KR20230105143A - 신장이식 후 간질 섬유화 및 세뇨관 위축 진단을 위한 정보 제공 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 신장이식 후 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA)을 진단하기 위한 정보 제공 방법 및 진단용 조성물에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 신장이식 수혜자의 ADAMTS2의 mRNA 또는 단백질의 발현 수준을 측정하여 IFTA가 발생했을 가능성에 대한 정보를 제공할 수 있으며, 이는 신장이식 수혜자의 예후, 예를 들면 신장 소실을 예측하기 위한 정보로도 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 신장이식 후 발생하는 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(Interstitial fibrosis and tubular atrophy, IFTA)의 진단 분야에서 활용될 수 있다.
장기 손상은 고령사회화에 따르는 문제로 그 문제성이 대두되고 있으며, 말기기능부전환자에게 가장 이상적인 치료방법인 장기이식은 해마다 증가하고 있다. 기술의 발전과 면역조절제의 사용으로 초기 거부반응은 감소하는 추세이나, 만성면역반응과 간질 섬유화 반응이 장기소실의 주요 원인이 되어가고 있다.
신장이식 후 나타나는 만성 거부반응에는 만성 TCMR과 만성 AMR이 포함되며, 2005년 열린 제8차 Banff 회의에서는 이전까지 사용해 오던 만성 이식신병증(chronic allograft nephropathy, CAN)은 비특이적인 용어로 진단명에 적합하지 않아 사용하지 말 것을 주장하였고 만성 거부반응을 T림프구에 의한 만성 TCMR과 DSA에 의한 만성 AMR로 구분하여 특정 원인 없이 조직 섬유화와 세뇨관 위축을 보이는 경우를 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(Interstitial fibrosis and tubular atrophy, 이하 'IFTA'라 한다.)으로 정의하였다.
신장이식 1년 후에 신 생검 했을 때 약 30%에서 IFTA가 발견되며 10년 후에는 거의 모든 환자에서 IFTA가 발견되고 있다. IFTA는 이식 장기 소실을 예측할 수 있는 중요한 지표이다.
현재 이식된 신장에 대한 모니터링은 신 생검을 통해 이루어지고 있으며 신 생검은 침습적인 검사로 환자들에게 합병증이나 불편감을 초래할 수 있다. 또한 결과 보고까지 시간이 소요되므로 조기진단을 하기가 어렵다.
이로 인해 보다 간편한 조기진단법에 대한 연구가 지속적으로 이루어지고 있다. 그러나 앞선 연구들에서 밝혀진 IFTA와 관련된 mRNA에 대한 연구들이 일치된 결과를 보이지 못하여 임상 적용에 제한이 있으므로, 새로운 분석기술을 이용하여 신장이식 후 IFTA 발생의 조기 진단의 가능성을 높일 수 있는 바이오마커 발굴이 요구되고 있다.
따라서 본 발명자들은 환자의 혈액의 림프구를 이용하여 차세대 염기서열 분석법을 이용한 mRNA sequencing을 분석하여 신장이식 후 IFTA와 관련된 차별발현유전자를 도출하였다. 차별발현 유전자들 중 신장이식 1년 후 신 생검에서 IFTA가 진단된 환자에서 ADAMTS2 유전자 발현량이 증가하는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 ADAMTS2의 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 측정하여 IFTA 진단을 위한 정보 제공 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 ADAMTS2의 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 측정할 수 있는 제제를 이용하여 신장이식 수혜자의 IFTA를 진단용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
1. 신장이식을 받은 개체로부터 분리된 시료에서 ADAMTS2(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 2)의 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 측정하는 단계;를 포함하는 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단을 위한 정보 제공 방법.
2. 위 1에 있어서, 상기 ADAMTS2의 mRNA는 서열번호 1의 서열로 이루어진 것인, 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단을 위한 정보 제공 방법.
3. 위 1에 있어서, 상기 시료는 조직, 세포, 전혈, 혈장, 혈청 또는 혈액인, 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단을 위한 정보 제공 방법.
4. 위 1에 있어서, 상기 ADAMTS2의 mRNA 또는 단백질 발현 수준이 대조군의 mRNA 또는 단백질 발현 수준보다 높으면 대조군보다 IFTA가 발생했을 가능성이 더 높다는 정보를 제공하는 단계;를 더 포함하는, 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단을 위한 정보 제공 방법.
