KR20240058160A - 디스트로핀병증을 치료하기 위한 근육 표적화 복합체의 투여 - Google Patents

디스트로핀병증을 치료하기 위한 근육 표적화 복합체의 투여 Download PDF

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KR20240058160A
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코디 에이. 데자르댕
킴 탕
옥사나 베스크로브나야
존 데이비스
크리스 믹스
티모시 위든
스콧 힐더브랜드
션 스프링
페이이 선
로메쉬 알. 서브라마니안
모하메드 티. 카타나니
존 나짐
브렌단 퀸
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Abstract

본 개시내용의 측면은 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법 및/또는 DMD를 치료하는 방법에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 방법은 대상체에게 항체 (예를 들어, 항-TfR1 항체)에 공유 연결된 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (예를 들어, DMD를 표적화하는 데 유용함)를 포함하는 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함한다.

Description

디스트로핀병증을 치료하기 위한 근육 표적화 복합체의 투여
관련 출원
본 출원은 2022년 6월 3일에 출원된 "디스트로핀병증을 치료하기 위한 근육 표적화 복합체의 투여"라는 발명의 명칭의 미국 가출원 번호 63/348,876; 2021년 12월 23일에 출원된 "디스트로핀병증을 치료하기 위한 근육 표적화 복합체의 투여"라는 발명의 명칭의 미국 가출원 번호 63/293,619; 2021년 9월 29일에 출원된 "디스트로핀병증을 치료하기 위한 근육 표적화 복합체의 투여"라는 발명의 명칭의 미국 가출원 번호 63/250,177; 및 2021년 9월 16일에 출원된 "디스트로핀병증을 치료하기 위한 근육 표적화 복합체의 투여"라는 발명의 명칭의 미국 가출원 번호 63/245,162의 35 U.S.C § 119(e) 하의 출원일의 이익을 주장하며; 이들 각각의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
발명의 분야
본 출원은 세포에 유효량의 올리고뉴클레오티드 분자 페이로드를 전달하기 위한 표적화 복합체 및 그의 용도, 특히 질환의 치료와 관련된 용도에 관한 것이다.
전자 서열 목록에 대한 참조
전자 서열 목록의 내용 (D082470071WO00-SEQ-CBD.xml; 크기: 60,636 바이트; 및 생성일: 2022년 8월 31일)은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
디스트로핀병증은 디스트로핀 유전자 내의 돌연변이로부터 유발되는 특유한 신경근육 질환의 군이다. 디스트로핀병증은 뒤시엔느 근육 이영양증, 베커 근육 이영양증 및 X-연관 확장성 심근병증을 포함한다. 디스트로핀 (DMD)은 79개의 엑손 및 대략 2백6십만개의 총 염기 쌍을 함유하는 큰 유전자이다. 엑손 프레임시프트, 결실, 치환 및 중복 돌연변이를 포함한 DMD 내의 수많은 돌연변이는 기능적 디스트로핀의 발현을 감소시켜 디스트로핀병증을 유도할 수 있다.
일부 측면에 따르면, 본 개시내용은 대상체에서 디스트로핀 단백질 (예를 들어, 말단절단된 디스트로핀 단백질)의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법 및/또는 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 치료하는 방법을 제공한다. 말단절단된 디스트로핀 단백질은 기능적이다 (예를 들어, 야생형 디스트로핀 단백질의 활성을 보유함). 일부 실시양태에서, 말단절단된 디스트로핀 단백질은 야생형 디스트로핀 단백질의 부분 기능을 보유한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 80 mg (예를 들어, 10 mg, 30 mg 또는 60 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg (예를 들어, 약 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg 내지 8 mg (예를 들어, 1 mg, 1.5 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg 또는 8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 5 mg 내지 120 mg (예를 들어, 약 11 mg, 22 mg, 44 mg, 66 mg 또는 88 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 투여는 2주마다 1회 내지 3개월마다 1회 (예를 들어, 2주마다 1회, 4주마다 1회, 2개월마다 1회 또는 3개월마다 1회)이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 뒤시엔느 근육 이영양증과 연관된 돌연변이된 DMD 대립유전자를 갖는다 (예를 들어, 여기서 돌연변이된 DMD 대립유전자는 엑손 스킵핑을 적용할 수 있는 돌연변이를 포함함).
본 개시내용의 일부 측면은 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 대상체에게 유효량의 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 1 mg 내지 90 mg을 제공하고, 여기서 항체는 서열식별번호(SEQ ID NO): 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하고, 여기서 올리고뉴클레오티드는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 뉴클레오티드 서열을 포함하고 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)인 방법을 제공한다.
본 개시내용의 일부 측면은 대상체에서 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 치료하는 방법으로서, 대상체에게 유효량의 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 1 mg 내지 90 mg을 제공하고, 여기서 항체는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하고, 여기서 올리고뉴클레오티드는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 뉴클레오티드 서열을 포함하고 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)인 방법을 제공한다.
일부 실시양태에서, 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00001
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 항-TfR1 항체를 포함하고;
각각의 복합체에서, n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 항체의 상이한 리신에 공유 연결된다. 일부 실시양태에서, 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이다.
일부 실시양태에서, 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00002
R2는 항-TfR1 항체를 포함하고;
각각의 복합체에서, n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 항체의 상이한 리신에 공유 연결된다. 일부 실시양태에서, 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이다.
일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체는 Fab 단편이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 1-8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 1-2 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 1.5 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 2-4 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 3 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 4-8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 6 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 3-52 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 5-40 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 7-15 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 11 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 15-30 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 22 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 30-59 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 44 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 61-117 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 88 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 조성물은 2주마다 1회, 4주마다 1회, 8주마다 1회 또는 12주마다 1회 투여된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 4주마다 1회 투여된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 8주마다 1회 투여된다.
일부 실시양태에서, 조성물은 수용액이고, 히스티딘 및 수크로스를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 히스티딘은 수용액 중에 25 mM의 농도로 존재한다. 일부 실시양태에서, 수크로스는 수용액 중에 10 w/v%의 농도로 존재한다. 일부 실시양태에서, 수용액은 pH 6.0이다.
일부 실시양태에서, 대상체는 엑손 51 스킵핑을 적용할 수 있는 돌연변이를 포함하는 돌연변이된 디스트로핀 대립유전자를 갖거나 또는 돌연변이된 디스트로핀 대립유전자는 엑손 51 내의 프레임시프트 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 복합체는 대상체에서 말단절단된 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진한다.
일부 실시양태에서, 대상체는 인간 대상체이다. 일부 실시양태에서, 인간 대상체는 2-60세이다.
도 1a-1b는 DMD 환자 근관에서 DMD 엑손 51 스킵핑을 유도하는 데 있어서의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 활성을 보여준다. 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체는 DMD 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드 (서열식별번호: 21)에 발린-시트룰린 서열을 포함하는 링커를 통해 (리신 접합을 통해) 공유 연결된 표 2에 제시된 VH/VL 서열을 갖는 항-TfR1 Fab를 함유한다. 도 1a는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 포함하는 조성물이 DMD 환자 근관에서 Fab에 공유 연결되지 않은 동일한 DMD 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드와 비교하여 증진된 엑손 스킵핑을 유발하였다는 것을 보여준다. 도 1b는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 항-TfR1 Fab 접합체를 2.5 μM (저), 5 μM (중간) 및 10 μM (고) 올리고뉴클레오티드 등가물의 최종 농도로 처리한 후 용량-의존성 엑손 51 스킵핑을 유발하였다는 것을 보여준다.
도 2a-2e는 10 mg/kg 올리고뉴클레오티드 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 (Fab-올리고) 접합체의 단일 용량의 투여 후, mdx 마우스의 사두근 (도 2a), 횡격막 (도 2b), 심장 (도 2c), 비복근 (도 2d) 및 전경골근 (도 2e)에서의 올리고뉴클레오티드의 수준을 보여준다. 항-TfR1 Fab-올리고 접합체는 DMD 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드에 발린-시트룰린 서열을 포함하는 링커를 통해 공유 연결된 항-마우스 TfR1 (R17-217) Fab를 함유한다.
도 3a-3e는 10 mg/kg 올리고뉴클레오티드 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 도 2a-2e에 기재된 항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 단일 용량의 투여 후, mdx 마우스의 사두근 (도 3a), 횡격막 (도 3b), 심장 (도 3c), 비복근 (도 3d) 및 전경골근 (도 3e)에서의 엑손 23 스킵핑의 수준을 보여준다.
도 4a-4e는 10 mg/kg 올리고뉴클레오티드 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 도 2a-2e에 기재된 항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 단일 용량의 투여 후, mdx 마우스의 사두근 (도 4a), 횡격막 (도 4b), 심장 (도 4c), 비복근 (도 4d) 및 전경골근 (도 4e)에서의 정량적 웨스턴 블롯에 의한 디스트로핀 발현의 수준을 보여준다. 도 4a-4c는 또한 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 도 2a-2e에 기재된 항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 단일 용량의 투여 후, mdx 마우스의 투여 8주 후의 사두근 (도 4a), 투여 4주 후의 횡격막 (도 4b) 및 투여 4주 후의 심장 (도 4c)에서의 디스트로핀 발현의 웨스턴 블롯 영상의 예를 보여준다.
도 5a-5c는 10 mg/kg 올리고뉴클레오티드 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 도 2a-2e에 기재된 항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 단일 용량의 투여 후, mdx 마우스의 투여 4주, 8주 및 12주 후의 사두근 (도 5a), 투여 4주 후의 횡격막 (도 5b) 및 투여 4주 후의 심장 (도 5c)에서의 근육속막으로의 디스트로핀 국재화를 가시화하는 면역형광 (IF) 영상을 보여준다. 도 5a는 또한 사두근에서의 IF 데이터의 정량화를 보여주고, 퍼센트 디스트로핀 양성 섬유 (PDPF)를 나타낸다.
도 6a-6b는 60 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 단일 용량 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 2회 용량 (제1일 및 제15일)의 투여 후, 시노몰구스 원숭이의 심장 (도 6a) 및 횡격막 (도 6b)에서의 엑손 51 스킵핑의 수준을 보여준다. 단일 60 mg/kg 용량의 2주 후 (제15일) 또는 제2 30 mg/kg 용량의 2주 후 (제29일)에 엑손 스킵핑의 수준을 분석하였다. 항-TfR1 Fab-올리고 접합체는 표 2에 제시된 VH/VL 서열을 갖는 항-TfR1 Fab를 함유하며, 여기서 Fab는 DMD 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드 (서열식별번호: 21)에 발린-시트룰린 서열을 포함하는 링커를 통해 (리신 접합을 통해) 공유 연결된다.
도 7a-7c는 (i) 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 2회 용량 (제1일 및 제15일) ("2 x 30" 및 4주에 측정됨), (ii) 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 4주 동안의 매주 용량 ("4 x 30" 및 4주에 측정됨), 또는 (iii) 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 5주 동안의 매주 용량 ("5 x 30" 및 8주에 측정됨)의 투여 후, 시노몰구스 원숭이의 사두근 (도 7a), 횡격막 (도 7b) 및 심장 (도 7c)에서의 엑손 51 스킵핑 수준을 보여준다. 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체는 표 2에 제시된 VH/VL 서열을 갖는 항-TfR1 Fab를 함유하며, 여기서 Fab는 DMD 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드 (서열식별번호: 21)에 발린-시트룰린 서열을 포함하는 링커를 통해 (리신 접합을 통해) 공유 연결된다.
도 8a-8e는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량이 mdx 마우스의 골격 및 심장 근육에서 올리고뉴클레오티드의 용량-의존성 수준을 유도하지만, 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드는 그렇지 않다는 것을 보여준다. 5주령 mdx 마우스에게 비히클, 30 mg/kg 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드, 또는 10 mg/kg 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 꼬리 정맥을 통해 주사하고, 나타낸 시점에 희생시켰다. 나타낸 골격 및 심장 근육에서의 올리고뉴클레오티드의 수준을 hELISA를 사용하여 결정하였다. 데이터는 평균 ± SD를 나타낸다. * p < 0.05, ** p < 0.01, **** p < 0.0001. hELISA, 혼성화 효소-연결 면역흡착 검정; PMO, 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머; WT, 야생형.
도 9a-9e는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량이 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드의 단일 용량과 비교하여 mdx 마우스의 골격 및 심장 근육에서 증진된 용량-의존성 Dmd 엑손 23 스킵핑을 유발하였다는 것을 보여준다. 5주령 mdx 마우스에게 비히클, 30 mg/kg 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드, 또는 10 mg/kg 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 꼬리 정맥을 통해 주사하고, 나타낸 시점에 희생시켰다. 엑손 23 스킵핑을 RT-PCR 및 모세관 전기영동에 의해 측정하였다. 퍼센트 스킵핑을 물질 및 방법에 기재된 바와 같이 계산하였다. 데이터는 평균 ± SD를 나타낸다. * p < 0.05, ** p < 0.01, **** p < 0.0001. PMO, 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머; RT-PCR, 역전사 폴리머라제 연쇄 반응; WT, 야생형.
도 10a-10f는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량이 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드의 단일 용량과 비교하여 mdx 마우스의 골격 및 심장 근육에서 증진된 용량-의존성 디스트로핀 단백질 발현을 유발하였다는 것을 보여준다. 5주령 mdx 마우스에게 비히클, 30 mg/kg 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드, 또는 10 mg/kg 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 꼬리 정맥을 통해 주사하고, 나타낸 시점에 희생시켰다. 도 10a는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체 또는 매칭되는 30 mg/kg 용량의 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드의 단일 용량의 28일 후 디스트로핀 발현의 대표적인 웨스턴 블롯 영상을 보여준다. 이들 샘플에서의 디스트로핀 수준은 표준 곡선의 상한을 초과하며, 이들 웨스턴 블롯은 정량화에 사용하지 않았다. 표준 곡선의 범위 내로 희석된 샘플에 대해 추가의 웨스턴 블롯팅을 수행하고, 이를 정량화에 사용하였다. 모든 밴드를 동일한 겔 상에서 실행되고 동일한 근육 조직 매트릭스를 사용하여 생성된 표준 곡선에 기초하여 정량화하였다. 도 10b-10f는 웨스턴 블롯 영상의 형광측정 분석에 의한 디스트로핀 단백질 수준의 정량화를 보여준다. 데이터는 평균 ± SD를 나타낸다. * p < 0.05, ** p < 0.01, **** p < 0.0001. PMO, 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머; WT, 야생형.
도 11a-11d는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량이 mdx 마우스의 골격 및 심장 근육에서 근육속막으로의 디스트로핀 국재화를 회복시키는 데 충분하다는 것을 보여준다. 5주령 mdx 마우스에게 비히클 또는 10 mg/kg 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 꼬리 정맥을 통해 주사하고, 나타낸 시점에 희생시켰다. 도 11a는 비히클-처리된 야생형 또는 mdx 마우스 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체로 처리된 mdx 마우스로부터 투여 4주, 8주 및 12주 후에 단리된 사두근 단면의 디스트로핀 (녹색) 및 라미닌 (적색) 염색을 사용한 대표적인 면역형광 영상을 보여준다. 제8주에 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드 군에 대해 정량화된 개별 필드가 도 15에 제시된다. 도 11b는 mdx 마우스의 사두근에서의 디스트로핀 양성 섬유의 정량화를 보여준다. 도 11c 및 도 11d는 비히클-처리된 mdx 마우스 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체로 처리된 mdx 마우스로부터 투여 4주 또는 8주 후에 단리된 횡격막 (도 11c) 및 심장 (도 11d) 단면의 디스트로핀 (녹색) 및 라미닌 (적색) 염색을 사용한 대표적인 면역형광 영상을 보여준다. 데이터는 평균 ± SD를 나타낸다. **** p < 0.0001. PMO, 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머; WT, 야생형.
도 12는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체에 의해 회복된 디스트로핀이 mdx 마우스의 근육 막에 국재화된다는 것을 보여준다. 5주령 mdx 마우스에게 비히클 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 꼬리 정맥을 통해 주사하고, 투여 4주 후에 희생시켰다. 횡격막을 단리하고, 종방향 단면을 디스트로핀 (녹색) 및 라미닌 (적색)으로 염색하여 근섬유의 전체 길이를 따라 막-국재화된 디스트로핀의 분포를 영상화하였다. PMO, 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머.
도 13a-13c는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체로의 처리가 mdx 마우스에서 개선된 기능적 결과를 유도하지만, 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드로는 그렇지 않다는 것을 보여준다. 5주령 야생형 또는 mdx 마우스에게 비히클을 투여하거나 또는 mdx 마우스에게 30 mg/kg 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 주사하고 2주 후에 기능적 평가를 수행하였다. 도 13a는 혈청 크레아틴 키나제 (CK) 활성을 보여준다. 도 13b는 중단되지 않는 24시간 기간 동안 러닝 휠에서 이동한 총 거리를 보여준다. 도 13c는 뒷다리 피로 챌린지 전 및 후에 오픈 필드에서 이동한 총 거리의 퍼센트 변화를 보여준다. 데이터는 평균 ± SD로 표현된다. *p ≤ 0.05, **p ≤ 0.01, ***p ≤ 0.001, ****p ≤ 0.0001. n.s., 유의하지 않음; PMO, 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머; WT, 야생형.
도 14a-14b는 대표적인 형광 웨스턴 블롯 영상 및 표준 곡선 정량화를 보여준다. 도 14a는 mdx 마우스 단백질 내로 희석된 야생형 마우스 단백질의 표준 곡선을 사용하여 각각의 겔이 실행된 대표적인 형광 웨스턴 블롯 영상을 보여준다. 각각의 표준 및 미지의 샘플에 대해 디스트로핀 및 알파-액티닌 채널에서 미가공 형광을 측정하였다. 도 14b는 표준 곡선 정량화를 보여준다. 디스트로핀/알파-액티닌 비를 생성하고, 각각의 표준에서 기지의 퍼센트 야생형 단백질에 대해 플롯팅하여 방정식을 생성하였다. 이어서, 미지의 샘플을 표준 곡선의 방정식에 기초하여 그의 디스트로핀/알파-액티닌 비로부터 내삽하였다. 미지의 샘플의 미가공 디스트로핀 신호가 표준 곡선 초과이면, 그것이 표준 곡선 내에 속할 때까지 샘플을 희석하였다. WT, 야생형.
도 15는 mdx 마우스의 사두근에서의 퍼센트 양성 근섬유를 정량화하는 데 사용된 면역형광 현미경사진을 보여준다 (또한 도 11a-11b 참조). 5주령 mdx 마우스에게 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 꼬리 정맥을 통해 주사하였다. 투여 8주 후에 단리된 사두근의 디스트로핀 (녹색) 및 라미닌 (적색) 염색을 사용한 면역형광 영상이다.
도 16a-16b는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체로의 처리가 mdx 마우스에서 혈청 크레아틴 키나제 활성을 감소시킨다는 것을 보여준다. 10 mg/kg 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 꼬리 정맥을 통해 주사한 5주령 mdx 마우스를 희생시키고, 혈청 크레아틴 키나제 (CK)를 투여 28일 후 (도 16a) 또는 56일 후 (도 16b)에 평가하였다. 데이터를 매칭되는 시점에서의 비히클-처리된 mdx 마우스의 평균 혈청 CK에 대해 정규화하였다. 데이터는 평균 ± SD를 나타낸다. * p< 0.05; ** p<0.01. CK, 크레아틴 키나제; PMO, 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머.
도 17a-17b는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체-매개된 디스트로핀 회복이 mdx 마우스에서 개선된 기능적 결과를 유도한다는 것을 보여준다. 5주령 야생형 또는 mdx 마우스에게 비히클을 투여하거나 또는 mdx 마우스에게 30 mg/kg 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 투여하고 4주 후에 기능적 평가를 수행하였다. 도 17a는 중단되지 않는 24시간 기간 동안 러닝 휠에서 이동한 총 거리를 보여준다. 도 17b는 뒷다리 피로 챌린지 전 및 후에 오픈 필드에서 이동한 총 거리의 퍼센트 변화를 보여준다. 데이터는 평균 ± SD로 표현된다. *p ≤ 0.05, **p ≤ 0.01. n.s., 유의하지 않음; PMO, 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머; WT, 야생형.
일부 측면에 따르면, 본 개시내용은 대상체에서 디스트로핀 단백질 (예를 들어, 말단절단된 디스트로핀 단백질)의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법 및/또는 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 치료하는 방법을 제공한다. 말단절단된 디스트로핀 단백질은 기능적이다 (예를 들어, 야생형 디스트로핀 단백질의 활성을 보유함). 일부 실시양태에서, 말단절단된 디스트로핀 단백질은 야생형 디스트로핀 단백질의 부분 기능을 보유한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 약 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 80 mg (예를 들어, 10 mg, 30 mg 또는 60 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg (예를 들어, 약 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg 내지 8 mg (예를 들어, 약 1.5 mg, 3.0 mg 또는 6.0 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 5 mg 내지 120 mg (예를 들어, 약 11 mg, 22 mg, 44 mg, 66 mg 또는 88 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 투여는 2주마다 1회 내지 3개월마다 1회 (예를 들어, 2주마다 1회, 4주마다 1회, 2개월마다 1회 또는 3개월마다 1회)이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 뒤시엔느 근육 이영양증과 연관된 돌연변이된 DMD 대립유전자를 갖는다 (예를 들어, 여기서 돌연변이된 DMD 대립유전자는 엑손 스킵핑을 적용할 수 있는 돌연변이를 포함함).
정의된 용어의 설명을 포함한 본 개시내용의 추가 측면이 하기에 제공된다.
정의
투여: 본원에 사용된 용어 "투여하는" 또는 "투여"는 생리학상 및/또는 (예를 들어, 및) 약리학상 유용한 (예를 들어, 대상체에서 상태를 치료하기 위한) 방식으로 대상체에게 복합체를 제공하는 것을 의미한다.
대략: 본원에 사용된 용어 "대략" 또는 "약"은 1개 이상의 관심 값에 적용되는 경우에 언급된 참조 값에 유사한 값을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 용어 "대략" 또는 "약"은 달리 언급되지 않거나 또는 달리 문맥으로부터 명백하지 않는 한 언급된 참조 값의 어느 방향 (초과 또는 미만)으로 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% 또는 그 미만 내에 속하는 값의 범위를 지칭한다 (이러한 수가 가능한 값의 100%를 초과하는 경우는 제외함).
항체: 본원에 사용된 용어 "항체"는 적어도 1개의 이뮤노글로불린 가변 도메인 또는 적어도 1개의 항원 결정기, 예를 들어 항원에 특이적으로 결합하는 파라토프를 포함하는 폴리펩티드를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 항체는 전장 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 키메라 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간화 항체이다. 그러나, 일부 실시양태에서, 항체는 Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, Fv 단편 또는 scFv 단편이다. 일부 실시양태에서, 항체는 낙타류 항체로부터 유래된 나노바디 또는 상어 항체로부터 유래된 나노바디이다. 일부 실시양태에서, 항체는 디아바디이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 배선 서열을 갖는 프레임워크를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 항체는 IgG, IgG1, IgG2, IgG2A, IgG2B, IgG2C, IgG3, IgG4, IgA1, IgA2, IgD, IgM 및 IgE 불변 도메인으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 불변 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 중쇄 (H) 가변 영역 (본원에서 VH로 약칭됨) 및/또는 (예를 들어, 및) 경쇄 (L) 가변 영역 (본원에서 VL로 약칭됨)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 불변 도메인, 예를 들어 Fc 영역을 포함한다. 이뮤노글로불린 불변 도메인은 중쇄 또는 경쇄 불변 도메인을 지칭한다. 인간 IgG 중쇄 및 경쇄 불변 도메인 아미노산 서열 및 그의 기능적 변이는 공지되어 있다. 중쇄와 관련하여, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항체의 중쇄는 알파 (α), 델타 (Δ), 엡실론 (ε), 감마 (γ) 또는 뮤 (μ) 중쇄일 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 항체의 중쇄는 인간 알파 (α), 델타 (Δ), 엡실론 (ε), 감마 (γ) 또는 뮤 (μ) 중쇄를 포함할 수 있다. 특정한 실시양태에서, 본원에 기재된 항체는 인간 감마 1 CH1, CH2 및/또는 (예를 들어, 및) CH3 도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, VH 도메인의 아미노산 서열은 인간 감마 (γ) 중쇄 불변 영역, 예컨대 관련 기술분야에 공지된 임의의 것의 아미노산 서열을 포함한다. 인간 불변 영역 서열의 비제한적 예는 관련 기술분야에 기재되었으며, 예를 들어 미국 특허 번호 5,693,780 및 상기 문헌 [Kabat E A et al., (1991)]을 참조한다. 일부 실시양태에서, VH 도메인은 본원에 제공된 임의의 가변 쇄 불변 영역에 대해 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 적어도 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 변형되고, 예를 들어 글리코실화, 인산화, SUMO화 및/또는 (예를 들어, 및) 메틸화를 통해 변형된다. 일부 실시양태에서, 항체는 1종 이상의 당 또는 탄수화물 분자에 접합된 글리코실화 항체이다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 당 또는 탄수화물 분자는 N-글리코실화, O-글리코실화, C-글리코실화, GPI화 (GPI 앵커 부착) 및/또는 (예를 들어, 및) 포스포글리코실화를 통해 항체에 접합된다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 당 또는 탄수화물 분자는 모노사카라이드, 디사카라이드, 올리고사카라이드 또는 글리칸이다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 당 또는 탄수화물 분자는 분지형 올리고사카라이드 또는 분지형 글리칸이다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 당 또는 탄수화물 분자는 만노스 단위, 글루코스 단위, N-아세틸글루코사민 단위, N-아세틸갈락토사민 단위, 갈락토스 단위, 푸코스 단위 또는 인지질 단위를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 링커 폴리펩티드 또는 이뮤노글로불린 불변 도메인에 연결된 본 개시내용의 1개 이상의 항원 결합 단편을 포함하는 폴리펩티드를 포함하는 구축물이다. 링커 폴리펩티드는 펩티드 결합에 의해 연결된 2개 이상의 아미노산 잔기를 포함하고, 1개 이상의 항원 결합 부분을 연결하는 데 사용된다. 링커 폴리펩티드의 예가 보고되었다 (예를 들어, 문헌 [Holliger, P., et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448; Poljak, R. J., et al. (1994) Structure 2:1121-1123] 참조). 추가로, 항체는 항체 또는 항체 부분과 1종 이상의 다른 단백질 또는 펩티드와의 공유 또는 비공유 회합에 의해 형성된 보다 큰 면역부착 분자의 일부일 수 있다. 이러한 면역부착 분자의 예는 사량체 scFv 분자를 제조하기 위한 스트렙타비딘 코어 영역의 사용 (Kipriyanov, S. M., et al. (1995) Human Antibodies and Hybridomas 6:93-101) 및 2가 및 비오티닐화 scFv 분자를 제조하기 위한 시스테인 잔기, 마커 펩티드 및 C-말단 폴리히스티딘 태그의 사용 (Kipriyanov, S. M., et al. (1994) Mol. Immunol. 31:1047-1058)을 포함한다.
CDR: 본원에 사용된 용어 "CDR"은 항체 가변 서열 내의 상보성 결정 영역을 지칭한다. 전형적인 항체 분자는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하며, 이는 통상적으로 항원 결합에 수반된다. VH 및 VL 영역은 "프레임워크 영역" ("FR")으로 공지된 보다 보존된 영역이 산재되어 있는, "상보성 결정 영역" ("CDR")으로도 또한 공지된 초가변성 영역으로 추가로 세분될 수 있다. 각각의 VH 및 VL은 전형적으로 아미노-말단에서 카르복시-말단으로 하기 순서로 배열된 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 프레임워크 영역 및 CDR의 정도는 관련 기술분야에 공지된 방법론을 사용하여, 예를 들어 카바트 정의, IMGT 정의, 코티아 정의, AbM 정의 및/또는 (예를 들어, 및) 접촉 정의에 의해 정확하게 확인될 수 있으며, 이들 모두는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Kabat, E.A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; IMGT®, the international ImMunoGeneTics information system® http://www.imgt.org, Lefranc, M.-P. et al., Nucleic Acids Res., 27:209-212 (1999); Ruiz, M. et al., Nucleic Acids Res., 28:219-221 (2000); Lefranc, M.-P., Nucleic Acids Res., 29:207-209 (2001); Lefranc, M.-P., Nucleic Acids Res., 31:307-310 (2003); Lefranc, M.-P. et al., In Silico Biol., 5, 0006 (2004) [Epub], 5:45-60 (2005); Lefranc, M.-P. et al., Nucleic Acids Res., 33:D593-597 (2005); Lefranc, M.-P. et al., Nucleic Acids Res., 37:D1006-1012 (2009); Lefranc, M.-P. et al., Nucleic Acids Res., 43:D413-422 (2015); Chothia et al., (1989) Nature 342:877; Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917, Al-lazikani et al. (1997) J. Molec. Biol. 273:927-948; 및 Almagro, J. Mol. Recognit. 17:132-143 (2004)]을 참조한다. 또한 hgmp.mrc.ac.uk 및 bioinf.org.uk/abs를 참조한다. 본원에 사용된 CDR은 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법에 의해 정의된 CDR을 지칭할 수 있다. 동일한 CDR을 갖는 2종의 항체는 2종의 항체가 동일한 방법, 예를 들어 IMGT 정의에 의해 결정 시 그 CDR과 동일한 아미노산 서열을 갖는다는 것을 의미한다.
중쇄 및 경쇄의 각각의 가변 영역에 3개의 CDR이 존재하며, 이는 각각의 가변 영역에 대해 CDR1, CDR2 및 CDR3으로 지정된다. 본원에 사용된 용어 "CDR 세트"는 항원에 결합할 수 있는 단일 가변 영역에서 발생하는 3개의 CDR의 군을 지칭한다. 이들 CDR의 정확한 경계는 상이한 시스템에 따라 상이하게 정의되었다. 카바트에 의해 기재된 시스템 (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987) and (1991))은 항체의 임의의 가변 영역에 적용가능한 명확한 잔기 넘버링 시스템을 제공할 뿐만 아니라, 3개의 CDR을 정의하는 정확한 잔기 경계를 제공한다. 이들 CDR은 카바트 CDR로 지칭될 수 있다. CDR의 하위-부분은 L1, L2 및 L3 또는 H1, H2 및 H3으로 지정될 수 있으며, 여기서 "L" 및 "H"는 각각 경쇄 및 중쇄 영역을 지정한다. 이들 영역은 코티아 CDR로 지칭될 수 있으며, 이는 카바트 CDR과 중첩되는 경계를 갖는다. 카바트 CDR과 중첩되는 CDR을 정의하는 다른 경계는 문헌 [Padlan (FASEB J. 9:133-139 (1995)) 및 MacCallum (J Mol Biol 262(5):732-45 (1996))]에 기재되어 있다. 또 다른 CDR 경계 정의는 상기 시스템 중 하나를 엄격히 따르지 않을 수 있으나 그럼에도 불구하고 카바트 CDR과 중첩될 것이며, 다만 특정한 잔기 또는 잔기의 군 또는 심지어 전체 CDR이 항원 결합에 유의하게 영향을 미치지 않는다는 예측 또는 실험적 발견에 비추어 단축되거나 연장될 수 있다. 본원에 사용된 방법은 임의의 이들 시스템에 따라 정의된 CDR을 이용할 수 있다. CDR 정의 시스템의 예가 표 1에 제공된다.
표 1. CDR 정의
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1 IMGT®, 국제 이뮤노제네틱스 정보 시스템(international ImMunoGeneTics information system)®, imgt.org, 문헌 [Lefranc, M.-P. et al., Nucleic Acids Res., 27:209-212 (1999)]
2 문헌 [Kabat et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]
3 문헌 [Chothia et al., J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)]
상보적: 본원에 사용된 용어 "상보적"은 2개의 뉴클레오티드 또는 2개 세트의 뉴클레오티드 사이의 정확한 쌍형성 능력을 지칭한다. 특히, 상보적은 2개의 뉴클레오티드 또는 2개 세트의 뉴클레오티드 사이의 결합을 가져오는 수소 결합 쌍형성의 정도를 특징화하는 용어이다. 예를 들어, 올리고뉴클레오티드의 한 위치에서의 염기가 표적 핵산 (예를 들어, mRNA)의 상응하는 위치에서의 염기와 수소 결합할 수 있으면, 염기들이 그 위치에서 서로에 대해 상보적인 것으로 간주된다. 염기 쌍형성은 정규 왓슨-크릭 염기 쌍형성 및 비-왓슨-크릭 염기 쌍형성 (예를 들어, 워블 염기 쌍형성 및 후그스틴 염기 쌍형성) 둘 다를 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 상보적 염기 쌍형성의 경우, 아데노신-유형 염기 (A)는 티미딘-유형 염기 (T) 또는 우라실-유형 염기 (U)에 대해 상보적이고, 시토신-유형 염기 (C)는 구아노신-유형 염기 (G)에 대해 상보적이고, 범용 염기, 예컨대 3-니트로피롤 또는 5-니트로인돌은 임의의 A, C, U 또는 T에 혼성화할 수 있고 그에 대해 상보적인 것으로 간주된다. 이노신 (I)은 또한 관련 기술분야에서 범용 염기인 것으로 간주되었고 임의의 A, C, U 또는 T에 대해 상보적인 것으로 간주된다.
공유 연결된: 본원에 사용된 용어 "공유 연결된"은 2개 이상의 분자가 적어도 1개의 공유 결합을 통해 함께 연결된 특징을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 2개의 분자는 분자들 사이의 링커로서의 역할을 하는 단일 결합, 예를 들어 디술피드 결합 또는 디술피드 가교에 의해 함께 공유 연결될 수 있다. 그러나, 일부 실시양태에서, 2개 이상의 분자는 다수의 공유 결합을 통해 2개 이상의 분자를 함께 연결하는 링커로서의 역할을 하는 분자를 통해 함께 공유 연결될 수 있다. 일부 실시양태에서, 링커는 절단가능한 링커일 수 있다. 그러나, 일부 실시양태에서, 링커는 비-절단가능한 링커일 수 있다.
DMD: 본원에 사용된 용어 "DMD"는 근육 세포, 특히 근육 섬유에서 내부 세포골격 및 세포외 매트릭스를 가교하는, 디스트로핀-당단백질 복합체의 주요 성분인 디스트로핀 단백질을 코딩하는 유전자를 지칭한다. DMD 내의 결실, 중복 및 점 돌연변이는 디스트로핀병증, 예컨대 뒤시엔느 근육 이영양증, 베커 근육 이영양증 또는 심근병증을 유발할 수 있다. 대안적 프로모터 용법 및 대안적 스플라이싱은 이 유전자에 대해 수많은 별개의 전사체 변이체 및 단백질 이소형을 생성한다. 일부 실시양태에서, 디스트로핀 유전자는 인간 (진(Gene) ID: 1756), 비-인간 영장류 (예를 들어, 진 ID: 465559) 또는 설치류 유전자 (예를 들어, 진 ID: 13405; 진 ID: 24907)일 수 있다. 추가로, 상이한 단백질 이소형을 코딩하는 다수의 인간 전사체 변이체 (예를 들어, 진뱅크(GenBank) RefSeq 수탁 번호: NM_000109.3, NM_004006.2 (서열식별번호: 24), NM_004009.3, NM_004010.3 및 NM_004011.3 하에 주석달린 바와 같음)가 특징화되었다.
