MX2007013756A - Epitopes - Google Patents

Abstract

Se proporcionan composiciones y métodos relacionados con epítopes de proteína de esclerostina, y agentes de unión de esclerostina, tal como anticuerpos capaces de unirse a esclerostina.

Description

EPITOPES Campo de la Invención La presente invención se refiere generalmente a epítopes de la proteína de esclerostina, incluyendo la proteína de esclerostina humana, y agentes de unión (tal como anticuerpos) capaces de unirse a la esclerostina o sus fragmentos. Antecedentes de la Invención Dos o tres fases distintas de cambios de la masa ósea ocurren durante la vida de un individuo (ver Riggs, West J, Med. 154:63-77 (1991)). La primera fase ocurre en hombres y mujeres y procede a la realización de una masa ósea máxima. Esta primera fase se alcanza con el crecimiento lineal de las placas de crecimiento endocondral y crecimiento radial debido a un índice de aposición periosteal. La segunda fase inicia alrededor de la edad de 30 para el hueso trabecular (huesos planos tal como vértebras y pelvis) y alrededor de la edad de 40 años para el hueso cortical (por ejemplo, huesos largos encontrados en los miembros) y continúo a edad mayor. Esta fase es caracterizada por la pérdida ósea lenta y ocurre en hombres y mujeres. En mujeres, también ocurre una tercera fase de la pérdida ósea, muy probablemente debido a deficiencias de estrógeno postmenopáusicas. Durante esta fase solamente, las mujeres pueden perder una masa ósea adicional del hueso cortical y del compartimiento trabecular (ver Riggs, supra).

La pérdida de contenido mineral del hueso puede causarse por una variedad amplia de condiciones y puede dar lugar a problemas médicos significativos. Por ejemplo, la osteoporosis es una enfermedad debilitante en humanos y se caracteriza por disminuciones marcadas en masa ósea esquelética y densidad mineral, deterioración estructural ósea, incluyendo degradación de la microarquitectura del hueso y aumentos correspondientes en fragilidad del hueso (es decir, disminución en fuerza del hueso), y susceptibilidad a la fractura en individuos afligidos. La osteoporosis en humanos es precedido generalmente por la osteopenia clínica (densidad mineral del hueso que es mayor que una desviación de estándar solamente menor de 2.5 desviaciones estándar por debajo del valor promedio para el hueso de adulto joven), una condición encontrada en aproximadamente 25 millones de personas de en los Estados Unidos. Se han diagnosticado otros 7-8 millones de pacientes en los Estados Unidos con osteoporosis clínica (definida como el contenido mineral del hueso mayor de 2.5 desviaciones estándar por debajo del hueso de adulto joven maduro). La frecuencia de la osteoporosis en la población humana aumenta con la edad. Entre caucásicos, la osteoporosis es predominante en mujeres que, en los Estados Unidos, comprende 80% del conjunto de paciente de osteoporosis. La fragilidad y susceptibilidad crecientes a fractura del hueso esquelético en la vejes es agravada por el riesgo mayor de caídas accidentales en esta población. Las caderas, muñecas y vértebras fracturadas están entre las lesiones más comunes asociadas con la osteoporosis. Las fracturas de la cadera en particular son extremadamente incómodas y costosas para el paciente, y para las mujeres, relacionadas con índices altos de mortalidad y morbilidad. Aunque la osteoporosis se ha considerado como un aumento en el riesgo de la fractura debido a la masa ósea disminuida, pocos de los tratamientos actualmente disponibles para trastornos esqueléticos puede aumentar la densidad ósea de adultos, y la mayoría de los tratamientos disponibles actualmente trabaja principalmente inhibiendo la resorción ósea adicional, más bien estimulando la nueva formación de hueso. El estrógeno ahora se está prescribiendo para retardar la pérdida ósea. Sin embargo, existe cierta controversia sobre si los pacientes ganan cualquier ventaja a largo plazo y si el estrógeno tiene algún efecto en pacientes de más de 75 años de edad. Por otra parte, el uso de estrógeno se cree que aumenta el riesgo de cáncer de mama y endometrial. La calcitonina, osteocalcina con la vitamina K, o dosis altas de calcio dietético, con o sin vitamina D, también se ha sugerido para mujeres postmenopáusicas. Las dosis altas de calcio, sin embargo, a menudo tienen efectos secundarios gastrointestinales indeseados, y los niveles de suero y calcio urinario deben supervisarse continuamente (por ejemplo, Khosla and Riggs, Mayo CHn. Proc. 70:978982, 1995). Otros procesos terapéuticos actuales para osteoporosis incluyen bisfosfonatos (por ejemplo, Fosamax™, Actonel™, Bonviva™, Zometa™, olpadronato, neridronato, skelid, bonefos), hormona paratiroides, calcilíticos, calcimiméticos (por ejemplo, cinacalcet), estatinas, esferoides anabólicos, sales de lantano y estroncio, y fluoruro de sodio. Tales terapéuticos, sin embargo, se asocian a menudo con efectos secundarios indeseables (ver Khosla y Riggs, supra). Esclerostina, el producto del gen SOST, está ausente en la esclerosteosis, una enfermedad esquelética caracterizada por crecimiento excesivo de hueso y huesos densos fuertes (Brunkow y colaboradores, Am. J. Hum. Genet, 68:577-589, 2001; Balemans et al, Hum. Mol. Genet., 10:537-543, 2001). La secuencia de aminoácido de la esclerostina humana es reportada por Brunkow y colaboradores ibid y reportada descrita en la presente como SEC ID NO:1. Breve Descripción de la Invención Se describen en la presente composiciones y métodos que pueden utilizarse para aumentar por lo menos uno de formación del hueso, densidad mineral del hueso, contenido mineral del hueso, masa ósea, calidad del hueso y fuerza del hueso, y que por lo tanto pueden utilizarse para tratar una variedad amplia de condiciones en las cuales es deseable un aumento en por lo menos uno de formación del hueso, densidad mineral del hueso, contenido mineral del hueso, masa ósea, calidad del hueso y fuerza del hueso. La presente invención también ofrece otras ventajas relacionadas descritas en la presente. La invención se relaciona con regiones (epítopes) de esclerostina humana reconocidos por los agentes de unión descritos en la presente, métodos para utilizar estos epítopes, y métodos para hacer tales epítopes. La invención también se relaciona con epítopes específicos a la región de esclerostina identificada como Bucle 2, y los agentes de unión que específicamente unen a la región. La invención también se relaciona con epítopes específicos de la región de cisteína-nódulo de esclerostina, y los agentes de unión tal como anticuerpos que específicamente unen a la región.

La invención se relaciona con agentes de unión, tal como anticuerpos, que específicamente unen a la esclerostina. Los agentes de unión pueden caracterizarse por su capacidad de entrecruzar la unión de por lo menos un anticuerpo descrito en la presente para la esclerostina y/o para entrecruzarse a partir de la esclerostina unida por al menos un anticuerpo descrito en la presente. Los anticuerpos y otros agentes de unión pueden también caracterizarse por su patrón de unión a péptidos de esclerostina humana en "un ensayo de unión de competición de epítope del péptido de esclerostina humana" como se describe en la presente. La invención se relaciona con agentes de unión, tal como anticuerpos, que pueden aumentar por lo menos uno de formación del hueso, densidad mineral del hueso, contenido mineral del hueso, masa ósea, calidad del hueso y fuerza del hueso en un mamífero. La invención se relaciona con agentes de unión, tal como anticuerpos, que pueden bloquear el efecto inhibidor de la esclerostina en un ensayo de mineralización basado en célula. La invención además se relaciona con constructos del polipéptido que comprenden dos, tres o cuatro fragmentos del polipéptido ligados por al menos un enlace de disulfuro, que representa una región central de la cisteína-nódulo de esclerostina, y anticuerpos capaces de específicamente unidos a los mismos. La invención se relaciona con métodos para obtener epítopes adecuados para uso como inmunógenos para generar, en mamíferos, agentes de unión, tal como anticuerpos capaces de unir específicamente a la esclerostina; en ciertas modalidades los agentes de unión generados son capaces de neutralizar la actividad de esclerostina in vivo. La invención se relaciona con una composición para producir como respuesta un anticuerpo específico para la esclerostina cuando la composición es administrada a un animal, la composición comprende un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO:6, SEC ID NO:63, SEC ID NO:64, SEC ID NO:65, SEC ID NO:66, SEC ID NO:67, SEC ID NO:68 o SEC ID NO:69. La invención también se relaciona con una composición para producir como respuesta un anticuerpo específico para la esclerostina cuando la composición es administrada a un animal, la composición comprende por lo menos un polipéptido que consiste esencialmente de la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 o SEC ID NO:5; la composición puede comprender por lo menos dos o por lo menos tres de las secuencias de aminoácidos de la SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 y SEQ ID NO:5 y la composición pueden comprender los cuatro de las secuencias de aminoácidos de la SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 y SEC ID NO:5. La invención además se relaciona con una composición para producir como respuesta un anticuerpo específico para la esclerostina cuando la composición es administrada a un animal, la composición comprende un polipéptido que tiene las secuencias de aminoácidos de la SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 y SEC ID NO:5, en donde la SEC ID NO:2 y 4 se unieron por un enlace de disulfuro en las posiciones de aminoácidos 57 y 111 con referencia a la SEC ID NO:1, y la SEC ID NO:3 y 5 se unieron por al menos uno de (a) un enlace de disulfuro en las posiciones de aminoácidos 82 y 142 con referencia a la identificación SEC ID NO:1, y (b) un enlace de disulfuro en las posiciones de aminoácidos 86 y 144 con referencia a la SEC ID NO:1; el polipéptido puede conservar la estructura terciaria de la región del polipéptido correspondiente de la esclerostina humana de la SEC ID NO:1.

La invención también se relaciona con el polipéptido T20.6 que consiste esencialmente en una proteína de esclerostina humana truncada multiplicada de la SEC ID NO:1, en donde los aminoácidos 1-50, 65-72, 91-100, 118-137 y 150-190 de la SEC ID NO:1 están ausentes del polipéptido; este polipéptido puede obtenerse por la digestión tríptica de la esclerostina humana, y la proteína puede aislarse mediante fraccionamiento de HPLC. La invención además se relaciona con la porción inmunogenética T20.6 de esclerostina humana que comprende los aminoácidos 51-64, 73-90, 101-117 y 138-149 de la SEC ID NO:1, en donde la porción inmunogenética comprende por lo menos uno de: (a) un enlace de disulfuro entre los aminoácidos 57 y 111; (b) un enlace de disulfuro entre los aminoácidos 82 y 142; y (c) un enlace de disulfuro entre los aminoácidos 86 y 144; la porción inmunogenética puede tener por lo menos dos de estos enlaces de disulfuro; y la porción inmunogenética puede tener tres enlaces de disulfuro. La invención además se relaciona con una porción inmunogenética T20.6 derivada de la esclerostina humana que comprende los aminoácidos 57-64, 73-86, 111-117 y 138-144 de la SEC ID NO:1, en donde la porción inmunogenética comprende por lo menos uno de: (a) un enlace de disulfuro entre los aminoácidos 57 y 111; (b) un enlace de disulfuro entre los aminoácidos 82 y 142; y (c) un enlace de disulfuro entre los aminoácidos 86 y 144; la porción inmunogenética puede tener por lo menos dos de estos enlaces de disulfuro; y la porción inmunogenética puede tener tres enlaces de disulfuro. La invención aún además se relaciona con un polipéptido que consiste esencialmente en una proteína de esclerostina humana de la SEC ID NO:1 truncada en los extremos C-terminal y N-terminal, en donde los aminoácidos 1-85 y 112-190 de la SEC ID NO:1 está ausente del polipéptido. La invención también se relaciona con una porción inmunogenética de esclerostina humana, que comprende los aminoácidos 86-111 de la SEC ID NO:1; la porción inmunogenética puede consistir esencialmente de los aminoácidos contiguos CGPARLLPNAIGRGKWWRPSGPDFRC (SEC ID NO:6). La invención además se relaciona con una porción inmunogenética de esclerostina de rata, que comprende los aminoácidos 92-109 de la SEC ID NO:98; la porción inmunogenética puede consistir esencialmente de los aminoácidos contiguos PNAIGRVKWWRPNGPDFR (SEC ID NO:96). La invención aún se relaciona con una porción inmunogenética de esclerostina de rata, que comprende los aminoácidos 99-120 de la SEC ID NO:98; la porción inmunogenética puede consistir esencialmente de los aminoácidos contiguos KWWRPNGPDFRCIPDRYRAQRV (SEC ID NO:97). La invención se relaciona con un método para producir una porción inmunogenética de esclerostina humana, que comprende las etapas de: (a) tratar la esclerostina humana para alcanzar la digestión tríptica completa; (b) recolectar la muestra de digestión tríptica que tiene un peso molecular promedio de 7,122.0 Daltons (masa teórica 7121.5 Daltons) o tiempo de retención de aproximadamente 20.6 minutos como se determinó por al elución de una columna CLAR de fase inversa con gradiente lineal de 0.05% de ácido trifluoroacético a 90% de acetonitrilo en 0.05% de TFA a una velocidad de flujo de 0.2 ml/min; y (c) purificar la porción inmunogenética. La invención se relaciona con un método para generar un anticuerpo capaz de unirse específicamente a la esclerostina, que comprende: (a) inmunizar un animal con una composición que comprende un polipéptido de la SEC ID NO:6, SEC ID NO:63, SEC ID NO:64, SEC ID NO:65, SEC ID NO:66, SEC ID NO:67, SEC ID NO:68, SEC ID NO:69, SEC ID NO:96, o SEC ID NO:97; (b) recolectar el suero del animal; y (c) aislar del suero un anticuerpo capaz de unirse específicamente a la esclerostina. La invención también se relaciona con un método para generar un anticuerpo capaz de unirse específicamente a la esclerostina , el método comprende: (a) inmunizar un animal con una composición que comprende el polipéptido T20.6 o un derivado de T20.6; (b) recolectar suero del animal; y (c) aislar del suero un anticuerpo capaz de unirse específicamente a la esclerostina. La invención además se relaciona con un método para detectar un anticuerpo anti-esclerostina en una muestra biológica, que comprende las etapas de (a) poner en contacto la muestra biológica con un polipéptido que consiste esencialmente de la SEC ID NO:6, SEC ID NO:63, SEC ID NO:64, SEC ID NO:65, SEC ID NO:66, SEC ID NO:67, SEC ID NO:68, SEC ID NO:69, SEC ID NO:96, o SEC ID NO:97 bajo condiciones que permiten a un complejo formarse entre el anticuerpo y el polipéptido; y (b) detectar la presencia o ausencia del complejo, en donde la presencia del complejo indica que la muestra biológica contiene un anticuerpo anti-esclerostina. La invención también se relaciona con un método para detectar un anticuerpo anti-esclerostina en una muestra biológica, que comprende las etapas, de (a) poner en contacto con la muestra biológica con el polipéptido T20.6 o un derivado de T20.6 bajo condiciones que permitan que un complejo se forme entre el anticuerpo y el polipéptido; y (b) detectar la presencia o ausencia del complejo, en donde la presencia del complejo indica que la muestra biológica contiene anti-anticuerpo de esclerostina. La invención además se relaciona con un agente de unión de esclerostina, tal como un anticuerpo, que entrecruza la unión de por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C o Ab-D a una proteína de esclerostina. El agente de unión de esclerostina puede también entrecruzarse a partir de la unión a esclerostina de por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C o Ab-D. El anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, puede ser un anticuerpo policlonal, anticuerpo monoclonal, anticuerpo humanizado, anticuerpo humano, anticuerpo quimérico o similar. La invención además se relaciona con un agente de unión de esclerostina, tal como un anticuerpo, que se entrecruza a partir de la unión a esclerostina de por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C o Ab-D. El anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, puede ser un anticuerpo policlonal, anticuerpo monoclonal, anticuerpo humanizado, anticuerpo humano, anticuerpo quimérico o similar. La invención además se relaciona con un agente de unión de esclerostina, tal como un anticuerpo aislado, que entrecruza la unión de por lo menos uno de anticuerpos 1-24 (Ab-1 a Ab-24) a una proteína de esclerostina. El agente de unión de esclerostina puede también entrecruzarse a partir de la unión a esclerostina por al menos uno de los anticuerpos 1-24 (Ab-1 a Ab-24). El anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, puede ser un anticuerpo policlonal, anticuerpo monoclonal, anticuerpo humanizado, anticuerpo humano o anticuerpo quimérico. La invención además se relaciona con un agente de unión de esclerostina, tal como un anticuerpo aislado, que es entrecruzado a partir de la unión a esclerostina de por lo menos uno de los anticuerpos 1-24 (Ab-1 a Ab-24); el anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, puede ser un anticuerpo policlonal, anticuerpo monoclonal, anticuerpo humanizado, anticuerpo humano o anticuerpo quimérico. La invención además se relaciona con un agente de unión, tal como un anticuerpo aislado que exhibe un patrón de unión similar a péptidos de esclerostina humanos en un "ensayo de unión de competición de epítope del péptido de esclerostina humano" como se exhibe por al menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C o Ab-D; el anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, puede ser un anticuerpo policlonal, anticuerpo monoclonal, anticuerpo humanizado, anticuerpo humano o anticuerpo quimérico. La invención aún se relaciona con un método para tratar un trastorno del hueso asociado con por lo menos uno de formación ósea baja, densidad mineral del hueso baja, contenido mineral del hueso bajo, masa ósea baja, calidad del hueso baja y fuerza del hueso baja en un sujeto mamífero que comprende proporcionar a un sujeto en necesidad de tal tratamiento una cantidad de un agente de unión de anti-esclerostina suficiente para aumentar por lo menos uno de formación del hueso, densidad mineral del hueso, contenido mineral del hueso, masa ósea, calidad del hueso y fuerza del hueso en donde el agente de unión de anti-esclerostina comprende un anticuerpo, o fragmento de unión a esclerostina del mismo. La invención también se relaciona con un polipéptido de esclerostina aislado o fragmentos del mismo, en donde el polipéptido contiene 6 residuos de cisteína conservados y los fragmentos del mismo comprenden dé 7 a 14 aminoácidos de la SEC ID NO:2; 8 a 17 aminoácidos de la SEC ID NO:3; 8 a 18 residuos de la SEC ID NO:4; y 6 a 12 residuos de la SEC ID NO:5, y el polipéptido o fragmentos del mismo son estabilizados por enlaces de disulfuro entre la SEC ID NO:2 y 4, y entre la SEC ID NO:3 y 5; el polipéptido o fragmentos pueden comprender 10-14 aminoácidos de la SEC ID NO:2; 14 a 17 aminoácidos de la SEC ID NO:3; 13 a 18 aminoácidos de la SEC ID NO:4; y 8 a 12 residuos de la SEC ID NO:5; y el polipéptido o fragmentos pueden comprender la SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 y SEC ID NO:5. En la presente se proporcionan anticuerpos que específicamente unen a la esclerostina humana. Los anticuerpos son caracterizados por su capacidad para entrecruzar la unión de por lo menos un anticuerpo descrito en la presente a esclerostina humana y/o entrecruzar a partir de la unión de esclerostina humana por lo menos un anticuerpo descrito en la presente. También se proporciona un anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, que puede aumentar por lo menos uno de formación del hueso, densidad mineral del hueso, contenido mineral del hueso, masa ósea, calidad del hueso y fuerza del hueso en un mamífero. También se proporciona en un anticuerpo aislado, o un fragmento de unión al antígeno del mismo, que puede bloquear el efecto inhibidor de esclerostina en una célula basada en el análisis de mineralización . También se proporciona un agente de unión, tal como un anticuerpo, que específicamente une a la esclerostina humana y tiene por lo menos una secuencia de CDR seleccionada de las SEC ID NOS: 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 78, 79, 80, 81, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 351, 352, 353, 358, 359 y 360, y variantes de los mismos, en donde el anticuerpo o fragmento de unión al antígeno del mismo neutraliza la esclerostina. También se proporciona un agente de unión, tal como un anticuerpo, que específicamente une a la esclerostina humana y tiene por lo menos una secuencia de CDR seleccionada de la SEC ID NOs:39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 78, 79, 80, 81, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 351, 352, 353, 358, 359 y 360, y variantes de los mismos. También se proporcionan regiones de esclerostina humana que son importantes para la actividad in vivo de la proteína. Estos y otros aspectos de la presente invención llegarán a ser evidentes con referencia a la siguiente descripción detallada y dibujos anexos. Todas las referencias descritas en la presente se incorporan por este medio por referencia en sus totalidades como si cada una fuera incorporada individualmente. Breve Descripción de los Dibujos La Figura 1 representa las secuencias de aminoácidos de la forma madura (péptidos de señal divididos) de la cadena ligera (Figura 1A) (SEC ID NO:23) y cadena pesada (Figura 1B) (SEC ID NO:27) para el anticuerpo de esclerostina anti-humana y esclerostina anti-ratón Ab-A. La Figura 2 representa las secuencias de aminoácidos de la forma madura (péptidos de la señal divididos) de la cadena ligera (Figura 2A) (SEC ID NO:31) y cadena pesada (Figura 2b) (SEC ID NO:35) para el anticuerpo de esclerostina anti-humano y esclerostina anti-ratón Ab-B. La Figura 3 representa las secuencias de aminoácidos de la forma madura (péptidos de la señal divididos) de la cadena ligera (Figura 3A) (SEC ID NO:15) y cadena pesada (Figura 3b) (SEC ID NO:19) para el anticuerpo de esclerostina anti-humano y esclerostina anti-ratón Ab-C. La Figura 4 representa las secuencias de aminoácidos de la forma madura (péptidos de la señal divididos) de la cadena ligera (Figura 4A) (SEC ID NO:7) y cadena pesada (Figura 4b) (SEC ID NO:11) para el anticuerpo de esclerostina anti-humano y esclerostina anti-ratón Ab-D. La Figura 5 representa la densidad mineral del hueso en ratones medidos en dos sitios del esqueleto (vértebras lumbares y metáfisis tibial) después de 3 semanas de tratamiento con el vehículo, PTH (1-34), Ab-A o Ab-B. La Figura 6 muestra la a densidad mineral del hueso en ratones medidos en dos sitios del esqueleto (vértebras lumbares y metáfisis tibial) después de 2 semanas de tratamiento con el vehículo, PTH (1-34) o Ab-C.

La Figura 7 representa la densidad mineral del hueso en ratones medidos en dos sitios del esqueleto (vértebras lumbares y metáfisis tibial) después de 3 semanas de tratamiento con el vehículo o Ab-D. La Figura 8 representa la secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal dividido) de la esclerostina humana (SEC ID NO:1). También se representa la secuencia del nucleótido de la esclerostina humana que codifica la región que codifica la forma madura de la esclerostina humana. Las ocho cisteínas se numeran de C1 a C8. La cisteína-nódulo es formada por tres enlaces de disulfuro (C1-C5; C3-C7; C4-C8). C2 y C6 también forman un enlace de disulfuro, no obstante este disulfuro no es parte de la cisteína-nódulo. La Figura 9 representa una representación esquemática de la estructura básica de la esclerostina humana. Existe un brazo N-terminal (de la primera Q a C1) y un brazo C-terminal (de C8 a la terminal Y). Entre estos brazos existe la estructura de cisteína-nódulo (formada por tres disulfuros: C1-C5; C3-C7; C4-C8) y tres bucles que son designados Bucle 1, Bucle 2 y Bucle 3. Las regiones distal del Bucle 1 y Bucle 3 están ligadas por el disulfuro C2-C6. Se indican los sitios divididos de tripsina potenciales (arginina = R y lisina = K). Algunos de los sitios de división de AspN potenciales se indican (solamente se muestran los residuos del ácido aspártico (D)). La Figura 10 representa los mapas del péptido HPLC de esclerostina humana después de la digestión con tripsina o AspN. Se indican los péptidos de esclerostina humana generados por la digestión de tripsina (T19.2, T20, T20.6 y T21-22) tal como los péptidos de esclerostina humana generados por la digestión de AspN (AspN14.6, AspN18.6 y AspN22.7-23.5). La Figura 11 representa la secuencia e información de masa para los péptidos ligados a disulfuro de esclerostina humana aislada generados por la digestión de tripsina. Seq. pos. = posición de la secuencia. Obs. = observado. La masa observada se determinó por el análisis de ESI-LC-EM. La Figura 12 representa la secuencia e información de masa para los péptidos de esclerostina humana aislada generados por la digestión de AspN. El péptido AspN22.7-23.5 contiene los 4 enlaces de disulfuro. Seq. pos. = posición de la secuencia. Obs. = observado. La masa observada se determinó por el análisis de ESI-LC-EM. La Figura 13 muestra un diagrama esquemático lineal de cuatro péptidos de esclerostina humana (T19.2, T20, T20.6 y T21-22) generados por la digestión de tripsina. La Figura 14 muestra un diagrama esquemático lineal de cinco péptidos de esclerostina humana (AspN14.6, AspN18.6 y AspN22.7-23.5) generados por la digestión de AspN. El máximo de HPLC AspN14.6 está compuesto de tres péptidos no ligados por cualquier enlace de disulfuro. La Figura 15 muestra la señal de la unidad de resonancia (Ru) del "ensayo de unión de competición de epítope del péptido de esclerostina humana" basado en Biacore. Se determinó Mab relativo que une a varios péptidos de esclerostina humana (en solución) contra Mab que une a la esclerostina humana en forma madura intacta (inmovilizada en chip de Biacore). Los datos mostrados son para Ab-A. Los péptidos de esclerostina humana usados fueron T19.2, T20, T20.6, T21-22, AspN14.6, AspN18.6 y AspN22.7-23.5. La Figura 16 muestra la señal de la unidad de resonancia (Ru) del "ensayo de unión de competición de epítope del péptido de esclerostina humana" basado en Biacore. Se determinó Mab relativo que une a varios péptidos de esclerostina humana (en solución) contra Mab que une a la esclerostina humana en forma madura intacta (inmovilizada en chip de Biacore). Los datos mostrados son para Ab-B. Los péptidos de esclerostina humana usados fueron T19.2, T20, T20.6, T21-22, AspN14.6, AspN18.6 y AspN22.7-23.5. La Figura 17 muestra la señal de la unidad de la resonancia (Ru) del "ensayo de unión de competición de epítope del péptido de esclerostina humana" basado en Biacore. Se determinó Mab relativo que une a varios péptidos de esclerostina humana (en solución) contra Mab que une a la esclerostina humana en forma madura intacta (inmovilizada en chip de Biacore). Los datos mostrados son para Ab-C. Los péptidos de esclerostina humana usados fueron T19.2, T20, T20.6, T21-22, AspN14.6, AspN18.6 y AspN22.7-23.5. La Figura 18 muestra la señal de la unidad de la resonancia (Ru) del "ensayo de unión de competición de epítope del péptido de esclerostina humana" basado en Biacore. Se determinó Mab relativo que une a varios péptidos de esclerostina humana (en solución) contra Mab que une a la esclerostina humana en forma madura intacta (inmovilizada en chip de Biacore). Los datos mostrados son para Ab-D. Los péptidos de esclerostina humana usados fueron T19.2, T20, T20.6, T21-22, AspN14.6, AspN18.6 y AspN22.7-23.5. La Figura 19 muestra dos epítopes de unión Mab de esclerostina humana. La Figura 19A muestra la secuencia del epítope de Bucle 2 para el unión de Ab-A y Ab-B a esclerostina humana (SEC ID NO:6). La Figura 19B muestra la secuencia, unión de disulfuro y diagrama esquemático del epítope T20.6 para el unión de Ab-C y Ab-D a esclerostina humana (SEC ID NO:2-5).

La Figura 20 representa los mapas del péptido HPLC de la esclerostina humana después de la digestión con tripsina. La Figura 20A muestra la digestión del complejo de Ab-D de esclerostina humana. La Figura 20B muestra la digestión de la esclerostina humana solamente. Se indican los máximos del péptido T19.2, T20, T20.6 y T21-22. La Figura 21 muestra la secuencia, unión de disulfuro y diagrama esquemático del epítope "derivado T20.6 1 (cisteína-nodulo + 4 brazos)" para la unión de Ab-D a la esclerostina humana. (SEC ID NO:70-73). La Figura 22 muestra los resultados del ensayo de mineralización de la línea celular del osteoblasto de MC3T3-E1-BF usado para identificar la anti-esclerostina que neutraliza Mabs. La esclerostina de ratón (Sel) se utilizó en 1 g/ml. Los anticuerpos monoclonal se utilizaron en 10 y 5 µg/ml. El grado de mineralización (varios tipos de fosfato de calcio insoluble) se cuantificó midiendo el calcio. La Figura 23 representa los resultados del ensayo de mineralización de la línea celular del osteoblasto de MC3T3-E1-BF usado para identificar la anti-esclerostina que neutraliza Mabs. La esclerostina humana (Sel) se utilizó en 1 g/ml. Los anticuerpos monoclonal se utilizaron en 8 y 4 pg/ml. El grado de mineralización (varios tipos de fosfato de calcio insoluble) se cuantificó midiendo el calcio. La Figura 24 muestra los resultados del ensayo de mineralización de la línea celular del osteoblasto de MC3T3-E1-BF usado para identificar la anti-esclerostina que neutraliza Mabs. La esclerostina humana (Sel) se utilizó en 1 µ?/???. Los anticuerpos monoclonal se utilizaron en 10 g/ml. El grado de mineralización (varios tipos de fosfato de calcio insoluble) se cuantificó midiendo el calcio. La Figura 25 representa los resultados de un modelo ratón SCID de pérdida del hueso por inflamación-inducida. El tratamiento Ab-A protegió al ratón contra la pérdida ósea por inflamación-relacionada asociada con colitis cuando se mide como la densidad mineral del hueso total (Figura 25A), densidad del hueso vertebral (Figura 25B), y densidad del hueso del fémur (Figura 25C). Descripción Detallada de la Invención La presente invención se relaciona con regiones de la proteína de esclerostina humana que contienen epítopes reconocidos por anticuerpos que también unen a la esclerostina de longitud completa, y métodos para hacer y usar estos epítopes. La invención también proporciona agentes de unión (tal como anticuerpos) que específicamente ligan a la esclerostina o porciones de esclerostina, y métodos para usar tales agentes de unión. Los agentes de unión son útiles para bloquear o dañar la unión de la esclerostina humana a uno o más ligandos. La esclerostina humana recombinante/SOST está disponible comercialmente de R&D Systems (Minneapolís, MN, USA; 2006 cat# 1589-ST-025). Adicionalmente, la esclerostina/SOST del ratón recombinante está disponible comercialmente de R&D Systems (Minneapolís, MN, USA; 2006 cat# 1589-ST-025) . La esclerostina de grado de búsqueda que une los anticuerpos monoclonal está disponible comercialmente de R&D Systems (Minneapolís, MN, USA; mouse monoclonal: 2006 cat# MAB1406; rat monoclonal: 2006 cat# MAB1589). Las Patentes Nortemericnas Nos. 6,395,511 y 6,803,453, y Publicaciones de Patente Nortemericna 20040009535 y 20050106683 se refieren a anticuerpos anti-esclerostina generalmente. Como se utiliza en la presente, el término esclerostina humana se desea por incluir la proteína de la SEC ID NO:1 y variantes alélicos de la misma. La esclerostina puede purificarse de células hospedadoras 293T que se han transfectado por un gen que codifica la esclerostina mediante la elución del sobrenadante filtrado del fluido de cultivo de la célula hospedadora usando una columna de HP de heparina, usando un gradiente de sal. La preparación y purificación adicional que utilizan cromatografía de intercambio catiónico se describen en los Ejemplos 1 y 2. Los agentes de unión de la invención son preferiblemente anticuerpos, como se define en la presente. El término "anticuerpo" se refiere a un anticuerpo intacto, o un fragmento de unión del mismo. Un anticuerpo puede comprender una molécula del anticuerpo completa (incluyendo policlonal, monoclonal, quimérica, humanizada, o versiones humanas que tienen cadenas pesada y/o ligera de longitud competa), o comprende un fragmento de unión al antígeno del mismo. Los fragmentos de anticuerpo incluyen fragmentos F(ab')2, Fab, Fab', Fv, Fe y Fd, y pueden incorporarse en anticuerpos de dominio único, anticuerpos de cadena sencilla, maxicuerpos, minicuerpos, intracuerpos, diacuerpos, triacuerpos, tetracuerpos, v-NAR y bis-scFv (Ver por ejemplo, Hollinger and Hudson, 2005, Nature Biotechnology, 23, 9, 1126-1136). Los polipéptidos del anticuerpo también se describen en Patente Norteamericana No. 6,703,199, que incluyen monocuerpos del polipéptido de fibronectina. Otros polipéptidos del anticuerpo se describen en la Publicación Patente Norteamericana 2005/0238646, que son polipéptidos de cadena sencilla. Los fragmentos de unión al antígeno derivados de un anticuerpo pueden obtenerse, por ejemplo, por hidrólisis proteolítica del anticuerpo, por ejemplo, digestión de pepsina o papaína de anticuerpos enteros de acuerdo a métodos convencionales. A modo de ejemplo, los fragmentos de anticuerpo pueden producirse por división enzimática de anticuerpos con pepsina para proporcionar un fragmento 5S llamado F(ab')2. Este fragmento puede dividirse adicionalmente usando un agente reductor de tiol para producir fragmentos monovalentes 3.5S Fab'. Opcionalmente, la reacción de escisión puede realizarse usando un grupo de bloqueo para los grupos sulfhidrilo que resultan de la escisión de las uniones de disulfuro. Como una alternativa, una escisión enzimática utiliza papaína que produce dos fragmentos Fab monovalentes y un fragmento Fe directamente. Estos métodos son descritos, por ejemplo, por Patente Norteamericana No. 4,331,647, Nisonoff y colaboradores, Arck Biochem. Biophys. 89:230, 1960; Porter, Biochem. J. 73:119, 1959; Edelman y colaboradores, in Methods in Enzymology 1:422 (Academic Press 1967); y por Andrews, S.M. and Titus, J.A. in Current Protocols in Immunology (Coligan J E., y colaboradores, eds), John Wiley & Sons, New York (2003). páginas 2.8.1-2.8.10 y 2.10A.1 -2.10A.5. Otros métodos para escindir anticuerpos, tal como separación de cadenas pesadas para formar fragmentos de cadena ligara-pesada monovalentes (Fd), además la escisión adicional de fragmentos, u otras técnicas enzimáticas, químicas, o genéticas pueden también utilizarse, siempre y cuando los fragmentos unidos al antígeno que es reconocido por el anticuerpo intacto. Un fragmento de anticuerpo también puede ser cualquier proteína sintético o genéticamente dirigida. Por ejemplo, los fragmentos de anticuerpo incluyen fragmentos aislados que consisten de la región variable de cadena ligera, los fragmentos "Fv" consisten de las regiones variables de las cadenas pesada y ligera, moléculas del polipéptido de cadena sencilla recombinante en donde las regiones variables de cadenas ligera y pesada son conectadas por un enlazador de péptido (proteínas scFv). Otra forma de un fragmento de anticuerpo es un péptido que comprende uno o más regiones determinantes de la complementariedad (CDRs) de un anticuerpo. Las CDRs (también llamadas "unidades de reconocimiento mínimas", o "región hipervariable") pueden obtenerse construyendo polinucleótidos que codifican la CDR de interés. Tales polinucleótidos se preparan, por ejemplo, usando la reacción en cadena de polimerasa para sintetizar la región variable usando el ARNm de células que producen el anticuerpo como una plantilla (ver, por ejemplo, Larrick y colaboradores, Methods: A Companion to Methods in Enzymology 2:106, 1991; Courtenay-Luck, "Genetic Manipulation of Monoclonal Antibodies," en Monoclonal Antibodies: Production, Engineering and Clinical Application, Ritter y colaboradores (eds.), página 166 (Cambridge University Press 1995); y Ward y colaboradores, "Genetic Manipulation and Expression of Antibodies," en Monoclonal Antibodies: Principies and Applications, Birch y colaboradores, (eds.), página 137 (Wiley-Liss, Inc. 1995)). Así, en una modalidad, el agente de unión comprende por lo menos un CDR como se describe en la presente. El agente de unión puede comprender por lo menos dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR's como se describe en la presente. El agente de unión ad icionalmente puede comprender por lo menos un dominio en la región variable de un anticuerpo descrito en la presente. El dominio en la región variable puede ser de cualquier tamaño o composición de aminoácido y generalmente comprenderá por lo menos una secuencia de CDR responsable de unir a la esclerostina humana, por ejemplo CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3 y/o los CDRs de cadena ligera específicamente descrito en la presente y que está adjunto a o en cuadro con una o más secuencias de soporte. En términos generales, el dominio en la región variable (V) puede ser cualquier arreglo adecuado de los dominios variables de cadena pesada (VH) y/o ligera (VL) de ¡nmunoglobulina. Así, por ejemplo, el dominio de región V puede ser monomérica y ser un dominio de VH o VL, que es capaz de independientemente unir la esclerostina humana con una afinidad de por lo menos igual a 1 x 10"7M o menor como describe más adelante. Alternativamente, el dominio de región V puede ser dimérico y contiene los VH-VH, VH-VL, o VL-VL, dímeros. El dímero de región V comprende por lo menos un VH y por lo menos una cadena VL que pueden ser no-covalentemente asociado (más abajo designado como Fv). Si se desea, las cadenas pueden covalentemente acoplarse directamente, por ejemplo vía un enlace de disulfuro entre los dos dominios variables, o con un enlazador, por ejemplo un enlazador de péptido, para formar un Fv de cadena sencilla (scFv). El dominio en la región variable puede ser cualquier dominio variable que ocurre naturalmente o una versión diseñada del mismo. Por versión diseñada es significado un dominios en la región variable que se ha creado usando técnicas de ingeniería de ADN recombinante. Tales versiones diseñadas incluyen las creadas, por ejemplo, de una región variable del anticuerpo específico por inserciones, eliminaciones o cambios en o a las secuencias de aminoácidos del anticuerpo específico. Los ejemplos particulares incluyen dominios en la región variable diseñados que contienen por lo menos un CDR y opcionalmente uno o más aminoácidos de soporte de un primer anticuerpo y el resto del dominio en la región variable de un segundo anticuerpo.

El dominio en la región variable puede covalente unirse en un aminoácido C-terminal en por lo menos otro dominio del anticuerpo o un fragmento del mismo. Así, por ejemplo, un dominio de VH que está presente en el dominio en la región variable puede unirse a un dominio CH1 de inmunoglobulina, o un fragmento del mismo. Similarmente un dominio VL puede ligarse a un dominio CK o un fragmento del mismo. De esta manera, por ejemplo, el anticuerpo puede ser un fragmento Fab en donde el dominio de unión al antígeno contiene los dominios VH y VL asociados covalentemente ligados en su C-terminal a un dominio CH1 y CK, respectivamente. El dominio CH1 puede ampliarse con otros aminoácidos, por ejemplo para proporcionar una región de bisagra o una porción de un dominio de región de bisagra como se encuentra en un fragmento Fab', o para proporcionar otros dominios, tal como el anticuerpo de los dominios CH2 y CH3. Como se describe en la presente, los agentes de unión comprenden por lo menos uno de estos CDRs. Por ejemplo, uno o más CDR pueden incorporarse en las regiones de soporte del anticuerpo conocidas (lgG1, lgG2, etc.), o conjugarse a un vehículo adecuado para mejorar la vida promedio del mismo. Los vehículos adecuados incluyen, pero no se limitan a Fe, polietilenglicol (PEG), albúmina, transferrina y similares. Éstos y otros vehículos adecuados se conocen en la técnica. Tales péptidos de CDR conjugados pueden ser monoméricos, dimérícos, tetraméricos, u otra forma. En una modalidad, uno o más polímeros solubles en agua se enlazan en una o más posiciones específicas, por ejemplo en el término amino, de un agente de unión. En ciertas modalidades preferidas, un agente de unión comprende uno o más polímeros solubles en agua adjuntos, incluyendo, pero sin limitarse a, polietilenglicol, polioxietilenglicol o polipropilenglicol. Ver, por ejemplo, Patentes Norteamericanas Nos. 4,640,835, 4,496,689, 4,301,144, 4,670,417, 4,791,192 y 4,179,337. En ciertas modalidades, un agente de unión derivado comprende uno o más de monometoxi-polietilenglicol, dextrán, celulosa u otros polímeros basados en carbohidrato, poli-(N-vinilpírrolidona)-poliet¡lenglicol, homopolímeros de propilenglicol, un copolímero de óxido de polipropileno/óxido de etileno, polioles polioxietilados (por ejemplo, glicerol) y alcohol de polivinilo, así como mezclas de tales polímeros. En ciertas modalidades, uno o más polímeros solubles en agua se unen aleatoriamente a una o más cadenas laterales. En ciertas modalidades, PEG puede actuar para mejorar la capacidad terapéutica para un agente de unión, tal como un anticuerpo. Ciertos métodos se discuten, por ejemplo, en la Patente Norteamericana No. 6,133,426, que se incorpora por este medio por referencia para cualquier propósito.

Se apreciará que un agente de unión de la presente invención puede tener por lo menos una sustitución del aminoácido, proporcionando que el agente de unión conserva la especificidad de unión. Por lo tanto, las modificaciones a las estructuras del agente de unión se comprenden dentro del alcance de la invención. Estas pueden incluir sustituciones del aminoácido, que pueden ser conservadoras o no conservadoras, que no destruye la capacidad de unión de la esclerostina de un agente de unión. Las sustituciones del aminoácido conservadoras pueden comprender los residuos del aminoácido que ocurren no-naturalmente, que se incorporan normalmente por síntesis del péptido químico más bien por síntesis en sistemas biológicos. Éstos incluyen peptidomiméticos y otras formas inversas o invertidas de radicales del aminoácido. Una sustitución del aminoácido conservadora puede también involucrar una sustitución de un residuo del aminoácido nativo con un residuo normativo tal que existe poco o nada del efecto sobre la polaridad o carga del residuo del aminoácido en esta posición. Las sustituciones no-conservadoras pueden involucrar el intercambio de un miembro de una clase de aminoácidos o miméticos del aminoácido para un miembro de otra clase con diferentes propiedades físicas (por ejemplo tamaño, polaridad, hidrofobicidad, carga). Tales residuos sustituidos pueden introducirse en las regiones del anticuerpo humano que son homologas con anticuerpos no humanos, o en las regiones no-homólogas de la molécula. Por otra parte, el experto en la técnica puede generar las variantes de prueba que contienen una sola sustitución del aminoácido en cada residuo del aminoácido deseado. Las variantes entonces pueden protegerse usando ensayos de actividad conocidos por los expertos en la técnica. Tales variantes podrán utilizarse para recopilar la información sobre las variantes adecuadas. Por ejemplo, si uno descubre que un cambio a un residuo del aminoácido particular da lugar a actividad destruida, indeseablemente reducida o inadecuada, las variantes con tal cambio pueden evitarse. En otras palabras, basado en la información recopilada de tales experimentos rutinarios, un experto en la técnica puede determinar fácilmente los aminoácidos, dónde otras sustituciones deben evitarse solas o en combinación con otras mutaciones. Un experto podrá determinar las variantes adecuadas del polipéptido como se indica en la presente usando técnicas bien conocidas. En ciertas modalidades, el experto en la técnica puede identificar las áreas adecuadas de la molécula que puede cambiarse sin destruir la actividad marcando las regiones no deseadas por ser importantes para la actividad. En ciertas modalidades, una puede identificar los residuos y porciones de las moléculas que se conservan entre polipéptidos similares. En ciertas modalidades, incluso las áreas que pueden ser importantes para la actividad biológica o para la estructura pueden someterse a sustituciones del aminoácido conservadoras sin destruir la actividad biológica o sin afectar adversamente la estructura del polipéptido. Además, un experto en la técnica puede revisar los estudios de función de la estructura identificando los residuos en polipéptidos similares que son importantes para la actividad o estructura. En vista de tal comparación, uno puede predecir la importancia de los residuos del aminoácido en una proteína que corresponden a residuos del aminoácido que son importantes para la actividad o estructura en proteínas similares. Un experto en la técnica puede optar por sustituciones del aminoácido químicamente similares para tales residuos del aminoácido importantes anteriormente mencionados. Un experto en la técnica también puede analizar la estructura tridimensional y secuencia del aminoácido con relación a la estructura en polipéptidos similares. En vista de tal información, el experto en la técnica puede predecir la alineación de los residuos del aminoácido de un anticuerpo con respecto a su estructura tridimensional. En ciertas modalidades, un experto en la técnica puede elegir no realizar cambios radicales a los residuos del aminoácido anteriormente mencionados por estar en la superficie de la proteína, puesto que tales residuos pueden involucrarse en interacciones importantes con otras moléculas. Un número de publicaciones científicas se han dedicado a la predicción de la estructura secundaria. Ver Moult J., Curr. Op. ¡n Biotech., 7(4):422-427 (1996), Chou y colaboradores, Biochemistry, 13(2):222-245 (1974); Chou y colaboradores, Biochemistry, 113(2):211 -222 (1974); Chou y colaboradores, Adv. Enzymol. Relat. Areas Mol. Biol., 47:45-148 (1978); Chou y colaboradores, Ann. Rev. Biochem., 47:251-276 and Chou y colaboradores, Biophys. J., 26:367-384 (1979). Por otra parte, los programas de computadora están actualmente disponibles para asistir con la predicción de la estructura secundaria. Un método para predecir la estructura secundaria se basa en modelar la homología. Por ejemplo, dos polipéptidos o proteínas que tienen una identidad de secuencia mayor de 30%, o similar mayor de 40% a menudo tienen topologías estructurales similares. El crecimiento reciente de la base de datos estructural de proteína (PDB) ha proporcionado predecibilidad mejorada de la estructura secundaria, incluyendo el número potencial de dobleces dentro de una estructura del polipéptido o proteína. Ver Holm y colaboradores, Nucí. Acid. Res., 27( 1 ) :244-247 (1999). Se ha sugerido (Brenner y colaboradores, Curr. Op. Struct. B i o I . , 7(3):369- 376 (1997)) que hay un número limitado de dobleces en un polipéptido o proteína dado y que un número crítico de estructuras se ha resuelto, la predicción estructural llegarán a ser dramáticamente más exacta. Los métodos adicionales para predecir la estructura secundaria incluyen "roscado" (Jones, D., Curr. Opin. Struct. Biol., 7(3):377-87 (1997); Sippl y colaboradores, Structure, 4(1): 15-19 (1996)), "profile analysis" (Bowie y colaboradores, Science, 253:164-170 (1991); Gribskov y colaboradores, Meth. Enzym., 183:146-159 (1990); Gribskov y colaboradores, Proc. Nat. Acad. Sci., 84(13):4355-4358 (1987)), and "evolutionary linkage" (ver Holm, supra (1999), and Brenner, supra (1997)).

En ciertas modalidades, las variantes de agentes de unión incluyen variantes de glicosilación en donde el número y/o tipo de sitio de glicosilación se ha alterado comparado con las secuencias de aminoácidos de un polipéptido madre. En ciertas modalidades, las variantes comprenden un número mayor o menor de sitios de glicosilación N-enlazado que la proteína nativa. Un sitio de glicosilación N-enlazado es caracterizado por la secuencia: Asn-X-Ser o Asn-X-Thr, en donde el residuo del aminoácido designado como X puede ser cualquier residuo del aminoácido excepto la prolina. La sustitución de los residuos del aminoácido para crear esta secuencia proporciona un sitio nuevo potencial para la adición de una cadena de carbohidrato N-enlazado. Alternativamente, las sustituciones que eliminan esta secuencia eliminarán una cadena de carbohidrato N-enlazado existente. También se proporciona una reconfiguración de las cadenas de carbohidrato N-enlazado en donde uno o más sitios de glicosilación N-enlazados (normalmente los que estén ocurriendo naturalmente) se eliminan y uno o más sitios N-enlazado nuevos se crean. Las variantes del anticuerpo preferidas adicionales incluyen variantes de cisteína en donde uno o más residuos de cisteína se eliminan de o sustituyen para otro aminoácido (por ejemplo, serina) con respecto a la secuencia del aminoácido madre. Las variantes de cisteína pueden ser útiles cuando los anticuerpos deben volverse a doblar en una conformación biológicamente activa tal como después del aislamiento de los cuerpos de inclusión insolubles. Las variantes de cisteína tienen generalmente pocos residuos de cisteína que la proteína nativa, y normalmente tienen un número igual para minimizar las interacciones resultantes de las cisteínas impares. Las sustituciones de aminoácido deseadas (si se conservan o no-conservan) pueden determinarse por los expertos en la técnicas en el momento que se desean tales sustituciones. En ciertas modalidades, las sustituciones del aminoácido pueden utilizarse para identificar residuos importantes de anticuerpos para esclerostina , o para aumentar o disminuir la afinidad de los anticuerpos para esclerostina descritas en la presente. De acuerdo a ciertas modalidades, las sustituciones del aminoácido preferidas son las que: (1) reducen la susceptibilidad a la proteólisis, (2) reducen la susceptibilidad a la oxidación, (3) alteran la afinidad de unión para formar complejos de proteína, (4) alteran las afinidades de unión, y/o (4) confieren o modifican otras propiedades fisicoquímicas o funcionales en tales polipéptidos. De acuerdo a ciertas modalidades, las sustituciones del aminoácido solas o múltiples (en ciertas modalidades, sustituciones del aminoácido conservadoras) pueden hacerse en la secuencia que ocurre naturalmente (en ciertas modalidades, en la porción del polipéptido fuera del dominio(s) que forma los contactos intermoleculares). En ciertas modalidades, una sustitución del aminoácido conservadora normalmente no puede cambiar sustancialmente las características estructurales de la secuencia madre (por ejemplo, un aminoácido de reemplazo no debe tender a romper una hélice que ocurre en la secuencia madre, o interrumpir otros tipos de estructura secundaria que caracterice la secuencia madre). Los ejemplos de estructuras secundarias y terciarias del polipéptido reconocidas por la técnica se describen en Proteins, Structures and Molecular Principies (Creighton, Ed., W. H. Freeman and Company, New York (1984)); Introduction to Protein Structure (C. Branden and J. Tooze, eds., Garland Publishing, New York, N.Y. (1991)); and Thornton y colaboradores Nature 354:105 (1991), donde cada uno se incorporó en la presente por referencia. En ciertas modalidades, los agentes de unión de la invención pueden químicamente enlazarse con los polímeros, lípidos u otros radicales. Los agentes de unión pueden comprender por lo menos uno de los CDRs descritos en la presente incorporados en una estructura de soporte biocompatible. En un ejemplo, la estructura de soporte biocompatible comprende un polipéptido o porción del mismo que sea suficiente para formar un soporte estructural conformacionalmente estable, o soporte, o andamio, que puede exhibir una o más secuencias de los aminoácidos que unen a un antígeno (por ejemplo, CDRs, una región variable, etc.) en una región superficial localizada. Tales estructuras pueden ser un polipéptido que ocurre naturalmente o polipéptido "plegado" (un motivo estructural), o pueden tener una o más modificaciones, tal como adiciones, eliminaciones o sustituciones de aminoácidos, con relación a un polipéptido que ocurre naturalmente o plegado. Estos andamios pueden derivarse de un polipéptido de cualquier especie (o de más de una especie), por ejemplo como un humano, otro mamífero, otro vertebrado, invertebrado, planta, bacteria o virus. Normalmente las estructuras de soporte biocompatible se basan en andamios o esqueletos de proteína con excepción de los dominios de inmunoglobulina. Por ejemplo, los basados en fibronectina , anquirina, lipocalina, neocarzinostain , citocromo b, dedo de zinc de CP1, PST1, embolización con espirales, LACI-D1, dominio Z y dominio de tendramisat pueden utilizarse (ver por ejemplo, Nygren and Uhlen, 1997, Current Opinión in Structural Biology, 7, 463-469). En modalidades preferidas, se apreciará que los agentes de unión de la invención incluyen los anticuerpos humanizados descritos en la presente. Los anticuerpos humanizados tal como los descritos en la presente pueden producirse usando técnicas conocidas por los experto en la técnicas (Zhang, W., y colaboradores, Molecular Immunology. 42(12): 1445-1451 , 2005; Hwang W. y colaboradores, Methods. 36(1):35-42, 2005; Dall'Acqua WF, y colaboradores, Methods 36(1)A3-60, 2005; and Clark, M., Immunology Today. 21 (8):391-402, 2000). Además, un experto en la técnica reconocerá que los agentes de unión adecuados incluyen porciones de estos anticuerpos, tal como uno o más de CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 y CDR-L3 como se describe específicamente en la presente. Por lo menos una de las regiones de CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 y CDR-L3 puede tener por lo menos una sustitución del aminoácido, con la condición de que el agente de unión conserve la especificidad de unión de CDR no-sustituido. La porción sin-CDR del agente de unión puede ser una molécula sin proteína, en donde el agente de unión entrecruza la unión de un anticuerpo descrito en la presente a esclerostina y/o esclerostina neutralizada. La porción sin-CDR del agente de unión puede ser una molécula sin proteína en la cual el agente de unión exhibe un patrón de unión similar a los péptidos de esclerostina humana en un "ensayo de unión de la competición de epítope del péptido de esclerostina humana" como el exhibido por al menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D, Ab-1, Ab-2, Ab-3, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-11, Ab-12, Ab-13, Ab-14, Ab-15, Ab-16, Ab-17, Ab-18, Ab-19, Ab- 20, Ab-21, Ab-22, Ab-23 y Ab-24, y/o esclerostina neutralizada. La porción sin-CDR del agente de unión puede componerse de aminoácidos, en donde el agente de unión es una proteína de unión recombinante o un péptido sintético, y la proteína de unión recombinante entrecruza la unión de un anticuerpo descrito en la presente a esclerostina y/o esclerostina neutralizada. La porción sin-CDR del agente de unión puede componerse de aminoácidos, en donde el agente de unión es una proteína de unión recombinante, y la proteína de unión recombinante exhibe un patrón de unión similar a los péptidos de esclerostina humana en el ensayo de unión de la competición de epítope del péptido de esclerostina humana (descrito más adelante) como el exhibido por al menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D, Ab-1, Ab-2, Ab-3, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-11, Ab-12, Ab-13, Ab-14, Ab-15, Ab-16, Ab-17, Ab-18, Ab-19, Ab-20, Ab-21, Ab-22, Ab-23 y Ab-24, y/o esclerostina neutralizada. Donde un anticuerpo comprende uno o más de CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 y CDR-L3 como se describe antes, puede obtenerse por la expresión de una célula hospedadoras que contiene la codificación del ADN para estas secuencias. Una codificación de ADN para cada secuencia de CDR puede determinarse en base de la secuencia del aminoácido del CDR y sintetizarse junto con cualquier soporte de región variable del anticuerpo deseado y secuencias de ADN de la región constante utilizando técnicas de síntesis del oligonucleótido, mutagénesis de sitio-dirigido y técnicas de la reacción en cadena de polimerasa (PCR) como sean apropiadas. La codificación del ADN para los soportes de región variable y regiones constantes está ampliamente disponible para los experto en la técnica a partir de bases de datos de secuencias genéticas tal como GenBank®. Cada uno de los CDRs mencionados anteriormente se localizan normalmente en un soporte de región variable en las posiciones 31-35 (CDR-H1), 50-65 (CDR-H2) y 95-102 (CDR-H3) de la cadena pesada y las posiciones 24-34 (CDR-L1), 50-56 (CDR-L2) y 89-97 (CDR-L3) de la cadena ligera de acuerdo al sistema de numeración de Kabat (Kabat y colaboradores, 1987 in Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Department of Health and Human Services, NIH, USA). Una vez sintetizado, el ADN que codifica un anticuerpo de la invención o fragmentos del mismo pueda propagarse y expresarse de acuerdo a cualquiera de una variedad de procedimientos bien conocidos para la escisión, ligadura, transformación y transfección del ácido nucleico usando cualquier número de vectores de expresión conocidos. Así, en ciertas modalidades la expresión de un fragmento de anticuerpo puede preferirse en un huésped procariótico, tal como Escherichia coli (ver, por ejemplo, Pluckthun y colaboradores, 1989 Methods Enzymol. 178:497-515). En ciertas otras modalidades, la expresión del anticuerpo o un fragmento del mismo puede preferirse en una célula hospedadoras eucariótica, incluyendo levadura (por ejemplo, Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, y Pichia pastoris), células animales (incluyendo células mamíferas) o células de plantas. Los ejemplos de células animales adecuados incluyen, pero no se limitan a, mieloma (tal como una línea NSO de ratón), COS, CHO, o células de hibridoma. Los ejemplos de las células de plantas incluyen células de tabaco, maíz, soja y arroz.

Uno o más vectores de expresión replicables que contienen la ADN que codifica una región variable y/o constante del anticuerpo pueden prepararse y usarse para transformar una línea celular apropiada, por ejemplo, una línea celular de mieloma no producida, tal como una línea NSO de ratón o una bacteria, tal como E. coli, en la cual la producción del anticuerpo ocurrirá. Para obtener la transcripción y traducción eficientes, la secuencia de ADN en cada vector debe incluir secuencia reguladora apropiada, particularmente un promotor y secuencia líder operativamente ligada a la secuencia de dominio variable. Los métodos particulares para producir anticuerpos de esta manera son generalmente bien conocido y utilizados rutinariamente. Por ejemplo, los procedimientos de biología molecular básicos son descritos por Maníatis y colaboradores (Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2a ed., Cold Spring Harbor Laboratory, New York, 1989; ver también Maniatis y colaboradores, 3a ed., Cold Spring Harbor Laboratory, New York, (2001)). La secuenciación del ADN puede realizarse como se describe en Sanger y colaboradores (PNAS 74:5463, (1977)) y el manual de secuenciación de pie de Amersham International, y el sitio de mutagénesis dirigida pueden realizarse de acuerdo a los métodos conocidos en la técnica (Kramer y colaboradores, Nucleic Acids Res. 12:9441, (1984); Kunkel Proc. Nati. Acad. Sci. USA 82:488-92 (1985); Kunkel y colaboradores, Methods in Enzymol. 154:367-82 (1987); the Anglian Biotec nology Ltd handbook). Además, las numerosas publicaciones describen técnicas adecuadas para la preparación de anticuerpos por la manipulación del ADN, creación de vectores de expresión y transformación y cultivo de células apropiadas (Mountain A and Adair, J R in Biotechnology and Genetic Engineering Reviews (ed. Tombs, M P, 10, Capítulo 1, 1992, Intercept, Andover, UK); "Current Protocols in Molecular Biology", 1999, F.M. Ausubel (ed.), Wiley I nterscience, New York). Donde se desea mejorar la afinidad de anticuerpos de acuerdo a la invención que contiene uno o más de los CDRs anteriormente mencionados puede obtenerse por un número de protocolos de maduración de afinidad incluyendo mantener los CDRs (Yang y colaboradores, J. Mol. Biol., 254, 392-403, 1995), reestructuración de cadena (Marks y colaboradores, Bio/Technology, 10, 779-783, 1992), uso de las cepas de mutación de E. coli. (Low y colaboradores, J. Mol Biol, 250, 350-368, 1996), reestructuración del ADN (Patten y colaboradores, Curr. Opin. Biotechnol, 8, 724-733, 1997), exhibición del fago (Thompson y colaboradores, J. Mol Biol, 256, 7-88, 1996) y PCR sexual (Crameri, y colaboradores, Nature, 391, 288-291, 1998). Todos estos métodos de maduración de afinidad son discutidos por Vaughan y colaboradores (Nature Biotechnology, 16, 535-539, 1998). Otros anticuerpos de acuerdo a la invención pueden obtenerse por inmunización convencional y procedimientos de fusión celular como se describes en la presente y conocidos en la técnica. Los anticuerpos monoclonal de la invención pueden generarse usando una variedad de técnicas conocidas. En general, los anticuerpos monoclonales que unen a los antígenos específicos puede obtenerse por métodos conocidos por los experto en la técnica (ver, por ejemplo, Kohler y colaboradores, Nature 256:495, 1975; Coligan y colaboradores (eds.), Current Protocols in Immunology, 1:2.5.12.6.7 (John Wiley & Sons 1991); Patentes Norteamericanas Nos. RE 32,011, 4,902,614, 4,543,439 y 4,411,993; Monoclonal Antibodies, Hybridomas: A New Dimensión in Biológica! Analyses, Plenum Press, Kennett, McKearn, and Bechtol (eds.) (1980); and Antibodies: A Laboratory Manual, Harlow and Lañe (eds.), Cold Spring Harbor Laboratory Press (1988); Picksley y colaboradores, "Production of monoclonal antibodies against proteins expressed in E. coli," in DNA Cloning 2: Expression Systems, 2a Edición, Glover y colaboradores (eds.), página 93 (Oxford University Press 1995)). Los fragmentos de anticuerpo pueden derivarse de los mismos usando cualquier técnica estándar adecuada tal como digestión proteolítica, u opcionalmente, por digestión proteolítica (por ejemplo, usando papaína o pepsina) seguido por la reducción ligera de enlaces de disulfuro y alquilación. Alternativamente, tales fragmentos pueden también generarse por técnicas de ingeniería genética recombinante como se describe en la presente.

Los anticuerpos monoclonales pueden obtenerse inyectando un animal, por ejemplo, una rata, hámster, conejo o preferiblemente un ratón, incluyendo por ejemplo un transgénico o knock-out, como se conoce en la técnica, con un inmunógeno que comprende esclerostina humana de la SEC ID NO:1, o un fragmento del mismo, de acuerdo a los métodos conocidos en la técnica y descritos en la presente. La presencia de la producción del anticuerpo específica puede supervisarse después de la inyección inicial y/o después de una inyección de refuerzo para obtener una muestra de suero y detectar la presencia de un anticuerpo que une a la esclerostina humana o péptido usando cualquier de varios métodos de inmunodetección conocidos en la técnica y descritos en la presente. A partir de animales que producen los anticuerpos deseados, las células linfoides, más comúnmente células del nodulo del bazo o linfático, se eliminan para obtener linfocitos B. Los linfocitos B entonces se fusionan con un de asociado de fusión de células del mieloma sensibilizadas con fármaco, preferiblemente uno que sea singénico con el animal inmunizado y que tenga opcionalmente otras propiedades deseables (por ejemplo, inhabilidad para expresar productos del gen Ig endógenos, por ejemplo, P3X63 -Ag 8.653 (ATCC No. CRL 1580); NSO, SP20) para producir hibridomas, que son líneas celulares eucarióticas inmortales. Las células linfoides (por ejemplo, del bazo) y las células del mieloma pueden combinarse por algunos minutos con un agente promotor de fusión de la membrana, tal como polietilenglicol o un detergente no iónico, y después colocarse en placas a densidad baja en un medio selectivo que soporta el crecimiento de las células del hibridoma pero no las células del mieloma no fusionadas. Un medio de selección preferido es HAT (hipoxantina, aminopterina, timidina). Después de un tiempo suficiente, generalmente se observan aproximadamente una a dos semanas, las colonias celulares. Se aislan las colonias únicas, y los anticuerpos se producen para que las células puedan probarse para la actividad de unión a esclerostina humana, usando una variedad de inmunoensayos conocidos en la técnica y descritos en la presente. Los hibridomas son clonados (por ejemplo, por clonación de dilusión limitada o por aislamiento de placa de agar blanda) y se seleccionan y cultivan los clones positivos que reproducen un anticuerpo específico para esclerostina. Los anticuerpos monoclonal de los cultivos del hibridoma pueden aislarse de los sobrenadantes de los cultivos del hibridoma. Un método alternativo para la producción de un anticuerpo monoclonal de murino es inyectar las células del hibridoma en la cavidad peritoneal de un ratón singénico, por ejemplo, un ratón que se ha tratado (por ejemplo, pristana-imprimada) para promover la formación del fluido de ascitis que contiene el anticuerpo monoclonal. Los anticuerpos monoclonales pueden aislarse y purificarse por una variedad de técnicas bien establecidas. Tales técnicas de aislamiento incluyen cromatografía de afinidad con Proteína A Sefarosa, cromatografía por exclusión de tamaño, y cromatografía de intercambio iónico (ver, por ejemplo, Coligan en las páginas 2.7.1-2.7.12 y páginas 2.9.1-2.9.3; Baines y colaboradores, "Purification of Immunoglobulin G (IgG)," ¡n Methods in Molecular Biology, Vol. 10, páginas 79-104 (The Humana Press, Inc. 1992)). Los anticuerpos monoclonales pueden purificarse por cromatografía de afinidad usando un ligando apropiado seleccionado basado en las propiedades particulares del anticuerpo (por ejemplo, isotipo de cadena pesada o ligera, especificidad de unión, etc.). Los ejemplos de un ligando adecuado, inmovilizado en un soporte sólido, incluye la proteína A, proteína G, un anticuerpo de región anticonstante (cadena ligera o cadena pesada), un anticuerpo anti-idiotipo, y una proteína de unión TGF-beta, o fragmento o variante del mismo. Un anticuerpo de la presente invención puede también ser un anticuerpo monoclonal humano. Los anticuerpos monoclonales humanos pueden generarse por cualquier número de técnicas con las cuales los que tienen habilidad ordinaria en la técnica serán familiares. Tales métodos incluyen, pero no se limitan a, transformación del Virus de Epstein Barr (EBV) de células de sangre periférica humanas (por ejemplo, que contienen linfocitos B), inmunización in vitro de las células B humanas, fusión de células del bazo de ratones transgénicos inmunizados que llevan genes de inmunoglobulina humanos insertados, aislamiento de bibliotecas en fago de región V de la inmunoglobulina humana, u otros procedimientos como se conocen en la técnica y basados en la descripción en la presente. Por ejemplo, los anticuerpos monocionaies humanos pueden obtenerse de ratones transgénicos que se han diseñado para producir anticuerpos humanos específicos en respuesta a desafío antigénico. Los métodos para obtener anticuerpos humanos a partir de ratones transgénicos se describen, por ejemplo, por Green y colaboradores, Nature Genet. 7:13, 1994; Lonberg y colaboradores, Nature 368:856, 1994; Taylor y colaboradores, Int. Immun. 6:579, 1994; Patente Norteamericana No. 5,877,397; Bruggemann y colaboradores, 1997 Curr. Opin. Biotechnol. 8.455-58; Jakobovits y colaboradores, 1995 Ann. N Y. Acad. Sci. 764:525-35. En esta técnica, los elementos del lugar de cadena pesada y ligera humana se introducen en cepas de ratones derivados de líneas celulares de raíz embriónica que contienen interrupciones marcadas de los loci de cadena pesada y cadena ligera endógenos (ver también Bruggemann y colaboradores, Curr. Opin. Biotechnol. 8:455-58 (1997)). Por ejemplo, los transgenes de inmunoglobulina humana pueden ser constructos de mini-gen, o transloci en cromosomas artificiales de levadura, que experimentan la reestructuración del ADN de célula B específico e hipermutación en el tejido linfoide de ratón. Los anticuerpos monocionaies humanos pueden obtenerse inmunizando ratones transgénicos, que pueden entonces producir anticuerpos humanos específicos para la esclerostina. Las células linfoides de los ratones transgénico inmunizados pueden utilizarse para producir hibridomas que secretan anticuerpos humanos de acuerdo a los métodos descritos en la presente. El suero policlonal que contiene anticuerpos humanos puede también obtenerse de la sangre de los animales inmunizados. Otro método para generar anticuerpos humanos de la invención incluye células de sangre periférica humana inmortalizada por transformación de EBV. Ver, por ejemplo, Patente Norteamericana No. 4,464,456. Tal línea celular B inmortalizada (o línea celular linfoblastoide) que produce un anticuerpo monoclonal que une específicamente a la esclerostina puede identificarse por métodos de inmunodetección como se proporciona en la presente, por ejemplo, un ELISA, y después aislar con técnicas de clonación estándares. La estabilidad de la línea celular de linfoblastoide que produce un anticuerpo anti-esclerostina puede mejorarse fusionando la línea celular transformada con un mieloma murino para producir una línea celular híbrida de ratón-humana de acuerdo a los métodos conocidos en la técnica (ver, por ejemplo, Glasky y colaboradores, Hybridoma 8:377-89 (1989)). Aún otro método para generar anticuerpos monoclonales humanos es la inmunización in vitro, que incluye imprimar células B de esplénicas humanas con esclerostina humana, seguido por la fusión de células B imprimadas con un asociado de fusión heterohíbrida. Ver, por ejemplo, Boerner y colaboradores, 1991 J. Immunol. 147:86-95. En ciertas modalidades, se selecciona una célula B que puede producir un anticuerpo de esclerostina anti-humano y las regiones variables de cadena ligera y cadena pesada se clonan de la célula B de acuerdo a técnicas biológicas moleculares conocidas en la técnica (documento WO 92/02551; Patente Norteamericana 5,627,052; Babcook y colaboradores, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 93:7843-48 (1996)) y descritas en la presente. Las células B de un animal inmunizado pueden aislarse del bazo, nodulo linfático, o muestra de sangre periférica seleccionando una célula que es producida en un anticuerpo que une específicamente a la esclerostina. Las células B pueden también aislarse de humanos, por ejemplo, de una muestra de sangre periférica. Los métodos para detectar solo células B que producen un anticuerpo con la especificidad deseada son bien conocidos en la técnica, por ejemplo, por formación de placa, clasificación de célula activada por fluorescencia, estimulación in vitro seguida por detección del anticuerpo específico, y similares. Los métodos para la selección de células B que producen el anticuerpo específico incluyen, por ejemplo, preparar una sola suspensión celular de células B en agar blando que contiene esclerostina humana. La unión del anticuerpo específico producido por la célula B en el antígeno resulta en la formación de un complejo, que puede ser visible como un inmunoprecipitado. Después se seleccionan las células B que producen el anticuerpo deseado, los genes del anticuerpo específico pueden reproducirse aislando y amplificando el ADN o ARNm de acuerdo a los métodos conocidos en la técnica y descritos en la presente. Un método adicional para obtener los anticuerpos de la invención es por exhibición del fago. Ver, por ejemplo, Winter y colaboradores, 1994 Annu. Rev. Immunol. 12:433-55; Burton y colaboradores, 1994 Adv. Immunol. 57:191-280. Las bibliotecas combinatorias del gen de región variable de inmunoglobulina humana o murina pueden crearse en vectores fago que pueden identificarse para seleccionar los fragmentos Ig (Fab, Fv, sFv, o multímeros del mismo) que unen específicamente a la proteína de unión TGF-beta o variante o fragmento de los mismos. Ver, por ejemplo, Patente Norteamericana No. 5,223,409; Huse y colaboradores, 1989 Science 246:1275-81; Sastry y colaboradores, Proc. Nati Acad. Sci. USA 86:5728-32 (1989); Alting-Mees y colaboradores, Strategies in Molecular Biology 3:1-9 (1990); Kang y colaboradores, 1991 Proc. Nati. Acad. Sci. USA 88:4363-66; Hoogenboom y colaboradores, 1992 J. Molec. Biol. 227:381-388; Schlebusch y colaboradores, 1997 Hybridoma 16.47-52 y referencias citadas en la presente. Por ejemplo, una biblioteca que contiene una pluralidad de secuencias del polin ucleótido que codifican los fragmentos de región variable de Ig puede insertarse en el genoma de un bacteriófago filamentoso, tal como M 3 o una variante del mismo, en el marco con la secuencia que codifica una proteína de revestimiento de fago. Una proteína de fusión puede ser una fusión de la proteína de revestimiento con el dominio de región variable de cadena ligera y/o con el dominio de región variable de cadena pesada. De acuerdo a ciertas modalidades, los fragmentos Fab de inmunoglobulina pueden también exhibirse en una partícula de fago (ver, por ejemplo, Patente Norteamericana No. 5,698,426). Las bibliotecas de expresión de ADNc de inmunoglobulina de cadena pesada y ligera pueden también prepararse en fago lambda, por ejemplo, utilizando vectores ??????????3?™(?) y ???????????ß?™ (L) (Stratagene, La Jolla, California). Brevemente, el ARNm se aisla de una población de cilulas B, y se utiliza para crear bibliotecas de expresión de ADNc de inmunoglobulina de cadena pesada y ligera en los vectores ???"???????3?™(?) y ???t?G?????3?™(?). Estos vectores pueden identificarse individualmente o co-expresarse para formar fragmentos Fab o anticuerpos (ver Huse y colaboradores, supra; ver también Sastry y colaboradores, supra). Las placas positivas pueden convertirse posteriormente a un plásmido no-lítico que permite la expresión de nivel alto de fragmentos del anticuerpo monoclonal de E. coli.

