KR980009329A - 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법에 관한 것으로서, 프리캐스트 겔 중 불연속 겔 시스템의 스택킹 겔(stacking gel)과 레졸루션 겔 (resolution gel)사이에 박막을 설치함으로써 분해능을 장시간 보존할 수 있는 폴리아크릴아미드 전기영동 겔을 제조하는 방법에 관한 것이다.

Description

폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법

본 발명은 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 프리캐스트 겔 중 불연속 겔 시스템의 스택킹 겔(stacking gel)과 레졸루션 겔(resolution gel)사이에 박막을 설치함으로써 분해능을 장시간 보존한 수 있는 폴리아크릴아미드 전기영동 겔을 제조하는 방법에 관한 것이다.

폴리아프릴아미드 겔은 단백질의 분석에 가장 많이 쓰이고 있는 장치로서, 특히 계면활성제인 SDS(Sodium dodecyl sulfate)와 함께 쓰는 SDS-폴리아크릴아미드 겔은 단백질의 분석에 빠질 수 없는 장치이다.

폴리아크릴아미드 전기영동 겔은 폴리아크릴아미드를 중합반응시켜 얻는데, 이때 비스아크릴아미드를 가교제로 사용하여 가교시켜 얻는다. 이와 같이 가교된 폴리아크릴아미드 겔은 그 내부에 환자차원의 체(sieve)를 가지게 된다.

단백질은 등전점(isoelectric point)을 제외하고는 항상 전하를 띠게 되며, 전기장 속에 놓일 경우 이동하게 된다. 만약 계면활성제인 SDS로 단백질을 처리해 주면 SDS가 단백질을 둘러싸며 이때 그 단백질은 SDS가 가진 음전하로 둘러싸여서 단백질-SDS의 결합체는 음전하만을 띠게 된다.

폴리아크릴아미드 겔에 전기장을 걸어주고 SDS에 녹아있는 단백을 통과시키면 단백질은 음전하만을 띠므로 한 방향으로만 움직이며, 겔 내부의 체의 효과에 의하여 크기가 작은 것이 먼저 통과하며 클 것이 느리게 움직이게 된다. 이러한 원리에 의하여 SDS 폴리아크릴아미드 겔 전기영동이 이루어진다.

한편, SDS 폴리아크릴아미드 전기영동은 연속 겔 시스템(continuous gel system)과 불연속 겔 시스템(discontinuous gel system)으로 나눌 수 있다.

여기서, 연속 겔 시스템은 단백질을 적용하는 웰(Well)에서부터 전기영동이 끝나는 부분까지 겔 전체의 농도와 pH가 같은 것을 말한다. 그래서 단백질을 적용하여 전기장을 걸어주는 순간부터 단백질은 체를 통과하면서 분리되기 시작한다.

불연속 겔 시스템은 스택킹 겔(stacking gel)과 레졸루션 겔(resolution gel)로 구성되어 진다. 두 겔은 pH가 다르며, 스택킹 겔은 아크릴아미드 단량체의 농도가 매우 작기 때문에 체의 구멍크기가 매우 커서 단백질의 크기에 관계없이 비슷하게 통과할 수 있도록 해 준다. 레졸루션 겔은 아크릴아미드 단량체의 농도가 분석 가능한 만큼 높다.

일반적으로 겔에 적용하기 위하여 단백질에는 염화이온과 글리신을 섞어주는데 스택킹 겔에서는 pH가 글리신의 pKa 부근으로 글리신의 전하가 작아진다 그래서 염화이온의 운동성이 글리신의 운동성보다 좋아지며 염화이온이 앞에서 움직이고 글리신이 뒤에서 따라가게 된다. 그리고, 두 물질 사이에는 전기 전도도가 매우 낮아서 전위차가 매우 큰 지역이 형성된다. 한편, 단백질 전하의 크기는 염화이온보다 크지만 분자의 크기가 휠씬 크기 때문에 운동성이 염화이온보다 떨어지게 되어 염화이온보다는 뒤쳐지게 되지만 염화이온과 글리신 사이에 전위차가 매우 큰 지역이 형성되었기 때문에 글리신보다는 빨리 이동하게 된다.

