KR20220071355A - Methods for proliferating lactic acid bacteria using chlorophyll-deficient chlorella - Google Patents

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KR20220071355A KR1020200158366A KR20200158366A KR20220071355A KR 20220071355 A KR20220071355 A KR 20220071355A KR 1020200158366 A KR1020200158366 A KR 1020200158366A KR 20200158366 A KR20200158366 A KR 20200158366A KR 20220071355 A KR20220071355 A KR 20220071355A
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Abstract

The present invention relates to a method for proliferating lactic acid bacteria comprising a step of culturing the lactic acid bacteria in a medium containing chlorella not containing chlorophyll. The method for proliferating lactic acid bacteria according to the present invention can not only remarkably increase a lactic acid bacteria growth effect, but also significantly reduce the cost of lactic acid bacteria growth by improving culturability and excluding the use of peptone and/or a yeast extract.

Description

클로로필을 함유하지 않는 클로렐라를 사용한 유산균의 증식방법{Methods for proliferating lactic acid bacteria using chlorophyll-deficient chlorella}Methods for proliferating lactic acid bacteria using chlorophyll-deficient chlorella

본 발명은 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라를 포함하는 배지 중에서 유산균을 배양하는 것을 포함하는 유산균의 증식 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for propagating lactic acid bacteria comprising culturing lactic acid bacteria in a medium containing chlorella that does not contain chlorophyll.

클로렐라를 포함하는 배지 중에서 유산균을 배양할 경우, 유산균의 증식 효율을 높일 수 있다는 것이 알려져 있다. 예를 들어, 클로렐라를 첨가한 요구르트가 개시된 바 있다 (예를 들어, 성윤미 등, 클로렐라를 첨가한 요구르트의 제조와 품질특성, 한국농화학회지 2005년 48권 1호 p.60-64). When culturing lactic acid bacteria in a medium containing chlorella, it is known that the proliferation efficiency of lactic acid bacteria can be increased. For example, yogurt to which chlorella is added has been disclosed (eg, Seong Yun-mi et al., Production and Quality Characteristics of Yogurt with Chlorella, Journal of the Korean Agrochemical Society, 2005 Vol. 48 No. 1 p.60-64).

또한, 클로렐라 존재하에서 유산균을 배양하는 선행문헌으로서, 대한민국 특허공개 제10-2008-0004515호는 미세 조류(예를 들어, 클로렐라 등)와 유산균을 함유하는 배양액 중에서 유산균을 배양하여 얻어지는 유산균 배양물을 유효 성분으로 하는 혈압 저하제를 개시한 바 있으며; 대한민국 특허등록 제10-0574413호는 발효물의 급속 동결을 포함하는 유산균 발효유의 제조방법을 개시한 바 있다.In addition, as a prior document for culturing lactic acid bacteria in the presence of chlorella, Korean Patent Publication No. 10-2008-0004515 discloses a culture of lactic acid bacteria obtained by culturing lactic acid bacteria in a culture medium containing microalgae (eg, chlorella, etc.) and lactic acid bacteria. A blood pressure lowering agent as an active ingredient has been disclosed; Korean Patent Registration No. 10-0574413 discloses a method for producing lactic acid bacteria fermented milk including rapid freezing of the fermented product.

그러나, 종래의 방법에 따라 클로렐라를 함유하는 배지 중에서 유산균을 배양할 경우 유산균의 증식을 어느 정도 촉진할 수 있으나, 그 증식 개선 효과가 여전히 만족스럽지 못할 뿐만 아니라 배지의 조성에 따라 증식 효율에 있어서 큰 편차를 나타내는 문제가 있다.However, in the case of culturing lactic acid bacteria in a medium containing chlorella according to the conventional method, the proliferation of lactic acid bacteria can be promoted to some extent, but the effect of improving the proliferation is still unsatisfactory, and the growth efficiency is large depending on the composition of the medium. There is a problem with the deviation.

본 발명자들은 유산균 증식 효율을 개선할 수 있는 방법을 개발하기 위하여 다양한 연구를 수행하였다. 놀랍게도, 본 발명자들은 특정 클로렐라, 즉 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라의 존재하에서 유산균을 증식시킬 경우, 유산균을 효과적으로 증식시킬 수 있을 뿐만 아니라, 배양성을 개선함으로써 유산균 증식 비용을 현저하게 감소시킬 수 있다는 것을 발견하였다.The present inventors performed various studies in order to develop a method capable of improving the lactic acid bacteria growth efficiency. Surprisingly, the present inventors found that when lactic acid bacteria are grown in the presence of specific chlorella, that is, chlorophyll-free chlorella, not only can the lactic acid bacteria effectively grow, but also the cost of lactic acid bacteria growth can be significantly reduced by improving the culturability. found

따라서, 본 발명은 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라를 포함하는 배지 중에서 유산균을 배양하는 것을 포함하는 유산균의 증식 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a method for propagating lactic acid bacteria comprising culturing the lactic acid bacteria in a medium containing chlorella that does not contain chlorophyll.