DMD 대립유전자: 본원에 사용된 용어 "DMD 대립유전자"는 DMD 유전자의 대안적 형태 (예를 들어, 야생형 또는 돌연변이 형태) 중 어느 하나를 지칭한다. 일부 실시양태에서, DMD 대립유전자는 그의 정상적 및 전형적 기능을 보유하는 디스트로핀을 코딩할 수 있다. 일부 실시양태에서, DMD 대립유전자는 근육 이영양증을 유발하는 1개 이상의 돌연변이를 포함할 수 있다. 뒤시엔느 근육 이영양증을 유도하는 통상의 돌연변이는 디스트로핀 대립유전자에 존재하는 79개의 엑손, 예를 들어 엑손 8, 엑손 23, 엑손 41, 엑손 44, 엑손 50, 엑손 51, 엑손 52, 엑손 53 또는 엑손 55 중 1개 이상의 프레임시프트, 결실, 치환 및 중복 돌연변이를 수반한다. DMD 돌연변이의 추가의 예는, 예를 들어 문헌 [Flanigan KM, et al., Mutational spectrum of DMD mutations in dystrophinopathy patients: application of modern diagnostic techniques to a large cohort. Hum Mutat. 2009 Dec; 30 (12):1657-66]에 개시되어 있으며, 이의 내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
디스트로핀병증: 본원에 사용된 용어 "디스트로핀병증"은 1개 이상의 돌연변이된 DMD 대립유전자로부터 유발된 근육 질환을 지칭한다. 디스트로핀병증은 뒤시엔느 근육 이영양증, 베커 근육 이영양증 및 DMD-연관 확장성 심근병증 (DCM)을 포함하는 넓은 범위의 상태 (경도 내지 중증의 범위)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 범위의 한쪽 단부에서, 디스트로핀병증은 크레아틴 포스포키나제 (CK)의 혈청 농도의 무증상 증가 및/또는 (예를 들어, 및) 미오글로빈뇨를 동반한 근육 경련과 표현형적으로 연관된다. 일부 실시양태에서, 범위의 다른쪽 단부에서, 디스트로핀병증은 일반적으로 골격근에 주로 이환되는 경우에 뒤시엔느 또는 베커 근육 이영양증으로서 분류되고 심장에 주로 이환되는 경우에 DMD-연관 확장성 심근병증 (DCM)으로 분류되는 진행성 근육 질환과 표현형적으로 연관된다. 뒤시엔느 근육 이영양증의 증상은 근육 손실 또는 변성, 감소된 근육 기능, 혀 및 송아지 근육의 가성비대, 신경계 이상의 보다 높은 위험 및 단축된 수명을 포함한다. 뒤시엔느 근육 이영양증은 온라인 인간 멘델 유전 (OMIM) 엔트리 # 310200과 연관된다. 베커 근육 이영양증은 OMIM 엔트리 # 300376과 연관된다. 확장성 심근병증은 OMIM 엔트리 X# 302045와 연관된다.
엑손 스플라이싱 인핸서 (ESE): 본원에 사용된 용어 "엑손 스플라이싱 인핸서" 또는 "ESE"는, 예를 들어 문헌 [Blencowe et al., Trends Biochem Sci 25, 106-10. (2000)] (본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이, 프리-mRNA의 mRNA로의 스플라이싱을 지시하거나 증진시키는 유전자, 프리-mRNA 또는 mRNA의 엑손 내의 핵산 서열 모티프를 지칭한다. ESE는 스플라이싱 특징부이다. ESE는, 예를 들어 유전자 전사체로부터 1개 이상의 인트론 및/또는 1개 이상의 엑손을 제거하기 위해 스플라이싱을 지시하거나 증진시킬 수 있다. ESE 모티프는 전형적으로 6-8개의 핵염기 길이이다. SR 단백질 (예를 들어, 유전자 SRSF1, SRSF2, SRSF3, SRSF4, SRSF5, SRSF6, SRSF7, SRSF8, SRSF9, SRSF10, SRSF11, SRSF12, TRA2A 또는 TRA2B에 의해 코딩되는 단백질)은 ESE에 그의 RNA 인식 모티프 영역을 통해 결합하여 스플라이싱을 용이하게 한다. ESE 모티프는 문헌 [Cartegni et al., Nucleic Acids Research, 2003, Vol. 31, No. 13, 3568-3571] (본원에 참조로 포함됨)에 기재된 것을 포함한 다수의 방법을 통해 확인될 수 있다.
프레임워크: 본원에 사용된 용어 "프레임워크" 또는 "프레임워크 서열"은 CDR을 제외한 가변 영역의 나머지 서열을 지칭한다. CDR 서열의 정확한 정의는 상이한 시스템에 의해 결정될 수 있기 때문에, 프레임워크 서열의 의미는 상응하는 상이한 해석에 따른다. 6개의 CDR (경쇄의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 중쇄의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3)은 또한 경쇄 및 중쇄 상의 프레임워크 영역을 각각의 쇄 상에서 4개의 하위-영역 (FR1, FR2, FR3 및 FR4)으로 분류하며, 여기서 CDR1은 FR1과 FR2 사이에, CDR2는 FR2와 FR3 사이에, CDR3은 FR3과 FR4 사이에 위치한다. 특정한 하위-영역을 FR1, FR2, FR3 또는 FR4로서 명시하지 않으면서, 다른 것으로 지칭되는 프레임워크 영역은, 단일의 자연 발생 이뮤노글로불린 쇄의 가변 영역 내의 조합 FR을 나타낸다. 본원에 사용된 FR은 4개의 하위-영역 중 1개를 나타내고, FR들은 프레임워크 영역을 구성하는 4개의 하위-영역 중 2개 이상을 나타낸다. 인간 중쇄 및 경쇄 수용자 서열은 관련 기술분야에 공지되어 있다. 한 실시양태에서, 관련 기술분야에 공지된 수용자 서열은 본원에 개시된 항체에 사용될 수 있다.
인간 항체: 본원에 사용된 용어 "인간 항체"는 인간 배선 이뮤노글로불린 서열로부터 유래된 가변 및 불변 영역을 갖는 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 본 개시내용의 인간 항체는, 예를 들어 CDR, 특히 CDR3 내에, 인간 배선 이뮤노글로불린 서열에 의해 코딩되지 않는 아미노산 잔기 (예를 들어, 시험관내에서 무작위 또는 부위-특이적 돌연변이유발에 의해 또는 생체내에서 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다. 그러나, 본원에 사용된 용어 "인간 항체"는 또 다른 포유동물 종, 예컨대 마우스의 배선으로부터 유래된 CDR 서열이 인간 프레임워크 서열 상에 그라프트된 항체를 포함하는 것으로 의도되지 않는다.
인간화 항체: 용어 "인간화 항체"는 비-인간 종 (예를 들어, 마우스)으로부터의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함하지만, VH 및/또는 (예를 들어, 및) VL 서열의 적어도 한 부분이 보다 "인간-유사"하도록, 즉 인간 배선 가변 서열과 보다 유사하도록 변경된 항체를 지칭한다. 인간화 항체의 한 유형은 인간 CDR 서열이 비-인간 VH 및 VL 서열에 도입되어 상응하는 비인간 CDR 서열을 대체하는 CDR-그라프트된 항체이다. 한 실시양태에서, 인간화 항-트랜스페린 수용체 항체 및 항원 결합 부분이 제공된다. 이러한 항체는 전통적인 하이브리도마 기술을 사용하여 뮤린 항-트랜스페린 수용체 모노클로날 항체를 수득하고, 이어서 시험관내 유전자 조작, 예컨대 PCT 공개 번호 WO 2005/123126 A2 (Kasaian et al.)에 개시된 것을 사용하여 인간화함으로써 생성될 수 있다.
카바트 넘버링: 용어 "카바트 넘버링", "카바트 정의" 및 "카바트 라벨링"은 본원에서 상호교환가능하게 사용된다. 관련 기술분야에서 인식되는 이들 용어는 항체 또는 그의 항원 결합 부분의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 내의 다른 아미노산 잔기보다 더 가변적인 (즉, 초가변적인) 아미노산 잔기를 넘버링하는 시스템을 지칭한다 (Kabat et al. (1971) Ann. NY Acad, Sci. 190:382-391 및 Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242). 중쇄 가변 영역에서, 초가변 영역은 CDR1의 경우 아미노산 위치 31 내지 35, CDR2의 경우 아미노산 위치 50 내지 65 및 CDR3의 경우 아미노산 위치 95 내지 102의 범위이다. 경쇄 가변 영역에서, 초가변 영역은 CDR1의 경우 아미노산 위치 24 내지 34, CDR2의 경우 아미노산 위치 50 내지 56 및 CDR3의 경우 아미노산 위치 89 내지 97의 범위이다.
모르폴리노: 본원에 사용된 용어 "모르폴리노" ("포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머"로도 또한 지칭됨)는 포스포로디아미데이트 기를 통해 연결된 메틸렌모르폴린 고리의 백본에 부착된 핵염기를 함유하는 분자 구조를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드는 모르폴리노-기재 화합물일 수 있다. 모르폴리노-기재 올리고머 화합물은 문헌 [Dwaine A. Braasch and David R. Corey, Biochemistry, 2002, 41(14), 4503-4510); Genesis, volume 30, issue 3, 2001; Heasman, J., Dev. Biol., 2002, 243, 209-214; Nasevicius et al., Nat. Genet., 2000, 26, 216-220; Lacerra et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 2000, 97, 9591-9596]; 및 1991년 7월 23일에 허여된 미국 특허 번호 5,034,506에 기재되어 있다. 일부 실시양태에서, 모르폴리노-기재 올리고머 화합물은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이다 (예를 들어, 문헌 [Iverson, Curr. Opin. Mol. Ther., 3:235-238, 2001; 및 Wang et al., J. Gene Med., 12:354-364, 2010]에 기재된 바와 같고, 이들의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨).
올리고뉴클레오티드: 본원에 사용된 용어 "올리고뉴클레오티드"는 200개 이하의 뉴클레오티드 길이의 올리고머 핵산 화합물을 지칭한다. 올리고뉴클레오티드의 예는 RNAi 올리고뉴클레오티드 (예를 들어, siRNA, shRNA), 마이크로RNA, 갭머, 믹스머, 포스포로디아미데이트 모르폴리노, 펩티드 핵산, 압타머, 가이드 핵산 (예를 들어, Cas9 가이드 RNA) 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 올리고뉴클레오티드는 단일 가닥 또는 이중 가닥일 수 있다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드는 1개 이상의 변형된 뉴클레오시드 (예를 들어, 2'-O-메틸 당 변형, 퓨린 또는 피리미딘 변형)를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드는 1개 이상의 변형된 뉴클레오시드간 연결을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드는 Rp 또는 Sp 입체화학적 입체형태일 수 있는 1개 이상의 포스포로티오에이트 연결을 포함할 수 있다.
상보성 영역: 본원에 사용된 용어 "상보성 영역"은 뉴클레오티드 서열, 예를 들어 올리고뉴클레오티드의 뉴클레오티드 서열이 동족 뉴클레오티드 서열, 예를 들어 표적 핵산의 동족 뉴클레오티드 서열에 대해, 2개의 뉴클레오티드 서열이 생리학적 조건 하에 (예를 들어, 세포에서) 서로에 대해 어닐링될 수 있도록 충분히 상보적인 것을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 상보성 영역은 표적 핵산의 동족 뉴클레오티드 서열에 대해 완전히 상보적이다. 그러나, 일부 실시양태에서, 상보성 영역은 표적 핵산의 동족 뉴클레오티드 서열에 대해 부분적으로 상보적이다 (예를 들어, 적어도 80%, 90%, 95% 또는 99% 상보성). 일부 실시양태에서, 상보성 영역은 표적 핵산의 동족 뉴클레오티드 서열과 비교하여 1, 2, 3 또는 4개의 미스매치를 함유한다.
특이적으로 결합한다: 본원에 사용된 용어 "특이적으로 결합한다"는 분자가 결합 검정 또는 다른 결합 상황에서 결합 파트너를 적절한 대조군과 구별하는 데 사용될 수 있게 하는 친화도 또는 결합력의 정도로 분자가 결합 파트너에 결합하는 능력을 지칭한다. 항체와 관련하여, 용어 "특이적으로 결합한다"는 항체가 특이적 항원을 다른 것과 구별하는 데, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이 항원에 대한 결합을 통해 특정 세포, 예를 들어 근육 세포에 대한 우선적 표적화를 허용하는 정도로 사용될 수 있게 하는 친화도 또는 결합력의 정도로 항체가 적절한 참조 항원 또는 항원들과 비교하여 특이적 항원에 결합하는 능력을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 항체가 표적에의 결합에 대해 적어도 약 10-4 M, 10-5 M, 10-6 M, 10-7 M, 10-8 M, 10-9 M, 10-10 M, 10-11 M, 10-12 M, 10-13 M 또는 그 미만의 KD를 갖는 경우에 항체는 표적에 특이적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체는 트랜스페린 수용체, 예를 들어 트랜스페린 수용체의 정단 도메인의 에피토프에 특이적으로 결합한다.
대상체: 본원에 사용된 용어 "대상체"는 포유동물을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 비-인간 영장류 또는 설치류이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 인간이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 환자, 예를 들어 질환을 갖거나 갖는 것으로 의심되는 인간 환자이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 돌연변이된 DMD 유전자 서열, 예를 들어 DMD 유전자 서열의 엑손 내의 돌연변이로 인한 질환을 갖거나 갖는 것으로 의심되는 인간 환자이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 디스트로핀병증, 예를 들어 뒤시엔느 근육 이영양증을 갖는다.
트랜스페린 수용체: 본원에 사용된 용어 "트랜스페린 수용체" (TFRC, CD71, p90, TFR 또는 TFR1로도 또한 공지됨)는 트랜스페린에 결합하여 세포내이입에 의한 철 흡수를 용이하게 하는 내재화 세포 표면 수용체를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 트랜스페린 수용체는 인간 (NCBI 진 ID 7037), 비-인간 영장류 (예를 들어, NCBI 진 ID 711568 또는 NCBI 진 ID 102136007) 또는 설치류 (예를 들어, NCBI 진 ID 22042) 기원의 것일 수 있다. 추가로, 수용체의 상이한 이소형을 코딩하는 다수의 인간 전사체 변이체 (예를 들어, 진뱅크 RefSeq 수탁 번호: NP_001121620.1, NP_003225.2, NP_001300894.1 및 NP_001300895.1 하에 주석달린 바와 같음)가 특징화되었다.
범위: 본 개시내용에 제공된 모든 범위는 종점을 포함한다.
복합체
대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 투여하는 것을 포함하며, 여기서 복합체는 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 표적화제, 예를 들어 항체를 포함하는 것인, 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하고/거나 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 일부 실시양태에서, 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 근육-표적화 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드는 PMO이다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드는 엑손 스킵핑을 촉진하는 돌연변이된 DMD 대립유전자를 표적화하는 올리고뉴클레오티드이다.
본원에 기재된 방법에 사용된 복합체는 일반적으로 본원에 기재된 항체 (예를 들어, 항-TfR1 항체 중 어느 하나)를 올리고뉴클레오티드 (예를 들어, PMO)에 공유 연결하는 링커를 포함한다. 링커는 적어도 1개의 공유 결합을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용된 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 각각의 R1은 독립적으로 올리고뉴클레오티드 (예를 들어, PMO)를 포함하는 화합물을 포함하고, R2는 항체 (예를 들어, 항-TfR1 항체)를 포함하고, 여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 각각의 복합체에서 R1의 경우의 개수를 나타내는 정수 (예를 들어, 1 이상)이다. 일부 실시양태에서, 각각의 R1은 독립적으로 올리고뉴클레오티드를 포함하는 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, 각각의 R1은 독립적으로 올리고뉴클레오티드 이외에 추가의 요소를 포함하는 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 항체 (예를 들어, 항-TfR1 항체)이다. 일부 실시양태에서, R2는 항-TfR1 Fab이다.
일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서, n1은 독립적으로 1 이상의 정수이다. 일부 실시양태에서, 항체는 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 Fab 단편, 전장 IgG, Fab' 단편, F(ab')2 단편, scFv 또는 Fv이다. 일부 실시양태에서, 항체는 Fab 단편이다.
일부 실시양태에서, 각각의 또는 임의의 복합체 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 조성물 또는 방법에서의 임의의 복합체)의 n1의 값은 1 내지 접합이 요구되거나 표적화되는 항체 내의 아미노산 잔기의 수 (예를 들어, 리신 잔기의 수)까지의 정수이다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1의 값은 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 및 27로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1의 값은 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 및 26으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1의 값은 독립적으로 1-27, 1-26, 1-10, 1-5 또는 1-3의 범위이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용된 복합체는 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)로서 제공된다. 일부 실시양태에서, 조성물은 복수의 복합체를 포함하고, 히스티딘 및/또는 수크로스를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 복수의 상이한 복합체는 공통 표적화제 (예를 들어, 항체) 및 공통 올리고뉴클레오티드 (PMO)를 포함한다. 이러한 실시양태에서, 상이한 복합체 유형은 항체에 공유 연결된 상이한 수의 올리고뉴클레오티드를 갖는 것을 특징으로 한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 대상체에게 투여하기 위한 조성물은 복수의 복합체 유형을 포함하며, 여기서 각각의 복합체 유형은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서 각각의 R1은 독립적으로 올리고뉴클레오티드 (예를 들어, PMO)를 포함하는 화합물을 포함하고, R2는 항체 (예를 들어, 항-TfR1 항체)를 포함하고, 여기서 각각의 복합체 유형에서 n1은 독립적으로 복합체 유형의 각각의 복합체에서 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 조성물의 상이한 복합체 유형은 상이한 n1 값 (예를 들어, 1-27, 1-26, 1-25, 1-20, 1-15, 1-10, 1-5 또는 1-3 범위의 n1 값)을 갖는 것을 특징으로 한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물은 비접합된 항체 (예를 들어, 미량으로) 및 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 접합된 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 비접합된 항체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 가지며 여기서 n1은 0인 화합물로서 지칭될 수 있다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조의 화합물 (예를 들어, 복합체)을 포함하며, 여기서 각각의 R1은 독립적으로 올리고뉴클레오티드를 포함하는 기를 포함하고, R2는 항체를 포함하고, n1은 독립적으로 각각의 화합물 (예를 들어, 복합체)에서 R1의 경우의 개수를 반영하는 0 이상의 정수이다. 일부 실시양태에서, 조성물 중 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 가지며 여기서 n1은 0인 화합물의 분율은 조성물 중 상기 구조에 대해 n1이 1 이상인 모든 화합물과 비교하여 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만, 0.5% 미만, 0.1% 미만, 0.05% 미만 또는 0.01% 미만이다.
일부 실시양태에서, 복합체에서 각각의 경우의 R1은 항체의 상이한 아미노산 잔기에 접합된다. 일부 실시양태에서, 각각의 상이한 아미노산은 ε-아미노 기 (예를 들어, 리신, 아르기닌)를 포함한다. 그러나, 일부 실시양태에서, R1이 공유 연결된 각각의 상이한 아미노산은 시스테인이다. 일부 실시양태에서, R1은 항체의 아미노산 잔기에 직접적으로 공유 연결된다. 그러나, 일부 실시양태에서, R1은 항체의 아미노산에 간접적으로 공유 연결되며, 예를 들어 아미노산 상의 글리코실화 부위에 공유 연결된다.
일부 실시양태에서, R1은 항체의 아미노산 잔기에 직접적으로 공유 연결된다. 그러나, 일부 실시양태에서, R1은 항체의 아미노산에 간접적으로 공유 연결되며, 예를 들어 아미노산 상의 글리코실화 부위에 공유 연결된다. 일부 실시양태에서, R1은 항체의 CDR 영역에 존재하는 아미노산 잔기에는 공유 연결되지 않는다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용된 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 각각의 R1은 독립적으로 화학식 (Ia)의 기를 포함하고:
Figure pct00004
여기서 R3은 올리고뉴클레오티드, 예를 들어 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이고; 여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 각각의 복합체에서 R1의 경우의 개수를 나타내는 정수 (예를 들어, 1 이상)이고, 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결된다 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결됨). 일부 실시양태에서, R2는 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 항체를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편, 전장 IgG, Fab' 단편, F(ab')2 단편, scFv 또는 Fv인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R3은 올리고뉴클레오티드, 예를 들어 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하는 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab를 포함하고, 각각의 R1은 부착 지점 A에서 Fab의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 정수 (예를 들어, 1-27, 1-26, 1-10, 1-5 또는 1-3 범위의 정수)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용된 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00005
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고; 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고, 여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 각각의 복합체에서 R1의 경우의 개수를 나타내는 정수 (예를 들어, 1 이상)이고, 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결된다 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결됨). 일부 실시양태에서, R2는 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 항체를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편, 전장 IgG, Fab' 단편, F(ab')2 단편, scFv 또는 Fv인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 정수 (예를 들어, 1-27, 1-26, 1-10, 1-5 또는 1-3 범위의 정수)이다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab를 포함하고, 각각의 R1은 부착 지점 A에서 Fab의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용된 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00006
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 각각의 복합체에서 R1의 경우의 개수를 나타내는 정수 (예를 들어, 1 이상)이고, 여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결된다 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결됨). 일부 실시양태에서, R2는 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 항체를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편, 전장 IgG, Fab' 단편, F(ab')2 단편, scFv 또는 Fv인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 정수 (예를 들어, 1-27, 1-26, 1-10, 1-5 또는 1-3 범위의 정수)이다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab를 포함하고, 각각의 R1은 부착 지점 A에서 Fab의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용된 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하며:
Figure pct00007
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고; 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고; 여기서 R2는 표 2로부터 선택된 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고; 여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 정사각형 괄호에 의해 둘러싸인 기의 경우의 개수를 나타내는 정수 (예를 들어, 1 이상)이고, 여기서 정사각형 괄호에 의해 둘러싸인 기의 각각의 경우는 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 정수 (예를 들어, 1-27, 1-26, 1-10, 1-5 또는 1-3 범위의 정수)이다. 일부 실시양태에서, R2는 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기를 통해 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결된) 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 복합체는 화학식 (A)의 구조를 포함하며:
Figure pct00008
여기서 n은 0-15 (예를 들어, 3)이고, m은 0-15 (예를 들어, 4)이다. 일부 실시양태에서, 항체는 항-TfR1 항체 (예를 들어, 표 2에 제공된 항-TfR1 항체)이다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드는 PMO이고, 서열식별번호: 21의 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 구조에서 항-TfR1 항체에 인접하여 제시된 아미드는 항-TfR1 항체의 아민, 예컨대 리신 엡실론 아민과의 반응으로부터 생성된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 복합체는 Fab의 리신을 통해 PMO의 5' 단부에 공유 연결된 항-TfR1 Fab를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 Fab 단편, 전장 IgG, Fab' 단편, F(ab')2 단편, scFv 또는 Fv이다.
항체
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용된 복합체는 인간 트랜스페린 수용체 1 (TfR1)에 결합하는 항체를 포함한다. NCBI 서열 NP_003225.2 (트랜스페린 수용체 단백질 1 이소형 1, 호모 사피엔스(homo sapiens))에 상응하는 인간 트랜스페린 수용체 1 아미노산 서열의 예는 하기와 같다:
Figure pct00009
표 2는 본원에 제공된 복합체에 유용한 항-TfR1 항체의 서열의 예를 제공한다.
표 2. 항-TfR1 항체 서열의 예
Figure pct00010
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 1의 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1) (IMGT 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 2의 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2) (IMGT 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 3의 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3) (IMGT 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 4의 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1) (IMGT 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 5의 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) (IMGT 정의 시스템에 따름) 및 서열식별번호: 6의 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3) (IMGT 정의 시스템에 따름)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 7의 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1) (카바트 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 8의 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2) (카바트 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 9의 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3) (카바트 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 10의 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1) (카바트 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 11의 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) (카바트 정의 시스템에 따름) 및 서열식별번호: 6의 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3) (카바트 정의 시스템에 따름)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 12의 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1) (코티아 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 13의 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2) (코티아 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 14의 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3) (코티아 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 15의 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1) (코티아 정의 시스템에 따름), 서열식별번호: 5의 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) (코티아 정의 시스템에 따름) 및 서열식별번호: 16의 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3) (코티아 정의 시스템에 따름)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)과 비교하여 프레임워크 영역에 25개 이하의 아미노산 변이 (예를 들어, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1개 이하의 아미노산 변이)를 함유하는 VH를 포함한다. 대안적으로 또는 추가로 (예를 들어, 추가로), 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)과 비교하여 프레임워크 영역에 25개 이하의 아미노산 변이 (예를 들어, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1개 이하의 아미노산 변이)를 함유하는 VL을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH에 대해 프레임워크 영역에서 적어도 75% (예를 들어, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함한다. 대안적으로 또는 추가로 (예를 들어, 추가로), 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL에 대해 프레임워크 영역에서 적어도 75% (예를 들어, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함한다. 대안적으로 또는 추가로 (예를 들어, 추가로), 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열에 대해 적어도 75% (예를 들어, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열에 대해 적어도 75% (예를 들어, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 Fab이다. 대안적으로 또는 추가로 (예를 들어, 추가로), 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열에 대해 적어도 75% (예를 들어, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 대안적으로 또는 추가로 (예를 들어, 추가로), 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열에 대해 적어도 75% (예를 들어, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 99%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 Fab이다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하는 Fab이다. 대안적으로 또는 추가로 (예를 들어, 추가로), 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 대안적으로 또는 추가로 (예를 들어, 추가로), 본 개시내용의 항-TfR1 항체는 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 Fab이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 항-TfR1 항체는 1종 이상의 번역후 변형을 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 피로글루타메이트 형성 (피로-Glu)으로도 또한 불리는 N-말단 고리화는 생산 동안 항체에서 N-말단 글루타메이트 (Glu) 및/또는 글루타민 (Gln) 잔기에서 발생할 수 있다. 따라서, N-말단 글루타메이트 또는 글루타민 잔기를 포함하는 서열을 갖는 것으로 명시된 항체는 번역후 변형으로부터 생성된 피로글루타메이트 형성을 겪은 항체를 포괄한다는 것이 인지될 것이다. 일부 실시양태에서, 피로글루타메이트 형성은 중쇄 서열에서 발생한다. 일부 실시양태에서, 피로글루타메이트 형성은 경쇄 서열에서 발생한다.
올리고뉴클레오티드
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용된 복합체의 올리고뉴클레오티드는 단일 가닥 올리고뉴클레오티드이다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드는 DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용하다. 일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 DMD 대립유전자 (예를 들어, 돌연변이된 DMD 대립유전자)를 표적화한다. 일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 DMD RNA (예를 들어, 서열식별번호: 24의 Dp427m 전사체)의 영역을 표적화한다. 일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 DMD RNA (예를 들어, 서열식별번호: 23의 Dp427m 전사체)에 대한 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 DMD RNA의 엑손 (예를 들어, 엑손 8, 23, 43, 44, 45, 46, 50, 51, 52, 53 또는 55) 또는 인트론에 대한 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 DMD RNA (예를 들어, 호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD) 유전자 (예를 들어, NCBI 수탁 번호 NG_012232.1)에 의해 코딩되는 DMD 프리-mRNA)의 스플라이싱 공여자 부위, 스플라이싱 수용자 부위, 분지점 또는 엑손 스플라이싱 인핸서 (ESE)를 표적화한다. 일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 DMD 내의 엑손 스플라이싱 인핸서 (ESE) 서열 (예를 들어, 엑손 23, 44, 45, 46, 50, 51, 52, 53 또는 55의 ESE 서열)을 표적화한다.
복합체의 올리고뉴클레오티드에 의해 표적화될 수 있는 DMD RNA 서열 및 엑손 서열의 예가 하기에 제공된다.
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, mRNA (NCBI 참조 서열: NM_004006.2) (서열식별번호: 23).
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 51 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 7554-7786)
Figure pct00011
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 8 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 894-1075)
Figure pct00012
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 23 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 3194-3406)
Figure pct00013
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 43 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 6362-6534)
Figure pct00014
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 44 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 6535-6682)
Figure pct00015
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 45 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 6683-6858)
Figure pct00016
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 46 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 6859-7006)
Figure pct00017
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 50 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 7445-7553)
Figure pct00018
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 51 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 7554-7786)
Figure pct00019
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 52 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 7787-7904)
Figure pct00020
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 53 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 7905-8116)
Figure pct00021
호모 사피엔스 디스트로핀 (DMD), 전사체 변이체 Dp427m, 엑손 55 (NCBI 참조 서열: NM_004006.2의 뉴클레오티드 위치 8272-8461)
Figure pct00022
일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 15-40개 (예를 들어, 15-40, 15-35, 15-30, 15-25, 15-20, 20-40, 20-35, 20-30, 20-25, 25-40, 25-35, 25-30, 25-28, 28-30, 30-40, 30-32, 32-35, 30-35 또는 35-40개)의 뉴클레오티드 길이이다. 일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30개의 뉴클레오티드 길이, 임의로 20-35 또는 30개의 뉴클레오티드 길이이다.
일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 DMD RNA에 대한 적어도 8개 (예를 들어, 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30개)의 연속 뉴클레오티드의 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 DMD RNA의 엑손에 대한 적어도 8개 (예를 들어, 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30개)의 연속 뉴클레오티드의 상보성 영역을 포함한다.
일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 서열식별번호: 23-34 중 어느 하나에 제시된 바와 같은 DMD 서열에 대해 적어도 8개 (예를 들어, 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30개)의 연속 뉴클레오티드의 상보성 영역을 포함한다.
일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 서열식별번호: 22에 제시된 바와 같은 표적 서열 (CTAGAAATGCCATCTTCCTTGATGTTGGAG)에 대해 적어도 8개 (예를 들어, 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30개)의 연속 뉴클레오티드의 상보성 영역을 포함한다. 일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 서열식별번호: 21에 제시된 바와 같은 서열 (CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG)의 적어도 8개 (예를 들어, 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30개)의 연속 뉴클레오티드를 포함한다.
일부 실시양태에서, DMD를 표적화하는 데 (예를 들어, 엑손 스킵핑에) 유용한 올리고뉴클레오티드는 서열식별번호: 21의 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 올리고뉴클레오티드 중 어느 하나는 PMO이다.
일부 실시양태에서, C5 위치에서의 핵염기 우라실의 메틸화는 티민을 형성한다는 것이 인지될 것이다. 따라서, 일부 실시양태에서, C5 메틸화 우라실 (또는 5-메틸-우라실)을 갖는 뉴클레오티드 또는 뉴클레오시드는 동등하게 티민 뉴클레오티드 또는 뉴클레오시드로서 확인될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 올리고뉴클레오티드 (예를 들어, 서열식별번호: 21에 제시된 바와 같은 올리고뉴클레오티드) 중 어느 하나 내의 티민 염기 (T) 중 어느 1개 이상은 독립적으로 및 임의로 우라실 염기 (U)일 수 있고/거나 본원에 제공된 올리고뉴클레오티드 내의 U 중 어느 1개 이상은 독립적으로 및 임의로 T일 수 있다.
조성물
일부 실시양태에서, 복합체 (즉, 복수의 복합체)를 포함하는 조성물은 본원에 기재된 방법에 적합한 방식으로 제제화된다. 일부 실시양태에서, 근육-표적화 복합체를 포함하는 조성물은 분해를 최소화하거나, 전달 및/또는 (예를 들어, 및) 흡수를 용이하게 하거나, 또는 제제 중 복합체에 또 다른 유익한 특성을 제공하는 제제를 사용하여 대상체에게 전달된다. 따라서, 일부 실시양태에서, 복합체 (예를 들어, Fab와 공유 연결된 PMO를 포함하는 복수의 복합체)를 포함하는 조성물은 히스티딘 및/또는 수크로스와 함께 제제화된다. 일부 실시양태에서, 근육-표적화 복합체 (예를 들어, Fab와 공유 연결된 PMO를 포함하는 복합체)를 포함하는 조성물은 수용액 중 히스티딘 및/또는 수크로스와 함께 제제화된다. 일부 실시양태에서, 복수의 복합체, 히스티딘 및 수크로스를 포함하는 조성물은 (예를 들어, 저장을 위해) 동결건조될 수 있다. 일부 실시양태에서, 동결건조된 조성물은 대상체에게 투여하기 위해 (예를 들어, 물로) 재구성될 수 있다. 조성물 (예를 들어, 수용액 또는 동결건조된 조성물)은 대상체에게 표적 세포의 바로 옆 환경으로 또는 전신으로 투여되는 경우에, 충분한 양의 복합체가 표적 근육 세포에 진입하도록 적합하게 제조될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 복합체 (즉, 복수의 복합체)를 포함하며, 각각의 복합체는 항체에 공유 연결된 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 복합체를 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 항-TfR1 항체에 공유 연결된 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)를 포함하고, 임의로 여기서 이러한 복합체의 항체는 표 2에 제시된 바와 같은 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하고, 추가로 일부 실시양태에서, 여기서 조성물은 히스티딘 (예를 들어, L-히스티딘) 및 수크로스를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 항-TfR1 Fab이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 복합체 (즉, 복수의 복합체)를 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조이고, 여기서 각각의 R1은 독립적으로 올리고뉴클레오티드 (예를 들어, PMO)를 포함하는 화합물을 포함하고, R2에 공유 연결되고, 여기서 R2는 항체 (예를 들어, 항-TfR1 항체)를 포함하고, 여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 각각의 복합체에서 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이다.
일부 실시양태에서, 조성물 중 각각의 복합체의 n1의 값은 독립적으로 및 임의로 1 내지 항체 (R2) 내의 접합이 요구되거나 표적화되는 아미노산 잔기의 수 (예를 들어, 리신 잔기의 수)까지의 정수이다. 일부 실시양태에서, 조성물 중 각각의 복합체의 n1의 값은 독립적으로 및 임의로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 및 27로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 조성물 중 각각의 복합체의 n1의 값은 독립적으로 및 임의로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 및 26으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 조성물 중 각각의 복합체의 n1의 값은 독립적으로 및 임의로 1 내지 27, 1 내지 26, 1 내지 10, 1 내지 5 또는 1 내지 3 범위의 정수로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 3, 1 내지 5, 1 내지 10, 1 내지 26 또는 1 내지 27의 범위이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물은 비접합된 항체 (예를 들어, 미량으로) 및 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 접합된 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 비접합된 항체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 가지며 여기서 n1은 0인 화합물로서 지칭될 수 있다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조의 화합물 (예를 들어, 복합체)을 포함하며, 여기서 각각의 R1은 독립적으로 올리고뉴클레오티드를 포함하는 기를 포함하고, R2는 항체를 포함하고, n1은 독립적으로 각각의 화합물 (예를 들어, 복합체)에서 R1의 경우의 개수를 반영하는 0 이상의 정수이다. 일부 실시양태에서, 조성물 중 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 가지며 여기서 n1은 0인 화합물의 분율은 조성물 중 상기 구조에 대해 n1이 1 이상인 모든 화합물과 비교하여 10% 미만, 5% 미만, 1% 미만, 0.5% 미만, 0.1% 미만, 0.05% 미만 또는 0.01% 미만이다.
