KR20200117919A - A culture dish capable of co-culturing each fertilized egg - Google Patents

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KR20200117919A
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김민규
박연배
김병호
이진희
길태영
박강선
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주식회사 엠케이바이오텍
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Abstract

The present invention relates to a fertilized egg culture dish which physically separates a space and thus enables each of fertilized eggs to be cultured. The present invention provides a culture dish (10) enabling co-culturing of each of fertilized eggs, the culture dish (10) comprising: a protective frame part (11) for protecting the culture dish (10); a dish bottom plate part (20) provided below the protective frame part (11); a channel (30) provided in the dish bottom plate part (20); a substrate (40) provided at the inside of the channel (30); a substrate protecting part (31) for protecting the substrate (40); and a well (41) enabling fertilized eggs to be cultured on the substrate (40). In addition, according to the culture dish enabling co-culturing of each of fertilized eggs of the present invention, the well (41) of the substrate (40) comprises an upper end part (41-1) and a lower end part (41-2), wherein the upper end part (41-1) has a cylindrical structure and the lower end part (41-2) has a conical inclined structure. Furthermore, according to the culture dish enabling co-culturing of each of fertilized eggs of the present invention, the substrate (40) is provided with an identification part (42) to perform a function of specifying a well position and thus perform a function of informing which fertilized egg is cultured and in which well the fertilized egg is cultured.

Description

각각의 수정란을 공동배양 할 수 있는 배양 접시{A culture dish capable of co-culturing each fertilized egg}A culture dish capable of co-culturing each fertilized egg}

본 발명은 물리적으로 공간을 분리해 수정란 각각의 배양이 가능하게 하는 수정란 배양 접시에 관한 것이다.The present invention relates to a fertilized egg culture dish that enables cultivation of each fertilized egg by physically separating the space.

일반적으로 우리나라의 수정란 이식은 1979년부터 한우에서 비외과적으로 수정란의 채취와 이식이 이루어졌다. 이후 1980년대에 과배란처리에 의한 채네 수정란이 집중적으로 생산되어왔고, 젖소에서 능력개량의 수단으로 외국 수정란이 도입되어 이식시험을 실시하기도 하였다. 1990년 이전에 수정란 생산 방법은 체내에서 생산된 수정란이 대다수를 이루었지만, 이후 지속적인 수정란 연구로 체외 수정란이 생산되기 시작하였다. 초기 체외 수정란의 경우 이식된 수란우의 유산율이 인공수정과 체내 수정란 보다 높으며, 송아지의 체중, 임신 기간, 난산 및 기형이 증가하였다. 2000년대에는 혈청 무사용 배양액 개발, 성장인자 첨가 체외배양 배양액 등 체외 수정란의 문제를 극복하는 다양한 연구들이 이룸어짐에 따라 세계적으로 체외 수정란에 대한 수요가 급격히 증가하게 되었다. 최근에는 체외 수정란이 체내 수정란 생산량을 따라 잡았으며, 이 이면에 OPU(Ovum Pick Up)이라는 새로운 기술이 있다. 유전체분석방법 중 단일연기다형(Single Nucleotide Polmorphism, SNP),분석 등 첨단 과학기술이 최외 수정란 생산에 접목되어 이용되고 있다. 이를 이용해 성별 확인 및 개체에 대한 다양한 유전적 분석을 실시하여 능력검증에 활용하고 있다.In general, fertilized egg transplantation in Korea has been performed non-surgically in Korean cattle since 1979. Since then, in the 1980s, fertilized eggs by hyperovulation have been intensively produced, and foreign fertilized eggs have been introduced as a means of improving capacity in dairy cows, and transplant tests have also been conducted. Before 1990, the majority of fertilized eggs produced in the body consisted of fertilized eggs produced in the body, but subsequent fertilization studies began to produce in vitro fertilized eggs. In the case of early in vitro fertilized eggs, the miscarriage rate of transplanted cows was higher than that of artificial insemination and in-body fertilization, and the calf's weight, gestation period, difficulty birth and deformity were increased. In the 2000s, as various studies were conducted to overcome the problem of in vitro fertilized eggs, such as the development of serum-free culture medium and in vitro culture medium with growth factors added, the demand for in vitro fertilized eggs rapidly increased worldwide. In recent years, in vitro fertilized eggs have caught up with in vivo fertilized egg production, and behind this is a new technology called OPU (Ovum Pick Up). Among the genome analysis methods, cutting-edge scientific technologies such as Single Nucleotide Polmorphism (SNP) and analysis are being used to produce the outermost fertilized eggs. Using this, it is used to verify the ability by conducting a variety of genetic analyzes on sex and individuals.

대한민국 공개특허 공보 10-2018-0025679(발명의 명칭: 난자 및 초기 배아 배양 용기)은 복수의 세포배양을 위한 복수의 세포 배양용 웰이 용기 내부에 형성된 투과ㅣ성 소재의 세포 배양용기에 있어서, 상기 용기는 원기둥형이고, 상기 용기의 외주면에 체결돌기가 형성되어 있고, 상기 용기의 바닥면으로부터 상기 외주면의 일방으로 연장되어 돌출된 수평돌출부가 구비된, 세포 배양용기가 제공된다.Republic of Korea Patent Publication 10-2018-0025679 (name of the invention: egg and early embryo culture vessel) is a cell culture vessel made of a permeable material in which a plurality of cell culture wells for culturing a plurality of cells are formed inside the vessel, The container is cylindrical, a fastening protrusion is formed on an outer circumferential surface of the container, and a horizontal protrusion extending from the bottom surface of the container to one of the outer circumferential surfaces is provided, and a cell culture container is provided.

하지만 배양에 있어서, 배양자가 배양을 하고 기록하지 않으면 배양세포를 구분하기 힘들 뿐 아니라 배양 갯수가 한정되어 많은 소요시간으로 인한 비용증가가 발생한다는 문제점이 있다.However, in cultivation, if the cultivator does not cultivate and record, it is difficult to distinguish the cultivated cells, and there is a problem in that the number of cultivations is limited, resulting in a cost increase due to a large amount of time required.

