KR20210042664A - Method for opuntia humifusa extract containing antioxidant carbon nanoparticles and reduced viscosity using microwave - Google Patents

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KR20210042664A
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Abstract

The purpose of the present invention is to provide a method for producing an Opuntia humifusa extract, wherein viscosity-related problems of Opuntia humifusa can be resolved. Also, the purpose of the present invention is to provide a cosmetic composition or a food composition comprising an extract of Opuntia humifusa as an active ingredient using a method for producing an extract with reduced cytotoxicity of Opuntia humifusa. The method for producing an Opuntia humifusa extract containing antioxidant carbon nanoparticles using microwaves, wherein the method comprises the steps of: (a) pulverizing Opuntia humifusa; (b) producing an Opuntia humifusa solid by irradiating microwaves to the pulverized Opuntia humifusa; and (c) producing an Opuntia humifusa extract containing antioxidant carbon nanoparticles by adding distilled water to the Opuntia humifusa solid.

Description

마이크로웨이브를 이용하여 항산화 탄소나노입자를 함유하고 점도가 감소된 천년초 추출물을 제조하는 방법{METHOD FOR OPUNTIA HUMIFUSA EXTRACT CONTAINING ANTIOXIDANT CARBON NANOPARTICLES AND REDUCED VISCOSITY USING MICROWAVE}A method of manufacturing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles and reduced viscosity using microwaves {METHOD FOR OPUNTIA HUMIFUSA EXTRACT CONTAINING ANTIOXIDANT CARBON NANOPARTICLES AND REDUCED VISCOSITY USING MICROWAVE}

본 발명은 마이크로웨이브를 이용한 항산화 탄소나노입자를 함유하는 천년초 추출물의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 천년초 원물을 분쇄하여 마이크로웨이브 처리하는 단순한 공정에 의해, 천년초가 가지는 점성을 낮추어 가공 및 상용화가 용이하도록 하는 추출물 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles using microwave, and more particularly, by a simple process of pulverizing the original Cheonnyeoncho and microwave treatment, processing and commercialization by lowering the viscosity of Cheonnyeoncho It relates to a method for preparing an extract to facilitate.

천년초(Opuntia humifusa)는 충남 등지에서 자생하는 한국 토종 선인장으로 일반적으로 손바닥 선인장으로 널리 알려진 백년초(Opuntia ficus-indica var saboten)는 1~2 m 크기로 자라며 길고 굵은 가시가 많은 반면, 천년초는 솜털 가시를 가지고 약 30 cm 크기로 자란다.Opuntia humifusa (Opuntia humifusa) is a Korean native cactus that grows naturally in Chungnam and other places. Opuntia ficus-indica var saboten, generally known as opuntia cactus, grows to 1~2 m in size and has many long and thick thorns, whereas cheonnyeoncho is downy thorns. Take it and grow it to a size of about 30 cm.

제주도에서 재배되는 백년초는 열대지방이 원산지로 저온에 약하여 노지재배가 어려운 반면, 한국 토종 선인장인 천년초는 휴면기인 겨울에도 노지에서 생존하며 병충해에 강한 특징이 있다. Baengnyeoncho grown in Jeju Island is native to the tropical region and is difficult to cultivate in the open field because it is weak at low temperatures, whereas the Korean native cactus, Cheonnyeoncho, survives in the open field even in the dormant winter and has strong characteristics against pests and diseases.

귀화식물인 백년초에 비하여 천년초의 활성에 대해서는 많은 연구가 이루어지지 않은 편이나, 최근 열수에 의한 천년초 줄기 추출물의 항산화 활성 및 사염화탄소로부터 간손상 예방 효과가 보고되었고, 천년초 선인장 추출물의 항산화 효과 연구에서 에틸 아세테이트 분획물이 α-tocopherol과 비슷한 항산화 활성을 나타낸다고 보고된 사례가 있다. There has not been much research on the activity of Cheonnyeoncho compared to the naturalized plant, Baengnyeoncho, but recently, the antioxidant activity of the stem extract of Cheonnyeoncho by hot water and the effect of preventing liver damage from carbon tetrachloride were reported. There has been a case where the acetate fraction has been reported to exhibit an antioxidant activity similar to that of α-tocopherol.

다만, 백년초가 초콜렛 등 식품으로 활발히 이용되는 반면 천년초는 전술한 생리 활성에도 불구하고 식품, 화장품 등으로 가공, 상용화가 거의 이루어지지 않고 있는데, 이는 천년초의 주된 성분인 펙틴에 의한 점성 때문이다.However, while Baengnyeoncho is actively used as food such as chocolate, Cheonnyeoncho is hardly processed and commercialized as foods and cosmetics despite the aforementioned physiological activity, which is due to the viscosity of pectin, the main ingredient of Cheonnyeoncho.

현재까지 천년초의 점성 제거를 위한 시도로는 방사선 추출법, 초고압 추출법, 여과, 효소 가수분해, 발효, 천년초 동결 후 분말화 방법 등이 제시되어 왔다. 여과나 분말화 등의 방법은 점성이 효과적으로 제거되지 않고, 효소 가수분해의 경우 공정이 번거롭고 시간과 비용이 많이 소요되는 문제점이 있었다. 또한, 방사선 추출법은 방사선 조사로 인한 정서상 반감을 일으킬 수 있는 문제점이 있으며, 초고압 추출법은 비용이 많이 소요되며 별도의 기계장치를 요하는 문제점이 있었다.Up to now, attempts to remove the viscosity of Cheonnyeoncho have been suggested by radiation extraction, ultra-high pressure extraction, filtration, enzymatic hydrolysis, fermentation, and freezing and powdering of Cheonnyeoncho. Methods such as filtration or powdering have a problem that viscosity is not effectively removed, and enzymatic hydrolysis is cumbersome and takes a lot of time and cost. In addition, the radiation extraction method has a problem that may cause emotional antagonism due to radiation irradiation, and the ultra-high pressure extraction method requires a lot of cost and requires a separate mechanical device.

또한, 동결 후 분말화 방법은 분말에 물을 넣어 반죽하면 접착력이 강해 성형기에 달라붙고 과립들이 서로 엉겨붙어 제형화가 곤란한 문제가 있어 천년초의 가공, 상용화가 힘든 문제점이 있었다. In addition, in the powdering method after freezing, when water is added to the powder and kneaded, the adhesive strength is strong, so that it sticks to the molding machine, and the granules stick to each other, making it difficult to formulate, so there is a problem that it is difficult to process and commercialize the millennial plant.

본 발명은 천년초가 가지는 점도 문제를 해결할 수 있는 천년초 추출물의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.An object of the present invention is to provide a method for preparing an extract of Cheonnyeoncho that can solve the viscosity problem of Cheonnyeoncho.