5. ADAMTS2(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 2)의 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 측정할 수 있는 제제를 포함하는, 신장이식 수혜자의 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단용 조성물.
본 발명의 방법 및 조성물을 이용하여 비침습적인 방법으로 신장이식 후 IFTA을 진단하기 위한 정보를 얻거나 진단할 수 있다.
본 발명의 방법 및 조성물을 통해 얻어진 IFTA 진단 결과는 신장이식의 예후를 예측하기 위한 정보로 활용될 수 있다.
도 1은 mRNA 분석 결과에 대한 volcano plot를 나타낸 것이다.
도 2는 IFTA 발생군과 미발생군에서 ADAMTS2 발현량 차이를 비교한 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 IFTA 발생군과 미발생군에서 ADAMTS2 발현량 차이를 비교한 결과를 나타낸 것이다.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 신장이식을 받은 개체로부터 분리된 시료에서 ADAMTS2(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 2)의 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 측정하는 단계;를 포함하는 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단을 위한 정보 제공 방법에 관한 것이다.
상기 신장이식은 정상 기능을 할 수 없는 신장을 대신하기 위해서 기증받은 건강한 신장을 심어주는 수술을 의미하며, 신장이식 수혜자는 신장이식을 받은 개체를 의미한다. 상기 개체는 인간을 포함할 수 있다.
상기 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA)는 특정 원인 없이 조직 섬유화와 세뇨관 위축을 보이는 질환으로 정의된다.
상기 ADAMTS2의 mRNA는 서열번호 1의 서열로 이루어진 것일 수 있다.
상기 ADAMTS2의 mRNA 또는 단백질 발현 수준이 대조군의 mRNA 또는 단백질 발현 수준보다 높으면 대조군보다 IFTA가 발생했을 가능성이 더 높다는 정보를 제공할 수 있다.
상기 대조군은 신장이식을 받지 않은 정상 환자군이나, 신장이식 후 IFTA가 발생하지 않은 이식환자군, IFTA가 발생한 환자군, 또는 IFTA 발생 여부가 불명확한 대조군을 포함하며, 상기 대조군의 mRNA 또는 단백질 발현 수준은 하나 또는 복수 개의 값에서 얻어진 것일 수 있고, 예를 들면 복수 개의 개체에서 얻은 mRNA 또는 단백질 발현 수준의 평균값, 중앙값, 최빈값 등이 될 수 있다.
IFTA가 발생한 개체는 상기 ADAMTS2의 mRNA 또는 단백질 발현 수준이 신장이식을 받거나 받지 않은 정상 대조군과 비교하여 2배, 2.1배, 2.2배, 2.3배, 2.4배, 2.5배, 2.6배, 2.7배, 2.8배, 2.9배, 3배, 3.1배, 3.2배, 3.3배, 3.4배, 3.5배, 3.6배, 3.7배, 3.8배, 3.8배, 3.9배, 4배, 4.1배, 4.2배, 4.3배, 4.4배, 4.5배 이상 높게 나타날 수 있다.
상기 mRNA 또는 단백질 발현 수준의 측정은 본 발명이 속한 분야의 통상의 기술자가 통상 사용되는 방법에 따라 측정할 수 있다.
예를 들면, 상기 mRNA 발현 수준은 마이크로어레이, 역전사효소 중합효소반응(RT-PCR), 경쟁적 역전사효소 중합효소반응(Competitive RT-PCR), 실시간 역전사효소 중합효소반응(Real-time RT-PCR), RNase 보호 분석법(RPA; RNase protection assay), 노던 블랏팅(Northern blotting) 및 면역분석방식 등을 이용할 수 있다.
상기 단백질 발현 수준은 상기 단백질에 특이적으로 결합하는 항체, 펩타이드 또는 뉴클레오티드를 이용하여 측정할 수 있다. 또한, 면역분석법 또는 면역염색법에 의해 측정될 수 있으며, 상기 단백질 또는 이의 단편을 검출할 수 있는 마이크로칩 또는 자동화된 마이크로어레이 시스템의 형태로 실시될 수 있다.
상기 면역분석법 또는 면역염색법은 방사능면역분석, 방사능면역침전, 면역침전, ELISA, 캡처-ELISA, 억제 또는 경쟁 분석, 샌드위치 분석, 유세포 분석, 면역형광염색 및 면역친화성 정제를 포함할 수 있다.
