KR20230161114A - 갈락토시다아제를 포함하는 간질환 개선, 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

갈락토시다아제를 포함하는 간질환 개선, 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 갈락토시다아제를 유효성분으로 하는 간질환 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것으로, 간세포모델에서 실리마린에 비해 우수한 지방축적 억제 효과를 나타내었을 뿐만 아니라, 지방간에 의해 유도되는 염증반응을 유의적으로 억제하였으므로, 본 발명의 조성물은 간질환 특히 비알콜성 지방간질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 식품, 의약품, 건강기능식품 소재에 매우 유용하게 사용될 수 있다.

Description

갈락토시다아제를 포함하는 간질환 개선, 예방 또는 치료용 조성물{Composition For Improving, Preventing Or Treating Liver Diseases Using Galactosidase}
본 발명은 갈락토시다아제를 유효성분으로 하는 간질환 예방 또는 치료용 약학 조성물, 그를 이용한 간질환 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
간 질환의 다양한 패턴과 병의 진행에 있어서 임상적으로 환자의 경과에 가장 중요한 단계는 간 섬유화(fibrosis)나 간경화(cirrhosis)의 발생을 억제하거나, 간경화가 이미 시작된 경우에는 그 진행을 억제하는 것이다. 따라서 간장 질환의 치료를 연구하는 수많은 연구자들은 간경변의 예방 또는 치료제의 개발에 노력을 기울여 왔다.
지방간은 간세포 속에 지방이 축적된 상태를 말하며, 정상 간은 지방이 차지하는 비율은 5% 정도인데, 이보다 많은 지방이 축적된 상태를 지방간이라고 한다. 지방간이 악화되어 간세포 속의 지방 덩어리가 커지면 핵을 포함한 세포의 중요한 구성성분이 한쪽으로 밀려 간세포의 기능이 저하되며, 세포 내에 축적된 지방으로 인하여 팽창된 간세포들이 간세포 사이에 있는 미세 혈관과 임파선을 압박하여 간 내의 혈액과 임파액의 순환에 장애가 생기게 된다. 이렇게 되면 간세포는 산소와 영양공급을 적절히 받을 수 없어 간기능이 저하된다.
지방간은 알코올성 지방간과 비알코올성 지방간으로 나눌 수 있다. 알코올성 지방간은 술이 원인이다. 술을 많이 마실수록 잘 발생하며, 지속적으로 술을 섭취하면 간에서 알코올을 대사하는 능력이 떨어져 지방간 발생이 더 심해진다. 또 영양상태가 나쁜 경우에도 잘 발생한다. 알코올성 지방간 중 일부는 알코올성 간염과 간경변으로 진행되어 사망할 수 있다.
비알코올성 지방간은 술 또는 바이러스 감염과 상관없이 간 내 지방축적이 증가한 경우로(간세포의 5% 초과), 간에서 지방 합성 증가 및 배출의 문제로 발생한다. 유리지방산(fatty acid)의 투입(input)과 배출(output)의 불균형에 의해 유발되는 비알코올성 지방간 환자의 약 59%는 외부로부터 유리지방산의 흡수 증가에 의해 발생하고, 약 26% 환자는 간 내 지방 생합성의 증가에 따른 유리지방산의 투입(input) 증가를 원인으로 유발되는 것으로 알려져 있다.
지방간의 원인과 심각성이 밝혀졌지만, 식이 조절과 운동을 통하여 증상을 개선해야 하는 지방간 환자가 이를 실천하지 못하는 경우가 많고, 비알코올성 지방간 질환이 의심되거나 또는 이를 보유한 환자를 위한 확립된 완화 또는 치료제 등이 부재한 실정이다. 특히, 일반적으로 비알코올성 지방간 질환을 겪는 환자의 경우 체중 감량이 통상적인 처방이나 비만 환자들은 좀처럼 유의한 체중 감소를 위한 생활습관의 대대적 개선이 어렵기 때문에, 비알코올성 지방간 질환에 대한 방안으로 체중 감량만을 제시하는 하는 것은 바람직하지 못하다.
따라서 식이 조절과 운동 이외의 실질적인 지방간 치료를 위해서, 특히 비알코올성 지방간 치료를 위해서 지방간 치료 약물의 개발 필요성이 요구되고 있다.
특허문헌 1. 대한민국 공개특허공보 제10-2019-0051706호
본 발명의 목적은 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 함유하는 간질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는데 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 함유하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는데 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 함유하는 간질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
상기 간질환은 간 섬유증, 간 경화, 비알코올성 지방간질환(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD) 및 알코올성 지방간질환(Alcoholic liver disease)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것일 수 있다.
상기 비알코올성 지방간질환은 비알코올성 단순 지방간 또는 비알코올성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)일 수 있다.
상기 조성물에서 갈락토시다아제(galactosidase)의 농도는 16 U/㎖ 내지 100 U/㎖일 수 있다.
상기 갈락토시다아제는 베타-갈락토시다아제(β-galactosidase)일 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 함유하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 간질환은 간 섬유증, 간 경화, 비알코올성 지방간질환(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD) 및 알코올성 지방간질환(Alcoholic liver disease)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.
상기 비알코올성 지방간질환은 비알코올성 단순 지방간 또는 비알코올성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)일 수 있다.