En una modalidad, en un hibridoma las regiones variables de un gen que expresa un anticuerpo monoclonal de interés se amplifican usando cebadores de nucleótido. Estos cebadores pueden sintetizarse por un experto en la técnica, o pueden adquirirse de fuentes disponible comercialmente (Ver, por ejemplo, Stratagene (La Jolla, California), que vende cebadores para regiones variables de ratón y humano incluyendo, entre otros, cebador para regiones VHa, VHb, VHc, VH , CHi , VL y CL). Estos cebadores pueden utilizarse para amplificar las regiones variables de cadena pesada o ligera, que pueden entonces insertarse en vectores tal como lmmunoZAP™H o lmmunoZAP™L (Stratagene) , respectivamente. Estos vectores pueden entonces introducirse en E. coli, levadura, o sistemas basados en mamíferos para expresión. Las cantidades mayores de una proteína de cadena sencilla que contienen una fusión de los dominios VH y VL pueden producirse usando estos métodos (ver Bird y colaboradores, Science 242:423-426, 1988). Una vez que las células que producen anticuerpos de acuerdo a la invención se han obtenido usando cualquiera de las técnicas de inmunización descrita antes y otras, los genes del anticuerpo específicos pueden reproducirse aislando y amplificando el ADN o ARNm de los mismos de acuerdo a procedimientos estándares como se describe en la presente. Los anticuerpos producidos de los mismos pueden secuenciarse y los CDRs identificados y la codificación del ADN para los CDRs pueden manipularse como se describe previamente para generar otros anticuerpos de acuerdo a la invención. Preferiblemente los agentes de unión específicamente unen la esclerostina. Como con todos los agentes de unión y ensayos de unión, uno experto en esta técnica reconocerá que varias porciones para las cuales un agente de unión no debe detectablemente unirse por ser terapéuticamente efectivo y adecuado serán exhaustivos e imprácticos de enumerarse. Por lo tanto, para un agente de unión descrito en la presente, el término "específicamente unidos" se refiere a la capacidad de un agente de unión para unir a la esclerostina, preferiblemente esclerostina humana, con mayor afinidad que se une a una proteína control no relacionada. Preferiblemente la proteína control es una lisozima de clara de huevo de gallina. Preferiblemente los agentes de unión unen a la esclerostina con una afinidad de por lo menos 50, 100, 250, 500, 1000 o 10,000 veces mayor que la afinidad para una proteína control. Un agente de unión puede tener una afinidad de unión para la esclerostina humana de menor que o igual a 1 x 10"7M, menor que o igual a 1 x 10"8M, menor que o igual a 1 x 10"9M, menor que o igual a 1 x 10"10M, menor que o igual a 1 x 10'1 M, o menor que o igual a 1 a x 10"12M. La afinidad puede determinarse por un ensayo de ELISA de afinidad. En ciertas modalidades, la afinidad puede determinarse por un ensayo en BIAcore. En ciertas modalidades, la afinidad puede determinarse por un método cinético. En ciertas modalidades, la afinidad puede determinarse por un método de equilibrio/solución. Tales métodos se describen en detalle adicional en la presente o se conocen en la técnica. Los agentes de unión de esclerostina de la presente invención preferiblemente modulan la función de la esclerostina en el ensayo basado en células descrito en la presente y/o el ensayo in vivo descrito en la presente y/o unido a uno o más de los epítopes descritos en la presente y/o entrecruzando la unión de uno de los anticuerpos descritos en esta solicitud y/o entrecruzados de esclerostina de unión por uno de los anticuerpos descritos en esta solicitud. Por consiguiente tales agentes de unión pueden identificarse usando los ensayos descritos en la presente. En ciertas modalidades, los agentes de unión son generados por los primeros anticuerpos de identificación que unen a uno más de los epítopes proporcionados en la presente y/o neutralizados en los ensayos basados en células y/o in vivo descritos en la presente y/o entrecruzar los anticuerpos descritos en esta solicitud y/o entrecruzado de la esclerostina de unión por uno de los anticuerpos descritos en esta solicitud. Las regiones de CDR de estos anticuerpos entonces se utilizan para insertarse en soportes biocompatible apropiados para generar agentes de unión de esclerostina. La porción sin-CDR del agente de unión puede componerse de aminoácidos, o puede ser una molécula sin proteína. Los ensayos descritos en la presente permiten la caracterización de agentes de unión. Preferiblemente los agentes de unión de la presente invención son anticuerpos como se define en la presente. Se entenderá por el experto en la técnica que algunas proteínas, tal como anticuerpos, pueden experimentar una variedad de modificaciones postraducción. El tipo y grado de estas modificaciones depende a menudo de la línea celular de la célula hospedadora usada para expresar la proteína así como las condiciones del cultivo. Tales modificaciones pueden incluir variaciones en la glicosilación, oxidación de metionina, formación de dicetopiperizina, isomerización de aspartato y desamidación de asparagina. Una modificación frecuente es la pérdida de un residuo básico de carboxi-terminal (tal como Usina o arginina) debido a la acción de la carboxipeptidasas (como se describe en Harris, RJ. Journal of Chromatography 705:129-134, 1995). Los anticuerpos designados como Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D y Ab- se describen más adelante. "HC" se refiere a la cadena pesada y "LC" se refiere a la cadena ligera. Para algunos anticuerpos más adelante, los CDRs están encajonadas-sombreadas y las regiones (C) constantes se muestran en cursivas y negritas. Ab-D El anticuerpo D (también designado en la presente como Ab-D y Mab-D) es un anticuerpo de ratón que exhibe afinidad alta que une a la esclerostina. El patrón de unión BIAcore de Ab-D se muestra en la Figura 18. La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de cadena ligera del Ab-D: 1 DVQMIQSPSS LSASLGDIVT MTCQASQGTS INLNWFQQKP GKAPKLLIYG 51 SSNLElGVPS RFSGSRYGTD FTLTISSLED EDLATYFCLQ HSYLPYTFGG 101 GTKLE I KJRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA SVVCFLNNFY PKDINVKWKI 151 DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT LTKDEYERHN SYTCEATKT 201 STSPIVKSFN RNEC (SEC ID N0 7) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-D es como sigue: 1 GATGTCCAGA TGATTCAGTC TCCATCCTCC CTGTCTGCAT CTTTGGGAGA 51 CATAGTCACC ATGACTTGCC AGGCAAGTCA GGGCACTAGC ATTAATTTAA 101 ACTGGTTTCA GCAAAAACCA GGGAAGGCTC CTAAGCTCCT GATCTATGGT 151 TCAAGCAACT TGGAAGATGG GGTCCCATCA AGGTTCAGTG GCAGTAGATA 201 TGGGACAGAT TTCACTCTCA CCATCAGCAG CCTGGAGGAT GAAGATCTGG 251 CAACTTATTT CTGTCTACAA CATAGTTATC TCCCGTACAC GTTCGGAGGG 301 GGG ACCAAGC TGGAAATAAA ACGGGCTGAT GCTGCACCAA CTGTATCCAT 351 CTTCCCACCA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC TCAGTCGTGT 401 GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA GTGGAAGATT 451 GATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA CTGATCAGGA 501 CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG TTGACCAAGG 551 ACGAGTATGA ACGAC ATAAC AGCTATACCT GTGAGGCCAC TCACAAG ACA 601 TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGG AATGAGT GTTAG (SEC ID NO:8) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-D incluye el péptido señal es como sigue: 1 MNTRAPAEFL GFLLLWFLGA RCDVQM IQSP SSLSASLGDI VTMTCQ ASQG 51 TSINLNWFQQ KPGKAPKLLI YGSSN LEDGV PSRFSGSRYG TDFTLTISSL 101 EDEDLATYFC LQHSILPYTF GGGTKLEIKR ADAAPTVSIF PPSSEQLTSG 151 GASWCFLNN FYPKDINVKW KIDGSERQNG VLNS WTDQDS KDSTYSMSST 201 LTLTKDEYER HNSYTCEAT KTSTSPIVKS FNRNEC (SEC ID NO:9) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-D incluye la secuencia de codificación del péptido señal: 1 ATG AACACGA GGGCCCCTGC GGGTTCCTGT TGCTCTGGTT 51 TTTAGGTGCC AGATGTGATG TCAGTCTCCA TCCTCCCTGT 101 CTGCATCTTT GGGAGACATA CTTGCCAGGC AAGTCAGGGC 151 ACTAGCATTA ATTTAAACTG AAACCAGGGA AGGCTCCTAA 201 GCTCCTGATC TATGGTTCAA AGATGGGGTC CCATCAAGGT 251 TCAGTGGCAG TAG ATATGGG CTCTCACCAT CAGCAGCCTG 301 GAGGATGAAG ATCTGGCAAC CTACAAC ATA GTTATCTCCC 351 GTACACGTTC GGAGGGGGGA AATAAAACGG GCTGATGCTG 401 CACCAACTGT ATCCATCTTC GTGAGCAGTT AACATCTGGA 451 GGTGCCTCAG TCGTGTGCTT TTCTACCCCA AAGACATCAA 501 TGTCAAGTGG AAGATTGATG ACAAAATGGC GTCCTG AACA 551 GTTGGACTGA TCAGGACAGC CCTACAGCAT GAGCAGCACC 601 CTCACGTTGA CCAAGGACGA CATAACAGCT ATACCTGTGA 651 GGCCACTCAC AAGACATCAA CTTCACCCAT TGTCAAGAGC TTCAACAGGA 701 ATGAGTGTTA G (SEC ID NO:10) La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la cadena pesada de la HC del Ab-D es como sigue: 1 EVQLQQSGPE LVTPGASVKI SCKASGYTFT DHYMSWVKQS HGKSLEWIGD 51 '?? S G E WW' ÑIlFKG ATL TVDKSSSIAY M El RGLTSED SAVYYCARÜ 101 QGTLVTVSA>A KTTPPSVYPL APGSAAQTNS MVTLGCLVKG 151 YFPEPVTVTW NSGSLSSGVH TFPA VLQSDL YTLSSSVTVP SSTWPSETVT 201 CNVAHPASST KVDKKIVPRD CGCKPCICTV PEVSSVFIFP PKPKDVLTIT 251 LTPKVTCWV DISKDDPEVQ FSWFVDDVEV HTAQTQPREE QFNSTFRSVS 301 ELPIMHQDWL NGKEFKCRVN SPAFPAPIEK TISKTKGRPK APQVYTIPPP 351 KEQMAKDKVS LTCMITDFFP EDITVEWQWN GQPAENYKNT QPIMDTDGSY 401 FIYSKLNVQK SNWEAGNTFT CSVLHEGLHN HHTEKSLSHS PGK (SEC ID NO:11) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-D es: 1 GAGGTCCAGC TGCAACAGTC TGGACCTGAA CTGGTGACGC CTGGGGCTTC 51 AGTGAAGATA TCTTGTAAGG CTTCTGGATA CACATTCACT GACCACTACA 101 TGAGCTGGGT GAAGCAGAGT CATGGAAAAA GCCTTGAGTG GATTGGAGAT 151 ATTAATCCCT ATTCTGGTGA AACTACCTAC AACCAGAAGT TCAAGGGCAC 201 GGCCACATTG ACTGTAGACA AGTCTTCCAG TATAGCCTAC ATGGAGATCC 251 GCGGCCTGAC ATCTGAGGAC TCTGCAGTCT ATTACTGTGC AAGAGATGAT 301 TACGACGCCT CTCCGTTTGC TTACTGGGGC CAAGGGACTC TGGTCACTGT 351 CTCTGCAGCC AAAACGACAC CCCCATCTGT CTATCCACTG GCCCCTGGAT 401 CTGCTGCCCA AACTAACTCC ATGGTGACCC TGGGATGCCT GGTCAAGGGC 451 TATTTCCCTG AGCCAGTGAC AGTGACCTGG AACTCTGGAT CCCTGTCCAG 501 CGGTGTGCAC ACCTTCCCAG CTGTCCTGCA GTCTGACCTC TACACTCTGA 551 GCAGCTCAGT GACTGTCCCC TCCAGCACCT GGCCCAGCGA GACCGTCACC 601 TGCAACGTTG CCCACCCGGC AAGGTGGACA AGAAAATTGT 651 GCCCAGGGAT TGTGGTTGTA ATGTACAGTC CCAG AAGTAT 701 CATCTGTCTT CATCTTCCCC AGG ATGTGCT CACCATTACT 751 CTG ACTCCTA AGGTCACGTG GACATCAGCA AGGATGATCC 801 CGAGGTCCAG TTCAGCTGGT TGTGGAGGTG CACACAGCTC 851 AGACGCAACC CCGGGAGGAG GCACTTTCCG CTCAGTCAGT 901 GAACTTCCCA TCATGCACCA AATGGCAAGG AGTTCAAATG 951 CAGGGTCAAC AGTCCAGCTT CATCGAG AAA ACCATCTCCA 1001 AAACCAAAGG CAGACCGAAG TGTACACCAT TCCACCTCCC 1051 AAGGAGCAG A TGGCCAAGGA CTGACCTGCA TGATAAC AGA 1101 CTTCTTCCCT GAAGACATTA GCAGTGGAAT GGGCAGCCAG 1151 CGGAGAACTA CAAG AACACT TGG ACACAGA TGGCTCTTAC 1201 TTC ATCTAC A GCAAGCTCAA TGTGCAGAAG AGCAACTGGG AGGCAGGAAA 1251 TACTTTCACC TGCTCTGTGT TACATGAGGG CCTGCACAAC CACCATACTG 1301 AGAAGAGCCT CTCCCACTCT CCTGGTAAAT GA (SEC ID NO:12) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-D que incluye el péptido señal es: 1 MRCRWIFLFL LSGTAGVLSE VQLQQSGPEL VTPGASVKIS CKASG YTFTD 51 HIMSWVKQSH GKSLEWIGDI NPYSGETTYN QKFKGTATLT VDKSSSIAYM 101 El RGLTSEDS AVYYCARDDY DASPFAYWGQ GTLVTVSAAK TTPPSVYPLA 151 PGSAAQTNSM VTLGC LVKG Y FPEPVTVTWN SGSLSSGVHT FPAVLQSDLY 201 TLSSSVTVPS STWPSETVTC NVAHPASSTK VDKKIVPRDC GCKPCICTVP 251 EVSSVFIFPP KPKDVLTITL TPKVTCVWD ISKDDPEVQF SWFVDDVEVH 301 TAQTQPREEQ FNSTFRSVSE LP I M H Q DWLN GKEFKCRVNS PAFPAPIEKT 351 ISKTKGRPKA PQVYTIPPPK EQMAKDKVSL TCMITDFFPE DITVEWQWNG 401 QPAENYKNTQ PIMDTDGSYF IYSKLNVQKS NWEAG NTFTC SVLHEGLHNH 451 HTEKSLSHSP GK (SEC ID NO:13) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-D que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGAGATGCA GGTGGATCTT TCTCTTTCTC CTGTCAGGAA CTGCAGGTGT 51 CCTCTCTGAG GTCCAGCTGC AACAGTCTGG ACCTGAACTG GTGACGCCTG 101 GGGCTTCAGT GAAGATATCT TGTAAGGCTT CTGGATACAC ATTCACTGAC 151 CACTACATGA GCTGGGTGAA GCAGAGTCAT GGAAAAAGCC TTGAGTGGAT 201 TGG AGATATT AATCCCTATT CTGGTG AAAC TACCTACAAC CAGAAGTTCA 251 AGGGCACGGC CACATTGACT GTAGACAAGT CTTCCAGTAT AGCCTACATG 301 GAGATCCGCG GCCTGACATC TGAGGACTCT GCAGTCTATT ACTGTGCAAG 351 AGATG ATTAC GACGCCTCTC CGTTTGCTTA CTGGGGCCAA GGGACTCTGG 401 TCACTGTCTC TGCAGCCAAA ACGACACCCC CATCTGTCTA TCCACTGGCC 451 CCTGGATCTG CTGCCCAAAC TAACTCCATG GTGACCCTGG GATGCCTGGT 501 CAAGGGCTAT TTCCCTGAGC CAGTGACAGT GACCTGGAAC TCTGG ATCCC 551 TGTCCAGCGG TGTGCACACC TTCCCAGCTG TCCTGCAGTC TGACCTCTAC 601 ACTCTG AGCA GCTCAGTGAC TGTCCCCTCC AGCACCTGGC CCAGCGAGAC 651 CGTCACCTGC AACGTTGCCC ACCCGGCCAG CAGCACCAAG GTGGACAAGA 701 AAATTGTGCC CAGGG ATTGT GGTTGTAAGC CTTGCATATG TACAGTCCCA 751 GAAGTATCAT CTGTCTTCAT CTTCCCCCCA AAGCCCAAGG ATGTGCTCAC 801 CATTACTCTG ACTCCTAAGG TCACGTGTGT TGTGGTAGAC ATCAGCAAGG 851 ATGATCCCGA GGTCCAGTTC AGCTGGTTTG TAGATGATGT GGAGGTGCAC 901 ACAGCTCAGA CGCAACCCCG GGAGG AGCAG TTCAACAGCA CTTTCCGCTC 951 AGTCAGTGAA CTTCCCATCA TGCACCAGGA CTGGCTCAAT GGCAAGGAGT 1001 TCAAATGCAG GGTCAAC AGT CCAGCTTTCC CTGCCCCCAT CGAGAAAACC 1051 ATCTCCAAAA CCAAAGGCAG ACCGAAGGCT CCACAGGTGT ACACCATTCC 1101 ACCTCCCAAG GAGCAGATGG CCAAGG ATAA AGTCAGTCTG ACCTGCATGA 1151 TAACAGACTT CTTCCCTGAA GACATTACTG TGGAGTGGCA GTGGAATGGG 1201 CAGCCAGCGG AGAACTACAA GAACACTCAG CCCATCATGG ACACAGATGG 1251 CTCTTACTTC ATCTACAGCA AGCTCAATGT GCAGAAGAGC AACTGGGAGG 1301 CAGGAAATAC TTTCACCTGC TCTGTGTTAC ATGAGGGCCT GCACAACCAC 1351 CATACTGAGA AGAGCCTCTC CCACTCTCCT GGTAAATGA (SEC ID NO:14) Las secuencias de CDR (región de determinación de complementariedad) en la región variable de la cadena pesada del Ab-D son como sigue: CDR-H1: DHYMS (SEC ID NO:39) CDR-H2: DINPYSGETTYNQKFKG (SEC ID NO:40) CDR-H3: DDYDASPFAY (SEC ID NO:41) Las secuencias de CDR de región variable de cadena ligera del Ab-D son: CDR-L1: QASQGTSINLN (SEC ID NO:42) CDR-L2: GSSNLED (SEC ID NO:43) CDR-L3: LQHSILPYT (SEC ID NO:44) Ab-C El anticuerpo C (también referido en la presente como Ab-C y Mab-C) es un anticuerpo de ratón que exhibe una unión de afinidad alta a la esclerostina. El patrón de unión BIAcore del Ab-C se muestra en la figura 17. La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de cadena ligera del Ab-C es como sigue: 1 DGVLTQSPAS LTVSLGLRAT ISCKASQSVD YDGDSYMNWY QQKPGQPPKL 51 LIYAASNLES GIPARFSGNG SGTDFTLNIH PVEEEDAVTY YCQQSNEDPW 101 TFGGGTKLEI KRADAAPTVS IFPPSSEQLT SGGASWCFL NNFYPKDINV 151 KWKIDGSERQ NGVLNSWTDQ DSKDSTYSMS STLTLTKDEYE RHNSYTCEA 201 THKTSTSPIV KSFNRNEC (SEC ID N0 15) La secuencia del ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-C es: 1 G ACATTGTGC TG ACCCAATC TCCAGCTTCT TTG ACTGTGT CTCTAGGCCT 51 GAGGGCCACC ATCTCCTGCA AGGCCAGCC A AAGTGTTGAT TATGATGGTG 101 ATAGTTATAT GAACTGGTAC CAGCAGAAAC CAGGACAGCC ACCCAAACTC 151 CTCATCTATG CTGCATCCAA TCTAGAATCT GGGATCCCAG CCAGGTTTAG 201 TGGCAATGGG TCTGGG ACAG ACTTCACCCT CAACATCCAT CCTGTGGAGG 251 AGG AGGATGC TGTAACCTAT TACTGTCAAC AAAGTAATGA GGATCCGTGG 301 ACGTTCGGTG GAGGCACCAA GCTGGAAATC AAACGGGCTG ATGCTGCACC 351 AACTGTATCC ATCTTCCCAC CATCCAGTGA GCAGTTAACA TCTGGAGGTG 401 CCTCAGTCGT GTGCTTCTTG AACAACTTCT ACCCCAAAGA CATCAATGTC 451 AAGTGGAAGA TTGATGGCAG TGAACGACAA AATGGCGTCC TGAACAGTTG 501 GACTGATCAG GACAGCAAAG ACAGCACCTA CAGCATGAGC AGCACCCTCA 551 CGTTGACCAA GGACGAGTAT GAACGACATA ACAGCTATAC CTGTGAGGCC 601 ACTCACAAGACATCAACTTC ACCCATTGTC AAGAGCTTCA ACAGGAATGA 651 GTGTTAG (SEC ID NO:16) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-C que incluye el péptido señal es: 1 METDTILLWV LLLWVPGSTG DIVLTQSPAS LTVSLGLRAT ISCKASQSVD 51 YDGDSYMNWY QQKPGQPPKL Ll YAASN LES GIPARFSGNG SGTDFTLN I H 101 PVEEEDAVTY YCQQSNEDPW TFGGGTKLEI KRADAAPTVS IFPPSSEQLT 151 SGGASWCFL NNFYPKDINV KWKI DGSERQ NGVLNSWTDQ DSKDSTYSMS 201 STLTLTKDEY ERHNSYTCEA TKTSTSPIV KSFNRNEC (SEC ID NO:17) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-C que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGAGACAG ACACAATCCT GCTATGGGTG CTGCTGCTCT GGGTTCCAGG 51 CTCCACTGGT GACATTGTGC TGACCCAATC TCCAGCTTCT TTGACTGTGT 101 CTCTAGGCCT GAGGGCCACC ATCTCCTGCA AGGCCAGCCA AAGTGTTGAT 151 TATGATGGTG ATAGTTATAT GAACTGGTAC CAGCAGAAAC CAGGACAGCC 201 ACCCAAACTC CTCATCTATG CTGCATCCAA TCTAGAATCT GGGATCCCAG 251 CC AGGTTTAG TGGCAATGGG TCTGGG ACAG ACTTCACCCT CAACATCCAT 301 CCTGTGGAGG AGGAGG ATGC TGTAACCTAT TACTGTCAAC AAAGTAATGA 351 GGATCCGTGG ACGTTCGGTG GAGGCACCAA GCTGGAAATC AAACGGGCTG 401 ATGCTGCACC AACTGTATCC ATCTTCCCAC CATCCAGTGA GCAGTTAACA 451 TCTGGAGGTG CCTCAGTCGT GTGCTTCTTG AACAACTTCT ACCCCAAAGA 501 CATCAATGTC AAGTGGAAG A TTGATGGCAG TGAACGACAA AATGGCGTCC 551 TGAACAGTTG GACTGATCAG GACAGCAAAG ACAGCACCTA CAGCATGAGC 601 AGCACCCTCA CGTTGACCAA GGACGAGTAT GAACGACATA ACAGCTATAC 651 CTGTGAGGCC ACTCACAAGA CATCAACTTC ACCCATTGTC AAGAGCTTCA 701 ACAGGAATGA GTGTTAG (SEC ID NO:18) Cadena Pesada del Ab-C La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de Ab-C HC es: 1 EVQLQQSGPE LVKPGTSVKM SCKASGYTFT DCYMNWVKQS HGKSLEWIGD 51 I NPFNGGTTY NQKFKGKATL TVDKSSSTAY MQLNSLTSDD SAVYYCARSH 101 YYFDGRVPWD AMDYWGQGTS VTVSSA 77P PSVYPLAPGS AAQTNSMVTL 151 GCLVKGYFPE PVTVTWNSGS LSSGVHTFPA VLQSDLYTLS SSVTVPSSTW 201 PSETVTCNVA HPASSTKVDK KWPRDCGCK PCICTVPEVS SVFIFPPKPK 251 DVLTITLTPK VTCVVVDISK DDPEVQFSWF VDDVEVH TAQ TQPREEQFNS 301 TFRSVSELPI MHQDWLNGKE FKCRVNSAAF PAPIEKTISK TKGRPKAPQV 351 YTIPPPKEQM AKDKVSLTCM ITDFFPEDIT VEWQWNGQPA ENYKNTQPIM 401 DTDGSYFIYS KLNVQKSNWE AGNTFTCSVL HEGLHNHHTE KSLSHSPGK (SEC ID N0 19) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-C es como sigue: 1 GAGGTCCAGC TGCAACAATC TGGACCTGAG CTGGTGAAGC CTGGGACTTC 51 AGTGAAGATG TCCTGTAAGG CTTCTGGATA CACATTCACT GACTGCTACA 101 TGAACTGGGT GAAGCAGAGC CATGGGAAGA GCCTTGAATG GATTGG AGAT 151 ATTAATCCTT TCAACGGTGG TACTACCTAC AACCAGAAGT TCAAGGGCAA 201 GGCCACATTG ACTGTAGACA AATCCTCCAG CACAGCCTAC ATGCAGCTCA 251 ACAGCCTGAC ATCTGACGAC TCTGCAGTCT ATTACTGTGC AAG ATCCCAT 301 TATTACTTCG ATGGTAGAGT CCCTTGGGAT GCTATGG ACT ACTGGGGTCA 351 AGG AACCTCA GTCACCGTCT CCTCAGCCAA AACGACACCC CCATCTGTCT 401 ATCCACTGGC CCCTGGATCT GCTGCCC AAA CTAACTCCAT GGTGACCCTG 451 GGATGCCTGG TCAAGGGCTA CCAGTGACAG TGACCTGGAA 501 CTCTGG ATCC CTGTCCAGCG CTTCCCAGCT GTCCTGCAGT 551 CTGACCTCTA CACTCTGAGC CTGTCCCCTC CAGCACCTGG 601 CCCAGCGAGA CCGTCACCTG CACCCGGCCA GCAGCACCAA 651 GGTGGACAAG AAAATTGTGC TGGTTGTAAG CCTTGCATAT 701 GTACAGTCCC AGAAGTATCA TCTTCCCCCC AAAGCCCAAG 751 GATGTGCTCA CCATTACTCT GTCACGTGTG TTGTGGTAGA 801 CATCAGCAAG GATGATCCCG CAGCTGGTTT GTAGATGATG 851 TGGAGGTGCA CACAGCTCAG GGGAGGAGCA GTTCAACAGC 901 ACTTTCCGCT CAGTCAGTGA ATGCACCAGG ACTGGCTCAA 951 TGGCAAGGAG TTCAAATGCA TGCAGCTTTC CCTGCCCCCA 1001 TCG AGAAAAC CATCTCCAAA GACCGAAGGC TCCACAGGTG 1051 TACACCATTC CACCTCCCAA GCCAAGGATA AAGTCAGTCT 1101 GACCTGCATG ATAACAGACT TCTTCCCTGA AGACATTACT GTGGAGTGGC 1151 AGTGG AATGG GCAGCCAGCG GAGAACTACA AGAACACTCA GCCCATCATG 1201 GACACAGATG GCTCTTACTT CATCTACAGC AAGCTCAATG TGCAGAAGAG 1251 CAACTGGGAG GCAGG AAATA CTTTCACCTG CTCTGTGTTA CATGAGGGCC 1301 TGCACAACCA CCATACTGAG AAGAGCCTCT CCCACTCTCC TGGTAAATGA (SEC ID NO:20) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-C que incluye el péptido señal es: 1 MGWNWI FLFL LSGTAG VYSE VQLQQSGPEL VKPGTSVKMS CKASGYTFTD 51 CYMNWVKQSH GKSLEWIGDI NPFNGGTTYN QKFKGKATLT VDKSSSTAYM 101 QLNSLTSDDS AVYYCARSH I YFDGRVPWDA MDYWGQGTSV TVSSAKTTPP 151 SVYPLAPGSA AQTNSMVTLG CLVKGYFPEP VTVTWNSGSL SSGVHTFPAV 201 LQSDLYTLSS SVTVPSSTWP SETVTCNVAH PASSTKVDKK IVPRDCGCKP 251 CICTVPEVSS VFIFPPKPKD VLTITLTPKV TCVWDISKD DPEVQFSWFV 301 DDVEVHTAQT QPREEQFNST FRSVSELPI M HQDWLNGKEF KCRVNSAAFP 351 APIEKTISKT KGRPKAPQVY TIPPPKEQMA KDKVSLTCM I TDFFPEDITV 401 EWQWNGQPAE NYKNTQPIMD TDGSYFIYSK LNVQKSNWEA GNTFTCSVLH 451 EGLHNHHTEK SLSHSPGK (SEC ID NO:21) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-C que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGGATGGA ACTGG ATCTT TCTCTTCCTC TTGTCAGGAA CTGCAGGTGT 51 CTACTCTGAG GTCCAGCTGC AACAATCTGG ACCTGAGCTG GTGAAGCCTG 101 GGACTTCAGT GAAG ATGTCC TGTAAGGCTT CTGGATACAC ATTCACTGAC 151 TGCTACATGA ACTGGGTGAA GCAGAGCCAT GGGAAGAGCC TTGAATGGAT 201 TGGAGATATT AATCCTTTCA ACGGTGGTAC TACCTACAAC CAGAAGTTCA 251 AGGGCAAGGC CACATTGACT GTAGACAAAT CCTCCAGCAC AGCCTACATG 301 CAGCTCAACA GCCTGACATC TGACGACTCT GCAGTCTATT ACTGTGCAAG 351 ATCCCATTAT TACTTCGATG GTAG AGTCCC TTGGGATGCT ATGGACTACT 401 GGGGTCAAGG AACCTCAGTC CAGCCAAAAC GACACCCCCA 451 TCTGTCTATC CACTGGCCCC GCCCAAACTA ACTCCATGGT 501 GACCCTGGGA TGCCTGGTCA CCCTGAGCCA GTGACAGTGA 551 CCTGGAACTC TGG ATCCCTG TGCACACCTT CCCAGCTGTC 601 CTGCAGTCTG ACCTCTACAC TCAGTGACTG TCCCCTCCAG 651 CACCTGGCCC AGCGAGACCG CGTTGCCCAC CCGGCCAGCA 701 GCACCAAGGT GGACAAG AAA GGGATTGTGG TTGTAAGCCT 751 TGCATATGTA CAGTCCCAGA GTCTTCATCT TCCCCCCAAA 801 GCCCAAGGAT GTGCTCACCA TCCTAAGGTC ACGTGTGTTG 851 TGGTAGACAT CAGCAAGGAT TCCAGTTCAG CTGGTTTGTA 901 GATGATGTGG AGGTGCACAC CAACCCCGGG AGGAGCAGTT 951 CAACAGCACT TTCCGCTCAG TCCCATCATG CACCAGGACT 1001 GGCTCAATGG CAAGGAGTTC TCAACAGTGC AGCTTTCCCT 1051 GCCCCCATCG AGAAAACCAT CTCCAAAACC AAAGGCAGAC CGAAGGCTCC 1101 ACAGGTGTAC ACCATTCCAC CTCCCAAGGA GCAG ATGGCC AAGGATAAAG 1151 TCAGTCTGAC CTGCATGATA ACAGACTTCT TCCCTGAAGA CATTACTGTG 1201 GAGTGGCAGT GGAATGGGCA GCCAGCGGAG AACTACAAGA ACACTCAGCC 1251 CATCATGGAC ACAGATGGCT CTTACTTCAT CTACAGCAAG CTCAATGTGC 1301 AGAAGAGCAA CTGGGAGGCA GGAAATACTT TCACCTGCTC TGTGTTACAT 1351 GAGGGCCTGC ACAACCACCA TACTGAGAAG AGCCTCTCCC ACTCTCCTGG 1401 TAAATGA (SEC ID NO:22) Las secuencias de CDR (región de determinación de complementariedad) en la región variable de la cadena pesada del Ab-C son como sigue: CDR-H1: DCYMN (SEC ID NO:45) CDR-H2: DINPFNGGTTY QKFKG (SEC ID NO:46) CDR-H3: SHIYFDGRVPWDAMDY (SEC ID NO:47) Las secuencias de CDR de región variable de cadena ligera del Ab-C son: CDR-L1: KASQSVDYDGDSYMN (SEC ID NO:48) CDR-L2: AASNLES (SEC ID NO:49) CDR-L3: QQSNEDPWT (SEC ID NO:50) Ab-A El anticuerpo A (también referido en la presente como Ab-A y Mab-A) es un anticuerpo quimérico de conejo-ratón que exhibe una unión de afinidad alta a la esclerostina. El patrón de unión BIAcore de Ab-A se muestra en la figura 15. Cadena ligera del Ab-A La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-C: 1 AQVLTQTPAS VSAAVGGTVT INCQSSQSVY DNNWLAjWFQQ KPGQPPKLLI 51 YD SD SGV PSRFSGSGSG TQFTLTISGV QCADAATYYC iGAY DVÍYA, 101 FGGGTEVWK RTDAAPTVSI FPPSSEQLTS GGASWCFLN NFYPKDINVK 151 WKIDGSERQN GVLNSWTDQD SKDSTYSMSS TLTLTKDEYE RHNSYTCEAT 201 HKTSTSPIVK SFNRNEC (SEC ID NO.23) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-C: 1 GCGCAAGTGC TGACCCAGAC TCCAGCCTCC GTGTCTGCAG CTGTGGGAGG 51 CACAGTCACC ATCAATTGCC AGTCCAGTCA GAGTGTTTAT GATAACAACT 101 GGTTAGCCTG GTTTCAGCAG AAACCAGGGC AGCCTCCCAA GCTCCTGATT 151 TATGATGCAT CCGATCTGGC ATCTGGGGTC CCATCGCGGT TCAGTGGCAG 201 TGG ATCTGGG ACACAGTTCA CTCTCACCAT CAGCGGCGTG CAGTGTGCCG 251 ATGCTGCCAC TTACTACTGT CAAGGCGCTT ATAATGATGT TATTTATGCT 301 TTCGGCGGAG GGACCGAGGT GGTGGTCAAA CGTACGG ATG CTGCACCAAC 351 TGTATCCATC TTCCCACCAT CCAGTGAGCA GTTAACATCT GGAGGTGCCT 401 CAGTCGTGTG CTTCTTG AAC AACTTCTACC CCAAAGACAT CAATGTCAAG 451 TGG AAGATTG ATGGCAGTGA ACG ACAAAAT GGCGTCCTGA ACAGTTGGAC 501 TGATCAGGAC AGCAAAGACA GCACCTACAG CATGAGCAGC ACCCTCACGT 551 TGACCAAGGA CGAGTATGAA CGACATAACA GCTATACCTG TGAGGCCACT 601 CACAAGACAT CAACTTCACC CATTGTCAAG AGCTTCAACA GGAATGAGTG 651 TTAG (SEC ID NO:24) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-C que incluye el péptido señal es: 1 MDTRAPTQLL GLLLLWLPGA TFAQ VLTQTP ASVSAAVGGT VTINCQSSQS 51 VYDNNWLAWF QQKPGQPPKL LIYDASDLAS GVPSRFSGSG SGTQFTLTIS 101 GVQCADAATY YCQGAYNDVI YAFGGGTEW VKRTDAAPTV SIFPPSSEQL 151 TSGGASWCF LNNFYPKDIN VKWKI DGSER QNGVLNSWTD QDSKDSTYSM 201 SSTLTLTKDE YERHNSYTCE ATKTSTSPI VKSFNRNEC (SEC ID NO:25) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-C que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACACGA GGGCCCCCAC TCAGCTGCTG GGGCTCCTGC TGCTCTGGCT 51 CCCAGGTGCC ACATTTGCGC AAGTGCTGAC CCAGACTCCA GCCTCCGTGT 101 CTGCAGCTGT GGGAGGCACA GTCACCATCA ATTGCCAGTC CAGTCAGAGT 151 GTTTATGATA ACAACTGGTT AGCCTGGTTT CAGCAGAAAC CAGGGCAGCC 201 TCCCAAGCTC CTG ATTTATG ATGCATCCGA TCTGGCATCT GGGGTCCCAT 251 CGCGGTTCAG TGGCAGTGGA TCTGGGACAC AGTTCACTCT CACCATCAGC 301 GGCGTGCAGT GTGCCGATGC TGCCACTTAC TACTGTCAAG GCGCTTATAA 351 TGATGTTATT TATGCTTTCG GCGGAGGGAC CGAGGTGGTG GTCAAACGTA 401 CGGATGCTGC ACCAACTGTA TCCATCTTCC CACCATCCAG TGAGCAGTTA 451 ACATCTGGAG GTGCCTCAGT CGTGTGCTTC TTGAACAACT TCTACCCCAA 501 AGACATCAAT GTCAAGTGGA AGATTGATGG CAGTGAACGA CAAAATGGCG 551 TCCTGAACAG TTGGACTGAT CAGG ACAGCA AAGACAGCAC CTACAGCATG 601 AGCAGCACCC TCACGTTGAC CAAGGACGAG TATGAACGAC ATAACAGCTA 651 TACCTGTGAG GCCACTCACA AGACATCAAC TTCACCCATT GTCAAGAGCT 701 TCAACAGGAA TGAGTGTTAG (SEC ID NO:26) La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de Ab-A HC es: 1 OSLEj¾G¾ Tgjf P'LTLT CTASGFSLSS YWMNWVRQAP GEGLEWIGTI 51 l l OYA i WAj RFTISR TSTTMDLKMT SLTTG DTARY FCARTONJ-WG 101 QGTLVTVSSA STKGPSVYPL APGSAAQTNS MVTLGCL VKG YFPEPVTVTW 151 NSGSLSSGVH TFPAVLQSDL YTLSSSVTVP SSTWPSETVT CNVAHPASST 201 KVDKKIVPRD CGCKPCICTV PEVSSVFIFP PKPKDVLTI TLTPKVTCVVV 251 DISKDDPEVQ FSWFVDDVEV HTAQTQPREE QFNSTFRSVS ELPIMHQDWL 301 NGKEFKCRVN SAAFPAPIEK TISKTKGRPK APQVYTIPPP KEQMAKDKVS 351 LTCMITDFFP EDITVEWQWN GQPAENYKNT QPIMNTNGSY FVYSKLNVQK 401 SNWEAGNTFT CSVLHEGLHN HHTEKSLSHS PGK (SEC ID NO:27) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de Ab-A HC es: 1 CAGTCGCTGG AGGAGTCCGG GGGTCGCCTG GTCACGCCTG GGACACCCCT 51 GACACTCACC TGCACAGCCT CTGGATTCTC CCTCAGTAGT TATTGGATG A 101 ACTGGGTCCG CCAGGCTCCA GGGGAGGGGC TGGAATGGAT CGG AACCATT 151 GATTCTGGTG GTAGGACGGA CTACGCGAGC TGGGCAAAAG GCCGATTCAC 201 CATCTCCAGA ACCTCGACTA CGATGGATCT GAAAATGACC AGTCTG ACGA 251 CCGGGGACAC GGCCCGTTAT TTCTGTGCCA GAAATTGGAA CTTGTGGGGC 301 CAAGGCACCC TCGTCACCGT CTCG AGCGCT TCTACAAAGG GCCCATCTGT 351 CTATCC ACTG GCCCCTGGAT CTGCTGCCCA AACTAACTCC ATGGTGACCC 401 TGGGATGCCT GGTCAAGGGC TATTTCCCTG AGCCAGTGAC AGTGACCTGG 451 AACTCTGGAT CCCTGTCCAG CGGTGTGCAC ACCTTCCCAG CTGTCCTGCA 501 GTCTGACCTC TACACTCTGA GCAGCTCAGT GACTGTCCCC TCCAGCACCT 551 GGCCCAGCGA GACCGTCACC TGCAACGTTG CCCACCCGGC CAGCAGCACC 601 AAGGTGGACA AGAAAATTGT GCCCAGGGAT TGTGGTTGTA AGCCTTGCAT 651 ATGTACAGTC CCAGAAGTAT CATCTGTCTT CATCTTCCCC CCAAAGCCCA 701 AGG ATGTGCT CACCATTACT CTGACTCCTA AGGTCACGTG TGTTGTGGTA 751 GACATCAGCA AGGATGATCC CGAGGTCCAG TTCAGCTGGT TTGTAGATGA 801 TGTGGAGGTG CACACAGCTC AGACGCAACC CCGGGAGGAG CAGTTCAACA 851 GCACTTTCCG CTCAGTCAGT GAACTTCCCA TCATGCACCA GGACTGGCTC 901 AATGGCAAGG AGTTCAAATG CAGGGTCAAC AGTGCAGCTT TCCCTGCCCC 951 CATCGAG AAA ACCATCTCCA AAACCAAAGG CAGACCGAAG GCTCCACAGG 1001 TGTACACCAT TCCACCTCCC AAGGAGCAGA TGGCCAAGGA TAAAGTCAGT 1051 CTGACCTGCA TGATAACAGA CTTCTTCCCT GAAG ACATTA CTGTGGAGTG 1101 GCAGTGGAAT GGGCAGCCAG CG GAGA ACTA CAAGAACACT CAGCCCATCA 1151 TGGACACAGA TGGCTCTTAC TTCGTCTACA GCAAGCTCAA TGTGCAGAAG 1201 AGCAACTGGG AGGCAGGAAA TACTTTCACC TGCTCTGTGT TACATGAGGG 1251 CCTGCACAAC CACCATACTG AGAAGAGCCT CTCCCACTCT CCTGGTAAAT 1301 GA (SEC ID NO:28) La secuencia de aminoácidos de Ab-A HC que incluye el péptido señal es: 1 METGLRWLLL VAVLKG VHCQ SLEESGGRLV TPGTPLTLTC TASGFSLSSY 51 WM WVRQAPG EGLEWIGTID SGGRTDYASW AKGRFTISRT STTM DLKMTS 101 LTTGDTARYF CAR WN LWGQ GTLVTVSSAS TKGPSVYPLA PGSAAQTNSM 151 VTLGCLVKGY FPEPVTVTWN SGSLSSGVHT FPAVLQSDLY TLSSSVTVPS 201 STWPSETVTC NVAHPASSTK VDKKIVPRDC GCKPCICTVP EVSSVFIFPP 251 KPKDVLT!TL TPKVTCWVD ISKDDPEVQF SWFVDDVEVH TAQTQPREEQ 301 FNSTFRSVSE LP I M H Q DWLN GKEFKCRVNS AAFPAPI EKT ISKTKGRPKA 351 PQVYTIPPPK EQMAKDKVSL TCM ITDFFPE DITVEWQWNG QPAENYKNTQ 401 PIMNTNGSYF VYSKLNVQKS NWEAGNTFTC SVLHEGLHNH HTEKSLSHSP 451 GK (SEC ID NO:29) La secuencia de ácido nucleico de Ab-A HC que incluye la secuencia de codificación del péptido señal: 1 ATGGAGACTG GGCTGCGCTG GCTTCTCCTG GTCGCTGTGC TCAAAGGTGT 51 CCACTGTCAG TCGCTGGAGG AGTCCGGGGG TCGCCTGGTC ACGCCTGGGA 101 CACCCCTGAC ACTCACCTGC ACAGCCTCTG GATTCTCCCT CAGTAGTTAT 151 TGGATGAACT GGGTCCGCCA GGCTCCAGGG GAGGGGCTGG AATGGATCGG 201 AACCATTGAT TCTGGTGGTA GGACGGACTA CGCGAGCTGG GCAAAAGGCC 251 GATTCACCAT CTCCAGAACC TCGACTACGA TGGATCTGAA AATGACCAGT 301 CTGACGACCG GGGACACGGC TGTGCCAGAA ATTGGAACTT 351 GTGGGGCCAA GGCACCCTCG GAGCGCTTCT ACAAAGGGCC 401 CATCTGTCTA TCCACTGGCC CTGCCCAAAC TAACTCCATG 451 GTGACCCTGG GATGCCTGGT TTCCCTGAGC CAGTGACAGT 501 GACCTGGAAC TCTGGATCCC TGTGCACACC TTCCCAGCTG 551 TCCTGCAGTC TGACCTCTAC GCTC AGTGAC TGTCCCCTCC 601 AGCACCTGGC CCAGCGAGAC AACGTTGCCC ACCCGGCCAG 651 CAGCACCAAG GTGGACAAGA CAGGGATTGT GGTTGTAAGC 701 CTTGCATATG TACAGTCCCA CTGTCTTCAT CTTCCCCCCA 751 AAGCCCAAGG ATGTGCTCAC ACTCCTAAGG TCACGTGTGT 801 TGTGGTAGAC ATCAGCAAGG GGTCCAGTTC AGCTGGTTTG 851 TAGATG ATGT GGAGGTGCAC CGCAACCCCG GGAGGAGCAG 901 TTCAACAGCA CTTTCCGCTC AGTCAGTGAA CTTCCCATCA TGCACCAGGA 951 CTGGCTCAAT GGCAAGGAGT TCAAATGCAG GGTCAACAGT GCAGCTTTCC 1001 CTGCCCCCAT CGAGAAAACC ATCTCC AAAA CCAAAGGCAG ACCGAAGGCT 1051 CCACAGGTGT ACACCATTCC ACCTCCCAAG GAGCAGATGG CCAAGGATAA 1101 AGTCAGTCTG ACCTGCATGA TAACAGACTT CTTCCCTGAA GACATTACTG 1151 TGGAGTGGCA GTGG AATGGG CAGCCAGCGG AGAACTACAA GAAC ACTCAG 1201 CCCATCATGG ACACAGATGG CTCTTACTTC GTCTACAGCA AGCTCAATGT 1251 GCAGAAGAGC AACTGGGAGG CAGGAAATAC TTTCACCTGC TCTGTGTTAC 1301 ATGAGGGCCT GCACAACCAC CATACTGAGA AGAGCCTCTC CCACTCTCCT 1351 GGTAAATGA (SEC ID NO:30) Las secuencias de CDR (región de determinación de complementariedad) en la región variable de la cadena pesada del Ab-A son como sigue: CDR-H1: SYWMN (SEC ID NO:51) CDR-H2: TIDSGGRTDYASWAKG (SEC ID NO:52) CDR-H3: NWNL (SEC ID NO:53) Las secuencias de CDR de región variable de cadena ligera del Ab-A son: CDR-L1: QSSQSVYDNNWLA (SEC ID NO:54) CDR-L2: DASDLAS (SEC ID NO:55) CDR-L3: QGAYN DVTYA (SEC ID NO:56) Ab-A fue humanizado, y es referido como anticuerpo 1 (también referido en la presente como Ab-1), que tiene las siguientes secuencias: La secuencia de ácido nucleico de la región variable de la LC del Ab-1 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: ATGGACACGAGGG CCCCC ACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCT CTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCTCAAGTTCTGACCCAGAGTCC AAGCAGTCTCTCCGCC AGCGTAGGCG ATCGTGTGACTATTACCTG TCAATCTAGTCAGAGCGTGTATGATAACAATTGGCTGGCGTGGTA CCAGCAAAAACCGGGCAAAGCCCCGAAGCTGCTCATCTATG ACG CGTCCGATCTGGCTAGCGGTGTGCCAAGCCGTTTCAGTGGCAGT GGCAGCGGTACTGACTTTACCCTCACAATTTCGTCTCTCCAGCCG GAAGATTTCGCCACTTACTATTGTCAAGGTGCTTACAACGATGTGA TTTATGCCTTCGGTCAGGGCACTAAAGTAGAAATCAAACGT (SEC ID NO:74) La secuencia de aminoácidos de la región variable de la LC del Ab-1 que incluye el péptido señal es: M DTR APTO LLG LLLLWLPGATFAQ VLTQ SPSS LSASVG DRVTI TCQSSQSVYDNNWLAWYQQKPGKAPKLLI YDASDLASGVPSRFSGS GSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQGAYNDVIYAFGQGTKVEI KR (SEC ID NO:75) La secuencia de ácido nucleico de la región variable de Ab-1 HC que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAA GGTGTCCACTGTGAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGAGGCGGGCT TGTCCAGCCTGGAGGGAGCCTGCGTCTCTCTTGTGCAGCAAGCG GCTTCAGCTTATCCTCTTACTGGATGAATTGGGTGCGGCAGGCAC CTGGG AAGGGCCTGGAGTGGGTGGGCACCATTGATTCCGGAGGC CGTACAGACTACGCGTCTTGGGCAAAGGGCCGTTTCACCATTTCC CGCGACAACTCCAAAAATACCATGTACCTCCAGATGAACTCTCTC CGCGCAGAGGACACAGCACGTTATTACTGTGCACGCAACTGGAAT CTGTGGGGTCAAGGTACTCTTGTAACAGTCTCGAGC (SEC ID NO:76) La secuencia de aminoácidos de la región variable de la HC del Ab-1 que incluye el péptido señal es: METGLRWLLLVAVLKGVHCEVQ LLESGGGLVOPGGSLRLSCA ASGFSLSi W lWVRQAPGKGLEWVGTIDSGGRTDYASWAKGRFT ISRDNSKNTMILQMNSLRAEDTARYYCARNWNLWGQGTLVTVSS (SEC ID NO:77) Las secuencias de CDR (región de determinación de complementariedad) en la región variable de la cadena pesada del Ab-1 son como sigue: CDR-H1: SYWMN (SEC ID NO:51) CDR-H2: TI DSGG RTDYASWAKG (SEC ID NO:52) CDR-H3: NWNL (SEC ID NO:53) Las secuencias de CDR de región variable de cadena ligera del Ab-1 son: CDR-L1: QSSQSVYDNNWLA (SEC ID NO:54) CDR-L2: DASDLAS (SEC ID NO:55) CDR-L3: QGAYNDVTYA (SEC ID NO:56) Ab-B El anticuerpo B (también referido en la presente como Ab-B y Mab-B) es un anticuerpo de ratón que exhibe una unión de afinidad alta a la esclerostina. El patrón de unión BIAcore de Ab-B se muestra en la figura 16. Cadena ligera del Ab-B La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-B es: 1 QIVLTQSPTI VSASPGEKVT LICSASSSVS FVDWFQQ KPG TSPKRWIYRT 51 SNLGFGVPAR FSGGGSGTSH SLTISRMEAE DAATYYCQQR STYPPTFGAG 101 TKLELKRADA APTVSIFPPS SEQLTSGGAS WCFLNNFYP KDINVKWKID 151 GSERQNGVLN SWTDQDSKDS TYSMSSTLTL TKDEYERHNS YTCEATKTS 201 TSPIVKSFNR NEC (SEC ID NO:31) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-B es: 1 CAAATTGTTC TCACCCAGTC TCCAACAATC GTGTCTGCAT CTCCAGGGGA 51 GAAGGTCACC CTAATCTGCA GTGCCAGTTC AAGTGTAAGT TTCGTGGACT 101 GGTTCCAGCA GAAGCCAGGC ACTTCTCCCA AACGCTGGAT TTACAGAACA 151 TCCAACCTGG GTTTTGGAGT CCCTGCTCGC TTCAGTGGCG GTGGATCTGG 201 GACCTCTCAC TCTCTCACAA TCAGCCGAAT GGAGGCTGAA GATGCTGCCA 251 CTTATTACTG CCAGCAAAGG AGTACTTACC CACCCACGTT CGGTGCTGGG 301 ACCAAGCTGG AACTGAA7CG GGCTGATGCT GCACCAACTG TATCCATCTT 351 CCCACCATCC AGTG AGCAGT TAACATCTGG AGGTGCCTCA GTCGTGTGCT 401 TCTTGAACAA CTTCTACCCC AAAGACATCA ATGTCAAGTG GAAGATTGAT 451 GCAGTGAAC GACAAAATGG CGTCCTGAAC AGTTGGACTG ATCAGGACAG 501 CAAAGACAGC ACCTACAGCA TGAGCAGCAC CCTCACGTTG ACCAAGG ACG 501 CAAAGACAGC ACCTACAGCA TGAGCAGCAC CCTCACGTTG ACCAAGGACG 551 AGTATG AACG ACATAACAGC TATACCTGTG AGGCCACTCA CAAGACATCA 601 ACTTCACCCA TTGTCAAGAG CTTCAACAGG AATGAGTGTT AG (SEC ID NO:32) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-B que incluye el péptido señal es: 1 MHFQVQIFSF LLISASVIVS RGQIVLTQSP TIVSASPGEK VTLICSASSS 51 VSFVDWFQQK PGTSPKRWIY RTSNLGFGVP ARFSGGGSGT SHSLTISRME 101 AEDAATYYCQ QRSTYPPTFG AGTKLELKRA DAAPTVSIFP PSSEQLTSGG 151 ASVVCFLNNF YPKDI NVKWK IDGSERQNGV LNSWTDQDSK DSTYSMSSTL 201 TLTKDEYERH NSYTCEATK TSTSPIVKSF NRNEC (SEC ID NO:33) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-B que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGCATTTTC AAGTGCAGAT TTTCAGCTTC CTGCTAATCA GTGCCTCAGT 51 CATAGTGTCC AG AGGGCAAA TTGTTCTCAC CCAGTCTCCA ACAATCGTGT 101 CTGCATCTCC AGGGGAGAAG GTCACCCTAA TCTGCAGTGC CAGTTCAAGT 151 GTAAGTTTCG TGGACTGGTT CCAGCAGAAG CCAGGCACTT CTCCCAAACG 201 CTGGATTTAC AGAACATCCA TGGAGTCCCT GCTCGCTTCA 251 GTGGCGGTGG ATCTGGGACC TCACAATCAG CCGAATGGAG 301 GCTGAAGATG CTGCCACTTA CAAAGGAGTA CTTACCCACC 351 CACGTTCGGT GCTGGG ACCA GAAACGGGCT GATGCTGCAC 401 CAACTGTATC CATCTTCCCA AGCAGTTAAC ATCTGGAGGT 451 GCCTCAGTCG TGTGCTTCTT TACCCCAAAG ACATCAATGT 501 CAAGTGGAAG ATTGATGGCA AAATGGCGTC CTGAACAGTT 551 GGACTGATCA GGACAGCAAA ACAGCATGAG CAGCACCCTC 601 ACGTTGACCA AGGACGAGTA AACAGCTATA CCTGTGAGGC 651 CACTCACAAG ACATCAACTT CAAGAGCTTC AACAGGAATG 701 AGTGTTAG (SEC ID NO:34) Cadena Pesada Ab-B La secuencia de aminoácidos de la forma señal eliminado) de la HC del Ab-B es: 1 QVTLKESGPG ILQPSQTLSL ISG G VilR HPSGKNLEWL 51 iHgfWDDVK! ISKDTSNSQV FLKIANVDTA DTATYYCARI 101 VIVSSA TTP PSVYPLAPGS AAQTNSMVTL 151 GCLVKGYFPE PVTVTWNSGS LSSGVHTFPA VLQSDLYTLS SSVTVPSSTW 201 PSETVTCNVA HPASSTKVDK KIVPRDCGCK PCICTVPEVS SVFIFPPKPK 251 DVLTITLTPK VTCVWDISK DDPEVQFSWF VDDVEVHTAQ TQPBEEQFNS 301 TFRSVSELPI MHQDWLNGKE FKCRVNSAAF PAPIEKTISK TKGRPKAPQV 351 YTIPPPKEQM AKDKVSLTCM ITDFFPEDIT VEWQWNGQPA ENYKNTQPIM 401 DTDGSYFVYS KLNVQKSNWE AGNTFTCSVL HEGLHNHHTE KSLSHSPGK (SEC ID NO:35) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-B es: 1 CAGGTTACTC TGAAAGAGTC TGGCCCTGGG ATATTGCAGC CCTCCCAGAC 51 CCTCAGTCTG ACTTGTTCTT TCTCTGGGTT TTCACTGAGC ACTTCTGGTA 101 TGGGTGTAGG CTGGATTCGT CACCCATCAG GGAAGAATCT GGAGTGGCTG 151 GCACACATTT GGTGGGATGA TATAACCCAG TCCTGAAGAG 201 CCGACTGACT ATCTCCAAGG CAGCCAGGTA TTCCTCAAGA 251 TCGCCAATGT GGACACTGCA CATACTACTG TGCTCGAATA 301 GAGGACTTTG ATTACGACGA GCTATGGACT ACTGGGGTCA 351 AGGAACCTCA GTCATCGTCT AACGACACCC CCATCTGTCT 401 ATCCACTGGC CCCTGGATCT CTAACTCCAT GGTGACCCTG 451 GGATGCCTGG TCAAGGGCTA CCAGTGACAG TGACCTGGAA 501 CTCTGGATCC CTGTCCAGCG CTTCCCAGCT GTCCTGCAGT 551 CTGACCTCTA CACTCTG AGC CTGTCCCCTC CAGCACCTGG 601 CCCAGCGAGA CCGTCACCTG CACCCGGCCA GCAGCACCAA 651 GGTGGACAAG AAAATTGTGC TGGTTGTAAG CCTTGCATAT 701 GTACAGTCCC AGAAGTATCA TCTTCCCCCC AAAGCCCAAG 751 GATGTGCTCA CCATTACTCT GTCACGTGTG TTGTGGTAGA 801 CATCAGCAAG GATGATCCCG AGGTCCAGTT CAGCTGGTTT GTAGATGATG 851 TGG AGGTGCA CACAGCTCAG ACGCAACCCC GGGAGGAGCA GTTCAACAGC 901 ACTTTCCGCT CAGTCAGTGA ACTTCCCATC ATGCACCAGG ACTGGCTCAA 951 TGGCAAGGAG TTCAAATGCA GGGTCAACAG TGCAGCTTTC CCTGCCCCCA 1001 TCGAGAAAAC CATCTCCAAA ACCAAAGGCA GACCGAAGGC TCCACAGGTG 1051 TACACCATTC CACCTCCCAA GGAGCAGATG GCCAAGGATA AAGTCAGTCT 1101 GACCTGCATG ATAACAGACT TCTTCCCTGA AGACATTACT GTGGAGTGGC 1151 AGTGG AATGG GCAGCCAGCG GAGAACTACA AGAACACTCA GCCCATCATG 1201 GACACAGATG GCTCTTACTT CGTCTACAGC AAGCTCAATG TGCAGAAGAG 1251 CAACTGGGAG GCAGGAAATA CTTTCACCTG CTCTGTGTTA CATG AGGGCC 1301 TGCACAACCA CCATACTGAG AAGAGCCTCT CCCACTCTCC TGGTAAATGA (SEC ID NO:36) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-B que incluye el péptido señal: 1 MGRLTSSFLL LIVPAYVLSQ VTLKESGPGI LQPSQTLSLT CSFSGFSLST 51 SGMGVGWIRH PSGKNLEWLA HIWWDDVKRY NPVLKSRLTI SKDTSNSQVF 101 LKIANVDTAD TATYYCARIE DFDYDEEYYA MDYWGQGTSV IVSSAKTTPP 151 SVYPLAPGSA AQTNSMVTLG CLVKGYFPEP VTVTWNSGSL SSGVHTFPAV 201 LQSDLYTLSS SVTVPSSTWP SETVTCNVAH PASSTKVDKK IVPRDCGCKP 251 CICTVPEVSS VFIFPPKPKD VLTITLTPKV TCVVVDISKD DPEVQFSWFV 301 DDVEVHTAQT QPREEQFNST FRSVSELPIM HQDWLNGKEF KCRVNSAAFP 351 APIEKTISKT KGRPKAPQVY TI P PP KEQ M A KDKVSLTCM I TDFFPEDITV 401 EWQWNGQPAE NYKNTQPIMD TDGSYFVYSK LNVQKSNWEA GNTFTCSVLH 451 EGLHNHHTEK SLSHSPGK (SEC ID NO:37) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-B que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGGCAGGC TTACTTCTTC ATTCCTGCTA CTGATTGTCC CTGCATATGT 51 CCTGTCCCAG GTTACTCTGA AAGAGTCTGG CCCTGGGATA TTGCAGCCCT 101 CCCAGACCCT CAGTCTGACT CTGGGTTTTC ACTGAGCACT 151 TCTGGTATGG GTGTAGGCTG CCATCAGGGA AGAATCTGGA 201 GTGGCTGGCA CACATTTGGT CAAGCGCTAT AACCCAGTCC 251 TGAAGAGCCG ACTGACTATC CCTCCAACAG CCAGGTATTC 301 CTCAAGATCG CCAATGTGGA ACTGCCACAT ACTACTGTGC 351 TCGAATAGAG GACTTTGATT GTATTATGCT ATGGACTACT 401 GGGGTCAAGG AACCTCAGTC CAGCCAAAAC GACACCCCCA 451 TCTGTCTATC CACTGGCCCC GCCCAAACTA ACTCCATGGT 501 GACCCTGGGA TGCCTGGTCA CCCTGAGCCA GTGACAGTGA 551 CCTGG AACTC TGGATCCCTG TGCACACCTT CCCAGCTGTC 601 CTGCAGTCTG ACCTCTACAC TCAGTGACTG TCCCCTCCAG 651 CACCTGGCCC AGCGAGACCG CGTTGCCCAC CCGGCCAGCA 701 GCACCAAGGT GGACAAGAAA GGGATTGTGG TTGTAAGCCT 751 TGCATATGTA CAGTCCCAGA AGTATCATCT GTCTTCATCT TCCCCCCAAA 801 GCCCAAGGAT GTGCTCACCA TTACTCTGAC TCCTAAGGTC ACGTGTGTTG 851 TGGTAGACAT CAGCAAGGAT GATCCCGAGG TCCAGTTCAG CTGGTTTGTA 901 GATGATGTGG AGGTGCACAC AGCTCAGACG CACCCCGGG AGGAGCAGTT 951 CAACAGCACT TTCCGCTCAG TCAGTGAACT TCCCATCATG CACCAGGACT 1001 GGCTCAATGG CAAGGAGTTC AAATGCAGGG TCAACAGTGC AGCTTTCCCT 1051 GCCCCCATCG AGAAAACCAT CTCCAAAACC AAAGGCAGAC CGAAGGCTCC 1101 ACAGGTGTAC ACCATTCCAC CTCCCAAGGA GCAGATGGCC AAGGATAAAG 1151 TCAGTCTGAC CTGCATGATA ACAGACTTCT TCCCTGAAGA CATTACTGTG 1201 GAGTGGCAGT GGAATGGGCA GCCAGCGGAG AACTACAAGA ACACTCAGCC 1251 CATCATGGAC ACAGATGGCT CTTACTTCGT CTACAGCAAG CTCAATGTGC 1301 AGAAGAGCAA CTGGGAGGCA GGAAATACTT TCACCTGCTC TGTGTTACAT 1351 GAGGGCCTGC ACAACCACCA TACTGAGAAG AGCCTCTCCC ACTCTCCTGG 1401 TAAATGA (SEC ID NO:38) Las secuencias de CDR (región de determinación de complementariedad) en la región variable de la cadena pesada del Ab-B son como sigue: CDR-H1: TSGMGVG (SEC ID NO:57) CDR-H2: H IWWDDVKRYN PVLKS (SEC ID NO:58) CDR-H3: EDFDYDEEYYAM DY (SEC ID NO:59) Las secuencias de CDR de región variable de cadena ligera del Ab-B son: CDR-L1: SASSSVSFVD (SEC ID NO:60) CDR-L2: RTSNLGF (SEC ID NO:61) CDR-L3: QQRSTYPPT (SEC ID NO:62) Los anticuerpos descritos en la presente se unen a las regiones de la esclerostina humana que son importantes para la actividad in vivo de la proteína. La unión de un anticuerpo a la esclerostina se puede correlacionar con los aumentos en, por ejemplo, la densidad mineral ósea alcanzada por el uso del anticuerpo in vivo tal como el descrito en los ejemplos 5 y 9 (ratones) y ejemplo 12 (mono). Los aumentos de por lo menos uno de formación ósea, contenido mineral óseo, masa ósea, calidad ósea y resistencia ósea también se pueden lograr por el uso del anticuerpo in vivo tal como el descrito en los ejemplos 5 y 9 (ratones) y ejemplo 12 (mono). Puesto que la unión de un anticuerpo a la esclerostina es determinada principalmente por sus secuencias de CDR, un anticuerpo para practicar la invención se puede generar con todas o algunas secuencias de CDR descritas en una trama apropiada, en donde el anticuerpo conserva la capacidad de unirse específicamente a la esclerostina, y se puede esperar que se alcancen los aumentos de, por ejemplo, la densidad mineral ósea hueso. Tales anticuerpos son útiles en el tratamiento de las condiciones humanas o animales que son causadas por, asociadas a, o resultado de por lo menos uno de formación ósea baja, densidad mineral ósea baja, contenido mineral óseo bajo, masa ósea baja, calidad ósea baja y resistencia ósea baja. Los métodos para elaborar y expresar los anticuerpos y fragmentos de los mismos que comprenden CDR's de la presente invención, son conocidos por los expertos en la técnica. La presente invención por lo tanto se relaciona en una modalidad a un anticuerpo aislado, incluyendo Ab-A, o un fragmento de unión de antígeno del mismo, que se une específicamente a la esclerostina y en donde el dominio variable de la cadena pesada comprende por lo menos una CDR que tiene las secuencias dadas en la SEC ID NO:51 para CDR-H1, SEC ID NO:52 para CDR-H2 y SEC ID NO:53 para CDR-H3. El anticuerpo o fragmento de unión de antígeno del miso puede comprender un dominio variable de cadena pesado en el cual las CDRs consisten de por lo menos uno de los péptidos de la SEC ID NO:51 para CDR-H 1 , SEC ID NO:52 para CDR-H2 y SEC ID NO:53 para CDR- H3. Cuando en los anticuerpos de la invención está presente una de cadena ligera, ésta puede ser cualquier cadena 5 complementaria conveniente y en particular se puede seleccionar de una cadena ligera en donde el dominio variable comprende por lo menos una CDR que tiene las secuencias dadas en SEC ID NO:54 para CDR-L1 , SEC ID NO:55 para CDR-L2 y SEC ID NO:56 para CDR-L3. El anticuerpo o fragmento de unión de antígeno del I0 mismo puede comprender un dominio variable de cadena ligera en donde las CDRs consisten de por lo menos uno de los péptidos de la SEC ID NO:54 para CDR-L1, SEC ID NO:55 para CDR-L2 y SEC ID NO:56 para CDR-L3. La presente invención adicionalmente se relaciona a un I5 anticuerpo aislado, que incluye Ab-B, o un fragmento de unión de antígeno del mismo, que se une específicamente a la esclerostina y en donde el dominio variable de la cadena pesada comprende por lo menos una CDR que tiene las secuencias dadas en la SEC ID NO:57 para CDR-H 1 , SEC ID NO:58 para CDR-H2 y SEC ID 0 NO:59 para CDR-H3. El anticuerpo o fragmento de unión de antígeno del mismo puede comprender un dominio variable de cadena pesada en donde las CDRs consistan de por lo menos uno de los péptidos de SEC ID NO:57 para CDR-H 1 , SEC ID NO:58 para CDR-H2 y SEC ID NO:59 para CDR-H3. 5 Cuando en los anticuerpos de la invención está presente una cadena ligera, ésta puede ser cualquier cadena complementaria conveniente y en particular se puede seleccionar de una cadena ligera en donde el dominio variable comprende por lo menos una CDR que tiene las secuencias dadas en SEC ID NO:60 para CDR-L1, SEC ID NO:61 para CDR-L2 y SEC ID NO:62 para CDR-L3. El anticuerpo o fragmento de unión de antígeno del mismo puede comprender un dominio variable de cadena ligera en donde las CDRs consistan de por lo menos uno de los péptidos de la SEC ID NO:60 para CDR-L1, SEC ID NO:61 para CDR-L2 y SEC ID NO:62 para CDR-L3. La presente invención aún se relaciona adicionalmente a un anticuerpo aislado, incluyendo Ab-C, o un fragmento de unión de antígeno del mismo, que se específicamente a la esclerostina y en donde el dominio variable de la cadena pesada comprende por lo menos una CDR que tiene las secuencias dadas en la SEC ID NO:45 para CDR-H1, SEC ID NO:46 para CDR-H2 y SEC ID NO:47 para CDR-H3. El anticuerpo o fragmento de unión de antígeno del mismo puede comprender un dominio variable de cadena pesada en el cual las CDRs consisten de por lo menos uno de los péptidos de la SEC ID NO:45 para CDR-H1, SEC ID NO:46 para CDR-H2 y SEC ID NO:47 para CDR-H3. Cuando en los anticuerpos de la invención está presente una cadena ligera, ésta puede ser cualquier cadena complementaria conveniente y en particular se puede seleccionar de una cadena ligera en donde el dominio variable comprende por lo menos una CDR que tiene las secuencias dadas en la SEC ID NO:48 para CDR-L1, SEC ID NO:49 para CDR-L2 y SEC ID NO:50 para CDR-L3. El anticuerpo o fragmento de unión de antígeno del mismo puede comprender un dominio variable de cadena ligera en donde las CDRs consisten de por lo menos uno de los péptidos de la SEC ID NO:48 para CDR-L1 , SEC ID NO:49 para CDR-L2 y SEC ID NO:50 para CDR-L3. La presente invención también se relaciona a un anticuerpo aislado, incluyendo Ab-D, o un fragmento de unión de antígeno del mismo, que se une específicamente a la esclerostina y en donde el dominio variable de la cadena pesada comprende por lo menos una CDR que tiene las secuencias dadas en la SEC ID NO:39 para CDR-H1, SEC ID NO:40 para CDR-H2 y SEC ID NO:41 para CDR-H3. El anticuerpo o fragmento de unión de antígeno del mismo puede comprender un dominio variable de cadena pesada en donde las CDRs consisten de por lo menos uno de los péptidos de la SEC ID NO:39 para CDR-H1, SEC ID NO:40 para CDR-H2 y SEC ID NO:41 para CDR-H3. Cuando en los anticuerpos de la invención está presente una cadena ligera, ésta puede ser cualquier cadena complementaria conveniente y en particular se puede seleccionar de una cadena ligera en donde el dominio variable comprende por lo menos una CDR que tiene las secuencias dadas en la SEC ID NO:42 para CDR-L1, SEC ID NO:43 para CDR-L2 y SEC ID NO:44 para CDR-L3. El anticuerpo o fragmento de unión de antígeno del mismo puede comprender un dominio variable de cadena ligera en donde las CDRs consisten de por lo menos uno de los péptidos de la SEC ID NO:42 para CDR-L1, SEC ID NO:43 para CDR-L2 y SEC ID NO:44 para CDR-L3. Los anticuerpos anti-esclerostina adicionales se describen a continuación. Para algunos de las secuencias de aminoácidos, las regiones de determinación de complementariedad (CDRs) están en cuadros sombreados y las regiones constantes están en cursiva y negritas. Ab-2 Las secuencias del anticuerpo 2 (también referido como Ab-2) del LC y HC son como sigue: Cadena ligera del Ab-2: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de Ab-2 LC es: 1 QIVLSQSPAI LSTSPGEKVT TCRASSSVY YMHWYQQKPG SSPKPWIYAT 51 SJI£¾ GVPVR FSGSGSGTSY SLTITRVEAE DAATYYCll SSDPLTFGAG 101 TKLELKRADA APTVSIFPPS SEQLTSGGAS WCFLNNFYP KDINVKWKID 151 GSERQNGVLN SWTDQDSKDS TYSMSSTLTL TKDEYERHNS YTCEA THKTS 201 TSPIVKSFNR NEC (SEC ID NO:117) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-2 es 1 CAAATTGTTC TCTCCCAGTC TCCAGCAATC CTGTCTACAT CTCCAGGGGA 51 GAAGGTCACA ATGACTTGCA GGGCCAGCTC AAGTGTATAT TACATGCACT 101 GGTACCAGCA GAAGCCAGGA TCCTCCCCCA AACCCTGGAT TTATGCCACA 151 TCCAACCTGG CTTCTGGAGT CCCTGTTCGC TTCAGTGGCA GTGGGTCTGG 201 GACCTCTTAC TCTCTCACAA TCACCAGAGT GGAGGCTGAA GATGCTGCCA 251 CTTATTACTG CCAGCAGTGG AGTAGTG ACC CACTCACGTT CGGTGCTGGG 301 ACCAAGCTGG AGCTGAAACG GGCTGATGCT GCACCAACTG TATCCATCTT 351 CCCACCATCC AGTGAGCAGT TAACATCTGG AGGTGCCTCA GTCGTGTGCT 401 TCTTGAACAA CTTCTACCCC AAAGACATCA ATGTCAAGTG GAAGATTG AT 451 GGCAGTGAAC GACAAAATGG CGTCCTGAAC AGTTGGACTG ATCAGGACAG 501 CAAAGACAGC ACCTACAGCA TGAGCAGCAC CCTCACGTTG ACCAAGG ACG 551 AGTATGAACG ACATAACAGC TATACCTGTG AGGCCACTCA CAAGACATCA 601 ACTTCACCCA TTGTCAAGAG CTTCAAC AGG AATGAGTGTT AG (SEC ID NO: 18) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-2 que incluye el péptido señal es: 5 1 MDFQVQIFSF LLISASVIMS RGQIVLSQSP AILSTSPGEK VTMTCRASSS 51 VYYMHWYQQK PGSSPKPWIY ATSNLASGVP VRFSGSGSGT SYSLTITRVE 101 AEDAATYYCQ QWSSDPLTFG AGTKLELKRA I0 DAAPTVSIFP PSSEQ LTSGG 151 ASWCFLNNF YPKDI NVKWK IDGSERQNGV LNSWTDQ DSK DSTYSMSSTL 201 TLTKDEYERH NSYTCEATK TSTSPIVKSF NRNEC (SEC ID NO:119) I5 La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-2 que incluye secuencia de codificación del péptido señal: 1 ATGGATTTTC AAGTGCAGAT TTTCAGCTTC CTGCTAATC A GTGCTTCAGT 51 CATTATGTCC AGGGGACAAA TTGTTCTCTC 0 CCAGTCTCCA GCAATCCTGT 101 CTACATCTCC AGGGGAGAAG GTCACAATGA CTTGCAGGGC CAGCTCAAGT 151 GTATATTACA TGCACTGGTA CCAGCAGAAG CCAGGATCCT CCCCCAAACC 5 201 CTGGATTTAT GCCACATCCA ACCTGGCTTC TGG AGTCCCT GTTCGCTTCA 251 GTGGCAGTGG GTCTGGGACC TCTTACTCTC TCACAATCAC CAGAGTGGAG 301 GCTGAAGATG CTGCCACTTA TTACTGCCAG CAGTGG AGTA GTG ACCCACT 351 CACGTTCGGT GCTGGGACCA AGCTGG AGCT GAAACGGGCT GATGCTGCAC 401 CAACTGTATC CATCTTCCCA CCATCCAGTG AGCAGTTAAC ATCTGGAGGT 451 GCCTCAGTCG TGTGCTTCTT GAACAACTTC TACCCCAAAG ACATCAATGT 501 CAAGTGGAAG ATTGATGGCA GTGAACGACA AAATGGCGTC CTGAACAGTT 551 GGACTGATCA GGACAGCAAA GACAGCACCT ACAGCATGAG CAGCACCCTC 601 ACGTTGACCA AGGACGAGTA TGAACG ACAT AACAGCTATA CCTGTG AGGC 651 CACTCACAAG ACATCAACTT CACCCATTGT CAAGAGCTTC AACAGGAATG 701 AGTGTTAG (SEC ID NO:120) Cadena Pesada del Ab-2 La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-2 es: 1 EVQVQQSGPE LVKPGASVKL SCTASGFNIK DYFIHWVKQR PEQGLEWIGR 51 t:DlPIDGESD¾ APKFQDKAIM TADTSSNTAY LQLRSLTSED TAIYYCERED 101 YDGTYTFFPY WGQGTLVTVS AAKTTPPSVY PLAPGSAAQT NSMVTLGCLV 151 KGYFPEPVTV TWNSGSLSSG VHTFPA VLQS DLYTLSSSVT VPSSTWPSET 201 VTCNVAHPAS STKVDKKIVP KDCGCKPCIC TVPEVSSVFI FPPKPKDVLT 251 ITLTPKVTCV WDISKDDPE VQFSWFVDDV EVHTAQTQPR EEQFNSTFRS 301 VSELPIMHQD WLNGKEFKCR VNSAAFPAPI EKTISKTKGR PKAPQVYTIP 351 PPKEQMAKDK VSLTCMITDF FPEDITVEWQ WNGQPAENYK NTQPIMDTDG 401 SYFIYSKLNV QKSNWEAGNT FTCSVLHEGL HNHHTEKSLS HSPGK (SEC ID NO:121) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-2 es: 1 GAGGTTCAGG TGCAGCAGTC TGGGCCAGAA CTTGTGAAGC CAGGGGCCTC 51 AGTCAAGTTG TCCTGCACAG CTTCTGGCTT CAACATTAAA GACTACTTTA 101 TACACTGGGT GAAGCAGAGG CCTGAACAGG GCCTGGAGTG GATTGG AAGG 151 CTTGATCCTG AGGATGGTG A AAGTGATTAT GCCCCGAAGT TCCAGGACAA 201 GGCCATTATG ACAGCAG ACA CACAGCCTAT CTTCAGCTCA 251 GAAGCCTGAC ATCTG AGGAC ATTATTGTGA GAGAGAGGAC 301 TACGATGGTA CCTACACCTT TGGGGCCAAG GGACTCTGGT 351 CACTGTCTCT GCAGCCAAAA ATCTGTCTAT CCACTGGCCC 401 CTGGATCTGC TGCCCAAACT TGACCCTGGG ATGCCTGGTC 451 AAGGGCTATT TCCCTGAGCC ACCTGGAACT CTGGATCCCT 501 GTCCAGCGGT GTGCACACCT CCTGCAGTCT GACCTCTACA 551 CTCTGAGCAG CTCAGTGACT GCACCTGGCC CAGCGAGACC 601 GTCACCTGCA ACGTTGCCCA AGCACCAAGG TGGACAAGAA 651 AATTGTGCCC AGGGATTGTG TTGCATATGT ACAGTCCCAG 701 AAGTATCATC TGTCTTCATC AGCCCAAGGA TGTGCTCACC 751 ATTACTCTGA CTCCTAAGGT GTGGTAGACA TCAGCAAGGA 801 TGATCCCGAG GTCCAGTTCA GCTGGTTTGT AGATG ATGTG GAGGTGCACA 851 CAGCTCAGAC GCAACCCCGG GAGGAGCAGT TCAACAGCAC TTTCCGCTCA 901 GTCAGTG AAC TTCCCATCAT GCACCAGGAC TGGCTCAATG GCAAGGAGTT 951 CAAATGCAGG GTCAACAGTG CAGCTTTCCC TGCCCCCATC GAGAAAACCA 1001 TCTCCAAAAC CAAAGGCAGA CCGAAGGCTC CACAGGTGTA CACCATTCCA 1051 CCTCCCAAGG AGCAGATGGC CAAGGATAAA GTCAGTCTGA CCTGCATGAT 1101 AACAGACTTC TTCCCTGAAG ACATTACTGT GGAGTGGCAG TGGAATGGGC 1151 AGCCAGCGGA GAACTACAAG AACACTCAGC CCATCATGGA CACAGATGGC 1201 TCTTACTTCA TCTACAGCAA GCTCAATGTG CAGAAGAGCA ACTGGGAGGC 1251 AGGAAATACT TTCACCTGCT CTGTGTTACA TGAGGGCCTG CACAACCACC 1301 ATACTGAGAA GAGCCTCTCC CACTCTCCTG GTAAATGA (SEC ID NO:122) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-2 que incluye el péptido señal es: 1 MKCSWVIFFL MAWTGVNSE VQVQQSGPEL VKPGASVKLS CTASGFNIKD 51 YFIHWVKQRP EQGLEWIGRL DPEDGESDYA PKFQDKAIMT ADTSSNTAIL 101 QLRSLTSEDT AIYYCEREDY DGTYTFFPYW GQGTLVTVSA AKTTPPSVYP 151 LAPGSAAQTN SMVTLGCLVK GYFPEPVTVT WNSGSLSSGV HTFPAVLQSD 201 LYTLSSSVTV PSSTWPSETV TCNVAHPASS TKVDKKGVPR DCGCKPCICT 251 VPEVSSVFIF PPKPKDVLTI TLTPKVTCW VDISKDDPEV QFSWFVDDVE 301 VHTAQTQPRE EQFNSTFRSV SELPIMHQDW LNGKEFKCRV NSAAFPAPIE 351 KTISKTKGRP KAPQVYTIPP PKEQMAKDKV SLTCMITDFF PEDITVEWQW 401 NGQPAENYKN TQPIMDTDGS YFI YSKLNVQ KSNWEAGNTF TCSVLHEGLH 451 NHHTEKSLSH SPGK (SEC ID NO:123) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-2 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGAAATGCA GCTGGGTCAT CTTCTTCCTG ATGGCAGTGG TTACAGGGGT 51 CAATTCAGAG GTTCAGGTGC AGCAGTCTGG GCCAGAACTT GTGAAGCCAG 101 GGGCCTCAGT CAAGTTGTCC TGCACAGCTT CTGGCTTCAA CATTAAAGAC 151 TACTTTATAC ACTGGGTGAA GAACAGGGCC TGGAGTGGAT 201 TGGAAGGCTT GATCCTGAGG TGATTATGCC CCGAAGTTCC 251 AGGACAAGGC CATTATGACA CATCCAACAC AGCCTATCTT 301 CAGCTCAGAA GCCTGACATC GCCATCTATT ATTGTG AGAG 351 AGAGGACTAC GATGGTACCT TCCTTACTGG GGCCAAGGGA 401 CTCTGGTCAC TGTCTCTGCA CACCCCCATC TGTCTATCCA 451 CTGGCCCCTG GATCTGCTGC TCCATGGTGA CCCTGGGATG 501 CCTGGTCAAG GGCTATTTCC G ACAGTGACC TGGAACTCTG 551 GATCCCTGTC CAGCGGTGTG CAGCTGTCCT GCAGTCTGAC 601 CTCTACACTC TGAGCAGCTC CCCTCCAGCA CCTGGCCCAG 651 CGAGACCGTC ACCTGCAACG GGCCAGCAGC ACCAAGGTGG 701 ACAAGAAAAT TGTGCCCAGG GTAAGCCTTG CATATGTACA 751 GTCCCAGAAG TATCATCTGT CTTCATCTTC CCCCCAAAGC CCAAGGATGT 801 GCTCACCATT ACTCTGACTC CTAAGGTCAC GTGTGTTGTG GTAG ACATCA 851 GCAAGGATGA TCCCGAGGTC CAGTTCAGCT GGTTTGTAGA TGATGTGGAG 901 GTGCACACAG CTCAGACGCA ACCCCGGGAG GAGCAGTTCA ACAGCACTTT 951 CCGCTCAGTC AGTG AACTTC CCATCATGC A CCAGGACTGG CTCAATGGCA 1001 AGGAGTTCAA ATGCAGGGTC AACAGTGCAG CTTTCCCTGC CCCCATCGAG 1051 AAAACCATCT CCAAAACCAA AGGCAG ACCG AAGGCTCCAC AGGTGTACAC 1101 CATTCCACCT CCCAAGGAGC AGATGGCCAA GGATAAAGTC AGTCTGACCT 1151 GCATGATAAC AGACTTCTTC CCTGAAGACA TTACTGTGGA GTGGCAGTGG 1201 AATGGGCAGC CAGCGGAGAA CTACAAGAAC ACTCAGCCCA TCATGGACAC 1251 AGATGGCTCT TACTTCATCT ACAGCAAGCT CAATGTGCAG AAG AGCAACT 1301 GGGAGGCAGG AAATACTTTC ACCTGCTCTG TGTTACATGA GGGCCTGCAC 1351 AACCACCATA CTGAGAAGAG CCTCTCCCAC TCTCCTGGTA AATGA (SEC ID NO:124) Ab-3 Las secuencias del anticuerpo 3 (también referido en la presente como Ab-3) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera de Ab-3 La secuencia de cadena ligera del Aminoácidos del Ab-3 de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-3: 1 EIVLTQSPAL M AAS PG E KVT ITCSVSSTIS SNHLHWFQQK SDTSPKPWIY 51 GTSNW G P VRFSGSGSGT SYSLTISSME AEDAATYYD g¾WS S YjfO;RG 101 AGTKLELRRA DAAPTVSIFP PSSEQLTSGG ASVVCFLNNF YPEDINVKWK 151 IDGSERQNGV LNSWTDQDSK DSTYSMSSTL TLTKDEYERH NSYTCEATK 201 TSTSPIVKSF NRNEC (SEC ID NO:125) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-3 es: 1 GAAATTGTGC TCACCCAGTC TCCAGCACTC ATGGCTGCAT CTCCGGGGGA 51 GAAGGTCACC ATCACCTGCA GTGTCAGTTC AACTATAAGT TCCAACCACT 101 TGCACTGGTT CCAGCAGAAG TCAGACACCT CCCCCAAACC CTGGATTTAT 151 GGCACATCCA ACCTGGCTTC TGG AGTCCCT GTTCGCTTCA GTGGCAGTGG 201 ATCTGGGACC TCTTATTCTC TCACAATCAG CAGCATGGAG GCTGAGGATG 251 CTGCCACTTA TTACTGTCAA CAGTGGAGTA GTTACCCACT CACGTTCGGC 301 GCTGGGACCA AGCTGGAGCT GAGACGGGCT GATGCTGCAC CAACTGTATC 351 CATCTTCCCA CCATCCAGTG AGCAGTTAAC ATCTGGAGGT GCCTCAGTCG 401 TGTGCTTCTT GAACAACTTC TACCCCAAAG ACATCAATGT CAAGTGG AAG 451 ATTGATGGCA GTGAACGACA AAATGGCGTC CTGAACAGTT GGACTGATCA 501 GGACAGCAAA GACAGCACCT ACAGCATGAG CAGCACCCTC ACGTTGACCA 551 AGGACGAGTA TGAACGACAT AACAGCTATA CCTGTG AGGC CACTCACAAG 601 ACATCAACTT CACCCATTGT CAAGAGCTTC AACAGGAATG AGTGTTAG (SEC ID N0.126) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-3 que incluye el péptido señal es: 1 MDFHVQIFSF MLISVTVILS SGEIVLTQSP ALMAASPGEK VTITCSVSST 51 ISSNHLHWFQ QKSDTSPKPW I YGTSN LASG VPVRFSGSGS GTSYSLTISS 101 MEAEDAATYY CQQWSSYPLT FGAGTKLELR RADAAPTVSI FPPSSEQLTS 151 GGASWCFLN NFYPKDINVK WKIDGSERQN GVLNSWTDQD SKDSTYSMSS 201 TLTLTKDEYE RHNSYTCEAT HKTSTSPIVK SFNRNEC (SEC ID NO:127) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-3 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGATTTTC ATGTGCAGAT TTTC AGCTTC ATGCTAATCA GTGTCACAGT 51 CATTTTGTCC AGTGGAGAAA TTGTGCTCAC CCAGTCTCCA GCACTCATGG 101 CTGCATCTCC GGGGGAGAAG GTCACCATCA CCTGCAGTGT CAGTTCAACT 151 ATAAGTTCCA ACCACTTGCA CTGGTTCCAG CAGAAGTCAG ACACCTCCCC 201 CAAACCCTGG ATTTATGGCA CATCCAACCT GGCTTCTGGA GTCCCTGTTC 251 GCTTCAGTGG CAGTGGATCT GGGACCTCTT ATTCTCTCAC AATCAGCAGC 301 ATGGAGGCTG AGGATGCTGC CACTTATTAC TGTCAACAGT GGAGTAGTTA 351 CCCACTCACG TTCGGCGCTG GGACCAAGCT GGAGCTGAGA CGGGCTGATG 401 CTGCACCAAC TGTATCCATC TTCCCACCAT CCAGTGAGCA GTTAACATCT 451 GGAGGTGCCT CAGTCGTGTG CTTCTTGAAC AACTTCTACC CCAAAG ACAT 501 CAATGTCAAG TGGAAGATTG ATGGCAGTGA ACGACAAAAT GGCGTCCTGA 551 ACAGTTGGAC TGATCAGGAC AGCAAAGACA GCACCTACAG CATGAGCAGC 601 ACCCTCACGT TGACCAAGGA CGAGTATGAA CGACATAACA GCTATACCTG 651 TGAGGCCACT CACAAGACAT CAACTTCACC CATTGTCAAG AGCTTCAACA 701 GGAATGAGTG TTAG (SEC ID NO:128) Cadena pesada del Ab-3 La secuencia de aminoácidos de Ab-3 de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-3 es: 1 EVQ LQQSGAE LVRPGALVKL SCTASDFN I K ÍÍ ¾WMRQR PEQGLDWIGR 51 IDPENGDTLY . DPKFQDKATL TTDTSSNTAY LQLSGLTSET TAVYYCSREA 101 Bl'FH DjG TS¾¾ \TVSSAKTTP PSVYPLAPGS AAQTNSMVTL 151 GCLVKGYFPE PVTVTWNSGS LSSGVHTFPA VLQSDL YTLS SSVTVPSSTW 201 PSETVTCNVA HPASSTKVDK KIVPRDCGCK PCICTVPEVS SVFIFPPKPK 251 DVLTITLTPK VTCVWDISK DDPEVQFSWF VDDVEVHTAQ TQPREEQFNS 301 TFRSVSELPI MHQDWLNGKE FKCRVNSAAF PAPIEKTISK TKGRPKAPQV 351 YTIPPPKEQM AKDKVSLTCM ITDFFPEDIT VEWQWNGQPA ENYKNTQPIM 401 DTDGSYFIYS KLNVQKSNWE AGNTFTCSVL HEGLHNHHTE KSLSHSPGK (SEC ID NO: 129) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-3 es: 1 GAGGTTCAGC TGCAGCAGTC TGGGGCTGAA CTTGTGAGGC CAGGGGCCTT 51 AGTCAAGTTG TCCTGCACAG CTTCTGACTT CAAC ATTAAA GACTTCTATC 101 TACACTGGAT GAGGCAGCGG CCTGAACAGG GCCTGGACTG GATTGGAAGG 151 ATTGATCCTG AGAATGGTGA TACTTTATAT GACCCGAAGT TCCAGGACAA 201 GGCCACTCTT ACAACAGACA CATCCTCCAA CACAGCCTAC CTGCAGCTCA 251 GCGGCCTGAC ATCTGAGACC ACTGCCGTCT ATTACTGTTC TAGAGAGGCG 301 GATTATTTCC ACGATGGTAC CTCCTACTGG TACTTCGATG TCTGGGGCGC 351 AGGGACCACA ATCACCGTCT CCTCAGCCAA AACGACACCC CCATCTGTCT 401 ATCCACTGGC CCCTGGATCT CTAACTCCAT GGTGACCCTG 451 GGATGCCTGG TCAAGGGCTA CCAGTGACAG TGACCTGGAA 501 CTCTGGATCC CTGTCCAGCG CTTCCCAGCT GTCCTGCAGT 551 CTGACCTCTA CACTCTG AGC CTGTCCCCTC CAGCACCTGG 601 CCCAGCGAGA CCGTCACCTG CACCCGGCCA GCAGCACCAA 651 GGTGGACAAG AAAATTGTGC TGGTTGTAAG CCTTGCATAT 701 GTACAGTCCC AGAAGTATCA TCTTCCCCCC AAAGCCCAAG 751 GATGTGCTCA CCATTACTCT GTCACGTGTG TTGTGGTAGA 801 CATCAGCAAG GATGATCCCG CAGCTGGTTT GTAGATGATG 851 TGGAGGTGCA CACAGCTCAG GGGAGGAGCA GTTCAACAGC 901 ACTTTCCGCT CAGTCAGTGA ATGCACCAGG ACTGGCTCAA 951 TGGCAAGGAG TTCAAATGCA TGC AGCTTTC CCTGCCCCCA 1001 TCGAGAAAAC CATCTCCAAA ACCAAAGGCA GACCGAAGGC TCCACAGGTG 1051 TACACCATTC CACCTCCCAA GGAGCAGATG GCCAAGGATA AAGTCAGTCT 1101 GACCTGCATG ATAACAGACT TCTTCCCTGA AGACATTACT GTGGAGTGGC 1151 AGTGGAATGG GCAGCCAGCG GAGAACTACA AGAACACTCA GCCCATCATG 1201 GACACAGATG GCTCTTACTT CATCTACAGC AAGCTCAATG TGCAGAAGAG 1251 CAACTGGGAG GCAGGAAATA CTTTCACCTG CTCTGTGTTA CATGAGGGCC 1301 TGCACAACCA CCATACTGAG AAG AGCCTCT CCCACTCTCC TGGTAAATGA (SEC ID NO:130) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-3 que incluye el péptido señal es: 1 MKCSWVIFFL AWTGVNSE VQLQQSGAEL VRPGALVKLS CTASDFNIKD 51 FILHWMRQRP EQGLDWIGRI DPENGDTLYD PKFQDKATLT TDTSSNTAIL 101 QLSGLTSETT AVYYCSREAD YFH DGTSYWY FDVWGAGTTI TVSSAKTTPP 151 SVYPLAPGSA AQTN S MVTLG CLVKGYFPEP VTVTWNSGSL SSGVHTFPAV 201 LQSDLYTLSS SVTVPSSTWP SETVTCNVAH PASSTKVDKK IVPRDCGCKP 251 CICTVPEVSS VFIFPPKPKD VLTITLTPKV TCWVDISKD DPEVQFSWFV 301 DDVEVHTAQT QPREEQFNST FRSVSELPIM HQDWLNGKEF KCRVNSAAFP 351 APIEKTISKT KGRPKÁPQVY TIPPPKEQMA KDKVSLTCMI TDFFPEDITV 401 EWQWNGQPAE NYKNTQPIMD TDGSYFGYSK LNVQKSNWEA GNTFTCSVLH 451 EGLHNHHTEK SLSHSPGK (SEC ID NO:131) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-3 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal: 1 ATGAAATGCA GCTGGGTCAT CTTCTTCCTG ATGGCAGTGG TTACAGGGGT 51 CAATTCAGAG GTTCAGCTGC AGCAGTCTGG GGCTGAACTT GTGAGGCCAG 101 GGGCCTTAGT CAAGTTGTCC TGCACAGCTT CTGACTTCAA CATTAAAGAC 151 TTCTATCTAC ACTGGATGAG GCAGCGGCCT GAACAGGGCC TGGACTGGAT 201 TGGAAGGATT GATCCTGAGA ATGGTGATAC TTTATATGAC CCG AAGTTCC 251 AGGACAAGGC CACTCTTACA ACAGACACAT CCTCCAACAC AGCCTACCTG 301 CAGCTCAGCG GCCTGACATC TGAGACCACT GCCGTCTATT ACTGTTCTAG 351 AGAGGCGGAT TATTTCCACG CTACTGGTAC TTCGATGTCT 401 GGGGCGCAGG GACCACAATC CAGCCAAAAC GACACCCCCA 451 TCTGTCTATC CACTGGCCCC GCCCAAACTA ACTCCATGGT 501 GACCCTGGGA TGCCTGGTCA CCCTGAGCCA GTGACAGTGA 551 CCTGGAACTC TGGATCCCTG TGCACACCTT CCCAGCTGTC 601 CTGCAGTCTG ACCTCTACAC TCAGTGACTG TCCCCTCCAG 651 CACCTGGCCC AGCGAG ACCG CGTTGCCCAC CCGGCCAGCA 701 GCACCAAGGT GGACAAGAAA GGGATTGTGG TTGTAAGCCT 751 TGCATATGTA CAGTCCCAGA GTCTTCATCT TCCCCCCAAA 801 GCCCAAGGAT GTGCTCACCA TCCTAAGGTC ACGTGTGTTG 851 TGGTAGACAT CAGCAAGGAT TCCAGTTCAG CTGGTTTGTA 901 GATGATGTGG AGGTGCACAC CAACCCCGGG AGGAGCAGTT 951 CAACAGCACT TTCCGCTCAG TCAGTGAACT TCCCATCATG CACCAGGACT 1001 GGCTCAATGG CAAGGAGTTC AAATGCAGGG TCAACAGTGC AGCTTTCCCT 1051 GCCCCCATCG AGAAAACCAT CTCCAAAACC AAAGGCAGAC CGAAGGCTCC 1101 ACAGGTGTAC ACCATTCCAC CTCCCAAGGA GCAGATGGCC AAGGATAAAG 1151 TCAGTCTGAC CTGCATG ATA ACAGACTTCT TCCCTGAAGA CATTACTGTG 1201 GAGTGGCAGT GGAATGGGCA GCCAGCGGAG AACTACAAGA ACACTCAGCC 1251 CATCATGGAC ACAG ATGGCT CTTACTTCAT CTACAGCAAG CTCAATGTGC 1301 AGAAGAGCAA CTGGGAGGCA GGAAATACTT TCACCTGCTC TGTGTTACAT 1351 GAGGGCCTGC ACAACCACCA TACTGAGAAG AGCCTCTCCC ACTCTCCTGG 1401 TAAATGA (SEC ID NO:132) Ab-4 Las secuencias del anticuerpo 4 (también referido en la presente como Ab-4) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera del Ab-4: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-4 es: 1 DIQMTQITSS LSASLGDRVS ISCRASQDIS NILNWYQQKP DGTFKLLIFY 51 TSRLLSGVPS RFSGSGSGTD YSLTIYNLEQ E D F A T Y F C ÍJG D T ]¾? ;F G G 101 GTKLEIKRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA SWCFLNNFY PKDINVKWKI 151 DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT LTKDEYERHN SYTCEATKT 201 STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO 133) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-4 es: 1 GATATCCAG A TGACACAGAT TACATCCTCC CTGTCTGCCT CTCTGGGAGA 51 CAGGGTCTCC ATCAGTTGCA GGGCAAGTCA AGACATTAGC AATTATTTAA 101 ACTGGTATCA GCAGAAACCA GATGGAACTT TTAAACTCCT TATCTTCTAC 151 ACATCAAGAT TACTCTCAGG AGTCCCATCA AGGTTCAGTG GCAGTGGGTC 201 TGGAACAGAT TATTCTCTCA CCATTTACAA CCTGGAGCAA GAAGATTTTG 251 CCACTTACTT TTGCCAACAG GGAGATACGC TTCCGTACAC TTTCGGAGGG 301 GGGACCAAGC TGGAAATAAA ACGGGCTGAT GCTGCACCAA CTGTATCCAT 351 CTTCCCACCA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC TCAGTCGTGT 401 GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA GTGGAAGATT 451 GATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA CTGATCAGGA 501 CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG TTGACCAAGG 551 ACGAGTATGA ACGACATAAC AGCTATACCT GTGAGGCCAC TCACAAG ACA 601 TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATGAGT GTTAG (SEC ID NO:134) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-4 que incluye el péptido señal: 1 MMSSAQFLGL LLLCFQGTRC D I Q MTQ ITSS LSASLGDRVS ISCRASQDIS 51 NILNWYQQKP DGTFKLLIFY TSRLLSGVPS RFSGSGSGTD YSLTIYNLEQ 101 EDFATYFCQQ GDTLPYTFGG GTKLEI KRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA 151 SWCFLNNFY PKDINVKWKI DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT 201 LTKDEYERHN SYTCEATKT STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO:135) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-4 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGATGTCCT CTGCTCAGTT CCTTGGTCTC CTGTTGCTCT GTTTTCAAGG 51 TACCAGATGT GATATCCAGA TGACACAGAT TACATCCTCC CTGTCTGCCT 101 CTCTGGGAGA CAGGGTCTCC ATCAGTTGCA GGGCAAGTCA AGACATTAGC 151 AATTATTTAA ACTGGTATCA GCAGAAACCA GATGGAACTT TTAAACTCCT 201 TATCTTCTAC ACATCAAGAT TACTCTCAGG AGTCCCATCA AGGTTCAGTG 251 GCAGTGGGTC TGGAACAGAT TATTCTCTCA CCATTTACAA CCTGGAGCAA 301 GAAGATTTTG CCACTTACTT TTGCCAACAG GGAGATACGC TTCCGTACAC 351 TTTCGGAGGG GGGACCAAGC TGG AAATAAA ACGGGCTGAT GCTGCACCAA 401 CTGTATCCAT CTTCCCACCA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC 451 TCAGTCGTGT GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA 501 GTGGAAGATT GATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA 551 CTGATCAGGA CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG 601 TTGACCAAGG ACGAGTATGA ACGACATAAC AGCTATACCT GTGAGGCCAC 651 TCACAAGACA TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATGAGT 701 GTTAG (SEC ID NO:136) Cadena pesada del Ab-4: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-4 es: 1 EVQLQQSGPE LM KPG ASVKM SCKASGYTFT DYNMHWVKQN QGKTLEWIGE 51 INSGGAGY NQKFKGKATL TVDKSSTTAY MELRSLTSED SAVYYCARLG 101 YBDIYDDWYF DVWGAGTTVT VSSAKTTPPS VYPLAPGSAA QTNSMVTLGC 151 LVKGYFPEPV TVTWNSGSLS SGVHTFPAVL QSDLYTLSSS VTVPSSTWPS 201 ETVTCNVAHP ASSTKVDKKI VPRDCGCKPC ICTVPEVSSV FIFPPKPKDV 251 LTITL TPKVT CVWDISKDD PEVQFSWFVD DVEVHTAQTQ PREEQFNSTF 301 RSVSELPIMH QDWLNGKEFK CRVNSAAFPA PIEKTISKTK GRPKAPQVYT 351 IPPPKEQMAK DKVSL TCMIT DFFPEDITVE WQWNGQPAEN YKNTQPIMDT 401 DGSYFIYSKL NVQKSNWEAG NTFTCSVLHE GLHNHHTEKS LSHSPGK (SEC ID NO:137) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-4 es: 1 GAGGTCCAAC TGCAACAGTC TGGACCTGAA CTAATGAAGC CTGGGGCTTC 51 AGTGAAGATG TCCTGCAAGG CTTCTGGATA TACATTCACT GACTACAACA 101 TGCACTGGGT GAAGCAGAAC CAAGG AAAGA CCCTAGAGTG GATAGGAGAA 151 ATTAATCCTA ACAGTGGTGG TGCTGGCTAC AACCAGAAGT TCAAGGGCAA 201 GGCCACATTG ACTGTAGACA AGTCCTCCAC CACAGCCTAC ATGGAGCTCC 251 GCAGCCTGAC ATCTG AGGAC TCTGCAGTCT ATTACTGTGC AAGATTGGGC 301 TACGATGATA TCTACGACGA CTGGTACTTC GATGTCTGGG GCGCAGGGAC 351 CACGGTCACC GTCTCCTCAG CCAAAACGAC ACCCCCATCT GTCTATCCAC 401 TGGCCCCTGG ATCTGCTGCC CAAACTAACT CCATGGTGAC CCTGGGATGC 451 CTGGTCAAGG GCTATTTCCC TGAGCCAGTG ACAGTGACCT GGAACTCTGG 501 ATCCCTGTCC AGCGGTGTGC ACACCTTCCC AGCTGTCCTG CAGTCTGACC 551 TCTACACTCT GAGCAGCTCA CCTCCAGCAC CTGGCCCAGC 601 G AGACCGTCA CCTGCAACGT GCCAGCAGCA CCAAGGTGGA 651 CAAGAAAATT GTGCCCAGGG TAAGCCTTGC ATATGTACAG 701 TCCCAGAAGT ATCATCTGTC CCCCAAAGCC CAAGGATGTG 751 CTCACCATTA CTCTGACTCC TGTGTTGTGG TAG ACATCAG 801 CAAGGATGAT CCCGAGGTCC GTTTGTAGAT GATGTGGAGG 851 TGCACACAGC TCAGACGCAA AGCAGTTCAA CAGCACTTTC 901 CGCTCAGTCA GTGAACTTCC CAGG ACTGGC TCAATGGCAA 951 GGAGTTCAAA TGCAGGGTCA TTTCCCTGCC CCCATCGAGA 1001 AAACCATCTC CAAAACCAAA AGGCTCCACA GGTGTACACC 1051 ATTCCACCTC CCAAGGAGCA GATAAAGTCA GTCTGACCTG 1101 CATGATAACA GACTTCTTCC TACTGTGGAG TGGCAGTGGA 1151 ATGGGCAGCC AGCGGAGAAC CTCAGCCCAT CATGGACACA 1201 GATGGCTCTT ACTTCATCTA CAGCAAGCTC AATGTGCAGA AGAGCAACTG 1251 GGAGGCAGGA AATACTTTCA CCTGCTCTGT GTTACATGAG GGCCTGCACA 1301 ACCACCATAC TGAGAAGAGC CTCTCCCACT CTCCTGGTAA ATGA (SEC ID NO:138) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-4 que incluye el péptido señal es: 1 MGWSWTFLFL LSGTAG VLSE VQLQQSGPEL MKPGASVKMS CKASGYTFTD 51 YNMHWVKQNQ GKTLEWIGEI NPNSGGAGYN QKFKGKATLT VDKSSTTAYM 101 ELRSLTSEDS AVYYCARLGY DDI YDDWYFD VWGAGTTVTV SSAKTTPPSV 151 YPLAPGSAAQ TNSMVTLGCL VKGYFPEPVT VTWNSGSLSS GVHTFPAVLQ 201 SDLYTLSSSV TVPSSTWPSE TVTCNVAHPA SSTKVDKKIV PRDCGCKPCI 251 CTVPEVSSVF IFPPKPKDVL TITLTPKVTC VWDISKDDP EVQFSWFVDD 301 VEVHTAQTQP REEQFNSTFR SVSELPIMHQ DWLNGKEFKC RVNSAAFPAP 351 IEKTISKTKG RPKAPQVYTI PPPKEQMAKD KVSLTCM ITD FFPEDITVEW 401 QWNGQPAENY KNTQPIMDTD GSYFGYSKLN VQKSNWEAGN TFTCSVLHEG 451 LHNHHTEKSL SHSPGK (SEC ID N0.139) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-4 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal: 1 ATGGGATGGA GCTGGACCTT TCTCTTCCTC CTGTCAGGAA CTGCAGGTGT 51 CCTCTCTGAG GTCCAACTGC AACAGTCTGG ACCTGAACTA ATG AAGCCTG 101 GGGCTTCAGT GAAGATGTCC TGCAAGGCTT CTGGATATAC ATTCACTGAC 151 TACAACATGC ACTGGGTGAA GCAGAACCAA GGAAAGACCC TAGAGTGGAT 201 AGGAGAAATT AATCCTAAC A GTGGTGGTGC TGGCTACAAC CAGAAGTTCA 251 AGGGCAAGGC CACATTG ACT GTAG ACAAGT CCTCCACCAC AGCCTACATG 301 GAGCTCCGCA GCCTGACATC TGAGGACTCT GCAGTCTATT ACTGTGCAAG 351 ATTGGGCTAC GATGATATCT ACGACG ACTG GTACTTCGAT GTCTGGGGCG 401 CAGGGACCAC GGTCACCGTC TCCTCAGCCA AAACGACACC CCCATCTGTC 451 TATCCACTGG CCCCTGGATC TGCTGCCCAA ACTAACTCCA TGGTG ACCCT 501 GGGATGCCTG GTCAAGGGCT GCCAGTGACA GTGACCTGGA 551 ACTCTGGATC CCTGTCCAGC CCTTCCCAGC TGTCCTGCAG 601 TCTGACCTCT ACACTCTGAG ACTGTCCCCT CCAGCACCTG 651 GCCCAGCGAG ACCGTCACCT CCACCCGGCC AGCAGCACCA 701 AGGTGGACAA GAAAATTGTG GTGGTTGTAA GCCTTGCATA 751 TGTACAGTCC CAGAAGTATC ATCTTCCCCC CAAAGCCCAA 801 GGATGTGCTC ACCATTACTC GGTCACGTGT GTTGTGGTAG 851 ACATCAGCAA GGATG ATCCC TCAGCTGGTT TGTAGATGAT 901 GTGGAGGTGC ACACAGCTCA CGGGAGGAGC AGTTCAACAG 951 CACTTTCCGC TCAGTCAGTG CATGCACCAG GACTGGCTCA 1001 ATGGCAAGGA GTTCAAATGC GTGCAGCTTT CCCTGCCCCC 1051 ATCG AGAAAA CCATCTCCAA AGACCGAAGG CTCCACAGGT 1101 GTACACCATT CCACCTCCCA GGCCAAGGAT AAAGTCAGTC 1151 TGACCTGCAT GATAACAGAC TTCTTCCCTG AAGACATTAC TGTGGAGTGG 1201 CAGTGGAATG GGCAGCCAGC GGAGAACTAC AAGAAC ACTC AGCCCATCAT 1251 GGACACAGAT GGCTCTTACT TCATCTACAG CAAGCTCAAT GTGCAGAAGA 1301 GCAACTGGGA GGCAGGAAAT ACTTTCACCT GCTCTGTGTT ACATGAGGGC 1351 CTGCACAACC ACCATACTGA GAAGAGCCTC TCCCACTCTC CTGGTAAATG 1401 A (SEC ID NO:140) Ab-4 fue humanizado para generar Ab-5. Ab-5 Las secuencias del anticuerpo 5 (también referido en la presente como Ab-5) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera del Ab-5: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-5 es: 1 DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDIS NILNWYQQKP GKAPKLLIYY 51 TSRLjJ¡GVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQ Q GDTLP YTFGG 101 GTKYEIKR7V AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SWCLLNNFY PREAKVQWKV 151 ADNLQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT LSKADYEKHK VYACEVTQG 201 LSSPVTKSFN RGEC (SEC ID N0:141) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-5 es: 1 GACATCCAGA TGACCCAGTC TCCATCCTCC CTCTCCGCAT CCGTAGGCGA 51 CCGCGTAACC ATAACATGTA GAGCATCTCA AGATATTTCC AACTATTTGA 101 ATTGGTACCA ACAAAAACCC GGCAAAGCAC CTAAACTCCT CATTTACTAT 151 ACATCAAGAC TCCTCTCCGG CGTTCCATCA CGATTCTCAG GCTCCGGCTC 201 CGGCACAGAT TTCACACTCA CTATTTCCTC CCTCCAACCA GAAGATTTTG 251 CAACCTATTA CTGTCAACAA GGCGATACAC TCCCATACAC ATTCGGCGGC 301 GGCACAAAAG TTG AAATTAA ACGTACGGTG GCTGCACCAT CTGTCTTCAT 351 CTTCCCGCCA TCTGATGAGC AGTTGAAATC TGGAACTGCC TCTGTTGTGT 401 GCCTGCTGAA TAACTTCTAT CCCAGAGAGG CCAAAGTACA GTGGAAGGTG 451 GATAACGCCC TCCAATCGGG TAACTCCCAG GAGAGTGTCA CAGAGCAGGA 501 CAGCAAGGAC AGCACCTACA GCCTCAGCAG CACCCTGACG CTGAGCAAAG 551 CAGACTACGA GAAACACAAA GTCTACGCCT GCGAAGTCAC CCATCAGGGC 601 CTGAGCTCGC CCGTCACAAA GAGCTTCAAC AGGGGAGAGT GT (SEC ID NO:142) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-5 que incluye el péptido señal es: 1 MDMRVPAQLL GLLLLWLRGA RCDIQMTQSP SSLSASVGDR VTITCRASQD 51 ISNILNWYQQ KPGKAPKLLI YYTSRLLSGV PSRFSGSGSG TDFTLTISSL 101 QPEDFATYYC QQGDTLPYTF GGGTKVEIKR TVAAPSVFIF PPSDEQLKSG 151 TASWCLLNN FYPREAKVQW KVADNLQSGN SQESVTEQDS KDSTYSLSST 201 LTLSKADYEK HKVYACEVT QGLSSPVTKS FNRGEC (SEC ID NO:143) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-5 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACATGA GGGTCCCCGC TCAGCTCCTG GGGCTCCTGC TACTCTGGCT 51 CCGAGGTGCC AGATGTGACA TCCAGATGAC CCAGTCTCCA TCCTCCCTCT 101 CCGCATCCGT AGGCGACCGC CATGTAG AGC ATCTCAAGAT 151 ATTTCCAACT ATTTGAATTG AAACCCGGCA AAGCACCTAA 201 ACTCCTCATT TACTATACAT CTCCGGCGTT CCATCACGAT 251 TCTCAGGCTC CGGCTCCGGC CACTCACTAT TTCCTCCCTC 301 CAACCAGAAG ATTTTGCAAC CAACAAGGCG ATACACTCCC 351 ATACACATTC GGCGGCGGCA AATTAAACGT ACGGTGGCTG 401 CACCATCTGT CTTCATCTTC ATGAGCAGTT GAAATCTGGA 451 ACTGCCTCTG TTGTGTGCCT TTCTATCCCA GAGAGGCCAA 501 AGTACAGTGG AAGGTGGATA ATCGGGTAAC TCCCAGGAGA 551 GTGTCACAGA GCAGGACAGC CCTACAGCCT CAGCAGCACC 601 CTGACGCTGA GCAAAGCAGA CACAAAGTCT ACGCCTGCGA 651 AGTCACCCAT CAGGGCCTGA CACAAAGAGC TTCAACAGGG 701 GAGAGTGT (SEC ID NO:144) Cadena Pesada del Ab-5: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-5 es: 1 EVQ LVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT DYNMHWVRQA PGQGLEWMGE J¾N;SGGAG»; NQifiPKGRVTM TTDTSTSTAY MELRSLRSDD TAVYYCARLG 101 YDDIYDDW'F G m WGQGTTVT VSSASTKGPS VFPLAPCSRS TSESTAALGC 151 LVKDYFPEPV TVS WNSGALT SGVHTFPAVL QSSGLYSLSS WTVPSSNFG 201 TQTYTCNVDH KPSNTKVDKT VERKCCVECP PCPAPPVAGP SVFLFPPKPK 251 DTLMISRTPE VTCVWDVSH EDPEVQFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQFNS 301 TFRWSVLTV VHQDWLNGKE YKCKVSNKGL PAPIEKTISK TKGQPREPQV 351 YTLPPSREEM TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPML 401 DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM HEALHNHITQ KSLSLSPGK (SEC ID N0 145) La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-5 sin Usina carboxi-terminal: 1 EVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT DYNMHWVRQA PGQGLEWMGE 51 INPNSGGAGY NQKFKGRVTM TTDTSTSTAY MELRSLRSDD TAVYYCARLG 101 YDDIYDDWYF DVWGQGTTVT VSSASTKGPS VFPLAPCSRS TSESTAALGC 151 LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPA VL QSSGLYSLSS WTVPSSNFG 201 TQTYTCNVDH KPSNTKVDKT VERKCCVECP PCPAPPVAGP SVFLFPPKPK 251 DTLMISRTPE VTCWVDVSH EDPEVQFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQFNS 301 TFRWSVLTV VHQDWLNGKE YKCKVSNKGL PAPIEKTISK TKGQPREPQV 351 YTLPPSREEM TKNQVSLTCL VKGFYPSDU VEWESNGQPE NNYKTTPPML 401 DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPG (SEC ID NO:392) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-5 es: 1 GAGGTGCAGC TGGTGCAGAG CGGCGCCGAG GTAAAAAAAC CAGGAGCAAG 51 CGTTAAAGTT TCTTGTAAAG CAAGCGGATA TACATTTACA GATTACAACA 101 TGCATTGGGT AAGACAAGCG CCAGGACAAG GATTGGAATG GATGGGCGAA 151 ATTAACCCTA ATAGTGGAGG AGCAGGCTAC AATCAAAAAT TCAAAGGGAG 201 AGTTACAATG ACAACAGACA AACAGCATAT ATGGAACTGC 251 GATCACTTAG AAGCGACGAT ACTATTGCGC ACGACTTGGG 301 TATGATGATA TATATGATGA GATGTTTGGG GCCAGGGAAC 351 AACAGTTACC GTCTCTAGTG GGGCCCATCG GTCTTCCCCC 401 TGGCGCCCTG CTCCAGGAGC GCACAGCGGC CCTGGGCTGC 451 CTGGTCAAGG ACTACTTCCC ACGGTGTCGT GGAACTCAGG 501 CGCTCTGACC AGCGGCGTGC AGCTGTCCTA CAGTCCTCAG 551 GACTCTACTC CCTCAGCAGC TGCCCTCCAG CAACTTCGGC 601 ACCCAGACCT ACACCTGCAA AAGCCCAGCA ACACCAAGGT 651 GGACAAGACA GTTG AGCGCA CGAGTGCCCA CCGTGCCCAG 701 CACCACCTGT GGCAGGACCG TCTTCCCCCC AAAACCCAAG 751 GACACCCTCA TGATCTCCCG GTCACGTGCG TGGTGGTGGA 801 CGTGAGCCAC GAAGACCCCG AGGTCCAGTT CAACTGGTAC GTGGACGGCG 851 TGGAGGTGCA TAATGCCAAG ACAAAGCCAC GGGAGGAGCA GTTCAACAGC 901 ACGTTCCGTG TGGTCAGCGT CCTCACCGTT GTGCACCAGG ACTGGCTGAA 951 CGGCAAGGAG TACAAGTGCA AGGTCTCCAA CAAAGGCCTC CCAGCCCCCA 1001 TCG AGAAAAC CATCTCCAAA ACCAAAGGGC AGCCCCGAGA ACCACAGGTG 1051 TACACCCTGC CCCCATCCCG GGAGG AGATG ACCAAGAACC AGGTCAGCCT 1101 GACCTGCCTG GTCAAAGGCT TCTACCCCAG CGACATCGCC GTGGAGTGGG 1151 AGAGCAATGG GCAGCCGGAG AACAACTACA AGACCACACC TCCCATGCTG 1201 GACTCCGACG GCTCCTTCTT CCTCTACAGC AAGCTCACCG TGGACAAGAG 1251 CAGGTGGCAG CAGGGGAACG TCTTCTCATG CTCCGTGATG CATGAGGCTC 1301 TGC ACAACCA CTACACGCAG AAGAGCCTCT CCCTGTCTCC GGGTAAA (SEC ID NO:146) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-5 que incluye el péptido señal es: 1 MDWTWRILFL VAAATGAHSE VQLVQSGAEV KKPGASVKVS CKASGYTFTD 51 YNMHWVRQAP GQGLEWMGEI NPNSGGAGYN QKFKGRVTMT TDTSTSTAYM 101 ELRSLRSDDT AVYYCARLGY DDIYDDWYFD VWGQGTTVTV SSASTKGPSV 151 FPLAPCSRST SESTAALGCL VKDYFPEPVT VSWNSGALTS GVHTFPAVLQ 201 SSGLYSLSSV VTVPSSNFGT QTYTCNVDHK PSNTKVDKTV ERKCCVECPP 251 CPAPPVAGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCWVDVSHE DPEVQFNWYV 301 DGVEVHNAKT KPREEQFNST FRWSVLTW HQDWLNGKEY KCKVSNKGLP 351 APIEKTISKT KGQPREPQVY TLPPSREEMT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV 401 EWESNGQPEN N YKTTPPM LD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH 451 EALHNHITQK SLSLSPGK (SEC ID NO:147) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-5 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACTGGA CCTGGAGGAT CCTCTTCTTG GTGGCAGCAG CCACAGGAGC 51 CCACTCCGAG GTGCAGCTGG TGCAGAGCGG CGCCGAGGTA AAAAAACCAG 101 GAGCAAGCGT TAAAGTTTCT TGTAAAGCAA GCGGATATAC ATTTACAGAT 151 TACAACATGC ATTGGGTAAG GGACAAGGAT TGGAATGGAT 201 GGGCGAAATT AACCCTAATA AGGCTACAAT CAAAAATTCA 251 AAGGGAGAGT TACAATGACA GCACTTCAAC AGCATATATG 301 GAACTGCGAT CACTTAGAAG GCTGTATACT ATTGCGCACG 351 ACTTGGGTAT GATGATATAT GTATTTCGAT GTTTGGGGCC 401 AGGGAACAAC AGTTACCGTC CCACCAAGGG CCCATCGGTC 451 TTCCCCCTGG CGCCCTGCTC TCCGAGAGCA CAGCGGCCCT 501 GGGCTGCCTG GTCAAGGACT ACCGGTGACG GTGTCGTGGA 551 ACTCAGGCGC TCTGACCAGC CCTTCCCAGC TGTCCTACAG 601 TCCTCAGGAC TCTACTCCCT GTGACCGTGC CCTCCAGCAA 651 CTTCGGCACC CAGACCTACA AGATCACAAG CCCAGCAACA 701 CCAAGGTGG A CAAGACAGTT GTTGTGTCGA GTGCCCACCG 751 TGCCCAGCAC CACCTGTGGC GTCTTCCTCT TCCCCCCAAA 801 ACCCAAGGAC ACCCTCATGA CCCTGAGGTC ACGTGCGTGG 851 TGGTGG ACGT GAGCCACGAA TCCAGTTCAA CTGGTACGTG 901 GACGGCGTGG AGGTGCATAA AAGCCACGGG AGGAGCAGTT 951 CAACAGCACG TTCCGTGTGG CACCGTTGTG CACCAGGACT 1001 GGCTGAACGG CAAGG AGTAC TCTCCAACAA AGGCCTCCCA 1051 GCCCCCATCG AGAAAACCAT AAAGGGCAGC CCCGAGAACC 1101 ACAGGTGTA ACCCTGCCCC GGAGATGACC AAGAACCAGG 1151 TCAGCCTGAC CTGCCTGGTC ACCCCAGCGA CATCGCCGTG 1201 GAGTGGGAGA GCAATGGGCA AACTACAAGA CCACACCTCC 1251 CATGCTGGAC TCCGACGGCT CTACAGCAAG CTCACCGTGG 1301 ACAAGAGCAG GTGGCAGCAG TCTCATGCTC CGTGATGCAT 1351 GAGGCTCTGC ACAACCACTA AGCCTCTCCC TGTCTCCGGG 1401 TAAA (SEC ID NO:148) Dominios variables del Ab-5: Secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena ligera del Ab-5 (sin secuencia de señal): 1 DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDIS NILÑWYQQICP GKAPKLLI¾ 51 TSRLLSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQGTJ3J5^BF^!T?FGG 101 GTKVEIK (SEC ID NO:376) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena ligera del Ab-5 (sin secuencia de señal): 1 GACATCCAGA TGACCCAGTC TCCATCCTCC CTCTCCGCAT CCGTAGGCGA 51 CCGCGTAACC ATAACATGTA GAGCATCTCA AGATATTTCC AACTATTTGA 101 ATTGGTACCA ACAAAAACCC GGCAAAGCAC CTAAACTCCT CATTTACTAT 151 ACATCAAGAC TCCTCTCCGG CGTTCCATCA CGATTCTCAG GCTCCGGCTC 201 CGGCACAGAT TTCACACTCA CTATTTCCTC CCTCCAACCA GAAGATTTTG 251 CAACCTATTA CTGTCAACAA GGCGATACAC TCCCATACAC ATTCGGCGGC 301 GGCACAAAAG TTGAAATTAA A (SEC ID NO:377) La secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena pesada del Ab-5 (sin secuencia de señal): 1 EVQ LVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT DYNMHWVRQA PGQGLEWMGE 51 INPNSGGAGY NQKFKGRVTM TTDTSTSTAY ELRSLRSDD TAVYYC ARLG 101 YDDI YDDWYF DVWGQGTTVT VSS (SEC ID NO:378) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena pesada del Ab-5 1 GAGGTGCAGC TGGTGCAGAG CGGCGCCGAG GTAAAAAAAC CAGGAGCAAG 51 CGTTAAAGTT TCTTGTAAAG CAAGCGGATA TACATTTACA GATTACAACA 101 TGCATTGGGT AAGACAAGCG CCAGGACAAG GATTGGAATG GATGGGCGAA 151 ATTAACCCTA ATAGTGGAGG AGCAGGCTAC AATCAAAAAT TCAAAGGGAG 201 AGTTACAATG ACAACAGACA CAAGCACTTC AACAGCATAT ATGGAACTGC 251 GATCACTTAG AAGCGACGAT ACAGCTGTAT ACTATTGCGC ACGACTTGGG 301 TATG ATGATA TATATG ATGA CTGGTATTTC GATGTTTGGG GCCAGGGAAC 351 AACAGTTACC GTCTCTAGT (SEC ID NO:379) Las secuencias de CDR (región de determinación de complementariedad) en la región variable de la cadena pesada del Ab-5 son como sigue: CDR-H1: DYNMH (SEC ID NO:245) CDR-H2: E I N P N SGG AG Y NQ KF KG (SEC ID NO:246) CDR-H3: LGYDDIYDD WYFDV (SEC ID NO:247) Las secuencias de CDR de región variable de cadena ligera del Ab-5 son: CDR-L1: RASQDISNILN (SEC ID NO:78) CDR-L2: YTSRLLS (SEC ID NO:79) CDR-L3: QQGDTLPYT (SEC ID NO:80) Ab-6 Las secuencias del anticuerpo 6 (también referido en la presente como Ab-6) del LC y HC son como sigue: Cadena ligera del Ab-6: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-6: 1 DIQMTQTTSS LSASLGDRVT ISCRASQDIS NILNWFQQKP DGTLKLLIFY 51 TSRLHSGVPS RFSGSGSGTD YSLTISNLEQ EDIATYFCQQ GDTLPY T F G G 101 GTKLE\RRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA SVVCFLNNFY PKDINVKWKI 151 DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT