz, 3H) , 13C NMR (100 MHz, CDCI3) d 172.3 (C), 172.2 (C) , 171.5 (C) , 170.7 (C) , 170.5 (C), 156.2 (C) , 145.0 (C) , 145.0 (C) , 144.3 (C) , 132.9 (CH) , 129.7 (CH) , 129.6 (CH) , 129.5(CH) , 129.5 (CH) , 128.2 (CH) , 128.2 (CH) , 128.0 (CH) , 127.0 (CH) , 126.7 (CH) , 69.5 (CH) , 67.1 (CH2), 66.7 (CH2) , 58.6 (CH) , 52.9 (CH) , 52.6 (CH) , 52.3 (CH), 52.2 (CH3), 44.2 (CH2), 41.1 (CH2), 40.1 (CH2) , 33.9 (CH2), 31.4 (CH2), 31.0 (CH2) , 31.0 (CH2) , 30.6 (CH) , 29.8 (CH2), 28.6 (CH3), 22.6 (CH2) , 19.3 (CH3) , 18.0 (CH3) , MS (ES+) 1185 (100%, [M+Na]+) , 1163 (40%, [M+H+) . Preparación de éster ter-butilico de ácido {4- [ (6J , 9S, 12R) -6-isopropil-2 ,5,8,11, 14-pentaoxo-16- ( (5) -4-tritilsulfanil-but-1-enil) -9-tritilsul-fanilmetil-l-oxa-4 ,7,10, 13-tetraaza-ciclo exadec-12-il] -butil} -carbámico (8D) . A 0°C a una solución de 6D (136 mg, 0.12 mmol) en THF (1.9 mL) se adicionó una solución de LiOH (6.8 mg, 0.28 mmol) en agua (0.5 mL) y la mezcla de reacción se agitó durante 55 mins. Luego se adicionó ácido cítrico gota a gota hasta que el pH se dejó entre 3-4 luego se adicionó agua (3.7 mL) después de EtOAc (15 mL) . Las capas se separaron y el producto se extrajo con EtOAc (2x10 mL) . Las capas orgánicas combinadas luego se lavaron con salmuera sat. (10 mL) , se secaron sobre MgS04 y el solvente se removió in vacuo para dar el ácido crudo 7D (132 mg, cuantitativo) como un sólido blanco que se utilizó inmediatamente en la siguiente etapa: LRMS (ES") 1147 (100%, [M-H]"). Luego a una solución de MNBA (47 mg, 0.14 mmol) y DMAP (33 mg, 0.27 mmol) en CH2C12 (25 mL) se adicionó gota a gota una solución del ácido 7D (132 mg, 0.11 mmol) en CH2C12 (96 mL) durante 10 h. y la mezcla de reacción se agitó durante otras 9.5 h. a temperatura ambiente. Luego se adicionó HCl al 0.2% (50 mL) y las capas formadas se separaron, la capa orgánica se lavó con sulfato hidrógeno de sodio (30 mL) y salmuera sat. (30 mL) se secó sobre MgS04 y se concentró in vacuo para dar un sólido café. Esto luego se purificó mediante la cromatografía en columna con evaporación instantánea con un eluyente de EtOAc/Hexano (6:4) el cual se incrementó a (3:1) dio el producto 8D (52 mg, 0.05 mmol, 42%) como un sólido blanco: Rf 0.07 de EtOAc/Hexano (6:4); [a]25D = -76 (c 0.1, CH2C12) ; IR (película delgada) 3271 1739 (m) , 1683, 1641, 1536, 1490, 1444, 1391; XH NMR (400MHz, CDC13) d 7.54 (s, ÍH) , 7.44-7.36 (m, 12H) , 7.30-7.17 (m, 19H) , 6.80 (d, J= 8.5 Hz, ÍH,), 6.47 (d, J= 8.5 Hz, ÍH) , 5.58 (dt, J = 15.1, 7.0 Hz, ÍH,), 5.47 (td, J= 6.5, 2.5 Hz, ÍH, ) , 5.39 (dd, J= 15.1, 6.5 Hz, ÍH), 4.68 (s, ÍH) , 4.29 (q, J = 7.0 Hz, ÍH) , 4.20 (dd, J = 17.1, 7.5 Hz, ÍH) , 4.16 (dd, J= 9.0, 6.0 Hz, ÍH), 3.53 (dd, J= 17.1, 5.5 Hz, ÍH) , 3.44 (q, J= 7.5 Hz, ÍH) , 3.00-2.90 (m, 2H) , 2.66 (d, J= 7.5 Hz, 2H) , 2.55-2.48 (m, ÍH), 2.39 (dd, J = 15.1, 8.0 Hz, ÍH) , 2.30-2.15 (m, 3H) , 2.13-2.01 (m, 4H) , 1.68 -1.58 (m, ÍH) , 1.51 (dd, J= 13.5, 7.0 Hz, ÍH,), 1.40 (s, 9H), 1.45-1.34 (m, 2H) , 1.36-1.28 (m, 2H) , 1.31-1.23 (m, 2H) , 0.89 (d, J= 6.5 Hz, 3H) , 0.84 (d, J= 6.5 Hz, 3H, ) , 13C NMR (100 MHz, CDC13) d 173.1 (C) , 171.3 (C), 171.3 (C), 169.8 (C) , 168.9 (C) , 156.2 (C) , 145.0 (C) , 144.5 (C), 132.6 (CH) , 129.7 (CH) , 128.2 (CH) , 128.0 (CH) , 127.0 (CH), 126.8 (CH) , 79.1 (CH) , 67.5 (C) , 66.8 (C) , 58.7 (CH) , 53.1 (CH) , 53.0 (CH) , 42.0 (CH2) , 41.8 (CH2), 40.2 (CH2) , 32.2 (CH2), 31.5 (CH2), 31.4 (CH2) , 31.2 (CH2) , 31.0 (CH2) , 29.7 (CH), 28.6 (CH3), 22.8 (CH2) , 19.5 (CH3) , 17.6 (CH3) ; LRMS (ES+) 1152 (100%, [M+Na+] ) . Preparación de éster ter-butilico de ácido [4- ( (7iR, IOS, 14S, 21JR) -7-isopropil-3,6, 9 , 19, 22-pentaoxo-2-oxa-12 , 13-ditia-5,8,20,23-tetraaza-biciclo[8.7.6] tricos-16-en-21-il) -butil] -carbámico (9D) . A una solución agitada de yodo (117 mg, 0.5 mmol) en CHCl2/MeOH (9:1) (148 mL) se adicionó gota a gota una solución de 8D (52 mg, 0.05 mmol) en CH2Cl2/Me0H (9:1) (77 mL) durante 30 mins, la mezcla de reacción luego se dejó agitar durante unos 30 mins. adicionales tiempo después de lo cual se adicionó tiosulfato de sodio (128 mL, 0.02 M) . Las capas se separaron y el producto se extrajo con CH2CI2 (3 x 25 mL) , se secó sobre MgS04, y el solvente se removió in vacuo . La purificación luego se llevó a cabo mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente MeOH/CH2Cl2 2:98-8:92) el cual dio 9D (3 mg, 0.005 mmol, 10%) como un sólido blanco: Rf 0.05 de MeOH/CH2Cl2 (5:95), LRMS (ES+) 666.8 (100%, [M+Na]+) . Preparación de éster metílico de ácido (R) -2- ( (R) -2- { (R) -2- [ (R) -2- ( (E) - (S) -3-hidroxi-9 , 9 , 9-trifenil-non-4-enoilamino) -propionilamino] -5,5, 5-trifenil-pentanoilamino} -3-metil-butirilamino) -propiónico (6E) . A una solución de ' H2N-D-Ala-D-Cys (STrt ) -D-Val-D-Ala-OMe (96 mg, 0.155 mmol, se adquirió de Biopepide Co., CA 92121-1510, EUA, pureza -60%) en CH2C12/THF (1:1, 30 mL) se adicionó una solución de 5 (87 mg, 0.155 mmol)' en CH2C12 (5 mL) después de DMAP (2 mg, 0.02 mmol). Después de 18 h. la mezcla de reacción se concentró in va cuo . La purificación mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 1-3.5%) dio jbis-tritilo 6E (55 mg, 0.054 mmol, 35%) como un sólido blanco con baja solubilidad: LRMS (HPLC ES+ utilizando una columna C?8 XTerra MS con 5 µm de tamaño de partícula, 3.0 x 50 mm, metanol al 5% de gradiente lineal (HCOOH al 0.1%) / H20 a 100% durante 5 min. a 1.25 mL/min.

