KR20220007244A - Medicament reaction container and medicament reaction analyzing method using the same - Google Patents

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KR20220007244A
KR20220007244A KR1020200085202A KR20200085202A KR20220007244A KR 20220007244 A KR20220007244 A KR 20220007244A KR 1020200085202 A KR1020200085202 A KR 1020200085202A KR 20200085202 A KR20200085202 A KR 20200085202A KR 20220007244 A KR20220007244 A KR 20220007244A
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강선웅
박경환
이종화
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한국화학연구원
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Abstract

A drug reaction container according to the present invention comprises: a well plate; and a plurality of inserts disposed in the well plate, having an inner space, and having a side surface surrounding the inner space formed of a porous material, wherein each side of the plurality of inserts is formed with pores of different sizes. The drug reaction container and a drug reaction analysis method using the same can control the diffusion rate of a drug differently by forming different pore sizes of the porous material constituting the side surfaces of the plurality of inserts and the drug effect according to the reaction between the drug having various diffusion rates and a cell can be easily measured therethrough.

Description

약물 반응 용기 및 이를 이용한 약물 반응 분석 방법{MEDICAMENT REACTION CONTAINER AND MEDICAMENT REACTION ANALYZING METHOD USING THE SAME}Drug reaction container and drug reaction analysis method using the same

본 발명은 약물 반응 용기 및 이를 이용한 약물 반응 분석 방법에 관한 것으로, 구체적으로는 다양한 확산 속도를 가진 약물과 세포 간의 반응에 따른 약물 효과를 용이하게 측정할 수 있는 약물 반응 용기 및 이를 이용한 약물 반응 분석 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a drug reaction container and a drug reaction analysis method using the same, and specifically, a drug reaction container capable of easily measuring the drug effect according to a reaction between a drug having various diffusion rates and a cell, and a drug reaction analysis using the same it's about how

최근 환경의 악화와 노년 인구의 증가로 세계 암 발생률이 매년 5%이상 증가하고 있다. 이러한 암의 치료를 위하여 외과적 치료, 화학요법, 생물요법, 방사선요법 등이 이용되고 있다.Due to the recent deterioration of the environment and an increase in the elderly population, the global cancer incidence rate is increasing by more than 5% every year. For the treatment of these cancers, surgical treatment, chemotherapy, biotherapy, radiation therapy, etc. are used.

그 중에서도 항암제가 대표적으로 사용되고 있는데, 현재 사용 중인 대부분의 항암제들은 심각한 독성 및 부작용으로 인해 사용이 제한적인데도 불구하고, 치료효과의 증강을 위하여 투여용량을 증가시키고 있어서 인체에 치명적이라는 문제점이 있다.Among them, anticancer drugs are typically used, and although most anticancer drugs currently in use are limited in use due to severe toxicity and side effects, the dosage is increased to enhance the therapeutic effect, so there is a problem that it is fatal to the human body.

따라서 기존에 사용되고 있는 항암제들의 독성 및 부작용을 경감시키기 위한 여러 약물 등이 현재 연구되고 있다. 그러나 종래에는 약물의 확산 속도를 간편하게 조절하여 약물의 항암 효과를 측정하기가 어려워, 항암 효과를 좀 더 정확하게 측정하는 데에 한계가 있었다.Therefore, various drugs for alleviating the toxicity and side effects of existing anticancer drugs are currently being studied. However, in the prior art, it is difficult to measure the anticancer effect of a drug by conveniently controlling the diffusion rate of the drug, so there is a limit in measuring the anticancer effect more accurately.

공개특허공보 제10-2012-0090118호(2012.08.17.)Laid-Open Patent Publication No. 10-2012-0090118 (2012.08.17.)

본 발명은 전술한 종래의 제반 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 본 발명의 목적은 복수의 인서트의 측면을 구성하는 다공성 재질의 포어 크기를 각각 다르게 형성시킴으로써, 약물의 확산 속도를 각각 다르게 조절할 수 있고, 이를 통해 다양한 확산 속도를 가진 약물과 세포 간의 반응에 따른 약물 효과를 용이하게 측정할 수 있는 약물 반응 용기 및 이를 이용한 약물 반응 분석 방법을 제공하는 데 있다.The present invention has been devised to solve the above-mentioned problems in the prior art, and an object of the present invention is to form different pore sizes of a porous material constituting the side surfaces of a plurality of inserts, so that the diffusion rate of the drug can be controlled differently. The object of the present invention is to provide a drug reaction container capable of easily measuring the drug effect according to a reaction between a drug having various diffusion rates and a cell, and a drug reaction analysis method using the same.

상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명은 웰 플레이트; 및 상기 웰 플레이트 내에 배치되고, 내부 공간이 형성되며, 상기 내부 공간을 둘러싼 측면이 다공성 재질로 형성된 복수의 인서트를 포함하고, 상기 복수의 인서트 각각의 측면은 서로 다른 크기의 포어가 형성된 것을 특징으로 하는 약물 반응 용기를 제공한다.The present invention for achieving the above object is a well plate; and a plurality of inserts disposed in the well plate, an inner space is formed, and a side surface surrounding the inner space is formed of a porous material, and each side of the plurality of inserts has pores having different sizes. A drug reaction container is provided.

여기서, 상기 복수의 인서트의 측면에 형성된 포어의 크기에 따라 상기 내부 공간에 주입된 약물의 확산 속도가 조절되는 것을 특징으로 한다.Here, it is characterized in that the diffusion rate of the drug injected into the inner space is controlled according to the size of the pores formed on the side surfaces of the plurality of inserts.

