Claims (7)
서열 목록에서 SEQ ID Nos. 1 내지 5로 표시되는 핵산 및 그것의 상보 서열들로 이루어지는 군으로부터 선택된 최소한 하나의 핵산의 일부분을 역전사 및 2단계의 중합효소 연쇄 반응(PCR)에 의해 증폭시키는 것으로 이루어지는, 신증후성 출혈열 바이러스의 검출 방법.SEQ ID Nos. Detection of nephrotic hemorrhagic fever virus, comprising amplifying a portion of at least one nucleic acid selected from the group consisting of the nucleic acids represented by 1 to 5 and its complementary sequences by reverse transcription and a two-step polymerase chain reaction (PCR) Way.
(a)시험할 샘플로부터 핵산을 단리하는 단계; (b)단리된 핵산에 대해, 서열 목록의 SEQ ID No.6으로 표시되는 핵산 단편 구설의 변이 서열 및 또는 목록의 SEQ ID No. 7로 표시되는 핵산 단편 또는 그것의 변이 서열로 이루어지는 군으로부터 선택되는 프라이머를 사용하여 역전사를 수행함으로써 역전사 DNA 생성물을 얻는 단계; (c)역전사 DNA생성물에 대해, 서열 목록의 SEQ ID No. 6으로 표시되는 핵산 단편 또는 그것의 변이 서열을 서열 목록의 SEQ ID No. 7로 표시되는 핵산 단편 또는 그것의 변이 서열과 조합하여 사용하는 첫번째 PCR 단계를 수행함으로써 DNA를 증폭시키는 단계; (d)증폭된 DNA에 대해, 서열 목록의 SEQ ID No. 8로 표시되는 핵산 단편 또는 그것의 변이 서열을 서열 목록의 SEQ ID No. 9로 표시되는 핵산 단편 또는 그것의 변이 서열과 조합하여 사용하는 두번째 PCR단계를 수행함으로써 DNA를 증폭시키는 단계; 그리고 (e)증폭된 DNA를 검출하는 단계로 이루어지는, 시험할 샘플중에 함유된 신증후성 출혈열 바이러스의 검출 방법.(a) isolating nucleic acid from the sample to be tested; (b) for an isolated nucleic acid, the mutant sequence of the nucleic acid fragment construct represented by SEQ ID No. 6 in the Sequence Listing and / or SEQ ID No. Obtaining reverse transcription DNA product by performing reverse transcription using a primer selected from the group consisting of the nucleic acid fragment represented by 7 or a variant sequence thereof; (c) For reverse transcription DNA products, SEQ ID No. The nucleic acid fragment represented by 6 or a variant sequence thereof is selected from SEQ ID No. Amplifying the DNA by performing the first PCR step used in combination with the nucleic acid fragment represented by 7 or a variant sequence thereof; (d) for amplified DNA, SEQ ID No. The nucleic acid fragment represented by 8 or a variant sequence thereof is selected from SEQ ID No. Amplifying the DNA by performing a second PCR step used in combination with the nucleic acid fragment represented by 9 or a variant sequence thereof; And (e) detecting the amplified DNA.
서열 목록에서 SEQ ID No. 6,7,8 또는 9로 표시되는 핵산 또는 그것의 변이 서열을 가지는, 신증후성 출혈열 바이러스의 검출에 사용하기 위한 프라이머.SEQ ID No. in the sequence listing. A primer for use in the detection of nephrotic hemorrhagic fever virus having a nucleic acid represented by 6,7,8 or 9 or a variant sequence thereof.
제3항에 있어서, SEQ ID No. 6,7,8 및 9의 변이 서열이 각각 SEQ ID No. 27,28,29 및 30으로 표시되는 핵산 서열인 것을 특징으로 하는 프라이머.The method of claim 3, wherein SEQ ID No. The variant sequences of 6,7,8 and 9 are shown by SEQ ID No. A primer characterized in that the nucleic acid sequence represented by 27,28,29 and 30.
SEQ ID No. 6으로 표시되는 핵산 서열 또는 그것의 변이 서열 및 SEQ ID No. 7로 표시되는 핵산 서열 또는 그것의 변이 서열을 가지는 프라이머 쌍과 SEQ ID No. 8로 표시되는 핵산 서열 또는 그것의 변이 서열 및 SEQ ID No. 9로 표시되는 핵산 서열 또는 그것의 변이 서열을 가지는 다른 프라이머 쌍을 포함하는, 신증후성 출혈열 바이러스를 검출하기 위한 키트.SEQ ID No. The nucleic acid sequence represented by 6 or a variant sequence thereof and SEQ ID No. A primer pair having a nucleic acid sequence represented by 7 or a variant sequence thereof and SEQ ID No. The nucleic acid sequence represented by 8 or its variant sequence and SEQ ID No. A kit for detecting nephrotic hemorrhagic fever virus, comprising another primer pair having a nucleic acid sequence represented by 9 or a variant sequence thereof.
제5항에 있어서, 혈액으로부터 RNA를 단리하기 위한 시약, 역전사효소 및 PCR 시약들을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 키트.6. The kit of claim 5 further comprising reagents, reverse transcriptases and PCR reagents for isolating RNA from blood.
제5항에 있어서, 역전사효소, DNA 중합효소, RNAse 억제제, 완충제, 염화 마그네슘, dNTP 혼합물 및 양성 대조표준 RNA를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 키트.6. The kit of claim 5 further comprising reverse transcriptase, DNA polymerase, RNAse inhibitor, buffer, magnesium chloride, dNTP mixture and positive control RNA.
※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.※ Note: The disclosure is based on the initial application.