KR820000865B1 - 2-아릴-1h-페리미딘 유도체의 제조방법 - Google Patents

Abstract

내용 없음.

Description

2-아릴-1H-페리미딘 유도체의 제조방법

본 발명은 면역억제제로 유용한 새로운 2－아릴－1H－레리미딘 유도체 및 그의 약학적으로 용인되는 염을 제조하는 방법과 관련이다.

현재에는 본 발명의 화합물과 다른 2－치환－1H－페리미딘 화합물과 2－치환－2,3－디히드로－1H－페리미딘 화합물이 보고되어 있다.

Proc. Am. Assn. Cancer Res. 3, 319(1962)에서는 2－(3,4－디클로로페닐)－1H－벤조(데)－퀴나졸린－(본 출원의 명명법으로는 2－(3,4－디클로로페닐)－1H－페리미딘과 같은 화합물)－의 정(靜)종양작용이 보고되고 있다. 이 보고에서는 특히 이 화합물이 경구적으로는 효과가 없음을 기술하고 있다.

J. Het. Chem. 1, 108 (1964)에서는 계속된 연구로서 일련의 2－아릴－2,3－디히드로－1H－페리미딘을 합성하였다.

이들에는 2－(p－클로로페닐)－2,3－디히도로－1H－페리미딘, 2－(3,4－디클로로페닐)－2,3－디히드로－1H－페리미딘, 2－(p－브로모페닐)－2,3－디히드로－1H－페리미딘을 포함한다. 이 보고서에서는 이들 화합물의 효용성에 대해서는 언급이 없다.

위 화합물들의 효용성에 대해서는 J. Med. Chem. 9(4) 599(1966)에 보고되어 있는데 약한 항종약 작용이 있음을 나타냈다.

J. Org. Chem. 36, No. 11, 1477(1971)에서는 2－페닐－1H－페리미딘, 2－(p－클로로페닐)－1H－페리미딘 및 그의 p－톨루엔 설포네이트염을 포함하는 2－치환－1H－페리미딘과 그의 p－톨루엔선포네이트염에 대해 기재하고 있다. 여기서도 효용성에 대해서는 언급이 없다. 유사하게 Reakts. Sposobnost′ Org. Soedin. 6(1) 47－54(1969)(Eng.)에서는 2－페닐－1H－페리미딘, 2－(p－톨릴)－1H－페리미딘, 2－(p－브로모페닐)－1H－페리미딘 및 2－(m－브로모페닐)－1H－페리미딘을 기재하고 있으나, 그 용도에 대해서도 언급이 없다.

다음 두 참고서는 1,2－치환 페르미딘의 새로운 합성법에 대해 기재하고 있다.

쏘련연방특허 504,770은 페리미딘을 “생물학적 효력이 있으며 의약으로서의 용도를 발견할 수 있는…”이라고 기재하였으나 이것을 믿을만한 참고자료에 대한 주해가 없다. 다만 1,2－치환화합물에만 관련된 것 같다.

Khim. Farm. Zhur. 11 (5) 87－93 (1977)에서 1,2－치환페리미딘과 2－(3,4－디메톡시페닐)페리미딘의 효과에 대해 기재하고 있다.

본 발명의 화합물은 1－위치에 치환되지 않으므로 기타 참고자료의 화합물과 다르고, 청구범위의 화합물들은 페닐환에 다른 치환체를 가지므로서 구별된다. 더 나아가, 본 발명은 포유동물 면역반응의 억제와 관련이 있고, CNS나 정종양작용에 대해서는 언급이 않는다.

본 발명은 다음 일반 구조식의 화합물인 새로운 2－아릴－1H－페리미딘 화합물 및 그의 약학적으로 용인되는 염을 제조하는 방법과 관련이 있다.

R¹은 m－ 또는 p－의 －CF₃, －OCF₃, －SCF₂, 또는 －OC₂F₅기이다.