일부 실시양태에서, 본원의 복합체 (예를 들어, 본원에 제공된 조성물의 복합체)에서 각각의 경우의 R1은 항체의 상이한 아미노산 잔기에 접합된다. 일부 실시양태에서, 각각의 상이한 아미노산은 ε-아미노 기 (예를 들어, 리신, 아르기닌)를 포함한다. 그러나, 일부 실시양태에서, R1이 공유 연결된 각각의 상이한 아미노산은 시스테인이다. 일부 실시양태에서, R1은 항체의 아미노산 잔기에 직접적으로 공유 연결된다. 그러나, 일부 실시양태에서, R1은 항체의 아미노산에 간접적으로 공유 연결되며, 예를 들어 아미노산 상의 글리코실화 부위에 공유 연결된다. 일부 실시양태에서, R1이 항체의 CDR 영역에 존재하는 아미노산 잔기에 공유 연결된 것인 복합체가 단지 미량으로만 존재하거나 또는 검출불가능한 양으로 존재하거나 또는 전혀 존재하지 않는 것인 제제가 제공된다. 일부 실시양태에서, R1이 항체의 CDR 영역에 존재하는 아미노산 잔기에 공유 연결된 것인 복합체가 표준 검출 기술을 사용하여 제제에서 검출가능하지 않은 것인 제제가 제공된다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체를 포함하며, 여기서 본원에 제공된 조성물의 복합체에서 각각의 R1은 독립적으로 화학식 (Ia)의 기를 포함하고:
Figure pct00023
여기서 R3은 올리고뉴클레오티드, 예를 들어 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이고; 여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 각각의 복합체에서 R1의 경우의 개수를 나타내는 정수 (예를 들어, 1 이상)이고, 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결된다 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결됨). 일부 실시양태에서, R2는 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 항체를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편, 전장 IgG, Fab' 단편, F(ab')2 단편, scFv 또는 Fv인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R3은 올리고뉴클레오티드, 예를 들어 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하는 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이다. 일부 실시양태에서, R2는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 각각의 R1은 부착 지점 A에서 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 정수 (예를 들어, 1-27, 1-26, 1-10, 1-5 또는 1-3 범위의 정수)이다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며 여기서 n1은 0인 복합체를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체를 포함하며, 여기서 본원에 제공된 조성물의 복합체에서 각각의 경우의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00024
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고, 여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 각각의 복합체에서 R1의 경우의 개수를 나타내는 정수 (예를 들어, 1 이상)이고, 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결된다 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결됨). 일부 실시양태에서, R2는 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 항체를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편, 전장 IgG, Fab' 단편, F(ab')2 단편, scFv 또는 Fv인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 정수 (예를 들어, 1-27, 1-26, 1-10, 1-5 또는 1-3 범위의 정수)이다. 일부 실시양태에서, R2는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 각각의 R1은 부착 지점 A에서 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며 여기서 n1은 0인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체를 포함하며, 여기서 본원에 제공된 조성물의 복합체에서 각각의 경우의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00025
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 각각의 복합체에서 R1의 경우의 개수를 나타내는 정수 (예를 들어, 1 이상)이고, 여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결된다 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결됨). 일부 실시양태에서, R2는 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 항체를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편, 전장 IgG, Fab' 단편, F(ab')2 단편, scFv 또는 Fv인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 Fab 단편인 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 정수 (예를 들어, 1-27, 1-26, 1-10, 1-5 또는 1-3 범위의 정수)이다. 일부 실시양태에서, R2는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 각각의 R1은 부착 지점 A에서 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며 여기서 n1은 0인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (Id)의 구조를 포함하는 복합체를 포함하며:
Figure pct00026
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고; 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고; 여기서 R2는 표 2로부터 선택된 CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3을 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고; 여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 정사각형 괄호에 의해 둘러싸인 기의 경우의 개수를 나타내는 정수 (예를 들어, 1 이상)이고, 여기서 정사각형 괄호에 의해 둘러싸인 기의 각각의 경우는 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다. 일부 실시양태에서, R2는 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 일부 실시양태에서, R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항체 (예를 들어, Fab)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 정수 (예를 들어, 1-27, 1-26, 1-10, 1-5 또는 1-3 범위의 정수)이다. 일부 실시양태에서, 각각의 복합체에서, n1은 독립적으로 1 이상의 정수이다. 일부 실시양태에서, R2는 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기를 통해 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결된) 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 n1이 0인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (A)의 구조를 포함하며:
Figure pct00027
여기서 n은 0-15 (예를 들어, 3)이고, m은 0-15 (예를 들어, 4)이다. 일부 실시양태에서, 항체는 항-TfR1 항체 (예를 들어, 표 2에 제공된 항-TfR1 항체)이다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드는 PMO이고, 서열식별번호: 21의 염기 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 구조에서 항체에 인접하여 제시된 아미드는 항체의 아민, 예컨대 리신 엡실론 아민과의 반응으로부터 생성된다. 일부 실시양태에서, 항체는 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3)을 포함하고/거나; 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 17에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH)을 포함하고/거나 서열식별번호: 18에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함하고/거나 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 19에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20에 대해 적어도 85% (예를 들어, 적어도 95%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함하고/거나 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 Fab 단편, 전장 IgG, Fab' 단편, F(ab')2 단편, scFv 또는 Fv이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 복합체를 포함하며, 여기서 그의 제제 중 복합체의 농도는 복합체 1-50 mg/mL, 임의로 10-50 mg/ml 또는 20-35 mg/mL (예를 들어, 1-10 mg/mL, 10-15 mg/mL, 15-20 mg/mL, 20-22 mg/mL, 22-24 mg/ml, 24-26 mg/ml, 24-25 mg/ml, 25-26 mg/ml, 22-25 mg/mL, 25-27 mg/mL, 27-29 mg/mL, 29-30 mg/mL, 25-30 mg/mL, 29-31 mg/ml, 30-31 mg/ml, 31-32 mg/ml, 30-32 mg/mL, 32-33 mg/ml, 32-35 mg/mL, 30-35 mg/mL, 35-40 mg/mL, 40-45 mg/mL, 45-50 mg/mL), 임의로 대략 25 mg/mL (예를 들어, 25 mg/mL) 또는 대략 30 mg/mL (예를 들어, 30 mg/mL)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 어느 하나 또는 복수의 복합체는 수용액 중 히스티딘 (예를 들어, L-히스티딘) 및 수크로스와 함께 또는 동결건조된 형태 (예를 들어, 동결건조된 분말)로 제제화된다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 어느 하나 또는 복수의 복합체는 수용액 중 히스티딘 (예를 들어, L-히스티딘) 및 수크로스와 함께 제제화된다. 일부 실시양태에서, 히스티딘 (예를 들어, L-히스티딘)은 수용액 중에 10-50 mM, 10-20 mM, 20 mM 내지 30 mM 또는 20 mM 내지 40 mM, 예를 들어 20-22 mM, 22-24 mM, 24-25 mM, 25-26 mM, 24-26 mM, 26-27 mM, 24-27 mM, 27-28 mM, 28-29 mM, 29-30 mM, 27-30 mM, 대략 22-27 mM, 대략 23-26 mM, 대략 24-26 mM, 대략 26-28 mM, 대략 28-30 mM, 대략 30-32 mM, 대략 32-35 mM, 대략 35-40 mM, 40-45 mM, 45-50 mM의 범위, 대략 25 mM 또는 임의로 25 mM의 농도로 존재한다. 일부 실시양태에서, 수크로스는 수용액 중에 부피당 5 중량% 내지 15 중량% (w/v%), 예를 들어 8-15% w/v%, 9-15% w/v%, 9-11% w/v%, 9.5-11% w/v%의 범위, 또는 예를 들어 5-6 w/v%, 6-7 w/v%, 7-8 w/v%, 8-9 w/v%, 9-10 w/v%, 10-11 w/v%, 11-12% w/v%, 10-12 w/v%, 12-13% w/v%, 13-14% w/v%, 12-14 w/v%, 14-15 w/v% 또는 8-12 w/v% 범위의 농도로 존재한다. 일부 실시양태에서, 수크로스는 수용액 중에 8-12 w/v%의 범위 (예를 들어, 10 w/v%)의 농도로 존재한다. 일부 실시양태에서, 수용액은 5.0 내지 7.0, 예를 들어 5.0-5.2, 5.2-5.4, 5.4-5.6, 5.6-5.8, 5.8-6.0, 5.9-6.0, 5.9-6.1, 6.0-6.1; 예를 들어 5.5 내지 6.5 범위의 pH 또는 예를 들어 5.5-5.8, 5.8-6.0, 5.9-6.1, 6.0-6.1, 6.0-6.2, 6.2-6.4, 6.4-6.5, 6.5-6.7, 6.7-6.8, 6.8-6.9, 6.9-7.0, 7.0-7.1 또는 5.8-6.2의 pH 범위를 갖는다. 일부 실시양태에서, 수용액은 5.8-6.2 범위 (예를 들어, 5.8-6.0, 5.8-6.1, 5.9-6.1)의 pH를 갖는다. 일부 실시양태에서, 수용액은 5.9-6.2 범위의 pH를 갖는다. 일부 실시양태에서, 수용액은 6.0-6.1 범위 (예를 들어, 약 6.0 또는 6.0)의 pH를 갖는다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액) 중 어느 하나는 하나 또는 복수의 복합체, 히스티딘 및 수크로스를 포함하며, 여기서 히스티딘 (예를 들어, L-히스티딘)은 조성물 (예를 들어, 수용액) 중에 25 mM의 농도로 존재하고, 여기서 수크로스는 조성물 (예를 들어, 수용액) 중에 10 w/v%의 농도로 존재하고, 여기서 조성물 (예를 들어, 수용액)은 pH 약 6.0 (예를 들어, 6.0, 5.9-6.1)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액) 중 어느 하나는 하나 또는 복수의 복합체, 히스티딘 및 수크로스를 포함하며, 여기서 히스티딘 (예를 들어, L-히스티딘)은 수용액 중에 25 mM의 농도로 존재하고, 여기서 수크로스는 수용액 중에 10 w/v%의 농도로 존재하고, 여기서 pH는 약 6.0 (예를 들어, 6.0, 5.9-6.1)이고, 제제 중 복합체의 농도는 10-50 mg/ml 또는 20-35 mg/mL (예를 들어, 1-10 mg/mL, 10-15 mg/mL, 15-20 mg/mL, 20-22 mg/mL, 22-24 mg/ml, 24-26 mg/ml, 22-25 mg/mL, 25-27 mg/mL, 27-29 mg/mL, 29-31 mg/ml, 29-30 mg/mL, 30-31 mg/ml, 31-32 mg/ml, 25-30 mg/mL, 30-32 mg/mL, 32-35 mg/mL, 30-35 mg/mL, 35-40 mg/mL, 40-45 mg/mL, 45-50 mg/mL), 임의로 25 mg/mL 또는 30 mg/mL이다.
본원에 기재된 바와 같이, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 조성물은 수크로스를 포함하는 수용액 중에 제제화된다. 일부 실시양태에서, 수크로스는 적어도 부분적으로 동결건조보호제로서의 역할을 한다. 일부 실시양태에서, 수크로스는 식물, 예를 들어 풀, 과실 또는 채소 (예를 들어, 뿌리 채소) 공급원 (예를 들어, 비트 (예를 들어, 사탕무, 예를 들어 사카룸 종(Saccharum spp.)), 사탕수수 (예를 들어, 베타 불가리스(Beta vulgaris)), 대추, 사탕 단풍나무, 단수수, 사과, 오렌지, 당근, 당밀, 단풍나무 시럽, 옥수수 감미제) 또는 동물 제품 (예를 들어, 꿀)으로부터의 것이다. 일부 실시양태에서, 수크로스는 비트 또는 사탕수수 (예를 들어, 비트 수크로스, 사탕수수 수크로스)로부터의 것이다. 일부 실시양태에서, 수크로스 이외의 다른 동결건조보호제, 예를 들어 트레할로스, 만니톨, 락토스, 폴리에틸렌 글리콜 또는 폴리비닐 피롤리돈이 사용될 수 있다. 그러나, 일부 실시양태에서, 붕괴 온도 조절제 (예를 들어, 덱스트란, 피콜 또는 젤라틴)가 조성물 중에 제공될 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물 (예를 들어, 수성 형태)의 수용액을 동결건조시키는 것을 포함하는 방법에 의해 생산된 생성물 (예를 들어, 본원에 기재된 동결건조 조성물)이 제공된다.
일부 실시양태에서, 조성물은 의도된 투여 경로에 적합하도록 제제화된다. 투여 경로의 예는 비경구, 예를 들어 정맥내, 피내, 피하 투여를 포함한다. 전형적으로, 투여 경로는 정맥내 또는 피하이다.
사용/치료/투여 방법
본원에 기재된 바와 같은 분자 페이로드 (예를 들어, 올리고뉴클레오티드, 예를 들어 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO))에 공유 연결된 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하는 복합체는 디스트로핀병증, 예를 들어 뒤시엔느 근육 이영양증을 갖는 대상체를 치료하는 데 효과적이다. 일부 실시양태에서, 복합체는 올리고뉴클레오티드, 예를 들어 돌연변이된 DMD 대립유전자로부터 발현된 mRNA의 엑손 스킵핑을 용이하게 하는 올리고뉴클레오티드인 분자 페이로드를 포함한다.
일부 실시양태에서, 대상체는 인간 대상체, 비-인간 영장류 대상체 (예를 들어, 시노몰구스 원숭이), 설치류 대상체 또는 임의의 적합한 포유동물 대상체일 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 인간이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 2-60세 (예를 들어, 2-60, 2-50, 2-40, 2-30, 2-20, 2-10세)인 인간 대상체이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 5-30세 (예를 들어, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30세)인 인간 대상체이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 5-12세 (예를 들어, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12세)인 인간 대상체이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 4-16세 (예를 들어, 4-16, 5-16, 6-16, 7-16, 8-16, 9-16, 10-16, 11-16, 12-16, 13-16, 14-16, 15-16, 4-15, 5-15, 6-15, 7-15, 8-15, 9-15, 10-15, 11-15, 12-15, 13-15, 14-15, 4-14, 5-14, 6-14, 7-14, 8-14, 9-14, 10-14, 11-14, 12-14, 13-14, 4-13, 5-13, 6-13, 7-13, 8-13, 9-13, 10-13, 11-13, 12-13, 4-12, 5-12, 6-12, 7-12, 8-12, 9-12, 10-12, 11-12, 4-11, 5-11, 6-11, 7-11, 8-11, 9-16, 10-11, 4-10, 5-10, 6-10, 7-10, 8-10, 9-10, 4-9, 5-9, 6-9, 7-9, 8-9, 4-9, 5-9, 6-9, 7-9, 8-9, 4-8, 5-8, 6-8, 7-8, 4-7, 5-7, 6-7, 4-6, 5-6 또는 4-5세)인 인간 대상체이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 약 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 또는 16세인 인간 대상체이다.
일부 실시양태에서, 대상체는 뒤시엔느 근육 이영양증 또는 다른 디스트로핀병증을 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 돌연변이된 DMD 대립유전자를 가지며, 이는 프레임시프트 돌연변이를 유발하고 부적절한 RNA 스플라이싱/프로세싱을 유도하는 DMD 엑손 내의 적어도 1개의 돌연변이를 임의로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 중증 디스트로핀병증의 증상, 예를 들어 근육 위축 또는 근육 손실을 앓고 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 크레아틴 포스포키나제 (CK)의 혈청 농도의 무증상 증가 및/또는 (예를 들어, 및) 미오글로빈뇨를 동반한 근육 경련을 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 진행성 근육 질환, 예컨대 뒤시엔느 또는 베커 근육 이영양증 또는 DMD-연관 확장성 심근병증 (DCM)을 갖는다. 일부 실시양태에서, 대상체는 디스트로핀병증의 증상을 앓고 있지 않다. 일부 실시양태에서, 대상체는 보행할 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 보행할 수 없다. 일부 실시양태에서, 대상체는 보행한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 비-보행한다. 일부 실시양태에서, 대상체는 비-보행하고, 본원에 기재된 방법으로 치료되기 전에 2년 미만 동안 비-보행이었다.
일부 실시양태에서, 대상체는 엑손 51 스킵핑을 적용할 수 있는 DMD 유전자 내의 돌연변이를 갖는다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 복합체는 엑손 51 스킵핑을 적용할 수 있는 DMD 유전자 내의 돌연변이를 갖는 대상체를 치료하는 데 효과적이다. 일부 실시양태에서, 복합체는 올리고뉴클레오티드, 예를 들어 돌연변이된 DMD 유전자 (예를 들어, 엑손 51 스킵핑을 적용할 수 있는 돌연변이된 DMD 유전자)로부터 코딩되는 프리-mRNA에서와 같이, 프리-mRNA의 엑손 51의 스킵핑을 용이하게 하는 올리고뉴클레오티드를 포함한다.
일부 실시양태에서, 대상체는 1 또는 2의 브룩 상지 척도(Brooke Upper Extremity Scale) 점수를 갖는다. 브룩 상지 척도는 1 내지 6의 척도를 사용하며, 여기서 1은 개체가 팔이 닿을 때까지 전체 원을 그리며 팔을 들어올릴 수 있는 전체 능력을 나타내고, 6은 개체가 손을 입으로 올릴 수 없고 손의 유용한 기능을 갖지 않는다는 것을 나타낸다 (예를 들어, 문헌 [Brooke et al. (1981). Muscle Nerve 4(3): 186-197] (본원에 참조로 포함됨) 참조).
일부 실시양태에서, 대상체는 글루코코르티코이드 (예를 들어, 프레드니손, 프레드니솔론, 데플라자코르트)를 사용한 치료를 받지 않거나 또는 받지 않았다. 일부 실시양태에서, 대상체는 또한 글루코코르티코이드를 사용한 치료를 받고 있거나 또는 받은 적이 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 안정한 투여량의 글루코코르티코이드 (예를 들어, 프레드니손, 프레드니솔론, 데플라자코르트)를 받고 있거나 또는 받은 적이 있다. 일부 실시양태에서, 대상체는 본원에 기재된 방법으로 치료되기 전에 적어도 12주 (예를 들어, 적어도 12주, 적어도 16주, 적어도 20주, 적어도 24주, 적어도 7개월, 적어도 8개월, 적어도 9개월, 적어도 10개월, 적어도 11개월, 적어도 12개월 또는 그 초과) 동안 안정한 투여량의 글루코코르티코이드 (예를 들어, 프레드니손, 프레드니솔론, 데플라자코르트)를 받았다.
본 개시내용의 한 측면은 대상체에게 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 복합체(들)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)을 투여하는 것을 수반하는 방법을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 올리고뉴클레오티드 (예를 들어, PMO)에 공유 연결된 본원에 기재된 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하는 복합체(들)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 유효량이 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 조성물 (예를 들어, 수용액)은 전신으로 투여된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 복합체(들)를 포함하는 제약 조성물은, 예를 들어 볼루스로서의 또는 일정 기간에 걸친 연속 주입에 의한 정맥내 투여 투여를 포함할 수 있는 적합한 경로에 의해 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 투여는 정맥내, 근육내, 복강내, 뇌척수내, 피하, 관절내, 활막내 또는 척수강내 경로에 의해 수행될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 복합체(들)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)은 주입 (예를 들어, 정맥내 주입)에 의해 투여된다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 복수의 복합체를 포함하는 조성물은 고체 형태, 수성 형태 또는 액체 형태일 수 있다. 일부 실시양태에서, 수성 또는 액체 형태는 네뷸라이징되거나 동결건조될 수 있다. 일부 실시양태에서, 네뷸라이징되거나 동결건조된 형태는 수성 또는 액체 용액으로 재구성될 수 있다.
일부 실시양태에서, 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)과 연관된 돌연변이된 DMD 대립유전자를 갖는 대상체에게, 본원에 기재된 복합체 또는 복수의 복합체를 복합체(들)의 유효량으로 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체를 치료하는 방법 및/또는 그를 위한 용도가 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 복수의 복합체를 복합체(들)의 유효량으로 포함하는 조성물과 세포를 접촉시키는 것을 포함하는, 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법 및/또는 용도를 제공한다. 일부 실시양태에서, 디스트로핀 단백질은 말단절단된 디스트로핀 단백질이다. 말단절단된 디스트로핀 단백질은 기능적이다 (예를 들어, 야생형 디스트로핀 단백질의 활성을 보유함). 일부 실시양태에서, 말단절단된 디스트로핀 단백질은 야생형 디스트로핀 단백질의 부분 기능을 보유한다. 일부 실시양태에서, 방법은 본원에 기재된 복수의 복합체를 포함하는 조성물의 동결건조된 형태 (예를 들어, 동결건조된 분말)를 투여하는 것을 포함하며, 이는 조성물의 동결건조된 형태를 수용액 중에 재구성하는 것 및 수용액을 그를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 복합체 또는 복수의 복합체를 포함하는 조성물의 동결건조된 형태는 동결건조된 형태로 운송 및/또는 저장되고, 투여를 위한 장소 (예를 들어, 건강관리 제공자 장소)에서 수용액 중에 재구성되고, 재구성된 형태로 (예를 들어, 수용액으로서) 주사에 의해 또는 정맥내로, 예를 들어 주입에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 대상체는 엑손 51 스킵핑을 적용할 수 있는 돌연변이를 포함하는 돌연변이된 DMD 대립유전자를 갖는다. 일부 실시양태에서, 돌연변이된 DMD 대립유전자는 엑손 51 내의 프레임시프트 돌연변이를 포함한다.
일부 실시양태에서, 조성물은 부위-특이적 또는 국부 전달 기술을 통해 투여된다. 이들 기술의 예는 복합체의 이식가능한 데포 공급원, 국부 전달 카테터, 부위 특이적 담체, 직접 주사 또는 직접 적용을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg 내지 110 mg (예를 들어, 1 mg 내지 110 mg, 1 mg 내지 100 mg, 1 mg 내지 90 mg, 1 mg 내지 80 mg, 1 mg 내지 70 mg, 1 mg 내지 60 mg, 1 mg 내지 50 mg, 1 mg 내지 40 mg, 1 mg 내지 30 mg, 1 mg 내지 20 mg, 1 mg 내지 10 mg, 5 mg 내지 110 mg, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 90 mg, 5 mg 내지 80 mg, 5 mg 내지 70 mg, 5 mg 내지 60 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 100 mg, 10 mg 내지 90 mg, 10 mg 내지 80 mg, 10 mg 내지 70 mg, 10 mg 내지 60 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 100 mg, 20 mg 내지 90 mg, 20 mg 내지 80 mg, 20 mg 내지 70 mg, 20 mg 내지 60 mg, 20 mg 내지 50 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 100 mg, 30 mg 내지 90 mg, 30 mg 내지 80 mg, 30 mg 내지 70 mg, 30 mg 내지 60 mg, 30 mg 내지 50 mg, 30 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 100 mg, 40 mg 내지 90 mg, 40 mg 내지 80 mg, 40 mg 내지 70 mg, 40 mg 내지 60 mg, 40 mg 내지 50 mg, 50 mg 내지 100 mg, 50 mg 내지 90 mg, 50 mg 내지 80 mg, 50 mg 내지 70 mg, 50 mg 내지 60 mg, 60 mg 내지 100 mg, 60 mg 내지 90 mg, 60 mg 내지 80 mg, 60 mg 내지 70 mg, 70 mg 내지 100 mg, 70 mg 내지 90 mg, 70 mg 내지 80 mg, 80 mg 내지 100 mg, 80 mg 내지 90 mg 또는 90 mg 내지 100 mg)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg 내지 25 mg (예를 들어, 1 mg 내지 25 mg, 1 mg 내지 20 mg, 1 mg 내지 15 mg, 1 mg 내지 11 mg, 1 mg 내지 10 mg, 1 mg 내지 8 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1.5 mg 내지 25 mg, 1.5 mg 내지 20 mg, 1.5 mg 내지 15 mg, 1.5 mg 내지 10 mg, 1.5 mg 내지 6 mg, 1.5 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 25 mg, 2 mg 내지 20 mg, 2 mg 내지 15 mg, 2 mg 내지 11 mg, 2 mg 내지 10 mg, 2 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 25 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 11 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 25 mg, 10 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 15 mg, 15 mg 내지 25 mg, 15 mg 내지 20 mg 또는 20 mg 내지 25 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1 mg, 1.5 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg, 10 mg, 11 mg, 12 mg, 13 mg, 14 mg, 15 mg, 16 mg, 17 mg, 18 mg, 19 mg, 20 mg, 21 mg, 22 mg, 23 mg, 24 mg 또는 25 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1.09 mg, 1.31 mg, 1.53 mg, 1.75 mg, 1.97 mg, 2.19 mg, 2.40 mg, 2.62 mg, 2.84 mg, 3.06 mg, 3.28 mg, 3.50 mg, 3.72 mg, 3.93 mg, 4.15 mg, 4.37 mg, 4.59 mg, 4.81 mg, 5.03 mg, 5.25 mg, 5.46 mg, 5.68 mg, 5.90 mg, 6.12 mg, 6.34 mg, 6.56 mg, 6.77 mg, 6.99 mg, 7.21 mg, 7.43 mg, 7.65 mg, 7.87 mg, 8.09 mg, 8.30 mg, 8.52 mg, 8.74 mg, 8.96 mg, 9.18 mg, 9.40 mg, 9.62 mg, 9.83 mg, 10.05 mg, 10.27 mg, 10.49 mg, 10.71 mg, 10.93 mg, 13.11 mg, 15.30 mg, 17.48 mg, 19.67 mg, 21.85 mg 또는 24.04 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1.19 mg, 1.24 mg, 1.29 mg, 1.34 mg, 1.40 mg, 1.46 mg, 1.53 mg, 1.61 mg, 1.69 mg, 1.78 mg, 1.89 mg, 2.01 mg, 2.38 mg, 2.47 mg, 2.57 mg, 2.68 mg, 2.79 mg, 2.92 mg, 3.06 mg, 3.21 mg, 3.38 mg, 3.57 mg, 3.78 mg, 4.02 mg, 4.76 mg, 4.94 mg, 5.14 mg, 5.35 mg, 5.59 mg, 5.84 mg, 6.12 mg, 6.43 mg, 6.76 mg, 7.14 mg, 7.56 mg, 8.03 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1.53 mg, 3.06 mg 또는 6.12 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 5 mg 내지 120 mg (예를 들어, 5 mg 내지 120 mg, 5 mg 내지 110 mg, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 90 mg, 5 mg 내지 80 mg, 5 mg 내지 70 mg, 5 mg 내지 60 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 100 mg, 10 mg 내지 90 mg, 10 mg 내지 80 mg, 10 mg 내지 70 mg, 10 mg 내지 60 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 100 mg, 20 mg 내지 90 mg, 20 mg 내지 80 mg, 20 mg 내지 70 mg, 20 mg 내지 60 mg, 20 mg 내지 50 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 100 mg, 30 mg 내지 90 mg, 30 mg 내지 80 mg, 30 mg 내지 70 mg, 30 mg 내지 60 mg, 30 mg 내지 50 mg, 30 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 100 mg, 40 mg 내지 90 mg, 40 mg 내지 80 mg, 40 mg 내지 70 mg, 40 mg 내지 60 mg, 40 mg 내지 50 mg, 50 mg 내지 100 mg, 50 mg 내지 90 mg, 50 mg 내지 80 mg, 50 mg 내지 70 mg, 50 mg 내지 60 mg, 60 mg 내지 100 mg, 60 mg 내지 90 mg, 60 mg 내지 80 mg, 60 mg 내지 70 mg, 70 mg 내지 100 mg, 70 mg 내지 90 mg, 70 mg 내지 80 mg, 80 mg 내지 100 mg, 80 mg 내지 90 mg 또는 90 mg 내지 100 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg, 10 mg, 11 mg, 12 mg, 13 mg, 14 mg, 15 mg, 16 mg, 17 mg, 18 mg, 19 mg, 20 mg, 21 mg, 22 mg, 23 mg, 24 mg, 25 mg, 26 mg, 27 mg, 28 mg, 29 mg, 30 mg, 31 mg, 32 mg, 33 mg, 34 mg, 35 mg, 36 mg, 37 mg, 38 mg, 39 mg, 40 mg, 41 mg, 42 mg, 43 mg, 44 mg, 45 mg, 46 mg, 47 mg, 48 mg, 49 mg, 50 mg, 51 mg, 52 mg, 53 mg, 54 mg, 55 mg, 56 mg, 57 mg, 58 mg, 59 mg, 60 mg, 61 mg, 62 mg, 63 mg, 64 mg, 65 mg, 66 mg, 67 mg, 68 mg, 69 mg, 70 mg, 71 mg, 72 mg, 73 mg, 74 mg, 75 mg, 76 mg, 77 mg, 78 mg, 79 mg, 80 mg, 81 mg, 82 mg, 83 mg, 84 mg, 85 mg, 86 mg, 87 mg, 88 mg, 89 mg, 90 mg, 91 mg, 92 mg, 93 mg, 94 mg, 95 mg, 96 mg, 97 mg, 98 mg, 99 mg, 100 mg, 101 mg, 102 mg, 103 mg, 104 mg, 105 mg, 106 mg, 107 mg, 108 mg, 109 mg, 110 mg, 111 mg, 112 mg, 113 mg, 114 mg, 115 mg, 116 mg, 117 mg, 118 mg, 119 mg 또는 120 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 8.50 mg, 8.83 mg, 9.18 mg, 9.56 mg, 9.98 mg, 10.43 mg, 10.93 mg, 11.47 mg, 12.08 mg, 12.75 mg, 13.50 mg, 14.34 mg, 17.00 mg, 17.65 mg, 18.36 mg, 19.12 mg, 19.95 mg, 20.86 mg, 21.85 mg, 22.95 mg, 24.15 mg, 25.50 mg, 27.00 mg, 28.68 mg, 34.00 mg, 35.30 mg, 36.71 mg, 38.24 mg, 39.91 mg, 41.72 mg, 43.71 mg, 45.89 mg, 48.31 mg, 50.99 mg, 52.95 mg, 53.99 mg, 55.07 mg, 57.37 mg, 57.37 mg, 59.86 mg, 62.58 mg, 65.56 mg, 67.99 mg, 68.84 mg, 70.61 mg, 72.46 mg, 73.43 mg, 76.49 mg, 79.82 mg, 80.99 mg, 83.44 mg, 86.05 mg, 87.42 mg, 91.79 mg, 96.62 mg, 101.99 mg, 107.99 mg, 114.73 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 11 mg, 22 mg, 44 mg, 66 mg 또는 88 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 10.93 mg, 21.85 mg, 43.71 mg, 65.56 mg 또는 87.42 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 10.93 mg, 21.86 mg, 43.72 mg, 65.56 mg 또는 87.43 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 10 mg을 제공한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 10 mg, 0.5 mg 내지 7.5 mg, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 10 mg, 1 mg 내지 7.5 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 10 mg, 2 mg 내지 7.5 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 7.5 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg, 4 mg 내지 10 mg, 4 mg 내지 7.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.5 mg, 1 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg 또는 10 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체 약 0.5 mg, 0.6 mg, 0.7 mg, 0.8 mg, 0.9 mg, 1 mg, 1.1 mg, 1.2 mg, 1.3 mg, 1.4 mg, 1.5 mg, 1.6 mg, 1.7 mg, 1.8 mg, 1.9 mg, 2 mg, 2.1 mg, 2.2 mg, 2.3 mg, 2.4 mg, 2.5 mg, 2.6 mg, 2.7 mg, 2.8 mg, 2.9 mg, 3 mg, 3.1 mg, 3.2 mg, 3.3 mg, 3.4 mg, 3.5 mg, 3.6 mg, 3.7 mg, 3.8 mg, 3.9 mg, 3 mg, 4 mg, 4.1 mg, 4.2 mg, 4.3 mg, 4.4 mg, 4.5 mg, 4.6 mg, 4.7 mg, 4.8 mg, 4.9 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg, 10 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.52 mg, 0.56 mg, 0.59 mg, 0.62 mg, 0.65 mg, 0.69 mg, 0.72 mg, 0.75 mg, 0.78 mg, 0.82 mg, 0.85 mg, 0.88 mg, 1.05 mg, 1.11 mg, 1.18 mg, 1.24 mg, 1.31 mg, 1.37 mg, 1.44 mg, 1.50 mg, 1.57 mg, 1.63 mg, 1.70 mg, 1.76 mg, 2.09 mg, 2.22 mg, 2.35 mg, 2.48 mg, 2.61 mg, 2.75 mg, 2.88 mg, 3.01 mg, 3.14 mg, 3.27 mg, 3.40 mg, 3.53 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.69 mg, 1.37 mg 또는 2.75 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 100 mg을 제공한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 100 mg, 3 mg 내지 55 mg, 3 mg 내지 50 mg, 3 mg 내지 10 mg, 5 mg 내지 80 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 70 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 30 mg, 20 mg 내지 60 mg, 20 mg 내지 40 mg 또는 30 mg 내지 50 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 약 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg, 10 mg, 11 mg, 12 mg, 13 mg, 14 mg, 15 mg, 16 mg, 17 mg, 18 mg, 19 mg, 20 mg, 21 mg, 22 mg, 23 mg, 24 mg, 25 mg, 26 mg, 27 mg, 28 mg, 29 mg, 30 mg, 31 mg, 32 mg, 33 mg, 34 mg, 35 mg, 36 mg, 37 mg, 38 mg, 39 mg, 40 mg, 41 mg, 42 mg, 43 mg, 44 mg, 45 mg, 46 mg, 47 mg, 48 mg, 49 mg, 50 mg, 51 mg, 52 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 3.83 mg, 4.07 mg, 4.31 mg, 4.55 mg, 4.79 mg, 5.03 mg, 5.27 mg, 5.51 mg, 5.75 mg, 5.99 mg, 6.23 mg, 6.47 mg, 7.67 mg, 8.15 mg, 8.63 mg, 9.11 mg, 9.59 mg, 10.07 mg, 10.55 mg, 11.03 mg, 11.50 mg, 11.98 mg, 12.46 mg, 12.94 mg, 15.34 mg, 16.30 mg, 17.26 mg, 18.22 mg, 19.17 mg, 20.13 mg, 21.09 mg, 22.05 mg, 23.01 mg, 23.97 mg, 24.45 mg, 24.93 mg, 25.89 mg, 27.32 mg, 28.76 mg, 30.20 mg, 30.68 mg, 31.64 mg, 32.60 mg, 33.08 mg, 34.51 mg, 35.95 mg, 36.43 mg, 37.39 mg, 38.35 mg, 38.83 mg, 40.27 mg, 42.18 mg, 44.10 mg, 46.02 mg, 47.94 mg, 49.85 mg 또는 51.77 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 100 mg을 제공한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 90 mg, 5 mg 내지 80 mg, 5 mg 내지 70 mg, 5 mg 내지 60 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 10 mg, 8 mg 내지 32 mg, 8 mg 내지 31 mg, 8 mg 내지 30 mg, 8 mg 내지 29 mg, 8 mg 내지 28 mg, 9 mg 내지 32 mg, 9 mg 내지 31 mg, 9 mg 내지 30 mg, 9 mg 내지 29 mg, 9 mg 내지 28 mg, 10 mg 내지 100 mg, 10 mg 내지 90 mg, 10 mg 내지 80 mg, 10 mg 내지 70 mg, 10 mg 내지 60 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 32 mg, 10 mg 내지 31 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 29 mg, 10 mg 내지 28 mg, 10 mg 내지 20 mg, 11 mg 내지 32 mg, 11 mg 내지 31 mg, 11 mg 내지 30 mg, 11 mg 내지 29 mg, 11 mg 내지 28 mg, 12 mg 내지 32 mg, 12 mg 내지 31 mg, 12 mg 내지 30 mg, 12 mg 내지 29 mg, 12 mg 내지 28 mg, 20 mg 내지 100 mg, 20 mg 내지 90 mg, 20 mg 내지 80 mg, 20 mg 내지 70 mg, 20 mg 내지 60 mg, 20 mg 내지 50 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 100 mg, 30 mg 내지 90 mg, 30 mg 내지 80 g, 30 mg 내지 70 mg, 30 mg 내지 60 mg, 30 mg 내지 50 mg, 30 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 100 mg, 40 mg 내지 90 mg, 40 mg 내지 80 mg, 40 mg 내지 70 mg, 40 mg 내지 60 mg, 40 mg 내지 50 mg, 50 mg 내지 100 mg, 50 mg 내지 90 mg, 50 mg 내지 80 mg, 50 mg 내지 70 mg, 50 mg 내지 60 mg, 60 mg 내지 100 mg, 60 mg 내지 90 mg, 60 mg 내지 80 mg, 60 mg 내지 70 mg, 70 mg 내지 100 mg, 70 mg 내지 90 mg, 70 mg 내지 80 mg, 80 mg 내지 100 mg, 80 mg 내지 90 mg 또는 90 mg 내지 100 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg, 10 mg, 11 mg, 12 mg, 13 mg, 14 mg, 15 mg, 16 mg, 17 mg, 18 mg, 19 mg, 20 mg, 21 mg, 22 mg, 23 mg, 24 mg, 25 mg, 26 mg, 27 mg, 28 mg, 29 mg, 30 mg, 31 mg, 32 mg, 33 mg, 34 mg, 35 mg, 36 mg, 37 mg, 38 mg, 39 mg, 40 mg, 41 mg, 42 mg, 43 mg, 44 mg, 45 mg, 46 mg, 47 mg, 48 mg, 49 mg, 50 mg, 51 mg, 52 mg, 53 mg, 54 mg, 55 mg, 56 mg, 57 mg, 58 mg, 59 mg, 60 mg, 61 mg, 62 mg, 63 mg, 64 mg, 65 mg, 66 mg, 67 mg, 68 mg, 69 mg, 70 mg, 71 mg, 72 mg, 73 mg, 74 mg, 75 mg, 76 mg, 77 mg, 78 mg, 79 mg, 80 mg, 81 mg, 82 mg, 83 mg, 84 mg, 85 mg, 86 mg, 87 mg, 88 mg, 89 mg, 90 mg, 91 mg, 92 mg, 93 mg, 94 mg, 95 mg, 96 mg, 97 mg, 98 mg, 99 mg 또는 100 mg을 제공한다. 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 올리고뉴클레오티드의 유효량이 제공되도록 대상체에게 투여되는 복합체의 양은 대상체의 체중 kg당 더 많은데, 이는 복합체가 또한 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항체를 포함하기 때문이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물 (여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2임)을 투여하는 것을 포함하고, 대상체 kg당 대략 100 mg의 복합체를 투여하여 대상체 kg당 30 mg의 올리고뉴클레오티드를 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물 (여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2임)을 투여하는 것을 포함하고, 대상체 kg당 대략 30 mg의 복합체를 투여하여 대상체 kg당 10 mg의 올리고뉴클레오티드를 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물 (여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1임)을 투여하는 것을 포함하고, 대상체 kg당 대략 16 mg의 복합체를 투여하여 대상체 kg당 5 mg의 올리고뉴클레오티드를 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물 (여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1임)을 투여하는 것을 포함하고, 대상체 kg당 대략 32 mg의 복합체를 투여하여 대상체 kg당 10 mg의 올리고뉴클레오티드를 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물 (여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1임)을 투여하는 것을 포함하고, 대상체 kg당 대략 64 mg의 복합체를 투여하여 대상체 kg당 20 mg의 올리고뉴클레오티드를 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물 (여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1임)을 투여하는 것을 포함하고, 대상체 kg당 대략 96 mg의 복합체를 투여하여 대상체 kg당 30 mg의 올리고뉴클레오티드를 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물 (여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1임)을 투여하는 것을 포함하고, 대상체 kg당 대략 128 mg의 복합체를 투여하여 대상체 kg당 40 mg의 올리고뉴클레오티드를 제공한다.
