KR20200017912A - Antibacterial Composition for Porphyromonas Gingivalis Comprising Plant Extract or Lactic Acid Bacteria Fermentation Product thereof - Google Patents

Antibacterial Composition for Porphyromonas Gingivalis Comprising Plant Extract or Lactic Acid Bacteria Fermentation Product thereof Download PDF

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Abstract

The present invention relates to an antibacterial composition for Porphyromonas gingivalis containing a plant extract or a lactobacillus fermentation product thereof. More specifically, the present invention relates to: an antibacterial composition for Porphyromonas gingivalis; and a composition for preventing, alleviating or treating periodontal diseases, wherein compositions contain a plant extract of Avena sativa, green tea, Houttuynia cordata, and Centella asiatica, or a lactobacillus fermentation product, fermented by additionally adding lactobacillus to the same as an active component.

Description

식물 추출물 또는 그의 유산균 발효물을 포함하는 포르피로모나스 진지발리스 항균용 조성물{Antibacterial Composition for Porphyromonas Gingivalis Comprising Plant Extract or Lactic Acid Bacteria Fermentation Product thereof}Antibacterial Composition for Porphyromonas Gingivalis Comprising Plant Extract or Lactic Acid Bacteria Fermentation Product

본 발명은 식물 추출물 또는 그의 유산균 발효물을 포함하는 포르피로모나스 진지발리스 항균용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 귀리, 녹차, 어성초 및 병풀의 식물 추출물, 또는 이에 유산균을 추가로 포함하여 발효된 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 포르피로모나스 진지발리스 항균용 조성물, 및 치주질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for porphyromonas jinjivalis antimicrobial comprising a plant extract or a fermented lactic acid bacterium thereof, and more specifically, fermentation further comprising a plant extract of oats, green tea, fish vinegar and centella, or lactic acid bacteria thereto. The present invention relates to a composition for porphyromonas gingivalis antimicrobial, and a composition for preventing, improving or treating periodontal disease.

건강한 치아는 오복 중 하나라 일컬을 정도로 삶의 질을 결정하는 중요한 요소이다. 구강질환 중 치주질환(periodontal disease, 풍치)은 세계적으로 발병률이 높은 질환으로서, 통증, 저작기능 장애, 치주조직의 파괴, 구취 및 시린이와 같은 다양한 임상적인 증상을 유발하고 치아상실을 초래하는 주된 요인으로 알려져 있으며 식생활의 변화로 구강질환의 원인요소는 더 증가하고 있는 실정이다.Healthy teeth are an important factor in determining the quality of life, which is said to be one of the five folds. Periodontal disease (periodontal disease) is one of the world's most prevalent diseases, which causes various clinical symptoms such as pain, masticatory dysfunction, periodontal tissue destruction, bad breath, and acute infection and causes tooth loss. It is known as a factor, and the cause of oral disease is increasing due to changes in diet.

치태 내에 서식하면서 치주질환 등을 유발하는 구강 병원균 증식을 억제하는 방법으로 항균제가 있으며, 구강병원균에 대한 살균 및 정균 작용을 갖는 항생제를 포함하는 다양한 종류의 항균제제가 충치, 치주질환, 치수 및 치근단 감염의 억제 및 치료제로써 개발되어 왔다.Antibacterial is a method of suppressing the proliferation of oral pathogens that cause periodontal disease while living in plaque, and various kinds of antimicrobial agents including antibiotics having bactericidal and bacteriostatic effects on oral pathogens include caries, periodontal disease, pulp and root root infections. It has been developed as an inhibitor and therapeutic agent.

그런데, 항생제는 우리 몸에 대한 전신적인 부작용과 함께 구강내 내성균의 출현 및 균교대증(superinfection)을 유발할 수 있기 때문에 장기적인 사용이 곤란하여 단지 치료제로만 이용될 수 있는 단점이 있다.However, since antibiotics can cause the emergence and superinfection of resistant bacteria in the oral cavity with systemic side effects on our body, long-term use is difficult and can be used only as a therapeutic agent.

