KR20230115546A - Bomb type cosmetic composition containing cinnamon extract and method for preparing same - Google Patents

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KR20230115546A
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cinnamon
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essential oil
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지광환
김은혜
홍다윗
배원빈
전영준
손현빈
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금오공과대학교 산학협력단
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Abstract

본 발명은 계피 추출물을 포함하는 밤타입 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로 무좀 치료, 완화 및 예방을 위한 계피 추출물을 포함하는 풋밤 형태의 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 계피 추출물을 포함하는 밤타입 화장료 조성물은 무좀 치료, 완효 및 예방에 효과가 있다. 또한, 본 발명은 천연물을 원료로 함에 따라 부작용이 없고, 휴대용으로 제작되어 사용이 간편한 장점이 있다. The present invention relates to a balm-type cosmetic composition containing a cinnamon extract and a method for producing the same, and more specifically to a cosmetic composition in the form of a green balm containing a cinnamon extract for the treatment, relief and prevention of athlete's foot, and a method for producing the same. The night-type cosmetic composition containing the cinnamon extract of the present invention is effective in treating, curing, and preventing athlete's foot. In addition, the present invention has the advantage that there is no side effect as it uses a natural product as a raw material, and it is made portable and easy to use.

Description

계피 추출물을 포함하는 밤타입 화장료 조성물 및 이의 제조방법{Bomb type cosmetic composition containing cinnamon extract and method for preparing same}Bomb type cosmetic composition containing cinnamon extract and method for preparing same {Bomb type cosmetic composition containing cinnamon extract and method for preparing same}

본 발명은 계피 추출물을 포함하는 밤타입 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로 무좀 치료, 완화 및 예방을 위한 계피 추출물을 포함하는 풋밤 형태의 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a balm-type cosmetic composition containing a cinnamon extract and a method for producing the same, and more specifically to a cosmetic composition in the form of a green balm containing a cinnamon extract for the treatment, relief and prevention of athlete's foot, and a method for producing the same.

계피는 계피나무(Cinnamomum cassia)의 외피를 건조시킨 것으로 계피 오일은 동남아시아, 중국, 인도 등지에 주로 분포되어 있는 녹나무속(Cinnamomum)에 속하는 육계나무의 껍질이나 잎에서 추출한 에센셜 오일이다. 시나몬 에센셜 오일(Cinnamon essential oil)은 나무의 껍질에서 추출한 bark oil과 잎에서 추출한 leaf oil로 구분된다. bark oil의 주성분은 알데하이드 계통의 monoterpene계 화합물(-CHO)인 트랜스-시나말데하이드(trans-cinnamaldehyde)가 대부분을 이루고 있다. 시나몬 에센셜 오일과 트랜스-시나말데하이드 성분은 생물학적 활성이 있는 물질들이 혼합되어 내성이 없는 점과 대상이 되는 생물체에만 선택적인 살충과 살비 효과를 가져 인체와 환경이 미치는 부작용이 적은 천연 살충제로 알려져 있다. 또한, 위의 성분들은 호흡기나 피부 질환을 일으키는 균주들에 대한 천연 항균물질로서 의약 분야에도 활용되고 있다.Cinnamon is the dried outer skin of the cinnamon tree (Cinnamomum cassia), and cinnamon oil is an essential oil extracted from the bark or leaves of the cinnamon tree belonging to the genus Cinnamomum, which is mainly distributed in Southeast Asia, China, and India. Cinnamon essential oil is divided into bark oil extracted from the bark of a tree and leaf oil extracted from its leaves. The main component of bark oil is mostly trans-cinnamaldehyde, a monoterpene compound (-CHO) of the aldehyde family. Cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde are known as natural insecticides that have little side effects on the human body and the environment because they have no resistance to the mixture of biologically active substances and have selective insecticidal and acaricidal effects only on target organisms. . In addition, the above ingredients are also used in the medical field as natural antibacterial substances against strains that cause respiratory or skin diseases.

진균(fungi)인 피부사상균은 피부, 머리카락, 손톱 및 발톱의 각질층에 침습하여 피부진균 감염증을 유발하여, Trichophyton mentagrophytes는 표재성 진균증의 대표적인 원인균으로써 무좀을 유발하는 것으로 알려져 있다. 무좀 치료에는 항진균제가 사용되며 스테로이드, 면역억제제, 항생제 및 합성화학물질로 구성되어 치료에 적합하다. 그러나 강한 자극성이나 잔류 독성 등 다양한 부작용을 동반하는 것으로 알려져 있으며, 최근 항생제의 오남용으로 내성균의 발생도 증가하고 있어 내성균 치료제의 개발도 대두되고 있는 실정이다. 이러한 문제의 대안으로 식물로부터 유래한 천연물질 소재의 탐색이 시도되어 왔으며, 다양한 식물군에서 항진균의 효과가 조사되고 있다. 또한, 식물에 함유된 다양한 천연물과 생리활성물질은 합성화합물질에 비하여 부작용이나 잔류 독성이 적은 편으로 이를 약용하고자 하는 연구가 활발히 진행되고 있다. 또한, 시중에 판매되는 연고는 1일 2 ~ 3 회 이상, 복용하는 무좀 치료제는 6 주에서 3 개월까지 비교적 오랜 기간 사용해야 하는 문제가 있다.Dermatophytes, which are fungi, invade the stratum corneum of the skin, hair, fingernails and toenails to cause skin fungal infection, and Trichophyton mentagrophytes is known to cause athlete's foot as a representative causative agent of superficial mycosis. Antifungal agents are used to treat athlete's foot, and are suitable for treatment as they consist of steroids, immunosuppressants, antibiotics and synthetic chemicals. However, it is known to be accompanied by various side effects such as strong irritation or residual toxicity, and as the occurrence of resistant bacteria is increasing due to the misuse and abuse of antibiotics recently, the development of resistant bacteria treatment is also on the rise. As an alternative to these problems, the search for natural materials derived from plants has been attempted, and the antifungal effect is being investigated in various plant groups. In addition, various natural substances and physiologically active substances contained in plants have fewer side effects or residual toxicity than synthetic compounds, and thus, studies are being actively conducted to use them as medicine. In addition, there is a problem in that commercially available ointments are used 2 to 3 times a day or more, and athlete's foot medications must be used for a relatively long period of time, from 6 weeks to 3 months.