Luego metanol al 100% (HCOOH al 0.1%) durante 5 min. a 1.5 mL/min) rt . = 7.93 min, m/z 1041.7 (100%, [M+Na]+) , 1019.7 (30%, [M+H]+) . Preparación de (3R, 6Rr 9S, 12.R, 16S) -6-isopropil-3, 12-dimetil-16- ( (E) -4-tritilsulfanil-but-l-enil) -9-tritilsulfanilmetil-l-oxa-4 ,7,10, 13-tetraaza-ciclohexadecan-2 ,5,8,11, 14-pentaona (8E) . A 0°C a una solución de éster metílico 6E (81 mg, 0.080 mmol) en THF (5 mL) se adicionó una solución de LiOH (3 mg, 0.12) en H20 (0.8 mL) . Depsués de 1 h. la reacción se enfrió mediante la adición de HCl 1 M (10 mL) . Se adicionó CHC13 (20 mL) y la fase orgánica se separó, se extrajo con CHC13 (2 x 10 mL) . La fase orgánica se lavó con salmuera (15 mL) , se secó ( gS?4) y se concentró in va cuo para dar el ácido crudo 7E (80 mg, cuantitativo) como un sólido blanco que se utilizó inmediatamente en la siguiente etapa: LRMS (ES") m/z 1003 (100%, [M-H]"). A una solución de MNBA (35 mg, 0.10 mmol) y DMAP (25 mg, 0.20 mmol) en CH2C12 (20 mL) se adicionó gota a gota una solución de ácido 7E (80 mg, 0.080 mmol) en CH2C12/THF (75:5, 80 mL) durante 3h. Después de unas 14 h. adicionales la reacción se enfrió mediante la adición de HCl 1 M (25 mL) . La fase orgánica se separó (extraída con CHC12) y se lavó secuencialmente con NaHC03 (30 mL) y salmuera (20 mL) . La fase orgánica combinada se secó (MgS04) y se concentró in vacuo para dar un aceite amarillo. La purificación mediante la cromatografía en columna sobre gel de silice (EtOAc/CH2Cl2 al 70-100%) dio 8E (34 mg, 0.035 mmol, 43%) como un sólido blanco: XH-NMR (400 MHz, CDC13) d 7.49-7.08 (m, 33H) , 6.31 (br s, ÍH), 5.57 (dt, J = 15.3, 6.5 Hz, ÍH) , 5.47 (q, J = 6.1 Hz, ÍH), 5.36 (dd, J = 15.3, 6.8 Hz, ÍH) , 4.45 (quin, J = 7.0 Hz, ÍH), 4.21 (quin, J = 7.0 Hz, ÍH) , 3.87 (t, J = 7.3 Hz, ÍH) , 3.59 (br s, ÍH) , 2.92 (dd, J = 12.5, 8.5 Hz, ÍH) , 2.55 (dd, J = 12.5, 5.4 Hz, ÍH) , 2.51-2.36 (m, 2H) , 2.17 (t, J = 7.3 Hz, 2H) , 2.05-1.86 (m, 3H) , 1.36 (d, J = 7.0 Hz, 3H) , 1.33 (d, J = 7.0 Hz, 3H) , 0.88 (d, J = 6.8 Hz, 3H) , 0.83 (d, J = 7.0 Hz 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CDC13) d 173.6 (C) , 170.8 (C) , 170.4 (C) , 170.2 (C) , 169.7 (C) , 144.9 (C) , 144.4 (C) , 132.9 (CH) , 129.7 (CH) , 129.6 (CH) , 128.2 (CH) , 128.1 (CH) , 128.0 (CH) , 127.0 (CH), 126.8 (CH) , 72.0 (CH) , 67.2 (C) , 66.8 (C) , 61.4 (CH), 55.3 (CH), 49.9 (CH) , 49.5 (CH) , 41.3 (CH2) , 32.4 (CH2) , 31.4 (CH2), 31.3 (CH2), 29.8 (CH) , 19.8 (CH3) , 18.4 (CH3) , 17.9 (CH3) , 17.8 (CH3); LRMS (ES+) m/z 1009 (100%, [MH-Na]+), 987 (10%, [M+H]+) . Preparación de (E) - (1S, 4i?, IR, IOS, 21R) -7-isopropil-4 ,21-dimetil-2-oxa-12 , 13-ditia-5 ,8,20, 23-tetraaza-biciclo [8.7.6]-tricos-16-en-3, 6, 9, 19 , 22-pentaona (9E) . A una solución de I2 (87 mg, 0.34 mmol) en CH2Cl2/MeOH (9:1, 100 mL) se adicionó gota a gota una solución de jbis-tritilo 8E (34 mg, 0.034 mmol) durante 30 minutos. Después de unos 30 min. adicionales la reacción se enfrió mediante la adición de tiosulfato de sodio (0.05 M, 25 mL) después de salmuera (10 mL) . La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con CH2C12 (3 x 15 mL) . La fase orgánica combinada se secó (MgS04), se filtró, antes de la concentración in vacuo dio un sólido blanco. La purificación mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 3-5%) dio depsipéptido ciclisado 9E (10 mg, 0.02 mmol, 60%) como un sólido blanco: [a]25D -51.8 (c 0.45, MeOH); XH-NMR (400 MHz, CDC13) d 