이러한 배경 하에서, 본 발명자들은 기존에 본 발명자들이 개발한 질염 예방 및 치료용 조성물(대한민국 등록특허 제10-1771479호)의 몇몇 유효성분 및 조성물을 기반으로, 이를 구강질환, 예컨대 치주질환 치료를 위한 제제로 개발하기 위한 연구를 수행한 결과, 상기 치주질환을 유발하는 포르피로모나스 진지발리스에 대한 항균 효과를 가짐을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.Under this background, the present inventors based on some of the active ingredients and compositions of the present inventors preventive and therapeutic composition developed by the present inventors (Korean Patent No. 10-1771479), it is used for the treatment of oral diseases such as periodontal disease As a result of conducting a study for the development of the formulation, the present invention was completed by confirming that it has an antimicrobial effect on Porphyromonas gingivalis causing the periodontal disease.

본 발명의 하나의 목적은 귀리, 녹차, 어성초 및 병풀의 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 포르피로모나스 진지발리스(Porphyromonas Gingivalis) 항균용 조성물을 제공하는 것이다.One object of the present invention is to provide an antimicrobial composition for Porphyromonas Gingivalis comprising oat, green tea, fish herb and plant extract of Centella as an active ingredient.

본 발명의 다른 하나의 목적은 상기 식물 추출물에 유산균을 추가로 포함하는, 포르피로모나스 진지발리스 항균용 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a composition for porphyromonas ginjivalis antimicrobial, further comprising lactic acid bacteria in the plant extract.

본 발명의 또 다른 하나의 목적은 상기 항균용 조성물을 이용하여 치주질환 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물 및 의약외품 조성물 등을 제공하는 것이다.Another object of the present invention to provide a pharmaceutical composition and quasi-drug composition for preventing, improving or treating periodontal disease using the antimicrobial composition.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 하나의 양태는 귀리, 녹차, 어성초 및 병풀의 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 포르피로모나스 진지발리스(Porphyromonas Gingivalis) 항균용 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, one embodiment of the present invention provides an antimicrobial composition of Porphyromonas Gingivalis comprising oat, green tea, fish herb and plant extract of Centella as an active ingredient.

또한, 상기 식물 추출물에 유산균을 추가로 포함하는 포르피로모나스 진지발리스 항균용 조성물을 제공한다.In addition, it provides porphyromonas jinjivalis antimicrobial composition further comprising lactic acid bacteria in the plant extract.

본 발명에서는, 다양한 식물 중에서 항균 효능, 특히 포르피로모나스 진지발리스에 대한 항균 효능을 갖는 식물을 탐색하던 중, 귀리, 녹차, 어성초 및 병풀이 우수한 효능을 발휘할 수 있을 것으로 예상하여 이들의 혼합 식물 추출물을 구성하였고, 이를 토대로 항균 효능을 확인한 결과 우수한 항균 효능이 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다. 특히, 상기 혼합 식물 추출물에 추가로 유산균을 배합함으로써, 이를 배양하여 유산균 발효물을 제조하는 경우에 항균 활성이 보다 뚜렷하게 나타남을 확인하였다. 아울러, 상기 혼합 식물 추출물과 유산균의 배합비를 적절하게 조절하여 실험을 수행한 결과, 유산균 및 식물 추출물의 비율이 2:1의 중량비일 때 최적의 항균 활성을 나타냄을 추가로 확인할 수 있었다.In the present invention, while searching for plants having antimicrobial efficacy, in particular, antibacterial efficacy against Porphyromonas jinjivalis among various plants, oat, green tea, eochocho and Centella as expected to be able to exert the excellent efficacy of these mixed plants The extract was configured, and based on this, the antimicrobial efficacy was confirmed, thereby confirming the excellent antimicrobial efficacy, thereby completing the present invention. In particular, by combining the lactic acid bacteria in addition to the mixed plant extract, it was confirmed that the antimicrobial activity is more pronounced when culturing the lactic acid bacteria fermented product. In addition, as a result of experiments by properly adjusting the blending ratio of the mixed plant extract and lactic acid bacteria, it was confirmed that the optimum antimicrobial activity was exhibited when the ratio of the lactic acid bacteria and plant extracts is 2: 1.

본 발명에서 "식물 추출물"은 "혼합 식물 추출물"과 혼용되어 사용될 수 있으며, 귀리, 녹차, 어성초 및 병풀의 추출물을 포함하는 것일 수 있으며, 구체적으로는 이들을 동량으로 포함하는 것일 수 있다. 상기 식물 추출물에는 다른 종류의 항균 활성을 갖는 식물을 추가로 포함할 수 있으며, 예를 들어 알로에 베라, 꿀풀, 황기, 고삼, 쑥잎, 연교, 생강, 꽈리를 추가로 포함할 수 있다.In the present invention, the "plant extract" may be used in combination with the "mixed plant extract", and may include extracts of oats, green tea, edible herbs and centella, and specifically may include the same amount thereof. The plant extract may further include a plant having another kind of antimicrobial activity, and for example, may further include aloe vera, lamiaceae, Astragalus, red ginseng, mugwort leaves, ducts, ginger, and cherries.