이러한 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명의 발명자들은 항진균 및 항염증 효과가 있는 계피 추출물을 이용하여 무좀 관리를 쉽고 간편하게 할 수 있는 1회 사용량의 밤타입 화장료 조성물을 제조하여 본 발명을 완성하였다.In order to solve this problem, the inventors of the present invention completed the present invention by preparing a night-type cosmetic composition for easy and convenient management of athlete's foot using a cinnamon extract having antifungal and anti-inflammatory effects.

대한민국 공개특허공보 제10-2021-0000621호Republic of Korea Patent Publication No. 10-2021-0000621

상술한 바와 같은 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명은 무좀 치료, 완화 및 예방을 위한 계피 추출물을 포함하는 밤타입 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.In order to solve the problems described above, an object of the present invention is to provide a night-type cosmetic composition containing a cinnamon extract for the treatment, relief and prevention of athlete's foot.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 계피 추출물 및 화장료 분말을 포함하는, 밤타입 화장료 조성물을 개시한다.In order to achieve the above object, the present invention discloses a night-type cosmetic composition comprising a cinnamon extract and a cosmetic powder.

여기서, 상기 계피 추출물은 시나몬 에센셜 오일(Cinnamon essential oil) 및 트랜스-시나말데하이드(trans-cinnamaldehyde)을 주성분으로 포함할 수 있다.Here, the cinnamon extract may include cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde as main components.

여기서, 상기 시나몬 에센셜 오일은 1.0 내지 10.0 ㎍/ml의 범위 이내의 농도를 갖는 것일 수 있다.Here, the cinnamon essential oil may have a concentration within the range of 1.0 to 10.0 μg/ml.

한편, 본 발명은 계피 추출물 및 화장료 분말을 용매에 혼합하여 교반하는 단계; 상기 교반된 혼합물을 압축하여 고체 형상을 생성하는 단계; 및 상기 생성된 고체 형상을 건조하여 밤타입 화장료 조성물을 제조하는 단계;를 포함하는, 밤타입 화장료 조성물의 제조방법을 추가로 개시한다.On the other hand, the present invention comprises the steps of mixing and stirring the cinnamon extract and cosmetic powder in a solvent; compressing the stirred mixture to produce a solid form; And drying the resulting solid shape to prepare a night-type cosmetic composition; containing, a method for producing a night-type cosmetic composition is further disclosed.

여기서, 상기 계피 추출물은 시나몬 에센셜 오일(Cinnamon essential oil) 및 트랜스-시나말데하이드(trans-cinnamaldehyde)을 주성분으로 포함할 수 있다.Here, the cinnamon extract may include cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde as main components.

여기서, 상기 시나몬 에센셜 오일은 1.0 내지 10.0 ㎍/ml의 범위 이내의 농도를 갖는 것일 수 있다.Here, the cinnamon essential oil may have a concentration within the range of 1.0 to 10.0 μg/ml.

상술한 바에 따른 본 발명의 계피 추출물을 포함하는 밤타입 화장료 조성물은 무좀 치료, 완효 및 예방에 효과가 있다. 또한, 본 발명은 천연물을 원료로 함에 따라 부작용이 없고, 휴대용으로 제작되어 사용이 간편한 장점이 있다. The night-type cosmetic composition containing the cinnamon extract of the present invention according to the above is effective in treating, curing, and preventing athlete's foot. In addition, the present invention has the advantage that there is no side effect as it uses a natural product as a raw material, and it is made portable and easy to use.

도 1은 HaCaT에 대한 시나몬 에센셜 오일과 트랜스-시나말데하이드의 MTT assay 결과를 그래프로 도시한 것이다.
도 2는 RAW264.7에 대한 시나몬 에센셜 오일과 트랜스-시나말데하이드의 MTT assay 결과를 그래프로 도시한 것이다.
도 3은 시나몬 에센셜 오일과 트랜스-시나말데하이드의 항염증 효과 실험 결과를 그래프로 도시한 것이다.
도 4는 E. coliS. aureus에 대하여 시나몬 에센셜 오일이 첨가된 풋밤의 향균 활성을 측정한 결과를 사진 촬영한 것이다.
도 5는 본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조 모습을 사진 촬영한 것이다.
도 6은 본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조방법에 따른 풋밤 형태의 완성품을 사진 촬영한 것이다.
1 is a graph showing the MTT assay results of cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde for HaCaT.
Figure 2 is a graph showing the MTT assay results of cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde for RAW264.7.
3 is a graph showing the results of anti-inflammatory effect experiments of cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde.
4 is a photograph of the results of measuring the antibacterial activity of green balm to which cinnamon essential oil was added against E. coli and S. aureus .
Figure 5 is a photograph of the manufacturing state of the balm-type cosmetic composition of the present invention.
Figure 6 is a photograph of the finished product in the form of foot balm according to the manufacturing method of the balm-type cosmetic composition of the present invention.

