KR20220063162A - 호흡기 병태 치료에 사용하기 위한 tmem16a 조절제로서의 피리딘 유도체 - Google Patents

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Abstract

일반식 (I)의 화합물:
Figure pct00309

(I)
여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 및 R10은 본원에 정의된 바와 같고 TMEM16A에 의해 조절되는 호흡기 질환 및 기타 질환 및 병태 치료에 유용하다.

Description

호흡기 병태 치료에 사용하기 위한 TMEM16A 조절제로서의 피리딘 유도체
본 발명은 칼슘-활성화 클로라이드 채널(CaCC)인 TMEM16A의 양성 조절제로서 활성을 갖는 신규한 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 화합물 제조 방법 및 이를 포함하는 약제학적 조성물, 그뿐만 아니라 TMEM16A에 의해 조절되는 질환 및 병태, 특히 호흡기 질환 및 병태 치료에서 이들 화합물의 용도에 관한 것이다.
인간은 매일 최대 12,000 L의 공기를 흡입할 수 있으며 공기 중 병원체(예컨대 박테리아, 바이러스 및 진균 포자)가 기도로 들어갈 가능성이 있다. 이러한 공기 중 병원체로부터 보호하기 위해 폐는 기도의 감염 및 집락화 가능성을 최소화하는 선천적 방어 메커니즘을 진화시켰다. 그러한 메커니즘 중 하나는 점액 제거 시스템으로, 분비된 점액은 기침 제거와 함께 섬모의 조정된 박동에 의해 기도 밖으로 추진되어 나온다. 이러한 지속적인 폐 '청소'는 흡입된 입자와 미생물을 지속적으로 제거하여 감염 위험을 감소시킨다.
최근 몇 년 동안 점액 젤의 수화는 점액 제거를 가능하게 하는 데 중요하다는 것이 분명해졌다 (Boucher 2007; Matsui et al, 1998). 정상적이고 건강한 기도에서 점액 젤은 일반적으로 97% 물 및 3% w/v 고체이며 이 조건에서 점액은 점액섬모 작용에 의해 제거된다. 기도 점막의 수화는 다수의 이온 채널과 수송체의 조정된 활동에 의해 조절된다. 낭성 섬유증 막횡단 전도도 조절기(CFTR) 및 칼슘 활성화 클로라이드 전도도(CaCC; TMEM16A)를 통해 매개되는 음이온(Cl- / HCO3 -) 분비 및 상피 Na+ 채널(ENaC)을 통한 Na+ 흡수의 균형은 기도 점막의 수화 상태를 결정한다. 이온이 상피를 가로질러 수송될 때, 물은 삼투압적으로 따라가야 하므로 체액이 분비되거나 흡수된다.
만성 기관지염 및 낭성 섬유증과 같은 호흡기 질환에서, 수화가 감소하고 점액 제거가 감소함에 따라 점액 젤의 고체 %가 증가한다 (Boucher, 2007). 낭성 섬유증에서, CFTR의 기능 상실 돌연변이가 기도가 체액을 분비하는 능력을 약화시키는 경우, 고체 %는 15%로 증가할 수 있고 이는 소기도의 막힘 및 점액 제거의 실패에 기여하는 것으로 생각된다. 기도 점액의 수화를 증가시키는 전략은 음이온을 자극하여 체액을 분비하거나 Na+ 흡수를 억제하는 것을 포함한다. 이를 위해, TMEM16A 채널의 활성을 자극하면, 음이온 분비가 증가하여 기도 점막에서 체액 축적이 증가하고 점액이 수화되며 점액 제거 메커니즘이 향상될 것이다.
아녹타민-1 (Ano1)로도 지칭되는 TMEM16A는 칼슘 활성화된 클로라이드 채널의 분자 정체성이다 (Caputo et al, 2008; Yang et al, 2008). TMEM16A 채널은 세포 내 칼슘 수준의 상승에 반응하여 개방되고 세포막을 가로질러 클로라이드, 비카르보네이트 및 기타 음이온의 양방향 플럭스를 허용한다. 기능적으로 TMEM16A 채널은 경상피 이온 수송, 위장 연동, 통각 및 세포 이동/증식을 조절하기 위해 제안되었다 (Pedemonte & Galietta, 2014).
TMEM16A 채널은 폐, 간, 신장, 췌장 및 침샘을 포함하는 다양한 기관의 상피 세포에 의해 발현된다. 기도 상피에서 TMEM16A는 점액 생산 술잔 세포, 섬모 세포 및 점막하 샘에서 높은 수준으로 발현된다. 생리학적으로 TMEM16A는 세포 내 칼슘을 동원하는 자극, 특히 퓨린성 작용제(ATP, UTP)에 의해 활성화되고, 이는 호흡 및 기침과 같은 기타 기계적 자극에 의해 야기된 주기적인 전단 응력에 반응하여 호흡기 상피에 의해 방출된다. 기도의 향상된 수화를 유발하는 음이온 분비 증가 이외에도, TMEM16A의 활성화는 비카르보네이트 분비에서 중요한 역할을 한다. 비카르보네이트 분비는 점액 특성 및 기도 내강 pH의 조절과 이에 따른 디펜신과 같은 천연 항균제의 활성 조절의 중요한 조절인자인 것으로 보고된다 (Pezzulo et al, 2012).
세포 내 칼슘의 상승을 통한 TMEM16A의 간접적인 조절은 임상적으로 탐구되었고 예를 들어 데누포솔이다 (Kunzelmann & Mall, 2003). 소규모 환자 코호트에서 고무적인 초기 결과가 관찰되었지만 이 접근법은 대규모 환자 코호트에서 임상적인 이점을 제공하지 못했다 (Accurso et al 2011; Kellerman et al 2008). 이러한 임상 효과의 결여는 단지, 상피 표면에서 데누포솔의 짧은 반감기 및 수용체/경로 탈감작의 결과인 음이온 분비의 일시적 상승, 및 술잔 세포로부터 증가된 점액 방출과 같은 원치 않는 세포 내 칼슘 상승 효과에 기인한 것이었다 (Moss, 2013). 낮은 수준의 칼슘 상승에서 채널 개방을 향상시키기 위해 TMEM16A에 직접 작용하는 화합물은 환자의 음이온 분비 및 점액섬모 제거를 지속적으로 향상시키고 선천적 방어를 개선할 것으로 예상된다. TMEM16A 활성은 CFTR 기능과 독립적이므로, TMEM16A 양성 조절제는 모든 CF 환자 및 만성 기관지염 및 중증 천식을 비롯한 점액 울혈을 특징으로 하는 비-CF 호흡기 질환에 임상적 이점을 제공할 가능성을 갖는다.
TMEM16A 조절은 쇼그렌 증후군의 타액선 기능장애 및 방사선 요법으로 인한 입안 건조(구강건조증), 안구 건조, 담즙정체 및 위장 운동 장애의 치료법과 관련이 있다.
우리의 출원인 WO2019/145726은 TMEM16A의 양성 조절제이고 따라서 TMEM16A의 조절이 역할을 하는 질환 및 병태, 특히 호흡기 질환 및 병태의 치료에서 사용되는 화합물에 관한 것이다.
본 발명자들은 TMEM16A의 양성 조절제인 추가 화합물을 개발했다. 본 발명의 많은 화합물은 WO2019/145726에 예시된 관련 화합물에 비해 이점을 갖는다. 이러한 이점은 화합물이 경구를 포함하여 전신으로 투여될 때 개선된 약동학(PK)을 유발하는 특성인 감소된 친유성(감소된 로그 D 값으로 표시됨) 및 더 낮은 대사 제거율을 포함한다. 특히, 감소된 친유성은 물에서의 증가된 용해도를 유발한다. 본 발명의 몇몇 화합물은 WO2019/145726에 예시된 화합물보다 개선된 용해도 및 더 낮은 대사 제거율 중 하나 또는 둘 모두를 갖는다. 이는 더 낮은 유효 용량, 투여 후 더 긴 반감기 또는, 경구 투여의 경우, 더 높은 생체이용률과 같은 이점을 유발한다.
발명의 요약
본 발명의 제1 양태에서 모든 호변이성질체 형태, 모든 거울상이성질체, 동위원소 변이체, 및 이들의 염 및 용매화물을 포함하는 일반식 (I)의 화합물이 제공된다:
Figure pct00001
(I)
여기서:
R1은 메틸, 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 클로로디플루오로메틸, 디클로로플루오로메틸, 에티닐 및 CN으로부터 선택되고; 또는
R2 및 R3이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R1 기에 추가하여, OH, 할로, 메틸 또는 CH2OH로 치환된 4- 내지 6-원 카르보사이클릭 고리를 형성하는 경우, R1은 또한 H일 수 있고; 또는
R2 및 R3이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R1 기를 제외하고 비치환인 4- 내지 6-원 카르보사이클릭 고리를 형성하는 경우; R1은 또한 CH2OH일 수 있고;
R2는 메틸 및 CH2OH로부터 선택되고;
R3은 H 및 메틸로부터 선택되고; 또는
R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 10-원 카르보사이클릭 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고, 이들 중 하나는, R1 기에 추가하여, OH, 할로, C1-4 알킬, 하나 이상의 OH 치환기로 치환된 C1-4 알킬, 및 C1-4 할로알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환되고; 또는
R1, R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 결합하여 OH, 할로, C1-4 알킬 및 C1-4 할로알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 가교 카르보사이클릭 또는 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고;
R4는 H 또는 할로이고;
R5 및 R7 각각은 H, 할로, C1-3 알킬 및 C1-3 할로알킬로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 H, 할로, CN 및 할로 및 OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 C1-4 알킬로부터 선택되고;
R8은 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고;
R9는 OH, CH2OH 또는 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고; 또는
R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R10 기에 추가하여, OH, F 및 CH2OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리; 또는 하나 또는 둘의 할로겐 치환기로 임의로 치환된 에테닐 기를 형성하고;
R10은 H, CN, OH, OH로 임의로 치환된 사이클로알킬, 및 할로, OH 및 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릭 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 C1-4 알킬로부터 선택되고, 이들 중 하나는 OH로 임의로 치환되고; 또는
R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 OH, F 및 CH2OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하고;
단:
i. R5 및 R7이 H이고 R6이 H 또는 F인 경우, R1, R2, R3, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이 아니고;
ii. R2, R3, R8, R9 및 R10이 모두 메틸인 경우, R5, R6 및 R7은 모두 H가 아니고;
iii. R1이 CN이고 R2 및 R3이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 10-원 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하는 경우, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이 아니고;
iv. R9 및 R10은 둘 모두 OH가 아니다.
적합하게는 일반식 (I)의 화합물이 제공된다. 또한 화학식 (I)의 화합물의 염, 예컨대 약제학적으로 허용되는 염이 제공된다. 또한 화학식 (I)의 화합물의 용매화물, 예컨대 수화물이 제공된다.
일반식 (I)의 화합물은 TMEM16A의 양성 조절제이므로, 이들은 TMEM16A의 조절이 역할을 하는 질환 및 병태, 특히 호흡기 질환 및 병태 치료에 유용하다.
발명의 상세한 설명
본 명세서에서, 문맥이 표현 언어 또는 필요한 함축으로 인해 달리 요구하는 경우를 제외하고, 단어 "포함하다(comprises)", 또는 "포함하다(comprises)" 또는 "포함하는(comprising)"과 같은 변형은 포괄적인 의미로, 즉 언급된 특징의 존재를 지정하기 위해 사용되지만, 본 발명의 다양한 구체예에서 추가적인 특징의 존재 또는 추가를 배제하지 않는다.
여기에 언급된 모든 문헌 및 특허 문서는 가능한 한 최대한 참조로 포함된다.
본 명세서에서, "약제학적 용도"에 대한 언급은 질환 또는 의학적 상태의 치료 또는 예방을 위해 인간 또는 동물, 특히 인간 또는 포유동물, 예를 들어 가축 또는 축산 포유동물에게 투여하기 위한 용도를 지칭한다. 용어 "약제학적 조성물"은 약제학적 용도에 적절한 조성물을 지칭하고 및 "약제학적으로 허용되는"은 약제학적 조성물에서 사용하기에 적절한 제제를 지칭한다. 다른 유사한 용어는 그에 따라 해석되어야 한다.
일반식 (I)의 화합물의 염 및 용매화물(예컨대 수화물)은 적합하게는 약제학적으로 허용된다. 적합한 약제학적으로 허용되는 염은 당업자에게 잘 알려져 있으며 예를 들어 Gupta et al (2018)에 의해 설명되어 있다. 일반식 (I)의 화합물의 일부 특히 적합한 염은 염기 부가염, 예컨대 소듐, 포타슘, 칼슘, 알루미늄, 아연, 마그네슘 및 기타 금속 염뿐만 아니라 콜린, 디에탄올아민, 에탄올아민, 에틸 디아민 및 메글루민 염을 포함한다. 대안적으로, 산 부가염, 예를 들어 하이드로클로라이드, 메실레이트, 하이드로브로마이드, 설페이트, 및 푸마레이트 염이 형성될 수 있다. 합성 중간체의 염은 약제학적으로 허용될 필요가 없다.
본 명세서에서, 용어 "C1-4 알킬"은 1 내지 4 개의 탄소 원자를 갖는 선형 또는 분지형 완전 포화 탄화수소 기를 지칭한다. 상기 용어는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, s-부틸 및 t-부틸을 포함한다. 다른 알킬 기, 예를 들어 C1-6 알킬 및 C1-3 알킬은 상기 정의된 바와 같지만 언급된 수의 탄소 원자를 포함한다.
용어 "3- 내지 10-원 카르보사이클릭"은 3 내지 10 개의 고리 탄소 원자를 포함하는 비방향족 탄화수소 고리 시스템을 지칭한다. 카르보사이클릭 고리 시스템은 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 포함할 수 있지만 바람직하게는는 사이클로알킬 기이다. 카르보사이클릭 고리 시스템은 단일 고리일 수 있거나, 접합되거나 스피로 배열이거나 가교될 수 있는 두 개의 고리를 포함할 수 있고, 여기서 가교의 탄소 원자는 고리 탄소 원자의 수에 포함된다. 카르보사이클릭 고리 시스템은 명시된 다른 수의 고리 원자, 예를 들어 5 내지 8 개의 고리 원자 또는 3 내지 6 개의 고리 원자를 포함할 수 있다.
본 명세서의 맥락에서, 용어 "사이클로알킬"은 상기 정의된 바와 같은 완전 포화 카르보사이클릭 고리 시스템을 지칭한다. 사이클로알킬 기의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 그뿐만 아니라 가교된 사이클로알킬 시스템, 예컨대 비사이클로[1.1.1]펜틸을 포함한다.
본 명세서의 맥락에서, 용어 "3- 내지 10-원 헤테로사이클릭" 및 "3- 내지 10-원 헤테로사이클릴"은 N, O 및 S로부터 선택된 적어도 하나의 헤테로원자를 포함하는 3 내지 10 개의 고리 원자를 포함하는 비방향족 고리 시스템을 지칭한다. 헤테로사이클릭 고리 시스템은 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 포함할 수 있지만 바람직하게는 완전히 포화된다. 헤테로사이클릭 고리 시스템은 단일 고리일 수 있거나, 접합되거나 스피로 배열이거나 가교될 수 있는 두 개 또는 세 개의 고리를 포함할 수 있고, 여기서 가교 원자는 고리 원자의 수에 포함된다. 산소 포함 헤테로사이클릭 고리는 고리 원자로서 적어도 하나의 산소 및 임의로 O, N 및 S로부터 선택된 하나 또는 둘의 추가 헤테로원자를 포함한다. 3- 내지 6-원 헤테로사이클릭 고리 시스템의 예는 옥세타닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로피라닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐 및 2-옥사스피로[3.3]헵탄-6-일을 포함한다. 헤테로사이클릭 고리 시스템은 명시된 다른 수의 고리 원자, 예를 들어 5 내지 8 개의 고리 원자 또는 3 내지 6 개의 고리 원자를 포함할 수 있다.
용어 "할로겐"은 플루오린, 염소, 브로민 또는 아이오딘을 지칭하고 용어 "할로"는 플루오로, 클로로, 브로모 또는 아이오도 기를 지칭한다. 유사하게, "할라이드"는 플루오라이드, 클로라이드, 브로마이드 또는 아이오다이드를 지칭한다.
용어 "C1-4 할로알킬" 본원에서 사용 시 수소 원자 중 하나 이상이 할로 기에 의해 대체된 상기 정의된 C1-4 알킬 기를 지칭한다. 임의의 수의 수소 원자가 퍼할로 치환까지 대체될 수 있다. 예는 트리플루오로메틸, 클로로에틸 및 1,1-디플루오로에틸을 포함한다. 플루오로알킬 기는 할로가 플루오로인 할로알킬 기이다. 다른 할로알킬 기, 예를 들어 C1-3 할로알킬은 상기 정의된 바와 같지만 명시된 수의 탄소 원자를 포함한다.
용어 "동위원소 변이체"는 화학식 (I)에서 언급된 것과 동일하지만 하나 이상의 원자가 자연에서 가장 흔하게 발견되는 원자 질량 또는 질량수와 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자에 의해 대체된, 또는 자연에서 덜 흔하게 발견되는 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자의 비율이 증가된 (후자의 개념은 "동위원소 농축"으로 지칭됨) 동위원소 표지된 화합물을 지칭한다. 본 발명의 화합물에 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 플루오린, 아이오딘 및 염소의 동위원소, 예컨대 2H (중수소), 3H, 11C, 13C, 14C, 18F, 123I 또는 125I (예를 들어 3H, 11C, 14C, 18F, 123I 또는 125I)를 포함하고, 이는 자연 발생 비자연 발생 동위원소일 수 있다.
일반식 (I)의 화합물의 특히 적합한 동위원소 변이체에서, 일부 또는 모든 메틸 기는 CD3에 의해 대체된다. 예를 들어, R8, R9 및 R10 중 하나, 둘 또는 모두가 CD3일 수 있다.
일부 적합한 일반식 (I)의 화합물에서:
R1은 메틸, 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 클로로디플루오로메틸, 디클로로플루오로메틸, 에티닐 및 CN으로부터 선택되고;
R2는 메틸 및 CH2OH로부터 선택되고;
R3은 H 및 메틸로부터 선택되고; 또는
R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 10-원 카르보사이클릭 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고, 이들 중 하나는, R1 기에 추가하여, OH, 할로, C1-4 알킬, 및 C1-4 할로알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환되고; 또는
R1, R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 결합하여 OH, 할로, C1-4 알킬 및 C1-4 할로알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 가교 카르보사이클릭 또는 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고;
R4는 H 또는 할로이고;
R5 및 R7 각각은 H, 할로, C1-3 알킬 및 C1-3 할로알킬로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 H, 할로, CN 및 할로 및 OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 C1-4 알킬로부터 선택되고;
R8은 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고;
R9는 OH, CH2OH 또는 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고; 또는
R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R10 기에 추가하여, OH, F 및 CH2OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리; 또는 하나 또는 둘의 할로겐 치환기로 임의로 치환된 에테닐 기를 형성하고;
R10은 H, CN, OH, OH로 임의로 치환된 사이클로알킬, 및 할로, OH 및 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릭 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 C1-4 알킬로부터 선택되고, 이들 중 하나는 OH로 임의로 치환되고; 또는
R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 OH, F 및 CH2OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하고;
단:
i. R5 및 R7이 H이고 R6이 H 또는 F인 경우, R1, R2, R3, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이 아니고;
ii. R2, R3, R8, R9 및 R10이 모두 메틸인 경우, R5, R6 및 R7은 모두 H가 아니고;
iii. R1이 CN이고 R2 및 R3이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 10-원 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하는 경우, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이 아니고;
iv. R9 및 R10은 둘 모두 OH가 아니다.
다른 적합한 일반식 (I)의 화합물에서:
R1은 메틸, 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 클로로디플루오로메틸, 디클로로플루오로메틸, 에티닐 및 CN으로부터 선택되고; 또는
R2 및 R3이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 OH, 할로, 메틸 또는 CH2OH로 치환된 4- 내지 6-원 카르보사이클릭 고리를 형성하는 경우, R1은 또한 H일 수 있고;
R2는 메틸 및 CH2OH로부터 선택되고;
R3은 H 및 메틸로부터 선택되고; 또는
R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 10-원 카르보사이클릭 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고, 이들 중 하나는, R1 기에 추가하여, OH, 할로, C1-4 알킬, 하나 이상의 OH 치환기로 치환된 C1-4 알킬, 및 C1-4 할로알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환되고; 또는
R1, R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 결합하여 OH, 할로, C1-4 알킬 및 C1-4 할로알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 가교 카르보사이클릭 또는 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고;
R4는 H 또는 할로이고;
R5 및 R7 각각은 H, 할로, C1-3 알킬 및 C1-3 할로알킬로부터 독립적으로 선택되고;
R6은 H, 할로, CN 및 할로 및 OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 C1-4 알킬로부터 선택되고;
R8은 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고;
R9는 OH, CH2OH 또는 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고; 또는
R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R10 기에 추가하여, OH, F 및 CH2OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리; 또는 하나 또는 둘의 할로겐 치환기로 임의로 치환된 에테닐 기를 형성하고;
R10은 H, CN, OH, OH로 임의로 치환된 사이클로알킬, 및 할로, OH 및 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릭 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 C1-4 알킬로부터 선택되고, 이들 중 하나는 OH로 임의로 치환되고; 또는
R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 OH, F 및 CH2OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하고;
단:
i. R5 및 R7이 H이고 R6이 H 또는 F인 경우, R1, R2, R3, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이 아니고;
ii. R2, R3, R8, R9 및 R10이 모두 메틸인 경우, R5, R6 및 R7은 모두 H가 아니고;
iii. R1이 CN이고 R2 및 R3이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 10-원 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하는 경우, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이 아니고;
iv. R9 및 R10은 둘 모두 OH가 아니다.
일부 일반식 (I)의 화합물에서:
R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R10 기에 추가하여, 하나 이상의 CH2OH 치환기 및 임의로 OH 및 F로부터 선택된 하나 이상의 추가 치환기로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하고; 또는
R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R10 기에 추가하여, OH 및 F로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하고; R10은 CN 또는 OH, OH로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 기 및 OH로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 헤테로사이클릭 기로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4 알킬이고; 또는
R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 하나 또는 둘의 할로겐 치환기로 임의로 치환된 에테닐 기를 형성하고; 또는
R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 하나 이상의 CH2OH 치환기 및 임의로 OH 및 F로부터 선택되는 하나 이상의 추가 치환기로 치환된 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하는 화합물이다.
이들 화합물에서, 더욱 적합하게는:
R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 R10 기를 제외하고 비치환인 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고; R10은 CN 및 CH2OH로부터 선택되고; 또는
R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 CH2OH로 치환된 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하는 화합물이다.
일부 일반식 (I)의 화합물에서:
R8은 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고;
R9는 OH, CH2OH 또는 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고; 또는
R8 및 R9 는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R10 기에 추가하여, OH 및 F로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하고, R10은 H, OH 또는 하나 이상의 할로 치환기로 임의로 치환된 C1-4 알킬이고; 또는
R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 OH 및 F로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하는 화합물이다.
이 유형의 일부 더욱 적합한 화합물에서:
R8은 메틸 또는 에틸이고, R9는OH 또는 CH2OH이고 R10은 메틸 또는 에틸이다. 더욱 적합하게는, R8은 메틸이고, R9는 OH 또는 CH2OH이고 R10은 메틸 또는 에틸이다. 더욱더 적합하게는 R8은 메틸이고, R9는 OH이고, R10은 메틸 또는 에틸이고; 또는 R8은 메틸이고, R9는 CH2OH이고 R10은 메틸이다.
대안적으로, R8은 메틸 또는 에틸이고, R9는 메틸 또는 에틸이고, R10은 OH 또는 OH로 치환된 C1-4 알킬이다. 더욱 적합하게는, R8은 메틸이고, R9는 메틸 또는 에틸이고 R10은 OH 또는 CH2CH2OH이다. 더욱더 적합하게는 R8은 메틸이고, R9는 메틸 또는 에틸이고, R10은 OH이고; 또는 R8은 메틸이고, R9는 메틸이고 R10은 CH2OH이다.
이 유형의 다른 더욱 적합한 화합물에서, R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 6-원 사이클로알킬 고리를 형성하고, 이는 R10 치환기를 제외하고 비치환이고; R10은 OH 또는 CH2OH이다. 더욱더 적합하게는, R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로프로필 또는 사이클로부틸 고리를 형성하고, 이는 R10 치환기를 제외하고 비치환이고; R10은 CH2OH이다.
이 유형의 다른 더욱 적합한 화합물에서, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이다.
일부 일반식 (I)의 화합물에서, R1, R2 및 R3은 모두 메틸이 아니다.
일부 일반식 (I)의 화합물에서, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이 아니다.
일부 일반식 (I)의 화합물에서, R1, R2, R3, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이 아니다.
적합하게는, 일반식 (I)의 화합물에서, R1은 메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 에티닐 또는 CN이다.
일부 일반식 (I)의 화합물에서, R1은 메틸이다.
다른 일반식 (I)의 화합물에서, R1은 에티닐이다.
일부 더욱 적합한 일반식 (I)의 화합물에서, R1은 디플루오로메틸 또는 트리플루오로메틸, 특히 트리플루오로메틸이다.
다른 더욱 적합한 일반식 (I)의 화합물에서, R1은 CN이다.
일부 적합한 일반식 (I)의 화합물에서, R2는 메틸이다.
다른 일반식 (I)의 화합물에서, R2는 CH2OH이다.
R2가 메틸 또는 CH2OH인 일반식 (I)의 화합물에서, R3은 H 또는 메틸이다.
일부 이러한 화합물에서, R3은 H이다. 그러나, 더욱 적합하게는, R3은 메틸이다.
일부 적합한 일반식 (I)의 화합물에서, R2는 메틸이고 R3은 H이다. 일부 적합한 일반식 (I)의 화합물에서, R2는 메틸이고 R3은 메틸이다.
대안적으로, 상기 기재된 바와 같이, R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 상기 기재된 바와 같이 임의로 치환된 3- 내지 10-원 카르보사이클릭 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성한다. 일부 적합한 일반식 (I)의 화합물에서, 고리 시스템은 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리이다. 이 경우에, 고리는 사이클로알킬 고리, 예를 들어 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 사이클로펜틸, 특히 사이클로프로필일 수 있다. 대안적으로, 고리는 완전 포화 3- 내지 6-원 산소 포함 헤테로사이클릭 고리, 예를 들어 테트라하이드로피란, 테트라하이드로푸란 또는 옥세탄 고리일 수 있다. 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리는, R1에 추가하여, OH, 할로, C1-4 알킬 및 C1-4 할로알킬, 더욱 적합하게는 OH, 할로, 메틸, 디플루오로메틸 또는 트리플루오로메틸, 더욱더 적합하게는 OH 및 할로, 예를 들어 OH 및 플루오로로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다.
적합하게는, R2 및 R3이 이 유형의 고리 시스템을 형성하는 경우, R1은 H, 메틸, 트리플루오로메틸, 디플루오로메틸 또는 CN, 더욱 적합하게는 메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸 또는 CN, 더욱더 적합하게는 트리플루오로메틸 또는 CN, 특히 트리플루오로메틸이다. R2 및 R3에 의해 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 형성된 고리 시스템은 기 R1 이외에 적합하게는 비치환이다.
R1이 H이고 R2 및 R3이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 OH, 할로, 메틸 또는 CH2OH로 치환된 4- 내지 6-원 카르보사이클릭 고리를 형성하는 일반식 (I)의 화합물에서, 4- 내지 6- 원 카르보사이클릭 고리에 대해 바람직한 치환기는 OH이다. 적합하게는, 고리는 사이클로펜틸 고리이다.
일부 적합한 화합물에서, R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 4- 내지 6-원 카르보사이클릭 고리를 형성하고, 이는 R1 기 이외에 비치환이다.
이 유형의 일부 적합한 화합물에서, R1은 CH2OH이다. 이 경우에, R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 적합하게는 R1 기 이외에 비치환인 사이클로부틸 또는 사이클로펜틸 고리, 가장 적합하게는 사이클로부틸 고리를 형성한다.
일부 특히 적합한 화합물에서, R1은 트리플루오로메틸이고; R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 R1 이외에 비치환인 사이클로프로필 고리를 형성한다.
일부 적합한 일반식 (I)의 화합물에서, R1, R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 결합하여 OH, 할로, C1-4 알킬 및 C1-4 할로알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 가교 카르보사이클릭 또는 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성한다.
일부 적합한 화합물에서 R4는 H 또는 F와 같은 할로이다. 특히 적합한 화합물에서, R4는 H이다.
일부 적합한 화합물에서, R5 및 R7 각각은 H이다.
적합한 일반식 (I)의 화합물에서, R6은 H, 할로, CN 및 할로 및 OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 메틸로부터 선택된다. 더욱 적합하게는, R6은 H, 할로, CN, CH3, CF3, CHF2, CH2F 또는 CH2OH, 더욱더 적합하게는 할로 또는 메틸, 특히 플루오로 또는 클로로와 같은 할로이다.
적합한 일반식 (I)의 화합물에서, R4는 H이고; 및/또는 R5 및 R7 각각은 H이고; 및/또는
R6은 H, 할로, CN, CH3, CF3, CHF2, CH2F 또는 CH2OH인 화합물이다. 적합하게는, R4는 H이고 R5 및 R7 각각은 H이다. 적합하게는, R4는 H이고 R6은 H, 할로, CN, CH3, CF3, CHF2, CH2F 또는 CH2OH이다. 적합하게는, R5 및 R7 각각은 H이고 R6은 H, 할로, CN, CH3, CF3, CHF2, CH2F 또는 CH2OH이다. 적합하게는, R4는 H이고, R5 및 R7 각각은 H이고, R6은 H, 할로, CN, CH3, CF3, CHF2, CH2F 또는 CH2OH이다.
일부 적합한 일반식 (I)의 화합물에서, R8은 메틸 또는 에틸, 특히 메틸이다.
본 발명의 일부 적합한 화합물에서, R8은 메틸 또는 에틸, 특히 메틸이고, R9는 메틸, CH2OH 또는 OH이다. 특히, R8은 메틸이고 R9는 OH이다.
발명의 다른 적합한 화합물에서 R8 및 R9는 각각 독립적으로 메틸 또는 에틸이다. 더욱 적합하게는, R8 및 R9 중 하나는 메틸이고 R8 및 R9 중 다른 하나는 메틸 또는 에틸이다.
대안적으로, R8 및 R9가 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하는 경우, 고리는 적합하게는 R10 모이어티를 제외하고 비치환이다. R8 및 R9에 의해 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 형성된 고리는 사이클로알킬 고리 및 단일 고리 산소 원자를 갖는 헤테로사이클릭 고리, 예를 들어 사이클로프로필, 사이클로부틸, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로푸라닐 및 옥세타닐로부터 적합하게 선택된다.
R10은 적합하게는 H, CN, 사이클로프로필, 사이클로부틸 및 메틸 또는 에틸로부터 선택되고, 여기서 메틸 또는 에틸은 비치환이거나 플루오로, OH 및 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴 기로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된다.
더욱 적합하게는, R10은 CN, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 비치환 메틸 또는 플루오로, OH 및 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴 기로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 메틸이다.
R10이 헤테로사이클릭 기로 치환된 메틸 또는 에틸인 경우, 이는 적합하게는 하나 이상의 추가 헤테로원자를 임의로 포함하고 고리 질소 원자를 통해 메틸 또는 에틸 기의 탄소 원자에 결합된 5- 또는 6-원 질소 포함 헤테로사이클이다. 이러한 헤테로사이클릭 기의 예는 모르폴리닐, 피롤리디닐, 피페리디닐 및 피페라지닐을 포함한다.
특히 적합한 일반식 (I)의 화합물에서, R10은 CN, 메틸, CF3, CH2OH, 사이클로프로필메틸 또는 모르폴리닐메틸, 예를 들어 모르폴린-4-일메틸, 및 특히 CH2OH이다.
R8이 메틸 또는 에틸이고 R9가 OH 또는 CH2OH인 경우, R10은 적합하게는 메틸 또는 에틸이다.
R8이 메틸 또는 에틸이고, R9가 메틸 또는 에틸인 경우, R10은 적합하게는 OH 또는 OH로 치환된 C1-4 알킬; 더욱 적합하게는 OH 또는 CH2OH이다.
R8 및 R9가 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하는 경우, R10은 더욱 적합하게는 메틸, 에틸, CH2OH, CH2CH2OH, 트리플루오로메틸 또는 CN이다.
일부 특히 적합한 화합물에서, R10은 CH2OH이다.
일부 일반식 (I)의 화합물에서, R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 또는 옥세타닐 고리, 특히 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 옥세타닐 고리를 형성하고, 이는 R10 기를 제외하고 비치환일 수 있거나 R10 기에 추가하여 단일 CH2OH 치환기를 가질 수 있고; R10은 메틸, CH2OH, 트리플루오로메틸 또는 시아노이다.
일부 이러한 화합물에서, R10은 CH2OH 또는 시아노이다.
일부 이러한 화합물에서, 고리는 R10 기를 제외하고 비치환이고 R10은 CH2OH 또는 시아노, 특히 CH2OH이다.
다른 이러한 화합물에서, 고리는 R10 기를 제외하고 비치환이고 R10은 메틸 또는 트리플루오로메틸이다.
R8, R9 및 R10이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 비치환 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하는 경우, 이는 적합하게는 가교된 고리 시스템, 예컨대 비사이클로[1.1.1]펜탄, 비사이클로[2.1.1]헥산 또는 비사이클로[2.2.1]헵탄이다. 적합하게는, 고리는 비치환이거나 단일 CH2OH 치환기로 치환된다.
일반식 (I)의 화합물의 특정 예는 다음을 포함한다:
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-메틸사이클로프로필)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.1);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-에티닐사이클로펜틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.2);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.3);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1R)-1-시아노에틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.3a/b);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1S)-1-시아노에틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.3 a/b);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.4);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노사이클로프로필)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.5);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.6);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1R)-1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.6 a/b);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1S)-1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.6 a/b);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.7);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2);
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.1);
N-tert-부틸-4-[[2-[4-(1-시아노-1-메틸-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.2);
4-[[2-[4-(1-시아노-1-메틸-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.3);
N-tert-부틸-4-[[2-[4-(1-시아노사이클로프로필)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸] 아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.4);
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[4-(1,1-디메틸-2-모르폴리노-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.5);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.6);
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.7);
4-[[2-[4-(1-사이클로프로필-1-하이드록시-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.8);
4-[[2-[4-(4-시아노테트라하이드로피란-4-일)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.9);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[2-(트리플루오로메틸)옥세탄-2-일]페닐] 아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.10);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-프로필)페닐] 아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.11);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1S)-1-하이드록시-1-메틸-프로필]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.11 a/b);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1R)-1-하이드록시-1-메틸-프로필]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.11 a/b);
4-[[2-[5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-2-메틸-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.12);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(하이드록시메틸)사이클로부틸]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.13);
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[2-(트리플루오로메틸)옥세탄-2-일]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.14);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[4-(하이드록시메틸)테트라하이드로피란-4-일]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.15);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(하이드록시메틸)사이클로프로필]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.16);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-5-플루오로-피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 3);
N-(1-시아노사이클로프로필)-4-[[2-[2-듀테리오-6-플루오로-3-하이드록시-4-[2,2,2-트리듀테리오-1,1-비스(트리듀테리오메틸)에틸]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 4);
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-메틸사이클로 부틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 5);
N-tert-부틸-4-[[2-(4-tert-부틸-5-하이드록시-2-이소프로필-페닐)아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 6);
N-tert-부틸-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐] 아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 7);
4-[[2-(2-플루오로-5-하이드록시-4-이소프로페닐-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 7.1);
N-tert-부틸-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-메틸사이클로프로필)페닐] 아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 8);
N-(1-시아노사이클로프로필)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 9);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 10);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 10.1);
4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노사이클로프로필) 피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 10.2);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(3-하이드록시-1,1-디메틸-프로필)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 11);
N-(4-시아노테트라하이드로피란-4-일)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 12);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[3-(트리플루오로메틸)옥세탄-3-일]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 12.1);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[(1S,2S)-2-하이드록시사이클로펜틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 12.2);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 12.3);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(하이드록시메틸)사이클로부틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 12.4);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(4-하이드록시테트라하이드로피란-4-일)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 13);
4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 14);
4-[[2-[5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)-2-메틸-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 14.1);
N-(3,3-디플루오로-1-메틸-사이클로부틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 15);
4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 15.1);
4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(3,3-디플루오로-1-메틸-사이클로부틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 15.2);
4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(디플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 15.3);
N-[1-(디플루오로메틸)사이클로프로필]-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 15.4);
N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 16);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(4-메틸테트라하이드로피란-4-일)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 16.1);
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 16.2);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(4-메틸테트라하이드로피란-4-일)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 16.3);
4-[[2-[2,6-디플루오로-3-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 16.4);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[2,2,2-트리플루오로-1-(하이드록시메틸)에틸]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 17);
4-[[2-[2-클로로-6-플루오로-3-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 18);
4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 19);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 20);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 20a/b);
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 20a/b);
및 상기의 염 및 용매화물.
일반식 (I)의 화합물은 일반식 (II)의 화합물을:
Figure pct00002
(II)
(여기서 R4, R5, R6, R7, R8, R9 및 R10은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같음);
일반식 (III)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00003
(III)
(여기서 R1, R2 및 R3은 일반식 (I)에서 정의된 바와 같음).
적합하게는, 반응은 커플링 시약의 존재에서 염기성 조건하에, 예를 들어 디이소프로필에틸아민 (DIPEA)과 같은 아민의 존재에서 DMF와 같은 유기 용매에서 수행된다.
적합한 커플링 시약은 공지된 펩타이드 커플링제, 예컨대 O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HBTU), O-(벤조트리아졸-1-일)- N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TBTU), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HATU), O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)- N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트 (TATU), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (BOP), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (PyBOP) 카르보디이미드, 예컨대 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 (EDCI) 및 트리아졸, 예컨대 1-하이드록시-7-아자벤조트리아졸 (HOAt) 또는 하이드록시벤조트리아졸 (HOBt)을 포함한다.
적합하게는, 이러한 커플링제가 사용되는 경우, 반응은 염기성 조건하에, 예를 들어 디이소프로필에틸아민 (DIPEA)과 같은 아민의 존재에서 DMF와 같은 유기 용매에서 수행된다.
대안적으로, 커플링 시약은 프로필포스폰산 무수물 (T3P®)일 수 있다. T3P가 커플링 시약으로 사용되는 경우, 반응은 염기성 조건하에, 예를 들어 디이소프로필에틸아민 (DIPEA) 또는 트리에틸아민 (TEA)과 같은 아민의 존재에서 디옥산과 같은 유기 용매에서 수행될 수 있다.
커플링제, 예컨대 HATU, HBTU, TBTU 및 TATU는 이 반응에 특히 적합하다.
일반식 (III)의 화합물은 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 합성될 수 있다.
일반식 (II)의 화합물은 일반식 (IV)의 화합물을 탈보호시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00004
(IV)
여기서 R4, R5, R6, R7, R8, R9 및 R10은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고 R15 및 R16 각각은 독립적으로 C1-6 알킬이다.
적합하게는, 탈보호는 보론 트리브로마이드와의 반응에 의해 수행되고, 이는 R15 및 R16 모두 메틸인 경우 특히 유용하다.
보론 트리브로마이드 탈보호는 디클로로메탄와 같은 극성 유기 용매에서 수행될 수 있다. 냉각은 초기에, 예를 들어 약 -5 내지 5 ℃로 필요할 수 있고, 반응은 이후 약 15 내지 25 ℃의 온도, 일반적으로 실온으로 가온될 수 있다.
일반식 (IV)의 화합물은 일반식 (V)의 화합물을:
Figure pct00005
(V)
(여기서 R5, R6, R7, R8, R9 및 R10은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고 R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같음);
일반식 (VI)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00006
(VI)
(여기서 R4는 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고 R15는 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같음).
적합하게는, 반응은 상기 기재된 바와 같은 커플링제의 존재하에 일어나고, T3P®가 특히 적합하다.
일반식 (VI)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 합성될 수 있다.
일반식 (V)의 화합물의 합성은 아래에서 더 자세히 논의될 것이다.
일반식 (IV)의 화합물의 합성을 위한 대안 방법은 일반식 (VII)의 화합물의 카르보닐화에 의한 것이다:
Figure pct00007
(VII)
여기서 R4, R5, R6, R7, R8, R9 및 R10은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고, R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같고 R17은 할로, 예를 들어 브로모이다.
카르보닐화는 Pd(dppf)Cl2 ([1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 디클로로팔라듐(II))과 같은 팔라듐 촉매 및 트리메틸아민과 같은 염기의 존재하에 메탄올과 같은 알코올성 용매에서 일산화 탄소와의 반응에 의해 수행될 수 있다. 일산화 탄소는 포름산 및 메탄 설포닐 클로라이드와 트리에틸아민의 반응에 의해 제자리에서 생성될 수 있다.
일반식 (VII)의 화합물은 상기 정의된 일반식 (V)의 화합물을 일반식 (VIII)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00008
(VIII)
여기서 R4는 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고 R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같다.
적합하게는, 반응은 상기 정의된 커플링 시약의 존재하에 수행되고, T3P®가 특히 적합하다.
일반식 (VIII)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다.
R8 및 R9가 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로알킬 기를 형성하고 R10이 메틸인 일반식 (IV)의 화합물은 일반식 (XXXI)의 화합물을:
Figure pct00009
(XXXI)
(여기서 R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고 R15 및 R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같음);
일반식 (XXXII)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00010
(XXXII)
(여기서 n은 0 내지 3임).
적합하게는, 반응은 진한 황산의 존재하에 일어난다.
일반식 (XXXII)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 당업자에 의해 합성될 수 있다.
일반식 (XXXI)의 화합물은 일반식 (IX)의 화합물을:
Figure pct00011
(IX)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고 R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같음);
상기 정의된 일반식 (VI)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다.
적합하게는, 반응은 상기 기재된 바와 같은 커플링제의 존재하에 일어나고, T3P®가 특히 적합하다.
일반식 (VI) 및 (IX)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 합성될 수 있다.
치환기의 성질에 따라 일반식 (V)의 화합물을 제조하는 많은 방법이 있다.
예를 들어, R8 및 R9가 메틸이고 R10이 메틸 또는 할로메틸인 일반식 (V)의 화합물은 상기 정의된 일반식 (IX)의 화합물의 알킬화에 의해 제조될 수 있다.
적합한 알킬화 반응은 루이스산 촉매, 예를 들어 FeCl3의 존재하에 일반식 (X)의 화합물과의:
Figure pct00012
(X)
(여기서 R10은 할로로 임의로 치환된 메틸이고 R18은 할로, 예를 들어 클로로 또는 브로모임);
프리델-크래프트 알킬화를 포함한다. 이 방법은 R6이 F인 화합물에 특히 적합하다.
대안적으로, R6이 할로인 일반식 (IX)의 화합물에 대해, 알킬화는 일반식 (XI)의 화합물과의 반응에 의해 수행될 수 있다:
Figure pct00013
(XI)
여기서 R10은 할로로 임의로 치환된 메틸이다.
적합하게는, 반응은 진한 황산의 존재하에 수행된다.
대안적으로, 알킬화는 진한 황산의 존재하에 일반식 (XIII)의 화합물과의:
Figure pct00014
(XIII)
(여기서 R10은 할로로 임의로 치환된 메틸임);
반응에 의해 수행될 수 있다.
일반식 (X), (XI) 및 (XIII)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다.
일반식 (IX)의 화합물은 또한 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다. 예를 들어, R6이 Cl 또는 Br인 일반식 (IX)의 화합물은 일반식 (XII)의 화합물의 염소화 또는 브로민화에 의해 제조될 수 있다:
Figure pct00015
(XII)
여기서 R5 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고 R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같다.
적합한 할로겐화제는 N-클로로 석신이미드 및 N-브로모석신이미드를 포함한다.
일반식 (XII)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다.
일반식 (I)의 화합물의 제조를 위한 대안 방법은 일반식 (XXI)의 화합물의 탈보호에 의한 것이다:
Figure pct00016
(XXI)
여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 및 R10은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 하나 이상의 메톡시 기로 임의로 치환된 벤질이다.
적합하게는, 탈보호는 예를 들어 팔라듐 촉매, 일반적으로 탄소 담지 팔라듐을 사용하는 촉매 수소화에 의해 달성될 수 있다. 반응은 알코올성 용매, 예를 들어 메탄올 또는 에탄올에서 수행될 수 있다. R20이 하나 이상의 메톡시 기로 치환된 벤질인 경우, 탈보호는 또한 염산 또는 트리플루오로아세트산과 같은 강산으로 처리하여 달성될 수 있다. 추가 탈보호 방법은 예를 들어 하기 실시예 19에 제시된 조건하에 니켈 (II) 염의 존재에서 소듐 보로하이드라이드를 사용한 처리를 포함한다.
이 방법은 특히 헤테로사이클릭 고리가 질소 원자를 통해 CH2에 결합되는 경우, R10이 OH, CN, 할로메틸 (예를 들어 CF3) 또는 OH로 치환된 메틸 또는 헤테로사이클릭 고리인 일반식 (I)의 화합물에 특히 적합하다. 또한, 이는 R8 및 R9가 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 (단독으로 또는 방금 언급된 R10 기와 조합으로) 형성하는 일반식 (I)의 화합물에 적합하다.
일반식 (XXI)의 화합물은 일반식 (XXII)의 화합물과:
Figure pct00017
(XXII)
(여기서 R1, R2, R3 및 R4는 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같음);
일반식 (XXV)의 화합물의 반응에 의해 제조될 수 있다:
Figure pct00018
(XXV)
(여기서 R5, R6, R7, R8, R9 및 R10은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음).
적합하게는, 반응은 상기 기재된 바와 같이 커플링 시약의 존재하에 수행된다. 일반적으로, T3P®는 커플링 시약으로서 사용될 수 있다.
일반식 (XXII)의 화합물은 상기 정의된 일반식 (III)의 화합물을 일반식 (XXIII)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00019
(XXIII)
여기서 R4는 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같다.
적합하게는, 반응은 상기 기재된 바와 같은 커플링 시약, 예를 들어 HATU와 같은 커플링 시약의 존재에서 수행된다.
일반식 (XXIII)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다.