또한, 본 발명은 천년초의 세포 독성이 저감된 제조방법을 이용하여 추출된 추출물을 포함하는 화장료 조성물 및 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.In addition, it is an object of the present invention to provide a cosmetic composition and a food composition comprising an extract extracted using a manufacturing method with reduced cytotoxicity of Cheonnyeoncho.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 (a) 천년초를 분쇄하는 단계; (b) 상기 분쇄된 천년초에 마이크로웨이브를 조사하여 천년초 고형물을 제조하는 단계; 및 (c) 상기 천년초 고형물에 증류수를 첨가하여, 항산화 탄소나노입자를 함유한 천년초 추출물을 제조하는 단계; 를 포함하는 마이크로웨이브를 이용한 천년초의 제조방법을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention comprises the steps of: (a) pulverizing Cheonnyeoncho; (b) irradiating microwaves on the pulverized cheonnyeoncho to prepare a cheonnyeoncho solid; And (c) adding distilled water to the solid material of Cheonnyeoncho to prepare a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles. It provides a manufacturing method of Cheonnyeoncho using a microwave comprising a.

상기 (a) 단계에서, 천년초의 잎, 열매, 및 뿌리를 사용할 수 있다.In the step (a), leaves, fruits, and roots of Cheonnyeoncho may be used.

상기 (b) 단계에서 상기 마이크로웨이브 조사는 80 내지 120 ℃의 온도에서 수행될 수 있다.In step (b), the microwave irradiation may be performed at a temperature of 80 to 120°C.

상기 (b) 단계에서 상기 마이크로웨이브 조사는 3 분 내지 15 분 동안 수행될 수 있다.In step (b), the microwave irradiation may be performed for 3 to 15 minutes.

상기 (b) 단계에서 상기 마이크로웨이브를 300 내지 800 W로 조사할 수 있다.In step (b), the microwave may be irradiated with 300 to 800 W.

상기 천년초 추출물은 1.0 내지 3.0 mPa.S의 점도를 가질 수 있다.The Cheonnyeoncho extract may have a viscosity of 1.0 to 3.0 mPa.S.

또한 상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 (a) 천년초를 분쇄하는 단계; (b) 상기 분쇄된 천년초에 마이크로웨이브를 조사하여 천년초 고형물을 제조하는 단계; 및 (c) 상기 천년초 고형물에 증류수를 첨가하여, 항산화 탄소나노입자를 함유한 천년초 추출물을 제조하는 단계에 의해 제조된 천년초 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.In addition, in order to achieve the above object, the present invention comprises the steps of: (a) pulverizing Cheonnyeoncho; (b) irradiating microwaves on the pulverized cheonnyeoncho to prepare a cheonnyeoncho solid; And (c) adding distilled water to the solid material of Cheonnyeoncho to provide a cosmetic composition comprising the Cheonnyeoncho extract prepared by the step of preparing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles as an active ingredient.

또한 상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 (a) 천년초를 분쇄하는 단계; (b) 상기 분쇄된 천년초에 마이크로웨이브를 조사하여 천년초 고형물을 제조하는 단계; 및 (c) 상기 천년초 고형물에 증류수를 첨가하여, 항산화 탄소나노입자를 함유한 천년초 추출물을 제조하는 단계에 의해 제조된 천년초 추출물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물을 제공한다.In addition, in order to achieve the above object, the present invention comprises the steps of: (a) pulverizing Cheonnyeoncho; (b) irradiating microwaves on the pulverized cheonnyeoncho to prepare a cheonnyeoncho solid; And (c) adding distilled water to the solid material of Cheonnyeoncho to provide a food composition comprising the Cheonnyeoncho extract prepared by the step of preparing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles as an active ingredient.

본 발명에 따른 천년초의 추출물 제조방법에 의하면 간단한 공정을 통해 천년초의 점성을 충분히 낮추면서도 천년초가 가지는 세포 독성 정도를 감소시킬 수 있다.According to the method for preparing an extract of Cheonnyeoncho according to the present invention, it is possible to reduce the degree of cytotoxicity of Cheonnyeoncho while sufficiently lowering the viscosity of Cheonnyeoncho through a simple process.

본 발명에 따른 천년초 추출물 제조방법에 의하면 항산화 및 피부 염증 개선의 효능을 가진 천년초를 화장품 또는 식품으로 용이하게 가공하여 상용화할 수 있는 장점이 있다.According to the method for preparing a cheonnyeoncho extract according to the present invention, there is an advantage in that cheonnyeoncho, which has antioxidant and skin inflammation improvement effects, can be easily processed into cosmetics or foods and commercialized.

도 1은 비교예 1 및 실시예 1 내지 4에 따른 천년초 추출물을 나타낸 사진이다.
도 2는 비교예 1 및 실시예 1 내지 4에 따른 천년초 추출물의 점성을 비교한 사진이다.
도 3은 실시예 2에 따른 천년초 추출물에 자외선을 조사한 결과를 나타낸 사진이다.
도 4는 비교예 1 및 실시예 2에 따른 천년초 추출물을 HaCaT 세포에 24 시간 처리한 경우 세포 독성(cytotoxicity) 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 5는 비교예 1 및 실시예 2에 따른 천년초 추출물을 HaCaT 세포에 48 시간 처리한 경우 세포 독성(cytotoxicity) 실험 결과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 비교예 1 및 실시예 2에 따른 천년초 추출물을 HaCaT 세포에 24 시간 처리한 경우 세포사멸(apoptosis) 결과를 비교한 그래프이다.
도 7은 비교예 1 및 실시예 2에 따른 천년초 추출물을 HaCaT 세포에 48 시간 처리한 경우 세포사멸(apoptosis) 결과를 비교한 그래프이다.
1 is a photograph showing the extract of Cheonnyeoncho according to Comparative Example 1 and Examples 1 to 4.
2 is a photograph comparing the viscosity of Cheonnyeoncho extracts according to Comparative Example 1 and Examples 1 to 4.
3 is a photograph showing the result of irradiating ultraviolet rays on the extract of Cheonnyeoncho according to Example 2.
4 is a graph showing the results of a cytotoxicity experiment when the Cheonnyeoncho extract according to Comparative Examples 1 and 2 was treated on HaCaT cells for 24 hours.
5 is a graph showing the results of a cytotoxicity experiment when the Cheonnyeoncho extract according to Comparative Examples 1 and 2 was treated on HaCaT cells for 48 hours.
6 is a graph comparing the results of apoptosis (apoptosis) when the Cheonnyeoncho extract according to Comparative Examples 1 and 2 was treated on HaCaT cells for 24 hours.
7 is a graph comparing the results of apoptosis (apoptosis) when the Cheonnyeoncho extract according to Comparative Examples 1 and 2 was treated on HaCaT cells for 48 hours.