또한, 상기 단백질 발현 수준은 다중 반응 모니터링(multiple reaction monitoring: MRM), 병행 반응 모니터링(parallel reaction monitoring: PRM), sequential windowed data independent acquisition of the total high-resolution(SWATH), 선택 반응 모니터링(selected reaction monitoring: SRM) 또는 면역 다중 반응 모니터링(immuno multiple reaction monitoring: iMRM)을 이용하여 측정될 수도 있다. MRM은 물질의 정확한 단편을 결정하여 이를 질량분석기에서 깬 후, 한 번 깨진 이온 중 특정 이온을 한 번 더 선택하여 연속적으로 연결된 검출기를 이용하여 그 수를 얻는 방법이다.
상기 시료는 조직, 세포, 전혈, 혈장, 혈청 또는 혈액일 수 있고, 구체적으로 혈액의 림프구, 혈액으로부터 분리된 핵산 시료 추출물일 수 있다.
또한, 본 발명은 ADAMTS2의 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 측정할 수 있는 제제를 포함하는, 신장이식 수혜자의 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단용 조성물에 관한 것이다.
상기 조성물의 진단 원리에 대해서는 전술한 바와 같으므로 중복을 피하기 위하여 기재를 생략한다.
상기 조성물에서 mRNA 발현 수준을 측정할 수 있는 제제는 ADAMTS2의 mRNA에 특이적으로 결합하거나 상기 mRNA를 증폭할 수 있는 제제 또는 상기 mRNA를 주형으로 합성된 cDNA에 특이적으로 결합하거나 상기 cDNA를 증폭할 수 있는 제제일 수 있으며, 예를 들면 프라이머나 프로브가 사용될 수 있다.
프라이머는 짧은 자유 3' 말단 수산화기(free 3' hydroxyl group)를 가지는 염기서열로서, 상보적인 템플레이트(template)와 염기쌍(base pair)을 형성할 수 있고 주형 가닥 복사를 위한 시작 지점으로 기능을 하는 짧은 서열을 의미한다.
상기 mRNA 증폭에 사용되는 프라이머는, 적절한 버퍼 중의 적절한 조건(예를 들면, 4개의 다른 뉴클레오시드 트리포스페이트 및 DNA, RNA 폴리머라제 또는 역전사 효소와 같은 중합제) 및 적당한 온도하에서 주형-지시 DNA 합성의 시작점으로서 작용할 수 있는 단일가닥 올리고뉴클레오티드가 될 수 있는데, 상기 프라이머의 적절한 길이는 사용 목적에 따라 달라질 수 있다. 상기 프라이머 서열은 상기 mRNA의 폴리뉴클레오티드 또는 이의 상보적인 폴리뉴클레오티드와 완전하게 상보적일 필요는 없으며, 혼성화할 정도로 충분히 상보적이면 사용가능하다.
프로브는 상기 mRNA와 특이적 결합을 이룰 수 있는, 라벨링(labeling)된 핵산 단편 또는 펩타이드를 의미한다. 예를 들면, 올리고뉴클레오타이드(oligonucleotide) 프로브, 단일 사슬 DNA(single stranded DNA) 프로브, 이중 사슬 DNA(double stranded DNA) 프로브, RNA 프로브, 올리고펩타이드(oligonucleotide peptide) 프로브, 폴리펩타이드(polypeptide) 프로브 등의 형태로 제작될 수 있다.
상기 단백질 발현 수준을 측정할 수 있는 제제는 예를 들면 ADAMTS2에 특이적으로 결합하는 항체, 펩타이드, 뉴클레오티드 등이 이용될 수 있다. 예를 들면, ADAMTS2 단백질에 특이적인 항체가 항원-항체 복합체를 형성하고 항원-항체 복합체의 형성량을 검출 라벨(edetedction label)의 시그널의 크기를 통해서 정량적으로 측정하는 것일 수 있다. 이러한 검출 라벨은 효소, 형광물, 리간드, 발광물, 미소입자(microparticle), 레독스 분자 및 방사선 동위원소로 이루어진 그룹 중에서 선택된 것일 수 있다.