상기 조성물에서 갈락토시다아제(galactosidase)의 농도는 16 U/㎖ 내지 100 U/㎖일 수 있다.
상기 갈락토시다아제는 베타-갈락토시다아제(β-galactosidase)일 수 있다.
본 발명은 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 함유하는 간질환 예방 또는 치료용 약학 조성물, 이를 포함하는 간질환 예방 또는 개선용 식품 조성물, 및 이를 이용한 간질환의 치료방법으로 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 갈락토시다아제(galactosidase)는 간세포모델에서 실리마린에 비해 우수한 지방축적 억제 효과를 나타내었을 뿐만 아니라, 지방간에 의해 유도되는 염증반응을 유의적으로 억제하였으므로, 본 발명의 조성물은 간질환 특히 비알콜성 지방간질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 식품, 의약품, 건강기능식품 소재에 매우 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 유산균 유래 효소 12종을 처리한 비알코올성 지방간 세포모델에 대한 지방축적 억제 효능을 분석한 결과 그래프이다.
도 2는 HepG2 세포에 대한 농도별 갈락토시다아제(galactosidase)의 세포 독성을 나타낸 결과 그래프이다.
도 3은 농도별 활성 갈락토시다아제(active galactosidase)와 불활성 갈락토시다아제(inactivative galactosidase)를 처리한 비알코올성 지방간 세포모델에 대한 지방축적 억제 효능을 분석한 결과 그래프이다.
도 4는 농도별 갈락토시다아제(galactosidase)를 처리한 비알코올성 지방간 세포모델에 대한 MDA 함량을 분석한 결과 그래프이다.
도 5는 농도별 갈락토시다아제(galactosidase)를 처리한 비알코올성 지방간 세포모델에 대한 GSH 함량을 분석한 결과 그래프이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 함유하는 간질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 함유하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 사용되는 갈락토시다아제는 알파-갈락토시다아제(α-galactosidase), 베타-갈락토시다아제(β-galactosidase) 및 이들의 혼합물일 수 있으며, 바람직하게는 베타-갈락토시다아제 단독일 수 있다. 상기 베티-갈락토시다아제는 유당을 가수분해하는 효소의 일종으로, 오탄당에 속하는 유당을 가수분해시키는 효소를 일컫는다. β-갈락토시드를 가수분해하여 갈락토오스를 만든다.
본 발명의 베타-갈락토시다아제는 천연으로부터 유래될 수도 있고, 당해 분야에서 널리 공지된 다양한 단백질 합성 방법으로 획득한 것일 수 있다. 일례로서, 폴리뉴클레오티드 재조합과 단백질 발현 시스템을 이용하여 제조하거나 단백질 합성과 같은 화학적 합성을 통하여 시험관 내에서 합성하는 방법 및 무세포 단백질 합성법 등으로 제조될 수 있다. 또한, 일례로서, 상기 베타-갈락토시다아제는 펩티드, 식물 유래 조직이나 세포의 추출물, 미생물(예를 들어 세균류 또는 진균류, 그리고 특히 효모)의 배양으로 얻어진 생산물일 수 있다. 본 발명의 베타-갈락토시다아제의 효소 명명 클래스 EC 3.2.1.23의 효소일 수 있다.
본 발명에 따른 유산균 유래 효소들 중 하나인 갈락토시다아제는, 지방산과 CML(Nε-(carboxymethyl)lysine)의 투여에 의해 비알코올성 지방간이 유도된 세포로부터 지방축적을 억제하고, 지방간에 동반되는 염증반응을 억제하며, 지질 과산화와 관련된 지질과산화하 대사산물인 MDA 증가를 억제하고, 간장내의 항상화 기전에서 가장 주요한 역할을 담당하는 GSH의 감소를 보호할 수 있다. 따라서 본 발명에 따른 갈락토시다아제는 간세포 예방적 보호 작용이 있고, 지방간의 개선, 예방 또는 치료를 위한 소재로서 유용하다. 또한 본 발명에 따른 갈락토시다아제는 지방간과 동반되는 염증반응을 억제시킬 수 있으므로, 비알코올성 지방간염(NASH)과 같은 비알코올성 지방간질환(NAFLD)의 개선, 예방 또는 치료를 위한 소재로서 유용하다.
본 발명의 갈락토시다아제(galactosidase)는 광의로는 갈락토시다아제(galactosidase)를 동물에게 투여할 수 있도록 제형화된 가공물, 예컨대, 분말 형태도 포함하는 의미를 갖는다. 비록 본 발명에서 액상의 갈락토시다아제(galactosidase)로 실험을 진행하긴 하였으나, 갈락토시다아제(galactosidase) 가공물과 같은 형태로도 목적하는 효과를 달성할 수 있음은 당업자라면 예상가능할 것이다.