일부 측면에서, 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법이 본원에 제공된다. 일부 측면에서, 대상체에서 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 100 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 100 mg, 0.5 mg 내지 90 mg, 0.5 mg 내지 80 mg, 0.5 mg 내지 70 mg, 0.5 mg 내지 60 mg, 0.5 mg 내지 50 mg, 0.5 mg 내지 40 mg, 0.5 mg 내지 30 mg, 0.5 mg 내지 20 mg, 0.5 mg 내지 10 mg, 0.5 mg 내지 7.5 mg, 0.5 내지 5 mg, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 80 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 60 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg 또는 30 mg 내지 60 mg)을 제공하고, 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하고, 여기서 올리고뉴클레오티드는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg 또는 40 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg 내지 90 mg (예를 들어, 1 mg 내지 90 mg, 5 mg 내지 80 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 60 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg 또는 30 mg 내지 60 mg)을 제공하고, 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하고, 여기서 올리고뉴클레오티드는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 근육 표적화 복합체의 유효량은 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.5 mg, 3 mg, 6 mg, 11 mg, 22 mg, 44 mg 또는 88 mg이다.
일부 측면에서, 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법이 본원에 제공된다. 일부 측면에서, 대상체에서 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 100 mg (예를 들어, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 80 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 60 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg 또는 30 mg 내지 60 mg)을 제공하고, 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하고, 여기서 올리고뉴클레오티드는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg 내지 90 mg (예를 들어, 1 mg 내지 90 mg, 5 mg 내지 80 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 60 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg 또는 30 mg 내지 60 mg)을 제공하고, 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하고, 여기서 올리고뉴클레오티드는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일부 실시양태에서, 근육 표적화 복합체의 유효량은 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.5 mg, 3 mg, 6 mg, 11 mg, 22 mg, 44 mg 또는 88 mg이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 10 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 10 mg, 0.5 mg 내지 7.5 mg, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 10 mg, 1 mg 내지 7.5 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 10 mg, 2 mg 내지 7.5 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 7.5 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg, 4 mg 내지 10 mg, 4 mg 내지 7.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00028
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고;
여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결되고, 임의로 여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2의 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.69 mg, 1.37 mg 또는 2.75 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, 여기서 각각의 R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 10 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 10 mg, 0.5 mg 내지 7.5 mg, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 10 mg, 1 mg 내지 7.5 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 10 mg, 2 mg 내지 7.5 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 7.5 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg, 4 mg 내지 10 mg, 4 mg 내지 7.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00029
R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고;
여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결되고, 임의로 여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2의 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.69 mg, 1.37 mg 또는 2.75 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, 여기서 각각의 R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 10 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 10 mg, 0.5 mg 내지 7.5 mg, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 10 mg, 1 mg 내지 7.5 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 10 mg, 2 mg 내지 7.5 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 7.5 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg, 4 mg 내지 10 mg, 4 mg 내지 7.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하고:
Figure pct00030
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고;
R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고, 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)는 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기를 통해 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7, 1.4 또는 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.69 mg, 1.37 mg 또는 2.75 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 n1이 0인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg 내지 36 mg, 8 mg 내지 30 mg, 8 mg 내지 25 mg, 8 mg 내지 20 mg, 8 mg 내지 15 mg, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 36 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 25 mg, 10 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 15 mg, 15 mg 내지 36 mg, 15 mg 내지 30 mg, 15 mg 내지 25 mg, 15 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 36 mg, 20 mg 내지 30 mg, 20 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 36 mg, 25 mg 내지 20 mg, 25 mg 내지 30 mg 또는 24 mg 내지 36 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00031
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고;
여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결되고, 임의로 여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2의 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, 여기서 각각의 R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg 내지 36 mg, 8 mg 내지 30 mg, 8 mg 내지 25 mg, 8 mg 내지 20 mg, 8 mg 내지 15 mg, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 36 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 25 mg, 10 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 15 mg, 15 mg 내지 36 mg, 15 mg 내지 30 mg, 15 mg 내지 25 mg, 15 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 36 mg, 20 mg 내지 30 mg, 20 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 36 mg, 25 mg 내지 20 mg, 25 mg 내지 30 mg 또는 24 mg 내지 36 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00032
R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고;
여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결되고, 임의로 여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2의 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, 여기서 각각의 R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg 내지 36 mg, 8 mg 내지 30 mg, 8 mg 내지 25 mg, 8 mg 내지 20 mg, 8 mg 내지 15 mg, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 36 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 25 mg, 10 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 15 mg, 15 mg 내지 36 mg, 15 mg 내지 30 mg, 15 mg 내지 25 mg, 15 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 36 mg, 20 mg 내지 30 mg, 20 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 36 mg, 25 mg 내지 20 mg, 25 mg 내지 30 mg 또는 24 mg 내지 36 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하고:
Figure pct00033
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고;
R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고, 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)는 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기를 통해 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 n1이 0인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 3 mg 내지 52 mg, 3 mg 내지 50 mg, 3 mg 내지 40 mg, 3 mg 내지 30 mg, 3 mg 내지 20 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 52 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 45 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 35 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 25 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 52 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 52 mg, 20 mg 내지 50 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 50 mg, 30 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 52 mg 또는 40 mg 내지 50 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00034
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고;
여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결되고, 임의로 여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2의 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, 여기서 각각의 R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 3 mg 내지 52 mg, 3 mg 내지 50 mg, 3 mg 내지 40 mg, 3 mg 내지 30 mg, 3 mg 내지 20 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 52 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 45 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 35 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 25 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 52 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 52 mg, 20 mg 내지 50 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 50 mg, 30 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 52 mg 또는 40 mg 내지 50 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00035
R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고;
여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2에 공유 연결되고, 임의로 여기서 각각의 R1은 부착 지점 A에서 R2의 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기에 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, 여기서 각각의 R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 유효량의 근육 표적화 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 3 mg 내지 52 mg, 3 mg 내지 50 mg, 3 mg 내지 40 mg, 3 mg 내지 30 mg, 3 mg 내지 20 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 52 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 45 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 35 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 25 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 52 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 52 mg, 20 mg 내지 50 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 50 mg, 30 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 52 mg 또는 40 mg 내지 50 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하고:
Figure pct00036
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 포함하고;
R2는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고, 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함하고, 추가로 임의로 여기서 항체 (예를 들어, Fab)는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고, 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)는 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 아미노산 잔기를 통해 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 조성물 (예를 들어, 수용액)은 n1이 0인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 조성물은 수용액이고, 히스티딘 및 수크로스를 추가로 포함하며, 여기서 히스티딘은 수용액 중에 25 mM의 농도로 존재하고, 수크로스는 수용액 중에 10 w/v%의 농도로 존재하고, 조성물은 pH 6.0이다. 일부 실시양태에서, 복합체는 조성물 중에 10 mg/mL 내지 50 mg/mL (예를 들어, 10 mg/mL, 15 mg/mL, 20 mg/mL, 25 mg/mL, 30 mg/mL, 35 mg/mL, 40 mg/mL, 45 mg/mL, 50 mg/mL) 범위의 농도로 존재한다.
일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 10 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 10 mg, 0.5 mg 내지 7.5 mg, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 10 mg, 1 mg 내지 7.5 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 10 mg, 2 mg 내지 7.5 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 7.5 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg, 4 mg 내지 10 mg, 4 mg 내지 7.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물 중 어느 하나의 단일 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 0.5 mg, 0.6 mg, 0.7 mg, 0.8 mg, 0.9 mg, 1 mg, 1.1 mg, 1.2 mg, 1.3 mg, 1.4 mg, 1.5 mg, 1.6 mg, 1.7 mg, 1.8 mg, 1.9 mg, 2 mg, 2.1 mg, 2.2 mg, 2.3 mg, 2.4 mg, 2.5 mg, 2.6 mg, 2.7 mg, 2.8 mg, 2.9 mg, 3 mg, 3.1 mg, 3.2 mg, 3.3 mg, 3.4 mg, 3.5 mg, 3.6 mg, 3.7 mg, 3.8 mg, 3.9 mg, 3 mg, 4 mg, 4.1 mg, 4.2 mg, 4.3 mg, 4.4 mg, 4.5 mg, 4.6 mg, 4.7 mg, 4.8 mg, 4.9 mg, 5 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물 중 어느 하나의 단일 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg, 1.4, mg 또는 2.8 mg을 제공함)을 포함하는 조성물 중 어느 하나의 단일 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.69 mg, 1.37 mg 또는 2.75 mg을 제공함)을 포함하는 조성물 중 어느 하나의 단일 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 100 mg (예를 들어, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg 또는 100 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물 중 어느 하나의 단일 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 3.83 mg, 4.07 mg, 4.31 mg, 4.55 mg, 4.79 mg, 5.03 mg, 5.27 mg, 5.51 mg, 5.75 mg, 5.99 mg, 6.23 mg, 6.47 mg, 7.67 mg, 8.15 mg, 8.63 mg, 9.11 mg, 9.59 mg, 10.07 mg, 10.55 mg, 11.03 mg, 11.50 mg, 11.98 mg, 12.46 mg, 12.94 mg, 15.34 mg, 16.30 mg, 17.26 mg, 18.22 mg, 19.17 mg, 20.13 mg, 21.09 mg, 22.05 mg, 23.01 mg, 23.97 mg, 24.45 mg, 24.93 mg, 25.89 mg, 27.32 mg, 28.76 mg, 30.20 mg, 30.68 mg, 31.64 mg, 32.60 mg, 33.08 mg, 34.51 mg, 35.95 mg, 36.43 mg, 37.39 mg, 38.35 mg, 38.83 mg, 40.27 mg, 42.18 mg, 44.10 mg, 46.02 mg, 47.94 mg, 49.85 mg 또는 51.77 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물 중 어느 하나의 단일 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg을 제공함)을 포함하는 조성물 중 어느 하나의 단일 용량을 투여한다.
일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체를 포함하는 조성물 중 어느 하나의 다중 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 10 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 10 mg, 0.5 mg 내지 7.5 mg, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 10 mg, 1 mg 내지 7.5 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 10 mg, 2 mg 내지 7.5 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 7.5 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg, 4 mg 내지 10 mg, 4 mg 내지 7.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체를 포함하는 조성물 중 어느 하나의 다중 용량을 투여한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 예를 들어, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.69 mg, 1.37 mg 또는 2.75 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 2주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 7.5 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체를 포함하는 조성물 중 어느 하나의 다중 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 100 mg (예를 들어, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 80 mg, 10 mg 내지 60 mg, 10 mg 내지 30 mg 또는 30 mg 내지 60 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회 내지 4개월마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 100 mg (예를 들어, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 80 mg, 10 mg 내지 60 mg, 10 mg 내지 30 mg 또는 30 mg 내지 60 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체를 포함하는 조성물 중 어느 하나의 다중 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 3 mg 내지 52 mg, 5 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회 내지 4개월마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 3 mg 내지 52 mg, 5 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 3.83 mg, 4.07 mg, 4.31 mg, 4.55 mg, 4.79 mg, 5.03 mg, 5.27 mg, 5.51 mg, 5.75 mg, 5.99 mg, 6.23 mg, 6.47 mg, 7.67 mg, 8.15 mg, 8.63 mg, 9.11 mg, 9.59 mg, 10.07 mg, 10.55 mg, 11.03 mg, 11.50 mg, 11.98 mg, 12.46 mg, 12.94 mg, 15.34 mg, 16.30 mg, 17.26 mg, 18.22 mg, 19.17 mg, 20.13 mg, 21.09 mg, 22.05 mg, 23.01 mg, 23.97 mg, 24.45 mg, 24.93 mg, 25.89 mg, 27.32 mg, 28.76 mg, 30.20 mg, 30.68 mg, 31.64 mg, 32.60 mg, 33.08 mg, 34.51 mg, 35.95 mg, 36.43 mg, 37.39 mg, 38.35 mg, 38.83 mg, 40.27 mg, 42.18 mg, 44.10 mg, 46.02 mg, 47.94 mg, 49.85 mg 또는 51.77 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 5 mg, 10 mg, 20 mg 또는 40 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 2주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg 내지 36 mg, 8 mg 내지 30 mg, 8 mg 내지 25 mg, 8 mg 내지 20 mg, 8 mg 내지 15 mg, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 36 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 25 mg, 10 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 15 mg, 15 mg 내지 36 mg, 15 mg 내지 30 mg, 15 mg 내지 25 mg, 15 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 36 mg, 20 mg 내지 30 mg, 20 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 36 mg, 25 mg 내지 20 mg, 25 mg 내지 30 mg 또는 24 mg 내지 36 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 2주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 3 mg 내지 52 mg, 3 mg 내지 50 mg, 3 mg 내지 40 mg, 3 mg 내지 30 mg, 3 mg 내지 20 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 52 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 45 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 35 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 25 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 52 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 52 mg, 20 mg 내지 50 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 50 mg, 30 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 52 mg 또는 40 mg 내지 50 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg 또는 40 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 2주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg 내지 36 mg, 8 mg 내지 30 mg, 8 mg 내지 25 mg, 8 mg 내지 20 mg, 8 mg 내지 15 mg, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 36 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 25 mg, 10 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 15 mg, 15 mg 내지 36 mg, 15 mg 내지 30 mg, 15 mg 내지 25 mg, 15 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 36 mg, 20 mg 내지 30 mg, 20 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 36 mg, 25 mg 내지 20 mg, 25 mg 내지 30 mg 또는 24 mg 내지 36 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 3 mg 내지 52 mg, 3 mg 내지 50 mg, 3 mg 내지 40 mg, 3 mg 내지 30 mg, 3 mg 내지 20 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 52 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 45 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 35 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 25 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 52 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 52 mg, 20 mg 내지 50 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 50 mg, 30 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 52 mg 또는 40 mg 내지 50 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg 또는 40 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg 내지 36 mg, 8 mg 내지 30 mg, 8 mg 내지 25 mg, 8 mg 내지 20 mg, 8 mg 내지 15 mg, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 36 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 25 mg, 10 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 15 mg, 15 mg 내지 36 mg, 15 mg 내지 30 mg, 15 mg 내지 25 mg, 15 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 36 mg, 20 mg 내지 30 mg, 20 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 36 mg, 25 mg 내지 20 mg, 25 mg 내지 30 mg 또는 24 mg 내지 36 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 3 mg 내지 52 mg, 3 mg 내지 50 mg, 3 mg 내지 40 mg, 3 mg 내지 30 mg, 3 mg 내지 20 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 52 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 45 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 35 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 25 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 52 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 52 mg, 20 mg 내지 50 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 50 mg, 30 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 52 mg 또는 40 mg 내지 50 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg 또는 40 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg 내지 36 mg, 8 mg 내지 30 mg, 8 mg 내지 25 mg, 8 mg 내지 20 mg, 8 mg 내지 15 mg, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 36 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 25 mg, 10 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 15 mg, 15 mg 내지 36 mg, 15 mg 내지 30 mg, 15 mg 내지 25 mg, 15 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 36 mg, 20 mg 내지 30 mg, 20 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 36 mg, 25 mg 내지 20 mg, 25 mg 내지 30 mg 또는 24 mg 내지 36 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg (예를 들어, 3 mg 내지 52 mg, 3 mg 내지 50 mg, 3 mg 내지 40 mg, 3 mg 내지 30 mg, 3 mg 내지 20 mg, 3 mg 내지 10 mg, 3 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 52 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 45 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 35 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 25 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 52 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 52 mg, 20 mg 내지 50 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 50 mg, 30 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 52 mg 또는 40 mg 내지 50 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg 또는 40 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.3 mg 내지 7 mg (예를 들어, 0.35 mg, 0.49 mg, 0.5 mg, 0.65 mg, 0.7 mg, 0.91 mg, 0.98 mg, 1.4 mg, 1.82 mg, 1.96 mg, 2.10 mg, 2.8 mg, 3.0 mg, 3.50 mg, 3.64 mg, 3.90 mg, 5.0 mg 또는 6.50 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg 내지 2.8 mg (예를 들어, 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.49 mg 내지 0.91 mg (예를 들어, 0.49 mg, 0.5 mg, 0.65 mg, 0.7 mg, 0.91 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.98 mg 내지 1.82 mg (예를 들어, 0.98 mg, 1.4 mg, 1.82 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 1.4 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 1.96 mg 내지 3.64 mg (예를 들어, 1.96 mg, 2.10 mg, 2.8 mg, 3.0 mg, 3.50 mg, 3.64 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 3 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.69 mg, 1.37 mg, 2.75 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 7 mg (예를 들어, 3 mg 내지 7 mg, 3 mg 내지 6 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 4 mg 내지 7 mg, 4 mg 내지 6 mg, 4 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 7 mg, 5 mg 내지 6 mg 또는 6 mg 내지 7 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 3.83 mg, 4.07 mg, 4.31 mg, 4.55 mg, 4.79 mg, 5.03 mg, 5.27 mg, 5.51 mg, 5.75 mg, 5.99 mg, 6.23 mg 또는 6.47 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 5.03 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 12 mg (예를 들어, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 11 mg, 8 mg 내지 10 mg, 8 mg 내지 9 mg, 9 mg 내지 12 mg, 9 mg 내지 11 mg, 9 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 12 mg, 10 mg 내지 11 mg 또는 11 mg 내지 12 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 8 mg, 9 mg, 10 mg, 11 mg 또는 12 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 10 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 7 mg 내지 13 mg (예를 들어, 7 mg 내지 13 mg, 7 mg 내지 12 mg, 7 mg 내지 11 mg, 7 mg 내지 10 mg, 7 mg 내지 9 mg, 7 mg 내지 8 mg, 8 mg 내지 13 mg, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 11 mg, 8 mg 내지 10 mg, 8 mg 내지 9 mg, 9 mg 내지 13 mg, 9 mg 내지 12 mg, 9 mg 내지 11 mg, 9 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 13 mg, 10 mg 내지 12 mg, 10 mg 내지 11 mg, 11 mg 내지 13 mg, 11 mg 내지 12 mg 또는 12 mg 내지 13 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 7.67 mg, 8.15 mg, 8.63 mg, 9.11 mg, 9.59 mg, 10.07 mg, 10.55 mg, 11.03 mg, 11.50 mg, 11.98 mg, 12.46 mg 또는 12.94 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 10.07 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 16 mg 내지 26 mg (예를 들어, 16 mg 내지 26 mg, 16 mg 내지 25 mg, 16 mg 내지 20 mg, 16 mg 내지 18 mg, 18 mg 내지 26 mg, 18 mg 내지 25 mg, 18 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 26 mg, 20 mg 내지 25 mg, 20 mg 내지 22 mg, 22 mg 내지 26 mg, 22 mg 내지 25 mg, 22 mg 내지 23 mg, 24 mg 내지 26 mg 또는 24 mg 내지 25 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 15.34 mg, 16.30 mg, 17.26 mg, 18.22 mg, 19.17 mg, 20.13 mg, 21.09 mg, 22.05 mg, 23.01 mg, 23.97 mg, 24.93 mg 또는 25.89 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 20.13 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 24 mg 내지 36 mg (예를 들어, 24 mg 내지 36 mg, 24 mg 내지 33 mg, 24 mg 내지 30 mg, 24 mg 내지 27 mg, 27 mg 내지 36 mg, 27 mg 내지 33 mg, 27 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 36 mg, 30 mg 내지 33 mg 또는 33 mg 내지 36 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 24 mg, 25 mg, 26 mg, 27 mg, 28 mg, 29 mg, 30 mg, 31 mg, 32 mg, 33 mg, 34 mg, 35 mg 또는 40 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 30 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 23 mg 내지 39 mg (예를 들어, 23 mg 내지 39 mg, 23 mg 내지 35 mg, 23 mg 내지 30 mg, 23 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 39 mg, 25 mg 내지 35 mg, 25 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 39 mg, 30 mg 내지 35 mg 또는 35 mg 내지 39 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 23.01 mg, 24.45 mg, 25.89 mg, 27.32 mg, 28.76 mg, 30.20 mg, 31.64 mg, 33.08 mg, 34.51 mg, 35.95 mg, 37.39 mg, 38.83 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 30.2 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 31 mg 내지 52 mg (예를 들어, 31 mg 내지 52 mg, 31 mg 내지 50 mg, 31 mg 내지 45 mg, 31 mg 내지 40 mg, 31 mg 내지 35 mg, 33 mg 내지 52 mg, 33 mg 내지 50 mg, 33 mg 내지 45 mg, 33 mg 내지 40 mg, 33 mg 내지 35 mg, 35 mg 내지 52 mg, 35 mg 내지 50 mg, 35 mg 내지 45 mg, 35 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 52 mg, 40 mg 내지 50 mg, 40 mg 내지 45 mg, 45 mg 내지 52 mg, 45 mg 내지 50 mg 또는 50 mg 내지 52 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 30.68 mg, 32.60 mg, 34.51 mg, 36.43 mg, 38.35 mg, 40.27 mg, 42.18 mg, 44.10 mg, 46.02 mg, 47.94 mg, 49.85 mg 또는 51.77 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 40.27 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 3 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.69 mg, 1.37 mg, 2.75 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 8 mg (예를 들어, 3 mg 내지 8 mg, 3 mg 내지 7 mg, 3 mg 내지 6 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 4 mg 내지 8 mg, 4 mg 내지 7 mg, 4 mg 내지 6 mg, 4 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 8 mg, 5 mg 내지 7 mg, 5 mg 내지 6 mg, 6 mg 내지 8 mg, 6 mg 내지 7 mg 또는 7 mg 내지 8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 3.83 mg, 4.07 mg, 4.31 mg, 4.55 mg, 4.79 mg, 5.03 mg, 5.27 mg, 5.51 mg, 5.75 mg, 5.99 mg, 6.23 mg 또는 6.47 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 5.03 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 12 mg (예를 들어, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 11 mg, 8 mg 내지 10 mg, 8 mg 내지 9 mg, 9 mg 내지 12 mg, 9 mg 내지 11 mg, 9 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 12 mg, 10 mg 내지 11 mg 또는 11 mg 내지 12 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 8 mg, 9 mg, 10 mg, 11 mg 또는 12 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 10 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 7 mg 내지 13 mg (예를 들어, 7 mg 내지 13 mg, 7 mg 내지 12 mg, 7 mg 내지 11 mg, 7 mg 내지 10 mg, 7 mg 내지 9 mg, 7 mg 내지 8 mg, 8 mg 내지 13 mg, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 11 mg, 8 mg 내지 10 mg, 8 mg 내지 9 mg, 9 mg 내지 13 mg, 9 mg 내지 12 mg, 9 mg 내지 11 mg, 9 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 13 mg, 10 mg 내지 12 mg, 10 mg 내지 11 mg, 11 mg 내지 13 mg, 11 mg 내지 12 mg 또는 12 mg 내지 13 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 7.67 mg, 8.15 mg, 8.63 mg, 9.11 mg, 9.59 mg, 10.07 mg, 10.55 mg, 11.03 mg, 11.50 mg, 11.98 mg, 12.46 mg 또는 12.94 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 10.07 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 16 mg 내지 26 mg (예를 들어, 16 mg 내지 26 mg, 16 mg 내지 25 mg, 16 mg 내지 20 mg, 16 mg 내지 18 mg, 18 mg 내지 26 mg, 18 mg 내지 25 mg, 18 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 26 mg, 20 mg 내지 25 mg, 20 mg 내지 22 mg, 22 mg 내지 26 mg, 22 mg 내지 25 mg, 22 mg 내지 23 mg, 24 mg 내지 26 mg 또는 24 mg 내지 25 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 15.34 mg, 16.30 mg, 17.26 mg, 18.22 mg, 19.17 mg, 20.13 mg, 21.09 mg, 22.05 mg, 23.01 mg, 23.97 mg, 24.93 mg 또는 25.89 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 20.13 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 24 mg 내지 36 mg (예를 들어, 24 mg 내지 36 mg, 24 mg 내지 33 mg, 24 mg 내지 30 mg, 24 mg 내지 27 mg, 27 mg 내지 36 mg, 27 mg 내지 33 mg, 27 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 36 mg, 30 mg 내지 33 mg 또는 33 mg 내지 36 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 24 mg, 25 mg, 26 mg, 27 mg, 28 mg, 29 mg, 30 mg, 31 mg, 32 mg, 33 mg, 34 mg, 35 mg 또는 36 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 30 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 23 mg 내지 39 mg (예를 들어, 23 mg 내지 39 mg, 23 mg 내지 35 mg, 23 mg 내지 30 mg, 23 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 39 mg, 25 mg 내지 35 mg, 25 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 39 mg, 30 mg 내지 35 mg 또는 35 mg 내지 39 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 23.01 mg, 24.45 mg, 25.89 mg, 27.32 mg, 28.76 mg, 30.20 mg, 31.64 mg, 33.08 mg, 34.51 mg, 35.95 mg, 37.39 mg, 38.83 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 30.2 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 31 mg 내지 52 mg (예를 들어, 31 mg 내지 52 mg, 31 mg 내지 50 mg, 31 mg 내지 45 mg, 31 mg 내지 40 mg, 31 mg 내지 35 mg, 33 mg 내지 52 mg, 33 mg 내지 50 mg, 33 mg 내지 45 mg, 33 mg 내지 40 mg, 33 mg 내지 35 mg, 35 mg 내지 52 mg, 35 mg 내지 50 mg, 35 mg 내지 45 mg, 35 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 52 mg, 40 mg 내지 50 mg, 40 mg 내지 45 mg, 45 mg 내지 52 mg, 45 mg 내지 50 mg 또는 50 mg 내지 52 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 30.68 mg, 32.60 mg, 34.51 mg, 36.43 mg, 38.35 mg, 40.27 mg, 42.18 mg, 44.10 mg, 46.02 mg, 47.94 mg, 49.85 mg 또는 51.77 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 40.27 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 3 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 0.69 mg, 1.37 mg, 2.75 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 7 mg (예를 들어, 3 mg 내지 7 mg, 3 mg 내지 6 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 4 mg 내지 7 mg, 4 mg 내지 6 mg, 4 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 7 mg, 5 mg 내지 6 mg 또는 6 mg 내지 7 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 3.83 mg, 4.07 mg, 4.31 mg, 4.55 mg, 4.79 mg, 5 mg, 5.03 mg, 5.27 mg, 5.51 mg, 5.75 mg, 5.99 mg, 6.23 mg 또는 6.47 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 5.03 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 12 mg (예를 들어, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 11 mg, 8 mg 내지 10 mg, 8 mg 내지 9 mg, 9 mg 내지 12 mg, 9 mg 내지 11 mg, 9 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 12 mg, 10 mg 내지 11 mg 또는 11 mg 내지 12 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 8 mg, 9 mg, 10 mg, 11 mg 또는 12 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 10 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 7 mg 내지 13 mg (예를 들어, 7 mg 내지 13 mg, 7 mg 내지 12 mg, 7 mg 내지 11 mg, 7 mg 내지 10 mg, 7 mg 내지 9 mg, 7 mg 내지 8 mg, 8 mg 내지 13 mg, 8 mg 내지 12 mg, 8 mg 내지 11 mg, 8 mg 내지 10 mg, 8 mg 내지 9 mg, 9 mg 내지 13 mg, 9 mg 내지 12 mg, 9 mg 내지 11 mg, 9 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 13 mg, 10 mg 내지 12 mg, 10 mg 내지 11 mg, 11 mg 내지 13 mg, 11 mg 내지 12 mg 또는 12 mg 내지 13 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 7.67 mg, 8.15 mg, 8.63 mg, 9.11 mg, 9.59 mg, 10 mg, 10.07 mg, 10.55 mg, 11.03 mg, 11.50 mg, 11.98 mg, 12.46 mg 또는 12.94 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 10.07 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 16 mg 내지 26 mg (예를 들어, 16 mg 내지 26 mg, 16 mg 내지 25 mg, 16 mg 내지 20 mg, 16 mg 내지 18 mg, 18 mg 내지 26 mg, 18 mg 내지 25 mg, 18 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 26 mg, 20 mg 내지 25 mg, 20 mg 내지 22 mg, 22 mg 내지 26 mg, 22 mg 내지 25 mg, 22 mg 내지 23 mg, 24 mg 내지 26 mg 또는 24 mg 내지 25 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 15.34 mg, 16.30 mg, 17.26 mg, 18.22 mg, 19.17 mg, 20 mg, 20.13 mg, 21.09 mg, 22.05 mg, 23.01 mg, 23.97 mg, 24.93 mg 또는 25.89 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 20.13 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 24 mg 내지 36 mg (예를 들어, 24 mg 내지 36 mg, 24 mg 내지 33 mg, 24 mg 내지 30 mg, 24 mg 내지 27 mg, 27 mg 내지 36 mg, 27 mg 내지 33 mg, 27 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 36 mg, 30 mg 내지 33 mg 또는 33 mg 내지 36 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 24 mg, 25 mg, 26 mg, 27 mg, 28 mg, 29 mg, 30 mg, 31 mg, 32 mg, 33 mg, 34 mg, 35 mg 또는 36 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 30 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 23 mg 내지 39 mg (예를 들어, 23 mg 내지 39 mg, 23 mg 내지 35 mg, 23 mg 내지 30 mg, 23 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 39 mg, 25 mg 내지 35 mg, 25 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 39 mg, 30 mg 내지 35 mg 또는 35 mg 내지 39 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 23.01 mg, 24.45 mg, 25.89 mg, 27.32 mg, 28.76 mg, 30.20 mg, 31.64 mg, 33.08 mg, 34.51 mg, 35.95 mg, 37.39 mg, 38.83 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 30.2 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 31 mg 내지 52 mg (예를 들어, 31 mg 내지 52 mg, 31 mg 내지 50 mg, 31 mg 내지 45 mg, 31 mg 내지 40 mg, 31 mg 내지 35 mg, 33 mg 내지 52 mg, 33 mg 내지 50 mg, 33 mg 내지 45 mg, 33 mg 내지 40 mg, 33 mg 내지 35 mg, 35 mg 내지 52 mg, 35 mg 내지 50 mg, 35 mg 내지 45 mg, 35 mg 내지 40 mg, 40 mg 내지 52 mg, 40 mg 내지 50 mg, 40 mg 내지 45 mg, 45 mg 내지 52 mg, 45 mg 내지 50 mg 또는 50 mg 내지 52 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 30.68 mg, 32.60 mg, 34.51 mg, 36.43 mg, 38.35 mg, 40 mg, 40.27 mg, 42.18 mg, 44.10 mg, 46.02 mg, 47.94 mg, 49.85 mg 또는 51.77 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 12주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 40.27 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후에 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 내의 2회 투여는 대상체에게 각각의 후속 투여에 의해 제공되는 복합체의 올리고뉴클레오티드의 양과 동일한 복합체의 올리고뉴클레오티드의 총량을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후에 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 내의 2회 투여 각각은 대상체에게 각각의 후속 투여에 의해 제공되는 복합체의 올리고뉴클레오티드의 양과 동일한 복합체의 올리고뉴클레오티드의 양을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 내의 처음 2회의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 총 3-52 mg (예를 들어, 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 후속 투여는 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3-52 mg (예를 들어, 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 내의 처음 2회의 투여 각각에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 총 3-52 mg (예를 들어, 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 후속 투여는 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3-52 mg (예를 들어, 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 내의 처음 2회의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 총 5 내지 40 mg (예를 들어, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 후속 투여는 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 내지 40 mg (예를 들어, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 내의 처음 2회 투여 각각에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 내지 40 mg (예를 들어, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 후속 투여는 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 내지 40 mg (예를 들어, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 내의 처음 2회의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 총 8 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg, 10 mg, 12 mg, 15 mg, 20 mg, 24 mg, 25 mg, 30 mg 또는 36 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 후속 투여는 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg, 10 mg, 12 mg, 15 mg, 20 mg, 24 mg, 25 mg, 30 mg 또는 36 mg)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 내의 처음 2회 투여 각각에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg, 10 mg, 12 mg, 15 mg, 20 mg, 24 mg, 25 mg, 30 mg 또는 36 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 후속 투여는 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg, 10 mg, 12 mg, 15 mg, 20 mg, 24 mg, 25 mg, 30 mg 또는 36 mg)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 (제0주 및 제2주) 내의 처음 2회의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드의 총 24 mg 내지 36 mg (예를 들어, 제1 용량에 대해 4 mg 및 제2 용량에 대해 20 mg, 제1 용량에 대해 8 mg 및 제2 용량에 대해 16 mg, 제1 용량에 대해 12 mg 및 제2 용량에 대해 12 mg, 제1 용량에 대해 24 mg 및 제2 용량에 대해 8 mg 또는 제1 용량에 대해 20 mg 및 제2 용량에 대해 4 mg, 제1 용량에 대해 5 mg 및 제2 용량에 대해 25 mg, 제1 용량에 대해 10 mg 및 제2 용량에 대해 20 mg, 제1 용량에 대해 15 mg 및 제2 용량에 대해 15 mg, 제1 용량에 대해 20 mg 및 제2 용량에 대해 10 mg, 제1 용량에 대해 25 mg 및 제2 용량에 대해 5 mg, 제1 용량에 대해 6 mg 및 제2 용량에 대해 30 mg, 제1 용량에 대해 12 mg 및 제2 용량에 대해 24 mg, 제1 용량에 대해 18 mg 및 제2 용량에 대해 18 mg, 제1 용량에 대해 24 mg 및 제2 용량에 대해 12 mg 또는 제1 용량에 대해 30 mg 및 제2 용량에 대해 6 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 후속 투여는 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 24 mg 내지 36 mg (예를 들어, 24 mg, 30 mg 또는 36 mg)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 (제0주 및 제2주) 내의 처음 2회의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 총 30 mg (예를 들어, 제1 용량에 대해 5 mg 및 제2 용량에 대해 25 mg, 제1 용량에 대해 10 mg 및 제2 용량에 대해 20 mg, 제1 용량에 대해 15 mg 및 제2 용량에 대해 15 mg, 제1 용량에 대해 20 mg 및 제2 용량에 대해 10 mg 또는 제1 용량에 대해 25 mg 및 제2 용량에 대해 5 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 후속 투여는 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 30 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후에 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 내의 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 24 mg 내지 36 mg (예를 들어, 24 mg, 30 mg 또는 36 mg)을 제공하고, 여기서 각각의 후속 투여는 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 24 mg 내지 36 mg (예를 들어, 24 mg, 30 mg 또는 36 mg)을 제공한다.