본 출원에서 사용하는 용어는 단지 특정한 예시를 설명하기 위하여 사용되는 것이다. 때문에 가령 단수의 표현은 문맥상 명백하게 단수여야만 하는 것이 아닌 한, 복수의 표현을 포함한다. 덧붙여, 본 출원에서 사용되는 "포함하다" 또는 "구비하다"등의 용어는 명세서 상에 기재된 특징, 단계, 기능, 구성요소 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 명확히 지칭하기 위하여 사용되는 것이지, 다른 특징들이나 단계, 기능, 구성요소 또는 이들을 조합한 것의 존재를 예비적으로 배제하고자 사용되는 것이 아님에 유의해야 한다.Terms used in this application are only used to describe specific examples. Therefore, for example, expressions in the singular number include plural expressions unless the context clearly requires them to be singular. In addition, the terms "include" or "have" used in this application are used to clearly indicate that the features, steps, functions, components, or combinations thereof described in the specification exist, but other features It should be noted that it is not intended to be used to preliminarily exclude the presence of any steps, functions, components, or combinations thereof.

한편, 다르게 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진 것으로 보아야 한다. 따라서, 본 명세서에서 명확하게 정의하지 않는 한, 특정 용어가 과도하게 이상적이거나 형식적인 의미로 해석되어서는 안 된다.Meanwhile, unless otherwise defined, all terms used in this specification should be regarded as having the same meaning as commonly understood by a person of ordinary skill in the art to which the present invention belongs. Accordingly, certain terms should not be interpreted in an overly idealistic or formal sense unless clearly defined herein.

본 발명자들은 상술한 과제를 해결하기 위하여 연구한 결과, 하기와 같은 발명을 안출하기에 이르렀다. 본 명세서는 계피 추출물 및 화장료 분말을 포함하는, 밤타입 화장료 조성물을 개시한다.As a result of research in order to solve the above-mentioned problems, the inventors of the present invention came up with the following invention. The present specification discloses a night-type cosmetic composition containing a cinnamon extract and a cosmetic powder.

본 발명의 밤타입 화장료 조성물에서 상기 계피 추출물은 시나몬 에센셜 오일(Cinnamon essential oil) 및 트랜스-시나말데하이드(trans-cinnamaldehyde)을 주성분으로 포함할 수 있다.In the night-type cosmetic composition of the present invention, the cinnamon extract may include cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde as main components.

본 발명의 밤타입 화장료 조성물에서 상기 시나몬 에센셜 오일은 1.0 내지 10.0 ㎍/ml의 범위 이내의 농도를 갖는 것이 바람직하고, 5.0 ㎍/ml의 농도를 갖는 것이 더욱 바람직하다.In the night-type cosmetic composition of the present invention, the cinnamon essential oil preferably has a concentration within the range of 1.0 to 10.0 μg/ml, and more preferably has a concentration of 5.0 μg/ml.

본 발명의 밤타입 화장료 조성물에서 화장료 분말은 당해 기술분야의 통상의 기술자의 입장에서 적절히 채용가능한 화장료 분말을 의미하며, 통상적으로 밤타입의 화장료 조성물에 쓰이는 성분 등이 포함될 수 있다.In the balm-type cosmetic composition of the present invention, the cosmetic powder means a cosmetic powder that can be appropriately employed from the point of view of a person skilled in the art, and may include components commonly used in balm-type cosmetic compositions.

한편, 본 명세서는 계피 추출물 및 화장료 분말을 용매에 혼합하여 교반하는 단계; 상기 교반된 혼합물을 압축하여 고체 형상을 생성하는 단계; 및 상기 생성된 고체 형상을 건조하여 밤타입 화장료 조성물을 제조하는 단계;를 포함하는, 밤타입 화장료 조성물의 제조방법을 추가로 개시한다.On the other hand, the present specification comprises the steps of mixing and stirring the cinnamon extract and cosmetic powder in a solvent; compressing the stirred mixture to produce a solid form; And drying the resulting solid shape to prepare a night-type cosmetic composition; containing, a method for producing a night-type cosmetic composition is further disclosed.

본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조방법에서 상기 계피 추출물은 시나몬 에센셜 오일(Cinnamon essential oil) 및 트랜스-시나말데하이드(trans-cinnamaldehyde)을 주성분으로 포함할 수 있다.In the manufacturing method of the night-type cosmetic composition of the present invention, the cinnamon extract may contain cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde as main components.

본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조방법에서 상기 시나몬 에센셜 오일은 1.0 내지 10.0 ㎍/ml의 범위 이내의 농도를 갖는 것이 바람직하고, 5.0 ㎍/ml의 농도를 갖는 것이 더욱 바람직하다.In the manufacturing method of the night-type cosmetic composition of the present invention, the cinnamon essential oil preferably has a concentration within the range of 1.0 to 10.0 μg/ml, and more preferably has a concentration of 5.0 μg/ml.