본 발명의 일 태양에 따라, 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라를 포함하는 배지 중에서 유산균을 배양하는 것을 포함하는 유산균의 증식 방법이 제공된다.According to one aspect of the present invention, there is provided a method for propagating lactic acid bacteria comprising culturing lactic acid bacteria in a medium containing chlorella that does not contain chlorophyll.

본 발명의 증식 방법에 있어서, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라는 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라 균주를 배양하여 얻어진 균체를 건조하여 얻어진 분말일 수 있다. 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라 균주는 클로렐라 프로토데코이데스(Chlorella protothecoides) 종일 수 있으며, 빛이 존재하지 않는 조건에서 당을 사용하여 종속영양배양을 통하여 얻어진 클로렐라 프로토데코이데스(Chlorella protothecoides) 종일 수 있다. 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라는 건조 중량 기준으로 45 중량% 이상의 미세조류 단백질을 포함할 수 있으며, 건조 중량 기준으로 30 중량% 이하의 지질 함량을 가질 수 있다. In the propagation method of the present invention, the chlorophyll-free chlorella may be a powder obtained by drying the cells obtained by culturing the chlorophyll-free chlorella strain. The Chlorella strain that does not contain the chlorophyll may be a Chlorella protothecoides species, and may be a Chlorella protothecoides species obtained through heterotrophic culture using sugar in the absence of light. The chlorophyll-free chlorella may contain 45% by weight or more of microalgal protein on a dry weight basis, and may have a lipid content of 30% by weight or less on a dry weight basis.

본 발명의 증식 방법에 있어서, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라는 배지 총 중량에 대하여 0.01 ∼ 10 중량%의 양으로 존재할 수 있다. 일 구현예에서, 상기 배지는 펩톤을 포함하지 않는다. 다른 구현예에서, 상기 배지는 효모 추출물을 포함하지 않는다. 또다른 구현예에서, 상기 배지는 펩톤 및 효모 추출물을 포함하지 않는다.In the propagation method of the present invention, the chlorophyll-free chlorella may be present in an amount of 0.01 to 10% by weight based on the total weight of the medium. In one embodiment, the medium does not contain peptone. In another embodiment, the medium does not include yeast extract. In another embodiment, the medium is free of peptone and yeast extract.

일 구현예에서, 상기 유산균은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 또는 락토바실로스 애시도필루스(Lactobacillus acidophilus)일 수 있다.In one embodiment, the lactic acid bacteria may be Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ) or Lactobacillus acidophilus ( Lactobacillus acidophilus ).

본 발명에 따른 유산균의 증식 방법은 유산균 증식 효과를 현저하게 높일 수 있을 뿐만 아니라, 배양성을 개선하여 펩톤 및/또는 효모 추출물의 사용을 배제함으로써 유산균 증식 비용을 현저하게 감소시킬 수 있다.The method for proliferating lactic acid bacteria according to the present invention can not only significantly increase the lactic acid bacteria growth effect, but also improve the culturability to significantly reduce the cost of lactic acid bacteria growth by excluding the use of peptone and/or yeast extract.

도 1는 다양한 배지 조성 중에서 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 균주의 시간별 생균수 및 pH 의 변화를 측정한 결과를 나타낸다.
도 2는 다양한 배지 조성 중에서 락토바실로스 애시도필루스(Lactobacillus acidophilus) 균주의 시간별 생균수 및 pH 의 변화를 측정한 결과를 나타낸다.1 shows the results of measuring the change in the number of viable cells and the pH over time of the Lactobacillus plantarum strain among various media compositions.
2 shows the results of measuring the number of viable cells and changes in pH over time of Lactobacillus acidophilus strains among various media compositions.

본 발명은 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라를 포함하는 배지 중에서 유산균을 배양하는 것을 포함하는 유산균의 증식 방법을 제공한다.The present invention provides a method for propagating lactic acid bacteria comprising culturing lactic acid bacteria in a medium containing chlorella that does not contain chlorophyll.