위와 같이 스택킹 겔의 체의 구멍 크기는 단백질의 크기보다는 훨씬 크기 때문에 모든 단백질이 거의 비슷한 속도로 이동하게 된다. 따라서 단백질은 염화이온과 글리신 사이에서 이동하게 되며, 염화이온과 글리신 사이의 거리는 미크론 단위밖에 안되기 때문에 자연스럽게 스택킹 겔에서 하나의 띠 안으로 모이게 되는 효과를 얻게 된다 이렇게 모인 단백질은 농도가 높아서 체의 구멍의 크기가 작으며, pH가 높아져 염화이온-글리신 띠가 풀리게 되는 레졸루션 겔에 도달하게 되면 단백질의 크기 순서로 이동하게 된다.

연속 겔 시스템은 단백질이 미처 한 줄에 모이기 전에 체효과가 나타나며, 불연속 겔 시스템은 스택킹 겔에서 단백질을 한 줄로 모은 다음 체효과가 나타나는 래졸루션 겔로 넘어가게 된다. 따라서, 불연속 겔 시스템이 훨신 분해능이 좋고 이로 인해 연속 겔 시스템에 비하여 널리 이용되고 있다.

이와같은 SDS 폴리아크릴아미드 겔은 생명과학에 있어서 빼놓을 수 없는 장치이다. SDS 폴리아크릴아미드 겔은 단백질의 분자량 확인, 단백질 혼합물의 환석 또는 단백질의 분리 및 정제에까지 이용된다.

생명과학의 발전과 그 수요의 증가로 인하여 생명과학 특히, 단백질 과학을 연구하는 실험실이 계속 늘어나고 있으며 앞으로도 그 수는 증가한 것이다. 이에 따라 SDS 폴리아크릴아미드 겔의 수요도 증가한 것이다.

지금까지는 SDS 폴리아크릴아미드 겔을 실험실에서 직접 중합하여 전기영동에 사용하여 왔으나, 여기에는 몇 가지 문제점이 따라왔다.

첫째, 겔을 만드는데 쓰이는 물질, 예를 들어 단량체인 아크릴아미드, 계면활성제인 SDS 등은 신경계통에 장해를 유발하는 시약들로서 매우 독성이 강하다.

둘째, 겔을 만들 때의 온도, 습도 및 중합조건 등에 따라서 겔의 상태가 달라진다. 그러므로 만들 때마다 겔의 상태가 다르다면 결과를 신뢰할 수 없게 된다.

셋째, 겔을 만드는 시간이 많이 걸린다. 보통 겔을 만들기 위한 시차들을 모두 섞고 반응을 시작한 후 5∼10 시간 후에나 단백질을 적용하여 전기영동을 시작할 수 있다. 이에 따라 시간의 손실이 만이 생길 뿐만 아니라 부가적인 일인 겔의 제작에 시간과 정신을 할애해야만 한다.

위와 같은 불편한 점들 때문에 이미 만들어져 있는 겔을 구입하여 사용하는 일이 점점 많아지고 있다.

이미 만들어져 있는 겔을 프리캐스트 겔(pre-cast gel)이라 하는데, 위험한 시약을 직접 만지지 않아도 되고 분석한 단백질이 준비되는 즉시 실험을 할 수 있으며 일정조건 하에서 실험을 할 수 있는 등 많은 이점이 있다. 그러나, 종래의 프리캐스트 겔은 연속 겔 시스템이 주이며, 불연속 겔 시스템이라 하더라도 스택킹 겔(stacking gel)과 레솔루션 겔(resolution gel)의 pH가 같도록 제조된다.

이와 같이 불연속 겔 시스템의 폴리아크릴아미드 전기영동 겔을 제조하는 데 있어서 pH가 같도록 제조되어야 하는 것은 통상의 방법에 따라 불연속 겔 시스템의 폴리아크릴아미드 전기영동 겔을 제조하는 경우 제조된 겔이 건조되는 것을 방지하면 이틀정도 보관이 가능하나, 그 이후에는 pH 차이와 이온농도의 차이에 의하여 확산이 일어나기 때문에 겔의 분해능이 떨어지기 때문이다.