종래의 기술은 다양한 배양 접시가 수정란 생산에 사용되고 있다. 하지만 수정란 생산용 접시가 아닌 세포 배양용 배양 접시에 수정란을 배양하고 있어서 수정란의 구분이 어려우며 수정란 배양에 효율적이지 않아 이런 문제를 다소 해결하기 위하여 종래의 세포 배양용 배양 접시에 미소적을 만들어 수정란 배양에 사용하고 있는 실정이다.In the prior art, various culture dishes are used for fertilized egg production. However, since fertilized eggs are cultivated in a culture dish for cell culture rather than a dish for producing fertilized eggs, it is difficult to distinguish fertilized eggs and is not efficient for culturing fertilized eggs. It is a situation in use.

최근에는 수정란에 대한 다양한 실험이 이루어지고 있고 특히 포유동물 중 쥐, 돼지, 소, 염소 등에서 성별 호가인 및 유전적 분석을 실시하고 있다. 이런 유전적 분석을 통하여 수정란 하나하나의 성별 확인이 가능하고 유전 분석을 통하여 수정란에 대한 능력검증이 실시되는데, 현재의 방법에서는 유전분석을 통한 능력검정이나 성별 확인 이후 수정란 각각 하나씩 구분하여 배양하는 방법이 전무한 실정이다.Recently, various experiments have been conducted on fertilized eggs, and in particular, among mammals, gender and genetic analysis are being performed in rats, pigs, cows, and goats. Through this genetic analysis, it is possible to check the sex of each fertilized egg, and the ability to verify the fertilized eggs is performed through genetic analysis.In the current method, the fertilized eggs are separately cultured after the ability test through genetic analysis or gender confirmation. There is no situation.

따라서, 본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결한 수정란 각각에 대한 개별 배양이 가능한 수정란 전용 접시를 제공하고자 한다.Accordingly, the present invention is to provide a plate dedicated to fertilized eggs capable of individually culturing each fertilized egg that solves the above problems.

본 발명은 상기와 같은 문제점 및 요구를 해결하기 위해 The present invention to solve the above problems and needs

상기 배양 접시(10)을 보호하는 보호 프레임부(11);A protective frame 11 for protecting the culture dish 10;

상기 보호 프레임부(11)의 하측에 구비된 접시 하판부(20);A plate lower plate part 20 provided under the protection frame part 11;

상기 접시하판부(20)에 구비된 채널(30);A channel 30 provided in the lower plate portion 20;

상기 채널(30)의 내부에 구비된 기판(40);A substrate 40 provided inside the channel 30;

상기 기판(40)을 보호하는 기판 보호부(31);A substrate protection part 31 protecting the substrate 40;

상기 기판(40)에 수정란 배양이 가능한 웰(41)을 구비하는 것을 특징으로 하는 각각의 수정란을 공동배양 할 수 있는 배양 접시(10)를 제공한다.It provides a culture dish 10 capable of co-culturing each of the fertilized eggs, characterized in that the substrate 40 is provided with a well 41 capable of culturing fertilized eggs.

또한 본 발명은 상기 기판(40)의 웰(41)은 상단부(41-1)와 하단부(41-2)를 포함하여 구성되고,In addition, in the present invention, the well 41 of the substrate 40 includes an upper end 41-1 and a lower end 41-2,

상단부(41-1)는 원기둥 형태의 구조를 띠고 있고 하단부(41-2)는 원뿔형 경사구조로 형성된 것을 특징으로 하는 각각의 수정란을 공동배양 할 수 있는 배양 접시를 제공한다.The upper part (41-1) has a cylindrical structure and the lower part (41-2) provides a culture dish capable of co-cultivating each fertilized egg, characterized in that it is formed in a conical inclined structure.

또한 본 발명은 상기한 기판(40)에 식별부(42)가 구비되어 웰 위치를 특정하게 하는 기능을 수행하여 어느 웰에 어떠한 수정란이 배양되는지를 알 수 있게 해주는 기능을 수행하는 것을 특징으로 하는 각각의 수정란을 공동배양 할 수 있는 배양 접시를 제공한다.In addition, the present invention is characterized in that the identification unit 42 is provided on the above-described substrate 40 to perform a function of specifying a well position, thereby performing a function of allowing to know which fertilized egg is cultured in which well. A petri dish is provided for co-cultivation of each fertilized egg.

종래기술은 유전분석을 통한 능력검정이나 성별 확인 이후 수정란 각각 하나씩 구분하여 배양하는 방법이 전무한 실정인 반면,In the prior art, there is no method of cultivating each fertilized egg separately after the ability test through genetic analysis or gender confirmation.

본 발명에 따른 수정란 배양 접시는 수정란 각각에 대한 개별 배양이 가능한 작용과 효과가 나타난다.The fertilized egg culture dish according to the present invention exhibits an action and effect that enables individual culture of each fertilized egg.

또한 본 발명에 따른 수정란 배양 접시는 식별부가 구비되어 수정란 각각 마다 위치를 특정할 수 있어, 유전자 분석이나 성별 확인이 된 수정란을 하나씩 개별적으로 배양할 수 있는 효과가 나타난다.In addition, the fertilized egg culture dish according to the present invention is provided with an identification unit so that the location of each fertilized egg can be specified, and thus the effect of culturing the fertilized eggs with genetic analysis or sex confirmation can be achieved individually.

또한 본 발명에 따른 수정란 배양 접시의 웰은 상단부(41-1)와 하단부(41-2)를 포함하여 구성되고, 상단부(41-1)는 원기둥 형태의 구조를 띠고 있고 하단부(41-2)는 원뿔형 경사구조로 형성되어 있어 수정란이 상단부(41-1)를 통과하여 하부에 잘 안착하여 흔들리지 않도록 하게 하고 배양액을 첨가하는 과정에서도 수정란이 움직이는 것을 방지하는 기능을 수행하고, 원뿔형 경사구조로 되어 있는 하단부(41-2)는 오목한(concave) 형태로 되어 있는 경우보다 수정란의 안정성 및 배양성에서 높은 기능을 발휘하게 된다.In addition, the well of the fertilized egg culture dish according to the present invention is configured to include an upper end (41-1) and a lower end (41-2), the upper end (41-1) has a cylindrical structure and the lower end (41-2) Is formed in a conical inclined structure, so that the fertilized egg passes through the upper part (41-1) and is well settled in the lower part so that it does not shake, and performs a function of preventing the fertilized egg from moving even in the process of adding the culture medium, The lower part 41-2 has a higher function in terms of stability and cultivation of a fertilized egg than when it is in a concave shape.