4주마다 1회는 1개월 1회와 실질적으로 유사하고, 8주마다 1회는 2개월마다 1회와 실질적으로 유사하고, 12주마다 1회는 3개월마다 1회와 실질적으로 유사하고, 16주마다 1회는 4개월마다 1회와 실질적으로 유사한 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 일부 실시양태에서, 4주마다 1회는 1개월에 1회를 의미할 수 있고; 8주마다 1회는 2개월마다 1회를 의미할 수 있고; 12주마다 1회는 3개월마다 1회를 의미할 수 있고; 16주마다 1회는 4개월마다 1회를 의미할 수 있다. 유사하게, 일부 실시양태에서, 4주마다 1회는 1년에 12회를 의미할 수 있고; 8주마다 1회는 1년에 6회를 의미할 수 있고; 12주마다 1회는 1년에 4회를 의미할 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 처음 4주에 2주마다 1회 투여하고 (제0주, 제2주, 제4주에 투여), 후속적으로 그 후에 4주마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 처음 4주 내의 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 30 mg을 제공하고, 여기서 각각의 후속 투여는 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 30 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00037
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A에서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 제제는 pH 5.5-6.5 (예를 들어, 6.0)이고, 히스티딘 (예를 들어, 25 mM의 농도), 수크로스 (예를 들어, 10 w/v%의 농도) 및 복합체 (예를 들어, 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도)를 포함하고;
여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg, 10 mg, 12 mg, 20 mg, 24 mg, 30 mg 또는 36 mg)을 제공하고, 임의로 여기서 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00038
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A에서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 제제는 pH 5.5-6.5 (예를 들어, 6.0)이고, 히스티딘 (예를 들어, 25 mM의 농도), 수크로스 (예를 들어, 10 w/v%의 농도) 및 복합체 (예를 들어, 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도)를 포함하고;
여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg, 10 mg, 12 mg, 20 mg, 24 mg, 30 mg 또는 36 mg)을 제공하고, 임의로 여기서 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하고:
Figure pct00039
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고; 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)는 항체의 상이한 아미노산 잔기를 통해 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 제제는 pH 5.5-6.5 (예를 들어, 6.0)이고, 히스티딘 (예를 들어, 25 mM의 농도), 수크로스 (예를 들어, 10 w/v%의 농도) 및 복합체 (예를 들어, 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도)를 포함하고;
여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg (예를 들어, 8 mg, 10 mg, 12 mg, 20 mg, 24 mg, 30 mg 또는 36 mg)을 제공하고, 임의로 여기서 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며 여기서 n1은 0인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 본원에 기재된 복합체의 유효량을 포함하는 조성물을 투여함으로써 대상체에게 제공되는 올리고뉴클레오티드의 양의 변동이 고려된다. 따라서, 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 5 mg (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 100 mg (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 5 mg (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 50 mg (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 10 mg (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 30 mg (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 8 mg, 9 mg, 10 mg, 11 mg, 12 mg, 13 mg, 14 mg, 15 mg, 16 mg, 17 mg, 18 mg, 19 mg, 20 mg, 21 mg, 22 mg, 23 mg, 24 mg, 25 mg, 26 mg, 27 mg, 28 mg, 29 mg, 30 mg, 31 mg, 32 mg, 33 mg, 34 mg, 35 mg 또는 36 mg을 제공한다. 올리고뉴클레오티드의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 20% (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 10 mg (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 30 mg (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00040
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A에서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 제제는 pH 5.5-6.5 (예를 들어, 6.0)이고, 히스티딘 (예를 들어, 25 mM의 농도), 수크로스 (예를 들어, 10 w/v%의 농도) 및 복합체 (예를 들어, 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도)를 포함하고;
여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg을 제공하고, 임의로 여기서 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00041
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A에서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 제제는 pH 5.5-6.5 (예를 들어, 6.0)이고, 히스티딘 (예를 들어, 25 mM의 농도), 수크로스 (예를 들어, 10 w/v%의 농도) 및 복합체 (예를 들어, 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도)를 포함하고;
여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg을 제공하고, 임의로 여기서 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하고:
Figure pct00042
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고; 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)는 항체의 상이한 아미노산 잔기를 통해 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 제제는 pH 5.5-6.5 (예를 들어, 6.0)이고, 히스티딘 (예를 들어, 25 mM의 농도), 수크로스 (예를 들어, 10 w/v%의 농도) 및 복합체 (예를 들어, 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도)를 포함하고;
여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg을 제공하고, 임의로 여기서 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5.03 mg, 10.06 mg, 20.13 mg, 30.2 mg 또는 40.27 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 본원에 기재된 복합체의 유효량을 포함하는 조성물을 투여함으로써 대상체에게 제공되는 올리고뉴클레오티드의 양의 변동이 고려된다. 따라서, 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 5 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 40 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 5.03 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 40.27 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 5 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 5.03 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 10 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 10.06 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 20 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 20.13 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 20 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 30.2 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 40 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 40.27 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00043
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A에서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 제제는 pH 5.5-6.5 (예를 들어, 6.0)이고, 히스티딘 (예를 들어, 25 mM의 농도), 수크로스 (예를 들어, 10 w/v%의 농도) 및 복합체 (예를 들어, 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도)를 포함하고;
여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공하고, 임의로 여기서 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00044
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A에서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 제제는 pH 5.5-6.5 (예를 들어, 6.0)이고, 히스티딘 (예를 들어, 25 mM의 농도), 수크로스 (예를 들어, 10 w/v%의 농도) 및 복합체 (예를 들어, 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도)를 포함하고;
여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공하고, 임의로 여기서 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하고:
Figure pct00045
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고; 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)는 항체의 상이한 아미노산 잔기를 통해 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 제제는 pH 5.5-6.5 (예를 들어, 6.0)이고, 히스티딘 (예를 들어, 25 mM의 농도), 수크로스 (예를 들어, 10 w/v%의 농도) 및 복합체 (예를 들어, 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도)를 포함하고;
여기서 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 제공하고, 임의로 여기서 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg, 1.4 mg, 2.8 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 제제는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 본원에 기재된 복합체의 유효량을 포함하는 조성물을 투여함으로써 대상체에게 제공되는 올리고뉴클레오티드의 양의 변동이 고려된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 0.5 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 5 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 0.7 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 1.4 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대략 2.8 mg (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.3 mg 내지 7 mg (예를 들어, 0.35 mg, 0.49 mg, 0.5 mg, 0.65 mg, 0.7 mg, 0.91 mg, 0.98 mg, 1.4 mg, 1.82 mg, 1.96 mg, 2.10 mg, 2.8 mg, 3.0 mg, 3.50 mg, 3.64 mg, 3.90 mg, 5.0 mg 또는 6.50 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg 내지 2.8 mg (예를 들어, 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg 내지 2.8 mg (예를 들어, 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.49 mg 내지 0.91 mg (예를 들어, 0.49 mg, 0.5 mg, 0.65 mg, 0.7 mg, 0.91 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.98 mg 내지 1.82 mg (예를 들어, 0.98 mg, 1.4 mg, 1.82 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 1.4 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 1.96 mg 내지 3.64 mg (예를 들어, 1.96 mg, 2.10 mg, 2.8 mg, 3.0 mg, 3.50 mg, 3.64 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 2.8 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 (예를 들어, 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 100 mg, 0.5 mg 내지 150 mg, 0.5 mg 내지 10 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 5 mg, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 50 mg 또는 10 mg 내지 30 mg을 전달하기에) 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 대상체에게 투여하기 위한 조성물은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하며, 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드의 양을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양은 하기 방정식 (방정식 A)을 사용하여 유도될 수 있다:
Figure pct00046
여기서 "MW"는 분자량 (g/mol)을 나타내고, "n1의 평균 값"은 조성물의 복합체의 n1의 평균 값을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 대상체에게 투여하기 위한 조성물은 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하며, 대상체 kg당 대상체에게 제공되는 복합체의 올리고뉴클레오티드의 양은 하기 방정식 (방정식 B)을 사용하여 유도될 수 있다:
Figure pct00047
여기서 "MW"는 분자량 (g/mol)을 나타내고, "n1의 평균 값"은 조성물의 복합체의 n1의 평균 값을 나타낸다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용은 n1의 평균 값에 있어서 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)의 변동을 고려한다. 일부 실시양태에서, 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위 (예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5 (예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)의 범위이고, 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)의 변동이 있다.
일부 실시양태에서, 본 개시내용은 n1의 평균 값에 있어서 최대 20% (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)의 변동을 고려한다. 일부 실시양태에서, 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위 (예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5 (예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5)의 범위이고, 최대 20% (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)의 변동이 있다.
n1의 평균 값은 정수일 필요는 없고 소수일 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 일부 실시양태에서, n1의 평균 값은 약 1.6, 1.7, 1.8, 1.8, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6 또는 2.7이다. 일부 실시양태에서, n1의 평균 값은 약 2이다. 일부 실시양태에서, n1의 평균 값은 약 2.1이다. 일부 실시양태에서, n1의 평균 값은 2, 2.05, 2.1, 2.111, 2.112, 2.113, 2.114, 2.115, 2.12, 2.115, 2.13, 2.135, 2.14, 2.145 또는 2.15이다.
본원에 제공된 올리고뉴클레오티드의 임의의 양은 방정식 A에 따른 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양으로서 나타내어질 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 임의의 올리고뉴클레오티드의 양을 제공하는 것에 관한 본원의 기재는 대안적으로 방정식 A에 따른 상응하는 양의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 제공하는 것으로서 이해될 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 반대로, 본원에 제공된 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 양은 방정식 B에 따른 올리고뉴클레오티드의 양으로서 나타내어질 수 있다. 따라서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 양을 제공하는 것에 관한 본원의 기재는 대안적으로 방정식 B에 따른 상응하는 양의 올리고뉴클레오티드를 제공하는 것으로서 이해될 수 있는 것으로 이해되어야 한다.
일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 분자량을 결정하기 위한 목적으로, 올리고뉴클레오티드는 화학식 (Ie)의 기로 나타내어지며:
Figure pct00048
이는 10452.09 g/mol의 분자량에 상응한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에 사용된 복합체의 항-TfR1 Fab (예를 들어, 표 2에 제시된 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하는 항-TfR1 Fab)는 47968.43 g/mol의 분자량을 갖는다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 대상체에게 올리고뉴클레오티드의 양을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양은, 조성물의 복합체의 n1의 평균 값이 2인 경우에,
Figure pct00049
이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 대상체에게 올리고뉴클레오티드의 양을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양은, 조성물의 복합체의 n1의 평균 값이 2.1인 경우에,
Figure pct00050
이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 조성물의 복합체의 n1의 평균 값 및 대상체에게 전달될 복합체의 올리고뉴클레오티드의 양에 기초하여 본원에 제공된 방정식 A를 사용하여 유도되고, 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 방정식 A로부터 유도된 양과 최대 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 달라진다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 복합체의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 Fab의 양 및 대상체 kg당 올리고뉴클레오티드의 양을 제공하며, 여기서 올리고뉴클레오티드의 양은, 조성물의 복합체의 n1의 평균 값이 2인 경우에,
Figure pct00051
이다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 양은 방정식 B로부터 유도된 양으로부터 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 달라진다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 복합체의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 Fab의 양 및 대상체 kg당 올리고뉴클레오티드의 양을 제공하며, 여기서 올리고뉴클레오티드의 양은, 조성물의 복합체의 n1의 평균 값이 2.1인 경우에,
Figure pct00052
이다. 일부 실시양태에서, 올리고뉴클레오티드의 양은 방정식 B로부터 유도된 양으로부터 최대 30% (예를 들어, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 달라진다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 조성물의 복합체의 n1의 평균 값 및 대상체에게 전달될 복합체의 올리고뉴클레오티드의 양에 기초하여 본원에 제공된 방정식 A를 사용하여 유도되고, 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 방정식 A로부터 유도된 양과 최대 25% (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 달라진다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 조성물의 복합체의 n1의 평균 값에 기초하여 본원에 제공된 방정식 A를 사용하여 유도되고, 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 방정식 A로부터 유도된 양과 최대 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 달라진다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 1 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 11 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 1.09 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 10.93 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg 내지 5 mg (예를 들어, 각각 0.5 mg 내지 5 mg, 0.5 mg 내지 4.5 mg, 0.5 mg 내지 4 mg, 0.5 mg 내지 3.5 mg, 0.5 mg 내지 3 mg, 0.5 mg 내지 2.5 mg, 0.5 mg 내지 2 mg, 0.5 mg 내지 1.5 mg, 0.5 mg 내지 1 mg, 1 mg 내지 5 mg, 1 mg 내지 4.5 mg, 1 mg 내지 4 mg, 1 mg 내지 3.5 mg, 1 mg 내지 3 mg, 1 mg 내지 2.5 mg, 1 mg 내지 2 mg, 2 mg 내지 5 mg, 2 mg 내지 4.5 mg, 2 mg 내지 4 mg, 2 mg 내지 3.5 mg, 2 mg 내지 3 mg, 3 mg 내지 5 mg, 3 mg 내지 4.5 mg, 3 mg 내지 4 mg, 3.5 mg 내지 5 mg, 3.5 mg 내지 4.5 mg 또는 4 mg 내지 5 mg)을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 1.09 mg 내지 10.93 mg (예를 들어, 1.09 mg 내지 10.93 mg, 1.09 mg 내지 9.83 mg, 1.09 mg 내지 9.18 mg, 1.09 mg 내지 7.65 mg, 1.09 mg 내지 6.56 mg, 1.09 mg 내지 5.46 mg, 2.19 mg 내지 10.93 mg, 2.19 mg 내지 9.83 mg, 2.19 mg 내지 9.18 mg, 2.19 mg 내지 7.65 mg, 2.19 mg 내지 6.56 mg, 2.19 mg 내지 5.46 mg, 4.37 mg 내지 10.93 mg, 4.37 mg 내지 9.83 mg, 4.37 mg 내지 9.18 mg, 4.37 mg 내지 7.65 mg, 4.37 mg 내지 6.56 mg, 66.56 mg 내지 10.93 mg, 6.56 mg 내지 9.83 mg, 6.56 mg 내지 9.18 mg, 7.65 mg 내지 10.93 mg, 7.65 mg 내지 9.83 mg 또는 9.18 mg 내지 10.93 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 대략 1 mg 내지 8 mg (예를 들어, 1 mg, 1.5 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg 또는 8 mg)이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg 내지 2.8 mg (예를 들어, 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg)을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 1.5 mg 내지 6 mg (예를 들어, 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.5 mg, 0.6 mg, 0.7 mg, 0.8 mg, 0.9 mg, 1 mg, 1.1 mg, 1.2 mg, 1.3 mg, 1.4 mg, 1.5 mg, 1.6 mg, 1.7 mg,1.8 mg, 1.9 mg, 2 mg, 2.1 mg, 2.3 mg, 2.4 mg, 2.5 mg, 2.6 mg, 2.7 mg, 2.8 mg, 2.9 mg, 3 mg, 3.1 mg, 3.2 mg, 3.3 mg, 3.4 mg, 3.5 mg, 3.6 mg, 3.7 mg, 3.8 mg, 3.9 mg, 4 mg, 4.1 mg, 4.2 mg, 4.3 mg, 4.4 mg, 4.5 mg, 4.6 mg, 4.7 mg, 4.8 mg, 4.9 mg 또는 5 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 1.09 mg, 1.31 mg, 1.53 mg, 1.75 mg, 1.97 mg, 2.19 mg, 2.40 mg, 2.62 mg, 2.84 mg, 3.06 mg, 3.28 mg, 3.5 mg, 3.72 mg, 3.93 mg, 4.15 mg, 4.37 mg, 4.59 mg, 5.03 mg, 5.25 mg, 5.46 mg, 5.68 mg, 5.90 mg, 6.12 mg, 6.34 mg, 6.56 mg, 6.77 mg, 6.99 mg, 7.21 mg, 7.43 mg, 7.65 mg, 7.87 mg, 8.09 mg, 8.30 mg, 8.52 mg, 8.74 mg, 8.96 mg, 9.18 mg, 9.40 mg, 9.62 mg, 9.83 mg, 10.05 mg, 10.27 mg, 10.49 mg, 10.71 mg 또는 10.93 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 1.5 mg, 3 mg, 6 mg 또는 11 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.3 mg 내지 7 mg (예를 들어, 0.35 mg, 0.49 mg, 0.5 mg, 0.65 mg, 0.7 mg, 0.91 mg, 0.98 mg, 1.4 mg, 1.82 mg, 1.96 mg, 2.10 mg, 2.8 mg, 3.0 mg, 3.50 mg, 3.64 mg, 3.90 mg, 5.0 mg 또는 6.50 mg)을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 0.66 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 15.30 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg 내지 2.8 mg (예를 들어, 0.7 mg, 0.91 mg, 0.98 mg, 1.4 mg, 1.82 mg, 1.96 mg, 2.10 mg 또는 2.8 mg)을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 1.5 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 6 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 1.53 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 6.12 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하는 복합체, 예컨대 화학식 (Ia), (Ib), (Ic) 또는 (Id)의 기를 포함하는 것)를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 1.07 mg 내지 2.03 mg (예를 들어, 1.07 mg, 1.09 mg, 1.45 mg, 1.53 mg 또는 2.03 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 1 mg 내지 2 mg (예를 들어, 1 mg, 1.5 mg 또는 2 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 1.5 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 1.53 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 1.4 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 2.14 mg 내지 4.07 mg (예를 들어, 2.14 mg, 3.06 mg 또는 4.07 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 2 mg 내지 4 mg (예를 들어, 2 mg, 3 mg 또는 4 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 3 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 3.06 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 2.8 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 4.28 mg 내지 8.14 mg (예를 들어, 4.28 mg, 4.59 mg, 6.12 mg, 6.56 mg, 7.65 mg 또는 8.14 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 4 mg 내지 8 mg (예를 들어, 4 mg, 6 mg 또는 8 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 6 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 6.12 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 0.7 mg, 1.4 mg 또는 2.8 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 1.53 mg, 3.06 mg 또는 6.12 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 50 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 조성물의 복합체의 n1의 평균 값에 기초하여 본원에 제공된 방정식 A를 사용하여 유도되고, 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 방정식 A로부터 유도된 양과 최대 25% (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 달라진다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 50 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 11.47 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 114.73 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 11.47 mg (예를 들어, 최대 25%, 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 91.79 mg (예를 들어, 최대 25%, 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg (예를 들어, 각각 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 35 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 25 mg, 5 mg 내지 20 mg, 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 10 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 35 mg, 10 mg 내지 30 mg, 10 mg 내지 25 mg, 10 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 15 mg, 15 mg 내지 40 mg, 15 mg 내지 35 mg, 15 mg 내지 30 mg, 15 mg 내지 25 mg, 15 mg 내지 20 mg, 20 mg 내지 40 mg, 20 mg 내지 35 mg, 20 mg 내지 30 mg, 20 mg 내지 25 mg, 25 mg 내지 40 mg, 25 mg 내지 35 mg, 25 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 40 mg, 30 mg 내지 35 mg 또는 35 mg 내지 40 mg)을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 11.47 mg 내지 91.79 mg (예를 들어, 11.47 mg 내지 91.79 mg, 11.47 mg 내지 80.31 mg, 11.47 mg 내지 68.84 mg, 11.47 mg 내지 57.38 mg, 11.47 mg 내지 45.89 mg, 11.47 mg 내지 34.42 mg, 11.47 mg 내지 22.95 mg, 22.95 mg 내지 91.79 mg, 22.95 mg 내지 80.31 mg, 22.95 mg 내지 68.84 mg, 22.95 mg 내지 57.37 mg, 22.95 mg 내지 45.89 mg, 22.95 mg 내지 34.42 mg, 34.42 mg 내지 91.79 mg, 34.42 mg 내지 80.31 mg, 34.42 mg 내지 68.84 mg, 34.42 mg 내지 57.37 mg, 34.42 mg 내지 45.89 mg, 45.89 mg 내지 91.79 mg, 45.89 mg 내지 80.31 mg, 45.89 mg 내지 68.84 mg, 45.89 mg 내지 57.37 mg, 57.37 mg 내지 91.79 mg, 57.37 mg 내지 80.31 mg, 57.37 mg 내지 68.84 mg, 68.84 mg 내지 91.79 mg, 68.84 mg 내지 80.31 mg 또는 80.31 mg 내지 91.79 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 25% (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg, 10 mg, 11 mg, 12 mg, 13 mg, 14 mg, 15 mg, 16 mg, 17 mg, 18 mg, 19 mg, 20 mg, 21 mg, 22 mg, 23 mg, 24 mg, 25 mg, 26 mg, 27 mg, 28 mg, 29 mg, 30 mg, 31 mg, 32 mg, 33 mg, 34 mg, 35 mg, 36 mg, 37 mg, 38 mg, 39 mg 또는 40 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 11.47 mg, 13.77 mg, 16.06 mg, 18.36 mg, 20.65 mg, 22.95 mg, 25.24 mg, 27.54 mg, 29.83 mg, 32.13 mg, 34.42 mg, 36.71 mg, 39.01 mg, 41.30 mg, 43.60 mg, 45.89 mg, 48.19 mg, 50.48 mg, 52.78 mg, 55.07 mg, 57.37 mg, 59.66 mg, 61.96 mg, 64.25 mg, 66.55 mg, 68.84 mg, 71.14 mg, 73.43 mg, 75.72 mg, 78.02 mg, 80.31 mg, 82.61 mg, 84.90 mg, 87.20 mg, 89.49 mg 또는 91.79 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 25% (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8-12 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 18.36 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 27.54 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 10 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 22.95 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 24 mg 내지 36 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 55.07 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 82.61 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 30 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 68.84 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 11.47 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 114.73 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 11.47 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 91.79 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 조성물의 복합체의 n1의 평균 값에 기초하여 본원에 제공된 방정식 A를 사용하여 유도되고, 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 방정식 A로부터 유도된 양과 최대 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 달라진다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 10 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 90 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg 또는 40 mg을 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 11 mg, 22 mg, 44 mg, 66 mg 또는 88 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 10.93 mg, 21.85 mg, 43.71 mg, 65.56 mg 또는 87.42 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 각각 대상체 kg당 대략 10.93 mg, 21.86 mg, 43.72 mg, 65.56 mg 또는 87.43 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 5 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 11 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 10.93 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 10 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 22 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 21.85 mg 또는 21.86 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 20 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 44 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 43.71 mg 또는 43.72 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 30 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 66 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 65.56 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 약 40 mg을 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 88 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 87.42 mg 또는 87.43 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 11.47 mg 내지 91.79 mg (예를 들어, 11.47 mg 내지 91.79 mg, 11.47 mg 내지 80.31 mg, 11.47 mg 내지 68.84 mg, 11.47 mg 내지 57.37 mg, 11.47 mg 내지 45.89 mg, 11.47 mg 내지 34.42 mg, 11.47 mg 내지 22.95 mg, 22.95 mg 내지 91.79 mg, 22.95 mg 내지 80.31 mg, 22.95 mg 내지 68.84 mg, 22.95 mg 내지 57.37 mg, 22.95 mg 내지 45.89 mg, 22.95 mg 내지 34.42 mg, 34.42 mg 내지 91.79 mg, 34.42 mg 내지 80.31 mg, 34.42 mg 내지 68.84 mg, 34.42 mg 내지 57.37 mg, 34.42 mg 내지 45.89 mg, 45.89 mg 내지 91.79 mg, 45.89 mg 내지 80.31 mg, 45.89 mg 내지 68.84 mg, 45.89 mg 내지 57.37 mg, 57.37 mg 내지 91.79 mg, 57.37 mg 내지 80.31 mg, 57.37 mg 내지 68.84 mg, 68.84 mg 내지 91.79 mg, 68.84 mg 내지 80.31 mg 또는 80.31 mg 내지 91.79 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 25% (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 11.47 mg, 13.77 mg, 16.06 mg, 18.36 mg, 20.65 mg, 22.95 mg, 25.24 mg, 27.54 mg, 29.83 mg, 32.13 mg, 34.42 mg, 36.71 mg, 39.01 mg, 41.30 mg, 43.60 mg, 45.89 mg, 48.19 mg, 50.48 mg, 52.78 mg, 55.07 mg, 57.37 mg, 59.66 mg, 61.96 mg, 64.25 mg, 66.55 mg, 68.84 mg, 71.14 mg, 73.43 mg, 75.72 mg, 78.02 mg, 80.31 mg, 82.61 mg, 84.90 mg, 87.20 mg, 89.49 mg, 91.79 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 25% (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 18.36 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 27.54 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 22.95 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 55.07 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 82.61 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 68.84 mg (예를 들어, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 10 mg 내지 90 mg (예를 들어, 11 mg, 22 mg, 44 mg, 66 mg 또는 88 mg)이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 조성물의 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 11 mg, 22 mg, 44 mg, 66 mg 또는 88 mg이다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 7 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 15 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대략 11 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대략 10.93 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다. 