이로 인하여 불연속 겔 시스템의 폴리아크릴아미드 전기영동 겔을 제조하는 경우 스택킹 겔과 레졸루션 겔 사이의 pH를 동일하게 제조하여 그 분해능을 유지하도록 하는 것이다.

그러나, 이와 같이 제조된 불연속 겔 시스템의 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 경우는 오로지 겔의 농도에만 의존하는 것으로서 pH에 의한 단백질 띠의 형성이 없기 때문에 스택킹 겔로서의 기눈이 완전히 발휘되는 것이라 할 수 없으며 분해능도 떨어진다.

본 발명자들을 상기와 같은 프리캐스트 겔 중에서 불연속 겔 시스템의 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 문제점을 해결하기 위하여 연구 노력한 결과, 불연속 겔 시스템의 제조에 있어서 스택킹 겔과 레졸루션 겔 사이에 박막을 설치한 결과 겔 사이의 pH를 달리하면서 전체 겔의 분해능을 장시간 보존할 수 있음을 알게되어 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명은 불연속 겔 시스템의 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 스택킹 겔과 레졸루션 겔 사이에 박막을 설치하여 이온확산을 막아줌으로써 장기간동안 보관해도 분해능이 전혀 떨어지지 않도록 한 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법을 제공하는 데 그 목적이 있다.

도1은 본 발명 비교예에 따라 불연속 SDS-폴리아크릴아미드 전기영동 겔을 만든 직후에 전기영동한 후 겔을 은염색한 패턴을 나타낸 것이다.

도2는 본 발명 실시예에 따라 박막을 설치하여 불연속 SDS-폴리아크릴아미드 전기영동 겔을 만든 후에 진공포장하여 2개월 보관한 것을 이용하여 전기영동시 박막을 제거하여 은염색한 패턴을 나타낸 것이다.

본 발명은 레졸루션 겔을 형성하고 여기에 스택킹 겔을 혼합하고 캐스팅하여 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔을 제조하는 방법에 있어서. 레졸루션 겔과 스택킹 겔 사이에 박막을 5∼100 ㎛ 두께로 설치하는 것을 그 특징으로 한다.

이와 같은 본 발명을 더욱 상세하게 설명하면 다음과 같다.

본 발명은 박막을 설치한 불연속 겔 시스템의 SDS 폴리아크릴아미드 겔을 제조하는 방법에 관한 것이다.

본 발명에서 SDS 플리아크릴아미드 겔을 제조하는 방법은 통상의 방법과 동일한 바, 그 방법은 다음과 같다.

스택킹 겔이나 레졸루션 겔의 성분은 아크릴아미드, Ν,Ν'-메틸렌비스아크릴아미드, Tris-HCI 완충액 및 소듐도데실설페이트(SDS)를 혼합한 것으로서, 이를 물에 녹이고 방치하여 제조된다.

그리고, 이때 가교제로서 암모늄퍼설페이트와 N,N,N',N'-테트라메틸에틸렌디아민(TEMED)를 첨가하여 제조된 것을 사용한다.

이때, 아크릴아미드와 비스아크릴아미드의 혼합비는 통상적으로 제 30 : 0.8로 한다. 그리고, 겔의 %는 아크릴아미드의 농도를 나타낸다.

상기와 같은 조성으로 제조된 스택킹 겔의 경우 아크릴아미드의 최종농도는 보통 3.75 %이고, pH는 완충용액으로 6.8이 되도록 제조한다.

래졸루션 겔의 경우 아크릴아미드의 최종농도는 5∼20 %까지 분리 목적에 따라서 다양하게 사용되고 있으며, pH는 통상적으로 8.8이다.

레졸루션 겔은 상기와 같이 아크릴아미드/비스아크릴아미드, Tris-HCI 완충액(pH 8.8), SDS, 그리고 중합반응의 개시제로 암모늄퍼설페이트와 TEMED 등을 물에 녹이고 방치해 두면 6시간 후에 겔이 형성된다.

스택킹 겔은 상기 레졸루션 겔에서와 같은 조성으로 제도하는 바, 다만 Tris-HCI 완충액의 pH가 6.8이고, 아크릴/비스아크릴의 농도가 휠씬 작다. 이들을 혼합하여 방치해 두면 1∼2 시간 후 겔이 형성된다.

