KR920000928A - 선충류에 대해 활성인 바실러스 투린지엔시스 미생물 바실러스 투린지엔시스 분리물로 클론된 선충류-활성의 독소를 코딩하는 유전자 - Google Patents

선충류에 대해 활성인 바실러스 투린지엔시스 미생물 바실러스 투린지엔시스 분리물로 클론된 선충류-활성의 독소를 코딩하는 유전자 Download PDF

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KR920000928A KR1019910009696A KR910009696A KR920000928A KR 920000928 A KR920000928 A KR 920000928A KR 1019910009696 A KR1019910009696 A KR 1019910009696A KR 910009696 A KR910009696 A KR 910009696A KR 920000928 A KR920000928 A KR 920000928A
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엠. 페인 제윌
이. 쉬웹 조지
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제이. 시크 오거스트
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내용 없음

Description

선충류에 대해 활성인 바실러스 투린지엔시스 미생물 바실러스 투린지에시스 분리물로 클론된 선충류-활성의 독소를 코딩하는 유전자
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (18)

  1. 바실러스 투린지엔시스(B.t.) 균주 PS80JJ1, b) 바실러스 투린지엔시스 (B.t.) 균주 PS158D5, c) 바실러스 투린지엔시스(B.t.) 균주 PS167P, d)바실러스 투린지엔시스(B.t.) 균주 PS169E, e) 바실러스 투린지엔시스(B.t.) 균주 PS177F1, f) 바실러스 투린지엔시스(B.t.) 균주 PS177G, g) 바실러스 투린지엔시스(B.t.) 균주 PS204G4, 및 h) 바실러스 투린지엔시스(B.t.) 균주 PS204G6로 구성도니 분리물 그룹으로부터 선택되는 선충류에 대한 활성을 갖는 바실러스 투리지엔시스 분비물.
  2. a) 선충류 박멸제 독소를 코딩하는 서열 1에 제시된 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 뉴클레오티드 서열, d) 선충류 박멸제 독소를 코딩하는 서열3에 제시된 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 뉴클레오티드 서열, c) 선충류 박멸제 독소를 코딩하는 서열5에 제시된 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 뉴클레오티드 서열, d) 선충류 박멸제 독소를 코딩하는 서열7에 제시된 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 뉴클레오티드 서열, e) 선충류 박멸제 독소를 코딩하는 서열9에 제시된 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 뉴클레오티드 서열, f) 제한 단편물길이 다형체 분석에 의해 4.4kbxba I 하이브리드화 밴드, QLQAQPLIPYNVLA를 포함하는 N-말단의 아미노산 서열 및 VQRILDEKLSFQLIK를 포함하는 내부 아미노산 서열을 갖는 B.F. PS63B로 정의된 선충박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는 선충박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물ㅇ르 포함한 DNA, g) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 5.0kb EcoR1 하이브리드화 밴드를 갖는 B.t. Ps17로 정의된 선출박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선충박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, h) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 1.8kb EcoR1 하이브리드화 밴드를 갖는 B.t Ps17e로 정의된 선충박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선충박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, 및 i) 바실러스 투린지엔시스 균주 PS80JJ1, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS15875, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS167P, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS169E, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177F1, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177G, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G4 및 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G6 중 하나로 부터 수득된 유전자의 DNA 서열을 포함하는 선충박멸성 독소를 코딩하는 DNA들로 구성된 그룹중에서 선택되는 DNA.
  3. 서열2, 서열4, 서열6, 서열8, 서열10에 제시된 서열에서 선택되는 아미노산 서열을 갖는 선충박멸성 독소를 코딩하는 DNA.
  4. B.t. Ps33F2, B.t. PS63B, B.t. PS52A1, B.t. PS69D1, B.t. PS17a, B.t. PS17b, B.t. PS17d 및 B.t. PS17e으로 정의된 유전자중에서 선택되는 유전자를 포함한 재조합 DNA 전이 벡터.