도 1은 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 사시도 이다.
도 2는 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 평면도 이다.
도 2b는 본 발명에 따른 수정란 배양 접시의 기판의 세부 구조도 이다.
도 3은 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 측면 확대도 이다.
도 3b는 본 발명에 따른 수정란 배양 접시의 배양액 및 미네랄 오일 처리 구성도 이다.
도 4는 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 채널 확대도 이다.
도 4b는 본 발명에 따른 수정란 배양 접시의 웰의 세부구조도 이다.
도 5는 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 배양과정 순서도 이다.1 is a perspective view according to a preferred embodiment of the present invention.
2 is a plan view according to a preferred embodiment of the present invention.
2B is a detailed structural diagram of a substrate of a fertilized egg culture dish according to the present invention.
3 is an enlarged side view according to a preferred embodiment of the present invention.
Figure 3b is a configuration diagram of the culture medium and mineral oil treatment of the fertilized egg culture dish according to the present invention.
4 is an enlarged view of a channel according to a preferred embodiment of the present invention.
4B is a detailed structure diagram of a well of a fertilized egg culture dish according to the present invention.
5 is a flow chart of a culture process according to a preferred embodiment of the present invention.

도 1은 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 사시도 이다. 도 2는 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 평면도 이다. 도 3은 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 측면 확대도 이다. 도 4는 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 채널 확대도 이다. 도 5는 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 배양과정 순서도 이다.1 is a perspective view according to a preferred embodiment of the present invention. 2 is a plan view according to a preferred embodiment of the present invention. 3 is an enlarged side view according to a preferred embodiment of the present invention. 4 is an enlarged view of a channel according to a preferred embodiment of the present invention. 5 is a flow chart of a culture process according to a preferred embodiment of the present invention.

본 발명은 배양 접시(10)을 보호하는 보호 프레임부(11);The present invention is a protective frame 11 for protecting the culture dish 10;

상기 보호 프레임부(11)의 하측에 구비된 접시 하판부(20);A plate lower plate part 20 provided under the protection frame part 11;

상기 접시하판부(20)에 구비된 채널(30);A channel 30 provided in the lower plate portion 20;

상기 채널(30)의 내부에 구비된 기판(40);A substrate 40 provided inside the channel 30;

상기 기판(40)을 보호하는 기판 보호부(31);A substrate protection part 31 protecting the substrate 40;

상기 기판(40)에 수정란 배양이 가능한 웰(41)을 구비하는 것을 특징으로 하는 각각의 수정란을 공동배양 할 수 있는 배양 접시(10)를 제공한다.It provides a culture dish 10 capable of co-culturing each of the fertilized eggs, characterized in that the substrate 40 is provided with a well 41 capable of culturing fertilized eggs.

본 발명의 배양 접시(10)는 수정란을 배양하는 도구 또는 장치를 의미한다.The culture dish 10 of the present invention means a tool or device for culturing a fertilized egg.

본 발명의 상기한 보호 프레임부(11)는 상기 배양 접시(10)을 보호하는 기능 및 미네랄 오일을 가둬두는 기능을 수행하게 된다.The protection frame 11 of the present invention serves to protect the petri dish 10 and to confine mineral oil.

도 3에서 보는 바와 같이, 보호 프레임부(11)는 하기의 채널(30)의 높이 보다 높게 형성되어 있어 미네랄 오일을 채워서 채널에 채워진 배양액 위로 담겨지게 되어 채널의 배양액의 수분 증발을 방지하는 기능을 수행하게 된다.As shown in FIG. 3, the protective frame part 11 is formed higher than the height of the channel 30 below, and is filled with mineral oil to be contained above the culture solution filled in the channel, thereby preventing water evaporation of the culture solution in the channel. Will perform.

즉, 도 3b에서 보는 바와 같이 채널(30)의 기판 보호부(31)의 높이(H1)보다 보호 프레임부(11)의 높이(H2)가 더 높게 형성되어 있어 채널에 채워진 배양액(A) 위를 미네랄 오일(B)로 막아 주게 되어 채널의 배양액의 수분 증발을 방지하는 기능을 수행하게 되는 것이다.That is, as shown in FIG. 3B, the height (H2) of the protection frame part 11 is higher than the height (H1) of the substrate protection part 31 of the channel 30, so that the above culture solution (A) filled in the channel The mineral oil (B) prevents water evaporation of the culture medium in the channel.

상기한 배양액의 경우 수분이 증발하게 되면 배양액의 기능이 제대로 수행되지 않아 수정란의 효율적인 배양을 저해하게 되는바 상기한 보호 프레임부(11)로 인하여 미네랄 오일이 배양액의 수분 증발을 방지하게 하여 수정란의 효율적인 배양이 촉진되게 된다. In the case of the above-described culture solution, when moisture is evaporated, the function of the culture solution is not properly performed, which hinders the efficient cultivation of the fertilized egg. Due to the protection frame 11, mineral oil prevents water evaporation of the culture solution. Efficient culture is promoted.

본 발명의 접시 하판부(20)는 바닥을 의미하는 것으로 상기 보호 프레임부(11)의 하측에 구비되고, 이와 같은 보호 프레임부(11)과 하측에 구비된 접시 하판부(20)가 하나로 되어 배양접시(10)가 된다.The lower plate portion 20 of the present invention refers to the bottom, and is provided under the protection frame portion 11, and the protection frame portion 11 and the plate lower plate portion 20 provided at the lower side become one. It becomes a culture dish 10.

본 발명의 채널(30)은 그 내부에 수정란 배양이 가능한 웰(41)을 수용하는 기능을 수행하며 웰(41)에 배양액을 저장하고 저류시키는 기능을 수행하는 장치 또는 수단을 의미한다.The channel 30 of the present invention refers to a device or means that performs a function of accommodating a well 41 capable of cultivating a fertilized egg therein, and performs a function of storing and storing a culture medium in the well 41.

도 1에서 보는 바와 같이, 본 발명의 채널(30)은 하부가 막힌 원통 형태로 되어 있으며 내부에 포함된 기판(40)을 보호하고, 그 내부에는 배양액이 채워져서 기판(40)의 웰(41)에 포함된 수정란에 배양액을 제공하는 기능을 수행하게 된다.As shown in FIG. 1, the channel 30 of the present invention has a cylindrical shape with a closed bottom and protects the substrate 40 included therein, and the culture solution is filled therein, so that the well 41 of the substrate 40 is filled. ) Is to perform the function of providing the culture medium to the fertilized eggs contained in.