일반적으로 플리아크릴아미드 켈의 제조는 우선 레졸루션 겔을 만든다. 이때 중요한 것은 유리판 사이에 설치하는 스페이서(Spacer)의 놀이가 레졸루션 겔의 높이와 동일해야한다는 것이다. 레졸루션 겔이 형성된 후에 스페이서의 두께와 같은 너비를 가진 박막을 레졸루션 겔과 스페이서에 완전 밀착되도록 설치한다. 밀착은 겔이 젖어있는 상태이기 때문에 어렵지 않게 이루어진다. 박막의 양옆으로 스페이서를 다시 설치하고 클립을 물려서 완전 밀폐되도록 한 다음에 스택킹 겔 용액을 붓고 시료들을 적재(loading)할 수 있는 홈을 형성시켜주기 위해서 콤(comb)을 꽂는다.

이와 같은 방법으로 겔을 만들고 건조되는 것을 막아주면 이틀정도 보관이 가능하다. 그 이후에는 pH 차이와 이온농도의 차이에 의하여 확산이 일어나기 때문에 겔의 분해능이 떨어지게 된다.

종래의 프리캐스트 겔이 해결하지 못한 부분이 바로 이 부분이다. 따라서, 프리캐스트 제품인 연속 겔 시스템의 겔(파마시아, 시그마)이나 불연속 겔 시스템(파마시아)이라 하더라도 스택킹 겔과 레졸루션 겔의 pH가 같은 것들만이 상품화되어 있다.

본 발명에서는 상기와 같은 방법 및 조성으로 스택킹 겔과 레졸루션 겔을 제조하되 겔 사이에 얇은 박막을 대어줌으로써 두 겔 사이의 이온화산을 만들어줌으로써 간단하게 이온확산을 막을 수 있다. 그리고 사용직전에 박막을 제거하고 전기영동을 하게된다.

이와 같은 역할을 하는 박막에 있어서 중요한 것은 그 재질과 두께이다.

박막의 재질은 수분과 이온이 통과해서는 안 되는 것이어야 한다. 이를 만족시킬 수 있는 적당한 박막의 재질로서는 테프른, 에틸셀룰로오즈 또는 폴리염화비닐(PVC) 등이 있다.

이온확장을 막기 위해서는 박막의 두께를 5 ∼ 100㎛로 한다. 박막의 두께가 5㎛ 보다 작으면 제조 및 설치에 문제가 있고, 100㎛를 넘게 되면 박막을 제거했을 때 스택킹 겔과 레졸루션 겔 사이에 공간이 생겨서 단백질 샘플이 스택킹 겔을 통과하여 레졸루션 겔에 도달했을 때 이 공간을 통해서 교차오염(cross-contamination)이 된다. 즉, 다른 샘플과 서로 섞이게 된다. 그러나 박막의 두께가 100㎛ 이하일 때는 박막을 제거했을 때 양 겔들간의 전하에 의해서 겔들이 서로 끌어당겨서 공간이 메워지게 되어 문제없이 전기영동을 수행할 수 있다.

한편, 겔은 수분이 날아가게 되면 전기영동 겔로서의 역할을 다할 수가 없다. 따라서 장기간의 보관이 가능하려면 수분을 보존해줄 수 있어야 한다. 수분을 보존하는 방법은 두 가지를 병행해야 하는 바, 첫 번째로는 진공밀폐상태를 유지하여야 한다는 것과 둘째, 일정량의 수분을 함유하고 있는 습포를 겔과 함께 보관해주는 것이다.

이와 같은 요건을 충족시키기 위한 방법으로 상기에 따라 박막을 설치하여 제조된 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔을 진공하에서 습포와 한께 포장재로 포장하여 보관한다. 이와 같이 습포로 보관하는 것은 일반화된 방법으로서, 습포로는 수분을 함유한 면, 마, 모 및 레이온 중에서 선택된 1 종 이상의 것으로 제조된 것을 사용한다.

그리고, 포장재로는 폴리염화비닐 또는 알루미늄을 사용하는 것이 보온, 보습, 진공보장에 적당하여 바람직하다.