본 발명 화합물은 1,8－디아미노－나프탈렌을

다음 구조식의 아실화물과 함게 축합하여 얻는다.

여기서 R¹은 전과 같고, X는 플루오로, 클로로, 브로모, 수소이다.

구조식 I에서

기의 탄소원자는 항상 2개의 질소원자의 중간에 있고 그래서 구조식 Ⅰ은 다음 2가지 구조로 나타내어 진다.

여기서 R¹은 전과 같다.

구조식 Ⅱ의 화합물은 X가 플루오로, 클로로, 브로모일때 제조되고 구조식 Ⅲ의 화합물은 X가 수소일때 제조된다. 이것은 J. Het. Chem. 1,108(1964), J. Org. Chem. 36 (11), 1477(1971)에 잘 기재되있다.

출발물질로 사용되는 구조식 Ⅴ의 화합물의 대부분은 잘 알려진 화합물이고, 이들은 통상의 방법으로 제조된다. m－및 p－트리플루오로메톡시벤조일 플루오리드는 알킬 m－ 또는 p－메톡시벤조에이트를 염소화하고 얻어진 m－ 또는 p－트리클로로메톡시 벤조일클로라이드와 SbF₃및 SbCl₅의 혼합물과 반응시켜 얻을 수 있다. m－ 및 p－트리풀루오로메틸 티오벤조일 클로라이드는 알킬 m－ 또는 p－요도벤조에이트를 Hg(SCF₃)₂와 반응시키고, 얻어지는 알킬 m－ 또는 p－트리플루오로메틸 티오벤조에이트를 가수 분해하고, 유리산을 산클로라이드로 전환시켜 얻는다. m－와 p－펜타플루오로에톡시벤조일 클로라이드는 다음과 같이 제조할 수 있다：즉 m－ 또는 p－브로모페놀을 트리플루오로아세틱 무수물과 아실화하고 이것을 SF₄와 반응시켜 m－ 또는 p－펜타플루오로에톡시페닐 브로마이드을 얻는다. 이것을 부틸리튬과 CO₂와 반응시켜 해당산으로 전환시키고, 다시 SOCl₂와 반응시켜 아실 클로라이드로 전환한다. 구조식 Ⅲ의 화합물의 제조에 사용되는 해당 알데히드를 통상의 방법으로 아실할라이드로부터 제조한다.

구조식 Ⅰ의 화합물은 포유동물의 면역작용을 억제시키는데에 유용하다. 그런 억제는 포유동물체가 외부단백질에 대한 반응으로서 항체 및 반응세포를 형성할 때마다 나타나는 면역반응의 억제를 말한다. 면역억제 작용의 실제적인 응용은 매우 다양하지만, 가장 많이 쓰이는 것을 기관을 이식할 때이다. 그러나 면역억제 효과는 총체적으로 자가면역 질환으로 알려진 여러 가지 질환에 유용하게 사용될 수 있다. 대표적인 자가면역 질환은 자가면역 용혈성 빈혈, 특발성 혈소판 감소증, 낭창성 홍진, 낭창성 간염, 낭창성 신염, 신우신염, 신증후군, 굳파스툴 증후군(Goodpasture´s syndrome), 웨게너의 육아종증(Wegener´s granulomatosis), 스크레로데르마(schleroderma), 세자리병(Seaary´s disease), 건선, uveitis, 류마치스성 관절염, 궤양성 대장염, 갑상선염, 고환염 등이다.