하기의 설명에서는 본 발명의 실시예를 이해하는데 필요한 부분만이 설명되며, 그 이외 부분의 설명은 본 발명의 요지를 흩트리지 않는 범위에서 생략될 것이라는 것을 유의하여야 한다.In the following description, it should be noted that only parts necessary for understanding the embodiments of the present invention will be described, and descriptions of other parts will be omitted without distracting the gist of the present invention.

이하에서 설명되는 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념으로 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다. 따라서 본 명세서에 기재된 실시예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 바람직한 실시예에 불과할 뿐이고, 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.The terms or words used in the present specification and claims described below should not be construed as being limited to a conventional or dictionary meaning, and the inventor is appropriate as a concept of terms in order to describe his own invention in the best way. It should be interpreted as a meaning and concept consistent with the technical idea of the present invention on the basis of the principle that it can be defined. Therefore, the embodiments described in the present specification and the configurations shown in the drawings are only preferred embodiments of the present invention, and do not represent all the technical spirit of the present invention, and various equivalents that can replace them at the time of application It should be understood that there may be variations and variations.

본 발명은 (a) 천년초를 분쇄하는 단계; (b) 상기 분쇄된 천년초에 마이크로웨이브를 조사하여 천년초 고형물을 제조하는 단계; 및 (c) 상기 천년초 고형물에 증류수를 첨가하여, 항산화 탄소나노입자를 함유한 천년초 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 마이크로웨이브를 이용한 항산화 탄소나노입자를 함유하는 천년초 추출물의 제조방법을 제공한다.The present invention comprises the steps of: (a) pulverizing Cheonnyeoncho; (b) irradiating microwaves on the pulverized cheonnyeoncho to prepare a cheonnyeoncho solid; And (c) adding distilled water to the solid material of Cheonnyeoncho, to prepare a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles. It provides a method for producing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles using microwaves.

천년초(Opuntia humifusa, Eastern prickly pear)는 우리나라에 자생하는 오핀티아 속(Opuntia sp.) 선인장 중 내륙에서 월동이 가능한 선인장으로, 제주도에 자생하는 선인장인 백년초와 구분된다. 상기 천년초는 줄기의 형태가 손바닥과 비슷하여 손바닥선인장으로도 불리운다.Cheonnyeoncho (Opuntia humifusa, Eastern prickly pear) is a cactus that can winter in inland among the Opuntia sp. The cheonnyeoncho has a shape similar to the palm of the hand, so it is also called a palm cactus.

상기 천년초는 다육질의 여러해살이 풀 즉, 다년생 현화식물로 줄기는 일반적인 선인장처럼 다육질로서 몇 군데가 마디처럼 잘록한 경절이 있고, 상기 경절은 원통 모양, 공 모양, 타원 모양 등 그 모양이 여러 가지이며, 그 모양에 따라 분류되기도 한다. 상기 경절에는 헛물관이 있고, 표피 가까이에 관다발이 있으며, 새순에 달리는 잎은 바늘처럼 생겼고, 육질로서 완전히 자란 다음에 떨어진다. 떡잎은 바소꼴 또는 삼각형이며 같은 육질로서 화피와 포가 서로 다르다. 일반적으로, 상기 천년초는 자체수분을 절반 이하로 감소시켜, 영하 20 ℃에서도 얼어 죽지 않고 월동이 가능하여, 생명력을 유지할 수 있는 것으로 알려져 있다.The cheonnyeoncho is a fleshy perennial plant, that is, a perennial flowering plant, and the stem is fleshy like a general cactus, and has several points of constriction like a node. They are also classified according to their shape. The ganglia has a hetmul tube, a vascular bundle near the epidermis, and the leaves on the shoots are shaped like needles, and are fleshy, and fall after they are fully grown. Cotyledons are lanceolate or triangular, and have the same flesh, and have different flowers and bracts. In general, it is known that the cheonnyeoncho reduces its own moisture to less than half, so that wintering is possible without freezing and dying even at -20°C, thereby maintaining vitality.

천년초는 종래 동초강목 등을 통해 상기 천년초 즙이 변비 치료효과, 이뇨효과, 장운동의 활성화 및 식욕증진 효과가 있는 것으로 알려져 있으며, 천년초 줄기를 이용한 항산화 활성, 항비만 활성, 간 보호 효과 등이 있는 것으로 알려져 있다. 이러한 천년초에 관한 연구는 주로 줄기와 열매 특히, 줄기에 관한 수행되어 왔으며, 이러한 연구 결과로 천년초 과육 및 줄기는 식품으로 판매되고 있다. 이와 같이, 예로부터 다양한 방법으로 사용되어온 천년초의 경우, 식품이나 의약으로 사용되어 왔으므로, 그 안전성은 보장된 것이라고 평가된다.Cheonnyeoncho is known to have the effect of treating constipation, diuretic effect, activating bowel movement, and increasing appetite through conventional Dongchogangmok, etc., and it has antioxidant activity, anti-obesity activity, and liver protection effect using Cheonnyeoncho stem. Is known. Studies on these cheonnyeonchos have been mainly conducted on stems and fruits, especially stems, and as a result of these studies, the flesh and stems of cheonnyeonchos are sold as food. As described above, since Cheonnyeoncho, which has been used in various ways since ancient times, has been used as a food or medicine, its safety is evaluated to be guaranteed.

상기 (a) 단계에서 바람직하게 천년초의 잎, 열매, 및 뿌리를 사용할 수 있다.In the step (a), preferably, leaves, fruits, and roots of Cheonnyeoncho may be used.

상기 (b) 단계는 분쇄된 천년초에 마이크로웨이브를 조사하여 천년초 고형물을 제조하는 단계이다.The step (b) is a step of preparing a solid material of cheonnyeoncho by irradiating microwaves on the pulverized cheonnyeoncho.

천년초의 열매는 고점도의 점성 물질을 다량으로 함유하고 있으며, 이 점성 물질의 조성은 arabinose, galactose, xylose, galacturonic acid, rhamnose로 구성되어 있는 고분자 식이섬유소인 펙틴이 주된 성분이다.The fruits of Cheonnyeoncho contain a large amount of viscous substances of high viscosity, and the composition of this viscous substance is pectin, a polymer dietary fiber composed of arabinose, galactose, xylose, galacturonic acid, and rhamnose.

상기 점성 물질은 열에 비교적 안정하고, 산성조건에서 물성 및 적색색소의 안정성이 유지되는 것으로 보고되고 있으나 고점도의 점성 물질로 인해 천년초 자체를 식품 소재로 활용하는 것이 어렵다.It is reported that the viscous material is relatively stable to heat and maintains the stability of physical properties and red pigment under acidic conditions, but it is difficult to use Cheonnyeoncho itself as a food material due to the viscous material of high viscosity.