7.52 (d, J = 6.5 Hz, ÍH) , 7.40 (d, J = 6.3 Hz, ÍH) , 6.94 (d, J = 9.5 Hz, ÍH) , 6.46 (d, J = 3.0 Hz, ÍH), 6.23-6.10 (m, ÍH) , 5.80-5.72 (m, 2H) , 5.06 (ddd, J = 10.0, 6.8, 3.7 Hz, ÍH) , 4.47 (quin, J = 7.0 Hz, ÍH), 4.20 (qd, J = 7.3, 3.5 Hz, ÍH) , 3.81 (dd, J= 14.3, 6.5 Hz, ÍH) , 2.96-2.77 (m, 3H) , 2.76-2.64 (m, 5H) , 2.61 (dd, J = 13.5, 2.2 Hz, ÍH), 1.49 (d, J = 7.0 Hz, 3H) , 1.48 (d, J = 7.2 Hz, 3H) , 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 3H) , 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CD3OD) d 174.9 (C), 173.9 (C) , 172.4 (C) , 172.2 (C) , 172.0 (C) , 131.9 (CH) , 131.1 (CH) , 71.8 (CH) , 67.2 (CH), 56.3 (CH) , 53.0 (CH) , 50.7 (CH) , 40.4 (CH2) , 39.9 (CH2) , 39.3 (CH2), 34.4 (CH2) , 28.7 (CH) , 20.7 (CH3) , 20.3 (CH3) , 17.7 (CH3) , 16.4 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 1024 (200%, [2M+Na]+), 523 (50%, [M+Na]+), 501 (100% [M+H]+). Preparación de éster ter-butilico de ácido (JR) -4- ( (E) - (S) -3- Hidroxi-7-tritilsulfanil- ept-4-enoilamino) -4-{ (S) -l-[ (R) -1- (metoxicarbonilmetil-carbamoil]-2-metil-propilcarbamoil] -2- tritilsulfanil-etilcar-bamoil} -butírico (6F) . A una solución de H2N-D-Glu (O' Bu) -D-Cys (STrt) -D- Val-Gly-OMe (145 mg, 0.2 mmol, se adquirió de Biopepide Co., ' CA 92121-1510, EUA, pureza -60%) en CH2C12 (40 mL) se adicionó una solución de 5 (113 mg, 0.2 mmol) en CH2C12 (10 mL) después de DMAP (2.5 mg, 0.02 mmol) . Después de 18 h. la reacción se concentró in va cuo . La purificación mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 1-3%) dio 6F (97 mg, 0.087 mmol, 44%) como un sólido blanco: XH-NMR (400 MHz, CDC13) d 7.46-7.33 (m, 12H), 7.32-7.13 (m, 20H) , 7.07 (br s, ÍH) , 6.77 (d, J = 8.3 Hz, ÍH) , 5.46 (dt, J = 15.3, 6.5 Hz, ÍH) , 5.34 (dd, J = 15.3, 6.3 Hz, ÍH) , 4.40-4.23 (m, 3H) , 4.11-3.86 (m, 2H) , 3.79 (dd, J = 17.8, 5.5 Hz, ÍH) , 3.70-3.58 (m, ÍH) , 3.64 (s, 3H) , 3.06 (br s, ÍH) , 2.63 (dd, J = 12.8, 7.5 Hz, ÍH), 2.53 (dd, J= 12.8, 5.8 Hz, ÍH) , 2.48-2.12 (m, 6H), 2.11-1.85 (m, 4H) , 1.41 (s, 9H) , 0.92 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 6.7 Hz, 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CDC13) d 173.7 (C) , 172.3 (C) , 171.6 (C) , 171.3 (C) , 170.4 (C) , 170.3 (C), 145.0 (C), 144.3 (C) , 133.6 (CH) , 130.3 (CH) , 129.7 (CH) , 129.5 (CH), 128.2 (CH) , 128.0 (CH) , 127.1 (CH) , 126.7 (CH) , 81.5 (C), 70.0 (CH) , 67.1 (C) , 66.7 (C) , 59.3 (CH) , 54.6 (CH) , 53.0 (CH) , 52.2 (CH3) , 44.1 (CH2) , 41.0 (CH2) , 33.3 (CH2), 32.2 (CH2), 31.4 (CH2 x 2), 29.9 (CH) , 28.1 (CH3) , 26.1 (CH2), 19.3 (CH3) , 17.7 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 1142 (100%, [M+Na]+) . Preparación de éster ter-butilico de ácido 3- [ (6.R, 9S, 12R, 16S) -6-isopropil-2 ,5,8,11, 14-pentaoxo-16- ( (E) -4-tritilsulfanil-but-1-enil) -9-tritilsul-fanilmetil-l-oxa-4 , 7 , 10 , 13-tetraaza-ciclohexadec-12-il] -propiónico (8F) A 0°C a una solución de éster metílico 6F (98 mg, 0.088 mmol) en THF (5 mL) se adicionó una solución de LiOH (3 mg, 0.13) en H20 (0.8 mL) . Después de 1 h. la reacción se enfrió mediante la adición de HCl 1 M (15 mL) . Se adicionó CHC13 (20 mL) y la fase orgánica se separó, se extrajo con CHCI3 (2 x 10 mL) . La fase orgánica se lavó con salmuera (15 mL) , se secó (MgS04) y se concentró in vacuo para dar el ácido crudo 7F (96 mg, cuantitativo) como un sólido blanco que se utilizó inmediatamente en la siguiente etapa: (ES") m/z 1103 (100%, [M-H]-) .