상기 단백질 수준을 측정하기 위한 분석 방법으로는 예를 들어, 웨스턴 블랏팅, ELISA, 방사선 면역분석법, 방사선 면역확산법, 오우크테로니(Ouchterlony) 면역확산법, 로케트 면역전기영동, 면역조직화학염색, 면역침전분석, 보체고정분석, FACS 또는 단백질 칩 등이 이용될 수 있다.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다.
1. 피험자의 정보와 혈액검체 수집 및 mRNA 추출
본 실험의 대상자는 서울대병원 신장내과와 장기이식센터에서 모집하였으며, 해당 기관에서 신장이식을 받은 환자를 대상으로 하였다. 본 연구의 프로토콜은 서울대학교병원의 생명윤리심의위원회에 의해 승인되었으며, 모든 환자의 정보는 서면동의 후 수집하였다.
신장이식을 받은 환자 82명을 대상으로 환자의 인적 정보, 신장이식 정보, 신 생검 정보, 임상검사정보를 수집하였다. 이식 후 일반적으로 계획되어 있는 신 생검을 시행하거나, 임상적으로 급성거부반응으로 의심될 시 신 생검을 시행하며, gun-biopsy 도구로 채취한 조직에 대해 병리학적 진단 정보를 바탕으로 Banff 진단분류에 따라 간질섬유화와 세뇨관위축(Interstital fibrosis and tubular atrophy, IFTA) 또는 경계선 변화(borderline change)가 발생한 환자군(시험군)과 발생하지 않은 이식환자군(대조군)으로 분류하였다. 두 군간의 성별, 나이, 이식 공여자, 기저질환의 분포의 차이는 유의하지 않았다.
| IFTA (n=41) | No IFTA (n=41) | P value | |
| age (mean±standard deviation) | 49.8 ± 10.9 | 49.1 ± 13.9 | 0.83 |
| male (n (percentage)) | 21 (51.2) | 25 (61.0) | 0.50 |
| BMI (±standard deviation) | 23.3 ± 4.0 | 23.4 ± 3.2 | 0.84 |
| dialysis (n (percentage)) | 0.49 | ||
| no dialysis | 9 (22.0) | 10 (24.4) | |
| hemodialysis | 27 (65.9) | 29 (70.7) | |
| peritoneal dialysis | 5 (12.2) | 2 (4.9) | |
| original disease (n (percentage)) | 0.74 | ||
| diabetes | 8 (19.5) | 9 (22.0) | |
| glomerular nephritis | 13 (31.7) | 14 (34.1) | |
| hypertension | 2 (4.9) | 2 (4.9) | |
| polycystic kidney disease | 7 (17.1) | 3 (7.3) | |
| others | 3 (7.3) | 6 (14.6) | |
| unknown | 8 (19.5) | 7 (17.1) | |
| donor type (n (percentage)) | 0.06 | ||
| deceased | 18 (43.9) | 8 (19.5) | |
| living / related | 15 (36.6) | 22 (53.7) | |
| living / unrelated | 8 (19.5) | 11 (26.8) | |
| donor age (mean±standard deviation) | 49.8 ± 12.3 | 46.6 ± 13.3 | 0.27 |
| missing (n (percentage)) | 3 (7.3) | 0 (0) | |
| postoperative days (mean±standard deviation) | 978.8 ± 429.5 | 1098.3 ± 421.3 | 0.21 |
| BMI, body mass index | |||
mRNA 분석을 위한 혈액 검체는 82명의 신장이식 환자에서 말초혈액으로부터 EDTA tube에 채혈하여 Lymphocyte Separation Medium(MP Biomedicals)으로 분리한 림프구에 RNAlater(QIAGEN)를 가하여 -70℃에 보관하였다. 시료로부터 RiboPure RNA Purification Kit-blood(Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, U.S.A)를 이용하여 RNA를 추출하였다.