본 발명의 일 실시예에 따라 천년초 혼합물에 마이크로웨이브를 조사하는 경우 펙틴으로 인한 천년초의 점성을 감소시킬 수 있다. According to an embodiment of the present invention, when microwaves are irradiated to the mixture of Cheonnyeoncho, the viscosity of Cheonnyeoncho due to pectin may be reduced.

상기 마이크로웨이브 조사는 천년초 추출물에 마이크로웨이브를 조사하여 가열하는 열적인 반응(thermal reaction)을 의미한다. 마이크로웨이브는 1 m 내지 1 mm의 파장을 갖는 라디오파, 또는 300 MHz 내지 300 GHz의 주파수를 갖는 파일 수 있다. 마이크로웨이브에 의한 가열은 반응물의 양이나 상태 등에 따라 달라질 수 있다.The microwave irradiation refers to a thermal reaction in which the extract of Cheonnyeoncho is irradiated with microwaves and heated. The microwave may be a radio wave having a wavelength of 1 m to 1 mm, or a file having a frequency of 300 MHz to 300 GHz. Heating by microwave may vary depending on the amount or state of the reactants.

일 예로서, 상기 마이크로웨이브 조사는 80 내지 120 ℃의 온도에서 수행될 수 있다.As an example, the microwave irradiation may be performed at a temperature of 80 to 120 °C.

또한, 상기 마이크로웨이브 조사는 3 분 내지 15 분 동안 수행할 수 있다. In addition, the microwave irradiation may be performed for 3 to 15 minutes.

또한, 상기 마이크로웨이브 조사는 상압하에서 수행될 수 있다.In addition, the microwave irradiation may be performed under normal pressure.

상기 마이크로웨이브 조사는 중성 용액, 예를 들어 수성 용액 중에서 조사되는 것일 수 있다. “수성 용액(aqueous solution)"이란 물을 포함하는 용액을 의미한다. 상기 수성 용액은 물 또는 물과 에탄올을 포함하는 것일 수 있다.The microwave irradiation may be irradiated in a neutral solution, for example, an aqueous solution. The term “aqueous solution” refers to a solution containing water, which may include water or water and ethanol.

상기 마이크로웨이브의 출력은 반응물의 양에 따라 적절히 증감될 수 있으나, 바람직하게는 300 내지 800 W일 수 있다. 300 W 미만일 경우 천년초 고형물을 제조하는 데 장시간이 소요되며, 800 W를 초과하는 경우 고형물(쿠키 형태)로 제조되지 않고, 과도한 탄화 공정이 진행이 되므로 상기 범위 내에서 조사하는 것이 바람직하다. The output of the microwave may be appropriately increased or decreased depending on the amount of the reactant, but may preferably be 300 to 800 W. If it is less than 300 W, it takes a long time to prepare a solid material of Cheonnyeoncho, and if it exceeds 800 W, it is not produced as a solid material (cookie form), and an excessive carbonization process proceeds, so it is preferable to irradiate within the above range.

상기 (c) 단계에서 천년초 고형물을 용매 추출법에 의해 추출하여 천년초 추출물을 제조한다. 상기 용매 추출은 증류수, 유기용매, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 용매일 수 있으며, 증류수를 사용하는 것이 바람직하다.In step (c), the solid substance of Cheonnyeoncho is extracted by a solvent extraction method to prepare a Cheonnyeoncho extract. The solvent extraction may be any one solvent selected from the group consisting of distilled water, an organic solvent, and a mixture thereof, and it is preferable to use distilled water.

상기 유기용매는 탄소수 1 내지 5의 알코올, 상기 알코올 희석수, 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매와 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산, 또는 디클로로메탄의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있다. 상기 탄소수 1 내지 5의 알코올은 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 피나콜 등의 2가 알코올인 글리콜 또는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 이소프로판올 등의 1가 알코올일 수 있으며, 유기용매를 사용하는 경우 에탄올을 사용하는 것이 바람직하다.The organic solvent may be an alcohol having 1 to 5 carbon atoms, a polar solvent such as dilute alcohol, ethyl acetate or acetone, and a non-polar solvent of ether, chloroform, benzene, hexane, or dichloromethane, or a mixed solvent thereof. The alcohol having 1 to 5 carbon atoms may be a glycol, such as a dihydric alcohol such as ethylene glycol, propylene glycol, butylene glycol, or pinacol, or a monohydric alcohol such as methanol, ethanol, propanol, butanol, and isopropanol, and an organic solvent is used. If so, it is preferable to use ethanol.

상기 에탄올은 10 %(v/v) 내지 99.9 %(v/v)로 물에 희석한 것일 수 있으나, 80 %(v/v)로 희석된 에탄올을 사용하는 것이 바람직하다.The ethanol may be diluted in water at 10% (v/v) to 99.9% (v/v), but it is preferable to use ethanol diluted at 80% (v/v).

상기 단계에 의해 추출된 천년초 추출물의 점도는 1.0 내지 3.0 mPa.S일 수 있다.The viscosity of the Cheonnyeoncho extract extracted by the above step may be 1.0 to 3.0 mPa.S.

본 발명의 다른 측면에 의하면, 본 발명은 (a) 천년초를 분쇄하는 단계; (b) 상기 분쇄된 천년초에 마이크로웨이브를 조사하여 천년초 고형물을 제조하는 단계; 및 (c) 상기 천년초 고형물에 증류수를 첨가하여, 항산화 탄소나노입자를 함유한 천년초 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 천년초 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.According to another aspect of the present invention, the present invention comprises the steps of: (a) pulverizing cheonnyeoncho; (b) irradiating microwaves on the pulverized cheonnyeoncho to prepare a cheonnyeoncho solid; And (c) adding distilled water to the solid material of Cheonnyeoncho to provide a cosmetic composition comprising a Cheonnyeoncho extract as an active ingredient comprising the step of preparing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles.

천년초 추출물의 제조방법에 대해 상기와 중복되는 설명은 생략한다. The overlapping description of the method for preparing the Cheonnyeoncho extract will be omitted.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 천년초 마이크로웨이브 추출물을 조성물 총 중량에 대해 0.001 내지 1.0 중량%로 함유하는 것이 바람직하다. The cosmetic composition according to the present invention preferably contains a microwave extract of Cheonnyeoncho in an amount of 0.001 to 1.0% by weight based on the total weight of the composition.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에 공지된 방법을 이용하여 각종 공지의 성분 등을 추가하여 화장수, 로션, 크림, 에센스, 팩, 메이컵베이스, 파운데이션, 바디오일, 바디로션, 클렌징오일, 클렌징폼, 헤어오일, 헤어샴프 및 헤어린스 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention is a lotion, lotion, cream, essence, pack, makeup base, foundation, body oil, body lotion, cleansing oil, cleansing foam by adding various known ingredients using a method known in the art. , Hair oil, hair shampoo and hair rinse can be prepared in any one formulation selected from.