일반식 (XXV)의 일부 화합물은 공지되어 있지만, 다른 것은 당업자에 의해 합성될 수 있다.
예를 들어, R8 및 R9가 독립적으로 메틸 또는 에틸이고 R10이 OH인 일반식 (XXV)의 화합물은 일반식 (XXVI)의 화합물로부터:
Figure pct00020
(XXVI)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R8 및 R9 각각은 독립적으로 메틸 또는 에틸이고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음);
Pd 촉매 (예컨대 [Pd(알릴)Cl]2), 포스핀 리간드 (예컨대 BINAP) 및 유기 염기 (예컨대 DMAP)의 존재에서 말론산 모노에스테르의 알칼리 금속 염 (예컨대 메틸 포타슘 말로네이트) 또는 시아노아세트산의 알칼리 금속 염 (예컨대 포타슘 2-시아노아세테이트)과의 반응에 의해 제조될 수 있다. 이후 생성된 에스테르 또는 니트릴은 수성 염기로 가수분해될 수 있다.
일반식 (XXVI)의 화합물은 일반식 (XXVII)의 화합물로부터 제조될 수 있다:
Figure pct00021
(XXVII)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R8은 메틸 또는 에틸이고 R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음);
적절한 조건하에 R9-MgBr와 같은 알킬 그리냐르 시약과의 반응에 의해 제조될 수 있다 (여기서 R9는 메틸 또는 에틸임).
일반식 (XXVII)의 화합물은 일반식 (XXVIII)의 화합물의:
Figure pct00022
(XXVIII)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R8은 메틸 또는 에틸이고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같음);
적합하게는 포타슘 카르보네이트와 같은 약염기의 존재에서 화합물 R20-Br (여기서 R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음)과의 반응에 의한 탈보호에 의해 제조될 수 있다.
일반식 (XXVIII)의 화합물은 일반식 (XXIX)의 화합물로부터:
Figure pct00023
(XXIX)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R8은 메틸 또는 에틸이고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같음);
상승된 온도, 일반적으로 약 150 내지 200 ℃에서 무용매 반응에서 알루미늄 클로라이드와의 반응에 의해 제조될 수 있다.
일반식 (XXIX)의 화합물은 일반식 (XXX)의 화합물로부터:
Figure pct00024
(XXX)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같음);
R8이 메틸인 일반식 (XXIX)의 화합물에 대해 에타노일 클로라이드와 또는 R8이 에틸인 일반식 (XXIX)의 화합물에 대해 프로파노일 클로라이드와의 반응에 의해 제조될 수 있다.
일반식 (XXX)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다.
R9가 메틸 또는 할로메틸이고 R10이 CN인 일반식 (XXV)의 화합물은 일반식 (XXXV)의 화합물로부터:
Figure pct00025
(XXXV)
(여기서 R5, R6, R7 및 R8은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고, R9는 메틸이고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고 R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음);
Pd 촉매 (예컨대 [Pd(알릴)Cl]2), 포스핀 리간드 (예컨대 BINAP) 및 유기 염기 (예컨대 DMAP)의 존재에서 말론산 모노에스테르의 알칼리 금속 염 (예컨대 메틸 포타슘 말로네이트)과의 반응에 의해 제조될 수 있다. 이후 생성된 에스테르는 수성 염기로 가수분해될 수 있다.
R8 및 R9가 독립적으로 메틸 또는 에틸인 일반식 (XXXV)의 화합물은 일반식 (XXXVI)의 화합물로부터 제조될 수 있다:
Figure pct00026
(XXXVI)
여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고 R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같다.
R8 및 R9가 동일한 화합물에 대해, 일반식 (XXXVI)의 화합물은 하기 일반식의 화합물과:
R8-I;
(여기서 R8은 메틸 또는 에틸임);
소듐 하이드라이드와 같은 강염기의 존재에서 반응될 수 있다.
R8 및 R9가 동일하지 않을 경우, 일반식:
R8-I 및 R9-I;
(여기서 R8 및 R9 중 하나는 메틸이고 다른 하나는 에틸임);
의 화합물을 사용하여 다시 소듐 하이드라이드와 같은 강염기의 존재에서 순차적 반응이 수행될 수 있다.
일반식 (XXXVI)의 화합물은 일반식 (XXXVII)의 화합물을:
Figure pct00027
(XXXVII)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같음);
화합물 R20-Br와 반응시켜 (여기서 R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음) 제조될 수 있다.
화합물 R20-Br은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다.
일반식 (XXXVII)의 화합물은 보호된 일반식 (XXXVIII)의 화합물을:
Figure pct00028
(XXXVIII)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R25는 OH 보호기, 예를 들어 트리(C1)-6 알킬) 실릴 또는 벤질이고 R26은 할로, 예를 들어 클로로 또는 브로모임);
소듐 시아나이드와 반응시키기고 이어서 수성 워크업하여 실릴 보호기를 제거함으로써 제조될 수 있다.
일반식 (XXXVI)의 화합물은 또한 소듐 시아나이드와의 반응에 의해 R25가 벤질인 일반식 (XXXVIII)의 화합물로부터 직접 제조될 수 있다.
일반식 (XXXVIII)의 화합물은 일반식 (XXXIX)의 화합물로부터:
Figure pct00029
(XXXIX)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R25는 일반식 (XXXVIII)에 대해 정의된 바와 같음);
적절한 할로겐화제와의 반응에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, R26이 클로로인 경우, 티오닐 클로라이드가 사용될 수 있다.
일반식 (XXXIX)의 화합물은 일반식 (XL)의 화합물로부터:
Figure pct00030
(XL)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고 R27은 C1-6 알킬 또는 벤질임);
일반식 (XXXVIII)에 대해 정의된 바와 같은 기 R25를 사용한 OH 기의 보호에 이어서 환원제, 일반적으로 하이드라이드, 예컨대 소듐 또는 리튬 보로하이드라이드와의 반응에 의해 제조될 수 있다.
일반식 (XL)의 화합물은 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 합성될 수 있다.
R8 및 R9가 이들의 부착된 원자와 함께 카르보사이클릭 고리를 형성하고 R10이 CN인 일반식 (XXV)의 화합물은 일반식 (XXXVa)의 화합물로부터:
Figure pct00031
(XXXVa)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같고; n은 0, 1, 2 또는 3임);
Pd 촉매 (예컨대 [Pd(알릴)Cl]2), 포스핀 리간드 (예컨대 BINAP) 및 유기 염기 (예컨대 DMAP)의 존재에서 말론산 모노에스테르의 알칼리 금속 염 (예컨대 메틸 포타슘 말로네이트)과의 반응에 이어서, 일반식 (XXXV)의 화합물의 일반식 (XXV)의 화합물로의 전환을 위한 상기 기재된 바와 같은 수성 염기를 사용한 가수분해에 의해 제조될 수 있다.
일반식 (XXXVa)의 화합물은 일반식 (XLIa)의 화합물과의 반응에 의해 상기 정의된 일반식 (XXXVI)의 화합물로부터 제조될 수 있다:
R28-CH2-(CH2)n-CH2-R29
(XLIa)
여기서 n은 일반식 (XXXVa)에 대해 상기 정의된 바와 같고 R28 및 R29 각각은 독립적으로 할로, 예컨대 클로로, 브로모 또는 아이오도이다.
R8 및 R9가 이들이 부착된 원자와 함께 3- 내지 6-원 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하고 R10이 CN인 일반식 (XXV)의 화합물은 일반식 (XXXVc)의 화합물로부터 제조될 수 있다:
Figure pct00032
(XXXVc)
여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같고; 각각의 p 및 q는 0, 1, 2, 3 또는 4이고 단 p 및 q의 합계는 1 내지 4이다.
상기 방법은 일반식 (XXV) 및 (XXXVa)의 화합물의 반응에 대해 상기 기재된 것과 유사하다.
일반식 (XXXVa)의 화합물은 일반식 (XLIc)의 화합물과의 반응에 의해 상기 정의된 일반식 (XXXVI)의 화합물로부터 제조될 수 있다:
R28- (CH2)p-O-(CH2)q-R29 (XLIc)
여기서 p 및 q는 일반식 (XXXVc)에 대해 정의된 바와 같고 R28 및 R29 각각은 독립적으로 일반식 (XLIa)에 대해 정의된 바와 같다
일반식 (XLIa) 및 (XLIc)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다.
R8 및 R9가 메틸이고 R10이 헤테로사이클릭 기, 특히 고리 질소 원자를 통해 메틸 탄소에 결합된 질소 포함 헤테로사이클릭 기로 치환된 메틸인 일반식 (XXV)의 화합물은 일반식 (XXXVb)의 화합물로부터:
Figure pct00033
(XXXVb)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같고; R30은 헤테로사이클릭 기, 특히 고리 질소 원자를 통해 메틸 탄소에 결합된 질소 포함 헤테로사이클릭 기임);
Pd 촉매 (예컨대 [Pd(알릴)Cl]2), 포스핀 리간드 (예컨대 BINAP) 및 유기 염기 (예컨대 DMAP)의 존재에서 말론산 모노에스테르의 알칼리 금속 염 (예컨대 메틸 포타슘 말로네이트)과의 반응에 이어서, 상기 기재된 바와 같은 수성 염기를 사용한 가수분해에 의해 제조될 수 있다.
일반식 (XXXVb)의 화합물은 상기 정의된 일반식 (XXXV)의 화합물로부터 두 단계로 제조될 수 있다. 먼저, 일반식 (XXXV)의 화합물은 시아노 기를 알데하이드로 전환시키기 위해, 예를 들어 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드 (DIBAL)와 같은 하이드라이드 환원제를 사용하여 환원된다. 이후 알데하이드 모이어티는 산성 조건 (예를 들어 아세트산)하에 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (STAB)와 같은 환원제의 존재에서 화학식 R30-H의 화합물 (여기서 R30은 일반식 (XXXVb)에 대해 상기 정의된 바와 같음)과 반응된다.
R8 및 R9가 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 옥세탄 고리를 형성하고 R10이 할로로 임의로 치환된 메틸인 일반식 (XXV)의 화합물은 일반식 (L)의 화합물로부터:
Figure pct00034
(L)
여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고, R10은 할로로 임의로 치환된 메틸이고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음);
팔라듐 촉매 (예컨대 [Pd(알릴)Cl]2), 포스핀 리간드 (예컨대 QPhos) 및 DMAP와 같은 유기 염기의 존재에서 할로-(2-알콕시-2-옥소-에틸)징크 (예컨대 브로모-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)징크)과의 반응에 이어서, 수성 염기를 사용하는 생성된 에스테르의 가수분해에 의해 제조될 수 있다.
일반식 (L)의 화합물은 일반식 (LI)의 화합물로부터:
Figure pct00035
(LI)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고, R10은 할로로 임의로 치환된 메틸이고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음);
코리 차이코프스키 유형 반응에서 트리메틸설폭소늄 아이오다이드와 같은 황 일리드와의 반응에 의해 제조될 수 있다.
일반식 (LI)의 화합물은 일반식 (LII)의 화합물의 산화에 의해 수득될 수 있다:
Figure pct00036
(LII)
여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고, R10은 할로로 임의로 치환된 메틸이고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같다.
산화는 산성 조건하에, 예를 들어 트리플루오로아세트산의 존재에서 데스-마틴 페리오디난을 사용하여 수행될 수 있다.
R10이 CF3 또는 CHF2인 일반식 (LII)의 화합물은 일반식 (LIII)의 화합물로부터:
Figure pct00037
(LIII)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음);
일반식 (LIV)의 화합물:
(CH3)3-Si-R10
(LIV)
(여기서 R10은 할로로 임의로 치환된 메틸임);
또는 대체 트리알킬 실란과의 반응에 의해 제조될 수 있다.
반응은 약 15 내지 25℃에서, 일반적으로 실온에서 디클로로메탄과 같은 융기 용매에서 수행될 수 있다.
일반식 (LIV)의 화합물은 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 합성될 수 있다.
일반식 (LIII)의 화합물은 일반식 (LIX)의 화합물로부터:
Figure pct00038
(LIX)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고 R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같음);
티타늄 테트라클로라이드와 같은 루이스산의 존재에서, 디클로로(메톡시)메탄과의 반응에 이어서, 예를 들어 보론 트리브로마이드를 사용하는 기 R16의 제거 및 적합하게는 포타슘 카르보네이트와 같은 약염기의 존재에서 예를 들어 화합물 R20-Br과의 반응에 의한 기 R20의 재보호에 의해 (여기서 R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음) 제조될 수 있다.
일반식 (LIX)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 합성될 수 있다.
일반식 (LIII)의 화합물은 올레핀화 반응, 예를 들어 비티히 유형 반응에서 알데하이드를 처리하여 변형될 수 있고, 생성물은 일반식 (XXXV), (XXXVa), (XXXVb), (XXXVc), (XXXVI), (XXXVII) 및 (L)의 화합물과 구조가 유사하지만 R7과 OH 치환기 사이의 위치에 대체 치환기를 갖는 화합물을 생성하기 위해 추가로 변형될 수 있다 (하기 중간체 R의 제조 참조). 대체 치환기가 있는 추가의 유사한 화합물의 합성도 아래에 주어진다 (중간체 B, BA, BB, BC, BD, BE, C, CA, CB, D, E, M, N 및 W의 제조 참조.
R10이 C1-4 알킬인 일반식 (LII)의 화합물을 수득하기 위해, 적절한 그리냐르 시약이 일반식 (LIII)의 화합물과 반응될 수 있다.
일반식 (LIII)의 화합물은 일반식 (LV)의 화합물의 산화에 의해 수득될 수 있다:
Figure pct00039
(LV)
여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같다.
이 반응에 적합한 산화제는 이산화망간이고 반응은 용매의 환류 온도에서 톨루엔과 같은 유기 용매에서 수행될 수 있다.
일반식 (LV)의 화합물은 일반식 (LVI)의 화합물로부터:
Figure pct00040
(LVI)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R17은 일반식 (VII)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같고 R21은 할로, 예를 들어 클로로 또는 브로모임);
디옥산과 같은 유기 용매에서 하이드록사이드, 적합하게는 알칼리 금속 하이드록사이드, 예컨대 소듐 또는 포타슘 하이드록사이드와의 반응에 의해 제조될 수 있다. 적합하게는, 반응은 용매의 환류 온도에서 수행된다.
일반식 (LV)의 화합물은 또한 페놀의 탈보호에 이어서 NaBH4와 같은 환원제를 사용하는 에스테르의 환원을 통해 일반식 (XL)의 화합물로부터 직접 제조될 수 있다.
일반식 (LVI)의 화합물은 OH 기를 일반식 (XXI)에 대해 상기 정의된 바와 같은 기 R20으로 보호하고 이어서 에스테르의 환원 이후 (예를 들어 티오닐 클로라이드를 사용하여) 생성된 알코올의 알킬 할라이드로의 전환에 의해 상기 정의된 일반식 (XL)의 화합물로부터 제조될 수 있다.
일반식 (XXV)의 화합물 제조를 위한 추가 방법은 일반식 (LVII)의 화합물의:
Figure pct00041
(LVII)
(여기서 R5, R6, R7, R8, R9 및 R10은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같음);
THF와 같은 용매에서 하이드록사이드, 예를 들어 수성 염기, 예를 들어 알칼리 금속 하이드록사이드, 예컨대 소듐 또는 포타슘 하이드록사이드와의 반응에 의한 것이다. 반응은 상승된 온도에서, 예를 들어 용매의 환류 온도에서 테트라하이드로푸란와 같은 유기 용매에서 수행될 수 있다.
이 방법은 R8, R9 및 R10이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 접합 또는 가교 고리 시스템을 형성하는 화합물에 특히 적합하다.
R8, R9 및 R10이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 접합 또는 가교 고리 시스템을 형성하는 경우, 일반식 (LVII)의 화합물은 화학식 (LVIII)의 화합물로부터 제조될 수 있다:
Figure pct00042
(LVIII)
여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R20은 일반식 (XXI)에 대해 정의된 바와 같고; R22는 할로, 예를 들어 브로모 또는 클로로이다.
일반식 (LVIII)의 화합물은 적합한 가교 또는 접합 고리의 할라이드와 반응할 수 있고 고리 상의 치환기는 필요에 따라 조작될 수 있다.
일반식 (LVIII)의 화합물은 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 합성될 수 있다.
R9가 OH이고 R10이 할로로 임의로 치환된 메틸인 일반식 (I)의 화합물은 R8 및 R9가 조합하여 에테닐 기를 형성하고 R10이 할로로 임의로 치환된 메틸인 일반식 (I)의 화합물인 일반식 (LX)의 화합물로부터:
Figure pct00043
(LX)
(여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R10은 할로로 임의로 치환된 메틸임);
1,4-디옥산 및 물의 혼합물에서 메탄설폰산과 같은 수성 산과의 반응에 의해 제조될 수 있다.
일반식 (LX)의 화합물은 일반식 (LXI)의 화합물로부터:
Figure pct00044
(LXI)
(여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; 및 R12는 할로,예를 들어 클로로 또는 브로모임);
트리포타슘 포스페이트, 트리사이클로헥실포스핀 및 팔라듐 아세테이트 (Pd(OAc)2)의 존재에서 2-이소프로페닐-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란과의 반응에 의해 제조될 수 있다.
R8 및 R9가 조합하여 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하고 R10이 OH인 일반식 (I)의 화합물을 제조하기 위해 유사한 방법이 사용될 수 있다. 이 방법에서, 일반식 (LXI)의 화합물은 적절한 환형 1,3,2-디옥사보롤란과 반응하여 일반식 (LX)와 유사하지만 모이어티 -C(=CH2)-R10이 환형 기가 분자의 나머지에 연결되는 위치에서 C=C 이중 결합을 포함하는 환형 기로 대체된 화합물을 제공한다. 이는 예를 들어 하기 실시예 13에 기재된 바와 같이 환원 조건하에 수화되어 필요한 생성물을 제공할 수 있다.
일반식 (LXI)의 화합물은 일반식 (LXII)의 화합물을 탈보호시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00045
(LXII)
여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R16a는 C1-6 알킬 또는 벤질이고; R12는 일반식 (LXI)에 대해 정의된 바와 같다.
탈보호는 적합하게는 일반식 (IV)의 화합물의 탈보호에 대해 상기 기재된 바와 같이 보론 트리브로마이드를 사용한 처리에 의해 달성된다.
일반식 (LXII)의 화합물은 상기 정의된 일반식 (XXII)의 화합물을 일반식 (LXIII)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00046
(LXIII)
여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R16a는 일반식 (LXII)에 대해 정의된 바와 같고; R12는 일반식 (LXI)에 대해 정의된 바와 같다.
적합하게는, 반응은 일반식 (V)의 화합물과 일반식 (VI)의 화합물의 반응에 대해 상기 기재된 것과 유사한 조건하에 수행된다.
일반식 (LXIII)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다.
예를 들어, 일반식 (LXIII)의 화합물은 일반식 (LXIV)의 화합물의 브로민화 또는 염소화에 의해 제조될 수 있다:
Figure pct00047
(LXIV)
여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R16b는 H 또는 C1-6 알킬이다.
브로민화 또는 염소화는 임의의 적합한 제제, 예를 들어 N-브로모 석신이미드, N-클로로석신이미드 또는 브로민을 사용하여 수행될 수 있다. R16b가 H인 경우, 적합한 보호 시약을 사용한 반응이 수행되어 일반식 (LXIII)의 화합물을 수득할 수 있다. 예를 들어, 벤질 브로마이드와의 반응은 R16a가 벤질인 일반식 (LXIII)의 화합물을 제공한다.
R8 및 R9가 이들이 부착된 탄소 원자와 조합하여 사이클로프로필 고리를 형성하고 R10이 할로로 임의로 치환된 메틸인 일반식 (XXI)의 화합물의 제조를 위한 방법은 청색광 조사하에; 일반식 (LXV)의 화합물과:
Figure pct00048
(LXV)
(여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같고 R10은 할로로 임의로 치환된 메틸임);
(4,4'-디-t-부틸-2,2'-비피리딘)비스[3,5-디플루오로-2-[5-트리플루오로메틸-2-피리디닐-kN)페닐-kC]이리듐(III) 헥사플루오로포스페이트의 존재에서 8-(아이오도메틸)-8,8'-스피로비[7,9-디옥사-8-실라누이다비사이클로[4.3.0]노나-1,3,5-트리엔]; 트리에틸암모늄의 반응에 의한 것이다.
적합하게는, 공정은 하기 실시예 8에 기재된 바와 같으며 디메틸설폭사이드와 같은 무수 유기 용매에서 질소와 같은 불활성 분위기하에 일어난다.
R10이 메틸인 일반식 (LXV)의 화합물은 2-이소프로페닐-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 및 트리포타슘 포스페이트에 이어서 트리사이클로헥실포스핀 및 팔라듐 아세테이트의 반응에 의해 상기 정의된 일반식 (LXII)의 화합물로부터 제조될 수 있다.
일부 경우에, 사이클로프로필 기의 도입은 공정의 초기 단계에서 일어날 수 있다. 예를 들어, 일반식 (LXX)의 화합물은:
Figure pct00049
(LXX)
(여기서 R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R15 및 R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같고 R12는 할로, 예를 들어 클로로 또는 브로모임);
Pd(dppf)Cl2와 같은 팔라듐 촉매의 존재에서 비스(피나콜라토)디보론으로 처리될 수 있다. 이후 이 반응의 보론산 에스테르 생성물을 일반식 (LXXI)의 화합물로 처리하여:
Figure pct00050
(LXXI)
(여기서 R10은 할로로 임의로 치환된 메틸이고 R13은 할로, 예를 들어 클로로 또는 브로모임) 일반식 (LXXII)의 생성물을 수득할 수 있다:
Figure pct00051
(LXXII)
(여기서 R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R15 및 R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같고 R10은 할로로 임의로 치환된 메틸임);
일반식 (LXXII)의 화합물은 일반식 (LXV)의 화합물의 반응에 대해 상기 기재된 바와 같이 청색광 조사 하에; 8-(아이오도메틸)-8,8'-스피로비[7,9-디옥사-8-실라누이다비사이클로[4.3.0]노나-1,3,5-트리엔]; 트리에틸암모늄 및 (4,4'-디-t-부틸-2,2'-비피리딘)비스[3,5-디플루오로-2-[5-트리플루오로메틸-2-피리디닐-kN)페닐-kC]이리듐(III) 헥사플루오로포스페이트와의 반응에 의해; R8 및 R9가 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로프로필 기를 형성하고 R10이 할로로 임의로 치환된 메틸인 일반식 (IV)의 화합물로 전환될 수 있다.
일반식 (LXI)의 화합물은 일반식 (V) 및 (XXV)의 화합물과 유사한 중간체가 -C(R8)(R9)(R10) 치환기 대신 기 R12를 가질 것임을 제외하고 일반식 (I)의 화합물에 대해 상기 기재한 것과 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다.
R8 및 R8이 메틸 또는 에틸이고 R10이 CH2OH 또는 CH2CH2OH인 일반식 (I)의 화합물은 일반식 (LXXV)의 화합물로부터:
Figure pct00052
(LXXV)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R8 및 R9 각각은 독립적으로 메틸 또는 에틸이고 X는 결합 또는 -CH2-임);
예를 들어 리튬 보로하이드라이드와 같은 하이드라이드 환원제를 사용하는 환원에 의해 제조될 수 있다.
적합하게는, 반응은 테트라하이드로푸란과 같은 유기 용매에서 수행되고 냉각하며, 예를 들어 -78 ℃에서 환원제가 첨가된다.
일반식 (LXXV)의 화합물은 상기 정의된 일반식 (XXII)의 화합물을 일반식 (LXXX)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00053
(LXXX)
여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R8 및 R9 각각은 독립적으로 메틸 또는 에틸이고 X는 일반식 (LXXV)에 대해 정의된 바와 같다.
적합하게는, 반응은 상기 기재된 바와 같이 커플링 시약의 존재하에 수행된다. T3P®이 특히 적합하다.
일부 경우에, 일반식 (LXXV)의 화합물을 단리하고 정제한 후 환원시켜 일반식 (I)의 화합물을 수득한다. 그러나 다른 경우에, 일반식 (LXXX) 및 (XXII)의 화합물은 반응하여 일반식 (LXXX)의 화합물을 제공하고, 이는 이후 추가의 정제 없이 환원되어 일반식 (I)의 화합물을 제공한다. 이는 5-원 락톤 중간체 (LXXX)의 경우, 즉 X가 결합일 때 더 일반적이다.
이 방법의 변형에서, 일반식 (LXXV)의 화합물은 상기 정의된 일반식 (III)의 화합물을 일반식 (LXXVI)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00054
(LXXVI)
여기서 R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R8 및 R9 각각은 독립적으로 메틸 또는 에틸이고 X는 일반식 (LXXV)에 대해 정의된 바와 같다.
적합하게는, 반응은 상기 기재된 바와 같은 커플링 시약의 존재에서 수행되고, HATU가 적합한 커플링 시약의 예이다.
일반식 (LXXV)의 화합물은 추가의 정제 없이 일반식 (I)의 화합물로 환원될 수 있다.
일반식 (LXXVI)의 화합물은 일반식 (LXXVII)의 화합물의 가수분해에 의해 제조될 수 있다:
Figure pct00055
(LXXVII)
여기서 R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R15는 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같고; R8 및 R9 각각은 독립적으로 메틸 또는 에틸이고 X는 일반식 (LXXV)에 대해 정의된 바와 같다.
적합하게는, 가수분해는 염기 가수분해이며, 예를 들어 테트라하이드로푸란과 같은 용매에서 리튬 하이드록사이드를 사용하여 수행된다.
일반식 (LXXVII)의 화합물은 상기 정의된 일반식 (VI)의 화합물을 상기 정의된 일반식 (LXXX)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다.
적합하게는, 반응은 상기 기재된 바와 같이 커플링 시약의 존재하에 수행된다. T3P®이 특히 적합하다.
X가 -CH2-인 일반식 (LXXX)의 화합물은 일반식 (LXXXI)의 화합물로부터:
Figure pct00056
(LXXXI)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같음);
일반식 (LXXXII)의 화합물과의 반응에 의해 제조될 수 있다:
Figure pct00057
(LXXXII)
(여기서 R8 및 R9는 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고 R35는 C1-6 알킬임).
적합하게는, 반응은 메탄 설폰산과 같은 강산의 존재하에 수행된다.
일반식 (LXXXI) 및 (LXXXII)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 당업자에게 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다.
X가 결합인 일반식 (LXXX)의 화합물은 일반식 (LXXXIII)의 화합물로부터:
Figure pct00058
(LXXXIII)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같고; R36은 C1-6 알킬 또는 벤질이고; R37은 C1-6 알킬이고; R8 및 R9 각각은 독립적으로 메틸 또는 에틸임);
보론 트리브로마이드와의 반응에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로, 반응은 약 -5 내지 5 ℃의 온도에서 디클로로메탄과 같은 용매에서 수행된다.
일반식 (LXXXIII)의 화합물은 일반식 (LXXXIV)의 화합물을:
Figure pct00059
(LXXXIV)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같고; R36은 일반식 (LXXXIII)에 대해 정의된 바와 같고; R38은 할로겐, 특히 브로민 또는 염소이고 보다 특히 브로민임);
일반식 (LXXXV)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00060
(LXXXV)
(여기서 R37은 일반식 (LXXXIII)에 대해 정의된 바와 같고 R8 및 R9 각각은 독립적으로 메틸 또는 에틸임).
반응은 징크 플루오라이드 및 Pd(PtBu3)2와 같은 팔라듐/백금 촉매의 존재에서 수행될 수 있다. 적합하게는, 반응은 불활성 분위기, 예를 들어 질소 하에 수행된다.
일반식 (LXXXV)의 화합물은 공지되어 있고 용이하게 입수 가능하거나 당업자에게 익숙한 방법에 의해 제조될 수 있다.
일반식 (LXXXIV)의 화합물은 일반식 (LXXXVI)의 화합물의:
Figure pct00061
(LXXXVI)
(여기서 R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같고; R38은 할로겐, 특히 브로민 또는 염소, 보다 특히 브로민임);
예를 들어 화합물 R36-Hal (여기서 Hal은 브로민 또는 염소, 특히 브로민)과의 반응에 의한 에스테르화에 의해 제조될 수 있다.
반응은 온화한 염기성 조건하에, 예를 들어 포타슘 카르보네이트의 존재에서, N,N-디메틸포름아미드와 같은 용매에서 수행될 수 있다.
일반식 (LXXXVI)의 화합물은 상기 정의된 일반식 (IX)의 화합물의 할로겐화에 의해 제조될 수 있다. 적합한 할로겐화제는 아세토니트릴과 같은 용매 중의 브로민을 포함한다. 대안적으로, N-클로로석신이미드 또는 N-브로모석신이미드가 사용될 수 있다.
X가 결합인 일반식 (LXXV)의 화합물의 제조를 위한 대안 방법은 일반식 (XC)의 화합물과:
Figure pct00062
(XC)
(여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R16은 일반식 (IV)에 대해 정의된 바와 같고; R37은 일반식 (LXXXIII)에 대해 정의된 바와 같고; R8 및 R9 각각은 독립적으로 메틸 또는 에틸임);
보론 트리브로마이드의 반응에 의한 것이다.
일반적으로, 반응은 디클로로메탄과 같은 용매에서 수행된다.
R8이 메틸 또는 에틸이고, R9가 CH2OH이고 R10이 H인 일반식 (XXI)의 화합물의 합성을 위한 대안 절차는 일반식 (XCV)의 화합물의:
Figure pct00063
(XCV)
(여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 R7은 일반식 (I)에 대해 정의된 바와 같고; R37은 일반식 (LXXXIII)에 대해 정의된 바와 같고; R8은 메틸 또는 에틸임);
일반적으로 리튬 알루미늄 하이드라이드와 같은 하이드라이드 환원제를 사용하는 환원에 의한 것이다.
적합하게는, 반응은 테트라하이드로푸란과 같은 용매에서 감소된 온도, 일반적으로 -78℃에서 수행된다.
일반식 (XCV)의 화합물은 상기 정의된 일반식 (LXII)의 화합물을 일반식 (XCVI)의 화합물과 반응시켜 제조될 수 있다:
Figure pct00064
(XCVI)
여기서 R8은 메틸 또는 에틸이고 R37은 일반식 (LXXXIII)에 대해 정의된 바와 같다.
반응은 징크 플루오라이드 및 Pd(PtBu3)2와 같은 팔라듐/백금 촉매의 존재에서 수행될 수 있다. 적합하게는, 반응은 불활성 분위기, 예를 들어 질소 하에 수행된다.
일반식 (I)의 화합물은 또한 다른 일반식 (I)의 화합물로 전환될 수 있다. 예를 들어, R6이 할로, 특히 브로모 또는 클로로인 일반식 (I)의 화합물은 트리사이클로헥실포스핀 및 팔라듐 아세테이트 및 염기 (예컨대 K2CO3)의 존재에서 적절한 알킬- 또는 알케닐-보론산 에스테르, 예를 들어 알킬- 또는 알케닐-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란과의 스즈키 유형 반응에서 R6이 알킬인 일반식 (I)의 화합물로 전환될 수 있다.
R5가 H인 일반식 (I)의 화합물은 적합하게는 약 15 내지 25 ℃의 온도에서, 예를 들어 실온에서, N,N-디메틸포름아미드와 같은 용매 중에서 N-클로로석신이미드 또는 N-브로모석신이미드와 같은 적합한 할로겐화제와의 반응에 의해 R5가 할로, 예를 들어 클로로 또는 브로모인 일반식 (I)의 화합물로 전환될 수 있다.
일반식 (I)의 화합물은 TMEM16A의 양성 조절제이므로, 본 발명의 추가 양태에서, 특히 TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 및 병태의 치료 또는 예방의 의약에서 사용하기 위한 상기 정의한 바와 같은 일반식 (I)의 화합물이 제공된다.
또한 TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 및 병태의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물의 용도가 제공된다.
TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 및 병태의 치료 또는 예방을 위한 방법이 또한 제공되며, 상기 방법은 유효량의 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물을 이러한 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함한다.
TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 및 병태는 호흡기 질환 및 병태, 입안 건조(구강건조증), 장 과운동성, 담즙정체 및 안구 병태를 포함한다.
다음이 또한 제공된다:
호흡기 질환 및 병태의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물.
입안 건조(구강건조증)의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물.
장 과운동성의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물.
담즙정체의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물.
안구 병태의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물.
본 발명은 또한 다음을 제공한다:
호흡기 질환 및 병태의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물의 용도.
입안 건조(구강건조증)의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물의 용도.
장 과운동성의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물의 용도.
담즙정체의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물의 용도.
안구 병태의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물의 용도.
추가로 다음이 제공된다:
호흡기 질환 및 병태의 치료 또는 예방 방법, 상기 방법은 이러한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함함.
입안 건조(구강건조증)의 치료 또는 예방 방법, 상기 방법은 이러한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함함.
장 과운동성의 치료 또는 예방 방법, 상기 방법은 이러한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함함.
담즙정체의 치료 또는 예방 방법, 상기 방법은 이러한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함함.
안구 병태의 치료 또는 예방 방법, 상기 방법은 이러한 치료를 필요로 하는 환자에게 유효량의 상기 정의된 일반식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함함.
일반식 (I)의 화합물에 의해 치료되거나 예방될 수 있는 호흡기 질환 및 병태는 낭성 섬유증, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 만성 기관지염, 폐기종, 비낭성 섬유증 기관지확장증을 포함하는 기관지확장증, 천식 및 원발성 섬모운동 이상증을 포함한다.
일반식 (I)의 화합물에 의해 치료되거나 예방될 수 있는 입안 건조(구강건조증)는 쇼그렌 증후군, 방사선요법 치료 및 구강건조(xerogenic) 약물로부터 기인할 수 있다.
일반식 (I)의 화합물에 의해 치료되거나 예방될 수 있는 장 과운동성은 위 소화불량, 위마비, 만성 변비 또는 과민성 대장 증후군과 관련될 수 있다.
일반식 (I)의 화합물에 의해 치료되거나 예방될 수 있는 안구 병태는 안구 건조 질환을 포함한다.
본 발명의 화합물은 일반적으로 약제학적 조성물의 일부로서 투여될 것이므로 본 발명은 일반식 (I)의 화합물과 함께 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 추가로 제공한다.
약제학적 조성물은 경구, 직장, 비강, 국소(폐, 진피, 경피, 점안액, 협측 및 설하로의 국소 투여 포함), 질 또는 비경구(피하, 근육내 및 피내 포함) 투여를 위해 제형화될 수 있고 약학 분야에서 잘 알려진 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다.
본 발명의 화합물은 경구 투여를 위해 특히 잘 적합화된다.
조성물은 상기 정의된 활성제를 부형제와 결합시켜 제조될 수 있다. 일반적으로, 제형은 활성제를 액체 담체 또는 미분된 고체 담체, 또는 양자 모두와 균일하고 긴밀하게(intimately) 결합시킨 다음, 필요한 경우 제품을 성형함으로써 제조된다. 본 발명은 일반식 (I)의 화합물을 약제학적으로 허용되는 담체 또는 비히클과 함께 제공 또는 결합시키는 것을 포함하는 약제학적 조성물 제조 방법으로 확장된다.
본 발명에서 경구 투여를 위한 제형은 다음과 같이 제시될 수 있다: 소정량의 활성제를 포함하는 캡슐, 사체(sachet) 또는 정제와 같은 개별 단위; 분말 또는 과립; 수성 액체 또는 비수성 액체 중의 활성제의 용액 또는 현탁액; 또는 수중유 액체 에멀젼 또는 유중수 액체 에멀젼; 또는 볼루스 등.
경구 투여용 조성물(예를 들어 정제 및 캡슐)의 경우, 용어 "허용되는 담체"는 비히클, 예컨대 일반적인 부형제, 예를 들어 결합제, 예를 들어 시럽, 아카시아, 젤라틴, 소르비톨, 트라가칸트, 폴리비닐피롤리돈(포비돈), 메틸셀룰로스, 에틸셀룰로스, 소듐 카르복시메틸셀룰로스, 하이드록시프로필메틸셀룰로스, 수크로스 및 전분; 충전제 및 담체, 예를 들어 옥수수 전분, 젤라틴, 락토스, 수크로스, 미세결정질 셀룰로스, 카올린, 만니톨, 디칼슘 포스페이트, 소듐 클로라이드 및 알긴산; 및 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트, 소듐 스테아레이트 및 기타 금속 스테아레이트, 글리세롤 스테아레이트, 스테아르산, 실리콘 유체, 탈크 왁스, 오일 및 콜로이드 실리카를 포함한다. 페퍼민트, 윈터그린 오일, 체리향 등과 같은 교미제가 또한 사용될 수 있다. 투여 형태를 쉽게 식별할 수 있도록 착색제를 첨가하는 것이 바람직할 수 있다. 정제는 또한 당업계에 잘 알려진 방법에 의해 코팅될 수 있다.
정제는 선택적으로 하나 이상의 보조 성분과 함께 압축 또는 성형에 의해 제조될 수 있다. 압축정은 결합제, 윤활제, 불활성 희석제, 보존제, 표면 활성제 또는 분산제와 선택적으로 혼합된 분말 또는 과립과 같은 자유 유동 형태의 활성제를 적합한 기계에서 압축함으로써 제조될 수 있다. 성형정은 불활성 액체 희석제로 습윤된 분말화된 화합물의 혼합물을 적합한 기계에서 성형함으로써 제조될 수 있다. 정제는 임의로 코팅되거나 스코어링될 수 있고 활성제의 느린 방출 또는 제어 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다.
경구 투여에 적합한 다른 제형은 향미성 기제, 보통 수크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트에 활성제를 포함하는 로젠지; 젤라틴 및 글리세린, 또는 수크로스 및 아카시아와 같은 불활성 기제에 활성제를 포함하는 향정; 및 적합한 액체 담체에 활성제를 포함하는 구강청결제를 포함한다.
피부에 국소 적용하기 위해 일반 화학식 I의 화합물은 크림, 연고, 젤리, 용액 또는 현탁액 등으로 만들어질 수 있다. 약물에 사용될 수 있는 크림 또는 연고 제형은 예를 들어 영국 약전과 같은 약학의 표준 교과서에 기술된 바와 같이 당업계에서 잘 알려진 통상적인 제형이다.
폐에 대한 국소 투여는 에어로졸 제형의 사용에 의해 달성될 수 있다. 에어로졸 제형은 전형적으로 클로로플루오로카본(CFC) 또는 하이드로플루오로카본(HFC)과 같은 적합한 에어로졸 추진제에 현탁되거나 용해된 활성 성분을 포함한다. 적합한 CFC 추진제는 트리클로로모노플루오로메탄(추진제 11), 디클로로테트라플루오로메탄(추진제 114), 및 디클로로디플루오로메탄(추진제 12)을 포함한다. 적합한 HFC 추진제는 테트라플루오로에탄(HFC-134a) 및 헵타플루오로프로판(HFC-227)을 포함한다. 추진제는 전형적으로 총 흡입 조성물의 40%-99.5% 예를 들어 40%-90 중량%를 차지한다. 제형은 공용매(예를 들어 에탄올) 및 계면활성제(예를 들어 레시틴, 소르비탄 트리올레에이트 등)을 포함하는 부형제를 포함할 수 있다. 다른 가능한 부형제는 폴리에틸렌 글리콜, 폴리비닐피롤리돈, 글리세린 등을 포함한다. 에어로졸 제형은 캐니스터에 포장되며 계량 밸브를 통해 적합한 용량이 전달된다 (예를 들어 Bespak, Valois 또는 3M 또는 대안으로 Aptar, Coster 또는 Vari에 의해 공급됨).
폐에 대한 국소 투여는 또한 수용액 또는 현탁액과 같은 비-가압 제형의 사용에 의해 달성될 수 있다. 이들은 예를 들어 가정을 위한 소형 및 휴대용 또는 병원용(즉 비휴대용)일 수 있는 네뷸라이저에 의해 투여될 수 있다. 제형은 물, 완충제, 등장성 조절제, pH 조절제, 계면활성제 및 공용매와 같은 부형제를 포함할 수 있다. 현탁액 액체 및 에어로졸 제형(가압 또는 비가압)은 전형적으로 예를 들어 0.5-10 μm 예를 들어 약 1-5 μm의 D50를 갖는 미분된 형태로 본 발명의 화합물을 포함할 것이다. 입자 크기 분포는 D10, D50 및 D90 값을 사용하여 나타낼 수 있다. 입자 크기 분포의 D50 중앙값은 분포를 반으로 나누는 마이크론 단위의 입자 크기로 정의된다. 레이저 회절로부터 유도한 측정은 부피 분포로 더 정확하게 설명되며, 따라서 이 절차를 사용하여 획득된 D50 값은 Dv50 값(부피 분포에 대한 중앙값)으로 지칭되는 것이 더 의미가 있다. 본원에서 사용 시 Dv 값은 레이저 회절을 사용하여 측정된 입자 크기 분포를 지칭한다. 유사하게, 레이저 회절의 맥락에서 사용되는 D10 및 D90 값은 Dv10 및 Dv90 값을 의미하고, 각각 분포의 10%가 D10 값 아래에 있고, 분포의 90%가 D90 값 아래에 있는 입자 크기를 지칭한다.
폐에 대한 국소 투여는 또한 건조 분말 제형의 사용에 의해 달성될 수 있다. 건조 분말 제형은 전형적으로 1-10 μm의 질량 평균 직경(MMAD) 또는 0.5-10 μm 예를 들어 약 1-5 μm의 D50를 갖는 미분된 형태로 본 개시내용의 화합물을 포함할 것이다. 미분된 형태의 본 발명의 화합물의 분말은 미세화 공정 또는 유사한 크기 감소 공정에 의해 제조될 수 있다. 미세화는 Hosokawa Alpine에 의해 제조된 것과 같이 제트 밀을 사용하여 수행될 수 있다. 생성된 입자 크기 분포는 레이저 회절을 사용하여 측정될 수 있다 (예를 들어 Malvern Mastersizer 2000S 기기 사용). 제형은 전형적으로 락토스, 글루코스 또는 만니톨(바람직하게는 락토스)과 같은 국소적으로 허용되는 희석제를 포함할 것이고, 일반적으로 비교적 큰 입자 크기 예를 들어 50 μm 이상, 예를 들어 100 μm 이상의 질량 평균 직경(MMAD) 또는 40-150 μm의 D50을 가질 것이다. 본원에서 사용 시, 용어 "락토스"는 α-락토스 일수화물, β-락토스 일수화물, α-락토스 무수, β-락토스 무수 및 비정질 락토스를 포함하는 락토스 함유 성분을 지칭한다. 락토스 성분은 미세화, 체별, 분쇄, 압축, 응집 또는 분무 건조에 의해 처리될 수 있다. 다양한 형태의 상업적으로 입수 가능한 락토스 형태, 예를 들어 Lactohale®(흡입 등급 락토스; DFE Pharma), InhaLac®70(건조 분말 흡입기용 체별된 락토스; Meggle), Pharmatose® (DFE Pharma) 및 Respitose®(체별된 흡입 등급 락토스; DFE Pharma) 제품이 또한 포함된다. 한 구체예에서, 락토스 성분은 α-락토스 일수화물, α-락토스 무수 및 비정질 락토스로 이루어진 군으로부터 선택된다. 바람직하게는, 락토스는 α-락토스 일수화물이다.
건조 분말 제형은 또한 다른 부형제를 포함할 수 있다. 따라서, 한 구체예에서 본 개시내용에 따른 건조 분말 제형은 마그네슘 또는 칼슘 스테아레이트를 포함한다. 이러한 제형은 특히 이러한 제형이 락토스를 또한 포함할 때 우수한 화학적 및/또는 물리적 안정성을 가질 수 있다.
건조 분말 제형은 전형적으로 건조 분말 흡입기(DPI) 장치를 사용하여 전달된다. 예시적인 건조 분말 전달 시스템은 SPINHALER®, DISKHALER®, TURBOHALER®, DISKUS®, SKYEHALER®, ACCUHALER® 및 CLICKHALER®을 포함한다. 건조 분말 전달 시스템의 추가 예는 ECLIPSE, NEXT, ROTAHALER, HANDIHALER, AEROLISER, CYCLOHALER, BREEZHALER/NEOHALER, MONODOSE, FLOWCAPS, TWINCAPS, X-CAPS, TURBOSPIN, ELPENHALER, MIATHALER, TWISTHALER, NOVOLIZER, PRESSAIR, ELLIPTA, ORIEL 건조 분말 흡입기, MICRODOSE, PULVINAL, EASYHALER, ULTRAHALER, TAIFUN, PULMOJET, OMNIHALER, GYROHALER, TAPER, CONIX, XCELOVAIR 및 PROHALER을 포함한다.
한 구체예에서 일반식 (I)의 화합물은, 예를 들어 적합한 등급의 락토스를 포함하는 미세화된 건조 분말 제형으로서 제공된다.
따라서, 본 발명의 한 양태로서 미립자 락토스와 조합으로 미립자 형태의 일반식 (I)의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물이 제공되고, 상기 조성물은 마그네슘 스테아레이트를 임의로 포함한다.
한 구체예에서 일반식 (I)의 화합물은 DISKUS와 같은 장치에 채워진, 적합한 등급의 락토스 및 마그네슘 스테아레이트를 포함하는 미세화된 건조 분말 제형으로서 제공된다. 적합하게는, 이러한 장치는 다중용량 장치이고, 예를 들어 제형은 DISKUS와 같은 다중 단위 용량 장치에서 사용하기 위해 블리스터에 채워진다.
또 다른 구체예에서 일반식 (I)의 화합물은 AEROLISER와 같은 단일 용량 장치에서 사용하기 위해 경질 캡슐에 채워진, 예를 들어 적합한 등급의 락토스를 포함하는 미세화된 건조 분말 제형으로서 제공된다.
또 다른 구체예에서 일반식 (I)의 화합물은 AEROLISER와 같은 단일 용량 장치에서 사용하기 위해 경질 캡슐에 채워진, 적합한 등급의 락토스 및 마그네슘 스테아레이트를 포함하는 미세화된 건조 분말 제형으로서 제공된다.