  5. 제4항에 있어서, pMYC 2316, pMYC 2321, pMYC 2317, pMYC 1627, pMYC 1628, pMYC 2309, 및 pMYC 2311로 구성된 그룹중에서 선택되는 재조합 DNA 전이 벡터.
  6. a) 거의 모든 선충박멸성 작용을 보유하는 서열 2에 제시된 아미노산 서열 또는 그것의 일부, b) 거의 모든 선충박멸성 작용을 보유하는 서열 4에 제시된 아미노산 서열 또는 그것의 일부, c) 거의 모든 선충박멸성 작용을 보유하는 서열 6에 제시된 아미노산 서열 또는 그것의 일부, d) 거의 모든 선충박멸성 작용을 보유하는 서열 8에 제시된 아미노산 서열 또는 그것의 일부, 및 e) 거의 모든 선충박멸성 작용을 보유하는 서열 10에 제시된 아미노산 서열 또는 그것의 일부, 중 하나를 포함하는 아미노산 서열을 갖는 선충류에 대한 활성 독소.
  7. a) 거의 모든 선충박멸성 작용을 보유하는 서열 2에 제시된 아미노산 서열 또는 그것의 일부를 갖는 독소, b) 거의 모든 선충박멸성 작용을 보유하는 서열 4에 제시된 아미노산 서열 또는 그것의 일부를 갖는 독소, c) 거의 모든 선충박멸성 작용을 보유하는 서열 6에 제시된 아미노산 서열 또는 그것의 일부를 갖는 독소, d) 거의 모든 선충박멸성 작용을 보유하는 서열 8에 제시된 아미노산 서열 또는 그것의 일부를 갖는 독소, 및 e) 거의 모든 선충박멸성 작용을 보유하는 서열 10에 제시된 아미노산 서열 또는 그것의 일부를 갖는 독소 중에서 선택된 바실러스 투린지엔시스 선충박멸성 독소를 형질발현 하도록 형질전환된 숙주 세포.
  8. 제7항에 있어서, a) NRRL B-18785의 선충박멸성 특징이 규명된 이. 콜리(NM522) (pMYC2316), b) NRRL B-18770의 선충박멸성 특징이 규명된 이. 콜리(NM522) (pMYC2321), c) NRRL B-18816의 선충박멸성 특징이 규명된 이. 콜리(NM522) (pMYC2317), d) NRRL B-18851의 선충박멸성 특징이 규명된 이. 콜리(NM522) (pMYC1627), e) NRRL B-18652의 선충박멸성 특징이 규명된 이. 콜리(NM522) (pMYC1628), f) 이. 콜리(NM522) (pMYC2311), 및 g) 이. 콜리(NM522) (pMYC2309) 중에서 선택된 형질환된 박테리아 숙주.
  9. a) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 1에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, b) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 3에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, c) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 5에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, d) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 7에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, e) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 9에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, f) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 4.4kbxba I 하이브리드화 밴드, QLQAQPLIPYNVLA를 포함하는 N-말단의 아미노산 서열 및 VQRILDEKILSFQLIK를 포함하는 내부 아미노산 서열을 갖는 B.t. PS63B로 정의된 선충박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로부터 수득되는, 선충백멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, g) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 5.0kb EcoRI 하이브리드화 밴드를 갖는 B.t. PS17d로 정의된 선충 박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선충박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 수득되는, 선충 박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, h) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 1.8kb EcoRI 하이브리드화 밴드를 갖는B.t. PS17e로 정의된 선충 박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선충박멸성 독소를코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열또는 수득되는, 선충 박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, 및 i) 바실러스 투린지엔시스 균주 PS80JJ1, 바실러스 투린지엔시스 균주 JS158D5, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS167P, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS169E, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177F1, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177G, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G4 및 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G5 중 하나로 부터 수득된 유전자의 선택된 DNA에 의해 코딩되는 8-내독소 폴리 펩타이드독소를 코딩한 바실러스 투린지엔시스 독소 유전자의 형질 발현체인 적어도 하나의 세포내 선충 박멸성 독소를 포함한 거의 무상(intact)의 재조합 세포.
  10. 제9항에 재조합 세포를 포함하는 선충박멸제 조성물.