또한, 상기 웰 플레이트의 중심부에 배치되고, 회전 가능하도록 구성된 교반부를 더 포함하고, 상기 복수의 인서트는 상기 교반부를 중심으로 원주 방향으로 배치된 것을 특징으로 한다.In addition, it is disposed in the center of the well plate and further comprises a rotatable agitator, wherein the plurality of inserts are arranged in a circumferential direction around the agitator.

또한, 상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명은 웰 플레이트; 및 상기 웰 플레이트 내에 배치되고, 내부 공간이 형성되며, 상기 내부 공간을 둘러싼 측면이 다공성 재질로 형성된 복수의 인서트를 포함하고, 상기 복수의 인서트 각각의 측면은 서로 다른 크기의 포어(pore)가 형성된, 약물 반응 용기를 이용한 약물 반응 분석 방법으로서, 상기 웰 플레이트의 수용 공간에 배지를 넣고, 상기 복수의 인서트에 세포를 분주하는 단계; 상기 수용 공간에 약물을 주입하는 단계; 및 상기 약물이 상기 복수의 인서트의 측면을 통과하여 상기 내부 공간으로 확산하는 단계를 포함하고, 상기 확산하는 단계는, 상기 복수의 인서트의 측면 포어 크기 별로 상기 약물이 각기 다른 속도로 확산함에 따라, 다양한 확산 속도를 가진 약물과 상기 세포 간의 반응에 따른 약물 효과 측정이 가능한 것을 특징으로 한다.In addition, the present invention for achieving the above object is a well plate; and a plurality of inserts disposed in the well plate, an inner space is formed, and a side surface surrounding the inner space is formed of a porous material, and a side surface of each of the plurality of inserts has pores of different sizes. , A drug reaction analysis method using a drug reaction vessel, the method comprising: putting a medium in a receiving space of the well plate, and dispensing cells into the plurality of inserts; injecting a drug into the receiving space; and diffusing the drug into the inner space through the side surfaces of the plurality of inserts, wherein the spreading comprises the drug diffusing at different rates for each side pore size of the plurality of inserts, It is characterized in that it is possible to measure the effect of the drug according to the reaction between the drug and the cell having various diffusion rates.

또한, 상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명은 웰 플레이트; 및 상기 웰 플레이트 내에 배치되고, 내부 공간이 형성되며, 상기 내부 공간을 둘러싼 측면이 다공성 재질로 형성된 복수의 인서트를 포함하고, 상기 복수의 인서트 각각의 측면은 서로 다른 크기의 포어(pore)가 형성된, 약물 반응 용기를 이용한 약물 반응 분석 방법으로서, 상기 웰 플레이트의 수용 공간에 배지를 넣고, 상기 복수의 인서트에 세포를 분주하는 단계; 상기 내부 공간에 약물을 주입하는 단계; 및 상기 약물이 상기 복수의 인서트의 측면을 통과하여 상기 수용 공간으로 확산하는 단계를 포함하고, 상기 확산하는 단계는, 상기 복수의 인서트의 측면 포어 크기 별로 상기 약물이 각기 다른 속도로 확산함에 따라, 다양한 확산 속도를 가진 약물과 상기 세포 간의 반응에 따른 약물 효과 측정이 가능한 것을 특징으로 한다.In addition, the present invention for achieving the above object is a well plate; and a plurality of inserts disposed in the well plate, an inner space is formed, and a side surface surrounding the inner space is formed of a porous material, and a side surface of each of the plurality of inserts has pores of different sizes. , A drug reaction analysis method using a drug reaction vessel, the method comprising: putting a medium in a receiving space of the well plate, and dispensing cells into the plurality of inserts; injecting a drug into the inner space; and diffusing the drug into the receiving space by passing through the side surfaces of the plurality of inserts, wherein the spreading includes the drug diffusing at different rates for each side pore size of the plurality of inserts, It is characterized in that it is possible to measure the effect of the drug according to the reaction between the drug and the cell having various diffusion rates.

여기서, 상기 약물 반응 용기는, 상기 웰 플레이트의 중심부에 배치되고, 회전 가능하도록 구성된 교반부를 더 포함하며, 상기 복수의 인서트는 상기 교반부를 중심으로 원주 방향으로 배치되고, 상기 확산하는 단계는, 상기 교반부를 미리 정해진 속도로 회전시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.Here, the drug reaction vessel is disposed in the center of the well plate, further comprising a rotatable agitator, wherein the plurality of inserts are arranged in a circumferential direction around the agitator, and the spreading step comprises: It characterized in that it comprises the step of rotating the stirring unit at a predetermined speed.

또한, 상기 약물은 독소루비신(doxorubicin)과 같은 항암제인 것을 특징으로 한다.In addition, the drug is characterized in that it is an anticancer agent, such as doxorubicin (doxorubicin).

본 발명에 따른 약물 반응 용기 및 이를 이용한 약물 반응 분석 방법은 복수의 인서트의 측면을 구성하는 다공성 재질의 포어 크기를 각각 다르게 형성시킴으로써, 약물의 확산 속도를 각각 다르게 조절할 수 있고, 이를 통해 다양한 확산 속도를 가진 약물과 세포 간의 반응에 따른 약물 효과를 용이하게 측정할 수 있다.The drug reaction container and the drug reaction analysis method using the same according to the present invention can control the diffusion rate of the drug differently by forming different pore sizes of the porous material constituting the side surfaces of a plurality of inserts, and through this, various diffusion rates It is possible to easily measure the drug effect according to the reaction between the drug and the cell.