한편, 본 명세서에서 용어 '유효성분으로 함유하는'이란 갈락토시다아제(galactosidase)의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 일예로, 상기 갈락토시다아제(galactosidase)는 0.1 내지 1000 U/㎖, 바람직하게는 1 내지 500 U/㎖, 보다 바람직하게는 5 내지 500 U/㎖, 보다 더 바람직하게는 8 내지 500 U/㎖, 더욱 바람직하게는 10 내지 500 U/㎖, 더더욱 바람직하게는 16 내지 500 U/㎖, 가장 바람직하게는 16 내지 100 U/㎖의 농도로 사용된다. 갈락토시다아제(galactosidase)는 천연물로서 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없으므로 본 발명의 조성물 내에 포함되는 갈락토시다아제(galactosidase)의 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다. 상기 갈락토시다아제의 범위 내에서 간질환 특히 비알코올성 지방간에 대한 우수한 개선, 예방 또는 치효 효율이 우수할 수 있으며, 가장 바람직하게는 16 U/㎖ 내지 100 U/㎖인 경우 지방간에 의해 유도되는 지방축적 억제 효과 뿐만 아니라 염증 반응에도 유의적으로 우수한 효과를 달성할 수 있다.
본 발명의 '간 질환'은, 간 섬유증, 간 경화, 비알코올성 지방간질환 (non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD) 및 알코올성 지방간질환(Alcoholic liver disease)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 비알코올성 지방간질환일 수 있다.
상기 비알코올성 지방간질환은 비알코올성 단순 지방간(simple steatosis) 또는 비알코올성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)일 수 있다. 상기 알코올성 지방간질환은 알코올성 지방간 또는 알코올성 간염 또는 알코올성 간 경변일 수 있다.
본 발명의 '비알코올성 지방간질환(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)'은, 음주와 관계없이 간 내에 중성지방이 축적되는 질환을 의미한다. 비알코올성 지방간 질환의 위험인자로는 비만, 당뇨병, 고지혈증이 대표적이고, 단백질-칼로리 결핍, 몸무게를 갑자기 감량하는 경우나 정맥주사로 전체 영양을 취하는 경우에도 발병할 수 있다고 알려져 있다. 비알코올성 지방간질환에는 단순 지방간(simple steatosis), 비알코올성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis, NASH) 및 간 경변을 포함된다. 단순 지방간은 임상적으로 예후가 양호한 양성 질환임에 반하여, 비알코올성 지방간염은 지방간과 함께 염증 또는 섬유화를 동반하는 것을 특징으로 하는 진행성 간 질환으로 간 경변이나 간암으로 진행될 수 있다.
상기 '식품 조성물'은 유효성분으로 갈락토시다아제(galactosidase) 이외에, 식품 제조에 통상적으로 사용되는 식품의 기준 및 규격('식품공전')에 기재된 식품으로 사용 가능한 식품 원료, 식품첨가물 공전에 기재된 식품첨가물을 포함한다.
특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상기 탄수화물은 단당류, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 이당류, 예를 들어 말토스, 설탕, 유당 등; 올리고당 또는 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 물엿, 사이클로덱스트린 등; 당알코올, 예를 들어 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등을 사용할 수 있다. 상기 향미제는 천연 향미제[타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.
상기 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 식품 조성물을 제조하는 경우 갈락토시다아제(galactosidase)는 간질환 개선, 예방 또는 치료 효능을 나타내는 함량이면 특별히 한정할 필요는 없으나, 예를 들어 0.1 내지 99 중량%, 0.5 내지 95 중량%, 1 내지 90 중량%, 2 내지 80 중량%, 3 내지 70 중량%, 4 내지 60 중량%, 5 내지 50 중량%로 포함될 수 있다.
상기 식품 조성물에서 유효성분인 갈락토시다아제(galactosidase)는 섭취자의 상태, 체중, 질병의 유무나 정도 및 기간에 따라 다르지만, 통상의 기술자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 예들 들어 1일 투여량을 기준으로 1 내지 5,000 mg, 바람직하게는 5 내지 2,000 mg, 더욱 바람직하게는 10 내지 1,000 mg, 더더욱 바람직하게는 20 내지 800 mg, 가장 바람직하게는 50 내지 500 mg일 수 있고, 투여 횟수는 특별히 한정할 필요는 없으나 1일 3회 내지 1주일에 1회의 범위 내에서 통상의 기술자가 조절할 수 있다. 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있다.
상기 식품 조성물은 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 환제, 엑스제, 젤리 제형, 티백 제형 또는 음료 제형일 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 위산 등의 환경으로부터 갈락토시다아제(galactosidase)의 활성을 보호하여, 안전하게 장 내로 도달할 수 있도록 장용성 폴리머를 추가로 포함 또는 코팅된 장용성 제제의 형태로 제공될 수 있다.
본 발명의 갈락토시다아제(galactosidase)는 효소활성에 의해 간질환 개선, 예방 또는 치료효능을 달성할 수 있으므로, 경구 투여시 안정하게 효소 활성을 유지한 채로 장내에 도달해야 원하는 효과를 충분히 얻을 수 있기 때문에 단독 또는 특정 형태로 제공시 장용성 폴리머로 코팅된 형태로 제공되는 것이 바람직하다.
상기 장용성 폴리머는 pH 5 이상에서 용해되는 장용성 고분자로, 위의 산성 환경으로부터 보호하는 장벽으로 작용함으로써 갈락토시다아제(galactosidase)가 소장에 도달하기 전에 활성을 잃거나 손상되지 않도록 실질적으로 보호할 수 있다.
상기 장용성 폴리머는 메타크릴산-메타크릴산메틸에스테르 공중합체, 메타크릴산-아크릴산에틸에스테르 공중합체 등의 아크릴산계 공중합체, 또는 히드록시프로필메틸셀룰로오스프탈레이트, 셀루로오스아세테이트프탈레이트 등의 셀룰로오스프탈산 유도체일 수 있다.