본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조방법에서 화장료 분말은 당해 기술분야의 통상의 기술자의 입장에서 적절히 채용가능한 화장료 분말을 의미하며, 통상적으로 밤타입의 화장료 조성물에 쓰이는 성분 등이 포함될 수 있다.In the manufacturing method of the balm-type cosmetic composition of the present invention, the cosmetic powder means a cosmetic powder that can be appropriately employed from the point of view of a person skilled in the art, and may include components commonly used in balm-type cosmetic compositions.

본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조방법에서 교반하는 단계는 10 내지 30 분간 교반하는 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.In the step of stirring in the preparation method of the balm-type cosmetic composition of the present invention, it is preferable to stir for 10 to 30 minutes, but is not limited thereto.

또한, 본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조방법에서 교반하기 위한 용매는 dimethyl sulfoxide(DMSO)와 같은 유기용매인 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.In addition, the solvent for stirring in the preparation method of the balm-type cosmetic composition of the present invention is preferably an organic solvent such as dimethyl sulfoxide (DMSO), but is not limited thereto.

또한, 본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조방법에서 고체 형상을 생성하기 위하여 디자인 몰드를 이용하여 분말을 압축 디자인하는 것이 가능할 수 있다.In addition, in the manufacturing method of the balm-type cosmetic composition of the present invention, it may be possible to compress and design the powder using a design mold to create a solid shape.

또한, 본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조방법에서 고체 형상을 건조하기 위한 시간은 24 내지 48 시간 이내인 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.In addition, the time for drying the solid form in the manufacturing method of the balm-type cosmetic composition of the present invention is preferably one within 24 to 48 hours, but is not limited thereto.

이하, 첨부한 도면 및 실시예들을 참조하여 본 명세서가 청구하는 바에 대하여 더욱 자세히 설명한다. 다만, 본 명세서에서 제시하고 있는 도면 내지 실시예 등은 통상의 기술자에게 의하여 다양한 방식으로 변형되어 여러 가지 형태를 가질 수 있는 바, 본 명세서의 기재사항은 본 발명을 특정 개시 형태에 한정되는 것이 아니고 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 균등물 내지 대체물을 포함하고 있는 것으로 보아야 한다. 또한, 첨부된 도면은 본 발명을 통상의 기술자로 하여금 더욱 정확하게 이해할 수 있도록 돕기 위하여 제시되는 것으로서 실제보다 과장되거나 축소되어 도시될 수 있다.Hereinafter, with reference to the accompanying drawings and embodiments will be described in more detail with respect to what the present specification claims. However, the drawings or embodiments presented in this specification can be modified in various ways by those skilled in the art and have various forms, and the description in this specification is not limited to the specific disclosure form of the present invention. It should be regarded as including all equivalents or substitutes included in the spirit and technical scope of the present invention. In addition, the accompanying drawings are presented to help those skilled in the art to more accurately understand the present invention, and may be exaggerated or reduced than actual.

{실시예 및 평가}{Example and evaluation}

세포 실험(MTT assay, 항염증 실험(NO assay))Cell test (MTT assay, anti-inflammatory test (NO assay))

세포 실험에 사용할 HaCaT cell과 RAW264.7(1x105 cells/well)은 2 내지 3일 주기로 계대배양을 하여 활성화하였다. 충분히 활성을 나타내면 96 well plate에 1x106 cells/ml로 희석하여 각 well 당 100 μl씩 seeding 해준 후 37℃, 5% CO2 조건이 유지되는 세포배양기에서 24 시간 배양하였다. 시료로 사용되는 시나몬 에센셜 오일(Cinnamon essential oil) 및 트랜스-시나말데하이드(trans-cinnamaldehyde)는 100% DMSO에 각각 0.20 g/ml로 녹인 후 200, 100, 50, 25, 10, 5, 2.5, 1, 0.5 μg/ml이 되도록 10% fetal bovine serum과 1% penicillin이 첨가된 DMEM 배지로 희석하였다. 이때 모든 시료의 DMSO 농도는 최종적으로 1%가 되게 하였다. 24 시간 배양 후에는 시료를 농도별로 처리하였고 같은 조건에서 24 시간 재배양하였다. RAW264.7의 경우 NO assay를 위해 LPS를 첨가한 후 DMEM 배지를 사용하여 시료와 함께 처리하였다. 시료 처리가 끝난 후 LPS의 농도는 500 ng/ml이 되도록 하였다. 24 시간 뒤에 RAW264.7은 각 well의 상층액을 100 μl씩 덜어 96 well plate에 옮기고 Griess reagent [1% sulfanilamide, 0.1% N-(1-naphtyl)-ethylene diamine dihydrochloride in 2.5% phosphoric acid]를 동량으로 혼합하고 ELISA reader 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. Positive control로 iNOS의 활성을 저해함으로써 NO의 생성을 억제하는 저해제로 L-NAME(250 μM)을 사용하였다. 그리고 96 well plate에 남아있는 용액을 모두 석션하고 MTT [3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl-2,5-diphenyltetrazolium bromide] 시약을 처리하여 약 4 시간 뒤 550 nm에서 ELISA reader로 흡광도를 측정하였다. RAW264.7의 NO assay와 MTT assay, HaCaT cell의 MTT assay로 독성이 없고, 항염증 효과가 있는 농도를 구해주었다.HaCaT cells and RAW264.7 (1x10 5 cells/well) to be used in cell experiments were subcultured and activated every 2 to 3 days. If sufficiently active, diluted to 1x10 6 cells/ml in a 96 well plate, seeded by 100 μl per well, and cultured for 24 hours in a cell incubator maintained at 37°C and 5% CO 2 conditions. Cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde used as samples were dissolved in 100% DMSO at 0.20 g/ml, respectively, and then 200, 100, 50, 25, 10, 5, 2.5, It was diluted with DMEM medium supplemented with 10% fetal bovine serum and 1% penicillin to a concentration of 1, 0.5 μg/ml. At this time, the DMSO concentration of all samples was finally set to 1%. After 24 hours of incubation, the samples were treated by concentration and re-cultured for 24 hours under the same conditions. In the case of RAW264.7, after adding LPS for NO assay, it was treated with the sample using DMEM medium. After sample treatment, the concentration of LPS was set to 500 ng/ml. After 24 hours, RAW264.7 took 100 μl of the supernatant from each well, transferred it to a 96 well plate, and added the same amount of Griess reagent [1% sulfanilamide, 0.1% N-(1-naphtyl)-ethylene diamine dihydrochloride in 2.5% phosphoric acid]. After mixing, the absorbance was measured at 540 nm with an ELISA reader. As a positive control, L-NAME (250 μM) was used as an inhibitor that inhibits the production of NO by inhibiting the activity of iNOS. Then, the solution remaining in the 96 well plate was suctioned off, treated with MTT [3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl-2,5-diphenyltetrazolium bromide] reagent, and after about 4 hours, the absorbance was measured with an ELISA reader at 550 nm. measured. The NO assay and MTT assay of RAW264.7 and the MTT assay of HaCaT cell yielded concentrations that were non-toxic and had anti-inflammatory effects.