도 1은 본 발명에 따른 약물 반응 용기를 개략적으로 나타낸 사시도이다.
도 2는 본 발명에 따른 약물 반응 용기에서 복수의 인서트의 다공성 재질로 형성된 측면을 나타낸 도면이다.
도 3은 본 발명에 따른 약물 반응 용기에서 도 2의 측면이 적용된 예를 나타낸 도면이다.
도 4는 본 발명에 따른 약물 반응 용기에서 100rpm으로 교반하는 조건일 때의 약물 확산 시간을 나타낸 도면이다.
도 5는 본 발명에 따른 약물 반응 용기를 이용하여 흡광도를 측정한 결과를 나타낸 도면이다.
도 6은 본 발명에 따른 약물 반응 용기에서 약물이 주입되는 Route 1 내지 3의 경로를 나타낸 도면이다.
도 7은 본 발명에 따른 약물 반응 용기에서 도 2의 다공성 재질의 측면이 적용된 인서트에 약물이 도 6에 도시된 Route 1 내지 3의 경로로 주입될 때의 시간에 따른 농도 변화를 나타낸 도면이다.1 is a perspective view schematically showing a drug reaction container according to the present invention.
2 is a view showing a side surface formed of a porous material of a plurality of inserts in the drug reaction vessel according to the present invention.
3 is a view showing an example in which the side of FIG. 2 is applied in the drug reaction container according to the present invention.
4 is a diagram showing the drug diffusion time in the drug reaction vessel according to the present invention under the stirring condition at 100 rpm.
5 is a view showing the result of measuring the absorbance using the drug reaction vessel according to the present invention.
6 is a view showing the routes of Routes 1 to 3 in which the drug is injected in the drug reaction container according to the present invention.
7 is a view showing the change in concentration over time when the drug is injected into the route of Routes 1 to 3 shown in FIG. 6 to the insert to which the side of the porous material of FIG.

이하, 본 발명의 실시예를 첨부된 도면들을 참조하여 상세하게 설명한다. 우선 각 도면의 구성 요소들에 참조 부호를 첨가함에 있어서, 동일한 구성 요소들에 대해서는 비록 다른 도면상에 표시되더라도 가능한 한 동일한 부호를 가지도록 하고 있음에 유의해야 한다. 또한, 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명은 생략한다. 또한, 이하에서 본 발명의 실시예를 설명할 것이나, 본 발명의 기술적 사상은 이에 한정하거나 제한되지 않고 당업자에 의해 실시될 수 있음은 물론이다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. First of all, it should be noted that in adding reference numerals to the components of each drawing, the same components are given the same reference numerals as much as possible even though they are indicated on different drawings. In addition, if it is determined that the gist of the present invention may be obscured, detailed description thereof will be omitted. In addition, although embodiments of the present invention will be described below, the technical spirit of the present invention is not limited thereto or may be practiced by those skilled in the art, of course.

이하, 도 1 내지 도 7을 참조하여, 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 약물 반응 용기(1)를 설명한다.Hereinafter, a drug reaction vessel 1 according to a preferred embodiment of the present invention will be described with reference to FIGS. 1 to 7 .

도 1을 참조하면, 본 발명에 따른 약물 반응 용기(1)는 웰 플레이트(10), 복수의 인서트(20)를 포함하여 구성된다.Referring to FIG. 1 , the drug reaction vessel 1 according to the present invention is configured to include a well plate 10 and a plurality of inserts 20 .

웰 플레이트(10)는 내부에 수용 공간(11)이 형성되어 복수의 인서트(20)가 내부에 배치될 수 있다.The well plate 10 has an accommodating space 11 formed therein, so that a plurality of inserts 20 may be disposed therein.

복수의 인서트(20)는 웰 플레이트(10) 내에 배치되고, 내부 공간(21)이 형성되며, 상기 내부 공간(21)을 둘러싼 측면(22)이 다공성 재질로 형성된다.The plurality of inserts 20 are disposed in the well plate 10 , an inner space 21 is formed, and a side surface 22 surrounding the inner space 21 is formed of a porous material.

즉, 복수의 인서트(20)의 측면(22)은 다공성 재질로 형성되어 내부 공간(21)에 주입되는 약물의 확산이 용이하도록 구성될 수 있다.That is, the side surfaces 22 of the plurality of inserts 20 may be formed of a porous material to facilitate diffusion of the drug injected into the inner space 21 .

여기서, 복수의 인서트(20)의 측면(22)을 구성하는 다공성 재질의 포어 크기를 조절함으로써 내부 공간(21)에 주입된 약물의 확산 속도를 용이하게 조절할 수 있다.Here, the diffusion rate of the drug injected into the inner space 21 can be easily controlled by adjusting the size of the pores of the porous material constituting the side surface 22 of the plurality of inserts 20 .

구체적으로, 복수의 인서트(20)의 측면(22)에 형성된 포어의 크기가 클수록 내부 공간(21)에 주입된 약물(d)은 상기 측면(22)을 통과하여 더 빠른 속도로 확산할 수 있다. 반면에, 복수의 인서트(20)의 측면(22)에 형성된 포어의 크기가 작을 경우 내부 공간(21)에 주입된 약물(d)은 상기 측면(22)을 통과하여 더 느린 속도로 확산할 수 있다.Specifically, as the size of the pores formed on the side surface 22 of the plurality of inserts 20 increases, the drug d injected into the inner space 21 can pass through the side surface 22 and diffuse at a faster rate. . On the other hand, when the size of the pores formed on the side surface 22 of the plurality of inserts 20 is small, the drug (d) injected into the inner space 21 can pass through the side surface 22 and diffuse at a slower rate. have.

이와 같이 본 발명에 따른 약물 반응 용기(1)는 복수의 인서트(20) 각각에 대하여 다공성 재질로 이루어진 측면(22) 포어의 크기를 조절함에 따라 약물이 확산되는 속도를 각각 다르게 조절할 수 있기 때문에 다양한 확산 속도를 가진 약물과 세포 간의 반응에 따른 약물 효과를 용이하게 측정할 수 있다는 장점이 있다.As described above, in the drug reaction container 1 according to the present invention, by adjusting the size of the pores of the side 22 made of a porous material with respect to each of the plurality of inserts 20, the rate at which the drug is diffused can be adjusted differently. It has the advantage of being able to easily measure the drug effect according to the reaction between the drug and the cell having a diffusion rate.