상기한 채널(30)은 원기둥 형태의 기판 보호부(31)가 구비되어 있어 기판(40)을 보호하는 기능을 수행하고 그 내부에 배양액이 저장되는 기능이 수행된다.The above-described channel 30 is provided with a cylindrical substrate protection unit 31 to perform a function of protecting the substrate 40 and to store a culture solution therein.

도 3b에서 보는 것처럼, 상기한 원기둥 형태의 기판 보호부(31)의 높이(H1)는 보호 프레임부(11)의 높이(H2) 보다 낮게 형성되어 채널(30)에 포함된 배양액(A)이 기판 보호부(31)의 내부에 포함된 미네랄 오일(B)로 덮여지게 되는 기능이 수행된다.As shown in FIG. 3B, the height H1 of the cylindrical substrate protection part 31 is lower than the height H2 of the protection frame part 11, so that the culture solution A contained in the channel 30 is The function of being covered with mineral oil B contained in the substrate protection part 31 is performed.

본 발명의 채널은 바람직하게는 상기한 보호 프레임부(11)의 내부에 하나 또는 둘 이상으로 형성되어 있으며 4개 정도 형성되어 있는 것이 효율적이다.The channel of the present invention is preferably formed in one or two or more inside the protection frame 11 described above, and it is effective to form about four channels.

본 발명의 기판(40)은 웰(41)이 형성되어 있는 틀의 기능을 수행하는 도구 또는 장치를 의미한다. The substrate 40 of the present invention refers to a tool or device that performs the function of a frame in which the wells 41 are formed.

도 2 내지 도 4에서 보는 바와 같이 기판(40)의 내부에는 다수의 웰(41)이 형성되어 있다.As shown in FIGS. 2 to 4, a plurality of wells 41 are formed inside the substrate 40.

본 발명의 웰(41)은 수정란이 배양되는 공간이 형성된 구조를 의미하며 특히 본 발명의 웰(41)은 수정란이 1개 수용되어 배양되는 공간을 형성하는 구조 등을 의미한다.The well 41 of the present invention refers to a structure in which a space in which a fertilized egg is cultured is formed, and in particular, the well 41 of the present invention refers to a structure that forms a space in which one fertilized egg is accommodated and cultured.

본 발명의 웰(41)은 상단부(41-1)와 하단부(41-2)를 포함하여 형성되어 있다.The well 41 of the present invention is formed including an upper end portion 41-1 and a lower end portion 41-2.

도 4b에서 보는 것처럼 상기한 상단부(41-1)는 원기둥 형태의 구조를 띠고 있고 하단부(41-2)는 원뿔형 경사구조로 웰(41)이 형성되어 있는 것을 특징으로 한다.As shown in FIG. 4B, the upper part 41-1 has a cylindrical structure, and the lower part 41-2 is characterized in that the well 41 is formed in a conical inclined structure.

특히 상기한 하단부(41-2)는 원뿔형 경사구조로 되어 있어서 수정란이 상단부(41-1)를 통과하여 하부에 잘 안착하여 흔들리지 않도록 하게 하고 배양액을 첨가하는 과정에서도 수정란이 움직이는 것을 방지하는 기능을 수행한다.In particular, the lower part 41-2 has a conical inclined structure, so that the fertilized egg passes through the upper part 41-1 and is well settled in the lower part so that it does not shake and prevents the fertilized egg from moving even in the process of adding the culture solution. Perform.

원뿔형 경사구조로 되어 있는 하단부(41-2)는 오목한(concave) 형태로 되어 있는 경우보다 수정란의 안정성 및 배양성에서 높은 기능을 발휘하게 된다.The lower part 41-2, which has a conical inclined structure, exhibits a higher function in stability and cultivation of a fertilized egg than in the case of a concave shape.

일실시예로 상기 웰(41)은 지름이 수정란 한개의 지름의 크기(200μm)보다 큰 210~400μm 바람직하게는 300μm이고, 높이가 200~400μm 바람직하게는 300μm인 U자 형태로 되어 있어 상기 각 웰(41)에 수정란이 1개씩 들어간다.In one embodiment, the well 41 has a U-shaped shape having a diameter of 210 to 400 μm, preferably 300 μm, and a height of 200 to 400 μm, preferably 300 μm, which is larger than the size (200 μm) of one fertilized egg. One fertilized egg enters the well 41.

도 2에서 보는 것처럼 본 발명의 웰(41)은 가로와 세로로 배열되어 형성되어 있으며, 통상 가로로 2개이상 통상적으로 5개, 세로로 2개 이상 통상적으로 5개 정도로 형성되어 있다. 즉,가로 세로(5X5)로 25개의 웰이 형성되어 있다.As shown in FIG. 2, the wells 41 of the present invention are formed by being arranged horizontally and vertically, and are generally formed in two or more horizontally, typically five, and two or more vertically, and typically five. That is, 25 wells are formed horizontally and vertically (5X5).

본 발명의 기술적 특징은 상기한 기판(40)에 웰 위치를 특정하게 하는 기능을 수행하는 수정란 식별부(42)가 구비되어 있어 웰 위치를 특정하게 됨에 따라 어느 웰에 어떠한 수정란이 배양되는지를 알 수 있게 해주는 기능을 수행한다.The technical feature of the present invention is that the substrate 40 is provided with a fertilized egg identification unit 42 that performs a function of specifying the well position, so that it is known which fertilized egg is cultured in which well as the well position is specified. It performs a function that allows you to

본 발명의 식별부(42)는 기판의 웰이 형성되어 있는 가로부(42-1)와 세로부(42-2)에 문자 또는 기호로 표시되어 있게 된다.The identification portion 42 of the present invention is indicated by letters or symbols on the horizontal portion 42-1 and the vertical portion 42-2 in which the wells of the substrate are formed.

도 2b에서 보는 것처철, 식별부(42)의 일실시예로 가로부(42-1)에는 영문으로 표시되어 있고, 세로부(42-2)에는 아라비아 숫자로 표시되어 있어서, 각각의 25개의 웰을 특정할 수 있게 된다,As seen in FIG. 2B, as an embodiment of the identification unit 42, the horizontal portion 42-1 is indicated in English, and the vertical portion 42-2 is indicated in Arabic numerals. Well can be specified,

즉, 25개의 웰은 5 X 5 형태의 정사각형으로 구성되며 이 웰들 위에 가로부에 알파벳 A, B, C, D, E가 적혀 있고 왼쪽 세로부에 1, 2, 3, 4, 5가 적혀 있어서 이를 이용하여 각 각의 웰 마다 이름을 정할 수 있으며 A1, C3, B2 등과 같이 웰 위치에 특정 할 수 있게 되는 기능이 수행된다.That is, 25 wells are composed of a 5 X 5 square, and the letters A, B, C, D, and E are written on the horizontal part of the wells, and 1, 2, 3, 4, 5 are written on the left vertical part. By using this, a name can be set for each well, and functions such as A1, C3, B2, etc. to be able to specify a well location are performed.