본 발명에서 귀리(oat, Avena sativa L.)는, 벼과에 속하는 이년생 초본식물로서, 연맥 또는 작맥이라고도 불리는 작물이다. 손톱과 피부건강에 좋다고 알려져 있다.In the present invention, oat (Avaena sativa L.) is a perennial herbaceous plant belonging to the family Asteraceae, and is a crop also called oat or wheat. It is known to be good for nail and skin health.

본 발명에서 녹차(green tea)는, 비교적 따뜻한 곳에서 자라는 여러해살이 상록교목으로서, 떫은 맛을 내는 카테킨이라는 성분이 혈압상승을 억제하고 감기 바이러스 표면에 붙어 활동을 저지하는 역할을 하며, 당질의 소화흡수를 지연시키는 작용을 하여 혈압상승 및 혈당치 상승을 예방해 당뇨, 고혈압 등을 예방할 수 있다.Green tea (green tea) in the present invention, a perennial evergreen arborescent growing in a relatively warm place, the catechin component of astringent taste inhibits the increase in blood pressure and acts to block the activity of the cold virus, digestion of sugar It delays absorption, preventing blood pressure rise and blood sugar level increase, thus preventing diabetes and high blood pressure.

본 발명에서 어성초(Heartleaf Houttuynia, Houttuynia cordata)는, 약모밀이라고 불리는 삼백초과에 속하는 다년생초이다. 플라보노이드, 쿠에르시트린, 마이르센, 라우리알데히드 등의 성분이 풍부하게 함유되어 있어, 이뇨작용 및 피부관리에 효과적이다.In the present invention, the herbaceous herb (Heartleaf Houttuynia, Houttuynia cordata) is a perennial herb belonging to over three hundred called wild buckwheat. It contains abundant ingredients such as flavonoids, quercitrin, myrsen and laurylaldehyde, which are effective for diuretic and skin care.

본 발명에서 병풀(Asiatic pennywort)은, 다년생 초본으로서, 아시아티코사이드(Asiaticoside), 아시아틱산(Asiatic acid), 마데카식산(madecassic acid) 등을 함유하여 콜라겐합성을 조절, 촉진하여 피부에 탄력 및 건강함을 부여한다.As the perennial herbaceous plant (Asiatic pennywort), as a perennial herb, containing Asianticoside (Asiaticoside), Asiantic acid (Asiatic acid), madecassic acid (madecassic acid) to control and promote collagen synthesis, elasticity and skin Gives health

다만, 상기 귀리, 녹차, 어성초 및 병풀은 항균 효능, 구체적으로는 포르피로모나스 진지발리스에 대한 항균 효능에 대해서는 알려져 있지 않으며, 이는 본 발명에서 최초로 확인하였다.However, the oats, green tea, eoseongcho and centella are not known for their antimicrobial efficacy, specifically, the antimicrobial efficacy against Porphyromonas jinjivalis, which was confirmed for the first time in the present invention.

본 발명에서, 포르피로모나스 진지발리스 항균용 조성물에는 유산균을 추가로 포함할 수 있다. 구체적으로는, 상기 식물 추출물과 유산균을 적절하게 배합하여 항균 효과를 극대화시킬 수 있다.In the present invention, porphyromonas ginjivalis antimicrobial composition may further comprise lactic acid bacteria. Specifically, by combining the plant extract and lactic acid bacteria can be maximized antibacterial effect.

상기 유산균(lactic acid bacteria)은 젖산균이라고도 불리며, 물질대사에 의해 탄수화물을 젖산으로 분해시키는 후벽균류 세균을 총칭한다. 요거트, 요구르트, 치즈 등의 유제품과 청주, 된장, 간장 등의 양조식품 및 김치류 등을 젖산에 의해서 병원균과 유해세균의 생육이 저지되는 성질을 이용하여 식품을 발효시키며, 일부 젖산균은 창자 등의 소화기관이나 질 안에 있어, 다른 병원미생물로부터 몸을 지키고, 항상성 유지를 돕는 역할을 한다.The lactic acid bacteria is also called lactic acid bacteria, and generically refers to posterior wall fungus bacteria that break down carbohydrates into lactic acid by metabolism. Dairy products such as yoghurt, yoghurt, and cheese, brewed foods such as sake, soybean paste, and soy sauce and kimchi are fermented by lactic acid to prevent the growth of pathogens and harmful bacteria. Within the organs or vagina, it protects the body from other pathogens and helps maintain homeostasis.