또 다른 구체예에서 일반식 (I)의 화합물은 흡입 투여 형태에서 사용하기 위해 미세 분말로서 제공되고, 여기서 분말은 0.5-10 μm 예를 들어 약 1-5 μm의 D50을 갖는 미세 입자이고, 이는 제트 밀 미세화 이외의 크기 감소 공정, 예를 들어 분무 건조, 분무 동결, 미세유동화, 고압 균질화, 초임계 유체 결정화, 초음파 결정화 또는 이들 바업의 조합, 또는 0.5-10 μm의 공기역학적 입자 크기를 갖는 미세 입자를 생성하기 위해 사용되는 당업계에 공지된 다른 적합한 입자 형성 방법에 의해 생성된다. 생성된 입자 크기 분포는 레이저 회절을 사용하여 측정될 수 있다 (예를 들어 Malvern Mastersizer 2000S 기기 사용). 입자는 화합물을 단독으로 또는 가공을 보조할 수 있는 적합한 다른 부형제와 조합으로 포함할 수 있다. 생성된 미세 입자는 인간에게 전달하기 위한 최종 제형을 형성할 수 있거나 선택적으로 허용되는 투여 형태로 전달을 용이하게 하기 위해 다른 적합한 부형제와 함께 추가로 제형화될 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 직장으로, 예를 들어 수성 또는 유성 용액뿐만 아니라 현탁액 및 에멀젼 및 발포체를 포함하는 좌제 또는 관장제의 형태로 투여될 수 있다. 이러한 조성물은 당업자에게 잘 알려진 표준 절차에 따라 제조된다. 예를 들어, 좌제는 활성 성분을 코코아 버터 또는 다른 글리세라이드와 같은 통상적인 좌제 기제와 혼합함으로써 제조될 수 있다. 이 경우에, 약물은 상온에서는 고체이지만 직장 온도에서는 액체이므로 직장에서 녹아 약물을 방출할 적합한 비자극성 부형제와 혼합된다. 이러한 물질은 코코아 버터 및 폴리에틸렌 글리콜이다.
일반적으로, 점안제 또는 안연고의 형태로 눈에 국소적으로 투여되도록 의도된 조성물의 경우, 일반식 (I)의 화합물의 총량은 약 0.0001 내지 4.0% (w/w) 미만일 것이다.
바람직하게는, 국소 안구 투여를 위해, 일반식 (I)에 따라 투여되는 조성물은 용액, 현탁액, 에멀젼 및 기타 투여 형태로 제형화될 것이다. 제형의 용이함, 및 영향을 받은 눈에 한두 방울의 용액을 점적함으로써 이러한 조성물을 쉽게 투여할 수 있는 환자의 능력에 기초하여, 수용액이 일반적으로 바람직하다. 그러나, 조성물은 또한 현탁액, 점성 또는 반점성 겔, 또는 다른 유형의 고체 또는 반고체 조성물일 수 있다. 현탁액은 물에 난용성인 화합물에 바람직할 수 있다.
눈에 투여하기 위한 대안은 일반식 (I)의 화합물의 용액 또는 현탁액의 유리체내 주사이다. 또한, 일반식 (I)의 화합물은 또한 안구 임플란트 또는 삽입물에 의해 주입될 수 있다.
일반식 (I)에 따라 투여되는 조성물은 또한 등장화제, 완충제, 계면활성제, 안정화 중합체, 보존제, 공용매 및 점도 증강제를 포함하지만 이에 제한되지 않는 다양한 다른 성분을 포함할 수 있다. 적합한 일반식 (I)의 약제학적 조성물은 등장화제 및 완충제와 함께 제형화된 본 발명의 화합물을 포함한다. 일반식 (I)의 약제학적 조성물은 추가로 계면활성제 및/또는 완화제 및/또는 안정화 중합체를 임의로 포함할 수 있다.
다양한 등장화제가 조성물의 긴장도, 바람직하게는 안과용 조성물에 대한 천연 눈물의 긴장도를 조정하기 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 소듐 클로라이드, 포타슘 클로라이드, 마그네슘 클로라이드, 칼슘 클로라이드, 단순당, 예컨데 덱스트로스, 프럭토스, 갈락토스, 및/또는 단순 폴리올, 예컨대 당 알코올 만니톨, 소르비톨, 자일리톨, 락티톨, 이소말티톨, 말티톨, 및 수소화 전분 가수분해물이 생리학적 긴장도에 근접하도록 조성물에 첨가될 수 있다. 이러한 등장화제의 양은 첨가될 특정 제제에 따라 달라질 것이다. 그러나 일반적으로, 조성물은 최종 조성물이 안과적으로 허용되는 삼투질농도(일반적으로 약 150-450 mOsm, 바람직하게는 250-350 mOsm, 가장 바람직하게는 약 290 mOsm)를 갖도록 하기에 충분한 양의 등장화제를 가질 것이다. 일반적으로, 본 발명의 등장화제는 2 내지 4% w/w의 범위로 존재할 것이다. 본 발명의 바람직한 등장화제는 단순당 또는 당 알코올, 예컨대 D-만니톨을 포함한다.
적합한 완충제 시스템(예를 들어 소듐 포스페이트, 소듐 아세테이트, 소듐 시트레이트, 소듐 보레이트 또는 붕산)은 조성물에 첨가되어 보관 조건 하에서 pH 드리프트를 방지할 수 있다. 특정 농도는 사용되는 제제에 따라 달라질 것이다. 그러나 바람직하게는, 완충제는 pH 5 내지 8 범위 이내의 표적 pH, 더욱 바람직하게는 pH 5 내지 7의 표적 pH를 유지하도록 선택될 것이다.
계면활성제는 더 높은 농도의 일반식 (I)의 화합물을 전달하기 위해 임의로 사용될 수 있다. 계면활성제는 화합물을 가용화하고 미셀 용액, 마이크로에멀젼, 에멀젼 및 현탁액과 같은 콜로이드 분산을 안정화시키는 기능을 한다. 임의로 사용될 수 있는 계면활성제의 예는 폴리소르베이트, 폴록사머, 폴리오실 40 스테아레이트, 폴리옥실 피마자유, 틸록사폴, 트리톤 및 소르비탄 모노라우레이트를 포함한다. 본 발명에서 사용될 바람직한 계면활성제는 12.4 내지 13.2 범위의 친수성/친유성/균형 "HLB"를 가지고 TritonX114 및 틸록사폴과 같은 안과용 용도로 허용된다.
일반식 (I)의 화합물의 안과용 조성물에 첨가될 수 있는 추가 제제는 안정화 중합체로서 기능하는 완화제이다. 안정화 중합체는 국소 안구 사용을 위한 우선순위가 있는 이온성/하전된 예, 더욱 구체적으로, 물리적 안정성을 위해 (-)10-50 mV의 제타 전위를 나타낼 수 있는 표면에서 음전하를 보유하는 중합체여야 하며, 물에 분산될 수 있어야 한다 (즉 수용성). 본 발명의 바람직한 안정화 중합체는 0.1-0.5% w/w의 고분자전해질, 또는 하나 초과인 경우 카르보머 및 Pemulen(R), 구체적으로 Carbomer 974p(폴리아크릴산)와 같은 가교된 폴리아크릴레이트의 계열의 고분자전해질일 것이다.
담체의 점도를 증가시키기 위해 다른 화합물이 또한 일반식 (I)의 화합물의 안과용 조성물에 첨가될 수 있다. 점도 향상제의 예는 다당류, 예컨대 하이알루론산 및 이의 염, 콘드로이틴 설페이트 및 이의 염, 덱스트란, 셀룰로스 계열의 다양한 중합체; 비닐 중합체; 및 아크릴산 중합체를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
국소 안과용 제품은 전형적으로 다중용량 형태로 포장된다. 따라서 사용 중 미생물 오염을 방지하기 위해 보존제가 필요하다. 적합한 보존제는 벤잘코늄 클로라이드, 클로로부탄올, 벤조도데시늄 브로마이드, 메틸 파라벤, 프로필 파라벤, 페닐에틸 알코올, 에덴테이트 디소듐, 소르브산, 폴리쿼터늄-1, 또는 당업자에게 공지된 기타 제제를 포함한다. 이러한 보존제는 전형적으로 0.001 내지 1.0% w/v의 수준으로 사용된다. 일반식 (I)의 단위 용량 조성물은 멸균될 것이지만, 일반적으로 보존처리되지 않는다. 따라서 이러한 조성물은 일반적으로 보존제를 포함하지 않을 것이다.
비경구 제형은 일반적으로 무균일 것이다.
의사 또는 다른 숙련가는 일반식 (I)의 화합물에 대한 적합한 투여량을 결정할 수 있을 것이며 따라서 본 발명의 화합물의 양이 임의의 특정한 약제학적 제형에 (단위 투여 형태이든 아니든) 포함되어야 한다.
일반식 (I)의 화합물은 호흡기 질환 및 병태의 치료 또는 예방에서 유용한 하나 이상의 다른 활성제와 조합으로 사용될 수 있다.
이러한 유형의 추가 활성제는 상기 기재된 약제학적 조성물에 포함될 수 있지만 대안적으로 일반식 (I)의 화합물과 동일한 시간에 또는 더 이르거나 더 늦은 시간에 별도로 투여될 수 있다.
따라서, 본 발명의 추가 양태에서 일반식 (I)의 화합물 및 TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 또는 병태, 특히 호흡기 질환 또는 병태, 예를 들어 위에 언급된 질환 및 병태 중 하나의 치료에서 동시, 순차적 또는 개별적으로 사용하기 위한 조합된 제제로서 호흡기 병태의 치료 또는 예방에서 유용한 추가 제제를 포함하는 생성물이 제공된다.
또한 TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 또는 병태, 특히 호흡기 질환 또는 병태, 예를 들어 위에 언급된 질환 및 병태 중 하나의 치료에서 동시, 순차적 또는 개별적으로 사용하기 위한 조합된 제제로서 호흡기 병태의 치료 또는 예방에서 유용한 추가 제제와 조합으로 일반식 (I)의 화합물이 제공된다.
약제학적 조성물 또는 일반식 (I), (Ix), (IA), (IB), (IC), (ID) 또는 (IE)의 화합물과의 조합된 제제에 포함될 수 있는 적합한 추가 활성제는 다음을 포함한다:
메타프로테레놀, 이소프로테레놀, 이소프레날린, 알부테롤, 살부타몰, 포르모테롤, 살메테롤, 인다카테롤, 터부탈린, 오르시프레날린, 비톨테롤 메실레이트, 피르부테롤, 올로다테롤, 빌란테롤 및 아빌란테롤과 같은 β2 아드레날린 수용체 작용제;
항히스타민제, 예를 들어 로라타딘, 세티리진, 데슬로라타딘, 레보세티리진, 펙소페나딘, 아스테미졸, 아젤라스틴 및 클로르페니라민과 같은 히스타민 H1 수용체 길항제 또는 H4 수용체 길항제;
도나아제 알파;
프레드니손, 프레드니솔론, 플루니솔리드, 트리암시놀론 아세토나이드, 베클로메타손 디프로피오네이트, 부데소니드, 플루티카손 프로피오네이트 모메타손 푸로에이트 및 플루티카손 푸로에이트와 같은 코르티코스테로이드;
몬테루카스트 및 자피르루카스트와 같은 류코트리엔 길항제;
항콜린성 화합물, 특히 이프라트로퓸, 티오트로퓸, 글리코피롤레이트, 아클리디늄 및 우메클리디늄과 같은 무스카린성 길항제;
이바카프터, QBW251, 바마카프터 (VX659), 엘렉사카프터 (VX445), VX561/CPT-656, VX152, VX440, GLP2737, GLP2222, GLP2451, PTI438, PTI801, PTI808, FDL-169 및 FDL-176과 같은 CFTR 수복 요법(예를 들어 CFTR 증강제, 교정제 또는 증폭제) 및 루마카프터 및 테자카프터와 같은 CFTR 교정제 또는 이들의 조합(예를 들어 이바카프터, 테자카프터 및 엘렉사카프터의 조합);
ENaC 조절제, 특히 ENaC 억제제;
항생제;
리바비린과 같은 항바이러스제 및 자나미비르와 같은 뉴라미니다아제 억제제;
PUR1900과 같은 항진균제;
고장성 식염수 및 만니톨(Bronchitol®)과 같은 기도 수화제(삼투질); 및
N-아세틸 시스테인과 같은 점액용해제.
추가 활성제가 ENaC 조절제인 경우, 이는 아밀로라이드, VX-371, AZD5634, QBW276, SPX-101, BI443651, BI1265162 및 ETD001와 같은 ENaC 억제제일 수 있다. 다른 적합한 ENaC 차단제는 본 출원인의 출원 WO 2017/221008, WO 2018/096325, WO 2019/077340 및 WO 2019/220147에 개시되고 이들 출원의 예시 화합물 중 어느 하나는 일반식 (I)의 화합물과 조합으로 사용될 수 있다. 일반식 (I)의 화합물과 조합으로 사용하기에 특히 적합한 화합물은 다음으로부터 선택된 양이온:
2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도) 에틸]-6-(4-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}피페리딘-1-카르보닐)-1,3-디에틸-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도) 메틸]-6-{[2-(4-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}피페리딘-1-일)에틸]카르바모일}-1,3-디에틸-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도)메틸]-5-[4-({비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}메틸)피페리딘-1-카르보닐]-1,3-디에틸-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도)메틸]-6-[(3R)-3-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}피롤리딘-1-카르보닐]-1,3-디에틸-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도)메틸]-6-[(3S)-3-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}피롤리딘-1-카르보닐]-1,3-디에틸-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도)메틸]-1,3-디에틸-6-{[(1r,4r)-4-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}사이클로헥실]카르바모일}-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도)메틸]-1,3-디에틸-6-{[(1s,4s)-4-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}사이클로헥실]카르바모일}-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
및 적합한 음이온, 예를 들어 할라이드, 설페이트, 니트레이트, 포스페이트, 포르메이트, 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 푸마레이트, 시트레이트, 타르트레이트, 옥살레이트, 석시네이트, 만델레이트, 메탄 설포네이트 또는 p-톨루엔 설포네이트를 갖는 화합물을 포함한다.
도 1은 생물학적 실시예 21에서 사용된 바와 같은 전체 세포 패치 클램프 (Qpatch) TMEM16A 강화제 분석으로부터의 예시적인 자취이며 분석에서 사용된 방법론을 설명한다.
실시예
일반적 조건:
질량 스펙트럼은 전자분무 이온화를 사용하여 LC-MS 시스템에서 실행되었다. 이들은 Waters PDA 및 ELS 검출기가 있는 Waters Acquity uPLC 시스템 또는 Shimadzu LCMS-2010EV 시스템을 사용하여 실행되었다. [M+H]+는 단일 동위원소 분자량을 지칭한다.
NMR 스펙트럼은 내부 중수소 락으로서 용매를 사용하여 5mm Broad Band Inverse probe가 있는 Bruker Avance III HD 500 MHz, Bruker Avance III HD 250 MHz, 5mm Broad Band Observed SmartProbe가 장착된 400MHz Avance III HD Nanobay에서 기록되었다. 스펙트럼은 달리 명시되지 않는 한 실온에서 기록되었고 용매 피크를 사용하여 참조되었다.
하기 실시예를 참조하면, 바람직한 구체예의 화합물은 본원엔 기재된 방법, 또는 당업계에 공지된 다른 방법을 사용하여 합성되었다.
바람직한 구체예의 다양한 출발 물질, 중간체, 및 화합물은 적절한 경우, 침전, 여과, 결정화, 증발, 증류 및 크로마토그래피와 같은 통상적인 기술을 사용하여 단리되고 정제될 수 있다. 달리 명시되지 않는 한, 모든 출발 물질은 상업적 공급업체로부터 입수되고 추가 정제 없이 사용된다. 염은 공지된 염 형성 절차에 의해 화합물로부터 제조될 수 있다.
화합물을 적절한 SNAP 카트리지 또는 Sfar 카트리지 및 구배를 사용하는 Biotage® Isolera 시스템에서 정상 실리카 상의 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제했다. 대안적으로, 화합물은 적절한 SNAP C18 또는 Sfar C18 카트리지 및 역상 용리액이 있는 Biotage® Isolera 또는 Biotage® Selekt 시스템을 사용하는 역상 실리카에서 또는 (달리 언급된 경우) 분취용 HPLC에 의해 정제되었다.
산성 pH, 조기 용리 방법을 사용하는 분취용 HPLC
정제는 Waters Sunfire C18 컬럼 (30 mm x 100 mm, 10 μM; 온도: RT) 및 14.44 분에 걸쳐 10-95% B (A= 물 중의 0.1% 포름산; 아세토니트릴 중의 B= 0.1% 포름산) 이후 2.11 분 동안 95% B의 구배를 사용하여, 1500 μL의 주입 부피 및 40 mL/분의 유량으로 Gilson LC 시스템에서 수행되었다. UV 스펙트럼은 Gilson 검출기를 사용하여 215 nm에서 기록되었다.
산성 pH, 표준 용리 방법을 사용하는 분취용 HPLC
분취용 HPLC (산성 pH, 표준 용리 방법)에 의한 정제는 Waters Sunfire C18 컬럼 (30 mm x 100 mm, 10 μM; 온도: RT) 및 11 분에 걸쳐 30-95% B (A= 물 중의 0.1% 포름산; 아세토니트릴 중의 B= 0.1% 포름산) 이후 2.11 분 동안 95% B의 구배를 사용하여, 1500 μL의 주입 부피 및 40 mL/분의 유량으로 Gilson LC 시스템에서 수행되었다. UV 스펙트럼은 Gilson 검출기를 사용하여 215 nm에서 기록되었다.
염기성 pH, 조기 용리 방법을 사용하는 분취용 HPLC
분취용 HPLC (염기성 pH, 조기 용리 방법)에 의한 정제는 Waters Xbridge C18 컬럼 (30 mm x 100 mm, 10 μM; 온도: RT) 및 14.44 분에 걸쳐 10-95% (A= 물 중의 0.2% 암모늄 하이드록사이드; B= 아세토니트릴 중의 0.2% 암모늄 하이드록사이드) 이후 2.11 분 동안 95% B의 구배를 사용하여, 1500 μL의 주입 부피 및 40 mL/분의 유량으로 Gilson LC 시스템에서 수행되었다. UV 스펙트럼은 Gilson 검출기를 사용하여 215 nm에서 기록되었다.
염기성 pH, 표준 용리 방법을 사용하는 분취용 HPLC
분취용 HPLC (염기성 pH, 표준 용리 방법)에 의한 정제는 Waters Xbridge C18 컬럼 (30 mm x 100 mm, 10 μM; 온도: RT) 및 11 분에 걸쳐 30-95% (A= 물 중의 0.2% 암모늄 하이드록사이드; B= 아세토니트릴 중의 0.2% 암모늄 하이드록사이드) 이후 2.11 분 동안 95% B의 구배를 사용하여, 1500 μL의 주입 부피 및 40 mL/분의 유량으로 Gilson LC 시스템에서 수행되었다. UV 스펙트럼은 Gilson 검출기를 사용하여 215 nm에서 기록되었다.
달리 명시되지 않은 경우, 분석 HPLC 조건은 다음과 같다.
방법 A
컬럼: Phenomenex Kinetix-XB C18 2.1 x 100 mm, 1.7 μm
컬럼 온도: 40 ℃
용리액: A: H2O +0.1% 포름산, B: 아세토니트릴 + 0.1% 포름산
유량: 0.6 mL/분
구배: 0-5.3 분 5-100% B, 5.3-5.8 분 100% B, 5.8-5.82 분 100-5% B, 5.82-7.00 분 5% B
방법 C
컬럼: Waters UPLC® BEHTM C18 2.1 x 100 mm, 1.7 μm
컬럼 온도: 40 ℃
용리액: A: 2 mM 암모늄 비카르보네이트, pH10로 완충됨, B: 아세토니트릴
유량: 0.6 mL/분
구배: 0-5.3 분 5-100% B, 5.3-5.8 분 100% B, 5.8-5.82 분 100-5% B, 5.82-7.00 분 5% B
방법 E
컬럼: Kinetex Core-Shell C18 2.1 x 50 mm, 5 μm
컬럼 온도: 40 ℃
용리액: A: H2O + 0.1% 포름산, B: 아세토니트릴 + 0.1% 포름산
유량: 1.2 mL/분
구배: 0-1.20 분 5-100% B, 1.20-1.30 분 100% B, 1.30-1.31 분 100-5% B, 1.31-1.7 분 5% B
방법 F
컬럼: Phenomenex Gemini-NX C18 2.0 x 50 mm, 3 μm
컬럼 온도: 40 ℃
용리액: A: 2 mM 암모늄 비카르보네이트, pH10로 완충됨, B: 아세토니트릴
유량: 1 mL/분
구배: 0-1.80 분 1-100% B, 1.80-2.10 분 100% B, 2.10-2.30 분 100-1% B, 2.30-3.50 분 1% B
방법 G
컬럼: Waters UPLC® BEHTM C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm
컬럼 온도: 40 ℃
용리액: A: H2O + 0.1% 포름산, B: 아세토니트릴 + 0.1% 포름산
유량: 0.9 mL/분
구배: 0-1.10 분 5-100% B, 1.10-1.35 분 100% B, 1.35-1.40 분 100-5% B, 1.40-1.50 분 5% B
방법 H
컬럼: Kinetex Core-Shell C18 2.1 x 50 mm, 5 μm
컬럼 온도: 40 ℃
용리액: A: H2O + 0.1% 포름산, B: 아세토니트릴 + 0.1% 포름산
유량: 1.2 mL/분
구배: 0-1.83 분 5-100% B, 1.83-2.25 분 100% B, 2.25-2.26 분 100-5% B, 2.26-2.8 분 5% B
방법 I
컬럼: Waters UPLC ® BEHTM C18 2.1 x 30mm, 1.7μm
컬럼 온도: 40 ℃
용리액: A: 2mM 암모늄 비카르보네이트, pH10로 완충됨, B: 아세토니트릴
유량: 1.0 mL/분
구배: 0-0.75 분 5-100%B, 0.75-0.85 분 100%B, 0.85-0.9 분 100-5%B, 0.9-1.0 분 5%B
하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며 이에 대한 제한으로 해석되어서는 안 된다. 온도는 섭씨로 주어진다. 달리 언급되지 않는 경우, 모든 증발은 진공에서, 바람직하게는 약 15 mm Hg 내지 100 mm Hg (= 20-133 mbar)에서 수행된다. 최종 생성물, 중간체 및 출발 물질의 구조는 표준 분석 방법, 예를 들어, 미세분석 및 분광 특징, 예를 들어, MS 및 NMR에 의해 확인된다. 사용된 약어는 당업계에서 통상적인 것이다. 정의되지 않은 경우, 용어는 일반적으로 허용되는 의미를 갖는다.
약어
aq. 수성
br 광폭
Cy 사이클로헥실
d 이중선
dd 이중선의 이중선
DIBAL 디이소부틸알루미늄 하이드라이드
DCM 디클로로메탄
DCE 1,2-디클로로에탄
DIPEA 디이소프로필에틸아민
DMAP 4-디메틸아미노피리딘
DMF N,N-디메틸포름아미드
DMSO 디메틸 설폭사이드
EtOH 에탄올
EtOAc 에틸 아세테이트
HATU 2-(7-아자-1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
HPLC 고압 액체 크로마토그래피
IPA 이소프로필 알코올
MeCN 아세토니트릴
MeOH 메탄올
MS 질량 분석법
m 다중선
min 분
mL 밀리리터
m/z 질량 대 전하 비율
NMR 핵자기 공명
Q-Phos 1,2,3,4,5-펜타페닐-1'-(디-tert-부틸포스피노)페로센
Rt 체류 시간
s 단일선
t 삼중선
T3P® 1-프로판포스폰산 무수물 용액
TBAF 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드
TBTU N,N,N',N'-테트라메틸-O-(벤조트리아졸-1-일)우로늄 테트라플루오로보레이트
TEA TEA
TFA 트리플루오로아세트산
THF 테트라하이드로푸란
μL 마이크로리터(들)
제조예
실시예 1
4-[[2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-메틸사이클로프로필)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00065
단계 1: 메틸 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00066
1,4-디옥산 (1 mL) 중의 2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (중간체 G) (120 mg, 0.5 mmol), 메틸 4-아미노피리딘-2-카르복실레이트 (76 mg, 0.5 mmol) 및 DIPEA (96 μL, 0.55 mmol)의 교반되는 용액에 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (297 μL, 0.5 mmol)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 45 분 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (20 mL)와 물 (20 mL) 사이에 분배했다. 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.20 분; MS m/z 375.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 8.61 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.05 - 7.84 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.07 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.73 (d, J = 1.0 Hz, 2H), 1.36 (s, 9H).
단계 2: 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산
Figure pct00067
DCM (0.21 mL, 2.24 mmol) 중의 1M BBr3을 냉각되고 (0 ℃), 교반되는 DCM (4 mL) 중의 메틸 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복실레이트 (단계 1) (140 mg, 0.37 mmol)의 현탁액에 적가했다. 30 분 후, 빙조를 제거하고 반응 혼합물을 실온에서 6 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (10 mL)와 포화 NaHCO3 (10 mL) 사이에 분배했다. 수성 부분을 분리하고 2M 수성 HCl을 사용하여 pH를 pH~3으로 조정했다. 혼합물을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 0.98 분; MS m/z 347.1 = [M+H]+ (94% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.26 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 8.62 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.40 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.00 (dd, J = 6.1, 2.1 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.72 (s, 2H), 1.32 (s, 9H)
단계 3: 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-메틸사이클로프로필)피리딘-2-카르복스아미드
DMF (1 mL) 중의 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산 (단계 2) (80 mg, 0.21 mmol), 1-메틸사이클로프로판아민 (15 mg, 0.21 mmol) 및 DIPEA (73 μL, 0.42 mmol)의 용액에 HATU (75 mg, 0.2 mmol)를 첨가하고 생성된 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (5 mL)와 물 (5 mL) 사이에 분배했다. 유기층을 물 (2 x 5 mL), 염수 (5 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의해 정제하고 원하는 분획을 조합하고 밤새 동결건조하여 표제 화합물을 회백색 분말로 수득했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.51 분; MS m/z 400.2 = [M+H]+ (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.74 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.44 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.64 (s, 2H), 1.35 (s, 3H), 1.31 (s, 9H), 0.82 - 0.70 (m, 2H), 0.66 - 0.55 (m, 2H).
하기 표로 작성된 실시예 (표 1)의 화합물은 1-메틸사이클로프로판아민 (단계 3)을 적절한 시판 아민으로 대체하여 실시예 1과 유사하게 제조되었다.
Figure pct00068
Figure pct00069
Figure pct00070
Figure pct00071
실시예 1.3a 및 1.3b
초임계 유체 크로마토그래피 [15 ml/분으로 Chiralcel OJ-H를 사용하는 카이랄 상 컬럼 7% MeOH : 93% CO2]를 사용하는 라세미 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (실시예 1.3)의 카이랄 분리는 개별 거울상이성질체를 제공했다:
실시예 1.3a: 4-[[2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1R)-1-시아노에틸]피리딘-2-카르복스아미드 또는 4-[[2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1S)-1-시아노에틸]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00072
(R)-이성질체
Figure pct00073
(S)-이성질체
첫 번째 용리 피크: SFC 체류 시간 = 3.48 분
LC-MS (방법 A): Rt 3.35 분; MS m/z 399.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.49 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.53 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.07 - 4.99 (m, 1H), 3.65 (s, 2H), 1.55 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.32 (s, 9H).
실시예 1.3b: 4-[[2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1R)-1-시아노에틸]피리딘-2-카르복스아미드 또는 4-[[2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1S)-1-시아노에틸]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00074
(R)-이성질체
Figure pct00075
(S)-이성질체
두 번째 용리 피크: SFC 체류 시간 = 4.36 분
LC-MS (방법 A): Rt 3.35 분; MS m/z 399.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.83 (s, 1H), 9.49 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 9.33 (s, 1H), 8.53 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.07 - 4.99 (m, 1H), 3.65 (s, 2H), 1.55 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.32 (s, 9H).
실시예 1.6a 및 1.6b
초임계 유체 크로마토그래피 [4 ml/분으로 Chiralpak IC 25 cm을 사용하는 카이랄 상 컬럼 25% IPA:75% CO2]를 사용하는 라세미 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (실시예 1.6)의 카이랄 분리는 개별 거울상이성질체를 제공했다:
실시예 1.6a: 4-[[2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1R)-1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸]피리딘-2-카르복스아미드 또는 4-[[2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1S)-1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00076
(R)-이성질체
Figure pct00077
(S)-이성질체
첫 번째 용리 피크: SFC 체류 시간 = 2.33 분
LC-MS (방법 A): Rt 3.16 분; MS m/z 429.3 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.84 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.91 (s, 1H), 3.82 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.73 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.66 (s, 2H), 1.66 (s, 3H), 1.32 (s, 9H).
실시예 1.6b: 4-[[2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1R)-1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸]피리딘-2-카르복스아미드 또는 4-[[2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1S)-1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00078
(R)-이성질체
Figure pct00079
(S)-이성질체
두 번째 용리 피크: SFC 체류 시간 = 4.26 분
LC-MS (방법 A): Rt 3.16 분; MS m/z 429.3 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.85 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.91 (s, 1H), 3.82 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.73 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.66 (s, 2H), 1.66 (s, 3H), 1.32 (s, 9H).
실시예 2
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00080
단계 1: 4-[[2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00081
1,4-디옥산 (0.5 mL) 중의 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세트산 (중간체 B) (38 mg, 0.12 mmol), 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A) (29 mg, 0.12 mmol) 및 DIPEA (23 μL, 0.13 mmol)의 교반되는 용액에 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (71 μL, 0.12 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (5 mL)와 물 (5 mL) 사이에 분배했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.24 분; MS m/z 546.3 = [M+H]+ (93% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 8.49 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.90 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.46-7.42 (m, 2H), 7.37-7.26 (m, 4H), 7.02 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.12 (s, 2H), 3.77 (s, 2H), 1.57 (s, 6H), 1.42 - 1.18 (m, 4H).
단계 2: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
EtOH (2 mL) 중의 4-[[2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸) 페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 1) (45 mg, 0.08 mmol)의 용액에 10 % Pd-C (9 mg, 0.01 mmol)를 첨가했다. 혼합물을 수소 분위기하에 두고 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 Celite® (필터 물질)을 통해 여과하고, EtOH (10 mL)로 헹구었다. 여과액을 진공에서 농축하고 미정제 물질을 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의해 정제하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.95 분; MS m/z 456.2 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.58 (br s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.63 (br s, 1H), 3.68 (s, 2H), 1.49 (s, 6H), 1.35 - 1.27 (m, 2H), 1.24 - 1.14 (m, 2H).
표제 화합물을 또한 다음 방법에 따라 제조했다:
공기 분위기로 퍼지된 IPA (20 mL) 및 DCM (4 mL) 중의 냉각된 (0 ℃) 4-[[2-(2-플루오로-5-하이드록시-4-이소프로페닐-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (실시예 7.1(1.0 g, 2.29 mmol)의 용액을 트리스(2,2,6,6-테트라메틸-3,5-헵탄디오나토)망가니즈(III) (0.14 g, 0.23 mmol)로 처리하고 이어서 페닐실란 (0.56 mL, 4.57 mmol)을 적가했다. 반응 혼합물을 연속 공기 퍼징과 함께 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 반응을 20% 수성 소듐 티오설페이트 (100 mL)로 퀀칭하고 실온에서 30 분 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 염수 (100 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0 내지 100% EtOAc에 이어서 EtOAc 중의 0 내지 100% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 황색 고체를 제공했다. 고체를 물 (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의해 추가로 정제하여 백색 고체를 수득했다. 고체를 MeCN (12 mL)으로부터 재결정화하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득했다.
LCMS (방법 A - MSQ2, 7분) Rt 2.92 분; MS m/z 456.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.56 (bs, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.63 (bs, 1H), 3.67 (s, 2H), 1.48 (s, 6H), 1.35 - 1.23 (m, 2H), 1.25 - 1.10 (m, 2H).
실시예 2.1
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00082
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세트산 (중간체 B) 및 4-아미노-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AB)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.57 분; MS m/z 415.3 = [M+H]+ (95% @ 215 nm)
(500 MHz, DMSO-d6) δ 10.83 (s, 1H), 9.57 (br s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.53 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.63 (s, 1H), 3.69 (s, 2H), 1.73 (s, 6H), 1.50 (s, 6H).
실시예 2.2
N- tert- 부틸-4-[[2-[4-(1-시아노-1-메틸-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00083
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-4-(1-시아노-1-메틸-에틸)-2-플루오로-페닐]아세트산 (중간체 C) 및 4-아미노-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 C): Rt 3.27 분; MS m/z 411.5 = [M-H]- (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 10.10 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.80 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 3.72 (s, 2H), 1.69 (s, 6H), 1.40 (s, 9H).
실시예 2.3
4-[[2-[4-(1-시아노-1-메틸-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00084
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-4-(1-시아노-1-메틸-에틸)-2-플루오로-페닐]아세트산 (중간체 C) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 C): Rt 3.20 분; MS m/z 465.3 = [M+H]+ (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 10.05 (br. s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.87 - 7.78 (m, 1H), 7.04 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 3.72 (s, 2H), 1.69 (s, 6H), 1.33-1.26 (m, 2H), 1.20-1.12 (m, 2H).
실시예 2.4
N- tert- 부틸-4-[[2-[4-(1-시아노사이클로프로필)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸] 아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00085
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-4-(1-시아노사이클로프로필)-2-플루오로-페닐]아세트산 (중간체 D) 및 4-아미노-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.05 분; MS m/z 411.3 = [M+H]+ (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.96 (br s, 1H), 8.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.80 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 3.71 (s, 2H), 1.59 - 1.52 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.33 - 1.26 (m, 2H).
실시예 2.5
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[4-(1,1-디메틸-2-모르폴리노-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00086
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-4-(1,1-디메틸-2-모르폴리노-에틸)-2-플루오로-페닐]아세트산 (중간체 E) 및 4-아미노-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AB)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 1.70 분; MS m/z 498.3 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.56 (s, 1H), 10.82 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.57 - 3.49 (m, 4H), 2.64 (s, 2H), 2.48 - 2.41 (m, 4H), 1.72 (s, 6H), 1.31 (s, 6H).
실시예 2.6
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00087
표제 화합물을 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A) 및 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세트산 (중간체 L)으로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.99 분; MS m/z 470.2 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.75 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 3.64 (s, 2H), 3.60 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 1.32 - 1.28 (m, 2H), 1.25 (s, 6H), 1.21 - 1.16 (m, 2H).
표제 화합물을 또한 다음 방법에 따라 제조했다:
단계 1: 4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로 메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00088
DMF (40 mL) 중의 2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 U) (98%, 1.82 g, 7.5 mmol) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A) (96%, 2.11 g, 8.25 mmol)의 용액에 DIPEA (3.93 mL, 22.49 mmol)에 이어서 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (8.93 mL, 14.99 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (150 mL)로 희석하고 염수 (3 x 150 mL)로 세척했다. 조합된 수성 세척액을 EtOAc (80 mL)로 추출하고 유기 추출물을 염수 (3 x 80 mL)로 세척했다. 유기 추출물을 조합하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.24 분; MS m/z 466.2 = [M+H]+ (92% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.84 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 3.83 (s, 2H), 1.45 (s, 6H), 1.32 - 1.28 (m, 2H), 1.21 - 1.16 (m, 2H).
단계 2: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
냉각된 (-78 ℃) THF (65 mL) 중의 4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 1) (92%, 3.46 g, 6.84 mmol)의 용액에 THF 중의 4M LiBH4 (1.88 mL, 7.53 mmol)를 첨가했다. 혼합물을 30 분 동안 교반한 다음 실온으로 서서히 가온하고 4 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 얼음처럼 차가운 1M HCl (150 mL)에 붓고, 20 분 동안 방치한 다음 EtOAc (200 mL)와 물 (100 mL) 사이에 분배했다. 상을 분리하고 수성 부분을 EtOAc (200 mL)로 추가로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 포화 NaHCO3 용액 (2 x 150 mL), 염수 (150 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 잔류물을 EtOAc (~19mL)에 현탁시키고 여과하고, 고체를 EtOAc (3 x 10 mL)로 세척했다. 고체를 진공하에 1 시간 동안 건조시킨 다음 MeCN (2 x 100 mL)으로 공비시켜 백색 고체를 수득했다. EtOAc 여과로부터의 여과액을 진공에서 농축하여 황색 고체를 제공했고 이를 MeCN/물 10-100% (0.1% 포름산)로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 회백색 고체를 수득했다. EtOAc 여과 및 역상 정제로부터의 고체를 조합하고 MeCN으로부터 재결정화하여 표제 화합물을 무색 결정질 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.96 분; MS m/z 470.2 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.57 - 9.20 (m, 2H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.76 (s, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.60 (s, 2H), 1.32 - 1.28 (m, 2H), 1.25 (s, 6H), 1.21 - 1.16 (m, 2H).
실시예 2.7
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00089
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세트산 (중간체 BA) 및 4-아미노-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AB)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.91 분; MS m/z 469.2 = [M+H]+ (97% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.86 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.72 (s, 2H), 1.79 (s, 3H), 1.72 (s, 6H).
실시예 2.8
4-[[2-[4-(1-사이클로프로필-1-하이드록시-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00090
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-4-(1-사이클로프로필-1-하이드록시-에틸)-2-플루오로-페닐]아세트산 (중간체 BB) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.23 분; MS m/z 482.3 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.61 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H), 3.67 (s, 2H), 1.55 - 1.48 (m, 4H), 1.32 - 1.27 (m, 2H), 1.21 - 1.16 (m, 2H), 0.48 - 0.41 (m, 1H), 0.36 - 0.23 (m, 2H), 0.19 - 0.13 (m, 1H).
실시예 2.9
4-[[2-[4-(4-시아노테트라하이드로피란-4-일)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00091
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-4-(4-시아노테트라하이드로피란-4-일)-2-플루오로-페닐]아세트산 (중간체 M) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.92 분; MS m/z 507.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.84 (s, 1H), 10.16 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.01 - 3.93 (m, 2H), 3.73 (s, 2H), 3.68 (m, 2H), 2.32-2.27 (m, 2H), 2.00 (td, J = 13.2, 4.2 Hz, 2H), 1.32-1.28 (m, 2H), 1.21-1.16 (m, 2H).
실시예 2.10
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[2-(트리플루오로메틸)옥세탄-2-일]페닐] 아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00092
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-[2-(트리플루오로메틸)옥세탄-2-일]페닐]아세트산 (중간체 N) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.41 분; MS m/z 522.4 = [M+H]+ (95% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 10.86 (s, 1H), 9.88 (br. s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 4.75 - 4.65 (m, 1H), 4.55-4.46 (m, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.19 - 3.05 (m, 2H), 1.34-1.27 (m, 2H), 1.22-1.16 (m, 2H).
실시예 2.11
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-프로필)페닐] 아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00093
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(1-하이드록시-1-메틸-프로필)페닐]아세트산 (중간체 BC) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.12 분; MS m/z 470.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.58 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.43 (s, 1H), 3.67 (s, 2H), 1.95 (dq, J = 14.8, 7.4 Hz, 1H), 1.70 (dq, J = 14.5, 7.2 Hz, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.33 - 1.27 (m, 2H), 1.22 - 1.16 (m, 2H), 0.69 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
실시예 2.11a 및 2.11b
카이랄 HPLC [0.5 mL/분으로 Chiralcel OD-H, 4.6 x 250 mm, 5 μL를 사용하는 카이랄 상 컬럼 95% 헵탄 : 5% EtOH]를 사용하는 라세미 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-프로필)페닐] 아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (실시예 2.11)의 카이랄 분리는 개별 거울상이성질체를 제공했다:
실시예 2.11a: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1S)-1-하이드록시-1-메틸-프로필]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 또는 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1R)-1-하이드록시-1-메틸-프로필]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00094
첫 번째 용리 피크: 카이랄 HPLC 체류 시간 = 44.37 분
LC-MS (방법 A): Rt 3.15 분; MS m/z 470.4 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.58 (br. s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.45 (br. s, 1H), 3.66 (s, 2H), 1.95 (dq, J = 14.8, 7.4 Hz, 1H), 1.70 (dq, J = 14.4, 7.2 Hz, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.36 - 1.25 (m, 2H), 1.25 - 1.16 (m, 2H), 0.69 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
실시예 2.11b: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1S)-1-하이드록시-1-메틸-프로필]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 또는 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1R)-1-하이드록시-1-메틸-프로필]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00095
두 번째 용리 피크: 카이랄 HPLC 체류 시간 = 50.81 분
LC-MS (방법 A): Rt 3.15 분; MS m/z 470.4 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.60 (br. s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.44 (br. s, 1H), 3.67 (s, 2H), 1.95 (dq, J = 14.7, 7.4 Hz, 1H), 1.70 (dq, J = 14.6, 7.3 Hz, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.32 - 1.26 (m, 2H), 1.23 - 1.15 (m, 2H), 0.69 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
실시예 2.12
4-[[2-[5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-2-메틸-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00096
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-2-메틸-페닐]아세트산 (중간체 BD) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.00 분; MS m/z 452.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.72 (s, 1H), 9.50 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 5.76 (s, 1H), 3.61 (s, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.48 (s, 6H), 1.33-1.27 (m, 2H), 1.22-1.15 (m, 2H).
실시예 2.13
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(하이드록시메틸)사이클로부틸]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00097
단계 1: [1-[2-벤질옥시-5-플루오로-4-[2-옥소-2-[[2-[[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]카르바모일] -4-피리딜]아미노]에틸]페닐]사이클로부틸]메틸 아세테이트
Figure pct00098
1,4-디옥산 (2 mL) 중의 2-[4-[1-(아세톡시메틸)사이클로부틸]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세트산 (중간체 CA)(94%, 142 mg, 0.35 mmol) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A) (93 mg, 0.38 mmol)의 용액에 DIPEA (91 μL, 0.52 mmol)에 이어서 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (0.31 mL, 0.52 mmol)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 희석하고 1M HCl (10 mL), 포화 NaHCO3 (10 mL) 용액 및 염수 (10 mL)로 순차적으로 세척했다. 유기 부분을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 헵탄 중의 0-50% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 옅은 황색 분말로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.44 분; MS m/z 614.4 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.81 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 2H), 7.40 - 7.35 (m, 2H), 7.34 - 7.29 (m, 1H), 7.09 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 5.04 (s, 2H), 4.31 (s, 2H), 3.76 (s, 2H), 2.35 - 2.27 (m, 2H), 2.18 - 2.11 (m, 2H), 2.07 - 1.97 (m, 1H), 1.90 (s, 3H), 1.78 - 1.70 (m, 1H), 1.31 - 1.17 (m, 4H).
단계 2: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(하이드록시메틸)사이클로부틸]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
MeOH (1 mL) 중의 [1-[2-벤질옥시-5-플루오로-4-[2-옥소-2-[[2-[[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 카르바모일]-4-피리딜]아미노]에틸]페닐]사이클로부틸]메틸 아세테이트 (단계 1(99%, 135 mg, 0.22 mmol)의 용액에 K2CO3 (33 mg, 0.24 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 Celite®를 통해 여과하고 MeOH (1 mL)를 통해 세척했다. 여과액에 10% Pd/C (14 mg, 0.01 mmol)를 첨가하고 혼합물을 H2의 분위기하에 두고 2 시간 동안 교반햇다. 생성된 혼합물을 Celite®를 통해 여과하고 MeOH를 통해 세척했다. 여과액을 진공에서 농축했고 헵탄 중의 50-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 무색 분말로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.10 분; MS m/z 482.3 = [M+H]+ (94% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.84 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.62 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.21 - 2.16 (m, 4H), 2.00 - 1.90 (m, 1H), 1.74 - 1.67 (m, 1H), 1.32 - 1.27 (m, 2H), 1.21 - 1.17 (m, 2H).
실시예 2.14
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[2-(트리플루오로메틸)옥세탄-2-일]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00099
표제 화합물을 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-[2-(트리플루오로메틸)옥세탄-2-일]페닐]아세트산 (중간체 N) 및 4-아미노-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AB)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.11 분; MS m/z 481.4 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.89 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.53 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 4.73 - 4.66 (m, 1H), 4.55 - 4.48 (m, 1H), 3.76 (s, 2H), 3.18 - 3.06 (m, 2H), 1.72 (s, 6H).
실시예 2.15
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[4-(하이드록시메틸)테트라하이드로피란-4-일]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00100
표제 화합물을 2-[4-[4-(아세톡시메틸)테트라하이드로피란-4-일]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세트산 (중간체 CB) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)로부터 실시예 2 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.56 분; MS m/z 512.1 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.40 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.61 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.70 - 3.61 (m, 6H), 3.43 - 3.37 (m, 2H), 2.26 - 2.17 (m, 2H), 1.83 (ddd, J = 13.3, 9.3, 3.6 Hz, 2H), 1.33 - 1.27 (m, 2H), 1.22 - 1.15 (m, 2H).
실시예 2.16
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(하이드록시메틸)사이클로프로필]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00101
단계 1: 메틸 1-[2-벤질옥시-4-(2-벤질옥시-2-옥소-에틸)-5-플루오로-페닐]사이클로프로판카르복실레이트
Figure pct00102
THF (54.35 mL) 중의 활성화된 아연 (1.066 g, 16.31 mmol)을 65 ℃에서 가열하고 브로민 (70 μL, 1.22 mmol)으로 처리하고 적색이 사라질 때까지 교반했다. 메틸 1-브로모사이클로프로판카르복실레이트 (21.89 g, 12.23 mmol)를 첨가하고 혼합물을 70 ℃에서 2 시간 동안 가열했다. 이후 혼합물을 실온으로 냉각하고 침전되도록 하여 잔여 Zn 분진을 제거에 도움을 주었다.
별도의 용기를 Pd(dba)2 (234 mg, 0.41 mmol), Q-Phos (290 mg, 0.41 mmol) 및 벤질 2-(5-벤질옥시-4-브로모-2-플루오로-페닐)아세테이트 (중간체 S, 단계 2) (3.5 g, 8.15 mmol)로 채우고 질소 분위기하에 두었다. 주사기에 의해 옮겨진 이 혼합물에 새로 제조된 네기시 시약을 첨가하고 반응 혼합물을 65 ℃에서 3 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축했고 헵탄 중의 0-30% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제가 (두 번 반복) 표제 화합물을 옅은 분홍색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 I): Rt 0.77 분; MS m/z 466.3 = [M+NH4]+ (97% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.40 - 7.31 (m, 10H), 7.11 - 7.06 (m, 2H), 5.14 (s, 2H), 5.06 (s, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.48 (s, 3H), 1.47 - 1.41 (m, 2H), 1.18 - 1.13 (m, 2H).