이와 같은 조건하에서 겔을 제조하여 보존실험을 하였을 경우 2개월 동안의 장기보관 후의 전기영동결과가 즉시 제조 후 사용한 전기영동 결과와 크게 다르지 않았으며, 종래의 프리캐스트 전기영동 겔이 상기 한 바와 같이 연속 겔 시스템이거나 불연속 겔 시스템이라도 스택킹 겔과 레졸루션 겔의 pH가 같게하여 완전한 불연속 겔 시스템보다 분해능이 떨어지는 반면 본 발명의 겔은 완전한 불연속 겔 시스템으로서의 분해 능을 보여준다.

따라서 상기한 바와 같은 제조방법으로 프리캐스트 겔을 제조한다면 분해능이 매우 우수한 겔을 만들 수 있다 이와 같은 방법으로 날로 늘어가는 생명공학연구실에서의 프리캐스트 겔에 대할 수요를 충족시킬 수 있으며, 뛰어난 분해능으로 연구발전에 이바지할 수 있을 것이다.

이하, 본 발명을 실시예에 의거하여 상세히 설명하면 다음과 같은 바, 본 발명이 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

SDS-폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조

SDS-플리아크릴아미드 전기영동 겔(이하, SDS-PAGE이라 함)을 10.0 % 겔로서 다음 표 1에 나타낸 바와 같은 혼합비율로 만들었다. 우선 유리판(16.0 × 18.0 × 0.3 ㎝) 두장을 테프론으로 만든 두께 0.75mm의 스페이서(Spacer)로 가장자리 세곳을 막는 식으로 하여 사이에 두고 클립 등으로 고정시켰다. 레졸루션 겔의 성분들을 섞은 다음 유리판 놀이의 2/3 정도 되는 지점까지 높이가 되도록 부어준 후 3-5 시간이 경과하여 겔을 완성하였다. 그 다음에 두께 35 ㎛의 테프론 박막을 완전밀폐가 되도록 레졸루션 겔 위에 위치시켰다.

상기 실시예에 따라 제조된 겔을 수분을 충분히 함유하고 있는 면포와 함께 글러브박스(glove box)에서 진공포장시켰다. 이 때 면포는 완전히 살균시켰으며 면포에 수분을 주기 위해 사용하는 물도 3차 증류수를 사용하였다. 진공밀폐된 상태로 알루미늄재의 포장재를 이용하여 포장하고 2개월 동안 보관하였다.

[비교예]

상기 실시예에서와 같은 조성으로 겔을 제조하되, 다만 박막을 설치하지 않고 그 위로 스택킹 겔의 성분을 섞은 용액을 부어주었다. 그리고 샘플의 홈을 만들어주는 콤(comb)을 꽂아주었다.

[표 1]

(주)스택킹 겔의 경우 20 ㎖의 겔 용액을 만들때의 각 시약의 부피를 ㎖로 나타낸 것이고, 레졸루션 겔의 경우 30 ㎖의 겔 용액을 만들 때의 각 시약의 부피를 ㎖로 나타낸 것이다.

(1) 스택킹 겔 완충액 보존용액 : 0.5 M Tris-HCI(pH 6.8)

(2) 레졸루션 겔 완충액 보존용액 : 3.0 M Tris-HCI(pH 8.8)

(3) 소듐도데실설페이트(Sodium dodecyl sulfate)

(4) Ν, Ν, Ν', Ν'- Tetramethy lethylenedine

[실험예]

상기 비교예에 따라 박막을 설치하지 않고 제조된 겔은 스택킹 겔이 굳은 후 즉시 전기영동을 실시했다.

한편, 상기 실시예에 따라 제조된 겔의 경우는 진공밀폐 상태에서 2개월 보관한 후에 포장을 풀고 박막을 제거한 후에 전기영동을 실시했다. 박막은 스페이서를 제거한 후에 박막의 길이방향으로 뽑아내듯이 제거했다. 전기영동은 통상적인 전기영동 완충액에서 실시하며 스택킹 겔에서의 전기영동전압은 100 V, 레졸루션 겔에서의 전압은 200 V이다.

