LV14791B - Biological preparation for protection of conifer stumps against heterobasidion annosum s.l. basidions sp. infection - Google Patents
Biological preparation for protection of conifer stumps against heterobasidion annosum s.l. basidions sp. infection Download PDFInfo
- Publication number
- LV14791B LV14791B LVP-13-156A LV130156A LV14791B LV 14791 B LV14791 B LV 14791B LV 130156 A LV130156 A LV 130156A LV 14791 B LV14791 B LV 14791B
- Authority
- LV
- Latvia
- Prior art keywords
- phlebiopsis gigantea
- isolate
- latvian
- new
- heterobasidion annosum
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
IZGUDROJUMA APRAKSTSDESCRIPTION OF THE INVENTION
Izgudrojums attiecas uz mežsaimniecības nozari, mikoloģiju un mikrobioloģiju un saistīts ar celmu bioloģisko aizsardzību pret skuju koku sakņu trupi izraisošo sēni sakņu piepi Heterobasidion annosum s.l bazīdijsporu infekciju.The present invention relates to forestry, mycology and microbiology and relates to the biological protection of strains against fungal root rot fungus Heterobasidion annosum s.l.
TEHNIKAS LĪMENISTECHNICAL LEVEL
Sakņu piepes Heterobasidion annosum s.l. izraisītā sakņu trupe rada ievērojamus ekonomiskos zaudējumus, kas Eiropas Savienības valstīs sastāda 790 miljonus eiro gadā [1]. Latvijā egļu audzēs trupējušo koku īpatsvars ir 23%. Sakņu piepe izplatās ar sporām, kuras mežizstrādes laikā nonāk uz tikko zāģētu celmu virsmas, attīstās un ieaug celmā, pēc tam sakņu kontaktu ceļā inficē blakus esošos augošos veselos kokus. Tāpēc ir svarigi noskaidrot sakņu trupes ierobežošanas iespējas, izmantojot dabiskos Heterobasidion annsoum s.l. antagonistus.Root Heterobasidion annosum s.l. is responsible for significant economic losses amounting to EUR 790 million per year in the European Union [1]. In Latvia, the share of decaying trees in spruce stands is 23%. Root spores are spread by spores that come to the surface of newly cut stumps during logging, develop and grow into the stump, then infect adjacent healthy trees by root contact. Therefore, it is important to explore the possibilities of limiting the root rot by using natural Heterobasidion annsoum s.l. antagonist.
Bioloģiskie preparāti tiek uzskatīti par alternatīvu ķīmiskajiem preparātiem. Eiropā plašāk izmantotais ir Somijā ražotais bioloģiskais preparāts „Rotstop”, kura sastāvā ir Phlebiopsis gigantea sporas [2]. Šis preparāts tiek pielietots arī Latvijā svaigu celmu apstrādē, tūlīt pēc koku zāģēšanas, pirms uz celmiem nonākušas Heterobasidion annosum s.l. sporas [3]. Zviedrijā veiktie pētījumi liecina, ka vietējie Phlebiopsis gigantea izolāti dažkārt ir efektīvāki Heterobasidion annosum s.l. izplatības ierobežošanā, salīdzinot ar komerciāli ražoto bioloģisko preparātu „Rotstop” [4]. Daudzās valstīs turpinās pētījumi, lai atrastu efektīvākos Phlebiopsis gigantea izolātus un ierobežotu Heterobasidion annosum s.l. izraisīto infekciju [5]. Izolāta „Rotstop” pielietošana ilgtermiņā var negatīvi ietekmēt citu celmus kolonizējošo sēņu populācijas. Lai novērstu viena izolāta ietekmi uz bioloģisko daudzveidību, lietderīgi izmantot bioloģiskos preparātus, kuru sastāvā ir dažādi „vietējie” sēnes Phlebiopsis gigantea izolāti [6],Biological preparations are considered as an alternative to chemical preparations. The most widely used in Europe is the biological product Rotstop, made in Finland, containing Phlebiopsis gigantea spores [2]. This preparation is also used in Latvia for the treatment of fresh strains, immediately after cutting the trees, before the Heterobasidion annosum s.l. spores [3]. Studies in Sweden have shown that native isolates of Phlebiopsis gigantea are sometimes more effective against Heterobasidion annosum s.l. as compared to the commercially produced organic Rotstop [4]. In many countries, research is ongoing to find the most effective isolates of Phlebiopsis gigantea and to limit Heterobasidion annosum s.l. infection [5]. Long-term use of isolated Rotstop can adversely affect populations of other strains colonizing fungi. In order to prevent the impact of one isolate on biodiversity, it is appropriate to use biological preparations containing various "local" isolates of Phlebiopsis gigantea [6],
Veiktie pētījumi jauna Phlebiopsis gigantea izolāta iegūšanaiStudies carried out to obtain a new isolate of Phlebiopsis gigantea
Laika posmā no 2010. līdz 2013. gadam dažādās vietās Latvijā ievākti Phlebiopsis gigantea izolāti. „Phlebiopsis gigantea isolates were collected in different places in Latvia during 2010–2013. "
No egles koksnes paraugiem iegūts efektīvs Phlebiopsis gigantea izolāts. IegūtaisAn effective isolate of Phlebiopsis gigantea was obtained from spruce wood samples. Acquired
Phlebiopsis gigantea izolāts uzglabāts Latvijas Valsts mežzinātnes institūta „Siļava” Meža mikoloģijas un fitopatoloģijas laboratorijas sēņu kultūru kolekcijā ar nosaukumu „05”.Phlebiopsis gigantea isolate has been stored in the collection of mushroom cultures of the Latvian State Institute of Forestry “Sļava” under the name “05”.
