KR920018071A - 폴리펩티드 수용체 및 g단백질-연결 수용체의 정제 방법 - Google Patents
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 "재료 및 방법"에서 기술된 바와 같이 CH3C1막에 결합된 수용체-결합 및 자유〔125I〕Tyr11-S14의 분리를 예증한다.
제2도는 다양한 상이한 세정제 유형을 사용하여 세포막으로부터 특이 결합 방사성 리간드의 비교 용해를 예증한다.
제3도는 상이한 농도의 다양한 세정제에 대한 100,000g상등액으로부터 무상(無傷)의 수용체 : 리간드 복합체의 비교 회수를 예증한다.
Claims (12)
- (a) 폴리펩티드 수용체에 특이하게 결합할 수 있는 리간드와 세포 물질 함유 수용체를 접촉시켜 수용체 ; 리간드 복합체를 형성하고 ;(b) 수용체 ; 리간드 복합체를 용해시키고 ; (c) 용해된 수용체 ; 리간드 복합체와 수용체 ; 리간드 복합체에 결합할 수 있는 기질을 접촉시키며 ; (d) 결합 수용체 ; 리간드 복합체와 리간드 ; 수용체 복합체로부터 수용체를 용출제내로 방출 시킬 수 있는 용출제를 접촉시키는 것으로 구성되는 폴리펩티드 수용체의 정제 방법.
- 제1항에 있어서, 수용체는 G 단백질-연결된 방법.
- 제1항에 있어서, 수용체의 특이적 G 단백질이 단계(d)까지 수용체 ; 리간드 복합체와 결합된 채로 남아있고, 수용체 및 G 단백질이 모두 용출제내에 함유되고 친화 컬럼의 용출에 의해 수용체 및 해리된 G 단백질을 모두 산출하는 방법.
- 제1항에 있어서, (e) 용출제로부터 수용체를 회수하는 단계가 포함되는 방법.
- 제4항에 있어서, 수용체는 당단백질에 결합할 수 있는 기질과의 접촉에 의해 보다 정제시킬 수 있는 방법.
- 제1항에 있어서, 수용체 : 리간드 복합테는 담증산염-유사 세정제로 용해시키는 방법.
- 제1항에 있어서, 리간드는 비오틴기화되고 단계 (c)의 기질은 아비된 또는 스트렙타비딘을 함유하는 방법.
- 제1항에 있어서, 단계 (d)에서 용출제는 이양이온성 킬레이트화제를 함유하는 방법.
- 제8항에 있어서, 용출제는 또한 GTP 동족체를 함유하는 방법.
- (a) 비오틴기화 수용체 동족체 리간드와 세포물질 함유 수용체를 접촉시켜 수용체 : 리간드 복합체를 형성하고, (b) 수용체 : 리간드 복합체를 담즙산염-유사 세정제에 용헤시키고 ; (c) 용해된 수용액 : 리간드 복합체와 아비딘 또는 스트렙타비딘을 함유하는 기질을 접촉시키며 ; (d) 결합수용체 : 리간드 복합체와 이양이온성 킬레이트화제 또는 GTP동족체, 또는 둘 모두 함유하는 용출제를 접촉시켜 수용체를 용출제내를 방출시키는 것을 구성되는 G단백질-연결 수용체의 정제 방법.
- 제1항의 방법에 의해 정제된 G단백질-연결 수용체.
- 제11항에 있어서, 혈관활성 장내 펩티드, 성장 호르몬 방출 인자, 안기오텐신, 소마토스타틴, 오피오이드, 부신피질 자극 호르몬, 코르티코트로핀 호르몬 방출 인자, 고나도트로핀 방출 인자, 바소프레신/옥시토신, 글루카곤, 콜레시스토키닌, 부갑상선 호르몬, 칼시토닌, 칼시토닌 유전자 관련 펩티드, 뉴로펩티드 Y, 펩티드 YY, 세크레틴, 젤라틴, 키오트로핀, 펩티드 히스티딘 이소루신, 브래디키닌, 뉴로텐신, 프로스타글란딘(E1,E2,D,I2및 F2-알파), 로코트리엔(A4, B4및 C4), 트롬빈, 인지질산, 혈소판 활성 인자, 트로복산, 루코트리엔, 세로토닌(5HT 1b, 2 및 D), 히스타민, 감마 아미노 부티르산, 글루탐산, 아데노신(A1 및 A2), 푸린(P1, P2t, P2x 및 P2y) 및 N-베타-알란닐-돕아민 수용체로 구성된 군으로부터 선택된 수용체.※참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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