2. 차세대 염기서열 분석법을 이용한 mRNA sequencing
RNA 순도는 NanoDrop8000 분광광도계에서 총 RNA 추출물 1μ￥μl를 분석하여 결정했다. RIN(RNA Integrity Number) 값이 있는 Agilent Technologies 2100 Bioanalyzer(Palo Alto, CA, U.S.A)를 사용하여 RNA의 품질을 평가했다. mRNA 시퀀싱 라이브러리는 제조업체의 지침(Illumina Truseq mRNA 라이브러리 준비 키트)에 따라 준비되었다. Oligo(dT) magnetic beads를 사용하여 총 RNA(1ug)로부터 mRNA를 정제하였다. 무작위 6량체로 절단된 RNA 단편은 역전사효소, 무작위 프라이머, dUTP를 사용하여 첫 번째 가닥 cDNA로 역전사되었다. 이 cDNA 단편에 단일 'A' 염기가 추가되고 어댑터가 연결되었다. 생성물을 정제하고 PCR로 농축하여 최종 가닥 특이적 cDNA 라이브러리를 생성했다. 증폭된 라이브러리의 품질은 모세관 전기영동(Bioanalyzer, Agilent)으로 확인했다. SYBR Green PCR Master Mix(Applied Biosystems, Foster City, CA, U.S.A.)를 사용한 QPCR 후, 풀에서 등몰량으로 태그가 지정된 라이브러리를 결합했다. cBot 자동화 클러스터 생성 시스템(illumina, San Diego, CA, USA)의 플로우 셀에서 클러스터를 생성했다. 그런 다음 Novaseq 6000 시퀀싱 시스템(Illumina, San Diego, CA, U.S.A)에 로드된 플로우 셀에서 2x100bp 길이로 시퀀싱을 수행했다. 각 샘플의 reads는 Tophat(v2.0.13)으로 reference genome에 매핑되었다. Cuffdiff(v2.2.0)를 사용하여 차별발현유전자를 발굴했다(도 1). ADAMTS2가 IFTA 발생군에서 미발생군보다 발현량이 3.5배 증가(FDR p-value<0.05)하여 차별발현유전자로 발굴되었다(도 2).
3. qRT-PCR 분석
mRNA sequencing에서 도출된 차별발현유전자들 중 ADAMTS2에 대하여 검증을 위하여 qRT-PCR을 수행했다. cDNA는 Oligo(dT)20 프라이밍된 cDNA 합성에 대한 제조업체의 권장 사항에 따라 SuperscriptTM ∥ RT-PCR 시스템(Invitrogen, Karlsruhe, Germany)을 사용하여 생성되었다. cDNA 합성은 42℃에서 500ng의 RNA에 대해 수행되었다. PCR은 ABI PRISM 7900HT Sequence Detection System(Applied Biosystems, Foster City, CA, U.S.A.)에서 10ul를 사용하여 384웰 마이크로타이터 플레이트에서 수행되었다. 최적의 반응 조건은 dNUTP, MgCl2, 반응 완충액 및 Ampli Taq Gold를 포함하는 Universal Master Mix(Applied Biosystems, Foster City, CA, U.S.A.), 90nM의 프라이머 및 250nM 형광 표지된 TaqMan 프로브를 사용하여 얻어졌다. 마지막으로, 2ul 템플릿 cDNA를 반응 혼합물에 첨가했다. 프라이머/TaqMan 프로브 조합은 각 표적 서열에 대해 설계되었다. 증폭은 95℃에서 10분 템플릿 변성 단계로 시작하여 95℃에서 15초 및 60℃에서 1분 동안 40 사이클이 수행되었다. 모든 샘플은 삼중으로 증폭되었고 데이터는 Sequence Detector 소프트웨어(Applied Biosystems)로 분석되었다. 상대 정량화를 위해 비교 Ct 방법을 수행했다. 델타 Ct 값은 표적 유전자의 개별 Ct 값에서 평균 내인성 대조군 Ct 값을 빼서 결정되었다. 델타 Ct 값은 시험군 샘플의 개별 델타 Ct에서 대조군 샘플의 델타 Ct를 빼서 결정되었다. 대조군에 대한 시험군의 fold change는 2^(- 델타 델타 Ct) 로 결정되었다. 발현량 fold change≥2 또는 fold change≤0.5를 cutoff로 설정하였으며 ADAMTS2의 발현량이 IFTA 발생군이 미발생군보다 2.2배 증가하였다(p<0.05).