Fig. 1. - 5. ir šādas ilustrācijas:FIG. Figures 1-5 are the following illustrations:
Fig.l. - Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 tīrkultūra uz iesala - agara barotnes (palielinājums 100x).FIG. - Pure culture of Phlebiopsis gigantea isolate 05 on malt-agar medium (100x magnification).
Fig.2. - Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 sporas (palielinājums 200x).FIG. - Spores of new isolate 05 of Phlebiopsis gigantea (200x magnification).
Fig.3. - Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 somatiskās nesaderības tests ar Somijā ražotā preparāta sastāvā esošo Phlebiopsis gigantea.3. - Somatic incompatibility test of a new isolate 05 of Phlebiopsis gigantea of Latvian origin with Phlebiopsis gigantea in a preparation manufactured in Finland.
Fig.4. - Somijā ražota preparāta sastāvā esošais Phlebiopsis gigantea: alēles 106bp un 116bp. Fig.5. - Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea jaunais izolāts 05: bāzu pāri 106bp un 122bp lokusā 18.FIG. - Phlebiopsis gigantea present in Finland: alleles 106bp and 116bp. FIG. - New isolate 05 of Phlebiopsis gigantea of Latvian origin: base pair 106bp and 122bp at locus 18.
Fig.6. - Budapeštas līguma par mikroorganismu deponēšanas starptautisko atzīšanu patentu procedūras nolūkā starptautiska forma, numurs P13 95.FIG. - International Agreement Concerning the International Recognition of the Deposit of Microorganisms for the Purposes of Patent Procedure, Number P13 95, Budapest.
1. piemērsExample 1:
Preparātā pielietotās sēnes Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 morfoloģiskais raksturojumsMorphological characterization of the new isolate 05 of Phlebiopsis gigantea
Micēlija krāsa ir balta, tā virsma ir matēta un gluda, micēlija apmale - gluda. Tam ir sīkgraudaina konsistence. Gaisa micēlijs sadalīts tipiskās veģetatīvo sporu (oīdiju) virknēs (Fig.l.). Oīdijas ir caurspīdīgas, cilindriskas, ar noapaļotiem galiem, to izmēri 5-10 x 2,5-6 pm (Fig.2.). Phlebiopsis gigantea hifu šūnas var saturēt vairākus kodolus. Phlebiopsis gigantea raksturīgas caurspīdīgas hifas, zarošanās vietās to izmēri ir 2,2-6,0 pm. Micēlijam raksturīgi kalcija oksalāta kristāli, sastopamas sprādzes un dubultās sprādzes. Micēlijs Petri plati pārklāj 2-3 nedēļu laikā (20 °C temperatūrā).The color of mycelium is white, its surface is matt and smooth, and mycelium border - smooth. It has a fine grain consistency. The aerial mycelium is divided into typical strands of vegetative spores (oidy) (Fig. 1). Oids are transparent, cylindrical, with rounded ends, measuring 5-10 x 2.5-6 pm (Fig. 2). Phlebiopsis gigantea hypha cells may contain multiple nuclei. Phlebiopsis gigantea is characterized by translucent hyphae, with a branching size of 2.2 to 6.0 pm. Mycelium is characterized by calcium oxalate crystals, buckles and double buckles. Spin the Petri plate for 2-3 weeks (at 20 ° C).
Labi attīstās Hagem un iesala-agara barotnē.It develops well in Hagem and malt-agar medium.
Hagem barotne (g/ml Γ1): KH2PO4 0,5; (NH4)2HPO4 0,25; MgSO4*7H2O 0,15; CaCl2*2H2O 0,05; NaCl 0,025; FeCl3*6H2O 1,2 ml; Tiamīns HC1 (0,1%) 1 ml; glikoze 2,5; iesala ekstrakts 10; agars 15.Broth medium (g / ml Γ 1 ): KH 2 PO 4 0.5; (NH 4 ) 2 HPO 4 0.25; MgSO 4 * 7H 2 O 0.15; CaCl 2 · 2H 2 O 0.05; NaCl 0.025; FeCl 3 * 6H 2 O 1.2 mL; Thiamine HCl (0.1%) in 1 mL; glucose 2.5; malt extract 10; agar 15.
Iesala - agara barotne (g T1): iesala ekstrakts 15; agars - 12.Malt - agar medium (g T 1 ): malt extract 15; agar - 12.
2. piemērsExample 2:
Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 sporu suspensijas sagatavošanas tehnoloģija Phlebiopsis gigantea izolāta micēlijs, augot uz iesala agara barotnes, 2-3 nedēļu laikā veido aptuveni 25 - 74 χ 104 sporas 1 ml. Sporu suspensija tiek iegūta, uzlejot uz micēlija Petri platē 5 ml ūdens, un pēc tam ar stikla nūjiņas palīdzību Phlebiopsis gigantea sporas noskalo no micēlija virsmas. Pēc tam suspensija tiek atšķaidīta līdz nepieciešamajam tilpumam. Lai iegūtu vēlamo sporu koncentrāciju (5000 sporas uz ml), tiek veikta sporu skaitīšana atsevišķās Petri platēs, uz virsmas izkliedējot 0,5 ml suspensijas, pēc tam nosakot sporu skaitu 30 mikroskopa (Leica DM 4000B, palielinājums 200Χ) redzeslaukos (diametrs: 1,09 mm) un pārrēķinot uz tilpuma vienību (ml). Rezultātā tiek iegūts bioloģisks aizsardzības līdzeklis ar sporu koncentrāciju 5000 Phlebiopsis gigantea izolāta 05 sporas ml’1.Phlebiopsis gigantea new isolate 05 spore suspension technology Phlebiopsis gigantea isolate mycelium, growing on malted agar medium, produces approximately 25 - 74 χ 10 4 spores per ml over 2-3 weeks. The spore suspension is prepared by pouring 5 ml of water on a Petri plate on a mycelium and then rinsing the spores of the Phlebiopsis gigantea from the surface of the mycelium with a glass rod. The suspension is then diluted to the required volume. To obtain the desired spore concentration (5000 spores per ml), spore counts are performed on individual Petri plates by scattering 0.5 ml of suspension on the surface, then measuring the number of spores in a 30 microscope (Leica DM 4000B magnification 200Χ) fields (diameter: 1, 09 mm) and converted to volume (ml). The result is a biological protection agent with a spore concentration of 5000 spleb ml ' 1 of Phlebiopsis gigantea isolate.