따라서, 본 발명의 이와 같은 식별부(42)가 형성된 수정란 접시를 사용할 경우 수정란 각각 마다 위치를 특정 할 수 있어, 유전자 분석이나 성별 확인이 된 수정란을 하나씩 개별적으로 배양할 수 있는 효과가 나타난다.Therefore, when using a fertilized egg plate having such an identification part 42 of the present invention, the position of each fertilized egg can be specified, and thus, the effect of culturing the fertilized eggs with genetic analysis or sex confirmation one by one can be achieved.

이하 첨부된 도면을 통해 본 발명의 실시예를 보다 상세하게 설명하고자 한다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in more detail through the accompanying drawings.

도 1 내지 도 2에 도시된 바와 같이 본 발명은 수정란 배양 접시는 기존 세포 배양 접시를 개량한 것으로 지름이 35mm, 높이가 10mm인 원형인 배양 접시(10)를 이용한 것이다. 1 to 2, the present invention is a fertilized egg culture dish which is an improvement of an existing cell culture dish and uses a circular culture dish 10 having a diameter of 35 mm and a height of 10 mm.

상기 높이 10mm로 제작된 접시 보호부(11)은 내용물이 바닥은 35mm의 지름이며 흐르지 않도록 하기 위한 원기둥형으로 구비되어 있다. 내부에 지름 5mm, 높이 3mm의 원기둥형 기판 보호부(31)가 4개 위치하고 있다.The plate protection part 11 manufactured with a height of 10 mm is provided in a cylindrical shape for preventing the contents from flowing with a diameter of 35 mm at the bottom. There are four cylindrical substrate protection parts 31 having a diameter of 5 mm and a height of 3 mm.

상기 배양 접시(10)는 투광성 소재로 제조될 수 있고 상기 투광성 소재는 유리(glass) 또는 수지제(resin) 일 수 있다. The culture dish 10 may be made of a light-transmitting material, and the light-transmitting material may be made of glass or resin.

상기 수지제는 폴리스티렌(polystyrene), 폴리프로필렌(polypropylene), 폴리에틸렌(polyethylene), 폴리아미드(polyamide) 또는 아크릴(acryl)이 바람직하나 상기 소재 등의 다른 소재로 제작이 가능하다.The resin is preferably polystyrene, polypropylene, polyethylene, polyamide, or acrylic, but other materials such as the above material may be used.

본 발명은 상기한 수지제로 제조한 배양 접시(10)의 안쪽은 코팅제로 코팅하여 수지제의 비친환경적인 점을 차단하고 수정란의 친오가닉(organic friendly)의 특성을 높여 수정란 배양 효율을 증진하게 된다.In the present invention, the inside of the culture dish 10 made of the above resin is coated with a coating agent to block the non-environmental point of the resin and enhance the organic friendly characteristics of the fertilized egg, thereby increasing the fertilized egg culture efficiency. .

상기한 코팅제는 콜라겐 또는 젤라틴을 사용하는 것이 바람직하다.It is preferable to use collagen or gelatin as the coating agent.

도 3 내지 도 4에 도시된 바와 같이 상기 기판 보호부(31), 기판(40), 웰(41)이 포함되어 하나의 채널(30)을 구성한다. 각각의 기판 보호부(31)의 안에는 5 * 5(가로*세로) =25개의 웰(41)이 존재한다. As shown in FIGS. 3 to 4, the substrate protection part 31, the substrate 40, and the well 41 are included to form one channel 30. 5 * 5 (horizontal * vertical) = 25 wells 41 are present in each of the substrate protection parts 31.

상기한 바처럼 웰(41)은 지름이 수정란 한 개의 지름의 크기(200μm)보다 큰 210~400μm 바람직하게는 300μm이고, 높이는 200~400μm 바람직하게는300μm인 U자 형태로 되어 있어 상기 각 웰(41)에 수정란이 1개씩 들어간다.As described above, the well 41 has a U-shaped shape having a diameter of 210 to 400 μm, preferably 300 μm, and a height of 200 to 400 μm, preferably 300 μm, which is larger than the size (200 μm) of one fertilized egg. 41) contains 1 fertilized egg.

상기 2~5mm 바람직하게는 3mm의 원기둥형 기판 보호부(31)에는 배양액을 첨가하여 상기 웰(41)에 삽입된 수정란의 성장을 돕는 영양성분을 공급한다.A culture solution is added to the 2~5mm, preferably 3mm cylindrical substrate protection part 31 to supply nutrients that aid in the growth of the fertilized egg inserted in the well 41.

지름이 25~45mm 바람직하게는 35mm 이고, 높이는 5~15mm 바람직하게는 10mm인 원형인 배양접시(10)의 외측에 구비된 접시 보호부(11)는 상기 기판 보호부(31)에 첨가된 배양액이 증발하지 않도록 방지하는 역할을 하는 미네랄 오일이 첨가된 것을 저류하게 하는 기능을 수행하게 된다.The plate protection part 11 provided on the outside of the circular culture dish 10 having a diameter of 25 to 45 mm, preferably 35 mm, and a height of 5 to 15 mm and preferably 10 mm, is a culture solution added to the substrate protection part 31 It performs a function of storing the added mineral oil, which serves to prevent the evaporation.

볼 발명의 수정란 배양 접시(10)는 최적의 배양효율을 위해 5 X 5개로 구성된 웰(41)로 구성되어 있다.The fertilized egg culture dish 10 of the ball invention is composed of wells 41 composed of 5 X 5 for optimal culture efficiency.

상기 웰(41)에 배양 가능한 배양물은 동물 또는 현탁 배양세포 일 수 있고 상기 배양세포는 정모세포(spermatocyte), 정자(sperm), 난자(oocyte), 수정란(fertilized egg), 배아(embryo), 상실배(morular) 또는 배판포(blastocyst) 일 수 있다.Cultures that can be cultured in the wells 41 may be animals or suspension cultured cells, and the cultured cells may be spermatocytes, sperm, oocytes, fertilized eggs, embryos, It may be a morular or blastocyst.