한편, 본 발명에 따른 약물 반응 용기(1)는 교반부(30)를 더 포함하여 구성된다. 여기서, 교반부(30)는 웰 플레이트(10)의 중심부에 배치되고, 회전 가능하도록 구성될 수 있다.On the other hand, the drug reaction vessel (1) according to the present invention is configured to further include a stirring unit (30). Here, the agitator 30 may be disposed in the center of the well plate 10 and configured to be rotatable.

이때, 교반부(30)는 마그네틱 바(Magnetic Stirrer)로 이루어질 수 있다. 마그네틱 바는 자성을 띠는 물질로 이루어질 수 있다. 이러한 교반부(30)는 외부에서 가해지는 자기장의 영향으로 회전축(31)을 중심으로 회전이 가능하도록 구성될 수 있다.At this time, the stirring unit 30 may be formed of a magnetic bar (Magnetic Stirrer). The magnetic bar may be made of a magnetic material. The stirring unit 30 may be configured to be rotatable about the rotation shaft 31 under the influence of a magnetic field applied from the outside.

이와 같이 본 발명에 따른 약물 반응 용기(1)는 원주 방향으로 배치된 복수의 인서트(20)의 중심부에 교반부(30)가 회전 가능하게 배치되기 때문에, 하나의 교반부(30)를 회전시킴에 따라 복수의 인서트(20)의 내부 공간(21)에 주입된 약물(d)의 확산 속도에 영향을 미칠 수 있다. 다시 말하면, 본 발명에 따른 약물 반응 용기(1)는 하나의 동력으로 복수의 인서트(20)에 주입된 모든 약물의 확산 속도에 영향을 미칠 수 있다.In this way, the drug reaction vessel 1 according to the present invention rotates one stirring unit 30 because the stirring unit 30 is rotatably arranged in the center of the plurality of inserts 20 arranged in the circumferential direction. Accordingly, the diffusion rate of the drug (d) injected into the inner space 21 of the plurality of inserts 20 may be affected. In other words, the drug reaction container 1 according to the present invention can affect the diffusion rate of all the drugs injected into the plurality of inserts 20 with one power.

도 2 및 도 3을 참조하면, 복수의 인서트(20)의 측면(22)을 구성하는 다공성 재질은 A(H1=108.7μm, H2=119.9μm), B(H1=64.41μm, H2=66.13μm), C(H1=14.60μm, V1=67.85μm), D(V1=42.94μm, V2=44.66μm)와 같이 형성될 수 있고, 여기서 포어의 크기는 A에서 D로 갈수록 작아지도록 구성된다.2 and 3, the porous material constituting the side surface 22 of the plurality of inserts 20 is A (H1 = 108.7 μm, H2 = 119.9 μm), B (H1 = 64.41 μm, H2 = 66.13 μm) ), C (H1 = 14.60 μm, V1 = 67.85 μm), and D (V1 = 42.94 μm, V2 = 44.66 μm), where the size of the pores is configured to decrease from A to D.

도 3 및 도 4를 참조하면, 교반부(30)가 100rpm으로 교반하는 조건일 때, 복수의 인서트(20)의 측면(22)을 구성하는 다공성 재질의 포어 크기가 상대적으로 더 작은 D로 갈수록 복수의 인서트(20)의 내부 공간(21)에 주입된 약물이 좀 더 오랜 시간에 걸쳐서 확산되는 것을 확인할 수 있다.3 and 4, when the stirring unit 30 is stirred at 100 rpm, the pore size of the porous material constituting the side surface 22 of the plurality of inserts 20 is relatively smaller toward D. It can be seen that the drug injected into the inner space 21 of the plurality of inserts 20 is diffused over a longer period of time.

도 5을 참조하면, A549 (human lung carcinoma)에 대한 독소루비신(Doxorubicin, Dox)의 항암 효과를 확인하기 위하여 흡광도(optical density, O.D)를 측정하였다. 이때, 배지는 RPMI1640 +10% FBS, +1% AA이고, 독소루비신의 72시간 기준으로 생존력 있는 세포의 50% 감소(IC50)는 288.1ng/㎖이며, 초기 스톡(stock) 농도는 250ng/㎖로 준비하였다.Referring to FIG. 5 , optical density (OD) was measured to confirm the anticancer effect of doxorubicin (Dox) on A549 (human lung carcinoma). At this time, the medium is RPMI1640 +10% FBS, +1% AA, the 50% reduction (IC 50 ) of viable cells based on 72 hours of doxorubicin is 288.1 ng/ml, and the initial stock concentration is 250 ng/ml was prepared with

세포 배양 방법은, 복수의 인서트(20) 외측의 웰 플레이트(10)의 수용 공간(11)에 6㎖의 배지를 넣고, 배지가 수용된 웰 플레이트 내에 배치된 복수의 인서트(20)에 5x104개의 세포를 600㎕가 되도록 분주하며, 24시간 후에 약물 처리하여 전체(total) 배지 부피가 10㎖가 되게 한다. 이때, CCK-8 용액을 첨가하고, 2시간 후에 세포 배양액의 흡광도를 450nm에서 측정하였다.In the cell culture method, 6 ml of medium is put into the receiving space 11 of the well plate 10 outside the plurality of inserts 20, and 5x10 4 pieces are placed in the plurality of inserts 20 placed in the well plate in which the medium is accommodated. The cells are aliquoted so as to be 600 μl, and the drug is treated after 24 hours so that the total medium volume is 10 ml. At this time, the CCK-8 solution was added, and the absorbance of the cell culture solution was measured at 450 nm after 2 hours.