LTKDEYERHN SYTCEATKT 201 STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO:149) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-6 es: 1 GATATCCAG A TGACACAGAC TACATCCTCC CTGTCTGCCT CTCTGGG AGA 51 CAGAGTCACC ATCAGTTGCA GGGCAAGTCA GGACATTAGC AATTATTTAA 101 ACTGGTTTCA GCAGAAACCA GATGGAACTC TTAAACTCCT GATCTTCTAC 151 ACATCAAGAT TACACTCAGG AGTTCCATCA AGGTTCAGTG GCAGTGGGTC 201 TGGAACAGAT TATTCTCTC A CCATTAGCAA CCTGGAGCAA GAAGATATTG 251 CCACTTACTT TTGCCAACAG GGTG ATACGC TTCCGTACAC GTTCGGGGGG 301 GGGACCAAGC TGGAAATAAG ACGGGCTGAT GCTGCACCAA CTGTATCCAT 351 CTTCCCACCA TCCAGTG AGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC TCAGTCGTGT 401 GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA GTGGAAG ATT 451 G ATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA CTGATCAGGA 501 CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG TTGACCAAGG 551 ACGAGTATG A ACGACATAAC AGCTATACCT GTGAGGCCAC TCACAAGACA 601 TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATGAGT GTTAG (SEC ID NO:150) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-6 que incluye el péptido señal es: 1 MMSSAQFLGL LLLCFQGTRC DIQMTQTTSS LSASLGDRVT ISCRASQDIS 51 NILNWFQQKP DGTLKLLIFY TSRLHSGVPS RFSGSGSGTD YSLTISN LEQ 101 EDIATYFCQQ GDTLPYTFGG GTKLEIRRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA 151 SVVCFLNNFY PKDINVKWKI DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT 201 LTKDEYERHN SYTCEATKT STSPIVKSFN RNEC (SEC ID N0.151) Secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-5 que incluye la secuencia de codificación de péptido señal es: 1 ATGATGTCCT CTGCTCAGTT CCTTGGTCTC CTGTTGCTCT GTTTTCAAGG 51 TACCAGATGT GATATCCAGA TGACACAGAC TACATCCTCC CTGTCTGCCT 101 CTCTGGGAGA CAGAGTCACC ATCAGTTGCA GGGCAAGTCA GGACATTAGC 151 AATTATTTAA ACTGGTTTCA GCAGAAACCA GATGG AACTC TTAAACTCCT 201 GATCTTCTAC ACATCAAGAT TACACTCAGG AGTTCCATCA AGGTTCAGTG 251 GCAGTGGGTC TGGAACAGAT TATTCTCTCA CCATTAGCAA CCTGGAGCAA 301 G AAG ATATTG CCACTTACTT TTGCCAACAG GGTGATACGC TTCCGTACAC 351 GTTCGGGGGG GGGACCAAGC TGG AAATAAG ACGGGCTGAT GCTGCACCAA 401 CTGTATCCAT CTTCCCACCA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC 451 TCAGTCGTGT GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAG ACA TCAATGTCAA 501 GTGGAAGATT GATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA 551 CTGATCAGGA CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG 601 TTGACCAAGG ACGAGTATGA ACGACATAAC AGCTATACCT GTGAGGCCAC 651 TCACAAGACA TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATGAGT 701 GTTAG (SEC ID NO:152) Cadena Pesada del Ab-6: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-6: 1 EVQLQQSGPE LM KPGASVKM SCKASGYTFT DYNMHWVKQN QGKSLEWIGE 51 INPNSGGSGY NQKFKGKATL TVDKSSSTAY MELRSLTSED SAVYYCARLV 101 YDGSYEDWYF DVWGAGTTVT VSSAKTTPPS VYPLAPGSAA QTNSMVTLGC 151 LVKGYFPEPV TVTWNSGSLS SGVHTFPAVL QSDLYTLSSS VTVPSSTWPS 201 ETVTCNVAHP ASSTKVDKKI VPRDCGCKPC ICTVPEVSSV FIFPPKPKDV 251 LTITLTPKVT CVVVDISKDD PEVQFSWFVD DVEVHTAQTQ PREEQFNSTF 301 RSVSELPIMH QDWLNGKEFK CRVNSAAFPA PIEKTISKTK GRPKAPQVYT 351 IPPPKEQMAK DKVSL TCMIT DFFPEDITVE WQWNGQPAEN YKNTQPIMDT 401 DGSYFIYSKL NVQKSNWEAG NTFTCSVLHE GLHNHHTEKS LSHSPGK (SEC ID N0 153) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-6 es: 1 GAGGTCCAGC TGCAACAGTC TGGACCTGAA CTAATGAAGC CTGGGGCTTC 51 AGTGAAGATG TCCTGCAAGG CTTCTGGATA CACATTCACT GACTACAACA 101 TGCACTGGGT GAAACAGAAC CAAGGAAAGA GCCTAGAGTG GATAGGAGAA 151 ATTAATCCTA ACAGTGGTGG AACCAAAAGT TCAAAGGCAA 201 GGCCACATTG ACTGTAGACA CACAGCCTAC ATGGAGCTCC 251 GCAGCCTGAC ATCTGAGGAC ATTACTGTGC AAGATTGGTC 301 TACGATGGCA GCTACGAGGA GATGTCTGGG GCGCAGGGAC 351 CACGGTCACC GTCTCCTCAG ACCCCCATCT GTCTATCCAC 401 TGGCCCCTGG ATCTGCTGCC CCATGGTGAC CCTGGGATGC 451 CTGGTCAAGG GCTATTTCCC ACAGTGACCT GGAACTCTGG 501 ATCCCTGTCC AGCGGTGTGC AGCTGTCCTG CAGTCTGACC 551 TCTACACTCT GAGCAGCTCA CCTCCAGCAC CTGGCCCAGC 601 GAGACCGTCA CCTGCAACGT GCCAGCAGCA CCAAGGTGGA 651 CAAGAAAATT GTGCCCAGGG TAAGCCTTGC ATATGTACAG 701 TCCCAGAAGT ATCATCTGTC CCCCAAAGCC CAAGGATGTG 751 CTCACCATTA CTCTGACTCC TGTGTTGTGG TAGACATCAG 801 CAAGGATGAT CCCGAGGTCC AGTTCAGCTG GTTTGTAGAT GATGTGGAGG 851 TGCACACAGC TCAGACGCAA CCCCGGGAGG AGCAGTTCAA CAGCACTTTC 901 CGCTCAGTCA GTGAACTTCC CATCATGCAC CAGGACTGGC TCAATGGCAA 951 GGAGTTCAAA TGCAGGGTCA ACAGTGCAGC TTTCCCTGCC CCCATCGAGA 1001 AAACCATCTC CAAAACCAAA GGCAGACCGA AGGCTCCACA GGTGTACACC 1051 ATTCCACCTC CCAAGGAGCA GATGGCCAAG GATAAAGTCA GTCTGACCTG 1101 CATGATAACA GACTTCTTCC CTGAAG ACAT TACTGTGGAG TGGCAGTGGA 1151 ATGGGCAGCC AGCGGAGAAC TACAAGAACA CTCAGCCCAT CATGG ACACA 1201 GATGGCTCTT ACTTCATCTA CAGCAAGCTC AATGTGCAGA AGAGCAACTG 1251 GGAGGCAGGA AATACTTTCA CCTGCTCTGT GTTACATGAG GGCCTGCACA 1301 ACCACCATAC TGAGAAGAGC CTCTCCCACT CTCCTGGTAA ATGA (SEC ID NO:154) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-6 que incluye el péptido señal es: 1 MGWSWTFLFL LSGTAGVLSE VQLQQSGPEL MKPGASVKMS CKASGYTFTD 51 YNMHWVKQNQ GKSLEWIGEI NPNSGGSGYN QKFKGKATLT VDKSSSTAYM 101 ELRSLTSEDS AVYYCARLVY DGSYEDWYFD VWGAGTTVTV SSAKTTPPSV 151 YPLAPGSAAQ TNSMVTLGCL VKGYFPEPVT VTWNSGSLSS GVHTFPAVLQ 201 SDLYTLSSSV TVPSSTWPSE TVTCNVAHPA SSTKVDKKIV PRDCGCKPCI 251 CTVPEVSSVF IFPPKPKDVL TITLTPKVTC VVVDISKDDP EVQFSWFVDD 301 VEVHTAQTQP REEQFNSTFR SVSELPIMHQ DWLNGKEFKC RVNSAAFPAP 351 IEKTISKTKG RPKAPQVYTI PPPKEQMAKD KVSLTCMITD FFPEDITVEW 401 QWNGQPAENY KNTQPIMDTD GSYFIYSKLN VQKSNWEAGN TFTCSVLHEG 451 LHNHHTEKSL SHSPGK (SEC ID NO:155) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-6 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGGATGGA GCTGGACCTT TCTCTTCCTC CTGTCAGGAA CTGCAGGTGT 51 CCTCTCTGAG GTCCAGCTGC AACAGTCTGG ACCTGAACTA ATGAAGCCTG 101 GGGCTTCAGT GAAGATGTCC TGCAAGGCTT CTGGATACAC ATTCACTGAC 151 TACAACATGC ACTGGGTGAA ACAG AACCAA GGAAAGAGCC TAGAGTGGAT 201 AGG AGAAATT AATCCTAACA GTGGTGGTAG TGGCTACAAC CAAAAGTTCA 251 AAGGCAAGGC CACATTGACT GTAGACAAGT CTTCCAGCAC AGCCTACATG 301 GAGCTCCGCA GCCTGACATC TGAGGACTCT GCAGTCTATT ACTGTGCAAG 351 ATTGGTCTAC GATGGCAGCT ACG1 AGGACTG GTACTTCGAT GTCTGGGGCG 401 CAGGGACCAC GGTCACCGTC TCCTCAGCCA AAACGACACC CCCATCTGTC 451 TATCCACTGG CCCCTGGATC TGCTGCCCAA ACTAACTCCA TGGTGACCCT 501 GGGATGCCTG GTCAAGGGCT ATTTCCCTGA GCCAGTGACA GTGACCTGGA 551 ACTCTGGATC CCTGTCCAGC GGTGTGCACA CCTTCCCAGC TGTCCTGCAG 601 TCTG ACCTCT ACACTCTGAG CAGCTCAGTG ACTGTCCCCT CCAGCACCTG 651 GCCCAGCGAG ACCGTCACCT GCAACGTTGC CCACCCGGCC AGCAGCACCA 701 AGGTGG ACAA GAAAATTGTG CCCAGGGATT GTGGTTGTAA GCCTTGCATA 751 TGTACAGTCC CAGAAGTATC ATCTGTCTTC ATCTTCCCCC CAAAGCCCAA 801 GGATGTGCTC ACCATTACTC TGACTCCTAA GGTCACGTGT GTTGTGGTAG 851 ACATCAGCAA GGATGATCCC GAGGTCCAGT TCAGCTGGTT TGTAGATGAT 901 GTGGAGGTGC ACACAGCTCA GACGCAACCC CGGGAGGAGC AGTTCAACAG 951 CACTTTCCGC TCAGTCAGTG AACTTCCCAT CATGCACCAG GACTGGCTCA 1001 ATGGCAAGGA GTTCAAATGC AGGGTCAACA GTGCAGCTTT CCCTGCCCCC 1051 ATCG AGAAAA CCATCTCCAA AACCAAAGGC AGACCGAAGG CTCCACAGGT 1101 GTACACCATT CCACCTCCCA AGGAGCAGAT GGCCAAGGAT AAAGTCAGTC 1151 TGACCTGCAT GATAACAGAC TTCTTCCCTG AAGACATTAC TGTGGAGTGG 1201 CAGTGGAATG GGCAGCCAGC GGAGAACTAC AAGAACACTC AGCCCATCAT 1251 GGACACAGAT GGCTCTTACT TCATCTACAG CAAGCTCAAT GTGCAGAAGA 1301 GCAACTGGGA GGCAGGAAAT ACTTTCACCT GCTCTGTGTT ACATGAGGGC 1351 CTGCACAACC ACCATACTGA GAAGAGCCTC TCCCACTCTC CTGGTAAATG 1401 A (SEC ID NO:156) Ab-7 Las secuencias del anticuerpo 7 (también referido en la presente como Ab-7) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera del Ab-7: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-7: 1 D I Q MTQTTSS LSASLGD VT ICCRASQVIT NILYWYQQKP DGTFKLLIYY 51 TSRLHJLGVPS RFSGSGSGTD YSLTYSNLEQ EDIATYFCQÓ;.C3¾ Y'T:FGG 101 GTKLEIKRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA SWCFLNNFY PKDINVKWKI 151 DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT LTKDEYERHN SYTCEATKT 201 STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO:157) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-7: 1 G ATATCCAG A TGACACAGAC TACATCCTCC CTGTCTGCCT CTCTGGGAG A 51 CAGAGTCACC ATCTGTTGCA GGGCAAGTCA GGTCATTACC AATTATTTAT 101 ACTGGTATCA GCAGAAACCA GATGGAACTT TTAAACTCCT GATCTACTAC 151 ACATCAAGAT TACACTCAGG AGTCCCATCA AGGTTCAGTG GCAGTGGGTC 201 TGGAACAGAT TATTCTCTCA CCATTAGCAA CCTGGAACAG GAAGATATTG 251 CCACTTACTT TTGCCAACAG GGTGATACGC TTCCGTACAC GTTCGGAGGG 301 GGGACCAAGC TGGAAATAAA ACGGGCTGAT GCTGCACCAA CTGTATCCAT 351 CTTCCCACCA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC TCAGTCGTGT 401 GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA GTGGAAGATT 451 GATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA CTG ATCAGGA 501 CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG TTGACCAAGG 551 ACGAGTATGA ACGACATAAC AGCTATACCT GTGAGGCCAC TCACAAGACA 601 TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATGAGT GT (SEC ID NO:158) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-7 que incluye el péptido señal es: 1 MMSSAQFLGL LLLCFQGTRC DIQMTQTTSS LSASLG DRVT ICCRASQVIT 51 NILYWYQQKP DGTFKLLIYY TSRLHSGVPS RFSGSGSGTD YSLTISNLEQ 101 EDIATYFCQQ GDTLPYTFGG GTKLE I KRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA 151 SVVCFLNNFY PKDGNVKWKI DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT 201 LTKDEYERHN SYTCEATKT STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO:159) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-7 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGATGTCCT CTGCTCAGTT CCTTGGTCTC CTGTTGCTCT GTTTTCAAGG 51 TACCAGATGT GATATCCAGA TGACACAGAC TACATCCTCC CTGTCTGCCT 101 CTCTGGGAGA CAGAGTCACC ATCTGTTGCA GGGCAAGTCA GGTCATTACC 151 AATTATTTAT ACTGGTATCA GCAGAAACC AGATGGAACTT TTAAACTCCT 201 GATCTACTAC ACATCAAGAT TACACTCAGG AGTCCCATCA AGGTTCAGTG 251 GCAGTGGGTC TGGAACAGAT TATTCTCTCA CCATTAGCAA CCTGGAACAG 301 GAAGATATTG CCACTTACTT TTGCCAACAG GGTGATACGC TTCCGTACAC 351 GTTCGGAGGG GGGACCAAGC TGGAAATAAA ACGGGCTGAT GCTGCACCAA 401 CTGTATCCAT CTTCCCACCA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC 451 TCAGTCGTGT GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA 501 GTGG AAGATT GATGGCAGTG AACG ACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA 551 CTGATCAGGA CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG 601 TTGACCAAGG ACG AGTATGA ACGACATAAC AGCTATACCT GTGAGGCCAC 651 TCACAAGACA TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATGAGT 701 GT (SEC ID NO:160) Cadena Pesada del Ab-7: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-7: 1 EVQLQQSGPE LM KPG ASVKM SCKASGYTFT DYNMHWMKQN QGKSLEWIGE 51 I N PNSGGAG Y NQQFKGKATL TVDKSSRTAY MELRSLTSED SAVYYCARGg 101 YVGNYEDWYF DVWGAGTTVT VSSAKTTPPS VYPLAPGSAA QTNSMVTLGC 151 LVKGYFPEPV TVTWNSGSLS SGVHTFPAVL QSDL YTLSSS VTVPSSTWPS 201 ETVTCNVAHP ASSTKVDKKI VPRDCGCKPC ICTVPEVSSV FIFPPKPKDV 251 LTITLTPKVT CVWDISKDD PEVQFSWFVD DVEVHTAQTQ PREEQFNSTF 301 RSVSELPIMH QDWLNGKEFK CRVNSAAFPA PIEKTISKTK GRPKAPQVYT 351 IPPPKEQMAK DKVSLTCMIT DFFPEDITVE WQWNGQPAEN YKNTQPIMDT 401 DGSYFIYSKL NVQKSNWEAG NTFTCSVLHE GLHNHHTEKS LSHSPGK (SEC ID NO:161) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-7 es: 1 GAGGTCCAGC TGCAACAGTC TGGACCTGAA CTAATGAAGC CTGGGGCTTC 51 AGTGAAGATG TCCTGCAAGG CTTCTGGATA CACATTCACT GACTACAACA 101 TGCACTGGAT GAAGCAGAAC CAAGG AAAGA GCCTAGAATG GATAGGAGAA 151 ATTAATCCTA ACAGTGGTGG TGCTGGCTAC AACCAGCAGT TCAAAGGCAA 201 GGCCACATTG ACTGTAG ACA AGTCCTCCAG GACAGCCTAC ATGGAGCTCC 251 GCAGCCTGAC ATCTGAGGAC TCTGCAGTCT ATTACTGTGC AAGATTGGGC 301 TACGTTGGTA ATTACGAGGA CTGGTACTTC GATGTCTGGG GCGCAGGGAC 351 CACGGTCACC GTCTCCTCAG ACCCCCATCT GTCTATCCAC 401 TGGCCCCTGG ATCTGCTGCC CCATGGTGAC CCTGGGATGC 451 CTGGTCAAGG GCTATTTCCC ACAGTGACCT GGAACTCTGG 501 ATCCCTGTCC AGCGGTGTGC AGCTGTCCTG CAGTCTGACC 551 TCTACACTCT GAGCAGCTCA CCTCCAGCAC CTGGCCCAGC 601 GAGACCGTCA CCTGCAACGT GCCAGCAGCA CCAAGGTGGA 651 CAAGAAAATT GTGCCCAGGG TAAGCCTTGC ATATGTACAG 701 TCCCAG AAGT ATCATCTGTC CCCCAAAGCC CAAGGATGTG 751 CTCACCATTA CTCTGACTCC TGTGTTGTGG TAGACATCAG 801 CAAGGATGAT CCCGAGGTCC GTTTGTAGAT GATGTGGAGG 851 TGCACACAGC TCAG ACGCAA AGCAGTTCAA CAGCACTTTC 901 CGCTCAGTCA GTGAACTTCC CAGGACTGGC TCAATGGCAA 951 GGAGTTCAAA TGCAGGGTCA ACAGTGCAGC TTTCCCTGCC CCCATCGAGA 1001 AAACCATCTC CAAAACCAAA GGCAGACCGA AGGCTCCACA GGTGTACACC 1051 ATTCCACCTC CCAAGGAGCA GATGGCCAAG GATAAAGTCA GTCTGACCTG 1101 CATGATAACA GACTTCTTCC CTGAAGACAT TACTGTGGAG TGGCAGTGGA 1151 ATGGGCAGCC AGCGGAGAAC TACAAGAACA CTCAGCCCAT CATGG ACACA 1201 GATGGCTCTT ACTTCATCTA CAGCAAGCTC AATGTGCAGA AGAGCAACTG 1251 GGAGGCAGGA AATACTTTCA CCTGCTCTGT GTTACATGAG GGCCTGCACA 1301 ACCAUCATAC TGAGAAGAGC CTCTCCCACT CTCCTGGTAA A (SEC ID NO:162) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-7 que incluye el péptido señal: 1 MGWSWTFLFL LSGTAGVLSE VQLQQSGPEL MKPGASVKMS CKASGYTFTD 51 YNMHWMKQNQ GKSLEWIGEI NPNSGGAGYN QQFKGKATLT VDKSS TAYM 101 ELRSLTSEDS AVYYCARLGY VGNYEDWYFD VWGAGTTVTV SSAKTTPPSV 151 YPLAPGSAAQ TNSMVTLGCL VKGYFPEPVT VTWNSGSLSS GVHTFPAVLQ 201 SDLYTLSSSV TVPSSTWPSE TVTCNVAHPA SSTKVDKKIV PRDCGCKPCI 251 CTVPEVSSVF IFPPKPKDVL TITLTPKVTC VVVDISKDDP EVQFSWFVDD 301 VEVHTAQTQP REEQFNSTFR SVSELPIMHQ DWLNGKEFKC RVNSAAFPAP 351 IEKTISKTKG RPKAPQVYTI PPPKEQMAKD KVSLTCMITD FFPEDITVEW 401 QWNGQPAENY KNTQPIMDTD GSYFIYSKLN VQKSNWEAGN TFTCSVLHEG 451 LHNHHTEKSL SHSPGK (SEC ID NO:163) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-7 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGG ATGGA GCTGGACCTT TCTCTTCCTC CTGTCAGGAA CTGCAGGTGT 51 CCTCTCTGAG GTCCAGCTGC AACAGTCTGG ACCTGAACTA ATGAAGCCTG 101 GGGCTTCAGT GAAGATGTCC TGCAAGGCTT CTGGATACAC ATTCACTGAC 151 TACAACATGC ACTGGATGAA GCAGAACCAA GGAAAGAGCC TAGAATGGAT 201 AGGAGAAATT AATCCTAACA GTGGTGGTGC TGGCTACAAC CAGCAGTTCA 251 AAGGCAAGGC CACATTGACT GTAG ACAAGT CCTCCAGGAC AGCCTACATG 301 G AGCTCCGCA GCCTGACATC GCAGTCTATT ACTGTGCAAG 351 ATTGGGCTAC GTTGGTAATT GTACTTCGAT GTCTGGGGCG 401 CAGGGACCAC GGTCACCGTC AAACGACACC CCCATCTGTC 451 TATCCACTGG CCCCTGGATC ACTAACTCCA TGGTGACCCT 501 GGG ATGCCTG GTCAAGGGCT GCCAGTGACA GTGACCTGGA 551 ACTCTGGATC CCTGTCCAGC CCTTCCCAGC TGTCCTGCAG 601 TCTGACCTCT ACACTCTGAG ACTGTCCCCT CCAGCACCTG 651 GCCCAGCGAG ACCGTCACCT CCACCCGGCC AGCAGCACCA 701 AGGTGGACAA GAAAATTGTG GTGGTTGTAA GCCTTGCATA 751 TGTACAGTCC CAGAAGTATC ATCTTCCCCC CAAAGCCCAA 801 GGATGTGCTC ACCATTACTC GGTCACGTGT GTTGTGGTAG 851 ACATCAGCAA GGATGATCCC TCAGCTGGTT TGTAGATGAT 901 GTGGAGGTGC ACACAGCTCA GACGCAACCC CGGGAGGAGC AGTTCAACAG 951 CACTTTCCGC TCAGTCAGTG AACTTCCCAT CATGCACCAG GACTGGCTCA 1001 ATGGCAAGGA GTTCAAATGC AGGGTCAACA GTGCAGCTTT CCCTGCCCCC 1051 ATCGAG AAAA CCATCTCCAA AACCAAAGGC AGACCGAAGG CTCCACAGGT 1101 GTACACCATT CCACCTCCCA AGGAGCAGAT GGCCAAGGAT AAAGTCAGTC 1151 TGACCTGCAT GATAACAGAC TTCTTCCCTG AAGACATTAC TGTGGAGTGG 1201 CAGTGG AATG GGCAGCCAGC GGAGAACTAC AAGAACACTC AGCCCATCAT 1251 GGACACAGAT GGCTCTTACT TCATCTACAG CAAGCTCAAT GTGCAGAAGA 1301 GCAACTGGGA GGCAGGAAAT ACTTTCACCT GCTCTGTGTT ACATGAGGGC 1351 CTGCACAACC ACCATACTGA GAAGAGCCTC TCCCACTCTC CTGGTAAA (SEC ID NO:164) Ab-8 Las secuencias del anticuerpo 8 (también referido en la presente como Ab-8) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera del Ab-8: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-8 es: 1 DIQMTQTTSS LSASLGDRVS ISCRASQDIS NILNWYQQKP DGTFKLLIFY 51 TSRLLSGVPS RFSGSGSGTD YSLTIYNLEQ EDFATYFC QQ G D T LPY TFGG 101 GTKLEIKRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA SWCFLNNFY PKDINVKWKI 151 DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT LTKDEYERHN SYTCEATKT 201 STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO:165) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-8: 1 GATATCCAGA TGACACAGAC TACATCCTCC CTGTCTGCCT CTCTGGGAGA 51 CAGGGTCTCC ATCAGTTGCA GGGCAAGTCA AGACATTAGC AATTATTTAA 101 ACTGGTATCA GCAGAAACCA GATGGAACTT TTAAACTCCT TATCTTCTAC 151 ACATCAAGAT TACTCTCAGG AGTCCCATCA AGGTTCAGTG GCAGTGGGTC 201 TGG AACAGAT TATTCTCTCA CCATTTACAA CCTGGAGCAA GAAGATTTTG 251 CCACTTACTT TTGCCAACAG GGAGATACGC TTCCGTACAC TTTCGGAGGG 301 GGGACCAAAC TGGAAATAAA ACGGGCTGAT GCTGCACCAA CTGTATCCAT 351 CTTCCCACCA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC TCAGTCGTGT 401 GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA GTGGAAGATT 451 GATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA CTG ATCAGGA 501 CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG TTGACCAAGG 551 ACGAGTATGA ACGACATAAC AGCTATACCT GTGAGGCCAC TCACAAGACA 601 TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATGAGT GTTAG (SEC ID NO:166) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-8 que incluye el péptido señal: 1 MMSSAQFLGL LLLCFQGTRC DIQMTQTTSS LSASLGDRVS ISCRASQDIS 51 NILNWYQQKP DGTFKLLIFY TSRLLSGVPS RFSGSGSGTD YSLTIYNLEQ 101 EDFATYFCQQ GDTLPYTFGG GTKLEI KRAD AAPTVSIFPP SSEQ LTSGG A 151 S VCFLNNFY PKDINVKWKI DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYS M SSTLT 201 LTKDEYERHN SYTCEATKT STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO:167) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-8 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal: 1 ATGATGTCCT CTGCTCAGTT CCTTGGTCTC CTGTTGCTCT GTTTTCAAGG 51 TACCAGATGT GATATCCAGA TGACACAGAC TACATCCTCC CTGTCTGCCT 101 CTCTGGGAGA CAGGGTCTCC ATCAGTTGCA GGGCAAGTCA AGACATTAGC 151 AATTATTTAA ACTGGTATCA GCAGAAACCA GATGGAACTT TTAAACTCCT 201 TATCTTCTAC ACATCAAGAT TACTCTCAGG AGTCCCATCA AGGTTCAGTG 251 GCAGTGGGTC TGGAACAGAT TATTCTCTCA CCATTTACAA CCTGG AGCAA 301 GAAGATTTTG CCACTTACTT TTGCCAACAG GGAGATACGC TTCCGTACAC 351 TTTCGGAGGG GGGACCAAAC TGGAAATAAA ACGGGCTGAT GCTGCACCAA 401 CTGTATCCAT CTTCCCACCA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC 451 TCAGTCGTGT GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA 501 GTGGAAGATT GATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA 551 CTGATCAGGA CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG 601 TTGACCAAGG ACGAGTATGA ACGACATAAC AGCTATACCT GTG AGGCCAC 651 TCACAAGACA TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATGAGT 701 GTTAG (SEC ID NO:168) Cadena Pesada del Ab-8: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-8 es: 1 EVQLQQSGPE LM KPG ASVKM SCKASGYTFT DYNMHWVKQN QGKTLDWIGE 51 INPNSGGAGY NQKFKGKATL TVDKSSTTAY MELRSLTSED SAVYYCARLG 101 YDDIYDDWYF DVWGAGTTVT VSSAKTTPPS VYPLAPGSAA QTN SMVTLGC 151 LVKGYFPEPV TVTWNSGSLS SGVHTFPA VL QSDLYTLSSS VTVPSSTWPS 201 ETVTCNVAHP ASSTKVDKKI VPRDCGCKPC ICTVPEVSSV FIFPPKPKDV 251 LTITLTPKVT CVWDISKDD PEVQFSWFVD DVEVHTAQTQ PREEQFNSTF 301 RSVSELPIMH QDWLNGKEFK CRVNSAAFPA PIEKTI SKTK GRPKAPQVYT 351 IPPPKEQMAK DKVSLTCMIT DFFPEDITVE WQWNGQPAEN YKNTQPIMDT 401 DGSYFIYSKL NVQKSNWEAG NTFTCSVLHE GLHNHHTEKS LSHSPGK (SEC ID NO:169) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-8 es: 1 GAGGTCCAAC TGCAACAGTC TGGACCTGAA CTAATGAAGC CTGGGGCTTC 51 AGTGAAG ATG TCCTGCAAGG CTTCTGGATA TACATTCACT GACTACAACA 101 TGCACTGGGT GAAGCAGAAC CAAGGAAAGA CCCTAGACTG GATAGGAGAA 151 ATTAATCCTA ACAGTGGTGG TGCTGGCTAC AACCAG AAGT TCAAGGGCAA 201 GGCCACATTG ACTGTAGACA AGTCCTCCAC CACAGCCTAC ATGGAGCTCC 251 GCAGCCTGAC ATCTGAGGAC TCTGCAGTCT ATTACTGTGC AAG ATTGGGC 301 TACGATGATA TCTACG ACG A CTGGTACTTC GATGTCTGGG GCGCAGGGAC 351 CACGGTCACC GTCTCCTCAG CCAAAACGAC ACCCCCATCT GTCTATCCAC 401 TGGCCCCTGG ATCTGCTGCC CAAACTAACT CCATGGTGAC CCTGGGATGC 451 CTGGTCAAGG GCTATTTCCC TGAGCCAGTG ACAGTG ACCT GGAACTCTGG 501 ATCCCTGTCC AGCGGTGTGC ACACCTTCCC AGCTGTCCTG CAGTCTGACC 551 TCTACACTCT GAGCAGCTCA CCTCCAGCAC CTGGCCCAGC 601 GAG ACCGTCA CCTGCAACGT GCCAGCAGCA CCAAGGTGGA 651 CAAGAAAATT GTGCCCAGGG TAAGCCTTGC ATATGTACAG 701 TCCCAG AAGT ATCATCTGTC CCCCAAAGCC CAAGGATGTG 751 CTCACCATTA CTCTGACTCC TGTGTTGTGG TAGACATCAG 801 CAAGG ATGAT CCCGAGGTCC GTTTGTAGAT GATGTGGAGG 851 TGCACACAGC TCAGACGCAA AGCAGTTCAA CAGCACTTTC 901 CGCTCAGTCA GTGAACTTCC CAGGACTGGC TCAATGGCAA 951 GGAGTTCAAA TGCAGGGTCA TTTCCCTGCC CCCATCGAGA 1001 AAACCATCTC CAAAACCAAA AGGCTCCACA GGTGTACACC 1051 ATTCCACCTC CCAAGGAGCA GATAAAGTCA GTCTG ACCTG 1101 CATGATAACA GACTTCTTCC TACTGTGGAG TGGCAGTGGA 1151 ATGGGCAGCC AGCGGAGAAC TACAAGAACA CTCAGCCCAT CATGGACACA 1201 GATGGCTCTT ACTTCATCTA CAGCAAGCTC AATGTGCAGA AGAGCAACTG 1251 GGAGGCAGGA AATACTTTCA CCTGCTCTGT GTTACATGAG GGCCTGCACA 1301 ACCACCATAC TGAGAAGAGC CTCTCCCACT CTCCTGGTAA ATGA (SEC ID NO:170) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-8 que incluye el péptido señal es: 1 MGWSWTFLFL LSGTAGVLSE VQLQQSGPEL MKPGASVKMS CKASGYTFTD 51 YNMHWVKQNQ GKTLDWIGEI NPNSGGAGYN QKFKGKATLT VDKSSTTAYM 101 ELRSLTSEDS AVYYCARLGY DDI YDDWYFD VWGAGTTVTV SSAKTTPPSV 151 YPLAPGSAAQ TNSMVTLGCL VKGYFPEPVT VTWNSGSLSS GVHTFPAVLQ 201 SDLYTLSSSV TVPSSTWPSE TVTCNVAHPA SSTKVDKKIV PRDCGCKPCI 251 CTVPEVSSVF IFPPKPKDVL TITLTPKVTC VVVDISKDDP EVQFSWFVDD 301 VEVHTAQTQP REEQFNSTFR SVSELPIMHQ DWLNGKEFKC RVNSAAFPAP 351 I EKTISKTKG RPKAPQVYTI PPPKEQMAKD KVSLTCMITD FFPEDITVEW 401 QWNGQPAENY KNTQPIMDTD GSYFIYSKLN VQKSNWEAGN TFTCSVLHEG 451 LHNHHTEKSL SHSPGK (SEC ID NO:171) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-8 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal: 1 ATGGGATGGA GCTGGACCTT TCTCTTCCTC CTGTCAGGAA CTGCAGGTGT 51 CCTCTCTGAG GTCCAACTGC AACAGTCTGG ACCTGAACTA ATGAAGCCTG 101 GGGCTTCAGT GAAGATGTCC TGCAAGGCTT CTGGATATAC ATTCACTGAC 151 TACAACATGC ACTGGGTGAA GCAGAACCAA GGAAAGACCC TAGACTGGAT 201 AGGAGAAATT AATCCTAACA GTGGTGGTGC TGGCTACAAC CAGAAGTTCA 251 AGGGCAAGGC CACATTGACT GTAGACAAGT CCTCCACCAC AGCCTACATG 301 GAGCTCCGCA GCCTGACATC TGAGGACTCT GCAGTCTATT ACTGTGCAAG 351 ATTGGGCTAC GATGATATCT ACG ACGACTG GTACTTCGAT GTCTGGGGCG 401 CAGGGACCAC GGTCACCGTC TCCTCAGCCA AAACGACACC CCCATCTGTC 451 TATCCACTGG CCCCTGGATC TGCTGCCCAA ACTAACTCCA TGGTGACCCT 501 GGGATGCCTG GTCAAGGGCT GCCAGTGACA GTGACCTGGA 551 ACTCTGGATC CCTGTCCAGC CCTTCCCAGC TGTCCTGCAG 601 TCTGACCTCT ACACTCTGAG ACTGTCCCCT CCAGCACCTG 651 GCCCAGCGAG ACCGTCACCT CCACCCGGCC AGCAGCACCA 701 AGGTGGACAA GAAAATTGTG GTGGTTGTAA GCCTTGCATA 751 TGTACAGTCC CAG AAGTATC ATCTTCCCCC CAAAGCCCAA 801 GGATGTGCTC ACCATTACTC GGTCACGTGT GTTGTGGTAG 851 ACATCAGCAA GGATGATCCC TCAGCTGGTT TGTAGATGAT 901 GTGGAGGTGC ACACAGCTCA CGGGAGGAGC AGTTCAACAG 951 CACTTTCCGC TCAGTCAGTG CATGCACCAG GACTGGCTCA 1001 ATGGCAAGGA GTTCAAATGC GTGCAGCTTT CCCTGCCCCC 1051 ATCGAGAAAA CCATCTCCAA AGACCGAAGG CTCCACAGGT 1101 GTACACCATT CCACCTCCCA AGGAGCAGAT GGCCAAGGAT AAAGTCAGTC 1151 TGACCTGCAT GATAACAGAC TTCTTCCCTG AAGACATTAC TGTGGAGTGG 1201 CAGTGGAATG GGCAGCCAGC GGAGAACTAC AAGAACACTC AGCCCATCAT 1251 GGACACAGAT GGCTCTTACT TCATCTACAG CAAGCTCAAT GTGCAGAAGA 1301 GCAACTGGGA GGCAGGAAAT ACTTTCACCT GCTCTGTGTT ACATG AGGGC 1351 CTGCACAACC ACCATACTGA GAAGAGCCTC TCCCACTCTC CTGGTAAATG 1401 A (SEC ID NO:172) Ab-9 Las secuencias del anticuerpo 9 (también referido en la presente como Ab-9) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera del Ab-9: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-9 es: 1 DIQMTQITSS LSASLGDRVS ISCR¾QDIS Ü s YQQKP DGTFKLLI FY 51 RFSGSGSGTD YSLTI YNLEQ EDFATYFC11F! DT L .P¥¥ FGG 101 GTKVEIKRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA SVVCFLNNFY PKDINVKWKI 151 DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT LTKDEYERHN SYTCEATKT 201 STSPIVKSFN RNEC (SEC ID N0:173) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-9 es: 1 GATATCCAGA TGACACAGAT TACATCCTCC CTGTCTGCCT CTCTGGGAGA 51 CAGGGTCTCC ATCAGTTGCA GGGCAAGTCA AGACATTAGC AATTATTTAA 101 ATTGGTATCA GCAGAAACCA GATGGAACTT TTAAACTCCT TATCTTCTAC 151 ACATCAAGAT TATTTTCAGG AGTCCCATCA AGGTTCAGTG GCAGTGGGTC 201 TGGAACAGAT TATTCTCTCA CCATTTACAA CCTGG AGCAA GAAGATTTTG 251 CCACTTACTT TTGCCAACAG GGAGATACGC TTCCGTACAC TTTCGGAGGG 301 GGGACCAAGG TGGAAATAAA ACGGGCTGAT GCTGCACCAA CTGTATCCAT 351 CTTCCCACCA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC TCAGTCGTGT 401 GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA GTGGAAGATT 451 GATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA CTGATCAGGA 501 CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG TTG ACCAAGG 551 ACGAGTATGA ACGACATAAC AGCTATACCT GTGAGGCCAC TCACAAG ACA 601 TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATGAGT GT (SEC ID NO:174) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-9 que incluye el péptido señal es: 1 MMSSAQFLGL LLLCFQGTRC DIQMTQITSS LSASLGDRVS ISCRASQDIS 51 NILNWYQQKP DGTFKLLIFY TSRLFSGVPS RFSGSGSGTD YSLTIYNLEQ 101 EDFATYFCQQ GDTLPYTFGG GTKVEI KRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA 151 SVVCFLNNFY PKDINVKWKI DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT 201 LTKDEYERHN SYTCEATKT STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO:175) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-9 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal: 1 ATGATGTCCT CTGCTCAGTT CCTTGGTCTC CTGTTGCTCT GTTTTCAAGG 51 TACCAGATGT GATATCCAGA TGACACAGAT TACATCCTCC CTGTCTGCCT 101 CTCTGGGAGA CAGGGTCTCC GGGCAAGTCA AGACATTAGC 151 AATTATTTAA ATTGGTATCA GATGGAACTT TTAAACTCCT 201 TATCTTCTAC ACATCAAGAT AGTCCCATCA AGGTTCAGTG 251 GCAGTGGGTC TGGAACAGAT CCATTTACAA CCTGGAGCAA 301 GAAGATTTTG CCACTTACTT GGAGATACGC TTCCGTACAC 351 TTTCGGAGGG GGGACCAAGG ACGGGCTGAT GCTGCACCAA 401 CTGTATCCAT CTTCCCACCA AGTTAACATC TGGAGGTGCC 451 TCAGTCGTGT GCTTCTTGAA CCCAAAGACA TCAATGTCAA 501 GTGGAAGATT GATGGCAGTG TGGCGTCCTG AACAGTTGGA 551 CTGATCAGGA CAGCAAAGAC GCATGAGCAG CACCCTCACG 601 TTGACCAAGG ACGAGTATGA AGCTATACCT GTGAGGCCAC 651 TCACAAGACA TCAACTTCAC GAGCTTCAAC AGGAATGAGT 701 GT (SEC ID NO:176) Cadena Pesada del Ab-9: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-9 es: 1 EVQLQQSGPE LMKPGTSVKM SCKASGYTFT DYNMHWVKQT QGKTLEWIGE 51 INPNSGGAGY NQKFKGKATL TVDKSSTTAY MELRSLTSED SAVYYCAKLG 101 YDDIYDDWYF DVWGAGTTVT VSSAKTTAPS VYPLAPVCGD TTGSSVTLGC 151 LVKGYFPEPV TLTWNSGSLS SDVHTFPALL QSGLYTLSSS VTVTTWPSQT 201 ITCNVAHPAS STKVDKKIEP RGSPTKPCP PCPAPNLLGG PSVFIFPPKI 251 KDVLMISLSP MVTCVWDVS EDDPDVHVSW FVNNVEVHTA QTQTREDYN 301 STIRVVSALP IQHQDWMSGK EFKCKVN N KA LPAPIERTIS KPKGPVRAPQ 351 VYVLPPPEEE MTKKQVTLTC MITDFMPEDI YVEWTNNGQT ELNYKNTEPV 401 LDSDGSYFMY SKLRVEKKNW VERNSYSCSV VHEGLHNHHT TKSFSRTPGK (SEC ID N0 177) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-9 es: 1 GAGGTCCAAC TGCAACAGTC TGGACCTGAA CTAATGAAGC CTGGG ACTTC 51 AGTGAAGATG TCCTGCAAGG TACATTCACT GACTACAACA 101 TGCACTGGGT GAAGCAGACC CCCTAGAGTG GATAGGAGAA 151 ATTAATCCTA ACAGTGGTGG AACCAGAAGT TCAAGGGCAA 201 GGCCACATTG ACTGTAGACA CACAGCCTAC ATGGAGCTCC 251 GCAGCCTGAC ATCTG AGGAC ATTACTGTGC AAAATTGGGC 301 TACG ATGATA TCTACGACGA GATGTCTGGG GCGCAGGGAC 351 CACGGTCACC GTCTCCTCAG AGCCCCATCG GTCTATCCAC 401 TGGCCCCTGT GTGTGGAGAT CCTCGGTGAC TCTAGGATGC 451 CTGGTCAAGG GTTATTTCCC ACCTTGACCT GGAACTCTGG 501 ATCCCTGTCC AGTGATGTGC AGCTCTCCTG CAGTCTGGCC 551 TCTACACCCT CAGCAGCTCA CCACCTGGCC CAGCCAGACC 601 ATCACCTGCA ATGTGGCCCA AGCACCAAAG TGGACAAGAA 651 AATTGAGCCC AGAGGGTCCC ACCCTGTCCT CCATGCCCAG 701 CTCCTAACCT CTTGGGTGGA TCATCTTCCC TCCAAAGATC 751 AAGG ATGTAC TCATGATCTC ATGGTCACGT GTGTGGTGGT 801 GGATGTGAGC GAGG ATGACC TGTCAGCTGG TTCGTG AACA 851 ACGTGG AAGT ACACACAGCT CCCATAGAGA GGATTACAAC 901 AGTACTATCC GGGTGGTCAG ATCCAGCACC AGGACTGGAT 951 GAGTGGCAAG G AGTTCAAAT CAACAAAGCC CTCCCAGCGC 1001 CCATCGAGAG AACCATCTCA GGCCAGTAAG AGCTCCACAG 1051 GTATATGTCT TGCCTCCACC ATGACTAAGA AACAGGTCAC 1101 TCTGACCTGC ATG ATCACAG TGAAGACATT TACGTGG AGT 1151 GGACCAACAA CGGGCAAACA ACAAGAACAC TGAACCAGTC 1201 CTGGACTCTG ATGGTTCTTA AGCAAGCTGA GAGTGGAAAA 1251 GAAGAACTGG GTGGAAAGAA CTGTTCAGTG GTCCACGAGG 1301 GTCTGCACAA TCACCACACG ACTAAGAGCT TCTCCCGGAC TCCGGGTAAA (SEC ID NO:178) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-9 que incluye el péptido señal es: 1 MGWSWTFLFL LSGTAGVLSE VQLQQSGPEL MKPGTSVKMS CKASGYTFTD 51 YNMHWVKQTQ GKTLEWIGEI NPNSGGAGYN QKFKGKATLT VDKSSTTAYM 101 ELRSLTSEDS AVYYCAKLG Y DDIYDDWYFD VWGAGTTVTV SSAKTTAPSV 151 YPLAPVCGDT TGSSVTLGCL VKGYFPEPVT LTWNSGSLSS DVHTFPALLQ 201 SGLYTLSSSV TVTTWPSQTI TCNVAHPASS TKVDKKIEPR GSPTKPCPP 251 CPAPNLLGGP SVFIFPPKIK DVLMISLSPM VTCVVVDVSE DDPDVHVSWF 301 VNNVEVHTAQ TQTREDYNS TIRWSALPI QHQDWMSGKE FKCKVNNKAL 351 PAPIERTISK PKGPVRAPQV YVLPPPEEEM TKKQVTLTCM ITDFM PEDI Y 401 VEWTNNGQTE LNYKNTEPVL DSDGSYFMYS KLRVEKKNWV ERNSYSCSVV 451 HEGLHNHHTT KSFSRTPGK (SEC ID NO:179) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-9 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGGATGGA GCTGGACCTT CTGTCAGGAA CTGCAGGTGT 51 CCTCTCTGAG GTCCAACTGC ACCTG AACTA ATGAAGCCTG 101 GGACTTCAGT GAAG ATGTCC CTGGATATAC ATTCACTGAC 151 TACAACATGC ACTGGGTGAA GGAAAGACCC TAGAGTGGAT 201 AGG AGAAATT AATCCTAACA TGGCTACAAC CAGAAGTTCA 251 AGGGCAAGGC CACATTGACT CCTCCACCAC AGCCTACATG 301 GAGCTCCGCA GCCTGACATC GCAGTCTATT ACTGTGCAAA 351 ATTGGGCTAC GATGATATCT GTATTTCGAT GTCTGGGGCG 401 CAGGGACCAC GGTCACCGTC AAACAACAGC CCCATCGGTC 451 TATCCACTGG CCCCTGTGTG ACTGGCTCCT CGGTGACTCT 501 AGGATGCCTG GTCAAGGGTT GCCAGTGACC TTGACCTGGA 551 ACTCTGGATC CCTGTCCAGT CCTTCCCAGC TCTCCTGCAG 601 TCTGGCCTCT ACACCCTCAG ACTGTAACCA CCTGGCCCAG 651 CCAGACCATC ACCTGCAATG GGCAAGCAGC ACCAAAGTGG 701 ACAAGAAAAT TGAGCCCAGA CACATAAACC CTGTCCTCCA 751 TGCCCAGCTC CTAACCTCTT TCCGTCTTCA TCTTCCCTCC 801 AAAGATCAAG GATGTACTCA GAGCCCCATG GTCACGTGTG 851 TGGTGGTGGA TGTGAGCGAG ATGTCCATGT CAGCTGGTTC 901 GTGAACAACG TGGAAGTACA ACACAAACCC ATAGAGAGGA 951 TTACAACAGT ACTATCCGGG CCTCCCCATC CAGCACCAGG 1001 ACTGGATGAG TGGCAAGGAG AGGTCAACAA CAAAGCCCTC 1051 CCAGCGCCCA TCGAGAGAAC CCCAAAGGGC CAGTAAGAGC 1101 TCCACAGGTA TATGTCTTGC AGAAGAGATG ACTAAGAAAC 1151 AGGTCACTCT GACCTGCATG TCATGCCTGA AGACATTTAC 1201 GTGGAGTGGA CCAACAACGG CTAAACTACA AGAACACTGA 1251 ACCAGTCCTG GACTCTGATG GTTCTTACTT CATGTACAGC AAGCTGAGAG 1301 TGGAAAAGAA GAACTGGGTG GAAAGAAATA GCTACTCCTG TTCAGTGGTC 1351 CACGAGGGTC TGCACAATCA CCACACGACT AAGAGCTTCT CCCGGACTCC 1401 GGGTAAA (SEC ID NO:180) Ab-10 Las secuencias del anticuerpo 10 (también referido en la presente como Ab-10) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera del Ab-10: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) del Ab-10 LC: 1 DIQMTQTTSS LSASLGDRVS ISCRASQDIS NYLNWYQQKP DGTFKLLIFY 51 TSRLLSGVPS RFSGSGSGTD YSLTIYNLEQ EDFATYFCQQ GDTLPYTFGG 101 GTKLEIK/?AD AAPTVSIFPL SSEQL TSGGA SVVCFLNNFY PKDINVKWKI 151 DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT LTKDEYERHN SYTCEATKT 201 STSPLVKSFN RNEC (SEC ID NO:181) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-10 es: 1 GATATCCAGA TGACACAGAC TACATCCTCC CTGTCTGCCT CTCTGGG AGA 51 CAGGGTCTCC ATCAGTTGCA AGACATTAGC AATTATTTAA 101 ACTGGTATCA GCAGAAACCA TTAAACTCCT TATCTTCTAC 151 ACATCAAGAT TACTCTCAGG AGGTTCAGTG GCAGTGGGTC 201 TGGAACAGAT TATTCTCTCA CCTGGAGCAA GAAGATTTTG 251 CCACTTACTT TTGCCAACAG TTCCGTACAC TTTCGGAGGG 301 GGG ACCAAAC TGGAAATAAA GCTGCACCAA CTGTATCCAT 351 CTTCCCACTA TCCAGTGAGC TGGAGGTGCC TCAGTCGTGT 401 GCTTCTTGAA CAACTTCTAC TCAATGTCAA GTGGAAGATT 451 GATGGCAGTG AACGACAAAA AACAGTTGGA CTG ATCAGGA 501 CAGCAAAGAC AGCACCTACA CACCCTCACG TTGACCAAGG 551 ACGAGTATGA ACGACATAAC GTGAGGCCAC TCACAAGACA 601 TCAACTTCAC CCATTGTCAA AGGAATGAGT GTTAG (SEC ID NO:182) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-10 que incluye el péptido señal es: 1 MMSSAQFLGL LLLCFQGTRC D I Q MTQTTSS LSASLGDRVS ISCRASQDIS 51 NILNWYQQKP DGTFKLLI FY TSRLLSGVPS RFSGSGSGTD YSLTIYNLEQ 101 EDFATYFCQQ GDTLPYTFGG GTKLEI KRAD AAPTVSIFPL SSEQ LTSGGA 151 SVVCFLNNFY PKDINVKWKI DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT 201 LTKDEYERHN SYTCEATKT STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO:183) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-10 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGATGTCCT CTGCTCAGTT CCTTGGTCTC CTGTTGCTCT GTTTTCAAGG 51 TACCAGATGT GATATCCAGA TGACACAGAC TACATCCTCC CTGTCTGCCT 101 CTCTGGGAGA CAGGGTCTCC ATCAGTTGCA GGGCAAGTCA AGACATTAGC 151 AATTATTTAA ACTGGTATCA GCAGAAACCA GATGGAACTT TTAAACTCCT 201 TATCTTCTAC ACATCAAGAT TACTCTCAGG AGTCCCATCA AGGTTCAGTG 251 GCAGTGGGTC TGG AACAGAT TATTCTCTCA CCATTTACAA CCTGGAGCAA 301 GAAGATTTTG CCACTTACTT TTGCCAACAG GGAGATACGC TTCCGTACAC 351 TTTCGGAGGG GGGACCAAAC TGGAAATAAA ACGGGCTGAT GCTGCACCAA 401 CTGTATCCAT CTTCCCACTA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC 451 TCAGTCGTGT GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA 501 GTGGAAG ATT GATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA 551 CTGATCAGGA CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG 601 TTGACCAAGG ACGAGTATGA ACGACATAAC AGCTATACCT GTGAGGCCAC 651 TCACAAG ACA TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATG AGT 701 GTTAG (SEC ID NO:184) Cadena Pesada del Ab-10: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) del Ab-10 HC es: 1 EVQLQQSGPE LM KPG ASVKM SCKASGYTFT Df jiHWVKQN QGKTLEWIGE 51 l:N¾síl l;AG¾S - ''' ¾.F¾;KATL TVDKSSTTAY MELRSLTSED SAVYYC ARLG 101 YDDI YDDWYF DVWGAGTTVT VYPLAPGSAA QTNSMVTLGC 151 LVKGYFPEPV TVTWNSGSLS QSDLYTLSSS VTVPSSTWPS 201 ETVTCNVAHP ASSTKVDKKI ICTVPEVSSV FIFPPKPKDV 251 LTITLTPKVT CWVDISKDD DVEVHTAQTQ PREEQFNSTF 301 RSVSELPIMH QDWLNGKEFK PIEKTISKTK GRPKAPQVYT 351 IPPPKEQMAK DKVSLTCMIT WQWNGQPAEN YKNTQPIMDT 401 DGSYFIYSKL NVQKSNWEAG GLHNHHTEKS LSHSPGK (SEC ID NO:185) La secuencia de ácido nucleico que codif (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-10: 1 GAGGTCCAAC TGCAACAGTC CTAATGAAGC CTGGGGCTTC 51 AGTGAAGATG TCCTGCAAGG TACATTCACT GACTACAACA 101 TGCACTGGGT GAAGCAGAAC CCCTAGAATG GATAGGAGAA 151 ATTAATCCTA ACAGTGGTGG AACCAGAAGT TCAAGGGCAA 201 GGCCACATTG ACTGTAGACA CACAGCCTAC ATGGAGCTCC 251 GCAGCCTGAC ATCTG AGGAC ATTACTGTGC AAGATTGGGC 301 TACGATG ATA TCTACGACGA GATGTCTGGG GCGCAGGGAC 351 CACGGTCACC GTCTCCTCAG ACCCCCATCT GTCTATCCAC 401 TGGCCCCTGG ATCTGCTGCC CCATGGTGAC CCTGGGATGC 451 CTGGTCAAGG GCTATTTCCC ACAGTGACCT GGAACTCTGG 501 ATCCCTGTCC AGCGGTGTGC AGCTGTCCTG CAGTCTGACC 551 TCTACACTCT GAGCAGCTCA CCTCCAGCAC CTGGCCCAGC 601 GAGACCGTCA CCTGCAACGT GCCAGCAGCA CCAAGGTGGA 651 CAAGAAAATT GTGCCCAGGG TAAGCCTTGC ATATGTACAG 701 TCCCAGAAGT ATCATCTGTC CCCCAAAGCC CAAGGATGTG 751 CTCACCATTA CTCTGACTCC TGTGTTGTGG TAG ACATCAG 801 CAAGGATGAT CCCGAGGTCC GTTTGTAGAT GATGTGGAGG 851 TGCACACAGC TCAGACGCAA CCCCGGG AGG AGCAGTTCAA CAGCACTTTC 901 CGCTCAGTCA GTGAACTTCC CATCATGCAC CAGGACTGGC TCAATGGCAA 951 GGAGTTCAAA TGCAGGGTCA ACAGTGCAGC TTTCCCTGCC CCCATCGAGA 1001 AAACCATCTC CAAAACCAAA GGCAGACCGA AGGCTCCACA GGTGTACACC 1051 ATTCCACCTC CCAAGGAGCA GATGGCCAAG GATAAAGTCA GTCTGACCTG 1101 CATGATAACA GACTTCTTCC CTGAAGACAT TACTGTGGAG TGGCAGTGGA 1151 ATGGGCAGCC AGCGGAG AAC TACAAGAACA CTCAGCCCAT CATGGACACA 1201 GATGGCTCTT ACTTCATCTA CAGCAAGCTC AATGTGCAGA AGAGCAACTG 1251 GGAGGCAGGA AATACTTTCA CCTGCTCTGT GTTACATGAG GGCCTGCACA 1301 ACCACCATAC TGAGAAGAGC CTCTCCCACT CTCCTGGTAA ATGA (SEC ID NO:186) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-10 que incluye el péptido señal es: 1 MGWSWTFLFL LSGTAGVLSE VQLQQSGPEL MKPGASVKMS CKASGYTFTD 51 YNMHWVKQNQ GKTLEWIGEI NPNSGGAGYN QKFKGKATLT VDKSSTTAYM 101 ELRSLTSEDS AVYYCARLGY DDI YDDWYFD VWGAGTTVTV SSAKTTPPSV 151 YPLAPGSAAQ TNSMVTLGCL VKGYFPEPVT VTWNSGSLSS GVHTFPAVLQ 201 SDLYTLSSSV TVPSSTWPSE TVTCNVAHPA SSTKVDKKIV PRDCGCKPCI 251 CTVPEVSSVF IFPPKPKDVL TITLTPKVTC VVVDISKDDP EVQFSWFVDD 301 VEVHTAQTQP REEQFNSTFR SVS E LP I M H Q DWLNGKEFKC RVNSAAFPAP 351 I EKTISKTKG RPKAPQVYTI PPPKEQMAKD KVSLTCM ITD FFPEDITVEW 401 QWNGQPAENY KNTQ P I M DTD GSYFIYSKLN VQKSNWEAGN TFTCSVLHEG 451 LHNHHTEKSL SHSPGK (SEC ID NO:187) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-10 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGGATGGA GCTGGACCTT TCTCTTCCTC CTGTCAGGAA CTGCAGGTGT 51 CCTCTCTGAG GTCCAACTGC AACAGTCTGG ACCTG AACTA ATG AAGCCTG 101 GGGCTTCAGT GAAGATGTCC TGCAAGGCTT CTGGATATAC ATTCACTGAC 151 TACAACATGC ACTGGGTGAA GCAGAACCAA GGAAAGACCC TAGAATGGAT 201 AGGAGAAATT AATCCTAACA TGGCTACAAC CAGAAGTTCA 251 AGGGCAAGGC CACATTG ACT CCTCCACCAC AGCCTACATG 301 GAGCTCCGCA GCCTGACATC GCAGTCTATT ACTGTGCAAG 351 ATTGGGCTAC G ATG ATATCT GTACTTCGAT GTCTGGGGCG 401 CAGGGACCAC GGTCACCGTC AAACGACACC CCCATCTGTC 451 TATCCACTGG CCCCTGGATC ACTAACTCCA TGGTG ACCCT 501 GGGATGCCTG GTCAAGGGCT GCCAGTGACA GTGACCTGGA 551 ACTCTGGATC CCTGTCCAGC CCTTCCCAGC TGTCCTGCAG 601 TCTGACCTCT ACACTCTGAG ACTGTCCCCT CCAGCACCTG 651 GCCCAGCGAG ACCGTCACCT CCACCCGGCC AGCAGCACCA 701 AGGTGGACAA GAAAATTGTG GTGGTTGTAA GCCTTGCATA 751 TGTACAGTCC CAGAAGTATC ATCTTCCCCC CAAAGCCCAA 801 GGATGTGCTC ACCATTACTC TGACTCCTAA GGTCACGTGT GTTGTGGTAG 851 ACATCAGCAA GGATGATCCC GAGGTCCAGT TCAGCTGGTT TGTAGATGAT 901 GTGGAGGTGC ACACAGCTCA GACGCAACCC CGGGAGGAGC AGTTCAACAG 951 CACTTTCCGC TCAGTCAGTG AACTTCCCAT CATGCACCAG GACTGGCTCA 1001 ATGGCAAGGA GTTCAAATGC AGGGTCAACA GTGCAGCTTT CCCTGCCCCC 1051 ATCGAGAAAA CCATCTCCAA AACCAAAGGC AGACCGAAGG CTCCACAGGT 1101 GTACACCATT CCACCTCCCA AGGAGCAGAT GGCCAAGGAT AAAGTCAGTC 1151 TGACCTGCAT GATAACAGAC TTCTTCCCTG AAGACATTAC TGTGGAGTGG 1201 CAGTGGAATG GGCAGCCAGC GGAGAACTAC AAGAACACTC AGCCCATCAT 1251 GGACACAGAT GGCTCTTACT TCATCTACAG CAAGCTCAAT GTGCAGAAGA 1301 GCAACTGGGA GGCAGGAAAT ACTTTCACCT GCTCTGTGTT ACATGAGGGC 1351 CTGCACAACC ACCATACTGA GAAGAGCCTC TCCCACTCTC CTGGTAAATG 1401 A (SEC ID N0:188) Ab-11 Las secuencias del anticuerpo 11 (también referido en la presente como Ab-11) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera del Ab-11: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-11 es: 1 QIVLSQSPAF LSVSPGDKVT MTCRASSSIS ÜiWFQQKPG SSPRSWIYA® 51 SS11Í¡GVPGR FSGSGSGTSY SLTISRVEAE DAATYYCQQ,W^^DPWFGAG 101 JK ELKRADA APTVSIFPPS SEQLTSGGAS VVCFLNNFYP KDINVKWKID 151 GSERQNGVLN SWTDQDSKDS TYSMSSTLTL TKDEYERHNS YTCEATKTS 201 TSPIVKSFNR NEC (SEC ID NO:189) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-11 es: 1 CAAATTGTTC TCTCCCAGTC TCCAGCATTC CTGTCTGTAT CTCCAGGGGA 51 TAAGGTCACA ATG ACTTGCA GGGCCAGCTC AAGTATAAGT TACATACACT 101 GGTTTCAGC A GAAGCCAGGA TCCTCCCCCA GATCCTGGAT TTATGCCACA 151 TCCAACCTGG CTTCTGGAGT CCCTGGTCGC TTCAGTGGCA GTGGGTCTGG 201 GACCTCTTAC TCTCTCACAA TCAGCAGAGT GGAGGCTGAG GATGCTGCCA 251 CTTATTACTG CCAGCAGTGG AGTAGTG ACC CACTCACGTT CGGTGCTGGG 301 ACCAAGCTGG AGCTGAAACG GGCTGATGCT GCACCAACTG TATCCATCTT 351 CCCACCATCC AGTGAGCAGT TAACATCTGG AGGTGCCTCA GTCGTGTGCT 401 TCTTGAACAA CTTCTACCCC AAAGACATCA ATGTCAAGTG GAAGATTGAT 451 GGCAGTGAAC GACAAAATGG CGTCCTGAAC AGTTGGACTG ATCAGGACAG 501 CAAAGACAGC ACCTACAGCA TGAGCAGCAC CCTCACGTTG ACCAAGGACG 551 AGTATGAACG ACATAACAGC TATACCTGTG AGGCCACTCA CAAG ACATCA 601 ACTTCACCCA TTGTCAAGAG CTTCAACAGG AATGAGTGTT AG (SEC ID NO:190) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-11 que incluye el péptido señal es: 1 MDFQVQIFSF LLISASVIMS RGQIVLSQSP AFLSVSPGDK VTMTCRASSS 51 ISYIHWFQQK PGSSPRSWIY ATSN LASGVP GRFSGSGSGT SYSLTISRVE 101 AEDAATYYCQ QWSSDPLTFG AGTKLELKRA DAAPTVSIFP PSSEQ LTSGG 151 ASVVCFLNNF YPKDI NVKWK IDGSERQNGV LNSWTDQDSK DSTYSMSSTL 201 TLTKDEYERH NSYTCEATK TSTSPIVKSF NRNEC (SEC ID NO:191) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-11 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGATTTTC AAGTGCAGAT TTTCAGCTTC CTGCTAATCA GTGCTTCAGT 51 CATAATGTCC AGAGGACAAA TTGTTCTCTC CCAGTCTCCA GCATTCCTGT 101 CTGTATCTCC AGGGGATAAG GTCACAATGA CTTGCAGGGC CAGCTCAAGT 151 ATAAGTTACA TACACTGGTT TCAGCAGAAG CCAGG ATCCT CCCCCAGATC 201 CTGGATTTAT GCCACATCCA ACCTGGCTTC TGGAGTCCCT GGTCGCTTCA 251 GTGGCAGTGG GTCTGGGACC TCTTACTCTC TCACAATCAG CAG AGTGGAG 301 GCTG AGGATG CTGCCACTTA TTACTGCCAG CAGTGGAGTA GTGACCCACT 351 CACGTTCGGT GCTGGGACCA AGCTGGAGCT GAAACGGGCT GATGCTGCAC 401 CAACTGTATC CATCTTCCCA CCATCCAGTG AGCAGTTAAC ATCTGG AGGT 451 GCCTCAGTCG TGTGCTTCTT GAACAACTTC TACCCCAAAG ACATCAATGT 501 CAAGTGGAAG ATTGATGGCA GTGAACGACA AAATGGCGTC CTGAACAGTT 551 GGACTGATCA GGACAGCAAA GACAGCACCT ACAGCATGAG CAGCACCCTC 601 ACGTTGACCA AGGACG AGTA TGAACGACAT AACAGCTATA CCTGTGAGGC 651 CACTCACAAG ACATCAACTT CACCCATTGT CAAGAGCTTC AACAGG AATG 701 AGTGTTAG (SEC ID NO:192) Cadena Pesada del Ab-11: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-11 es: 1 EVQLQQSGAD LVQPGASVKV SCTASGFDIK DYYIHWMKQR PDQGLEWIGR 51 VBPDNGÉTEF f APKFPGKATF TTDTSSNTAY LQLRGLTSED TAI YYCG RED 101 YDGTYTWFPY WGQGTLVTVS AAKTTPPSVY PLAPGSAAQT NSMVTLGCL V 151 KGYFPEPVTV TWNSGSLSSG VHTFPAVLQS DLYTLSSSVT VPSSTWPSET 201 VTCNVAHPAS STKVDKKIVP RDCGCKPCLC TVPEVSSVFI FPPKPKDVLT 251 ITLTPKVTCV WDISKDDPE VQFSWFVDDV EVHTAQTQPR EEQFNSTFRS 301 VSELPIMHQD WLNGKEFKCR VNSAAFPAPL EKTISKTKGR PKAPQVYTIP 351 PPKEQMAKDK VSLTCMITDF FPEDITVEWQ WNGQPAENYK NTQPIMDTDG 401 SYFIYSKLNV QKSNWEAGNT FTCSVLHEGL HNHHTEKSLS HSPGK (SEC ID NO:193) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-11 es: 1 GAAGTTCAGC TGCAACAGTC TGGGGCAGAC CTTGTGCAGC CAGGGGCCTC 51 AGTCAAGGTG TCCTGCACAG CTTCTGGCTT CGACATTAAG GACTACTATA 101 TACACTGGAT GAAACAGAGG CCTGACCAGG GCCTGGAGTG GATTGGAAGG 151 GTTGATCCTG ACAATGGTGA GACTGAATTT GCCCCGAAGT TCCCGGGCAA 201 GGCCACTTTT ACAACAGACA CATCCTCCAA CACAGCCTAC CTACAACTCA 251 GAGGCCTGAC ATCTGAGGAC ACTGCCATCT ATTACTGTGG GAG AGAAGAC 301 TACGATGGTA CCTACACCTG GTTTCCTTAT TGGGGCCAAG GGACTCTGGT 351 CACTGTCTCT GCAGCCAAAA CGACACCCCC ATCTGTCTAT CCACTGGCCC 401 CTGGATCTGC TGCCCAAACT TGACCCTGGG ATGCCTGGTC 451 AAGGGCTATT TCCCTGAGCC ACCTGGAACT CTGGATCCCT 501 GTCCAGCGGT GTGCACACCT CCTGCAGTCT GACCTCTACA 551 CTCTGAGCAG CTCAGTGACT GCACCTGGCC CAGCGAGACC 601 GTCACCTGCA ACGTTGCCCA AGCACCAAGG TGGACAAGAA 651 AATTGTGCCC AGGG ATTGTG TTGCATATGT ACAGTCCCAG 701 AAGTATCATC TGTCTTCATC AGCCCAAGGA TGTGCTCACC 751 ATTACTCTGA CTCCTAAGGT GTGGTAGACA TCAGCAAGGA 801 TGATCCCGAG GTCCAGTTCA AGATGATGTG GAGGTGCACA 851 CAGCTCAGAC GCAACCCCGG TCAACAGCAC TTTCCGCTCA 901 GTCAGTGAAC TTCCCATCAT TGGCTCAATG GCAAGG AGTT 951 CAAATGCAGG GTCAACAGTG TGCCCCCATC GAGAAAACCA 1001 TCTCCAAAAC CAAAGGCAGA CACAGGTGTA CACCATTCCA 1051 CCTCCCAAGG AGCAGATGGC CAAGGATAAA GTCAGTCTGA CCTGCATGAT 1101 AACAGACTTC TTCCCTG AAG ACATTACTGT GGAGTGGCAG TGGAATGGGC 1151 AGCCAGCGGA GAACTACAAG AACACTCAGC CCATCATGGA CACAGATGGC 1201 TCTTACTTCA TCTACAGCAA GCTCAATGTG CAGAAGAGCA ACTGGGAGGC 1251 AGGAAATACT TTCACCTGCT CTGTGTTACA TGAGGGCCTG CACAACCACC 1301 ATACTGAGAA GAGCCTCTCC CACTCTCCTG GTAAATGA (SEC ID NO:194) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-11 que incluye el péptido señal es: 1 MKCSWVIFFL MAVVTGVNSE VQLQQSGADL VQPGASVKVS CTASGFDIKD 51 YYIHWMKQRP DQGLEWIGRV DPDNGETEFA PKFPGKATFT TDTSSNTAIL 101 QLRGLTSEDT Al YYCGREDY DGTYTWFPYW GQGTLVTVSA AKTTPPSVYP 151 LAPGSAAQTN SMVTLGCLVK GYFPEPVTVT WNSGSLSSGV HTFPAVLQSD 201 LYTLSSSVTV PSSTWPSETV TCNVAHPASS TKVDKKIVPR DCGCKPCICT 251 VPEVSSVFIF PPKPKDVLTI TLTPKVTCVV VDISKDDPEV QFSWFVDDVE 301 VHTAQTQPRE EQFNSTFRSV SELPIMHQDW LNGKEFKCRV NSAAFPAPIE 351 KTISKTKGRP KAPQVYTIPP P KEQ M AKD KV SLTCM ITDFF PEDITVEWQW 401 NGQPAENYKN TQPIMDTDGS YFIYSKLNVQ KSNWEAGNTF TCSVLHEGLH 451 NHHTEKSLSH SPGK (SEC ID NO:195) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-11 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGAAATGCA GCTGGGTCAT CTTCTTCCTG ATGGCAGTGG TTACAGGGGT 51 CAATTCAGAA GTTCAGCTGC AACAGTCTGG GGCAGACCTT GTGCAGCCAG 101 GGGCCTCAGT CAAGGTGTCC TGCACAGCTT CTGGCTTCGA CATTAAGGAC 151 TACTATATAC ACTGGATGAA ACAGAGGCCT GACCAGGGCC TGGAGTGGAT 201 TGGAAGGGTT GATCCTGACA ATGGTGAGAC TGAATTTGCC CCGAAGTTCC 251 CGGGCAAGGC CACTTTTACA ACAGACACAT CCTCCAACAC AGCCTACCTA 301 CAACTCAGAG GCCTGACATC TGAGGACACT GCCATCTATT ACTGTGGGAG 351 AGAAGACTAC GATGGTACCT TCCTTATTGG GGCCAAGGGA 401 CTCTGGTCAC TGTCTCTGCA CACCCCCATC TGTCTATCCA 451 CTGGCCCCTG GATCTGCTGC TCCATGGTGA CCCTGGGATG 501 CCTGGTCAAG GGCTATTTCC GACAGTGACC TGG AACTCTG 551 GATCCCTGTC CAGCGGTGTG CAGCTGTCCT GCAGTCTGAC 601 CTCTACACTC TGAGCAGCTC CCCTCCAGCA CCTGGCCCAG 651 CGAGACCGTC ACCTGCAACG GGCCAGCAGC ACCAAGGTGG 701 ACAAGAAAAT TGTGCCCAGG GTAAGCCTTG CATATGTACA 751 GTCCCAGAAG TATCATCTGT CCCCCAAAGC CCAAGGATGT 801 GCTCACCATT ACTCTGACTC GTGTGTTGTG GTAGACATCA 851 GCAAGGATGA TCCCGAGGTC GGTTTGTAGA TGATGTGGAG 901 GTGCACACAG CTCAGACGCA GAGCAGTTCA ACAGCACTTT 951 CCGCTCAGTC AGTGAACTTC CCAGGACTGG CTCAATGGCA 1001 AGGAGTTCAA ATGCAGGGTC AACAGTGCAG CTTTCCCTGC CCCCATCGAG 1051 AAACCATCT CCAAAACCAA AGGCAGACCG AAGGCTCCAC AGGTGTACAC 1101 CATTCCACCT CCCAAGGAGC AGATGGCCAA GGATAAAGTC AGTCTGACCT 1151 GCATGATAAC AGACTTCTTC CCTG AAGACA TTACTGTGGA GTGGCAGTGG 1201 AATGGGCAGC CAGCGGAGAA CTACAAGAAC ACTCAGCCCA TCATGGACAC 1251 AGATGGCTCT TACTTCATCT ACAGCAAGCT CAATGTGCAG AAGAGCAACT 1301 GGGAGGCAGG AAATACTTTC ACCTGCTCTG TGTTACATGA GGGCCTGCAC 1351 AACCACCATA CTGAG AAGAG CCTCTCCCAC TCTCCTGGTA AATGA (SEC ID NO:196) Ab-12 Las secuencias del anticuerpo 12 (también referido en la presente como Ab-12) del LC y HC son como sigue: Cadena ligera del Ab-12: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de Ab-12 LC es: 1 DLQMTQTTSS LSASLGDRVT ISCRASQDIS NILNWYQQECP DGTVKLLIFY 51 TSTLQSGVPS RFSGSGSGTN YSLTITNLEQ DDAATYFCgQ G ifPY FGG 101 GTKLEIKKiAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA SWCFLNNFY PKDINVKWKI 151 DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT LTKDEYERHN SYTCEATKT 201 STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO:197) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-12 es: 1 GATCTCCAGA TGACACAGAC TACTTCCTCC CTGTCTGCCT CTCTGGGAGA 51 CAG AGTCACC ATCAGTTGCA GGGCAAGTCA GGACATTAGC AATTATTTAA 101 ACTGGTATCA GCAG AAACCA GATGG AACTG TTAAGCTCCT GATCTTCTAC 151 ACATCAACAT TACAGTCAGG AGTCCCATCG AGGTTCAGTG GCAGTGGGTC 201 TGGAACAAAT TATTCTCTCA CCATTACCAA CCTGGAGCAA GATG ATGCTG 251 CCACTTACTT TTGCCAACAG GGTGATACGC TTCCGTACAC GTTCGGAGGG 301 GGGACCAAGC TGGAAATAAA ACGGGCTGAT GCTGCACCAA CTGTATCCAT 351 CTTCCCACCA TCCAGTGAGC AGTTAACATC TGGAGGTGCC TCAGTCGTGT 401 GCTTCTTGAA CAACTTCTAC CCCAAAGACA TCAATGTCAA GTGGAAGATT 451 GATGGCAGTG AACGACAAAA TGGCGTCCTG AACAGTTGGA CTGATCAGGA 501 CAGCAAAGAC AGCACCTACA GCATGAGCAG CACCCTCACG TTG ACCAAGG 551 ACG AGTATGA ACGACATAAC AGCTATACCT GTG AGGCCAC TCACAAGACA 601 TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGG AATGAGT GTTAG (SEC ID NO:198) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-12 que incluye el péptido señal es: 1 MMSSAQFLGL LLLCFQGSRC DLQMTQTTSS LSASLGDRVT ISCRASQDIS 51 N I LNWYQQKP DGTVKLLIFY TSTLQSGVPS RFSGSGSGTN YSLTITNLEQ 101 DDAATYFCQQ GDTLPYTFGG GTKLE I KRAD AAPTVSIFPP SSEQLTSGGA 151 SVVCFLNNFY PKDINVKWKI DGSERQNGVL NSWTDQDSKD STYSMSSTLT 201 LTKDEYERHN SYTCEATKT STSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO:199) La secuencia de ácido nucleico de Ab-12 LC que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGATGTCCT CTGCTCAGTT CCTTGGTCTC CTGTTGCTCT GTTTTCAAGG 51 TTCCAGATGT GATCTCCAGA TACTTCCTCC CTGTCTGCCT 101 CTCTGGGAGA CAGAGTCACC GGGCAAGTCA GGACATTAGC 151 AATTATTAA ACTGGTATCA GATGGAACTG TTAAGCTCCT 201 GATCTTCTAC ACATCAACAT AGTCCCATCG AGGTTCAGTG 251 GCAGTGGGTC TGGAACAAAT CCATTACCAA CCTGGAGCAA 301 GATGATGCTG CCACTTACTT GGTGATACGC TTCCGTACAC 351 GTTCGGAGGG GGGACCAAGC ACGGGCTGAT GCTGCACCAA 401 CTGTATCCAT CTTCCCACCA AGTTAACATC TGGAGGTGCC 451 TCAGTCGTGT GCTTCTTGAA CCCAAAGACA TCAATGTCAA 501 GTGGAAGATT GATGGCAGTG TGGCGTCCTG AACAGTTGGA 551 CTGATCAGGA CAGCAAAGAC GCATGAGCAG CACCCTCACG 601 TTGACCAAGG ACGAGTATGA AGCTATACCT GTGAGGCCAC 651 TCACAAGACA TCAACTTCAC CCATTGTCAA GAGCTTCAAC AGGAATGAGT 701 GTTAG (SEC ID NO:200) Cadena Pesada del Ab-12. La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-12 es: 1 EVQLQQSGPE LMKPGASVK SCKASGYTFT DYNMHWMKQN QGKSLEWIGE 51 I N PNSGGSGY NQKFKGKATL TVDKSSSTAY MELRSLTSED SAVYYCARLG 101 YYGNYEDWYF DVWGAGTTVT VSSAKTTPPS VYPLAPGSAA QTNSMVTLGC 151 LVKGYFPEPV TVTWNSGSLS SGVHTFPAVL QSDL YTLSSS VTVPSSTWPS 201 ETVTCNVAHP ASSTKVDKKI VPRDCGCKPC ICTVPEVSSV FIFPPKPKDV 251 LTITLTPKVT CVWDISKDD PEVQFSWFVD DVEVHTAQTQ PREEQFNSTF 301 RSVSELPIMH QDWLNGKEFK CRVNSAAFPA PIEKTI SKTK GRPKAPQVYT 351 IPPPKEQMAK DKVSL TCMIT DFFPEDITVE WQWNGQPAEN YKNTQPIMDT 401 DGSYFIYSKL NVQKSNWEAG NTFTCSVLHE GLHNHHTEKS LSHSPGK (SEC ID NO 201) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-12 es 1 GAGGTCCAGT TGCAACAGTC TGGACCTGAA CTAATGAAGC CTGGGGCTTC 51 AGTGAAG ATG TCCTGCAAGG CTTCTGGATA CACATTCACT GACTACAACA 101 TGCACTGGAT GAAGCAGAAC CAAGGAAAGA GCCTAGAGTG GATAGGAGAG 151 ATTAATCCTA ACAGTGGTGG TTCTGGTTAC AACCAG AAGT TCAAAGGCAA 201 GGCCACATTG ACTGTAGACA AGTCCTCCAG CACAGCCTAC ATGGAGCTCC 251 GCAGCCTGAC ATCTG AGGAC TCTGCAGTCT ATTACTGTGC AAGATTGGGC 301 TACTATGGTA ACTACG AGGA CTGGTATTTC GATGTCTGGG GCGCAGGGAC 351 CACGGTCACC GTCTCCTCTG CCAAAACGAC ACCCCCATCT GTCTATCCAC 401 TGGCCCCTGG ATCTGCTGCC CAAACTAACT CCATGGTGAC CCTGGGATGC 451 CTGGTCAAGG GCTATTTCCC TGAGCCAGTG ACAGTG ACCT GGAACTCTGG 501 ATCCCTGTCC AGCGGTGTGC ACACCTTCCC AGCTGTCCTG CAGTCTGACC 551 TCTACACTCT GAGCAGCTCA GTG ACTGTCC CCTCCAGCAC CTGGCCCAGC 601 GAG ACCGTCA CCTGCAACGT GCCAGCAGCA CCAAGGTGGA 651 CAAGAAAATT GTGCCCAGGG TAAGCCTTGC ATATGTACAG 701 TCCCAGAAGT ATCATCTGTC CCCCAAAGCC CAAGGATGTG 751 CTCACCATTA CTCTGACTCC TGTGTTGTGG TAGACATCAG 801 CAAGGATGAT CCCGAGGTCC GTTTGTAGAT GATGTGGAGG 851 TGCACACAGC TCAGACGCAA AGCAGTTCAA CAGCACTTTC 901 CGCTCAGTCA GTGAACTTCC CAGGACTGGC TCAATGGCAA 951 GGAGTTCAAA TGCAGGGTCA TTTCCCTGCC CCCATCGAGA 1001 AAACCATCTC CAAAACCAAA AGGCTCCACA GGTGTACACC 1051 ATTCCACCTC CCAAGGAGCA GATAAAGTCA GTCTGACCTG 1001 CATGATAACA GACTTCTTCC TACTGTGGAG TGGCAGTGGA 1151 ATGGGCAGCC AGCGGAG AAC CTCAGCCCAT CATGGACACA 1201 GATGGCTCTT ACTTCATCTA AATGTGCAGA AGAGCAACTG 1251 GGAGGCAGGA AATACTTTCA CCTGCTCTGT GTTACATGAG GGCCTGCACA 1301 ACCACCATAC TGAGAAGAGC CTCTCCCACT CTCCTGGTAA ATGA (SEC ID NO:202) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-12 que incluye el péptido señal es: 1 MGWSWTFLFL LSGTSGVLSE VQLQQSGPEL MKPGASVKMS CKASGYTFTD 51 YNMHWMKQNQ GKSLEWIGEI NPNSGGSGYN QKFKGKATLT VDKSSSTAY 101 ELRSLTSEDS AVYYCARLGY YGNYEDWYFD VWGAGTTVTV SSAKTTPPSV 151 YPLAPGSAAQ TNSMVTLGCL VKGYFPEPVT VTWNSGSLSS GVHTFPAVLQ 201 SDLYTLSSSV TVPSSTWPSE TVTCNVAHPA SSTKVDKKIV PRDCGCKPCI 251 CTVPEVSSVF IFPPKPKDVL TITLTPKVTC VVVDISKDDP EVQFSWFVDD 301 VEVHTAQTQP REEQFNSTFR SVSELPI HQ DWLNGKEFKC RVNSAAFPAP 351 IEKTISKTKG RPKAPQVYTI PPPKEQMAKD KVSLTCMITD FFPEDITVEW 401 QWNGQPAENY KNTQPIMDTD GSYFIYSKLN VQKSNWEAGN TFTCSVLHEG 451 LHNHHTEKSL SHSPGK (SEC ID NO:203) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-12 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGGATGGA GCTGGACCTT TCTCTTCCTC CTGTCAGGAA CTTCGGGTGT 51 CCTCTCTGAG GTCCAGTTGC AACAGTCTGG ACCTGAACTA ATG AAGCCTG 101 GGGCTTCAGT GAAGATGTCC TGCAAGGCTT CTGGATACAC ATTCACTGAC 151 TACAACATGC ACTGGATGAA GCAGAACCAA GGAAAGAGCC TAGAGTGGAT 201 AGGAGAGATT AATCCTAACA GTGGTGGTTC TGGTTACAAC CAGAAGTTCA 251 AAGGCAAGGC CACATTGACT GTAG ACAAGT CCTCCAGCAC AGCCTACATG 301 GAGCTCCGCA GCCTGACATC TGAGGACTCT GCAGTCTATT ACTGTGCAAG 351 ATTGGGCTAC TATGGTAACT ACGAGGACTG GTATTTCGAT GTCTGGGGCG 401 CAGGGACCAC GGTCACCGTC TCCTCTGCCA AAACGACACC CCCATCTGTC 451 TATCCACTGG CCCCTGGATC TGCTGCCCAA ACTAACTCCA TGGTGACCCT 501 GGGATGCCTG GTCAAGGGCT ATTTCCCTGA GCCAGTGACA GTGACCTGGA 551 ACTCTGGATC CCTGTCCAGC CCTTCCCAGC TGTCCTGCAG 601 TCTGACCTCT ACACTCTGAG ACTGTCCCCT CCAGCACCTG 651 GCCCAGCGAG ACCGTCACCT CCACCCGGCC AGCAGCACCA 701 AGGTGGACAA GAAAATTGTG GTGGTTGTAA GCCTTGCATA 751 TGTACAGTCC CAGAAGTATC ATCTTCCCCC CAAAGCCCAA 801 GGATGTGCTC ACCATTACTC GGTCACGTGT GTTGTGGTAG 851 ACATCAGCAA GGATGATCCC TCAGCTGGTT TGTAGATGAT 901 GTGGAGGTGC ACACAGCTCA CGGGAGGAGC AGTTCAACAG 951 CACTTTCCGC TCAGTCAGTG CATGCACCAG GACTGGCTCA 1001 ATGGCAAGGA GTTCAAATGC GTGCAGCTTT CCCTGCCCCC 1051 ATCGAG AAAA CCATCTCCAA AGACCGAAGG CTCCACAGGT 1101 GTACACCATT CCACCTCCCA GGCCAAGGAT AAAGTCAGTC 1151 TGACCTGCAT GATAACAGAC AAGACATTAC TGTGGAGTGG 1201 CAGTGG AATG GGCAGCCAGC GGAGAACTAC AAGAACACTC AGCCCATCAT 1251 GGACACAGAT GGCTCTTACT TCATCTACAG CAAGCTCAAT GTGCAGAAGA 1301 GCAACTGGGA GGCAGGAAAT ACTTTCACCT GCTCTGTGTT ACATGAGGGC 1351 CTGCACAACC ACCATACTGA GAAGAGCCTC TCCCACTCTC CTGGTAAATG 1401 A (SEC ID NO:204) Ab-13 Las secuencias del anticuerpo 13 (también referido en la presente como Ab-13) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera del Ab-13: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-13 es: 1 QIVLTQSPAI MSASPGEKVT MTCRASSSVF SSYLNWYQQK PGSSPKLWIY 51 STSNLASGVP ARFSGSGSGT SYSLTISSVE AEDAATYYQQ QYDFFPSTFG 101 GGTKLEIKRA DAAPTVSIFP PSSEQLTSGG ASWCFLNNF YPKDINVKWK 151 IDGSERQNGV LNSWTDQDSK DSTYSMSSTL TLTKDEYERH NSYTCEATK 201 TSTSPIVKSFN RNEC (SEC ID NO.205) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-13 es: 1 CAGATTGTTC TCACCCAGTC TCCAGCAATC ATGTCTGCAT CTCCAGGGGA 51 GAAGGTCACC ATGACCTGCA GGGCCAGCTC AAGTGTAACT TCCAGTTACT 101 TGAACTGGTA CCAGCAGAAG CCAGG ATCTT CCCCCAAACT CTGGATTTAT 151 AGCACATCCA ACCTGGCTTC AGG AGTCCCA GCTCGCTTCA GTGGCAGTGG 201 GTCTGGGACC TCTTACTCTC TCACAATCAG CAGTGTGGAG GCTGAGGATG 251 CTGCCACTTA TTACTGCCAG CAGTATGATT TTTTCCCATC GACGTTCGGT 301 GGAGGCACCA AGCTGGAAAT CAAGCGGGCT GATGCTGCAC CAACTGTATC 351 CATCTTCCCA CCATCCAGTG AGCAGTTAAC ATCTGGAGGT GCCTCAGTCG 401 TGTGCTTCTT GAACAACTTC TACCCCAAAG ACATCAATGT CAAGTGG AAG 451 ATTGATGGCA GTGAACGACA AAATGGCGTC CTGAACAGTT GGACTGATCA 501 GGACAGCAAA GACAGCACCT ACAGCATGAG CAGCACCCTC ACGTTGACCA 551 AGGACGAGTA TGAACGACAT AACAGCTATA CCTGTGAGGC CACTCACAAG 601 ACATCAACTT CACCCATCGT CAAGAGCTTC AACAGGAATG AGTGT (SEC ID NO:206) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-13 que incluye el péptido señal es: 1 MDSQVQIFSF LLISALVKMS RGQ I VLTQSP AIMSASPGEK VTMTC RASSS 51 VTSSILNWYQ QKPGSSPKLW IYSTSNLASG VPARFSGSGS GTSYSLTISS 101 VEAEDAATYY CQQYDFFPST FGGGTKLEIK RADAAPTVSI FPPSSEQLTS 151 GGAS VVCFLN NFYPKDINVK WKIDGSERQN GVLNSWTDQD SKDSTYSMSS 201 TLT LTKDEYE RHN SYTCEAT HKTSTSPIVK SFNRNEC (SEC ID NO:207) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-13 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGATTCTC AAGTGCAGAT TTTCAGCTTC CTTCTAATCA GTGCCTTAGT 51 CAAAATGTCC AGAGGACAG A TTGTTCTCAC CCAGTCTCCA GCAATCATGT 101 CTGCATCTCC AGGGGAGAAG GTCACCATGA CCTGCAGGGC CAGCTCAAGT 151 GTAACTTCCA GTTACTTGAA CTGGTACCAG CAGAAGCCAG GATCTTCCCC 201 CAAACTCTGG ATTTATAGCA CATCCAACCT GGCTTCAGGA GTCCCAGCTC 251 GCTTCAGTGG CAGTGGGTCT GGGACCTCTT ACTCTCTCAC AATCAGC AGT 301 GTGGAGGCTG AGGATGCTGC CACTTATTAC TGCCAGCAGT ATG ATTTTTT 351 CCCATCGACG TTCGGTGGAG GCACCAAGCT GGAAATCAAG CGGGCTGATG 401 CTGCACCAAC TGTATCC ATC TTCCCACCAT CCAGTGAGCA GTTAACATCT 451 GGAGGTGCCT CAGTCGTGTG CTTCTTGAAC AACTTCTACC CCAAAGACAT 501 CAATGTCAAG TGG AAGATTG ATGGCAGTGA ACGACAAAAT GGCGTCCTGA 551 ACAGTTGGAC TGATCAGGAC AGCAAAGACA GCACCTACAG CATGAGCAGC 601 ACCCTCACGT TGACCAAGGA CGAGTATGAA CGACATAACA GCTATACCTG 651 TGAGGCCACT CACAAGACAT CAACTTCACC CATCGTCAAG AGCTTCAACA 701 GGAATGAGTG T (SEC ID NO.208) Cadena Pesada del Ab-13: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-13 es: 1 EVQLQQSGPE LVKPG ASVKM SCKASGYTFT DYYMNWV KQS HGESLEWIGD 51 INPYNDDTTY NHKFKGKATL TVDKSSNTAY MQLNSLTSED SAVYYCARET 101 AVITTNAMDY WGQGTSVTVS SAKTTPPSVY PLAPGSAAQT NSMVTLGCLV 151 KGYFPEPVT VTWNSGSLSSG VHTFPAVLQS DLYTLSSSVT VPSSTWPSET 201 VTCNVAHPAS STKVDKKIVP RDCGCKPCIC TVPEVSSVFI FPPKPKDVL T 251 ITLTPKVTCV VVDISKDDPE VQFSWFVDDV EVHTAQTQPR EEQFNSTFRS 301 VSELPIMHQD WLNGKEFKCR VNSAAFPAPI EKTISKTKGR PKAPQVYTIP 351 PPKEQMAKDK VSL TCMITDF FPEDITVEWQ WNGQPAENYK NTQPIMDTDG 401 SYFIYSKLNV QKSNWEAGNT FTCSVLHEGL HNHHTEKSLS HSPGK (SEC ID NO:209) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-13 es: 1 GAGGTCCAGC TGCAACAATC TGGACCTGAG CTGGTGAAGC CTGGGGCTTC 51 AGTGAAG ATG TCCTGTAAGG CTTCTGGATA CACATTCACT GACTACTACA 101 TGAACTGGGT GAAGCAGAGC CATGGAGAG A GCCTTGAGTG GATTGGAGAT 151 ATTAATCCTT ACAACGATGA AACCACAAGT TCAAGGGCAA 201 GGCCACATTG ACTGTAGACA CACAGCCTAC ATGCAGCTCA 251 ACAGCCTGAC ATCTGAGGAC ATTACTGTGC AAGAG AGACG 301 GCCGTTATTA CTACGAATGC TGGGGTCAAG GAACCTCAGT 351 CACCGTCTCC TCAGCCAAAA ATCTGTCTAT CCACTGGCCC 401 CTGGATCTGC TGCCCAAACT TGACCCTGGG ATGCCTGGTC 451 AAGGGCTATT TCCCTGAGCC ACCTGGAACT CTGGATCCCT 501 GTCCAGCGGT GTGCACACCT CCTGCAGTCT GACCTCTACA 551 CTCTGAGCAG CTCAGTGACT GCACCTGGCC CAGCGAGACC 601 GTCACCTGCA ACGTTGCCCA AGCACCAAGG TGGACAAGAA 651 AATTGTGCCC AGGGATTGTG TTGCATATGT ACAGTCCCAG 701 AAGTATCATC TGTCTTCATC AGCCCAAGGA TGTGCTCACC 751 ATTACTCTGA CTCCTAAGGT GTGGTAGACA TCAGCAAGGA 801 TGATCCCGAG GTCCAGTTCA GCTGGTTTGT AGATGATGTG GAGGTGCACA 851 CAGCTCAGAC GCAACCCCGG GAGGAGCAGT TCAACAGCAC TTTCCGCTCA 901 GTCAGTGAAC TTCCCATCAT GCACCAGGAC TGGCTCAATG GCAAGGAGTT 951 CAAATGCAGG GTCAACAGTG CAGCTTTCCC TGCCCCCATC GAGAAAACCA 1001 TCTCCAAAAC CAAAGGCAGA CCGAAGGCTC CACAGGTGTA CACCATTCCA 1051 CCTCCCAAGG AGCAGATGGC CAAGGATAAA GTCAGTCTGA CCTGCATGAT 1101 AACAGACTTC TTCCCTGAAG ACATTACTGT GGAGTGGCAG TGGAATGGGC 1151 AGCCAGCGGA GAACTACAAG AACACTCAGC CCATCATGGA CACAGATGGC 1201 TCTTACTTCA TCTACAGCAA GCTCAATGTG CAGAAGAGCA ACTGGGAGGC 1251 AGGAAATACT TTCACCTGCT CTGTGTTACA TGAGGGCCTG CACAACCACC 1301 ATACTGAGAA GAGCCTCTCC CACTCTCCTG GTAAA (SEC ID NO:210) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-13 que incluye el péptido señal es: 1 MGWNWIFLFL LSGTAGVYSE VQLQQSGPEL VKPGASVKMS CKASGYTFTD 51 YYMNWVKQSH GESLEWIGDI NPYNDDTTYN HKFKGKATLT VDKSSNTAYM 101 QLNSLTSEDS AVYYCARETA VITTNAMDYW GQGTSVTVSS AKTTPPSVYP 151 LAPGSAAQTN SMVTLGCLVK GYFPEPVTVT WNSGSLSSGV HTFPAVLQSD 201 LYTLSSSVTV PSSTWPSETV TCNVAHPASS TKVDKKIVPR DCGCKPCICT 251 VPEVSSVFIF PPKPKDVLTI TLTPKVTCVV VDISKDDPEV QFSWFVDDVE 301 VHTAQTQPRE EQFNSTFRSV SELPIMHQDW LNGKEFKCRV NSAAFPAPIE 351 KTISKTKGRP KAPQVYTIPP PKEQMAKDKV SLTCM ITDFF PEDITVEWQW 401 NGQPAENYKN TQ P I M DTDG S YFI YSKLNVQ KSNWEAG NTF TCSVLHEGLH 451 NHHTEKSLSH SPGK (SEC ID NO:211) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-13 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGG ATGGA ACTGG ATCTT TCTCTTCCTC TTGTCAGGAA CTGCAGGTGT 51 CTACTCTGAG GTCCAGCTGC AACAATCTGG ACCTGAGCTG GTGAAGCCTG 101 GGGCTTCAGT GAAGATGTCC CTGGATACAC ATTCACTGAC 151 TACTACATGA ACTGGGTGAA GGAGAGAGCC TTGAGTGGAT 201 TGGAGATATT AATCCTTACA TACCTACAAC CACAAGTTCA 251 AGGGCAAGGC CACATTGACT CCTCCAACAC AGCCTACATG 301 CAGCTCAACA GCCTGACATC GCAGTCTATT ACTGTGCAAG 351 AGAGACGGCC GTTATTACTA GGACTACTGG GGTCAAGGAA 401 CCTCAGTCAC CGTCTCCTCA CACCCCCATC TGTCTATCCA 451 CTGGCCCCTG GATCTGCTGC TCCATGGTGA CCCTGGGATG 501 CCTGGTCAAG GGCTATTTCC GACAGTGACC TGGAACTCTG 551 GATCCCTGTC CAGCGGTGTG CAGCTGTCCT GCAGTCTGAC 601 CTCTACACTC TGAGCAGCTC CCCTCCAGCA CCTGGCCCAG 651 CGAGACCGTC ACCTGCAACG GGCCAGCAGC ACCAAGGTGG 701 ACAAGAAAAT TGTGCCCAGG GTAAGCCTTG CATATGTACA 751 GTCCCAGAAG TATCATCTGT CCCCCAAAGC CCAAGGATGT 801 GCTCACCATT ACTCTGACTC GTGTGTTGTG GTAG ACATCA 851 GCAAGG ATGA TCCCGAGGTC GGTTTGTAGA TGATGTGGAG 901 GTGCACACAG CTCAGACGCA GAGCAGTTCA ACAGCACTTT 951 CCGCTCAGTC AGTGAACTTC CCAGGACTGG CTCAATGGCA 1001 AGGAGTTCAA ATGCAGGGTC CTTTCCCTGC CCCCATCGAG 1051 AAAACCATCT CCAAAACCAA AAGGCTCCAC AGGTGTACAC 1101 CATTCCACCT CCCAAGGAGC GGATAAAGTC AGTCTGACCT 1151 GCATGATAAC AGACTTCTTC TTACTGTGGA GTGGCAGTGG 1201 AATGGGCAGC CAGCGGAGAA ACTCAGCCCA TCATGGACAC 1251 AGATGGCTCT TACTTCATCT CAATGTGCAG AAGAGCAACT 1301 GGGAGGCAGG AAATACTTTC TGTTACATGA GGGCCTGCAC 1351 AACCACCATA CTGAGAAGAG CCTCTCCCAC TCTCCTGGTA AA (SEC ID NO:212) Ab-13 fue humanizado para generar Ab-14. Las secuencias del anticuerpo 14 (también referido en la presente como Ab-14) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera de Ab-14: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-14 es: 1 DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCRASSSVT §;¾TI"NjWYQQK PGKAPKLLI Y 51 STSNLASGVP SRFSGSGSGT EFTLTISSLQ PEDFATYYCi^^DFES IFG 101 GGTKVEIKRT VAAPSVFIFP PSDEQLKSGT ASWCLLNNF YPREAKVQWK 151 VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL TLSKADYEKH KVYACEVTHQ 201 GLSSPVTKSF NRGEC (SEC ID NO:213) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-14: 1 GACATCCAGC TGACCCAGAG CCCCAGCTTC CTTTCCGCAT CCGTTGGTGA 51 CCGAGTAACA ATCACATGCC GCGCCTCATC TTCAGTTACA TCTTCTTATC 101 TTAATTGGTA TCAACAAAAA CCAGGAAAAG CACCTAAACT TCTTATATAC 151 TCTACATCTA ATCTCGCATC AGGAGTTCCC TCTCGATTTT CAGGATCTGG 201 ATCAGGCACA GAATTTACAC TTACTATATC ATCACTCCAA CCAGAAGACT 251 TCGCCACTTA TTACTGCCAA CAATACGATT TTTTTCCAAG CACATTCGGA 301 GGAGGTACAA AAGTAGAAAT CAAGCGTACG GTGGCTGCAC CATCTGTCTT 351 CATCTTCCCG CCATCTGATG AGCAGTTGAA ATCTGGAACT GCCTCTGTTG 401 TGTGCCTGCT GAATAACTTC TATCCCAGAG AGGCCAAAGT ACAGTGGAAG 451 GTGGATAACG CCCTCCAATC GGGTAACTCC CAGGAGAGTG TCACAGAGCA 501 GGACAGCAAG GACAGCACCT ACAGCCTCAG CAGCACCCTG ACGCTGAGCA 551 AAGCAGACTA CGAGAAACAC AAAGTCTACG CCTGCGAAGT CACCCATCAG 601 GGCCTGAGCT CGCCCGTCAC AAAGAGCTTC AACAGGGGAG AGTGT (SEC ID NO:214) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-14 que incluye el péptído señal es: 1 MDMRVPAQLL GLLLLWLPGA RCDIQLTQSP SFLSASVGDR VTITCRASSS 51 VTSSILNWYQ QKPGKAPKLL IYSTSNLASG VPSRFSGSGS GTEFTLTISS 101 LQPEDFATYY CQQYDFFPST FGGGTKVE I K RTVAAPSVFI FPPSDEQLKS 151 GTAS VVCLLN NFYPREAKVQ WKVADNLQSG NSQESVTEQD SKDSTYSLSS 201 TLTLSKADYE KHKVYACEVT HQGLSSPVTK SFNRGEC (SEC ID NO:215) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-14 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACATGA GGGTCCCCGC TCAGCTCCTG GGGCTCCTGC TACTCTGGCT 51 CCCAGGTGCC AGATGTGACA TCCAGCTGAC CCAGAGCCCC AGCTTCCTTT 101 CCGCATCCGT TGGTGACCGA GTAACAATCA CATGCCGCGC CTCATCTTCA 151 GTTACATCTT CTTATCTTAA TTGGTATCAA CAAAAACCAG GAAAAGCACC 201 TAAACTTCTT ATATACTCTA CATCTAATCT CGCATCAGGA GTTCCCTCTC 251 GATTTTCAGG ATCTGGATCA GGCACAGAAT TTACACTTAC TATATCATCA 301 CTCCAACCAG AAGACTTCGC CACTTATTAC TGCCAACAAT ACGATTTTTT 351 TCCAAGCACA TTCGGAGGAG GTACAAAAGT AGAAATCAAG CGTACGGTGG 401 CTGCACCATC TGTCTTCATC TTCCCGCCAT CTGATGAGCA GTTGAAATCT 451 GGAACTGCCT CTGTTGTGTG CCTGCTGAAT AACTTCTATC CCAGAGAGGC 501 CAAAGTACAG TGGAAGGTGG ATAACGCCCT CCAATCGGGT AACTCCCAGG 551 AGAGTGTCAC AGAGCAGGAC AGCAAGGACA GCACCTACAG CCTCAGCAGC 601 ACCCTGACGC TGAGCAAAGC AGACTACGAG AAACACAAAG TCTACGCCTG 651 CGAAGTCACC CATCAGGGCC TGAGCTCGCC CGTCACAAAG AGCTTCAACA 701 GGGGAGAGTG T (SEC ID NO:216) Cadena Pesada del Ab-14: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-14: 1 EVQ LVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT DYYMNWVRQA PGQRLEWMGD 51 INPYNDDTTY NHKFKGRVTI TRDTSASTAY MELSSLRSED TAVYYCARET 101 &VITTNAMD,Y, WGQGTTVTVS SASTKGPSVF PLAPCSRSTS ESTAALGCLV 151 KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VHTFPAVLQS SGLYSLSSW TVPSSNFGTQ 201 TYTCNVDHKP SNTKVDKTVE RKCCVECPPC PAPPVAGPSV FLFPPKPKDT 251 LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVQFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQFNSTF 301 RVVSVLTWH QDWLNGKEYK CKVSNKGLPA PIEKTISKTK GQPREPQVYT 351 LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPMLDS 401 DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHITQKS LSLSPGK (SEC ID NO:217) La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-14 sin Usina carboxi-terminal: 1 EVQ LVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT DYYM NWVRQA PGQRLEWMGD 51 INPYNDDTTY NHKFKGRVTI TRDTSASTAY MELSSLRSED TAVYYCARET 101 AVITTNAMDY WGQGTTVTVS SASTKGPSVF PLAPCSRSTS ESTAALGCLV 151 KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VHTFPAVLQS SGLYSLSSW TVPSSNFGTQ 201 TYTCNVDHKP SNTKVDKTVE RKCCVECPPC PAPPVAGPSV FLFPPKPKDT 251 LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVQFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQFNSTF 301 RVVSVLTWH QDWLNGKEYK CKVSNKGLPA PIEKTISKTK GQPREPQVYT 351 LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPMLDS 401 DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHITQKS LSLSPGK (SEC ID N0 393) La secuencia de ácido nucleico que codifi la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-14 e 1 GAGGTGCAGC TGGTGCAGAG CGGCGCCGAG GTCAAGAAAC CTGGAGCAAG 51 CGTAAAGGTT AGTTGCAAAG CATCTGGATA CACATTTACC GACTACTACA 101 TGAATTGGGT ACG ACAAGCC CCTGGACAAA GACTTGAATG GATGGGAGAC 151 ATTAACCCTT ATAACGACGA CACTACATAC AATCATAAAT TTAAAGGAAG 201 AGTTACAATT ACAAGAGATA CATCCGCATC AACCGCCTAT ATGGAACTTT 251 CCTCATTGAG ATCTGAAGAC ACTGCTGTTT ATTACTGTGC AAGAGAAACT 301 GCCGTTATTA CTACTAACGC TATGGATTAC TGGGGTCAAG GAACCACTGT 351 TACCGTCTCT AGTGCCTCCA CCAAGGGCCC ATCGGTCTTC CCCCTGGCGC 401 CCTGCTCCAG GAGCACCTCC GAGAGCACAG CGGCCCTGGG CTGCCTGGTC 451 AAGGACTACT TCCCCGAACC GGTGACGGTG TCGTGGAACT CAGGCGCTCT 501 GACCAGCGGC GTGCACACCT CCTACAGTCC TCAGGACTCT 551 ACTCCCTCAG CAGCGTGGTG CCAGCAACTT CGGCACCCAG 601 ACCTACACCT GCAACGTAGA AGCAACACCA AGGTGGACAA 651 GACAGTTGAG CGCAAATGTT CCCACCGTGC CCAGCACCAC 701 CTGTGGCAGG ACCGTCAGTC CCCCAAAACC CAAGGACACC 751 CTCATGATCT CCCGGACCCC TGCGTGGTGG TGGACGTGAG 801 CCACGAAGAC CCCGAGGTCC GTACGTGGAC GGCGTGGAGG 851 TGCATAATGC CAAGACAAAG AGCAGTTCAA CAGCACGTTC 901 CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CAGGACTGGC TGAACGGCAA 951 GGAGTACAAG TGCAAGGTCT CCTCCCAGCC CCCATCGAGA 1001 AAACCATCTC CAAAACCAAA GAGAACCACA GGTGTACACC 1051 CTGCCCCCAT CCCGGGAGGA AACCAGGTCA GCCTGACCTG 1101 CCTGGTCAAA GGCTTCTACC CCAGCG ACAT CGCCGTGGAG TGGGAGAGCA 1151 ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CACCTCCCAT GCTGGACTCC 1201 GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTGGACA AGAGCAGGTG 1251 GCAGCAGGGG AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA 1301 ACCACTACAC GCAGAAGAGC CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA A (SEC ID N0:218) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-14 que incluye el péptido señal es: 1 MDWTWRILFL VAAATG AHSE VQLVQSGAEV KKPGASVKVS CKASGYTFTD 51 YYM NWVRQAP GQRLEWMGDI NPYNDDTTYN HKFKGRVTIT RDTSASTAYM 101 ELSSLRSEDT AVYYCARETA VITTNAMDYW GQGTTVTVSS ASTKGPSVFP 151 LAPCSRSTSE STAALGCLVK DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS 201 GLYSLSSVVT VPSSN FGTQT YTCNVDHKPS NTKVDKTVER KCCVECPPCP 251 APPVAGPSVF LFPPKPKDTL MISRTPEVTC VVVDVSHEDP EVQFNWYVDG 301 VEVHNAKTKP REEQFNSTFR VVSVLTVVHQ DWLNGKEYKC KVSNKGLPAP 351 I EKTISKTKG QPREPQVYTL PPSREEMTKN QVSLTCLVKG FYPSDIAVEW 401 ESNGQPENNY KTTPPMLDSD GSFFLYSKLT VDKSRWQQGN VFSCSVMHEA 451 LHNHITQKSL SLSPGK (SEC ID NO:219) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-14 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACTGGA CCTGGAGGAT CCTCTTCTTG GTGGCAGCAG CCACAGGAGC 51 CCACTCCGAG GTGCAGCTGG TGCAGAGCGG CGCCGAGGTC AAGAAACCTG 101 GAGCAAGCGT AAAGGTTAGT TGCAAAGCAT CTGGATACAC ATTTACCGAC 151 TACTACATG A ATTGGGTACG ACAAGCCCCT GGACAAAGAC TTGAATGGAT 201 GGGAGACATT AACCCTTATA ACGACGACAC TACATACAAT CATAAATTTA 251 AAGGAAGAGT TACAATTACA AGAGATACAT CCGCATCAAC CGCCTATATG 301 GAACTTTCCT CATTG AGATC TGAAGACACT GCTGTTTATT ACTGTGCAAG 351 AGAAACTGCC GTTATTACTA CTAACGCTAT GGATTACTGG GGTCAAGGAA 401 CCACTGTTAC CGTCTCTAGT GCCTCCACCA AGGGCCCATC GGTCTTCCCC 451 CTGGCGCCCT GCTCCAGGAG AGCACAGCGG CCCTGGGCTG 501 CCTGGTCAAG GACTACTTCC GACGGTGTCG TGGAACTCAG 551 GCGCTCTGAC CAGCGGCGTG CAGCTGTCCT ACAGTCCTCA 601 GGACTCTACT CCCTCAGCAG GTGCCCTCCA GCAACTTCGG 651 CACCCAGACC TACACCTGCA CAAGCCCAGC AACACCAAGG 701 TGGACAAGAC AGTTGAGCGC TCGAGTGCCC ACCGTGCCCA 751 GCACCACCTG TGGCAGGACC CTCTTCCCCC CAAAACCCAA 801 GGACACCCTC ATGATCTCCC GGTCACGTGC GTGGTGGTGG 851 ACGTGAGCCA CGAAGACCCC TCAACTGGTA CGTGGACGGC 901 GTGGAGGTGC ATAATGCCAA CGGGAGGAGC AGTTCAACAG 951 CACGTTCCGT GTGGTCAGCG TGTGCACCAG GACTGGCTGA 1001 ACGGCAAGGA GTACAAGTGC ACAAAGGCCT CCCAGCCCCC 1051 ATCGAGAAAA CCATCTCCAA AACCAAAGGG CAGCCCCGAG AACCACAGGT 1101 GTACACCCTG CCCCCATCCC GGGAGGAGAT GACCAAGAAC CAGGTCAGCC 1151 TGACCTGCCT GGTCAAAGGC TTCTACCCCA GCGACATCGC CGTGGAGTGG 1201 GAGAGCAATG GGCAGCCGGA GAACAACTAC AAGACCACAC CTCCCATGCT 1251 GGACTCCGAC GGCTCCTTCT TCCTCTACAG CAAGCTCACC GTGGACAAGA 1301 GCAGGTGGCA GCAGGGGAAC GTCTTCTCAT GCTCCGTGAT GCATGAGGCT 1351 CTGCACAACC ACTACACGCA GAAGAGCCTC TCCCTGTCTC CGGGTAAA (SEC ID NO:220) Las secuencias de CDR en la región variable de la cadena pesada del Ab-14 son: CDR-H 1 : DYYMN (SEC ID NO:296) CDR-H2: DINPYNDDTTYNHKFKG (SEC ID NO:297) CDR-H3: ETAVITTNAM D (SEC ID NO:298) Las secuencias de CDR de región variable de cadena ligera del Ab-14 son : CDR-L1: RASSSVTSSILN (SEC ID NO:284) CDR-L2: STSNLAS (SEC ID NO:285) CDR-L3: QQYDFFPST (SEC ID NO:286) Dominios Variables de Ab-14: La secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena ligera del Ab-14 (sin secuencia de señal) es: 1 DIQLTQSPSF LSASVG DRVT ITCRASSSVT SSILNWYQQK PGKAPKLLIY 51 I£SJ LSGVP SRFSGSGSGT EFTLTISSLQ PEDFATYYCQ QYDFFPSTFG 101 GGTKVEIK (SEC ID NO:380) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena ligera del Ab-14 (sin secuencia de señal) es: 1 GACATCCAGC TGACCCAGAG CCCCAGCTTC CTTTCCGCAT CCGTTGGTGA 51 CCGAGTAACA ATCACATGCC GCGCCTCATC TTCAGTTACA TCTTCTTATC 101 TTAATTGGTA TCAACAAAAA CCAGGAAAAG CACCTAAACT TCTTATATAC 151 TCTACATCTA ATCTCGCATC AGGAGTTCCC TCTCGATTTT CAGGATCTGG 201 ATCAGGCACA GAATTTACAC TTACTATATC ATCACTCCAA CCAGAAGACT 251 TCGCCACTTA TTACTGCCAA CAATACGATT TTTTTCCAAG CACATTCGGA 301 GGAGGTACAA AAGTAGAAAT CAAG (SEC ID NO:381) La Secuencia variable de cadena pesada de aminoácidos del dominio Ab-14 (sin secuencia de la señal) es: 1 EVQ LVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT DYYMNWVRQA PGQ RLEWMGfl 51 TRDTSASTAY MELSSLRSED TAVYYCARET 101 AVITTNAMDY WGQGTTVTVS S (SEC ID NO-.382) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena pesada del Ab-14 (sin secuencia de señal): 1 GAGGTGCAGC TGGTGCAGAG CGGCGCCGAG GTCAAGAAAC CTGGAGCAAG 51 CGTAAAGGTT AGTTGCAAAG CATCTGGATA CACATTTACC GACTACTACA 101 TGAATTGGGT ACG ACAAGCC CCTGGACAAA GACTTGAATG GATGGGAGAC 151 ATTAACCCTT ATAACGACGA CACTACATAC AATCATAAAT TTAAAGGAAG 201 AGTTACAATT ACAAGAGATA CATCCGCATC AACCGCCTAT ATGGAACTTT 251 CCTCATTGAG ATCTG AAGAC ACTGCTGTTT ATTACTGTGC AAG AGAAACT 301 GCCGTTATTA CTACTAACGC TATGGATTAC TGGGGTCAAG GAACCACTGT 351 TACCGTCTCT AGT (SEC ID NO:383) Ab-3 fue humanizado para generar Ab-15. Ab-15 Las secuencias del anticuerpo 15 (también referido en la presente como Ab-15) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera del Ab-15: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-15 es: 1 DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCSVSSTIS SNHLH¡WFQQK PGKAPKSLIY 51 GTSNLASGVP SRFSGSGSGT DFTLTISSLQ PEDFATYYC Q QWSSYP LTFG 101 GGTKVEIKR7" VAAPSVFIFP PSDEQLKSGT ASWCLLNNF YPREAKVQfVK 151 VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL TLSKADYEKH KVYACEVTHQ 201 GLSSPVTKSF NRGEC (SEC ID NO:221) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-15 es: 1 GACATCCAGA TGACCCAGTC TCCATCCTCC CTCTCAGCAT CCGTAGGCGA 51 TAG AGTTACA ATAACATGCA GCGTATCATC AACTATATCA TCAAATCATC 101 TTCATTGGTT CCAACAGAAA CCCGGCAAAG CACCTAAATC ACTTATATAC 151 GGCACATCAA ATCTCGCATC AGGCGTTCCT TCAAGATTTT CAGGCTCTGG 201 CTCAGGCACC GACTTTACTC TTACAATATC CTCCCTCCAA CCCGAAG ACT 251 TCGCAACCTA TTACTGTCAA CAATGGTCCT CATATCCACT CACATTTGGC 301 GGCGGCACAA AAGTAGAAAT TAAACGTACG GTGGCTGCAC CATCTGTCTT 351 CATCTTCCCG CCATCTGATG AGCAGTTGAA ATCTGGAACT GCCTCTGTTG 401 TGTGCCTGCT GAATAACTTC TATCCCAGAG AGGCCAAAGT ACAGTGGAAG 451 GTGGATAACG CCCTCCAATC GGGTAACTCC CAGGAGAGTG TCACAGAGCA 501 GGACAGCAAG GACAGCACCT ACAGCCTCAG CAGCACCCTG ACGCTGAGCA 551 AAGCAGACTA CGAGAAACAC AAAGTCTACG CCTGCGAAGT CACCCATCAG 601 GGCCTGAGCT CGCCCGTCAC AAAGAGCTTC AACAGGGGAG AGTGT (SEC ID NO:222) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-15 que incluye el péptido señal es: 1 MDMRVPAQLL GLLLLWLRGA RCDIQMTQSP SSLSASVGDR VTITCSVSST 51 ISSNHLHWFQ QKPGKAPKSL IYGTSNLASG VPSRFSGSGS GTDFTLTISS 101 LQPEDFATYY CQQWSSYPLT FGGGTKVEIK RTVAAPSVFI FPPSDEQLKS 151 GTAS VVCLLN NFYPREAKVQ WKVADNLQSG NSQESVTEQD SKDSTYSLSS 201 TLTLSKADYE KHKVYACEVT HQGLSSPVTK SFNRGEC (SEC ID NO:223) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-15 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACATGA GGGTCCCCGC TCAGCTCCTG GGGCTCCTGC TACTCTGGCT 51 CCGAGGTGCC AGATGTGACA TCCAGATGAC CCAGTCTCCA TCCTCCCTCT 101 CAGCATCCGT AGGCGATAGA GTTACAATAA CATGCAGCGT ATCATCAACT 151 ATATCATCAA ATCATCTTCA TTGGTTCCAA CAGAAACCCG GCAAAGCACC 201 TAAATCACTT ATATACGGCA CATCAAATCT CGCATCAGGC GTTCCTTCAA 251 GATTTTCAGG CTCTGGCTCA GGCACCGACT TTACTCTTAC AATATCCTCC 301 CTCCAACCCG AAGACTTCGC AACCTATTAC TGTCAACAAT GGTCCTCATA 351 TCCACTCACA TTTGGCGGCG GCACAAAAGT AGAAATTAAA CGTACGGTGG 401 CTGCACCATC TGTCTTCATC TTCCCGCCAT CTGATGAGCA GTTG AAATCT 451 GGAACTGCCT CTGTTGTGTG CCTGCTGAAT AACTTCTATC CCAGAGAGGC 501 CAAAGTACAG TGGAAGGTGG ATAACGCCCT CCAATCGGGT AACTCCCAGG 551 AGAGTGTCAC AGAGCAGGAC AGCAAGGACA GCACCTACAG CCTCAGCAGC 601 ACCCTGACGC TGAGCAAAGC AGACTACGAG AAACACAAAG TCTACGCCTG 651 CGAAGTCACC CATCAGGGCC TGAGCTCGCC CGTCACAAAG AGCTTCAACA 701 GGGGAGAGTG T (SEC ID NO:224) Cadena Pesada del Ab-15 La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-15 es: 1 EVQ LVQSGAE VKKPGASVKV SCKASDFNIK DFYLHWVRQA PGQGLEWIGR 51 PENGDTLY^. ^ t|P P:Q¾|K VT M TTDTSTSTAY MELRSLRSDD TAVYYCAREA 101 DYFHDGTSYW YFDVWGRGTL VTVSSASTKG PSVFPLAPCS RSTSESTAAL 151 GCLVKDYFPE PVTVSWNSGA LTSGVHTFPA VLQSSGL YSL SSVVTVPSSN 201 FGTQTYTCNV DHKPSNTKVD KTVERKCCVE CPPCPAPPVA GPSVFLFPPK 251 PKDTLMISRT PEVTCVWDV SHEDPEVQFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQF 301 NSTFRWSVL TWHQDWLNG KEYKCKVSNK GLPAPIEKTI SKTKGQPREP 351 QVYTLPPSRE EMTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP 401 MLDSDGSFFL YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG 451 JT (SEQ ID NO:225) La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-15 sin Usina carboxi-terminal: 1 EVQ LVQSGAE VKKPGASVKV SCKASDFN I K DlligjWVRQA PGQGLEWIGR 51 ?5??¾?^ TTDTSTSTAY MELRSLRSDD TAVYYCAREA 101 DYFH DGTSYW YFDVWG RGTL VTVSSASTKG PSVFPLAPCS RSTSESTAAL 151 GCLVKDYFPE PVTVSWNSGA LTSGVHTFPA VLQSSGLYSL SSVVTVPSSN 201 FGTQTYTCNV DHKPSNTKVD KTVERKCCVE CPPCPAPPVA GPSVFLFPPK 251 PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVQFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQF 301 NSTFRWSVL TWHQDWLNG KEYKCKVSNK GLPAPIEKTI SKTKGQPREP 351 QVYTLPPSRE EMTKNQVSLT CLVKGFYPSD IA VEWESNGQ PENNYKTTPP 401 MLDSDGSFFL YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG 451 (SEC ID NO:394) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-15 es: 1 GAGGTGCAGC TGGTGCAGTC TGGGGCTGAG GTGAAGAAGC CTGGGGCCTC 51 AGTGAAGGTC TCCTGCAAGG CTTCTGACTT CAACATTAAA GACTTCTATC 101 TACACTGGGT GCGACAGGCC CCTGGACAAG GGCTTGAGTG GATTGG AAGG 151 ATTGATCCTG AGAATGGTGA TACTTTATAT GACCCGAAGT TCCAGGACAA 201 GGTCACCATG ACCACAGACA CGTCCACCAG CACAGCCTAC ATGGAGCTGA 251 GGAGCCTGAG ATCTGACGAC ACGGCCGTGT ATTACTGTGC GAGAGAGGCG 301 GATTATTTCC ACGATGGTAC CTCCTACTGG TACTTCGATG TCTGGGGCCG 351 TGGCACCCTG GTCACCGTCT CTAGTGCCTC CACCAAGGGC CCATCGGTCT 401 TCCCCCTGGC GCCCTGCTCC AGGAGCACCT CCGAGAGCAC AGCGGCCCTG 451 GGCTGCCTGG TCAAGGACTA CTTCCCCGAA CCGGTGACGG TGTCGTGGAA 501 CTCAGGCGCT CTGACCAGCG CTTCCCAGCT GTCCTACAGT 551 CCTCAGGACT CTACTCCCTC TGACCGTGCC CTCCAGCAAC 601 TTCGGCACCC AGACCTACAC GATCACAAGC CCAGCAACAC 651 CAAGGTGGAC AAGACAGTTG TTGTGTCGAG TGCCCACCGT 701 GCCCAGCACC ACCTGTGGCA TCTTCCTCTT CCCCCCAAAA 751 CCCAAGG ACA CCCTCATGAT CCTGAGGTCA CGTGCGTGGT 801 GGTGGACGTG AGCCACG AAG CCAGTTCAAC TGGTACGTGG 851 ACGGCGTGGA GGTGCATAAT AGCCACGGGA GGAGCAGTTC 901 AACAGCACGT TCCGTGTGGT ACCGTTGTGC ACCAGGACTG 951 GCTGAACGGC AAGGAGTACA CTCCAACAAA GGCCTCCCAG 1001 CCCCCATCGA GAAAACCATC AAGGGCAGCC CCGAGAACCA 1051 CAGGTGTACA CCCTGCCCCC GAGATGACCA AGAACCAGGT 1101 CAGCCTGACC TGCCTGGTCA CCCCAGCGAC ATCGCCGTGG 1151 AGTGGGAGAG CAATGGGCAG CCGGAGAACA ACTACAAGAC CACACCTCCC 1201 ATGCTGGACT CCGACGGCTC CTTCTTCCTC TACAGCAAGC TCACCGTGGA 1251 CAAGAGCAGG TGGCAGCAGG GGAACGTCTT CTCATGCTCC GTGATGCATG 1301 AGGCTCTGCA CAACCACTAC ACGCAGAAGA GCCTCTCCCT GTCTCCGGGT 1351 AAA (SEC ID NO:226) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-15 que incluye el péptido señal es: 1 MDWTWRILFL VAAATGAHSE VQLVQSGAEV KBGPGASVKVS CKASDFNIKD 51 FILHWVRQAP GQGLEWIGRI DPENGDTLYD PKFQDKVTMT TDTSTSTAYM 101 ELRSLRSDDT AVYYCAREAD YFHDGTSYWY FDVWGRGTLV TVSSASTKGP 151 SVFPLAPCSR STSESTAALG CLVKDYFPEP VTVSWNSGAL TSGVHTFPAV 201 LQSSGLYSLS SVVTVPSSNF GTQTYTCNVD HKPSNTKVDK TVERKCCVEC 251 PPCPAPPVAG PSVFLFPPKP KDTLM ISRTP EVTCVVVDVS HEDPEVQFNW 301 YVDGVEVHNA KTKPREEQFN STFRVVSVLT VVHQDWLNGK EYKCKVSNKG 351 LPAPIEKTIS KTKGQPREPQ VYTLPPSREE MTKNQVSLTC LVKGFYPSDI 401 AVEWESNGQP ENNYKTTPPM LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW QQGNVFSCSV 451 MHEALHNHIT QKSLSLSPGK (SEC ID NO:227) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab- 5 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACTGGA CCTGG AGGAT CCTCTTCTTG GTGGCAGCAG CCACAGGAGC 51 CCACTCCGAG GTGCAGCTGG TGCAGTCTGG GGCTGAGGTG AAGAAGCCTG 101 GGGCCTCAGT GAAGGTCTCC TGCAAGGCTT CTGACTTCAA CATTAAAGAC 151 TTCTATCTAC ACTGGGTGCG ACAGGCCCCT GGACAAGGGC TTGAGTGGAT 201 TGGAAGGATT GATCCTGAGA ATGGTGATAC TTTATATGAC CCGAAGTTCC 251 AGGACAAGGT CACCATGACC ACAGACACGT CCACCAGCAC AGCCTACATG 301 GAGCTGAGGA GCCTG AGATC TGACGACACG GCCGTGTATT ACTGTGCGAG 351 AGAGGCGGAT TATTTCCACG ATGGTACCTC CTACTGGTAC TTCGATGTCT 401 GGGGCCGTGG CACCCTGGTC ACCGTCTCTA GTGCCTCCAC CAAGGGCCCA 451 TCGGTCTTCC CCCTGGCGCC CTGCTCCAGG AGCACCTCCG AGAGCACAGC 501 GGCCCTGGGC TGCCTGGTCA AGG ACTACTT CCCCGAACCG GTGACGGTGT 551 CGTGGAACTC AGGCGCTCTG ACCAGCGGCG TGCACACCTT CCCAGCTGTC 601 CTACAGTCCT CAGGACTCTA CTCCCTCAGC AGCGTGGTGA CCGTGCCCTC 651 CAGCAACTTC GGCACCCAGA CCTACACCTG CAACGTAGAT CACAAGCCCA 701 GCAACACCAA GGTGGACAAG ACAGTTGAGC GCAAATGTTG TGTCGAGTGC 751 CCACCGTGCC CAGCACCACC TGTGGCAGGA CCGTCAGTCT TCCTCTTCCC 801 CCCAAAACCC AAGGACACCC TCATG ATCTC CCGGACCCCT GAGGTCACGT 851 GCGTGGTGGT GGACGTGAGC CACGAAGACC CCGAGGTCCA GTTCAACTGG 901 TACGTGGACG GCGTGGAGGT GCATAATGCC AAGACAAAGC CACGGGAGGA 951 GCAGTTCAAC AGCACGTTCC GTGTGGTCAG CGTCCTCACC GTTGTGCACC 1001 AGG ACTGGCT GAACGGCAAG GAGTACAAGT GCAAGGTCTC CAACAAAGGC 1051 CTCCCAGCCC CCATCGAGAA AACCATCTCC AAAACCAAAG GGCAGCCCCG 1101 AGAACCACAG GTGTACACCC TGCCCCCATC CCGGGAGGAG ATGACCAAGA 1151 ACCAGGTCAG CCTGACCTGC CTGGTCAAAG GCTTCTACCC CAGCGACATC 1201 GCCGTGGAGT GGGAGAGCAA TGGGCAGCCG GAGAACAACT ACAAGACCAC 1251 ACCTCCCATG CTGGACTCCG ACGGCTCCTT CTTCCTCTAC AGCAAGCTCA 1301 CCGTGGACAA GAGCAGGTGG CAGCAGGGGA ACGTCTTCTC ATGCTCCGTG 1351 ATGCATGAGG CTCTGCACAA CCACTACACG CAGAAGAGCC TCTCCCTGTC 1401 TCCGGGTAAA (SEC ID NO:228) Las secuencias de CDR en la región variable de la cadena pesada del Ab-15 son: CDR-H1: DFILH (SEC ID NO:290) CDR-H2: RIDPENGDTLYDPKFQD (SEC ID NO:291) CDR-H3: EADYFHDGTSYWYFDV (SEC ID NO:292) Las secuencias de CDR de región variable de cadena ligera del Ab-15 son : CDR-L1: SVSSTISSNHLH (SEC ID NO:278) CDR-L2: GTSNLAS (SEC ID NO:279) CDR-L3: QQWSSYPLT (SEC ID NO:280) Dominios Variables de Ab-15: Secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena ligera del Ab-15 (sin secuencia de señal): 1 DIQMTQSPSS LSASVG DRVT ITCSVSSTIS SNHLHWFQQK PGKAPKSLI Y si GTSNL 'GVP SRFSGSGSGT DFTLTISSLQ PEDFATYYC Q QWSSYP LT F G 101 GGTKVEIK (SEC ID NO:384) Secuencia de ADN de dominio variable de cadena ligera del Ab-15 (sin secuencia de señal): 1 GACATCCAGA TGACCCAGTC TCCATCCTCC CTCTCAGCAT CCGTAGGCGA 51 TAGAGTTACA ATAACATGCA GCGTATCATC AACTATATCA TCAAATCATC 101 TTCATTGGTT CCAACAGAAA CCCGGCAAAG CACCTAAATC ACTTATATAC 151 GGCACATCAA ATCTCGCATC AGGCGTTCCT TCAAG ATTTT CAGGCTCTGG 201 CTCAGGCACC GACTTTACTC TTACAATATC CTCCCTCCAA CCCGAAGACT 251 TCGCAACCTA TTACTGTCAA CAATGGTCCT CATATCCACT CACATTTGGC 301 GGCGGCACAA AAGTAGAAAT TAAA (SEC ID NO:385) La secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena pesada del Ab-15 (sin secuencia de señal): 1 EVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASDFNIK DFYLHWVRQA PGQGLEWIGR 51 IDPÉNGDTLY DPKFQDKVTM TTDTSTSTAY MELRSLRSDD TAVYYCAREA 101 DYFHDGTSYW YFDVWG RGTL VTVSS (SEC ID NO:386) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena pesada del Ab-15 (sin secuencia de señal): 1 GAGGTGCAGC TGGTGCAGTC TGGGGCTGAG GTGAAGAAGC CTGGGGCCTC 51 AGTGAAGGTC TCCTGCAAGG CTTCTG ACTT CAACATTAAA GACTTCTATC 101 TACACTGGGT GCGACAGGCC CCTGGACAAG GGCTTGAGTG GATTGGAAGG 151 ATTGATCCTG AGAATGGTGA TACTTTATAT GACCCGAAGT TCCAGGACAA 201 GGTCACCATG ACCACAGACA CGTCCACCAG CACAGCCTAC ATGGAGCTGA 251 GGAGCCTGAG ATCTGACGAC ACGGCCGTGT ATTACTGTGC GAGAGAGGCG 301 GATTATTTCC ACGATGGTAC CTCCTACTGG TACTTCGATG TCTGGGGCCG 351 TGGCACCCTG GTCACCGTCT CTAGT (SEC ID NO:387) El Ab-11 fue humanizado para generar Ab-16.