또한, 상기 장용성 폴리머는 조성물 전체 중량을 기준으로(100 중량부) 5 내지 25 중량부, 바람직하게는 10 내지 15 중량부이며, 5 중량부 미만이면 전체적으로 코팅하기 어렵고 25 중량부를 초과하면 균일한 코팅을 기대하기 어렵고 코팅액 분사시 분무 건조기의 노즐이 막혀버릴 수 있다.
상기와 같은 제조방법에 의해 제조된 본 발명의 장용성 약제는 유효성분인 갈락토시다아제(galactosidase)를 지질에 내포시킴으로써 장(腸)내에서 지속적으로 방출하도록 하였고, 장용성 약제 투여후의 유효성분 용출성이 우수하여 지속적인 약효를 발휘할 수 있도록 하였으며, 또한 장용코팅에 의해 산(acid)에 안정하여 위산(胃酸)에 의해 쉽게 분해되지 않는 특성이 있다.
또한 일반 식품에 간질환 개선, 예방 또는 치료 기능성을 부여하기 위하여 상기 갈락토시다아제(galactosidase)를 첨가할 수 있으며, 첨가가 가능한 식품은, 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어 식품위생법 제7조에 따른 식품의 기준 및 규격('식품공전')에 예시된 과자류, 빵 또는 떡류, 코코아가공품류 또는 초콜릿류, 식육 또는 알가공품, 어육가공품, 두부류 또는 묵류, 면류, 다류, 커피, 음료류, 특수용도식품, 장류, 조미식품, 드레싱류, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품, 주류, 건포류, 기타 식품류 등에 첨가될 수 있다. 또한 축산물위생관리법 제4조에 따른 축산물의 가공기준 및 성분규격('축산물공전')에 예시된 유가공품, 식육가공품 및 포장육, 알가공품에 첨가될 수 있다.
한편 상기 갈락토시다아제(galactosidase)는 지방축적을 억제하고, 지방간에 의해 유도된 염증반응을 감소시키므로, 상기 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 하는 식품 조성물은 단독으로 "간 건강에 도움을 주는 건강기능식품"으로 이용될 수 있다.
상기 '건강기능식품'은 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 법적 기준에 따라 제조(가공을 포함)한 식품(건강기능식품에 관한 법률 제3조 제1호)을 말한다. 상기 '건강기능식품'은 국가마다 용어나 범위에 차이가 있을 수 있으나, 미국의 '식이 보충제(Dietary Supplement)', 유럽의 '식품 보충제(Food Supplemnet)', 일본의 '보건기능식품' 또는 '특정보건용식품(Food for Special Health Use, FoSHU)', 중국의 '보건식품' 등에 해당할 수 있다.
상기 식품 조성물 또는 건강기능식품은 식품첨가물을 추가로 포함할 수 있으며, 식품첨가물로서의 적합여부는 다른 규정이 없는 한 '식품첨가물공전'의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 따른다.
또한 상기 건강기능식품에는 상기 갈락토시다아제(galactosidase)와 함께 "간 건강에 도움을 주는 건강기능식품"에 사용되는 '기능성 원료'로 고시된 원료 또는 개별인정된 원료로서, 밀크씨슬(카르두스 마리아누스) 추출물, HK표고버섯균사체, 곰피추출물, 댕댕이나무열매추출분말, 도라지추출물, 복분자추출분말, 유산균 발효 다시마추출물, 유산균발효다시마추출물, 유산균발효마늘추출물, 표고버섯균사체추출물, 헛개나무과병추출분말의 간 건강과 관련된 건강기능식품 소재를 복합하여 사용할 수 있다.
상기 '약학 조성물'은 상기 유효성분인 갈락토시다아제(galactosidase) 이외에, 약학 조성물 등의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
상기 '담체'는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물이다. 상기 '희석제'는 대상 화합물의 생물학적 활성 형태를 안정화시킬 뿐만 아니라, 화합물을 용해시키게 되는 물에서 희석되는 화합물이다.
상기 담체, 부형제 및 희석제로는 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어, 유당, 포도당, 설탕, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다.
더 나아가 해당분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
상기 약학 조성물의 사용량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 무엇보다도, 치료대상 개체의 상태, 치료 대상 질환의 특정한 카테고리 또는 종류, 투여 경로, 사용되는 치료제의 속성에 의존적일 것이다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여이다.
상기 약학 조성물은 체내에서 활성성분의 흡수도, 배설속도, 환자 또는 치료대상 동물의 연령 및 체중, 성별 및 상태, 치료할 질병의 중증정도 등에 따라 적절히 선택되나, 일반적으로 1일 0.1 내지 1,000mg/kg, 바람직하게는 1 내지 500mg/kg, 더욱 바람직하게는 5 내지 250mg/kg, 가장 바람직하게는 10 내지 100mg/kg으로 투여하는 것이 바람직하다. 이렇게 제형화 된 단위 투여형 제제는 필요에 따라 일정시간 간격으로 수회 투여할 수 있다.
상기 약학 조성물은 개별적으로 예방제 또는 치료제로서 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다.
상기 약학조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 트로키제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형, 그리고 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등의 비경구 제형으로 제형화하여 사용될 수 있다.