단계 2: 2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-메톡시카르보닐사이클로프로필)페닐]아세트산
Figure pct00103
EtOH (60 mL) 중의 메틸 1-[2-벤질옥시-4-(2-벤질옥시-2-옥소-에틸)-5-플루오로-페닐]사이클로프로판카르복실레이트 (단계 1) (97%, 3.64 g, 7.88 mmol)의 혼합물을 10% Pd/C (물 중의 50%) (15.38 g, 0.72 mmol)로 처리하고, 수소 분위기하에 두고 실온에서 4 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 Celite®를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하고, 진공에서 농축하여 표제 화합물을 옅은 황색 연질 유리로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.69 분; MS m/z 269.1 = [M+H]+ (94% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.42 (br. s, 1H), 9.36 (s, 1H), 6.91 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.49 (s, 2H), 1.44 - 1.39 (m, 2H), 1.12 - 1.06 (m, 2H).
단계 3: 2-(5-플루오로-2-옥소-스피로[벤조푸란-3,1'-사이클로프로판]-6-일)아세트산
Figure pct00104
THF (10 mL) 중의 2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-메톡시카르보닐사이클로프로필)페닐]아세트산 (단계 2) (94%, 2.8 g, 9.81 mmol)을 실온에서 1M KOH (29.44 mL, 29.44 mmol)로 처리하고 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 1M 수성 HCl (39.25 mL, 39.25 mmol)로 처리하고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류물을 THF (20 mL)에 용해시키고, 디옥산 중의 4M HCl (3.46 mL, 98.12 mmol)로 처리하고 80 ℃에서 1 시간 동안 가열했다. 추가의 디옥산 중의 4 M HCl (10 mL)을 첨가하고 교반을 80 ℃에서 1 시간 동안 계속했다. 실온으로 냉각한 후, 혼합물을 진공에서 농축하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 0.98 분; (83% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.46 (br. s, 1H), 7.27 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.12 - 7.08 (m, 1H), 3.64 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 1.89 - 1.84 (m, 2H), 1.76 - 1.71 (m, 2H).
단계 4: 4-[[2-(5-플루오로-2-옥소-스피로[벤조푸란-3,1'-사이클로프로판]-6-일)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00105
1,4-디옥산 (40 mL) 중의 2-(5-플루오로-2-옥소-스피로[벤조푸란-3,1'-사이클로프로판]-6-일)아세트산 (단계 3) (83%, 1.860 g, 6.54 mmol) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A) (1.76 g, 7.19 mmol)를 DIPEA (3.42 mL, 19.61 mmol) 및 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (7.78 mL, 13.07 mmol)으로 처리하고 혼합물을 실온에서 45 분 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 물 (150 mL)과 EtOAc (150 mL) 사이에 분배하고 상을 분리했다. 수성 부분을 EtOAc (150 mL)로 역추출한 다음 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 베이지색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.20 분; MS m/z 464.2 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.81 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.83 (s, 2H), 1.90 - 1.84 (m, 2H), 1.78 - 1.73 (m, 2H), 1.33 - 1.26 (m, 2H), 1.21 - 1.16 (m, 2H).
단계 5: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(하이드록시메틸)사이클로프로필]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
냉각된 (-78 ℃) THF (70 mL) 중의 4-[[2-(5-플루오로-2-옥소-스피로[벤조푸란-3,1'-사이클로프로판]-6-일)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 4) (98%, 3.12 g, 6.59 mmol)의 용액에 THF 중의 4M LiBH4 (1.81 mL, 7.25 mmol)를 적가했다. 혼합물을 -78 ℃에서 10 분 동안 교반한 다음, 실온으로 서서히 가온하고 실온에서 5 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 빙조로 0 ℃까지 냉각하고 1M HCl (70 mL)의 적가에 의해 퀀칭했다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, EtOAc (300 mL) 및 물 (230 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 수성 부분을 EtOAc (300 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 미정제 생성물을 베이지색 고체로 수득했다. 고체를 EtOAc (~25 mL)로부터 재결정화하여 백색 분말 고체를 수득했다. 모액을 진공에서 농축하여 황색 고체를 수득했고 이를 MeCN/물 10-100% (0.1% 포름산)로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 회백색 고체를 수득했다.
EtOAc 결정화 및 역상 정제로부터의 물질을 MeCN에서 조합하고 진공에서 농축했다. 고체를 MeCN와 공비시킨 다음 MeCN으로부터 재결정화하고 ~40℃의 고진공 오븐에서 밤새 건조시켜 표제 화합물을 백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.84 분; MS m/z 468.3 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.99 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 3.67 (s, 2H), 3.47 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 1.35 - 1.27 (m, 2H), 1.23 - 1.14 (m, 2H), 0.83 - 0.73 (m, 2H), 0.68 - 0.58 (m, 2H).
실시예 3
4-[[2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-5-플루오로-피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00106
단계 1: N-(2-브로모-5-플루오로-4-피리딜)-2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-메톡시-페닐) 아세트아미드
Figure pct00107
표제 화합물을 2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (중간체 G) 및 2-브로모-5-플루오로-피리딘-4-아민으로부터 실시예 1 단계 1과 유사하게 제조했다. DIPEA를 TEA로 대체했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.38 분; MS m/z 413.0, 415.0 = [M+H]+ (94 % @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.67 (s, 1H), 8.41 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 1.31 (s, 9H).
단계 2: 메틸 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]-5-플루오로-피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00108
다음 절차에 따라 모든 시약이 COware 가스 반응기 시스템 (2-챔버 유리 장치)에 투입되었다;
챔버 A를 N-(2-브로모-5-플루오로-4-피리딜)-2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-메톡시-페닐) 아세트아미드 (단계 1) (500 mg, 1.21 mmol), Pd(dppf)Cl2 (85 mg, 0.12 mmol)로 채우고 장치를 질소로 플러싱했다. 챔버 B에, 탈기된 톨루엔 (5 mL) 중의 포름산 (320 μL, 8.47 mmol) 및 메탄설포닐 클로라이드 (656 μL, 8.47 mmol)의 용액을 첨가했다. 이후 MeOH (5 mL) 중의 TEA (423 μL, 2.42 mmol)의 용액을 챔버 A에 첨가하고 이어서 TEA (2.96 mL, 16.94 mmol)를 챔버 B에 첨가하여 일산화 탄소를 생성했다. COware 장비를 60 ℃로 16 시간 동안 가열했다. 챔버 A로부터의 생성된 혼합물을 EtOAc (100 mL)와 염수 (100 mL) 사이에 분배했다. 상을 분리하고 수성 부분을 EtOAc (100 mL)로 재추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했고 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 옅은 베이지색 폼으로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.25 분; MS m/z 393.1 = [M+H]+ (94% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.67 (s, 1H), 8.91 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 8.66 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 1.32 (s, 9H).
단계 3: 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-5-플루오로-피리딘-2-카르복실산
Figure pct00109
DCM 중의 1M BBr3 (4.34 mL, 4.34 mmol)을 DCM (10 mL) 중의 메틸 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]-5-플루오로-피리딘-2-카르복실레이트 (단계 2) (98%, 348 mg, 0.87 mmol)의 용액에 첨가하고 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 물 (15 mL)로 희석하고 실온에서 10 분 동안 교반했다. 휘발성 용매를 진공에서 제거하고 생성된 혼합물을 EtOAc (50 mL) 및 1:1 물:염수 (30 mL)로 희석했다. 상을 분리하고 수성 부분을 EtOAc (30 mL)로 재추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.08 분; MS m/z 365.1 = [M+H]+ (95% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.61 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.90 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.78 (s, 2H), 1.32 (s, 9H).
단계 4: 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-5-플루오로-피리딘-2-카르복스아미드
HATU (151 mg, 0.40 mmol)를 DMF (3 mL) 중의 4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-5-플루오로-피리딘-2-카르복실산 (단계 3) (145 mg, 0.40 mmol), 2-아미노-2-메틸-프로판니트릴 하이드로클로라이드 (72 mg, 0.6 mmol) 및 DIPEA (0.17 mL, 0.99 mmol)의 용액에 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (20 mL) 및 물 (20 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 유기 부분을 염수 (20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 분취용 HPLC (산성 pH, 표준 용리 방법)에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.54 분; MS m/z 431.2 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.63 (s, 1H), 9.31 (s, 1H), 8.88 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.61 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.79 (s, 2H), 1.71 (s, 6H), 1.32 (s, 9H).
실시예 4
N-(1-시아노사이클로프로필)-4-[[2-[2-듀테리오-6-플루오로-3-하이드록시-4-[2,2,2-트리듀테리오-1,1-비스(트리듀테리오메틸)에틸]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00110
단계 1: 2-[2-듀테리오-6-플루오로-3-메톡시-4-[2,2,2-트리듀테리오-1,1-비스(트리듀테리오 메틸) 에틸]페닐]아세트산
Figure pct00111
DCE (16 mL) 중의 2-(2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (300 mg, 1.63 mmol)을 포함하는 용기를 1,1,1,3,3,3-헥사듀테리오-2-듀테리오옥시-2-(트리듀테리오메틸) 프로판 (1.23 mL, 13.03 mmol) 및 듀테리오황산 (0.71 mL, 13.03 mmol)으로 처리한 다음 실온에서 3 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고 층을 분리했다. 수성층을 DCM (3 x 20 mL)으로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류물을 DCM (15 mL)에 용해시키고, TFA (1.5 mL)로 처리하고, 2 시간 동안 교반하고 진공에서 농축했다. 헵탄 (+1% 포름산) 중의 0-100% EtOAc (+1% 포름산)로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 생성된 혼합물의 정제는 표제 화합물을 무색 고체로 제공했다. (참고: NMR 분석은 페놀에 대한 오르토-위치에서 80% D 혼입, 및 tert-부틸 기에서 97% D 혼입을 나타냈다).
LC-MS (방법 E): Rt 1.18 분; (75% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.41 (s, 1H), 7.08 (d, J = 9.4 Hz, 0.2H), 6.92 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.55 (d, J = 1.0 Hz, 2H), 1.25 (s, 0.3H).
단계 2: 메틸 4-[[2-[2-듀테리오-6-플루오로-3-메톡시-4-[2,2,2-트리듀테리오-1,1-비스 (트리듀테리오메틸)에틸]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00112
1,4-디옥산 (10.7 mL) 중의 메틸 4-아미노피리딘-2-카르복실레이트 (178 mg, 1.17 mmol) 및 2-[2-듀테리오-6-플루오로-3-메톡시-4-[2,2,2-트리듀테리오-1,1-비스(트리듀테리오메틸) 에틸]페닐] 아세트산 (단계 1) (267 mg, 1.06 mmol)의 혼합물을 TEA (0.56 mL, 3.19 mmol) 및 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (0.63 mL, 1.06 mmol)으로 처리하고 혼합물을 16 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (30 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 포화 수성 소듐 비카르보네이트 (2 x 20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc에 이어서 EtOAc 중의 0-100% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 무색 오일로 제공했다. (참고: NMR 분석은 페놀에 대한 오르토-위치에서 80% D 혼입, 및 tert-부틸 기에서 97% D 혼입을 나타냈다).
LC-MS (방법 E): Rt 1.17 분; MS m/z 385.1= [M+H]+ (69% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.81 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.30 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 6.65 Hz, 0.2H), 6.95 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.75 (s, 2H), 1.26 (s, 0.3H).
단계 3: 4-[[2-[2-듀테리오-6-플루오로-3-하이드록시-4-[2,2,2-트리듀테리오-1,1-비스(트리듀테리오메틸) 에틸]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산
Figure pct00113
THF (4 mL) 중의 메틸 4-[[2-[2-듀테리오-6-플루오로-3-메톡시-4-[2,2,2-트리듀테리오-1,1-비스 (트리듀테리오메틸) 에틸]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트 (단계 2) (69%, 471 mg, 0.85 mmol)를 1M LiOH (4.23 mL, 4.23 mmol)로 처리하고 2 시간 동안 교반했다. 휘발성 용매를 진공에서 제거하고 1M HCl의 첨가에 의해 수성상을 pH 1 로 산성화했다. 생성된 현탁액을 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 DCM (8 mL)에 용해시키고, 빙조에서 냉각하고 DCM 중의 1M BBr3 (2.54 mL, 2.54 mmol)으로 처리했다. 3 시간 동안 교반한 후, 반응을 물 (10 mL)로 퀀칭하고 상을 분리했다. 수성층을 DCM (2 x 20 mL) 및 EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 진공에서 농축했다. 물 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 무색 고체로 제공했다. (참고: NMR 분석은 페놀에 대한 오르토-위치에서 80% D 혼입, 및 tert-부틸 기에서 97% D 혼입을 나타냈다).
LC-MS (방법 E): Rt 0.98 분; MS m/z 357.1 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.79 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 7.0 Hz, 0.2H), 3.65 (s, 2H), 1.26 (s, 0.3H).
단계 4: N-(1-시아노사이클로프로필)-4-[[2-[2-듀테리오-6-플루오로-3-하이드록시-4-[2,2,2-트리듀테리오-1,1-비스(트리듀테리오메틸)에틸]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
DMF (1.4 mL) 중의 4-[[2-[2-듀테리오-6-플루오로-3-하이드록시-4-[2,2,2-트리듀테리오-1,1-비스(트리듀테리오 메틸)에틸]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산 (단계 3) (50 mg, 0.14 mmol)을 1-아미노사이클로프로판 카르보니트릴 하이드로클로라이드 (20 mg, 0.17 mmol), DIPEA (49 μL, 0.28 mmol) 및 HATU (50.7 mg, 0.13 mmol)로 처리했고 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의한 반응 혼합물의 정제는 표제 화합물을 무색 고체로 제공했다.
(참고: NMR 분석은 페놀에 대한 오르토-위치에서 80% D 혼입, 및 tert-부틸 기에서 97% D 혼입을 나타냈다).
LC-MS (방법 C): Rt 3.38 분; MS m/z 421.3 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.67 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 6.9 Hz, 0.2H), 3.66 (s, 2H), 1.57 - 1.51 (m, 2H), 1.37 - 1.30 (m, 2H), 1.27 (s, 0.3H).
실시예 5
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-메틸사이클로 부틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00114
단계 1: 메틸 4-[[2-(2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00115
1,4-디옥산 (108.6 mL) 중의 메틸 4-아미노피리딘-2-카르복실레이트 (3.64 g, 23.89 mmol) 및 2-(2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (4 g, 21.72 mmol)의 용액에 TEA (9.48 mL, 54.3 mmol) 및 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (51.67 mL, 43.44 mmol)을 첨가하고 혼합물을 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (100 mL)에 용해하고 포화 수성 소듐 비카르보네이트 (2 x 100 mL)로 세척했다. 유기 부분을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0%-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 주황색 검으로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.00 분; MS m/z 319.1 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.30 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 6.1, 3.2 Hz, 1H), 6.86 (dt, J = 8.9, 3.7 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.77 (s, 2H), 3.73 (s, 3H).
단계 2: 메틸 4-[[2-[2-플루오로-5-메톡시-4-(1-메틸사이클로부틸)페닐] 아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00116
DCE (2 mL) 중의 메틸 4-[[2-(2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트 (단계 1) (200 mg, 0.63 mmol)의 용액을 진한 황산 (0.27 mL, 5.03 mmol)으로 처리하고 혼합물을 0 ℃로 냉각했다. 이 혼합물에 DCE (2 mL) 중의 메틸렌사이클로부탄 (214 mg, 3.14 mmol)을 적가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 DCM (10 mL) 및 물 (10 mL)에 희석했다. 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.22 분; MS m/z 387.1 = [M+H]+ (77% @ 215 nm)
단계 3: N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-메틸사이클로부틸) 페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
DCM 중의 1M BBr3의 용액(4.05 mL, 4.05 mmol)을 메틸 3-[[2-[2-플루오로-5-메톡시-4-(1-메틸사이클로부틸)페닐]아세틸]아미노] 벤조에이트 (260 mg, 0.67 mmol)의 냉각되고 (0 ℃), 교반되는 용액에 질소하에 2 분에 걸쳐 첨가했다. 혼합물을 실온으로 가온하고 밤새 교반했다. 반응을 얼음으로 퀀칭하고, 30 분 동안 교반했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 갈색 오일을 수득했다. 오일을 DMF (1 mL)에 용해시키고 2-아미노-2-메틸-프로판니트릴 하이드로클로라이드 (36 mg, 0.29 mmol) 및 DIPEA (86 μL, 0.49 mmol)에 이어서 HATU (80.83 mg, 0.21 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (10 mL) 및 물 (10 mL)로 희석했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 회백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.52 분; MS m/z 425.3 = [M+H]+ (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, MeOH -d4) δ 8.47 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 6.69 - 6.63 (m, 2H), 3.68 (s, 2H), 2.43 - 2.30 (m, 2H), 2.16 - 2.02 (m, 3H), 1.80 (s, 6H), 1.80 - 1.72 (m, 1H), 1.45 (s, 3H).
실시예 6
N- tert- 부틸-4-[[2-(4- tert- 부틸-5-하이드록시-2-이소프로필-페닐)아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00117
단계 1: 4-[[2-(2-브로모-4-tert-부틸-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00118
표제 화합물을 2-(2-브로모-4-tert-부틸-5-메톡시-페닐)아세트산 (중간체 F) 및 4-아미노-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드로부터 실시예 1 단계 1과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.42 분; MS m/z 476.1, 478.1 = [M+H]+ (96% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 8.45 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.81 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 1.40 (s, 9H), 1.32 (s, 9H).
단계 2: 4-[[2-(2-브로모-4-tert-부틸-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00119
표제 화합물을 4-[[2-(2-브로모-4-tert-부틸-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드(단계 1) 및 DCM 중의 1M BBr3으로부터 실시예 1 단계 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.32 분; MS m/z 462.0, 463.9 = [M+H]+ (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.66 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.80 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 3.75 (s, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.33 (s, 9H).
단계 3: N-tert-부틸-4-[[2-(4-tert-부틸-5-하이드록시-2-이소프로필-페닐)아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복스아미드
4-[[2-(2-브로모-4-tert-부틸-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드 (단계 2) (96%, 170 mg, 0.35 mmol), 2-이소프로페닐-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (119 mg, 0.71 mmol), 트리포타슘 포스페이트 (300 mg, 1.41 mmol), P(Cy)3 (40 mg, 0.14 mmol) 및 Pd(OAc)2 (16 mg, 0.07 mmol)의 혼합물을 질소하에 탈기된 10:1 톨루엔:물 (2.2 mL)에 용해시키고 혼합물을 100 ℃에서 4 시간 동안 가열했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (10 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 물 (10 mL)로 세척하고 수성 세척액을 EtOAc (3 x 10 mL)로 재추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 혼합물을 실리카의 플러그를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하고 진공에서 농축했다. 잔류물을 EtOH (2 mL)에 용해시키고 10% Pd/C (38 mg, 0.35 mmol)로 처리했다. 혼합물을 수소 분위기하에 두고 24 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 Celite® 플러그를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하고 여과액을 진공에서 농축했다. 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의한 정제는 표제 화합물을 무색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 4.32 분; MS m/z 426.4 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.72 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.45 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.81 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 3.64 (s, 2H), 3.05 (hept, J = 6.9 Hz, 1H), 1.40 (s, 9H), 1.33 (s, 9H), 1.12 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
실시예 7
N- tert- 부틸-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐] 아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00120
단계 1: 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00121
표제 화합물을 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 I) 및 DCM 중의 1M BBr3으로부터 실시예 1 단계 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.28 분; MS m/z 424.1, 426.1 = [M+H]+ (93% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.79 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.71 (s, 2H), 1.40 (s, 9H).
단계 2: N-tert-부틸-4-[[2-(2-플루오로-5-하이드록시-4-이소프로페닐-페닐)아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00122
Figure pct00123
표제 화합물을 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드 (단계 1) 및 2-이소프로페닐-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란으로부터 실시예 8 단계 1과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.56 분; MS m/z 386.2 = [M+H]+ (91% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.78 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.81 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.22 - 5.19 (m, 1H), 5.14 - 5.11 (m, 1H), 3.69 (s, 2H), 2.06 (s, 3H), 1.40 (s, 9H).
단계 3: N-tert-부틸-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸] 아미노]피리딘-2-카르복스아미드
물 (2.5 mL) 및 1,4-디옥산 (5 mL) 중의 N-tert-부틸-4-[[2-(2-플루오로-5-하이드록시-4-이소프로페닐-페닐) 아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 2) (50 mg, 0.13 mmol)의 용액을 메탄설폰산 (842 μL, 12.97 mmol)으로 처리하고 30 ℃에서 24 시간 동안 교반했다. 실온에서 밤새 방치한 후, 혼합물을 EtOAc (20 mL)와 물 (20 mL) 사이에 분배했다. 층을 분리하고 수성 부분을 EtOAc (2 x 20 mL)로 추가로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 염수 (20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의해 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.99 분; MS m/z 404.3 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, MeOH -d4) δ 8.43 (dd, J = 5.6, 0.5 Hz, 1H), 8.13 (dd, J = 2.2, 0.5 Hz, 1H), 7.90 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.70 (s, 2H), 1.58 (s, 6H), 1.47 (s, 9H).
실시예 7.1
4-[[2-(2-플루오로-5-하이드록시-4-이소프로페닐-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00124
단계 1: 4-[2-(4-브로모-2-플루오로-5-하이드록시페닐)아세트아미도]-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필] 피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00125
냉각된 (0 ℃) DCM (250 mL) 중의 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 H) (19.5 g, 39.78 mmol)의 용액에 DCM 중의 1M BBr3 (119.33 mL, 119.33 mmol)을 10 분에 걸쳐 적가했다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 2.5 시간 동안 교반했다. 용매를 진공에서 제거하고 미정제 물질을 0 ℃에서 EtOAc (350 mL)에 현탁시키고 포화 NaHCO3 (550 mL)으로 처리했다. 혼합물을 20 분 동안 실온에서 격렬하게 교반하고 유기층을 분리했다. 수성층을 EtOAc (200 mL)로 재추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 MeCN (300 mL)에 현탁시키고 혼합물을 100 ℃로 10 분 동안 가열했다. 물 (300 mL)을 첨가하고 가열을 30 분 동안 계속했다. 생성된 뜨거운 혼합물을 여과하고 고체를 MeCN (2 x 70 mL)으로 세척하고 40 ℃에서 고진공하에 건조시켜 표제 화합물을 백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.16 분; MS m/z 476.2, 478.1 = [M+H]+ (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 10.17 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.71 (s, 2H), 1.37 - 1.23 (m, 2H), 1.22 - 1.15 (m, 2H).
단계 2: 4-[[2-(2-플루오로-5-하이드록시-4-이소프로페닐-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
톨루엔 (200 mL) 및 물 (40 mL) 중의 2-이소프로페닐-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (12.19 g, 72.57 mmol), Pd(OAc)2 (1.63 g, 7.26 mmol), 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 1(96%, 18.0 g, 36.29 mmol)의 용액을 질소로 10 분 동안 탈기한 다음 P(Cy)3 (4.07 g, 14.51 mmol) 및 트리포타슘 포스페이트 (30.81 g, 145.14 mmol)로 처리했다. 혼합물에 질소를 살포하고, 밀봉하고, 100 ℃에서 밤새 가열했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 미정제 잔류물을 EtOAc (200 mL)와 물 (200 mL) 사이에 분배했다. 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 Celite® 패드를 통해 여과하고, DCM 중의 20% MeOH (100 mL)로 세척했다. 여과액을 진공에서 농축하고 미정제 물질을 톨루엔 (200 mL)에 현탁시켰다. 혼합물을 20 분 동안 환류 가열한 다음 냉각하고 밤새 0 도에서 방치했다. 생성된 고체의 여과 및 톨루엔 (50 mL) 및 헵탄 (100 mL)을 사용한 세척이 표제 화합물을 회백색 고체로 제공했다.
여과액을 진공에서 농축하고 미정제 물질을 MeCN (200 mL)에 용해시켰다. 진공에서 여과액의 농축 및 MeCN (200 mL)에서 재용해에 의해 추가 물질을 수득했다. 2,4,6-트리머캅토-s-트리아진 (1.5 g) 및 탈색 목탄 (3.0 g)을 첨가하고 혼합물을 20-25 ℃에서 1 시간 동안 교반했다. Celite® (2.0 g)를 첨가하고 혼합물을 0-5 ℃에서 1 시간 동안 교반했다. 침전물을 여과지를 통한 흡인 여과에 의해 제거하고 MeCN (100 mL)으로 세척했다. 여과액을 진공에서 농축하고 미정제 물질을 톨루엔 (100 mL)에 현탁시키고 20 분 동안 환류 가열했다. 혼합물을 실온으로 냉각하고 0 ℃에서 밤새 유지했다. 생성된 혼합물을 여과하고, 고체를 차가운 톨루엔 (50 mL)에 이어서 헵탄 (100 mL)으로 세척하고 40 ℃의 고진공 오븐에서 건조시켜 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
여과액의 농축 및 헵탄 중의 0-100% EtOAc에 이어서 EtOAc 중의 0- 100% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제에 의해 추가 물질을 수득했다. 정제 단계로부터의 정제된 물질을 조합하고 물 (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의해 추가로 정제했다. 생성된 고체를 MeCN (10 mL)로부터 재결정화하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.32 분; MS m/z 438.1 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 10.81 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.22 - 5.19 (m, 1H), 5.14 - 5.11 (m, 1H), 3.69 (s, 2H), 2.11 - 2.01 (m, 3H), 1.36 - 1.23 (m, 2H), 1.25 - 1.11 (m, 2H).
실시예 8
N- tert- 부틸-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-메틸사이클로프로필)페닐] 아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00126
단계 1: N-tert-부틸-4-[[2-(2-플루오로-4-이소프로페닐-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00127
톨루엔 (6 mL) 및 물 (0.6 mL) 중의 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 I) (850 mg, 1.94 mmol), 2-이소프로페닐-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (729 μL, 3.88 mmol) 및 트리포타슘 포스페이트 (1.65 g, 7.76 mmol)의 용액을 질소로 10 분 동안 탈기한 다음 Pd(OAc)2 (87 mg, 0.39 mmol) 및 P(Cy)3 (217.54 mg, 0.78 mmol)으로 처리했다. 혼합물에 질소를 살포하고, 밀봉하고, 100 ℃에서 3시간 동안 가열했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 미정제 잔류물을 EtOAc (50 mL)와 물 (50 mL) 사이에 분배했다. 유기 부분을 분리하고, 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 생성된 미정제 물질을 헵탄 중의 0-100% EtOAc에 이어서 EtOAc 중의 0-10% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.35 분; MS m/z 400.2 = [M+H]+ (91% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.78 (s, 1H), 8.45 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.81 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 5.16 - 5.12 (m, 1H), 5.11 - 5.08 (m, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.76 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.39 (s, 9H).
단계 2: N-tert-부틸-4-[[2-[2-플루오로-5-메톡시-4-(1-메틸사이클로프로필)페닐]아세틸] 아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00128
무수 TEA (6.59 mL) 중의 트리에틸암모늄 비스(카테콜라토)아이오도메틸실리케이트 (중간체 J) (95%, 193 mg, 0.38 mmol) 및 (4,4'-디-t-부틸-2,2'-비피리딘)비스[3,5-디플루오로-2-[5-트리플루오로메틸-2-피리디닐-kN)페닐-kC]이리듐(III) 헥사플루오로포스페이트 (14 mg, 0.01 mmol)의 혼합물에 질소하에 무수 DMSO (1.5 mL) 중의 N-tert-부틸-4-[[2-(2-플루오로-4-이소프로페닐-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 1) (100 mg, 0.25 mmol)의 용액을 첨가했다. 반응 혼합물을 파라필름으로 밀봉하고 밤새 팬으로 온도를 약 20-25℃로 유지하면서 Kessil A160WE Tuna Blue 40W LED 램프 앞에서 조사했다. 추가의 트리에틸암모늄 비스(카테콜라토)아이오도메틸실리케이트 (중간체 J) (95%, 193 mg, 0.38 mmol) 및 (4,4'-디-t-부틸-2,2'-비피리딘)비스[3,5-디플루오로-2-[5-트리플루오로메틸-2-피리디닐-kN)페닐-kC]이리듐(III) 헥사플루오로포스페이트 (14 mg, 0.01 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 질로소 다시 퍼징하고 추가 8 시간 동안 조사했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (10 mL) 및 H2O (10 mL)에 희석했다. 형성된 침전물을 1 g Celite® Isolute 카트리지를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하여 제거했다. 여과액 상을 분리하고, 유기 부분을 염수 (2 x 10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제에 이어서 H2O (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN (+0.1% 포름산)으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 추가 정제는 표제 화합물을 황색 점성 오일을 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.33 분; MS m/z 414.1 = [M+H]+ (97% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.77 (s, 1H), 8.45 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.81 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 6.97 - 6.95 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.75 (s, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.26 (s, 3H), 0.69 - 0.65 (m, 2H), 0.65 - 0.59 (m, 2H).
단계 3: N-tert-부틸-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-메틸사이클로프로필)페닐] 아세틸] 아미노]피리딘-2-카르복스아미드
DCM 중의 1M BCl3 (181 μL, 0.18 mmol)을 냉각된 (0℃) DCM (1 mL) 중의 N-tert-부틸-4-[[2-[2-플루오로-5-메톡시-4-(1-메틸사이클로프로필)페닐] 아세틸] 아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 2) (30 mg, 0.07 mmol) 및 테트라-n-부틸암모늄 아이오다이드 (67 mg, 0.18 mmol)의 용액에 질소하에 적가하고 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반했다. 추가의 DCM 중의 1M BCl3 (72 μL, 0.07 mmol)을 첨가하고 교반을 30 분 동안 계속했다. 반응을 얼음으로 퀀칭하고 유기층을 소수성 프릿을 통해 분리했다. 잔여 수성층을 DCM으로 세척하고 유기 부분을 조합하고 진공에서 농축했다. H2O (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN (+0.1% 포름산)으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 회백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.56 분; MS m/z 400.3 = [M+H]+ (98 % @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.76 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.45 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.80 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 3.64 (s, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.26 (s, 3H), 0.69 - 0.63 (m, 2H), 0.63 - 0.55 (m, 2H).
실시예 9
N-(1-시아노사이클로프로필)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00129
단계 1: 메틸 4-[[2-[2-플루오로-5-메톡시-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00130
1,4-디옥산 (45 mL) 중의 메틸 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸] 아미노]피리딘-2-카르복실레이트 (중간체 I 단계 1 (94%, 4.5 g, 10.65 mmol), 비스(피나콜라토)디보론 (4.06 g, 15.97 mmol), KOAc (4.42 g, 31.95 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2 (779 mg, 1.06 mmol)의 혼합물을 질소하에 80℃에서 4 시간 동안 가열했다. 추가의 비스(피나콜라토)디보론 (4.06 g, 15.97 mmol)을 첨가하고 혼합물을 80℃에서 추가 3.5 시간 동안 가열했다. 이후 추가의 Pd(dppf)Cl2 (779 mg, 1.06 mmol)를 첨가하고 혼합물을 80℃에서 밤새 가열했다. 생성된 혼합물을 Celite® (필터 물질)를 통해 여과하고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-10% EtOAc에 이어서 EtOAc 중의 0-100% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 어두운 갈색 점성 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.11 분; MS m/z 445.2 = [M+H]+ (62% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.81 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.81 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 1.27 (s, 12H).
단계 2: 메틸 4-[[2-[2-플루오로-5-메톡시-4-[1-(트리플루오로메틸)비닐]페닐] 아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00131
메틸 4-[[2-[2-플루오로-5-메톡시-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트 (단계 1) (4.5 g, 10.13 mmol), Cs2CO3 (3.96 g, 12.16 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2 (827 mg, 1.01 mmol)의 혼합물을 질소하에 탈기된 모노글라임 (45.5 mL) 및 탈기된 탈이온수 (13 mL)에 용해시켰다. 2-브로모-3,3,3-트리플루오로-프로프-1-엔 (2.36 mL, 22.28 mmol)을 첨가하고 혼합물을 80℃에서 밤새 가열했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (150 mL) 및 물 (150 mL)로 희석했다. 유기 부분을 분리하고, 염수 (150 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 0-100% 중의 EtOAc에 이어서 EtOAc 0-20% 중의 MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제와 H2O (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN (+0.1% 포름산)으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 후속 정제는 표제 화합물을 무색 점성 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.83 분; MS m/z 413.2 = [M+H]+ (91% @ 215 nm)
단계 3: 메틸 4-[[2-[2-플루오로-5-메톡시-4-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]페닐] 아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00132
표제 화합물을 메틸 4-[[2-[2-플루오로-5-메톡시-4-[1-(트리플루오로메틸)비닐]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트 (단계 2) 및 트리에틸암모늄 비스(카테콜라토)아이오도메틸실리케이트 (중간체 J)로부터 실시예 8 단계 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.22 분; MS m/z 427.2 = [M+H]+ (42% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 8.62 (s, 1H), 8.01 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.94 - 7.91 (m, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.18 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 6.86 - 6.82 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.74 (s, 2H), 1.40 - 1.36 (m, 2H), 1.01 - 0.97 (m, 2H).
단계 4: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]페닐]아세틸] 아미노] 피리딘-2-카르복실산
Figure pct00133
표제 화합물을 메틸 4-[[2-[2-플루오로-5-메톡시-4-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트 (단계 3) 및 DCM 중의 1M BBr3으로부터 실시예 1 단계 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 0.96 분; MS m/z 399.1 = [M+H]+ (76% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.89 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 8.57 - 8.53 (m, 1H), 8.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83 - 7.79 (m, 1H), 7.07 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.72 (s, 2H), 1.32 - 1.29 (m, 2H), 1.06 - 1.02 (m, 2H). [산-OH 관찰되지 않음]
단계 5: N-(1-시아노사이클로프로필)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
DMF (1.5 mL) 중의 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산 (단계 4) (42%, 63 mg, 0.07 mmol)의 용액에 DIPEA (23 μL, 0.13 mmol), 1-아미노사이클로프로판카르보니트릴 하이드로클로라이드 (9 mg, 0.08 mmol)에 이어서 HATU (24 mg, 0.06 mmol)를 첨가하고 혼합물을 질소 하에, 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 추가의 1-아미노사이클로프로판카르보니트릴 하이드로클로라이드 (9 mg, 0.08 mmol), DIPEA (23 μL, 0.13 mmol)에 이어서 HATU (24 mg, 0.06 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축했고 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 황갈색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.08 분; MS m/z 463.2 = [M+H]+ (94% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.85 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.71 (s, 2H), 1.55 - 1.51 (m, 2H), 1.35 - 1.28 (m, 4H), 1.07 - 1.01 (m, 2H).
실시예 10
4-[[2-(4- tert- 부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00134
단계 1: 메틸 4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00135
1,4-디옥산 (40 mL) 중의 2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-메톡시-페닐)아세트산 (중간체 K)(1.68 g, 6.54 mmol), 메틸 4-아미노피리딘-2-카르복실레이트 (1.19 g, 7.85 mmol) 및 DIPEA (1.49 mL, 8.51 mmol)의 교반되는 용액에 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (5.06 mL, 8.51 mmol)을 첨가했다. 반응 혼합물을 실온에서 45 분 동안 교반한 다음 EtOAc (200 mL)와 물 (200 mL) 사이에 분배했다. 생성된 현탁액을 1M 수성 HCl (100 mL)에 이어서 20% 수성 NaOH (2 x 100 mL)로 세척했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 헵탄 중의 20-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 회백색 분말로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.25 분; MS m/z 391.1, 393.1 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.45 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.85 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 1.32 (s, 9H).
단계 2: 4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산
Figure pct00136
DCM 중의 1M BBr3 (63.71 mL, 63.71 mmol)을 냉각되고 (0 ℃), 교반되는 DCM (8 mL) 중의 메틸 4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트 (단계 1) (4.15 g, 10.62 mmol)의 현탁액에 적가했다. 30 분 후, 빙조를 제거하고 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 미정제 잔류물을 EtOAc (100 mL)와 물 (100 mL) 사이에 분배했다. 유기층을 분리하고 수성층을 EtOAc (50 mL)로 역추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류물을 1:1 MeCN:물 (50 mL)에 현탁시키고 여과하고, 1:1 MeCN:물로 세척했다. 고체를 진공 하에 건조시켜 표제 화합물을 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.02 분; MS m/z 363.0, 365.0 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
단계 3: 4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-1-메틸-에틸) 피리딘-2-카르복스아미드
DMF (25 mL) 중의 4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복실산 (단계 2) (2.5 g, 6.89 mmol)의 용액에 2-아미노-2-메틸-프로판니트릴 하이드로클로라이드 (914 mg, 7.58 mmol), DIPEA (2.41 mL, 13.78 mmol)에 이어서 HATU (2.62 g, 6.89 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc로 희석하고 1M HCl (150 mL), 포화 NaHCO3 용액 (150 mL) 및 염수 (150 mL)로 순차적으로 세척했다. 유기 부분을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 무색 분말로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.65 분; MS m/z 429.2, 431.2 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.85 (s, 1H), 9.64 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 3.75 (s, 2H), 1.72 (s, 6H), 1.33 (s, 9H).
실시예 10.1
4-[[2-(4- tert- 부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00137
2-아미노-2-메틸-프로판니트릴 하이드로클로라이드 (단계 3)를 1-(트리플루오로메틸)사이클로프로판아민 하이드로클로라이드로 대체하여 표제 화합물을 실시예 10과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.92 분; MS m/z 470.2, 472.2 = [M+H]+ (98 % @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.81 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 3.74 (s, 2H), 1.33 (s, 9H), 1.30 - 1.14 (m, 4H).
실시예 10.2
4-[[2-(4- tert- 부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노사이클로프로필) 피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00138
2-아미노-2-메틸-프로판니트릴 하이드로클로라이드 (단계 3)를 1-아미노사이클로프로판카르보니트릴 하이드로클로라이드로 대체하여 표제 화합물을 실시예 10과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.50 분; MS m/z 427.2, 429.2 = [M+H]+ (97 % @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (br s, 1H), 9.66 (s, 1H), 9.63 (br s, 1H), 8.50 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 3.75 (s, 2H), 1.56 - 1.50 (m, 2H), 1.39 - 1.27 (m, 11H).
실시예 11
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(3-하이드록시-1,1-디메틸-프로필)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00139
단계 1: 4-[[2-(6-플루오로-4,4-디메틸-2-옥소-크로만-7-일)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00140
표제 화합물을 2-(6-플루오로-4,4-디메틸-2-옥소-크로만-7-일)아세트산 (중간체 P) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)로부터 실시예 2 단계 1와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.96 분; MS m/z 480.2 = [M+H]+ (93% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.84 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.80 (s, 2H), 2.73 (s, 2H), 1.34 - 1.21 (m, 8H), 1.21 - 1.17 (m, 2H).
단계 2: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(3-하이드록시-1,1-디메틸-프로필)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
교반되는 냉각된 (-78 ℃) THF (10 mL) 중의 4-[[2-(6-플루오로-4,4-디메틸-2-옥소-크로만-7-일)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 1) (93%, 345 mg, 0.67 mmol)의 용액에 THF 중의 4M LiBH4 (201 μL, 0.8 mmol)를 첨가하고 혼합물을 -78 ℃에서 1 시간 동안 이후 실온에서 밤새 교반했다.
반응을 물 (20 mL)로 퀀칭하고 EtOAc (10 mL)로 희석했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 물 (0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 잔류물의 정제는 표제 화합물을 백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.98 분; MS m/z 484.2 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.81 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.16 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.20 - 3.10 (m, 2H), 2.03 - 1.91 (m, 2H), 1.38 - 1.22 (m, 8H), 1.21 - 1.12 (m, 2H).
실시예 12
N-(4-시아노테트라하이드로피란-4-일)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00141
단계 1: 메틸 4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00142
DIPEA (9.0 mL, 51.53 mmol) 및 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (20.0 mL, 33.6 mmol)을 교반되는 DMF (60 mL) 중의 2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 U)(4.0 g, 16.79 mmol) 및 메틸 4-아미노피리딘-2-카르복실레이트 (2.55 g, 16.79 mmol)의 용액에 동시에 첨가하고 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (60 mL)로 희석하고 염수 (100 mL)로 세척했다. 수성 물질을 EtOAc (2 x 75 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 염수 (2 x100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 잔류물의 정제에 이어서 생성물 분획과 EtOAc (3 x 100 mL)의 공비는 표제 화합물을 베이지색 분말로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.81 분; MS m/z 373.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.85 (br. s, 1H), 8.56 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.30 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.83 (s, 2H), 1.45 (s, 6H).
단계 2: 4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산
Figure pct00143
THF (22 mL) 중의 메틸 4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복실레이트 (단계 1) (2.0 g, 5.37 mmol)의 용액에 물 (22 mL) 중의 리튬 하이드록사이드 수화물 (1.13 g, 26.86 mmol)의 용액을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물의 pH를 2M KHSO4 (약 45 mL)를 사용하여 pH 1로 조정하고 교반을 실온에서 1 시간 동안 계속했다. 용해도를 보조하기 위해 디옥산 (100 mL)을 첨가하고 혼합물을 50℃로 밤새 가열했다. 혼합물을 EtOAc/MeCN (1:1, 4 x 100 mL)으로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 잔류물을 디옥산 중의 4M HCl (15 mL)에 용해시키고 80℃로 1 시간 동안 가열했다. 생성된 에멀젼을 실온으로 냉각하고 진공에서 농축하고, EtOAc:MeCN (1:1, 2 x 100 mL)과 공비시켜 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 0.93 분; MS m/z 359.1 = [M+H]+ (97% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.26 (br. s, 1H), 8.60 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 5.9, 2.2 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 3.89 (s, 2H), 1.45 (s, 6H).
단계 3: N-(4-시아노테트라하이드로피란-4-일)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
DMF (3 mL) 중의 4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산 (단계 2) (87%, 150 mg, 0.36 mmol), 4-아미노테트라하이드로피란-4-카르보니트릴 (51 mg, 0.40 mmol) 및 HATU (166 mg, 0.44 mmol)의 용액에 DIPEA (89 μL, 0.51 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 추가의 HATU (166 mg, 0.44 mmol), 4-아미노테트라하이드로피란-4-카르보니트릴 (51 mg, 0.40 mmol) 및 DIPEA (89 μL, 0.51 mmol)를 첨가하고 교반을 추가 한 시간 동안 계속했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (8 mL)로 희석하고, 물 (8 mL), 염수 (2 x 8 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 잔류물을 THF (3 mL)에 용해시키고 -78℃로 냉각했다. THF 중의 4M LiBH4 (0.10 mL, 0.40 mmol)을 적가하고 45 분에 걸쳐 실온으로 서서히 가온하며 교반을 계속했다. 생성된 혼합물을 0℃로 재냉각하고 반응을 1M HCl (5 mL)의 적가에 의해 퀀칭했다. 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 수성 물질을 EtOAc (10 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 물 (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 생성물의 정제는 표제 화합물을 베이지색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.54 분; MS m/z 471.4 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.83 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.77 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 3.87 (dt, J = 12.1, 3.8 Hz, 2H), 3.65 (s, 2H), 3.62 - 3.55 (m, 4H), 2.40 - 2.33 (m, 2H), 2.11 - 2.03 (m, 2H), 1.25 (s, 6H).
실시예 12.1
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[3-(트리플루오로메틸)옥세탄-3-일]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00144
표제 화합물을 4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산 (실시예 12 단계 2) 및 3-(트리플루오로메틸)옥세탄-3-아민 하이드로클로라이드로부터 실시예 12 단계 3과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.75 분; MS m/z 486.3 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.89 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.93 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 4.79 - 4.69 (m, 3H), 3.66 (s, 2H), 3.61 (d, J = 3.3 Hz, 2H), 1.26 (s, 6H).
실시예 12.2
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[(1S,2S)-2-하이드록시사이클로펜틸]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00145
표제 화합물을 4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산 (실시예 12 단계 2) 및 (1S,2S)-2-아미노사이클로펜타놀 하이드로클로라이드로부터 실시예 12 단계 3과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.37 분; MS m/z 446.3 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, 메탄올-d4) δ 8.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.34 (br. s, 1H), 8.18 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.16 - 4.08 (m, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.69 (s, 2H), 2.23-2.15 (m, 1H), 2.05-1.97 (m, 1H), 1.89 - 1.73 (m, 2H), 1.70 - 1.58 (m, 2H), 1.34 (s, 6H).
실시예 12.3
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00146
4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산 ((실시예 12 단계 2)(87%, 172 mg, 0.42 mmol) 및 DIPEA (0.22 mL, 1.26 mmol)를 DMF (2 mL)에 현탁시키고 HATU (191 mg, 0.5 mmol)에 이어서 2-아미노-2-메틸-프로판-1-올 (49 mg, 0.54 mmol)로 처리하고 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (25 mL)로 희석하고 물 (2 x 20 mL), 염수 (2 x 20 mL)로 세척하고, Na2SO4 로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 중간체를 THF (10 mL)에 용해시키고 -78℃로 냉각했다. THF 중의 4M LiBH4 (157 μL, 0.63 mmol)를 첨가하고 실온으로 서서히 가온하며 교반을 계속했다. 추가 1.5 시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 0℃로 재냉각하고 반응을 1M HCl (10 mL)의 적가에 의해 퀀칭했다. 혼합물을 EtOAc (20 mL) 및 물 (20 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 수성 부분을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추가로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의한 미정제 생성물의 정제는 고체를 제공했고 이를 40℃의 진공 오븐에서 건조시켜 표제 화합물을 무색 고체로 수득했다.
LCMS (방법 A) Rt 2.43 분; MS m/z 434.3 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.76 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.45 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.19 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.13 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.77-4.70 (m, 1H), 3.64 (s, 2H), 3.60 (d, J = 3.7 Hz, 2H), 3.44 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 1.33 (s, 6H), 1.25 (s, 6H).