구조식 Ⅰ의 화합물의 투여는 경구 또는 비경구로 할 수 있다. 정확한 용량은 화합물에 따라 매우 다양하나, 높은 치료적 영역을 가져서, 매우 효과적이고, 무독성 용량이 넓다. 소포유동물에서 시험해볼때 시험체에 따라, 이 범위는 1.6내지 25mg／kg／1일이다.다른 화합물에서는 100mg／kg／1일 또는 그 이상까지도 이용되었다. 소 및 대동물의 용량사이의 관계는 다른 면역 억제제의 인체용량을 보면 즉 아자티오푸린은 일반적으로 1내지 2mg／kg이나 생쥐용량은 약 50mg／kg(참조：Cancer Chemotherapy Reports 50：219；1966)이고 효과가 기대되는 인체용량 수준으로 볼때, 0.5내지 100mg／kg／1일에서부터, 소동물에게서는 더 낮아진다.

구조식 Ⅰ의 화합물은 약학적 처방으로 투여되는 것이 바람직하다. 약학적 처방이란 이미 널리 알려진 것으로 구조식 Ⅰ의 활성물질에 유당, 덱스트로스, 서당, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아껌, 캄슘 포스페이트, 알기네이트, 트라가칸드, 제라틴, 메틸 셀루로즈, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광유와 같은 물질과 혼합하는 것이다. 이런 처방은 정제, 현택액, 캅셀로 할 수 있고 비경구용을 위하여 주사용 용액으로 처방한다.

바람직한 처방은 면역억제 작용을 가지면서 무독성 용량을 나타태는 활성성분 10내지 100mg 희석제를 가하여 경구적으로 면역억제 효과를 얻을 수 있는 용량단위로 하는 것이다.

다음의 실시예가 본 발명을 설명해준다.

[실시예 1]

2－(p－트리플루오로메틸페닐)－1H－페리미딘 하이드로 클로라이드의 제조.

벤젠 500ml내의 1,8－다아미노나프탈렌 31.64g(0.20몰) 용액과 벤젠 500ml내의 p－트리플루오로메틸벤조일 클로라이드 20.8g(0.20몰)의 용액을 동시에 실온에서 강하게 교반하면서 벤젠 500ml에 가한다. 약 1／2시간 교반한 후 고체를 모으고 메탄올과 저작하여, 융점 210°C(분해) 매스 스펙트럼 m／e 312 하이드로클로라이드염으로서 24.6g(수율 35％)을 얻는다.

원소분석(C₁₈H₁₂N₂ClF₃)

이론치：C, 61.99； H, 3.47； N, 8.05； Cl, 10.17； F, 16.34

실험치：C, 61.75； H, 3.59； N, 8.02； Cl, 10.45； F, 10.70

[실시예 2]

2－(m－트리플루오로메틸페닐)－1H－페리미딘 하이드로 클로라이드의 제조.

1,8-디아미노나프탈렌(15.82g：0.10몰)과 m－트리플루오로메틸벤조일 클로라이드(20.8g：0.10몰)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 융점 280°C(분해) 매스 펙트럼인 m／e 312인 2－(m－트리플루오로메틸페닐)－1H－페리미딘 하이드로클로라이드 33.3g을 얻는다.

원소분석(C₁₈H₁₂N₂ClF₃)

이론치：C, 61.99； H, 3.47； N, 8.03

실험치：C, 61.08； H, 3.59； N, 8.13

[실시예 3]

2－(p－트리플루오로메틸페닐)－1H－페리미딘 하이드로클로라이드.

1,8－디아미노나푸탈렌(1.52g：0.0096몰)을 톨루엔 25ml에 녹이고, 침강시킨다. p－트리플루오로메톡시벤조일플루오라이드(2.0g：0.0096몰)을 톨루엔 25ml에 녹인다. 두 용액을 동시에 톨루엔 25ml에 가한다. 반응화합물을 약 4시간 동안 교반하고, TLC는 반응이 끝났는지를 알려준다. 반응 혼합물을 여과하고 황색고체인 생성물을 건조하여 매스 스펙트럼 m／e 328, 융점 195°C인 화합물 2.72g(수율 81.4％)를 얻는다.