항균 실험antibacterial experiment

항균 실험은 paper disk diffusion으로 진행하였다. 실험에는 대표적인 그람음성균인 E. coli와 그람양성균인 S. aureus를 사용하였다. 각각의 균은 하루에 한 번 전배양하였으며 실험에 사용되는 paper disk는 autoclave로 고온, 고압 멸균시켜 사용하였다. 균은 LB 배지로 배양하였으며 실험 전 UV-vis spectrophotometer를 이용하여 탁도를 측정하였다. Wavelength가 600 nm에서의 값이 0.1일 때 1 x 108 CFU/ml로 가정하여 대략적인 균의 수를 계산하였다. Paper disk diffusion method는 균의 colony 형태가 거의 보이지 않게 도말하므로, E. coli는 1 x 108 CFU/ml, S. aureus는 1 x 107 CFU/ml의 200 μl를 LB 고체배지에 도말하였다. 시나몬 에센셜 오일은 비수용성으로 citric acid, corn starch, sodium bicarbonate를 균일하게 섞은 고체 분말 0.140 g에 양쪽성 계면활성제인 코코베타인 0.16 μl을 증류수 20 ml에 녹인 용매를 이용해 각각 원하는 농도로 맞추었다. Negative control로는 시료가 녹아있는 용매를 사용하였으며, positive control로는 잘 알려진 항균제인 ampicillin 1 mg/ml을 사용하였다. 모든 시료는 8 nm paper disk에 50 μl 분주 후, 균을 도말한 LB 고체배지에 멸균된 핀셋으로 올려주었고 35℃ incubator에서 약 16 시간 배양해주었다. 이후 생성된 clear zone의 직경을 측정하여 항균력을 비교하였다.Antibacterial experiments were conducted by paper disk diffusion. Representative gram-negative bacteria, E. coli , and gram-positive bacteria, S. aureus , were used in the experiment. Each germ was pre-cultured once a day, and the paper disk used in the experiment was sterilized at high temperature and high pressure in an autoclave. Bacteria were cultured in LB medium, and turbidity was measured using a UV-vis spectrophotometer before the experiment. When the wavelength value at 600 nm was 0.1, the approximate number of bacteria was calculated assuming 1 x 10 8 CFU/ml. Since the paper disk diffusion method smears almost no bacterial colony, 200 μl of 1 x 10 8 CFU/ml for E. coli and 1 x 10 7 CFU/ml for S. aureus was spread on LB solid medium. Cinnamon essential oil is non-aqueous, and 0.140 g of a solid powder uniformly mixed with citric acid, corn starch, and sodium bicarbonate and 0.16 μl of cocobetaine, an amphoteric surfactant, were dissolved in 20 ml of distilled water to adjust the concentration to the desired concentration. As a negative control, a solvent in which the sample was dissolved was used, and as a positive control, 1 mg/ml of ampicillin, a well-known antibacterial agent, was used. After dispensing 50 μl of all samples on an 8 nm paper disk, they were placed on LB solid medium smeared with bacteria with sterilized tweezers and incubated for about 16 hours in a 35 ° C incubator. Then, the diameter of the generated clear zone was measured to compare the antibacterial activity.