구체적으로 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔, 팩인 경우 공지의 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀롤로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.Specifically, when the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a paste, cream, gel, or pack, known ingredients include animal fiber, plant fiber, wax, paraffin, starch, tragacanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, Silica, talc, or zinc oxide may be used.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더인 경우 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a powder, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 비방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, a solvating agent or an emulsifying agent may be used, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1, 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol, or non-propionic acid ester of sorbitan may be used.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화이소스테아릴알코올, 폴리옥시에틸렌 스르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀롤로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a suspension, liquid diluents such as water, ethanol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, suspending agents such as polyoxyethylene srbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, microcrystalline Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tragacanth, and the like may be used.

본 발명의 또 다른 측면에 의하면, 본 발명은 (a) 천년초를 분쇄하는 단계; (b) 상기 분쇄된 천년초에 마이크로웨이브를 조사하여 천년초 고형물을 제조하는 단계; 및 (c) 상기 천년초 고형물에 증류수를 첨가하여, 항산화 탄소나노입자를 함유한 천년초 추출물을 제조하는 단계;를 포함하는 천년초 추출물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물을 제공한다.According to another aspect of the present invention, the present invention comprises the steps of: (a) pulverizing cheonnyeoncho; (b) irradiating microwaves on the pulverized cheonnyeoncho to prepare a cheonnyeoncho solid; And (c) by adding distilled water to the solid material of the cheonnyeoncho, preparing a cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles; provides a food composition comprising the cheonnyeoncho extract as an active ingredient.

상기 식품이란 건강보조식품, 건강기능식품, 기능성 식품 등이나 이에 제한되는 것은 아니며, 천연식품, 가공식품, 일반적인 식자재 등에 본 발명의 천년초 마이크로웨이브 추출물을 첨가하는 것도 포함된다.The food is a health supplement food, a health functional food, a functional food, etc., but is not limited thereto, and includes adding the microwave extract of the present invention to natural foods, processed foods, and general food materials.

본 발명에 따른 천년초 마이크로웨이브 추출물을 포함하는 식품은 상기 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 조성물과 함께 사용될 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따른 천년초 추출물은 식품 또는 음료의 제조시에 식품 또는 음료의 원료 100 중량부에 대하여 0.1 내지 90 중량부, 바람직하게는 1 내지 60 중량부로 첨가될 수 있다. Food containing the microwave extract of Cheonnyeoncho according to the present invention may be added as it is or used with other foods or food compositions, and may be appropriately used according to a conventional method. For example, the cheonnyeoncho extract according to the present invention may be added in an amount of 0.1 to 90 parts by weight, preferably 1 to 60 parts by weight, based on 100 parts by weight of raw materials for food or beverage when preparing food or beverage.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 천년초 추출물을 포함하는 식품은 정제, 경질 또는 연질 캅셀제, 액제, 현탁제 등과 같은 경구투여용 제제의 형태로 이용될 수 있으며, 이들 제제는 허용 가능한 통상의 담체, 예를 들어 경구투여용 제제의 경우에는 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 가용화제, 현탁화제, 보존제 또는 증량제 등을 사용하여 조제할 수 있다.There is no particular limitation on the type of the food. The food containing the Cheonnyeoncho extract can be used in the form of preparations for oral administration such as tablets, hard or soft capsules, solutions, suspensions, etc., and these preparations are acceptable conventional carriers, for example, preparations for oral administration. In this case, it may be prepared using an excipient, a binder, a disintegrant, a lubricant, a solubilizing agent, a suspending agent, a preservative or a bulking agent.

상기 천년초 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제, 기타 영양제 등을 들 수 있으나 이들 종류의 식품으로 제한되는 것은 아니다.Examples of foods to which the Cheonnyeoncho extract can be added include meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gum, dairy products including ice cream, various soups, beverages, tea, and drinks. , Alcoholic beverages and vitamin complexes, and other nutritional supplements, but are not limited to these types of foods.

실시예Example

이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시예에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해서 제공되는 것이다.Hereinafter, examples will be described in detail in order to describe the present invention in detail. However, the embodiments according to the present invention may be modified in various other forms, and the scope of the present invention should not be construed as being limited to the embodiments described below. The embodiments of the present invention are provided to more completely describe the present invention to those of ordinary skill in the art.

비교예 1: 천년초 추출물의 제조Comparative Example 1: Preparation of Cheonnyeoncho extract

천년초의 잎, 열매, 뿌리를 채취하여 가시를 제거한 후 물로 깨끗이 세척하였다. 그 다음 이를 1 cm 이하로 잘게 자른 후 분쇄기에 넣고 고루 분쇄하였다. 분쇄된 천년초와 80 %의 에탄올을 1:9의 비율로 추출기에 넣고 0.5 atm 이하의 압력을 유지하면서 90 분간 추출을 진행하였다. 추출된 액을 3 차에 걸쳐 필터로 여과한 후 농축기에서 물을 좀 더 증발시키고 보존 안정제로 천연 방부제를 2.5 % 혼합하여 최종적으로 천년초 추출물을 완성하였다. The leaves, fruits, and roots of Cheonnyeoncho were collected, thorns were removed, and then washed thoroughly with water. Then, it was finely cut into 1 cm or less, and then put into a grinder and pulverized evenly. The pulverized Cheonnyeoncho and 80% ethanol were added to the extractor at a ratio of 1:9 and extraction was performed for 90 minutes while maintaining a pressure of 0.5 atm or less. After the extracted liquid was filtered through a filter for 3 times, water was further evaporated in a concentrator, and 2.5% of a natural preservative was mixed as a preservation stabilizer to finally complete the Cheonnyeoncho extract.

실시예 1: 천년초 마이크로웨이브 추출물의 제조Example 1: Preparation of microwave extract of Cheonnyeoncho

천년초 원물 17 g을 마이크로웨이브 오븐을 이용하여 100 ℃의 온도에서 800 w(주파수 2450 MHz)로 마이크로웨이브 가열 처리를 5 분간 처리하였다. 마이크로웨이브 가열 처리한 천년초 고형물에 15 ml의 증류수를 추가하여 비교예 1의 천년초 추출물과 동일한 용량이 되도록 처리하고, 그 상등액을 사용하였다. 17 g of the raw material of Cheonnyeoncho was subjected to microwave heating treatment at a temperature of 100° C. at 800 w (frequency 2450 MHz) using a microwave oven for 5 minutes. 15 ml of distilled water was added to the microwave-heated cheonnyeoncho solids to obtain the same volume as the cheonnyeoncho extract of Comparative Example 1, and the supernatant was used.