본 발명의 세포 배양용 배양 접시(10)은 최적의 배양 효율을 위해 5 X 5개의 웰(41)을 구비한다.The cell culture culture dish 10 of the present invention includes 5 X 5 wells 41 for optimal culture efficiency.

인간 또는 동물의 생식세포의 경우, 일반적으로 외부에서 배양 전 작업을 마친 세포는 무균상태의 환경에서 현미경을 통해 본 발명의 배양 접시(10)의 외부로 부터 유입된 물질을 완전히 제거하고 세포 배양용 웰(41)로 옮겨 배양을 실시한다.In the case of human or animal reproductive cells, in general, cells that have been subjected to external culture prior to culturing completely remove substances introduced from the outside of the culture dish 10 of the present invention through a microscope in a sterile environment and are used for cell culture. Transfer to the well 41 and culture.

이 때 상기 배양 접시(10)에 구비된 채널(30)에 첨가되는 배양액은 오일 오버레이(oil overlay)를 실시하고 세포배양기 외부 또는 내부에서 평형(equilibrium) 및 예열(pre-warming)하여 적합한 배양조건을 확립함으로써 배양세포의 손상을 최소화하고 최적의 배양환경을 조성해야 한다. At this time, the culture solution added to the channel 30 provided in the culture dish 10 is subjected to an oil overlay, and the culture medium is equilibrated and pre-warmed outside or inside the cell incubator. It is necessary to minimize damage to cultured cells and create an optimal culture environment by establishing

이 때 상기 배양조건은 온도(temperature), 습도(humidity), 가스(gas) 또는 삼투압(osmotic pressure)일 수 있다.At this time, the culture conditions may be temperature, humidity, gas, or osmotic pressure.

도 1에 도시된 바와 같이 본 발명에 따른 상기 수정란 배양 접시(10)의 지름 35mm의 원형 형태의 배양 접시(10)안에 4개의 원기둥 형태의 기판 보호부(31)이 존재 한다. 상기 기판 보호부(31)에는 5 X 5 총 25개의 웰(41)이 존재하며 각각의 웰(41)은 U자 형태를 이루고 있고, 상기 웰(41)은 지름(300μm), 높이(300μm)로 되어 있다.As shown in FIG. 1, there are four cylindrical substrate protection parts 31 in a circular culture dish 10 having a diameter of 35 mm of the fertilized egg culture dish 10 according to the present invention. In the substrate protection part 31, there are a total of 25 wells 41 of 5 X 5, and each well 41 has a U shape, and the wells 41 have a diameter (300 μm) and a height (300 μm). It is made into.

상기 웰(41)은 상단부(41-1)는 원기둥 형태의 구조이고 하단부(41-2)는 원뿔형 경사구조로 웰(41)이 형성되어 있다.In the well 41, the upper part 41-1 has a cylindrical structure and the lower part 41-2 has a conical inclined structure, and the well 41 is formed.

상기한 바와 같이 상기 웰(41)의 하단부(41-2)를 경사지게 형성하는 이유는 수정란의 안전성 및 배양액을 첨가하는 과정에서 기포발생가능성을 최소화하기 위함이다.As described above, the reason why the lower part 41-2 of the well 41 is formed inclined is to minimize the possibility of bubble generation during the process of adding the fertilized egg and the safety of the fertilized egg.

또한 상기한 웰(41)의 원뿔형 하단부의 중앙부로 수정란이 모아져서 배치되게 됨에따라 현미경으로 수정란의 발달 상태 확인하는데 위치상관 없이 확인이 가능한 특징이 있다.In addition, as the fertilized eggs are collected and arranged in the center of the conical lower part of the well 41, it is possible to check the development status of the fertilized eggs with a microscope, regardless of location.

또한 상기 웰(41)에는 식별부(42)가 구비되어 있고 식별부에는 알파벳과 숫자가 적혀 있어 각각의 웰(41)의 위치를 특정할 수 있는 기능이 수행된다.In addition, the identification unit 42 is provided in the well 41, and alphabets and numbers are written on the identification unit, so that the position of each well 41 can be specified.

도 2에 도시된 바와 같이 상기 25개의 웰(41)은 5 X 5 형태의 정사각형으로 구성되어 있다. 상기 웰(41)들의 식별부에는 가로로 알파벳 A, B, C, D, E가 적혀있고 왼쪽 세로에 1, 2, 3, 4, 5가 적혀있다. 상기 채널(30)을 이용하여 각각의 웰(41)마다 이름을 정할 수 있다. 예를 들어 A1, C3, B2 등과 같이 웰(41)의 위치를 특정 할 수 있다.As shown in FIG. 2, the 25 wells 41 have a 5×5 square shape. Alphabets A, B, C, D, and E are written horizontally on the identification portions of the wells 41, and 1, 2, 3, 4, 5 are written on the left and vertically. Each well 41 can be named by using the channel 30. For example, it is possible to specify the location of the well 41 such as A1, C3, B2, or the like.

따라서, 본 발명의 수정란 전용 배양 접시(10)를 사용할 경우 수정란 각각 마다 위치를 특정 할 수 있어, 유전자 분석이나 성별 확인이 된 수정란을 하나씩 개별적으로 배양할 수 있는 효과가 있다.Therefore, when the culture dish 10 for fertilized eggs of the present invention is used, the position of each fertilized egg can be specified, and thus, there is an effect that the fertilized eggs with genetic analysis or sex confirmation can be individually cultured.

일반적으로 복수의 세포를 배양할 경우 각 세포를 구분하고 식별하기 위한 레이블링(labeling)이 중요하다.In general, when culturing a plurality of cells, labeling to distinguish and identify each cell is important.

특히 인간의 생식세포의 경우, 각각 개인의 레이블링이 매우 주용하며 레이블링과정에서 실수 또는 부주의로 인해 미표기 또는 오표기(2명 이상의 환자의 성명이 동일 또는 유사한 경우 등)를 하게 되면 대형 의료사고가 발생할 가능성이 내재해 있다.In particular, in the case of human reproductive cells, individual labeling is very important, and if the labeling process is unlabeled or mislabeled (when two or more patients have the same or similar names) due to mistakes or carelessness, a large medical accident may occur. The possibility is inherent.