상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라는 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라 균주를 배양하여 얻어진 균체를 건조하여 얻어진 분말을 바람직하게 사용할 수 있다. 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라 균주는 노란색 콜로니 형태로 배양되는 공지의 클로렐라 속 균주, 예를 들어 클로렐라 프로토데코이데스(Chlorella protothecoides) 종일 수 있다. 바람직하게는, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라 균주는 빛이 존재하지 않는 조건에서 당을 사용하여 종속영양배양을 통하여 얻어진 클로렐라 프로토데코이데스(Chlorella protothecoides) 종일 수 있다. 일 구현예에서, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라 균주는 본 발명자들에 의해 개발된 높은 조 단백질 생산능을 갖는 클로렐라 프로토데코이데스 DS-NCRC7(Chlorella protothecoides DS-NCRC7)(KCTC 18633P)(대한민국 특허등록 제10-2026681호)를 빛이 존재하지 않는 조건에서 당을 사용하여 종속영양배양을 통하여 얻어진 균주일 수 있다. 상기 배양은 통상의 클로렐라 균주의 배양방법, 예를 들어 대한민국 특허등록 제10-2026681호에 개시된 배양방법에 의해 수행될 수 있다. 예를 들어, 상기 배양은 물(예를 들어, 정제수 등) 중에 당원으로서 포도당(Glucose), 인산염(KH2PO4, K2HPO4 등), 금속염(MgSO4, ZnSO4, CuSO4, FeSO4, NaMoO4, MnCl2 등) 등을 포함하는 배지 중에서 수행될 수 있다. 또한, 필요에 따라, 상기 배지는 소포제 등을 추가로 포함할 수 있다. 상기와 같은 배지 중에서의 균주의 배양은 통상의 배양방법, 예를 들어 무균 탱크에서 무균적, 유기종속적(예를 들어, 당원으로서 포도당을 사용하여)으로 수행될 수 있으며, 공기를 0.3∼1.0vvm, 교반을 200∼500rpm, pH는 6.5∼7.5로 조절하여 유가식으로 수행될 수 있다. For the chlorophyll-free chlorella, a powder obtained by drying the cells obtained by culturing the chlorophyll-free chlorella strain may be preferably used. The Chlorella strain that does not contain the chlorophyll may be a known Chlorella genus strain cultured in the form of yellow colonies, for example, Chlorella protothecoides species. Preferably, the Chlorella strain that does not contain chlorophyll may be a Chlorella protothecoides species obtained through heterotrophic culture using sugar in the absence of light. In one embodiment, the Chlorella strain that does not contain chlorophyll is a Chlorella protothecoides DS-NCRC7 having a high crude protein production capacity developed by the present inventors (KCTC 18633P) (Korea Patent Registration) No. 10-2026681) may be a strain obtained through heterotrophic culture using sugar in the absence of light. The culture may be performed by a conventional method of culturing a chlorella strain, for example, the culture method disclosed in Korean Patent Registration No. 10-2026681. For example, in the culture, glucose (Glucose), phosphate (KH 2 PO 4 , K 2 HPO 4 , etc.), metal salt (MgSO 4 , ZnSO 4 , CuSO 4 , FeSO as a sugar source in water (eg, purified water, etc.) 4 , NaMoO 4 , MnCl 2 , etc.) and the like). In addition, if necessary, the medium may further include an antifoaming agent or the like. Cultivation of the strain in the medium as described above can be carried out in a conventional culture method, for example, aseptically and organically (for example, using glucose as a sugar source) in an aseptic tank, and air is supplied with 0.3 to 1.0 vvm. , by adjusting the stirring to 200 to 500 rpm, and the pH to 6.5 to 7.5, it can be carried out in a fed-batch type.