실시예 2: 천년초 마이크로웨이브 추출물의 제조Example 2: Preparation of microwave extract of Cheonnyeoncho

마이크로웨이브 가열 처리를 10 분간 처리한 것 이외에는 실시예 1과 동일한 방법에 의해 천년초 마이크로웨이브 추출물을 제조하였다.A microwave extract was prepared in the same manner as in Example 1, except that the microwave heat treatment was performed for 10 minutes.

실시예 3: 천년초 마이크로웨이브 추출물의 제조Example 3: Preparation of microwave extract of Cheonnyeoncho

마이크로웨이브 가열 처리를 15 분간 처리한 것 이외에는 실시예 1과 동일한 방법에 의해 천년초 마이크로웨이브 추출물을 제조하였다.A microwave extract was prepared in the same manner as in Example 1, except that the microwave heat treatment was performed for 15 minutes.

실시예 4: 천년초 마이크로웨이브 추출물의 제조Example 4: Preparation of microwave extract of Cheonnyeoncho

마이크로웨이브 가열 처리를 20 분간 처리한 것 이외에는 실시예 1과 동일한 방법에 의해 천년초 마이크로웨이브 추출물을 제조하였다.A microwave extract of Cheonnyeoncho was prepared in the same manner as in Example 1, except that the microwave heat treatment was performed for 20 minutes.

실험예Experimental example 1: One: 천년초Millennium 추출방법에 따른 점도 평가 Viscosity evaluation according to extraction method

실시예 1 내지 4에 따른 천년초 추출물과 비교예 1의 천년초 추출물의 점성을 비교하였다. The viscosity of the Cheonnyeoncho extract according to Examples 1 to 4 and the Cheonnyeoncho extract of Comparative Example 1 was compared.

도 1은 비교예 1 및 실시예 1 내지 4에 따른 천년초 추출물을 나타낸 사진이고, 도 2는 비교예 1 및 실시예 1 내지 4에 따른 천년초 추출물의 점성을 비교한 사진이다.1 is a photograph showing the extract of Cheonnyeoncho according to Comparative Example 1 and Examples 1 to 4, and FIG. 2 is a photograph comparing the viscosity of the extract of Cheonnyeoncho according to Comparative Example 1 and Examples 1 to 4.

도 1 및 도 2를 참조하면, 마이크로웨이브 처리를 하지 않은 비교예 1의 천년초 추출물은 높은 점성을 띄는 것으로 확인되었다. 반면 마이크로웨이브 처리한 실시예 1 내지 4의 천년초 추출물의 경우 침전물과 상등액의 분리가 일어나 점성이 감소한 것을 확인할 수 있었다.Referring to Figures 1 and 2, it was confirmed that the extract of Comparative Example 1 without microwave treatment exhibits a high viscosity. On the other hand, in the case of the extracts of Cheonnyeoncho of Examples 1 to 4 subjected to microwave treatment, it was confirmed that the sediment and the supernatant were separated and the viscosity decreased.

따라서, 천년초를 마이크로웨이브 처리하여 추출한 경우 천년초의 점성을 현저히 감소시킬 수 있으며, 마이크로웨이브 처리 시간이 길어질수록 추출물의 점성 감소에 더 효과적임을 확인할 수 있었다.Accordingly, it was confirmed that the viscosity of Cheonnyeoncho was significantly reduced when extracted by microwave treatment, and the longer the microwave treatment time was, the more effective it was in reducing the viscosity of the extract.

실험예Experimental example 2: 2: 천년초Millennium 추출물 내의 Within the extract 탄소나노입자Carbon nanoparticles 확인 실험 Confirmation experiment

도 3은 실시예 2에 따른 천년초 추출물에 자외선을 조사한 결과를 나타낸 사진이다. 3 is a photograph showing the result of irradiating ultraviolet rays on the extract of Cheonnyeoncho according to Example 2.

탄소나노물질은 자외선을 받으면 청색 계열의 형광을 보이므로, 실시예 2에 따른 천년초 추출물 내에 항산화 탄소나노입자가 포함되어 있는지 확인하기 위하여 천년초 추출물에 자외선(UV)을 조사하였다. Since carbon nanomaterials exhibit blue-based fluorescence when exposed to ultraviolet rays, ultraviolet rays (UV) were irradiated on the Cheonnyeoncho extract to confirm whether antioxidant carbon nanoparticles were contained in the Cheonnyeoncho extract according to Example 2.

도 3을 참조하면, 천년초 추출물에 자외선을 조사한 결과 청색 형광이 나타난 것을 확인할 수 있어, 본 발명에 따르면 천년초의 항산화 효과를 가지는 탄소나노입자를 천년초 추출물로부터 얻을 수 있다.Referring to FIG. 3, it can be seen that blue fluorescence appears as a result of irradiation with ultraviolet rays on the Cheonnyeoncho extract, and according to the present invention, carbon nanoparticles having an antioxidant effect of Cheonnyeoncho can be obtained from the Cheonnyeoncho extract.

실험예Experimental example 3: 3: 천년초Millennium 마이크로웨이브 추출물의 Microwave extract HaCaTHaCaT 각질세포에 대한 세포 독성(cytotoxicity) 평가 Evaluation of cytotoxicity on keratinocytes

천년초 마이크로웨이브 추출물의 HaCaT 각질세포에 대한 세포독성을 평가하였다. 96 well plate에 HaCaT cell을 5×104 개를 넣고 배양하고, 실시예 2의 천년초 추출물을 각 well에 농도별(10, 50, 100, 300, 500 μg/mL)로 접종하였다. 48 시간 동안 배양한 후 FBS가 들어가지 않은 DMEM 배지로 1회 세척하여 주었다. 한편, 음성대조군으로는 비교예 1의 천년초 추출물을 HaCaT 세포에 처리하여 실험하였다. The cytotoxicity of the microwave extract of Cheonnyeoncho to HaCaT keratinocytes was evaluated. 5 × 10 4 HaCaT cells were added to a 96 well plate and cultured, and the Cheonnyeoncho extract of Example 2 was inoculated into each well at concentrations (10, 50, 100, 300, 500 μg/mL). After incubation for 48 hours, it was washed once with DMEM medium without FBS. On the other hand, as a negative control group, the extract of Cheonnyeoncho of Comparative Example 1 was treated with HaCaT cells and tested.

상기 천년초 추출물이 처리된 HaCaT 세포에 CCK-8 assay 용액을 각 웰당 10㎕ 처리하고, 1~4시간 후 분광광도계를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하여 세포생존율을 계산하였다.The HaCaT cells treated with the Cheonnyeoncho extract were treated with 10 µl of CCK-8 assay solution per well, and after 1 to 4 hours, the absorbance was measured at 540 nm using a spectrophotometer to calculate the cell viability.