단백질 샘플은 통상적으로 쓰는 분해형(dissociating) 샘플용 완충액을 사용하여 준비했다. 전기영동이 끝난 후 겔은 통상적으로 쓰는 은염색법(silver staining)을 이용하여 단백질의 전기영동상태를 점검하였으며, 그 결과는 제1도 및 제2도에 나타낸 바와 같다.

제1도는 비교예에 따라 겔을 만든 직후에 전기영동을 실시한 겔의 은염색 패턴이고, 제2도는 실시예에 따라 박막을 설치한 겔의 7개월간의 진공포장 후의 전기영동상태를 나타낸 것이다. 제1도 및 제2도에 있어서, 1레인은 알돌라아제(aldolase)이고, 2레인은 분자량 표시 단백질을 나타낸 것이고, 3레인은 감마 글로불린(γ -globulin)이 다.

2레인의 분자량 표시 단백질(molecular weight marker)은 위에서부터 순서대로 분자량 97.4 kDa, 66.2 kDa, 45 kDa, 31 kDa, 21 kDa 및 14 kDa를 나타낸다.

제1도 및 제2도에서와 같이 비교예에서와 같이 겔을 만든 직후와 본 발명에 따라 박막을 설치하여 2개월 보관한 겔을 사용한 전기영동 패턴이 크게 차이가 없음을 알 수 있다. 이로부터 본 발명에서와 같이 스택킹 겔과 레졸루션 겔 사이에 박막을 설치 하므로써 이온확산을 막고 습포와 함께 진공 포장함으로써 건조를 막아서 분해능을 장기 보존할 수 있음을 알 수 있다.

상기한 바와 같이 본 발명에서와 같이 프리캐스트 전기영동 겐 중 불연속 시스템을 갖는 것을 제조하는 데 있어서 스택킹 겔과 레졸루션 겔 사이에 박막을 설치하므로써 이온확산을 막고 습포와 함께 진공포장함으로써 건조를 막아서 분해능을 장기보존할 수 있다.

Claims (8)

1. 레졸루션 겔을 형성하고 여기에 스택킹 겔을 혼합하고 캐스팅하여 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔을 제조하는 방법에 있어서, 레졸루션 겔과 스택킹 겔 사이에 박막을 5∼100 ㎛ 두께로 설치하는 것을 특징으로 하는 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법.
2. 제1항에 있어서, 상기 레졸루션 겔로는 아크릴아미드, Ν,N'-메틸렌비스아크릴아미드, Tris-HCI 완충액 및 소듐도데실설페이트(SDS)를 혼합하여 물에 녹이고 방치하여 pH가 8.8 되도록 제조된 것을 사용하는 것을 특징으로 하는 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법.
3. 제2항에 있어서, 상기 레졸루션 겔로는 가교제로서 암모늄퍼설페이트와 Ν,Ν,Ν',N'-테트라메틸에틸렌디아민(TEMED)을 첨가하여 제조된 것을 사용하는 것을 특징으로 하는 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법.
4. 제2항 또는 제3항에 있어서. 상기 레졸루션 겔로는 아크릴아미드의 최종농도가 5.0∼20.0%되도록 제조된 것을 사용하는 것을 특징으로 하는 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법.
5. 제1항에 있어서, 상기 스택킹 겔로는 아크릴아미드, Ν,Ν'-메틸렌비스아크릴아미드, 완충액 및 소듐도데실설페이트(SDS)를 혼합하여 물에 녹이고 방치하여 pH 6.8이 되도록 제조된 것을 사용하는 것을 특징으로 하는 SBS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법.
6. 제5항에 있어서, 상기 스택킹 겔로는 가교제로서 암모늄퍼설페이트와 N,N,N',N'-테트라메틸에틸렌디아민(TEMED)를 첨가하여 제조된 것을 사용하는 것을 특징으로 하는 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법.
7. 제5항 또는 제6항에 있어서, 상기 스택킹 겔로는 아크릴아미드의 최종농도가 3.75%되도록 제조된 것을 사용하는 것을 특징으로 하는 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법.
8. 제1항에 있어서, 상기 박막으로는 테프론, 폴리염화비닐 및 에틸셀룰로오즈 중에서 선택된 1종 이상의 것으로 제조된 것을 사용하는 것을 특징으로 하는 SDS 폴리아크릴아미드 전기영동 겔의 제조방법.

   ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.