본 발명에서는 상기 유산균을 식물 추출물과 적절하게 배합시키고 이를 배양함으로써, 식물 추출물이 유산균에 의해 발효되도록 하여 식물 추출물의 유산균 발효물을 제조하였다. 또한, 상기 유산균 발효물이 포르피로모나스 진지발리스 항균 효능이 우수함을 확인하였다. 상기 유산균 발효물은 유산균을 이용하여 발효된 물질을 총칭하여 이르는 것이다.In the present invention, by appropriately blending the lactic acid bacteria with plant extracts and culturing them, the lactic acid bacteria fermented product of the plant extracts was prepared by allowing the plant extracts to ferment by lactic acid bacteria. In addition, it was confirmed that the lactic acid bacteria fermented product has excellent porphyromonas jinjivalis antibacterial effect. The lactic acid bacteria fermented product is to collectively reach the fermented material using lactic acid bacteria.

상기 유산균은 락토바실러스 속 균주를 적절하게 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나 구체적으로는 락토바실러스 람노서스 또는 락토바실러스 플란타럼을 사용할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus)를 사용하여 항균 효과를 확인하였다.The lactic acid bacteria may be appropriately used strains of the genus Lactobacillus, but is not limited thereto, and specifically, may be used Lactobacillus rhamnosus or Lactobacillus plantarum. In one embodiment of the present invention using Lactobacillus rhamnosus ( Lactobacillus rhamnosus ) was confirmed the antimicrobial effect.

본 발명에서는, 항균 효능을 위한 상기 유산균 및 식물 추출물의 적절한 배합비를 확인한 데에 추가의 일 특징부가 있다. 구체적으로는, 유산균 및 식물 추출물이 2:1의 중량비로 포함되는 것이 가장 바람직할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 다양한 배합비로 유산균 및 식물 추출물을 배합하여 실험한 결과(표 1), 유산균 및 식물 추출물이 2:1의 중량비로 포함될 경우에 가장 우수한 포르피로모나스 진지발리스 항균 효능을 가짐을 확인하였다(도 7).In the present invention, there is an additional feature to confirm the appropriate blending ratio of the lactic acid bacteria and plant extracts for antimicrobial efficacy. Specifically, it may be most preferable that lactic acid bacteria and plant extracts are included in a weight ratio of 2: 1. In one embodiment of the present invention, the results of experiments by combining the lactic acid bacteria and plant extracts in various ratios (Table 1), when the lactic acid bacteria and plant extracts are included in the weight ratio of 2: 1, the best porphyromonas ginjivalis antimicrobial efficacy It was confirmed to have (Fig. 7).

다른 하나의 양태로서, 본 발명은 귀리, 녹차, 어성초 및 병풀의 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 치주질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. 또한, 상기 식물 추출물에 유산균을 추가로 포함하는 치주질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.As another aspect, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating periodontal disease, comprising as an active ingredient plant extracts of oats, green tea, eochocho and centella. The present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing or treating periodontal disease, which further comprises lactic acid bacteria in the plant extract.

또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 귀리, 녹차, 어성초 및 병풀의 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 치주질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다. 또한, 상기 식물 추출물에 유산균을 추가로 포함하는 치주질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.As yet another aspect, the present invention provides a quasi-drug composition for preventing or improving periodontal disease, comprising as an active ingredient plant extracts of oats, green tea, eochocho and centella. The present invention also provides a quasi-drug composition for preventing or improving periodontal disease, further comprising lactic acid bacteria in the plant extract.

본 발명에서 상기 식물 추출물 또는 그의 유산균 발효물에 대해서는 상기 설명한 바와 같으며, 본 발명의 조성물은 포르피로모나스 진지발리스에 대한 항균 효능을 가져 치주질환 예방, 개선 또는 치료에 효과적일 수 있다.In the present invention, as described above for the plant extract or fermented lactic acid bacterium thereof, the composition of the present invention may have an antimicrobial effect against Porphyromonas ginjivalis may be effective in preventing, improving or treating periodontal disease.