제형화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 갈락토시다아제(galactosidase)에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트, 설탕 또는 유당, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌 글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 위산 등의 환경으로부터 갈락토시다아제(galactosidase)의 활성을 보호하여, 안전하게 장 내로 도달할 수 있도록 장용성 폴리머를 추가로 포함 또는 코팅된 장용성 제제의 형태로 제공될 수 있다.
본 발명의 갈락토시다아제(galactosidase)는 효소활성에 의해 간질환 개선, 예방 또는 치료효능을 달성할 수 있으므로, 경구 투여시 안정하게 효소 활성을 유지한 채로 장내에 도달해야 원하는 효과를 충분히 얻을 수 있기 때문에 단독 또는 특정 형태로 제공시 장용성 폴리머로 코팅된 형태로 제공되는 것이 바람직하다.
상기 장용성 폴리머는 pH 5 이상에서 용해되는 장용성 고분자로, 위의 산성 환경으로부터 보호하는 장벽으로 작용함으로써 갈락토시다아제(galactosidase)가 소장에 도달하기 전에 활성을 잃거나 손상되지 않도록 실질적으로 보호할 수 있다.
상기 장용성 폴리머는 메타크릴산-메타크릴산메틸에스테르 공중합체, 메타크릴산-아크릴산에틸에스테르 공중합체 등의 아크릴산계 공중합체, 또는 히드록시프로필메틸셀룰로오스프탈레이트, 셀루로오스아세테이트프탈레이트 등의 셀룰로오스프탈산 유도체일 수 있다.
또한, 상기 장용성 폴리머는 조성물 전체 중량을 기준으로(100 중량부) 5 내지 25 중량부, 바람직하게는 10 내지 15 중량부이며, 5 중량부 미만이면 전체적으로 코팅하기 어렵고 25 중량부를 초과하면 균일한 코팅을 기대하기 어렵고 코팅액 분사시 분무 건조기의 노즐이 막혀버릴 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시하나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범주 및 기술사상 범위 내에서 다양한 변경 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연한 것이다.
실험재료
본 발명에서 사용한 갈락토시다아제를 비롯한 효소 12종(galactosidase, lactate dehydrogenase, fructose-6-phosphate kinase, glucokinase, glutamate dehydrogenase, D-lactate dehydrogenase, glutamate decarboxylase, UDP-glucose-4-epimerase, Phosphofructokinase, Pyruvate kinase, Lactate isomerase 및 Amylase)은 모두 시그마 알드리치사에서 구입하여 사용하였다.
실험예 1. 비알코올성 지방간 세포모델
CML(Nε-(carboxymethyl)lysine)은 지방산과 함께 간세포의 지질축적, 지질 과산화 및 염증을 유도하며, 특히 RAGE 의존성 염증 반응과 관련이 있는 것으로, 비알코올성 지방간 질환(NAFLD) 발명기전에 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 따라서 본 발명에서는 지방산인 올레산과 함께 CML을 HepG2 세포에 처리함으로써 생체 내 비알코올성 지방간 질환과 유사한 발병기전을 갖는 세포모델을 제공하고자 하였다.
인간 간세포주인 HepG2 세포(ATCC, American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA)를 사용하였다. HepG2 세포는 DMEM(Gibco, Grand Island, NY, USA)에 10% FBS(Gibco, Grand Island, NY, USA), 1% penicillin streptomycin(Gibco, Grand Island, NY, USA)이 첨가된 배양배지에서, 37 ℃, 5% CO2 배양 조건으로 2~3일마다 계대배양하여 사용하였다.
상기 HepG2 세포를 24-웰 플레이트에 1 × 105 세포/웰 농도로 3 mL 분주하여 10% FBS(Gibco, Grand Island, NY, USA)와 1% penicillin streptomycin(Gibco, Grand Island, NY, USA)이 포함된 DMEM(Gibco, Grand Island, NY, USA) 배지에서 5% CO2, 37 ℃ 조건에서 배양하였다. 24웰 플레이트에 세포를 분주한 후 세포가 24웰에 완전히 붙어 세포의 모양을 갖춘 후, 세포가 75% 포화도(confluence)에 도달하였을 때 사용하였다. 지방 축적을 유도하기 위해 250 μg/mL 올레산(0.8mM, oleic acid)과 200 μg/mL CML(Nε-(carboxymethyl)lysine)이 첨가된 DMEM 배지로 5% CO2, 37 ℃ 조건에서 24시간 배양하여 비알코올성 지방간 세포모델을 제조하였다.
실험예 2. 유산균 유래 효소 12종에 대한 지방축적 억제효과 분석
유산균에는 다양한 효소가 존재하고, 대표적으로 12종의 효소(galactosidase, lactate dehydrogenase, fructose-6-phosphate kinase, glucokinase, glutamate dehydrogenase, D-lactate dehydrogenase, glutamate decarboxylase, UDP-glucose-4-epimerase, Phosphofructokinase, Pyruvate kinase, Lactate isomerase 및 Amylase)가 존재한다는 것을 확인한 바, 이들 각각에 대하여 간 보호 효능을 분석하고자 하였다. 이때 효소는 모두 시그마 알드리치사에서 구입한 것을 사용하였다.