3. piemērsExample 3:
Pēc Prof. J. Stenlid izstrādātās metodikas salīdzināti Phlebiopsis gigantea Latvijas izolāti ar Somijā ražotā preparāta Phlebiopsis gigantea izolātu. Metodika pamatojas uz ģenētiski atšķirīgu sēņu izolātu somatisko nesaderību (somatic incompatibility tēst) [7] (Fig.3.). Salīdzinājuma rezultātā secināts, ka Somijā ražotā preparāta sastāvā esošā Phlebiopsis gigantea ir ģenētiski atšķirīga no Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea izolāta 05: to parāda attēlā redzamā demarkācijas līnija starp abiem analizētajiem Phlebiopsis gigantea micēlijiem. Demarkācijas līnija liecina, ka abi analizējamie micēliji nesaaug kopā, tātad tie ir ģenētiski atšķirīgi.After Prof. Methods developed by J. Stenlid compared Phlebiopsis gigantea Latvian isolates with Phlebiopsis gigantea isolate produced in Finland. The methodology is based on the somatic incompatibility of genetically different fungal isolates [7] (Fig.3). The comparison concluded that Phlebiopsis gigantea contained in the preparation manufactured in Finland is genetically different from Latvian-derived Phlebiopsis gigantea isolate 05: it is shown by the demarcation line between the two Phlebiopsis gigantea mycelium analyzed. The demarcation line shows that the two mycelium analyzed do not grow together, so they are genetically distinct.
4. piemērsExample 4
Lai salīdzinātu Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea jauno izolātu 05 ar Somijā ražotā preparāta sastāvā esošo Phlebiopsis gigantea, Latvijas Valsts mežzinātnes institūta „Silava” Ģenētisko resursu centrā tika veiktas ģenētiskās analīzes.In order to compare the new isolate 05 of Phlebiopsis gigantea of Latvian origin with that of Phlebiopsis gigantea produced in Finland, genetic analyzes were performed at the Geneva Resource Center of the Latvian State Forestry Institute Silava.
Lai pārbaudītu ģenētiskās atšķirības, tika izmantots Phlebiopsis gigantea Simple sequence repeat (SSR) marķieris „18” [8]. SSR marķieri uzrāda vienkāršo sekvenču atkārtojumu garumu atšķirību starp sugas izolātiem.Phlebiopsis gigantea Simple Sequence Repeat (SSR) marker "18" was used to test for genetic differences [8]. SSR markers show the difference in simple sequence repeats between species isolates.
Polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) protokols:Polymerase Chain Reaction (PCR) Protocol:
Reakcijas maisījums:Reaction mixture:
DNS -1 μΐ 10x PCR buferis — 2 μΐ MgCl2 (25 mm)-1,6 μΐ dNTP (10 mm katrs) - 0,4 μΐDNA -1 μΐ 10x PCR buffer - 2 μΐ MgCl 2 (25 mm) –1.6 μΐ dNTP (10 mm each) - 0.4 μΐ
PCR praimeri (4 pm) - 1 μΐ katrs (F praimeris iezīmēts ar TAMRA fluorescējošo krāsvielu)PCR primers (4 pm) - 1 μΐ each (F primer is labeled with TAMRA fluorescent dye)
H2O - līdz 20 μΐH 2 O - up to 20 μΐ
PCR termociklera režīms:PCR thermocycler mode:
°C - 5 min (94 °C-15sek °C-30sek °C-30sek) x 35 cikli °C-7min.° C - 5 min (94 ° C-15sec ° C-30sec ° C-30sec) x 35 cycles ° C-7min.
Iegūtie PCR fragmenti tika analizēti ar „ Applied Biosystems 3130x1 Genetic Analyser” (ASV, 2004), un fragmentu garumi noteikti ar „ GeneMapper 4.0” (Applied Biosystems, ASV, 2004) programmatūru.The resulting PCR fragments were analyzed with the Applied Biosystems 3130x1 Genetic Analyzer (USA, 2004) and the fragment lengths were determined with the GeneMapper 4.0 (Applied Biosystems, USA, 2004) software.
Analīzes rezultātā noskaidrots, ka Somijā ražotā preparāta sastāvā esošajam Phlebiopsis gigantea jaunajam izolātam, izmantojot SSR marķieri „18”, tika amplificētas jeb pavairotas divas alēles (106bp un 116bp, Fig.4.), bet Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea izolātam 05 amplificētas divas alēles (106bp un 122bp, Fig.5.), kas liecina par šo abu Phlebiopsis gigantea izolātu ģenētisko atšķirību. Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea izolāts 05, izmantojot SSR marķieri „18”, analizēts 5 atkārtojumos.As a result of the analysis, two alleles (106bp and 116bp, Fig.4) were amplified or propagated to the new isolate of Phlebiopsis gigantea produced in Finland (SSb marker "18"), while to the Phlebiopsis gigantea isolate 05 of Latvian origin, two alleles ( 106bp and 122bp, Fig. 5), demonstrating the genetic difference between the two isolates of Phlebiopsis gigantea. Phlebiopsis gigantea isolate 05 from Latvia was analyzed in 5 replicates using the SSR marker "18".