클로로필을 함유하지 않는 클로렐라 균주를 배양하여 얻어진 균체를 건조하여 얻어진 분말(본 명세서에서 '클로렐라 원말' 혹은 '클로렐라 분말'로도 지칭된다)은 예를 들어, 클로렐라 프로토데코이데스(Chlorella protothecoides) 종 등의 균주를 배양한 후, 통상의 방법에 따라 균체(biomass) 회수, 분무건조 등의 건조공정을 통하여 얻어질 수 있다. 예를 들어, 클로렐라 프로토데코이데스(Chlorella protothecoides)의 배양액을 원심분리 등에 의해 균체(biomass)를 회수한 후, 필요에 따라 분무건조 등의 통상의 방법으로 건조하여 제조할 수 있다. 바람직하게는, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라는 건조 중량 기준으로 45 중량% 이상의 미세조류 단백질을 포함할 수 있다. 또한, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라는 건조 중량 기준으로 바람직하게는 30 중량% 이하, 더욱 바람직하게는 20 중량% 이하, 더더욱 바람직하게는 5 ∼ 15 중량%, 특히 바람직하게는 6 ∼ 10 중량%의 지질(lipids) 함량을 가질 수 있다.The powder obtained by drying the cells obtained by culturing the Chlorella strain that does not contain chlorophyll (also referred to herein as 'Chlorella powder' or 'Chlorella powder') is, for example, Chlorella protothecoides ). After culturing the strain, it can be obtained through a drying process such as recovery of biomass and spray drying according to a conventional method. For example, Chlorella protothecoides can be prepared by recovering a culture solution of Chlorella protothecoides by centrifugation or the like, and then drying it by a conventional method such as spray drying if necessary. Preferably, the chlorophyll-free chlorella may contain 45% by weight or more of microalgal protein on a dry weight basis. In addition, the chlorophyll-free chlorella is preferably 30% by weight or less, more preferably 20% by weight or less, still more preferably 5 to 15% by weight, particularly preferably 6 to 10% by weight on a dry weight basis. may have a lipids content of

본 발명의 증식 방법에 있어서, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라의 함량은 특별히 제한된 것은 아니나, 예를 들어 배지 총 중량에 대하여 바람직하게는 0.01 ∼ 10 중량%, 더욱 바람직하게는 0.1 ∼ 5 중량%, 특히 바람직하게는 0.5 ∼ 1.5 중량%의 양으로 존재할 수 있다.In the propagation method of the present invention, the content of chlorophyll-free chlorella is not particularly limited, but for example, preferably 0.01 to 10% by weight, more preferably 0.1 to 5% by weight, based on the total weight of the medium; Particularly preferably, it may be present in an amount of 0.5 to 1.5% by weight.

상기 배지는, 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라에 추가하여, 유산균 증식을 위해 통상적으로 사용되는 배지를 사용할 수 있다. 예를 들어, 상기 배지는 정제수 중에, 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라에 추가하여, 펩톤, 효모 추출물, 소고기 추출물(Beef extract), 당류(예를 들어, 글루코오스 등), 유화제/계면활성제(예를 들어, 트윈 80 등), 염류(예를 들어, K2HPO4, 소듐 아세테이트, 암모늄 시트레이트, MgSO4, MnSO4 등) 등을 포함할 수 있다. 펩톤, 효모 추출물, 소고기 추출물, 당류, 유화제/계면활성제, 염류 등은 유산균 증식을 위해 통상적으로 사용되는 양으로 사용될 수 있으며, 특별히 제한되는 것은 아니다. 일 구현예에서, 상기 배지는 펩톤을 포함하지 않는다. 다른 구현예에서 상기 배지는 효모 추출물을 포함하지 않는다. 또다른 구현예에서, 상기 배지는 펩톤 및 효모 추출물을 포함하지 않는다. As the medium, in addition to chlorophyll-free chlorella, a medium commonly used for the growth of lactic acid bacteria may be used. For example, the medium may contain, in purified water, in addition to chlorophyll-free chlorella, peptone, yeast extract, beef extract, saccharides (eg, glucose, etc.), emulsifiers/surfactants (eg, , Tween 80, etc.), salts (eg, K 2 HPO 4 , sodium acetate, ammonium citrate, MgSO 4 , MnSO 4 , etc.) and the like. Peptone, yeast extract, beef extract, saccharides, emulsifiers / surfactants, salts, etc. may be used in amounts commonly used for the growth of lactic acid bacteria, and are not particularly limited. In one embodiment, the medium does not contain peptone. In another embodiment, the medium does not include yeast extract. In another embodiment, the medium is free of peptone and yeast extract.

본 발명의 증식 방법에 있어서, 상기 유산균은 요구르트 등의 다양한 식품 제조에 사용되는 통상의 유산균을 제한 없이 포함하며, 예를 들어 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 또는 락토바실로스 애시도필루스(Lactobacillus acidophilus)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the propagation method of the present invention, the lactic acid bacteria include, without limitation, conventional lactic acid bacteria used in the manufacture of various foods such as yogurt, for example, Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ) or Lactobacillus acidophilus ( Lactobacillus acidophilus ) may be, but is not limited thereto.