도 5에서 StNo는 대조군으로서 교반부(30)로 교반하지 않은 경우의 흡광도를 나타내고, StDx는 A549 세포를 Dox IC50으로 처리하고, 교반부(30)로 교반한 경우의 흡광도를 나타낸다.In FIG. 5 , StNo indicates the absorbance when not stirred by the stirring unit 30 as a control, and StDx indicates the absorbance when A549 cells are treated with Dox IC 50 and stirred by the stirring unit 30 .

또한, DyDx_A, DyDrDx_A는 도 2에 나타낸 A 다공성 재질의 측면(22)을 포함한 인서트(20)에 약물이 주입될 때의 흡광도를 나타내고, DyDx_B, DyDrDx_B는 도 2의 B 다공성 재질의 측면(22)을 포함한 인서트(20)에 약물이 주입될 때의 흡광도를 나타내며, DyDx_D, DyDrDx_D는 도 2의 D 다공성 재질의 측면(22)을 포함한 인서트(20)에 약물이 주입될 때의 흡광도를 나타낸다.In addition, DyDx_A and DyDrDx_A represent absorbance when a drug is injected into the insert 20 including the side 22 of the porous material A shown in FIG. 2, and DyDx_B and DyDrDx_B are the side 22 of the porous material B in FIG. 2 It represents the absorbance when the drug is injected into the insert 20 including, DyDx_D and DyDrDx_D are the absorbance when the drug is injected into the insert 20 including the side 22 of the porous material D in FIG. 2 .

이때, DyDx는 도 6에 도시된 Route 3(인서트(20) 외측에서 약물을 주입함)의 경로로 약물이 주입된 경우의 흡광도를 나타내고, DyDrDx는 도 6의 Route 2(어느 한 인서트(20)에 약물이 주입된 후 외측으로 확산되어 다른 인서트(20)로 주입됨)의 경로로 약물이 주입된 경우의 흡광도를 나타낸다. 또한, 도 6의 Route 1은 인서트(20)의 내측에 약물을 주입하는 경로를 나타낸다.At this time, DyDx represents the absorbance when the drug is injected through the route of Route 3 (injecting the drug from the outside of the insert 20) shown in FIG. 6, and DyDrDx is Route 2 of FIG. 6 (one insert 20) It shows the absorbance when the drug is injected through the path of the other insert (20) after the drug is injected and then diffused outward. In addition, Route 1 of FIG. 6 represents a route for injecting a drug into the insert 20 .

도 5에 도시된 바와 같이, 측면(22)의 포어 크기가 각각 다르게 형성된 복수의 인서트(20)에 독소루비신과 같은 항암제 약물을 동일한 농도로 처리한 결과, 측면(22)의 포어 크기가 클수록 흡광도가 낮게 나타났다. 즉, 측면(22)의 포어 크기가 클수록 약물이 더 빠른 속도로 확산함에 따라 세포의 생존율이 낮아져 약물의 항암 효과가 우수한 것으로 나타났다.As shown in FIG. 5 , as a result of treating an anticancer drug such as doxorubicin at the same concentration in a plurality of inserts 20 having different pore sizes on the side surface 22, the larger the pore size of the side surface 22, the greater the absorbance. appeared low. That is, as the pore size of the side 22 is larger, the cell viability is lowered as the drug diffuses at a faster rate, indicating that the anticancer effect of the drug is excellent.

또한, 교반부(30)로 교반하지 않은 경우(StNo)보다 교반부(30)로 교반한 경우(StDx)의 흡광도가 상대적으로 낮게 나타났다. 즉, 교반부(30)로 교반하여 유체의 흐름을 발생시켰을 때 약물의 확산이 더 잘 일어나 세포의 생존율이 낮아져 약물의 항암 효과가 우수한 것으로 나타났다.In addition, the absorbance was relatively lower in the case of stirring with the stirring unit 30 (StDx) than when not stirring with the stirring unit 30 (StNo). That is, when the fluid flow was generated by stirring with the agitator 30, the drug diffusion occurred better and the cell viability was lowered, indicating that the anticancer effect of the drug was excellent.

도 7을 참조하면, 도 7(a)는 도 2의 A 다공성 재질의 측면(22)을 포함한 인서트(20)에 약물이 상술한 Route 1 내지 3의 경로로 주입될 때의 시간에 따른 농도 변화를 나타내고, 도 7(b)는 도 2의 B 다공성 재질의 측면(22)을 포함한 인서트(20)에 약물이 Route 1 내지 3의 경로로 주입될 때의 시간에 따른 농도 변화를 나타내며, 도 7(c)는 도 2의 D 다공성 재질의 측면(22)을 포함한 인서트(20)에 약물이 Route 1 내지 3의 경로로 주입될 때의 시간에 따른 농도 변화를 나타낸다. Referring to Figure 7, Figure 7 (a) is a concentration change with time when the drug is injected into the insert 20 including the side surface 22 of the porous material A in Figure 2 through the routes of Routes 1 to 3 described above. 7 (b) shows the change in concentration with time when the drug is injected into the insert 20 including the side 22 of the porous material B in FIG. 2 through the routes of Routes 1 to 3, and FIG. (c) shows the concentration change with time when the drug is injected into the insert 20 including the side 22 of the porous material D in FIG. 2 through the routes of Routes 1 to 3.

도 7(a) 내지 도 7(c)에 도시된 바와 같이, 측면(22) 포어의 크기가 다르게 형성됨에 따라 약물의 확산 속도가 각각 다르게 조절됨을 알 수 있다.As shown in Figures 7 (a) to 7 (c), it can be seen that the diffusion rate of the drug is controlled differently as the size of the pores on the side 22 is formed differently.