Tātad Latvijas Valsts mežzinātnes institūta „Silava” Ģenētisko resursu centrā veiktā analīze apstiprina, ka vietējais Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea jaunais izolāts 05 ir ģenētiski atšķirīgs no Somijā ražotā bioloģiskā preparāta sastāvā esošā Phlebiopsis gigantea izolāta.Thus, the analysis carried out at the Geneva Resource Center of the Latvian State Forestry Research Institute "Silava" confirms that the new Latvian isolate 05 of Phlebiopsis gigantea is genetically different from the biological preparation of Phlebiopsis gigantea produced in Finland.
Jāatzīmē, ka Latvijas jaunais izolāts 05 ģenētiski atšķiras arī no Latvijā ražotā Phlebiopsis gigantea GI (LMKK P272), kas satur ģenētiskās sekvences 106 un 122 bāzu pārus (bp) lokusā 18.It should be noted that the new Latvian isolate 05 is also genetically different from the Latvian-produced Phlebiopsis gigantea GI (LMKK P272), which contains 106 and 122 base pairs (bp) of the genetic sequence 18.
Rezultātā Latvijas Valsts mežzinātnes institūta „Silava” Meža mikoloģijas un fitopatoloģijas laboratorijā no koksnes parauga izaudzēts jauns Latvijas izcelsmes sēnes Phlebiopsis gigantea izolāts 05, kam lokusā 18 piemīt ģenētiskās sekvences 106 un 122 bāzu pāru (bp) garumā.As a result, a new isolate 05 of Latvian fungus Phlebiopsis gigantea 05 was grown from a wood sample in the Forest Mycology and Phytopathology Laboratory of the Latvian State Forestry Institute “Silava”, which has genetic sequences of 106 and 122 base pairs (bp).
Nebija zināms, vai Latvijas izcelsmes sēnes Phlebiopsis gigantea jaunajam izolātam 05 piemīt īpašības, kas nodrošina aizsardzību pret Heterobasidion annosum s.l bazīdijsporu infekciju.It was not known whether Phlebiopsis gigantea isolate 05 from Latvia has properties that confer protection against Heterobasidion annosum s.l. basidium spore infection.
Izgudrojuma mērķis ir jauna bioloģiska produkta izstrāde skuju koku celmu bioloģiskajai aizsardzībai pret sakņu piepes Heterobasidion annosum s.l. bazīdij sporu infekciju.The object of the invention is to develop a new organic product for the biological protection of coniferous strains against root rot Heterobasidion annosum s.l. basidium spore infection.
Izvirzītais mērķis tiek sasniegts izveidojot:The objective is achieved by creating:
- Latvijas izcelsmes sēnes Phlebiopsis gigantea jaunu izolātu 05, kas deponēts Latvijas- a new isolate 05 of the fungus Phlebiopsis gigantea of Latvian origin, deposited in Latvia
Mikroorganismu kultūru kolekcijā ar reģistrācijas numuru LMKK P1395,Microorganism Culture Collection under registration number LMKK P1395,
- produktu, kas satur Latvijas izcelsmes sēnes Phlebiopsis gigantea jaunu izolātu 05- a product containing a new isolate 05 of the fungus Phlebiopsis gigantea originating in Latvia
LMKK P1395,LMKK P1395,
- produktu, kas izmantojams skuju koku celmu aizsardzībai pret Heterobasidion annosum s.l. bazīdij sporu infekciju.- a product used for the protection of coniferous strains against Heterobasidion annosum s.l. basidium spore infection.
Veiktie pētījumi Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 efektivitātes rādītāju novērtēšanaiStudies performed to evaluate the efficacy indices of the new isolate 05 of Phlebiopsis gigantea of Latvian origin
Latvijas izcelsmes sēnes Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 efektivitāte novērtēta laboratorijas un lauka eksperimentos.The effectiveness of the new isolate 05 of Latvian origin fungus Phlebiopsis gigantea has been evaluated in laboratory and field experiments.
Lai noteiktu jaunā bioloģiskā preparāta efektivitāti aizsardzībai pret Heterobasidion annosum s.l. bazīdijsporu infekciju, bija nepieciešams veikt šādus pētījumus:To determine the efficacy of the new biological preparation for protection against Heterobasidion annosum s.l. basidiumpor infection, the following studies were required:
1) pārbaudīt sēnes micēlijā Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta īpašības laboratorijas apstākļos ar preparāta „ Rotstop” rādītājiem,1) to test the properties of the new isolate of Phlebiopsis gigantea in fungal mycelium under laboratory conditions using the Rotstop preparation,
2) pārbaudīt sēnes micēlijā Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta augšanas ātrumu egles koksnes bluķīšos ar preparāta „ Rotstop ” rādītājiem,2) to test the growth rate of the new isolate of Phlebiopsis gigantea in the spruce logs with the characteristics of the preparation "Rotstop",
3) pārbaudīt antagonismu pret Heterobasidion annosum s.l. bazīdijsporu infekciju un salīdzināt Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta mijiedarbību ar skuju koku koksnē sastopamo sēni Trichoderma sp. efektivitātē pret Heterobasidion annosum s.l. bazīdijsporu infekciju koksnes bluķīšos.3) To test antagonism against Heterobasidion annosum s.l. basidium spores and compare the interaction of the new isolate of Phlebiopsis gigantea with the coniferous fungus Trichoderma sp. in efficacy against Heterobasidion annosum s.l. basidium spore infection in wood blocks.