상기 배양 접시(10)에는 접시 하판부(20)가 형성되어 있다.The culture dish 10 has a lower plate portion 20 formed therein.

접시 하판부(20)는 바닥을 의미하는 것으로 상기 보호 프레임부(11)의 하측에 구비되고, 이와 같은 보호 프레임부(11)과 하측에 구비된 접시 하판부(20)가 하나로 되어 배양접시(10)가 된다.The lower plate part 20 refers to the bottom and is provided under the protective frame part 11, and the protective frame part 11 and the lower plate part 20 provided at the lower side are united to form a culture dish ( 10) becomes.

상기 본 발명의 배양 접시(10)는 타임-랩스 세포 배양 방식에 최적화 되어 있으므로 한번 배양을 시작하면 배양용기의 교체없이 배양 완료 시점까지 배양을 수행해야 하고 이에 따라 배양물의 발달상태를 실시간 촬영 가능함으로 최적의 배양효율을 도모할 수 있다.Since the culture dish 10 of the present invention is optimized for a time-lapse cell culture method, once the culture is started, the culture must be performed until the culture is completed without changing the culture container, and accordingly, the development state of the culture can be photographed in real time. Optimal culture efficiency can be achieved.

타임-랩스 세포 배양방식을 위해 제조된 배양 접시(10)에 사용되는 배지는 원스텝 배지(one step media)를 사용하여 수정란에서 배반포(blastocyst)까지 영얀분의 결핍 또는 배양용기의 교환없이 배양을 완료할 수 있으므로 상기의 문제점을 완벽하게 해결하였다. 상기 원스텝 배지는 세포 배양이 가능한 배양 접시(10)에 수정란을 주입시킨 후 3일 내지 5일 동안 교환 없이 배양을 수행해야 하므로 상기 배지의 오염 방지 및 증발 방지를 위해 미네랄 오일로 커버역할을 할 수 있도록 해야하는 배양조건을 고려하여 세포가 배양되는 웰(41)이 소정의 높이가 있도록 구비한다.The culture medium used in the culture dish 10 manufactured for the time-lapse cell culture method uses one step media to complete the culture without deficiency of nutrients or exchange of culture vessels from fertilized eggs to blastocysts. Since it can be done, the above problems have been completely solved. Since the one-step medium needs to be cultured without exchange for 3 to 5 days after injecting the fertilized egg into the culture dish 10 capable of cell culture, it can serve as a cover with mineral oil to prevent contamination of the medium and prevent evaporation. In consideration of the culture conditions to be made, the wells 41 in which cells are cultured are provided to have a predetermined height.

상기 기판 보호부(31)와 기판(40), 웰(41)을 합쳐서 채널(30)로 지칭하며 상기 채널(30)이 원형(circle shape)으로 구성되어 타임 랩스 배양 챔버에 장착시 효율성을 도모할 수 있다.The substrate protection part 31, the substrate 40, and the well 41 are combined to be referred to as a channel 30, and the channel 30 is configured in a circular shape to improve efficiency when mounted in a time lapse culture chamber. can do.

이하 본 발명과 수정란 이식과정이 포함된 순서도와 함께 설명하고자 한다.Hereinafter, the present invention and a fertilized egg implantation process will be described together with a flowchart.

다수개의 배양이 가능한 배양 접시(10)에 있어서, 상기 배양 접시(10)는 사람 또는 포유동물의 수정란을 배양할 수가 있다.In the culture dish 10 capable of a plurality of cultures, the culture dish 10 can culture fertilized eggs of humans or mammals.

도 5에 도시된 바와 같이, 상기 수정란은 포유동물의 것으로서 수정란을 배양하기에 앞서 생리식염수로 2 ~ 4번 세척을 하는 흡입작업흡인작업(S10)(Aspiration)을 수행한다,As shown in Fig. 5, the fertilized egg is of a mammal, and prior to culturing the fertilized egg, an inhalation operation suction operation (S10) (Aspiration) of washing 2 to 4 times with physiological saline is performed.

상기 생리식염수로 여러번 세척하는 이유는 잔존물이 남아있을 수 있기 때문에 흡인작업(S10)(Aspiration)을 할 때 주사기 안으로 잔존물이 들어갈 수 있기 때문에 잔존물 제거를 위해 생리식염수를 사용한다.The reason for washing with the physiological saline solution several times is that the residual material may remain, so that the residual material may enter into the syringe when the aspiration operation (S10) (Aspiration) is performed, so that the physiological saline solution is used to remove the residual material.

상기 과정이 완료되면 체외성숙(S20)(In Vitro Maturation, 이하 IVM)의 단계에서 상기 배양 접시(10)의 외측을 보호하는 미네랄오일을 덮어준다. 이때 미네랄오일을 덮기 전에 상기 채널(30)에 배양액을 먼저 덮어준다. 배양액을 덮어주는 이유는 수정란에 영양을 공급하기 위함이며, 미네랄오일을 덮는 이유는 배양액이 증발하는 것을 막고자 함이다.When the above process is completed, mineral oil that protects the outside of the culture dish 10 is covered in the step of in vitro maturation (S20) (In Vitro Maturation, hereinafter referred to as IVM). At this time, before covering the mineral oil, the culture medium is first covered with the channel 30. The reason for covering the culture medium is to supply nutrients to the fertilized eggs, and the reason for covering the mineral oil is to prevent evaporation of the culture medium.

상기 과정 다음으로는 체외수정(S30)(In Vitro Fertilization, 이하 IVF)의 단계로서 상기 채널(30)에 구비된 성숙된 수정란에 원심분리가 끝난 정액을 피펫팅하는 단계이다.Following the above process, in vitro fertilization (S30) (In Vitro Fertilization, hereinafter referred to as IVF) is a step of pipetting the centrifuged semen to the mature fertilized egg provided in the channel 30.

상기 피펫팅을 한 후에 다시 12000RPM 원심분리를 실시하고난 부산물인 상층액을 비스듬이 기울여서 다시 피펫팅한다.After the pipetting, the supernatant, which is a by-product, was centrifuged again at 12000RPM and then pipetted again by tilting the supernatant.

상기 채널(30)을 12000RPM 원심분리를 하여 비스듬이 상층액을 제거하는 이유는 상기 채널(30)에 구비된 성숙된 수정란에 침전물(난구세포와 기타 부유물 등)의 영향을 주지 않기 위해서이다.The reason why the oblique supernatant is removed by centrifuging the channel 30 at 12000 RPM is to prevent the effect of sediments (such as cumulus cells and other suspended matter) on the mature fertilized eggs provided in the channel 30.