실시예 12.4
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(하이드록시메틸)사이클로부틸]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00147
DMF (3 mL) 중의 4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산 (실시예 12 단계 2) (87%, 160 mg, 0.39 mmol) 및 DIPEA (0.24 mL, 1.36 mmol)의 용액에 HATU (177 mg, 0.47 mmol)에 이어서 (1-아미노사이클로부틸)메탄올 하이드로클로라이드 (70 mg, 0.51 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 40 분 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (20 ml) 및 물 (20 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 유기 부분을 염수 (20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 중간체를 THF (3 mL)에 녹이고 -78℃로 냉각했다. THF 중의 4M LiBH4 (107 μL, 0.43 mmol)을 적가하고 40 분에 걸쳐 실온으로 서서히 가온하며 혼합물을 교반했다. 생성된 혼합물을 0℃로 재냉각하고 반응을 1M HCl (5 mL)의 적가에 의해 퀀칭했다. 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 수성 부분을 EtOAc (10 mL)로 추가로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의한 미정제 생성물의 정제는 표제 화합물을 무색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.43 분; MS m/z 446.3 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.34 (br. s, 1H), 8.48 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.01 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.76 (br. s, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.62 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 3.61 (s, 2H), 2.09 - 2.01 (m, 2H), 1.89 - 1.80 (m, 1H), 1.79 - 1.66 (m, 1H), 1.26 (s, 6H).
실시예 13
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(4-하이드록시테트라하이드로피란-4-일)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00148
단계 1: 4-[[2-(5-벤질옥시-4-브로모-2-플루오로-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00149
표제 화합물을 2-(5-벤질옥시-4-브로모-2-플루오로-페닐)아세트산 (중간체 S) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)로부터 실시예 2 단계 1과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.13 분; MS m/z 566.1, 568.0 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.50-7.46 (m, 2H), 7.42 - 7.36 (m, 2H), 7.35-7.28 (m, 2H), 5.16 (s, 2H), 3.79 (s, 2H), 1.33-1.27 (m, 2H), 1.23-1.15 (m, 2H).
단계 2: 4-[[2-[5-벤질옥시-4-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-플루오로-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00150
톨루엔 (5 mL) 및 물 (0.5 mL) 중의 4-[[2-(5-벤질옥시-4-브로모-2-플루오로-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 1) (220 mg, 0.39 mmol), 2-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (163 mg, 0.78 mmol), 트리포타슘 포스페이트 (330 mg, 1.55 mmol)의 용액을 질소로 10 분 동안 탈기한 다음 Pd(OAc)2 (17 mg, 0.08 mmol) 및 P(Cy)3 (44 mg, 0.16 mmol)으로 처리했다. 혼합물을 추가 5 분 동안 질소로 버블링하고, 밀봉하고 100 ℃에서 5 시간 동안 가열했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (25 mL)와 물 (25 mL) 사이에 분배했다. 층을 분리하고 유기 부분을 염수 (25 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.35 분; MS m/z 570.3 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.46 - 7.34 (m, 4H), 7.34 - 7.28 (m, 1H), 7.15 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 5.99 - 5.95 (m, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.19 - 4.15 (m, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.74 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.43 - 2.38 (m, 2H), 1.33 - 1.27 (m, 2H), 1.22 - 1.17 (m, 2H).
단계 3: 4-[[2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(4-하이드록시테트라하이드로피란-4-일)페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00151
IPA (5 mL) 및 DCM (1 mL) 중의 4-[[2-[5-벤질옥시-4-(3,6-디하이드로-2H-피란-4-일)-2-플루오로-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 2) (100%, 170 mg, 0.3 mmol)의 용액을 공기로 10 분 동안 퍼징했다. 혼합물을 0 ℃로 냉각하고 트리스(2,2,6,6-테트라메틸-3,5-헵탄디오나토)망가니즈(III) (18 mg, 0.03 mmol)에 이어서 페닐실란 (74 μL, 0.6 mmol)을 첨가했다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 1 시간 동안 교반했다. 반응을 소듐 티오설페이트의 20% 수용액 (20 mL)로 퀀칭하고 실온에서 30 분 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (2 x 25 mL)로 추출하고, 조합된 유기 추출물을 염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 회백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.26 분; MS m/z 588.3 = [M+H]+ (79% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.52 - 7.48 (m, 2H), 7.41 - 7.34 (m, 3H), 7.32-7.28 (m, 1H), 7.13 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.15 (s, 2H), 5.11 (s, 1H), 3.79 - 3.71 (m, 4H), 3.66 (dd, J = 10.7, 5.2 Hz, 2H), 2.68 - 2.57 (m, 2H), 1.35 - 1.28 (m, 4H), 1.21 - 1.17 (m, 2H).
단계 4: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(4-하이드록시테트라하이드로피란-4-일)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
표제 화합물을 4-[[2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(4-하이드록시테트라하이드로피란-4-일)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 3) 및 10% Pd-C로부터 실시예 2 단계 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.71 분; MS m/z 498.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.81 (s, 1H), 9.57 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.35 (s, 1H), 3.77-3.72 (m, 2H), 3.70-3.65 (m, 4H), 2.46 (모호한 m, 2H), 1.36 (d, J = 12.9 Hz, 2H), 1.32 - 1.27 (m, 2H), 1.21-1.16 (m, 2H).
실시예 14
4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00152
단계 1: 메틸 2-[5-클로로-2-메톡시-4-[2-옥소-2-[[2-[[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 카르바모일]-4-피리딜]아미노]에틸]페닐]-2-메틸-프로파노에이트
Figure pct00153
1,4-디옥산 중의 2-[2-클로로-5-메톡시-4-(2-메톡시-1,1-디메틸-2-옥소-에틸)페닐]아세트산 (중간체 T 단계 5) (771 mg, 2.56 mmol), 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A) (629 mg, 2.56 mmol) 및 TEA (672 μL, 3.85 mmol)의 (10 mL) 교반되는 용액에 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (2.29 mL, 3.85 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 주위 온도에서 1 시간 동안 교반했다.
생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 미정제 잔류물을 EtOAc (20 mL)에 용해시키고, NaHCO3 (15 mL), 염수 (15 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 잔류물의 정제는 표제 화합물을 회백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.05 분; MS m/z 528.1, 530.1 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.87 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 1.42 (s, 6H), 1.32 - 1.30 (m, 2H), 1.21 - 1.19 (m, 2H).
단계 2: 4-[[2-(5-클로로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00154
DCM 중의 1M BBr3 (2.81 mL, 2.81 mmol)을 DCM (12 mL) 중의 메틸 2-[5-클로로-2-메톡시-4-[2-옥소-2-[[2-[[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]카르바모일]-4-피리딜]아미노]에틸] 페닐]-2-메틸-프로파노에이트 (단계 1) (494 mg, 0.94 mmol)의 용액에 N2하에 적가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고 DCM (30 mL)으로 추출했다. 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 10-100% 물 (+0.1% 포름산) / MeCN (+0.1% 포름산)으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 잔류물의 정제는 표제 화합물을 회백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.02 분; MS m/z 482.2, 484.1 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.86 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 3.94 (s, 2H), 1.46 (s, 6H), 1.32 - 1.28 (m, 2H), 1.21 - 1.17 (m, 2H).
단계 3: 4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
냉각된 (-78 ℃) THF (4 mL) 중의 4-[[2-(5-클로로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 2) (197 mg, 0.41 mmol)의 용액에 THF 중의 4M LiBH4 (0.11 mL, 0.45 mmol)를 첨가했다. 생성된 혼합물을 5 분 동안 교반한 다음 1 시간에 걸쳐 서서히 실온으로 가온했다.
혼합물을 얼음처럼 차가운 1M HCl (50 mL)에 붓고, 20 분 동안 방치한 다음 EtOAc (50 mL) 및 물 (20 mL)로 희석했다. 상을 분리하고 수성 부분을 EtOAc (50 mL)로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 포화 NaHCO3 용액 (2 x 50 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 10-100% 물 (+0.1% 포름산) / MeCN (+0.1% 포름산)으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 잔류물의 정제는 표제 화합물을 회백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.12 분; MS m/z 486.2, 488.1 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 8.23 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.85 (dd, J= 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.77 (s, 1H), 3.75 (s, 2H), 3.61 (s, 2H), 1.33 - 1.28 (m, 2H), 1.26 (s, 6H), 1.22 - 1.17 (m, 2H).
실시예 14.1
4-[[2-[5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)-2-메틸-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00155
단계 1: 메틸 2-[5-브로모-2-메톡시-4-[2-옥소-2-[[2-[[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 카르바모일]-4-피리딜]아미노]에틸]페닐]-2-메틸-프로파노에이트
Figure pct00156
표제 화합물을 2-[2-브로모-5-메톡시-4-(2-메톡시-1,1-디메틸-2-옥소-에틸)페닐]아세트산 (중간체 Q) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)로부터 실시예 14 단계 1와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 H): Rt 1.53 분; MS m/z 573.4 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.87 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 1.42 (s, 6H), 1.32 - 1.29 (m, 2H), 1.22 - 1.16 (m, 2H).
단계 2: 메틸 2-[2-메톡시-5-메틸-4-[2-옥소-2-[[2-[[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 카르바모일]-4-피리딜]아미노]에틸]페닐]-2-메틸-프로파노에이트
Figure pct00157
메틸 2-[5-브로모-2-메톡시-4-[2-옥소-2-[[2-[[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]카르바모일]-4-피리딜]아미노]에틸]페닐]-2-메틸-프로파노에이트 (단계 1) (75%, 655 mg, 0.86 mmol)를 1,4-디옥산 (15 mL)에 용해시키고 2,4,6-트리메틸-1,3,5,2,4,6-트리옥사트리보리난 (50%, 0.29 mL, 1.03 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (31 mg, 0.04 mmol) 및 K2CO3 (237 mg, 1.72 mmol)을 첨가했다. 반응 혼합물을 5 분 동안 탈기하고 110℃에서 18 시간 동안 교반되도록 두었다. 생성된 혼합물을 EtOAc (40 mL)로 희석하고 물 (30 mL), 염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 물 중의 0-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.01 분; MS m/z 508.30 = [M+H]+ (79% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.77 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 3.72 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.52 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.39 (s, 6H), 1.32 - 1.28 (m, 2H), 1.21 - 1.15 (m, 2H).
단계 3: N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]-4-[[2-(3,3,5-트리메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00158
표제 화합물을 메틸 2-[2-메톡시-5-메틸-4-[2-옥소-2-[[2-[[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]카르바모일]-4-피리딜]아미노]에틸]페닐]-2-메틸-프로파노에이트 (단계 2) 및 DCM 중의 1M BBr3으로부터 실시예 14 단계 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.02 분; MS m/z 462.2 = [M+H]+ (93% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 3.79 (s, 2H), 2.27 (s, 3H), 1.42 (s, 6H), 1.32 - 1.27 (m, 2H), 1.21 - 1.16 (m, 2H).
단계 4: 4-[[2-[5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)-2-메틸-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
표제 화합물을 N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]-4-[[2-(3,3,5-트리메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 3) 및 4M LiBH4로부터 실시예 14 단계 3과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.04 분; MS m/z 466.3 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.73 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.64 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 3.59 (s, 2H), 3.58 (s, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.32 - 1.28 (m, 2H), 1.25 (s, 6H), 1.21 - 1.17 (m, 2H).
실시예 15
N-(3,3-디플루오로-1-메틸-사이클로부틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00159
DMF (2.5 mL) 중의 4-아미노-N-(3,3-디플루오로-1-메틸-사이클로부틸)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AE) (67 mg, 0.28 mmol) 및 2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 U) (60 mg, 0.25 mmol)을 DIPEA (0.13 mL, 0.74 mmol) 및 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (0.59 mL, 0.49 mmol)으로 처리하고 혼합물을 3 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (20 mL)로 희석하고 염수 (2 x 20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류물을 THF (2.5 mL)에 용해시키고, -78 ℃로 냉각하고 THF 중의 4M LiBH4 (60 μL, 0.25 mmol)로 처리했다. 혼합물을 0 ℃로 가온하고 4 시간 동안 교반했다. 1M HCl의 빙냉 용액에 적가하여 반응을 퀀칭하고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 포화 수성 소듐 비카르보네이트 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 무색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.02 분; MS m/z 466.3 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.78 (s, 1H), 9.39 (br. s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.75 (br. s, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.60 (s, 2H), 3.12 - 3.00 (m, 2H), 2.74 - 2.64 (m, 2H), 1.52 (s, 3H), 1.25 (s, 6H).
실시예 15.1
4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00160
표제 화합물을 4-아미노-N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AD) 및 2-(5-클로로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 T)으로부터 실시예 15와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.07 분; MS m/z 444.3, 446.3 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.21 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.76 (s, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.61 (s, 2H), 3.22 (s, 1H), 1.64 (s, 6H), 1.25 (s, 6H).
실시예 15.2
4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(3,3-디플루오로-1-메틸-사이클로부틸)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00161
Figure pct00162
표제 화합물을 4-아미노-N-(3,3-디플루오로-1-메틸-사이클로부틸)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AE) 및 2-(5-클로로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 T)으로부터 실시예 15와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.18 분; MS m/z 482.3, 484.3 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.76 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.61 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 3.12 - 3.00 (m, 2H), 2.74 - 2.63 (m, 2H), 1.52 (s, 3H), 1.25 (s, 6H).
실시예 15.3
4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(디플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00163
표제 화합물을 2-(5-클로로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 T) 및 4-아미노-N-[1-(디플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AC)로부터 실시예 15와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.96 분; MS m/z 468.2, 470.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.08 (t, J = 57.1 Hz, 1H), 4.75 (s, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.61 (s, 2H), 1.25 (s, 6H), 1.11 - 1.05 (m, 2H), 1.06 - 0.99 (m, 2H).
실시예 15.4
N-[1-(디플루오로메틸)사이클로프로필]-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00164
표제 화합물을 2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 U) 및 4-아미노-N-[1-(디플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AC)로부터 실시예 15와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.78 분; MS m/z 452.3 = [M+H]+ (94% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.38 (br. s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.08 (t, J = 57.1 Hz, 1H), 4.75 (br. s, 1H), 3.64 (s, 2H), 3.60 (s, 2H), 1.25 (s, 6H), 1.11 - 1.05 (m, 2H), 1.05 - 1.00 (m, 2H).
실시예 16
N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00165
단계 1: N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)-4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00166
DMF (5 mL) 중의 4-아미노-N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AD) (176 mg, 0.87 mmol), DIPEA (0.21 mL, 1.18 mmol), 2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 U) (94%, 200 mg, 0.79 mmol) 및 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (0.56 mL, 0.95 mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 희석하고 염수 (20 mL)로 세척했다. 유기 부분을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득했다. 이는 다음 단계에서 추가의 정제 없이 사용되었다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.98 분; MS m/z 424.3 = [M+H]+ (92% @ 215 nm)
단계 2: N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
냉각되고 (-78 ℃), 교반되는 THF (10 mL) 중의 N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)-4-[[2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 1) (92%, 330 mg, 0.72 mmol)의 용액에 THF 중의 4M LiBH4 (215 μL, 0.86 mmol)를 첨가하고 혼합물을 -78 ℃에서 1 시간 동안 이후 실온에서 3 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 0 ℃로 냉각하고 반응을 1M HCl (10 mL)로 퀀칭했다. 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 희석하고 층을 분리했다. 수성 부분을 EtOAc (2 x 10 mL)로 재추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 물 (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 생성물의 정제에 이어서 MeCN으로부터의 재결정화는 표제 화합물을 백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 C): Rt 2.97 분; MS m/z 426.5 = [M-H]- (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.37 (bs, 1H), 8.48 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.20 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.75 (bs, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.60 (s, 2H), 3.21 (s, 1H), 1.65 (s, 6H), 1.25 (s, 6H).
실시예 16.1
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(4-메틸테트라하이드로피란-4-일)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00167
표제 화합물을 2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 U) 및 4-아미노-N-(4-메틸테트라하이드로피란-4-일)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AF)로부터 실시예 16 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.66 분; MS m/z 460.3 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.83 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.75 (br. s, 1H), 3.70 - 3.57 (m, 6H), 3.55 - 3.47 (m, 2H), 2.24 - 2.16 (m, 2H), 1.68 - 1.58 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.26 (s, 6H).
실시예 16.2
N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00168
표제 화합물을 2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 U) 및 4-아미노-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AB)로부터 실시예 16 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.65 분; MS m/z 429.4 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.83 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.75 (s, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.60 (s, 2H), 1.72 (s, 6H), 1.25 (s, 6H).
실시예 16.3
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(4-메틸테트라하이드로피란-4-일)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00169
표제 화합물을 2-(5-플루오로-3-메틸-2-옥소-3H-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 UA) 및 4-아미노-N-(4-메틸테트라하이드로피란-4-일)피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 AF)로부터 실시예 16 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.34 분; MS m/z 446.3 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.25 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.82 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.64 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 3.68 - 3.61 (m, 4H), 3.57 - 3.48 (m, 3H), 3.38 - 3.34 (m, 1H), 3.18 - 3.08 (m, 1H), 2.24 - 2.17 (m, 2H), 1.67 - 1.59 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.13 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
실시예 16.4
4-[[2-[2,6-디플루오로-3-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00170
표제 화합물을 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A) 및 2-(5,7-디플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산 (중간체 V)으로부터 실시예 16 단계 1 및 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.04 분; MS m/z 488.3 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.88 (s, 1H), 9.51 (br. s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 11.8, 1.7 Hz, 1H), 5.07 (br. s, 1H), 3.77 (s, 2H), 3.63 (s, 2H), 1.32 - 1.24 (m, 8H), 1.22 - 1.15 (m, 2H).
실시예 17
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[2,2,2-트리플루오로-1-(하이드록시메틸)에틸]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00171
단계 1: 4-[[2-[5-벤질옥시-4-[1-[[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시메틸]-2,2,2-트리플루오로-에틸]-2-플루오로-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
tert-부틸-클로로-디메틸-실란 (41 mg, 0.27 mmol)을 DMF (1.5 mL) 중의 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-[2,2,2-트리플루오로-1-(하이드록시메틸)에틸]페닐]아세트산 (중간체 R) (51 mg, 0.14 mmol) 및 이미다졸 (23 mg, 0.34 mmol)의 혼합물에 첨가하고 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 추가의 이미다졸 (23 mg, 0.34 mmol) 및 tert-부틸-클로로-디메틸-실란 (41 mg, 0.27 mmol)을 첨가하고 교반을 추가 30 분 동안 계속했다. 추가의 이미다졸 (46 mg) 및 tert-부틸-클로로-디메틸-실란 (82 mg)을 첨가하고 교반을 30 분 동안 계속했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (10 mL) 및 포화 암모늄 클로라이드 용액 (10 mL)으로 희석하고 상을 분리했다. 수성 부분을 EtOAc (10 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류물을 1,4-디옥산 (1.5 mL)에 용해시키고 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A) (40 mg, 0.16 mmol), DIPEA (47.95 μL, 0.27 mmol)에 이어서 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (0.1 mL, 0.16 mmol)으로 처리하고 생성된 혼합물을 실온에서 45 분 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (15 mL) 및 물 (15 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 수성 부분을 EtOAc (10 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-50% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 무색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 H): Rt 2.10 분; MS m/z 714.5 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.84 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.45 - 7.41 (m, 2H), 7.40 - 7.35 (m, 2H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 7.28 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.15.15-5.08 (m, 2H), 4.21 - 4.11 (m, 1H), 4.07 - 4.01 (m, 1H), 3.98 - 3.93 (m, 1H), 3.80 (s, 2H), 1.31 - 1.17 (m, 4H), 0.80 (s, 9H), -0.02 (s, 3H), -0.04 (s, 3H).
단계 2: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[2,2,2-트리플루오로-1-(하이드록시메틸)에틸]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
디옥산 중의 4M HCl (0.5 mL, 2.0 mmol)을 MeOH (0.5 mL) 중의 4-[[2-[5-벤질옥시-4-[1-[[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시메틸]-2,2,2-트리플루오로-에틸]-2-플루오로-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 1) (46 mg, 0.06 mmol)의 혼합물에 첨가했다. 혼합물을 실온에서 15 분 동안 교반한 다음 진공에서 농축하고 EtOH (2 x 5 mL)와 공비시켰다. 잔류물을 EtOH (3 mL)에 용해시키고 질소 분위기하에 두었다. 10% Pd/C (6.85 mg, 0.01 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 수소 분위기하에 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 Celite® 패드를 통해 여과하고 9:1 EtOAc:MeOH로 헹구었다. 여과액을 진공에서 농축했고 10-100% MeCN/물 (+0.1% 포름산)로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 회백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.91 분; MS m/z 510.0 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.84 (s, 1H), 9.80 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.11 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 4.11 - 4.00 (m, 1H), 3.93 - 3.86 (m, 1H), 3.82 - 3.75 (m, 1H), 3.71 (s, 2H), 1.33 - 1.25 (m, 2H), 1.24 - 1.15 (m, 2H).
실시예 18
4-[[2-[2-클로로-6-플루오로-3-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00172
N-클로로석신이미드 (59 mg, 0.44 mmol)를 DMF (2 mL) 중의 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (실시예 2) (100 mg, 0.22 mmol)의 혼합물에 첨가하고 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반했다. 추가의 N-클로로석신이미드 (59 mg, 0.44 mmol)를 첨가하고 교반을 24 시간 동안 계속했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (10 mL) 및 1:1 염수:물 (10 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 유기 부분을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 미정제 생성물을 황색 오일로 수득했다. 10-100% MeCN/물 (+0.1% 포름산)로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 오일의 정제는 표제 화합물을 회백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.16 분; MS m/z 490.3 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.93 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.88 (s, 2H), 1.52 (s, 6H), 1.32 - 1.26 (m, 2H), 1.21 - 1.15 (m, 2H).
실시예 19
4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00173
단계 1: 4-[[2-[5-벤질옥시-2-클로로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00174
1,4-디옥산 (1 mL) 중의 2-[5-벤질옥시-2-클로로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세트산 (중간체 BE)(150 mg, 0.45 mmol), 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A)(100 mg, 0.41 mmol) 및 DIPEA (178 μL, 1.02 mmol)의 용액에 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (364 μL, 0.61 mmol)을 첨가하고 혼합물을 주위 온도에서 2 시간 동안 교반한 다음 주말 동안 방치했다. 생성된 혼합물을 DCM (5 mL)과 물 (5 mL) 사이에 분배하고 유기물을 소수성 PTFE 프릿 튜브를 통한 여과를 통해 분리했다. 여과액을 진공에서 농축하고 헵탄 중의 0-100% EtOAc에 이어서 EtOAc 중의 0-100% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 잔류물의 정제는 표제 화합물을 옅은 황색 분말 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.05 분; MS m/z 562.2, 564.2 = [M+H]+ (91% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 10.83 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.43 - 7.37 (m, 2H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 5.15 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 3.86 (s, 2H), 1.47 (s, 6H), 1.33 - 1.28 (m, 2H), 1.22 - 1.17 (m, 2H).
단계 2: 4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
4-[[2-[5-벤질옥시-2-클로로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (196 mg, 0.35 mmol) (단계 1) 및 10% Pd/C (20 mg, 0.35 mmol)에 질소 분위기하에 탈기된 EtOH (3.5 mL)를 첨가하고 혼합물을 질소로 퍼지한 다음 수소 분위기하에 60 분 동안 두었다. 추가 10% Pd/C (20 mg, 0.35 mmol)를 첨가한 다음 반응을 다시 질소로 퍼지하고 수소 분위기하에 추가 65 분 동안 두었다. 생성된 혼합물을 MeOH (~10 mL)로 희석하고 Celite®를 통해 여과하고, 추가의 MeOH로 세척했다. 여과액을 진공에서 농축하고 잔류물을 헵탄 중의 0-100% EtOAc 및 EtOAc 중의 0-100% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 이어서 0.1% 포름산이 있는 물/MeCN을 사용하는 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의해 정제했다. 조합된 생성물 분획을 진공에서 농축하여 유기 용매의 벌크를 제거하고 수성 잔류물을 포화 수성 NaHCO3 (10 mL)로 처리했다. 혼합물을 EtOAc (2 x 15 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 백색 결정질 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.11 분; MS m/z 472.2, 474.2 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
UPLC (MSQ1, 7MIN_HIRES_UPLC) 100%; Rt 3.11 분; MS m/z 472.2, 474.2 = [M+H]+
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 3.76 (s, 2H), 1.49 (s, 6H), 1.33 - 1.28 (m, 2H), 1.22 - 1.17 (m, 2H).
실시예 20
4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00175
단계 1: 메틸 2-[2-벤질옥시-5-플루오로-4-[2-옥소-2-[[2-[[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 카르바모일]-4-피리딜]아미노]에틸]페닐]프로파노에이트
탈기된 DMF (2 mL) 중의 [(E)-1-메톡시프로프-1-엔옥시]-트리메틸-실란 (130 μL, 0.71 mmol)의 용액을 4-[[2-(5-벤질옥시-4-브로모-2-플루오로-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 피리딘-2-카르복스아미드 (실시예 13, 단계 1 (200 mg, 0.35 mmol), ZnF2 (37 mg, 0.35 mmol) 및 Pd(PtBu3)2 (18 mg, 0.04 mmol)의 혼합물에 질소하에 첨가하고 생성된 혼합물을 80 ℃로 16 시간 동안 가열했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (20 mL)로 희석하고 물 (2 x 20 mL), 염수 (2 x 20 mL)로 세척하고, Na2SO4 로 건조시키고 진공에서 농축했다. 생성된 미정제 물질을 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.09 분; MS m/z 574.2 = [M+H]+ (83% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.43 - 7.35 (m, 4H), 7.33 - 7.29 (m, 1H), 7.14 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 5.10 - 5.04 (m, 2H), 3.98 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 3.77 (s, 2H), 3.51 (s, 3H), 1.37 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.32 - 1.28 (m, 2H), 1.21-1.17 (m, 2H).
단계 2: 4-[[2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(2-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00176
불활성 분위기하에 냉각된 (-78 ℃) THF (10 mL) 중의 메틸 2-[2-벤질옥시-5-플루오로-4-[2-옥소-2-[[2-[[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]카르바모일]-4-피리딜]아미노]에틸]페닐]프로파노에이트 (단계 1) (83%, 100 mg, 0.14 mmol)의 용액을 THF 중의 2.4M LiAlH4의 용액 (121 μL, 0.29 mmol)으로 처리하고 혼합물을 -78 ℃에서 1.5 시간 동안 교반한 다음 0 ℃로 가온했다. 반응을 물로 퀀칭하고 실온으로 가온했다. 생성된 혼합물을 물 (25 mL) 및 EtOAc (25 mL)로 희석했다. 층을 분리하고 유기 부분을 포화 로셸 염 용액 (10 mL), 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 10-100% MeCN/물 (+0.1% 포름산)로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의해 정제했다. 생성물 분획을 진공에서 농축하여 무색 오일을 수득했다. 오일을 MeOH와 공비시키고 고진공하에 농축하여 표제 화합물을 밝은 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.00 분; MS m/z 546.2 = [M+H]+ (90% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.47 - 7.41 (m, 2H), 7.40 - 7.35 (m, 2H), 7.35 - 7.28 (m, 1H), 7.08 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.66 - 4.61 (m, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.58 - 3.52 (m, 1H), 3.30 - 3.22 (부분적으로 모호한 m, 2H), 1.32 - 1.26 (m, 2H), 1.22 - 1.17 (m, 2H), 1.14 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
단계 3: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
표제 화합물을 4-[[2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(2-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (단계 2) 및 10% Pd-C로부터 실시예 2 단계 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.70 분; MS m/z 456.3 = [M+H]+ (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.66-4.61 (m, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.57-3.51 (m, 1H), 3.17-3.08 (m, 1H), 1.32-1.28 (m, 2H), 1.21-1.16 (m, 2H), 1.13 (d, J = 7.0 Hz, 3H). ~3.3-3.4의 신호는 물 피크 아래에 숨겨졌지만 HSQC (아래)에서 관찰되었다.
실시예 20a 및 20b
초임계 유체 크로마토그래피 [15 mL/분으로 Chiralpak AD-H 10 x 250 mm 컬럼을 사용하는 15% IPA : 85% CO2]를 사용하는 라세미 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (실시예 20)의 카이랄 분리는 개별 거울상이성질체를 제공했다:
실시예 20a: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 또는 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00177
첫 번째 용리 피크: SFC 체류 시간 = 17.13 분
LC-MS (방법 A): Rt 2.69 분; MS m/z 456.3 = [M+H]+ (91% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 9.21 (br. s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.65 (br. s, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.53 (dd, J = 10.2, 5.6 Hz, 1H), 3.40-3.30 (모호한 m, 1H), 3.14 - 3.10 (m, 1H), 1.32 - 1.28 (m, 2H), 1.21 - 1.17 (m, 2H), 1.13 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
실시예 20b: 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 또는 4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00178
두 번째 용리 피크: SFC 체류 시간 = 20.28 분
LC-MS (방법 A): Rt 2.69 분; MS m/z 456.3 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 9.25 (br. s, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.65 (br. s, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.53 (dd, J = 10.2, 5.6 Hz, 1H), 3.40-3.30 (모호한 m, 1H), 3.15 - 3.10 (m, 1H), 1.31 - 1.28 (m, 2H), 1.20 - 1.17 (m, 2H), 1.13 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
중간체의 제조
중간체 A
4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00179
DMF (36.2 mL) 중의 4-아미노피리딘-2-카르복실산 (1 g, 7.24 mmol)을 TEA (3.68 mL, 26.43 mmol), 1-(트리플루오로메틸)사이클로프로판아민 하이드로클로라이드 (1.29 g, 7.96 mmol)에 이어서 TBTU (3.14 g, 9.77 mmol)로 처리하고 실온에서 4 일 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 여과하고 고체를 DMF (2 x 30 mL)로 세척했다. 여과액을 진공에서 농축하고 미정제 잔류물을 EtOAc (300 mL)에 용해시키고 포화 NaHCO3 용액 (2 x 300 mL)으로 세척했다. 수성 부분을 EtOAc (30 mL)로 재추출하고 조합된 유기 추출물을 염수 (2 x 160 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 물 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 컬럼 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 회백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 F): Rt 1.32 분; MS m/z 246.1 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 9.13 (s, 1H), 8.02 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.61 (dd, J = 5.6, 2.4 Hz, 1H), 6.36 (s, 2H), 1.32 - 1.22 (m, 2H), 1.21 - 1.11 (m, 2H).
중간체 AB
4-아미노-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00180
표제 화합물을 4-아미노피리딘-2-카르복실산 및 2-아미노-2-메틸-프로판니트릴 하이드로클로라이드로부터 중간체 A와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 0.35 분; MS m/z 205.0 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.60 (s, 1H), 8.03 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.62 (dd, J = 5.6, 2.4 Hz, 1H), 6.40 (s, 2H), 1.70 (s, 6H).
중간체 AC
4-아미노-N-[1-(디플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00181
표제 화합물을 4-아미노피리딘-2-카르복실산 및 1-(디플루오로메틸)사이클로프로판아민 하이드로클로라이드로부터 중간체 A와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 I): Rt 0.39 분; MS m/z 228.0 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.85 (s, 1H), 8.00 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 5.6, 2.4 Hz, 1H), 6.36 (s, 2H), 6.05 (t, J = 57.2 Hz, 1H), 1.09 - 1.03 (m, 2H), 1.03 - 0.97 (m, 2H).
중간체 AD
4-아미노-N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00182
표제 화합물을 4-아미노피리딘-2-카르복실산 및 2-메틸부트-3-인-2-아민으로부터 중간체 A와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 I): Rt 0.42 분; MS m/z 203.9 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.23 (s, 1H), 7.99 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.58 (dd, J = 5.6, 2.4 Hz, 1H), 6.36 (s, 2H), 3.19 (s, 1H), 1.62 (s, 6H).
중간체 AE
4-아미노-N-(3,3-디플루오로-1-메틸-사이클로부틸)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00183
표제 화합물을 3,3-디플루오로-1-메틸-사이클로부탄아민 하이드로클로라이드 및 4-아미노피리딘-2-카르복실산으로부터 중간체 A와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.63 분; MS m/z 242.2 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.79 (s, 1H), 8.01 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.59 (dd, J = 5.6, 2.4 Hz, 1H), 6.32 (br. s, 2H), 3.11 - 2.96 (m, 2H), 2.72 - 2.59 (m, 2H), 1.50 (s, 3H).
중간체 AF
4-아미노-N-(4-메틸테트라하이드로피란-4-일)피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00184
표제 화합물을 4-메틸테트라하이드로피란-4-아민 하이드로클로라이드 및 4-아미노피리딘-2-카르복실산으로부터 중간체 A와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 I): Rt 0.36 분; MS m/z 236.0 = [M+H]+ (93% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.08 (s, 1H), 8.00 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.58 (dd, J = 5.6, 2.4 Hz, 1H), 6.34 (s, 2H), 3.67 - 3.60 (m, 2H), 3.51 - 3.45 (m, 2H), 2.18 - 2.12 (m, 2H), 1.63 - 1.56 (m, 2H), 1.39 (s, 3H).
중간체 B
2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세트산
Figure pct00185
단계 1: (3-브로모-4-플루오로-페닐) 아세테이트
Figure pct00186
Figure pct00187
냉각된 (0 ℃) DCM (100 mL) 중의 3-브로모-4-플루오로-페놀 (5 g, 26.18 mmol) 및 TEA (6.86 mL, 49.22 mmol)의 용액을 아세틸 클로라이드 (2.61 mL, 36.65 mmol)로 한 방울씩 처리하고 혼합물을 실온에서 45 분 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 DCM (100 mL)으로 희석하고 0.5M HCl (120 mL), 물 (120 mL), 포화 NaHCO3 (120 mL) 및 염수 (120 mL)로 순차적으로 세척했다. 유기 부분을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 황갈색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.14 분 (85% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.59 (dd, J = 6.0, 2.8 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 7.26 - 7.17 (m, 1H), 2.26 (s, 3H).
단계 2: 1-(4-브로모-5-플루오로-2-하이드록시-페닐)에탄온
Figure pct00188
(3-브로모-4-플루오로-페닐) 아세테이트 (단계 1) (90%, 6.3 g, 24.33 mmol) 및 알루미늄 트리클로라이드 (5.84 g, 43.8 mmol)의 혼합물을 165 ℃에서 3 시간 동안 교반했다. 용융물을 실온으로 냉각하고 생성된 고체를 DCM (100 mL)에 현탁시켰다. 2N HCl (100 mL)을 첨가하고 불용성 물질을 Celite® (필터 물질)을 통해 여과에 의해 제거했다. 층을 분리하고 수성 부분을 DCM (60 mL)으로 재추출했다. 조합된 유기 추출물을 물 (140 mL), 염수 (140 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 헵탄 중의 0-30% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.17 분 (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.62 (s, 1H), 7.79 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 2.61 (s, 3H).
단계 3: 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)에탄온
Figure pct00189
벤질 브로마이드 (3.23 mL, 27.19 mmol)를 교반되는 DMF (25 mL) 중의 1-(4-브로모-5-플루오로-2-하이드록시-페닐)에탄온 (단계 2) (96%, 5.5 g, 22.66 mmol) 및 K2CO3 (7.83 g, 56.65 mmol)의 혼합물에 첨가하고 혼합물을 80 ℃에서 1 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 실온으로 냉각하고 EtOAc (150 mL)와 물 (150 mL) 사이에 분배했다. 수성층을 EtOAc (100 mL)로 추가로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 물 (2 x 150 mL), 염수 (150 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 헵탄 중의 0-60% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.35 분 (87% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.65 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.55 - 7.46 (m, 3H), 7.44 - 7.40 (m, 2H), 7.39 - 7.35 (m, 1H), 5.26 (s, 2H), 2.49 (s, 3H).
단계 4: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)프로판-2-올
Figure pct00190
-78 ℃의 THF (1 mL) 중의 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)에탄온 (단계 3) (90%, 100 mg, 0.28 mmol)의 교반되는 용액에 브로모(메틸)마그네슘 (Et2O 중의 3M) (121 μL, 0.36 mmol)을 첨가했다. 드라이 아이스조를 제거하고 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 포화 수성 NH4Cl (10 mL) 및 EtOAc (10 mL)로 희석했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.31 분; MS m/z 320.9, 322.9 [M+H-H2O]+ (95% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.57 - 7.27 (m, 7H), 5.23 (s, 1H), 5.14 (s, 2H), 1.45 (s, 6H).
단계 5: 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세트산
톨루엔 (2 mL) 중의 포타슘 3-에톡시-3-옥소-프로파노에이트 (75 mg, 0.44 mmol) 및 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)프로판-2-올 (단계 4) (100 mg, 0.29 mmol)의 교반되는 용액에 DMAP (3.6 mg, 0.03 mmol)를 첨가했다. 생성된 혼합물을 5 분 동안 탈기시켰다. 디알릴디팔라듐 디클로라이드 (2.2 mg, 0.01 mmol) 및 BINAP (11.0 mg, 0.02 mmol)를 첨가하고 밀봉된 반응 혼합물을 140 ℃에서 3.5 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물 THF (3 mL)에 용해시켰다. 불용성 물질을 여과에 의해 제거하고 여과액을 MeOH (0.5 mL)로 희석하고 2M 수성 LiOH 용액 (0.44 mL, 0.88 mmol)으로 처리했다. 생성된 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반했다. 혼합물을 2M NaOH (10 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출했다. 유기 추출물을 버리고 수성 부분을 2M 수성 HCl을 사용하여 pH 3으로 산성화했다. 혼합물을 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.10 분; MS m/z 301.0 [M+H-H2O]+ (93% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.40 (s, 1H), 7.49 - 7.45 (m, 2H), 7.45 - 7.40 (m, 2H), 7.37 - 7.33 (m, 1H), 7.31 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.08 (s, 1H), 5.06 (s, 2H), 3.57 (s, 2H), 1.46 (s, 6H).
중간체 BA
2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐] 아세트산
Figure pct00191
단계 1: [1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2,2,2-트리플루오로-1-메틸-에톡시]-트리메틸-실란
Figure pct00192
-50 ℃의 THF (1 mL) 중의 트리메틸(트리플루오로메틸)실란 (257 μL, 1.74 mmol)의 교반되는 용액에 THF (1 mL) 중의 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)에탄온 (중간체 B 단계 3) (90%, 500 mg, 1.39 mmol)의 용액에 이어서 TBAF (2.5 mg, 0.01 mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 -50 ℃에서 30 분 동안 교반한 다음 실온으로 1 시간 동안 가온했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (10 mL) 및 물 (10 mL)로 희석했다. 유기층을 분리하고, 물 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 H): Rt 2.03 분; (85% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.38 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 7.31 - 7.11 (m, 5H), 6.99 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 4.88 (s, 2H), 1.79 (s, 3H), 0.05 (s, 9H).
단계 2: 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세트산
표제 화합물을 [1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2,2,2-트리플루오로-1-메틸-에톡시]-트리메틸-실란 (단계 1) 및 포타슘 3-에톡시-3-옥소-프로파노에이트로부터 중간체 B 단계 5와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.18 분; MS m/z 743.2 [2M-H]- (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.60 (s (br), 1H), 7.47 - 7.39 (m, 5H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.19 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.10 - 5.03 (m, 2H), 3.61 (s, 2H), 1.78 (s, 3H).
중간체 BB
2-[5-벤질옥시-4-(1-사이클로프로필-1-하이드록시-에틸)-2-플루오로-페닐]아세트산
Figure pct00193
표제 화합물을 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)에탄온 (중간체 B 단계 3) 및 브로모(사이클로프로필)마그네슘 용액 (Me-THF 중의 1M)으로부터 중간체 B 단계 4 및 5와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.23 분; MS m/z 345.1 [M+H]+ (86% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.47 (s (br), 1H), 7.49 - 7.45 (m, 2H), 7.43 - 7.39 (m, 2H), 7.36 - 7.32 (m, 1H), 7.23 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.64 (s, 1H), 3.56 (s, 2H), 1.64-1.58 (m, 1H), 1.54 (s, 3H), 0.50 - 0.42 (m, 1H), 0.24 - 0.16 (m, 2H), 0.06 -0.00 (m, 1H).
중간체 BC
2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(1-하이드록시-1-메틸-프로필)페닐]아세트산
Figure pct00194
표제 화합물을 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)에탄온 (중간체 B 단계 3) 및 브로모(에틸)마그네슘 용액 (THF 중의 1M)으로부터 중간체 B 단계 4 및 5와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.17 분; MS m/z 315.1 [M+H-H2O]+ (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.43 (br. s, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 4H), 7.37 - 7.32 (m, 1H), 7.28 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.85 (s, 1H), 3.59 - 3.54 (m, 2H), 2.02 (dq, J = 14.8, 7.4 Hz, 1H), 1.65 (dq, J = 14.5, 7.3 Hz, 1H), 1.44 (s, 3H), 0.61 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
중간체 BD
2-[5-벤질옥시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-2-메틸-페닐]아세트산
Figure pct00195
단계 1: 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-메틸-페닐)에탄온
Figure pct00196
표제 화합물을 1-(4-브로모-2-하이드록시-5-메틸-페닐)에탄온 및 브로모메틸벤젠으로부터 중간체 B 단계 3과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.18 분; MS m/z 319.0, 321.0 = [M+H]+ (98% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.56 - 7.46 (m, 4H), 7.45 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.33 (m, 1H), 5.24 (s, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.30 (s, 3H).
단계 2: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-메틸-페닐)프로판-2-올
Figure pct00197
냉각된 (0 ℃) THF (100 mL) 중의 세륨 트리클로라이드 (2.27 g, 9.21 mmol)의 현탁액을 에테르 중의 3M 메틸 마그네슘 브로마이드 (3.07 mL, 9.21 mmol)를 처리하고 1 시간 동안 교반했다. 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-메틸-페닐)에탄온 (단계 1(98%, 2 g, 6.14 mmol)을 한번에 첨가하고 반응 혼합물을 0 ℃에서 90 분 동안 교반했다. 반응을 물 (150 mL)에 이어서 EtOAc (100 mL)의 첨가로 퀀칭했다. 유기물을 분리하고, 물 (100 mL), 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 무색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.16 분; MS m/z 317.1, 319.1 = [M-H2O+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.54 (s, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 4H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 5.12 (s, 2H), 5.02 (s, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.45 (s, 6H).
단계 3: 2-[5-벤질옥시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-2-메틸-페닐]아세트산
표제 화합물을 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-메틸-페닐)프로판-2-올 (단계 2) 및 포타슘 3-에톡시-3-옥소-프로파노에이트로부터 중간체 B 단계 5와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.87 분; MS m/z 297.2 = [M-H2O+H]+ (95% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.32 (br. s, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.44 - 7.38 (m, 2H), 7.38 - 7.31 (m, 2H), 6.92 (s, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.86 (s, 1H), 3.52 (s, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.46 (s, 6H).
중간체 BE
2-[5-벤질옥시-2-클로로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세트산
Figure pct00198
단계 1: (3-브로모-4-클로로-페닐) 아세테이트
Figure pct00199
냉각된 (빙조) DCM (75 mL) 중의 3-브로모-4-클로로-페놀 (5.0 g, 24.1 mmol) 및 TEA (6.31 mL, 36.15 mmol)의 용액을 DCM (25 mL) 중의 아세틸 클로라이드 (2.4 mL, 33.74 mmol)로 한 방울씩 처리하고 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 0.5M HCl (100 mL), 1:1 포화 NaHCO3/물 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축하여 표제 화합물을 갈색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.22 분; 이온화 없음 (90% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.68 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.23 (dd, J = 8.7, 2.7 Hz, 1H), 2.27 (s, 3H).
단계 2: 1-(4-브로모-5-클로로-2-하이드록시-페닐)에탄온
Figure pct00200
질소하에 (3-브로모-4-클로로-페닐) 아세테이트 (단계 1) (6.35 g, 25.47 mmol) 및 알루미늄 트리클로라이드 (6.11 g, 45.84 mmol)의 혼합물을 165 ℃로 3 시간 동안 가열했다. 생성된 용융물을 130 ℃로 냉각하고, 톨루엔 (50 mL)을 첨가하고 혼합물을 환류 가열하여 고체를 1 시간 동안 용해시켰다. 생성된 혼합물을 실온으로 냉각한 다음 EtOAc (10 mL) 및 0.5M HCl (40 mL)을 첨가하고 혼합물을 이차 교반기로 교반했다. 유기물을 분리하고 수성 부분을 EtOAc (20 mL)로 재추출했다. 조합된 유기 추출물을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류물을 헵탄 (25 mL)으로 처리하고 생성된 현탁액을 여과하고, 추가의 헵탄으로 세척하고 흡인하에 건조시켜 표제 화합물을 황갈색 결정질 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.26 분; 이온화 없음 (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.76 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 2.62 (s, 3H).
단계 3: 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-클로로-페닐)에탄온
Figure pct00201
1-(4-브로모-5-클로로-2-하이드록시-페닐)에탄온 (단계 2) (96%, 3.56 g, 13.69 mmol) 및 1-(4-브로모-5-클로로-2-하이드록시-페닐)에탄온 (78%, 2.35 g, 7.33 mmol)을 DMF (30 mL)에 용해시키고 K2CO3 (11.62 g, 84.1 mmol) 및 벤질 브로마이드 (4.5 mL, 37.85 mmol)로 처리했다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 Celite®를 통해 여과하고, MeOH로 세척하고 여과액을 진공에서 농축했다. 잔류물을 4:1 EtOAc/헵탄 (150 mL)과 물 (100 mL) 사이에 분배했다. 유기 부분을 분리하고, 물 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류물을 헵탄 중의 0 내지 30% EtOAc의 구배로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제했다. 생성물 분획을 진공에서 농축했고 1:1 TBME/헵탄 (20 mL)로부터의 잔류물의 재결정화가 표제 화합물을 갈색 결정질 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.19 분; (76% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.83 (s, 1H), 7.44-7.40 (m, 5H), 7.32 (s, 1H), 5.14 (s, 2H), 2.55 (s, 3H).
단계 4: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-클로로-페닐)프로판-2-올
Figure pct00202
냉각된 (-78℃) THF (25 mL) 중의 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-클로로-페닐)에탄온 (단계 3)(1.29 g, 3.8 mmol)의 용액을 메틸 마그네슘 브로마이드 (Et2O 중의 3M) (1.65 mL, 4.94 mmol)로 처리하고 실온으로 가온하고, 1.5 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 0 ℃로 냉각하고 10% 수성 NH4Cl (10 mL) 및 EtOAc (10 mL)로 처리했다. 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0 내지 50% EtOAc의 구배로 용리하는 염기성 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 밝은 황갈색 오일로 제공했고 이는 방치 시 결정화되었다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.17 분; MS m/z 337.0, 339.0 = [M+H-H2O]+ (68% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.47 (s, 1H), 7.45 - 7.36 (m, 5H), 7.21 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 3.45 (s, 1H), 1.58 (s, 6H).