5. piemērsExample 5
Lai novērtētu Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 rādītājus, Latvijas Valsts mežzinātnes institūta „Silava” Meža mikoloģijas un fitopatoloģijas laboratorijā tika pārbaudīts Phlebiopsis gigantea micēlijā augšanas ātrums, antagonisms pret Heterobasidion annosum s.l. un novērtēta sporu veidošanās. Rezultāti atspoguļoti 1. tabulā.In order to evaluate the 05 indices of the new isolate of Phlebiopsis gigantea of Latvian origin, the growth rate of Phlebiopsis gigantea mycelium, antagonism against Heterobasidion annosum s.l., was tested in the Forest Mycology and Phytopathology Laboratory of the Latvian State Forestry Institute Silava. and evaluated spore formation. The results are shown in Table 1.
1.tabula. Laboratorijas apstākļos iegūtie Phlebiopsis gigantea rādītāji.Table 1. Laboratory findings of Phlebiopsis gigantea.
Iegūtie rezultāti liecina, ka gandrīz pēc visiem analizētajiem rādītājiem Phlebiopsis gigantea izolāts 05 uzrāda labākus rezultātus (micēlijā augšanas ātrums 9,40 mm dienā'1 un veģetatīvo sporu veidošanās 170, 50 miljoni sporu Petri platē), salīdzinājumā ar Somijā ražotā bioloģiskā preparāta „Rotstop” sastāvā esošo Phlebiopsis gigantea izolātu (attiecīgi 7,02 mm dienā1 un 42,90 miljoni sporu Petri platē). Ļoti nozīmīgs radītājs rūpnieciskai izolāta pavairošanai ir spēja veidot lielu skaitu sporu. Šajā gadījumā Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea jaunais izolāts 05 veido gandrīz četras reizes vairāk sporu.The results show that Phlebiopsis gigantea isolate 05 shows better results (mycelial growth rate 9.40 mm / day ' 1 and growth of vegetative spores 170, 50 million spores in Petri plate) in almost all analyzed parameters compared to the Rotstop biological preparation made in Finland of Phlebiopsis gigantea (7.02 mm / day 1 and 42.90 million spores in the Petri plate, respectively). A very important factor in the industrial reproduction of the isolate is the ability to produce large numbers of spores. In this case, the new isolate 05 of Phlebiopsis gigantea of Latvian origin produces almost four times more spores.
6. piemērsExample 6
Phlebiopsis gigantea jauno izolātu attīstība novērtēta parastās egles koksnē. Sēnes micēlijā attīstība analizēta lauka eksperimentā 20 - 30 cm garos bluķīšos, kuri vēlāk tika sazāģēti četrās 3 cm biezās ripās.The development of new isolates of Phlebiopsis gigantea has been evaluated in spruce wood. The development of mycelial fungus was analyzed in a field experiment in blocks of 20 - 30 cm, which were subsequently sawn in four 3 cm thick disks.
2.tabula. Phlebiopsis gigantea jauno izolatu augšanas ātrums un aizņemtais laukums egles koksnēTable 2. Growth rate and occupied area of new isolates of Phlebiopsis gigantea in spruce wood
Tika novērtēts gan augšanas ātrums, gan micēlija aizņemtais laukums (% no kopējā ripas laukuma). Aizņemtais virmas laukums ir ļoti svarīgs rādītājs, kas raksturo Phlebiopsis gigantea jauno izolātu spēju konkurēt ar Heterobasidion annosum s.l. skuju koku koksnē. Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea izolātu 05 raksturo būtiski augstāks augšanas ātrums (l,86±0,09 mm dienā'1), salīdzinājumā ar bioloģiskā preparāta „Rotstop” sastāvā esošo Phlebiopsis gigantea izolātu (l,19±0,05 mm dienā'1).Both growth rate and mycelial area (% of total disc area) were evaluated. The occupied surface area is a very important indicator of the ability of new isolates of Phlebiopsis gigantea to compete with Heterobasidion annosum sl in coniferous wood. Phlebiopsis gigantea isolate 05 from Latvia is characterized by a significantly higher growth rate (1,86 ± 0,09 mm / day ' 1 ) compared to Phlebiopsis gigantea isolate (1,19 ± 0,05 mm / day' 1 ) in the biological preparation 'Rotstop' .
Sēnes aizņemtais laukums (pēc raksturīgā oranži - brūnā krāsojuma koksnē) mērīts, izmantojot planimetru PLANIXS10 „ Marble ”.The area occupied by the fungus (by its characteristic orange to brown color in the wood) was measured using the PLANIXS10 Marble.
Novērtējot Phlebiopsis gigantea izolātu aizņemto laukumu 3 cm dziļumā, konstatēts, ka Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea izolāta 05 aizņemtais laukums ir 3,66±0,23%, savukārt preparāta „Rotstop” sastāvā esošajam Phlebiopsis gigantea izolātam attiecīgi 3,04±0,26%.Evaluating the occupied area of Phlebiopsis gigantea isolates at a depth of 3 cm, the occupied area of Phlebiopsis gigantea isolate 05 originating in Latvia was found to be 3.66 ± 0.23%, while that of Phlebiopsis gigantea isolate contained in Rotstop was 3.04 ± 0.26%. .