Ab-16 Las secuencias del anticuerpo 16 (también referido en la presente como Ab-16) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera del Ab-16: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) del Ab-16 LC es: 1 DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCRASSSIS YIHWYQQKPG KAPKLLI YAT 51 SNLASGVPSR FSGSGSGTEF TLTISSLQPE 101 TKVEI KfiTVA APSVFIFPPS DEQLKSGTAS VVCLLNNFYP REAKVQWKVD 151 NALQSGNSQE SVTEQDSKDS TYSLSSTLTL SKADYEKHKV YACEVTQGL 201 SSPVTKSFNR GEC (SEC ID NO:229) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-16 es: 1 GACATCCAGT TGACCCAGTC TCCATCCTTC CTGTCTGCAT CTGTAGGAGA 51 CAGAGTCACC ATCACTTGCA GGGCCAGCTC AAGTATAAGT TACATACACT 101 GGTATCAGCA AAAACCAGGG AAAGCCCCTA AGCTCCTGAT CTATGCCACA 151 TCCAACCTGG CTTCTGGGGT CCCATC AAGG TTCAGCGGCA GTGGATCTGG 201 GACAGAATTC ACTCTCACAA TCAGCAGCCT GCAGCCTGAA GATTTTGCAA 251 CTTATTACTG TCAGCAGTGG AGTAGTGACC CACTCACGTT CGGCGGAGGG 301 ACCAAGGTGG AGATCAAACG TACGGTGGCT GCACCATCTG TCTTCATCTT 351 CCCGCCATCT GATGAGCAGT TGAAATCTGG AACTGCCTCT GTTGTGTGCC 401 TGCTGAATAA CTTCTATCCC AGAGAGGCCA AAGTACAGTG GAAGGTGGAT 451 AACGCCCTCC AATCGGGTAA CTCCCAGGAG AGTGTCACAG AGCAGGACAG 501 CAAGGACAGC ACCTACAGCC TCAGCAGCAC CCTG ACGCTG AGCAAAGCAG 551 ACTACGAGAA ACACAAAGTC TACGCCTGCG AAGTCACCCA TCAGGGCCTG 601 AGCTCGCCCG TCACAAAGAG CTTCAACAGG GGAGAGTGT (SEC ID NO:230) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-16 que incluye el péptido señal es: 1 MDMRVPAQLL GLLLLWLPGA RCDIQLTQSP SFLSASVGDR VTITCRASSS 51 ISYIHWYQQK PG I CAPKLLI Y ATSNLASGVP SRFSGSGSGT EFTLTISSLQ 101 PEDFATYYCQ QWSSDPLTFG GGTKVEIKRT VAAPSVFIFP PSDEQLKSGT 151 ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VADNLQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL 201 TLSKADYEKH KVYACEVTQ GLSSPVTKSF NRGEC (SEC ID NO:231) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-16 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACATGA GGGTCCCCGC TCAGCTCCTG GGGCTCCTGC TGCTCTGGCT 51 CCCAGGTGCC AGATGTGACA TCCAGTTGAC CCAGTCTCCA TCCTTCCTGT 101 CTGCATCTGT AGGAGACAGA GTCACCATCA CTTGCAGGGC CAGCTCAAGT 151 ATAAGTTACA TACACTGGTA TCAGCAAAAA CCAGGGAAAG CCCCTAAGCT 201 CCTG ATCTAT GCCACATCCA ACCTGGCTTC TGGGGTCCCA TCAAGGTTCA 251 GCGGCAGTGG ATCTGGGACA GAATTCACTC TCACAATCAG CAGCCTGCAG 301 CCTGAAGATT TTGCAACTTA TTACTGTCAG CAGTGGAGTA GTGACCCACT 351 CACGTTCGGC GGAGGGACCA AGGTGGAGAT CAAACGTACG GTGGCTGCAC 401 CATCTGTCTT CATCTTCCCG CCATCTGATG AGCAGTTGAA ATCTGGAACT 451 GCCTCTGTTG TGTGCCTGCT GAATAACTTC TATCCCAGAG AGGCCAAAGT 501 ACAGTGGAAG GTGGATAACG CCCTCCAATC GGGTAACTCC CAGGAGAGTG 551 TCACAGAGCA GGACAGCAAG GACAGCACCT ACAGCCTCAG CAGCACCCTG 601 ACGCTGAGCA AAGCAGACTA CGAGAAACAC AAAGTCTACG CCTGCG AAGT 651 CACCCATCAG GGCCTGAGCT CGCCCGTCAC AAAGAGCTTC AACAGGGGAG 701 AGTGT (SEC ID NO:232) Cadena Pesada del Ab-16: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-16 es: 1 EVQ LVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGFDIKDYYIHWVRQA PGQGLEWIGR, 51 VDPDNGETEF APKFPGKVTM TTDTSISTAY MELSRLRSDD TAVYYCARED 101 WGQGTLVTVS SASTKGPSVF PLAPCSRSTS ESTAALGCLV 151 KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VHTFPAVLQS SGLYSLSSW TVPSSNFGTQ 201 TYTCNVDHKP SNTKVDKTVE RKCCVECPPC PAPPVAGPSV FLFPPKPKDT 251 LMISRTPEVT CWVDVSHED PEVQFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQFNSTF 301 RVVSVLTVVH QDWLNGKEYK CKVSNKGLPA PIEKTISKTK GQPREPQVYT 351 LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPMLDS 401 DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK (SEC ID NO:233) La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-16 sin Usina carboxi-terminal: 1 EVQ LVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGFDIKDYYIHWVRQA PGQGLEWIGR 51 VDPDNGETEF APKFPGKVTM TTDTSISTAY MELSRLRSDD TAVYYCARED 101 YDGTYTWFPY WGQGTLVTVS SASTKGPSVF PLAPCSRSTS ESTAALGCLV 151 KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VHTFPAVLQS SGLYSLSSVV TVPSSNFGTQ 201 TYTCNVDHKP SNTKVDKTVE RKCCVECPPC PAPPVAGPSV FLFPPKPKDT 251 LMISRTPEVT CVWDVSHED PEVQFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQFNSTF 301 RVVSVLTWH QDWLNGKEYK CKVSNKGLPA PIEKTISKTK GQPREPQVYT 351 LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPMLDS 401 DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHITQKS LSLSPG (SEC ID NO:395) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-16 es: 1 GAGGTGCAGC TGGTGCAGTC TGGGGCTGAG GTGAAGAAGO CTGGGGCCTC 51 AGTGAAGGTC TCCTGC AAGG CTTCTGGATT CGACATTAAG GACTACTATA 101 TACACTGGGT GCGACAGGCC CCTGGACAAG GGCTTGAGTG GATCGGAAGG 151 GTTGATCCTG ACAATGGTG A GACTGAATTT GCCCCGAAGT TCCCGGGCAA 201 GGTCACCATG ACCACAGACA CGTCCATCAG CACAGCCTAC ATGGAGCTGA 251 GCAGGCTGAG ATCTGACGAC ACGGCCGTGT ATTACTGTGC GAGAGAAGAC 301 TACGATGGTA CCTACACCTG GTTTCCTTAT TGGGGCCAAG GGACTCTGGT 351 CACCGTCTCT AGTGCCTCCA CCAAGGGCCC ATCGGTCTTC CCCCTGGCGC 401 CCTGCTCCAG GAGCACCTCC GAGAGCACAG CGGCCCTGGG CTGCCTGGTC 451 AAGGACTACT TCCCCGAACC GGTGACGGTG TCGTGGAACT CAGGCGCTCT 501 GACCAGCGGC GTGCACACCT TCCCAGCTGT CCTACAGTCC TCAGG ACTCT 551 ACTCCCTCAG CAGCGTGGTG ACCGTGCCCT CCAGCAACTT CGGCACCCAG 601 ACCTACACCT GCAACGTAGA TCACAAGCCC AGCAACACCA AGGTGGACAA 651 GACAGTTGAG CGCAAATGTT GTGTCGAGTG CCCACCGTGC CCAGCACCAC 701 CTGTGGCAGG ACCGTCAGTC TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGG ACACC 751 CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACG TGCGTGGTGG TGGACGTGAG 801 CCACGAAGAC CCCGAGGTCC AGTTCAACTG GTACGTGGAC GGCGTGGAGG 851 TGCATAATGC CAAGACAAAG CCACGGGAGG AGCAGTTCAA CAGCACGTTC 901 CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTTGTGCAC CAGGACTGGC TGAACGGCAA 951 GGAGTACAAG TGCAAGGTCT CCAACAAAGG CCTCCCAGCC CCCATCGAGA 1001 AAACCATCTC CAAAACCAAA GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC 1051 CTGCCCCCAT CCCGGGAGGA GATGACCAAG AACCAGGTCA GCCTGACCTG 1101 CCTGGTCAAA GGCTTCTACC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG TGGGAGAGCA 1151 ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CACCTCCCAT GCTGG ACTCC 1201 GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTGGACA AGAGCAGGTG 1251 GCAGCAGGGG AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA 1301 ACCACTACAC GCAGAAGAGC CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA A (SEC ID NO:234) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-16 que incluye el péptido señal es: 1 MDWTWRILFL VAAATGAHSE VQLVQSGAEV KKPGASVKVS CKASGFDIKD 51 YYI HWVRQAP GQGLEWIGRV DPDNGETEFA PKFPGKVTMT TDTS I STAYM 101 ELSRLRSDDT AVYYCAREDY DGTYTWFPYW GQGTLVTVSS ASTKGPSVFP 151 LAPCSRSTSE STAALGCLVK DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS 201 GLYSLSSVVT VPSSN FGTQT YTCNVDHKPS NTKVDKTVER KCCVECPPCP 251 APPVAGPSVF LFPPKPKDTL MISRTPEVTC VVVDVSHEDP EVQFNWYVDG 301 VEVHNAKTKP REEQFNSTFR VVSVLTVVHQ DWLNG KEYKC KVSNKGLPAP 351 IEKTISKTKG QPREPQVYTL PPSREEMTKN QVSLTCLVKG FYPSDIAVEW 401 ESNGQPENNY KTTPPMLDSD GSFFLYSKLT VDKSRWQQGN VFSCSVMHEA 451 LHNHITQKSL SLSPGK (SEC ID NO:235) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-16 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACTGGA CCTGGAGGAT CCTCTTCTTG GTGGCAGCAG CCACAGGAGC 51 CCACTCCGAG GTGCAGCTGG TGCAGTCTGG GGCTGAGGTG AAGAAGCCTG 101 GGGCCTCAGT GAAGGTCTCC TGCAAGGCTT CTGGATTCG A CATTAAGGAC 151 TACTATATAC ACTGGGTGCG ACAGGCCCCT GGACAAGGGC TTGAGTGGAT 201 CGGAAGGGTT GATCCTGACA ATGGTGAGAC TGAATTTGCC CCGAAGTTCC 251 CGGGCAAGGT CACCATGACC ACAGACACGT CCATCAGCAC AGCCTACATG 301 GAGCTGAGCA GGCTGAGATC TGACG ACACG GCCGTGTATT ACTGTGCGAG 351 AGAAGACTAC GATGGTACCT ACACCTGGTT TCCTTATTGG GGCCAAGGGA 401 CTCTGGTCAC CGTCTCTAGT GCCTCCACCA AGGGCCCATC GGTCTTCCCC 451 CTGGCGCCCT GCTCCAGGAG CACCTCCGAG AGCACAGCGG CCCTGGGCTG 501 CCTGGTCAAG GACTACTTCC GACGGTGTCG TGGAACTCAG 551 GCGCTCTGAC CAGCGGCGTG CAGCTGTCCT ACAGTCCTCA 601 GGACTCTACT CCCTCAGCAG GTGCCCTCCA GCAACTTCGG 651 CACCCAGACC TACACCTGCA CAAGCCCAGC AACACCAAGG 701 TGG ACAAGAC AGTTGAGCGC TCGAGTGCCC ACCGTGCCCA 751 GCACCACCTG TGGCAGGACC CTCTTCCCCC CAAAACCCAA 801 GGACACCCTC ATGATCTCCC GGTCACGTGC GTGGTGGTGG 851 ACGTGAGCCA CGAAGACCCC TCAACTGGTA CGTGGACGGC 901 GTGGAGGTGC ATAATGCCAA CGGGAGGAGC AGTTCAACAG 951 CACGTTCCGT GTGGTCAGCG TGTGCACCAG GACTGGCTGA 1001 ACGGCAAGG A GTACAAGTGC ACAAAGGCCT CCCAGCCCCC 1051 ATCGAGAAAA CCATCTCCAA CAGCCCCGAG AACCACAGGT 1101 GTACACCCTG CCCCCATCCC GGGAGGAGAT GACCAAGAAC CAGGTCAGCC 1151 TGACCTGCCT GGTCAAAGGC TTCTACCCCA GCGACATCGC CGTGGAGTGG 1201 GAGAGCAATG GGCAGCCGGA GAACAACTAC AAGACCACAC CTCCCATGCT 1251 GGACTCCGAC GGCTCCTTCT TCCTCTACAG CAAGCTCACC GTGGACAAGA 1301 GCAGGTGGCA GCAGGGGAAC GTCTTCTCAT GCTCCGTGAT GCATGAGGCT 1351 CTGCACAACC ACTACACGCA GAAGAGCCTC TCCCTGTCTC CGGGTAAA (SEC ID NO:236) Las secuencias de CDR en la región variable de la cadena pesada del Ab-16 son: CDR-H1: DYYIH (SEC ID NO:293) CDR-H2: RVDPDNGETEFAPKFPG (SEC ID NO:294) CDR-H3: EDYDGTYTWFPY (SEC ID NO:295) Las secuencias de CDR de región variable de cadena ligera del Ab-16 son: CDR-L1: RASSSISYIH (SEC ID NO:281) CDR-L2: ATSNLAS (SEC ID NO:282) CDR-L3: QQWSSDPLT (SEC ID NO:283) Dominios variables de Ab-16: La secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena ligera del Ab-16 (sin secuencia de señal): 1 DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCRASSSIS YIHWYQQKPG KAPKLLIYAT 51 SNLASGVPSR FSGSGSGTEF TLTISSLQPE DFATYYC QQW SSDP LTFGGG 101 TKVEIK (SEC ID NO:388) La secuencia variable de cadena ligera de la ADN del dominio Ab-16 (sin secuencia de señal): 1 GACATCCAGT TGACCCAGTC TCCATCCTTC CTGTCTGCAT CTGTAGGAG A 51 CAGAGTCACC ATCACTTGCA GGGCCAGCTC AAGTATAAGT TACATACACT 101 GGTATCAGCA AAAACCAGGG AAAGCCCCTA AGCTCCTGAT CTATGCCACA 151 TCCAACCTGG CTTCTGGGGT CCCATCAAGG TTCAGCGGCA GTGGATCTGG 201 GACAGAATTC ACTCTCACAA TCAGCAGCCT GCAGCCTGAA GATTTTGCAA 251 CTTATTACTG TCAGCAGTGG AGTAGTGACC CACTCACGTT CGGCGGAGGG 301 ACCAAGGTGG AGATCAAA (SEC ID NO:389) La secuencia variable de cadena pesada de aminoácidos del dominio de Ab-16 (sin secuencia de señal) es: 1 EVQ LVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGFDIKDYY I H WV R Q A PGQGLEWIGR 5 VDPDNGETEF APKFPGKVTM TTDTSISTAY MELSRLRSDD TAVYYCARÍ¡§) 101 YDGTYTWFPY WGQGTLVTVS S (SEC ID NO:390) Secuencia de ADN de dominio variable de cadena pesada del Ab-16 (sin secuencia de señal) es: 1 GAGGTGCAGC TGGTGCAGTC TGGGGCTGAG GTGAAGAAGC CTGGGGCCTC 51 AGTGAAGGTC TCCTGCAAGG CTTCTGGATT CGACATTAAG GACTACTATA 101 TACACTGGGT GCGACAGGCC CCTGGACAAG GGCTTGAGTG GATCGGAAGG 151 GTTGATCCTG ACAATGGTGA GACTGAATTT GCCCCGAAGT TCCCGGGCAA 201 GGTCACCATG ACCACAGACA CGTCCATCAG CACAGCCTAC ATGGAGCTGA 251 GCAGGCTGAG ATCTG ACGAC ACGGCCGTGT ATTACTGTGC GAGAGAAGAC 301 TACGATGGTA CCTACACCTG GTTTCCTTAT TGGGGCCAAG GGACTCTGGT 351 CACCGTCTCT AGT (SEC ID NO.391) Los anticuerpos adicionales son referidos en la presente como anticuerpos 17-22 (también designados en la presente como Ab-17, Ab-18, Ab-19, Ab-20, Ab-21, y Ab-22). La región constante Kappa para todas las regiones VK de Ab-17, Ab-19, y Ab-21 es como sigue: TDAAPTVSI FPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKI DGSER QNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERH NSYTCEATKTST SPIVKSFNRNEC (SEC ID NO:323) La región constante pesada de todas las regiones de VH de los anticuerpos 17, 19 y 21 es como sigue: AKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSL SSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSTWPSETVTCNVAHPASSTKV DKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVD ISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPI MHQ DWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTI PPPKEQM AKDKVSLTCM ITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMDTDGSY FVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK (SEC ID NO:324) En las siguientes secuencias de aminoácidos del anticuerpo, los aminoácidos en cuadros sombreados representan las regiones de determinación de complementariedad (CDRs) y los aminoácidos subrayados representan el péptido señal. Ab-17 La secuencia de aminoácidos de Ab-17 LC que incluye el péptido señal es: MDFQVOI FSFMLISVTVI LSSGEI VLTQSPALMAASPGEKVTITC SVSSSISSSNLHWSQQKSGTSPKLWIYGTSNLASGVPVRFSGSGSG TSYSLTISSM EAEDAATYYCQQWTTTYTFGSGTKLELKR (SEC ID NO:299) La secuencia de ácido nucleico del Ab-17 LC que incluye el péptido señal es: ATGGATTTTCAGGTGCAGATTTTCAGCTTCATGCTAATCAGTGTCA CAGTCATATTGTCCAGTGGAGAAATTGTGCTCACCCAGTCTCCAG CACTCATGGCTGCATCTCCAGGGGAGAAGGTCACCATCACCTGCA GTGTCAGCTCGAGTATAAGTTCCAGCAACTTACACTGGTCCCAGC AGAAGTCAGG AACCTCCCCCAAACTCTGG ATTTATGGCACATCCA ACCTTGCTTCTGGAGTCCCTGTTCGCTTCAGTGGCAGTGGATCTG GGACCTCTTATTCTCTCACAATCAGCAGCATGGAGGCTGAAGATG CTGCCACTTATTACTGTCAACAGTGG ACTACTACGTATACGTTCGG ATCGGGGACCAAGCTGGAGCTG AAACGT (SEC ID NO:300) La secuencia de aminoácidos del Ab-17 HC que incluye el péptido señal es: MGWNWI I FFLMAVVTGVNSEVQLRQSGADLVKPGASVKLSCTASGF N I KDYYIHWV KQRPEQGLEWIG RID P DNGESTYVPK FQG K A T I T A D T SSNTAI LQLRSLTSEDTAI YYCGREGL DYGDY Y AVDYW GQGTSVTVS S (SEC ID NO:301) La secuencia de ácido nucleico del Ab-17 HC que incluye el péptido señal es: ATGGGATGGAACTGG ATCATCTTCTTCCTGATGGCAGTGGTTACA GGGGTCAATTCAGAGGTGCAGTTGCGGCAGTCTGGGGCAGACCT TGTGAAGCCAGGGGCCTCAGTCAAGTTGTCCTGCACAGCTTCTGG CTTCAACATTAAAGACTACTATATACACTGGGTGAAGCAG AGGCC TGAACAGGGCCTGGAGTGGATTGGAAGGATTGATCCTGATAATGG TGAAAGTACATATGTCCCGAAGTTCCAGGGCAAGGCCACTATAAC AGCAGACACATCATCCAACACAGCCTACCTACAACTCAGAAGCCT GACATCTG AGGACACTGCCATCTATTATTGTGGG AGAGGGGCTCG ACTATGGTG ACTACTATGCTGTGG ACTACTGGGGTCAAGGAACCT CGGTCACAGTCTCGAGC (SEC ID NO:302) Ab-17 fue humanizado para generar Ab-18. Ab-18 La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-18 que incluye el péptido señal es: MDMRVPAOLLGLLLLWLPGARCDIOLTQSPSFLSASVGDRVTI T C SVSSSISSSNLHWY OQ KPGKAPKLLI YGT SNLASG VPSRFSGSGS GTEFTLTISSLQ PBDFATYYCQQWTTTYTFGQGTKLEI KR (SEC ID NO:303) La secuencia de ácido nucleico de Ab-18 LC que incluye el péptido señal es: ATGGATATGCGCGTGCCGGCGCAGCTGCTGGGCCTGCTGCTGCT GTGGCTGCCGGGCGCGCGCTGCGATATTCAGCTGACCCAGAGCC CG AGCTTTCTGAGCGCGAGCGTGGGCG ATCGCGTGACCATTACC TGCAGCGTGAGCAGCAGCATTAGCAGCAGCAACCTGCATTGGTAT CAGCAGAAACCGGGCAAAGCGCCGAAACTGCTGATTTATGGCAC CAGCAACCTGGCGAGCGGCGTGCCGAGCCGCTTTAGCGGCAGCG GCAGCGGCACCGAATTTACCCTGACCATTAGCAGCCTGCAGCCG GAAGATTTTGCGACCTATTATTGCCAGCAGTGG ACCACCACCTAT ACCTTTGGCCAGGGCACCAAACTGGAAATTAAACGT (SEC ID NO:304) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-18 que incluye el péptido señal es: M DWTWSI LFLVAAPTGAHSEVOLVOSGAEVKKPGASVKVSC KASG F N I KDYYIH WVRQAPGQGLEWMG RIDP D N GESTYVPK FQG RVTMTTD TSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCAREGLDYGDYYAVDYWGQGTLVT VSS (SEC ID NO:305) La secuencia de ácido nucleico del Ab-18 HC que incluye el péptido señal es: ATGGATTGGACCTGGAGCATTCTGTTTCTGGTGGCGGCGCCGAC CGGCGCGCATAGCGAAGTGCAGCTGGTGCAGAGCGGCGCGGAA GTG AAAAAACCGGGCGCGAGCGTGAAAGTGAGCTGCAAAGCGAG CGGCTTTAACATTAAAGATTATTATATTCATTGGGTGCGCCAGGCG CCGGGCCAGGGCCTGGAATGGATGGGCCGCATTGATCCGGATAA CGGCGAAAGCACCTATGTGCCGAAATTTCAGGGCCGCGTGACCA TGACCACCGATACCAGCACCAGCACCGCGTATATGGAACTGCGCA GCCTGCGCAGCGATGATACCGCGGTGTATTATTGCGCGCGCGAA GGCCTGGATTATGGCG ATTATTATGCGGTGGATTATTGGGGCCAG GGCACCCTGGTGACCGTCTCGAGC (SEC ID NO:306) La secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena ligera del Ab-18 (sin secuencia de señal) es: DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITC S V S S S I S S S N L H W Y Q Q K P G K A P K L L I YGTSNLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQWTTT YTFGQGTKLEIKR (SEC ID NO:368) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena ligera del Ab-18 (sin secuencia de señal): GATATTCAGCTGACCCAGAGCCCGAGCTTTCTGAGCGCGAGCGT GGGCGATCGCGTGACCATTACCTGCAGCGTGAGCAGCAGCATTA GCAGCAGCAACCTGCATTGGTATCAGCAG AAACCGGGCAAAGCG CCGAAACTGCTGATTTATGGCACCAGCAACCTGGCG AGCGGCGT GCCGAGCCGCTTTAGCGGCAGCGGCAGCGGCACCGAATTTACCC TGACCATTAGCAGCCTGCAGCCGG AAGATTTTGCGACCTATTATT GCCAGCAGTGGACCACCACCTATACCTTTGGCCAGGGCACCAAA CTGGAAATTAAACGT (SEC ID NO:369): La secuencia de aminoácido de dominio variable de cadena pesada del Ab-18 (sin secuencia de señal): EVQ LVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFN I KDYYIH WVRQAPGQG LE WM G RIDPDNGESTYVPKFQG RVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTA VYYCAREGLDYGDYYAVDYWGQGTLVTVSS (SEC ID NO:370) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena pesada del Ab-18 (sin secuencia de señal): GAAGTGCAGCTGGTGCAGAGCGGCGCGGAAGTG AAAAAACCGGG CGCGAGCGTGAAAGTGAGCTGCAAAGCGAGCGGCTTTAACATTAA AGATTATTATATTCATTGGGTGCGCCAGGCGCCGGGCCAGGGCCT GGAATGGATGGGCCGCATTGATCCGGATAACGGCGAAAGCACCT ATGTGCCGAAATTTCAGGGCCGCGTG ACCATG ACCACCGATACCA GCACCAGCACCGCGTATATGGAACTGCGCAGCCTGCGCAGCGAT GATACCGCGGTGTATTATTGCGCGCGCGAAGGCCTGGATTATGG CGATTATTATGCGGTGGATTATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTGAC CGTCTCGAGC (SEC ID NO:371) Ab-19 La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-19 que incluye el péptido señal es: MMSSAQFLGLLLLCFQGT RCDIOMTQTTSSLSASLGDRVN ISC RASO jDjSjS í L Ñ1 W YQQKPDGTVKLLIYSTSRLKSGVPSRFSGSGSGTDYSLTI SNLAQEDIATYFCÜQDIKHPTFGGGTKLELKR (SEC ID NO:307) La secuencia de ácido nucleico de al LC del Ab-19 que incluye el péptido señal es: ATGATGTCCTCTGCTCAGTTCCTTGGTCTCCTGTTGCTCTGTTTTC AAGGTACCAGATGTG ATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCC TGTCTGCCTCTCTGGG AGACAG AGTCAACATCAGCTGCAGGGCAA GTCAGGACATTAGCAGTTATTTAAACTGGTATCAGCAGAAACCAG ATGGAACTGTTAAACTCCTG ATCTACTCCACATCAAGATTAAACTC AGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGATTA TTCTCTCACTATTAGCAACCTGGCACAAGAAGATATTGCCACTTAC TTTTGCCAACAGGATATTAAGCATCCGACGTTCGGTGGAGGCACC AAGTTGGAGCTGAAACGT (SEC ID NO:308) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-19 que incluye el péptido señal es: TFT DYIMHWV KQKPGQGLEWIG Yf fig N g¾¾ N ? K f. K GK A T L T S D K S SSTAYM DLSSLTSEGSAVYYCARSIYYYDAPFAYWGQGTLVTVSS (SEC ID NO:309) La secuencia de ácido nucleico de Ab-19 HC que incluye el péptido señal es: ATGGAATGGATCTGGATATTTCTCTTCCTCCTGTCAGGAACTGCA GGTGTCCACTCTGAGGTCCAGCTGCAGCAGTCTGGACCTGAGCT GGTAAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAGATGTCCTGCAAGGCTTCTGG GTTCACATTCACTGACTACATTATGCACTGGGTGAAGCAG AAGCC TGGGCAGGGCCTTGAGTGGATTGGATATATTAATCCTTACAATGA TG ATACTGAATACAATG AGAAGTTCAAAGGCAAGGCCACACTGAC TTCAGACAAATCCTCCAGCACAGCCTACATGG ATCTCAGCAGTCT GACCTCTGAGGGCTCTGCGGTCTATTACTGTGCAAGATCGATTTA TTACTACGATGCCCCGTTTGCTTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGT CACAGTCTCGAGC (SEC ID NO:310) El Ab-19 fue humanizado para generar el anticuerpo 20 (también referido en la presente como Ab-20) y el anticuerpo 23 (también referido en la presente como Ab-23). Ab-20 Versión de lgG4 La secuencia de aminoácidos de Ab-20 LC que incluye el péptido señal es: MMSSAOFLGLLLLCFOGTRCDIO TOSPSSLSASVGDRVTITCRASÓ SSLQPEDFATYYCQQDIKHPTFGQGTKVEIKR (SEC ID NO:311 ) La secuencia de ácido nucleico de Ab-20 LC que incluye el péptido señal es: ATGATGTCCTCTGCTCAGTTCCTTGGTCTCCTGTTGCTCTGTTTTC AAGGTACCAGATGTGATATCCAGATG ACCCAGTCTCCATCCTCCC TGTCTGCATCTGTAGGTGACCGTGTCACCATCACTTGCCGCGCAA GTCAGGATATTAGCAGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAG GGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATTCTACTTCCCGTTTGAATAG TGGGGTCCCATCACGCTTCAGTGGCAGTGGCTCTGGGACAGATTT CACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTG AAGATTTTGCAACTTAC TACTGTCAACAGGATATTAAACACCCTACGTTCGGTCAAGGCACC AAGGTGGAGATCAAACGT (SEC ID NO:312) La secuencia de aminoácidos de Ab-20 HC que incluye el péptido señal es: M EWI Wl FLFLLSGTAGVHSEVOLVOSGAEVKKPGSSVKVSCKASG FT FTDY IMHWV RQAPGQGLEWMG YINPYN DDTEYNEKFKGRVTITADK STSTAYM ELSSLRSEDTAVYYCARSÍYYYDAPFAYWGQGTLVTVSS (SEC ID NO:313) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-20 que incluye el péptido señal es: ATGGAATGGATCTGGATATTTCTCTTCCTCCTGTCAGGAACTGCA GGTGTCCACTCTGAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGT GAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTG AAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTG GTTTTACCTTCACCGACTATATTATGCACTGGGTGCGTCAGGCCC CTGGTCAAGGGCTTG AGTGGATGGGCTATATCAACCCTTATAATG ATGACACCGAATACAACGAGAAGTTCAAGGGCCGTGTCACGATTA CCGCGG ACAAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGC CTGCGCTCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGCGTTCGATT TATTACTACGATGCCCCGTTTGCTTACTGGGGCCAAGGGACTCTG GTCACAGTCTCGAGC (SEC ID NO:349) Ab-23 Versión de lqG2 Cadena Ligera: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-23 es: 1 DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDIS SILNWYQQKP GKAPKLLIYS 51 TSRLNSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ DIKHPT FGQG 101 TKVEIK/?7W APSVFIFPPS DEQLKSGTAS VVCLLNNFYP REAKVQWKVD 151 NALQSGNSQE SVTEQDSKDS TYSLSSTLTL SKADYEKHKV YACEVTQGL 201 SSPVTKSFNR GEC (SEC ID NO:341) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de Ab-23 LC es: 1 GACATCCAGA TGACCCAGTC TCCATCCTCC CTGTCTGCAT CTGTAGGTGA 51 CCGTGTCACC ATCACTTGCC GCGCAAGTCA GGATATTAGC AGCTATTTAA 101 ATTGGTATCA GCAGAAACCA GGG AAAGCCC CTAAGCTCCT GATCTATTCT 151 ACTTCCCGTT TGAATAGTGG GGTCCCATCA CGCTTCAGTG GCAGTGGCTC 201 TGGGACAGAT TTCACTCTCA CC ATCAGCAG TCTGCAACCT GAAGATTTTG 251 CAACTTACTA CTGTCAACAG GATATTAAAC ACCCTACGTT CGGTCAAGGC 301 ACCAAGGTGG AGATCAAACG TACGGTGGCT GCACCATCTG TCTTCATCTT 351 CCCGCCATCT GATGAGCAGT TGAAATCTGG AACTGCCTCT GTTGTGTGCC 401 TGCTGAATAA CTTCTATCCC AGAGAGGCCA AAGTACAGTG GAAGGTGGAT 451 AACGCCCTCC AATCGGGTAA CTCCCAGGAG AGTGTCACAG AGCAGGACAG 501 CAAGGACAGC ACCTACAGCC TCAGCAGCAC CCTGACGCTG AGCAAAGCAG 551 ACTACGAGAA ACACAAAGTC TACGCCTGCG AAGTCACCCA TCAGGGCCTG 601 AGCTCGCCCG TCACAAAGAG CTTCAACAGG GGAGAGTGT (SEC ID NO:342) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-23 que incluye el péptido señal es: 1 MDMRVPAQLL GLLLLWLRGA RCDIQMTQSP SSLSASVGDR VTITCRASQD 51 ISSILNWYQQ KPGKAPKLLI YSTSRLNSGV PSRFSGSGSG TDFTLTISSL 101 QPEDFATYYC QQ DI KHPTFG QGTKVEI KRT VAAPSVFIFP PSDEQLKSGT 151 AS VVCLLN N F YPREAKVQWK VADNLQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL 201 TLSKADYEKH KVYACEVTQ GLSSPVTKSF NRGEC (SEC ID NO:343) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-23 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACATGA GGGTGCCCGC TCAGCTCCTG GGGCTCCTGC TGCTGTGGCT 51 GAGAGGTGCC AGATGTGACA TCCAGATGAC CCAGTCTCCA TCCTCCCTGT 101 CTGCATCTGT AGGTGACCGT GTCACCATCA CTTGCCGCGC AAGTCAGGAT 151 ATTAGCAGCT ATTTAAATTG GTATCAGCAG AAACCAGGGA AAGCCCCTAA 201 GCTCCTG ATC TATTCTACTT CCCGTTTGAA TAGTGGGGTC CCATCACGCT 251 TCAGTGGCAG TGGCTCTGGG ACAGATTTCA CTCTCACCAT CAGCAGTCTG 301 CAACCTGAAG ATTTTGCAAC TTACTACTGT CAACAGGATA TTAAACACCC 351 TACGTTCGGT CAAGGCACCA AGGTGGAGAT CAAACGTACG GTGGCTGCAC 401 CATCTGTCTT CATCTTCCCG CCATCTGATG AGCAGTTGAA ATCTGGAACT 451 GCCTCTGTTG TGTGCCTGCT GAATAACTTC TATCCCAGAG AGGCCAAAGT 501 ACAGTGGAAG GTGGATAACG CCCTCCAATC GGGTAACTCC CAGGAGAGTG 551 TCACAGAGCA GGACAGCAAG GACAGCACCT ACAGCCTCAG CAGCACCCTG 601 ACGCTGAGCA AAGCAGACTA CGAGAAACAC AAAGTCTACG CCTGCGAAGT 651 CACCCATCAG GGCCTG AGCT CGCCCGTCAC AAAGAGCTTC AACAGGGGAG 701 AGTGT (SEC ID NO:344) Cadena Pesada La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-23 es: 1 EVQLVQSGAE VKKPGSSVKV SCKASGFTFT DYIMHWV RQA PGQGLEWMGY 51 JNPYNDDTEY Mf J¾j VTI TADKSTSTAY MELSSLRSED TAVYYCARll 101 II DAP F A YjW GQGTLVTVSS ASTKGPSVFP LAPCSRSTSE STAALGCLVK 151 DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS GLYSLSSWT VPSSNFGTQT 201 YTCNVDHKPS NTKVDKTVER KCCVECPPCP APPVAGPSVF LFPPKPKDTL 251 MLSRTPEVTC WVDVSHEDP EVQFNWYVDG VEVHNAKTKP REEQFNSTFR 301 WSVLTWHQ DWLNGKEYKC KVSNKGLPAP IEKT1 SKTKG QPREPQVYTL 351 PPSREEMTKN QVSLTCLVKG FYPSDIAVEW ESNGQPENNY KTTPPMLDSD 401 GSFFLYSKLT VDKSRWQQGN VFSCSVMHEA LHNHITQKSL SLSPGK (SEC ID NO:345) La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-23 sin Usina carboxi-terminal: 1 EVQLVQSGAE VKKPGSSVKV SCKASGFTFT DYIMHWVRQA PGQGLEWMGY 51 INPYND|I¾[:' :l NE;híl lRVTI TADKSTSTAY MELSSLRSED TAVYYCARSI 101 ASTKGPSVFP LAPCSRSTSE STAALGCLVK 151 DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS GLYSLSSWT VPSSNFGTQT 201 YTCNVDHKPS NTKVDKTVER KCCVECPPCP APPVAGPSVF LFPPKPKDTL 251 MISRTPEVTC VVVDVSHEDP EVQFNWYVDG VEVHNAKTKP REEQFNSTFR 301 VVSVLTWHQ DWLNGKEYKC KVSNKGLPAP IEKTISKTKG QPREPQVYTL 351 PPSREEMTKN QVSLTCLVKG FYPSDIAVEW ESNGQPENNY KTTPPMLDSD 401 GSFFLYSKLT VDKSRWQQGN VFSCSVMHEA LHNHITQKSL SLSPG (SEC ID N0 396) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-23 es: 1 GAGGTGCAGC TGGTGCAGTC TGGGGCTGAG GTGAAGAAGC CTGGGTCCTC 51 GGTGAAGGTC TCCTGCAAGG TACCTTCACC GACTATATTA 101 TGCACTGGGT GCGTCAGGCC GGCTTGAGTG GATGGGCTAT 151 ATCAACCCTT ATAATGATGA AACGAGAAGT TCAAGGGCCG 201 TGTCACGAFT ACCGCGGACA CACAGCCTAC ATGGAGCTGA 251 GCAGCCTGCG CTCTGAGGAC ATTACTGTGC GCGTTCGATT 301 TATTACTACG ATGCCCCGTT GGCCAAGGGA CTCTGGTCAC 351 CGTCTCTAGT GCCTCCACCA GGTCTTCCCC CTGGCGCCCT 401 GCTCCAGGAG CACCTCCGAG CCCTGGGCTG CCTGGTCAAG 451 GACTACTTCC CCG AACCGGT TGGAACTCAG GCGCTCTGAC 501 CAGCGGCGTG CACACCTTCC ACAGTCCTCA GGACTCTACT 551 CCCTCAGCAG CGTGGTGACC GCAACTTCGG CACCCAGACC 601 TACACCTGCA ACGTAGATCA AACACCAAGG TGGACAAGAC 651 AGTTGAGCGC AAATGTTGTG ACCGTGCCCA GCACCACCTG 701 TGGCAGGACC GTCAGTCTTC CAAAACCCAA GGACACCCTC 751 ATGATCTCCC GGACCCCTGA GTGGTGGTGG ACGTGAGCCA 801 CGAAGACCCC GAGGTCCAGT CGTGGACGGC GTGGAGGTGC 851 ATAATGCCAA GACAAAGCCA AGTTCAACAG CACGTTCCGT 901 GTGGTCAGCG TCCTCACCGT GACTGGCTGA ACGGCAAGGA 951 GTACAAGTGC AAGGTCTCCA CCCAGCCCCC ATCG AGAAAA 1001 CCATCTCCAA AACCAAAGGG AACCACAGGT GTACACCCTG 1051 CCCCCATCCC GGGAGGAGAT CAGGTCAGCC TGACCTGCCT 1101 GGTCAAAGGC TTCTACCCCA CGTGGAGTGG GAGAGCAATG 1151 GGCAGCCGGA GAACAACTAC CTCCCATGCT GGACTCCGAC 1201 GGCTCCTTCT TCCTCTACAG GTGGACAAGA GCAGGTGGCA 1251 GCAGGGGAAC GTCTTCTCAT GCATGAGGCT CTGCACAACC 1301 ACTACACGCA GAAGAGCCTC TCCCTGTCTC CGGGTAAA (SEC ID NO:346) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-23 que incluye el péptido señal es: 1 MDWTWRILFL VAAATGAHSE VQLVQSGAEV KKPGSSVKVS CKASGFTFTD 51 YIMHWVRQAP GQGLEWMGYI NPYNDDTEYN EKFKGRVTIT ADKSTSTAYM 101 ELSSLRSEDT AVYYCARSIY YYDAPFAYWG QGTLVTVSSA STKGPSVFPL 151 APCSRSTSES TAALGCLVKD YFPEPVTVSW NSGALTSGVH TFPAVLQSSG 201 LYSLSSVVTV PSSNFGTQTY TCNVDHKPSN TKVDKTVERK CCVECPPCPA 251 PPVAGPSVFL FPPKPKDTLM ISRTPEVTCV VVDVSHEDPE VQFNWYVDGV 301 EVHNAKTKPR EEQFNSTFRV VSVLTVVHQD WLNGKEYKCK VSNKGLPAPI 351 EKTISKTKGQ PREPQVYTLP PSREEMTKNQ VSLTCLVKGF YPSDIAVEWE 401 SNGQPENNYK TTPPMLDSDG SFFLYSKLTV DKSRWQQGNV FSCSVM H EAL 451 HNHITQKSLS LSPGK (SEC ID NO:347) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-23 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGACTGG A CCTGGAGGAT GTGGCAGCAG CCACAGGAGC 51 CCACTCCGAG GTGCAGCTGG GGCTGAGGTG AAGAAGCCTG 101 GGTCCTCGGT GAAGGTCTCC CTGGTTTTAC CTTCACCGAC 151 TATATTATGC ACTGGGTGCG GGTCAAGGGC TTGAGTGGAT 201 GGGCTATATC AACCCTTATA CGAATACAAC GAGAAGTTCA 251 AGGGCCGTGT CACGATTACC CCACGAGCAC AGCCTACATG 301 GAGCTG AGCA GCCTGCGCTC GCCGTGTATT ACTGTGCGCG 351 TTCGATTTAT TACTACGATG TTACTGGGGC CAAGGGACTC 401 TGGTCACCGT CTCTAGTGCC GCCCATCGGT CTTCCCCCTG 451 GCGCCCTGCT CCAGGAGCAC ACAGCGGCCC TGGGCTGCCT 501 GGTCAAGGAC TACTTCCCCG GGTGTCGTGG AACTCAGGCG 551 CTCTGACCAG CGGCGTGCAC CTGTCCTACA GTCCTCAGGA 601 CTCTACTCCC TCAGCAGCGT CCCTCCAGCA ACTTCGGCAC 651 CCAGACCTAC ACCTGCAACG GCCCAGCAAC ACCAAGGTGG 701 ACAAGACAGT TGAGCGCAAA AGTGCCCACC GTGCCCAGCA 751 CCACCTGTGG CAGGACCGTC TTCCCCCCAA AACCCAAGGA 801 CACCCTCATG ATCTCCCGGA CACGTGCGTG GTGGTGGACG 851 TGAGCCACGA AGACCCCGAG ACTGGTACGT GGACGGCGTG 901 GAGGTGCATA ATGCCAAGAC GAGGAGCAGT TCAACAGCAC 951 GTTCCGTGTG GTCAGCGTCC GCACCAGGAC TGGCTGAACG 1001 GCAAGGAGTA CAAGTGCAAG AAGGCCTCCC AGCCCCCATC 1051 GAGAAAACCA TCTCCAAAAC CCCCGAGAAC CACAGGTGTA 1101 CACCCTGCCC CCATCCCGGG CAAGAACCAG GTCAGCCTGA 1151 CCTGCCTGGT CAAAGGCTTC ACATCGCCGT GGAGTGGGAG 1201 AGCAATGGGC AGCCGGAGAA ACCACACCTC CCATGCTGGA 1251 CTCCGACGGC TCCTTCTTCC TCTACAGCAA GCTCACCGTG GACAAGAGCA 1301 GGTGGCAGCA GGGGAACGTC TTCTCATGCT CCGTGATGCA TGAGGCTCTG 1351 CACAACCACT ACACGCAGAA GAGCCTCTCC CTGTCTCCGG GTAAA (SEC ID NO:348) Las secuencias de CDR (región de determinación de complementariedad) en la región variable de la cadena pesada del Ab-23 son como sigue: CDR-H1: DYIMH (SEC ID NO:269) CDR-H2: YINPYNDDTEYNEKFKG (SEC ID NO:270) CDR-H3: SIYYYDAPFAY (SEC ID NO:271) Las secuencias de CDR de región variable de cadena ligera del Ab-23 son: CDR-L1: RASQDISSILN (SEC ID NO:239) CDR-L2: STSRLNS (SEC ID NO:240) CDR-L3: QQDIKHPT (SEC ID NO:241 ) Dominios variables del Ab-23: La secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena ligera del Ab-23 (sin secuencia de señal) es: DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQDIS SILNWYQQKP GKAPKLLIYS TSRLNSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ DI KH PTFGQG TKVEIK (SEC ID NO:364) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena ligera del Ab-23 (sin secuencia de señal) es: GACATCCAG ATG ACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTA GGTGACCGTGTCACCATCACTTGCCGCGCAAGTCAGGATATTAGC AGCTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAG CTCCTG ATCTATTCTACTTCCCGTTTG AATAGTGGGGTCCCATCAC GCTTCAGTGGCAGTGGCTCTGGGAC AG ATTTCACTCTC ACCATC A GCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGG ATATTAAACACCCTACGTTCGGTCAAGGCACCAAGGTGGAGATCA AA (SEC ID NO:365) La secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena pesada del Ab-23 (sin secuencia de señal) es: EVQ LVQSGAEVKKPGSSVKVSC KASG FTFTDYI M H WVRQAPGQG LE WMGYI NPYNDDTEYN EKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAV YYCARSI YYYDAPFAYWGQGTLVTVSS (SEC ID NO:366) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena pesada del Ab-23 (sin secuencia de señal) es: GAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTG AGGTGAAGAAGCCTGG GTCCTCGGTG AAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTTTACCTTCAC CGACTATATTATGCACTGGGTGCGTCAGGCCCCTGGTCAAGGGCT TGAGTGGATGGGCTATATCAACCCTTATAATG ATGACACCGAATA CAACGAGAAGTTCAAGGGCCGTGTCACGATTACCGCGGAC AAATC CACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGCGCTCTGAGG ACACGGCCGTGTATTACTGTGCGCGTTCGATTTATTACTACGATG CCCCGTTTGCTTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTCACCGTCTCTA GT (SEC ID NO-.367) Ab-21 La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-21 que incluye el péptido señal es: MKSOTOVFVYMLLWLSGVEGDI VMTOSH KFMSTSVGDRVTITCKAS ODVFTAVAWY OQKPGQSPKLL I YWASTRHTG VPDRFTGSGSGTDFT LTISNVQSEDLADYFC Q Q Y SS Y P LJj FGAGTKLELKR (SEC ID NO:315) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-21 que incluye el péptido señal es: ATG AAGTCACAGACCCAGGTCTTTGTATACATGTTGCTGTGGTTGT CTGGTGTTGAAGGAGACATTGTG ATGACCC AGTCTCACAAATTCA TGTCCACGTCAGTAGGAGACAGGGTCACCATCACCTGCAAGGCC AGTCAGGATGTCTTTACTGCTGTAGCCTGGTATCAACAGAAACCA GGACAATCTCCTAAACTACTGATTTACTGGGCATCCACCCGGCAC ACTGGAGTCCCTGATCGCTTCACAGGCAGTGGATCTGGGACAGAT TTCACTCTCACCATTAGCAATGTGCAGTCTG AAGACTTGGCAGATT ATTTCTGTCAACAATATAGCAGCTATCCTCTCACGTTCGGTGCTGG GACCAAGTTGGAGCTGAAACGT (SEC ID NO:316) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-21 que incluye el péptido señal es: MGWNWI IFFLMAVVTGVNSEVOLQQSGAELVRPGALVKLSCKASGF N I K DYYMHWV KQRPEQGLEWIG ¾DP E G. DJ !Y DPKFQGKASITTDT SSNTAILQLSSLTSEDTAVYYCAYlAG^ (SEC ID NO:317) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-21 que incluye el péptido señal es: ATGGG ATGGAACTGGATCATCTTCTTCCTGATGGCAGTGGTTACA GGGGTCAATTCAGAGGTTCAGCTGCAGCAGTCTGGGGCTGAGCT TGTG AGGCCAGGGGCCTTAGTCAAGTTGTCCTGCAAAGCTTCTGG CTTCAATATTAAAGACTACTATATGCACTGGGTGAAGCAG AGGCC TGAACAGGGCCTGGAGTGGATTGGAAGGATTGATCCTGAGAATG GTGATATTATATATGACCCGAAGTTCCAGGGCAAGGCCAGTATAA CAACAGACACATCCTCCAACACAGCCTACCTGCAGCTCAGCAGCC TGACGTCTGAGGACACTGCCGTCTATTACTGTGCTTACG ATGCTG GTG ACCCCGCCTGGTTTACTTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTCA CCGTCTCGAGC (SEC ID NO:318) Ab-21 fue humanizado para proporcionar Ab-22. Ab-22 La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-22 que incluye el péptido señal es: MDMRVPAOLLGLLLLWLRGARCDIOMTOSPSSLSASVGDRVTITCKA SODVFTAVAWYQQKPGKAPKLLI YWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDF TLTISSLQPE DFATYYCQQYSSYPLTF GGGTKVE I KR (SEC ID NO:319) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-22 que incluye el péptido señal es: ATGGATATGCGCGTGCCGGCGCAGCTGCTGGGCCTGCTGCTGCT GTGGCTGCGCGGCGCGCGCTGCGATATCCAGATGACCCAGAGCC CGAGCAGCCTGAGCGCGAGCGTGGGCGATCGCGTGACCATTACC TGCAAAGCGAGCCAGGATGTGTTTACCGCGGTGGCGTGGTATCA GCAGAAACCGGGCAAAGCGCCGAAACTGCTGATTTATTGGGCGA GCACCCGCCATACCGGCGTGCCGAGTCGCTTTAGCGGCAGCGGC AGCGGCACCGATTTTACCCTGACCATTAGCAGCCTGCAGCCGGAA GATTTTGCGACCTATTATTGCCAGCAGTATAGCAGCTATCCGCTG ACCTTTGGCGGCGGCACCAAAGTGG AAATTAAACGT (SEC ID NO:320) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-22 que incluye el péptido señal es: M DWTWSI LFLVAAPTGAHSEVO LVOSG AEVKKPGASVKVSCKASG F NI KDYYMHWVRQAPGQGLEWIGRIDPENGDÍGYDPKFQGRVTMTTD TSTSTAYM ELRSLRSDDTAVYYCAYDAGDPÁWFTYWGQGTLVTVSS (SEC ID NO:321) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-22 que incluye el péptido señal es: ATGGATTGGACCTGGAGCATTCTGTTTCTGGTGGCGGCGCCGAC CGGCGCGCATAGCG AAGTGCAGCTGGTGCAGAGCGGCGCGGAA GTG AAAAAACCGGGCGCGAGCGTGAAAGTGAGCTGCAAAGCGAG CGGCTTTAACATTAAAGATTATTATATGCATTGGGTGCGCCAGGC GCCGGGCCAGGGCCTGGAATGGATCGGCCGCATTGATCCGGAAA ACGGCGATATTATTTATG ATCCGAAATTTCAGGGCCGCGTGACCA TGACCACCGATACCAGCACCAGCACCGCGTATATGG AACTGCGCA GCCTGCGCAGCGATGATACCGCGGTGTATTATTGCGCGTATGATG CGGGCGATCCGGCGTGGTTTACCTATTGGGGCCAGGGCACCCTG GTGACCGTCTCGAGC (SEC ID NO:322) La secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena ligera del Ab-22 (sin secuencia de señal) es: DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCKASQDVF TAVAWYQQKP GKAPKLLIYW ASTRHTGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ YSSYPLTFGG GTKVEIKR (SEC ID NO:336) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena ligera del Ab-22 (sin secuencia de señal) es: GATATCCAGATGACCCAG AGCCCG AGCAGCCTGAGCGCG AGCGT GGGCGATCGCGTG ACCATTACCTGCAAAGCGAGCCAGG ATGTGT TTACCGCGGTGGCGTGGTATCAGCAGAAACCGGGCAAAGCGCCG AAACTGCTG ATTTATTGGGCGAGCACCCGCCATACCGGCGTGCC GAGTCGCTTTAGCGGCAGCGGCAGCGGCACCGATTTTACCCTGA CCATTAGCAGCCTGCAGCCGGAAGATTTTGCGACCTATTATTGCC AGCAGTATAGCAGCTATCCGCTG ACCTTTGGCGGCGGC ACC AAA GTGGAAATTAAACGT (SEC ID NO:337) La secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena pesada del Ab-22 (sin secuencia de señal) es: EVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGFNIK DYYM HWVRQ A PGQGLEWIGRIDPENGDIIY DPKFQGRVTM TTDTSTSTAY MELRSLRSDD TAVY YC AY D AG D PAWFTYWG QGTLVTVSS (SEC ID NO:338) La secuencia de ADN de dominio variable de cadena pesada del Ab-22 (sin secuencia de señal) es: GAAGTGCAGCTGGTGCAGAGCGGCGCGG AAGTGAAAAAACCGGG CGCGAGCGTGAAAGTGAGCTGCAAAGCGAGCGGCTTTAACATTAA AGATTATTATATGCATTGGGTGCGCCAGGCGCCGGGCCAGGGCC TGG AATGGATCGGCCGCATTGATCCGGAAAACGGCGATATTATTT ATGATCCGAAATTTCAGGGCCGCGTG ACCATG ACCACCGATACCA GCACCAGCACCGCGTATATGGAACTGCGCAGCCTGCGCAGCGAT GATACCGCGGTGTATTATTGCGCGTATGATGCGGGCGATCCGGC GTGGTTTACCTATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTG ACCGTCTCGA GC (SEC ID NO:339). Para Ab-18, Ab-20, y Ab-22, la región constante kappa humana de cadena ligera es como sigue: TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVADNLQ SGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTQGLS SPVTKSF RGEC* (SEC ID NO:325) y la región constante gamma-4 humana de cadena pesada es como sigue: ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALT SGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKV DKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLM ISRTPEVTC VVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLT VLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPS QEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPEN NYKTTPPVLDS DGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHITQKSLSLSLG K* (SEC ID NO:326) La región bisagra contiene la mutación de Ser-241-Pro para mejorar la estabilidad de bisagra (Angal S y colaboradores, (1993), Mol Immunol, 30(1), 105-108). Ab-24 Las secuencias del anticuerpo 24 (también referido en la presente como Ab-24) del LC y HC son como sigue: Cadena Ligera: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-24 es: 5 1 DIVLTQSPAS LAVSLGQ RAT IACKASQSVD YDGTSYM NWY QQKPGQPPKL 51 LIYAASNLES EIPARFSGTG SGTDFTLN I H PVEEEDITTY YCQQSNEDPF 101 TFGGGTKLEI KRADAAPTVS IFPPSSEQLT I0 SGGASVVCFL NNFYPKDINV 151 KWKIDGSERQ NGVLN SWTDQ DSKDSTYSMS STLTLTKDEY ERHNSYTCEA 201 TKTSTSPIV KSFNRNEC (SEC ID NO 350) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura I5 (péptido señal eliminado) de la LC del Ab-24 es: 1 GACATTGTGT TGACCCAGTC TCCAGCTTCT TTGGCTGTGT CTCTAGGGCA 51 GAGGGCCACC ATCGCCTGCA AGGCCAGCCA AAGTGTTGAT TATGATGGTA 0 101 CTAGTTATAT GAATTGGTAC CAACAGAAAC CAGGACAGCC ACCCAAACTC 151 CTCATCTATG CTGCATCCAA TCTAGAATCT GAGATCCCAG CCAGGTTTAG 201 TGGCACTGGG TCTGGGACAG ACTTCACCCT 5 CAACATCCAT CCTGTGGAGG 251 AGGAGGATAT CACAACCTAT TACTGTCAGC AAAGTAATGA GGATCCGTTC 301 ACGTTCGGAG GGGGGACCAA GTTGGAAATA AAACGGGCTG ATGCTGCACC 351 AACTGTATCC ATCTTCCCAC CATCCAGTGA GCAGTTAACA TCTGG AGGTG 401 CCTCAGTCGT GTGCTTCTTG AACAACTTCT ACCCCAAAGA CATCAATGTC 451 AAGTGGAAGA TTGATGGCAG TGAACGACAA AATGGCGTCC TGAACAGTTG 501 GACTGATCAG GACAGCAAAG ACAGCACCTA CAGCATGAGC AGCACCCTCA 551 CGTTGACCAA GGACGAGTAT GAACG ACATA ACAGCTATAC CTGTGAGGCC 601 ACTCACAAGA CATCAACTTC ACCCATTGTC AAGAGCTTCA ACAGGAATGA 651 GTGTTAG (SEC ID NO:354) La secuencia de aminoácidos de la LC del Ab-24 que incluye el péptido señal es: 1 METDTILLWV LLLWVPGSTG DIVLTQSPAS LAVSLGQRAT IACKASQSVD 51 YDGTSYM NWY QQKPGQPPKL LIYAASNLES El PARPSGTG SGTDFTLN I H 101 PVEEEDITTY YCQQSNEDPF TFGGGTKLEI KRADAAPTVS IFPPSSEQLT 151 SGGASVVCFL NNFYPKDINV KWKI DGSERQ NGVLNSWTDQ DSKDSTYSMS 201 STLTLTKDEY ERHNSYTCEA TKTSTSPIV KSFNRNEC (SEC ID NO:355) La secuencia de ácido nucleico de la LC del Ab-24 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGAGACAG ACACAATCCT GCTATGGGTG CTGCTGCTCT GGGTTCCAGG 51 CTCCACTGGT GACATTGTGT TGACCCAGTC TCCAGCTTCT TTGGCTGTGT 101 CTCTAGGGCA GAGGGCCACC ATCGCCTGCA AGGCCAGCCA AAGTGTTGAT 151 TATGATGGTA CTAGTTATAT GAATTGGTAC CAACAGAAAC CAGGACAGCC 201 ACCCAAACTC CTCATCTATG CTGCATCCAA TCTAGAATCT GAGATCCCAG 251 CCAGGTTTAG TGGCACTGGG TCTGGGACAG ACTTCACCCT CAACATCCAT 301 CCTGTGGAGG AGGAGGATAT CACAACCTAT TACTGTCAGC AAAGTAATG A 351 GGATCCGTTC ACGTTCGGAG GGGGGACCAA GTTGGAAATA AAACGGGCTG 401 ATGCTGCACC AACTGTATCC ATCTTCCCAC CATCCAGTGA GCAGTTAACA 451 TCTGGAGGTG CCTCAGTCGT GTGCTTCTTG AACAACTTCT ACCCCAAAGA 501 CATCAATGTC AAGTGGAAGA TTGATGGCAG TGAACGACAA AATGGCGTCC 551 TGAACAGTTG GACTGATCAG GACAGCAAAG ACAGCACCTA CAGCATGAGC 601 AGCACCCTCA CGTTGACCAA GGACGAGTAT GAACGACATA ACAGCTATAC 651 CTGTGAGGCC ACTCACAAGA CATCAACTTC ACCCATTGTC AAGAGCTTCA 701 ACAGGAATGA GTGTTAG (SEC ID NO:356) Cadena Pesada del Ab-24: La secuencia de aminoácidos de la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-24 es: 1 QVQLQQPGTE LVRPGTSVKL SCKASGYIFT TYWMNWVKQR PGQGLEWIGM 51 IHPSASEIRL DQKFKDKATL TLDKSSSTAY MHLSGPTSVD SAVYYCARSG 101 EWGSMDYWGQ GTSVTVSSA TTPPSVYPLA PGSAAQTNSM VTLGCLVKGY 151 FPEPVTVTWN SGSLSSGVHT FPAVLQSDLY TLSSSVTVPS STWPSETVTC 201 NVAHPASSTK VDKKIVPRDC GCKPCICTVP EVSSVFIFPP KPKDVLTITL 251 TPKVTCVWD ISKDDPEVQF SWFVDDVEVH TAQTQPREEQ FNSTFRSVSE 301 LPIMHQDWLN GKEFKCRVNS AAFPAPI EKT ISKTKGRPKA PQVYTIPPPK 351 EQMAKDKVSL TCMITDFFPE DITVEWQWNG QPAENYKNTQ PIMDTDGSYF 401 IYSKLNVQKS NWEAGNTFTC SVLHEGLHNH HTEKSLSHSP GK (SEC ID NO:357) La secuencia de ácido nucleico que codifica la forma madura (péptido señal eliminado) de la HC del Ab-24 es: 1 CAGGTCCAAC TACAGCAGCC TGGGACTGAG CTGGTGAGGC CTGGAACTTC 51 AGTGAAGTTG TCCTGTAAGG CTTCTGGCTA CATCTTCACC ACCTACTGGA 101 TGAACTGGGT GAAACAGAGG CCTGGACAAG GCCTTGAGTG GATTGGCATG 151 ATTCATCCTT CCGCAAGTGA AATTAGGTTG GATCAGAAAT TCAAGG ACAA 201 GGCCACATTG ACTCTTGACA AATCCTCCAG CACAGCCTAT ATGCACCTCA 251 GCGGCCCGAC ATCTGTGGAT TCTGCGGTCT ATTACTGTGC AAGATCAGGG 301 GAATGGGGGT CTATGGACTA CTGGGGTCAA GGAACCTCAG TCACCGTCTC 351 CTCAGCCAAA ACGACACCCC CATCTGTCTA TCCACTGGCC CCTGGATCTG 401 CTGCCCAAAC TAACTCCATG GTGACCCTGG GATGCCTGGT CAAGGGCTAT 451 TTCCCTGAGC CAGTGACAGT GACCTGGAAC TCTGGATCCC TGTCCAGCGG 501 TGTGCACACC TTCCCAGCTG TCCTGCAGTC TGACCTCTAC ACTCTGAGCA 551 GCTCAGTGAC TGTCCCCTCC AGCACCTGGC CCAGCGAGAC CGTCACCTGC 601 AACGTTGCCC ACCCGGCCAG CAGCACCAAG GTGGACAAGA AAATTGTGCC 651 CAGGGATTGT GGTTGTAAGC CTTGCATATG TACAGTCCCA GAAGTATCAT 701 CTGTCTTCAT CTTCCCCCCA AAGCCCAAGG ATGTGCTCAC CATTACTCTG 751 ACTCCTAAGG TCACGTGTGT TGTGGTAGAC ATCAGCAAGG ATGATCCCGA 801 GGTCCAGTTC AGCTGGTTTG TAGATGATGT GGAGGTGCAC ACAGCTCAGA 851 CGCAACCCCG GGAGGAGCAG TTCAACAGCA CTTTCCGCTC AGTCAGTGAA 901 CTTCCCATCA TGCACCAGGA CTGGCTCAAT GGCAAGG AGT TCAAATGCAG 951 GGTCAACAGT GCAGCTTTCC CTGCCCCCAT CGAGAAAACC ATCTCCAAAA 1001 CCAAAGGCAG ACCGAAGGCT CCACAGGTGT ACACCATTCC ACCTCCCAAG 1051 GAGCAGATGG CCAAGGATAA AGTCAGTCTG ACCTGCATGA TAACAGACTT 1101 CTTCCCTGAA GACATTACTG TGGAGTGGCA GTGGAATGGG CAGCCAGCGG 1151 AGAACTACAA GAACACTCAG CCCATCATGG ACACAGATGG CTCTTACTTC 1201 ATCTACAGCA AGCTCAATGT GCAGAAGAGC AACTGGGAGG CAGGAAATAC 1251 TTTCACCTGC TCTGTGTTAC ATGAGGGCCT GCACAACCAC CATACTGAGA 1301 AGAGCCTCTC CCACTCTCCT GGTAAATGA (SEC ID NO:361) La secuencia de aminoácidos de la HC del Ab-24 que incluye el péptido señal es: 1 MGWSSIILFL VATATGVHSQ VQLQQPGTEL VRPGTSVKLS CKASGYIFTT 51 YWMNWVKQRP GQGLEWIGMI HPSASEIRLD QKFKDKATLT LDKSSSTAYM 101 HLSGPTSVDS AVYYCARSGE WGSMDYWGQG TSVTVSSAKT TPPSVYPLAP 151 GSAAQTNSMV TLGCLVKGYF PEPVTVTWNS GSLSSGVHTF PAVLQSDLYT 201 LSSSVTVPSS TWPSETVTCN VAHPASSTKV DKKIVPRDCG CKPCICTVPE 251 VSSVFIFPPK PKDVLTITLT PKVTCVVVDI SKDDPEVQFS WFVDDVEVHT 301 AQTQPREEQF NSTFRSVSEL PIMHQDWLNG KEFKCRVNSA AFPAPIEKTI 351 SKTKGRPKAP QVYTIPPPKE QMAKDKVSLT CMITDFFPED ITVEWQWNGQ 401 PAENYKNTQP I M DTDGSYFI YSKLNVQKSN WEAG NTFTCS VLHEGLHNHH 451 TEKSLSHSPG K (SEC ID NO:362) La secuencia de ácido nucleico de la HC del Ab-24 que incluye la secuencia de codificación del péptido señal es: 1 ATGGGATGGA GCTCTATCAT CCTCTTCTTG GTAGCAACAG CTACAGGTGT 51 CCACTCCCAG GTCCAACTAC AGCAGCCTGG GACTGAGCTG GTGAGGCCTG 101 GAACTTCAGT GAAGTTGTCC TGTAAGGCTT CTGGCTACAT CTTCACCACC 151 TACTGGATGA ACTGGGTGAA ACAGAGGCCT GGACAAGGCC TTGAGTGGAT 201 TGGCATGATT CATCCTTCCG CAAGTGAAAT TAGGTTGGAT CAGAAATTCA 251 AGGACAAGGC CACATTGACT CTTGACAAAT CCTCCAGCAC AGCCTATATG 301 CACCTCAGCG GCCCGACATC TGTGGATTCT GCGGTCTATT ACTGTGCAAG 351 ATCAGGGGAA TGGGGGTCTA TGGACTACTG GGGTCAAGGA ACCTCAGTCA 401 CCGTCTCCTC AGCCAAAACG CTGTCTATCC ACTGGCCCCT 451 GGATCTGCTG CCCAAACTAA ACCCTGGGAT GCCTGGTCAA 501 GGGCTATTTC CCTGAGCCAG CTGGAACTCT GGATCCCTGT 551 CCAGCGGTGT GCACACCTTC TGCAGTCTGA CCTCTACACT 601 CTGAGCAGCT CAGTGACTGT ACCTGGCCCA GCGAGACCGT 651 CACCTGCAAC GTTGCCCACC CACCAAGGTG GACAAGAAAA 701 TTGTGCCCAG GGATTGTGGT GCATATGTAC AGTCCCAGAA 751 GTATCATCTG TCTTCATCTT CCCAAGGATG TGCTCACCAT 801 TACTCTGACT CCTAAGGTCA GGTAGACATC AGCAAGGATG 851 ATCCCGAGGT CCAGTTCAGC ATGATGTGGA GGTGCACACA 901 GCTCAGACGC AACCCCGGGA AACAGCACTT TCCGCTCAGT 951 CAGTGAACTT CCCATCATGC GCTCAATGGC AAGGAGTTCA 1001 AATGCAGGGT CAACAGTGCA GCTTTCCCTG CCCCCATCGA GAAAACCATC 1051 TCCAAAACCA AAGGCAGACC GAAGGCTCCA CAGGTGTACA CCATTCCACC 1101 TCCCAAGGAG CAGATGGCCA AGGATAAAGT CAGTCTGACC TGCATGATAA 1151 CAGACTTCTT CCCTGAAGAC ATTACTGTGG AGTGGCAGTG GAATGGGCAG 1201 CCAGCGGAGA ACTACAAGAA CACTCAGCCC ATCATGG ACA CAGATGGCTC 1251 TTACTTCATC TACAGCAAGC TCAATGTGCA GAAGAGCAAC TGGGAGGCAG 1301 GAAATACTTT CACCTGCTCT GTGTTACATG AGGGCCTGCA CAACCACCAT 1351 ACTGAGAAGA GCCTCTCCCA CTCTCCTGGT AAATGA (SEC ID NO:363) Las secuencias de CDR en la región variable de la cadena ligera del Ab-24 son como sigue: CDR-L1: KASQSVDYDGTSYMN (SEC ID NO:351) CDR-L2: AASNLES (SEC ID NO:352) CDR-L3: QQSNEDPFT (SEC ID NO:353) Las secuencias de CDR en la región variable de la cadena pesada del Ab-24 son como sigue: CDR-H1: TYWMN (SEC ID NO:358) CDR-H2: MIHPSASEIRLDQKFKD (SEC ID NO:359) CDR-H3: SGEWGSMDY (SEC ID NO.360) La tabla 1 a continuación proporciona las SEC ID NOs y secuencias de aminoácidos de CDR's de Ab-A, Ab-B, Ab-C5 Ab-D, Ab-1, Ab-2, Ab-3, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-11, Ab-12, Ab-13, Ab-14, Ab-15, Ab-16, Ab-17, Ab-18, Ab-19, Ab-20, Ab-215 Ab-22, Ab- 23, y Ab-24. L1, L2 y L3 se refieren a CDRs de cadena ligera 1, 2, y 3, y H1, H2, y H3 se refieren a CDR's de cadena pesada 1, 2 y 3 de acuerdo al sistema de numeración Kabat (Kabat y colaboradores, 1987 en Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Departament of Health and Human Services, NIH, E.E.U.U.).