단계 5: 2-[5-벤질옥시-2-클로로-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세트산
2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-클로로-페닐)프로판-2-올 (단계 4) (1.04 g, 2.91 mmol), 포타슘 3-에톡시-3-옥소-프로파노에이트 (991 mg, 5.82 mmol), 디알릴디팔라듐 디클로라이드 (106 mg, 0.29 mmol), BINAP (362 mg, 0.58 mmol) 및 DMAP (36 mg, 0.29 mmol)를 톨루엔 (9.7mL)에 현탁시키고 밀봉된 튜브에서 140℃로 18 시간 동안 가열했다. 반응 용매를 진공에서 농축하고 생성된 잔류물을 MeOH (20 mL) 및 2M 수성 LiOH (4.37 mL, 8.73 mmol)로 처리한 다음 실온에서 3 시간 동안 교반했다. 추가 2M 수성 LiOH (4.37 mL, 8.73 mmol) 및 MeOH (10 mL)를 첨가하고 교반을 추가 2 시간 동안 계속했다. 혼합물을 진공에서 농축하여 유기물의 벌크를 제거하고 수성 잔류물을 물 (20 mL) 및 DCM (30 mL)으로 희석했다. 수성 부분을 분리하고, DCM으로 세척하고 2M KHSO4 (25 mL)로 산성화했다. 혼합물을 DCM (2 x 30 mL)으로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 헵탄 중의 0 내지 100% EtOAc에 이어서 EtOAc 중의 0 내지 100% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제했다. 생성물 분획을 진공에서 농축하고 잔류물을 1:1 DMSO/MeOH (1.2 mL)에 용해시켰다. 분취용 HPLC (산성 pH, 조기 용리 방법)에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 백색 결정질 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.12 분; MS m/z 316.9, 318.9 = [M+H-H2O]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.57 (s, 1H), 7.50 - 7.45 (m, 2H), 7.45 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.33 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 5.11 (s, 1H), 5.09 (s, 2H), 3.65 (s, 2H), 1.45 (s, 6H).
중간체 C
2-[5-벤질옥시-4-(1-시아노-1-메틸-에틸)-2-플루오로-페닐]아세트산
Figure pct00203
단계 1: 메틸 4-브로모-5-플루오로-2-트리이소프로필실릴옥시-벤조에이트
Figure pct00204
교반되는 DCM (20 mL) 중의 메틸 4-브로모-5-플루오로-2-하이드록시-벤조에이트 (3 g, 12.05 mmol), TEA (3.69 mL, 26.5 mmol) 및 DMAP (147 mg, 1.2 mmol)의 혼합물을 질소하에 트리이소프로필실릴 클로라이드 (3.09 mL, 14.46 mmol)로 한 방울씩 처리하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 물 (20 mL)로 희석하고 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 H): Rt 2.09 분; MS m/z 405.1, 407.1 = [M+H]+ (97% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.61 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.81 - 3.74 (m, 3H), 1.29 (hept, J = 7.3 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 7.6 Hz, 18H).
단계 2: (4-브로모-5-플루오로-2-트리이소프로필실릴옥시-페닐)메탄올
Figure pct00205
교반되는 THF (100 mL) 중의 메틸 4-브로모-5-플루오로-2-트리이소프로필실릴옥시-벤조에이트 (단계 1) (76%, 5.4 g, 10.12 mmol)의 용액을 THF 중의 4M LiBH4 (7.59 mL, 30.37 mmol)로 처리하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다.
혼합물을 냉각하고 (0 ℃) 반응을 얼음 (20 mL)으로 조심스럽게 퀀칭하고 30 분 동안 교반한 다음 실온으로 가온했다. EtOAc (20 mL)를 첨가하고 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피 (Biotage® Isolera 55g KP-NH)에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 황색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 H): Rt 1.60 분; MS m/z 400.1 = [M+Na]+ (90% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.28 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 5.32 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.48 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 1.28 (dq, J = 14.5, 7.5 Hz, 3H), 1.09 - 1.03 (m, 18H).
단계 3: [5-브로모-2-(클로로메틸)-4-플루오로-페녹시]-트리이소프로필-실란
Figure pct00206
냉각된 (0 ℃), 교반되는 DCM (80 mL) 중의 (4-브로모-5-플루오로-2-트리이소프로필실릴옥시-페닐)메탄올 (4.8 g, 12.72 mmol) 및 DMF (941 μL, 12.14 mmol)의 용액을 DCM (40 mL) 중의 티오닐 클로라이드 (2.24 mL, 30.88 mmol)로 한 방울씩 처리하고 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다.
용매를 진공에서 제거하고 잔류물을 EtOAc (100 mL)로 희석했다. 혼합물을 포화 NaHCO3 (100 mL), 염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 황색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 H): Rt 2.12 분 (87% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.51 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 4.66 (s, 2H), 1.35 (hept, J = 7.4 Hz, 3H), 1.08 (d, J = 7.5 Hz, 18H).
단계 4: 2-(4-브로모-5-플루오로-2-하이드록시-페닐)아세토니트릴
Figure pct00207
소듐 시아나이드 (576 mg, 11.75 mmol)를 DMF (20 mL) 중의 [5-브로모-2-(클로로메틸)-4-플루오로-페녹시]-트리이소프로필-실란 (단계 3) (3.1 g, 7.83 mmol)의 용액에 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (20 mL)로 희석하고, 포화 소듐 카르보네이트 (30 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 황색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.04 분; MS m/z 227.8, 229.8 = [M-H]- (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.43 (s, 1H), 7.30 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 3.78 (s, 2H).
단계 5: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)아세토니트릴
Figure pct00208
벤질 브로마이드 (614 μL, 5.16 mmol)를 교반되는 DMF (10 mL) 중의 2-(4-브로모-5-플루오로-2-하이드록시-페닐)아세토니트릴 (단계 4) (990 mg, 4.3 mmol) 및 K2CO3 (1.49 g, 10.76 mmol)의 혼합물에 첨가하고 혼합물을 80 ℃에서 1 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 실온으로 냉각하고 EtOAc (20 mL)와 물 (50 mL) 사이에 분배했다. 층을 분리하고 수성 부분을 EtOAc (10 mL)로 추가로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 황색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.30 분 (68% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.56 - 7.45 (m, 3H), 7.46 - 7.37 (m, 3H), 7.40 - 7.32 (m, 1H), 5.22 (s, 2H), 3.90 (s, 2H).
단계 6: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로판니트릴
Figure pct00209
질소하에 냉각된 (0 ℃) DMF (10 mL) 중의 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)아세토니트릴 (0.51 g, 1.59 mmol)의 용액에 메틸 아이오다이드 (100%, 0.2 mL, 3.19 mmol)에 이어서 NaH, (미네랄 오일 중의 60% 분산, 127 mg, 3.19 mmol)를 첨가했다. 혼합물을 실온으로 가온하고 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 얼음 (20 mL)에 조심스럽게 붓고, EtOAc (20 mL)를 첨가하고 혼합물을 20 분 동안 교반했다. 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류 DMF를 밤새 40 ℃의 고진공 오븐에서 건조에 의해 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.37 분; MS m/z 347.9, 350.0 = [M+H]+ (66% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.56 (m, 2H), 7.53 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.45 - 7.38 (m, 2H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 5.27 (s, 2H), 1.69 (s, 6H).
단계 7: 2-[5-벤질옥시-4-(1-시아노-1-메틸-에틸)-2-플루오로-페닐]아세트산
표제 화합물을 포타슘 3-에톡시-3-옥소-프로파노에이트 및 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로판니트릴 (단계 6)로부터 중간체 B 단계 5와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.20 분; MS m/z 328.0 = [M+H]+ (48% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.50 (s, 1H), 7.61 - 7.54 (m, 2H), 7.45 - 7.37 (m, 2H), 7.39 - 7.31 (m, 1H), 7.24 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.19 (s, 2H), 3.62 (s, 2H), 1.69 (s, 6H).
중간체 CA
2-[4-[1-(아세톡시메틸)사이클로부틸]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세트산
Figure pct00210
단계 1: 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로부탄카르보니트릴
Figure pct00211
냉각된 (0 ℃) DMF (15 mL) 중의 NaH (미네랄 오일 중의 60% 분산, 394 mg, 9.84 mmol)의 현탁액에 DMF (5 mL) 중의 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)아세토니트릴 (중간체 C 단계 5)(1.5 g, 4.69 mmol)의 용액을 첨가했다. 혼합물을 15 분 동안 교반한 다음 10 분에 걸쳐 DMF (5 mL) 중의 1,3-디브로모프로판 (523 μL, 5.15 mmol)의 용액으로 한 방울씩 처리했다. 혼합물을 실온으로 가온하고 2 시간 동안 교반하고 반응을 포화 수성 NH4Cl 용액 (100 mL)으로 퀀칭하고 DCM (100 mL)으로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-50% TBME로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 무색 결정질 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.18 분; MS m/z 360.1, 362.0 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.53 - 7.46 (m, 3H), 7.45 - 7.39 (m, 2H), 7.39 - 7.32 (m, 2H), 5.21 (s, 2H), 2.67 - 2.53 (m, 4H), 2.29 - 2.17 (m, 1H), 1.92-1.83 (m, 1H).
단계 2: 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로부탄카브알데하이드
Figure pct00212
냉각된 (-78 ℃) THF (7.5 mL) 중의 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로부탄 카르보니트릴 (단계 1) (99%, 556 mg, 1.53 mmol)의 용액에 톨루엔 중의 1.2M DIBAL (1.91 mL, 2.29 mmol)을 첨가하고 혼합물을 0 ℃로 가온하고 0 ℃에서 밤새 유지했다. 생성된 혼합물을 -78 ℃로 냉각하고 추가의 톨루엔 중의 0.5 당량의 1.2M DIBAL로 처리하고 -40 ℃로 가온했다. 반응을 -30 ℃에서 1M HCl (2 mL)의 첨가에 의해 퀀칭한 다음 실온으로 가온하고 30 분 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (30 mL)로 희석하고 포화 NaHCO3 (30 mL) 용액 및 염수 (30 mL)로 세척했다. 유기물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 잔류물을 헵탄 중의 0-50% TBME로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 무색 오일로 수득했고, 이는 실온에서 방치 시 결정화되었다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.23 분; (97% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.61 (s, 1H), 7.42 - 7.30 (m, 6H), 7.26 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H), 2.40 - 2.32 (m, 2H), 2.00 - 1.90 (m, 1H), 1.86 - 1.78 (m, 1H), 2.56 - 2.45 (obscured m, 2H)
단계 3: [1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로부틸]메탄올
Figure pct00213
냉각된 (0 ℃) MeOH (2.5 mL) 중의 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로부탄 카브알데하이드 (단계 2) (97%, 200 mg, 0.53 mmol)용액에 NaBH4 (21 mg, 0.56 mmol)를 첨가하고 혼합물을 30 분 동안 교반했다. 반응을 포화 NaHCO3 용액 (20 mL)의 첨가에 의해 퀀칭하고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 농축하여 표제 화합물을 무색 오일로 수득했고 이는 실온에서 방치 시 결정화되었다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.17 분; MS m/z 363.1, 365.1 = [M-H]- (99% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.45 - 7.38 (m, 4H), 7.36 - 7.32 (m, 1H), 7.29 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.62 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 3.62 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 2.25 - 2.11 (m, 4H), 1.97 - 1.89 (m, 1H), 1.74 - 1.66 (m, 1H).
단계 4: [1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로부틸]메틸 아세테이트
Figure pct00214
DCM (3 mL) 중의 [1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로부틸]메탄올 (단계 3) (99%, 191 mg, 0.52 mmol), TEA (99 μL, 0.57 mmol) 및 DMAP (6.32 mg, 0.05 mmol)의 용액에 아세트산 무수물 (54 μL, 0.57 mmol)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 DCM (20 mL)로 희석하고 1M HCl (15 mL), 염수 (15 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 무색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.55 분; (95% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.45 - 7.38 (m, 4H), 7.36 - 7.31 (m, 2H), 6.98 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.31 (s, 2H), 2.33 - 2.25 (m, 2H), 2.17 - 2.10 (m, 2H), 2.07 - 1.98 (m, 1H), 1.88 (s, 3H), 1.78 - 1.69 (m, 1H).
단계 5: tert-부틸 2-[4-[1-(아세톡시메틸)사이클로부틸]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세테이트
Figure pct00215
THF (1.5 mL) 중의 [1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로부틸]메틸 아세테이트 (단계 4) (170 mg, 0.42 mmol)의 용액에 Pd(dba)2 (12 mg, 0.02 mmol) 및 Q-Phos (15 mg, 0.02 mmol)를 첨가했다. 혼합물을 5 분 동안 탈기한 다음 THF (1.25 mL, 0.63 mmol) 중의 0.5M 브로모-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)징크를 첨가하고 혼합물을 60 ℃에서 2 시간 동안 가열했다. 실온으로 냉각한 후, 생성된 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 희석하고 포화 NaHCO3 (10 mL) 용액, 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-50% TBME로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 잔류물의 정제는 표제 화합물을 옅은 주황색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.57 분; MS m/z 465.2 [M+Na]+ (72% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.45 - 7.38 (m, 4H), 7.35 - 7.31 (m, 1H), 7.00 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 5.02 (s, 2H), 4.31 (s, 2H), 3.56 (s, 2H), 2.34 - 2.26 (m, 2H), 2.17 - 2.11 (m, 2H), 2.05 - 1.97 (m, 1H), 1.88 (s, 3H), 1.77 - 1.70 (m, 1H), 1.40 (s, 9H).
단계 6: 2-[4-[1-(아세톡시메틸)사이클로부틸]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세트산
냉각된 (0 ℃) DCM (1.5 mL) 중의 tert-부틸 2-[4-[1-(아세톡시메틸)사이클로부틸]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세테이트 (단계 5)(90%, 192 mg, 0.39 mmol)의 용액에 TFA (0.5 mL, 6.53 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온으로 가온하고, 추가 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 미정제 생성물을 DCM과 공비시켜 표제 화합물을 주황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.31 분; MS m/z 409.1 [M+Na]+ (94% @ 215 nm)
중간체 CB
2-[4-[4-(아세톡시메틸)테트라하이드로피란-4-일]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세트산
Figure pct00216
단계 1: 4-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)테트라하이드로피란-4-카르보니트릴
Figure pct00217
표제 화합물을 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)아세토니트릴 (중간체 C 단계 5) 및 1-브로모-2-(2-브로모에톡시)에탄으로부터 중간체 C 단계 6과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.11 분; MS m/z 390.1, 392.1 = [M+H]+ (95% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.52 - 7.50 (m, 1H), 7.45 - 7.35 (m, 4H), 7.18 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 5.18 (s, 2H), 4.06 - 3.99 (m, 2H), 3.91 (td, J = 12.2, 1.6 Hz, 2H), 2.36 - 2.27 (m, 2H), 2.09 - 1.99 (m, 2H).
단계 2: [4-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)테트라하이드로피란-4-일]메탄올
Figure pct00218
-78 ℃의 DCM (50 mL) 중의 4-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)테트라하이드로피란-4-카르보니트릴 (단계 1(1.85 g, 4.74 mmol)의 교반되는 용액에 헥산 중의 1M DIBAL (5.21 mL, 5.21 mmol)을 적가하고 혼합물을 -78 ℃에서 1 시간 동안 교반했다. 반응을 MeOH의 적가로 퀀칭하고, 포화 수성 로셸 염 (10 mL), 물 (30 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 유기상을 1M HCl (30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 고체를 DCM (50 mL)에 용해시키고 -78 ℃의 헥산 중의 1M DIBAL (5.21 mL, 5.21 mmol)로 재처리하고 밤새 교반되도록 두었다. 추가의 헥산 중의 1 M DIBAL (3.0 mL, 3.0 mmol)을 -78 ℃에서 첨가하고 40 분 동안 교반했다. MeOH의 적가로 반응을 퀀칭하여 '하이드로겔 유사' 물질의 형성을 유발했다. 혼합물을 추가 DCM (30 mL)으로 희석하고, 물리적으로 부수고, 소결 깔때기를 통해 여과하고 진공에서 농축했다. 필터 케이크를 1 M NaOH (200 mL)에 용해시키고 2 시간 동안 교반했다. 수성층을 TBME (2 x 100 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 회백색 검으로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.02 분; MS m/z 395.1, 397.2 = [M+H]+ (78% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.46 - 7.28 (m, 6H), 7.16 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.49 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 3.71 - 3.58 (m, 4H), 3.43 - 3.35 (m, 2H), 2.23 - 2.14 (m, 2H), 1.84 - 1.75 (m, 2H).
단계 3: [4-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)테트라하이드로피란-4-일]메틸 아세테이트
Figure pct00219
냉각된 (0 ℃) DCM (10 mL) 중의 [4-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)테트라하이드로피란-4-일]메탄올 (단계 2)(574 mg, 1.45 mmol)의 용액에 TEA (507 μL, 2.9 mmol)에 이어서 DMAP (17.73 mg, 0.15 mmol) 및 아세트산 무수물 (274 μL, 2.9 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 DCM (20 mL)으로 희석하고 물 (2 x 15 mL)로 세척했다. 유기 부분을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 물 (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 옅은 황색 검으로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.42 분; (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.47 - 7.38 (m, 5H), 7.39 - 7.31 (m, 1H), 7.25 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 3.65 (ddd, J = 11.5, 5.7, 3.6 Hz, 2H), 3.41 (ddd, J = 11.5, 8.9, 2.5 Hz, 2H), 2.27 - 2.19 (m, 2H), 1.87 - 1.77 (m, 5H).
단계 4: tert-부틸 2-[4-[4-(아세톡시메틸)테트라하이드로피란-4-일]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세테이트
Figure pct00220
표제 화합물을 [4-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)테트라하이드로피란-4-일]메틸 아세테이트 (단계 3) 및 THF 중의 0.5M 브로모-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)징크로부터 중간체 CA 단계 5와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.17 분; MS m/z 495.2 = [M+Na]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.48 - 7.43 (m, 2H), 7.43 - 7.37 (m, 2H), 7.38 - 7.30 (m, 1H), 7.10 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 3.69 - 3.60 (m, 2H), 3.58 (s, 2H), 3.46 - 3.36 (m, 2H), 2.29 - 2.19 (m, 2H), 1.88 - 1.78 (m, 5H), 1.40 (s, 9H).
단계 5: 2-[4-[4-(아세톡시메틸)테트라하이드로피란-4-일]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세트산
표제 화합물을 tert-부틸 2-[4-[4-(아세톡시메틸)테트라하이드로피란-4-일]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세테이트 (단계 4) 및 TFA로부터 중간체 CA 단계 6과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.91 분; MS m/z 439.2 = [M+Na]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.51 (br. s, 1H), 7.48 - 7.43 (m, 2H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.38 - 7.31 (m, 1H), 7.14 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 3.65 (ddd, J = 11.3, 5.5, 3.5 Hz, 2H), 3.59 (s, 2H), 3.46 - 3.38 (m, 2H), 2.27 - 2.19 (m, 2H), 1.87 - 1.79 (m, 5H).
중간체 D
2-[5-벤질옥시-4-(1-시아노사이클로프로필)-2-플루오로-페닐]아세트산
Figure pct00221
단계 1: 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로프로판카르보니트릴
Figure pct00222
고체 포타슘 하이드록사이드 (210 mg, 3.75 mmol)에 60% 수성 포타슘 하이드록사이드 (779 mg, 3.28 mmol)에 이어서 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)아세토니트릴 (중간체 C 단계 5) (500 mg, 1.56 mmol) 및 테트라부틸암모늄 브로마이드 (5 g, 15.62 mmol)를 첨가했다. 생성된 혼합물을 1,2-디브로모에탄 (0.27 mL, 3.12 mmol) (발열이 관찰되었고 온도는 외부 냉각에 의해 50 ℃에서 유지됨)으로 한 방울씩 처리하고 교반을 50 ℃에서 밤새 계속했다. 생성된 혼합물을 물 (15 mL)로 희석하고 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출했다. 유기 추출물을 조합하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 황색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.33 분 (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.55 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.48 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 3H), 7.35 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 5.28 (s, 2H), 1.64 - 1.58 (m, 2H), 1.41 - 1.35 (m, 2H).
단계 2: 2-[5-벤질옥시-4-(1-시아노사이클로프로필)-2-플루오로-페닐]아세트산
용매로서 톨루엔을 메시틸렌으로 치환하여 표제 화합물을 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로프로판카르보니트릴 (단계 1) 및 포타슘 3-에톡시-3-옥소-프로파노에이트로부터 중간체 B 단계 5와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.12 분; MS m/z 326.1 = [M+H]+ (71 % @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.55 (s, 1H), 7.57 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.45 - 7.38 (m, 2H), 7.38 - 7.32 (m, 1H), 7.20 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 3.60 (s, 2H), 1.62 - 1.55 (m, 2H), 1.38 - 1.32 (m, 2H).
중간체 E
2-[5-벤질옥시-4-(1,1-디메틸-2-모르폴리노-에틸)-2-플루오로-페닐]아세트산
Figure pct00223
단계 1: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로판알
Figure pct00224
-78 ℃의 DCM (20 mL) 중의 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로판니트릴 (중간체 C 단계 6) (80% 순도, 1 g, 2.30 mmol)의 용액에 헥산 중의 1M DIBAL (6.03 mL, 6.03 mmol)을 첨가했다. 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 밤새 교반했다. 반응을 1M HCl (50 mL)로 퀀칭하고 30 분 동안 교반했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-30% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.40 분 (99 % @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.46 (s, 1H), 7.46 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.44 - 7.37 (m, 1H), 7.41 - 7.28 (m, 5H), 5.12 (s, 2H), 1.31 (s, 6H).
단계 2: 4-[2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로필]모르폴린
Figure pct00225
THF (10 mL) 중의 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로판알 (단계 1) (520 mg, 1.48 mmol) 및 AcOH (127 μL, 2.22 mmol)의 용액에 모르폴린 (256 μL, 2.96 mmol) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (377 mg, 1.78 mmol)를 첨가하고 생성된 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (10 mL) 및 포화 소듐 비카르보네이트 용액 (20 mL)으로 희석했다. 상을 분리하고 유기 부분을 염수 (20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 무색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 0.99 분; MS m/z 422.1, 424.1 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.52 - 7.46 (m, 2H), 7.43 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.40 - 7.33 (m, 1H), 7.34 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.12 (s, 2H), 3.40 - 3.34 (m, 4H), 2.59 (s, 2H), 2.21 - 2.11 (m, 4H), 1.26 (s, 6H).
단계 3: 2-[5-벤질옥시-4-(1,1-디메틸-2-모르폴리노-에틸)-2-플루오로-페닐]아세트산
용매로서 톨루엔을 메시틸렌으로 치환하여 표제 화합물을 4-[2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로필]모르폴린 (단계 1) 및 포타슘 3-에톡시-3-옥소-프로파노에이트로부터 중간체 B 단계 5와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 0.90 분; MS m/z 402.5 = [M+H]+ (83% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.54 - 7.47 (m, 2H), 7.47 - 7.38 (m, 2H), 7.40 - 7.31 (m, 1H), 7.05 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 5.04 (s, 2H), 3.51 (s, 2H), 3.42 - 3.34 (m, 4H), 2.60 (s, 2H), 2.22 - 2.10 (m, 4H), 1.26 (s, 6H).
중간체 F
2-(2-브로모-4- tert- 부틸-5-메톡시-페닐)아세트산
Figure pct00226
단계 1: (4-tert-부틸-3-메톡시-페닐)메탄올
Figure pct00227
THF 중의 1M 보란 (134.45 mL, 134.45 mmol)을 교반되는 THF (100 mL) 중의 4-tert-부틸-3-메톡시-벤조산 (10 g, 48.02 mmol)의 용액에 첨가하고 혼합물을 50 ℃에서 1 시간 동안 교반했다. 실온으로 냉각한 후, 생성된 혼합물을 MeOH (10 mL)로 조심스럽게 퀀칭하고 휘발성 용매를 진공에서 제거했다. 추가의 MeOH (10 mL)를 첨가하고 혼합물을 진공에서 농축하여 표제 화합물을 옅은 황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.14 분 (97% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.14 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.81 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 1.32 (s, 9H).
단계 2: 1-tert-부틸-4-(클로로메틸)-2-메톡시-벤젠
Figure pct00228
DCM (40 mL) 중의 티오닐 클로라이드 (6.09 mL, 83.88 mmol)를 DCM (80 mL) 중의 (4-tert-부틸-3-메톡시-페닐)메탄올 (단계 1) (97%, 8.4 g, 41.94 mmol) 및 DMF (3.25 mL, 41.94 mmol)의 냉각된 (0 ℃) 용액에 적가하고 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (100 mL)와 포화 NaHCO3 (100 mL) 사이에 분배했다. 상을 분리하고 유기 부분을 염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.38 분 (79% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.20 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.94 (dd, J = 7.9, 1.7 Hz, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 1.32 (s, 9H).
단계 3: 2-(4-tert-부틸-3-메톡시-페닐)아세토니트릴
Figure pct00229
소듐 시아나이드 (1.88 g, 38.33 mmol)를 DMF (100 mL) 중의 1-tert-부틸-4-(클로로메틸)-2-메톡시-벤젠 (단계 2) (79%, 8.6 g, 31.94 mmol)의 용액에 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석하고 포화 수성 소듐 카르보네이트 (300 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 갈색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.25 분 (84% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.21 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.86 (dd, J = 7.9, 1.7 Hz, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 1.31 (s, 9H).
단계 4: 2-(4-tert-부틸-3-메톡시-페닐)아세트산
Figure pct00230
물 (50 mL) 중의 2-(4-tert-부틸-3-메톡시-페닐)아세토니트릴 (단계 3) (84%, 8.0 g, 33.06 mmol)의 용액에 리튬 하이드록사이드 수화물 (9.27 g, 165.29 mmol)을 첨가하고 혼합물을 환류하에 밤새 가열했다. 실온으로 냉각한 후, 생성된 혼합물을 진한 HCl 용액으로 산성화하고 DCM (2 x 30 mL)으로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.13 분 (88% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.27 (s, 1H), 7.13 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.75 (dd, J = 7.9, 1.7 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.50 (s, 2H), 1.31 (s, 9H).
단계 5: 2-(2-브로모-4-tert-부틸-5-메톡시-페닐)아세트산
아세트산 (2.19 mL) 중의 2-(4-tert-부틸-3-메톡시-페닐)아세트산 (단계 4) (340 mg, 1.53 mmol)을 브로민 (176 μL, 3.06 mmol)으로 처리하고 90 분 동안 교반했다. 반응을 포화 수성 소듐 티오설페이트로 퀀칭하고 생성된 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 물 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 무색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.24 분 (97% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.43 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.65 (s, 2H), 1.31 (s, 9H).
중간체 G
2-(4- tert- 부틸-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산
Figure pct00231
2-(2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (585 mg, 3.17 mmol)을 진한 황산 (677 μL, 12.7 mmol) 및 tert-부탄올 (1.21 mL, 12.7 mmol)로 처리하고 3 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 진공에서 농축했다. 물질 MeOH의 전달이 사용되는 동안, 이는 메틸 에스테르의 형성을 야기했다. 잔류물을 물 중의 10-100% MeCN로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의해 정제했다. 생성된 물질을 2M LiOH (7 mL) 및 THF (7 mL)에 용해시키고 2 시간 동안 교반했다. 휘발성 용매를 진공에서 제거하고 수용액을 1M HCl로 산성화했다. 현탁액을 DCM (3 x 20 mL)으로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.17 분; MS m/z 239.0 = [M-H]- (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.42 (s, 1H), 6.94 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.57 - 3.53 (m, 2H), 1.31 (s, 9H).
중간체 H
4-[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시페닐)아세트아미도]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로 프로필]피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00232
DMF (150 mL) 중의 2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (중간체 U 단계 1 (99%, 15.5 g, 58.33 mmol)의 용액에 DIPEA (15.28 mL, 87.5 mmol) 및 4-아미노-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (중간체 A) (15.02 g, 61.25 mmol)를 첨가하고 혼합물을 0 ℃로 냉각했다. EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (41.67 mL, 70. mmol)을 5 분에 걸쳐 적가하고 반응 혼합물을 실온으로 서서히 가온하고 4 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (200 mL)로 희석하고 염수 (500 mL)로 세척했다. 수성 세척액을 EtOAc (200 mL)로 역추출하고 조합된 유기 부분을 포화 NaHCO3 (200 mL) 및 1M HCl (200 mL)로 세척했다. 형성된 침전물을 여과하고, EtOAc (100 mL)로 세척하고 건조시켜 백색 고체를 수득했다. 고체를 EtOAc (200 mL)에 현탁시키고 포화 NaHCO3 (500 mL)을 첨가했다. 30 분 동안 격렬하게 교반한 후, 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.01 분; MS m/z 490.0, 492.0 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.83 (s, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.81 (s, 2H), 1.36 - 1.23 (m, 2H), 1.22 - 1.12 (m, 2H).
중간체 I
4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]-N- tert- 부틸-피리딘-2-카르복스아미드
Figure pct00233
단계 1: 메틸 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트
Figure pct00234
1,4-디옥산 (20 mL) 중의 2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (중간체 U 단계 1) (91%, 2.92 g, 10.09 mmol), 메틸 4-아미노피리딘-2-카르복실레이트 (1.54 g, 10.09 mmol) 및 DIPEA (5.29 mL, 30.26 mmol)의 교반되는 용액에 EtOAc 중의 50% T3P® 용액 (6.6 mL, 11.1 mmol)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 17 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (100 mL) 및 물 (100 mL)로 희석했다. 상을 분리하고 수성층을 EtOAc (60 mL)로 추가로 추출했다. 유기 추출물을 조합하고, 물 (2 x 100 mL), 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.05 분; MS m/z 397.0, 399.0 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 2H).
단계 2: 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산
Figure pct00235
2M 수성 LiOH (7.55 mL, 15.11 mmol)를 THF (10 mL) 중의 메틸 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실레이트 (단계 1) (2 g, 5.04 mmol)의 교반되는 용액에 첨가하고 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 휘발성 용매를 진공에서 제거하고 생성된 수성층을 1M 수성 HCl을 사용하여 pH 3으로 산성화했다. 침전물을 여과에 의해 수집하고 40 ℃의 진공 오븐에서 8 시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 0.91 분; MS m/z 382.9, 384.9 = [M+H]+ (97% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.10 (s, 1H), 8.55 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 5.6, 2.1 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 3.84 (s, 2H), 3.83 (s, 3H).
단계 3: 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]-N-tert-부틸-피리딘-2-카르복스아미드
DMF (5 mL) 중의 4-[[2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세틸]아미노]피리딘-2-카르복실산 (단계 2) (930 mg, 2.43 mmol), 2-메틸프로판-2-아민 (306 μL, 2.91 mmol) 및 DIPEA (636 μL, 3.64 mmol)의 용액에 HATU (1 g, 2.67 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (10 mL)와 물 (10 mL) 사이에 분배했다. 상을 분리하고 유기 부분을 물 (2 x 10 mL), 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.28 분; MS m/z 438.1, 440.0 = [M+H]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.80 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.80 (dd, J = 5.5, 2.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.81 (s,2H), 1.40 (s, 9H).
중간체 J
트리에틸암모늄 비스(카테콜라토)아이오도메틸실리케이트
Figure pct00236
이 화합물은 J. Am. Chem. Soc. 2018, 140, 8037-8047에 기재된 절차에 따라 제조되었다. 라디칼/극 교차를 통한 산화환원-중성 광촉매 사이클로프로판화.
중간체 K
2-(4- tert- 부틸-2-클로로-5-메톡시-페닐)아세트산
Figure pct00237
단계 1: 2-(2-클로로-5-메톡시-페닐)아세트산
Figure pct00238
DCM (301 mL) 중의 2-(3-메톡시페닐)아세트산 (10 g, 60.18 mmol)의 교반되는 용액에 트리페닐포스핀 설파이드 (1.77 g, 6.02 mmol)에 이어서 N-클로로석신이미드 (9.64 g, 72.22 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 20 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 실리카 플러그를 통해 여과하고 TBME (2 x 500 mL)로 세척했다. 여과액을 진공에서 농축하고 잔류물을 1M NaOH (1 L) 용액에 용해시키고, 10 분 동안 격렬하게 교반했다. 수성 혼합물을 TBME (2 x 200 mL)로 추출하여 유기 불순물을 제거한 다음, 6 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 DCM (2 x 200 mL)으로 추출했다. DCM 추출물을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 끓는 헵탄으로부터의 고온 여과에 의해 추가로 정제했다. 고체를 헵탄 (1 L)에 현탁시키고 불용성 오일 잔류물이 잔존하면서 모든 고체가 용해될 때까지 환류 가열했다. 불용성 유성 불순물로부터 따라내면 뜨거운 헵탄 용액으로부터 생성물이 결정화되었다. 결정화된 고체를 여과하고 진공 오븐에서 건조시켜 표제 화합물을 옅은 황색 결정질 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.00 분; (98% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.43 (s, 1H), 7.32 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 6.87 (dd, J = 8.8, 3.1 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.66 (s, 2H).
단계 2: 2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-메톡시-페닐)아세트산
Figure pct00239
DCE (498.45 mL) 중의 2-(2-클로로-5-메톡시-페닐)아세트산 (단계 1(20.0 g, 99.69 mmol)을 t-부탄올 (114.41 mL, 1196.29 mmol)로 처리하고 이어서 진한 황산 (63.77 mL, 1196.29 mmol)을 적하 깔때기를 통해 40 분에 걸쳐 실온에서 적가하고 1 시간 동안 교반했다. 추가의 t-부탄올 (38 mL) 및 진한 황산 (21 mL)을 출발 물질의 완전한 소모가 관찰될 때까지 90 분 간격으로 첨가했다. 층을 분리한 다음, 황산 층을 DCE (2 x 200 mL)로 추출하고, 조합된 DCE 층을 진공에서 농축했다 (60 ℃에서 가열하고 고진공이 필요함). 생성된 고체를 헵탄에 이어서 1M HCl로 트리터레이션(truturation)한 다음 물로 세척하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.65 분; (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.42 (br. s, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.64 (s, 2H), 1.31 (s, 9H).
중간체 L
2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세트산
Figure pct00240
단계 1: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로판-1-올
소듐 보로하이드라이드 (96.17 mg, 2.54 mmol)를 MeOH (10 mL) 중의 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로판알 (중간체 E 단계 1 (72%, 620 mg, 1.27 mmol)의 교반되는 용액에 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 용매를 진공에서 제거한 다음 포화 수성 NH4Cl (20 mL)로 처리하고, 30 분 동안 교반했다. EtOAc (20 mL)를 첨가하고 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 무색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.32 분; MS m/z 351.0, 353.0 = [M-H]- (89% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.50 - 7.45 (m, 2H), 7.46 - 7.39 (m, 2H), 7.39 - 7.32 (m, 1H), 7.33 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.59 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 3.59 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 1.23 (s, 6H).
단계 2: [2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로필] 아세테이트
Figure pct00241
DCM (10 mL) 중의 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로판-1-올 (단계 1) (85%, 520 mg, 1.25 mmol)의 용액을 DMAP (15 mg, 0.13 mmol), 아세트산 무수물 (237 μL, 2.5 mmol) 및 TEA (349 μL, 2.5 mmol)로 처리하고 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 포화 Na2CO3 (20 mL)로 세척하고 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 무색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.47 분 (94% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.42 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.40 - 7.32 (m, 2H), 7.17 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 5.15 (s, 2H), 4.28 (s, 2H), 1.90 (s, 3H), 1.30 (s, 6H).
단계 3: 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세트산
표제 화합물을 포타슘 3-에톡시-3-옥소-프로파노에이트 및 [2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-메틸-프로필] 아세테이트 (단계 2)로부터 중간체 B 단계 5와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.16 분; MS m/z 663.4 = [2M-H]- (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.44 (br. s, 1H), 7.50 - 7.47 (m, 2H), 7.44 - 7.40 (m, 2H), 7.37 - 7.33 (m, 1H), 7.05 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.56 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 3.59 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 3.55 (s, 2H), 1.24 (s, 6H).
중간체 M
2-[5-벤질옥시-4-(4-시아노테트라하이드로피란-4-일)-2-플루오로-페닐]아세트산
Figure pct00242
Figure pct00243
단계 1: 4-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)테트라하이드로피란-4-카르보니트릴
Figure pct00244
냉각된 (0℃) DMF (40 mL) 중의 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)아세토니트릴 (중간체 C 단계 5) (1 g, 3.12 mmol)의 용액에 질소하에 NaH (미네랄 오일 중의 60% 분산, 262 mg, 6.56 mmol)을 첨가했다. 5 분 동안 교반한 후, 혼합물을 1-브로모-2-(2-브로모에톡시)에탄 (0.8 g, 3.44 mmol)으로 10 분에 걸쳐 한 방울씩 처리했다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 1 시간 동안 교반한 다음 65 ℃로 2 시간 동안 가열했다. 생성된 혼합물을 0℃로 냉각하고 반응을 질소하에 물 (10 mL)의 조심스러운 첨가에 의해 퀀칭했다. 추가 물 (200 mL) 첨가가 침전물을 제공했고 이를 실온에서 20 분 동안 교반했다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 물 (200 mL)로 세척하고 40 ℃의 진공 오븐에서 3 시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 베이지색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.33 분; MS (90% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.54 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 7.43 - 7.31 (m, 4H), 5.29 (s, 2H), 3.98 - 3.92 (m, 2H), 3.66 (t, J = 11.5 Hz, 2H), 2.29 (d, J = 12.6 Hz, 2H), 1.99 (td, J = 13.1, 4.2 Hz, 2H).
단계 2: 2-[5-벤질옥시-4-(4-시아노테트라하이드로피란-4-일)-2-플루오로-페닐]아세트산
THF (10 mL) 중의 4-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)테트라하이드로피란-4-카르보니트릴 (단계 1) (90%, 750 mg, 1.73 mmol)의 용액에 Pd(dba)2 (20 mg, 0.03 mmol)에 이어서 Q-Phos (25 mg, 0.03 mmol)를 첨가했다. 혼합물에 질소를 10 분 동안 살포하고 THF 중의 0.5M 브로모-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)징크 (3.46 mL, 1.73 mmol)를 첨가하여 처리했다. 50 ℃에서 질소하에 1.5 시간 동안 교반한 후, Pd(dba)2 (20 mg, 0.03 mmol) 및 Q-Phos (25 mg, 0.03 mmol)의 추가 부분을 첨가하고 교반을 60 ℃에서 밤새 계속했다. 생성된 것을 EtOAc (25 mL)로 희석하고 물 (20 mL), 1M HCl (20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 황색 오일을 제공했다. 오일을 DCM (15 mL)에 용해시키고, TFA (1.99 mL, 25.94 mmol)로 처리하고 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 미정제 잔류물을 EtOAc (25 mL)에 용해시켰다. 유기 혼합물을 2M NaOH (2 x 25 mL)로 세척했다. 염기성 수성 세척액을 조합하고, 6M HCl을 사용하여 pH 4-5로 재산성화한 다음 EtOAc (3 x 25 mL)로 역추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 옅은 황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.12 분; MS m/z 370.1 = [M+H]+ (97% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.55 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.43-7.38 (m, 2H), 7.35-7.31 (m, 1H), 7.24 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 3.98 - 3.92 (m, 2H), 3.66 (t, J = 11.6 Hz, 2H), 3.59 (s, 2H), 2.29 (d, J = 12.7 Hz, 2H), 2.03-1.96 (m, 2H).
중간체 N
2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-[2-(트리플루오로메틸)옥세탄-2-일]페닐]아세트산
Figure pct00245
단계 1: 메틸 2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-벤조에이트
Figure pct00246
벤질 브로마이드 (2.29 mL, 19.27 mmol)를 교반되는 DMF (50 mL) 중의 메틸 4-브로모-5-플루오로-2-하이드록시-벤조에이트 (4 g, 16.06 mmol) 및 K2CO3 (5.55 g, 40.16 mmol)의 혼합물에 첨가하고 반응 혼합물을 80 ℃에서 1 시간 동안 교반했다. 실온으로 냉각한 후, 생성된 혼합물을 EtOAc (150 mL)와 물 (150 mL) 사이에 분배했다. 유기 부분을 분리하고 수성층을 EtOAc (50 mL)로 추가로 추출했다. 조합된 유기층을 물 (2 x 50 mL), 염수 (150 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-60% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 무색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.37 분; (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.66 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 2H), 7.44 - 7.37 (m, 2H), 7.36 - 7.29 (m, 1H), 5.23 (s, 2H), 3.81 (s, 3H).
단계 2: (2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)메탄올
Figure pct00247
Figure pct00248
THF (100 mL) 중의 메틸 2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-벤조에이트 (단계 1) (5.4 g, 15.92 mmol)의 교반되는 용액에 LiBH4 (11.94 mL, 47.77 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 추가 LiBH4 부분 (11.94 mL, 47.77 mmol)을 첨가하고 교반을 밤새 계속했다. 생성된 혼합물을 얼음 (~50 mL)으로 퀀칭하고, 30 분 동안 교반한 다음 EtOAc (50 mL)를 첨가했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.24 분; (94% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.46 - 7.36 (m, 4H), 7.37 - 7.30 (m, 2H), 7.30 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 5.29 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.49 (d, J = 5.6 Hz, 2H).
단계 3: 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄올
Figure pct00249
톨루엔 (50 mL) 중의 (2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)메탄올 (단계 2) (1 g, 3.21 mmol)의 용액에 이산화망간 (1.1 g, 12.86 mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 90 ℃에서 1 시간 동안 교반한 다음 실온에서 밤새 교반되도록 방치했다. 생성된 혼합물을 Celite® (필터 물질)을 통해 여과하고 톨루엔으로 세척했다. 여과액을 진공에서 농축하고 잔류물을 THF (25 mL)에 재용해시키고 트리메틸(트리플루오로메틸)실란 (914 mg, 6.43 mmol)으로 처리했다. 5 분 동안 교반한 후, THF 중의 1M TBAF (47 μL, 0.16 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 0 ℃로 냉각하고 2M HCl (20 mL)을 첨가했다. 실온에서 1 시간 동안 교반한 후, 혼합물을 EtOAc (100 mL)와 물 (100 mL) 사이에 분배했다. 상을 분리하고 유기물을 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 생성물을 헵탄 중의 0-50% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.39 분; (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.52 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.44 - 7.33 (m, 6H), 6.99 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.44 - 5.36 (m, 1H), 5.19 (s, 2H).
단계 4: 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄온
Figure pct00250
DCM (40 mL) 중의 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄올 (단계 3) (700 mg, 1.85 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난 (979 mg, 2.31 mmol)에 이어서 TFA (0.14 mL, 1.85 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반했다. 생성된 반응 혼합물을 여과하고 DCM (~20 mL)으로 세척했다. 여과액을 포화 NaHCO3 (2 x 25 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.16 분; MS m/z 375.1, 377.1 = [M+H]+ (70% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.81 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.45 - 7.32 (m, 5H), 5.28 (s, 2H).
단계 5: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-(트리플루오로메틸)옥세탄
Figure pct00251
트리메틸설폭소늄 아이오다이드 (490 mg, 2.23 mmol) 및 포타슘 t-부톡사이드 (250 mg, 2.23 mmol)를 DMSO (10 mL)에 용해시키고 10 분 동안 교반했다. 이 혼합물에 DMSO (2 mL) 중의 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2,2,2-트리플루오로-에탄온 (단계 4) (70%, 400 mg, 0.74 mmol)의 용액을 적가하고 혼합물을 실온에서 불활성 분위기하에 7 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (50 mL)에 희석하고 물 (2 x 25 mL), 염수 (25 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 밝은 황색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.53 분; (95% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.58 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.44-7.39 (m, 4H), 7.38 - 7.33 (m, 1H), 7.25 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.17 (s, 2H), 4.72-4.66 (m, 1H), 4.51 (dt, J = 9.3, 5.9 Hz, 1H), 3.15 (dt, J = 12.6, 8.7 Hz, 1H), 3.04-2.97 (m, 1H).
단계 6: 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-[2-(트리플루오로메틸)옥세탄-2-일]페닐]아세트산
표제 화합물을 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-2-(트리플루오로메틸) 옥세탄 (단계 5) 및 THF 중의 0.5M 브로모-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)징크로부터 중간체 M 단계 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.02 분; MS m/z 767.3 = [2M-H]- (90% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.60 (br. s, 1H), 7.46 - 7.31 (m, 5H), 7.25 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.74 - 4.65 (m, 1H), 4.53-4.46 (m, 1H), 3.65 (s, 2H), 3.19 - 3.10 (m, 1H), 3.06 - 2.97 (m, 1H).
중간체 O
2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시페닐)아세토니트릴
Figure pct00252
단계 1: 2-브로모-4-플루오로-5-메틸페놀
Figure pct00253
-78℃의 DCM (79 mL) 중의 4-플루오로-3-메틸페놀 (10 g, 79.3 mmol)의 용액에 브로민 (4.09 mL, 79.3 mmol)을 적가했다. 1 시간 후, 1M 수성 소듐 티오설페이트를 첨가하고 혼합물을 실온으로 가온했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 수득했다. 위치선택성 >10:1.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.84 (dd, J = 6.8, 0.9 Hz, 1H), 5.27 (s, 1H), 2.20 (dd, J = 2.1, 0.8 Hz, 3H).
단계 2: 1-브로모-5-플루오로-2-메톡시-4-메틸벤젠
Figure pct00254
아이오도메탄 (7.3 mL, 117 mmol)을 DMF (156 mL) 중의 2-브로모-4-플루오로-5-메틸페놀 (단계 1) (16 g, 78.0 mmol) 및 포타슘 카르보네이트 (21.6 g, 156 mmol)의 혼합물에 적가하고 혼합물을 밤새 격렬하게 교반했다. 여과 후, 여과액을 물과 Et2O 사이에 분배했다. 상을 분리하고, 유기상을 물 (x 3), 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류물을 n-펜탄으로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 옅은 황색 오일로 수득했다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.21 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.72 - 6.68 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.24 (dd, J = 2.1, 0.7 Hz, 3H).
단계 3: 1-브로모-4-(브로모메틸)-5-플루오로-2-메톡시벤젠
Figure pct00255
교반되는 CCl4 (45.7 mL) 중의 1-브로모-5-플루오로-2-메톡시-4-메틸벤젠 (단계 2) (2 g, 9.13 mmol)의 용액에 실온에서 N-브로모석신이미드 (1.63 g, 9.13 mmol) 및 아조비스이소부티로니트릴 (150 mg, 0.913 mmol)을 첨가했다. 생성된 혼합물을 3 시간 동안 환류 가열했다. 실온으로 냉각한 후, 혼합물을 얼음 냉수에 붓고 DCM (x 2)으로 추출했다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 생성물을 사이클로헥산 중의 0-10% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.30 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.46 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H).