7. piemērsExample 7
Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 efektivitāte pret Heterobasidion annosum s.l. bazīdijsporu infekcijas antagonismu tika pārbaudīta egles koksnē. Latvijas izcelsmes Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 attīstība tika pārbaudīta dabiskos apstākļos. Pēc tam Phlebiopsis gigantea jaunais izolāts 05 tika pārbaudīts, konkurējot ar citām koksni kolonizējošām sēnēm. Eksperimentā tika novērtēta koksnē bieži sastopamās Trichoderma sp. ietekme uz Phlebiopsis gigantea izolāta 05 efektivitāti. Trichoderma ir ļoti spēcīgs antagonists, tāpēc ir veikti daudzi eksperimenti (pārsvarā laboratorijas apstākļos), lai novērtētu šīs sēnes ietekmi uz Heterobasidion annosum s.l. infekciju. Citi autori uzskata, ka Phlebiopsis gigantea un Trichoderma viride ir pietiekami bieži sastopamas koksnē, lai konkurētu ar Heterobasidion annosum s.l. Sēņu micēlija attīstība analizēta lauka eksperimentā, apsmidzinot 20 - 30 cm garu bluķīšu virsmu, pēc tam sazāģējot bluķīšus 3 cm biezās ripās un izvērtējot izolātu attīstību divos dziļumos.Efficacy of the new isolate 05 of Phlebiopsis gigantea of Latvian origin against Heterobasidion annosum s.l. antagonism of basidium spore infection was tested in spruce wood. The development of a new isolate 05 of Phlebiopsis gigantea of Latvian origin was tested under natural conditions. Subsequently, the new isolate 05 of Phlebiopsis gigantea was tested in competition with other wood-colonizing fungi. The experiment evaluated the presence of Trichoderma sp. effect on the efficacy of Phlebiopsis gigantea isolate 05. Trichoderma is a very potent antagonist, so many experiments (mostly under laboratory conditions) have been conducted to evaluate the effect of this fungus on Heterobasidion annosum s.l. infection. Other authors believe that Phlebiopsis gigantea and Trichoderma viride are common enough in wood to compete with Heterobasidion annosum s.l. The development of fungal mycelium was analyzed in a field experiment by spraying a 20-30 cm long block surface, then sawing the blocks in 3 cm thick discs and evaluating the development of isolates at two depths.
Izolātu efektivitāte aprēķināta, salīdzinot Heterobasidion annosum s.l. aizņemto laukumu ripas daļā, kas apstrādāta tikai ar Heterobasidion annosum s.l., ar to ripas daļu, kas apstrādāta gan ar Heterobasidion annosum s.l., gan Phlebiopsis gigantea izolātu 05 unThe efficacy of the isolates was calculated by comparing Heterobasidion annosum s.l. the occupied area in the part of the wheel treated with Heterobasidion annosum s.l., only, that part of the wheel treated with both Heterobasidion annosum s.l. and Phlebiopsis gigantea isolate 05, and
Trichoderma viride izolātu 945. Eksperimentos izmantotais Trichoderma viride izolāts 945 iegūts no Latvijas Universitātes Bioloģijas fakultātes Mikroorganismu kultūru kolekcijas. Minētais izolāts, sākotnēji veiktajos laboratorijas pētījumos, uzrādīja labākas īpašības pie dažādām temperatūrām, salīdzinot ar citiem Trichoderma sp. izolātiem.Trichoderma viride isolate 945. The Trichoderma viride isolate 945 used in the experiments was obtained from the Microorganism Culture Collection of the Faculty of Biology, University of Latvia. This isolate showed better properties at different temperatures in the initial laboratory studies compared to other Trichoderma sp. isolates.
Phlebiopsis gigantea jaunais izolāts 05 uzrādīja augstu efektivitāti aizsardzībā pret Heterobasidion annosum s.l. 3 cm dziļumā (76,73±4,44 %) (1. attēls).Phlebiopsis gigantea new isolate 05 showed high efficacy in protection against Heterobasidion annosum s.l. 3 cm (76.73 ± 4.44%) (Figure 1).
Apstrādes variantsTreatment option
1. attēls. Phlebiopsis gigantea izolāta 05 un Trichoderma viride izolāta 945 efektivitāte 3 un 8 cm dziļumā.Figure 1. Effectiveness of Phlebiopsis gigantea isolate 05 and Trichoderma viride isolate 945 at 3 and 8 cm depth.
Apzīmējumi:Legend:
- apstrāde ar Phlebiopsis gigantea izolātu 05 Trich. - apstrāde ar Trichoderma viride izolātu 945- treatment with Phlebiopsis gigantea isolate 05 Trich. - treatment with Trichoderma viride isolate 945
Phlebiopsis gigantea jaunā izolāta 05 suspensija, salīdzinot ar Trichoderma viride izolātu 945,3 cm dziļumā, bija būtiski efektīvāka (p<0,05). Tas nozīmē, ka Phlebiopsis gigantea jaunais izolāts 05 meža ekosistēmā būs pietiekami konkurētspējīgs skuju koku celmu aizsardzībā pret Heterobasidion annosum s.l. bazīdij sporu infekciju, un tā attīstību būtiski neietekmēs augstā Trichoderma sp. sastopamība.The suspension of the new Phlebiopsis gigantea isolate 05 was significantly more effective (p <0.05) than the Trichoderma viride isolate at a depth of 945.3 cm. This means that the new isolate 05 of Phlebiopsis gigantea in the forest ecosystem will be sufficiently competitive in protecting conifers against Heterobasidion annosum s.l. basidium spore infection and its development will not be significantly affected by high levels of Trichoderma sp. incidence.