A una solución de MNBA (36 mg, 0.10 mmol) y DMAP (25 mg, 0.21 mmol) en CH2C12 (20 mL) se adicionó gota a gota una solución de ácido 7F (96 mg, 0.087 mmol) en CH2C12/THF (75:2, 77 mL) durante 3h. Después de unas 14 h. adicionales la reacción se enfrió mediante la adición de HCl 1 M (25 mL) . La fase orgánica se separó (extraída con CH2C12) y se lavó secuencialmente con NaHC03 (30 mL) y salmuera (20 mL) . La fase orgánica combinada se secó (MgS04) y se concentró in vacuo para dar un aceite amarillo. La purificación mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (EtOAc/CH2Cl2 50-70%, luego + MeOH al 0.1%) dio 8F (53 mg, 0.049 mmol, 56%) como un sólido blanco: H-NMR (400 MHz, CDC13) d 7.44-7.32 (m, 12H), 7.31-7.15 (m, 19H) , 7.11-7.03 (m, 2H) , 6.68 (br s, ÍH) , 5.58 (dt, J = 15.6, 6.5 Hz, ÍH) , 5.43 (ddd, J = 9.5, 7.0, 3.0 Hz, ÍH), 5.33 (dd, J = 15.6, 7.0 Hz, ÍH) , 4.44 (dd, J = 17.0, 9.6 Hz, ÍH) , 4.30 (dd, J = 9.0, 4.5 Hz, ÍH) , 4.04 (q, J = 7.0 Hz, ÍH) , 3.59 (m, ÍH) , 3.50 (dd, J = 6.5, 2.0 Hz, ÍH) , 3.07 (t, J = 11.0 Hz, ÍH), 2.60-2.45 (m, 3H) , 2.42-2.23 (m, 3H) , 2.22-2.12 (m, 2H) , 2.08-1.89 (m, 4H) , 1.40 (s, 9H) , 0.88 (d, J = 7.0 Hz, 3H) , 0.83 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CDC13) d 173.4 (C), 172.6 (C) , 171.1 (C) , 170.9 (C) , 170.0 (C), 169.0 (C), 145.0 (C) , 144.3 (C) , 133.2 (CH) , 129.7 (CH) , 129.6 (CH) , 128.3 (CH) , 128.0 (CH) , 127.1 (CH) , 126.8 (CH) , 81.3 (C), 72.1 (CH) , 67.3 (C) , 66.8 (C) , 58.7 (CH) , 56.8 (CH), 54.1 (CH), 41.9 (CH2), 41.3 (CH2), 32.4 (CH2), 31.8 (CH2), 31.4 (CH2), 31.2 (CH2) , 29.0 (CH), 28.2 (CH3), 25.9 (CH2) , 19.7 (CH3) , 17.2 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 1109 (100%, [M+Na]+) , 1087 (50%, [M+H]+) . Preparación de éster ter-butilico de ácido 3- ( (JS) -(1S, IR, IOS, 211?) -7-isopropil-3 ,6,9,19, 22-pentaoxo-2-oxa-12 , 13-ditia-5 ,8,20 , 23-tetraaza-biciclo [8.7.6] tricos-16-en-21-il) -propiónico (9F) . A una solución de I2 (117 mg, 0.46 mmol) en CH2Cl2/MeOH (9:1, 130 mL) se adicionó gota a gota una solución de £>is-tritilo 8F (50 mg, 0.046 mmol) durante 30 minutos. Después de unos 30 min. adicionales la reacción se enfrió mediante la adición de tiosulfato de sodio (0.05 M, 50 mL) después por salmuera (20 mL) . La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con CH2CI2 (3 x 25 mL) . La fase orgánica combinada se secó ( gSÜ4) antes de la concentración in vacuo dio un sólido blanco. La purificación mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 1-3%) dio depsipéptido bicíclico 9F (19 mg, 0.032 mmol, 69%) como un sólido blanco: [ ]25D -76.7 (c 0.60, MeOH); XH-NMR (400 MHz, CDC13) d 8.15 (d, J = 4.0 Hz, ÍH) , 7.35 (d, J = 6.5 Hz, ÍH), 7.23 (t, J = 5.5 Hz, ÍH) , 7.11 (d, J = 9.0 Hz, ÍH) , 6.05 (ddt, J = 15.5, 7.0, 2.0 Hz, ÍH) , 5.84-5.73 (m, 2H) , 4.97 (td, J = 8.0, 4 J5 Hz, ÍH), 4.18-4.01 (m, 3H) , 3.61 (dd, J = 15.1, 8.0 Hz, ÍH), 3.24 (dd, J = 10.5, 6.5 Hz, ÍH) , 2.95-2.75 (m, 5H) , 2.73-2.62 (m, 3H) , 2.51 (dd, J= 13.6, 2.0 Hz, ÍH), 2.42 (ddd, J = 18.0, 9.0, 3.5 Hz, ÍH) , 2.19-2.04 (m, 2H) , 1.83 (s, 9H), 0.98 (d, J = 6.5 Hz, 3H) , Ó .92 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CDC13) d 175.7 (C) , 171.8 (C) , 171.7 (C), 170.9 (C), 169.9 (C) , 168.2 (C) , 130.2 (CH) , 129.6 (CH), 82.6 (C), 69.4 (CH) , 65.4 (CH) , 57.6 (CH) , 53.8 (CH) , 42.4 (CH2), 40.0 (2 x CH2), 38.6 (CH2) , 34.1 (CH2) , 33.1 (CH2) , 28.2 (CH3), 27.4 (CH) , 24.9 (CH2), 20.6 (CH3) , 20.2 (CH3) ; LRMS (ES+) m/z 623 (90%, [M+Na]+), 601 (100%, [M+H]+). Preparación de ácido 3- ( (E) - (1S, IR, IOS, 212?) -7-isopropil-3,6,9,19, 22-pentaoxo-2-oxa-12 , 13-ditia-5 ,8,20, 23-tetraaza-biciclo [8.7.6] tricos-16-en-21-il) -propiónico (10F) . A una solución de 9F (12 mg, 0.02 mmol) y Et3SiH (10 µL, 0.06 mmol) en CH2C12 (1.5 mL) se adicionó TFA (150 µL, 2.0 mmol) . Después de 6 h. el solvente se removió y el residuo se purificó mediante la cromatografía en columna sobre gel de sílice (metanol al 10%/CH2C12 luego + AcOH al 1%) para dar 10F (5.6 mg, 0.01 mmol, 55%) como un sólido blanco: [a]25D -63.4 (c 0.25, MeOH); ^-NMR (400 MHz, CD3OD) d 7.5 (1 x NH observado, d, J = 7.5 Hz, ÍH) , 5.81 (dddd, J = 16.8, 6.8, 4.8, 2.5 Hz, ÍH), 5.75-5.67 (m, 2H) , 4.62 (ddd, J = 11.0, 8.0, 5.5 Hz ÍH), 4.28 (d, J = 17.5 Hz, ÍH) , 4.15 (dd, J = 9.0, 6.0 Hz, ÍH), 3.78 (d, J = 17.5 Hz, ÍH) , 3.43 (d, J = .5 Hz, ÍH), 3.20-3.10 (m, 2H) , 3.07-3.00 (m, 2H) , 2.94-2.81 (m, ÍH), 2.82 (dd, J = 13.2, 2.2 Hz, ÍH) , 2.73-2.50 (m, 4H), 2.38 (q, J = 7.0 Hz, ÍH) , 2.23-1.99 (m, 2H) , 0.98 (d, J = 6.5 Hz, 3H) , 0.92 (d, J = 6.5 Hz5 3H) ; 13C-NMR (100 MHz, CD3OD) d 176.5 (C) , 174.0 (C) , 173.5 (C) , 173.0 (C) , 171.6 (C), 169.5 (C) , 131.4 (CH) , 131.3 (CH) , 72.1 (CH) , 66.0 (CH) , 58.5 (CH) , 57.0 (CH) , 42.7 (CH2) , 39.7 (CH2) , 39.4 (CH2) , 36.8 (CH2), 31.8 (CH2) , 31.6 (CH2) , 28.2 (CH3) , 26.6 (CH2) , 20.6 (CH3) , 20.5 (CH3) ; LRMS (ES") m/z 543 (100%, [M-H]"). RESULTADOS Ensayo de Actividad 1 Los inventores compararon la habilidad de ácido hidroxámico de Suberoilanilida (SAHA) , un inhibidor de HDAC conocido, y el compuesto 001 (el compuesto de la fórmula (2) de la página 7) para inhibir el crecimiento de células de cáncer de seno de humano MCF7 y fibroblastos dérmicos de humano normal (NHDF) . Método; Los ensayos de proliferación celular se realizaron utilizando el sistema de ensayo CyQuantMR (Molecular Probes, Inc. EUA) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Este sistema utiliza un tinte fluorescente verde propietario el cual se somete al aumento fluorescente fuerte sobre ácidos nucleicos celulares de enlace, para permitir la determinación del número celular con un intervalo de detección lineal entre 50 a 250,000 células. Las células de cáncer de seno MCF7 positivas del receptor de estrógeno (ECAAC) y las células NHDF (Cambrex, UK) se colocaron en placas de 96 cavidades, a una densidad de 1000 células en 100 µl del medio de cultivo celular por cavidad. Los compuestos se adicionaron un mínimo de 5 horas después, en diluciones seriales en el medio de cultivo celular, en volúmenes de 100 µl a 2x de concentración final. Seis días después el medio de cultivo celular se removió mediante inversión de la placa sobre papel secante y las células se lavaron suavemente una vez con 200 µl de PBS. Las placas se congelaron inmediatamente durante un mínimo de una hora a -80°C y luego se derritieron. 