실험예 1에 따른 비알코올성 지방간 세포모델의 지방축적을 유도하는 동안 유산균 유래 효소 12종(galactosidase, lactate dehydrogenase, fructose-6-phosphate kinase, glucokinase, glutamate dehydrogenase, D-lactate dehydrogenase, glutamate decarboxylase, UDP-glucose-4-epimerase, Phosphofructokinase, Pyruvate kinase, Lactate isomerase 및 Amylase)을 10 U/㎖의 농도로 각 배양액에 처리하였고, 24시간 후 지방생성 정도를 관찰하였다. 아무것도 처리하지 않은 HepG2 세포는 정상군(Normal)으로 사용하였고, 아무것도 처리하지 않은 비알코올성 지방간 세포모델은 음성대조군(NC)으로 사용하였으며, 건기식 원료인 밀크씨슬의 기능성분인 실리마린(Sylimarine)을 투여한 비알코올성 지방간 세포모델은 양성대조군(PC)으로 사용하였다.
상기 각각의 세포주에서 배지를 제거한 뒤, PBS 완충액으로 세포를 두 번 세척하고, 상온에서 1시간 동안 3.7% 포르말린으로 고정하고, PBS 완충액으로 이용하여 두 번 세척한 후, 상온에서 5분 동안 60% 이소프로판올(Sigma-Aldrich, MO, USA)로 세포를 세척하였다. 증류수와 3:2의 비율로 혼합하여 희석한 오일레드 오(Oil Red O)(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) 용액을 준비하였다. 상기 세척된 세포에 희석 오일레드 오 용액을 첨가하고 15분 동안 상온에서 배양하여 염색시킨 후 증류수로 3회 세척한 다음, 염색용액의 파편을 제거하고 형광현미경을 이용하여 이미지를 촬영하였다. 상기 각 웰당 300 ㎕의 2-프로판올(propanol)을 넣어 추출한 후 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.
실험결과는 평균(mean)±표준편차(SD)로 나타내었고 통계적 유의성은 Student's t-test를 이용하여 그룹간의 차이를 통계처리 한 후 p<0.05 수준에서 유의성을 검정하였다.
도 1은 유산균 유래 효소 12종을 처리한 비알코올성 지방간 세포모델에 대한 지방축적 억제 효능을 분석한 결과 그래프로, 이에 따르면 유산균 유래 12종 효소들 중에서 갈락토시다아제(galactosidase)만이 음성대조군(NC) 대비 유의적으로 간세포 지방축적을 현저히 억제하는 것으로 확인되었다(p < 0.05).
상술한 결과를 통해 유산균 유래 효소들 중에서 갈락토시다아제(galactosidase)만이 간질환에 유의적 효과를 나타낸다는 것을 확인하였으므로, 최종적으로 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 선정하였다.
구체적으로, 정상군(Normal) 대비 모델군은 지방축적이 192.4±7.3%로 증가하였으나, 갈락토시다아제(galactosidase)의 상대적 간세포 지방축적 조성(%)은 136.6±6.4%로 유의적인 감소가 확인되었으나, 나머지 유산균 유래 효소의 지방축적 비율은 190 내지 200%로 유의적 변화가 없었다. 즉 갈락토시다아제(galactosidase)만이 음성대조군(NC)보다 지방축적이 60 내지 70% 유의적으로 감소한 것을 확인한 바, 유산균 유래 효소들 중에서 유일하게 간질환 예방 또는 치료효과를 갖는다할 것이다.
실험예 3. 갈락토시다아제의 농도별 간세포 영향 평가
인간 간세포주인 HepG2 세포(ATCC, American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA)를 24웰 플레이트에 1 × 105 세포/웰 농도로 3 mL 분주하여 10% FBS(Gibco, Grand Island, NY, USA)와 1% penicillin streptomycin(Gibco, Grand Island, NY, USA)이 포함된 DMEM(Gibco, Grand Island, NY, USA) 배지에서 5% CO2, 37 ℃ 조건에서 배양하였다. 24웰 플레이트에 세포를 분주한 후 세포가 24웰에 완전히 붙어 세포의 모양을 갖춘 후, 세포가 75% 포화도(confluence)에 도달하였을 때 사용하였다. HepG2 세포 각각에 다양한 농도(2 U/ml, 4 U/ml, 8 U/ml, 16 U/ml, 32 U/ml)의 갈락토시다아제(galactosidase)를 처리하였다. 24시간 배양한 후 배지를 제거하고, 새로운 배지를 첨가하여 5% CO2, 37 ℃ 조건에서 30분 동안 안정화시켰다.
MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) 시약(Sigma-Aldrich, MO, USA) 용액(2㎎) 50 μL를 첨가하여 5% CO2, 37 ℃조건에서 2시간 동안 반응시킨 후 배지를 제거하고, DMSO를 150 μL씩 첨가하여 실온에서 20분 동안 반응시켜서 생성된 불용성의 포마잔(formazan) 결정을 용해하였다. 마이크로플레이트 리더(microplate reader (BIO-RAD, California, USA)를 이용하여 540㎚에서 흡광도를 측정하였다. 측정치는 3회 반복하여 실험의 평균값으로 나타내었다.