  11. a) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 1에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, b) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 3에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, c) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 5에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, d) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 7에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, e) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 9에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, f) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 4.4kbxba I 하이브리드화 밴드, QLQAQPLIPYNVLA를 포함하는 N-말단의 아미노산 서열 및 VQRILDEKILSFQLIK를 포함하는 내부 아미노산 서열을 갖는 B.t. PS63B로 정의된 선충박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로부터 수득되는 선중박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, g) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 5.0kb EcoRI 하이브리드화 밴드를 갖는 B.t. PS17d로 정의된 선충 박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선충박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, h) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 1.8kb EcoRI 하이브리드화 밴드를 갖는 B.t. PS17e 로 정의된 선충 박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선출박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 코딩하는 유전의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, 및 i) 바실러스 투린지엔시스 균주 PS80JJ1, 바실러스 투린지엔시스 균주 JS158D5, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS167P, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS169E, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177F1, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177G, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G4 및 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G6 중 하나로 부터 수득된 유전자의 선택된 DNA 서열을 포함하는 선충박멸성 독소를 코딩하는 DNA,로 구성된 그룹중에서 선택되는 DNA를 포함한 식물.
  12. a) 선충박멸설 독소를 코딩하는 서열 1에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, b) 선충박멸설 독소를 코딩하는 서열 3에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, c) 선충박명설 독소를 코딩하는 서열 5에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, d) 선충박명설 독소를 코딩하는 서열 7에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, e) 선충박멸설 독소를 코딩하는 서열 9에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, f) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 4.4kbxba I 하이브리드화 밴드, QLQAQPLIPYNVLA를 포함하는 N-말단의 아미노산 서열 및 VQRILDEKLSFQLIK를 포함하는 내부 아미노산 서열을 갖는 B.t. PS63B로 정의된 선충박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스분리물로 부터 수득되는 선충박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, g) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 5.0kb EcoRI 하이브리드화 밴드를 갖는 B.t. PS17d로 정의된 선충 박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선충박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, h) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 1.8kb EcoRI 하이브리디화 밴드를 갖는 B.t. PS17e 로 정의된 선충 박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선출박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 코딩하는 유전의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, 및 i) 바실러스 투린지엔시스 균주 PS80JJ1, 바실러스 투린지엔시스 균주 JS158D5, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS167P, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS169E, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177F1, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177G, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G4 및 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G6 중 하나로 부터 수득된 유전자의 DNA 서열을 포함하는 선충박멸성 독소를 코딩하는 DNA,로 구성된 그룹중에서 선택되며 식물이나 기타 숙주 세포로 형질환되는 상기 DNA에 의해 코딩된 선충류 구제 유효량의 독소를 선충류와 접촉시키는 것을 특징으로 하는 선충류 구제 방법.
  13. a) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 1에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, b) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 3에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, c) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 5에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, d) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 7에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, e) 선충박멸성 독소를 코딩하는 서열 9에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, f) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 4.4kbxba I 하이브리드화 밴드, QLQAQPLIPYNVLA를 포함하는 N-말단의 아미노산 서열 및 VQRILDEKLSFQLIK를 포함하는 내부 아미노산 서열을 갖는 B.t. PS63B로 정의된 선충박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스분리물로 부터 수득되는 선충박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, g) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 5.0kb EcoRI 하이브리드화 밴드를 갖는 B.t. PS17d로 정의된 선충 박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선충박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, h) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 1.8kb EcoRI 하이브리드화 밴드를 갖는 B.t. PS17e 로 정의된 선충 박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선출박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 수득되는, 선충박멸성 독소를코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, 및 i) 바실러스 투린지엔시스 균주 PS80JJ1, 바실러스 투린지엔시스 균주 JS158D5, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS167P, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS169E, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177F1, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177G, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G4 및 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G6 중 하나로 부터 수득된 유전자의 선택된 DNA 서열을 포함하는 선충박멸성 독소를 코딩하는 DNA,로 구성된 그룹중에서 선택되며 식물이나 기타 숙주 세포로 형질환 되는 상기 DNA에 의해 코딩된 선충류 구제 유효량의 독소를 동물숙주에 투여하는 것을 포함한 선충류가 서식하는 숙주의 치료 방법.