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gccuccuccg ccccgcgccc ugcggugcug cagcugcggg cggcuccagc ugcccccaga 60
ugugggcugg gcggcucgcg gggaacuuuc gcgccggcug cgagugcggg gccccggcug 120
caguccggcu gccauggauc cgccggcggg agccgcucgc cgccugcucu gccccgcgcu 180
gcugcugcug cugcugcugc ugccgccgcc gcuccugccg ccgccgccgc cgcccgcgaa 240
cgccaggcuc gccgccgccg ccgacccccc aggcgggccc cuggggcacg gagcggagcg 300
cauccuggcg gugcccgugc gcacugacgc ccagggccgc uugguguccc acgugguguc 360
ggcagcuacg uccagagcag ggguacgagc ccgcagggcc gccccggucc ggaccccgag 420
cuuccccgga ggcaacgagg aggagccugg cagucaccuc uucuacaaug ucacggucuu 480
uggccgagac cugcaccugc ggcugcggcc caacgcccgc cucguggcgc ccggggccac 540
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ucagagccug gagaaugucu gccgcugggc cuaccuccag cagaagccag acacgggcca 1200
cgaugaauac cacgaucacg ccaucuuccu cacacggcag gacuuugggc cuuccggcau 1260
gcaaggcuau gcuccuguca ccggcaugug ccauccgguc cgcagcugca cccugaacca 1320
ugaggacggc uucuccucag cguuuguggu ggcccaugag acuggccacg ugcugggcau 1380
ggagcacgac gggcagggca accgcugugg cgacgaggug cggcugggca gcaucauggc 1440
gccccuggug caggccgccu uccaccgcuu ccacuggucc cgcugcagcc agcaggagcu 1500
gagccgcuac cugcacuccu augacugccu gcuggaugac cccuucgccc acgacuggcc 1560
ggcgcugccc cagcucccgg gacugcacua cuccaugaac gagcaaugcc gcuuugacuu 1620
cggccugggc uacaugaugu gcacggcguu ccggaccuuu gaccccugca agcagcugug 1680
gugcagccau ccugacaacc ccuacuuuug caagaccaag aaggggcccc ccuuggacgg 1740
gacuaugugu gcaccuggca agcauuguuu uaaaggacac ugcaucuggc ugacaccuga 1800
cauccucaaa cgggacggca gcuggggcgc uuggaguccg uuuggcuccu gcucacguac 1860
cuguggcacg ggcgugaagu ucaggacccg ccagugugac aacccacacc cggccaacgg 1920
gggccgcacc ugcucgggcc uugccuacga cuuccagcuc ugcagccgcc aggacugccc 1980
cgacucccug gcugacuucc gcgaggagca gugccgccag ugggaccugu acuucgagca 2040
cggcgacgcc cagcaccacu ggcugcccca cgagcaccgg gaugccaagg agagaugcca 2100
ccuguacugc gaguccaggg agaccgggga gguggugucc augaagcgca uggugcauga 2160
cgggacgcgc ugcuccuaca aggacgccuu cagccucugu gugcgcgggg acugcaggaa 2220
ggugggcugu gacgguguga ucggcuccag caagcaggaa gacaagugug gcgugugcgg 2280
aggggacaac agccacugca aaguggucaa gggcacguuc acacggucac ccaagaagca 2340
ugguuacauc aagauguuug agaucccugc aggagccaga caccugcuca uucaggaggu 2400
agacgccacc agccaccauc uggccgucaa gaaccuggag acaggcaagu ucaucuuaaa 2460
ugaagagaau gacguggaug ccaguuccaa aaccuucauu gccaugggcg uggaguggga 2520
guacagagac gaggacggcc gggagacgcu gcagaccaug ggcccccucc acggcaccau 2580
caccguucug gucaucccgg ugggagacac ccgggucuca cugacguaca aauacaugau 2640
ccaugaggac ucacugaaug ucgacgacaa caacguccug gaagaggacu cuguggucua 2700
cgagugggcc cugaagaagu ggucuccgug cuccaagccc uguggcggag ggucccaguu 2760
caccaaguau ggcugccgcc ggaggcugga ccacaagaug guacaccgug gcuucugugc 2820
cgcccucucg aagcccaaag ccauccgcag agcgugcaac ccacaggaau gcucccagcc 2880
aguguggguc acaggcgaau gggagccaug uagccagacc ugugggcgga caggcaugca 2940
ggugcgcucc gugcgcugca uucagccgcu acacgacaac accacccgcu ccgugcacgc 3000
caagcacugc aaugacgccc ggcccgagag ccgccgggcc ugcagccgcg agcucugccc 3060
uggucguugg cgagccgggc ccugguccca gugcucagua accuguggca acggcaccca 3120