일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 15 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 30 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 22 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대략 21.85 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대략 21.86 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 30 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 59 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대략 44 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대략 43.71 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대략 43.72 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 46 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 88 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대략 65.56 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 61 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%) 내지 대략 117 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대상체 kg당 대략 88 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대략 87.42 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 제공된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 바와 같은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조 중 어느 하나를 포함하는 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 2.1이고, 여기서 조성물은 대상체에게 복합체의 올리고뉴클레오티드를 전달하기에 충분한 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양을 포함하고, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 충분한 양은 대략 87.43 mg (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg, 10 mg, 11 mg, 12 mg, 13 mg, 14 mg, 15 mg, 16 mg, 17 mg, 18 mg, 19 mg, 20 mg, 21 mg, 22 mg, 23 mg, 24 mg, 25 mg, 26 mg, 27 mg, 28 mg, 29 mg, 30 mg, 31 mg, 32 mg, 33 mg, 34 mg, 35 mg, 36 mg, 37 mg, 38 mg, 39 mg, 40 mg, 41 mg, 42 mg, 43 mg, 44 mg, 45 mg, 46 mg, 47 mg, 48 mg, 49 mg, 50 mg, 51 mg, 52 mg, 53 mg, 54, mg, 55 mg, 56 mg, 57 mg, 58 mg, 59 mg, 60 mg, 61 mg, 62 mg, 63 mg, 64 mg, 65 mg, 66 mg, 67 mg, 68 mg, 69 mg, 70 mg, 71 mg, 72 mg, 73 mg, 74 mg, 75 mg, 76 mg, 77 mg, 78 mg, 79 mg, 80 mg, 81 mg, 82 mg, 83 mg, 84 mg, 85 mg, 86 mg, 87 mg, 88 mg, 89 mg, 90 mg, 91 mg, 92 mg, 93 mg, 94 mg, 95 mg, 96 mg, 97 mg, 98 mg, 99 mg, 100 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1.5 mg, 3 mg, 6 mg, 11 mg, 22 mg, 44 mg 또는 88 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 114.7 mg, 108.0 mg, 102.0 mg, 96.62 mg, 91.79 mg, 87.42 mg, 86.05 mg, 83.44 mg, 80.99 mg, 79.82 mg, 76.49 mg, 76.44 mg, 73.43 mg, 72.46 mg, 70.61 mg, 68.84 mg, 67.99 mg, 65.56 mg, 62.58 mg, 59.86 mg, 57.37 mg, 55.07 mg, 53.99 mg, 52.95 mg, 50.99 mg, 48.31 mg, 45.89 mg, 43.71 mg, 41.72 mg, 39.91 mg, 38.24 mg, 36.71 mg, 35.30 mg, 34.00 mg, 28.68 mg, 27.0 mg, 25.50 mg, 24.15 mg, 22.95 mg, 21.85 mg, 20.86 mg, 19.95 mg, 19.12 mg, 18.36 mg, 17.65 mg, 17.00 mg, 14.34 mg, 13.50 mg, 12.75 mg, 12.08 mg, 11.47 mg, 10.93 mg, 10.43 mg, 9.98 mg, 9.56 mg, 9.18 mg, 8.83 mg, 8.50 mg, 8.03 mg, 7.56 mg, 7.14 mg, 6.76 mg, 6.43 mg, 6.12 mg, 5.84 mg, 5.59 mg, 5.35 mg, 5.14 mg, 4.94 mg, 4.76 mg, 4.02 mg, 3.78 mg, 3.57 mg, 3.38 mg, 3.21 mg, 3.06 mg, 2.92 mg, 2.79 mg, 2.68 mg, 2.57 mg, 2.47 mg, 2.38 mg, 2.01 mg, 1.89 mg, 1.78 mg, 1.69 mg, 1.61 mg, 1.53 mg, 1.46 mg, 1.40 mg, 1.34 mg, 1.29 mg, 1.24 mg, 1.19 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1.53 mg, 3.06 mg, 6.12 mg, 10.93 mg, 21.85 mg, 43.71 mg, 65.56 mg, 87.42 mg을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 유효량의 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-TfR1 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.09 mg 내지 10.93 mg (예를 들어, 1.09 mg 내지 10.93 mg, 1.09 mg 내지 9.83 mg, 1.09 mg 내지 9.18 mg, 1.09 mg 내지 7.65 mg, 1.09 mg 내지 6.56 mg, 1.09 mg 내지 5.46 mg, 2.19 mg 내지 10.93 mg, 2.19 mg 내지 9.83 mg, 2.19 mg 내지 9.18 mg, 2.19 mg 내지 7.65 mg, 2.19 mg 내지 6.56 mg, 2.19 mg 내지 5.46 mg, 4.37 mg 내지 10.93 mg, 4.37 mg 내지 9.83 mg, 4.37 mg 내지 9.18 mg, 4.37 mg 내지 7.65 mg, 4.37 mg 내지 6.56 mg, 66.56 mg 내지 10.93 mg, 6.56 mg 내지 9.83 mg, 6.56 mg 내지 9.18 mg, 7.65 mg 내지 10.93 mg, 7.65 mg 내지 9.83 mg 또는 9.18 mg 내지 10.93 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.53 mg 내지 6.12 mg (예를 들어, 1.53 mg, 3.06 mg 또는 6.12 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체를 포함하는 조성물의 단일 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체를 포함하는 조성물 중 어느 하나의 다중 용량을 투여한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.09 mg 내지 10.93 mg (예를 들어, 1.09 mg 내지 10.93 mg (예를 들어, 1.09 mg 내지 10.93 mg, 1.09 mg 내지 9.83 mg, 1.09 mg 내지 9.18 mg, 1.09 mg 내지 7.65 mg, 1.09 mg 내지 6.56 mg, 1.09 mg 내지 5.46 mg, 2.19 mg 내지 10.93 mg, 2.19 mg 내지 9.83 mg, 2.19 mg 내지 9.18 mg, 2.19 mg 내지 7.65 mg, 2.19 mg 내지 6.56 mg, 2.19 mg 내지 5.46 mg, 4.37 mg 내지 10.93 mg, 4.37 mg 내지 9.83 mg, 4.37 mg 내지 9.18 mg, 4.37 mg 내지 7.65 mg, 4.37 mg 내지 6.56 mg, 66.56 mg 내지 10.93 mg, 6.56 mg 내지 9.83 mg, 6.56 mg 내지 9.18 mg, 7.65 mg 내지 10.93 mg, 7.65 mg 내지 9.83 mg 또는 9.18 mg 내지 10.93)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회 내지 4개월마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 유효량 1.09 mg 내지 10.93 mg (예를 들어, 1.09 mg 내지 10.93 mg, 1.09 mg 내지 9.83 mg, 1.09 mg 내지 9.18 mg, 1.09 mg 내지 7.65 mg, 1.09 mg 내지 6.56 mg, 1.09 mg 내지 5.46 mg, 2.19 mg 내지 10.93 mg, 2.19 mg 내지 9.83 mg, 2.19 mg 내지 9.18 mg, 2.19 mg 내지 7.65 mg, 2.19 mg 내지 6.56 mg, 2.19 mg 내지 5.46 mg, 4.37 mg 내지 10.93 mg, 4.37 mg 내지 9.83 mg, 4.37 mg 내지 9.18 mg, 4.37 mg 내지 7.65 mg, 4.37 mg 내지 6.56 mg, 66.56 mg 내지 10.93 mg, 6.56 mg 내지 9.83 mg, 6.56 mg 내지 9.18 mg, 7.65 mg 내지 10.93 mg, 7.65 mg 내지 9.83 mg 또는 9.18 mg 내지 10.93 mg)을 포함하는 조성물을 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 1 mg 내지 8 mg (예를 들어, 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg, 1.5 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg 또는 8 mg)을 대상체의 나머지 수명 동안 1주에 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 제공한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 유효량의 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-TfR1 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.5 mg 내지 6 mg (예를 들어, 대상체에게 1.5 mg 내지 6 mg (예를 들어, 1.5 mg 내지 6 mg, 1.5 mg 내지 5.5 mg, 1.5 mg 내지 5 mg, 1.5 mg 내지 4.5 mg, 1.5 mg 내지 4 mg, 15 mg 내지 3.5 mg, 1.5 mg 내지 3 mg, 1.5 mg 내지 2.5 mg, 1.5 mg 내지 2 mg)을 제공함)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 유효량을 포함하는 조성물을 1주 1회 내지 4개월마다 1회 투여하는 것을 포함하며, 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 유효량은 대상체 kg당 1.5 mg, 3 mg, 6 mg이다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1.53 mg, 3.06 mg 또는 6.12 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 각각의 투여의 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 1.5 mg 내지 6 mg (예를 들어, 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.07 mg 내지 2.03 mg (예를 들어, 1.07 mg, 1.09 mg, 1.45 mg, 1.5 mg, 1.53 mg 또는 2.03 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg 내지 2 mg (예를 들어, 1 mg, 1.5 mg 또는 2 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.5 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.53 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 대략 2 mg 내지 4 mg (예를 들어, 2 mg, 3 mg 또는 4 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 대략 2.14 mg 내지 4.07 mg (예를 들어, 2.14 mg, 3.06 mg 또는 4.07 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 3 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 3.06 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 대략 4 mg 내지 8 mg (예를 들어, 4 mg, 6 mg 또는 8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 대략 4.28 mg 내지 8.14 mg (예를 들어, 4.28 mg, 4.59 mg, 6.12 mg, 6.56 mg, 7.65 mg 또는 8.14 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 6 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 각각의 투여에 대한 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 6.12 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 4주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물을 8주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 유효량의 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-TfR1 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 5 mg 내지 120 mg (예를 들어, 5 mg 내지 120 mg, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 80 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 40 mg, 5 mg 내지 30 mg, 5 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 60 mg, 10 mg 내지 50 mg, 10 mg 내지 40 mg, 10 mg 내지 30 mg, 30 mg 내지 60 mg, 40 mg 내지 60 mg, 60 mg 내지 80 mg, 80 mg 내지 100 mg 또는 100 mg 내지 120 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.5 mg, 3 mg, 6 mg, 11 mg, 22 mg, 44 mg 또는 88 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.53 mg, 3.06 mg, 6.12 mg, 10.93 mg, 21.85 mg, 43.71 mg 또는 87.41 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체를 포함하는 조성물의 단일 용량을 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 본원에 기재된 복합체를 포함하는 조성물 중 어느 하나의 다중 용량을 투여한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.5 mg 내지 6 mg (예를 들어, 1.5 mg 내지 6 mg, 1.5 mg 내지 5 mg, 1.5 mg 내지 4 mg, 1.5 mg 내지 3 mg, 1.5 mg 내지 2 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회 내지 4개월마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.5 mg 내지 6 mg (예를 들어, 1.5 mg, 3 mg, 6 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10 mg 내지 90 mg (예를 들어, 10 mg 내지 90, 10 mg 내지 10 mg, 20 mg 내지 80 mg, 20 mg 내지 40 mg, 30 mg 내지 70 mg, 40 mg 내지 60 mg 또는 80 mg 내지 90 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회 내지 4개월마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10 mg 내지 90 mg (예를 들어, 11 mg, 22 mg, 44 mg, 66 mg 또는 88 mg)을 제공함)을 포함하는 조성물을 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 1.53 mg, 3.06 mg, 6.12 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 8.50 mg, 8.83 mg, 9.18 mg, 9.56 mg, 9.98 mg, 10.43 mg, 10.93 mg, 11.47 mg, 12.08 mg, 12.75 mg, 13.50 mg, 14.34 mg, 17.00 mg, 17.65 mg, 18.36 mg, 19.12 mg, 19.95 mg, 20.86 mg, 21.85 mg, 22.95 mg, 24.15 mg, 25.50 mg, 27.00 mg, 28.68 mg, 34.00 mg, 35.30 mg, 36.71 mg, 38.24 mg, 39.91 mg, 41.72 mg, 43.71 mg, 45.89 mg, 48.31 mg, 50.99 mg, 52.95 mg, 53.99 mg, 55.07 mg, 57.37 mg, 57.37 mg, 59.86 mg, 62.58 mg, 65.56 mg, 67.99 mg, 68.84 mg, 70.61 mg, 72.46 mg, 73.43 mg, 76.49 mg, 79.82 mg, 80.99 mg, 83.44 mg, 86.05 mg, 87.42 mg, 91.79 mg, 96.62 mg, 101.99 mg, 107.99 mg, 114.73 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 10.93 mg, 21.85 mg, 21.86 mg, 43.71 mg, 43.72 mg, 65.56 mg, 87.42 mg 또는 87.43 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 대상체에게 본원에 기재된 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량 (예를 들어, 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 약 11 mg, 22 mg, 44 mg 또는 88 mg을 제공함)을 포함하는 조성물을 대상체의 나머지 수명 동안 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 4주마다 1회, 5주마다 1회, 6주마다 1회, 7주마다 1회, 8주마다 1회, 9주마다 1회, 10주마다 1회, 11주마다 1회, 12주마다 1회, 13주마다 1회, 14주마다 1회, 15주마다 1회, 16주마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 임의의 상기 양과 관련하여, 값은 최대 ± 33% (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)만큼 달라질 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00053
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A에서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg 내지 8 mg (예를 들어, 1 mg, 1.5 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg 또는 8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 1.5 mg 내지 6 mg (예를 들어, 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 4주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 8주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg, 3 mg 또는 6 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.53 mg, 3.06 mg 또는 6.12 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00054
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A에서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg 내지 8 mg (예를 들어, 1 mg, 1.5 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg 또는 8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 1.5 mg 내지 6 mg (예를 들어, 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 4주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 8주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.53 mg, 3.06 mg 또는 6.12 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하고:
Figure pct00055
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고; 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)는 항체의 상이한 아미노산 잔기를 통해 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1 mg 내지 8 mg (예를 들어, 1 mg, 1.5 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg 또는 8 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 1.5 mg 내지 6 mg (예를 들어, 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg)을 제공한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 4주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 8주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.5 mg, 3 mg 또는 6 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 1.53 mg, 3.06 mg 또는 6.12 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00056
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A에서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 5 mg 내지 120 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10 mg 내지 90 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 11 mg, 22 mg, 44 mg 또는 88 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10.93 mg, 21.85 mg, 43.71 mg, 65.56 mg 또는 87.42 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10.93 mg, 21.86 mg, 43.72 mg, 65.56 mg 또는 87.43 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00057
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A에서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 5 mg 내지 120 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10 mg 내지 90 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 11 mg, 22 mg, 44 mg 또는 88 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10.93 mg, 21.85 mg, 43.71 mg, 65.56 mg 또는 87.42 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10.93 mg, 21.86 mg, 43.72 mg, 65.56 mg 또는 87.43 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법은 복합체를 포함하는 조성물 (예를 들어, 수용액)의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하고:
Figure pct00058
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)를 포함하고; 임의로 여기서 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)는 항체의 상이한 아미노산 잔기를 통해 공유 연결 (예를 들어, 간접적으로 또는 직접적으로 연결, 예를 들어 직접적으로 연결)되고, 임의로 여기서 각각의 상이한 아미노산 잔기는 리신이고;
여기서 각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 1 이상의 정수이고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 5 mg 내지 120 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 조성물을 4주, 8주 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10 mg 내지 90 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 11 mg, 22 mg, 44 mg 또는 88 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10.93 mg, 21.85 mg, 43.71 mg, 65.56 mg 또는 87.42 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab) 10.93 mg, 21.86 mg, 43.72 mg, 65.56 mg 또는 87.43 mg을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 대상체에게 투여하기 위한 복합체를 포함하는 조성물은 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서 n1은 0이고, R1 및 R2는 본원에 정의된 것인 복합체를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에서, 본원에 기재된 복합체의 유효량을 포함하는 조성물을 투여함으로써 대상체에게 제공된 항-TfR1 항체 (예를 들어, Fab)의 양의 대략 50 mg (예를 들어, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)까지의 변동 (예를 들어, ± 최대 33%, ± 최대 30%, ± 최대 25%, ± 최대 20%, ± 최대 15%, ± 최대 10%, ± 최대 5%, ± 최대 3% 또는 ± 최대 1%)이 고려된다.
일부 실시양태에서, 조성물은 pH 6.0이고, 25 mM 농도의 히스티딘, 10 w/v% 농도의 수크로스 및 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도의 복합체를 포함하는 수용액의 제제이다.
일부 실시양태에서, 대상체에게 제제를 4주마다 1회, 8주마다 1회 또는 12주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 제제를 4주마다 1회 투여한다. 일부 실시양태에서, 대상체에게 제제를 8주마다 1회 투여한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에 따른 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물의 투여는 대상체에서 디스트로핀 단백질 (예를 들어, 말단절단된 디스트로핀 단백질)의 발현 또는 활성을 촉진한다. 말단절단된 디스트로핀 단백질은 기능적이다 (예를 들어, 야생형 디스트로핀 단백질의 활성을 보유함). 일부 실시양태에서, 말단절단된 디스트로핀 단백질은 야생형 디스트로핀 단백질의 부분 기능을 보유한다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에 따른 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물의 투여는 대조군에 비해 대상체에서 적어도 1% (예를 들어, 적어도 1%, 적어도 2%, 적어도 3%, 적어도 4%, 적어도 6%, 적어도 7%, 적어도 8%, 적어도 9%, 적어도 10%, 적어도 11%, 적어도 12%, 적어도 13%, 적어도 14%, 적어도 15%, 적어도 16%, 적어도 17%, 적어도 18%, 적어도 19%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%)의 디스트로핀 단백질 (예를 들어, 말단절단된 디스트로핀 단백질)을 생성한다. 일부 실시양태에서, 대조군은 건강한 대상체 (예를 들어, DMD를 갖지 않는 대상체)에서의 디스트로핀 단백질 수준이다. 일부 실시양태에서, 대조군은 돌연변이된 디스트로핀 대립유전자를 갖지 않는 대상체, 임의로 여기서 프레임시프트 돌연변이를 갖는 돌연변이된 디스트로핀 대립유전자를 갖지 않는 대상체에서의 디스트로핀 단백질 수준이다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에 따른 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물의 투여는 대상체에서 디스트로핀 단백질 (예를 들어, 말단절단된 디스트로핀 단백질)의 증가 (예를 들어, 적어도 1%, 적어도 2%, 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 1배, 2배, 5배, 10배 또는 그 초과만큼)를 유발한다. 일부 실시양태에서, 증가는 본원에 기재된 조성물의 초기 투여 전 또는 후 제25주 (예를 들어, 제10주, 제15주, 제20주 또는 제25주)에 관찰된다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에 따른 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물의 투여는 대상체에서 디스트로핀 양성 섬유의 수의 증가 (예를 들어, 적어도 1%, 적어도 2%, 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 1배, 2배, 5배, 10배 또는 그 초과만큼)를 유발한다. 일부 실시양태에서, 증가는 본원에 기재된 조성물의 초기 투여 전 또는 후 제25주 (예를 들어, 제10주, 제15주, 제20주 또는 제25주)에 관찰된다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에 따른 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물의 투여는 디스트로핀 양성 섬유의 수를 대상체의 병소 영역 (예를 들어, 사두근, 횡격막, 심장, 비복근 또는 전경골근의 병소 영역) 내의 총 근육 섬유의 적어도 10% (예를 들어, 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 그 초과)로 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 디스트로핀 양성 섬유의 수는 대상체의 면역-염색된 (예를 들어, 항-디스트로핀 항체를 사용함) 근육 조직의 면역형광 영상에서 정량화된다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에 따른 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물의 투여는 DMD의 1종 이상의 증상을 완화시킨다. 일부 실시양태에서, 증가는 본원에 기재된 조성물의 초기 투여 전 또는 후 제25주 (예를 들어, 제10주, 제15주, 제20주 또는 제25주)에 관찰된다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에 따른 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물의 투여는 본원에 기재된 방법을 사용한 치료 전의 엑손 (예를 들어, 엑손 51) 스킵핑의 수준에 비해, 대상체의 근육 조직에서의 엑손 (예를 들어, 엑손 51) 스킵핑을 (예를 들어, 적어도 0.5%, 적어도 1%, 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50% 또는 그 초과만큼) 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 증가는 본원에 기재된 조성물의 초기 투여 전 또는 후 제25주 (예를 들어, 제10주, 제15주, 제20주 또는 제25주)에 관찰된다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 방법 중 어느 하나에 따른 복합체 (예를 들어, 근육 표적화 복합체)의 유효량을 포함하는 조성물의 투여는 본원에 기재된 방법을 사용한 치료 전의 혈액 크레아틴 키나제 수준에 비해, 대상체의 혈액 크레아틴 키나제 수준을 (예를 들어, 적어도 0.5%, 적어도 1%, 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 그 초과만큼) 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 감소는 본원에 기재된 조성물의 초기 투여 후 최대 145주 (예를 들어, 최대 제10주, 제20주, 제30주, 제40주, 제50주, 제60주, 제70주, 제80주, 제90주, 제100주, 제110주, 제120주, 제130주, 제140주 또는 제145주)의 과정에 걸쳐 관찰된다. 일부 실시양태에서, 감소는 본원에 기재된 조성물의 초기 투여로부터 145주 초과 후에 관찰된다.
실시예
실시예 1. DMD 환자 근관에서의 항-TfR1 접합체의 엑손-스킵핑 활성
본 연구는 DMD 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드 (올리고)에 발린-시트룰린 서열을 포함하는 링커를 통해 (리신 접합을 통해) 공유 연결된 표 2에 제시된 중쇄 및 경쇄 서열을 갖는 항-TfR1 Fab를 포함하는 접합체의 엑손-스킵핑 활성을 평가하였다. DMD 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드는 PMO이고, 서열식별번호: 21의 염기 서열을 포함한다. 접합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하며:
Figure pct00059
여기서 R2는 표 2에 제시된 항-TfR1 Fab이고, 여기서 각각의 접합체에서 n1은 독립적으로 0 이상의 정수이다.
엑손 52 결실을 보유하는 불멸화된 인간 근모세포를 해동시키고, 프로모셀 골격 세포 성장 배지 (5% FBS 및 1x Pen-Strep 함유) 중에 넣어 1 x 106개 세포/플라스크의 밀도로 시딩하고, 전면생장률로 성장하도록 하였다. 전면생장되면, 세포를 트립신처리하고, 원심분리를 통해 펠릿화하고, 신선한 프로모셀 골격 세포 성장 배지 중에 재현탁시켰다. 세포 수를 계수하고, 세포를 매트리겔-코팅된 96-웰 플레이트에 50k개 세포/웰의 밀도로 시딩하였다. 세포를 24시간 동안 회복되도록 하였다. 성장 배지를 흡인하고 혈청이 없는 분화 배지로 교체함으로써 세포가 분화되도록 유도하였다. 이어서, 세포를 10 μM 올리고뉴클레오티드의 농도의 DMD 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드 (항체에 공유 연결되지 않음 - "네이키드")로 처리하거나 또는 최종 농도 10 μM 올리고뉴클레오티드 등가물의 접합체로 처리하였다. 세포를 시험 물품과 함께 10일 동안 인큐베이션한 다음, 96 웰 플레이트로부터 총 RNA를 수거하였다. 총 RNA 75 ng에 대해 cDNA 합성을 수행하고, 돌연변이 특이적 PCR을 수행하여 각각의 세포 유형에서 엑손 51 스킵핑의 정도를 평가하였다. 돌연변이-특이적 PCR 생성물을 4% 아가로스 겔 상에서 실행하고, SYBR 골드를 사용하여 가시화하였다. 밀도측정법을 사용하여 스킵핑된 앰플리콘 및 스킵핑되지 않은 앰플리콘의 상대량을 계산하고, 엑손 51 스킵핑된 앰플리콘을 존재하는 앰플리콘의 총량으로 나눈 비로서 엑손 스킵핑을 결정하였다:
Figure pct00060
결과는 접합체가 환자 근관에서 항체에 공유 연결되지 않은 동일한 DMD 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드와 비교하여 증진된 엑손 스킵핑을 유발하였다는 것을 입증한다 (도 1a). 이는 항-TfR1 Fab (예를 들어, 표 2에 제시된 바와 같은 서열을 가짐)가 접합체의 근육 세포 내로의 세포 내재화를 용이하게 하여 근육 세포에서 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드의 활성을 유발하였다는 것을 나타낸다.
추가적으로, 세포를 항-TfR1 Fab-올리고 접합체로 2.5 μM (저), 5 μM (중간) 또는 10 μM (고) 올리고뉴클레오티드 등가물의 최종 농도로 처리하였다. 엑손 51-스킵핑 데이터가 도 2b에 제시된다. 결과는 접합체가 DMD 환자 근관에서 용량 의존성 엑손 51 스킵핑을 유발하였다는 것을 입증한다.
실시예 2. 시노몰구스 원숭이에서의 생체내 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 엑손 스킵핑 활성
실시예 1에 기재된 항-TfR1-올리고 접합체를 건강한 비-인간 영장류에서 생체내 그의 엑손 스킵핑 활성에 대해 시험하였다. 나이브 수컷 시노몰구스 원숭이 (군당 n= 4-5마리)에게 제1일 및 제8일에 2회 용량의 비히클, 30 mg/kg 네이키드 올리고 (즉, 항체에 공유 연결되지 않음) 또는 DMD 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드 (30 mg/kg 올리고 등가물)에 공유 연결된 122 mg/kg 항-TfR1 Fab를 정맥내 주입을 통해 투여하였다. 동물을 희생시키고, 제1 용량이 투여된 지 2주 또는 4주 후에 조직을 수거하였다. 프로메가 맥스웰(Promega Maxwell)® RSC 기기를 사용하여 조직 샘플로부터 총 RNA를 수집하고, q스크립트 cDNA 슈퍼믹스(qScript cDNA SuperMix)를 사용하여 cDNA 합성을 수행하였다. 종점 PCR을 사용하여 엑손 51 스킵핑의 평가를 수행하였다.
PCR 생성물의 모세관 전기영동을 사용하여 엑손 스킵핑을 평가하고, % 엑손 51 스킵핑을 하기 식을 사용하여 계산하였다:
Figure pct00061
계산된 엑손 51 스킵핑 결과가 표 4에 제시된다.
표 4. 시노몰구스 원숭이 디스트로핀에서의 디스트로핀의 엑손 51 스킵핑
Figure pct00062
a올리고 = 올리고뉴클레오티드.
b접합체 용량은 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 mg/kg으로서 열거된다.
c올리고 용량은 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 용량과 등가인 올리고뉴클레오티드의 mg/kg으로서 열거된다.
d엑손 스킵핑 값은 괄호 안의 표준 편차를 갖는 평균 % 엑손 51 스킵핑 (n=5)이다.
조직 올리고뉴클레오티드 (올리고) 축적은 올리고뉴클레오티드 서열에 대해 상보적인 프로브에 의한 혼성화 ELISA를 사용하여 정량화하였다. 표준 곡선을 생성하고, 표준 곡선의 선형 회귀로부터 올리고뉴클레오티드 수준 (ng/g)을 유도하였다. 올리고뉴클레오티드는 비접합된 올리고뉴클레오티드 (항체에 공유 연결되지 않음)의 투여와 비교하여 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 투여 후에 더 높은 수준으로, 평가된 모든 조직에 분포되었다. 비접합된 올리고뉴클레오티드의 정맥내 투여는 제1 용량이 투여된 지 2주 및 4주후에 평가된 모든 조직에서 배경 수준에 근접한 올리고뉴클레오티드의 수준을 유발하였다. 접합체의 투여는 제1 투여 2주 후에 심장>횡격막>이두근>사두근>비복근>전경골근의 순위 순서로, 평가된 조직에 걸친 올리고뉴클레오티드의 분포를 유발하였다.
조직 농도의 지속기간을 또한 평가하였다. 올리고뉴클레오티드 수준은 모든 조직에서 투여 4주 후에 검출가능하였다 (표 5). 이는 표 2에 제시된 항-TfR1 Fab가 생체내에서 접합체의 근육 세포 내로의 세포 내재화를 가능하게 하여 근육 세포에서 엑손 스킵핑 올리고뉴클레오티드의 활성을 유발하였다는 것을 나타낸다.
표 5. 시노몰구스 원숭이에서의 DMD 엑손 51 스킵핑 올리고뉴클레오티드의 조직 분포
Figure pct00063
a올리고 = 올리고뉴클레오티드.
b접합체 용량은 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 mg/kg으로서 열거된다.
c올리고 용량은 올리고뉴클레오티드 또는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체 용량과 등가인 올리고뉴클레오티드의 mg/kg으로서 열거된다.
d올리고 값은 괄호 안의 표준 편차를 갖는 ng/g으로서의 조직 내의 올리고뉴클레오티드의 평균 농도 (n=5)이다.
실시예 3: mdx 마우스에서의 생체내 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 엑손 스킵핑 활성
디스트로핀 (DMD) 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드 (올리고)에 발린-시트룰린 서열을 포함하는 링커를 통해 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 (항-TfR1) 항체 (RI7 217 (Fab))로서 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 생성하였다. 엑손 23 스킵핑 올리고뉴클레오티드는 25개 뉴클레오티드 길이의 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이고, GGCCAAACCTCGGCTTACCTGAAAT (서열식별번호: 36)의 염기 서열을 포함한다.
DMD 엑손 51 스킵핑을 적용할 수 있는 대상체의 질환 상태에 대한 실제 동물 모델이 현재 존재하지 않기 때문에 mdx 마우스 모델을 대용 모델로서 사용하였다. mdx 마우스 모델은 항-TfR1-올리고 접합체가 생체내에서 어떻게 거동하는지를 예시해준다. 본 연구에서, 5주령 C57BL/10ScSn-Dmd mdx /J (mdx) 마우스에게 접합체 67.7 mg/kg (30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가임) 또는 22.6 mg/kg (10 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가임)의 단일 볼루스 용량을 정맥내로 주사하였다. 5마리의 마우스를 희생시키고, 표적화된 근육 조직을 각각의 3일, 1주, 4주 및 8주에 22.6 mg/kg (10 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가임) 군에서 수집하였다. 5마리의 마우스를 희생시키고, 표적화된 근육 조직을 각각의 3일, 1주, 4주, 8주 및 12주에 67.7 mg/kg (30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가임) 군에서 수집하였다.
후속적으로, 개별 근육 조직 샘플을 조직 올리고뉴클레오티드 노출에 대해 혼성화 ELISA (hELISA)를 사용하여 검정하였다. 종점 모세관 전기영동을 통해 디스트로핀 유전자의 엑손 23 스킵핑을 평가하고, 정량적 웨스턴 블롯을 통한 퍼센트 디스트로핀 단백질 회복을 모든 시점에서 수행하였다. 추가적으로, 선택된 시점에서 퍼센트 디스트로핀 양성 섬유 (PDPF)를 평가하여 디스트로핀 국재화를 결정하고 정량화였다.
조직 노출의 측정
또한 혼성화 ELISA (hELISA)를 사용하여 조직 올리고뉴클레오티드 노출을 정량화하였다. 투여 3일, 1주, 4주, 8주 및 12주 후에 수집된 조직 샘플에서 조직 올리고뉴클레오티드 수준을 측정하였다. 항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 투여는 사두근 (도 2a), 횡격막 (도 2b), 심장 (도 2c), 비복근 (도 2d) 및 전경골근 (도 2e) 내에 올리고뉴클레오티드 (올리고)의 용량 의존성인 실질적인 축적을 유발하였다. 이들 결과는 항-TfR1 Fab-올리고 접합체를 둘 다의 용량 (10 mg/kg 올리고뉴클레오티드 및 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가임)으로 투여하는 것이 투여 최대 4주 후에 시험된 각각의 조직에서 측정가능한 양의 올리고뉴클레오티드를 생성하였다는 것을 입증한다. 30 mg/kg 올리고 용량에서, 근육 내의 올리고뉴클레오티드는 투여 12주 후에도 검출가능하였다. 절대 수준은 낮아서, 막대 그래프에서 보기는 어렵지만; 올리고뉴클레오티드는 검출가능하였다.
엑손 23 스킵핑의 측정
조직을 균질화하고, 프로메가 맥스웰 RSC 기기 및 맥스웰 RSC 심플리RNA 조직 키트를 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 용해물 상에서 RNA 단리를 수행하였다. 퀀타바이오 q스크립트 cDNA 슈퍼믹스 사용을 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 총 RNA 75 ng으로부터 cDNA를 생성하였다. 관심 영역을 증폭시키기 위해 프라이머를 사용하여 종점 PCR을 수행하였다. 랩칩 HT 터치(LabChip HT Touch) II 기기 상에서 PCR 생성물의 모세관 전기영동을 실행하고, 퍼센트 엑손 스킵핑을 하기 방정식에 따라 정량화하였다:
Figure pct00064
항-TfR1 Fab-올리고 접합체로 처리된 마우스는 사두근 (도 3a), 횡격막 (도 3b), 심장 (도 3c), 비복근 (도 3d) 및 전경골근 (도 3e)에서 엑손 23의 강건하고 용량-의존성인 엑손 스킵핑을 나타냈다.
디스트로핀 단백질 발현의 측정
조직을 균질화하고, 피어스 래피드 골드(Pierce Rapid Gold) BCA 단백질 검정 키트를 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 총 단백질 함량을 평가하였다. 웨스턴 블롯을 웰당 25 ug의 단백질로 실행하였다. 전달 후, 항-디스트로핀 1차 항체 (압캠(Abcam), Ab15277; 1:500) 및 항-알파-액티닌 (Ab9465; 1:10,000)을 사용하여 블롯을 영상화하였다. 2차 항체는 각각 IRDye 800CW 염소 항-토끼 IgG 및 IRDye 680RD 염소 항-마우스 IgG였다. 블롯을 리코르 오디세이(Licor Odyssey) CLX 기기 상에서 영상화하였다. 기지의 백분율로 디스트로핀-결여 mdx 단백질 조직과 혼합된 야생형 단백질의 선형 표준 곡선에 기초하여 정량화를 수행하였다.
항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 67.7 mg/kg (30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가임)으로의 투여 3일, 1주, 4주, 8주 및 12주 후에 수집된 사두근 (도 4a), 횡격막 (도 4b), 심장 (도 4c) 근육 조직에 대한 웨스턴 블롯의 영상이 제시된다. 항-TfR1 Fab-올리고 접합체를 10 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가이거나 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량으로 투여한 후의 웨스턴 블롯 결과의 정량화가 도 4a-4e에 시험된 모든 근육 조직에 대해 제시된다. 항-TfR1 Fab-올리고 접합체로 처리된 마우스는 시험된 모든 근육 조직에서 디스트로핀 단백질의 지속적이고 용량-의존성인 발현을 나타냈다. 도 4a (사두근), 도 4b (횡격막), 도 4c (심장), 도 4d (비복근) 및 도 4e (전경골근)에서의 결과는 항-TfR1 Fab-올리고 접합체가 항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 어느 하나의 용량의 투여 후에 모든 근육 조직에서 강건한 디스트로핀 회복을 용이하게 하였다는 것을 나타낸다. 예를 들어, 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 투여 8주 후에, 마우스에서의 디스트로핀 수준이 사두근 내의 야생형 디스트로핀의 41%에 도달하였고 (도 4a 참조), 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 투여 4주 후에, 마우스에서의 디스트로핀 수준이 횡격막 내의 야생형 디스트로핀의 90%에 도달하였고 (도 4b 참조), 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 투여 4주 후에, 마우스에서의 디스트로핀 수준이 심장 내의 야생형 디스트로핀의 78%에 도달하였고 (도 4c 참조), 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 투여 4주 후에, 마우스에서의 디스트로핀 수준이 비복근 내의 야생형 디스트로핀의 60%에 도달하였고 (도 4d 참조), 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 투여 4주 후에, 마우스에서의 디스트로핀 수준이 전경골근 내의 야생형 디스트로핀의 70%에 도달하였다 (도 4e 참조). 결과는 항-TfR1 Fab-올리고 접합체가 심장 및 골격근에 걸쳐 높은 수준의 디스트로핀 발현을 달성하였다는 것을 나타낸다.
면역형광 영상화에 의한 디스트로핀 국재화
항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 투여 3일, 1주, 4주, 8주 및 12주 후에 mdx 마우스의 사두근, 횡격막 및 심장 조직에서 근육속막 (근육 세포 막)으로의 디스트로핀 국재화를 평가하였다. 나타낸 근육 조직 (사두근, 횡격막, 심장)을 OCT 마운팅 배지 중에서 급속-동결시키고, 10 μm 연속 절편으로 절편화하고, 커버슬립 상에 마운팅하였다. 이어서, 절편을 4% PFA로 고정시키고, 토끼 pAb 항-디스트로핀 1차 항체 (압캠15277; 1:500)로 염색하고, 래트 mAb 항-라미닌 (압캠11576; 1:1000)으로 대조-염색하였다. 자이스(Zeiss) LSM 800 공초점 현미경 상에서 20x 배율로 현미경사진을 획득하였다. 이미지제이(ImageJ)를 사용하여 현미경사진의 후처리를 완료하였다.
도 5a (사두근), 도 5b (심장) 및 도 5c (횡격막)에서의 면역형광 (IF) 영상은 퍼센트 디스트로핀 양성 섬유 (PDPF)를 보여준다. 사두근 IF 데이터의 정량화가 도 5a에 제시되며, 이는 처리 8주 후에 사두근의 근육속막에 83% 디스트로핀-양성 섬유가 존재한다는 것을 입증한다. 도 5b 및 도 5c에서의 IF 영상은 처리 4주 후에 횡격막 및 심장 둘 다의 근육속막에 대략 80% 디스트로핀-양성 섬유가 존재한다는 것을 보여준다. 결과는 항-TfR1 Fab-올리고 접합체가 mdx 마우스의 사두근, 횡격막 및 심장에서 근육속막으로의 오래 지속되는 디스트로핀 국재화를 달성하였다는 것을 나타낸다.
실시예 4. 시노몰구스 원숭이에서의 생체내 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 엑손 스킵핑 활성
본 연구는 디스트로핀 (DMD) 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드 (올리고)에 발린-시트룰린 서열을 포함하는 링커를 통해 (리신 접합을 통해) 공유 연결된 표 2에 제시된 중쇄 및 경쇄 서열을 갖는 항-TfR1 Fab를 포함하는 항-TfR1 접합체의 엑손-스킵핑 활성을 평가하였다. 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드는 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이고, 서열식별번호: 21의 염기 서열을 포함한다. 접합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하며:
Figure pct00065
여기서 R2는 표 2에 제시된 항-TfR1 Fab이고, 여기서 각각의 접합체에서 n1은 독립적으로 0 이상의 정수이다.
접합체의 엑손 스킵핑 활성을 건강한 시노몰구스 원숭이에서 생체내 시험하였다. 나이브, 어린 수컷 시노몰구스 원숭이를 60 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 정맥내 주입으로 처리하고, 2주 후에 희생시키거나, 또는 제1일 및 제15일에 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 2회 정맥내 주입으로 처리하고, 마지막 용량 2주 후에 희생시켰다.
조직을 균질화하고, 프로메가 맥스웰 RSC 기기 및 맥스웰 RSC 심플리RNA 조직 키트를 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 용해물 상에서 RNA 단리를 수행하였다. 퀀타바이오 q스크립트 cDNA 슈퍼믹스 사용을 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 총 RNA 75 ng으로부터 cDNA를 생성하였다. 관심 영역을 증폭시키기 위해 프라이머를 사용하여 종점 PCR을 수행하였다. 랩칩 HT 터치 II 모세관 전기영동 기기 상에서 PCR 생성물을 실행하고, 퍼센트 엑손 스킵핑을 하기 방정식에 따라 정량화하였다:
Figure pct00066
결과는 65.7 mg/kg 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체 (30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가임)의 용량의 제1일 및 제15일 2회 정맥내 주입이 60 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 131.4 mg/kg 항-TfR1 Fab-올리고 접합체의 단일 용량과 비교하여 시노몰구스 원숭이의 심장에서 대등한 효능 및 횡격막에서 더 양호한 효능을 달성하였다는 것을 나타낸다 (도 6a 및 6b 참조).
실시예 5. 시노몰구스 원숭이에서의 생체내 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 엑손 스킵핑 활성
본 연구는 디스트로핀 (DMD) 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드 (올리고)에 발린-시트룰린 서열을 포함하는 링커를 통해 (리신 접합을 통해) 공유 연결된 표 2에 제시된 중쇄 및 경쇄 서열을 갖는 항-TfR1 Fab를 포함하는 항-TfR1 접합체의 엑손-스킵핑 활성을 평가하였다. 엑손 51-스킵핑 올리고뉴클레오티드는 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)이고, 서열식별번호: 21의 염기 서열을 포함한다. 접합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하며:
Figure pct00067
여기서 R2는 표 2에 제시된 항-TfR1 Fab이고, 여기서 각각의 접합체에서 n1은 독립적으로 0 이상의 정수이다.