200 µl de solución reguladora de lisis celular CyQuant IX suplementado con tinte, se hizo de acuerdo con la instrucción del fabricante, se adicionó inmediatamente a cada cavidad y se incubó a temperatura ambiente durante 3-5 minutos. La fluorescencia luego se medió para cada cavidad utilizando un Lector de Placa Multicavidad Fluorescente Cytofluor II y el programa CytoFluor II con filtros a 480 nm para excitación y 520 nm para emisión máxima. La proliferación celular se determinó por valores medios de muestras duplicadas como porcentajes relativos para muestras celulares no tratadas (=100%). Las curvas de inhibición de crecimiento se utilizaron para derivar los valores IC50. La Figura 1 muestra el efecto del compuesto 001 y SAHA sobre el crecimiento de MCF7 y Fibroblastos Dérmicos de Humano Normal (NHDF) . El MCF7 y NHDF se incubaron con las concentraciones indicadas de los compuestos. Después de 6 días el crecimiento celular relativo para las células no tratadas (=100%) se determinó utilizando el ensayo CyQuant.MR Las cantidades equivalentes de DMSO, como un control de solvente, no tuvo efecto sobre el crecimiento celular (no mostrado) . Los datos mostrados son desviación media ± estándar para duplicar las determinaciones y son representativas de experimentos múltiples. Resul tados; el crecimiento celular se inhibió por los compuestos. Importantemente, hubo diferencias entre los inhibidores y entre los tipos de célula. La IC50 promedio para la inhibición del crecimiento (± SD) se calculó de múltiples experimentos y se muestran en la Tabla 1 enseguida. Tabla 1 aIC5o calculado del experimento individual realizado en duplicado El Compuesto 001 fue un inhibidor potente del crecimiento celular de cáncer. Importantemente, el compuesto 001 fue significantemente más potente que SAHA (p=0.003, t-prueba del Estudiante) , actualmente en los ensayos de la fase II. Ambos compuestos fueron relativamente más efectivos en células MCF7 contra NHDF demostrando selectividad hacia células malignas. Los experimentos similares realizados utilizando células de leucemia de célula T HUT78 (se realizó como es descrito en lo anterior) demostrando que el Compuesto 001 también inhibió el crecimiento de estas células (datos no mostrados) . Ensayo de Actividad 2 Los inventores investigaron si el compuesto 001 (el compuesto de la fórmula (2) en la página 7) activó el promotor SV40, previamente demostrado que es responsivo para la represión mediada por HDAC. Método . Los inventores generaron un clon estable derivado de células MCF7 que contienen un constructor reportero integrado con el promotor temprano inmediato de SV40 clonado corriente arriba del gen de luciferasa. Las células MCF7 se transfectaron con pGL2-Básico ( SVJ O /reportero de luciferasa) (Promega, UK) y pcDNA3 (expresa el gen de resistencia de neomicina) utilizando reactivo de transfección de Transfast. Después de 24 horas, las células se recolectaron mediante tripsinisación y colocadas a baja densidad. El siguiente día, G418 se adicionó al medio de crecimiento. Después de ~21 días, las colonias resistentes al fármaco individuales se aislaron y se cultivaron. Seleccionaron un clon (células 2.1.1) el cual demostró un alto nivel de inducción de actividad de luciferasa después de la adición de un inhibidor de HDAC para el estudio adicional. A la prueba los efectos del compuesto 001, células 2.1.1 se incubaron con varias concentraciones del compuesto 001 o una cantidad equivalente de DMSO como un control. El siguiente día, las células se recolectaron y la actividad de luciferasa se detectó utilizando el sistema de ensayo de luciferasa Promega y un TopCount (Perkin-Elmer). La Figura 2 muestra el efecto del compuesto 001 sobre la actividad del promotor SV40 responsivo de HDAC. Las células derivadas de MCF7 que contienen un plásmido reportero promotor de luciferasa SV40 integrado estable se trataron con las concentraciones indicadas del compuesto 001, o DMSO como un control de solvente. La actividad de luciferasa se determinó después de aproximadamente 16 horas. Los datos mostrados se derivan de un experimento individual realizado en duplicado y son representativos de múltiples experimentos. Resul tados; el experimento mostró que el compuesto 001 efectivamente invierte la represión mediada por HDAC del promotor temprano inmediato SV40. Ensayo de Actividad 3 Los inventores investigaron los efectos del compuesto 001 (el compuesto de la fórmula (2) en la página 7) y SAHA sobre el ciclo celular de distribución y supervivencia en células MCF7. Método; las células MCF7 se incubaron con concentraciones indicadas de los compuestos, o dejaron no tratado como un, durante varias veces, como es detallado en las leyendas de la figura. Las células se recolectaron y la proporción de las células en diferentes fases del ciclo celular determinado utilizando el manchado de yoduro de propidio y la citrometría de flujo como previamente es descrito (Purohit y colaboradores, Int J Ca 85, 584-9 2000) . La proporción de las células con contenido <G0/G1 (pre GO) relativo a las células totales se calculó primero. La proporción de las células en diferentes fases de ciclo celular (G0/G1, S, G2/M) se calculó como una proporción de todas las células en el ciclo celular (es decir, células totales menos células con contenido <G0/G1) . La Figura 3 muestra los efectos del compuesto 001 y SAHA sobre la distribución del ciclo celular y supervivencia en las células MCF7. Las células MCF7 se incubaron con las concentraciones indicadas de los compuestos (cada equivalente a ~10 x valores IC50 para la inhibición del crecimiento) , o DMSO como un control de solvente, durante 24, 48 o 72 horas. La proporción de las células en fases diferentes del ciclo celular se determinó mediante citometría de flujo. Los datos mostrados son valores medios ± SD, derivados de dos experimentos separados, relativo a células no tratadas las cuales se normalizan a 1. Resul tados; La figura muestra que en concentraciones efectivas equivalentes, el compuesto 001 y SAHA induce un arresto de fase G2/M predominante y muerte celular en células MCF7.