ggagcggcca gugcucugcc gcaccgcgga cgacagcuuc ggcaucugcc aggaggagcg 3180
uccugagaca gcgaggaccu gcaggcuugg ccccuguccc cgaaacaucu cagaucccuc 3240
caagaagagc uacguaguuc aguggcuguc ccgcccggac cccgacucgc ccauccggaa 3300
gaucucguca aagggccacu gccaaggcga caagucaaua uucuguagga uggaagucuu 3360
gucccgcuau ugcuccaucc caggcuacaa caagcugugc ugcaaguccu guaaccugua 3420
caacaaccuc accaacgugg agggcaggau agagccaccg ccugggaagc acaacgacau 3480
ugacguguuc augccuaccc ucccagugcc cacuguagcc auggaggugc ggccaucacc 3540
aagcaccccc cuggaggucc cucucaaugc cuccagcacc aaugccacag aggaucaccc 3600
agaaaccaau gccguagaug aacccuacaa aauccauggc cuggaagaug aaguccagcc 3660
acccaaccua aucccucgac gaccgagccc cuaugaaaag accagaaacc aaagaaucca 3720
agagcucauu gaugagaugc ggaagaaaga gaugcucgga aaguucuaau aaaauggaaa 3780
gauagcaucc cuagcauuuu uuucuugcuu auagagauau uccaugggau agcaaauccu 3840
gugucaugga gaugaaguca aaauuccuga uuccaaaagg uuuugagaaa acaaagaggg 3900
ggaaugacgu aagaaagaua ggcaugagca ugugguaacu agguuagcac gugugcuucc 3960
cagcccagga gcgaccaaau acuguggugg cgucaggugu gcaguggaga ggaauauaga 4020
ggcuguaugg ccucccucag ugagggcagg gcaagaggga ucacucugag agaacaaaaa 4080
uaggccccaa guugcuaagc agugauuggg aaccuuccuu uccuuggcgg agaugcauga 4140
cauucccuac cgauccccag acacagccug ugggacucuu aggagaaaug gugauuuacu 4200
gaauaacuga cccguugccg agaugaguac aaugaagugg aggugaugaa cucaaaucgu 4260
cuuccagggc caggcggcug accgggguga gcguaguggc ccgcugggga ccauggccgc 4320
ccugacagcc acacccaccu ggagcugacu ugguucuggc uguugcugcc acugugaaau 4380
cuguaucucu cuccaucucu gcucuacuau ccccggccuu gccagacagu guucuuuuuc 4440
ggaagaaguc uagauuuuug caugaaaaaa acucaaucuu uaaaggucga cucagaacau 4500
uuuaaggagg ccuccacuug gucugaugca gucuugcuaa uuaagaacua aaggccuucu 4560
gaccuucuug gugcucaugc uguacggcau cugaaugucu cgaccgaguc ugagccgugc 4620
agcuguccuc caccugcgaa aguaaugaga auccuaucac gggacauaag gauaggucua 4680
aacagggucc augccaagaa aacagugggg ugcucuccca ggccucuccc cuguccacua 4740
acccuggccu ugccggcugc cuuccaggcu cugggggaag agcuccugca uucuucccug 4800
gccaccuugg cuccagggcu ccccagagag ccucuucccu ccccaaguac cugagaaaga 4860
ugagagaggc acgugcucug cugggaaggu ccagugagcg guucaagggc cuggaaucuc 4920
ccuacggcca agucuaaggg uucugggauu cugggcuuug ugggcuuugc uugcuugcug 4980
ggaaugggcu uucccugucc cgcccugccc caccucgccu cugucucuca gaagcuccag 5040
aacccagcag ugaccugcaa aauguggccu cugauggggg cuuagggugg gagaugggga 5100
gagccuacau ugucuuuugc uccuugaaaa cuuuaauagc uccuauuuuc cagagaaugg 5160
ugcuuuguga gcaacaugcg aguaagagag aaauaggagg aagggggagu aggggcggau 5220
gggagaagag uggcucauuu uuaccucuca cugccuugac auuuugugaa cgugaagcuu 5280
aaacuuucug ggcuuacaag acccaggggc acgucagcuc cuuagauggg cucagccuga 5340
cacauaauuc uuaaaccuuu ccuguuuaag aaacuucuag aggcugugua cucucaccaa 5400
uccucuucga gaauuuguuc auguguauuu ccccauuaua uggaugaggc ucaggauaac 5460
agcauagugg cuaccuucua cugaguuuug aggugcuaau aaguauguuu gucugaggcu 5520
gcacaugugg guggcucugu guguaugauc caagggacaa aaugacgaug uaggaaccag 5580
caagaacgga aucugggcug augcuucagu cuccaccugg gugauggcua gccucccgcc 5640
cuccaccacc gcaucccaca cgugcugcgc acuguccccg ugucuccugg agaaccaaac 5700
uggagaaaac cuuucugagu aucucucaua guaccccuuc cuuaagaaga ugugguuuag 5760