접합체의 엑손 스킵핑 활성을 건강한 시노몰구스 원숭이에서 생체내 시험하였다. 나이브, 어린 수컷 시노몰구스 원숭이를 (i) 제1일 및 제15일에 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 2회 정맥내 주입으로 처리하고, 마지막 용량 2주 후에 희생시키거나, (ii) 4주 동안 1주 1회 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 정맥내 주입으로 처리하고, 제1 용량 4주 후에 희생시키거나, 또는 (iii) 5주 동안 1주 1회 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 정맥내 주입으로 처리하고, 제1 용량 8주 후에 희생시켰다.
조직을 균질화하고, 프로메가 맥스웰 RSC 기기 및 맥스웰 RSC 심플리RNA 조직 키트를 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 용해물 상에서 RNA 단리를 수행하였다. 퀀타바이오 q스크립트 cDNA 슈퍼믹스 사용을 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 총 RNA 75 ng으로부터 cDNA를 생성하였다. 관심 영역을 증폭시키기 위해 프라이머를 사용하여 종점 PCR을 수행하였다. 랩칩 HT 터치 II 모세관 전기영동 기기 상에서 PCR 생성물을 실행하고, 퍼센트 엑손 스킵핑을 하기 방정식에 따라 정량화하였다:
Figure pct00068
결과는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 시노몰구스 원숭이 심장 및 골격근에서 유의한 엑손 51 스킵핑을 달성하였다는 것을 나타낸다 (도 7a-7c). 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량으로 5주 동안 매주 정맥내 주입하는 것은 사두근에서 18% 엑손 51 스킵핑 (도 7a), 횡격막에서 52% 엑손 51 스킵핑 (도 7b) 및 심장에서 43% 엑손 51 스킵핑 (도 7c)을 달성하였다.
실시예 6. mdx 마우스에서 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합을 사용한 안티센스 올리고뉴클레오티드의 표적화된 전달에 의해 달성된 증진된 엑손 스킵핑 및 연장된 디스트로핀 회복
뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)에 대한 현행 요법은 올리고뉴클레오티드, 예컨대 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)를 사용하여 디스트로핀 프리-mRNA에서 엑손 스킵핑을 유도함으로써, 단축되었지만 기능적인 디스트로핀 단백질의 번역을 가능하게 한다. 이러한 전략은 심장 및 골격근으로의 PMO의 불충분한 전달에 의해 방해되었다. 이들 한계를 극복하기 위해, 올리고뉴클레오티드에 접합된, 트랜스페린 수용체 1 (TfR1)에 결합하는 항원-결합 단편을 포함하는 접합체를 개발하였다. 올리고뉴클레오티드에 접합된, 마우스 TfR1 Fab에 결합하는 항체를 포함하는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량은 mdx 마우스에서 엑손 23 스킵핑 올리고뉴클레오티드 (서열식별번호: 36의 핵염기 서열을 포함하는 PMO)의 근육 전달을 증진시켜, 용량-의존성이고 강건한 엑손 스킵핑 및 지속적인 디스트로핀 회복을 달성하는 것으로 입증되었다. 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체-유도된 디스트로핀 발현은 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량으로, 사두근, 전경골근, 비복근, 횡격막 및 심장에서 각각 야생형 수준의 51%, 72%, 62%, 90% 및 77%의 피크에 도달하였다. 단축된 디스트로핀은 근육속막에 국재화되었으며, 이는 기능적 단백질의 발현을 나타낸다. 반대로, 단일 30 mg/kg 용량의 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드는 미미한 수준의 엑손 스킵핑 및 디스트로핀 발현을 유발하는 불량한 근육 전달을 나타냈다. 중요하게는, 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체 처리는 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드의 투여와 비교하여 개선된 기능적 결과를 가져왔다. 결과는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 DMD의 치료를 위한 효과적인 접근법이라는 것을 시사한다.
물질 및 방법
시약
RNA레이터(RNAlater) (카탈로그 번호 AM7021), 아이브라이트(iBright) FL1000 영상화 시스템 (카탈로그 번호 A32752), 래피드 골드(Rapid Gold) BCA 비신코닌산 검정 (카탈로그 번호 A53225), 슈퍼스크립트 III 플래티넘(Superscript III Platinum) Taq 폴리머라제 (카탈로그 번호 12574018), 항-토끼 알렉사(Alexa)647 (카탈로그 번호 A-21245) 및 항-래트 알렉사488 (카탈로그 번호 A-21208) 항체를 써모피셔 사이언티픽(ThermoFisher Scientific)/인비트로젠(Invitrogen) (캘리포니아주 칼스배드)으로부터 구입하였다. 맥스웰 RSC 기기 (카탈로그 번호 AS8500) 및 맥스웰 RSC 심플리 조직 추출 키트 (카탈로그 번호 AS1340)를 프로메가 (미국 위스콘신주 매디슨)로부터 입수하였다. 랩칩 GXII 터치 HT (CLS138160) 및 DNA 5K/RNA/전하 변이체 랩칩 (카탈로그 번호 760435)을 퍼킨 엘머(Perkin Elmer) (미국 캘리포니아주 산타 클라라)로부터 구입하였다. 크레아티닌 키나제 (CK) 활성 검정 키트 (비색; 카탈로그 번호 ab155901) 및 하기 항체를 압캠 (영국 캠브리지)으로부터 구입하였다: 항-디스트로핀 (카탈로그 번호 Ab15277), 항-알파-액티닌 (카탈로그 번호 Ab9465), 항-라미닌 (카탈로그 번호 Ab11576). IRDye 800CW 염소 항-토끼 IgG (카탈로그 번호 926-32211) 및 IRDye 680RD 염소 항-마우스 IgG (카탈로그 번호 926-68070) 항체 및 오디세이 CLX 기기 (카탈로그 번호 9140-09)를 리코르 (미국 네브래스카주 링컨)로부터 구입하였다. 세파로스 4 패스트 플로우 단백질 G 수지 (카탈로그 번호 17061802) 및 부틸 HP 수지 (카탈로그 번호 28411005)를 시티바(Cytiva) (미국 매사추세츠주 말보로)로부터 입수하였다. 바이오-겔(Bio-Gel) P-4 (카탈로그 번호 1504124) 및 세라믹 히드록시아파타이트 (CHT) (카탈로그 번호 1582000)를 바이오-래드 래보러토리즈(Bio-Rad Laboratories) (미국 캘리포니아주 허큘레스)로부터 구입하였다. 나머지 시약/기기는 하기와 같이 구입하였다: 비바플로우(Vivaflow) 50 카세트 (사르토리우스(Sartorius), 독일 괴팅겐; 카탈로그 번호 VF05P2); PES 래피드플로우(Rapidflow) (써모 사이언티픽 날진(Thermo Scientific Nalgene), 미국 뉴욕주 로체스터; 카탈로그 번호 09-741-03); 엔도세이프(Endosafe) 리물루스 아메보사이트 용해물(limulus amebocyte lysate) 동역학적 발색 검정 (찰스 리버 래보러토리즈 인터내셔널, 인크.(Charles River Laboratories International, Inc.), 미국 매사추세츠주 윌밍톤; 카탈로그 번호 PTS20F); 포스포로티오에이트/DNA 포획 프로브 (인테그레이티드 DNA 테크놀로지스 인크.(Integrated DNA Technologies Inc.), 미국 아이오와주 코랄빌); 시너지 네오2(Synergy Neo2) 멀티-모드 마이크로플레이트 판독기 (바이오텍(BioTek), 미국 버몬트주 위누스키, 카탈로그 번호 NEO2); 프리셀리스 에볼루션(Precellys Evolution) 균질화기 (베르틴(Bertin), 프랑스 몽티니-르-브르토뇌, 카탈로그 번호 P000062-PEVO0-A); 경질-조직 균질화기 (옴니 인터내셔널, 인크.(Omni International, Inc.), 미국 조지아주 케네소, 카탈로그 번호 TH115); 최적 절단 온도 (OCT) 마운팅 배지 (티슈-텍(Tissue-tek), 미국 캘리포니아주 토런스, 카탈로그 번호 4583); 자이스(ZEISS) 레이저 스캐닝 800 공초점 현미경 (칼 자이스 메디텍 아게(Carl Zeiss Meditec AG), 독일 예나); 이미지 J 소프트웨어 (미국 국립 보건원, 미국 메릴랜드주 베데스다); M3 멀티모드 플레이트 판독기 (몰레큘라 디바이시스(Molecular Devices), 미국 캘리포니아주 산 호세, 카탈로그 번호 M3); 이중 리코미터가 장착된 마우스 활동 휠 (라파예트 인스트루먼트 캄파니(Lafayette Instrument Co.), 미국 인디애나주 라파예트, 모델 80822); 플렉시글래스 정사각형 챔버 (메드 어소시에이츠 인크.(Med Associates Inc.), 미국 버몬트주 세인트 알반스). 마우스 TfR1 항-mTfR1 Fab를 표적화하는 모노클로날 래트 항-마우스 IgG2a 항체 (RI7217-rIgG2a)를 진스크립트 바이오테크 코포레이션(Genescript Biotech Corporation) (미국 뉴저지주 피스카타웨이)으로부터 구입하였다. 마우스 디스트로핀 엑손 23에 대한 PMO 안티센스 올리고뉴클레오티드 (5'-NH2-GGCCAAACCTCGGCTTACCTGAAAT-3') (서열식별번호: 36) (26, 27)를 진 툴즈, 엘엘씨(Gene Tools, LLC) (미국 오레곤주 필로매스)로부터 구입하였다. 5' 단부에서 디곡시게닌 및 3' 단부에서 비오틴으로 이중 표지된 핵산-혼성화 효소-연결 면역흡착 검정 (hELISA) 포획 프로브 (5'/DigN/ATTTCAGGTAAG CCGAGGTTTGGCC/3Bio/3' (서열식별번호: 38); 포스포로티오에이트 단부는 볼드체로 강조됨) 및 PCR 프라이머 (정방향 프라이머: 5'-CACATCTTTGATGGTGTGAGG-3' (서열식별번호: 39); 역방향 프라이머: 5'-CAACTTCAGCCATCCATTTCTG-3' (서열식별번호: 40))를 인티그레이티드 DNA 테크놀로지스 (미국 아이오와주 코랄빌)로부터 입수하였다.
생물학적 자원
Mdx (C57Bl/10ScSn-Dmd<mdx>/J, 잭슨 래보러토리(Jackson Laboratory) 스톡 #1801) 및 C57Bl/10ScSn 야생형 마우스를 더 잭슨 래보러토리 (미국 메인주 바 하버)로부터 입수하였다. CHO-K1SP 세포를 진스크립트 바이오테크 코포레이션 (미국 뉴저지주 피스카타웨이)으로부터 구입하였다.
항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체
항-TfR1 Fab
마우스 TfR1을 표적화하는 모노클로날 래트 항-마우스 IgG2a 항체 Fab (RI7217-rIgG2a)를 CHO-K1SP 세포에서 안정하게 발현시켰다. 상청액을 수거하고, 단백질 G 수지 상에서 정제하고, 용리시키고, 둘베코 포스페이트-완충 염수 (pH 7.4)로 완충제-교환하였다.
링커-올리고뉴클레오티드 중간체
링커-올리고뉴클레오티드 중간체를 미리 형성하기 위해, 엑손 23 스킵핑 올리고뉴클레오티드 (서열식별번호: 36)를 디메틸 술폭시드 중에 50 mg/mL로 용해시켰다. 사내 생성된 이관능성 발린-시트룰린 링커를 디메틸 술폭시드 중에 30 mg/mL로 용해시키고, 실온에서 120분 동안 엑손 23 스킵핑 올리고뉴클레오티드와 4-몰 과량으로 혼합하였다. 닌히드린 시험을 사용하여 반응 완료를 측정하였다. P-4 겔 투과 크로마토그래피를 사용하여 과량의 시약을 제거하였다. 링커-올리고뉴클레오티드의 농도를 0.1N 염산에서 자외선-가시광선 분광광도측정법 (265 nm, ε = 259210 mM-1cm-1)에 의해 측정하였으며; 순도를 역상, 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 평가하였다.
항-TfR1 Fab-링커-올리고뉴클레오티드 접합체
링커-올리고뉴클레오티드와의 접합 전에, 항-TfR1 Fab를 1/10 v/v 아세토니트릴 (HPLC 등급)로 희석하였다. 항-TfR1 Fab를 실온에서 18시간 동안 3-몰 과량의 링커-올리고뉴클레오티드와 혼합하였다. 소듐 도데실 술페이트-폴리아크릴아미드 겔 전기영동 (SDS-PAGE) 및 분석용 크기-배제 크로마토그래피로 반응을 확인하였다. 친수성 상호작용 크로마토그래피 (부틸 HP)를 황산암모늄 구배로 사용하여 미반응 Fab를 제거하였다. 풀링된 분획을 뉴클레아제-무함유 물로 희석하여 전도도를 < 8 mS로 감소시키고, 히드록시아파타이트 크로마토그래피 (CHT)를 사용하여 정제함으로써 비접합된 링커-올리고뉴클레오티드를 제거하였다. 최종 항-TfR1 Fab-링커-올리고뉴클레오티드 접합체를 제제 완충제 (100 mM 인산이나트륨, 100 mM 염화나트륨, pH 7.2) 중에 직접적으로 용리시키고, 10 kDa 접선 흐름 여과 (비바플로우 50)에 이어서 멸균 여과 (0.22 μm, PES 래피드플로우)를 사용하여 농축시켰다. 접합체의 농도를 비신코닌산 검정 (래피드 골드 BCA)에 의해 측정하고, 약물 항체 비를 SDS-PAGE 겔의 밀도측정법 (아이브라이트 FL1000)에 의해 결정하였다. 내독소 수준을 엔도세이프 리물루스 아메보사이트 용해물 동역학적 발색 검정을 사용하여 측정하였다.
연구 설계
동역학 연구
엑손 스킵핑 및 디스트로핀 회복을 분석하기 위해, 5주령 수컷 mdx 마우스 (C57Bl/10ScSn-Dmd<mdx>/J)에게 단일 정맥내 (IV) 용량의 비히클, 30 mg/kg 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드, 또는 10 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드의 등가물을 함유하는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 꼬리 정맥을 통해 주사하였다 (처리당 n = 5마리 동물). 비히클-처리된 마우스를 투여 4주, 8주 또는 12주 후에 부검하였다. 30 mg/kg 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드로 처리된 마우스를 투여 1주, 4주 또는 8주 후에 부검하였다. 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체로 처리된 마우스를 10 mg/kg 올리고뉴클레오티드-등가물 코호트에 대해 투여 3일, 1주, 4주 또는 8주 후에 및 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드-등가물 코호트에 대해 투여 3일, 1주, 4주, 8주, 12주 또는 24주 후에 부검하였다. 모든 마우스를 부검 전에 준치사 용량의 펜토바르비탈로 마취시켰다. 심장 천자를 사용하여 전혈을 수집하고, 크레아틴 키나제 (CK) 분석을 위한 혈청을 생산하도록 처리하였다. 이어서, 마우스를 염수로 관류하고, 근육을 수집하였으며; 각각의 근육의 좌측을 RNA레이터로 처리하고, 우측을 후속 분자 분석을 위해 액체 질소 중에서 순간 동결시켰다. 샘플을 대략 48시간 후에 RNA레이터로부터 꺼내고, 드라이 아이스를 사용하여 동결시키고, -80℃에서 저장하였다.
기능적 연구
기능적 수행능을 평가하기 위해, 7-8주령 수컷 mdx 마우스 및 C57Bl/10ScSn 야생형 대조군에게 단일 정맥내 용량의 비히클 (n = 10마리의 각각의 mdx 및 야생형 마우스), 30 mg/kg 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드 (n = 10마리의 mdx 마우스) 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체 (n = 10마리의 mdx 마우스)를 꼬리 정맥을 통해 주사하였다. 자발적 러닝 휠 및 오픈-필드 활동을 각각의 처리군에 대해 투여 2주 후 (n = 10) 및 투여 4주 후 (n = 5)에 평가하였다. 목적하는 시점에, 마우스를 준치사 용량의 펜토바르비탈로 마취시켰다. 심장 천자를 사용하여 전혈을 수집하고, CK 분석을 위한 혈청을 생산하도록 처리하였다.
축산
환경 온도를 20℃ 내지 23℃로 유지하고, 상대 습도를 대략 50%로 유지하였다. 12시간 명:12시간 암의 광 주기를 유지하였다. 음식 및 물을 자유롭게 제공하였다. 동물을 기능적 시험 전에 취급 및 시험 절차에 순응시켰다.
올리고뉴클레오티드 검출을 위한 효소-연결 면역흡착 검정
hELISA 방법을 문헌 [Burki et al.] (29)의 방법으로부터 적합화시켰다. 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드에 대한 포스포로티오에이트/DNA 역 상보체 포획 프로브를 5' 단부에서 디곡시게닌 및 3' 단부에서 비오틴으로 이중 표지하였다. 시너지 네오2 멀티-모드 마이크로플레이트 판독기 상에서 A450에서 신호를 판독하였다. 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드의 농도를 0-500 pM 범위의 기지의 농도의 표준 곡선을 사용하여 계산하였다.
엑손 스킵핑 분석
조직 샘플로부터 극저온-분쇄를 사용하고 후속적으로 맥스웰 RSC 기기를 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 RNA를 추출함으로써 총 RNA를 단리하였다. 간략하게, RNA레이터로 제조된 근육으로부터의 조직 단편에 대해 조직 균질화를 수행하였다. 조직 단편을 칭량하고, 적절한 양의 1-티오글리세롤/맥스웰 균질화 완충제를 첨가하여 200 mg/mL 완충제의 최종 조직 농도를 달성하였다. 프리셀리스 에볼루션 상에서 제조업체의 사전-명시된 "경질 조직" 프로그램을 사용하여, 샘플을 분쇄 튜브에서 균질화하였다. 이어서, 튜브를 5,000 rpm으로 1분 동안 원심분리하여 발포를 감소시켰으며; 균질화 및 원심분리를 2회 반복하였다. 맥스웰 RSC 심플리 조직 추출 키트를 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 총 RNA를 추출하였다. 조직 샘플로부터 단리된 총 RNA를 주형으로서 사용하여 엑손 23 스킵핑을 검정하였다. 총 RNA (15-75 ng)를 슈퍼스크립트 III 플래티넘 Taq와 함께 25 μL RT-PCR에 사용하였다. 35 사이클을 완료한 후, 반응물을 PCR 완충제 중에 1:10으로 희석하고, 랩칩® GXII 터치 HT 상에서 DNA 5K/RNA/전하 변이체 랩칩®을 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 분석하였다. 전장 디스트로핀 전사체는 445개 염기 쌍의 PCR 생성물을 산출하며; 엑손 23-스킵핑된 RNA는 232개 염기 쌍의 PCR 생성물을 생산한다. 하기 방정식을 사용하여 퍼센트 엑손 스킵핑을 정량화하였다:
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단백질 추출 및 웨스턴 블롯
근육을 탈이온수 중 8M 우레아, 0.5M 트리스 (pH 7.5), 10% 소듐 도데실 술페이트 및 프로테아제 억제제를 함유하는 완충제 중에서 경질-조직 균질화기를 사용하여 중속으로 30초 동안 샘플당 4회 균질화하였다. 단백질 농도를 비신코닌산 검정에 의해 측정하였다. 총 단백질 (25 μg)을 3%-8% 트리스-아세테이트 단백질 겔 상에 로딩하고, 60 V에서 30분 동안 및 100 V에서 1시간 동안 실행하였다. 이어서, 겔을 4℃에서 200 mAmp에서 120분 동안 폴리비닐리덴 디플루오라이드 막으로 옮겼다. 막을 1:500 희석의 항-디스트로핀 항체 및 1:10,000 희석의 항-알파-액티닌과 함께 4℃에서 밤새 인큐베이션하였다. 다음 날, 막을 세척하고, 1:10,000 희석의 IRDye 800CW 염소 항-토끼 IgG 및 IRDye 680RD 염소 항-마우스 IgG 2차 항체와 함께 인큐베이션하여 각각 디스트로핀 및 알파-액티닌을 가시화하였다. 오디세이® CLX 상에서 블롯을 가시화하였으며, 800 nm에서 디스트로핀 및 680 nm에서 알파-액티닌이 검출되었다.
각각의 샘플에 존재하는 디스트로핀 단백질의 양을 정량화하기 위해, mdx 마우스로부터의 근육 매트릭스 내로 희석된 야생형 마우스로부터의 매칭되는 근육 매트릭스의 표준 곡선을 사용하여 각각의 겔을 실행하였다. 각각의 표준 및 미지의 샘플에 대해 디스트로핀 및 알파-액티닌 채널에서 미가공 형광을 측정하였다. 이어서, 표준의 디스트로핀/알파-액티닌 비를 생성하고, 각각의 표준에서 기지의 퍼센트 야생형 단백질에 대해 플롯팅하여 선형 방정식을 생성하였다. 이어서, 미지의 샘플을 표준 곡선의 방정식에 기초하여 그의 디스트로핀/알파-액티닌 비로부터 내삽하였다. 미지의 샘플의 미가공 디스트로핀 신호가 표준 곡선의 범위 초과이면, 그것이 표준 곡선 내에 속할 때까지 샘플을 희석하였다. 대표적인 웨스턴 블롯 영상은 도 14a에 제공되고, 대표적인 표준 곡선 계산은 도 14b에 제공된다.
면역형광 현미경검사
OCT 마운팅 배지 중에서 급속-동결된 사두근을 10-μm 연속 절편으로 절편화하고, 커버슬립 상에 마운팅하였다. 슬라이드를 실온에서 평형화되도록 한 후, 1´ PBS 중에 넣어 실온에서 5분 동안 두었다. 이어서, 슬라이드를 4% 파라포름알데히드로 고정시키고, 토끼 폴리클로날 항체 항-디스트로핀 1차 항체 (1:500)로 염색하고, 래트 모노클로날 항체 항-라미닌 (1:1,000)으로 대조-염색하였다. 라미닌은 근육속막의 바로 외부에 있는 큰 당단백질을 염색하기 때문에 대조염색으로서 사용되었고; 이 방법은 막에 중첩되지 않으면서 근섬유의 윤곽을 보여주었으며, 이는 막 상의 중첩되는 염색의 복잡한 영상 디컨볼루션을 피하면서 근섬유 윤곽을 표적화할 때 유의미하다. 영상화 전에, 디스트로핀을 가시화하기 위해, 슬라이드를 항-토끼 알렉사647 (1:500)로 염색하고; 라미닌을 가시화하기 위해, 슬라이드를 항-래트 알렉사488 (1:500) 2차 항체로 염색하였다. 자이스 레이저 스캐닝 800 공초점 현미경 상에서 20´ 배율로 현미경사진을 획득하였다. 이미지 J 소프트웨어를 사용하여 현미경사진의 후처리를 완료하였다 (30).
혈청 CK 검정
CK 활성 검정 키트 (비색)를 제조업체의 프로토콜에 따라 사용하여 CK 활성의 분석을 수행하였다. 혈청 샘플을 얼음 상에서 해동시키고, CK 검정 완충제 (4℃) 중에 1:100 희석하였다. 96-웰 마이크로플레이트에서, 희석된 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 표준, 양성 대조군 및 희석된 혈청 샘플을 반응 마스터 믹스 (CK 검정 완충제, 효소 믹스, 현상제, ATP 및 기질)와 함께 실온에서 인큐베이션하였다. 희석된 혈청 샘플을 효소 믹스 없이 사용한 배경 대조군 반응물을 실온에서 인큐베이션하였다. M3 멀티모드 플레이트 판독기를 37℃에서 총 30분 동안 5분마다 동역학적 모드로 사용하여 OD450에서 판독치를 수득하였다. OD450 판독치는 T1 (시간 0)과 T2 (10분) 사이에서 선형이었다. 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드의 농도에 대해 표준의 OD450을 플롯팅함으로써 표준 곡선을 구축하였다. 광학 밀도 값을 사용하여 혈청 샘플의 CK 활성을 계산하였다.
근육 기능 시험
러닝 휠
이중 리코미터가 장착된 마우스 활동 휠에서 자발적 러닝 휠 평가를 수행하였다. 폴리카르보네이트 챔버는 35.3 x 23.5 x 20 cm로 측정되었다. 알루미늄 러닝 휠은 0.40 미터/회전의 러닝 거리에 대해 12.7 cm의 내부 직경 및 5.72 cm의 내부 폭을 가졌다. 러닝 표면은 10.9-mm 중심에서 6.14-mm 간격으로 각각 대략 4.8 mm 직경의 38개의 막대로 이루어졌다. 이동한 총 거리를 포함한 동물의 활동을 전자적으로 기록하는 인터페이스에 러닝 휠을 연결하였다.
뒷다리 피로 챌린지
자동화 오픈-필드 시험을 사용하여 이동 거리를 포함한 운동 활성 (수평 활성)을 평가하였다. 10분의 자세 뒷다리 피로 챌린지 (HLFC) 세션 또는 10분 동안의 홈 케이지 내 배치 전 및 후 둘 다에서 10분 시험 세션에서 활성을 측정하였다. 오픈-필드 챔버로서 사용되는 적외선 포토빔 소스에 의해 둘러싸인 27.3 x 27.3 x 20.3 cm로 측정된 플렉시글래스 정사각형 챔버에서 오픈 필드 활동을 수행하였다. 수평 활성은 연속 빔 중단으로부터 측정하였다. 자세 HLFC는 mdx 마우스 계통의 근육 표현형을 악화시키기 위해 수행되는 시험-전 운동이다. 간략하게, 마우스를 10분 동안 그의 체중의 대부분을 사용하여 뒷다리로 두 발로 서 있도록 구속하였다. 이어서, 마우스를 기재된 바와 같은 시험에 적용하였다.
통계적 분석
모든 추론 통계에 대해 0.05의 유의성 수준을 선택하였다. 모든 분자 분석을 위해, 이원 ANOVA를 던넷 다중 비교 사후 검정과 함께 수행하여 투여 1주, 4주 및 8주 후 시점에서 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드와 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체 데이터 사이의 차이를 평가하였다. 모든 행동 평가를 위해, 적절한 사후 비교와 함께 일원 또는 이원 분산 분석에 의해 통계적 유의성을 평가하였다. 이상치를 각각의 행동 평가로부터 배제하였다. 러닝 휠 분석을 위해, 처음 24시간의 암주기 동안 이동한 총 거리를 평가하였다. 동물이 이동한 총 거리가 동일한 처리군에서의 모든 동물의 평균 수행능과 비교하여 평균으로부터 2 표준 편차 (SD) 초과 또는 미만인 경우에, 동물을 러닝 휠 분석으로부터 배제하였다.
HLFC에 대해, 오픈 필드에서 이동한 총 거리의 퍼센트 변화를 홈 케이지 휴식 또는 자세 HLFC 전 및 후에 계산하였다. 각각의 처리군에 대해, 홈 케이지 데이터 및 HLFC 데이터를 개별적으로 분석하였다. 동물이 이동한 총 거리의 퍼센트 변화가 동일한 처리군에서의 모든 동물의 평균 수행능과 비교하여 평균으로부터 2 SD 초과 또는 미만인 경우에, 동물을 홈 케이지 또는 HLFC 분석으로부터 배제하였다.
결과
항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체는 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드의 투여보다 유의하게 더 많은 엑손 스킵핑 올리고뉴클레오티드를 mdx 마우스의 골격 및 심장 근육에 전달한다
DMD의 mdx 마우스 모델에서 디스트로핀 단백질 발현을 회복시키는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 능력을 조사하기 위해, 엑손 23 스킵핑 올리고뉴클레오티드 (서열식별번호: 36)를 항-TfR1 Fab에 접합시켰다. 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 올리고뉴클레오티드를 근육에 전달하는지 여부를 결정하기 위해, 10 mg/kg 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드를 전달하는 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 정맥내 투여 후에 mdx 마우스에서의 총 근육 올리고뉴클레오티드 수준의 동역학을 hELISA에 의해 측정하였다. mdx 마우스의 병행 코호트에 30 mg/kg 용량의 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드를 정맥내로 주사하였다. 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체는 심장 및 골격근에 대한 올리고뉴클레오티드의 용량-의존성 분포 및 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드 단독보다 유의하게 더 높은 수준의 노출을 유도하였다. 피크 올리고뉴클레오티드 수준은 사두근에서 투여 3일 후에 검출되었고 (도 8a), 그 후 두 용량 수준에 대해 유사한 비율로 꾸준히 감소하였다. 전경골근 (TA; 도 8b), 비복근 (도 8c) 및 횡격막 (도 8d)을 포함한 다른 골격근에서의 올리고뉴클레오티드 노출 동역학은 사두근에서의 동역학과 유사하였다. 심장에서, 피크 올리고뉴클레오티드 수준은 투여 3일 내지 1주 후에 달성되었다 (도 8e). 투여 1주 및 4주 후에 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드로 처리된 mdx 마우스의 골격 및 심장 근육에서 최소 올리고뉴클레오티드 노출이 검출가능하였고, 투여 8주 후에 페이로드는 검출가능하지 않았다 (도 8a-8e). 이들 데이터는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 근육으로의 올리고뉴클레오티드 페이로드의 전달을 증진시킨다는 것을 나타낸다.
항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량은 mdx 마우스의 근육에서 강건하고 지속적인 엑손 23 스킵핑을 유도하지만, 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드는 그렇지 않다
항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 근육에 활성 올리고뉴클레오티드 페이로드를 전달하는지 여부를 조사하기 위해, 종점-RT-PCR 및 모세관 전기영동을 사용하여 Dmd 엑손 23 스킵핑을 평가하였다. 용량-의존성 엑손 23 스킵핑은 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 투여 3일 후에 검출가능하였고, 평가된 모든 근육에서 투여 1주 후에 피크였다. 사두근 (도 9a), 전경골근 (도 9b), 비복근 (도 9c), 횡격막 (도 9d) 및 심장 (도 9e)에서의 엑손 23 스킵핑의 평균 최대 수준은 10 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량 후에 각각 24%, 8%, 18%, 18% 및 28%였다. 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량으로 처리한 후 동일한 근육에서의 평균 최대 수준은 44%, 30%, 30%, 37% 및 40%였다 (도 9a-9e). 매칭되는 30 mg/kg 용량의 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드 단독의 투여는 유의하게 더 낮은 엑손 스킵핑을 유발하였다. 엑손 23 스킵핑은 투여 1주 및 4주 후에 30 mg/kg 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드 코호트에서 단일 마우스에서만 검출가능하였고, 투여 후 8주까지 명백한 검출가능한 스킵핑은 없었다 (도 9a-9e). 투여 4주, 8주 및 12주 후에 비히클-처리된 대조군 마우스에서 평가된 어떠한 근육에서도 엑손 23 스킵핑은 검출가능하지 않았다 (도 9a-9e). 중요하게는, 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체-유도된 스킵핑은 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량을 투여한 마우스의 심장 근육 및 횡격막에서 8주까지 및 사두근, 전경골근 및 비복근에서 12주까지 지속적이고 검출가능하였다. 이들 데이터는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체에 의한 증진된 올리고뉴클레오티드 전달이 심장 및 골격근에서 증가된 수준의 엑손 스킵핑으로 해석된다는 것을 입증한다.
항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량은 mdx 마우스의 근육에서 강건하고 지속적인 디스트로핀 단백질 발현을 유도하지만, 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드는 그렇지 않다
엑손 23 스킵핑의 유도와 일치하게, 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량으로의 처리는 디스트로핀 단백질 발현의 지속적이고 용량-의존성인 회복을 유발하였다. 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체로 처리된 동물의 사두근, TA, 비복근, 횡격막 및 심장의 희석되지 않은 근육 샘플을 사용한 대표적인 웨스턴 블롯은 디스트로핀 회복이 야생형 디스트로핀 표준 곡선의 상한을 초과하였다는 것을 나타냈다 (도 10a; 샘플을 후속적으로 표준 곡선의 범위 내로 희석하여 정량화를 생성함). 반대로, 대부분의 비히클-처리된 마우스는 검출가능한 디스트로핀이 최소이거나 없었으며 (도 10b-10f), 이는 mdx 마우스에서의 낮은 백분율의 디스트로핀-양성 복귀돌연변이 섬유의 존재와 일치한다 (31).
사두근 (도 10b), 전경골근 (도 10c), 비복근 (도 10d), 횡격막 (도 10e) 및 심장 (도 10f)에서, 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체-유도된 디스트로핀 발현은 10 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 투여 후에 각각 야생형 수준의 20%, 8%, 8%, 11% 및 27%의 피크에 도달하였다. 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 투여 후 피크 디스트로핀 발현은 동일한 근육에서 야생형 수준의 51%, 72%, 62%, 90% 및 77%였다 (도 10b-10f). 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량 후 심장 및 횡격막에서 8주까지 및 뒷다리의 골격근에서 12주까지 지속적인 디스트로핀 발현이 주목되었다. 대조적으로, 30 mg/kg 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드로의 처리는 투여 1주, 4주 및 8주 후에 소수의 mdx 마우스의 사지 근육에서 보다 낮은 수준의 디스트로핀 생산을 유도하였다 (도 10a-10b 및 10d). 디스트로핀 단백질은 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드의 투여 1주 및 4주 후에 mdx 마우스의 횡격막 및 심장에서 단지 산발적으로 검출되었지만, 8주 후에는 더 이상 측정가능하지 않았다 (도 10e-10f). 이들 데이터는 Dmd 엑손 스킵핑에 대한 관찰을 확증하고, 올리고뉴클레오티드를 위한 전달 플랫폼으로서의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 우수성을 지지한다.
항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체로의 처리는 근육 내의 디스트로핀-양성 근섬유를 증가시킨다
골격 및 심장 근육에서의 그의 기능적 함요인 근육속막으로의 디스트로핀 국재화를 평가하기 위해, 근육 단면을 항-디스트로핀 및 항-라미닌 항체를 사용하여 면역형광 현미경사진에 의해 가시화하였다. 라미닌은 근육속막 바로 외부에 국재화된 큰 당단백질이며 (32), 라미닌 염색은 근육 근섬유를 묘사하고 퍼센트 디스트로핀-양성 근섬유의 계산을 가능하게 하는 데 통상적으로 사용된다 (33). 엑손 스킵핑 및 디스트로핀 회복이 유도된 동일한 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체-처리된 마우스에서, 디스트로핀이 사두근 내의 근육속막에 국재화되었으며, 디스트로핀-양성 섬유의 용량-의존성 증가는 12주까지 지속적이었다 (도 11a; 도 15는 8주에 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드 군에 대해 정량화된 개별 필드를 나타냄). 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량은 사두근에서 4, 8 및 12주에 각각 68%, 83% 및 45% 디스트로핀-양성 섬유를 생성하였다 (도 11b). 유사하게, 디스트로핀은 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량의 투여 4 및 8주 후에 횡격막 (도 11c) 및 심장 (도 11d)의 근육속막에 고도로 국재화되었다. 주목할 만하게, 횡격막의 근섬유의 길이를 따라 근육속막에 국재화된 디스트로핀은 디스트로핀 회복이 국부 사건이 아니라 근섬유 전체까지 확장되었다는 것을 나타냈다 (도 12).