Ensayo de Actividad 4 Los inventores investigaron los efectos del compuesto 001 (el compuesto de la fórmula (2) en la página 7) sobre la acetilación de histona en células de cáncer de seno MCF7 y miocitos cardiacos. Método; Los miocitos cardiacos se prepararon como es descrito en Chembiochem. Enero del 2005; 6(l):162-70 y se incubaron con las concentraciones indicadas del compuesto 001 durante 24 horas. Las células MCF7 se incubaron con las concentraciones indicadas del compuesto 001 durante 24 horas.

La expresión de la acetilación H4 de histona total, o acetilación especifica de Histona H4-K8 o Histona H3-K9 se analizó por manchado de Western, como previamente es descrito (Brimmell y colaboradores, Br J Cáncer. Noviembre de 1999;81 (6) : 1042-51) utilizando anticuerpos de Upstate Biotech. La Figura 4 muestra el efecto del compuesto 001 sobre la acetilación de Histona. (A) las células MCF7 se incubaron con el compuesto 001 durante 24 horas. La acetilación H4 de histona se midió mediante inmunomanchado .

(B) Los miocitos cardiacos se incubaron con el compuesto 001 indicado durante 24 horas. La acetilación H4 de histona se midió mediante inmunomanchado. (C) Las células MCF7 se incubaron con el compuesto 001 durante 24 horas. La acetilación de histona H3-K9 e Histona H4-K8 se midió mediante inmunomanchado. Resul tados; El experimento muestra que el compuesto 001 induce la acumulación de histona H4 acetilada y acetilación de Histona H3-K9 e Histona H4-K8 específica. También demostraron que el Compuesto 001 incrementó los niveles de histona H4 acetilada en células de leucemia linfocíticas crónicas primarias (datos no mostrados) . Ensayo de Actividad 5 Los inventores analizaron la habilidad de los compuestos para inhibir la actividad de HDAC in vi tro . Los ensayos de HDAC in vi tro se realizaron utilizando un equipo de ensayo de actividad fluorescente de HDAC (Biomol, UK) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Los compuestos se redujeron antes del análisis; 1 mM del compuesto se redujo con DTT 30 mM DTT en DMSO durante la noche a temperatura ambiente, protegido de la luz. Las reacciones luego se coloraron hasta en una placa de 96 cavidades. Para cada reacción 10 µl del compuesto (5x de concentración requerida en solución reguladora de ensayo) se mezcló con 15 µl de Extracto Nuclear Hela diluido (30 veces en la solución reguladora de ensayo) . Las diluciones seriales se colocaron para cada compuesto. Las reacciones que contienen el extracto Hela solamente y solución reguladora de ensayo solamente también se colocaron. 25 µl de sustrato de Fl uor de Lys™ diluido (100 veces en solución reguladora de ensayo) se adicionó a cada reacción, en las cuales luego se incubaron a 37°C durante 1 hora. La reacción se detuvo mediante la adición de 50 µl del Revelador Fl uor de Lys™ (20 veces de dilución en solución reguladora de ensayo, más TSA diluido 100 veces) . Las reacciones luego se incubaron a temperatura ambiente durante 10 minutos antes de la fluorescencia se midió utilizando un Lector de Placa Multicavidad de Fluorescencia CytoFluor II y programa CytoFluor II con filtros colocados a 360 nM para la excitación y 460 nM para la emisión. La inhibición de la actividad de HDAC in vi tro se determinó por valores medios de muestras duplicadas como porcentajes relativos para el extracto Hela solamente reacciones. Los valores IC5o se calcularon utilizando un programa GraphPad Prism. Tabla 2. Inhibición de la actividad de HDAC Ensayo de Actividad 6 Los inventores analizaron la habilidad de los compuestos para inhibir el crecimiento in vi tro de células de cáncer humano. Los ensayos de proliferación celular se realizaron utilizando el sistema de ensayo CyQuantMR (Molecular Probes, Inc. EUA) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Las células de seno MCF7, ovario A2780 y PC3 y cáncer de próstata de LNCAP se colocaron en placas de 96 cavidades, a una densidad de 1000 células para células de MCF7 o 5000 células para células A2780/PC3/LNCAP, en 100 µl de medio de cultivo celular por cavidad. Los compuestos se adicionaron un mínimo de 5 horas después, en diluciones seriales en medio de cultivo celular, en 100 µl de volúmenes a 2x de concentración final. El medio de cultivo celular se removió después 4 (células A2780, PC3 o LNCAP) o 6 días (células MCF7) por inversión de la placa sobre el papel secante y las células se lavaron suavemente una vez con 200 µl de PBS. Las placas se congelaron inmediatamente durante un mínimo de una hora a -80°C y luego se derritieron. 200 µl de solución reguladora de lisis celular lx CyQuant suplementado con tinte, se hizo de acuerdo con la instrucción del fabricante, se adicionó inmediatamente para cada cavidad y se incubó a temperatura ambiente durante 3-5 minutos. La fluorescencia luego se midió para cada cavidad utilizando un Lector de Placa Multicavidad de Fluorescencia Cytofluor II y el programa CytoFluor II con filtros a 480 nm para excitación y 520 nm para máxima emisión. La proliferación celular se determinó por valores medios de muestras duplicadas como 11 porcentajes relativos a muestras celulares no tratadas (=100%) . Las curvas de inhibición de crecimiento se utilizaron para derivar los valores IC50. Tabla 3. Inhibición del crecimiento celular (valores IC50 (nM) ) nd = no determinado Ensayo de Actividad 7 Los inventores analizaron la habilidad de los compuestos para inhibir la producción de TNFa de las células mononucleares de sangre periférica (PBMCs). Los inmunoensayos de TNF-a se llevaron a cabo utilizando el equipo de ensayo TNF-a Humano Quantikine® (R&D systems, Abingdon UK) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La sangre completa de humano se separó utilizando Ficol paqueMR Plus (GE Healthcare, Amersham, UK) y las PBMCs se colocaron en placas de 24 cavidades, a una densidad de 2.5xl06 en 500 µl de medio de cultivo celular por cavidad. Los compuestos se adicionaron 1 hora más tarde en volúmenes de 100 µl a 6x de concentración final. Cinco horas más tarde lipopolisacárido (LSP, Sigma, Poole, UK) se adicionó en un volumen de 10 µl a 60x de placas de concentración final se mezclaron y se dejaron durante la noche a 37°C de C02 al 5%. Las placas se centrifugaron y el sobrenadante celular se transfirió a una nueva placa. Los reactivos de ensayo Quantikine® y estándares se prepararon de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La placa de ensayo Quantikine® se preparó al adicionar 50 µl de ensayo RD1F diluido en cada cavidad. Esto se siguió mediante 200 µl de estándar o 100 µl de calibrador diluido más 100 µl de sobrenadante celular; esto se incubó durante 2 horas a temperatura ambiente (RT) . La placa se lavó utilizando solución reguladora lavada 4 veces. Después del lavado final la placa se tapó sobre papel limpio de toalla para remover toda la solución reguladora residual. 200 µl de conjugado de TNF-a se adicionó a cada cavidad y se incubó durante 1 hora a RT . La placa luego se lavó como antes. La cantidad requerida de solución de sustrato se preparó al adicionar volúmenes iguales de reactivos de color A y B, proteger de la luz, 200 µl de esta mezcla se adicionó a cada cavidad y se incubó durante 20 mins. a RT, protegido de la luz. 50 ul de solución detenida se adicionó a cada cavidad en el mismo orden como la solución de sustrato y la placa se leyó sobre un lector de placa Biorad 680 de 96 cavidades (Bio-Rad, Hemel Hempstead, UK) a 450 nm con corrección ? a 570 nm. Los niveles de TNF-a se determinaron por valores medios de muestras duplicadas utilizando absorbencia en nm, los valores cero de calibración fueron sustraídos de todos los resultados para corregir para la adición del diluyente calibrador en el ensayo. Tabla 4. Inhibición de secreción de TNFa inducido por LPS de PBMCs Ensayo de Actividad 8 Los inventores analizaron la habilidad del compuesto 9A (el compuesto de la fórmula (2) en la página 7) para inhibir la inflamación en ratones. Los ratones Balb/c se sintetizaron mediante la aplicación de oxazolona al 5% (p/v) a la piel afeitada abdominal. Los ratones después de 7 días se cambiaron mediante aplicación tópica de oxalazona al 3% (p/v) a la oreja izquierda y acetona a la oreja derecha.