Tabla 1 SEC ID NO DESCRIPCION SECUENCIA DE AMINOACIDOS 54 Ab-A y Ab-1 CDR-L1 QSSQSVYDNNWLA 55 Ab-A Ab-1 CDR-L2 DASDLAS 56 Ab-A y Ab-1 CDR-L3 QGAYNDVIYA 51 Ab-A y Ab-1 CDR-Hl SYWMN 52 Ab-A y Ab-1 CDR-H2 TIDSGGRTDYASWAKG 53 Ab-A y Ab-1 CDR-H3 NWNL 60 Ab-B CDR-L1 SASSSVSFVD 61 Ab-B CDR-L2 RTSNLGF 62 Ab-B CDR-L3 QQRSTYPPT 57 Ab-B CDR-H1 TSGMGVG 58 Ab-B CDR-H2 H1WWDDV RYNPVLKS 59 Ab-B CDR-H3 EDFDYDEEYYAMDY 48 Ab-C CDR-L1 KASQSVDYDGDSYMN 49 Ab-C CDR-L2 AASNLES 50 Ab-C CDR-L3 QQSNEDPWT 45 Ab-C CDR-H1 DCYMN 46 Ab-C CDR-H2 DINPFNGGTTYNQKFKG 47 Ab-C CDR-H3 SHYYFDGRVPWDAMDY 42 Ab-D CDR-L1 QASQGTSINLN 43 Ab-D CDR-L2 GSSNLED 44 Ab-D CDR-L3 LQHSYLPYT 39 Ab-D CDR-H1 DHYMS 40 Ab-D CDR-H2 DINPYSGETTYNQKFKG 41 Ab-D CDR-H3 DDYDASPFAY 275 Ab-2 CDR-Lt RASSSVYYYMH 276 Ab-2 CDR-L2 ATSNLAS 277 Ab-2 CDR-L3 QQWSSDPLT 287 Ab-2 CDR-H1 DYF1H 288 Ab-2 CDR-H2 RLDPEDGESDYAPKFQD 289 Ab-2 CDR-H3 EDYDGTYTFFPY 278 Ab-3 y Ab-15 CDR-Ll SVSSTISSNHLH 279 Ab-3 Ab-15 CDR-L2 GTSNLAS 280 Ab-3 y Ab-15 CDR-L3 QQWSSYPLT 290 Ab-3 y Ab-15 CDR-Hl DFYLH 291 Ab-3 y Ab-15 CDR-H2 RIDPENGDTLYDPKFQD 292 Ab-3 y Ab-15 CDR-H3 EADYFHDGTSYWYFDV 78 Ab-4 y Ab-5 CDR-Ll RASQDISNYLN 79 Ab-4 y Ab-5 CDR-L2 YTSRLLS 80 Ab-4 y Ab-5 CDR-L3 QQGDTLPYT 245 Ab-4 y Ab-5 CDR-H1 DYNMH 246 Ab-4 y Ab-5 CDR-H2 EINPNSGGAGYNQKFKG 247 Ab-4 y Ab-5 CDR-H3 LGYDDIYDDWYFDV 81 Ab-6 CDR-L1 RASQDISNYLN 99 Ab-6 CDR-L2 YTSRLHS 100 Ab-6 CDR-L3 QQGDTLPYT 248 Ab-6 CDR-H1 DYNMH Tabla 1 SEC ID NO DESCRIPCION SECUENCIA DE AMINOACIDOS 249 Ab-6 CDR-H2 EINPNSGGSGYNQKFKG 250 Ab-6 CDR-H3 LVYDGSYEDWYFDY 101 Ab-7 CDR-Ll RASQVIT YLY 102 Ab-7 CDR-L2 YTSRLHS 103 Ab-7 CDR-L3 QQGDTLPYT 251 Ab-7 CDR-H1 DYNMH 252 Ab-7 CDR-H2 EINPNSGGAGYNQQFKG 253 Ab-7 CDR-H3 LGYVGNYEDWYFDV 104 Ab-8 CDR-L1 RASQDISNYLN 105 Ab-8 CDR-L2 YTSRLLS 106 Ab-8 CDR-L3 QQGDTLPYT 254 Ab-8 CDR-H1 DYNMH 255 Ab-8 CDR-H2 EINPNSGGAGYNQKFKG 256 Ab-8 CDR-H3 LGYDDIYDDWYFDV 107 Ab-9 CDR-L1 RASQDISNYLN 108 Ab-9 CDR-L2 YTSRLFS 109 Ab-9 CDR-L3 QQGDTLPYT 257 Ab-9 CDR-H1 DYNMH 258 Ab-9 CDR-H2 EINPNSGGAGYNQKFKG 259 Ab-9 CDR-H3 LGYDDIYDDWYFDV 110 Ab-10 CDR-Ll RASQDISNYLN 111 Ab-10 CDR-L2 YTSRLLS 112 Ab-10 CDR-L3 QQGDTLPYT 260 Ab-10 CDR-Hl DYNMH 261 Ab-10 CDR-H2 EINPNSGGAGYNQKFKG 262 Ab-10 CDR-H3 LGYDDIYDDWYFDV 281 Ab-l l Ab-16 CDR-Ll RASSSISYIH 282 Ab-l l Ab-16 CDR-L2 ATSNLAS 283 Ab-l l Ab-16 CDR-L3 QQWSSDPLT 293 Ab-l l Ab-16 CDR-Hl DYYIH 294 Ab-U Ab-16 CDR-H2 R VDPDN GETEF APKFPG 295 Ab-l l y Ab-16 CDR-H3 EDYDGTYTWFPY 113 Ab-12 CDR-Ll RASQDISNYLN 114 Ab-12 CDR-L2 YTSTLQS 115 Ab-12 CDR-L3 QQGDTLPYT 263 Ab-12 CDR-H1 DYNMH 264 Ab-12 CDR-H2 EINPNSGGSGYNQKFKG 265 Ab-12 CDR-H3 LGYYGNYEDWYFDV 284 Ab-13 y Ab-14 CDR-Ll RASSSVTSSYLN 285 Ab-13 y Ab-14 CDR-L2 STSNLAS 286 Ab-13 y Ab-14 CDR-L3 QQYDFFPST 296 Ab-13 y Ab-14 CDR-H1 DYYMN 297 Ab-13 y Ab-14 CDR-H2 DINPYNDDTTYNHKFKG 298 Ab-13 y Ab-14 CDR-H3 ETAVITT AMD 116 Ab-17 y Ab-18 CDR-Ll SVSSSISSSNLH 237 Ab-17 Ab-18 CDR-L2 GTSNLAS 238 Ab-17 y Ab-18 CDR-L3 QQWTTTYT Tabla 1 SEC ID NO DESCRIPCIO SECUENCIA DE AMINOACIDOS 266 Ab-17 Ab-18CDR-Hl DYYIH 267 Ab-17 Ab-18CDR-H2 RIDPDNGESTYVPKFQG 268 Ab-17 y Ab-18CDR-H3 EGLDYGDYYAVDY 239 Ab-19,Ab-20 Ab-23 CDR-L1 RASQDISSYLN 240 Ab-19, Ab-20 y Ab-23 CDR-L2 STSRLNS 241 Ab-19,Ab-20 r Ab-23 CDR-L3 QQDIKHPT 269 Ab-19, Ab-20 y Ab-23 CDR-H1 DYIMH 270 Ab-19, Ab-20 y Ab-23 CDR-H2 YINPYNDDTEYNEKFKG 271 Ab-19, Ab-20 y Ab-23 CDR-H3 SIYYYDAPFAY 242 Ab-21 y Ab-22CDR-Ll KASQDVFTAVA 243 Ab-21 y Ab-22CDR-L2 WASTRHT 244 Ab-21 y Ab-22CDR-L3 QQYSSYPLT 272 Ab-21 y Ab-22CDR-Hl DYYMH 273 Ab-21 y Ab-22CDR-H2 RIDPENGDIIYDPKFQG 274 Ab-21 y Ab-22CDR-H3 DAGDPAWFTY 351 Ab-24 CDR-L1 KASQSVDYDGTSYMN 352 Ab-24 CDR-L2 AASNLES 353 Ab-24 CDR-L3 QQSNEDPFT 358 Ab-24 CDR-H1 TYWMN 359 Ab-24 CDR-H2 MIHPSASEIRLDQ F D 360 Ab-24 CDR-H3 SGEWGSMDY Un oligopéptido o polipéptido está dentro del alcance de la invención si tiene una secuencia de aminoácidos que sea por lo menos 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ó 99% idéntica a por lo menos una de CDR's de la tabla 1 anterior; y/o a una CDR de un agente de unión de esclerostina que bloquea transversalmente la unión de por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D, Ab-1, Ab-2, Ab-3, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-11, Ab- 2, Ab-13, Ab-14, Ab-15, Ab-16, Ab-17, Ab-18, Ab-19, Ab-20, Ab-21, Ab-22, Ab-23, y Ab-24 a la esclerostina, y/o se bloquea transversalmente a partir de la unión a la esclerostina mediante por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D, Ab-1, Ab-2, Ab-3, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-11, y/o a una CDR de un agente de unión de esclerostina en donde el agente de unión puede bloquear el efecto inhibidor de la esclerostina en un análisis de mineralización basado en células (es decir, un agente de unión de neutralización de esclerostina); y/o a una CDR de un agente de unión de esclerostina que se une a un epítope del Bucle 2; y/o a una CDR de un agente de unión de esclerostina se une a un epítope T20.6; y/o a una CDR de un agente de unión de esclerostina que se une a un epítope "derivado T20.6 (nudo de cistina + 4 brazos)". Los polipéptidos de agente de unión de esclerostina y los anticuerpos están dentro del alcance de la invención si tienen las secuencias de aminoácidos que son por lo menos 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ó 99% idénticas a una región variable de por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D, Ab-1, Ab-2, Ab-3, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-11, Ab-12, Ab-13, Ab-14, Ab-15, Ab-16, Ab-17, Ab-18, Ab-19, Ab-20, Ab-21, Ab-22, Ab-23, y Ab-24, y bloquean transversalmente la unión de por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D, Ab-1, Ab-2, Ab-3, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-11, Ab-12, Ab-13, Ab-14, Ab-15, Ab-16, Ab-17, Ab-18, Ab-19, Ab-20, Ab-21, Ab-22, Ab-23, y Ab-24; y/o pueden bloquear el efecto inhibidor de la esclerostina en un análisis de mineralización basado en células (es decir, un agente de unión de neutralización de esclerostina); y/o se unen a un epítope del Bucle 2; y/o se unen a un epítope T20.6; y/o se unen a un epítope "derivado T20.6 (nudo de cistina + 4 brazos)". Los agentes de unión de esclerostina de codificación de polinucleótidos están dentro del alcance de la invención si tienen las secuencias de polinucleótidos que son por lo menos 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ó 99% idénticas a un polinucleótido que codifica una región variable de por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D, Ab-1, Ab-2, Ab-3, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-11, Ab-12, Ab-13, Ab-14, Ab-15, Ab-16, Ab-17, Ab-18, Ab-19, Ab-20, Ab-21, Ab-22, Ab-23, y Ab-24, en donde los agentes de unión de esclerostina bloquean transversalmente la unión de por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D, Ab-1, Ab-2, Ab-3, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-11, Ab-12, Ab-13, Ab-14, Ab-15, Ab-16, Ab-17, Ab-18, Ab-19, Ab-20, Ab-21, Ab-22, Ab-23, y Ab-24 a la esclerostina, y/o se bloquean transversalmente a partir de la unión a la esclerostina mediante por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D, Ab-1, Ab-2, Ab-3, Ab-4, Ab-5, Ab-6, Ab-7, Ab-8, Ab-9, Ab-10, Ab-11, Ab-12, Ab-13, Ab-14, Ab-15, Ab-16, Ab-17, Ab-18, Ab-19, Ab-20, Ab-21, Ab-22, Ab-23, y Ab-24; y/o pueden bloquear el efecto inhibidor de la esclerostina en un análisis de mineralización basado en células (es decir, un agente de unión de neutralización de esclerostina); y/o se unen a un epítope del Bucle 2; y/o se unen a un epítope T20.6; y/o se unen a un epítope "derivado T20.6 (nudo de cistina + 4 brazos)".