항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량은 mdx 마우스에서 선택된 기능적 결과를 개선시키지만, 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드는 그렇지 않다
항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 근육 손상을 감소시키는 그의 능력에 있어서 그의 비접합된 엑손-스킵핑 올리고뉴클레오티드보다 우수한지 여부를 결정하기 위해, mdx 마우스에게 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량 또는 30 mg/kg 용량의 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드를 주사하였다. CK 수준을 주사 2주 또는 4주 후에 측정하고, 비히클로 처리된 야생형 또는 mdx 마우스에서의 CK 수준과 비교하였다. mdx 마우스의 손상된 근육속막과 일치하게, 이들 마우스에서 혈청 CK 수준은 이들의 야생형 대응물과 비교하여 더 높았다 (도 13a). 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량은 비히클-처리된 mdx 마우스와 비교하여 투여 2주 및 4주 후 둘 다에서 mdx 마우스에서의 혈청 CK를 저하시켰지만, 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드는 그렇지 않았다 (p < 0.0001). 투여 4주 후에, 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체로 처리된 mdx 마우스에서의 혈청 CK 수준은 비히클-처리된 야생형 마우스에서의 수준과 유사하였으며, 이는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량 후 mdx 표현형의 교정을 나타낸다. 투여 4주 및 8주 후 유사한 관찰은 CK 혈청 수준을 감소시키는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 능력을 확인시켜 주었고, 효과가 용량-의존성이라는 것을 나타냈다 (도 16a-16b).
혈청 CK의 이영양증-연관 증가를 호전시키는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 능력이 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드와 비교하여 개선된 기능적 결과로 해석되는지 여부를 평가하기 위해, mdx 마우스 (군당 n = 10마리)에게 30 mg/kg 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드 또는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체를 제공하였으며; 연령-매칭되는 대조군 mdx 및 야생형 마우스 (군당 n = 10마리)에게 비히클을 주사하였다. 자발적 러닝 휠 및 뒷다리 피로 챌린지 후 오픈-필드 활동을 투여 2주 후 (처리군당 n = 10마리 마우스) 및 4주 후 (처리군당 n = 5마리 마우스)에 평가하였다.
투여 2주 후 자발적 러닝-휠 활동 시험에서, 암주기 (마우스의 활동 시간) 동안, 비히클로 처리된 mdx 마우스는 동일한 처리를 받은 야생형 마우스보다 유의하게 더 짧은 거리를 이동하였다 (p = 0.0022) (도 13b). 반대로, 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량으로 처리된 mdx 마우스는 비히클 단독으로 처리된 mdx 마우스보다 유의하게 더 많이 이동하였다 (p = 0.0135). 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체로 처리된 mdx 마우스가 이동한 거리는 비히클로 처리된 야생형 마우스가 이동한 거리와 유사하였으며, 이는 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 투여에 의한 mdx 표현형의 구출을 나타낸다. 추가로, 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드와 비교하여, 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체는 4주에 증가된 자발적 러닝 휠로 이어졌다 (도 17a).
오픈-필드 활동을 사용하여 러닝 휠 기능 측정을 보완하였다. 뒷다리 피로 챌린지가 없는 경우, 야생형 및 mdx 마우스 사이에서 이동한 총 거리의 유의한 차이가 없었다 (도 13c). mdx 마우스의 기능적 표현형을 악화시키기 위해 수행된 뒷다리 피로 챌린지 후에, 이동한 총 거리의 퍼센트 변화로서 분석 시, 야생형 마우스와 비교하여 mdx에서 오픈-필드 활동의 유의한 감소 (p < 0.0001)가 있었다 (도 13c). 뒷다리 챌린지 후 증가된 오픈-필드 활동을 향한 유의하진 않지만 양성인 경향이 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량으로 처리된 mdx 마우스에서 관찰되었지만, 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드로 처리된 마우스에서는 관찰되지 않았으며, 이는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 올리고뉴클레오티드의 근육 전달 및 활성을 증가시킨다는 것을 시사한다 (도 13c, 도 17b).
논의
올리고뉴클레오티드-유도된 엑손 스킵핑에 기초한 요법은 미국에서 엑손 51, 53 및 45의 스킵핑을 적용할 수 있는 돌연변이를 갖는 DMD를 갖는 환자의 치료를 위해 승인되었다 (12-15). 엑손 스킵핑 접근법이 DMD의 치료에서 큰 가망성을 보유하였지만, 승인된 요법은 디스트로핀 단백질 회복의 매우 제한된 증가 및 존재하더라도 미미한 기능적 이익을 제시하였다. 근육으로의 효율적인 전달을 달성하는 것은 임상적으로 효과적인 요법의 개발에 대해 극복할 수 없는 장애물로 남아있다 (17).
안티센스 올리고뉴클레오티드 전달은 화학적 변형, 대안적 화학적 백본의 사용 및 전달 모이어티, 예컨대 펩티드에 대한 접합에 의해 개선되었다 (34). 모르폴린 고리가 데옥시리보스 모이어티를 대체하고 포스포로디아미데이트 연결이 포스포디에스테르 서브유닛간 연결을 대체하는 PMO는 천연 DNA 또는 RNA와 비교하여 뉴클레아제 및 프로테아제 활성에 대해 더 안정하다 (35, 36). 그럼에도 불구하고, 큰 규모의 공개된 연구는 PMO의 심장 및 골격근 내로의 불량한 흡수로 인해 DMD에 대한 요법으로서의 단점을 밝혀냈다. 결과적으로, 단일 PMO 용량의 작용 지속기간은 짧고, 치료는 일관되지 않은 디스트로핀 단백질 회복에 의해 여전히 방해받고 있는 치료 효과를 달성하기 위해 높은 약물 투여량 및/또는 반복 투여를 필요로 한다 (36).
본 연구는 뮤린 TfR1에 결합하도록 설계된 Fab가 mdx 마우스에 대한 전신 투여 시 골격 및 심장 근육에 Dmd 엑손 23 스킵핑을 유도할 수 있는 올리고뉴클레오티드 (서열식별번호: 36의 핵염기 서열을 포함하는 PMO) (항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체)를 전달한다는 것을 입증한다. PMO 조직 농도는 단일 용량 후에 측정된 가장 이른 시점에서 피크를 달성하였고, 이어서 근접하게 엑손 23 스킵핑의 피크 수준이 존재하였다. 조직 노출 및 엑손 23 스킵핑 수준 둘 다는 최대 수준을 달성한 직후에 감소하였지만, 횡격막을 포함한 심장 및 골격근에서 투여 4주 및 8주 후에 높은 수준의 디스트로핀 단백질 회복이 관찰되었다. 이는 골격근에서의 디스트로핀의 비교적 긴 반감기와 일치한다. 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 투여는 등몰 용량의 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드보다 유의하게 더 많은 노출 및 더 큰 약리학적 효과를 유도하였다. 2가지 처리 사이의 모든 비교가 통계적 유의성을 달성하지는 않았지만, 이는 mdx 마우스에서의 개별 가변성으로 인한 것일 가능성이 있다. 더욱이, 비접합된 PMO 전달의 알려져 있는 한계와 일치하게, 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드는 심장 및 골격근 및 분자에서 뿐만 아니라 기능적 약리학적 반응에서도 일관되지 않은 한계 노출을 유도하였다.
사두근 절편의 면역형광 분석은 단백질 발현에 대한 관찰을 보완하였고, 디스트로핀이 그의 생리학적 작용 부위인 근육속막에 국재화된다는 것을 밝혀냈으며, 이는 단축된 디스트로핀이 기능적으로 이상없다는 것을 나타낸다. 중요하게는, 관찰이 사실상 정성적이긴 하였지만, 풍부한 수준의 디스트로핀이 횡격막 및 심장 절편에서 세포 막에 국재화되었다. 흥미롭게도, 사두근과 달리, 횡격막 및 심장에서의 총 디스트로핀 회복은 투여 후 8주까지 급속하게 감소하는 것으로 보인다. 이러한 관찰은 횡격막 및 심장 둘 다에서의 일정한 수축의 지속적인 기계적 응력으로 인한 것일 가능성이 있다. 종합하면, 이들 발견은 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 상당량의 PMO를 심장 및 골격근에 전달하고, 스킵핑된 전사체로부터 번역된 디스트로핀 단백질이 그의 생리학적 함요에 국재화됨에 따라 기능적으로 유능할 가능성이 있다는 것을 나타낸다.
항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량의 투여 후에 관찰된 근육속막에서의 디스트로핀 국재화의 정도 및 약역학적 반응의 지속기간은 막 완전성의 개선과 상관관계가 있었다. 추가적으로, 기능적 mdx 표현형의 교정과 조합된 혈청 CK 수준의 감소는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체로의 처리가 의미있는 양의 기능적 디스트로핀 단백질을 회복시켰다는 것을 시사한다. 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체는 비접합된 엑손 23-스킵핑 올리고뉴클레오티드로의 처리에 의해 달성된 보통의 효과와 비교하여 우수한 분자 및 표현형 교정을 유도하였으며, 이는 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 골격 및 심장 근육으로의 올리고뉴클레오티드 치료제의 전달을 증진시킨다는 개념을 확인시켜 준다. 이들 관찰에 기초하여, DMD 환자를 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체에 기초한 요법으로 치료하는 것은 비-근육 표적화 PMO의 주입으로 달성된 임상적 개선과 비교하여 우수한 이익을 유도할 수 있다.
현행 엑손 스킵핑 PMO 분자의 한계를 다루고 DMD를 위한 치료제로서의 그의 잠재력을 개선시키기 위해, 세포-침투 펩티드 (PPMO)에 대한 접합 전략이 구현되었다. 다수의 시험관내 및 생체내 보고로부터의 발견은 PPMO가 세포 내로의 개선된 내재화, 표적 조직으로의 전신 전달의 효율, 지속적인 디스트로핀 생산 및 비접합된 PMO와 비교하여 더 낮은 용량에서 증진된 효력을 나타낸다는 것을 입증하였다 (36). 문헌 [Gao et al.] (39)은 3주 동안 1주에 1회 25 mg/kg의 엑손 스킵핑 PPMO 또는 75 mg/kg의 단일 용량이 투여된 mdx 마우스가 마지막 용량 2주 후에 골격근에서 효과적인 엑손 스킵핑 및 디스트로핀 발현을 나타냈지만, 심장에서는 그렇지 않았다고 보고하였다. 상이한 보고에서, PMO-내재화 펩티드 (Pip6-PMO)를 사용하여, 문헌 [Betts et al.] (40)은 mdx 마우스의 심장에서의 엑손 스킵핑 및 디스트로핀 발현을 보고하였다. 10 mg/kg의 단일 용량 후에 보통의 디스트로핀 발현이 관찰되었기 때문에, Pip-PMO의 총 9회 용량으로의 보다 긴 치료 요법을 실시하여 횡격막 (77%) 및 TA (86%)에서 높은 수준의 엑손 23 스킵핑을 유발하였다. 그러나, 심장에 대한 효과는 보통이어서, 단지 32% 스킵핑 및 28% 디스트로핀 발현의 회복에 도달하였다. 따라서, PMO의 전신 전달이 펩티드 접합에 의해 크게 개선되었지만, 심장 조직에서의 효능은 도전과제로 남아있다. 대조적으로, mdx 마우스에서 30 mg/kg 올리고뉴클레오티드와 등가인 용량의 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량은 투여 4주 후에 심장에서 40% 엑손 스킵핑 및 77% 디스트로핀 단백질 발현 피크를 생성하였다. 이들 관찰은 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 심장 조직에 PMO 페이로드의 치료 수준을 전달하는 높은 잠재력을 갖는다는 것을 시사한다.
PPMO 접합은 근육으로의 전달을 증가시킬 수 있지만, 펩티드 모이어티는 간 및 신장과 같은 기관에서 알려진 안전성 문제를 가지며, 이는 잠재적으로 펩티드의 양이온성 성질에 의해 유도될 가능성이 있는 독성 부작용으로 이어진다 (36). 다수의 추가의 인자, 예컨대 치료 지속기간, 투여량, 전신 투여 빈도 및 PPMO를 시험하는 데 사용된 동물 모델이 또한 관찰된 부작용에 기여할 수 있다. 따라서, 보다 낮은 용량을 사용하거나 또는 투여 사이의 보다 긴 간격을 허용하는 것은 이들 위험 중 일부를 완화시키는 것을 도울 수 있다 (36). 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량이 mdx 마우스에서 PPMO를 사용한 연구에서 관찰된 것과 유사한 수준의 스킵핑을 달성하였으며, 골격 및 심장 근육에서의 약리학적 효과가 12주까지 나타났다는 것을 주목하는 것이 중요하다. 보다 낮은 활성 용량 수준과 조합된 연장된 작용 지속기간은 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체가 세포-침투 펩티드에 의존하는 전달 메카니즘보다 더 넓은 치료 지수를 가질 수 있다는 개념을 지지한다.
그럼에도 불구하고, 이들 발견은 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체의 단일 용량이 비접합된 올리고뉴클레오티드를 활용하는 접근법과 비교하여 우수한 엑손 스킵핑 및 디스트로핀 발현, 뿐만 아니라 더 큰 근육 기능 개선을 제공한다는 것을 입증한다. 결론적으로, 항-TfR1 Fab-올리고뉴클레오티드 접합체는 생물학적 약물의 약리학적 특성을 올리고뉴클레오티드 요법의 특색과 조합하고, DMD를 갖는 환자를 위한 효과적이고 재-투여가능하며 적정가능한 치료를 제공할 잠재력을 갖는다.
참고문헌
Figure pct00070
Figure pct00071
Figure pct00072
Figure pct00073
추가의 실시양태
1. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 대상체에게 유효량의 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 80 mg을 제공하고, 여기서 항체는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하고, 여기서 올리고뉴클레오티드는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 뉴클레오티드 서열을 포함하고 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)인 방법.
2. 대상체에서 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 치료하는 방법으로서, 대상체에게 유효량의 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 80 mg을 제공하고, 여기서 항체는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하고, 여기서 올리고뉴클레오티드는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 뉴클레오티드 서열을 포함하고 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)인 방법.
3. 실시양태 1 또는 실시양태 2에 있어서, 각각의 복합체가 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00074
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 항-TfR1 항체를 포함하고;
각각의 복합체에서, n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 항체의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위인 방법.
4. 실시양태 1 또는 실시양태 2에 있어서, 각각의 복합체가 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00075
R2는 항-TfR1 항체를 포함하고;
각각의 복합체에서, n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 항체의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위인 방법.
5. 실시양태 1-4 중 어느 하나에 있어서, 항-TfR1 항체가 Fab 단편인 방법.
6. 실시양태 1-5 중 어느 하나에 있어서, 항-TfR1 항체가 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 방법.
7. 실시양태 1-6 중 어느 하나에 있어서, 항-TfR1 항체가 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 것인 방법.
8. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 10 mg 내지 50 mg을 제공하는 것인 방법.
9. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8-36 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 10-30 mg을 제공하는 것인 방법.
10. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3-52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5-40 mg을 제공하는 것인 방법.
11. 실시양태 1-10 중 어느 하나에 있어서, 조성물이 4주마다 1회 투여되는 것인 방법.
12. 실시양태 1-10 중 어느 하나에 있어서, 조성물이 8주마다 1회 투여되는 것인 방법.
13. 실시양태 1-10 중 어느 하나에 있어서, 조성물이 12주마다 1회 투여되는 것인 방법.
14. 실시양태 1-11 중 어느 하나에 있어서, 투여가 4주마다 1회이고, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8-12 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 10 mg을 제공하는 것인 방법.
15. 실시양태 1-11 중 어느 하나에 있어서, 투여가 4주마다 1회이고, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 24-36 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 30 mg을 제공하는 것인 방법.
16. 실시양태 1-11 중 어느 하나에 있어서, 투여가 4주마다 1회이고, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3-7 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5.03 mg을 제공하는 것인 방법.
17. 실시양태 1-11 중 어느 하나에 있어서, 투여가 4주마다 1회이고, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 7-13 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 10.06 mg을 제공하는 것인 방법.
18. 실시양태 1-11 중 어느 하나에 있어서, 투여가 4주마다 1회이고, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 16-26 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 20.13 mg을 제공하는 것인 방법.
19. 실시양태 1-11 중 어느 하나에 있어서, 투여가 4주마다 1회이고, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 31-52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 40.27 mg을 제공하는 것인 방법.
20. 실시양태 1-7 중 어느 하나에 있어서, 조성물이 대상체에게 처음 4주에 2주마다 1회 투여되고, 후속적으로 4주마다 1회 투여되는 것인 방법.
21. 실시양태 20에 있어서, 처음 4주 내의 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 24-36 mg을 제공하고, 임의로 여기서 처음 4주 내의 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 30 mg을 제공하는 것인 방법.
22. 실시양태 20에 있어서, 처음 4주 내의 처음 2회 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 총 24-36 mg을 제공하고, 임의로 여기서 처음 4주 내의 처음 2회 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 총 30 mg을 제공하는 것인 방법.
23. 실시양태 20-22 중 어느 하나에 있어서, 각각의 후속 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 24-36 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 후속 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 30 mg을 제공하는 것인 방법.
24. 실시양태 20에 있어서, 처음 4주 내의 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3-52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 처음 4주 내의 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5-40 mg을 제공하는 것인 방법.
25. 실시양태 20에 있어서, 처음 4주 내의 처음 2회 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 총 3-52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 처음 4주 내의 처음 2회 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 총 5-40 mg을 제공하는 것인 방법.
26. 실시양태 20, 24 및 25 중 어느 하나에 있어서, 각각의 후속 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3-52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 후속 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5-40 mg을 제공하는 것인 방법.
27. 실시양태 1-26 중 어느 하나에 있어서, 조성물이 수용액이고, 히스티딘 및 수크로스를 추가로 포함하는 것인 방법.
28. 실시양태 27에 있어서, 히스티딘이 수용액 중에 25 mM의 농도로 존재하고, 수크로스가 수용액 중에 10 w/v%의 농도로 존재하고, 수용액이 pH 6.0인 방법.
29. 실시양태 27 또는 실시양태 28에 있어서, 복합체가 조성물 중에 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도로 존재하는 것인 방법.
30. 실시양태 1-29 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 엑손 51 스킵핑을 적용할 수 있는 돌연변이를 포함하는 돌연변이된 디스트로핀 대립유전자를 갖는 것인 방법.
31. 실시양태 30에 있어서, 돌연변이된 디스트로핀 대립유전자가 엑손 51 내의 프레임시프트 돌연변이를 포함하는 것인 방법.
32. 실시양태 1-31 중 어느 하나에 있어서, 복합체가 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 것인 방법.
33. 실시양태 32에 있어서, 디스트로핀 단백질이 말단절단된 디스트로핀 단백질인 방법.
34. 실시양태 1-33 중 어느 하나에 있어서, 조성물의 투여가 대조군에 비해 대상체에서 1% 초과의 디스트로핀 단백질을 생성하는 것인 방법.
35. 실시양태 34에 있어서, 대조군이 건강한 대상체에서의 디스트로핀 단백질 수준인 방법.
36. 실시양태 34에 있어서, 대조군이 돌연변이된 디스트로핀 대립유전자를 갖지 않는 대상체, 임의로 여기서 프레임시프트 돌연변이를 갖는 돌연변이된 디스트로핀 대립유전자를 갖지 않는 대상체에서의 디스트로핀 단백질 수준인 방법.
37. 실시양태 1-36 중 어느 하나에 있어서, 조성물의 투여가 디스트로핀 양성 섬유의 수를 대상체의 근육 조직 샘플 내의 총 근육 섬유의 약 50%로 증가시키는 것인 방법.
38. 실시양태 1-37 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 인간 대상체이고, 임의로 여기서 인간 대상체가 2-60세인 방법.
39. 실시양태 1-38 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 4-16세인 인간 대상체인 방법.
40. 실시양태 1-37 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 설치류인 방법.
41. 실시양태 1-37 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 비-인간 영장류인 방법.
42. 실시양태 1-41 중 어느 하나에 있어서, 복합체가 전신으로 투여되고, 임의로 여기서 복합체가 주입에 의해 투여되는 것인 방법.
43. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 수용액 중 복합체를 포함하는 조성물의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00076
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 Fab를 포함하고;
각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 Fab의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 수용액은 pH 6.0이고, 25 mM 농도의 히스티딘, 10 w/v% 농도의 수크로스 및 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도의 복합체를 포함하고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg을 제공하고, 임의로 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 10 mg 내지 30 mg을 제공하는 것인 방법.
44. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 수용액 중 복합체를 포함하는 조성물의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00077
여기서 R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 Fab를 포함하고;
각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 Fab의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 수용액은 pH 6.0이고, 25 mM 농도의 히스티딘, 10 w/v% 농도의 수크로스 및 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도의 복합체를 포함하고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg을 제공하고, 임의로 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 10 mg 내지 30 mg을 제공하는 것인 방법.
45. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 수용액 중 복합체를 포함하는 조성물의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하고:
Figure pct00078
여기서 R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 Fab를 포함하고;
여기서 수용액은 pH 6.0이고, 25 mM 농도의 히스티딘, 10 w/v% 농도의 수크로스 및 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도의 복합체를 포함하고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 8 mg 내지 36 mg을 제공하고, 임의로 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 10 mg 내지 30 mg을 제공하는 것인 방법.
46. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 수용액 중 복합체를 포함하는 조성물의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00079
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 Fab를 포함하고;
각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 Fab의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 수용액은 pH 6.0이고, 25 mM 농도의 히스티딘, 10 w/v% 농도의 수크로스 및 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도의 복합체를 포함하고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg을 제공하는 것인 방법.
47. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 수용액 중 복합체를 포함하는 조성물의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00080
여기서 R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 Fab를 포함하고;
각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 Fab의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 수용액은 pH 6.0이고, 25 mM 농도의 히스티딘, 10 w/v% 농도의 수크로스 및 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도의 복합체를 포함하고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg을 제공하는 것인 방법.
48. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 수용액 중 복합체를 포함하는 조성물의 제제의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 구조를 포함하고:
Figure pct00081
여기서 R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 Fab를 포함하고;
여기서 수용액은 pH 6.0이고, 25 mM 농도의 히스티딘, 10 w/v% 농도의 수크로스 및 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도의 복합체를 포함하고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 3 mg 내지 52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 올리고뉴클레오티드 5 mg 내지 40 mg을 제공하는 것인 방법.
49. 실시양태 43-48 중 어느 하나에 있어서, 투여가 4주마다 1회, 8주마다 1회 또는 12주마다 1회인 방법.
50. 실시양태 43-49 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 갖는 것인 방법.
51. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하거나 또는 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 치료하는 방법으로서, 대상체에게 유효량의 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 5 mg 내지 120 mg을 제공하고, 여기서 항체는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하고, 여기서 올리고뉴클레오티드는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 뉴클레오티드 서열을 포함하고 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)인 방법.
52. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 복합체를 포함하는 조성물의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
Figure pct00082
여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 Fab를 포함하고;
각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 Fab의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 Fab 5 mg 내지 120 mg을 제공하는 것인 방법.
53. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 복합체를 포함하는 조성물의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하고, 여기서
각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
Figure pct00083
여기서 R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 Fab를 포함하고;
각각의 복합체에서 n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 Fab의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위이고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 Fab 5 mg 내지 120 mg을 제공하는 것인 방법.
54. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 방법으로서, 복합체를 포함하는 조성물의 유효량을 주입을 통해 투여하는 것을 포함하며, 여기서 각각의 복합체는 화학식 (Id)의 기를 포함하고:
Figure pct00084
여기서 R2는 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 항-TfR1 Fab를 포함하고;
여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 Fab 5 mg 내지 120 mg을 제공하는 것인 방법.
55. 실시양태 51-54 중 어느 하나에 있어서, 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 Fab 10 mg 내지 90 mg을 제공하고, 임의로 여기서 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 Fab 11 mg, 22 mg, 44 mg 또는 88 mg을 제공하는 것인 방법.
56. 실시양태 51-54 중 어느 하나에 있어서, 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 Fab 10.93 mg, 21.85 mg, 43.71 mg, 65.56 mg 또는 87.42 mg을 제공하는 것인 방법.
57. 실시양태 51-54 중 어느 하나에 있어서, 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 Fab 10.93 mg, 21.86 mg, 43.72 mg, 65.56 mg 또는 87.43 mg을 제공하는 것인 방법.
58. 실시양태 51-57 중 어느 하나에 있어서, 조성물이 pH 6.0이고 25 mM 농도의 히스티딘, 10 w/v% 농도의 수크로스 및 10 mg/mL 내지 50 mg/mL 범위의 농도의 복합체를 포함하는 수용액의 제제인 방법.
59. 실시양태 51-58 중 어느 하나에 있어서, 대상체에게 제제가 4주마다 1회, 8주마다 1회 또는 12주마다 1회 투여되고, 임의로 여기서 대상체에게 제제가 4주마다 1회 투여되는 것인 방법.
60. 실시양태 51-59 중 어느 하나에 있어서, 대상체가 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 갖는 것인 방법.
등가물 및 용어
본원에 예시적으로 기재된 본 개시내용은 본원에 구체적으로 개시되지 않은 임의의 요소 또는 요소들, 제한 또는 제한들의 부재 하에 적합하게 실시될 수 있다. 따라서, 예를 들어 본원의 각각의 경우에서, 용어 "포함하는", "로 본질적으로 이루어진" 및 "로 이루어진" 중 임의의 용어는 다른 두 용어 중 어느 하나로 대체될 수 있다. 사용된 용어 및 표현은 제한이 아닌 설명의 용어로서 사용되었으며, 이러한 용어 및 표현의 사용에 있어서 제시 및 기재된 특색 또는 그의 부분의 임의의 등가물을 배제하려는 의도는 없지만, 본 개시내용의 범주 내에서 다양한 변형이 가능하다는 것이 인식된다. 따라서, 본 개시내용이 바람직한 실시양태에 의해 구체적으로 개시되었지만, 본원에 개시된 개념의 임의적인 특색, 변형 및 변경이 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 재분류될 수 있고, 이러한 변형 및 변경이 본 개시내용의 범주 내에 있는 것으로 간주된다고 이해될 것이다.
추가로, 본 개시내용의 특색 또는 측면이 마쿠쉬 군 또는 다른 대안적 군의 면에서 기재되는 경우에, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 본 개시내용이 또한 마쿠쉬 군 또는 다른 군의 임의의 개별 구성원 또는 구성원의 하위군의 면에서 기재된다는 것을 인식할 것이다.
일부 실시양태에서, 서열 목록에 제시된 서열은 올리고뉴클레오티드 또는 다른 핵산의 구조를 기재하는 데 언급될 수 있다는 것이 인지될 것이다. 이러한 실시양태에서, 실제 올리고뉴클레오티드 또는 다른 핵산은 명시된 서열과 본질적으로 동일하거나 유사한 상보적 특성을 보유하면서 명시된 서열과 비교하여 1개 이상의 대안적 뉴클레오티드 (예를 들어, DNA 뉴클레오티드의 RNA 대응부 또는 RNA 뉴클레오티드의 DNA 대응부) 및/또는 (예를 들어, 및) 1개 이상의 변형된 뉴클레오티드 및/또는 (예를 들어, 및) 1개 이상의 변형된 뉴클레오티드간 연결 및/또는 (예를 들어, 및) 1개 이상의 다른 변형을 가질 수 있다.
본 발명을 기재하는 문맥에서 (특히 하기 청구범위의 문맥에서) 단수 용어 및 유사한 지시대상의 사용은 본원에 달리 나타내지 않는 한 또는 문맥에 의해 명확하게 모순되지 않는 한, 단수 및 복수 둘 다를 포괄하는 것으로 해석될 것이다. 용어 "포함하는", "갖는", "포함한" 및 "함유하는"은 달리 나타내지 않는 한 개방형 용어 (즉, "포함하나 이에 제한되지는 않음"을 의미함)로서 해석될 것이다. 본원에서 값의 범위에 대한 언급은 본원에 달리 나타내지 않는 한, 단지 상기 범위 내에 속하는 각각의 개별 값을 개별적으로 지칭하는 약칭 방법으로서 제공되는 것으로 의도되고, 각각의 개별 값은 본원에 개별적으로 열거된 것처럼 본 명세서에 포함된다. 본원에 기재된 모든 방법은 본원에 달리 나타내지 않는 한 또는 문맥에 의해 달리 명확하게 모순되지 않는 한 임의의 적합한 순서로 수행될 수 있다. 본원에 제공된 임의의 및 모든 예 또는 예시적인 어휘 (예를 들어, "예컨대")의 사용은 단지 본 발명을 보다 잘 예시하는 것으로 의도되며, 달리 청구되지 않는 한 본 발명의 범주에 대한 제한을 부과하지 않는다. 본 명세서의 어떠한 어휘도 임의의 청구되지 않은 요소가 본 발명의 실시에 필수적인 것임을 나타내는 것으로 해석되어서는 안된다.
본 발명의 실시양태가 본원에 기재된다. 이들 실시양태의 변경은 상기 설명을 읽으면 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 분명해질 수 있다.
본 발명자들은 통상의 기술자가 이러한 변경을 적절하게 사용할 것으로 예상하고, 본 발명자들은 본 발명이 본원에 구체적으로 기재된 것과 달리 실시되는 것을 의도한다. 따라서, 본 발명은 적용가능한 법에 의해 허용되는 바와 같은 본원에 첨부된 청구범위에 언급된 대상의 모든 변형 및 등가물을 포함한다. 더욱이, 모든 가능한 변경에서 상기 기재된 요소들의 임의의 조합은 본원에 달리 나타내지 않는 한 또는 문맥에 의해 달리 명확하게 모순되지 않는 한 본 발명에 의해 포괄된다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 단지 상용에 지나지 않는 실험을 사용하여, 본원에 기재된 본 발명의 구체적 실시양태에 대한 많은 등가물을 인식하거나 확인할 수 있을 것이다. 이러한 등가물은 하기 청구범위에 포괄되는 것으로 의도된다.

Claims (22)

  1. 대상체에서 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하거나 또는 뒤시엔느 근육 이영양증 (DMD)을 치료하는 방법으로서, 대상체에게 유효량의 복합체를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하고, 각각의 복합체는 1개 이상의 올리고뉴클레오티드에 공유 연결된 항-트랜스페린 수용체 1 (TfR1) 항체를 포함하며, 여기서 유효량은 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 1 mg 내지 90 mg을 제공하고, 여기서 항체는 서열식별번호: 1, 7 또는 12에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-H1), 서열식별번호: 2, 8 또는 13에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-H2), 서열식별번호: 3, 9 또는 14에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 중쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-H3), 서열식별번호: 4, 10 또는 15에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 1 (CDR-L1), 서열식별번호: 5 또는 11에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 2 (CDR-L2) 및 서열식별번호: 6 또는 16에 제시된 바와 같은 서열을 포함하는 경쇄 상보성 결정 영역 3 (CDR-L3)을 포함하고, 여기서 올리고뉴클레오티드는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 뉴클레오티드 서열을 포함하고 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)인 방법.
  2. 제1항에 있어서, 각각의 복합체가 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서
    각각의 R1은 화학식 (Ib)의 기를 포함하고:
    Figure pct00085

    여기서 -pN은 포스포로디아미데이트 모르폴리노 올리고머 (PMO)의 염기 위치를 나타내고, 여기서 -p는 포스포로디아미데이트 연결을 반영하고 N은 아데닌 (A), 시토신 (C), 구아닌 (G) 또는 티민 (T)의 핵염기에 상응하여, PMO는 CTCCAACATCAAGGAAGATGGCATTTCTAG (서열식별번호: 21)의 염기 서열을 갖고;
    R2는 항-TfR1 항체를 포함하고;
    각각의 복합체에서, n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 항체의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위인 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 각각의 복합체가 화학식 (I): [R1]n1-R2의 구조를 포함하며, 여기서
    각각의 R1은 화학식 (Ic)의 기를 포함하고:
    Figure pct00086

    R2는 항-TfR1 항체를 포함하고;
    각각의 복합체에서, n1은 독립적으로 R1의 경우의 개수를 나타내는 1 이상의 정수이고, 여기서 각각의 경우의 R1은 부착 지점 A를 통해 항-TfR1 항체의 상이한 리신에 공유 연결되고, 임의로 여기서 조성물의 복합체의 n1의 평균 값은 1 내지 5의 범위인 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 항-TfR1 항체가 Fab 단편인 방법.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 항-TfR1 항체가 서열식별번호: 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 (VH) 및 서열식별번호: 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역 (VL)을 포함하는 것인 방법.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 항-TfR1 항체가 서열식별번호: 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열식별번호: 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함하는 것인 방법.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 1-8 mg을 제공하는 것인 방법.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 1-2 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 1.5 mg을 제공하는 것인 방법.
  9. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 2-4 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 3 mg을 제공하는 것인 방법.
  10. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 4-8 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 6 mg을 제공하는 것인 방법.
  11. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 3-52 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 5-40 mg을 제공하는 것인 방법.
  12. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 7-15 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 11 mg을 제공하는 것인 방법.
  13. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 15-30 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 22 mg을 제공하는 것인 방법.
  14. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 30-59 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 44 mg을 제공하는 것인 방법.
  15. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 61-117 mg을 제공하고, 임의로 여기서 각각의 투여의 유효량이 대상체에게 대상체 kg당 복합체의 항-TfR1 항체 88 mg을 제공하는 것인 방법.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 2주마다 1회, 4주마다 1회, 8주마다 1회 또는 12주마다 1회 투여되는 것인 방법.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 4주마다 1회 투여되는 것인 방법.
  18. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 8주마다 1회 투여되는 것인 방법.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 수용액이고, 히스티딘 및 수크로스를 추가로 포함하며, 임의로 여기서 히스티딘이 수용액 중에 25 mM의 농도로 존재하고, 임의로 여기서 수크로스가 수용액 중에 10 w/v%의 농도로 존재하고, 임의로 여기서 수용액이 pH 6.0인 방법.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 엑손 51 스킵핑을 적용할 수 있는 돌연변이를 포함하는 돌연변이된 디스트로핀 대립유전자를 갖거나 또는 돌연변이된 디스트로핀 대립유전자가 엑손 51 내의 프레임시프트 돌연변이를 포함하는 것인 방법.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 복합체가 대상체에서 말단절단된 디스트로핀 단백질의 발현 또는 활성을 촉진하는 것인 방법.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체가 인간 대상체이고, 임의로 여기서 인간 대상체가 2-60세인 방법.
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