단계 4: 2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시페닐)아세토니트릴
10:1 DMF:물 (34 mL) 중의 1-브로모-4-(브로모메틸)-5-플루오로-2-메톡시벤젠 (단계 3) (4.38 g, 14.7 mmol)의 용액에 KCN (1.05 g, 16.2 mmol) 및 테트라부틸암모늄 브로마이드 (5.21 g, 16.2 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고 Et2O (3 x 50 mL)로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 50 % 포화 NaHCO3 (3 x 100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 생성물을 사이클로헥산 중의 0-100% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 황색 고체로 수득했다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ 7.26 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.69 - 3.64 (m, 2H).
중간체 P
2-(6-플루오로-4,4-디메틸-2-옥소-크로만-7-일)아세트산
Figure pct00256
단계 1: 2-(2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세트산
Figure pct00257
DCM (30 mL) 중의 2-(2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (2.0 g, 10.86 mmol)의 용액 및 DCM 중의 1M BBr3 (21.72 mL, 21.72 mmol)을 실온에서 밤새 교반했다. 추가 DCM 중의 1M BBr3 부분 (21.72 mL, 21.72 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 주말에 걸쳐 교반했다. 생성된 침전물을 여과하고, DCM (100 mL)으로 세척하고 진공에서 건조하여 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.52 분; MS m/z 339.1 = [2M-H]- (85% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.37 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 6.94 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 6.72 - 6.65 (m, 1H), 6.67 - 6.59 (m, 1H), 3.50 (s, 2H).
단계 2: 메틸 2-(6-플루오로-4,4-디메틸-2-옥소-크로만-7-일)아세테이트
Figure pct00258
메탄설폰산 (5.42 mL, 83.46 mmol) 중의 2-(2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세트산 (단계 1(85%, 710 mg, 3.55 mmol) 및 메틸 3-메틸부트-2-에노에이트 (714 mg, 6.26 mmol)의 용액을 70 ℃에서 40 시간 동안 교반했다. 실온으로 냉각한 후, 혼합물을 얼음 (20 g)에 붓고 EtOAc (30 mL)를 첨가했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc에 이어서 EtOAc 중의 0-100% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 및 이후 물 (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.14 분; (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.27 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 3.73 (s, 2H), 3.63 (s, 3H), 2.73 (s, 2H), 1.27 (s, 6H).
단계 3: 2-(6-플루오로-4,4-디메틸-2-옥소-크로만-7-일)아세트산
물 (2 mL) 중의 리튬 하이드록사이드 (189 mg, 7.89 mmol)의 용액을 THF (2 mL) 중의 메틸 2-(6-플루오로-4,4-디메틸-2-옥소-크로만-7-일)아세테이트 (단계 2) (420 mg, 1.58 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하여 유기물을 제거한 다음 EtOAc (20 mL)로 희석했다. 혼합물을 1M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 I: Rt 0.28 분; MS m/z 251.3 = [M-H]- (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.53 (s, 1H), 7.25 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 3.61 (s, 2H), 2.72 (s, 2H), 1.27 (s, 6H).
중간체 Q
2-[2-브로모-5-메톡시-4-(2-메톡시-1,1-디메틸-2-옥소-에틸)페닐]아세트산
Figure pct00259
냉각된 (0 ℃) MeCN (10 mL) 중의 메틸 2-[4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-2-메톡시-페닐]-2-메틸-프로파노에이트 (중간체 T 단계 3) (811 mg, 2.52 mmol)의 용액을 10 분에 걸쳐 브로민 (0.17 mL, 3.02 mmol)으로 한 방울씩 처리했다. 생성된 혼합물을 빙조를 제거하지 않고 실온으로 서서히 가온한 다음 16 시간 동안 교반되도록 두었다. 수성 포화 소듐 설파이트 용액 (20 mL)을 혼합물에 천천히 첨가하고 10 분 동안 교반했다. 생성된 용액을 염수 (50 mL)로 희석하고 EtOAc (50 mL)로 추출했다. 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-70% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 회백색 검으로 제공했다.
LC-MS (방법 H): Rt 1.31 분; MS m/z 345, 347 = [M+H]+ (96% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ 12.53 (br. s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.68 (s, 2H), 3.53 (s, 3H), 1.40 (s, 6H).
중간체 R
2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-[2,2,2-트리플루오로-1-(하이드록시메틸)에틸]페닐]아세트산
Figure pct00260
단계 1: 4-브로모-5-플루오로-2-메톡시-벤즈알데하이드
Figure pct00261
냉각된 (0 ℃) 건조 DCM (125 mL) 중의 2-브로모-1-플루오로-4-메톡시-벤젠 (7.35 g, 35.85 mmol)의 용액에 TiCl4 (3.94 mL, 35.85 mmol)를 첨가하고 혼합물을 0 ℃에서 15 분 동안 교반했다. 디클로로(메톡시)메탄 (4.87 mL, 53.78 mmol)에 이어서 추가 TiCl4 (3.94 mL, 35.85 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 얼음물 (~300 mL)에 붓고, 15 분 동안 격렬하게 교반하고 상을 분리했다. 수성 부분을 DCM (150 mL)으로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류물을 뜨거운 EtOAc (100 mL)에 현탁시키고 소결 패드를 통해 여과하고 소결 패드를 EtOAc로 헹구었다. 여과액을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (~20 mL)로부터 재결정화하여 표제 화합물을 백색 결정질 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.92 분; (97% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.27 - 10.22 (m, 1H), 7.64 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H).
단계 2: 4-브로모-5-플루오로-2-하이드록시-벤즈알데하이드
Figure pct00262
Figure pct00263
냉각된 (0 ℃) 건조 DCM (60 mL) 중의 4-브로모-5-플루오로-2-메톡시-벤즈알데하이드 (단계 1) (4.0 g, 17.17 mmol)의 용액에 DCM 중의 1M BBr3 (25.75 mL, 25.75 mmol)을 적가했다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 18 시간 동안 교반했다.
생성된 혼합물을 0 ℃로 냉각하고, 물 (50 mL)을 천천히 첨가하고 혼합물을 10 분 동안 격렬하게 교반했다. 상을 분리하고 수성 부분을 DCM (50 mL)으로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 진공에서 농축하여 옅은 보라색 고체를 수득했고 이를 EtOAc (30 mL)에 용해시켰다. 포화 소듐 비카르보네이트 용액 (30 mL)을 첨가하고 혼합물을 10 분 동안 격렬하게 교반했다. 상을 분리하고 유기 부분을 염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 옅은 베이지색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.14 분; (100% @ 215 nm)
MS18, 이온화 없음, RT = 1.14, UV 100%
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.63 (br. s, 1H), 10.23 - 10.20 (m, 1H), 7.50 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.6 Hz, 1H).
단계 3: 2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-벤즈알데하이드
Figure pct00264
MeCN (75 mL) 중의 4-브로모-5-플루오로-2-하이드록시-벤즈알데하이드 (단계 2)(100%, 3.68 g, 16.81 mmol) 및 K2CO3 (4.65 g, 33.61 mmol)의 혼합물에 브로모메틸벤젠 (2.2 mL, 18.49 mmol)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 4 시간 30 분 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (300 mL) 및 물 (300 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 유기 부분을 물 (2 x 200 mL), 염수 (200 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 미정제 생성물을 옅은 주황색 고체로 수득했다. 고체를 최소 부피의 끓는 헵탄 (30 mL)에 용해시키고 실온으로 냉각했다. 생성된 결정질 고체를 여과하고, 헵탄 (2 x 5 mL)으로 세척하고 진공에서 건조시켜 표제 화합물을 베이지색 결정질 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.12 분; MS m/z 307.0, 309.0 = [M-H]- (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.30 - 10.28 (m, 1H), 7.77 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.52 - 7.49 (m, 2H), 7.44 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.33 (m, 1H), 5.32 (s, 2H).
단계 4: 1-벤질옥시-5-브로모-2-(2,2-디플루오로비닐)-4-플루오로-벤젠
Figure pct00265
DMF (25 mL) 중의 2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-벤즈알데하이드 (단계 3) (3.95 g, 12.78 mmol) 및 트리페닐 포스핀 (4.02 g, 15.33 mmol)의 혼합물을 질소 분위기하에 두고 100 ℃로 가열했다. 이 혼합물에 DMF (10 mL) 중의 소듐 2-클로로-2,2-디플루오로-아세테이트 (2.92 g, 19.17 mmol)를 적가하고 교반을 100 ℃에서 40 분 동안 계속했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (200 mL) 및 1:1 물:염수 (200 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 유기 부분을 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 미정제 생성물을 주황색/갈색 오일로 수득했다. 헵탄 중의 0-15% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 오일의 정제는 표제 화합물을 무색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 H): Rt 1.87 분; (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.49 - 7.44 (m, 3H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 5.73 (dd, J = 26.7, 3.7 Hz, 1H), 5.17 (s, 2H).
단계 5: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-3,3,3-트리플루오로-프로판산
Figure pct00266
세슘 플루오라이드 (4.45 g, 29.29 mmol)를 자기 교반 막대가 구비된 3 구 플라스크에 첨가했다. 플라스크를 과도하게 가열하며 (히트 건) 진공하에 두어 고체가 적합하게 건조되도록 했다. 건조 과정 동안 용기를 질소로 퍼지하고 여러 번 다시 배기했다. 플라스크를 100 ℃에서 진공하에 1 시간 동안 두었다. 플라스크를 실온으로 냉각한 후, 플라스크를 질소 분위기하에 두고 건조 DMSO (75 mL) 중의 1-벤질옥시-5-브로모-2-(2,2-디플루오로비닐)-4-플루오로-벤젠 (단계 4) (3.35 g, 9.76 mmol)의 용액을 첨가했다. 용기를 CO2 분위기하에 두고 (3 x 사이클의 충전 및 배기, 렉처 병으로부터 1 atm 압력 CO2 충전) 55 ℃에서 밤새 격렬하게 교반했다. 생성된 혼합물을 물 (300 mL) 및 EtOAc (300 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 유기 부분을 물 (300 mL), 염수 (300 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 생성물을 물 (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 H): Rt 1.33 분; MS m/z 361.0, 363.0 = [M-CO2-H] (98% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.56 (br. s, 1H), 7.56 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.46 - 7.37 (m, 5H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 5.25 - 5.16 (m, 2H), 5.05 (q, J = 9.3 Hz, 1H).
단계 6: 메틸 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-3,3,3-트리플루오로-프로파노에이트
Figure pct00267
냉각된 (0 ℃) MeOH (20 mL) 중의 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-3,3,3-트리플루오로-프로판산 (단계 5) (763 mg, 1.87 mmol)의 혼합물을 SOCl2 (1360 μL, 18.75 mmol)로 한 방울씩 처리하고 50 ℃로 4 시간 동안 가열했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 DCM (10 mL) 및 THF (10 mL)와 공비시켜 표제 화합물을 갈색/주황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.47 분; (97% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.58 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.43 - 7.38 (m, 5H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 5.27 - 5.14 (m, 3H), 3.57 (s, 3H).
단계 7: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-3,3,3-트리플루오로-프로판-1-올
Figure pct00268
냉각된 (-78 ℃) THF (16 mL) 중의 메틸 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-3,3,3-트리플루오로-프로파노에이트 (단계 6) (97%, 720 mg, 1.66 mmol)의 용액에 THF 중의 4M LiBH4 (0.41 mL, 1.66 mmol)를 적가하고 혼합물을 30 분 동안 교반했다. 추가의 THF 중의 4M LiBH4 (0.41 mL, 1.66 mmol)를 첨가하고 혼합물을 1 시간 동안 교반했다. 반응을 포화 NH4Cl 용액 (10 mL)의 적가에 의해 퀀칭하고 생성된 혼합물을 EtOAc (80 mL) 및 물로 희석했다. 상을 분리하고 유기 부분을 염수 (80 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 황색 오일을 수득했다. 헵탄 중의 0-40% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 오일의 정제는 표제 화합물을 무색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.11 분; MS m/z 391.1,393.1 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.49 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 3H), 7.40 - 7.33 (m, 3H), 5.18 (s, 2H), 5.16 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.21 - 4.09 (m, 1H), 3.96 - 3.89 (m, 1H), 3.88 - 3.81 (m, 1H).
단계 8: [2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-3,3,3-트리플루오로-프로폭시]-tert-부틸-디메틸-실란
Figure pct00269
t-부틸디메틸실릴 클로라이드 (70 mg, 0.46 mmol)를 DCM (3 mL) 중의2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-3,3,3-트리플루오로-프로판-1-올 (단계 7)(99%, 123 mg, 0.31 mmol) 및 이미다졸 (42 mg, 0.62 mmol)의 혼합물에 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 DCM (10 mL) 및 물 (10 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 수성 물질을 DCM (10 mL)으로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-20%EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 생성물의 정제는 표제 화합물을 무색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 H): Rt 2.21 분; (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.52 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.44 - 7.38 (m, 4H), 7.37 - 7.33 (m, 1H), 5.20 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.21 - 4.11 (m, 1H), 4.05 (dd, J = 10.8, 5.9 Hz, 1H), 3.99 (dd, J = 10.8, 6.0 Hz, 1H), 0.78 (s, 9H), -0.03 (s, 3H), -0.05 (s, 3H).
단계 9: tert-부틸 2-[5-벤질옥시-4-[1-[[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시메틸]-2,2,2-트리플루오로-에틸]-2-플루오로-페닐]아세테이트
Figure pct00270
표제 화합물을 [2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)-3,3,3-트리플루오로-프로폭시]-tert-부틸-디메틸-실란 (단계 8) 및 THF 중의 0.5M 브로모-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)징크로부터 중간체 M 단계 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 H): Rt 2.26 분; MS m/z 487.2 = [M+H]+ (81% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.45 - 7.37 (m, 4H), 7.36 - 7.32 (m, 1H), 7.25 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 5.08 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.20 - 4.11 (m, 1H), 4.03 (dd, J = 10.8, 6.0 Hz, 1H), 3.97 (dd, J = 10.8, 5.9 Hz, 1H), 3.60 (s, 2H), 1.38 (s, 9H), 0.79 (s, 9H), -0.03 (s, 3H), -0.05 (s, 3H).
단계 10: 2-[5-벤질옥시-2-플루오로-4-[2,2,2-트리플루오로-1-(하이드록시메틸)에틸]페닐]아세트산
TFA (938 μL, 12.25 mmol)를 DCM (3 mL) 중의 tert-부틸 2-[5-벤질옥시-4-[1-[[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시메틸]-2,2,2-트리플루오로-에틸]-2-플루오로-페닐]아세테이트 (단계 9) (90%, 12 mg, 0.2 mmol)의 혼합물에 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축한 다음 DCM (3 x 5 mL)과 공비시켰다. 미정제 생성물을 10-100% MeCN/물 (+0.1% 포름산)로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 무색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.19 분; MS m/z 355.1 = [M+H-H2O]+ (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.51 (br s, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 4H), 7.37 - 7.32 (m, 1H), 7.21 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.14 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.19 - 4.09 (m, 1H), 3.96 - 3.90 (m, 1H), 3.85 - 3.79 (m, 1H), 3.61 (s, 2H).
중간체 S
2-(5-벤질옥시-4-브로모-2-플루오로-페닐)아세트산
Figure pct00271
단계 1: 2-(4-브로모-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세트산
Figure pct00272
DCM 중의 1M BBr3 (28.51 mL, 28.51 mmol)을 냉각되고 (0 ℃), 교반되는 DCM (30 mL) 중의 2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (중간체 U 단계 1) (2.5 g, 9.5 mmol)의 현탁액에 적가했다. 30 분 후, 빙조를 제거하고 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (100 mL)와 물 (100 mL) 사이에 분배했다. 유기층을 분리하고, 물 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 미정제 물질을 물 (+0.1% 포름산) 중의 MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.43 (br s, 1H), 7.36 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.52 - 3.49 (m, 2H). 1H NMR에 의해 90% 순도.
단계 2: 벤질 2-(5-벤질옥시-4-브로모-2-플루오로-페닐)아세테이트
Figure pct00273
표제 화합물을 2-(4-브로모-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세트산 (단계 1) 및 브로모메틸벤젠으로부터 중간체 R 단계 3과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.52 분; (88% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.56 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.50 - 7.45 (m, 2H), 7.43 - 7.31 (m, 8H), 7.28 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 5.12 (s, 2H), 3.78 (d, J = 1.1 Hz, 2H).
단계 3: 2-(5-벤질옥시-4-브로모-2-플루오로-페닐)아세트산
표제 화합물을 벤질 2-(5-벤질옥시-4-브로모-2-플루오로-페닐)아세테이트 (단계 2) 및 리튬 하이드록사이드로부터 중간체 P 단계 3과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.99 분; MS m/z 675.1, 677.1, 679.1 = [2M-H]- (84% @215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.55 (br. s, 1H), 7.53 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.50 - 7.46 (m, 2H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.37 - 7.32 (m, 1H), 7.26 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 3.60 (d, J = 1.2 Hz, 2H).
중간체 T
2-(5-클로로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산
Figure pct00274
단계 1: 메틸 2-(4-브로모-2-메톡시-페닐)아세테이트
Figure pct00275
진한 황산 (350 μL, 6.3 mmol)을 교반되는 MeOH (70 mL) 중의 2-(4-브로모-2-메톡시-페닐)아세트산 (7.25 g, 29.6 mmol)의 용액에 적가했다. 반응 혼합물을 70℃로 3 시간 동안 가열한 다음 실온에서 밤새 방치했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 EtOAc (100 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 NaHCO3 (50 mL)으로 세척하고, 수성 세척액을 EtOAc (20 mL x 2)로 추가로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 주황색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.96 분; (90% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.17 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.10 (dd, J = 8.0, 1.9 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.59 (s, 3H), 3.58 (s, 2H).
단계 2: 메틸 2-(4-브로모-2-메톡시-페닐)-2-메틸-프로파노에이트
Figure pct00276
냉각된 (-78 ℃) THF (104.21 mL) 중의 디이소프로필아민 (20.7 mL, 147.5 mmol)의 용액을 헥산 중의 1.8M BuLi (80.6 mL, 145.1 mmol)으로 처리했다. 10 분 동안 교반한 후, THF (50 mL) 및 메틸 아이오다이드 (12.2 mL, 196.7 mmol) 중의 메틸 2-(4-브로모-2-메톡시-페닐)아세테이트 (단계 1) (90%, 5 g, 17.4 mmol) 및 메틸 2-(4-브로모-2-메톡시-페닐)아세테이트 (단계 1(80%, 10.3 g, 31.8 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 2 일 동안 교반했다. 추가의 THF (100 mL)를 첨가하고 혼합물을 0 ℃로 냉각하고 THF 중의 2M LDA (30 mL, 60.0 mmol) 및 MeI (1.6 mL, 19.2 mmol)로 처리했다. 0 ℃에서 2 시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 EtOAc (500 mL)와 포화 수성 암모늄 클로라이드 (500 mL) 사이에 분배했다. 상을 분리하고 수성 부분을 EtOAc (2 x 300 mL)로 추가로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-25% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 물질의 정제는 표제 화합물을 옅은 황색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 H): Rt 1.51 분; MS m/z 286.8, 288.8 = [M+H]+ (92% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.22 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.18 - 7.10 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.52 (s, 3H), 1.39 (s, 6H).
단계 3: 메틸 2-[4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-2-메톡시-페닐]-2-메틸-프로파노에이트
Figure pct00277
메틸 2-(4-브로모-2-메톡시-페닐)-2-메틸-프로파노에이트 (단계 2)(2.0 g, 6.97 mmol), Pd(dba)2 (200 mg, 0.35 mmol) 및 Q-Phos (248 mg, 0.35 mmol)를 THF (40 mL)에 현탁시킨 다음 반응을 질소로 5 분 동안 탈기했다. THF 중의 0.5M 브로모-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)징크 (20.9 mL, 10.45 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 60 ℃에서 2.5 시간 동안 가열했다. 실온으로 냉각한 후, 혼합물을 EtOAc (75 mL)와 포화 NaHCO3 (50 mL) 사이에 분배했다. 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 잔류물을 헵탄 중의 0-100% EtOAc에 이어서 헵탄 중의 0-100% DCM 이후 DCM 중의 0-100% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의해 정제했다. 잔류물을 1:1 DMSO/MeOH (1.2 mL)에 용해시키고 0.1% 포름산이 있는 물/MeCN으로 용리하는 질량 지시 LC-MS에 의해 정제하여 표제 화합물을 밝은 적색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.13 분; MS m/z 345.2 = [M+Na]+ (95% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.20 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.81 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.53-3.51 (m, 5H), 1.42 (s, 9H), 1.40 (s, 6H).
단계 4: 메틸 2-[4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-5-클로로-2-메톡시-페닐]-2-메틸-프로파노에이트
Figure pct00278
DCM (18.6 mL) 중의 메틸 2-[4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-2-메톡시-페닐]-2-메틸-프로파노에이트 (단계 3) (1.2 g, 3.72 mmol)을 트리페닐포스핀 설파이드 (110 mg, 0.37 mmol) 및 N-클로로석신이미드 (596 mg, 4.47 mmol)로 처리하고 1 시간 동안 교반했다. 반응을 포화 수성 소듐 티오설페이트 (20 mL)로 퀀칭하고 상을 분리했다. 수성층을 DCM (2 x 20 mL)으로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-50% TBME로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 옅은 황색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.24 분; MS m/z 379.2, 381.2 = [M+Na]+ (95% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.25 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.65 (s, 2H), 3.53 (s, 3H), 1.42 (s, 9H), 1.41 (s, 6H).
단계 5: 2-[2-클로로-5-메톡시-4-(2-메톡시-1,1-디메틸-2-옥소-에틸)페닐]아세트산
Figure pct00279
Figure pct00280
DCM (15 mL) 중의 메틸 2-[4-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)-5-클로로-2-메톡시-페닐]-2-메틸-프로파노에이트 (단계 4)(95%, 1.37 g, 3.63 mmol)를 TFA (5.0 mL, 65.34 mmol)로 처리하고 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 진공에서 농축하고 DCM (20 mL)과 한 번 공비시켰다. 잔류물을 EtOAc (20 mL)에 용해시키고 물 (2 x 10 mL)로 세척했다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 회백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.90 분; MS m/z 301.1, 303.1 = [M+H]+ (95% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.45 (br. s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.67 (s, 2H), 3.54 (s, 3H), 1.41 (s, 6H).
단계 6: 2-(5-클로로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산
냉각된 (0 ℃) DCM (32.2 mL) 중의 2-[2-클로로-5-메톡시-4-(2-메톡시-1,1-디메틸-2-옥소-에틸)페닐]아세트산 (단계 5) (95%, 1.02 g, 3.22 mmol)의 용액을 DCM 중의 1M BBr3 (0.93 mL, 9.67 mmol)를 처리한 다음 실온으로 가온하고 20 시간 동안 교반했다. 반응을 물로 퀀칭하고, 상을 분리하고 수성상을 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 물 (+0.1% 포름산) 중의 10-100% MeCN으로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 무색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.97 분; (98% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.53 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 3.74 (s, 2H), 1.45 (s, 6H).
중간체 U
2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산
Figure pct00281
단계 1: 2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산
Figure pct00282
냉각된 (0 ℃) MeCN (1.2 L) 중의 2-(2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (45 g, 244.4 mmol)의 용액에 MeCN (100 mL) 중의 브로민 (12.63 mL, 244.9 mmol)의 용액을 10 분에 걸쳐 적가했다. 생성된 혼합물을 빙조를 제거하지 않고 실온으로 서서히 가온했다 (~1.5 시간). 추가의 MeCN (50 mL) 중의 브로민 (4.21 mL, 81.64 mmol)을 0 ℃에서 혼합물에 적가하고 이를 실온에서 추가 3.5 시간 동안 교반했다. MeCN (50 mL) 중의 브로민 (4.21 mL, 81.64 mmol)을 추가로 실온에서 첨가하고 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반했다. 밝은 주황색이 사라질 때까지 반응을 포화 수성 소듐 설파이트 (~700 mL)로 조심스럽게 퀀칭했다. 무색 용액을 염수 (200 mL) 및 EtOAc (200 mL)로 희석하고, 10 분 동안 격렬하게 교반했다. 유기층을 분리하고 수성층을 EtOAc (200 mL)로 추가로 추출했다. 유기층을 조합하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 미정제 생성물을 백색 고체로 수득했다. 미정제 생성물을 AcOH (700 mL)에 고체를 용해시켜 재결정화한 다음, 물 (4 L)로 처리했다. 혼합물을 교반하여 용매를 혼합하면 결정이 점차적으로 나타났다. 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 유지한 다음 0 ℃에서 3 시간 동안 유지했다. 여과에 이어서 40 ℃에서의 진공 건조가 표제 화합물을 보송한 백색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.07분; (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.55 (br s, 1H), 7.50 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.61 (d, J = 1.3 Hz, 2H).
단계 2: 벤질 2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세테이트
Figure pct00283
DMF (140 mL) 중의 2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세트산 (단계 1(15 g, 57.02 mmol) 및 K2CO3 (15.76 g, 114.0 mmol)의 혼합물을 벤질브로마이드 (7.45 mL, 62.7 mmol)로 처리하고 실온에서 18 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 여과하고 진공에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc (300 mL)에 용해시키고 염수 (200 mL) 및 포화 수성 소듐 비카르보네이트 (2 x 200 mL)로 순차적으로 세척했다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다.헵탄 중의 0-20% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 무색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.13 분; (95% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.53 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.40 - 7.31 (m, 5H), 7.15 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 3.81 - 3.78 (m, 5H).
단계 3: 메틸 2-[4-(2-벤질옥시-2-옥소-에틸)-5-플루오로-2-메톡시-페닐]-2-메틸-프로파노에이트
Figure pct00284
벤질 2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세테이트 (단계 2) (5.0 g, 14.16 mmol), ZnF2 (1.1 g, 10.62 mmol) 및 Pd(PtBu3)2 (0.36 g, 0.71 mmol)를 반응 용기에 첨가하고 질소 분위기하에 두었다. 탈기된 DMF (50 mL) 중의 (1-메톡시-2-메틸-프로프-1-엔옥시)-트리메틸-실란 (5.75 mL, 28.31 mmol)의 용액을 첨가하고 반응 혼합물을 80 ℃로 18 시간 동안 가열했다. 생성된 혼합물을 여과하고 진공에서 농축했다. 잔류물을 EtOAc (100 mL)에 용해시키고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고 유기층을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-30% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 정제는 표제 화합물을 옅은 황색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 A): Rt 3.99 분; MS m/z 375.3 = [M+H]+ (92% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.40 - 7.30 (m, 5H), 7.09 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 1.40 (s, 6H).
단계 4: 2-(5-플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산
DCM 중의 1M BBr3 (34.13 mL, 34.1 mmol)을 냉각된 (0 ℃) 건조 DCM (60 mL) 중의 메틸 2-[4-(2-벤질옥시-2-옥소-에틸)-5-플루오로-2-메톡시-페닐]-2-메틸-프로파노에이트 (단계 3) (92%, 2777 mg, 6.83 mmol)의 혼합물에 첨가했다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고 4.5 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 0 ℃로 재냉각하고 물 (50 mL)을 첨가했다. 30분에 걸쳐 서서히 실온으로 가온하면서 교반을 계속했다. 생성된 혼합물을 DCM (80 mL) 및 물 (80 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 수성 물질을 EtOAc (80 mL)로 추출한 다음 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 미정제 생성물을 갈색 오일로 수득했다. 10-100% MeCN/물 (+0.1% 포름산)로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 생성물의 정제는 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 H): Rt 1.19 분; (98% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.56 (br. s, 1H), 7.42 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 3.64 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 1.44 (s, 6H).
중간체 UA
2-(5-플루오로-3-메틸-2-옥소-3H-벤조푸란-6-일)아세트산
Figure pct00285
단계 1: 메틸 2-[4-(2-벤질옥시-2-옥소-에틸)-5-플루오로-2-메톡시-페닐]프로파노에이트
Figure pct00286
표제 화합물을 벤질 2-(4-브로모-2-플루오로-5-메톡시-페닐)아세테이트 (중간체 U 단계 2) 및 [(E)-1-메톡시프로프-1-엔옥시]-트리메틸-실란으로부터 중간체 U 단계 3과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.37 분; MS m/z 361.2 = [M+H]+ (97% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.39 - 7.30 (m, 5H), 7.02 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 3.93 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 3.76 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.57 (s, 3H), 1.34 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 2: 2-(5-플루오로-3-메틸-2-옥소-3H-벤조푸란-6-일)아세트산
표제 화합물을 메틸 2-[4-(2-벤질옥시-2-옥소-에틸)-5-플루오로-2-메톡시-페닐]프로파노에이트 (단계 1) 및 DCM 중의 1M BBr3으로부터 중간체 U 단계 4와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 2.08 분; (88% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.56 (br s, 1H), 7.33 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 4.03 (q, J = 7.5 Hz, 1H), 3.63 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 1.45 (d, J = 7.6 Hz, 3H).
중간체 V
2-(5,7-디플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산
Figure pct00287
단계 1: 2-(2,6-디플루오로-3-하이드록시-페닐)아세트산
Figure pct00288
DCM (30 mL) 중의 2-(2,6-디플루오로-3-메톡시-페닐)아세트산 (850 mg, 4.2 mmol)의 용액에 DCM 중의 1M BBr3 (6.31 mL, 6.31 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반한 다음 실온에서 5 일 동안 방치했다. 생성된 혼합물을 물 (30 mL)에 붓고 1M NaOH (aq) (~20 mL)를 첨가했다. 2상 혼합물을 30 분 동안 실온에서 격렬하게 교반하고 층을 분리했다. 수성 부분을 6M HCl의 적가에 의해 pH1-2로 산성화한 다음 EtOAc (2 x 30 mL)로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.50 분; (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.61 (br. s, 1H), 9.74 (s, 1H), 6.89 - 6.83 (m, 2H), 3.58 (s, 2H).
단계 2: 2-(4-브로모-2,6-디플루오로-3-하이드록시-페닐)아세트산
Figure pct00289
냉각된 (0 ℃) 클로로포름 (30 mL) 중의 2-(2,6-디플루오로-3-하이드록시-페닐)아세트산 (단계 1) (940 mg, 5. mmol)의 혼합물에 DIPEA (1.75 mL, 9.99 mmol)를 첨가하고 생성된 혼합물을 10 분 동안 격렬하게 교반했다. N-브로모석신이미드 (889 mg, 5. mmol)를 첨가하고 혼합물을 0 ℃에서 20 분 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (150 mL) 및 1M HCl (150 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 수성 부분을 EtOAc (150 mL)로 추출하고 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 10-100% MeCN/물 (+0.1% 포름산)로 용리하는 C18 역상 크로마토그래피에 의한 미정제 생성물의 정제는 표제 화합물을 옅은 주황색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.70 분; MS m/z 264.9, 266.9 = [M-H]- (100% @ 215 nm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.73 (br. s, 1H), 10.27 (br. s, 1H), 7.35 (dd, J = 8.8, 2.2 Hz, 1H), 3.59 (s, 2H).
단계 3: 벤질 2-(3-벤질옥시-4-브로모-2,6-디플루오로-페닐)아세테이트
Figure pct00290
DMF (25 mL) 중의 2-(4-브로모-2,6-디플루오로-3-하이드록시-페닐)아세트산 (단계 2)(896 mg, 3.35 mmol)의 용액에 K2CO3 (1391 mg, 10.06 mmol) 및 브로모메틸벤젠 (0.88 mL, 7.38 mmol)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (150 mL) 및 물 (150 mL)로 희석하고 상을 분리했다. 유기 부분을 염수 (150 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-25% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 생성물의 정제는 표제 화합물을 옅은 황색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.30 분; (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.56 (dd, J = 8.8, 2.1 Hz, 1H), 7.49 - 7.46 (m, 2H), 7.42 - 7.31 (m, 8H), 5.16 (s, 2H), 5.02 (s, 2H), 3.82 (s, 2H).
단계 4: 메틸 2-[2-벤질옥시-4-(2-벤질옥시-2-옥소-에틸)-3,5-디플루오로-페닐]-2-메틸-프로파노에이트
Figure pct00291
표제 화합물을 벤질 2-(3-벤질옥시-4-브로모-2,6-디플루오로-페닐)아세테이트 (단계 3) 및 (1-메톡시-2-메틸-프로프-1-엔옥시)-트리메틸-실란으로부터 중간체 U 단계 3과 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 A): Rt 4.66 분; MS m/z 469.3 = [M+H]+ (49% @ 215 nm)
단계 5: 2-(5,7-디플루오로-3,3-디메틸-2-옥소-벤조푸란-6-일)아세트산
표제 화합물을 메틸 2-[2-벤질옥시-4-(2-벤질옥시-2-옥소-에틸)-3,5-디플루오로-페닐]-2-메틸-프로파노에이트 (단계 4) 및 DCM 중의 1M BBr3으로부터 중간체 U 단계 4와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.82 분; (100% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (br. s, 1H), 7.39 (dd, J = 8.3, 1.2 Hz, 1H), 3.68 (s, 2H), 1.49 (s, 6H).
중간체 W
2-[4-[1-(아세톡시메틸)사이클로프로필]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세트산
Figure pct00292
단계 1: 1-벤질옥시-5-브로모-2-(클로로메틸)-4-플루오로-벤젠
Figure pct00293
냉각되고 (0 ℃), 교반되는 DCM (100 mL) 및 DMF (2.89 mL, 37.28 mmol) 중의 (2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)메탄올 (중간체 N, 단계 2)(11.6 g, 37.28 mmol)의 용액에 DCM (20 mL) 중의 티오닐 클로라이드 (5.41 mL, 74.56 mmol)를 적가하고 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 용매를 진공에서 제거하고 잔류물을 EtOAc (150 mL)로 희석하고 포화 NaHCO3 (3 x 100 mL)로 세척했다. 유기 부분을 염수 (2 x 100 mL)로 추가로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.43 분; (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.54 - 7.45 (m, 4H), 7.43-7.39 (m, 2H), 7.37-7.32 (m, 1H), 5.22 (s, 2H), 4.71 (s, 2H).
단계 2: 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)아세토니트릴
Figure pct00294
DMF (50 mL) 중의 1-벤질옥시-5-브로모-2-(클로로메틸)-4-플루오로-벤젠 (단계 1) (3.7 g, 11.23 mmol)의 용액에 소듐 시아나이드 (0.63 g, 12.91 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 생성된 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고 포화 소듐 카르보네이트 (100 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척했다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 황색 고체로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.09 분; MS m/z 318.0, 320.0 = [M+H]+ (97% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.54 - 7.48 (m, 2H), 7.48 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.45 - 7.37 (m, 3H), 7.38 - 7.32 (m, 1H), 5.22 (s, 2H), 3.90 (s, 2H).
단계 3: 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로프로판카르보니트릴
Figure pct00295
물 (1.3 mL) 중의 포타슘 하이드록사이드 (2209 mg, 39.37 mmol)의 혼합물에 2-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)아세토니트릴 (단계 2) (3.4 g, 10.62 mmol) 및 테트라부틸암모늄 브로마이드 (34.23 g, 106.2 mmol)를 첨가했다. 생성된 혼합물을 1,2-디브로모에탄 (1.83 mL, 21.24 mmol)으로 한 방울씩 처리했고 여기서 강한 발열 효과가 관찰되고 온도가 50 ℃에서 유지되었다 (외부 냉각). 50 ℃에서 밤새 교반한 후, 생성된 혼합물을 염수 (100 mL)로 희석하고 EtOAc (2 x 30 mL)로 추출했다. 조합된 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-60% EtOAc로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 생성물의 정제는 표제 화합물을 옅은 황색 고체로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.39 분; MS m/z 346.0, 348.0 = [M+H]+ (99% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.58 - 7.52 (m, 2H), 7.48 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.46 - 7.39 (m, 3H), 7.38 - 7.31 (m, 1H), 5.28 (s, 2H), 1.64 - 1.58 (m, 2H), 1.41 - 1.35 (m, 2H).
단계 4: [1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로프로필]메탄올
Figure pct00296
Figure pct00297
DCM (50 mL) 중의 1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로프로판카르보니트릴 (단계 3) (2 g, 5.78 mmol)의 교반되는 냉각된 (0 ℃) 용액에 헥산 중의 1M DIBAL (17.33 mL, 17.33 mmol)을 적가하고 반응 혼합물을 0 ℃에서 1 시간 동안 이후 실온에서 밤새 교반했다. 추가 헥산 중의 1M DIBAL 부분 (17.33 mL, 17.33 mmol)을 첨가하고 실온에서 밤새 교반을 계속했다. 반응을 1M HCl (20 mL)로 조심스럽게 퀀칭하고 30 분 동안 교반했다. 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축했다. 헵탄 중의 0-100% EtOAc에 이어서 EtOAc 중의 0-100% MeOH로 용리하는 실리카 상의 크로마토그래피에 의한 미정제 생성물의 정제는 표제 화합물을 갈색 오일로 제공했다.
LC-MS (방법 E): Rt 1.32 분; MS m/z 682.0, 684.9, 686.0 = [2M-H2O] (78% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.45 - 7.37 (m, 2H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 7.31 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H), 4.53 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 3.45 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 0.81 - 0.74 (m, 2H), 0.69 - 0.63 (m, 2H).
단계 5: [1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로프로필]메틸 아세테이트
Figure pct00298
DCM (10 mL) 중의 [1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로프로필]메탄올 (단계 4) (700 mg, 1.99 mmol)의 교반되는 용액에 DMAP (24 mg, 0.2 mmol), 아세트산 무수물 (0.38 mL, 3.99 mmol) 및 TEA (0.56 mL, 3.99 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다. 반응을 포화 수성 Na2CO3 용액 (20 mL)으로 퀀칭하고 유기 부분을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축하여 표제 화합물을 갈색 오일로 수득했다.
LC-MS (방법 G): Rt 1.22 분; (89% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.51 - 7.45 (m, 2H), 7.45 - 7.38 (m, 2H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 7.20 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 5.18 (s, 2H), 4.09 (s, 2H), 1.88 (s, 3H), 0.96 - 0.87 (m, 2H), 0.86 - 0.79 (m, 2H).
단계 6: 2-[4-[1-(아세톡시메틸)사이클로프로필]-5-벤질옥시-2-플루오로-페닐]아세트산
표제 화합물을 [1-(2-벤질옥시-4-브로모-5-플루오로-페닐)사이클로프로필]메틸 아세테이트 (단계 5) 및 THF 중의 0.5M 브로모-(2-tert-부톡시-2-옥소-에틸)징크로부터 중간체 M 단계 2와 유사하게 제조했다.
LC-MS (방법 G): Rt 0.98 분; MS m/z 395.2 = [M+Na]+ (82% @ 215 nm)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.45 (s, 1H), 7.52 - 7.47 (m, 2H), 7.45 - 7.38 (m, 2H), 7.37 - 7.30 (m, 1H), 7.05 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.57 (s, 2H), 1.88 (s, 3H), 0.92 - 0.86 (m, 2H), 0.85 - 0.75 (m, 2H).
생물학적 실시예
하기 실시예에서, 본 발명의 화합물은 출원인의 초기 출원 PCT/GB2019/050209의 실시예 93.4 및 91과 비교된다. 이들 화합물은 다음과 같다:
PCT/GB2019/050209의 실시예 93.4:
Figure pct00299
PCT/GB2019/050209의 실시예 91:
Figure pct00300
실시예 21 - 재조합 세포에서 TMEM16A 활성을 검출하기 위한 자동화된 전체 세포 패치 클램프 분석
세포 배양 및 준비
인간 TMEM16A (TMEM16Aabc 변이체; Dr Luis Galietta, Insituto Giannina, Italy)를 안정적으로 발현하는 Fisher 래트 갑상선 (FRT) 세포를 10% (v/v) 소 태아 혈청, 페니실린-스트렙토마이신 (10,000 U/mL/10000 μg/mL), G-418 (750μg/mL), L-글루타민 (2 mM) 및 소듐 비카르보네이트 용액 (7.5% v/v)으로 보충된 Coon's modification (Sigma)가 있는 Hams F-12 배지 중에서 T-75 플라스크에서 배양했다. ~90% 컨플루언스(confluence) 세포를 Detachin (BMS Biotechnology) 및 0.25% (w/v) 트립신-EDTA의 2:1 (v/v) 혼합물로 분리하여 실험을 위해 수확했다. 세포를 CHO-S-SFM II (Sigma), 25 mM HEPES (Sigma) 및 대두 트립신 억제제 (Sigma)로 구성된 배지를 사용하여 3.5 - 4.5 x 106 세포/mL의 밀도로 희석했다.
전체 세포 패치 클램프 기록
FRT-TMEM16A 세포는 자동화된 평면 패치 클램프 시스템 (Qpatch, Sophion)을 사용하여 전체 세포 패치 클램프되었다. 간단히 말해서, 고저항 (GOhm) 밀봉이 세포와 평면 기록 어레이 사이에 확립되면 패치가 패치 클램프 기법의 전체 세포 기록 구성을 확립하기 위해 흡입 펄스를 사용하여 파열되었다. 분석은 다음 용액을 사용했다 (모든 시약 Sigma):
세포내 용액 (mM): N-메틸-D-글루카민 130, CaCl2 18.2, MgCl2 1, HEPES 10, EGTA 10, BAPTA 20, Mg-ATP 2, pH 7.25, 수크로스로 325mOsm.
세포외 용액 (mM): N-메틸-D-글루카민 130, CaCl2 2, MgCl2 1, HEPES 10, pH 7.3, 수크로스로 320 mOsm.
세포내 용액은 최대 TMEM16A 매개 전류의 ~20% 활성화를 제공하기 위한 필요한 수준에서 (칼슘 이온에 대한 EC20) 세포내 칼슘을 완충한다. 세포는 -70mV의 유지 전위에서 전압 클램프되고 조합된 전압 단계 (+70 mV까지)/램프 (-90 mv에서 +90 mV까지)가 0.05 Hz에서 적용되었다. 전류 안정화 기간 후, 100% (v/v) DMSO에 가용화되고 후속적으로 세포외 용액에 희석된 테스트 화합물을 적용하여 누적 농도 반응 곡선을 생성했다. 각 농도의 테스트 화합물을 5 분 동안 인큐베이션한 후 다음 농도를 첨가했다. 최종 농도를 테스트한 후 과최고 농도의 공지된 활성 양성 조절제 또는 TMEM16A 억제제, CaCCinhA01 (Del La Fuente et al, 2008)을 첨가하여 분석의 상한 및 하한을 정의한다.
화합물 첨가 시 전류의 증가를 측정하고 이를 기준선 TMEM16A 전류 수준의 백분율 증가로 표현함으로써 화합물 활성을 정량화했다. 전류 증가 백분율이 각 농도에 대해 결정되었고, Qpatch 소프트웨어 또는 Graphpad Prism v6.05를 사용하여 데이터를 농도의 함수로서 플로팅하여 최대 효과의 50%를 제공하는 농도(EC50) 및 최대 효능(기준선 증가의 백분율)을 제공했다.
결과 계산 방법은 Qpatch TMEM16A 분석의 예시 추적을 보여주는 도 1에 도시된다. 도 1에서, IBL은 기준 전류와 같고, I[#1]은 테스트 화합물 농도 1 인큐베이션 기간 동안 피크 전류와 같다.
+70mV에서의 피크 TMEM16A 전류는 분석 기간에 걸친 시간의 함수로서 플로팅되었다. 기준 전류 (IBL)는 안정화 기간 후에 측정되었다. 각 화합물 첨가에 대한 전류의 증가는 인큐베이션 기간 동안 피크 전류를 취하고 이전 기록 기간의 전류를 차감한 다음 이를 기준 전류의 백분율(강화 %)로 표현하여 결정되었다. 도 1의 테스트 화합물 농도 1에 대해 이는 다음과 같다:
(I[#1] - IBL / IBL) x 100
테스트된 각 추가 농도에 대해 전류 증가는 전류를 이전 인큐베이션 기간으로부터 차감하고 기준 값을 정규화하여 결정되었다 - 도 1에서 테스트 농도 2에 대해 이는 다음과 같다:
(I[#2] - I[#1} / IBL) x 100
각 테스트 농도에 대한 값은 농도의 누적 함수로서 플로팅되었고 예를 들어 테스트 농도 2에 대해 이는 농도 1 플러스 농도 2 동안 측정된 피크 변화의 합계일 것이다.
실시예 화합물에 대해 획득된 결과는 표 2에 나타나고, 이로부터 본 발명의 화합물이 TMEM16A 전류 수준을 상당히 증가시킬 수 있음을 알 수 있다.
표 2: QPatch TMEM16A (최소 n = 2) EC 50
실시예
3.33uM 평균에서 강화 % QPatch TMEM16A EC 50 (μM)
PCT/GB2019/050209의 91 0.055
PCT/GB2019/050209의 93.4 476 0.064
1 247.69 0.038
1.1 118 0.026
1.2 149.26 0.045
1.3 380.31 0.104
1.3a 223.74 0.187
1.3b 70.906 0.042
1.4 200.04 0.037
1.5 147.57 0.065
1.6 120.9 0.040
1.6a 372.08 0.061
1.6b 219.92 0.327
1.7 202.06 0.025
2 243.21 0.064
2.1 350.22 0.466
2.2 355.83 0.150
2.3 72.13 0.052
2.4 356.44 0.069
2.5 111.8 결정되지 않음
2.6 270.23 0.030
2.7 309.32 0.219
2.8 301.84 0.077
2.9 294.99 0.149
2.10 434.25 0.030
2.11 390.42 0.064
2.11a 193.13 0.014
2.11b 144.37 0.049
2.12 209.38 0.042
2.13 339.06 0.037
2.14 121.65 0.027
2.15 412.89 0.279
2.16 227.3 0.076
3 352.65 0.132
4 185.57 0.029
5 335.29 0.043
6 513.47 0.099
7 83.6 0.068
7.1 433.05 0.015
8 240.3 0.046
9 378.14 0.088
10 310.23 0.052
10.1 250.35 0.057
10.2 251.62 0.052
11 207.85 0.043
12 150.15 0.118
12.1 405.58 0.052
12.2 141.53 0.238
12.3 97.234 0.238
12.4 341.6 0.214
13 195.86 0.221
14 489.99 0.033
14.1 232.64 0.045
15 113.02 0.014
15.1 190.16 0.041
15.2 194.81 0.036
15.3 249.64 0.036
15.4 226.33 0.060
16 74.547 0.019
16.1 213.82 0.181
16.2 294.78 0.115
16.3 139.6 0.407
16.4 280.47 0.018
17 374.02 0.093
18 314.59 0.268
19 244.19 0.046
20 294.73 0.100
20a 321.29 0.195
20b 283.84 0.063
대부분의 화합물은 PCT/GB2019/050209의 화합물 91 및 93.4와 유사한 EC50 값을 가지며 실제로 일부 경우에 활성이 개선됨을 알 수 있다.