세포 실험 결과 및 평가Cell test results and evaluation

MTT assay는 다양한 식품 생리활성 물질에 대한 세포 활성, 즉 세포의 성장 및 사멸도 변화를 평가하기 위해 가장 널리 이용되는 방법으로, 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide 시약을 이용한 환원법이다. MTT 시약을 사용하는 이 환원법은 노란색 수용성 MTT tetrazolium을 세포에 처리할 때, 살아있는 세포의 미토콘드리아에 있는 탈수소효소에 의해 tetrazolium의 ring 구조가 끊어진 청자색을 띄는 비수용성의 MTT formazan으로 환원되는 원리를 이용한다. MTT formazan은 일반적으로 dimethyl sulfoxide(DMSO)와 같은 유기용매에 녹여 흡광도를 측정하는데, 이때 formazan dye의 최대 흡광도는 540 nm부근이며, 측정된 흡광도 값에 따라 살아있는 세포를 정량적으로 평가할 수 있다.MTT assay is the most widely used method to evaluate cell activity, that is, changes in cell growth and apoptosis, for various food bioactive substances. It is a reduction method using diphenyltetrazolium bromide reagent. This reduction method using the MTT reagent uses the principle that when cells are treated with yellow water-soluble MTT tetrazolium, the ring structure of tetrazolium is broken by dehydrogenase in the mitochondria of living cells and reduced to blue-violet water-insoluble MTT formazan. MTT formazan is generally dissolved in an organic solvent such as dimethyl sulfoxide (DMSO) to measure absorbance. At this time, the maximum absorbance of formazan dye is around 540 nm, and living cells can be quantitatively evaluated according to the measured absorbance value.

염증 반응은 외부로부터 물리·화학적 자극으로 인해 손상된 부위를 복구시키는 생체 보호 반응으로서, 자극이 가해지면 국소적으로 혈관 활성 물질이 유리되어 혈관 투과성이 증가하고 면역 반응이 유도된다. 대식세포(macrophage)는 동물 체내 모든 조직에 분포하여, 인체 면역 체계에서 방어 및 항상성을 유지하는 주요 역할을 한다. 체내 염증 과정에서 활성자유종의 일종인 nitric oxide(NO)는 대식세포와 같은 면역세포에 의해 생성되어 각종 생리 및 병리적 과정에 있어 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. NO는 매우 불안정한 화합물로서 LPS, TNF-α 등과 같은 염증 유발 물질에 의한 NO 생성효소인 iNOS의 활성화를 통해 생성된다. 따라서 염증의 발생 억제와 치료 를 위해서는 iNOS의 활성을 억제시키는 것이 중요하다. NO assay는 Griess reagent [1% sulfanilamide, 0.1% N-(1-naphtyl)-ethylene diamine dihydrochloride in 2.5% phosphoric acid]를 사용하여 NO의 생성량을 측정하였으며, RAW264.7(1x105 cells/well)에 LPS를 농도별 시료와 함께 처리하고 24 시간동안 반응시켰다. 각 실험군의 배지 100 μl와 griess reagent를 동량으로 혼합하고 540 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 산화질소 생성량은 sodium nitrate(NaNO3)를 표준으로 사용하여 검량선을 작성하여 계산하였다. Positive control로 iNOS의 활성을 저해함으로써 NO의 생성을 억제하는 저해제로 L-NAME[N-Nitroarginine methyl ester]을 사용하였다.The inflammatory response is a bioprotective reaction that restores damaged areas due to physical and chemical stimuli from the outside. When the stimulation is applied, vasoactive substances are released locally, vascular permeability increases, and an immune response is induced. Macrophages are distributed in all tissues in the body of animals and play a major role in maintaining defense and homeostasis in the human immune system. It is known that nitric oxide (NO), a kind of active free species in the body's inflammatory process, is produced by immune cells such as macrophages and plays an important role in various physiological and pathological processes. NO is a very unstable compound and is produced through the activation of iNOS, an NO synthase, by inflammatory substances such as LPS and TNF-α. Therefore, it is important to inhibit the activity of iNOS for the inhibition and treatment of inflammation. NO assay measured the amount of NO produced using Griess reagent [1% sulfanilamide, 0.1% N-(1-naphtyl)-ethylene diamine dihydrochloride in 2.5% phosphoric acid], and RAW264.7 (1x10 5 cells/well) LPS was treated with samples by concentration and reacted for 24 hours. 100 μl of medium for each experimental group and griess reagent were mixed in equal amounts and absorbance was measured at a wavelength of 540 nm. Nitric oxide production was calculated by preparing a calibration curve using sodium nitrate (NaNO 3 ) as a standard. As a positive control, L-NAME [N-Nitroarginine methyl ester] was used as an inhibitor that inhibits the production of NO by inhibiting the activity of iNOS.

도 1은 HaCaT에 대한 시나몬 에센셜 오일과 트랜스-시나말데하이드의 MTT assay 결과를 그래프로 도시한 것이다. 또한, 도 2는 RAW264.7에 대한 시나몬 에센셜 오일과 트랜스-시나말데하이드의 MTT assay 결과를 그래프로 도시한 것이다. 또한, 도 3은 시나몬 에센셜 오일과 트랜스-시나말데하이드의 항염증 효과 실험 결과를 그래프로 도시한 것이다.1 is a graph showing the MTT assay results of cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde for HaCaT. 2 is a graph showing the MTT assay results of cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde for RAW264.7. In addition, Figure 3 is a graph showing the results of the anti-inflammatory effect test of cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde.

도 1 내지 3을 참조하면, 피부 각질세포인 HaCaT에 대한 MTT assay 결과는 최종 농도가 0.05 내지 20 μg/ml인 시나몬 에센셜 오일과 트랜스-시나말데하이드의 cell viability가 대부분 100% 부근으로 전 범위에 걸쳐 독성이 없는 것으로 나타난 것을 확인할 수 있다. 나아가, RAW264.7에 대해서도 대부분의 농도에서 독성이 없는 것으로 나타났지만, 트랜스-시나말데하이드의 고농도 시료인 20 μg/ml의 cell viability가 76%인 것으로 보아 20 μg/ml의 트랜스-시나말데하이드의 경우 상대적으로 독성이 있음을 확인할 수 있다.1 to 3, the MTT assay results for HaCaT, which are skin keratinocytes, show that the cell viability of cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde with a final concentration of 0.05 to 20 μg/ml is mostly around 100% in the entire range. It can be confirmed that there is no toxicity throughout. Furthermore, RAW264.7 was found to be nontoxic at most concentrations, but the cell viability of 20 μg/ml, a high concentration sample of trans-cinamaldehyde, was 76%, suggesting that 20 μg/ml of trans-cinamaldehyde In the case of , it can be confirmed that it is relatively toxic.