원소분석(₁₈H₁₂F₄N₂O)

이론치：C, 62.07； H, 3.47； N, 8.04； F, 21.82

실험치：C, 61.81； H, 3.58； N, 8.13； F, 21.59

[실시예 4]

2－(p－트리플루오로메틸티오페닐)－1H－페리미딘 하이드로클로라이드의 제조

1,8－디아미노나프탈렌(14.59g：0.092몰)과 p－트리플루오로메틸 티오벤조일 클로라이드(2.22g:0.092몰)을 실시예 3과 같이 반응시켜 매스 스펙트럼 m／e 344, 융 점276°C(분해)인 생성물 31. 86g(수율 91.0％)를 얻는다. 이것을 톨루엔 750ml에서 재현탁하고 2시간 끓이고 여과로 분리하여 29.7g을 얻는다. (수율 84.8％)

원소분석(C₁₈H₁₂CLF₃N₂S)

이론치：C, 56.77； H, 3.18； N, 7.36

실험치：C, 56.57； H, 3.37； N, 7.40

[실시예 5]

2－(p－펜타플루오로에톡시페닐)－1H－페리미딘 하이드로클로라이드의 제조.

1.8－디아미노나프탈렌(1.04g 0.00656몰)과 P－펜타플루오레에톡시 벤조일클로라이드(1.8g：0.00656몰)을 실시예 3과 같이 반응시켜 매스 스펙트럼 m／e 378, 융점 240°C(분해)인 생성물 2.25g을 얻는다.

원소분석(C₁₉H₁₂CLF₅N₂O)

이론치：C, 55.02； H, 2.92； N, 6.75； F, 22.90

실험치：C, 54.82； H, 3.15； N, 6.49； F, 23.20

[실시예 6]

2,3－디하이드로－2－(P－트리플루오로메틸페닐)－1H－페리미딘.

1,8－디아미노나프탈렌 15.8g(0.10몰)과 P－트리플루오로메틸벤즈알데히드 17.4g(0.10몰)과 키실렌 1ℓ를 포함하는 용액을 24시간 환류한다. 용매를 진공에서 증발시켜 조생성물 37.5g을 얻고 이것을 실리카겔 위에서 정제하고 톨루엔으로 용출시켜 매스 스펙트럼 m／e 314, 융점 119 내지 22°C인 생성물 22.9g을 얻는다.

원소분석(C₁₈H₁₃N₂F₃)

이론치：C, 68.78； H, 4.17； N, 8.91

실험치：C, 68.69； H, 4.40； N, 9.11

[실시예 7－20]

20g 수컷, 랜덤－브레드(Random－bred), 스위스 숫쥐 5마리 그룹에 양의 적혈구 5×10⁷을 정맥 주사한다. 이들 주사용 세포는 0.85％ 생리식염수로 세번 씻고, 0.85％ 생리식염수에 재현탁시켜 1aml의 혈액(Alsever’s용액에서 수집)으로 제조한다. 폴리에틸렌글리콜에 녹여진 실험된 각 화합물의 9일 용량을 적혈구를 주사하기전 3일부터 0.1ml 용량을 경구투여한다. 각 화합물의 수개의 용량을 이용한다. 적혈구와 약대신 기타 물질의 9일 용량을 주입시킨 대조군의 쥐가 포함된다. 항원을 주입시킨 후 6일째 쥐는 심장에서 출혈이 있고, 각 5마리의 쥐그룹으로부터 혈청을 뽑느다. 뽑은 혈청을 실험혈청의 2배의 생리식염수로 희석시킨 희석액과 0.5％양의 적혈구 현탁액의 혼합물을 이용하여 표준방법으로 혈구응집소의 함량을 알기 위해 정량한다. 37°C에서 3시간동안 접시에서 배양하여 혈구응집 형태를 알도록 한다. 4배(75％) 또는 더 큰 항체의 감소(대조혈청에 비해 실험혈청에서)가 관찰되었다. 이 결과를 최소유효용량(“MED”)…75％ 또는 더 큰 항체감소를 가져오는 최소함량이라고 한다.