도 2는 HepG2 세포에 대한 농도별 갈락토시다아제(galactosidase)의 세포 독성을 나타낸 결과 그래프이다. 도 2에 나타난 바와 같이, HepG2 세포에 갈락토시다아제(galactosidase)를 24시간 처리한 결과, 모든 농도에서 세포 생존율(100% 이상)에 영향을 미치지 않는다는 것을 확인하였다. 즉 갈락토시다아제(galactosidase)는 세포 독성이 매우 낮은 것을 확인할 수 있다.
실험예 4. 농도별 갈락토시다아제에 대한 지방축적 억제효과 분석
실험예 1에 따른 비알코올성 지방간 세포모델의 지방축적을 유도하는 동안 다양한 농도(2 U/ml, 4 U/ml, 8 U/ml, 16 U/ml, 32 U/ml)의 갈락토시다아제(galactosidase)를 각 배양액에 처리하였고, 24시간 후 지방생성 정도를 관찰하였다. 아무것도 처리하지 않은 HepG2 세포는 정상군(Normal)으로 사용하였고, 아무것도 처리하지 않은 비알코올성 지방간 세포모델은 음성대조군(NC)으로 사용하였으며, 건기식 원료인 밀크씨슬의 기능성분인 실리마린(Sylimarine)을 투여한 비알코올성 지방간 세포모델은 양성대조군(PC)으로 사용하였다.
갈락토시다아제(galactosidase)에 의한 효과인지를 확인하기 위하여 갈락토시다아제를 95 ℃에서 10분 동안 가열하여 불활성화시키고, 다양한 농도(2 U/ml, 4 U/ml, 8 U/ml, 16 U/ml, 32 U/ml)로 비알코올성 지방간 세포모델에 첨가하여 비교군(inactivative galactosidase)을 제조하였다.
상기 각각의 세포주에서 배지를 제거한 뒤, PBS 완충액으로 세포를 두 번 세척하고, 상온에서 1시간 동안 3.7% 포르말린으로 고정하고, PBS 완충액으로 이용하여 두 번 세척한 후, 상온에서 5분 동안 60% 이소프로판올(Sigma-Aldrich, MO, USA)로 세포를 세척하였다. 증류수와 3:2의 비율로 혼합하여 희석한 오일레드 오(Oil Red O)(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) 용액을 준비하였다. 상기 세척된 세포에 희석 오일레드 오 용액을 첨가하고 15분 동안 상온에서 배양하여 염색시킨 후 증류수로 3회 세척한 다음, 염색용액의 파편을 제거하고 형광현미경을 이용하여 이미지를 촬영하였다. 상기 각 웰당 300 ㎕의 2-프로판올(propanol)을 넣어 추출한 후 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.
실험결과는 평균(mean)±표준편차(SD)로 나타내었고 통계적 유의성은 Student's t-test를 이용하여 그룹간의 차이를 통계처리 한 후 p<0.05 수준에서 유의성을 검정하였다.
도 3은 농도별 활성 갈락토시다아제(active galactosidase)와 불활성 갈락토시다아제(inactivative galactosidase)를 처리한 비알코올성 지방간 세포모델에 대한 지방축적 억제 효능을 분석한 결과 그래프이다.
도 3에 나타난 바와 같이, 갈락토시다아제(active galactosidase) 효소는 농도가 증가할수록 지질 축적이 유의적으로 감소하는 것을 확인할 수 있었다(p < 0.05). 반면 불활성화된 갈락토시다아제(inactive galactosidase) 효소는 동일한 세포 모델에 대해 지방축적 억제 효과를 나타내지 않는 것을 확인하였다. 즉 갈락토시다아제(active galactosidase)의 간 지방축적 억제 효과는, 효소의 구성성분이 아닌 효소활성에 의한 효과라는 것을 알 수 있다.
구체적으로 갈락토시다아제(active galactosidase) 효소의 상대적 지질 축적능(%)은 8 U/mL농도에서 130-150%, 16 U/mL에서 110-130%, 32 U/mL에서 105-125%인 것을 확인하였고, 이는 음성대조군(NC)(180-190%)에 비해 유의적으로 낮은 수치라는 것을 확인할 수 있다. 반면 불활성 갈락토시다아제(inactivative galactosidase)가 처리된 경우에는 음성대조군(NC)과 유의적으로 차이가 없는 180-190%의 수치가 확인되었다.
실험예 5. 간 기능관련 지표 분석
실험예 1에 따른 비알코올성 지방간 세포모델의 지방축적을 유도하는 동안 다양한 농도(2 U/ml, 4 U/ml, 8 U/ml, 16 U/ml, 32 U/ml)의 갈락토시다아제(galactosidase)를 각 배양액에 처리하였고, 24시간 후 지방생성 정도를 관찰하였다. 아무것도 처리하지 않은 HepG2 세포는 정상군(Normal)으로 사용하였고, 아무것도 처리하지 않은 비알코올성 지방간 세포모델은 음성대조군(NC)으로 사용하였으며, 건기식 원료인 밀크씨슬의 기능성분인 실리마린(Sylimarine)을 투여한 비알코올성 지방간 세포모델은 양성대조군(PC)으로 사용하였다. 상기 각각의 세포로부터 배지를 제거하고, PBS 완충액으로 세포를 세 번 세척하여, 각 그룹별 세포를 회수하였다.