RŪPNIECISKĀ IZMANTOŠANAINDUSTRIAL USE
Izstrādāts Latvijas izcelsmes sēnes Phlebiopsis gigantea jauns izolāts 05, kas deponēts Latvijas Mikroorganismu kultūru kolekcijā ar reģistrācijas numuru LMKK P1395. Latvijas jaunais izolāts 05 ģenētiski atšķiras no Somijā komerciāli ražotā preparāta „Rotstop” un no Latvijā ražotā Phlebiopsis gigantea izolāta Gl (LMKK P272).A new isolate 05 of Latvian origin fungus Phlebiopsis gigantea has been developed and deposited in the Latvian Collection of Microorganisms with registration number LMKK P1395. The new Latvian isolate 05 is genetically different from the Rotstop product commercially produced in Finland and the Phlebiopsis gigantea isolate Gl (LMKK P272) produced in Latvia.
Salīdzinājumā ar preparātu „Rotstop”, Latvijas jaunajam izolātam ir: 1) ļoti nozīmīgs rādītājs rūpnieciskai izolāta pavairošanai - veido četras reizes vairāk sporu; 2) būtiski augstāks augšanas ātrums. Salīdzinājumā ar preparātu Trichoderma viride izolātu 945,Compared to Rotstop, the new isolate of Latvia has: 1) a very important indicator for industrial reproduction of the isolate - four times more spores; 2) significantly higher growth rate. Compared to Trichoderma viride isolate 945,
Latvijas jaunais izolāts 05 uzrāda augstu efektivitāti aizsardzībā pret Heterobasidion annosum s.l. bazīdijsporu infekciju.The new Latvian isolate 05 shows high efficacy in protection against Heterobasidion annosum s.l. basidium spore infection.
Vietējos Phlebiopsis gigantea izolātus saturošu bioloģisko preparātu izmantošana celmu apstrādē ilgtermiņā mazāk ietekmētu vides bioloģisko daudzveidību.The use of biological preparations containing native Phlebiopsis gigantea isolates in the treatment of strains would be less likely to affect the biodiversity of the environment in the long term.
Informācijas avotiSources of information
1. Woodward S., Stenlid J., Karjalainen R., Htittermann A. 1998. Heterobasidion annosum·. biology, ecology, impact and control. CAB International, Wallingford, UK: 589.1. Woodward S., Stenlid J., Karjalainen R., Htittermann A. 1998. Heterobasidion annosum ·. biology, ecology, impact and control. CAB International, Wallingford, UK: 589.
2. Thor M., Arlinger J.D., Stenlid J. 2006. Heterobasidion annosum root rot in Picea abies·. Modelling economic outcomes of stump treatment in Scandinavian coniferous forests. Scandinavian Journal of Forest Research, 21,414 423.2. Thor M., Arlinger J.D., Stenlid J. 2006. Heterobasidion annosum root rot in Picea abies ·. Modeling economic outcomes of stump treatment in Scandinavian coniferous forests. Scandinavian Journal of Forest Research, 21,414,423.
3. Korhonen K., Liponen K., Bendz M., Johansson M., Ryen I., Venn K., Seiskari P., Niemi Μ. 1994. Control of Heterobasidion annosum by stump treatment with Rotstop, a new commercial formulation of Phlebiopsis gigantea. - In: Johansson M., Stenlid J. Proceedings of Eighth IUFRO Conference on Root and Butt Rots. Sweden/Finland. August 9-16, 1993. Swedish Univcrsity of Agricultural Sciences, Uppsala, Sweden: 675-685.3. Korhonen K., Liponen K., Bendz M., Johansson M., Ryen I., Venn K., Seiskari P., Niemi Μ. 1994. Control of Heterobasidion annosum by stump treatment with Rotstop, a new commercial formulation of Phlebiopsis gigantea. - In: Johansson M., Stenlid J. Proceedings of the Eighth IUFRO Conference on Root and Butt Rots. Sweden / Finland. August 9-16, 1993. Swedish Univcrsity of Agricultural Sciences, Uppsala, Sweden: 675-685.
4. Berglund M., Ronnberg J., Holmer L., Stenlid J. 2005. Comparison of five strains of Phlebiobsis gigantea and two Trichoderma formulations for treatment against natūrai Heterobasidion spore infections on Norway spruce stumps. Scandinavian Journal of Forest Research 20: 12-17.4. Berglund M., Ronnberg J., Holmer L., Stenlid J. 2005. Comparison of five strains of Phlebiobsis gigantea and two Trichoderma formulations for treatment against nature Heterobasidion spore infections on Norway spruce stumps. Scandinavian Journal of Forest Research 20: 12-17.
5. Drenkhan T., Hanso S., Hanso M. 2008. Effect of the stump treatment with Phlebiopsis gigantea against Heterobasidion root rot in Estonia. Baltie Forestry, 14(1),16-25.5. Drenkhan T., Hanso S., Hanso M. 2008. Effect of stump treatment with Phlebiopsis gigantea against Heterobasidion root rot in Estonia. Baltie Forestry, 14 (1), 16-25.
6. Pat LV 14608 B, 2013, C12N1/14; A01N63/04.6. Pat LV 14608 B, 2013, C12N1 / 14; A01N63 / 04.
7. Stenlid J. 1985. Population structure of Heterobasidion annosum as determined by somatic incompatibility, sexual incompatibility, and isoenzyme pattems. Canadian Journal of Botany 63, 2268-2273.7. Stenlid J. 1985. Population structure of the Heterobasidion annosum as determined by somatic incompatibility, sexual incompatibility, and isoenzyme pattems. Canadian Journal of Botany 63, 2268–2273.