또한, 도 1 내지 3을 참조하면, RAW264.7의 NO assay 결과, LPS 처리가 되지 않은 control -는 NO가 생성되지 않았지만, LPS를 처리한 control +는 LPS 자극에 의해 iNOS가 발현되어 약 30 μM의 NO가 생성된 것을 확인할 수 있다. 나아가, Positive control로 사용한 잘 알려진 항염증제인 L-NAME는 iNOS 발현을 억제시켜 최종적으로 생성된 NO는 control+의 절반 정도인 16.31 μM가 생성된 것을 확인할 수 있다.In addition, referring to FIGS. 1 to 3, as a result of the NO assay of RAW264.7, NO was not produced in the control − not treated with LPS, but iNOS was expressed by LPS stimulation in the control + treated with LPS, and about 30 μM It can be confirmed that NO of is generated. Furthermore, L-NAME, a well-known anti-inflammatory agent used as a positive control, inhibits iNOS expression, and finally, it can be seen that 16.31 μM of NO, which is about half of that of control+, was produced.

시나몬 에센셜 오일은 저농도인 0.05 내지 0.5 μg/ml까지는 별다른 변화가 없었으나 1.0 μg/ml부터 20 μg/ml까지는 생성된 NO의 양이 농도의존적으로 줄어든 것으로 보아 상기 농도 범위에서는 항염증 효과가 있다고 볼 수 있다. 트랜스-시나말데하이드 또한 비슷한 양상을 보이며 0.5 μg/ml부터 20 μg/ml까지 농도의존적으로 NO가 감소하는 것을 확인할 수 있다. 하지만 20 μg/ml에서는 앞의 농도에 비하여 현저히 감소됨을 보였는데 이는 RAW264.7의 MTT assay 결과 20 μg/ml에서 독성이 나타난 것과 연관이 있는 것으로 추정된다. Cinnamon essential oil showed no significant change from 0.05 to 0.5 μg/ml, which is a low concentration, but from 1.0 μg/ml to 20 μg/ml, the amount of NO produced decreased in a concentration-dependent manner. can It can be seen that trans-cinamaldehyde also shows a similar pattern and decreases NO in a concentration-dependent manner from 0.5 μg/ml to 20 μg/ml. However, at 20 μg / ml, it was significantly reduced compared to the previous concentration, which is estimated to be related to the toxicity at 20 μg / ml as a result of the MTT assay of RAW264.7.

이를 토대로 피부에 영향을 끼치지 않는 농도 범위인 0.5 내지 10.0 μg/ml로 제품에 첨가하여 E. coliS. aureus에 대한 항균력을 paper disk diffusion method로 알아보았다.Based on this, it was added to the product in a concentration range of 0.5 to 10.0 μg/ml, which is a concentration range that does not affect the skin, and the antibacterial activity against E. coli and S. aureus was investigated by the paper disk diffusion method.

항균 실험 결과 및 평가Antibacterial test results and evaluation

도 4는 E. coliS. aureus에 대하여 시나몬 에센셜 오일이 첨가된 풋밤의 항균 활성을 측정한 결과를 사진 촬영한 것이다. 여기서, a는 용매(control), b는 ampicillin 1 mg/ml(positive control), c는 시나몬 에센션 오일 0.5 μg/ml, d는 시나몬 에센션 오일 1.0 μg/ml, e는 시나몬 에센션 오일 2.5 μg/ml, f는 시나몬 에센션 오일 5.0 μg/ml 및 g는 시나몬 에센션 오일 10.0 μg/ml이다.4 is a photograph of the results of measuring the antibacterial activity of foot balm to which cinnamon essential oil was added against E. coli and S. aureus . Here, a is solvent (control), b is ampicillin 1 mg/ml (positive control), c is cinnamon essential oil 0.5 μg/ml, d is cinnamon essential oil 1.0 μg/ml, e is cinnamon essential oil 2.5 μg/ml, f is cinnamon essential oil 5.0 μg/ml and g is cinnamon essential oil 10.0 μg/ml.

표 1은 ampicillin 및 시나몬 에센셜 오일의 E. coliS. aureus에 대한 항균 활성 측정 결과를 나타낸 것이다. Table 1 shows the results of measuring the antibacterial activity of ampicillin and cinnamon essential oil against E. coli and S. aureus .