이와 같이, 본 발명에 따른 약물 반응 용기(1)는 복수의 인서트(20)의 측면(22)을 구성하는 다공성 재질의 포어 크기를 각각 다르게 형성시킴으로써, 복수의 인서트(20)에 주입되는 약물의 확산 속도를 각각 다르게 조절할 수 있고, 이를 통해 다양한 확산 속도를 가진 약물과 세포 간의 반응에 따른 약물 효과를 용이하게 측정할 수 있다.In this way, the drug reaction container 1 according to the present invention forms different pore sizes of the porous material constituting the side surface 22 of the plurality of inserts 20, so that the drug injected into the plurality of inserts 20 is The diffusion rate can be controlled differently, and through this, the drug effect according to the reaction between the drug and the cell having various diffusion rates can be easily measured.

이하, 도 6 및 도 7을 참조하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 약물 반응 용기(1)를 이용한 약물 반응 분석 방법에 대해서 자세히 설명하기로 한다.Hereinafter, a drug reaction analysis method using the drug reaction vessel 1 according to an embodiment of the present invention will be described in detail with reference to FIGS. 6 and 7 .

먼저, 웰 플레이트(10)의 수용 공간(11)에 배지를 넣고, 복수의 인서트(20)에 세포를 분주할 수 있다. 여기서, 상술한 바와 같이, 배지는 RPMI1640 +10% FBS, +1% AA일 수 있고, 세포는 A549일 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.First, a medium may be put into the receiving space 11 of the well plate 10 , and cells may be dispensed into the plurality of inserts 20 . Here, as described above, the medium may be RPMI1640 +10% FBS, +1% AA, and the cells may be A549, but is not limited thereto.

복수의 인서트(20)에 세포를 분주한 후, 웰 플레이트(10)의 수용 공간(11)에 약물을 주입할 수 있다. 이때, 약물은 독소루비신과 같은 항암제일 수 있다.After dispensing the cells into the plurality of inserts 20 , the drug may be injected into the receiving space 11 of the well plate 10 . In this case, the drug may be an anticancer agent such as doxorubicin.

이후에, 주입된 약물은 복수의 인서트(20)의 측면(22)을 통과하여 내부 공간(21)으로 확산할 수 있다.Thereafter, the injected drug may pass through the side surfaces 22 of the plurality of inserts 20 and diffuse into the inner space 21 .

이때, 상술한 바와 같이 약물은 복수의 인서트(20)의 측면(22)에 형성된 포어의 크기 별로 각기 다른 속도로 확산할 수 있다.At this time, as described above, the drug may diffuse at different rates for each size of the pores formed on the side surfaces 22 of the plurality of inserts 20 .

즉, 본 발명의 약물 반응 용기를 이용한 약물 반응 분석 방법은, 다양한 확산 속도를 가진 약물과 상기 세포 간의 반응에 따른 약물 효과의 측정이 가능하다는 장점이 있다.That is, the drug reaction analysis method using the drug reaction vessel of the present invention has the advantage that it is possible to measure the drug effect according to the reaction between the drug and the cell having various diffusion rates.

일예로, 각각의 인서트(20)의 측면(22) 포어의 크기를 다르게 함으로써 다양한 인체의 부위를 모사하는 실험을 진행할 수 있다.For example, by varying the size of the pores of the side 22 of each insert 20, an experiment for simulating various parts of the human body may be conducted.

즉, 약물이 인체에 투여되었을 때, 약물의 흡수는 확산에 의해 생체막을 통과하면서 일어날 수 있으므로, 각각의 인서트(20)의 측면(22)을 구성하는 다공성 재질의 포어 크기를 다르게 하여 다양한 약물의 확산 속도를 가질 수 있는 인체 부위를 모사할 수 있고, 이를 통해 세포와의 반응에 따른 약물의 효과를 용이하게 분석할 수 있다.That is, when a drug is administered to the human body, the absorption of the drug can occur while passing through the biological membrane by diffusion, so the pore size of the porous material constituting the side 22 of each insert 20 is different, so that the It is possible to simulate a part of the body that can have a diffusion rate, and through this, it is possible to easily analyze the effect of a drug according to a reaction with a cell.

한편, 본 발명의 다른 실시예에 따른 약물 반응 용기(1)를 이용한 약물 반응 분석 방법은, 웰 플레이트(10)의 수용 공간(11)에 배지를 넣고, 복수의 인서트(20)에 세포를 분주하는 단계와, 복수의 인서트(20)의 내부 공간(21)에 약물을 주입하는 단계와, 약물이 복수의 인서트(20)의 측면(22)을 통과하여 웰 플레이트(10)의 수용 공간(11)으로 확산하는 단계를 포함하여 구성될 수 있다.On the other hand, in the drug reaction analysis method using the drug reaction vessel 1 according to another embodiment of the present invention, a medium is placed in the receiving space 11 of the well plate 10 , and cells are dispensed into a plurality of inserts 20 . and injecting a drug into the inner space 21 of the plurality of inserts 20, and the drug passes through the side surface 22 of the plurality of inserts 20 to receive space 11 of the well plate 10 ) may be configured including the step of diffusion.

즉, 본 발명의 다른 실시예에 따른 약물 반응 분석 방법은, 일 실시예에 따른 약물 반응 분석 방법과는 달리 약물을 복수의 인서트(20)의 내부 공간(21)에 주입하고, 주입된 약물은 측면(22)을 통과하여 웰 플레이트(10)의 수용 공간(11)으로 확산하는 것을 특징으로 한다.That is, in the drug response analysis method according to another embodiment of the present invention, unlike the drug response analysis method according to the embodiment, a drug is injected into the inner space 21 of the plurality of inserts 20 , and the injected drug is It is characterized in that it diffuses into the receiving space 11 of the well plate 10 through the side 22 .