Los anticuerpos de acuerdo a la invención pueden tener una afinidad de unión a el esclerostina humana de menos que o igual a 1 x 10"7M, menos que o igual a 1 x 10"8M, menos que o igual a 1 x 10"9M, menos que o igual a 1 x 10" 0M, menos que o igual a 1 x 10"1 M, o menos que o igual a 1 x 10*1 M. La afinidad de un agente de unión tal como un anticuerpo o asociado de unión, así como el grado al cual un agente de unión (tal como un anticuerpo) inhibe la unión, puede ser determinada por un experto en la técnica usando las técnicas convencionales, por ejemplo las descritas por Scatchard y colaboradores (Ann. N.Y. Acad. Sci. 51:660-672 (1949)) o por resonancia de plasmón superficial (SPR; BIAcore, Biosensor, Piscataway, NJ). Para la resonancia de plasmón superficial, las moléculas objeto se inmovilizan en una fase sólida y se exponen a los ligandos en una fase móvil utilizados a lo largo de una célula de flujo. Si ocurre la unión del ligando al objeto inmovilizado, el índice de refracción local cambia, conduciendo a un cambio en el ángulo de SPR, que se puede monitorear en tiempo real detectando los cambios de la intensidad de la luz reflejada. Los índices de cambio de señal de SPR se pueden analizar para proporcionar las constantes de índice aparentes para las fases de asociación y disociación de la reacción de unión. El índice de estos valores da la constante de equilibrio aparente (afinidad) (ver, por ejemplo, Wolff y colaboradores, Cáncer Res. 53:2560-65 (1993)). Un anticuerpo de acuerdo a la presente invención puede pertenecer a cualquier clase de inmunoglobina, por ejemplo IgG, IgE, IgM, IgD, o IgA. Se puede obtener de o derivarse de un animal, por ejemplo, aves (por ejemplo, pollo) y mamíferos, que incluye pero no se limitan a, ratón, rata, hámster, conejo, u otro roedor, vaca, caballo, ovejas, cabra, camello, humano, u otro primate. El anticuerpo puede ser un anticuerpo de asimilación. La producción de los anticuerpos se describe generalmente en la Publicación de Patente Norteamericana No. 2004/0146888. Análisis de Caracterización En los métodos descritos anteriormente para generar los anticuerpos de acuerdo a la invención, incluyendo la manipulación de Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D específicos, y de CDRs del anticuerpo 1-24 (Ab-1 a Ab-24) en nuevas tramas y/o regiones constantes, los análisis apropiados están disponibles para seleccionar los anticuerpos deseados o agentes de unión (es decir análisis para determinar la afinidad de unión a la esclerostina; ensayo de bloqueo transversal; "análisis de unión de competencia de epítope de esclerostina humana" basado en Biacore; análisis basado en células MC3T3-E1; análisis in vivo). Análisis de Unión de Epítope La esclerostina humana de la forma madura es una glicoproteína de 190 aminoácidos con una estructura de nudo de cistina (figuras 8 y 9). Además de la estructura de nudo de cistina, la proteína se caracteriza por tener bucles designados como Bucle 1, Bucle 2 y Bucle 3. La esclerostina humana fue sometida a la digestión proteolítica para producir los fragmentos. Brevemente, usando diferentes proteasas, incluyendo la tripsina, aspN, y lysC, fueron generados los fragmentos con varios sitios y tamaños de división. Fueron determinadas las secuencias y la masa de varios péptidos de esclerostina humana. La protección del anticuerpo fue evaluada para determinar el efecto sobre la accesibilidad de la proteólisis, incluyendo el enmascaramiento del sitio acortado y el cambio del péptido. Finalmente, fue realizado un "análisis de competencia de epítope de péptido de esclerostina humana" basado en BIAcore. La exposición de la esclerostina a la división con tripsina dio lugar a un patrón de fragmentos de péptido según lo explicado brevemente en la figura 13. Los fragmentos son referidos como T19.2, T20, T20.6, y T21-22. Según lo mostrado esquemáticamente en la figura 19B, el epítope T20.6 es un complejo de cuatro secuencias de péptido separadas que se unen mediante tres enlaces disulfuro de la región de nudo de cistina. Dos de los péptidos están unidos por dos enlaces disulfuro. Los otros dos péptidos son ligados por un enlace disulfuro que, esquemáticamente, divide los primeros dos polipéptidos. El epítope T20.6 que fue generado por la digestión de tripsina conserva la estructura del nudo de cistina del polipéptido nativo y es reconocido por los anticuerpos Ab-C y Ab-D. Un derivado del epítope T20.6 consiste de la región de nudo de cistina y los aminoácidos 58-64, 73-81, 112-117 y 138-141 en la posición de la secuencia con referencia a la SEC ID NO:1. Este epítope derivado se muestra en la figura 21. Un epítope que comprende la región de nudo de cistina puede tener uno o más aminoácidos que están presentes en el epítope T20.6 (figura 19B) pero pueden no estar presentes en el epítope derivado T20.6 (figura 21). Otra región que contiene el epítope fue identificada en la región del Bucle 2 de la esclerostina humana (figura 19A) y es reconocido por los anticuerpos Ab-A y Ab-B. Un epítope del Bucle 2 comprende los aminoácidos 86-111 de la SEC ID NO:1 (C4GPARLLPNAIGRGKWWRPSGPDFRC5, SEC ID NO:6). Ampliamente, con referencia a la esclerostina integral de la SEC ID NO:1, la estructura que contiene el Bucle 2 es definida en un extremo por un enlace disulfuro entre la cisteína en la posición 86 (C4) y la cisteína en la posición 144 (C8), y en el otro extremo por un enlace disulfuro entre la cisteína en la posición 111 (C5) y la cisteína en la posición 57 (C1). Los péptidos generados por la división de aspN de la esclerostina humana se muestran en la figura 12. En la figura, estos péptidos son designados como AspN14.6, AspN18.6, y AspN22.7-23,5, y también son referidos en la presente como N14.6, N18.6, y N22.7-23.5, respectivamente. Un grupo de anticuerpos exhibe un patrón específico de unión a ciertos epítopes como se evidencia por "análisis de competencia de epítope de péptido de esclerostina humana" basado en BIAcore." Brevemente, el anticuerpo se pre-incuba con el epítope que se probará, a concentraciones que saturarán los sitios de unión epítope en el anticuerpo. El anticuerpo entonces se expone a la esclerostina unida a una superficie del chip. Después de la incubación apropiada y de los procedimientos de lavado, se establece un patrón de unión competitivo. Según lo mostrado en la figura 18, el anticuerpo ejemplar Ab-D unido a las moléculas de esclerostina se une a la superficie del chipo. La pre-incubación del anticuerpo Ab-D con esclerostina disminuyó la unión del anticuerpo a la esclerostina en el chip a casi cero. La pre-incubación con un epítope que consistía del péptido T19.2 mostró que T19.2 no compitió con la esclerostina por la unión del anticuerpo. Sin embargo, la pre-incubación con cualquiera de los epítopes designados T20, T20.6, T21-22, o N22.7-23.5, elimino una proporción grande de la unión del anticuerpo a la esclerostina en el chip. En contraste, la pre-incubación del anticuerpo con cualquiera de los epítopes designados como T19.2, N14.6 o N18.6 no eliminó la capacidad del anticuerpo de unirse a la esclerostina. Un segundo anticuerpo ejemplar con este perfil de unión (figura 17) es Ab-C. El anticuerpo Ab-D por lo tanto es ejemplar y representativo de un grupo de los anticuerpos que se unen a los epítopes T20, T20.6, T21-22, y N22.7-23.5, y tiene una unión detectable mínima a los epítopes T19.2, N14.6 y N18.6, según lo medido por la capacidad de bloquear la unión del anticuerpo a la esclerostina . Los anticuerpos que tienen este patrón de unión característico pueden o no compartir la secuencia de aminoácidos en una o más regiones de la molécula del anticuerpo. La similitud del anticuerpo es determinada funcionalmente tal como por la capacidad de unirse a la esclerostina después de la pre-incubación con cada uno de los epítopes descritos anteriormente. Los anticuerpos que exhiben un patrón de unión similar o idéntico al del anticuerpo Ab-D, se incluyen en la invención. Por "similar a" se entiende, por ejemplo, que el anticuerpo exhibirá la unión a cada uno de los polipéptidos T20, T20.6, T21-22 y N22.7-23.5, por lo cual está unión competirá específicamente por al menos el 50% de la unión del anticuerpo a la esclerostina que ocurriría de otra manera en ausencia de la pre-incubación con esclerostina o un péptido de esclerostina. El anticuerpo también exhibirá poco o nada de unión detectable a los polipéptidos T19.2, N14.6 y N18.6, dando por resultado una reducción del 30% o menos de la unión que ocurrirá en ausencia de la pre-incubación con esclerostina o péptido de esclerostina. Por ejemplo, sin unirse mediante un mecanismo particular, el patrón de unión del anticuerpo de la figura 18 sugiere que el espacio del epítope al cual el anticuerpo Ab-D y otros anticuerpos que tienen el patrón de unión del epítope de Ab-D se unen, consiste de un polipéptido que comprende la región del nudo de cistina de esclerostina. Así, como se describe en la presente y con referencia a la figura 19B, un epítope T20.6 ejemplar comprende cuatro cadenas de péptido unidas vía tres enlaces disulfuro separados. La cadena de péptido SAKPVTELVC3SGQC4GPAR (SEC ID NO:3) se une a la cadena de péptido LVASC7KC8KRLTR (SEC ID NO:5) por los enlaces disulfuro de C3 a C7, y de C4 a C8. La cadena de péptido DVSEYSCIRELHFTR (SEC ID NO:2) se une a la cadena de péptido WWRPSGPDFRC5I PDRYR (SEC ID NO:4) por un enlace disulfuro de C1 a C5. Los polipéptidos de la SEC ID NO:3 y 5 permanecen asociados a los polipéptidos de la SEC ID NO:2 y 4 a través de una constructo estérico por el cual el enlace C1-C5 craza el plano de los enlaces C4-C8 y C3-C7 y se localizan entre ellos, según lo ilustrado en la figura 19B. Como se describe en la presente y con referencia a la figura 21, un epítope derivado ejemplar de T20.6 comprende cuatro cadenas de péptido unidas vía tres enlaces disulfuro separados. La cadena de péptido SAKPVTELVC3SGQC4 (SEC ID NO:70) se une a la cadena de péptido LVASC7KC8 (SEC ID NO:71) mediante los enlaces disulfuro C3 a C7, y C4 a C8. La cadena de péptido CIRELHFTR (SEC ID NO:72) se une a la cadena de péptido C5IPDRYR (SEC ID NO:73) por un enlace disulfuro C1 a C5. Los polipéptidos de la SEC ID NO:70 y 71 permanecen asociados a los polipéptidos de la SEC ID NO:72 y 73 a través de un constructo estérico por el que el enlace C1-C5 cruza el plano de los enlaces C4-C8 y C3-C7 y se ubica entre ellos, como se ilustra en la figura 21. El anticuerpo Ab-A es ejemplar y representativo de un segundo grupo de anticuerpos que tienen un patrón de unión característico a los péptidos de esclerostina humana, que es distinto del obtenido para los anticuerpos Ab-C y Ab-D. Ab-A y el grupo de anticuerpos representa la unión al epítope N22.7-23.5 y tienen una unión detectable mínima a los epítopes T19.2, T20, T20.6, T21-22, N14.6 o N18.6, según lo medido por la capacidad de bloquear la unión del anticuerpo a la esclerostina (figura 15). Un segundo anticuerpo ejemplar con este perfil de unión (figura 16) es Ab-B. Los anticuerpos que tienen este patrón de unión característico pueden o no compartir la secuencia de aminoácidos en una o más regiones de la molécula del anticuerpo. La similitud del anticuerpo es determinada funcionalmente tal como por la capacidad de unirse a la esclerostina después de la pre-incubación con cada uno de los epítopes descritos anteriormente. Los anticuerpos que exhiben un patrón de unión similar o idéntico al del anticuerpo Ab-A, se incluyen en la invención. Por "similar a" se entiende, por ejemplo, que el anticuerpo exhibirá la unión al polipéptido N22.7-23.5 por lo cual está unión compite específicamente por al menos 50% de la unión del anticuerpo a la esclerostina que ocurrirá de otra manera en ausencia de la pre-incubación con esclerostina o péptido de esclerostina. El anticuerpo también exhibirá poco o nada de unión detectable a los polipéptidos T19.2, T20, T20.6, T21-22, N14.6 y N18.6, dando por resultado una reducción del 30% o menos de la unión que ocurrirá en ausencia de la pre-incubación con esclerostina o péptido de esclerostina. Por ejemplo, sin unirse mediante un mecanismo particular, el patrón de unión del anticuerpo de la figura 15 sugiere que el espacio del epítope al cual el anticuerpo Ab-A y otros anticuerpos que tienen el patrón de unión del epítope de Ab-A se unen, consiste de un polipéptido que comprende la región del Bucle 2 de esclerostina. Así, como se describe en la presente y con referencia a la figura 19A, la región del Bucle 2 se puede describir como un péptido lineal, pero adquiere una estructura terciaria cuando está presente en la esclerostina nativa o una porción que contiene el nudo de cistina de esclerostina en donde se mantenga la estructura nativa del enlace disulfuro. La estructura lineal o terciaria del epítope del Bucle 2 puede afectar la unión del anticuerpo a la misma, según lo discutido en los ejemplos. Una región del Bucle 2 puede comprender la siguiente secuencia de aminoácidos: C4GPARLLPNAIGRGKWW PSGPDF C5 (SEC ID NO:6). "C4" se refiere a un residuo de cisteína localizado en la posición 86 con referencia a la SEC ID NO:1. "C5" se refiere a un residuo de cisteína localizado en la posición 111 con referencia a la SEC ID NO:1. En la proteína esclerostina nativa, C4 es ligado a una cisteína en la posición 144 (C8) por un enlace disulfuro, y C5 es ligado a una cisteína en la posición 57 (C1) por un enlace disulfuro. Los epítopes derivados de la región del Bucle 2 incluyen CGPARLLPNAIGRGKWWRPS (SEC ID NO:63); GPARLLPNAIGRGKWWRPSG (SEC ID NO:64); PARLLPNAIGRGKWWRPSGP (SEC ID NO:65); ARLLPNAIGRGKWWRPSGPD (SEC ID NO:66); RLLPNAIGRGKWWRPSGPDF (SEC ID NO:67); LLPNAIGRGKWWRPSGPDFR (SEC ID NO:68); y LPNAIGRGKWWRPSGPDFRC (SEC ID NO:69). Ensayos de Bloqueo Transversal Los términos "bloquear transversalmente", "bloqueado transversalmente" y "bloqueo transversal" se utilizan intercambiablemente en la presente para dar a entender la capacidad del anticuerpo u otro agente de unión de interferir con la unión de otros anticuerpos o agentes de unión a la esclerostina . El grado al cual un anticuerpo u otro agente de unión puede interferir con la unión de otro a la esclerostina, y por lo tanto si se puede bloquear transversalmente de acuerdo a la invención, se puede determinar usando el análisis de unión de competencia. Un análisis cuantitativo particularmente conveniente utiliza una máquina Biacore que puede medir el grado de interacciones usando la tecnología de resonancia de plasmón superficial. Otro ensayo de bloqueo transversal cuantitativo conveniente utiliza un método basado en ELISA para medir la competencia entre los anticuerpos u otros agentes de unión en términos de su unión a la esclerostina .