실시예 22 - 물리화학적 분석
동적 용해도 결정
테스트 화합물 (10 μL; 20 mM DMSO 용액)을 멸균수 (190 μL)에 삼중으로 첨가하고 실온에서 300 rpm으로 진탕했다. 90 분 후 테스트 화합물을 원심분리기에 의해 여과하여 (3000 rpm으로 5 분) 수성 여과액을 수득했다. 아세토니트릴 (20 μL)을 깨끗한 96-웰 UV/VIS 분석 플레이트에 분배하고 수성 여과액 (80 μL)을 추가하고 다음 파장에서 Molecular Devices SPECTRAmax® 플러스 마이크로플레이트 리더를 사용하여 테스트 화합물 농도에 대해 플레이트를 분석했다: (280, 300, 320, 340, 360, 800 nm). 수성 여과액 (10 μL)을 95% 물 5 % DMSO (90 μL)에 첨가하고 플레이트를 10 분 동안 진탕하여 두 번째 희석 플레이트 (10-배)를 제조했다. 이후 희석된 여과액 (80 μL)을 아세토니트릴 (20 μL)에 첨가하고 플레이트를 이전과 같이 분석했다. 획득된 결과는 각각의 테스트 샘플에 대해 준비된 표준 보정 곡선 및 참조 대조 화합물의 분석에 의해 제어된 결과에 대해 정량화되었다 (케토코나졸, 니페디핀, β-에스트라디올 및 디페닐이미다졸)
Log D (pH7.4 셰이크 플라스크)
모든 화합물은 각각 초기에 5mMolar로 DMSO에 용해된 4 개의 테스트 화합물의 혼합물을 포함하는 '카세트'에서 테스트되었다. 포스페이트 버퍼 (1 M)를 탈이온수로 20 mM으로 희석하고 인산 또는 소듐 하이드록사이드로 pH 7.4로 조정했다. 1-옥탄올 및 포스페이트 버퍼 (20 mM)를 텀블링(tumbling)에 의해 밤새 포화시켰다. 두 상을 분리 깔때기를 사용하여 분리했다. 5 μL의 5 mM 화합물 카세트를 96-웰 플레이트에서 495 μL의 옥탄올-포화 버퍼 및 495 μL 버퍼 포화 옥탄올에 첨가했다 (최고 농도 50 μM). 플레이트를 1시간 동안 진탕하고 25 ℃에서 5 분 동안 원심분리했다. 각 상의 200 μL를 별도의 플레이트로 옮겼다. 교차 오염을 피하기 위해 먼저 옥탄올 층을 샘플링했다. 5 μL의 용액을 495 μL의 퀀치 용액*으로 옮겼다 (최대 농도 0.5 μM). 또한, 40 μL의 버퍼 용액을 360 μL의 퀀치 용매 (최대 농도 5 μM)에 첨가했다. 샘플은 LC-MS/MS에 의해 분석되었다. 각 화합물에 대한 보정 곡선 및 대조 화합물인 설프라이드, 디클로페낙, 클로르프로마진 및 타목시펜에 대한 벤치마킹.
*퀀치 용액은 0.1% 포름산 및 이미프라민/라베탈롤, 200 nM을 포함하는 아세토니트릴: 아세토니트릴: 물의 1:3:1 혼합물 (v/v/v)이었다.
Log D 및 동역학적 용해도 분석에 대한 결과는 표 3에 나타난다. pH 7.4에서 5 이하의 mLog D 값을 갖는 화합물은 약제학적 제형에 대해 일반적으로 충분하게 가용성이다. 표 3은 예시 화합물의 mLog D 값이 모두 이 범위 내에 있음을 보여준다. mLog D 값은 4.2 이하인 것이 바람직하고 거의 모든 실시예 화합물이 이 범위에 속한다.
표 3: Log D 및 고처리량 (HT) 동적 용해도 데이터
실시예 mLogD (pH 7.4) 동적 용해도 (mg/ml)
PCT/GB2019/050209의 93.4 >4.1 0.037
PCT/GB2019/050209의 91 >4.5 0.01
1 >4.2 n/d
1.1 >4.0 0.006
1.2 >4.5 0.003
1.3 3.9 0.035
1.3a >4.0 0.032
1.3b 4.0 0.033
1.4 >4.1 n/d
1.5 3.7 0.011
1.6 3.8 0.074
1.6a 3.8 0.069
1.6b 3.6 0.096
1.7 >4 n/d
2 3.1 0.152
2.1 2.4 0.32
2.2 >4.2 0.042
2.3 2.9 0.069
2.4 3.7 n/d
2.5 2.7 0.327
2.6 3.2 0.142
2.7 3.0 0.164
2.8 3.6 0.068
2.9 2.5 0.057
2.10 4.2 n/d
2.11 3.6 0.116
2.11a n/d 0.131
2.11b 3.3 0.118
2.12 3.2 0.027
2.13 3.3 0.067
2.14 n/d 0.099
2.15 2.7 0.081
2.16 2.7 0.047
3 3.9 n/d
4 3.8 0.029
5 >4.0 0.017
6 >4.0 0.012
7 3.3 0.167
7.1 >4.2 0.018
8 >4.0 0.037
9 3.5 0.072
10 >4.0 n/d
10.1 3.7 0.256
10.2 3.7 0.011
11 3.7 0.12
12 2.4 0.044
12.1 3.1 0.218
12.2 2.6 0.296
13 2.7 0.207
14 3.9 0.09
14.1 3.4 0.154
15 3.5 0.089
15.1 >4.0 0.051
15.2 >4.2 0.044
15.3 3.4 0.164
15.4 3.1 0.207
16 3.5 0.073
16.1 3.2 0.225
16.2 2.1 0.136
16.3 2.5 0.338
16.4 3.6 0.075
17 3.3 0.292
18 3.5 0.014
19 3.0 0.128
20 2.3 0.381
20a 2.7 n/d
20b 2.8 n/d
n/d = 결정되지 않음
실시예 23 - 투과율 분석
PAMPA
평행 인공막 투과율 분석(Parallel artificial membrane permeability assay, PAMPA) 투과율 데이터는 생물학적 지질막을 통한 수동 투과율을 예측하기 위한 유용한 도구이다. 이 분석에 의해 결정된 높은 수동 투과율 (>10 x10-6 cm/s)은 화합물이 경구 투여에 적합하게 만드는 흡수 특성을 가질 가능성이 있음을 나타낸다. 수동 투과율 (>0.1 및 <10 x10-6 cm/s)은 여전히 양호한 흡수 특성을 제공할 수 있다. 표 4의 많은 예는 10 x10-6 cm/s보다 높은 Pe를 갖는다.
모든 테스트 화합물은 DMSO에서 20 mM로 제형화되었다. 분석에서 모든 화합물의 최종 농도는 200 μM이었고 최종 DMSO 농도는 1%였다. 다음의 참조 대조군이 사용되었다: 안티피린, 카르바마제핀, 프로프라놀롤, 라니티딘 및 케토프로펜.
테스트 화합물을 pH 5.0, 6.2 및 7.4의 시스템 버퍼에서 200 μM으로 희석했다. 용액을 여과하고 150 μL를 고감도 96 웰 UV 플레이트로 옮겼다. 이는 참조 플레이트로서 UV에 의해 분석되었다. 200 μM 용액의 200 μL 샘플을 PAMPA 플론 샌드위치 플레이트 시스템의 '도너' 플레이트로 옮겼다. 200 μL의 억셉터 싱크 버퍼를 웰 필터를 가로질러 GIT-O 지질 용액으로 이전에 처리된 '억셉터' 플레이트로 옮겼다. 도너 및 억셉터 플레이트를 끼우고 실온의 습한 환경에서 16 시간 동안 유지했다. 인큐베이션 완료 시 도너 및 억셉터 플레이트를 분리했다. 150 μL의 용액을 각각의 도너 및 억셉터 PAMPA 샌드위치 플레이트로부터 UV에 의한 분석을 위해 고감도 96 웰 UV 플레이트로 옮겼다. 수동 투과율 (Pe 10-6 cm/초)은 테스트된 각 화합물에 대해 결정되었다. 분석 기능을 보장하기 위해 대조 화합물을 과거 및 문헌 값과 비교했다. 결과는 표 4에 나타난다.
표 4 - PAMPA 분석 데이터
실시예
PAMPA Pe (pH 7.4) (x10 -6 cm/s) PAMPA Pe (pH 6.2) (x10 -6 cm/s) PAMPA Pe (pH 5.0 (x10 -6 cm/s)
PCT/GB2019/050209의 93.4
 36.4 38.4 30.9
PCT/GB2019/050209의 91
 n/d n/d n/d
1 37.0 34.6 32.0
1.1 n/d n/d n/d
1.2 n/d n/d n/d
1.3 48.8 43.9 37.3
1.3a n/d 37.9 28.9
1.3b 37.9 33.7 28.2
1.4 32.9 37.7 n/d
1.5 44.1 46.2 41.7
1.6 0.1 0.1 0.1
1.6a n/d n/d n/d
1.6b 11.8 18.9 n/d
1.7 n/d n/d n/d
2 15.6 15.7 22.2
2.1 14.3 13.5 14.1
2.2 1.3 6.9 26.9
2.3 0.9 4.4 19.1
2.4 n/d n/d n/d
2.5 19.7 18.4 12.6
2.6 18.3 24.8 25.9
2.7 11.4 13.6 5.7
2.8 22.7 21.4 15.6
2.9 7.4 9.1 8.8
2.10 30.9 17.9 0.1
2.11 5.8 5.1 5.0
2.11a 16.6 16.4 16.9
2.11b 18.4 17.0 16.9
2.12 n/d n/d n/d
2.13 15.3 19.8 33.0
2.14 28.7 26.7 30.0
2.15 3.3 3.7 4.1
2.16 11.5 16.4 16.0
3 n/d n/d n/d
4 40.2 39.2 39.0
5 27.7 39.1 31.2
6 n/d n/d n/d
7 20.1 20.6 24.1
7.1 n/d 6.2 2.9
8 0.8 n/d 0.1
9 28.8 19.4 14.0
10 n/d n/d n/d
10.1 n/d n/d n/d
10.2 29.4 n/d 28.3
11 n/d n/d 9.7
12 12.5 n/d 13.3
12.1 12.1 11.7 11.9
12.2 1.6 0.8 1.0
13 11.1 12.6 12.0
14 1.7 1.1 1.0
14.1 2.9 2.8 2.2
15 20.1 15.1 15.3
15.1 12.3 13.4 12.6
15.2 15.7 12.0 14.2
15.3 16.6 14.0 13.3
15.4 14.0 14.3 12.2
16 21.7 17.3 17.4
16.1 14.1 15.9 2.2
16.2 9.9 9.6 8.9
16.3 9.2 7.5 6.2
16.4 14.0 13.5 12.5
17 0.9 0.3 0.2
18 n/d 0.1 n/d
19 16.1 15.5 14.2
20 10.2 9.0 12.8
20a 10.7 11.7 10.6
20b n/d n/d n/d
n/d = 결정되지 않음
Caco-2 투과율 분석
Caco2 투과율 데이터는 화합물의 투과율 및 P-당단백질에 의한 이의 유출 가능성의 척도를 제공한다. 일반적으로, 낮은 유출 경향 (비율 <10)과 조합된 높은 정단 대 기저측 투과율 (>1 x10-6 cm/s)은 화합물이 경구 흡수에 대해 양호한 잠재력을 가짐을 나타낼 수 있다. 따라서 이 분석은 어떤 화합물이 경구 투여에 적합할 것인지에 대한 표시를 제공한다. 표 5의 많은 예는 투과율 >1 x10-6 cm/s 및 유출 비율 <10을 보여준다.
Caco-2 세포를 ATCC로부터 구입하고 계대하여 세포 은행을 생성했다. 세포는 20 회 계대 후에 사용되지 않았다.
모든 테스트 및 참조 화합물 (메토프롤롤 (수동 투과율) 및 아테놀롤 (pgp 기질))은 DMSO에서 20 mM으로 제형화되었다.
96-웰 플레이트에 DMEM, 10% FBS, 1% NEAA, 1% 펜/스트렙에서 9x103 Caco-2 세포/웰로 시딩하고 95% 공기 및5% CO2의 매우 습한 분위기에서 37℃로 유지했다. 플레이트는 21일째에 사용할 준비가 되었다.
10 mM DMSO 스톡 테스트 화합물을 DMSO에서 1 mM으로 희석했다. 각 테스트 화합물의 두 복제물이 모든 분석에 포함되었다. 도너 용액의 최종 농도는 10 μM이었다.
세포를 세척하고, 루시퍼 옐로우 (LY) 스톡 용액, 리시버 용액 및 수송 분석을 위한 블랭크를 생성하기 위해 분석 수송 버퍼 (25mM HEPES/Hanks Balanced Salt Solution (HBSS), pH7.4)가 준비되었다다. LY의 최종 농도는 10 μM이었다. 기저측 웰을 250 μL의 10 μM 투여 약물 용액 또는 250 μL 수송 버퍼로 처리했다. 정단 웰을 75 μL 약물 투여 용액 또는 75 μL 수송 버퍼로 처리했다. 두 플레이트를 함께 끼우고 세포를 50 rpm, 37 ℃, 0% CO2에서 진탕하면서 테스트 화합물과 함께 2 시간 동안 인큐베이션했다.
각 화합물에 대해 보정 곡선을 작성하고; DMSO 스톡 용액을 DMSO에서 300 μM으로부터 100 μM, 30 μM, 10 μM, 3 μM, 1 μM 및 0.3 μM로 연속으로 희석했다. 각 농도의 2 μL를 198 μL의 샘플 퀀치 용액 (500 nM 톨부타미드를 포함하는 50% 아세토니트릴)에 희석했다. 이후 50 μL의 각 보정 용액을 50 μL 투여 버퍼 (LY를 포함하는 변성된 HBSS)에 희석했다. 마지막으로 이 플레이트를 Janus 로봇을 사용하여 로봇 희석 퀀치 용액 (250 nM 톨부타미드를 포함하는 35% 아세토니트릴)에서 1:10으로 희석했다.
2 시간 인큐베이션 후, 50 μL의 샘플을 각 웰(정단 및 기저측)로부터 수거하고 T2 샘플 플레이트에 첨가했다. 루시퍼 옐로우 형광은 XFluor 소프트웨어를 특징으로 하는 Spectrafluor Plus를 사용하여 분석되어 막 무결성을 결정했다.
형광은 다음 파장에서 측정되었다:λ 여기 (nm), λ 방출 (nm): 485, 535. 이득은 각 개별 분석에 대해 적절하게 설정되었다.
형광 플레이트 판독 후, 50 μL 샘플 퀀체 용액을 T2 샘플 플레이트에 첨가했다. Janus 로봇을 사용하여 플레이트를 불투명 384-웰 플레이트로 1:10 및/또는 1:100 희석했다. 1:100 희석 트랜스퍼가 1:10 희석으로부터 직접 순차적으로 생성되었다. 모든 희석액은 로봇 희석 퀀치 용액 (250 nM 톨부타미드를 포함하는 35% 아세토니트릴)을 사용하여 생성되었다. 모든 샘플은 LC-MS/MS에 의해 분석되었다.
획득된 결과는 각각의 테스트 샘플에 대해 준비된 표준 보정 곡선 및 참조 대조 화합물의 분석에 의해 제어된 결과에 대해 정량화되었다. 결과는 표 5에 나타난다.
표 5 - Caco-2 투과율 데이터
실시예 Caco-2 A-B Papp (x10 -6 cm/s) Caco-2 B-A Papp (x10 -6 cm/s) Caco-2 유출 비율
PCT/GB2019/050209의 93.4 < 30% < 30% n/d
PCT/GB2019/050209의 91 불량한 보정 곡선 불량한 보정 곡선 n/d
1.2 n/d n/d n/d
1.3 2.8 2.5 0.9
1.3a n/d n/d n/d
1.3b n/d n/d n/d
1.4 n/d n/d n/d
1.5 n/d n/d n/d
1.6 0.6 4.7 8.4
1.6a 0.6 3.1 5.6
1.6b 0.6 6.2 9.6
1.7 n/d n/d n/d
2 3.2 5.7 1.8
2.1 2.3 12.1 5.2
2.2 n/d n/d n/d
2.3 n/d n/d n/d
2.4 n/d n/d n/d
2.5 n/d n/d n/d
2.6 2.2 5.3 2.4
2.7 n/d n/d n/d
2.8 3.7 5.7 1.6
2.9 0.5 5.5 10.0
2.10 n/d n/d n/d
2.11 4.7 4.7 1.0
2.11a n/d n/d n/d
2.11b 2.4 3.3 1.4
2.12 6.5 6.5 1.0
2.13 2.4 6.1 2.6
2.14 n/d n/d n/d
2.15 0.2 8.9 37.1
2.16 2.0 9.0 4.6
3 n/d n/d n/d
4 n/d n/d n/d
5 n/d n/d n/d
6 n/d n/d n/d
7 4.5 6.7 1.5
7.1 n/d n/d n/d
8 n/d n/d n/d
9 n/d n/d n/d
10 n/d n/d n/d
10.1 n/d n/d n/d
10.2 n/d n/d n/d
11 2.4 5.5 2.3
12 0.0 6.9 149.7
12.1 0.1 6.0 52.2
12.2 n/d n/d n/d
13 0.9 8.8 9.5
14 1.8 4.9 2.8
14.1 2.1 6.0 2.8
15 2.0 8.5 4.3
15.1 1.1 6.5 6.1
15.2 n/d n/d n/d
15.3 0.4 7.2 19.8
15.4 1.2 8.7 7.2
16 0.9 7.0 8.1
16.1 0.5 13.7 29.9
16.2 1.0 11.9 11.8
16.3 0.6 11.5 18.9
16.4 n/d n/d n/d
17 0.4 7.8 20.7
18 2.8 7.7 2.8
19 3.9 6.5 1.7
20 1.4 9.4 6.7
20a n/d n/d n/d
20b n/d n/d n/d
n/d = 결정되지 않음
실시예 24 - 대사 안정성 분석
마이크로솜 안정성
마이크로솜(인간)을 Bioreclamation로부터 얻었다.
모든 테스트 및 참조 대조군 화합물 (랄록시펜, 디클로페낙, 테르페나딘, 프로프라놀롤, 덱스트로메토르판 및 메토프롤롤)을 용해시켜 100 μM 스톡 (최종 농도; 91.5% 아세토니트릴: 8.5% DMSO)을 생성했다. 인큐베이션에서 최종 테스트 화합물 농도는 1 μM (< 0.1 % DMSO)이었다.
분석 버퍼는 조합에 의해 포타슘 포스페이트 용액 1 및 2로부터 제조되어 37 ℃에서 pH 7.42 용액을 형성한다. 용액 1: 1 L 탈이온수에 용해된 17.4 g 포타슘 포스페이트 이염기 무수물 (K2HPO4, 0.1 M). 용액 2: 2 mM 마그네슘 클로라이드가 있는 1 L 탈이온수 pH7.4에 용해된 13.6 g 포타슘 포스페이트 일염기 무수물 (KH2PO4, 0.1 M). NADPH (10 mM)는 탈이온수에서 제조된다.
마이크로솜(모든 종)을 -80 ℃로부터 수거하여 37 ℃에서 해동했다. 마이크로솜을 분석 버퍼에 희석하여 0.5 mg/mL의 최종 단백질 농도 및 1 mM NADPH를 달성했다.
다음 절차가 96 웰 포맷에서 Perkin Elmer Janus 로봇 플랫폼에서 완료되었다: 마이크로솜 인큐베이션 플레이트를 300 rpm의 히터 쉐이커로 옮기고 용액을 37 ℃로 10 분 사전 가온 동안 가열했다. 0 및 45 분의 보조인자 없는 대조군 및 각 테스트 화합물의 하나의 복제물이 모든 분석에 포함되었다. 마이크로솜을 분석 전체에 걸쳐 300 rpm으로 설정된 진탕기에서 37 ℃에서 인큐베이션했다. 각 시점에서 (0, 5, 15, 30, 45 분) 50 μL의 샘플을 96-웰로부터 제거하고 200 μL의 퀀치 용액 (0.1% 포름산 및 이미프라민/라베탈롤, 200 nM을 포함하는 아세토니트릴)에 첨가했다. 샘플을 Janus Robot을 사용하여 물로 1:1 희석하고 LC-MS/MS에 의해 분석했다. 획득된 결과는 각각의 테스트 샘플에 대해 준비된 표준 보정 곡선 및 참조 대조 화합물의 분석에 의해 제어된 결과에 대해 정량화되었다.
PCT/GB2019/050209의 화합물 91 및 93.4에 대한 인간 마이크로솜 제거율은 각각 32.8 및 51 μL/분/mg이다. 그러나 경구 투여에 의도되는 화합물의 경우, 마이크로솜 제거율이 현저히 낮은 것이 유리한데, 이는 낮은 초회 통과 제거를 달성할 가능성을 개선하여, 경구 생체이용률을 향상하고 화합물의 전신 반감기를 증가시키고, 효능에 필요한 용량을 감소시키고 및/또는 화합물을 1일 1회 또는 2회 투여에 적합하게 만들기 때문이다. 몇몇 실시예 화합물은 실제로 표 6에 나타난 바와 같이 PCT/GB2019/050209의 화합물 91 및 93.4보다 상당히 낮은 제거율을 가졌다.
표 6: 마이크로솜 제거 데이터
실시예
인간 마이크로솜 Cl int (μL/분/mg)
PCT/GB2019/050209의 93.4 32.8
PCT/GB2019/050209의 91 51.0
1 43.7
1.1 16.6
1.2 126.2
1.3 12.0
1.3a 13.9
1.3b 12.4
1.4 53.0
1.5 18.0
1.6 20.5
1.6a 23.9
1.6b 20.7
1.7 20.2
2 <10.0
2.1 <10.0
2.2 249.7
2.3 232.8
2.4 106.7
2.5 500.0
2.6 10.7
2.7 <10.0
2.8 <10.0
2.9 31.6
2.10 29.9
2.11 11.9
2.11a 13.8
2.11b 10.9
2.12 <10.0
2.13 11.7
2.14 n/d
2.15 29.5
2.16 <10.0
3 15.4
4 14.5
5 24.7
6 14.5
7 18.9
7.1 44.4
8 15.7
9 <10.0
10 31.6
10.1 22.5
10.2 24.7
11 36.3
12 <10.0
12.1 15.5
12.2 <10.0
13 <10.0
14 <10.0
14.1 12.7
15 <10.0
15.1 10.4
15.2 <10.0
15.3 <10.0
15.4 <10.0
16 <10.0
16.1 135.7
16.2 <10.0
16.3 63.7
16.4 <10.0
17 <10.0
18 <10.0
19 <10.0
20 12.0
20a <10.0
20b <10.0
n/d = 결정되지 않음.
간 안정성
냉동보존된 간세포 (인간)를 Bioreclamation로부터 얻었다.
테스트 화합물 및 참조 대조군 (랄록시펜, 디클로페낙, 테레나딘, 프로프라놀롤, 덱스트로메토르판 및 메토프롤롤)을, 5 μL의 4 mM (DMSO)을 195 μL의 50:50 DMSO:간세포 버퍼에 희석하여 제조된 100 μM 스톡에 용해시켰다. 인큐베이션에서 최종 테스트 화합물 농도는 1 μM이었다.
간세포 버퍼가 제조되었다 (페놀 레드 및 Glutamax™, 15 mM HEPES를 포함하는 Williams E 배지, 37 ℃로 가온됨, NaOH를 사용하여 pH7.4). 간세포 (모든 주요 종)를 액체 질소로부터 제거하고, 수조에서 해동하고, 50 mL의 사전 가온된 Cryopreserved Hepatocyte Recovery Media (LifeTechnologies)로 따라내고 원심분리했다. 상청액 분획을 제거하고, 세포를 간세포 버퍼에 재현탁하고 트리판 블루 배제에 의해 계수했다. 모든 분석에 대해 >80%의 세포 생존률이 필요했다.
세포를 1 x 106/mL로 재현탁하고 198 μL 세포 현탁액을 각 96-웰에 첨가했다. 2 μL의 100 μM 화합물 스톡 용액을 관련 웰에 첨가하여 인큐베이션을 개시했다. 무세포 대조군 및 각 테스트 화합물의 두 복제물이 모든 분석에 포함되었다. 세포를 300 rpm로 설정된 진탕기에서 37 ℃에서 인큐베이션했다. 각 시점에서 (0, 15, 30, 45, 60, 90 분) 20 μL의 샘플을 96-웰로부터 제거하고 80 μL의 퀀치 용액 (0.1% 포름산 및 이미프라민/라베탈롤, 200 nM을 포함하는 아세토니트릴)에 첨가했다. 샘플을 Janus Robot을 사용하여 물로 1:1 희석하고 LC-MS/MS에 의해 분석했다. 획득된 결과는 각각의 테스트 샘플에 대해 준비된 표준 보정 곡선 및 참조 대조 화합물의 분석에 의해 제어된 결과에 대해 정량화되었다.
결과는 표 7에 나타난다. 다시 말해서, 경구 투여에 의도된 화합물은 낮은 시험관내 간세포 제거를 갖는 것이 유리한데, 이는 낮은 초회 통과 제거를 달성할 가능성을 개선하고, 결국 경구 생체이용률을 향상시켜, 효능에 대한 용량 요구량을 낮추고 전신 반감기를 증가시켜, 화합물을 잠재적으로 1일 1회 또는 2회 투여에 적합하게 만들기 때문이다. 하기 표 5는 인간 간세포 제거 데이터가 PCT/GB2019/050209의 화합물 91 및 93.4에 대한 데이터와 비슷하거나, 일부 경우에는 더 유리한 실시예 화합물을 보여준다.
표 7: 간세포 제거 데이터
실시예 인간 간세포 Cl int (μL/분/백만 세포)
PCT/GB2019/050209의 93.4 24.1
PCT/GB2019/050209의 91 15.6
1 26.1
1.1 18.0
1.2 38.7
1.3 22.4
1.3a 27.2
1.3b 23.4
1.4 20.8
1.5 20.0
1.6 28.2
1.6a 20.7
1.6b 30.7
1.7 11.4
2 6.6
2.1 7.9
2.2 125.3
2.3 72.0
2.4 69.8
2.5 120.1
2.6 7.1
2.7 45.4
2.8 12.4
2.9 10.4
2.10 11.3
2.11 10.3
2.11a 15.5
2.11b 6.3
2.12 16.9
2.13 6.3
2.14 13.1
2.15 3.2
2.16 5.8
3 65.3
4 19.6
5 33.3
6 14.0
7 14.9
7.1 149.6
8 20.9
9 24.5
10 15.8
10.1 10.8
10.2 13.9
11 131.6
12 3.7
12.1 7.3
12.2 7.8
13 7.8
14 8.3
14.1 9.1
15 7.8
15.1 13.3
15.2 9.9
15.3 8.6
15.4 6.7
16 8.1
16.1 15.2
16.2 5.2
16.3 5.8
16.4 12.5
17 7.2
18 6.9
19 10.5
20 6.7
20a 7.2
20b 32.2
참고문헌
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Claims (27)

  1. 모든 호변이성질체 형태, 모든 거울상이성질체, 동위원소 변이체, 및 이들의 염 및 용매화물을 포함하는 일반식 (I)의 화합물:
    Figure pct00301

    (I)
    여기서:
    R1은 메틸, 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 클로로디플루오로메틸, 디클로로플루오로메틸, 에티닐 및 CN으로부터 선택되고; 또는
    R2 및 R3이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R1 기에 추가하여, OH, 할로, 메틸 또는 CH2OH로 치환된 4- 내지 6-원 카르보사이클릭 고리를 형성하는 경우, R1은 또한 H일 수 있고; 또는
    R2 및 R3이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R1 기를 제외하고 비치환인 4- 내지 6-원 카르보사이클릭 고리를 형성하는 경우; R1은 또한 CH2OH일 수 있고;
    R2는 메틸 및 CH2OH로부터 선택되고;
    R3은 H 및 메틸로부터 선택되고; 또는
    R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 10-원 카르보사이클릭 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고, 이들 중 하나는, R1 기에 추가하여, OH, 할로, C1-4 알킬, 하나 이상의 OH 치환기로 치환된 C1-4 알킬, 및 C1-4 할로알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환되고; 또는
    R1, R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 결합하여 OH, 할로, C1-4 알킬 및 C1-4 할로알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 가교 카르보사이클릭 또는 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고;
    R4는 H 또는 할로이고;
    R5 및 R7 각각은 H, 할로, C1-3 알킬 및 C1-3 할로알킬로부터 독립적으로 선택되고;
    R6은 H, 할로, CN 및 할로 및 OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 C1-4 알킬로부터 선택되고;
    R8은 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고;
    R9는 OH, CH2OH 또는 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고; 또는
    R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R10 기에 추가하여, OH, F 및 CH2OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리; 또는 하나 또는 둘의 할로겐 치환기로 임의로 치환된 에테닐 기를 형성하고;
    R10은 H, CN, OH, OH로 임의로 치환된 사이클로알킬, 및 할로, OH 및 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릭 기로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 C1-4 알킬로부터 선택되고, 이들 중 하나는 OH로 임의로 치환되고; 또는
    R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 OH, F 및 CH2OH로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하고;
    단:
    i. R5 및 R7이 H이고 R6이 H 또는 F인 경우, R1, R2, R3, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이 아니고;
    ii. R2, R3, R8, R9 및 R10이 모두 메틸인 경우, R5, R6 및 R7은 모두 H가 아니고;
    iii. R1이 CN이고 R2 및 R3이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 10-원 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하는 경우, R8, R9 및 R10은 모두 메틸이 아니고;
    iv. R9 및 R10은 둘 모두 OH가 아님.
  2. 제1항에 있어서:
    R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R10 기에 추가하여, 하나 이상의 CH2OH 치환기 및 임의로 OH 및 F로부터 선택된 하나 이상의 추가 치환기로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하고; 또는
    R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R10 기에 추가하여, OH 및 F로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하고; R10은 CN 또는 OH, OH로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 기 및 OH로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 헤테로사이클릭 기로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-4 알킬이고; 또는
    R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 하나 또는 둘의 할로겐 치환기로 임의로 치환된 에테닐 기를 형성하고; 또는
    R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 하나 이상의 CH2OH 치환기 및 임의로 OH 및 F로부터 선택된 하나 이상의 추가 치환기로 치환된 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하는 화합물.
  3. 제2항에 있어서:
    R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 R10 기를 제외하고 비치환인 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고; R10은 CN 및 CH2OH로부터 선택되고; 또는
    R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 CH2OH로 치환된 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하는 화합물.
  4. 제1항에 있어서:
    R8은 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고;
    R9는 OH, CH2OH 또는 메틸 또는 에틸이고, 이들 중 하나는 하나 이상의 할로겐 치환기로 임의로 치환되고; 또는
    R8 및 R9 는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R10 기에 추가하여, OH 및 F로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하고, R10은 H, OH 또는 하나 이상의 할로 치환기로 임의로 치환된 C1-4 알킬이고; 또는
    R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 OH 및 F로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 5- 내지 8-원 접합 또는 가교 카르보사이클릭 고리 시스템을 형성하는 화합물.
  5. 제4항에 있어서:
    R8은 메틸 또는 에틸이고, R9는OH 또는 CH2OH이고 R10은 메틸 또는 에틸이고;
    R8은 메틸 또는 에틸이고, R9는 메틸 또는 에틸이고, R10은 OH 또는 OH로 치환된 C1-4 알킬이고; 또는
    R8, R9 및 R10은 모두 메틸인 화합물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 에티닐 또는 CN인 화합물.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서:
    R2는 메틸 및/또는 R3은 H 또는 메틸이고; 또는
    R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, R1에 추가하여, OH, 할로, C1-4 알킬 및 C1-4 할로알킬로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의로 치환된 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리 시스템을 형성하고; 또는
    R1은 H이고 R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 OH로 치환된 4- 내지 6-원 카르보사이클릭 고리를 형성하고; 또는
    R1은 트리플루오로메틸이고; R2 및 R3은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 R1을 제외하고 비치환인 사이클로프로필 고리를 형성하는 화합물.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서:
    R4는 H이고; 및/또는
    R5 및 R7 각각은 H이고; 및/또는
    R6은 H, 할로, CN, CH3, CF3, CHF2, CH2F 또는 CH2OH인 화합물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, R8은 메틸 또는 에틸, 특히 메틸이고; R9는 메틸, CH2OH 또는 OH이고; 또는
    R8 및 R9는 각각 독립적으로 메틸 또는 에틸이고; 또는
    R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 산소 포함 헤테로사이클릭 고리를 형성하고, 여기서 고리는 R10 모이어티를 제외하고 치환되지 않고 사이클로알킬 고리 및 단일 고리 산소 원자를 갖는 헤테로사이클릭 고리로부터 선택되는 화합물.
  10. 제1항 또는 제4항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, R10은 CN, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 비치환 메틸 또는 플루오로, OH 및 3- 내지 6-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴 기로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환된 메틸로부터 선택되는 화합물.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, R8 및 R9는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 또는 옥세타닐 고리를 형성하고, 이는 R10 기를 제외하고 치환되지 않거나 R10 기에 추가하여 단일 CH2OH 치환기를 갖고; R10은 메틸, CH2OH, 트리플루오로메틸 또는 시아노인 화합물.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, R8, R9 및 R10은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 비사이클로[1.1.1]펜탄, 비사이클로[2.1.1]헥산 또는 비사이클로[2.2.1]헵탄과 같은 가교 고리 시스템을 형성하고, 여기서 고리는 치환되지 않거나 단일 CH2OH 치환기로 치환되는 화합물.
  13. 제1항에 있어서, 다음으로부터 선택되는 화합물:
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-메틸사이클로프로필)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.1);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-에티닐사이클로펜틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.2);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.3);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1R)-1-시아노에틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.3a/b);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1S)-1-시아노에틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.3 a/b);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.4);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노사이클로프로필)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.5);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.6);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1R)-1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.6 a/b);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[(1S)-1-시아노-2-하이드록시-1-메틸-에틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.6 a/b);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 1.7);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2);
    N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.1);
    N-tert-부틸-4-[[2-[4-(1-시아노-1-메틸-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.2);
    4-[[2-[4-(1-시아노-1-메틸-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.3);
    N-tert-부틸-4-[[2-[4-(1-시아노사이클로프로필)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸] 아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.4);
    N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[4-(1,1-디메틸-2-모르폴리노-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.5);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.6);
    N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2,2,2-트리플루오로-1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.7);
    4-[[2-[4-(1-사이클로프로필-1-하이드록시-에틸)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.8);
    4-[[2-[4-(4-시아노테트라하이드로피란-4-일)-2-플루오로-5-하이드록시-페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.9);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[2-(트리플루오로메틸)옥세탄-2-일]페닐] 아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.10);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-프로필)페닐] 아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.11);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1S)-1-하이드록시-1-메틸-프로필]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.11 a/b);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1R)-1-하이드록시-1-메틸-프로필]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.11 a/b);
    4-[[2-[5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)-2-메틸-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.12);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(하이드록시메틸)사이클로부틸]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.13);
    N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[2-(트리플루오로메틸)옥세탄-2-일]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.14);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[4-(하이드록시메틸)테트라하이드로피란-4-일]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.15);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(하이드록시메틸)사이클로프로필]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 2.16);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-플루오로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-5-플루오로-피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 3);
    N-(1-시아노사이클로프로필)-4-[[2-[2-듀테리오-6-플루오로-3-하이드록시-4-[2,2,2-트리듀테리오-1,1-비스(트리듀테리오메틸)에틸]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 4);
    N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-메틸사이클로 부틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 5);
    N-tert-부틸-4-[[2-(4-tert-부틸-5-하이드록시-2-이소프로필-페닐)아세틸]아미노] 피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 6);
    N-tert-부틸-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐] 아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 7);
    4-[[2-(2-플루오로-5-하이드록시-4-이소프로페닐-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 7.1);
    N-tert-부틸-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(1-메틸사이클로프로필)페닐] 아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 8);
    N-(1-시아노사이클로프로필)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 9);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노-1-메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 10);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸) 사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 10.1);
    4-[[2-(4-tert-부틸-2-클로로-5-하이드록시-페닐)아세틸]아미노]-N-(1-시아노사이클로프로필) 피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 10.2);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(3-하이드록시-1,1-디메틸-프로필)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 11);
    N-(4-시아노테트라하이드로피란-4-일)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 12);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[3-(트리플루오로메틸)옥세탄-3-일]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 12.1);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[(1S,2S)-2-하이드록시사이클로펜틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 12.2);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 12.3);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(하이드록시메틸)사이클로부틸]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 12.4);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(4-하이드록시테트라하이드로피란-4-일)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 13);
    4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 14);
    4-[[2-[5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)-2-메틸-페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 14.1);
    N-(3,3-디플루오로-1-메틸-사이클로부틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 15);
    4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 15.1);
    4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(3,3-디플루오로-1-메틸-사이클로부틸)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 15.2);
    4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(디플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 15.3);
    N-[1-(디플루오로메틸)사이클로프로필]-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 15.4);
    N-(1,1-디메틸프로프-2-이닐)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 16);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(4-메틸테트라하이드로피란-4-일)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 16.1);
    N-(1-시아노-1-메틸-에틸)-4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 16.2);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-(4-메틸테트라하이드로피란-4-일)피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 16.3);
    4-[[2-[2,6-디플루오로-3-하이드록시-4-(2-하이드록시-1,1-디메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 16.4);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[2,2,2-트리플루오로-1-(하이드록시메틸)에틸]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 17);
    4-[[2-[2-클로로-6-플루오로-3-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 18);
    4-[[2-[2-클로로-5-하이드록시-4-(1-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 19);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-(2-하이드록시-1-메틸-에틸)페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 20);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1S)-2-하이드록시-1-메틸-에틸]페닐]아세틸] 아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필]피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 20a/b);
    4-[[2-[2-플루오로-5-하이드록시-4-[(1R)-2-하이드록시-1-메틸-에틸]페닐]아세틸]아미노]-N-[1-(트리플루오로메틸)사이클로프로필] 피리딘-2-카르복스아미드 (화합물 20a/b);
    및 상기의 염 및 용매화물.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 의약에 사용하기 위한 화합물.
  15. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 및 병태의 치료 또는 예방에서 사용하기 위한 화합물.
  16. TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 및 병태의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
  17. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 유효량을 이러한 치료가 필요한 환자에게 투여하는 것을 포함하는, TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 및 병태의 치료 또는 예방 방법.
  18. 제14항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 및 병태는 호흡기 질환 및 병태, 입안 건조(구강건조증), 장 과운동성, 담즙정체 및 안구 병태로부터 선택되는, 사용하기 위한 화합물, 용도 또는 방법.
  19. 제18항에 있어서:
    호흡기 질환 및 병태는 낭성 섬유증, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 만성 기관지염, 폐기종, 비낭성 섬유증 기관지확장증을 포함하는 기관지확장증, 천식 및 원발성 섬모운동 이상증으로부터 선택되고; 및/또는
    입안 건조(구강건조증)는 쇼그렌 증후군, 방사선요법 치료 또는 구강건조(xerogenic) 약물로부터 기인하고; 및/또는
    장 과운동성은 위 소화불량, 위마비, 만성 변비 또는 과민성 대장 증후군과 관련되고; 및/또는
    안구 질환은 건조 안구 질환인, 사용하기 위한 화합물, 용도 또는 방법.
  20. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 화합물 및 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물.
  21. 제20항에 있어서, TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 또는 병태의 치료에서 동시, 순차 또는 개별 사용을 위한 조합 제제로서 호흡기 병태의 치료 또는 예방에서 유용한 추가 활성제를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
  22. TMEM16A의 조절에 의해 영향을 받는 질환 또는 병태의 치료에서 동시, 순차 또는 개별 사용을 위한 조합 제제로서 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 화합물 및 호흡기 병태의 치료 또는 예방에 유용한 추가 제제를 포함하는 제품.
  23. 추가 활성제가 다음으로부터 선택되는 제21항에 따른 약제학적 조성물 또는 제22항에 따른 제품:
    메타프로테레놀, 이소프로테레놀, 이소프레날린, 알부테롤, 살부타몰, 포르모테롤, 살메테롤, 인다카테롤, 터부탈린, 오르시프레날린, 비톨테롤 메실레이트, 피르부테롤, 올로다테롤, 빌란테롤 및 아빌란테롤과 같은 β2 아드레날린 수용체 작용제;
    항히스타민제, 예를 들어 로라타딘, 세티리진, 데슬로라타딘, 레보세티리진, 펙소페나딘, 아스테미졸, 아젤라스틴 및 클로르페니라민과 같은 히스타민 H1 수용체 길항제 또는 H4 수용체 길항제;
    도나아제 알파;
    프레드니손, 프레드니솔론, 플루니솔리드, 트리암시놀론 아세토나이드, 베클로메타손 디프로피오네이트, 부데소니드, 플루티카손 프로피오네이트 모메타손 푸로에이트 및 플루티카손 푸로에이트와 같은 코르티코스테로이드;
    몬테루카스트 및 자피르루카스트와 같은 류코트리엔 길항제;
    항콜린성 화합물, 특히 이프라트로퓸, 티오트로퓸, 글리코피롤레이트, 아클리디늄 및 우메클리디늄과 같은 무스카린성 길항제;
    이바카프터, QBW251, 바마카프터 (VX659), 엘렉사카프터 (VX445), VX561/CPT-656, VX152, VX440, GLP2737, GLP2222, GLP2451, PTI438, PTI801, PTI808, FDL-169 및 FDL-176과 같은 CFTR 수복 요법(예를 들어 CFTR 증강제, 교정제 또는 증폭제) 및 루마카프터 및 테자카프터와 같은 CFTR 교정제 또는 이들의 조합(예를 들어 이바카프터, 테자카프터 및 엘렉사카프터의 조합);
    아밀로라이드, VX-371, AZD5634, QBW276, SPX-101, BI443651, BI1265162, ETD001 및 다음으로부터 선택된 양이온:
    2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도) 에틸]-6-(4-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}피페리딘-1-카르보닐)-1,3-디에틸-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
    2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도) 메틸]-6-{[2-(4-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}피페리딘-1-일)에틸]카르바모일}-1,3-디에틸-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
    2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도)메틸]-5-[4-({비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}메틸)피페리딘-1-카르보닐]-1,3-디에틸-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
    2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도)메틸]-6-[(3R)-3-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}피롤리딘-1-카르보닐]-1,3-디에틸-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
    2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도)메틸]-6-[(3S)-3-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}피롤리딘-1-카르보닐]-1,3-디에틸-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
    2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도)메틸]-1,3-디에틸-6-{[(1r,4r)-4-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}사이클로헥실]카르바모일}-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
    2-[({3-아미노-5H-피롤로[2,3-b]피라진-2-일}포름아미도)메틸]-1,3-디에틸-6-{[(1s,4s)-4-{비스[(2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥실]아미노}사이클로헥실]카르바모일}-1H-1,3-벤조디아졸-3-윰;
    및 적합한 음이온, 예를 들어 할라이드, 설페이트, 니트레이트, 포스페이트, 포르메이트, 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 푸마레이트, 시트레이트, 타르트레이트, 옥살레이트, 석시네이트, 만델레이트, 메탄 설포네이트 또는 p-톨루엔 설포네이트를 갖는 화합물과 같은 ENaC 조절제, 특히 ENaC 억제제;
    항생제;
    리바비린과 같은 항바이러스제 및 자나미비르와 같은 뉴라미니다아제 억제제;
    PUR1900과 같은 항진균제;
    고장성 식염수 및 만니톨(Bronchitol®)과 같은 기도 수화제(삼투질); 및
    N-아세틸 시스테인과 같은 점액용해제.
  24. 다음 단계를 포함하는, 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 화합물 제조 공정:
    A. 일반식 (II)의 화합물을:
    Figure pct00302

    (II)
    (여기서 R4, R5, R6, R7, R8, R9 및 R10은 제1항과 같음);
    일반식 (III)의 화합물과 반응시키는 단계:
    Figure pct00303

    (III)
    (여기서 R1, R2 및 R3은 제1항에 정의된 바와 같음); 또는
    B. 일반식 (XXI)의 화합물을 탈보호하는 단계:
    Figure pct00304

    (XXI)
    (여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 및 R10은 제1항에 정의된 바와 같고; R20은 벤질임); 또는
    C. R9는 OH이고 R10은 할로로 임의로 치환된 메틸인 일반식 (I)의 화합물에 대해:
    일반식 (L)의 화합물을:
    Figure pct00305

    (L)
    (여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 R7은 제1항에 정의된 바와 같고; R10은 할로로 임의로 치환된 메틸임);
    이탈기의 산, 예를 들어 메탄 설폰산 또는 톨루엔 설폰산과 반응시키는 단계; 또는
    D. 일반식 (I)의 화합물을 또 다른 일반식 (I)의 화합물로 전환시키는 단계.
  25. 일반식 (II)의 화합물:
    Figure pct00306

    (II)
    여기서 R4, R5, R6 및 R7은 제1항에 정의된 바와 같고 R8, R9 및 R10은 제2항에 정의된 바와 같음; 또는 이의 염.
  26. 일반식 (XXI)의 화합물:
    Figure pct00307

    (XXI)
    여기서 R1, R2, R3, R4, R5 및 R6은 제1항에 정의된 바와 같고, R7, R8, R9 및 R10은 제2항에 정의된 바와 같고, R20은 벤질임; 또는 이의 염.
  27. 일반식 (L)의 화합물:
    Figure pct00308

    (L)
    여기서 R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 R7은 제1항에 정의된 바와 같고 R10은 할로로 임의로 치환된 메틸임; 또는 이의 염.
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