도 4는 비교예 1 및 실시예 2에 따른 천년초 추출물을 HaCaT 세포에 24 시간 처리한 경우 세포 독성(cytotoxicity) 실험 결과를 나타낸 그래프이고, 도 5는 비교예 1 및 실시예 2에 따른 천년초 추출물을 HaCaT 세포에 48 시간 처리한 경우 세포 독성(cytotoxicity) 실험 결과를 나타낸 그래프이다.4 is a graph showing the results of a cytotoxicity experiment when the Cheonnyeoncho extract according to Comparative Examples 1 and 2 was treated on HaCaT cells for 24 hours, and FIG. 5 is a graph showing the results of the Cheonnyeoncho extract according to Comparative Examples 1 and 2 This is a graph showing the results of cytotoxicity experiments when HaCaT cells were treated for 48 hours.

도 4 및 도 5를 참조하면, 비교예 1의 천년초 추출물은 처리농도가 증가할수록 세포 생존율이 점점 감소하였으며, 500 ㎍/mL의 농도로 천년초 추출물을 처리한 경우에는 세포 생존율이 40 %로 나타나 인간 각질세포에 대해 독성을 나타내는 것을 확인하였다. 4 and 5, the cell viability of the Cheonnyeoncho extract of Comparative Example 1 gradually decreased as the treatment concentration increased, and when the Cheonnyeoncho extract was treated at a concentration of 500 μg/mL, the cell survival rate was 40%. It was confirmed that it exhibits toxicity to keratinocytes.

반면, 실시예 2의 천년초 마이크로웨이브 추출물은 농도가 증가하여도 세포 생존율이 일정 수준 이상을 유지하였다. 비교예 1의 천년초 추출물을 500 ㎍/mL의 농도로 처리한 경우와 비교하여 같은 농도 실시예 2의 천년초 추출물을 처리시 70 % 이상의 세포 생존율을 보여 마이크로웨이브 처리한 천년초 추출물이 인간 각질세포에 대해 세포 독성이 낮음을 확인할 수 있었다. On the other hand, the microwave extract of Cheonnyeoncho of Example 2 maintained a certain level of cell viability or higher even when the concentration was increased. Compared to the case where the Cheonnyeoncho extract of Comparative Example 1 was treated at a concentration of 500 μg/mL, when the Cheonnyeoncho extract of Example 2 was treated at the same concentration, the cell survival rate was 70% or more. It was confirmed that the cytotoxicity was low.

실험예Experimental example 4: 4: 천년초Millennium 마이크로웨이브 추출물의 Microwave extract HaCaTHaCaT 각질세포에 대한 세포 사멸 정도 평가 Evaluation of the degree of apoptosis on keratinocytes

UVB-유도 세포사멸(induced Apoptosis)를 통해 생겨나는 세포사멸 세포체(apoptotic cell)의 양을 확인하기 위하여 annexin-V/PI를 사용하여 유세포분석기(Flow cytometry)로 확인하였다.In order to confirm the amount of apoptotic cells generated through UVB-induced apoptosis, it was confirmed by flow cytometry using annexin-V/PI.

HaCaT cell을 60 mm dish에 배양하고, UVB를 조사시킨 후 아무것도 처리하지 않은 천년초 추출물과 실시예 2의 천년초 마이크로웨이브 추출물을 각각 농도별(100, 300 ㎍/mL)로 처리하였다. 6 시간 이후 세포주를 파이펫팅(pippeting)하여 1×106 cells/㎖만큼 시험관에 넣고 PBS로 washing한 후, 상층액을 버리고 cell pellet에 binding buffer(10 mM Hepes/NaOH pH 7.4, 140 mM NaCl, 2.5 mM CaCl2)로 다시 파이펫팅을 하였다. 이후, FITC-conjugated annexin V Apoptosis Detection Kit(BD Pharmigen, 556547, U.S.A)와 propiium Ioddide(PI)(FITC annexin V kit 포함)를 넣고 암실에서 15 분 동안 배양하여 염색 시킨 다음에 염색된 세포를 분석기(flow cytometer; Fluorescence-activated cell sorting, FACS calibur;Becton-Dickinson)로 분석하고 소프트웨어(Cell Quest software)를 이용하여 apoptotic cell의 비율을 측정하였다.HaCaT cells were cultured in a 60 mm dish, and after irradiation with UVB, the untreated Cheonnyeoncho extract and the Cheonnyeoncho microwave extract of Example 2 were treated at different concentrations (100, 300 μg/mL). After 6 hours, pipetting the cell line into a test tube as much as 1×10 6 cells/ml and washing with PBS, discard the supernatant and add a binding buffer (10 mM Hepes/NaOH pH 7.4, 140 mM NaCl, It was pipetted again with 2.5 mM CaCl 2 ). Thereafter, FITC-conjugated annexin V Apoptosis Detection Kit (BD Pharmigen, 556547, USA) and propiium Ioddide (PI) (including FITC annexin V kit) were added and incubated for 15 minutes in the dark for staining. Flow cytometer; Fluorescence-activated cell sorting, FACS calibur; Becton-Dickinson), and the percentage of apoptotic cells was measured using the software (Cell Quest software).

도 6은 비교예 1 및 실시예 2에 따른 천년초 추출물을 HaCaT 세포에 24 시간 처리한 경우 세포사멸(apoptosis) 결과를 비교한 그래프이고, 도 7은 비교예 1 및 실시예 2에 따른 천년초 추출물을 HaCaT 세포에 48 시간 처리한 경우 세포사멸(apoptosis) 결과를 비교한 그래프이다.6 is a graph comparing the results of apoptosis when the Cheonnyeoncho extract according to Comparative Examples 1 and 2 was treated on HaCaT cells for 24 hours, and FIG. 7 is a graph comparing the Cheonnyeoncho extract according to Comparative Examples 1 and 2 This is a graph comparing the results of apoptosis when treated with HaCaT cells for 48 hours.

Live cell (%)Live cell (%) Apoptosis cell (%)Apoptosis cell (%) Late apoptosis cell (%)Late apoptosis cell (%) Necrosis cell (%)Necrosis cell (%) 양성 대조군Positive control 1.31.3 61.761.7 26.326.3 10.710.7 음성 대조군Negative control 91.291.2 6.86.8 1.91.9 00 실시예 2 (100 ㎍/mL)Example 2 (100 μg/mL) 88.288.2 8.68.6 3.13.1 00 실시예 2 (300 ㎍/mL)Example 2 (300 μg/mL) 71.471.4 26.726.7 1.81.8 0.10.1 비교예 1 (100 ㎍/mL)Comparative Example 1 (100 μg/mL) 54.254.2 41.741.7 4.04.0 0.10.1 비교예 1 (300 ㎍/mL)Comparative Example 1 (300 μg/mL) 33.833.8 60.860.8 5.45.4 0.10.1