8. Liu Α. Z., Samils N., Higgins B., Stenlid J., Slippers B., Naim C. J., Covert S. F. 2009. Microsatellite markers for the wood decay fungus Phlebiopsis gigantea. Conservation genetics, 10 (5), 1529-1532, DOI: 10.1007/sl 0592-008-9785-9.8. Liu Α. Z., Samils N., Higgins B., Stenlid J., Slippers B., Naim C.J., Covert S.F. 2009. Microsatellite markers for wood decay fungus Phlebiopsis gigantea. Conservation Genetics, 10 (5), 1529-1532, DOI: 10.1007 / sl 0592-008-9785-9.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LVP-13-156A LV14791B (en) | 2013-10-21 | 2013-10-21 | Biological preparation for protection of conifer stumps against heterobasidion annosum s.l. basidions sp. infection |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LVP-13-156A LV14791B (en) | 2013-10-21 | 2013-10-21 | Biological preparation for protection of conifer stumps against heterobasidion annosum s.l. basidions sp. infection |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| LV14791A LV14791A (en) | 2014-01-20 |
| LV14791B true LV14791B (en) | 2014-05-20 |
Family
ID=50154081
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| LVP-13-156A LV14791B (en) | 2013-10-21 | 2013-10-21 | Biological preparation for protection of conifer stumps against heterobasidion annosum s.l. basidions sp. infection |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| LV (1) | LV14791B (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3563671A3 (en) * | 2018-02-15 | 2020-02-26 | Envion OY | Spreading device and method for controlling forest pathogens on tree stumps |
-
2013
- 2013-10-21 LV LVP-13-156A patent/LV14791B/en unknown
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3563671A3 (en) * | 2018-02-15 | 2020-02-26 | Envion OY | Spreading device and method for controlling forest pathogens on tree stumps |
| EP3785525A1 (en) * | 2018-02-15 | 2021-03-03 | Envion OY | Composition for controlling forest pathogens on tree stumps |
| US11432480B2 (en) | 2018-02-15 | 2022-09-06 | Envion Oy | Spreading device, method and powder-like mixture composition for controlling or preventing forest pathogens on tree stumps |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| LV14791A (en) | 2014-01-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lygis et al. | Wood-inhabiting fungi in stems of Fraxinus excelsior in declining ash stands of northern Lithuania, with particular reference to Armillaria cepistipes | |
| Carrillo et al. | Entomopathogenic fungi as biological control agents for the vector of the laurel wilt disease, the redbay ambrosia beetle, Xyleborus glabratus (Coleoptera: Curculionidae) | |
| Vasiliauskas et al. | Wood‐decay fungi in fine living roots of conifer seedlings | |
| Menkis et al. | Fungi in decayed roots of conifer seedlings in forest nurseries, afforested clear‐cuts and abandoned farmland | |
| Kubart et al. | Fungal communities in Norway spruce stumps along a latitudinal gradient in Sweden | |
| Buscardo et al. | Is the potential for the formation of common mycorrhizal networks influenced by fire frequency? | |
| Vasiliauskas et al. | Persistence and long-term impact of Rotstop biological control agent on mycodiversity in Picea abies stumps | |
| Mgbeahuruike et al. | Screening of Phlebiopsis gigantea isolates for traits associated with biocontrol of the conifer pathogen Heterobasidion annosum | |
| Bendel et al. | Incidence and distribution of Heterobasidion and Armillaria and their influence on canopy gap formation in unmanaged mountain pine forests in the Swiss Alps | |
| Hamberg et al. | The potential of the decay fungus Chondrostereum purpureum in the biocontrol of broadleaved tree species | |
| Koukol et al. | A new species of Lophodermium on needles of mountain pine (Pinus mugo) from the Giant Mountains in Poland | |
| Ciniglia et al. | Cyanidium chilense (Cyanidiophyceae, Rhodophyta) from tuff rocks of the archeological site of Cuma, Italy | |
| Sun et al. | Variation in properties of Phlebiopsis gigantea related to biocontrol against infection by Heterobasidion spp. in Norway spruce stumps | |
| Burnevica et al. | In vitro screening of Latvian isolates of Bjerkandera adusta and Sistotrema brinkmannii as potential biocontrol agents against Heterobasidion root and butt rots | |
| Tkaczyk et al. | Morphological and molecular identification of Phytophthora species isolated from the rhizosphere of declining oak trees in Krotoszyn Plateau | |
| LV14791B (en) | Biological preparation for protection of conifer stumps against heterobasidion annosum s.l. basidions sp. infection | |
| Prospero et al. | Primary resource capture in two sympatric Armillaria species in managed Norway spruce forests | |
| Redfern et al. | Inoculum concentration and the colonization of Picea sitchensis stumps by basidiospores of Heterobasidion annosum | |
| Filippova et al. | The fungal consortium of Andromeda polifolia in bog habitats. | |
| Smith et al. | Tuberculate ectomycorrhizae of angiosperms: The interaction between Boletus rubropunctus (Boletaceae) and Quercus species (Fagaceae) in the United States and Mexico | |
| Vasaitis et al. | Cut Picea abies stumps constitute low quality substrate for sustaining biodiversity in fungal communities | |
| Walbert et al. | Ectomycorrhiza of Pinus radiata (D. Don 1836) in New Zealand-an above-and below ground assessment | |
| Swedjemark et al. | A highly diverse population of Heterobasidion annosum in a single stump of Picea abies | |
| Latham | Etiology, epidemiology and pathogen biology of Esca disease of grapevines in California | |
| Gunulf et al. | Comparison of colonization capacity by asexual spores of Heterobasidion species in Norway spruce wood |