상기 과정 다음으로는 체외배양(S40)(In Vitro Culture, 이하 IVC)의 단계로 넘어간다.After the above process, it goes to the step of in vitro culture (S40) (In Vitro Culture, hereinafter referred to as IVC).

체외배양(S40)(In Vitro Culture, 이하 IVC)의 단계에서는 상기 과정을 거친 상기 채널(30)에 대하여 피펫팅을 하여 난구세포를 제거한다.In the step of in vitro culture (S40) (In Vitro Culture, hereinafter referred to as IVC), the channel 30 subjected to the above process is pipetted to remove the cumulus cells.

피펫팅 이유는 제거가 덜된 침전물(난구세포와 기타 부유물 등)을 제거하기 위함이다. 상기 침전물(난구세포와 기타 부유물 등)을 제거한 뒤는 인큐베이터에 보관하며 상기 체외배양(In Vitro Culture, 이하 IVC)의 단계를 1 ~ 3번 가량 진행하여 상기 침전물(난구세포와 기타 부유물 등)을 제거한다. 이때 1 ~ 3번 가량 진행하는 기간은 4 ~ 6정도 기간을 두고 실시 한다. The reason for pipetting is to remove less-removed sediments (eg, cumulus cells and other suspended matter). After removing the sediment (cumulus cells and other suspended matter), it is stored in an incubator and the steps of in vitro culture (hereinafter referred to as IVC) are performed 1 to 3 times to remove the sediment (cumulus cells and other suspended matter, etc.) do. At this time, the period of 1 to 3 times is carried out with 4 to 6 periods.

상기 과정 다음으로는 수정란이식(S50)(Embryo Transfer, 이하 ET과정)의 단계로서 상기 배양접시(10)의 채널(30)에서 배양한 수정란을 배반포일 시기인 6 ~ 7일 사이의 배반포 상태인 수정란을 이식준비하는 단계이다.Following the above process, as a step of fertilized egg transplantation (S50) (Embryo Transfer, hereinafter ET process), the fertilized egg cultured in the channel 30 of the culture dish 10 is in a blastocyst state between 6 and 7 days, which is the blastocyst date. This is the stage of preparing the fertilized egg for transplantation.

상기의 수정란이식(S50) 과정 전에 수정란을 incubator에서 꺼내어 현미경으로 배반포 단계의 수정란을 마우스피펫으로 골라낸 후 동결기에서 동결과정(S40-2)(Slow freezing, 이하 완만동결)을 수행한다.Before the above-described fertilized egg transplantation (S50) process, the fertilized eggs are taken out of the incubator, the embryos at the blastocyst stage are picked out with a mouse pipette under a microscope, and then the freezing process (S40-2) (slow freezing) is performed in a freezer.

상기한 동결(S40-2)(Slow freezing, 이하 완만동결)의 단계에서는 동결기에 액체질소를 넣은 다음 홀드상태로 -6도로 온도를 맞춘 다음 수정란 동결을 수행한다.In the step of freezing (S40-2) (Slow freezing), liquid nitrogen is added to the freezer and then the temperature is adjusted to -6 degrees in a hold state, and then the fertilized egg is frozen.

상기 과정들을 통해 상기 배양접시(10)에 배양하는 수정란의 상태를 확인할 수 있다.Through the above processes, it is possible to check the state of the fertilized eggs cultured in the culture dish 10.

본 발명은 상기한 구성과 기능으로 이루어져 있고 각각의 수정란을 공동배양 할 수 있는 배양 접시를 제공한다.The present invention provides a culture dish comprising the above configuration and function and capable of co-culturing each fertilized egg.

본 발명은 미생물을 배양하는 접시를 생산, 제조, 판매, 유통, 연구하는 산업에 유용하다.The present invention is useful in an industry that produces, manufactures, sells, distributes, and studies a dish for culturing microorganisms.

특히 본 발명은 수정란을 배양하는 접시를 생산, 제조, 판매, 유통, 연구하는 산업에 유용하다.In particular, the present invention is useful in an industry that produces, manufactures, sells, distributes, and studies a dish for culturing fertilized eggs.

10: 배양 접시
11: 보호 프레임부
20: 접시 하판부
30: 채널
31: 기판 보호부
40: 기판
41: 웰10: Petri dish
11: Protection frame part
20: lower plate
30: channel
31: substrate protection unit
40: substrate
41: well

Claims (2)

상기 배양 접시(10)을 보호하는 보호 프레임부(11);
상기 보호 프레임부(11)의 하측에 구비된 접시 하판부(20);
상기 접시하판부(20)에 구비된 채널(30);
상기 채널(30)의 내부에 구비된 기판(40);
상기 기판(40)을 보호하는 기판 보호부(31);
상기 기판(40)에 수정란 배양이 가능한 웰(41)을 구비하는 것을 특징으로 하는 각각의 수정란을 공동배양 할 수 있는 배양 접시(10).
A protective frame 11 for protecting the culture dish 10;
A plate lower plate part 20 provided under the protection frame part 11;
A channel 30 provided in the lower plate portion 20;
A substrate 40 provided inside the channel 30;
A substrate protection part 31 protecting the substrate 40;
A culture dish 10 capable of co-culturing each of the fertilized eggs, characterized in that the substrate 40 includes a well 41 capable of culturing the fertilized eggs.
 제 1항에 있어서,
상기 기판(40)의 웰(41)은 상단부(41-1)와 하단부(41-2)를 포함하여 구성되고,
상단부(41-1)는 원기둥 형태의 구조를 띠고 있고 하단부(41-2)는 원뿔형 경사구조로 형성된 것을 특징으로 하는 각각의 수정란을 공동배양 할 수 있는 배양 접시.

The method of claim 1,
The well 41 of the substrate 40 includes an upper end 41-1 and a lower end 41-2,
A petri dish capable of co-culturing each fertilized egg, characterized in that the upper part (41-1) has a cylindrical structure and the lower part (41-2) is formed in a conical inclined structure.
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KR1020200047787A KR20200117919A (en) 2020-04-21 2020-04-21 A culture dish capable of co-culturing each fertilized egg

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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WO2022055130A1 (en) 2020-09-14 2022-03-17 주식회사 엘지에너지솔루션 Battery pack with structure for prevention of heat diffusion between battery modules

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