이때, 상술한 바와 같이 약물은 복수의 인서트(20)의 측면(22)에 형성된 포어의 크기 별로 각기 다른 속도로 확산할 수 있다.At this time, as described above, the drug may diffuse at different rates for each size of the pores formed on the side surfaces 22 of the plurality of inserts 20 .

즉, 본 발명의 약물 반응 용기를 이용한 약물 반응 분석 방법은, 다양한 확산 속도를 가진 약물과 상기 세포 간의 반응에 따른 약물 효과의 측정이 가능하다는 장점이 있다.That is, the drug reaction analysis method using the drug reaction vessel of the present invention has the advantage that it is possible to measure the drug effect according to the reaction between the drug and the cell having various diffusion rates.

이와 더불어, 본 발명의 약물 반응 용기를 이용한 약물 반응 분석 방법은, 복수의 인서트(20)에 각각 다른 약물을 주입하여 다양한 약물이 세포와 어떻게 반응하는지를 동시에 분석하는 경우에도 사용될 수 있다.In addition, the drug reaction analysis method using the drug reaction container of the present invention may be used in the case of simultaneously analyzing how various drugs react with cells by injecting different drugs into the plurality of inserts 20 .

또한, 복수의 인서트(20)에 주입된 각기 다른 약물들이 서로 다른 크기의 포어가 형성된 측면(22)을 통과하여 각기 다른 속도로 확산해 나감에 따라, 다양한 약물들 간의 상호 반응을 측정하는 데에도 용이하게 활용될 수 있다.In addition, as different drugs injected into the plurality of inserts 20 diffuse at different rates through the side surfaces 22 having pores of different sizes, it is also used to measure the interaction between various drugs. can be used easily.

한편, 상술한 바와 같이, 본 발명에 따른 약물 반응 용기(1)는 원주 방향으로 배치된 복수의 인서트(20)의 중심부에 교반부(30)가 회전 가능하게 배치되기 때문에, 하나의 교반부(30)를 회전시킴에 따라 복수의 인서트(20)의 내부 공간(21)에 주입된 약물의 확산 속도에 영향을 미칠 수 있다. 즉, 본 발명에 따른 약물 반응 용기(1)는 하나의 동력으로 복수의 인서트(20)에 주입된 모든 약물의 확산 속도에 영향을 미칠 수 있다.On the other hand, as described above, in the drug reaction vessel 1 according to the present invention, since the stirring unit 30 is rotatably disposed at the center of the plurality of inserts 20 arranged in the circumferential direction, one stirring unit ( By rotating 30), the diffusion rate of the drug injected into the inner space 21 of the plurality of inserts 20 may be affected. That is, the drug reaction container 1 according to the present invention can affect the diffusion rate of all drugs injected into the plurality of inserts 20 with one power.

이때, 본 발명의 실시예들에 따른 약물 반응 분석 방법에 있어서, 약물이 복수의 인서트(20)의 측면(22)을 통과하여 웰 플레이트(10)의 수용 공간(11)으로 확산하는 단계는 교반부(30)를 미리 정해진 속도로 회전시키는 단계를 포함하여 구성될 수 있다.At this time, in the drug reaction analysis method according to embodiments of the present invention, the step of the drug passing through the side surface 22 of the plurality of inserts 20 and spreading into the receiving space 11 of the well plate 10 is stirred It may be configured to include rotating the unit 30 at a predetermined speed.

이러한 교반부(30)의 교반 속도는 약물 용해 속도에 영향을 주고, 생체의 경우 교반이 비교적 일정하기 때문에, 교반부(30)를 미리 정해진 속도 회전시킴에 따라 생체 내에서 일어나는 용해 환경과 유사하게 맞춘 상태로 약물 효과 측정이 가능하다는 장점이 있다.The stirring speed of the stirring unit 30 affects the drug dissolution rate, and since the stirring is relatively constant in the case of a living body, similarly to the dissolution environment occurring in the living body by rotating the stirring unit 30 at a predetermined speed. It has the advantage of being able to measure the effect of a drug in a tailored state.

이상, 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세히 설명하였으나, 본 발명의 기술적 범위는 전술한 실시예에 한정되지 않고 특허청구범위에 의하여 해석되어야 할 것이다. 이때, 이 기술분야에서 통상의 지식을 습득한 자라면, 본 발명의 범위에서 벗어나지 않으면서도 많은 수정과 변형이 가능함을 고려해야 할 것이다.As mentioned above, although preferred embodiments of the present invention have been described in detail, the technical scope of the present invention is not limited to the above-described embodiments and should be interpreted according to the claims. At this time, those skilled in the art should consider that many modifications and variations are possible without departing from the scope of the present invention.