도 4 및 상기 표 1을 참조하면, E. coli에 대해 positive control은 negative control에 비해 1.4 cm 증가된 직경을 나타냈고, 시료의 농도가 25 μg/ml부터는 positive control과 비슷한 크기의 직경이 나타난 것을 확인할 수 있었다. S. aureus에 대해서는 positive control의 직경이 2.6 cm 증가되었고, 5.0 μg/ml 농도에서 마찬가지로 2.6 cm 증가된 것으로 보아 5.0 μg/ml 이상의 농도일 때 ampicillin에 달하는 항균력을 갖는 것을 알 수 있다. 따라서 1.0 내지 10.0 μg/ml 내에서는 시나몬 에센셜 오일을 첨가한 밤타입의 화장료 조성물이 피부에 독성이 없으며 항염증 효과와 항균 효과가 우수한 것을 알 수 있다.Referring to FIG. 4 and Table 1, the positive control for E. coli exhibited a diameter increased by 1.4 cm compared to the negative control, and a diameter similar to that of the positive control appeared from a sample concentration of 25 μg / ml. I was able to confirm. As for S. aureus , the diameter of the positive control was increased by 2.6 cm, and at a concentration of 5.0 μg/ml, it was also increased by 2.6 cm, indicating that the antibacterial activity reached to ampicillin at a concentration of 5.0 μg/ml or more. Therefore, within 1.0 to 10.0 μg / ml, it can be seen that the night-type cosmetic composition to which cinnamon essential oil is added is not toxic to the skin and has excellent anti-inflammatory and antibacterial effects.

도 5는 본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조 모습을 사진 촬영한 것이다. 또한, 도 6은 본 발명의 밤타입 화장료 조성물의 제조방법에 따른 풋밤 형태의 완성품을 사진 촬영한 것이다. 도 5 및 6과 같이 본 발명자들은 시나몬 에센셜 오일의 농도가 5 μg/ml로 첨가된 풋밤 형태의 화장료 조성물을 최종 제품으로서 제작하였다.Figure 5 is a photograph of the manufacturing state of the balm-type cosmetic composition of the present invention. In addition, Figure 6 is a photograph of the finished product in the form of foot balm according to the manufacturing method of the balm-type cosmetic composition of the present invention. As shown in FIGS. 5 and 6, the present inventors prepared a cosmetic composition in the form of a foot balm to which the concentration of cinnamon essential oil was added at 5 μg/ml as a final product.

상술한 바에 따른 본 발명의 계피 추출물을 포함하는 밤타입 화장료 조성물은 무좀 치료, 완효 및 예방에 효과가 있다. 또한, 본 발명은 천연물을 원료로 함에 따라 부작용이 없고, 휴대용으로 제작되어 사용이 간편한 장점이 있다. The night-type cosmetic composition containing the cinnamon extract of the present invention according to the above is effective in treating, curing, and preventing athlete's foot. In addition, the present invention has the advantage that there is no side effect as it uses a natural product as a raw material, and it is made portable and easy to use.

이상의 설명은 본 발명의 기술 사상을 예시적으로 설명한 것에 불과한 것으로서, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 수정 및 변형이 가능할 것이다.The above description is merely an example of the technical idea of the present invention, and various modifications and variations can be made to those skilled in the art without departing from the essential characteristics of the present invention.

따라서, 본 발명에 개시된 실시예들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.Therefore, the embodiments disclosed in the present invention are not intended to limit the technical idea of the present invention, but to explain, and the scope of the technical idea of the present invention is not limited by these embodiments. The protection scope of the present invention should be construed according to the claims below, and all technical ideas within the equivalent range should be construed as being included in the scope of the present invention.

Claims (6)

계피 추출물 및 화장료 분말을 포함하는, 밤타입 화장료 조성물.
A night-type cosmetic composition containing a cinnamon extract and cosmetic powder.
제1항에 있어서,
상기 계피 추출물은 시나몬 에센셜 오일(Cinnamon essential oil) 및 트랜스-시나말데하이드(trans-cinnamaldehyde)을 주성분으로 포함하는, 밤타입 화장료 조성물.
According to claim 1,
The cinnamon extract is a night-type cosmetic composition containing cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde as main components.
제1항에 있어서,
상기 시나몬 에센셜 오일은 1.0 내지 10.0 ㎍/ml의 범위 이내의 농도를 갖는 것을 특징으로 하는, 밤타입 화장료 조성물.
According to claim 1,
The cinnamon essential oil is a night-type cosmetic composition, characterized in that it has a concentration within the range of 1.0 to 10.0 μg / ml.
계피 추출물 및 화장료 분말을 용매에 혼합하여 교반하는 단계;
상기 교반된 혼합물을 압축하여 고체 형상을 생성하는 단계; 및
상기 생성된 고체 형상을 건조하여 밤타입 화장료 조성물을 제조하는 단계;를 포함하는, 밤타입 화장료 조성물의 제조방법.
Stirring the mixture of cinnamon extract and cosmetic powder in a solvent;
compressing the stirred mixture to produce a solid form; and
Method for producing a night-type cosmetic composition comprising a; step of preparing a night-type cosmetic composition by drying the resulting solid shape.
제4항에 있어서,
상기 계피 추출물은 시나몬 에센셜 오일(Cinnamon essential oil) 및 트랜스-시나말데하이드(trans-cinnamaldehyde)을 주성분으로 포함하는, 밤타입 화장료 조성물의 제조방법.
According to claim 4,
The method of producing a night-type cosmetic composition, wherein the cinnamon extract contains cinnamon essential oil and trans-cinnamaldehyde as main components.
제4항에 있어서,
상기 시나몬 에센셜 오일은 1.0 내지 10.0 ㎍/ml의 범위 이내의 농도를 갖는 것을 특징으로 하는, 밤타입 화장료 조성물의 제조방법.
According to claim 4,
The cinnamon essential oil is characterized in that it has a concentration within the range of 1.0 to 10.0 ㎍ / ml, a method for producing a night-type cosmetic composition.
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