Ensayo de Bloqueo Transversal Blacore El siguiente describe generalmente un ensayo Biacore conveniente para determinarse si un anticuerpo u otro agente de unión bloquea transversalmente o es capaz de bloquearse transversal de acuerdo a la invención. Para la conveniencia se hace referencia a dos anticuerpos, pero será apreciado que el análisis se pueda utilizar con cualquiera de los agentes de unión de esclerostina descritos en la presente. La máquina Biacore (por ejemplo Biacore 3000) se opera en línea con las recomendaciones del fabricante. Así en un ensayo de bloqueo transversal, la esclerostina se acopla a un chip CM5 Biacore usando la química estándar de acoplamiento de amina para generar una superficie recubierta con esclerostina. Comúnmente 200-800 unidades de resonancia de esclerostina se acoplaran al chip (una cantidad que da fácilmente los niveles medibles de unión pero que es saturable fácilmente por las concentraciones del reactivo de prueba que es utilizado).

Los dos anticuerpos (llamados A* y B*) a los que se les determinará su capacidad de bloquearse entre sí, se mezclan uniformemente a una relación molar de los sitios de unión en un amortiguador conveniente para crear la mezcla de prueba. Al calcular las concentraciones en una base del sitio de unión, el peso molecular de un anticuerpo se asume que es el peso molecular total del anticuerpo dividido por el número de los sitios de unión de esclerostina en el anticuerpo.

La concentración de cada anticuerpo en ia mezcla de prueba debe ser lo suficientemente alta para saturar fácilmente los sitios de unión para el anticuerpo en las moléculas de esclerostina capturadas en el chip Biacore. Los anticuerpos en la mezcla están a la misma concentración molar (sobre una base de unión) y tal concentración estaría comúnmente entre 1.00 y 1.5 micromolar (sobre una base del sitio de unión). También se preparan las soluciones separadas que contienen solo el anticuerpo A* y solo el anticuerpo B*. El anticuerpo A* y el anticuerpo B* en estas soluciones deben estar en el mismo amortiguador y a la misma concentración que en la mezcla de prueba. La mezcla de la prueba se hace pasar sobre el chip Biacore recubierto con esclerostina y la cantidad total de unión registrada. El chip entonces se trata para eliminar los anticuerpos unidos sin dañar la esclerostina unida al chip. Comúnmente Esto se hace tratando el chip con 30 mM HCI durante 60 segundos. La solución de solo el anticuerpo A* entonces se hace pasar sobre la superficie recubierta con esclerostina y se registra la cantidad de unión. El chip se trata nuevamente para eliminar todo el anticuerpo unido sin dañar esclerostina unida al chip. La solución de solo el anticuerpo B* entonces se hace pasar sobre la superficie recubierta con esclerostina y se registra la cantidad de unión.

La unión teórica máxima de la mezcla del anticuerpo A* y del anticuerpo B* después se calcula, y es la suma de la unión de cada anticuerpo cuando pasa sobre solamente la superficie de esclerostina. Si la unión actual registrada de la mezcla es menor que este máximo teórico entonces los dos anticuerpos se bloquean transversalmente. Así, en general, un anticuerpo de bloqueo transversal u otro agente de unión de acuerdo a la invención, es uno que se unirá a la esclerostina en el ensayo de bloqueo transversal Biacore anterior tal que durante el análisis y en la presencia del segundo anticuerpo u otro agente de unión de la invención, la unión registrada está entre 80% y 0.1% (por ejemplo 80% a 4%) de la unión teórica máxima, específicamente entre 75% y 0.1% (por ejemplo 75% a 4%) de la unión teórica máxima, y más específicamente entre 70% y 0.1% (por ejemplo 70% a 4%) de la unión teórica máxima (según lo definido recientemente) de los dos anticuerpos o agentes de unión en combinación. El ensayo Biacore descrito anteriormente es un análisis primario usado para determinar si los anticuerpos u otros agentes de unión se bloquean transversalmente de acuerdo a la invención. En ocasiones poco comunes, los anticuerpos u otros agentes de unión particulares pueden no unirse a la esclerostina acoplada vía la química de amina a un chip CM5 Biacore (ésta ocurre comúnmente cuando el sitio de unión relevante en la esclerostina es enmascarado o destruido por el acoplamiento al chip). En tales casos el bloqueo transversal se puede determinar usando una versión etiquetada de esclerostina, por ejemplo esclerostina etiquetada con la terminal N (R & D Systems, Minneapolis, MN, E.E.U.U.; 2005 Cat# 1406-ST-025) . En este formato particular, un anticuerpo anti-His se acoplaría al chip Biacore y después la esclerostina etiquetada con His se haría pasar sobre la superficie del chip y sería capturada por el anticuerpo anti-His. El ensayo de bloqueo transversal sería realizado esencialmente como se describe anteriormente, a menos que después de cada ciclo de regeneración del chip, la nueva esclerostina etiquetada con His se cargara nuevamente sobre la superficie recubierta con el anticuerpo anti-His. Además del ejemplo dado usando la esclerostina etiquetada con la terminal N, la esclerostina etiquetada con la terminal C se podría utilizar alternativamente. Además, varias otras etiquetas y combinaciones de la proteína de unión etiquetada que se conocen en la técnica, se podrían utilizar para tal ensayo de bloqueo transversalmente (por ejemplo la etiqueta Ha con los anticuerpos anti-HA; la etiqueta FLAG con los anticuerpos anti-FLAG; la etiqueta de biotina con estreptavidina). Ensayo de bloqueo transversal Basado en ELISA Lo siguiente describe generalmente un análisis ELISA para determinar si un anticuerpo anti-esclerostina u otro agente de unión de esclerostina se bloquea transversalmente o es capaz de bloquear transversalmente de acuerdo a la invención. Para conveniencia, se hace referencia a dos anticuerpos (Ab-X y Ab-Y), pero será apreciado que el análisis se puede utilizar con cualquiera de los agentes de unión de esclerostina descritos en la presente. El principio general del análisis es tener un anticuerpo anti-esclerostina recubierto sobre los pozos de una placa de ELISA. Una cantidad excesiva de un segundo anticuerpo anti-esclerostina de bloqueo transversal potencial, se agrega a la solución (es decir no se une a la placa de ELISA). Una cantidad limitada de esclerostina entonces se agrega a los pozos. El anticuerpo revestido y el anticuerpo en la solución compiten por la unión del número limitado de moléculas de esclerostina. La placa se lava para eliminar la esclerostina que no se había unido por el anticuerpo recubierto y también para eliminar el segundo anticuerpo en fase de solución así como cualquier complejo formado entre el segundo anticuerpo en fase de solución y la esclerostina. La cantidad de esclerostina unida entonces se mide usando un reactivo de detección de esclerostina apropiado. Un anticuerpo en la solución que puede bloquear transversalmente el anticuerpo recubierto podrá causar una disminución del número de moléculas de esclerostina que el anticuerpo recubierto puede unir en relación al número de moléculas de esclerostina que el anticuerpo recubierto puede unir en ausencia del segundo anticuerpo en fase de solución. Este ensayo además se describe más detalladamente después para Ab-X y Ab-Y. En el caso donde se elige que Ab-X sea el anticuerpo inmovilizado, se recubre sobre los pozos de la placa de ELISA, después de lo cual las placas se bloquean con una solución de bloqueo conveniente para minimizar la unión no específica de los reactivos que se agregan posteriormente. Una 5 cantidad excesiva de Ab-Y entonces se agrega a la placa de ELISA tal que los moles de los sitios de unión de esclerostina de Ab-Y por pozo son por lo menos 10 veces más altos que los moles de los sitios de unión de esclerostina de Ab-X que se usaron, por pozo, durante el recubrimiento de la placa de ELISA. La I0 esclerostina entonces se agrega tal que los moles de la esclerostina agregados por pozo sean por lo menos 25 veces más bajos que los moles de los sitios de unión de esclerostina de Ab-X que se utilizaron para recubrir cada pozo. Después de un período de incubación conveniente se lava la placa de ELISA y se I5 agrega un reactivo de detección de esclerostina para medir la cantidad de esclerostina unida específicamente por el anticuerpo anti-esclerostina recubierto (en este caso Ab-X). La señal base para el ensayo se define como la señal obtenida en los pozos con el anticuerpo recubierto (en este caso Ab-X), el segundo 0 anticuerpo en fase de solución (en este caso Ab-Y), solamente el amortiguador de esclerostina solamente (es decir sin esclerostina) y los reactivo de detección de esclerostina. La señal de control positiva para el análisis se define como la señal obtenida en los pozos con el anticuerpo recubierto (en este caso 5 Ab-X), solamente el segundo amortiguador del anticuerpo en fase de solución (es decir ningún segundo anticuerpo en fase de solución), esclerostina y reactivos de detección de esclerostina. El análisis de ELISA necesita realizarse de tal manera para hacer que la señal de control positiva sea por lo menos 6 veces la señal base. Para evitar cualquier alteración (por ejemplo afinidades significativamente diferentes entre Ab-X y Ab-Y para la esclerostina) resultante de la elección del anticuerpo que se usa como el anticuerpo de recubrimiento y que se utiliza como el segundo anticuerpo (competidor), el ensayo de bloqueo transversal necesita realizarse en dos formatos: 1) el formato 1 es donde Ab-X es el anticuerpo que está recubierto sobre la placa de ELISA y Ab-Y es el anticuerpo competidor que está en la solución y 2) el formato 2 es donde Ab-Y es el anticuerpo que está recubierto sobre la placa de ELISA y Ab-X es el anticuerpo competidor que está en la solución. Se define que Ab-X y Ab-Y se bloquean transversalmente si, en el formato 1 o en el formato 2, el anticuerpo anti-esclerostina en fase de solución puede causar una reducción de entre 60% y 100%, específicamente entre 70% y 100%, y más específicamente entre 80% y 100%, de la señal de detección de esclerostina (es decir la cantidad de esclerostina unida por el anticuerpo recubierto) en comparación a la señal de detección de esclerostina obtenida en ausencia del anticuerpo anti-esclerostina en fase de solución (es decir pozos de control positivo). Un ejemplo de tal ensayo de bloqueo transversal basado en ELISA, se puede encontrar en el ejemplo 7 ("ensayo de bloqueo transversal basado en ELISA"). Análisis de Neutralización Basado en Células La mineralizacion por las células originadas de osteoblastos en cultivo, células primarias o líneas celulares, se utiliza como un modelo in vitro de la formación ósea. La mineralizacion tarda de aproximadamente una a seis semanas en ocurrir comenzando con la inducción de la diferenciación de la célula originada de osteoblastos por uno o más agentes de diferenciación. La secuencia total de eventos implica la proliferación celular, diferenciación, producción de matriz extracelular, maduración de matriz y finalmente la sedimentación del mineral, que se refiere a la cristalización y/o sedimentación del fosfato de calcio. Esta secuencia de eventos que comienza con la proliferación y diferenciación celular, y que finaliza con la sedimentación del mineral, es referida en la presente como la mineralizacion. La medición del calcio (mineral) es el resultado del análisis. Las células MC3T3-E1 (Sudo H, Kodama H-A, Amagai Y, Yamamoto S, Kasai S. 1983. In vitro differentiation and calcification in a new clonal osteogenic cell Une derived from newborn mouse calvaría. J Cell Biol 96:191-198) y los subclones de la línea celular original pueden formar el mineral en el cultivo durante el crecimiento en presencia de los agentes de diferenciación. Tales subclones incluyen MC3T3-E1-BF (Smith E, Redman R, Logg C, Coetzee G, Kasahara N, Frenkel B. 2000. Glucocorticoids inhibit developmental stage-specific osteoblast cell cycle. J. Biol. Chem. 275:19992-20001). Para el subclon de MC3T3-E1 -BF así como las células originales MC3T3-E1, la esclerostina puede inhibir una o más de la secuencia de eventos que conducen a y que incluyen la sedimentación mineral (es decir la esclerostina inhibe la mineralización). Los anticuerpos anti-esclerostina que pueden neutralizar la actividad inhibidora de la esclerostina, permiten la mineralización del cultivo en presencia de esclerostina para que haya un aumento estadísticamente significativo en la sedimentación del fosfato de calcio (medido como calcio) en comparación a la cantidad de calcio medida en el grupo de tratamiento de solamente esclerostina (es decir sin anticuerpo). Los anticuerpos usados en los experimentos del análisis de mineralización basado en células mostrados en las figuras 22, 23 y 24, tienen pesos moleculares de aproximadamente 145 Kd y tienen 2 sitios de unión de esclerostina por molécula de anticuerpo. Cuando se realiza el ensayo con el fin de determinar si un anticuerpo anti-esclerostina o agente de unión de anti-esclerostina puede neutralizar la esclerostina (es decir, es un anticuerpo de neutralización de esclerostina o un derivado del mismo, o es un agente de unión de neutralización de esclerostina), la cantidad de esclerostina utilizada en el ensayo necesita ser la cantidad mínima de esclerostina que causa por lo menos una reducción estadísticamente significativa del 70% de la sedimentación del fosfato de calcio (medido como calcio) en el grupo de solo esclerostina, en comparación a la cantidad de calcio medida en el grupo de no esclerostina. Un anticuerpo de neutralización anti-esclerostina o un agente de unión de neutralización anti-esclerostina se define como uno que causa un aumento estadísticamente significativo en la sedimentación de fosfato de calcio (medido como calcio) con respecto a la cantidad de calcio medida en el grupo de tratamiento de solo esclerostina (es decir sin anticuerpo, sin agente de unión). Para determinar si un anticuerpo anti-esclerostina o un agente de unión anti-esclerostina está neutralizando o no, la cantidad de anticuerpo anti-esclerostina o agente de unión anti-esclerostina utilizada en el ensayo necesita ser tal, que haya un exceso de moles de los sitios de unión de esclerostina por pozo con respecto al número de moles de esclerostina por pozo. Dependiendo de la potencia del anticuerpo, el exceso de veces que puede requerirse puede ser 24, 18, 12, 6, 3, ó 1.5, y un experto está familiarizado con la práctica rutinaria de probar más de una concentración del agente de unión. Por ejemplo, un anticuerpo de neutralización anti-esclerostina o un agente de unión de neutralización anti-esclerostina muy potentes podrían neutralizar la esclerostina incluso cuando hay menos de un exceso de 6 veces los moles de los sitios de unión de esclerostina por pozo con respecto al número de moles de esclerostina por pozo. Un anticuerpo de neutralización anti-esclerostina o un agente de unión de neutralización anti-esclerostina menos potentes podrían neutralizar la esclerostina solamente a un exceso de 12, 18 ó 24 veces. Los agentes de unión de esclerostina dentro de este intervalo completo de potencias, son convenientes como agentes de unión de neutralización de esclerostina. Los ensayos de mineralización basados en células ejemplares se describen detalladamente en el ejemplo 8. Los anticuerpos anti-esclerostina y derivados de los mismos que pueden neutralizar la esclerostina humana, y los agentes de unión de esclerostina que pueden neutralizar la esclerostina humana pueden ser para el uso en el tratamiento de condiciones/trastornos humanos que son causados por, asociarse, o resultar de por lo menos uno de formación ósea baja, densidad mineral ósea baja, contenido mineral óseo bajo, masa ósea baja, calidad ósea baja y resistencia ósea baja. Ensayo de Neutralización In Vivo Los aumentos de varios parámetros asociados a, o que resultan de, el estímulo de la nueva formación ósea, se pueden medir como un resultado de la prueba in vivo de los agentes de unión de esclerostina para identificar los agentes de unión que pueden neutralizar la esclerostina y así poder causar el estímulo de la nueva formación ósea. Tales parámetros incluyen varios marcadores anabólicos de suero [por ejemplo osteocalcina, PINP (propéptido terminal N del procolágeno tipo 1)], marcadores histomorfométricos de formación ósea (por ejemplo superficie del osteoblasto/superficie ósea; índice de formación ósea/superficie ósea; espesor trabecular), densidad mineral ósea, contenido mineral óseo, masa ósea, calidad ósea y resistencia ósea. Un agente de unión de neutralización de esclerostina se define como uno capaz de causar un aumento estadísticamente significativo, con respecto a los animales tratados con vehículo, en cualquier parámetro asociado a, o que resulta de, el estímulo de la nueva formación ósea. Tal prueba in vivo se puede realizar en cualquier mamífero conveniente (por ejemplo ratón, rata, mono). Un ejemplo de tal prueba in vivo se puede encontrar en el ejemplo 5 ("prueba in vivo de los anticuerpos monoclonales anti-esclerostina") . Aunque la secuencia de aminoácidos de la esclerostina no es 100% idéntica a través de las especies mamíferas (por ejemplo la esclerostina de ratón no es 100% idéntica a la esclerostina humana), será apreciado por un experto en la técnica que un agente de unión que puede neutralizar, in vivo, la esclerostina de ciertas especies (por ejemplo ratón) y que también puede unirse a la esclerostina humana in vitro, sea muy probable que neutralice la esclerostina humana in vivo. Así, tal agente de unión de esclerostina humana (por ejemplo anticuerpo de esclerostina anti-humana) puede ser para el uso en el tratamiento de condiciones/trastornos humanos que son causados por, asociados, o que resultan de por lo menos uno de formación ósea baja, densidad mineral ósea baja, contenido mineral óseo bajo, masa ósea baja, calidad ósea baja y resistencia ósea baja. Los ratones en los cuales la recombinación homologa había sido utilizada para eliminar el gen de esclerostina de ratón y para insertar el gen de esclerostina humana en su lugar (es decir ratones knock-in con gen de esclerostina humana o ratones knock-in con SOST humano) serían un ejemplo de un sistema in vivo adicional. Se proporcionan las composiciones farmacéuticas que comprenden uno de los agentes de unión descritos anteriormente, tal como por lo menos uno de los anticuerpos Ab-A, Ab-B, Ab-C, Ab-D y Ab-1 toAb-24, a la esclerostina humana, junto con portador, excipiente, o diluyente farmacéutica o fisiológicamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas y métodos de tratamiento se describen en la Solicitud Copendiente No. de Serie 10/868.497, presentada el 16 de junio de 2004, que reivindica la prioridad del No. de Serie 60/478,977, ambas se incorporan por referencia en la presente. El desarrollo de los regímenes convenientes de dosificación y tratamiento para usar las composiciones particulares descritas en la presente en una variedad de regímenes de tratamiento, que incluye por ejemplo la administración y formulación subcutáneas, orales, parenterales, intravenosas, intranasales, e intramusculares, es bien conocido en la técnica, parte del cual se discute brevemente posteriormente para los propósitos generales de ilustración. En ciertas aplicaciones, las composiciones farmacéuticas descritas en la presente se pueden suministrar vía la administración oral a un animal. Como tal, estas composiciones se pueden formular con un diluyente inerte o con un portador comestible asimilable, o se pueden incluir en una cápsula de gelatina de cubierta suave o dura, o se pueden comprimir en tabletas, o se pueden incorporar directamente al alimento de la dieta. En ciertas circunstancias será deseable suministrar las composiciones farmacéuticas descritas en la presente de manera subcutánea, parenteral, intravenosa, intramuscular, o incluso intraperitoneal . Tales métodos son bien conocidos por el experto en la técnica, algunos de los cuales se describen adicionalmente, por ejemplo, en la Patente Norteamericana No. 5,543,158; Patente Norteamericana No. 5,641,515 y Patente Norteamericana No. 5,399,363. En ciertas modalidades, las soluciones de los compuestos activos como bases libres o sales farmacológicamente aceptables se pueden preparar en agua mezcladas convenientemente con un tensioactivo, tal como hidroxipropicelulosa. Las dispersiones también se pueden preparar en glicerol, polietilenglicoles líquidos, y mezclas de los mismos y en aceites. Bajo condiciones ordinarias de almacenamiento y uso, estas preparaciones contendrán generalmente un conservador para prevenir el crecimiento de los microorganismos. Las formas farmacéuticas ilustrativas convenientes para el uso inyectable incluyen las soluciones o dispersiones acuosas estériles y polvos estériles para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables estériles (por ejemplo, ver la Patente Norteamericana No. 5,466,468). En todos los casos la forma debe ser estéril y debe ser fluida hasta el punto que exista una capacidad de inyección fácil. Debe ser estable bajo condiciones de fabricación y almacenamiento y debe conservarse contra la acción de contaminación por microorganismos, tal como bacterias y hongos. El portador puede ser un solvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol, y polietilenglicol líquido, y similares), mezclas convenientes de los mismos, y/o aceites vegetales. La fluidez apropiada se puede mantener, por ejemplo, por el uso de un recubrimiento, tal como lecitina, por el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de la dispersión y/o por el uso de tensioactivos. La prevención de la acción de microorganismos se puede facilitar por varios agentes anti-bacterianos y anti-hongos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol , fenol, ácido sórbico, timerosal, y similares. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares o cloruro de sodio. La absorción prolongada de las composiciones inyectables se puede obtener por el uso en las composiciones de los agentes que retrasan la absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina. En una modalidad, para la administración parenteral en una solución acuosa, la solución se debe amortiguar convenientemente en caso de ser necesario y el diluyente líquido primero se produjo isotónico con suficiente solución salina o glucosa. Estas soluciones acuosas particulares son especialmente convenientes para la administración intravenosa, intramuscular, subcutánea e intraperitoneal. Con respecto a esto, un medio acuoso estéril que se puede utilizar es conocido por los expertos en la técnica en la luz de la presente descripción. Por ejemplo, una dosificación se puede disolver en 1 mi de solución isotónica de NaCI y agregarse a 1000 mi de fluido de hipodermoclisis o inyectarse en el sitio propuesto de infusión, (ver por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 15a ed., pp. 1035-1038 y 1570-1580). Una cierta variación en la dosificación ocurrirá necesariamente dependiendo de la condición del sujeto que es tratado. Por otra parte, para la administración humana, las preparaciones por supuesto preferiblemente cumplirán con la esterilidad, capacidad pirogénica, y estándares generales de seguridad y pureza según lo requerido por FDA Office of Biologics Standars. En otra modalidad de la invención, las composiciones descritas en la presente se pueden formular en una forma neutra o en forma de sal. Las sales farmacéuticamente aceptables ilustrativas incluyen las sales de adición de ácido (formadas con los grupos amino libres de proteína) y las cuales se forman con ácidos inorgánicos tal como, por ejemplo, ácidos hidroclóricos o fosfóricos, o ácidos orgánicos tal como ácidos acéticos, oxálicos, tartáricos, mandélicos, y similares. Las sales formadas con los grupos carboxilo libres también se pueden derivar de las bases inorgánicas tal como, por ejemplo, sodio, potasio, amonio, calcio, o hidróxidos férricos, y bases orgánicas tal como isopropilamina, trimetilamina, histidina, procaína y similares. Durante la formulación, las soluciones serán administradas de una manera compatible con la formulación de dosificación y en una cantidad que sea terapéuticamente efectiva. Los portadores pueden comprender adicionalmente cualquiera y todos los solventes, medios de dispersión, vehículos, recubrimientos, diluyentes, agentes anti-bacterianos y anti-hongos, agentes isotónicos y retardadores de absorción, amortiguadores, soluciones portadoras, suspensiones, coloides, y similares. El uso de tales medios y agentes para las sustancias activas farmacéuticas es bien conocido en la técnica. A menos que cualquiera de los medios o agentes convencionales sean incompatibles con el ingrediente activo, se contempla su uso en las composiciones terapéuticas. Los ingredientes activos complementarios también se pueden incorporar en las composiciones. La frase "farmacéuticamente aceptable" se refiere a entidades moleculares y composiciones que no producen una reacción adversa alérgica o similar cuando se administran a un humano. En ciertas modalidades, los liposomas, nanocápsulas, microparticulas, partículas de lípidos, vesículas, y similares, se utilizan para la introducción de las composiciones de la presente invención en células/organismos hospedadores convenientes. En particular, las composiciones de la presente invención se pueden formular para el suministro, encapsuladas en una partícula de lípidos, liposoma, vesícula, nanoesfera, o nanopartícula o similares. Alternativamente, las composiciones de la presente invención se pueden unir, de manera covalente o no covalente, a la superficie de tales vehículos portadores. La formación y el uso del liposoma y preparaciones de tipo liposoma como portadores de fármaco potenciales, son conocidos generalmente por los expertos en la técnica (ver por ejemplo, Lasic, Trends Biotechnol. 16(7):307-21 , 1998; Takakura, Nippon Rinsho 56(3):691 -95, 1998; Chandran y colaboradores, Indian J. Exp. Biol. 55(8): 801-09, 1997; Margalit, Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Sys. 2(2-3).233-6 , 1995; Patente Norteamericana No. 5,567,434; Patente Norteamericana No. 5,552,157; Patente Norteamericana No. 5,565,213; Patente Norteamericana No. 5,738,868 y Patente Norteamericana No. 5,795,587, cada una se incorpora específicamente en la presente por referencia en su totalidad). El uso de liposomas no parece asociarse a las respuestas autoinmunes o a la toxicidad inaceptable después del suministro sistémico. En ciertas modalidades, los liposomas se forman a partir de fosfolípidos que se dispersan en un medio acuoso y forman espontáneamente vesículas bi-capas concéntricas multilamelares (también llamadas vesículas multilamelares (MLVs, por sus siglas en inglés)). Alternativamente, en otras modalidades, la invención proporciona las formulaciones en nanocápsulas farmacéuticamente aceptables de las composiciones de la presente invención. Las nanocápsulas pueden generalmente capturar los compuestos de una manera estable y reproductiva (ver, por ejemplo, Quintanar-Guerrero y colaboradores, Drug Dev. Ind. Pharm. 24( 2): 1 13-28 , 1998). Para evitar los efectos secundarios debidos a la sobrecarga polimérica intracelular, tales partículas ultrafinas (dimensionadas a aproximadamente 0.1 pm) se pueden diseñar usando los polímeros capaces de degradarse in vivo. Tales partículas se pueden hacer como se describe, por ejemplo, por Couvreur y colaboradores, Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Sys. 5(1):1-20, 1988; zur Muhlen y colaboradores, Eur. J. Pharm. Biopharm. 45(2): 149-55, 1998; Zambaux y colaboradores, J. Controlled Reléase 50(1 -3):31 -40, 1998; y la Patente Norteamericana No. 5,145,684. Además, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden colocar dentro de los envases, junto con el material empaquetado que proporciona las instrucciones con respecto al uso de tales composiciones farmacéuticas. Generalmente, tales instrucciones incluirán una expresión tangible que describe la concentración el reactivo, así como dentro de ciertas modalidades, las cantidades relativas de los ingredientes excipientes o diluyentes (por ejemplo, agua, solución salina o PBS) que pueden ser necesarios para reconstituir la composición farmacéutica. La dosis administrada puede oscilar de 0.01 mg/kg a 100 mg/kg de peso corporal. Como será evidente para un experto en la técnica, la cantidad y frecuencia de la administración dependerán, por supuesto, de los factores tal como naturaleza y gravedad de la indicación que es tratada, respuesta deseada, condición del paciente, y así sucesivamente. Comúnmente, las composiciones se pueden administrar mediante una variedad de técnicas, según lo observado anteriormente. Los aumentos del contenido mineral óseo y/o densidad mineral ósea no se pueden determinar directamente con el uso de rayos X (por ejemplo, Dual Energy X-ray Spectometry o "DEXA"), o por inferencia a través de la medición de 1) marcadores de formación ósea y/o actividad de osteoblastos, por ejemplo, pero sin limitarse a, fosfatasa alcalina específica de osteoblastos, osteocalcina, propéptido de procolágeno C tipo 1 (PICP, por sus siglas en inglés), fosfatasa alcalina total (ver Cornier, Curr. Opin. in Rheu. 7:243(1995)) y propéptido terminal N de procolágeno 1 de suero (PINP), y/o 2) marcadores de resorción ósea y/o actividad de osteoclastos incluyendo, pero sin limitarse a, piridinolina, deoxipiridinolina, N-telopéptido, hidroxiprolina urinaria, fosfatasas de ácido resistente al tartrato de plasma, e hidroxilisina de galactosilo; (ver Cornier, Id), TRAP 5b de suero (isoforma 5b de fosfatasa de ácido resistente al tartrato) y telopéptido C reticulado de suero (sCTXI). La cantidad de masa ósea también se puede calcular a partir del peso corporal o usando otros métodos (ver Guinness-Hey , Metab. Bone Dis. Relat. Res. 5:177-181, 1984). Los animales y modelos animales particulares se utilizan en la técnica para probar el efecto de las composiciones y métodos de la invención en, por ejemplo, parámetros de pérdida ósea, resorción ósea, formación ósea, resistencia ósea o mineralización ósea que imitan las condiciones de la enfermedad humana, tal como osteoporosis y osteopenias. Los ejemplos de tales modelos incluyen el modelo rata sin ovarios (Kalu, D.N., The ovariectomized rat model of postmenopausal bone loss. Bone and Mineral 15:175-192 (1991); Frost, H.M. y Jee, W.S.S. On the rat model of human osteopenias and osteoporosis. Bone and Mineral 18:227-236 (1992); y Jee, W.S.S. y Yao, W., Overview: animal models of osteopenia and osteoporosis. J. Musculoskel. Neuron. Interact. 1:193-207 (2001 )). Las condiciones particulares que se pueden tratar mediante las composiciones de la presente invención incluyen las displasias, en donde el crecimiento o desarrollo óseo es anormal y hay una variedad amplia de causas de osteopenia, osteoporosis y pérdida ósea. Los ejemplos representativos de tales condiciones incluyen acondroplasia, disostosis cleidocranea , encondromatosis, displasia fibrosa, enfermedad de Gaucher, raquitismo hipofosfatémico, síndrome de Marfan, exotosis hereditaria múltiple, neurofibromatosis, osteogénesis imperfecta, osteopetrosis, osteopoiquilosis, lesiones escleróticas, pseudoartrosis, y osteomielitis piogénica, enfermedad periodontal, pérdida ósea inducida por fármacos antiepilépticos, hiperparatiroidismo primario y secundario, síndromes de hiperparatiroidismo familiares, pérdida ósea inducida por ingravidez, osteoporosis en hombres, pérdida ósea postmenopáusica, osteoartritis, osteodistrofia renal, trastornos de infiltración ósea, pérdida ósea oral, osteonecrosis de la mandíbula, enfermedad de Paget juvenil, meloreostosis, enfermedades óseas metabólicas, mastocitosis, célula anemia/enfermedad falciforme, pérdida ósea relacionada al trasplante de órgano, pérdida ósea relacionada al trasplante de riñon, lupus eritematoso sistémico, espondilitis anquilosante, epilepsia, artritis juvenil, talasemia, mucopolisacaridosis, enfermedad de Fabry, síndrome de Turner, síndrome de Down, síndrome de Klinefelter, lepra, enfermedad de Perthes, escoliosis idiopática adolescente, enfermedad inflamatoria del multi-sistema de inicio infantil, síndrome de Winchester, enfermedad de Menkes, enfermedad de Wilson, enfermedad ósea isquémica (tal como enfermedad de Legg-Calve-Pertes, osteoporosis migratoria regional), estados anémicos, condiciones causadas por esteroides, pérdida ósea inducida por glucocorticoides, pérdida ósea inducida por heparina, trastornos de la médula, escorbuto, desnutrición, deficiencia de calcio, osteopenia idiopática u osteoporosis, osteopenia congénita u osteoporosis, alcoholismo, enfermedad del hígado crónica, estado postmenopáusico, condiciones inflamatorias crónicas, artritis reumatoide, enfermedad del intestino inflamatoria, colitis ulcerativa, colitis inflamatoria, enfermedad de Crohn, oligomenorrea, amenorrea, embarazo, diabetes mellitus, hipertiroidismo, trastornos de la tiroides, trastornos de la paratiroides, enfermedad de Cushing, acromegalia, hipogonadismo, inmovilización o obsolescencia, síndrome de distrofia de comprensión de reflejo, osteoporosis regional, osteomalacia, pérdida ósea asociada al reemplazo de articulación, pérdida ósea asociada al VIH, pérdida ósea asociada a la pérdida de la hormona del crecimiento, pérdida ósea asociada a la fibrosis quística, displasia fibrosa, pérdida ósea asociada a la quimioterapia, pérdida ósea inducida por tumor, pérdida ósea relacionada al cáncer, pérdida ósea ablativa hormonal, mieloma múltiple, pérdida ósea inducida por fármaco, anorexia nerviosa, pérdida ósea facial asociada a la enfermedad, pérdida ósea craneal asociada a la enfermedad, pérdida ósea de la mandíbula asociada a la enfermedad, perdida ósea craneal asociada a la enfermedad, y perdida ósea asociada a vuelos espaciales. Otras condiciones se relacionan a la pérdida ósea asociada al envejecimiento, incluyendo la pérdida ósea facial asociada al envejecimiento, pérdida ósea craneal asociada al envejecimiento, pérdida ósea de la mandíbula asociada al envejecimiento, y pérdida ósea del cráneo asociada al envejecimiento. Las composiciones de la presente invención también pueden ser útiles para mejorar los resultados en los procedimientos ortopédicos, procedimientos dentales, implantes quirúrgicos, reemplazo de articulaciones, injerto óseo, cirugía cosmética ósea y reparación ósea tal como curación de fractura, curación de desunión, curación de unión retrasada, y reconstrucción facial. Una o más composiciones se pueden administrar antes, durante y/o después del procedimiento, reemplazo, injerto, cirugía o reparación. La invención también proporciona un kit de diagnóstico que comprende por lo menos un agente de unión anti-esclerostina de acuerdo a la presente invención. El agente de unión puede ser un anticuerpo. Además, tal kit puede comprender opcionalmente uno o más de los siguientes: (1) instrucciones para usar uno o más agentes de unión para el ensayo, diagnosis, pronóstico, monitoreo terapéutico o cualquier combinación de éstas aplicaciones; (2) un asociado de unión etiquetado para el agente de unión anti-esclerostina; (3) una fase sólida (tal como una tira reactivo) sobre la cual se inmoviliza el agente de unión anti-esclerostina; y (4) una etiqueta o inserto que indica la aprobación reguladora para el ensayo, diagnóstico, pronóstico o uso terapéutico o cualquier combinación de los mismos. Si no se proporciona ningún asociado de unión etiquetado al agente de unión, el agente de unión por sí mismo se puede etiquetar con uno o más marcadores detectables, por ejemplo un radical quimioluminiscente, enzimático, fluorescente, o radiactivo.

Los siguientes ejemplos se proporcionan a modo de ilustración, y no de limitación. Ejemplos Ejemplo 1 Expresión Recombinante de Esclerostina La esclerostina/SOST humana recombinante está disponible comercialmente de R&D Systems (Minneapolis, MN, E.E.U.U.; 2006 Cat# 1406-ST-025). Adicionalmente, la esclerostina/SOST de ratón recombinante está disponible comercialmente de R&D Systems (Minneapolis, MN, E.E.U.U.; 2006 Cat# 1589-ST-025) . Alternativamente, las diferentes especies de esclerostina se puede expresar temporalmente en las células 293T o 293EBNA adaptadas a la suspensión sin suero. Las transfecciones se pueden realizar como en 500 mi o 1 I de cultivo. Los siguientes reactivos y materiales están disponibles de Gibco BRL (ahora Invitrogen, Carlsbad, CA). Los números de catálogo se listan entre paréntesis: DMEM sin suero (21068-028); DMEM/F12 (3:1) (21068/11765); 1X Insulin-Transferrin-Selenium Supplement (51500-056); IX Pen Strep Glut (10378-016); 2mM -Glutamina (25030-081); 20 mM HEPES (15630-080); 0.01% Pluronic F68 (24040-032). Brevemente, el inoculo celular (5.0-10.0 x 105 células/ml X volumen de cultivo) se centrifuga a 2,500 rpm durante 10 minutos a 4°C para eliminar el medio acondicionado. Las células se suspenden nuevamente en DMEM sin suero y se centrifugan nuevamente a 2,500 rpm durante 10 minutos a 4°C. Después de aspirar la solución lavada, las células se suspenden nuevamente en el medio de crecimiento [DMEM/F12 (3:1) + 1X Insulin-Transferrin-Selenium Supplement + 1X Pen Strep Glut + 2mM L-Glutamina + 20 mM HEPES + 0.01% Pluronic F68] en un cultivo del matraz de agitación de 1 I o 3 I. El cultivo del matraz de agitación se mantiene en una placa de agitación magnética a 125 rpm que se coloca en una incubadora humedecida mantenida a 37°C y 5% C02. El ADN de expresión de plásmido de mamífero (por ejemplo pcADN3.1, pCEP4, Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA), que contiene la región de codificación completa (y el codón de detención) de la esclerostina con una secuencia de consenso Kozak (por ejemplo, CCACC) directamente 5' del sitio de inicio ATG, es se hace complejo para el reactivo de transfección en un tubo cónico de 50 mi. El complejo reactivo de transfección de ADN se puede preparar en 5-10% del volumen de cultivo final en DMEM u O PTI-M EM sin suero. Los reactivos de transfección que se pueden utilizar para este propósito incluyen X-tremeGene RO-1539 (Roche Applied Science, Indianapolis, IN), FuGene6 (Roche Applied Science, Indianapolis, IN), Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA) y 293fectin (Invitrogen, Carlsbad, CA). 1-5 pg de ADN de plásmido/ml cultivo se agregan primero a DMEM sin suero, seguido por 1-5 µ? reactivo de transfección/ml de cultivo. Los complejos se pueden incubar a temperatura ambiente durante aproximadamente 10-30 minutos y después se agregan a las células en el matraz de agitación. La transfección/expresión se puede realizar durante 4-7 días, después de lo cual el medio acondicionado (CM, por sus siglas en inglés) se cosecha por centrifugación a 4.000 rpm durante 60 minutos a 4°C. Ejemplo 2 Purificación de Esclerostina Recombinante La esclerostina recombinante fue purificada a partir de las células hospedadoras mamíferas como sigue. Todos los procesos de purificación fueron realizados a temperatura ambiente. Un esquema de purificación fue utilizado para purificar varias especies de esclerostina, incluyendo la esclerostina de murino y humana. El esquema de purificación utilizó la cromatografía de la afinidad seguida por la cromatografía de intercambio catiónico. Cromatografía de Heparina El medio acondicionado de célula hospedadora de mamífero (CM) fue centrifugado en una centrifugadora Beckman J6-M1 a 4000 rpm durante 1 hora a 4°C para eliminar los residuos celulares. El supernadante de CM entonces fue filtrado a través de un filtro estéril de 0.2 pm. (En este punto el CM filtrado estéril opcionalmente se puede almacenar congelado hasta la purificación.) Si el CM fue congelado, se deshiela a las siguientes temperaturas, o combinación de las mismas: 4°C, temperatura ambiente o agua caliente. Después del deshelado, el CM fue filtrado a través de filtro estéril de 0.2 pm y opcionalmente fue concentrado por u Itrafiltración de flujo tangencial (TFF, por sus siglas en ingles) usando una membrana de corte de peso molecular de 10 kD. El concentrado de CM fue filtrado a través de un filtro estéril de 0.2 pm y después cargado sobre una columna Heparin High Performance (Heparin HP) (GE Healtcare, antes Amersham Biosciences) equilibrado en PBS. Alternativamente, el supernadante de CM filtrado se puede cargar directamente sobre la columna Heparin HP equilibrada en PBS. Después de cargar, la columna Heparin HP fue lavada con PBS hasta que la absorbencia a 280 nm de flujo regreso a la línea base (es decir, la absorbencia medida antes de cargar el supernadante de CM). La esclerostina entonces fue eluida de la columna usando un gradiente lineal de 150 mM a 2 M de cloruro de sodio en PBS. La absorbencia a 280 nm del eluido fue monitoreada y las fracciones que contenían la proteína fueron recolectadas. Las fracciones entonces fueron probadas por manchado Coomassie SDS-PAGE para identificar las fracciones que contienen un polipéptido que emigra al tamaño de la esclerostina glicosilada. Las fracciones apropiadas de la columna fueron combinadas para hacer la agrupación Heparin HP.

Cromatografía de Intercambio Catiónico La esclerostina eluida de la columna Heparin HP fue purificada adicionalmente por cromatografía de intercambio catiónico usando los medios de cromatografía de SP High Performance (SPHP) (GE Healtcare, antes Amersham Biosciences). El grupo Heparin HP fue el amortiguador intercambiado en PBS por la diálisis usando las membranas de 10,000 MWCO (Pierce Slide-A-Lyzer). El grupo Heparin HP dializado entonces fue cargado sobre una columna SPHP equilibrada en PBS. Después de cargar, la columna fue lavada con PBS hasta que la absorbencia a 280 nm de flujo regreso a la línea base. La esclerostina entonces fue eluida de la columna SPHP usando un gradiente lineal de 150 mM a 1 M de cloruro de sodio en PBS. La absorbencia a 280 nm del eluido fue monitoreada y la esclerostina eluida fue recolectada en fracciones. Las fracciones entonces fueron probadas por manchado Coomassie SDS-PAGE para identificar las fracciones que contienen un polipéptido que emigra al tamaño de la esclerostina glicosilada. Las fracciones apropiadas de la columna fueron combinadas para hacer el grupo SPHP.

Formulación Después de la purificación, el grupo SPHP fue formulado en PBS por diálisis usando membranas de 10,000 MWCO (Pierce Slide-A-Lyzer). Si la concentración de la esclerostina fuera necesaria, se utilizó un dispositivo centrífugo (Amicon Centricon o Centriprep) con una membrana de 10,000 MWCO. Después de la formulación, la esclerostina fue filtrada a través de un filtro estéril de 0.2 pm y almacenada a 4°C o congelada. Ejemplo 3 ELISA de Unión al Péptido Una serie de péptidos traslapados (cada péptido es de aproximadamente 20-25 aminoácidos de largo) fue sintetizada en base a la secuencia de aminoácidos conocida de esclerostina de rata (SEC ID NO:98). Los péptidos fueron diseñados tal que contuvieran un residuo de cisteína reducido; una cisteína adicional fue incluida en la terminal C de cada péptido que ya no contuvo una en su secuencia. Esto permitió a los péptidos unirse a las placas de ensayo por el acoplamiento covalente, usando las placas de unión de sulfhidrilo disponibles comercialmente (Costar), a una concentración de 1 pg/ml, en solución salina amortiguada con fosfato (PBS: pH 6.5) que contiene 1 mM EDTA. Después de la incubación durante 1 hora a temperatura ambiente, las placas se lavaron tres veces con PBS que contiene 0.5% Tween 20. Las placas fueron bloqueadas por incubación con una solución de PBS que contiene 0.5% gelatina de piel de pescados (Sigma) durante 30 minutos a temperatura ambiente y después se lavaron tres veces en PBS que contiene 0.5% Tween 20. Los anticuerpos que se probarán fueron diluidos en 1 pg/ml en PBS que contiene 0.5% gelatina de piel de pescado y se incubaron con las placas recubiertas con péptido durante 1 hora a temperatura ambiente. El exceso de anticuerpo fue eliminado por tres lavados con PBS, 0.5% Tween 20. Las placas entonces fueron incubadas con un anticuerpo secundario apropiado conjugado con peroxidasa de rábano picante (diluido apropiadamente en PBS que contiene 0.5% Tween 20) y capaz de unirse al anticuerpo de interés. Las placas entonces se lavaron tres veces: una vez con PBS que contiene 0.5% Tween 20, y dos veces con PBS. Finalmente las placas fueron incubadas con un sustrato cromogénico de peroxidasa de rábano picante (TMB-Stable Stop, RDI) durante 5 minutos a temperatura ambiente, el desarrollo del color fue detenido con ácido, y la densidad óptica de las placas fue medida a 450nm. Materiales Placas de unión de sulfhidrilo Costar (VWR # 29442-278) Amortiguador de recubrimiento: 1XPBS pH 6.5 + 1 mM EDTA Amortiguador de bloqueo: 1X PBS + 0.5% gelatina de piel de pescados (PBS de CS; FSG de Sigma# G 7765) Amortiguador de lavado: 1X PBS + 0.5% Tween 20 Péptidos de esclerostina de rata Muestras de anticuerpo: Ab temporal, Ab recombinante purificado, suero de conejo, etc. Ab secundario apropiado: cabra-anti-conejo/ratón-HRP (Jackson Immuno Research, 115-036-072) TMB-Stable Stop (RDI # RDI-TMBSX-IL) Los Métodos fueron los siguientes: 1. Las placas recubiertas con 100 µ?/???? de péptido de esclerostina de rata diluido en 1XPBS pH 6.5 + 1 mM EDTA en 1 g/ml. Se incuban las placas 1 hora a temperatura ambiente. (Las placas se deben utilizar dentro de un periodo de 30 minutos de abertura). 2. Se lavan las placas 3X con amortiguador de lavado. 3. Se bloquean las placas con 200 µ?/???? de amortiguador de bloqueo. Se incuban las placas 30 minutos a temperatura ambiente. 4. Se repite el lavado como se describe en (2). 5. Se incuban las placas con 50 µ?/???? de las muestras diluidas en el amortiguador de bloqueo - Los títulos de suero iniciaron a 1:100; Uso en orden de Ab recombinante temporal; Uso de Ab recombinante purificado en 1 µg/ml (todas las muestras se realizaron por duplicados). Se incubaron las placas 1 H a temperatura ambiente. 6. Se lavan las placas como se describe en (2). 7. Se incuban las placas con 50 µ?/???? de anticuerpo secundario apropiado (HRP etiquetado) diluido a 1:1600 en amortiguador de bloqueo. Se incuban las placas 1 hora a temperatura ambiente. 8. Se lavan las placas 1X con amortiguador de lavado, 2x con PBS. 9. Se incuban las placas con 50 µ?/???? de TMB, 5 minutos a temperatura ambiente. 10. Se detiene la reacción con 50 µ?/???? de 0.5M HCI. 11. Se leen las placas a una longitud de onda de 450 nm. Las siguientes secuencias de péptidos fueron analizadas como se describe anteriormente: QGWQAFKN DATEI I PGLREYPEPP (SEC ID NO:82) TEIIPGLREYPEPPQELENN (SEC ID NO:83) PEPPQELENNQTMNRAENGG (SEC ID NO:84) ENGGRPPHHPYDTKDVSEYS (SEC ID NO:85) CRELHITRFVTDGP (SEC ID NO:86) CRELH ITRFVTDGPSRSAKPVTELV (SEC ID NO:87) CRSAKPVTELVSSGQSGPRARLL (SEC ID NO:88) CGPARLLPNAIGRVKWWRPNGPDFR (SEC ID NO:89) RAQ RVQ LLCPGGAAPRSRKV (SEC ID NO:90) PGGAAPRSRKVRLVAS (SEC ID NO:91) KRLTRFHNQSELKDFGPETARPQ (SEC ID NO:92) IPDRYAQRVQLLSPGG (SEC ID NO:93) SELKDFGPETARPQKGRKPRPRAR (SEC ID NO:94) KGRKPRPRARGAKANQAELENAY (SEC ID NO:95) PNAIGRVKWWRPNGPDFR (SEC ID NO:96) KWWRPNGPDFRCI PDRYRAQRV (SEC ID NO:97).