Live cell (%)Live cell (%) Apoptosis cell (%)Apoptosis cell (%) Late apoptosis cell (%)Late apoptosis cell (%) Necrosis cell (%)Necrosis cell (%) 양성 대조군Positive control 1.31.3 61.761.7 26.326.3 10.710.7 음성 대조군Negative control 91.291.2 6.86.8 1.91.9 00 실시예 2 (100 ㎍/mL)Example 2 (100 μg/mL) 62.662.6 35.435.4 1.81.8 0.20.2 실시예 2 (300 ㎍/mL)Example 2 (300 μg/mL) 51.651.6 43.643.6 4.74.7 00 비교예 1 (100 ㎍/mL)Comparative Example 1 (100 μg/mL) 16.116.1 78.878.8 55 0.10.1 비교예 1 (300 ㎍/mL)Comparative Example 1 (300 μg/mL) 13.513.5 78.378.3 88 0.30.3

상기 표 1 및 표 2는 비교예 1 및 실시예 2의 천년초 추출물을 HaCaT 각질세포에 처리한 경우 세포 사멸 결과를 정리한 표이다. Tables 1 and 2 are tables summarizing the cell death results when the Cheonnyeoncho extracts of Comparative Examples 1 and 2 were treated with HaCaT keratinocytes.

도 6 내지 7 및 표 1 내지 2를 참조하면, 실시예 2의 천년초 마이크로웨이브 추출물은 비교예 1의 천년초 추출물에 비하여 apoptosis cell의 UVB로 인한 세포 사멸을 억제하여 세포의 생존율을 농도 의존적으로 높인다는 사실을 알 수 있었다. 또한, HaCaT 각질세포에서 천년초 추출물에 의한 노출시간이 길어질수록 세포 사멸 비율이 현저하게 증가하는 것을 확인할 수 있었다.6 to 7 and Tables 1 to 2, the microwave extract of Cheonnyeoncho of Example 2 inhibits cell death due to UVB of apoptosis cells compared to the extract of Cheonnyeoncho of Comparative Example 1, thereby increasing the viability of cells in a concentration-dependent manner. I could see the facts. In addition, it was confirmed that the cell death rate significantly increased as the exposure time by the Cheonnyeoncho extract in HaCaT keratinocytes increased.

지금까지 본 발명의 일 실시예에 따른 마이크로웨이브를 이용한 항산화 탄소나노입자를 포함하는 천년초 추출물의 제조방법에 관한 구체적인 실시예에 관하여 설명하였으나, 본 발명의 범위에서 벗어나지 않는 한도 내에서는 여러 가지 실시 변형이 가능함은 자명하다.Until now, specific examples of a method for preparing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles using microwaves according to an embodiment of the present invention have been described, but various implementation modifications within the limit not departing from the scope of the present invention This possibility is self-evident.

그러므로 본 발명의 범위는 설명된 실시예에 국한되어 정해져서는 안 되며, 후술하는 특허청구범위뿐만 아니라 이 특허청구범위와 균등한 것들에 의해 정해져야 한다.Therefore, the scope of the present invention should not be defined by being limited to the described embodiments, and should be defined by the claims and equivalents as well as the claims to be described later.

즉, 전술된 실시예는 모든 면에서 예시적인 것이며, 한정적인 것이 아닌 것으로 이해되어야 하며, 본 발명의 범위는 상세한 설명보다는 후술될 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 그 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.That is, it should be understood that the above-described embodiments are illustrative in all respects and not limiting, and the scope of the present invention is indicated by the claims to be described later rather than the detailed description, and the meaning and scope of the claims and All changes or modified forms derived from the equivalent concept should be construed as being included in the scope of the present invention.

Claims (8)

(a) 천년초를 분쇄하는 단계;
(b) 상기 분쇄된 천년초에 마이크로웨이브를 조사하여 천년초 고형물을 제조하는 단계; 및
(c) 상기 천년초 고형물에 증류수를 첨가하여, 항산화 탄소나노입자를 함유한 천년초 추출물을 제조하는 단계;
를 포함하는 마이크로웨이브를 이용한 항산화 탄소나노입자를 함유하는 천년초 추출물의 제조방법.
(a) pulverizing Cheonnyeoncho;
(b) irradiating microwaves on the pulverized cheonnyeoncho to prepare a cheonnyeoncho solid; And
(c) adding distilled water to the solid material of Cheonnyeoncho to prepare an extract of Cheonnyeoncho containing antioxidant carbon nanoparticles;
Method for producing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles using a microwave comprising a.
제1항에 있어서,
상기 (a) 단계에서
천년초의 잎, 열매, 및 뿌리를 사용하는 것을 특징으로 하는 마이크로웨이브를 이용한 항산화 탄소나노입자를 함유하는 천년초 추출물의 제조방법.
The method of claim 1,
In step (a)
A method for producing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles using microwaves, characterized in that the leaves, fruits, and roots of Cheonnyeoncho are used.
제1항에 있어서,
상기 (b) 단계에서
상기 마이크로웨이브 조사는 80 내지 120 ℃의 온도에서 수행되는 것을 특징으로 하는 마이크로웨이브를 이용한 항산화 탄소나노입자를 함유하는 천년초 추출물의 제조방법.
The method of claim 1,
In step (b)
The microwave irradiation method for producing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles using microwave, characterized in that carried out at a temperature of 80 to 120 ℃.
제1항에 있어서,
상기 (b) 단계에서
상기 마이크로웨이브 조사는 3 분 내지 15 분 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 마이크로웨이브를 이용한 항산화 탄소나노입자를 함유하는 천년초 추출물의 제조방법.
The method of claim 1,
In step (b)
The microwave irradiation is a method for producing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles using microwave, characterized in that performed for 3 to 15 minutes.
제1항에 있어서,
상기 (b) 단계에서
상기 마이크로웨이브를 300 내지 800 W로 조사하는 것을 특징으로 하는 마이크로웨이브를 이용한 항산화 탄소나노입자를 함유하는 천년초 추출물의 제조방법.
The method of claim 1,
In step (b)
Method for producing a Cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles using microwave, characterized in that irradiating the microwave with 300 to 800 W.
제1항에 있어서,
상기 천년초 추출물은 1.0 내지 3.0 mPa.S의 점도를 갖는 것을 특징으로 하는 마이크로웨이브를 이용한 항산화 탄소나노입자를 함유하는 천년초 추출물의 제조방법.
The method of claim 1,
The cheonnyeoncho extract is a method for producing a cheonnyeoncho extract containing antioxidant carbon nanoparticles using microwave, characterized in that it has a viscosity of 1.0 to 3.0 mPa.S.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 방법으로 제조된 천년초 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물.A cosmetic composition comprising an extract of Cheonnyeoncho prepared by the method of any one of claims 1 to 6 as an active ingredient. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항의 방법으로 제조된 천년초 추출물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물.A food composition comprising the extract of Cheonnyeoncho prepared by the method of any one of claims 1 to 6 as an active ingredient.
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