1 : 약물 반응 용기 10 : 웰 플레이트
11 : 수용 공간 20 : 복수의 인서트
21 : 내부 공간 22 : 복수의 인서트의 측면
30 : 교반부 31 : 회전축1: drug reaction vessel 10: well plate
11: accommodating space 20: a plurality of inserts
21: inner space 22: side of a plurality of inserts
30: stirring unit 31: rotating shaft

Claims (7)

웰 플레이트; 및
상기 웰 플레이트 내에 배치되고, 내부 공간이 형성되며, 상기 내부 공간을 둘러싼 측면이 다공성 재질로 형성된 복수의 인서트를 포함하고,
상기 복수의 인서트 각각의 측면은 서로 다른 크기의 포어(pore)가 형성된 것을 특징으로 하는 약물 반응 용기.
well plate; and
It is disposed in the well plate, an inner space is formed, and a side surface surrounding the inner space includes a plurality of inserts formed of a porous material,
Each side of the plurality of inserts is a drug reaction container, characterized in that the pores (pores) of different sizes are formed.
 제1항에 있어서,
상기 복수의 인서트의 측면에 형성된 포어의 크기에 따라 상기 내부 공간에 주입된 약물의 확산 속도가 조절되는 것을 특징으로 하는 약물 반응 용기.
According to claim 1,
A drug reaction container, characterized in that the diffusion rate of the drug injected into the inner space is controlled according to the size of the pores formed on the side surfaces of the plurality of inserts.
 제1항에 있어서,
상기 웰 플레이트의 중심부에 배치되고, 회전 가능하도록 구성된 교반부를 더 포함하고,
상기 복수의 인서트는 상기 교반부를 중심으로 원주 방향으로 배치된 것을 특징으로 하는 약물 반응 용기.
According to claim 1,
It is disposed in the center of the well plate, further comprising a stirrer configured to be rotatable,
The plurality of inserts are drug reaction vessel, characterized in that arranged in the circumferential direction around the stirring unit.
 웰 플레이트; 및 상기 웰 플레이트 내에 배치되고, 내부 공간이 형성되며, 상기 내부 공간을 둘러싼 측면이 다공성 재질로 형성된 복수의 인서트를 포함하고, 상기 복수의 인서트 각각의 측면은 서로 다른 크기의 포어(pore)가 형성된, 약물 반응 용기를 이용한 약물 반응 분석 방법으로서,
상기 웰 플레이트의 수용 공간에 배지를 넣고, 상기 복수의 인서트에 세포를 분주하는 단계;
상기 수용 공간에 약물을 주입하는 단계; 및
상기 약물이 상기 복수의 인서트의 측면을 통과하여 상기 내부 공간으로 확산하는 단계를 포함하고,
상기 확산하는 단계는,
상기 복수의 인서트의 측면 포어 크기 별로 상기 약물이 각기 다른 속도로 확산함에 따라, 다양한 확산 속도를 가진 약물과 상기 세포 간의 반응에 따른 약물 효과 측정이 가능한 것을 특징으로 하는 약물 반응 분석 방법.
well plate; and a plurality of inserts disposed in the well plate, an inner space is formed, and a side surface surrounding the inner space is formed of a porous material, and a side surface of each of the plurality of inserts has pores of different sizes. , A drug reaction analysis method using a drug reaction vessel,
putting a medium into the receiving space of the well plate and dispensing cells into the plurality of inserts;
injecting a drug into the receiving space; and
Including the step of diffusion of the drug into the interior space through the sides of the plurality of inserts,
The spreading step is
As the drug diffuses at different rates for each side pore size of the plurality of inserts, drug reaction analysis method, characterized in that it is possible to measure the drug effect according to the reaction between the drug and the cell having various diffusion rates.
 웰 플레이트; 및 상기 웰 플레이트 내에 배치되고, 내부 공간이 형성되며, 상기 내부 공간을 둘러싼 측면이 다공성 재질로 형성된 복수의 인서트를 포함하고, 상기 복수의 인서트 각각의 측면은 서로 다른 크기의 포어(pore)가 형성된, 약물 반응 용기를 이용한 약물 반응 분석 방법으로서,
상기 웰 플레이트의 수용 공간에 배지를 넣고, 상기 복수의 인서트에 세포를 분주하는 단계;
상기 내부 공간에 약물을 주입하는 단계; 및
상기 약물이 상기 복수의 인서트의 측면을 통과하여 상기 수용 공간으로 확산하는 단계를 포함하고,
상기 확산하는 단계는,
상기 복수의 인서트의 측면 포어 크기 별로 상기 약물이 각기 다른 속도로 확산함에 따라, 다양한 확산 속도를 가진 약물과 상기 세포 간의 반응에 따른 약물 효과 측정이 가능한 것을 특징으로 하는 약물 반응 분석 방법.
well plate; and a plurality of inserts disposed in the well plate, an inner space is formed, and a side surface surrounding the inner space is formed of a porous material, and a side surface of each of the plurality of inserts has pores of different sizes. , A drug reaction analysis method using a drug reaction vessel,
putting a medium into the receiving space of the well plate and dispensing cells into the plurality of inserts;
injecting a drug into the inner space; and
and diffusing the drug into the receiving space through the sides of the plurality of inserts,
The spreading step is
As the drug diffuses at different rates for each side pore size of the plurality of inserts, a drug reaction analysis method characterized in that it is possible to measure the drug effect according to the reaction between the drug and the cell having various diffusion rates.
 제4항 또는 제5항에 있어서,
상기 약물 반응 용기는,
상기 웰 플레이트의 중심부에 배치되고, 회전 가능하도록 구성된 교반부를 더 포함하며, 상기 복수의 인서트는 상기 교반부를 중심으로 원주 방향으로 배치되고,
상기 확산하는 단계는,
상기 교반부를 미리 정해진 속도로 회전시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 약물 반응 분석 방법.
6. The method according to claim 4 or 5,
The drug reaction vessel,
It is disposed in the center of the well plate, further comprising a rotatable agitator, wherein the plurality of inserts are arranged in a circumferential direction around the agitator,
The spreading step is
Drug reaction analysis method comprising the step of rotating the stirring unit at a predetermined speed.
 제4항 또는 제5항에 있어서,
상기 약물은 독소루비신(doxorubicin)과 같은 항암제인 것을 특징으로 하는 약물 반응 분석 방법.6. The method according to claim 4 or 5,
The drug is a drug response analysis method, characterized in that the anticancer drug, such as doxorubicin (doxorubicin).
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