상기 각 그룹에 대한 MDA(Malondialdehyde)와 GSH(Total Glutathione) 함량 측정은 MDA ELSA kit(ab118970, Abcam, Cambridge, MA, USA)와 GSH-GSSG ELISA kit(ab138881, Abcam, Cambridge, MA, USA)를 이용하여 측정하였으며, 제조사의 지시에 따라 수행하였다.
실험결과는 평균(mean)±표준편차(SD)로 나타내었고 통계적 유의성은 Student's t-test를 이용하여 그룹간의 차이를 통계처리 한 후 p<0.05 수준에서 유의성을 검정하였다.
도 4는 농도별 갈락토시다아제(galactosidase)를 처리한 비알코올성 지방간 세포모델에 대한 MDA 함량을 분석한 결과 그래프이다.
도 4에 나타난 바와 같이, 지방산인 올레산과 CML을 동시처리한 HepG2 세포(NC)는 MDA가 정상군(Normal) 대비 2배 이상 증가하였다(10.6±0.6 nmol/mg protein). 여기에 갈락토시다아제(galactosidase)를 2 내지 32 U/ml 농도로 처리하면 MDA가 농도의존적으로 감소하는 것을 알 수 있다(5.6-12.2 nmol/mg protein). 특히 갈락토시다아제(galactosidase)가 16 U/ml, 32 Uml농도로 투여된 경우, 음성대조군(NC) 대비 유의적으로 MDA가 감소하였으며(6.2±0.6 nmol/mg protein)(p < 0.05), 정상군과 가장 근접한 수치라는 것을 확인할 수 있다. 게다가 16 U/ml, 32 U/ml 농도의 갈락토시다아제(galactosidase)는 양성대조군(PC)보다 MDA를 감소 효과가 25% 더 우수한 것을 알 수 있다.
도 5는 농도별 갈락토시다아제(galactosidase)를 처리한 비알코올성 지방간 세포모델에 대한 GSH 함량을 분석한 결과 그래프이다.
도 5에 나타난 바와 같이, 지방산인 올레산과 CML을 동시처리한 HepG2 세포(NC)는 GSH가 정상군(Normal) 대비 1.5배 이상 감소하였다(98.6±9.2 nmol/mg protein). 여기에 갈락토시다아제(galactosidase)를 2 내지 32 U/ml 농도로 처리하면 GSH가 농도 의존적으로 증가하는 것을 알 수 있다(103.3-163.7 nmol/mg protein). 특히 갈락토시다아제(galactosidase)가 8 U/ml, 16 U/ml, 32 Uml 농도로 투여된 경우, 음성대조군(NC) 대비 유의적으로 GSH가 감소하였으며(각각, 142.3±8.9, 145.2±11.3, 148.2±15.5 nmol/mg protein)(p < 0.05), 정상군과 가장 근접한 수치라는 것을 확인할 수 있다. 게다가 8 U/ml, 16 U/ml, 32 U/ml 농도의 갈락토시다아제(galactosidase)는 양성대조군(PC)보다 GSH가 25~30% 더 증가한 것을 알 수 있다.
하기에 본 발명의 분말을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 산제의 제조
실시예 1에서 얻은 갈락토시다아제; 500 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2. 정제의 제조
실시예 1에서 얻은 갈락토시다아제; 300 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 캅셀제의 제조
실시예 1에서 얻은 갈락토시다아제; 200 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 4. 액제의 제조
실시예 1에서 얻은 갈락토시다아제; 4 g
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100g으로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예 5. 과립제의 제조
실시예 1에서 얻은 갈락토시다아제; 1,000 mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 mg
비타민 B1 0.13 mg
비타민 B2 0.15 mg
비타민 B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 mg
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 mg
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 mg
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 mg
산화아연 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 mg
제1인산칼륨 15 mg
제2인산칼슘 55 mg
구연산칼륨 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 과립제에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 과립제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예 6. 기능성 음료의 제조
실시예 1에서 얻은 갈락토시다아제; 1,000 mg
구연산 1,000 mg
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 mL
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 기능성 음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (10)

  1. 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 함유하는 간질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 간질환은 간 섬유증, 간 경화, 비알코올성 지방간질환(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD) 및 알코올성 지방간질환(Alcoholic liver disease)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나이상인 것을 특징으로 하는 간질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 비알코올성 지방간질환은 비알코올성 단순 지방간 또는 비알코올성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)을 특징으로 하는 간질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 조성물에서 갈락토시다아제(galactosidase)의 농도는 16 U/㎖ 내지 100 U/㎖인 것을 특징으로 하는 간질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 갈락토시다아제는 베타-갈락토시다아제(β-galactosidase)인 것을 특징으로 하는 간질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  6. 갈락토시다아제(galactosidase)를 유효성분으로 함유하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 간질환은 간 섬유증, 간 경화, 비알코올성 지방간질환(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD) 및 알코올성 지방간질환(Alcoholic liver disease)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나이상인 것을 특징으로 하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 비알코올성 지방간질환은 비알코올성 단순 지방간 또는 비알코올성 지방간염(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)을 특징으로 하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  9. 제6항에 있어서,
    상기 조성물에서 갈락토시다아제(galactosidase)의 농도는 16 U/㎖ 내지 100 U/㎖인 것을 특징으로 하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  10. 제6항에 있어서,
    상기 갈락토시다아제는 베타-갈락토시다아제(β-galactosidase)인 것을 특징으로 하는 간질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
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