이하, 본 발명을 실시예를 통하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명이 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. However, the following examples are for illustrating the present invention, and the present invention is not limited by the following examples.

대한민국 특허등록 제10-2026681호에 개시된 방법에 따라 클로렐라 프로토데코이데스 DSNCRC7(Chlorella protothecoides DS-NCRC7)(KCTC 18633P)를 5ℓ Jar fermenter 배양한 후, 3000 rpm으로 원심분리하여 균체를 회수한 다음, 얻어진 균체를 건조하여 얻어진 분말을 '클로렐라 원말'로서 하기 실시예에서 사용하였다. 상기 '클로렐라 원말'의 분석 결과, 건조 중량 기준으로 약 8 중량%의 지질 및 약 57 중량%의 미세조류 단백질을 함유하였다.After culturing Chlorella protothecoides DS-NCRC7 (KCTC 18633P) in 5ℓ jar fermenter according to the method disclosed in Korean Patent Registration No. 10-2026681, the cells were recovered by centrifugation at 3000 rpm, and then The powder obtained by drying the cells was used in the following Examples as 'Chlorella raw powder'. As a result of the analysis of the 'Chlorella raw powder', it contained about 8% by weight of lipid and about 57% by weight of microalgal protein on a dry weight basis.

실시예 1. 클로렐라를 함유한 다양한 배지 중에서 유산균 증식 평가Example 1. Evaluation of the proliferation of lactic acid bacteria in various media containing chlorella

하기 표 1의 함량 및 성분에 따라 유산균 배양배지를 제조하였다. 증류수 1L 기준으로 클로렐라 원말은 펩톤(Peptone, P) 대체로는 10g, 효모 추출물(Yeast extract, YE)를 대체하기 위해서는 5g을 사용하였으며, 펩톤과 효모 추출물 모두 대체했을 때는 15g을 사용하였다. 표 1에 따른 성분 및 함량으로 유산균 배양배지를 제조(최종적으로 물을 가하여 1L로 제조)하였다. 얻어진 유산균 배양배지를 121℃에서 20분 살균한 후, 각각의 배지(100 ml)에 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)(대상(주) 식품연구소 발효팀, Lactobacillus plantarum16) 또는 락토바실로스 애시도필루스(Lactobacillus acidophilus)(KCTC 3140)을 각각 1% 접종하고 37℃ 항온기에서 정치배양하였다. A lactic acid bacteria culture medium was prepared according to the contents and components of Table 1 below. Based on 1L of distilled water, 10 g of chlorella raw powder was used to replace peptone (P), 5 g was used to replace yeast extract (YE), and 15 g was used to replace both peptone and yeast extract. A lactic acid bacteria culture medium was prepared with the components and contents according to Table 1 (finally prepared by adding water to 1L). After sterilizing the obtained lactic acid bacteria culture medium at 121° C. for 20 minutes, each medium (100 ml) was added to Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ) ( Daesang Food Research Institute Fermentation Team, Lactobacillus plantarum 16 ) Or Lactobacillus acidophilus ( Lactobacillus acidophilus ) (KCTC 3140) was inoculated with 1%, respectively, and cultured stationary at 37° C. incubator.

조성Furtherance 단위unit 실시예Example 2-12-1 2-22-2 2-32-3 2-42-4 2-52-5 MRSMRS P 대체Replace P YE 대체YE Substitute P 및 YE 대체Replace P and YE P 및 YE 제외Excluding P and YE 클로렐라 원말Chlorella raw material gg 1010 55 1515 00 펩톤 (P)peptone (P) gg 1010 　 1010 　 00 효모 추출물 (YE)Yeast Extract (YE) gg 55 55 　 　 00 소고기 추출물
(Beef extract)beef extract
(Beef extract) gg 1010 1010 1010 1010 1010 글루코오스glucose gg 2020 2020 2020 2020 2020 트윈 80twin 80 mlml 1One 1One 1One 1One 1One K2HPO4 K 2 HPO 4 gg 22 22 22 22 22 소듐 아세테이트sodium acetate gg 55 55 55 55 55 암모늄 시트레이트 Ammonium Citrate gg 22 22 22 22 22 MgSO4 MgSO 4 gg 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 MnSO4 MnSO 4 gg 0.050.05 0.050.05 0.050.05 0.050.05 0.050.05