항체생산을 감소시키는 능력을 알기 위해 구조식 Ⅰ의 페리미딘 화합물을 실험한 결과를 표 Ⅰ에 표시하였다. 임상적으로 면역억제에 이용되는 아자티오푸린(이무란^＊)은 이 시험에서 100mg／kg×9의 최소유효용량을 가진다.

[표 I]

[실시예 21－25]

개개의 혈청정량법

이 시험에서 실시예 7－20에 기술된 과정을 5마리의 쥐그룹 대신에 10마리의 쥐그룹에 사용하여 실시했다. 쥐는 전과 같이 출혈이 있으나, 혈청은 모아서가 아니라 개개별로 측정했다. 평균 혈구응집소치(log₂)

S.E는 각 10마리 쥐그룹에서 계산되고, 대조군에 비교하여 P치(학생의＋실험에 의해)가 측정되었다. 항체를 현저하게 감소시키는 가장 낮은 약용량을 최소량(endpoint does)라고 규정했다. 이 약을 적혈구를 주사하기 3일부터 전에 10일 용량을 경구 또는 정맥주사로 투여하였다. 약을 0.125퍼센트 메틸셀루로즈와 0.2퍼센트 비이온성 유활제를 포함한 생리식염수에 현탁시켰다. 항체(혈구응집소)측정은 적혈구 주사후 7일동안 행해졌다. 구조식 Ⅰ의 대표적 화합물로 한개개의 혈청실험에서 얻어진 결과는 표 Ⅱ와 같다.

[표 II]

[실시예 26－27]

그라프트－버수스－호스트(GVH)반응(Graft－Versus－Host reaction)

이 실험에서, 조성 C 57BL의 쥐의 비장세포가 F, 히브리드 종이 쥐 C 57BL×(3H)에 주사되었다. 수주된 쥐는 주사된 비장세포를 배척하지 않아 히브리드는 그의 조상으로부터 C 57BL－관련항원을 “자기 것”으로 간주했다. 그러나 주사된 세포는 다른 종족의 C3H－유래항원에 대해서는 주사를 받은 조직이 반응을 일으켰다. 결과로 주사를 받은 비장은 비대해졌다. 면역억제 작용은 이 확장을 방지 또는 감소시킨다. 그래서 비장무게로서 1반응 및 그의 면역억제작용하에서의 감소반응을 측정할 수 있다.

시몬센의 원방법(Ann. N. Y. Acad. Sci. 73：834,1958)을 수정하여 사용했다. 큰 비장세포를 일반적으로 손으로 비장을 절개하지 않고 Waring blendors를 사용하여 얻었다. 12초동안에 비장을 결합조직으로부터 유리세포로 만든다. (25ml 생리식염수내의 25C57BL비장) 후자를 여과하여 치츠두께의 수개를 제거한다. 이 방법으로 제조한 세포 현탁액을 레비－하우저 첼버카운트(Levy－Hausser chamber counts)을 사용, 표준화하여 1ml당 6×10⁸세포가 포함되도록 했다. 10마리의 16내지 18g의 C 57BL×C3H 쥐그룹에 공여 세포현탁액 1ml을 복강내주사를 행하여졌다. 02ml로서 경구 또는 피하주사로 세포주사전 3일에서 13일동안 계속하여 매일 치료가 시행되었다. 대조동물은 다만 세포와 매개물만 투여되었다. 비장은 제거되고 세포주사 후 10일동안 무게를 측정했다. 결과는 체중 1g당 비장 mg으로 표시했다.

주사된 쥐에 투여된 세포, 즉C 57BL×C 3H는 낮은정도의 비장확대를 일으키고, 이런 동물의 비장무게는 CVH성분의 억제를 100％로 하고 면역억제화합물에 의한 억제의 퍼센트를 계산하는데 사용되었다. 계산법은 참고의 면역억제화합물로 치료받은 쥐를 예로서 나타내었다.