  14. 제13항에 있어서, 상기 선충 박멸성 독소는 상기 바실러스 투린지엔시스로 부터 수득된 바실러스 투린지엔시스 유전자에 의해 형질발현되며, 상기 유전자는 식물의 구근층이나 엽층에서 서식, 생존 및 증식이 가능하도록 식물 또는 상이한 미생물에 유전공학적으로 삽입되는 것을 특징으로 하는 방법.
  15. 재조합 숙주로 형질전환되고 형질발현된 바실러스 투린지엔시스 DNA에 의해 코딩되는 독소 또는 야생형 바실러스 투린지엔시스에 의한 독소의 흡충 박멸성 유효량을 흡충류가 서식하는 숙주에 투여하거나 상기 흡충류에 직접 투여 또는 상기 흡충류의 원 위치에 투여하는 것을 포함한 흡충류의 구제 방법.
  16. 제15항에 있어서, 상기 바실러스 투린지엔시스가 바실러스 투린지엔시스 PS17, 바실러스 투린지엔시스 PS33F2, 바실러스 투린지엔시스 PS52A1, 바실러스 투린지엔시스 PS63B, 바실러스 투린지엔시스 PS69D1, 바실러스 투린지엔시스 PS80JJ1, 바실러스 투린지엔시스 PS158D5, 바실러스 투린지엔시스 PS167P, 바실러스 투린지엔시스 PS169E, 바실러스 투린지엔시스 PS177F1, 바실러스 투린지엔시스 PS177G, 바실러스 투린지엔시스 PS204G4, 바실러스 투린지엔시스 PS204G6 중에서 선택된 것을 특징으로 하는 방법.
  17. 제15항에 있어서, 상기 DNA가 a) 선충박멸설 독소를 코딩하는 서열 1에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, b) 선충박멸설 독소를 코딩하는 서열 3에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, c) 선충박멸설 독소를 코딩하는 서열 5에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, d) 선충박멸설 독소를 코딩하는 서열 9에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, e) 선충박멸설 독소를 코딩하는 서열 7에 제시된 서열 또는 그것의 단편을 포함한 뉴클레오티드 서열, f) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 4.4kbxba I 하이브리드화 밴드, QLQAQPLIPYNVLA를 포함하는 N-말단의 아미노산 서열 및 VQRILDEKLSFQLIK를 포함하는 내부 아미노산 서열을 갖는 B.t. PS63B로 정의된 선충박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는 그것의 단편물을 포함한 DNA g) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 5.0kb EcoRI 하이브리드화 밴드를 갖는 B.t. PS17d로 정의된 선충 박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선충박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, h) 제한 단편물 길이 다형체 분석에 의해 1.8kb EcoRI 하이브리드화 밴드를 갖는 B.t. PS17e 로 정의된 선충 박멸제 작용의 바실러스 투린지엔시스 분리물로 부터 수득되는, 선출박멸성 독소를 코딩하는 유전자의 뉴클레오티드 서열 또는 수득되는, 선충 박멸성 독소를 코딩하는 유전의 뉴클레오티드 서열 또는 그것의 단편물을 포함한 DNA, 및 i) 바실러스 투린지엔시스 균주 PS80JJ1, 바실러스 투린지엔시스 균주 JS158D5, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS167P, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS169E, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177F1, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS177G, 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G4 및 바실러스 투린지엔시스 균주 PS204G6 중 하나로 부터 수득된 유전자의 선택된 DNA 서열을 포함하는 선충박멸성 독소를 코딩하는 DNA중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  18. 재조합 숙주로 형질전환되고 형질발현되는 바실러스 투린지엔시스에 의해 코딩된 독소 또는 야생형 바실러스 투린지엔시스에 의한 독소를 포함하며, 흡충 박멸제의 적용에 적당한 담체를 주가로 포함하는 흡충류 구제를 위한 조성물.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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