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guugaaccca ggacagcugg ugcuauucac aggcugaaga acugggcagu ucuuacuugg 5880
gucuguccua ggauguggag gaaguucagg acuaacgcua ggcagagagu augacucggu 5940
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gcuuccuggc uugaggcugg aagccuuugg gaagaggccc agcugggaca uucccugggc 6060
accugucuuc cgcugaaggg agcaaggugc ccucugggac ugacagccau gacccucugu 6120
gccauccuca auccuugagc cauauaucaa gaguccucua gagccggaug guccucaaaa 6180
gucuguccaa ggaaugccaa cguucaccgg gcucugagaa acgacgcaaa ucucugagcu 6240
ggggaccacu uggagaaccg gcuuaguaac aguccugauc uucgcaagcc agcuucuucu 6300
gcaucugagg ggcuccuggc gcccagagga ggcagacaga ugucuucuag cugaguuucu 6360
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gucacuucuc cuuagugggc agacucgugu uagauuugug gaacccagcu cucugauuua 6480
cuccuuuugg aaaacccaug gaauuucaug uauaaggcuu ucauuuguau uuuaagguuu 6540
uucuguuugu uuugaguaua uacauggugc ucaauagcaa caucuuagca gaugaagcag 6600
uuuaugauuc cacucccucc uguaugacag guagccacua uacugaauca aggugcugaa 6660
cucaaaucac aaaauucugg cuuaccgaua caacaaccaa uacaucuuug uucuguaaug 6720
uaaaauuuga cuccuuacuu uuauaacuua uuaaaguuaa aaugucugug uuuuugcaaa 6780
uca 6783
Claims (5)
- 신장이식을 받은 개체로부터 분리된 시료에서 ADAMTS2(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 2)의 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 측정하는 단계;를 포함하는 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단을 위한 정보 제공 방법.
- 청구항 1에 있어서, 상기 ADAMTS2의 mRNA는 서열번호 1의 서열로 이루어진 것인, 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단을 위한 정보 제공 방법.
- 청구항 1에 있어서, 상기 시료는 조직, 세포, 전혈, 혈장, 혈청 또는 혈액인, 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단을 위한 정보 제공 방법.
- 청구항 1에 있어서, 상기 ADAMTS2의 mRNA 또는 단백질 발현 수준이 대조군의 mRNA 또는 단백질 발현 수준보다 높으면 대조군보다 IFTA가 발생했을 가능성이 더 높다는 정보를 제공하는 단계;를 더 포함하는, 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단을 위한 정보 제공 방법.
- ADAMTS2(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 2)의 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 측정할 수 있는 제제를 포함하는, 신장이식 수혜자의 간질 섬유화 및 세뇨관 위축(IFTA) 진단용 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220000339A KR20230105143A (ko) | 2022-01-03 | 2022-01-03 | 신장이식 후 간질 섬유화 및 세뇨관 위축 진단을 위한 정보 제공 방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220000339A KR20230105143A (ko) | 2022-01-03 | 2022-01-03 | 신장이식 후 간질 섬유화 및 세뇨관 위축 진단을 위한 정보 제공 방법 |
Publications (1)
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|---|---|
| KR20230105143A true KR20230105143A (ko) | 2023-07-11 |
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ID=87159489
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020220000339A KR20230105143A (ko) | 2022-01-03 | 2022-01-03 | 신장이식 후 간질 섬유화 및 세뇨관 위축 진단을 위한 정보 제공 방법 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20230105143A (ko) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102328932B1 (ko) | 2019-06-21 | 2021-11-19 | 울산대학교 산학협력단 | 신장이식 후 항체 매개성 거부반응의 진단 또는 예측을 위한 소변 엑소좀 바이오마커 |
-
2022
- 2022-01-03 KR KR1020220000339A patent/KR20230105143A/ko unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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