실험에서 시료받지 않은 시험군과 정상군 사이에는 다만 약간의 차이만 있었고 20마리의 쥐그룹을 사용했을때 4개의 시험군에서의 계산은 5.20±0.37, 4.99±0.39, 4.42±0.13, 4.66±0.12이고 복합치는 4.8이었다. 구조식 Ⅰ의 화합물과의 그라프트－버수스－호스트 반응(graft－versus－veaction)에서 얻어진 결과는 표 Ⅲ에 요약했다.

[표 III]

[실시예 28]

쥐(Rat)에서의 보조제로 유발된 관절염 테스트(Adjuvant－induced Arthritis)

2－(p－트리플루오로메틸페닐)－1H－페리미딘 하이드로클로라이드의 쥐에서 보조제로 유발된 부종에 일어나는 뒷발－부풀음과 뼈의 장애에 대한 효과를 측정했다. 보조제로 유발된 부종에 의한 뒷발－부풀음의 억제를 정량적으로 측정하기 위해 염증을 두 가지 형태로 정의했다. 즉 (1) 1차 및 2차의 주사된 숨은 발톱, (2)는 2차의 주사되지 않은 뒷발, 이것을 일반적으로 주사된 발톱에 염증을 유발된 후 약 9일부터 시잭했다. 염증의 후자형의 감소는 면역억제효과로 나타났다. (참고, Chang, Arth. Rheum. 20：1135－1141 (1977)). 페노푸로펜(Fenoprofen)(30mg／kg)은 비교치를 위한 표준적인 항염증제이다. (Nickander et al., Fed. Proc. Annual FASEB Mtgs., April, 1971, ABS ＃205).

보조제 관절염은 광유내의 마이코박테리움 튜버큐로시스(Calbiochem－Perrogen－C)의 열처리, 냉동건조된 0,5％ 현탁액의 0.1ml를 오른쪽 뒷발에 1번 주사하므로서 루이스－위스 타주(Lewis Wistar rat 200내지 210g) 수컷에 유발되었다(Winter et al.,에 의해 보고된 진보된 방법, Arth. Rheum. 9：394－397(1966)). 5마리 쥐의 1개 그룹만(“TB control”이 치료를 받았다. 시험에 사용된 각 화합물을 카복시메틸 셀루로즈(1％)에 현탁시키고 보조제 주사후(17용량) 17번째날부터 계속하여, 30mg／kg을 매일 경구로 쥐에(각 5마리그룹) 음식물로 투여되었다. 발부피는 스타탐 프레셔 트란스듀서(Statham pressure transducer)와 디지탈 볼트메다(Digital voltmeter)를 사용하여 수은 변화로 측정되었다. 주사된 및 주사되지 않은 뒷발을 2,4,7,9,11,14,16,18일에 측정했다. X－선 사진은 동물이 희생된 후 18일에 찍었다. 9일에서 시작하여 19일까지 주사되지 않은 발의 부피측정은 다음과 같다.

[표 IV]

주사된 및 주사되지 않은 발에서 찍어진 X-선사진의 일반적 관찰에서 2-(P-트리플루오로메틸페닐)-1H-페리미딘하이드로클로라이드로 치료받은 동물은 뼈의 장해가 없었고 반면 TB처리군에서는 명백한 뼈의 장해를 보여주었다.

Claims (1)

1. 다음 일반식(Ⅳ)의 1,8－디아미노－나프탈렌과 다음 일반식(Ⅴ)의 아실화합물을 반응시켜 다음 일반식(Ⅰ)의 화합물을 제조하는 방법.

   

   상기식에서 R은 R¹은 m- 또는 P-위치의 -CF₃, -OCF₃, -SCF₃, 또는 -OC2F₅그룹이고 X는 불소, 염소, 브롬 또는 수소이다.