Después de 30 minutos los compuestos de prueba disueltos en acetona se aplicaron a las orejas (superficie dorsal y ventral) . Los ratones después de 24 horas se eutanasiaron y el peso de las orejas se determinó. El % de inhibición se determinó utilizando la siguiente fórmula donde pesos promedio iguales W; % de inhibi ción = 1 - ( ( W?rntante+matenal de prueba_w vehículo Tabla 5. Inflamación in vivo Medio ± SD, 8 animales por grupo

Claims

REIVINDICACIONES 1. Uso, en la manufactura de un medicamento para el uso en el tratamiento o prevención de una condición mediada por HDAC, de un compuesto el cual es un análogo de FK228 de la fórmula (I) o (I'), un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Ri, R2, R3 y R4 son los mismos o diferentes y representan una porción de cadena lateral de aminoácido, cada R6 es el mismo o diferente y representa hidrógeno o alquilo de C?-C , y Pr1 y Pr2 son los mismos o diferentes y presentan hidrógeno o un grupo protector de tiol.
2. El uso, en la manufactura de un medicamento para el uso en el tratamiento o prevención de una condición mediada por HDAC, de un análogo de FK228 el cual es un compuesto de la fórmula (I) o (I') como se definió en la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo .
3. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque cada cadena lateral de aminoácido es una porción seleccionada de -H, alquilo de -C?-C6, alquenilo de -C2-C6, -L-O-C (0) -R' , -L-C(0)-0-R", -L-A, -L-NR"R' , -L-Het-C (0) -Het-R" y -L-Het-R", en donde L es un grupo alquileno de Ci-Cß, A es fenilo o un grupo heteroarilo de 5 a 6 miembros, cada R7 es el mismo o diferente y representa alquilo de C?-C , cada R" es el mismo o diferente y representa H o alquilo de Ci-Ce, cada -Het- es el mismo o diferente y es un espaciador de heteroátomo seleccionado de -0-, -N(R"') y -S- y cada R"' es el mismo o diferente y representa H o alquilo de C?-C .
4. El uso de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque A es fenilo.
5. El uso de conformidad con la reivindicación 3 o 4, caracterizado porque -Het- es -0- o -NR"' .
6. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3, 4 y 5, caracterizado porque Rx es una porción seleccionada de -H y alquilo de -C?-C6.
7. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 6, caracterizado porque R2 es una porción seleccionada de -H y alquilo de -C?-C4.
8. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 7, caracterizado porque R3 es una porción seleccionada de -H, alquilo de -C?-C6, -L-C (0) -0-R", -L-A, -L-NR"R" y -L-N (R") -C (0) -0-R" .
9. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 8, caracterizado porque R es una porción seleccionada de -H y alquilo de -C?-C .
10. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 9, caracterizado porque R es -H.
11. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 10, caracterizado porque Pr1 y Pr2 son los mismos o diferentes y se seleccionan de hidrógeno y un grupo protector seleccionado de un grupo bencilo el cual es opcionalmente sustituido por alcoxi de C?-C6, aciloxi de C?~ C6, hidroxi y nitro, picolilo, picolil-N-óxido, antrilmetilo, difenilmetilo, fenilo, t-butilo, adamantilo, aciloximetilo de C -C6, alcoximetilo de C -Cß, tetrahidropiranilo, benciltiometilo, feniltiometilo, tiazolidina, acetamidemetilo, benzamidometilo, butoxicarbonilo terciario (BOC) , acetilo y sus derivados, benzoilo y sus derivados, carbamoilo, fenilcarbamoilo y alquilcarbamoilo de C?-C6.
12. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 3 a 11, caracterizado porque Pr1 y Pr2 son hidrógeno .
13. El uso de conformidad con la reivindicación 1 o 2, caracterizado porque cada cadena lateral de aminoácido es una porción de cadena lateral de aminoácido presente en un aminoácido natural o es - (CH2) 2-C (O) -O-C (CH3) 3, -(CH2)4-NH-C(0)-0-C(CH3)3, -(CH2)3-NH-C(0)NH2, -CH2-CH2OH o - (CH2) 2-CH2NH2.
14. El uso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto es un compuesto de la fórmula (2), (2'), (3), (3'), (4), (4'), (5), (5'), (6), (6'), (7), ( ! ' ) , (8), (8' ), (9) o (9')
15. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el análogo de FK228 es un compuesto de la fórmula (I), un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
16. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el medicamento es para el uso en aliviar el cáncer, hipertrofia cardiaca, falla del corazón crónica, una condición inflamatoria, una enfermedad cardiovascular, una haemoglobinopatia, una talasemia, una enfermedad de célula segadera, un desorden de CNS, una enfermedad autoinmune, diabetes, osteoporosis, MDS, hiperplasia prostética benigna, leucoplacia oral, un desorden metabólico genéticamente relacionado, una infección, Rubens-Taybi, síndrome X frágil, o deficiencia de antitripsina alfa-1, o es para el uso en acelerar la sanación de heridas, o en proteger los folículos del cabello, o es para el uso como un inmunosupresante.
17. El uso de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el medicamento es para el uso en aliviar leucemia linfocítica crónica, cáncer de seno, cáncer de próstata, cáncer de ovario, mesotelioma, linfoma de célula T, hipertrofia cardiaca, falla del corazón crónica o una condición inflamatoria de la piel, en particular psoriasis, acné o eczema.
18. Un análogo de FK228, un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para el uso en un método para tratar el cuerpo humano o animal.
19. Un análogo de FK228, un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15.
20. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un análogo de FK228, un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.
21. Una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 20, caracterizada porque está en un formato adecuado para la administración oral, rectal, parenteral, intranasal o transdérmica o administración mediante inhalación o mediante supositorio.