락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 균주의 시간별 생균수 및 pH 의 변화 및 락토바실로스 애시도필루스(Lactobacillus acidophilus) 균주의 시간별 생균수 및 pH 의 변화를 측정한 결과는 각각 도 2 도 3과 같다. 각각의 배양 배지에서의 생균수는 MRS 아가 플레이트에서 측정하였다. 도 2 및 도 3의 결과로부터, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 균주의 경우, MRS 대비하여 클로렐라 원말에 의한 펩톤 대체가 가능하였으나, 클로렐라 원말에 의한 효모 추출물 대체시에는 생균수가 감소되는 것을 확인할 수 있다. 또한, 락토바실로스 애시도필루스(Lactobacillus acidophilus) 균주의 경우, MRS 대비하여 클로렐라 원말에 의한 펩톤 및 효모 추출물 대체시 생균수가 증가되는 것을 확인할 수 있다.Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ) Changes in the number of viable cells and pH over time and Lactobacillus acidophilus ( Lactobacillus acidophilus ) Results of measuring the number of viable cells and changes in pH over time of the strain are shown in FIGS. 2 and 3 , respectively same. The number of viable cells in each culture medium was measured on MRS agar plates. From the results of FIGS. 2 and 3 , in the case of the Lactobacillus plantarum strain, it was possible to replace the peptone by the chlorella raw end compared to MRS, but it was confirmed that the number of viable cells was reduced when the yeast extract was replaced by the chlorella raw end. can In addition, in the case of Lactobacillus acidophilus strain, it can be confirmed that the number of viable cells is increased when replacing peptone and yeast extract by chlorella raw powder compared to MRS.

Claims (11)

클로로필을 함유하지 않는 클로렐라를 포함하는 배지 중에서 유산균을 배양하는 것을 포함하는 유산균의 증식 방법.A method of proliferating lactic acid bacteria comprising culturing lactic acid bacteria in a medium containing chlorella that does not contain chlorophyll. 제1항에 있어서, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라가 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라 균주를 배양하여 얻어진 균체를 건조하여 얻어진 분말인 것을 특징으로 하는 증식 방법.The growth method according to claim 1, wherein the chlorophyll-free chlorella is a powder obtained by drying the cells obtained by culturing a chlorophyll-free chlorella strain. 제2항에 있어서, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라 균주가 클로렐라 프로토데코이데스(Chlorella protothecoides) 종인 것을 특징으로 하는 증식 방법.The method according to claim 2, characterized in that the chlorophyll-free Chlorella strain is a Chlorella protothecoides species. 제2항에 있어서, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라 균주가 빛이 존재하지 않는 조건에서 당을 사용하여 종속영양배양을 통하여 얻어진 클로렐라 프로토데코이데스(Chlorella protothecoides) 종인 것을 특징으로 하는 증식 방법.The method according to claim 2, wherein the chlorophyll-free Chlorella strain is a Chlorella protothecoides species obtained through heterotrophic culture using sugar in the absence of light. 제1항에 있어서, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라가 건조 중량 기준으로 45 중량% 이상의 미세조류 단백질을 포함하는 것을 특징으로 하는 증식 방법.The method according to claim 1, wherein the chlorophyll-free chlorella comprises at least 45% by weight of microalgal protein on a dry weight basis. 제1항에 있어서, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라가 건조 중량 기준으로 30 중량% 이하의 지질 함량을 갖는 것을 특징으로 하는 증식 방법.The method according to claim 1, characterized in that the chlorophyll-free chlorella has a lipid content of 30% by weight or less on a dry weight basis. 제1항에 있어서, 상기 클로로필을 함유하지 않는 클로렐라가 배지 총 중량에 대하여 0.01 ∼ 10 중량%의 양으로 존재하는 것을 특징으로 증식 방법.The method according to claim 1, wherein the chlorophyll-free chlorella is present in an amount of 0.01 to 10% by weight based on the total weight of the medium. 제1항에 있어서, 상기 배지가 펩톤을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 증식 방법.The method according to claim 1, wherein the medium does not contain peptone. 제1항에 있어서, 상기 배지가 효모 추출물을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 증식 방법.The method of claim 1 , wherein the medium does not contain yeast extract. 제1항에 있어서, 상기 배지가 펩톤 및 효모 추출물을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 증식 방법.The method of claim 1 , wherein the medium does not contain peptone and yeast extract. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 유산균이 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 또는 락토바실로스 애시도필루스(Lactobacillus acidophilus)인 것을 특징으로 하는 증식 방법.The method according to any one of claims 1 to 10, wherein the lactic acid bacteria is Lactobacillus plantarum or Lactobacillus acidophilus .
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