Un anticuerpo de neutralización de afinidad alta (Ab-19) une dos secuencias traslapadas de péptido: PNAIGRVKWWRPNGPDFR (SEC ID NO:96) y KWWRPNGPDFRCIPDRYRAQRV (SEC ID NO:97). Este procedimiento permite el reconocimiento de los epítopes para los anticuerpos que reaccionan con los epítopes lineales aparentes. Los péptidos que contienen todo o parte del sitio de unión del anticuerpo, se unirán al anticuerpo y así serán detectados. Ejemplo 4 Identificación de los Epítopes de Esclerostina Humana Estructura de Esclerostina La forma madura (péptido señal eliminado) es una proteína de 190 aminoácidos (figura 8). La figura 9 muestra un diagrama esquemático de la estructura general de la esclerostina con un brazo terminal N (de la terminal N Q a la cisteina 1) y un brazo terminal C (de la cisteina 8 a la terminal Y). El sandwich entre estos dos brazos es la estructura del nudo de cistina y tres bucles se designan como Bucle 1, Bucle 2 y Bucle 3. Los cuatro enlaces disulfuro en la esclerostina son Cys1 en la posición de secuencia 57 ligada a Cys5 en la posición 111 (referida como C1-C5), Cys2 en la posición de secuencia 71 ligada a Cys6 en la posición de secuencia 125 (referida como C2-C6), Cys3 en la posición de secuencia 82 ligada a Cys7 en la posición de secuencia 142 (referida como C3-C7), Cys4 en la posición de secuencia 86 ligada a Cys8 en la posición de secuencia 144 (referida como C4-C8). La estructura de anillo de ocho miembros se forma vía el enlace disulfuro C3-C7 y C4-C8. Esta estructura de anillo, junto con el enlace disulfuro C1-C5 que penetra a través del anillo, forma un nudo de cistina común. C2-C6, que no es parte del nudo de cistina, tienen dos estructuras grandes de bucle, bucle 1 (residuos 57 a 82) y bucle 3 (residuos 111 a 142) cerrados juntos. El Bucle 2 va de C4 (residuo 86) a C5 (residuo 111). Experimental El método general para caracterizar los epítopes unidos por los anticuerpos monoclonales anti-esclerostina implica la fragmentación de la esclerostina humana en péptidos con diferentes proteasas, la determinación de la secuencia de varios péptidos de esclerostina humana, el aislamiento de estos péptidos y la prueba de la capacidad de cada uno de ellos de unirse a un anticuerpo monoclonal particular usando un ensayo de unión de competencia del epítope de péptido de esclerostina humana. Los datos resultantes permitieron que fuera determinada la localización del epítope de unión. Las digestiones del péptido se sometieron sujetados al trazado de péptido por CLAR; fueron recolectados los picos individuales, y se identificaron los péptidos y se trazaron por los ensayo de espectrometría de masa de absorción de láser asistida por matriz (MALDI-MS, por sus siglas en inglés) y CL-EM por ionización de electrospray (ESl-CL-EM) y/o por la secuenciacion de la terminal N. Todos los ensayo de CLAR para estos estudios fueron realizados usando una columna C8 de fase inversa (2.1 mm i.d. x 15 cm de longitud). El trazado del péptido por CLAR fue realizado con un gradiente lineal de 0.05% ácido trifloroacético (fase móvil A) a acetonitrilo 90% en 0.05% ácido trifluoroacético. Las columnas fueron desarrolladas durante 50 minutos a un caudal de 0.2 ml/min. Digestiones de Tripsina y Endoproteinasa AspN La esclerostina humana de la forma madura fue digerida con tripsina, que se divide después en arginina y lisina, o con AspN. Aproximadamente 200 pg de esclerostina en 0.5-1.0 mg/ml fueron incubados en PBS (pH 7.2) durante 20 horas a 37°C con 8 g de tripsina o AspN. Digestión de Tripsina La cromatografía de CLAR de las digestiones de tripsina produjeron varios picos importantes (figura 10A). El ensayo de la secuencia fue conducido en los picos de péptido recuperados de CLAR después de la digestión de tripsina. El ensayo ESI CL-EM en línea de la digestión del péptido, también fue realizado para determinar la masa exacta de los péptidos que fueron separados por CLAR. Así fue determinada la identidad de los péptidos presentes en los picos de péptido (fig. 11). La figura 13 muestra la alineación de varias secuencias de péptido (T19.2, T20, T20.6, T21-22) a lo largo de la secuencia de esclerostina. El número que sigue cada T (por ejemplo, T19.2) refleja el tiempo de retención. T19.2 contiene dos péptidos (uno del bucle 1 y uno del bucle 3) ligados por el enlace disulfuro C2-C6. T20 contiene dos péptidos ligados por la estructura del nudo de cistina, con los bucles 1 y 3 intactos mantenidos juntos por el enlace disulfuro C2-C6 y con la mayoría del Bucle 2 ausente. T20.6 contiene cuatro secuencias ligadas por la estructura del nudo de cistina, pero falta la parte del bucle 1 y 3 (parte T19.2) y falta la mayoría del Bucle 2. T21-22 es casi idéntica a T20 pero tiene 3 aminoácidos adicionales en la región del Bucle 2. Digestión de AspN La cromatografía por CLAR de las digestiones de AspN produjo varios picos importantes (figura 10B). El ensayo de secuencia fue conducido en los picos de péptido recuperados de CLAR. El ensayo ESI CL-EM en línea de la digestión del péptido también fue realizado para determinar la masa exacta de los péptidos que fueron separados por CLAR. Así fue determinada la identidad de los péptidos presentes en los picos de péptido de la digestión de AspN (figura 12). La figura 14 muestra la alineación de varias secuencias de péptido (AspN14.6, AspN18.6, AspN22.7-23.5) a lo largo de la secuencia de esclerostina . El número después de cada AspN (por ejemplo AspN18.6) refleja el tiempo de retención. AspN14.6 contiene tres péptidos cortos de los brazos terminal N y C de la esclerostina, mientras que AspN18.6 es un péptido más grande del brazo terminal N de esclerostina. AspN22.7-23.5 contiene un solo fragmento de péptido de 104 aminoácidos, comprende las ocho cisteínas (cuatro enlaces disulfuro), el nudo de cistina y todos los bucles 1, 2 y 3. La estrategia para caracterizar los epítopes fue utilizar varios péptidos de esclerostina humana generados por tripsina y AspN y determinan qué los péptidos aún se podrían unir mediante varios anticuerpos (Ab-A, Ab-B, Ab-C y Ab-D). Esto fue probado específicamente en el "ensayo de competencia de epítope de péptido de esclerostina humana" basado en BIAcore donde la unión de un anticuerpo monoclonal particular a la esclerostina humana inmovilizada en el chip Biacore, se determina en presencia o ausencia de cada una de varias fracciones aisladas del péptido de CLAR de tripsina y de AspN. En ausencia de cualquier péptido de competencia, el anticuerpo monoclonal particular pudo unirse a la esclerostina humana en el chip y produce una respuesta de la unidad de resonancia, RU. La pre-incubación del anticuerpo monoclonal particular con esclerostina humana intacta en la solución, seguida por la prueba de unión al chip, demostró que la unión de Mab a la esclerostina humana en la solución previno la unión de Mab a la esclerostina humana en el chip, así se validó el principio general de este ensayo de competencia. Este procedimiento general fue repetido individualmente para cada péptido. Una respuesta de RU robusta fue tomada para indicar que el péptido particular que fue probado no pudo unirse a Mab en la solución (por lo tanto Mab estuvo libre de unirse a la esclerostina humana que había sido inmovilizada en el chip). Por el contrario, la ausencia de una respuesta de RU robusta indicó que Mab pudo unirse al péptido de la esclerostina en la solución. Estos patrones de unión, acoplados con la identidad conocida de varios péptidos de esclerostina, fueron utilizados para determinar que los epítopes de esclerostina fueron unidos por los anticuerpos anti-esclerostina Ab-A, Ab-B, Ab-C y Ab-D. Ensayo de Unión de Competencia del Epítope de Péptido de Esclerostina Humana Basado en Biacore Preparación de la Superficie de Esclerostina Humana: La inmovilización de la esclerostina humana de la forma madura a una superficie del chip del sensor BIAcore (CM5) fue realizada de acuerdo a las instrucciones del fabricante. Brevemente, los grupos carboxilo en las superficies del chip de sensor, fueron activados inyectando 60 µ? de una mezcla que contiene de 0.2 M N-etil-N'-(dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) y 0.05 M N-hidroxisuccinimida (NHS). La esclerostina humana fue diluida en 10 mM acetato de sodio, pH 4.0 a una concentración de 20 g/ml seguidos por la inyección sobre la superficie activada CM5. El exceso de los grupos reactivos en las superficies fue desactivado inyectando 60 µ? de 1 M etanolamina. Los niveles inmovilizados finales fueron ~ 5000 unidades de resonancia (RU) para la superficie esclerostina humana. Una superficie vacía de referencia acoplada simulada también fue preparada en los chips de sensor. Análisis de Unión de Especificidad La solución salina amortiguada con 1X fosfato sin cloruro de calcio o cloruro de magnesio fue de Gibco/lnvitrogen, Carlsbad, CA. La albúmina de suero bovino, fracción V, sin IgG fue de Sigma-Aldrich, St. Louis, MO. Cada Mab (2 nM) se incubó por separado con 20 nM esclerostina humana o péptido de esclerostina humana particular (nota: hay 3 péptidos sin ligar en AspN14.6) en amortiguador de muestra (1X PBS + 0.005% P-20 + 0.1 mg/ml BSA) antes de inyectarse sobre la superficie de esclerostina humana inmovilizada. El caudal de la inyección de muestra fue de 5 µ?/min seguido por la regeneración superficial usando 1 M NaCI en 8 mM glicina, pH 2.0 en 30 µ?/min durante 30 segundos. Los datos fueron analizados usando BIAevaluation 3.2, y se presentan en la figura 15 (Ab-A), figura 16 (Ab-B), figura 17 (Ab-C) y figura 18 (Ab-D). Epítopes de Bucle 2 y T20.6: El patrón de unión del péptido de esclerostina para los dos anticuerpos representativos (Ab-A y Ab-B) fue virtualmente idéntico (figura 15 y figura 16) y mostró que estos anticuerpos podrían unirse solamente al péptido AspN22.7-23.5. La diferencia única entre AspN22.7-23.5 y el resto de los péptidos de esclerostina es que AspN22.7-23.5 contiene un bucle 2 intacto. Esto muestra que Ab-A y Ab-B se unen a la región del Bucle 2 de la esclerostina definiendo así el epítope del Bucle 2 (figura 19A).

Los patrones de unión del péptido de esclerostina para Ab-C y Ab-D fueron virtualmente idénticos entre sí (figura 17 y figura 18) pero totalmente distintos de los encontrados para Ab-A y Ab-B. De los péptidos probados en este ejemplo, el péptido más diminuto, cuyos Ab-C y Ab-D se podrían unir, fue el péptido T20.6. Este resultado define el epítope T20.6 (figura 19B). Ensayo de Protección de Proteasa: El principio general de este ensayo es que la unión de Mab a la esclerostina puede dar lugar a la protección de ciertos sitios de división de proteasa específicos y esta información se puede utilizar para determinar la región de la esclerostina en donde Mab se une. Epítope "derivado T20.6 1 (nudo de cisteina + 4 brazos)": La figura 20 muestra los mapas del péptido de CLAR para un complejo de Ab-D de esclerostina humana (figura 20A: la esclerostina humana fue pre-incubada a una relación molar de 1:1 con Ab-D antes de la digestión con tripsina como se describe anteriormente) y la esclerostina humana sola (figura 20B: la esclerostina humana fue digerida con tripsina como se describe anteriormente). Los picos del péptido T19.2 y T20.6 en la figura 20A mostraron una reducción clara de su altura máxima respectiva, con respecto a la figura 20B. Esta reducción en las alturas de los picos fue acompañada por un aumento en la altura del pico de los péptidos T20 y T21-22. Estos datos indican que los residuos básicos de aminoácidos en el bucle 1 y en el bucle 3, que en ausencia de Ab-D se dividieron por tripsina para generar los péptidos T19.2 y T20.6, fueron resistentes a la división por tripsina cuando Ab-D estuvo pre-unido a la esclerostina. La presencia de T20, T20.6 y T21-22 indica que el Bucle 2 aún fue dividido eficientemente cuando Ab-D estuvo pre-unido a la esclerostina. Estos datos indican que Ab-D se une en el lado del bucle 1 y bucle 3 del epítope T20.6 así se define el epítope más pequeño "derivado T20.6 1 (nudo de cisteina + 4 brazos)" mostrado en la figura 21. Ejemplo 5 Prueba In Vivo de los Anticuerpos Monoclonales Anti-Esclerostina en Ratones Los ratones machos BDFI de cuatro semanas de edad fueron obtenidos de Charles River Laboratories (Raleigh, NC) y se colocaron en jaulas limpias, cinco animales por jaula. La temperatura ambiente fue mantenida entre 68 y 72°F, y la humedad relativa fue mantenida entre 34 y 73%. El laboratorio que alojo las jaulas tuvo un ciclo de 12 horas de luz/oscuridad y cumplió todas las especificaciones de AAALAC. Las observaciones clínicas de todos los ratones en el estudio ocurrieron una vez al día. Los anticuerpos monoclonales anti-esclerostina purificados (Ab-A figura 11; Ab-B figura 2; Ab-C figura 3; Ab-D figura 4) fueron diluidos en solución salina amortiguad con fosfato de Dulbecco estéril. Los ratones fueron inyectados con los anticuerpos anti-esclerostina o el vehículo de PBS de manera subcutánea a 21 µ? por gramo de peso corporal, dos veces por semana (lunes y jueves) a 25 mg/kg. PTH humano (1-34) fue diluido en amortiguador de PTH (0.001 N HCI, 0.15 M NaCI, 2% BSA), y se dosificó de manera subcutánea a 21 µ? por gramo de peso corporal cinco veces por semana (lunes, martes, miércoles, jueves, viernes) a 100 pg/kg como control positivo (figuras 5 y 6). El número de ratones por grupo fue N = 5 en el figura 5 y 6, y N = 6 en la figura 7. Densitometría Ósea In Vivo PIXImus La densidad mineral ósea (BMD, por sus siglas en inglés) fue determinada semanalmente en la metáfisis tibial próxima y en vértebras lumbares por Dual Energy X-ray Absorptometry periférica (pDEXA) con el sistema P1Xlmus2 de GE/Lunar Medida Systems, Madison, Wl. Una región de 25 mm2 de interés (ROI) fue colocada para incluir la superficie articular próxima, la el epífisis, y el extremo próximo en el metáfisis de la tibia. Una región de interés (ROI) fue colocada para incluir las vértebras lumbares (L1-L5). Las regiones de la tibia y lumbares próximas fueron analizadas para determinar la densidad mineral ósea total. Los promedios del grupo fueron reportados como ± Desviation Standar y comparados al grupo de tratamiento con vehículo del análisis estadístico. Análisis Estadístico El análisis estadístico fue realizado con un Dunnett's y Tukey-Kramer (usando MS Excel y JMP v.5.0, para los datos BMD). Los promedios del grupo para cada dato fueron considerados significativamente diferentes cuando el valor P fue de menos de 0.05 (P < 0.05). Actividad de Neutralización de Esclerostina de los Anticuerpos Los aumentos estadísticamente significativos en BMD con respecto al vehículo vistos para cada uno de Ab-A (figura 5), Ab-B (figura 5), Ab-C (figura 6) y Ab-D (figura 7) muestran que estos cuatro anticuerpos son anticuerpos de neutralización de esclerostina. Además estos datos muestran que, para los anticuerpos anti-esclerostina que unen esclerostina de ratón, el tratamiento y el ensayo de los ratones como se describe anteriormente, se pueden utilizar para identificar los anticuerpos de neutralización de esclerostina. Ejemplo 6 Ensayo de Detección de los Anticuerpos Que Bloquean la Unión de Un Anticuerpo a la Esclerostina Humana La esclerostina humana fue acoplada a un chip CM5 Biacore usando la química de acoplamiento de amina estándar para generar una superficie recubierta con esclerostina. 300 unidades de resonancia de esclerostina fueron acopladas a la superficie. Los anticuerpos que se probarán fueron diluidos a una concentración de 200 pg/ml en amortiguador de HBS-EP (que es 10 mM HEPES pH 7.4, 150 mM NaCI, 3 mM EDTA, 0.005% (v/v) tensioactivo P20) y después se mezclaron uno por uno a una relación molar (en una base del sitio de unión) para generar la mezcla de prueba. Esta mezcla de prueba contuvo así cada anticuerpo a una concentración de 100 pg/ml (1.3 um en una base del sitio de unión). También se prepararon las soluciones separadas que contienen cada uno de los anticuerpos en la mezcla de la prueba sola. Estas soluciones contuvieron los anticuerpos individuales en amortiguador de HBS-EP a una concentración de 100 g/ml (1.3 um en una base del sitio de unión). 20 µ? de la mezcla de prueba pasaron sobre el chip recubierto con esclerostina a un caudal de 10 µ?/min y se registro la cantidad de unión. El chip entonces fue tratado con dos pulsos de 60 segundos de 30 mM HCI para eliminar todo el anticuerpo unido. Una solución que contiene solamente uno de los anticuerpos de la mezcla de prueba (a 1.3 µ? en el mismo amortiguador que la mezcla de prueba sobre una base del sitio de unión) entonces de hizo pasar sobre el chip de manera similar a la de la mezcla de prueba y se registró la cantidad de unión. El chip fue tratado nuevamente para eliminar todo el anticuerpo unido y finalmente una solución que contiene el otro anticuerpo de la mezcla de prueba solamente (a 1.3 µ? en el mismo amortiguador que la mezcla de prueba sobre una base del sitio de unión) se hizo pasar sobre el chip y se registró la cantidad de unión .

La siguiente tabla muestra los resultados del ensayo de bloqueo transversal en un intervalo de diferentes anticuerpos. Los valores en cada cuadro de la tabla representan la cantidad de unión (en RU) considerada cuando los anticuerpos (a 1.3 µ? sobre una base del sitio de unión) o amortiguador indicado en la fila superior de la tabla se mezclan con los anticuerpos (a 1.3 µ? sobre una base del sitio de unión) o amortiguador indicado en la primera columna de la tabla.

Usando el valor de unión promedio (en RU) para cada combinación de anticuerpos en la tabla anterior (puesto que cada combinación aparece dos veces) es posible calcular el porcentaje de unión teórica mostrada por cada combinación de anticuerpos. La unión teórica es calculada como la suma de los valores promedios para los componentes de cada mezcla de prueba cuando se prueban solos (es decir, anticuerpo y amortiguador).

Amortiguador Ab-4 Ab-13 Ab-A Ab-3 Ab-19 Amortiguador Ab-4 90.75 60.45 85.4 60.75 Ab-13 96.9 58.0 97.0 Ab-A 93.5 65.0 Ab-3 94.4 Ab-19 De los datos anteriores está claro que Ab-4, Ab-A y Ab-19 se bloquean transversalmente entre sí. Similarmente Ab-13 y Ab-3 se bloquean transversalmente. EJEMPLO 7 Ensayo de bloqueo transversal basado en ELISA Los volúmenes de líquido usados en este ejemplo serían los usados comúnmente en los ELISAs con placas de 96 pozos (por ejemplo 50-200 µ?/????). Se asume que Ab-X y Ab-Y, en este ejemplo tienen los pesos moleculares de aproximadamente 145 Kd y que tienen 2 sitios de unión de esclerostina por molécula de anticuerpo. Un anticuerpo anti-esclerostina (Ab-X) está recubierto (por ejemplo 50 µ de 1 pg/ml) sobre una placa de ELISA de 96 pozos [por ejemplo Corning 96 Well EIA/RIA Fiat Bottom Microplate (Producto # 3590), Corning Inc., Acton, MA] durante por lo menos una hora. Después de esta etapa de recubrimiento, se elimina la solución del anticuerpo, la placa se lava una vez o dos veces con la solución de lavado (por ejemplo, PBS y 0.05% Tween 20) y después se bloquea usando una solución de bloqueo apropiada (por ejemplo, PBS, 1% BSA, 1% suero de cabra y 0.5% Tween 20) y los procedimientos conocidos en la técnica. La solución de bloqueo de entonces se elimina de la placa de ELISA y un segundo anticuerpo anti-esclerostina (Ab-Y), que se prueba para determinar su capacidad de bloquear transversalmente el anticuerpo recubierto, se agrega en exceso (por ejemplo 50 µ? de 10 pg/ml) en la solución de bloqueo a los pozos apropiados de la placa de ELISA. Después de esto, entonces se agrega una cantidad limitada (por ejemplo 50 µ? de 10 ng/ml) de esclerostina en la solución de bloqueo a los pozos apropiados y la placa se incuba durante por lo menos una hora a 5 temperatura ambiente mientras se agita. La placa entonces se lava 2-4 veces con la solución de lavado. Una cantidad apropiada de un reactivo de detección de esclerostina [por ejemplo, anticuerpo policlonal biotinilado anti-esclerostina que ha sido convertido a complejo previamente con una cantidad apropiada de I0 un conjugado de peroxidasa de rábano picante-estreptavidina (HRP)] en la solución de bloqueo se agrega a la placa de ELISA y se incuba durante por lo menos una hora a temperatura ambiente. La placa entonces se lava por lo menos 4 veces con la solución de lavado y se desarrolla con un reactivo apropiado [por ejemplo I5 sustratos de HRP tal como TMB (colorimétrico) o varios sustratos luminiscentes de HRP]. La señal base para el ensayo se define como la señal obtenida en los pozos con el anticuerpo recubierto (en este caso Ab-X), el segundo anticuerpo en fase de solución (en este caso Ab-Y), solamente amortiguador de esclerostina (es 0 decir sin esclerostina) y los reactivo de detección de esclerostina. La señal de control positivo para el ensayo se define como la señal obtenida en los pozos con el anticuerpo recubierto (en este caso Ab-X), solamente el segundo amortiguador de anticuerpo en fase de solución (es decir ningún segundo anticuerpo en fase de 5 solución), esclerostina y reactivos de detección de esclerostina.

El ensayo de ELISA necesita realizarse de tal manera para hacer que la señal de control positiva sea por lo menos 6 veces la señal base. Para evitar cualquier anomalía (por ejemplo afinidades significativamente diferentes entre Ab-X y Ab-Y para la esclerostina) resultantes de la elección del anticuerpo que se utiliza como el anticuerpo de recubrimiento y que se utiliza como el segundo anticuerpo (competidor), el ensayo de bloqueo transversal necesita realizarse en dos formatos: 1) el formato 1 es donde Ab-X es el anticuerpo que está recubierto sobre la placa de ELISA y Ab-Y es el anticuerpo competidor que está en la solución y 2) el formato 2 es donde Ab-Y es el anticuerpo que está recubierto sobre la placa de ELISA y Ab-X es el anticuerpo competidor que está en la solución. Ab-X y Ab-Y son definidos como bloqueadores transversales si, en el formato 1 o formato 2, el anticuerpo anti-esclerostina en fase de solución puede causar una reducción de entre 60% y 100%, específicamente entre 70% y 100%, y más específicamente entre 80% y 100%, de la señal de detección de esclerostina (es decir, la cantidad de unión de esclerostina por el anticuerpo recubierto) con respecto a la señal de detección de esclerostina obtenida en ausencia del anticuerpo anti-esclerostina en fase de solución (es decir los pozos control positivo). En el caso que una versión etiquetada de esclerostina se utilice en el ELISA, tal como esclerostina etiquetada con His terminal N (R&D Systems, Minneapolis, MN, E.E.U.U.; 2005 Cat# 1406-ST-025) entonces un tipo apropiado de reactivo de detección de esclerostina incluiría un anticuerpo anti-His etiquetado con HRP. Además de usar esclerostina etiquetada con His terminal N, también se puede utilizar esclerostina etiquetada con His terminal C. Además, varias etiquetas y combinaciones de proteína de unión etiquetada que se conocen en la técnica se pueden utilizar en este ensayo de bloqueo transversal basado en ELISA (por ejemplo, etiqueta Ha con los anticuerpos anti-HA; etiqueta FLAG con los anticuerpos anti-FLAG; etiqueta de biotina con estreptavidina) . Ejemplo 8 Ensayo de la Mineralización Basado en Células Para Identificar los Agentes Que Pueden Antagonizar la Actividad de la Esclerostina Introducción La mineralización por las células originadas del osteoblastos en cultivo, células primarias o líneas celulares, se utiliza como un modelo in vitro de la formación ósea. La mineralización toma de aproximadamente una a seis semanas en ocurrir comenzando con la inducción de la diferenciación de las células de origen osteoblástico por uno o más agentes de diferenciación. La secuencia total de eventos implica la proliferación celular, diferenciación, producción de matriz extracelular, maduración de matriz y finalmente la sedimentación de minerales, que se refiere a la cristalización y/o sedimentación del fosfato de calcio. Esta secuencia de eventos que inicia con la proliferación y diferenciación celular, y que concluye con la sedimentación de minerales, es referida en la presente como mineralización. La medición del calcio (mineral) es el resultado del ensayo. La sedimentación de minerales tiene una característica biofísica fuerte, una vez que los minerales se "siembran" comienza a formarse, la cantidad total de mineral que será depositada en el cultivo entero se puede depositar a veces absolutamente rápido, por ejemplo dentro de algunos días después de lo anterior. La duración y el grado de sedimentación mineral en cultivo son influenciados, en parte, por las células de origen osteoblástico/línea celular particulares que se utilizan, condiciones de crecimiento, elección de los agentes de diferenciación y el número de porción particular del suero usado en el medio de cultivo celular. Para los cultivos de mineralización de células de origen osteoblástico/línea celular, por lo menos de ocho a quince porciones de suero de más de un proveedor se deben probar para identificar una porción de suero particular que permita que ocurra la mineralización. Las células MC3T3-E1 (Sudo H y colaboradores In vitro differentiation and calcification in a new clonal osteogenic cell Une derived from newborn mouse calvaría. J Cell Biol 96:191-198) y los subclones de la línea celular original pueden formar el mineral en el cultivo durante el crecimiento en presencia de los agentes de diferenciación. Tales subclones incluyen MC3T3-E1-BF (Smith E, Redman R, Logg C, Coetzee G, Kasahara N, Frenkel B. 2000. Glucocorticoids inhibit developmental stage-specific osteoblast cell cycle. J. Biol. Chem. 275:19992-20001). Identificación de los Anticuerpos de Neutralización de Esclerostina Las células MC3T3-E1 -BF fueron utilizadas para el ensayo de mineralización. El ácido ascórbico y B-glicerofosfato fueron utilizados para inducir la diferenciación de células MC3T3-E1 -BF que conduce a la sedimentación mineral. El protocolo de ensayo específico, en el formato de 96 pozos, implicó las células de planta un miércoles, seguido por siete cambios de medios (como se describe con más detalle abajo) durante un período de 12 días con la mayoría de la sedimentación mineral que ocurre en aproximadamente las ultimas dieciocho horas de la noche (por ejemplo, la noche del domingo al lunes). Para cualquier tratamiento dado, fueron utilizados 3 pozos (N = 3). La duración y el grado específicos de la sedimentación mineral pueden variar dependiendo, en parte, del número de porción de suero particular que es utilizada. Los experimentos de control permitirán que tales variables sean consideradas, al igual que sean generalmente bien conocidas en la técnica de la experimentación de cultivo celular. En este sistema de ensayo la esclerostina inhibió uno o más de la secuencia de eventos que conducen a y que incluyen la sedimentación mineral (es decir, esclerostina inhibe la mineralización). Los anticuerpos anti-esclerostina que pueden neutralizar la actividad inhibidora de la esclerostina permitieron la mineralización de cultivo en presencia de la esclerostina tal que hubiera un aumento estadísticamente significativo en la sedimentación del fosfato de calcio (medido como calcio) con respecto a la cantidad de calcio medida en el grupo de tratamiento de solamente esclerostina (es decir, sin anticuerpo). Para el ensayo estadístico (usando MS Excel y JMP) un ANOVA de una etapa seguido por la comparación de Dunnett, fue utilizado para determinar las diferencias entre los grupos. Los promedios del grupo para cada conjunto de datos fueron considerados significativamente diferentes cuando el valor P fue de menos de 0.05 (P < 0.05). Un resultado representativo de la realización de este ensayo se muestra en la figura 22. En ausencia de la esclerostina recombinante de ratón, la secuencia de eventos que conduce a e incluye la sedimentación mineral, procedió normalmente. Los niveles de calcio en cada grupo de tratamiento se muestran como promedios ± Estándar Error of the Mean (SEM). En este experimento ejemplar los niveles de calcio del ensayo de calcio fueron ~31 pg/ml. Sin embargo, la adición de la esclerostina recombinante de ratón causó la inhibición de la mineralización, y el calcio fue reducido a -85%. La adición del anticuerpo monoclonal anti-esclerostina Ab-19 o Ab-4 junto con la esclerostina recombinante dio lugar a un aumento estadísticamente significativo de la sedimentación mineral, con respecto al grupo de solamente esclerostina, debido a que la actividad inhibidora de la esclerostina fue neutralizada por cualquier anticuerpo. Los resultados de este experimento indican que Ab-19 y Ab-4 son anticuerpos monoclonales de neutralización de esclerostina (Mabs). La figura 23 muestra un resultado muy similar usando la esclerostina humana recombinante y dos Mabs anti-esclerostina humanizados. La figura 24 también muestra un resultado muy similar usando la esclerostina humana recombinante y Mabs anti-esclerostina de ratón y humanizados según lo indicado. Los anticuerpos usados para los experimentos mostrados en el figura 22, 23 y 24 tienen pesos moleculares de aproximadamente 145 Kd y tienen 2 sitios de unión de esclerostina por molécula de anticuerpo. Un protocolo detallado del cultivo de células MC3T3-E1-BF se describe más adelante. Reactivos y Medios Reactivos Compañía # de catalogo Alpha-MEM Gibco-lnvitrogen 12571-048 Ácido ascórbico Sigma A4544 Beta-glicerofosfato Sigma G6376 100X PenStrepGlutamine Gibco-lnvitrogen 10378-016 Dimetilsufóxido (DMSO) Sigma D5879 o D2650 Suero bovino fetal (FBS) Cansera CS-C08-500 (lote # SF50310) o suero bovino fetal (FBS) TerraCell Int. CS-C08-1000A (lote # SF20308) Alfa-MEM se fabrica generalmente con una fecha de caducidad de 1 año. El Alfa-MEM que no tuvo una antigüedad de 6 meses después de la fabricación fue utilizado para la cultivo celular. Medio de Expansión (Alfa-MEM/ 10% FBS/PenStrepGlu) fue preparado como sigue: Una botella de 500 mi de FBS fue deshelada y esterilizada por a través de un filtro de 0.22 micrones. 100 mis de este FBS fueron agregados a 1 litro de Alfa-MEM seguido por la adición de 10 mis de 100x PenStrepGlutamine. FBS sin usar fue sometido a alícuotas y se volvió a congelar para un uso posterior. Medio de Diferenciación (Alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu, + 50 pg/ml ácido ascórbico, + 10 mM beta-glicerofosfato) fue preparado como sigue: 100 mis del medio de diferenciación fueron preparados por la complementacion de 100 mis de medio de extensión con ácido ascórbico y beta-glicerofosfato como sigue: Conc. Base Volumen Conc. final (ver abajo) Ácido ascórbico 10mg/ml 0.5 mis 100 gml(50 g/ml + 50 g/ml) ß-glicerofosfato 1 M 1.0 mis 10 mM El medio de diferenciación fue hecho por medio de la complementación del medio solamente el día en que el medio de diferenciación se iba utilizar para la cultivo celular. La concentración final de ácido ascórbico en medio de diferenciación es de 100 pg/ml debido a que Alpha-MEM ya contiene 50 pg/ml de ácido ascórbico. La solución original de ácido ascórbico (10 mg/ml) fue hecha y se sometió a alícuotas para congelarse a -80°C. Cada alícuota se utilizó solamente una vez (es decir no se volvió a congelar). La solución madre de beta-glicerofosfato (1 M) fue hecha y sometida a alícuotas para congelarse a -20°C. Cada alícuota fue congelada y deshelada un máximo de 5 veces antes de eliminarse.

Cultivo Celular para la Expansión de las Células MC3T3-E1-BF. El cultivo celular fue realizado a 37°C y 5% C02. Un banco celular fue generado para los propósitos de ensayo de los anticuerpos de neutralización de esclerostina. El banco celular fue creado como sigue: Un frasco de células MC3T3-E1-BF congeladas fue deshelado por agitación en un baño de agua a 37°C. Las células desheladas fueron puestas en 10 mis de medio de expansión (alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu) en un tubo de 50 mi y se giro suavemente durante 5 minutos. Las células entonces fueron suspendidas nuevamente en 4 mis de Alpha-MEM/ 0%FBS/PenStrepGlu. Después de determinar el número de células usando azul tripán y un hemacitómetro, 1 x 106 células se colocaron en placas en 50 mis de medio de Alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu en un matraz T175. Cuando este paso fue confluente (en aproximadamente 7 días), las células fueron sometidas a tripsina con tripsina/EDTA (0.05% tripsina; 0.53 mM EDTA), se giro suavemente durante 5 minutos y después se volvió a suspender en 5 mis de Alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu. Después de determinar el número de células usando azul tripán y el hemacitómetro, las células se colocaron en placas a 1 x 106 células en 50 mis de medio de Alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu por matraz T175. El número de matraces T175 usados para colocar en placas en este punto, dependió del número total de células disponible y del número deseado de matraces que se debían llevar a la siguiente etapa. Las células adicionales se congelaron a 1-2x106 células vivas/ml en 90% FBS/10% DMSO. Cuando este paso fue confluente (aproximadamente 3-4 días), las células fueron sometidas a tripsina con tripsina/EDTA (0.05% tripsina; 0.53 mM EDTA), se giraron suavemente durante 5 minutos y después se suspendieron nuevamente en 5 mis de Alpha-MEM/10% FBS/PenStrepGlu. Después de determinar el número de células usando azul tripán y el hemacitómetro, las células fueron colocadas en placas a 1 x 106 células en 50 mis de medio de Alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu por frasco T175. El número de matraces T175 usados para colocar en placas en este punto dependió del número total de células disponibles y del número deseado de matraces que debían llevarse a la siguiente etapa. Las células adicionales se congelaron a 12x106 células vivas/ml en 90% FBS/10% DMSO. Cuando este paso fue confluente (aproximadamente 3-4 días), las células fueron sometidas a tripsina con tripsina/EDTA (0.05% tripsina; 0.53 mM EDTA), se giraron suavemente durante 5 minutos y después se suspendieron nuevamente en 5 mis de Alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu. Después de determinar el número de células usando azul tripán y hemacitómetro, las células fueron colocadas en placas a 1 x 106 células en 50 mis de medio de alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu por matraz T175. El número de matraces T175 usados para colocar en placas en este punto dependió del número total de células disponibles y del número deseado de matraces que debían llevarse a la siguiente etapa. Las células adicionales se congelaron a 12x106 células vivas/ml en 90%FBS/10%DMSO. Cuando este paso fue confluente (aproximadamente 3-4 días), las células fueron sometidas a tripsina con tripsina/EDTA (0.05% tripsina; 0.53 mM EDTA), se hicieron girar suavemente durante 5 minutos y después se suspendieron nuevamente en 5 mis de Alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu. Después de determinar el número de células usando azul tripán y el hemacitómetro, las células se congelaron a 1-2x106 células vivas/ml en 90%FBS/10%DMSO. Este "paso final" de las células congeladas fue el paso que fue utilizado para el ensayo de detección.

Cultivo Celular para Mineralizar las Células MC3T3-E1 -BF. El cultivo celular fue realizado a 37°C y 5% C02- Es deseable minimizar la temperatura y el % de fluctuaciones de C02 durante el procedimiento de cultivo celular de mineralización. Esto puede lograrse minimizando el tiempo que tardan las placas en salir de la incubadora durante la alimentación y también minimizando el número de veces que la puerta de la incubadora se abre y cierra durante el procedimiento de cultivo celular de mineralización. En este aspecto puede ser ventajoso tener una incubadora de cultivo tisular que se dedica exclusivamente al cultivo celular de mineralización (y así no se abre y cierra más de lo necesario). Un número apropiado de frascos de "paso final" preparados como se describe anteriormente fueron deshelados por agitación en un baño de agua a 37°C. Las células desheladas fueron puestas en 10 mis de medio de expansión (Alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu) en un tubo de 50 mi y se giraron suavemente durante 5 minutos. Las células entonces fueron suspendidas nuevamente en 4 mis de Alpha-MEM/10%FBS/PenStrepGlu. Después de determinar el número de células mediante azul tripán y el hemacitómetro, 2500 células fueron colocadas en 200 microlitros de medio de expansión por pozo en placas de 96 pozos recubiertas con colágeno I (Becton Dickinson Labware, Cat# 354407). Para evitar un efecto que limite la placa de mineralización, las células no fueron colocadas en la fila/columna exterior hasta el final alrededor de la placa. En su lugar 200 microlitros de PBS fueron agregados a estos pozos. Procedimiento de Cultivo Celular Ejemplar En el siguiente procedimiento, se indica que el día de inicio de la colocación en placas de las células es el miércoles. Si un día diferente de la semana se utiliza como el día de inicio de la colocación en placas de las células, ese día se activara el horario diario para eliminar y agregar el medio durante el proceso entero según lo indicado abajo. Por ejemplo, si las células se colocan en placas el martes, el medios no se deben eliminar y ni se debe agregar el primer viernes y sábado, ni el segundo viernes y sábado. Con un inicio el martes, las placas serían preparadas para el ensayo de calcio el último domingo. Las células se colocaron en placas el miércoles a 2500 células en 200 µ? de medio de expansión. El jueves todos el medio de expansión fue eliminado y 200 µ? de medio de diferenciación se agregaron. El viernes 100 µ? de medio fue eliminado y fue agregado 100 µ? de medio de diferenciación reciente. El lunes 100 µ? de medio fueron eliminados y 100 µ? de medio de diferenciación reciente fueron agregados. El martes 100 µ? de medio fueron eliminados y 100 µ? de medio de diferenciación reciente fueron agregados. El miércoles 100 µ? de medio fueron eliminados y 100 µ? de medio de diferenciación reciente fueron agregados. El jueves 100 µ? de medio fueron eliminados y 100 µ? de medio de diferenciación reciente fueron agregados. El viernes 100 µ? de medio fueron eliminados y 100 µ? de medio de diferenciación reciente fueron agregados. El lunes siguiente las placas se prepararon para el ensayo de calcio como sigue: Las placas se lavaron una vez con 10 mM Tris, HCI pH 7-8.

Trabajando bajo una capucha para humo, 200 µ? de 0.5 N HCI fueron agregados por pozo. Las placas entonces se congelaron a -80°C. Justo antes de medir el calcio, las placas se congelaron-deshelaron dos veces, y entonces la trituración con una pipeta de varios canales se utilizó para dispersar el contenido de la placa. El contenido de la placa entonces se dejó establecerse a 4°C durante 30 minutos en cuyo punto se eliminó una cantidad apropiada de supernadante para medir el calcio usando un kit de calcio disponible comercialmente. Un kit ejemplar y no limitante es el Calcium (CPC) Liquicolor, Cat No. 0150-250, Stanbio Laboratory, Boerne, TX. En este ensayo basado en células, la esclerostina inhibe una o más de la secuencia de eventos que conducen a y que incluyen la sedimentación mineral (es decir la esclerostina inhibe la mineralización). Así, en los experimentos donde la esclerostina fue incluido en el experimento de cultivo celular particular, la esclerostina recombinante fue agregada al medio que comienza el primer jueves y cada día de alimentación después del mismo. En los casos donde un anticuerpo monoclonal anti-esclerostina (Mab) fue probado para determinar su capacidad de neutralizar la esclerostina, es decir permite la mineralización neutralizando la capacidad de la esclerostina de inhibir la mineralización, el Mab fue agregado al medio que comienza el primer jueves y cada día de alimentación después del mismo. De acuerdo al protocolo, esto fue logrado como sigue: el Mab fue pre-incubado con esclerostina recombinante en el medio de diferenciación durante 45-60 minutos a 37°C y entonces este medio fue utilizado para alimentar las células. Se describe anteriormente un protocolo de mineralización de 12 días para las células MC3T3-E1-BF. Usar los mismos reactivos y el protocolo de alimentación, las células originales MC3T3-E1 (Sudo H, Kodama H-A, Amagai Y, Yamamoto S, Kasai S. 1983. In vitro differentiation and calcification in a new clonal osteogenic cell Une derived from newborn mouse calvaría. J Cell Biol 96:191-198) que obtuvimos del banco RIKEN Cell Bank (RCB 1126, RIKEN BioResource, centro 3-1-1 Koyadai, Tsukuba-shi, Ibaraki 305-0074 Japón) tardaron más en mineralizarse (20 días totales para la mineralización) que las células MC3T3-E1-BF. La mineralización de las células originales MC3T3-E1 fue inhibida por la esclerostina recombinante y esta inhibición fue bloqueada usando un anticuerpo de neutralización de esclerostina.

Ejemplo 9 El Anticuerpo Anti-Esclerostina Protege Contra la Pérdida Ósea Inducida Por la Inflamación en el Modelo de Transferencia CD4 CD45RBHI de Colitis en Ratones SCID Breve Descripción del Modelo La inyección del subconjunto de CD45RBalt0 de células CD4 + T en ratones SCID C.B-17 da lugar a la inflamación intestinal crónica con las características similares a las de la enfermedad humana de intestino inflamatorio (IBD). La diarrea y la enfermedad debilitante se observa 3-5 semanas después de la transferencia celular con la infiltración severa de leucocitos en los dos puntos acompañada por hiperplasia celular epitelial y formación de granuloma. Los ratones scid C-B-17 que reciben el subconjunto recíproco de células CD4+, que expresan CD45RBbai°, no exhiben colitis y tienen un aumento de peso indistinguible de los ratones scid sin inyectar. Además de los síntomas de colitis, el modelo de transferencia de células CD4 + CD45RBalt0 T de la colitis está acompañado por una reducción en la densidad mineral ósea (BMD), se cree principalmente que es a través de los mecanismos inflamatorios en lugar de a través de una mala absorción dietética (Byrne, F. R. y colaboradores, Gut 54:78-86, 2005). Inducción de la Colitis y Pérdida Ósea Inducida por la Inflamación Los bazos fueron extraídos de ratones balb/c hembra y se alteraron a través de un tamiz celular de 70 µ?t?. La población de CD4+ entonces se enriqueció por la selección negativa con Dynabeads usando anticuerpos contra B220, MAC-1, CD8 y l-Ad. La población enriquecida entonces se mancho con anti-CD4 conjugado con FITC y anti-CD45RB conjugado con PE y se fraccionó en poblaciones CD4 + CD45RBalt0 y CD4 + CD45Rbaj0 por clasificación de dos colores en un Moflo (Dakocytomation) . Las poblaciones CD45RBait0 y de CD45RBbaj0 se definieron como el 40% de manchado más brillante y el 20% de manchado más opaco de las células CD4+ respectivamente: 5 x 105 células entonces se inyectaron de manera intraperitoneal en ratones scid C.B-17 el día 0 y el desarrollo de la colitis fue monitoreado a través del aspecto de las heces suaves o diarrea y perdida de peso. Las mediciones de la densidad mineral ósea fueron tomadas al final del estudio (día 88). Efecto del Tratamiento Anti-Esclerostina Sobre los Síntomas de la Colitis y BMD Ab-A IgG fue dosificado a 10 mg/kg s.c. a partir del día antes de la transferencia de las células CD4 + CD45RBalt0 y con respecto a los ratones que recibieron el anticuerpo de control negativo 101.4 también dosificado a 10 mg/kg s.c. Los anticuerpos se dosificaron semanalmente después de lo anterior. Un grupo de ratones que recibieron las células no patógenas CD4 + CD45RBbaj0 y se dosificaron con 10 mg/kg de 101.4, se estudiaron como un control. Al final del estudio (día 88) la densidad mineral ósea fue medida y las secciones del colon fueron tomadas para el ensayo de infiltración celular y de determino el daño histológico. a) No Hay Efecto Sobre los Síntomas Comunes de la Colitis Los síntomas de ¡a colitis tal como pérdida de peso e infiltración de células inflamatorias en el colon no fueron afectados por el tratamiento con Ab-A. Similarmente no hubo mejora del daño histológico al colon después del tratamiento con Ab-A. b) Inhibición de la Pérdida Inducida por la Inflamación de la Densidad Mineral Ósea. El día 88 después de la transferencia celular en ratones scid C.B- 7, la densidad mineral ósea fue medida (BMD total, BMD vertebral y BMD femoral). En comparación a los ratones de control que recibieron las células no patógenas CD4 + CD45RBbai°, los ratones que recibieron las células CD4+ CD45RBalt0 T y el anticuerpo de control negativo 101.4 habían reducido la densidad mineral ósea, según lo mostrado en la figura 25. En contraste, no se observó ninguna reducción en BMD después del tratamiento con Ab-A. Al final total, las mediciones de BMD vertebrales y femorales fueron significativamente más altas en los ratones que recibieron las células CD4+ CD45RBalt0 T y tratados con Ab-A que los ratones que recibieron las células CD4 + CD45RBalto T y tratados con 101.4 (P<0.001 por la prueba de comparación múltiple Bonferroni).

Ejemplo 10 Determinación Basada en KinExa de Afinidad (KD) de Anticuerpos Anti-Esclerostina para Esclerostina Humana La afinidad de varios anticuerpos anti-esclerostina a la esclerostina humana fue determinada por un ensayo de unión de equilibrio de solución usando KinExA® 3000 (Sapidyne Instruments Inc., Boise, ID). Para estas mediciones, los gránulos Reacti-Gel 6x (Pierce, Rockford, IL) fueron recubiertos previamente con 40 Mg/ml de esclerostina humana en 50 mM Na2C03, pH 9.6 a 4°C durante la noche. Los gránulos entonces fueron bloqueados con 1 mg/ml BSA en 1 M Tris-HCI, pH 7.5 a 4°C durante dos horas. 10 pM, 30 pM, o 100 pM del anticuerpo fueron mezclados con varias concentraciones de esclerostina humana, que oscilan en la concentración de 0.1 pM a 1 nM y se equilibraron a temperatura ambiente durante más de 8 horas en PBS con 0.1 mg/ml BSA y 0.005% de P20. Las mezclas entonces se hicieron pasar sobre los gránulos recubiertos con esclerostina humana. La cantidad de anticuerpo anti-esclerostina unido al gránulo, fue cuantificada usando anticuerpos cabra-anti-ratón-lgG etiquetado con Cy5 o anticuerpos fluorescentes cabra-anti-humano-lgG etiquetados con Cy5 (Jackson Immuno Research, West Grove, PA) para las muestras del anticuerpo de ratón o humano, respectivamente. La cantidad de señal fluorescente medida fue proporcional a la concentración del anticuerpo anti-esclerostina libre en cada mezcla de reacción en equilibrio.

La constante de equilibrio de disociación (KD) fue obtenida de la regresión no lineal de las curvas de competencia de usando un modelo de unión homogénea de uno sitio de n-curvas proporcionado en el software KinExA Pro. Los resultados de los ensayo KinExA para los anticuerpos seleccionados se presentan brevemente en la siguiente tabla. Anticuerpos Antígenos KD (pM) 95% de i ntervalo confidencia Ab- 13 Esclerostina humano 0.6 0 .4 - 0.8 pM Ab- 4 Esclerostina humano 3 1 .8 - 4 pM Ab- 19 Esclerostina humano 3 1 .7 - 4 pM Ab- 14 Esclerostina humano 1 0 .5 - 2 pM Ab- 5 Esclerostina humano 6 4 .3 - 8 pM Ab- 23 Esclerostina humano 4 2 .1 - 8 pM Ejemplo 11 Método de BIACORE para Determinar la Afinidad de Anticuerpos Anti-Esclerostina Humanizados para Esclerostina Humana. La tecnología BIAcore monitorea la unión entre las biomoléculas en tiempo real y sin el requisito para el etiquetado. Uno de los interactuantes, llamado ligando, se inmoviliza directamente o se captura en la superficie inmovilizada mientras que el otro, llamado añalito, fluye en la solución sobre la superficie capturada. El sensor detecta el cambio en la masa de la superficie del sensor mientras que el analito se une al ligando para formar un complejo en la superficie. Esto corresponde al proceso de asociación. Se monitorea el proceso de disociación cuando el analito es remplazado por el amortiguador. En el ensayo Biacore de afinidad, el ligando es el anticuerpo anti-esclerostina y el analito es la esclerostina . Instrumento Biacore ® 3000, Biacore AB, Uppsala, Suecia Chip Sensor CM5 (grado de investigación) número de catálogo: BR-1001-14, Biacore Ab, Uppsala, Suecia. Los chips se almacenan a 4°C. Solución BIAnormalising 70% (p/p) glicerol. Parte del kit BIAmaintenance número de catalogo: BR-1002-51, Biacore Ab, Uppsala, Suecia. El kit BIAmaintenance fue almacenado a 4°C. Kit de Acoplamiento de Amina Número de Catálogo: BR-1000-50, Biacore Ab, Uppsala, Suecia. Clorhidrato de etilo-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC). Hecho a 75 mg/ml en agua destilada y almacenado en 200 µ de alícuotas a -70°C. N-hidroxisuccinimida (NHS). Hecho a 11.5 mg/ml en agua destilada y almacenado en 200 µ? de alícuotas a -70°C. 1 M clorhidrato de etanolamina-NaOH pH 8.5. Almacenado en 200 µ? de alícuotas a -70°. Amortiguadores Ejecutar el amortiguador para inmovilizar el anticuerpo capturado: HBS-EP (es 0.01 M HEPES pH 7.4, 0.15 M NaCI, 3 mM EDTA, 0.005% tensioactivo P20). Número de Catálogo: BR-1001-88, Biacore Ab, Uppsala, Suecia. Amortiguador almacenado a 4°C. Amortiguador de inmovilización: Acetato 5.0 (es 10 mM acetato de sodio pH 5.0). Número de catálogo: BR-1003-5 , Biacore Ab, Uppsala, Suecia. Amortiguador almacenado a 4°C. Ejecutar el amortiguador para el ensayo de unión: HBS-EP (es 0.01 M HEPES pH 7.4, 0.15 M NaCI, 3 mM EDTA, 0.005% tensioactivo P20, número de catálogo: BR-1001-88, Biacore AB, Uppsala, Suecia) con CM-Dextran agregado en 1 mg/ml (número de catálogo 27560, Fluka BioChemika, Buchs, Suiza).

Amortiguador almacenado a 4°C. Captura de Ligando Cabra anti-humano IgG del fragmento de AffiniPure F(ab')2 fragmento Fe especifico. Jackson ImmunoResearch Inc.

(Pennsilvania, E.E.U.U.) Número de catálogo: 109-006-098.

Reactivo almacenado a 4°C. Ligando Anticuerpos de esclerostina anti-humano humanizados Ab5, Ab 14 y Ab20.

Analito Esclerostina humana recombinante. Alícuotas almacenadas a -70°C y desheladas una vez para cada ensayo. Solución de Regeneración 40 mM HCI preparados por dilusión con agua destilada de una solución original de 11.6 M (BDH, Poo!e, Inglaterra. Número de catálogo: 101254H). 5 mM NaOH se prepararon por dilusión con agua destilada de una solución original de 50 mM. Número de catálogo: BR-1003-58, Biacore Ab, Uppsala, Suecia. Método de Ensayo El formato del ensayo fue la captura del anticuerpo anti-esclerostina por IgG-Fc anti-humano inmovilizado después por al titulación de la esclerostina sobre la superficie capturada. Un ejemplo del procedimiento se da abajo: BIA (Biamolecular Interaction Analysis) fue realizado usando un BIAcore 3000 (BIAcore AB). El cabra anti-humano IgG del fragmento Affinipure F(ab')2, fragmento Fe específico (Jackson ImmunoResearch) fue inmovilizado en un chip del sensor CM5 vía la química de acoplamiento de amina a un nivel de captura de =4000 unidades de respuesta (RUs). El amortiguador de HBS-EP (10 mM HEPES pH 7.4, 0.15 M NaCI, 3 mM EPTA, 0.005% tensioactivo P20, BIAcore AB) que contienen 1 mg/ml de CM-Dextran, fue utilizado como el amortiguador de realización con un caudal de 10 µ?/min. Una inyección de 10 µ? de anticuerpo anti-esclerostina en ~5 pg/ml, se utilizó para la captura mediante IgG-Fc anti-humano inmovilizado. Los niveles de captura del anticuerpo fueron comúnmente de 100-200 RU. La esclerostina fue titulada sobre el anticuerpo anti-esclerostina capturado a varias concentraciones a un caudal de 30 µ?/min. La superficie fue regenerada por dos inyecciones de 10 µ? de 40 mM HCI, seguidas por una inyección de 5 µ? de 5 mM NaOH a un caudal de 10 µ?/min. Las curvas de unión de sustracción base fueron analizadas usando el software BIAevaluation (versión 3.2) después de los procedimientos estándares. Los parámetros cinéticos fueron determinados a partir del algoritmo apropiado. Los datos cinéticos y las constantes calculadas de disociación se dan en la tabla 2. TABLA 2: Afinidad de los Anticuerpos Anti-esclerostina para la Esclerostina Ejemplo 12 Prueba In Vivo de los Anticuerpos Monoclonales Anti-Esclerostina en Monos Cynomolgous Treinta y tres monos Cynomolgus hembra( acaca fascicularis) , de aproximadamente 3-5 años de edad, fueron utilizados en este estudio de 2 meses. El estudio contuvo 11 grupos: Grupo 1: vehículo (N = 4) Grupo 2: Ab-23 (N = 2, dosis de 3 mg/kg) Grupo 3: Ab-23 (N = 3, dosis de 10 mg/kg) Grupo 4: Ab-23 (N = 3, dosifican de 30 mg/kg) Grupo 5: Ab-5 (N = 3, dosis de 3 mg/kg) Grupo 6: Ab-5 (N = 3, dosis de 10 mg/kg) Grupo 7: Ab-5 (N = 3, dosis de 30 mg/kg) Grupo 8: Ab-14 (N = 3, dosis de 3 mg/kg) Grupo 9: Ab-14 (N = 3, dosis de 10 mg/kg) Grupo 10: Ab-14 (N = 3, dosis de 30 mg/kg) Grupo 11: hormona paratiroides (1-34) [PTH (1-34)] (N = 3, dosis de 0 pg/kg) Todas las dosificaciones fueron subcutáneas. PTH (1-34) fue dosificado diariamente, los anticuerpos monoclonales (Mabs) se dosificaron dos veces (la primera dosis al principio del estudio y la segunda dosis en el punto de tiempo de un mes). Para determinar los parámetros óseos (por ejemplo densidad mineral ósea) pQCT (tomografía computado cuantitativa periférica) y las exploraciones por DXA (absorciometría de rayos X de energía dual) fueron realizadas antes de iniciar el estudio (para obtener los valores de la línea base) y después de un mes (antes de la segunda dosis de Mab) y finalmente en el final del estudio (en el punto de tiempo de dos meses) en cuyo punto los monos se sometieron a autopsia para un ensayo adicional (por ejemplo ensayo histomorfométrico). Los animales fueron etiquetados con fluorocromo (los días 14, 24, 47, y 57) por histomorfometría dinámica. El suero fue recolectado en varios puntos de tiempo durante el estudio [día 1 de pre-dosis (el día de la primera dosis de Mab), el día 1 doce horas después de la dosis, día 2, día 3, día 5, día 7, día 14, día 21, día 28, día 29 doce horas después de la dosis (el día 29 fue el día de la segunda y última dosis de Mab), día 30, día 31, día 33, día 35, día 42, día 49 y día 56]. Tres biomarcadores de suero relacionados al hueso fueron medidos usando los kits disponibles comercialmente: Osteocalcina (OC) (DSL Osteocalcin Radioimmunoassay Kit; Diagnostic Systems Laboratories, Inc., Webster, Tx, E.E.U.U.). Propéptido terminal N de Procolágeno tipo I (P1NP) (PINP Radioimmunoassay; Orion Diagnostica, Espoo, Finlandia) Fragmentos de telopéptido C de cadenas de colágeno tipo I 1a (sCTXI) (Serum CrossLaps® ELISA; Nordic Bioscience Diagnostics A/S, Herlev, Dinamarca). Las exploraciones por pQCT y DXA proporcionaron los datos sobre varios parámetros óseos (incluyendo densidad mineral ósea (BMD) y contenido mineral óseo) a través de numerosos sitios esqueléticos (incluyendo metáfisis y diáfisis tibiales, metáfisis y diáfisis radiales, cuello del fémur, vértebras lumbares). El ensayo de estos datos óseos (cambio porcentual de la línea base para cada animal) y datos del biomarcador de suero anabólico (OC, P1NP) (cambio porcentual de la línea base para cada animal), reveló aumentos estadísticamente significativos, contra el grupo de vehículo, en algunos parámetros en algunos de los puntos de tiempo y dosis para cada Mab. Estos datos del parámetro óseo, datos del biomarcador de suero, así como los datos histomorfométricos, indicaron que cada uno de los 3 Mabs (Ab-23, Ab-5 y Ab-14) pudo neutralizar la esclerostina en monos Cynomolgous. Esta actividad fue más robusta para Ab-23 y Ab-5, particularmente a dosis más altas (30 mg/kg), con un aumento claro de la formación ósea (efecto anabólico) así como aumentos netos del hueso (por ejemplo BMD). Los aumentos estadísticamente significativos de los parámetros óseos y parámetros histomorfométricos anabólicos también fueron encontrados en el grupo de control positivo (PTH (1-34)). Los marcadores de formación ósea de suero (P1NP, osteocalcina) fueron aumentados (p<0.05 contra el vehículo (VEH)) en los varios puntos de tiempo y dosis, pero particularmente en los grupos de 30 mg/kg para Ab-23 y Ab-5. El ensayo histomorfométrico reveló aumentos dramáticos (p<0.05 contra VEH) en los índices de formación ósea en el hueso poroso en la vértebra lumbar y tibia próxima (aumento de hasta cinco veces), así como en la superficie endocorticoide de la diáfisis del fémur (aumento de hasta diez veces) a dosis más altas de Ab-23 y Ab-5. El espesor trabecular fue aumentado con la alta dosis de Ab-23 y Ab-5 en vértebras lumbares (>60%, p<0.05 contra VEH). Al final del estudio (2 meses), BMD regionales, como cambio porcentual de la línea base, fueron aumentados (p<0.05 contra VEH) en el cuello del fémur, radio ultra-distal (Ab-23, 30 mg/kg), y en las vértebras lumbares (Ab-5, 30 mg/kg). Los aumentos en BMD regional en las vértebras lumbares fueron acompañados por los aumentos en la resistencia vertebral (aumento del 97% en la carga máxima vertebral para Ab-23, 30 mg/kg; p<0.05 contra VEH); los valores de la línea base para BMD regional lumbar antes de la dosificación de Mab, fueron estadísticamente similares en todos los grupos. En conclusión, la administración a corto tiempo de Mabs de neutralización de esclerostina en monos Cynomolgous dio lugar, en parte, a aumentos en la formación ósea, BMD y resistencia vertebral ósea. A partir de lo anterior, aunque las modalidades específicas de la invención se han descrito en la presente para los propósitos de ilustración, varias modificaciones se pueden hacer sin apartarse del espíritu y alcance de la invención. Por consiguiente, la invención no está limitada, excepto por las reivindicaciones anexas. Todas las Publicaciones, Solicitudes de Patente Publicadas, y Documentos de Patente descritos en la presente son incorporados mediante este medio por referencia .

Claims (66)

REIVINDICACIONES

1. Una composición que comprende un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO:6.

2. Una composición que comprende un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO.63.

3. Una composición que comprende un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO:64

4. Una composición que comprende un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO:65.

5. Una composición que comprende un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO:66.

6. Una composición que comprende un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO:67.

7. Una composición que comprende un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO:68.

8. Una composición que comprende un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO:69.

9. Una composición que comprende por lo menos un polipéptido de la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 o SEC ID NO:5.

10. La composición de conformidad con la reivindicación 9, que comprende por lo menos dos de las secuencias de aminoácidos de la SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 y SEC ID NO:5.

11. La composición de conformidad con la reivindicación 9, que comprende por lo menos tres de las secuencias de aminoácidos de la SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 y SEC ID NO:5.

12. La composición de conformidad con la reivindicación 9, que comprenden cuatro de las secuencias de aminoácidos de la SEC 5 ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 y SEC ID NO:5.

13. Una composición que comprende un polipéptido que tiene las secuencias de aminoácidos de la SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 y SEC ID NO:5, en donde la SEC ID NO:2 y 4 se une por un enlace disulfuro en las posiciones del aminoácido 57 y 111 10 con referencia a la SEC ID NO:1, y la SEC ID NO:3 y 5 son unen a por lo menos uno de (a) un enlace disulfuro en las posiciones del aminoácido 82 y 142 con referencia a la SEC ID NO:1, y (b) un enlace disulfuro en la posición del aminoácido 86 y 144 con referencia a la SEC ID NO:1. I5

14. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-12, en donde cada uno de los polipéptidos conserva la estructura terciaria de la región del polipéptido correspondiente de la esclerostina humana de la SEC ID NO:1.

15. Un polipéptido que consiste esencialmente de una 0 proteína de esclerostina humana truncada multiplicada de la SEC ID NO:1, en donde los aminoácidos 1-50, 65-72, 91-100, 118-137 y 150- 190 de la SEC ID NO:1 están ausentes del polipéptido.

16. Una composición que comprende por lo menos un polipéptido que consiste esencialmente en la secuencia 5 de aminoácidos de las SEC ID NO:70, SEC ID NO:71, SEC ID NO:72 o SEC ID NO.73.

17. La composición de conformidad con la reivindicación 16, que comprende por lo menos dos de las secuencias de aminoácidos de la SEC ID NO:70, SEC ID NO:71, SEC ID NO:72 y SEC ID NO:73.

18. La composición de conformidad con la reivindicación 16 que comprende por lo menos tres de las secuencias de aminoácidos de la SEC ID NO:70, SEC ID NO:71, SEC ID NO:72 y SEC ID NO:73.

19. La composición de conformidad con la reivindicación 16, que comprenden cuatro de las secuencias de aminoácidos de la SEC ID NO:70, SEC ID NO:71, SEC ID NO:72 y SEC ID NO:73.

20. Una composición que comprende un polipéptido que tiene las secuencias de aminoácidos de la SEC ID NO:70, SEC ID NO:71, SEC ID NO.72 y SEC ID NO.73, en donde la SEC ID NO:72 y 73 se une por un enlace disulfuro en las posiciones del aminoácido 57 y 111 con referencia a la SEC ID NO:1, y la SEC ID NO:70 y 71 se une a por lo menos uno de (a) un enlace disulfuro en la posición del aminoácido 82 y 142 con referencia a la SEC ID NO:1, y (b) un enlace disulfuro en la posición del aminoácido 86 y 144 con referencia a la SEC ID NO:1.

21. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 16-20, en donde cada uno de los polipéptidos conserva la estructura terciaria de la región del polipéptido correspondiente de la esclerostina humana de la SEC ID NO:1.

22. Un polipéptido que consiste esencialmente de una proteína de esclerostina humana truncada multiplicada de la SEC ID N0:1, en donde los aminoácidos 1-56, 65-72, 87-110, 118-137, y 145-190 de la SEC ID NO:1 están ausentes del polipéptido.

23. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 22, en donde el polipéptido es obtenido por digestión tríptica de la esclerostina humana.

24. El polipéptido de conformidad con la reivindicación 23, en donde la esclerostina humana es tratada con tripsina para alcanzar la digestión de la tripsina completa y el polipéptido es aislado por CLAR.

25. Una porción de esclerostina humana que comprende los aminoácidos 51-64, 73-90, 101- 117 y 138-149 de la SEC ID NO:1, en donde la porción tiene por lo menos uno de: (a) un enlace disulfuro entre los aminoácidos 57 y 111 ; (b) un enlace disulfuro entre los aminoácidos 82 y 142; y (c) un enlace disulfuro entre los aminoácidos 86 y 144.

26. La porción de esclerostina humana de conformidad con la reivindicación 25, tiene por lo menos dos de los enlaces disulfuro.

27. La porción de esclerostina humana de conformidad con la reivindicación 25, tiene los tres enlaces disulfuro.

28. Una porción de esclerostina humana que comprende los aminoácidos 57-64, 73-86, 111- 117 y 138-144 de la SEC ID NO:1, en donde la la porción tiene por lo menos uno de: (a) un enlace disulfuro entre los aminoácidos 57 y 111; (b) un enlace disulfuro entre los aminoácidos 82 y 142; y (c) un enlace disulfuro entre los aminoácidos 86 y 144.

29. La porción de esclerostina humana de conformidad con la reivindicación 28, tiene por lo menos dos de los enlaces disulfuro.

30. La porción de esclerostina humana de conformidad con la reivindicación 28, tiene tres enlaces disulfuro.

31. Un polipéptido que consiste esencialmente de una proteína de esclerostina humana de la SEC ID NO:1 truncada en los extremos C-terminal y N-terminal, en donde los aminoácidos 1-85 y 112-190 de la SEC ID NO:1 están ausentes del polipéptido.

32. Una porción de esclerostina humana, que comprende los aminoácidos 86-111 de la SEC ID NO:1.

33. Una porción de esclerostina humana, que comprende la SEC ID NO:6.

34. Una porción de esclerostina humana, que comprende la SEC ID NO:63.

35. Una porción de esclerostina humana, que comprende la SEC ID NO:64.

36. Una porción de esclerostina humana, que comprende la SEC ID NO:65.

37. Una porción de esclerostina humana, que comprende la SEC ID NO:66.

38. Una porción de esclerostina humana, que comprende la SEC ID NO:67.

39. Una porción de esclerostina humana, que comprende la SEC ID NO:68.

40. Una porción de esclerostina humana, que comprende la SEC ID NO:69.

41. Una porción de esclerostina de la rata, que comprende la SEC ID NO:96.

42. Una porción de esclerostina de rata, que comprende la SEC ID NO:97.

43. Un método para producir una porción de esclerostina humana, que comprende las etapas de: (a) tratar la esclerostina humana con tripsina para alcanzar la digestión tríptica completa; (b) recolectar la muestra de digestión tríptica que tiene una masa molecular promedio de 7122. OD (masa teórica 7121.5D) o tiempo de retención de aproximadamente 20.6 minutos como se determinó por la elución de una columna de CLAR de fase inversa con gradiente lineal de 0.05% de ácido trifluoroacético a 90% de acetonitrilo en 0.05% de TFA a una velocidad de flujo de 0.2 ml/min; y (c) purificar la porción.

44. Un polipéptido de la SEC ID NO:6.

45. Un polipéptido de la SEC ID NO:2.

46. Un polipéptido de la SEC ID NO:3.

47. Un polipéptido de la SEC ID NO:4.

48. Un polipéptido de la SEC ID NO:5.

49. Un polipéptido de la SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, SEC ID NO:4 y SEC ID NO:5.

50. Un polipéptido de la SEC ID NO:96.

51. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 97.

52. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 63.

53. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 64.

54. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 65.

55. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 66.

56. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 67.

57. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 68.

58. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 69.

59. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 70.

60. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 71.

61. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 72.

62. Un pol ipéptido de la SEC ID NO 73.

63. Un pol ipéptido de la SEC IC ) NO:70 ID NO:72 y SEC ID NO:73

64. Un método para generar un anticuerpo que comprende administrar a un animal un polipéptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-42 y 44-63.

65. El método de conformidad con la reivindicación 64, en donde el animal es un mamífero.

66. Una vacuna que comprende por lo menos un polipéptido que comprende uno o más de los epítopes de la SEC ID NO:2, 3, 4, 5, 6, 70, 71, 72 y 73.