22. Una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque está en la forma de una tableta, cápsula, trocisco, pastilla, suspensiones acuosas o aceitosas, polvos dispersables o granulos o una tableta sub-lingual.
23. Un método para tratar un paciente que sufre de o susceptible a una condición mediada por HDAC, como se definió en la reivindicación 1, 16 o 17, caracterizado porque el método comprende administrar al paciente una cantidad efectiva de un compuesto como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
24. Un proceso para seleccionar un compuesto que tiene una actividad inhibitoria de HDAC que es por lo menos igual a aquella exhibida por ácido hidroxámico de Suberoilanilida (SAHA) , caracterizado porque el proceso comprende preparar un compuesto de la fórmula (I) o (I'), como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, al (i) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VI) con un compuesto de la fórmula (VII) en donde Rx y R2 son como se definen en cualquiera de las reivindicaciones precedentes, R es alquilo de C?-C4 o alquenilo de C2-C4 y Y es un grupo protector amino; (ii) desproteger el intermediario así obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (VIII) en donde Y' es un grupo protector amino y Y" es hidrógeno o un grupo protector; (iii) desproteger el intermediario así obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (IX) en donde R3 es como se define en cualquiera de las reivindicaciones precedentes y Y" ' es un grupo protector amino; (iv) desproteger el intermediario así obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (X) en donde R4 es como se define en cualquiera de la reivindicaciones precedentes, R5 es hidrógeno o un grupo protector hidroxi, LG es un grupo saliente y Y"" es hidrógeno o un grupo protector; (v) opcionalmente desproteger el grupo ß-hidroxi sobre el intermediario así obtenido para remover el grupo protector R5 y reemplazarlo con H; (vi) hidrolizar y ciclizar el intermediario así obtenido; (vii) opcionalmente hacer reaccionar el intermediario así obtenido para efectuar la formación de enlace de disulfuro, y, si un enlace disulfuro se forma, opcionalmente segmentar el enlace de disulfuro en el compuesto así obtenido, y si el compuesto así obtenido contiene un grupo tiol, opcionalmente introducir un grupo protector de tiol; y (viii) clasificar el compuesto así obtenido para medir su actividad como un inhibidor de HDAC.
25. Un proceso de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque en la etapa (viii) la etapa de clasificación es un ensayo de HDAC in vi tro, el ensayo que comprende poner en contacto un compuesto de prueba y SAHA, en varias concentraciones, con Extracto Nuclear Hela diluido para determinar la IC50 del compuesto de prueba y de SAHA contra el Extracto Nuclear Hela.
26. Un proceso para seleccionar un compuesto que tiene una actividad inhibitoria de crecimiento celular de cáncer humano que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA, caracterizado porque el proceso comprende preparar un compuesto de la fórmula (I) o (I'), como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, al (i) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VI) con un compuesto de la fórmula (VII) en donde Rx y R2 son como se definen en cualquiera de las reivindicaciones precedentes, R7 es alquilo de C?-C4 o alquenilo de C2-C4 y Y es un grupo protector amino; (ii) desproteger el intermediario así obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (VIII) en donde Y' es un grupo protector amino y Y" es hidrógeno o un grupo protector; (iii) desproteger el intermediario así obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (IX) en donde R3 es como se define en cualquiera de las reivindicaciones precedentes y Y"' es un grupo protector amino; (iv) desproteger el intermediario así obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (X) en donde R4 es como se define en cualquiera de las reivindicaciones precedentes, R5 es hidrógeno o un grupo protector hidroxi, LG es un grupo saliente y Y"" es hidrógeno o un grupo protector; (v) opcionalmente desproteger el grupo ß-hidroxi sobre el intermediario así obtenido para remover el grupo protector R5 y reemplazarlo con H; (vi) hidrolizar y ciclizar el intermediario así obtenido; (vii) opcionalmente hacer reaccionar el intermediario así obtenido para efectuar la formación de enlace de disulfuro, y, si un enlace disulfuro se forma, opcionalmente segmentar el enlace de disulfuro en el compuesto así obtenido, y si el compuesto así obtenido contiene un grupo tiol, opcionalmente introducir un grupo protector de tiol; y (viii) clasificar el compuesto así obtenido para medir sus actividad como un inhibidor de crecimiento celular de cáncer humano.
27. Un proceso de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado porque en la etapa (viii) la etapa de clasificación es un ensayo in vi tro, el ensayo que comprende poner en contacto un compuesto de prueba y SAHA, en varias concentraciones, con una línea celular de cáncer de seno MCF7, leucemia de célula T HUT78, avario A2780, PC3 o próstata LNCAP para determinar la IC50 del compuesto de prueba y de SAHA con la linea celular.
28. Un proceso para seleccionar un compuesto que tiene una actividad anti-inflamatoria que es por lo menos igual a aquella exhibida por SAHA, caracterizado porque el proceso comprende un compuesto de la fórmula (I) o (I'), como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, al (i) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VI) con un compuesto de la fórmula (VII) en donde R y R2 son como se definen en cualquiera de las reivindicaciones precedentes, R7 es alquilo de C?-C4 o alquenilo de C2-C4 y Y es un grupo protector amino; (ii) desproteger el intermediario así obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (VIII) en donde Y' es un grupo protector amino y Y" es hidrógeno o un grupo protector; (iii) desproteger el intermediario así obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (IX) en donde R3 es como se define en cualquiera de las reivindicaciones precedentes y Y" ' es un grupo protector amino; (iv) desproteger el intermediario así obtenido y hacerlo reaccionar con un compuesto de la fórmula (X) en donde R4 es como se define en cualquiera de las reivindicaciones precedentes, Rs es hidrógeno o un grupo protector hidroxi, LG es un grupo saliente y Y"" es hidrógeno o un grupo protector; (v) opcionalmente desproteger el grupo ß-hidroxi sobre el intermediario así obtenido para remover el grupo protector R5 y reemplazarlo con H; (vi) hidrolizar y ciclizar el intermediario así obtenido; (vii) opcionalmente hacer reaccionar el intermediario así obtenido para efectuar la formación de enlace de disulfuro, y, si un enlace disulfuro se forma, opcionalmente segmentar el enlace de disulfuro en el compuesto así obtenido, y si el compuesto así obtenido contiene un grupo tiol, opcionalmente introducir un grupo protector de tiol; y (viii) clasificar el compuesto así obtenido para medir su actividad como anti-inflamatoria .
29. Un proceso de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque en la etapa (viii) la etapa de clasificación es un ensayo, el ensayo que comprende medir la actividad de un compuesto en inhibir la producción de TNFa de células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) relativo a SAHA.
30. Un producto que contiene (a) un análogo de FK228 como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y (b) otro inhibidor de HDAC para el uso simultaneo, separado o secuencial en el tratamiento o prevención de una condición mediada por HDAC, como se definió en la reivindicación 1, 16 o 17.
31. Un producto que contiene (a) un análogo de FK228 como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, un isóstero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y (b) otro agente quimioterapéutico o antineoplásico para el uso simultaneo, separado o secuencial en el tratamiento o prevención de cáncer.