본 발명에서, "치주질환(periodontal disease)"은 치아를 받치고 있는 치은과 치주인대 및 골조직에 염증이 생기는 질환으로서, 흔히 풍치라고도 하는데, 병의 정도에 따라 치은염(gingivitis)과 치주염(periodontitis)으로 나뉜다. 비교적 가볍고 회복이 빠른 형태의 치주질환으로 잇몸 즉, 연조직에만 국한된 형태를 치은염이라고 하고, 이러한 염증이 잇몸과 잇몸뼈 주변까지 진행된 경우를 치주염이라고 한다.In the present invention, "periodontal disease" is a disease in which the gingival, periodontal ligament and bone tissue supporting the tooth are inflamed, which is also commonly referred to as flavour, and as gingivitis and periodontitis depending on the degree of the disease Divided. It is a relatively mild and fast-recovering form of periodontal disease, namely gingivitis, which is limited to gums, or soft tissues, and this type of inflammation is called periodontitis.

치주질환을 일으키는 원인균에는 몇가지 종류가 있는데, 대표적으로 포르피로모나스 진지발리스를 들 수 있다. 상기 포르피로모나스 진지발리스는 박테로이드(Bacteroide) 유연균의 일종으로 그람음성균이고, 혐기성균이다. 상기 포피로모나스 진지발리스는 치주질환이 발생한 구강 내에서 발견되며, 그 외에도 위장관 상부, 호흡기 및 결장에서도 발견된다. 그에 따라, 포르피로모나스 진지발리스에 대한 항균 활성을 통해 치주질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.There are several types of bacteria that cause periodontal disease, such as Porphyromonas ginjivalis. Porphyromonas gingivalis is a kind of bacteroid (Bacteroide) flexible bacteria, gram-negative bacteria, anaerobic bacteria. The porphyromonas gingivalis is found in the oral cavity in which periodontal disease has occurred, as well as in the upper gastrointestinal tract, respiratory tract and colon. Accordingly, it is possible to prevent, ameliorate or treat periodontal disease through the antibacterial activity against Porphyromonas gingivalis.

본 발명의 약학적 조성물은 구강질환을 예방하고 치료하기 위한 통상의 방법에 따라 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 에어로졸, 멸균 주사용액 등의 형태로 제형화가 가능하다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 약학적 조성물의 구체적인 투여량은 제제화 방법, 환자의 상태 및 체중, 환자의 성별, 연령, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간, 배설 속도, 반응 감응성 등과 같은 요인들에 따라 당업자에 의해 다양하게 선택될 수 있으며, 투여량 및 횟수는 어떠한 면에서든 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.The pharmaceutical composition of the present invention in the form of tablets, pills, powders, granules, capsules, suspensions, solvents, emulsions, syrups, aerosols, sterile injectable solutions and the like according to conventional methods for preventing and treating oral diseases Formulation is possible. In addition, the pharmaceutical compositions of the present invention may further comprise a carrier, excipient or diluent. The specific dosage of the pharmaceutical composition according to the present invention depends on factors such as the method of formulation, the condition and weight of the patient, the sex, age, extent of disease, drug form, route and duration of administration, rate of excretion, response sensitivity, etc. Various choices can be made by those skilled in the art, and the dosage and frequency do not limit the scope of the present invention in any aspect.

본 발명의 의약외품 조성물은 구강용 의약외품을 포함할 수 있다. 본 발명의 의약외품 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 유효성분 이외에 구강용 의약외품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 연마제, 습윤제, 결합제, 기포제, 감미제, 방부제, 약효성분, 향미제, 색소, 용제, 증백제, 가용화제 또는 pH 조정제를 포함할 수 있다.The quasi-drug composition of the present invention may include an oral quasi-drug. Ingredients included in the quasi-drug composition of the present invention may include components commonly used in the quasi-drug composition for oral cavity as an active ingredient, for example, abrasives, wetting agents, binders, foaming agents, sweeteners, preservatives, medicinal ingredients, flavors Agents, dyes, solvents, brighteners, solubilizers or pH adjusters.

본 발명의 구강용 의약외품 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 치약, 구강세정제, 구강청정제, 껌, 캔디류, 구강스프레이, 구강용 연고제, 구강용 바니쉬, 구강양치액 및 잇몸 마사지 크림 등의 제형을 가질 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.Oral quasi-drug composition of the present invention can be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, toothpaste, mouthwash, mouthwash, gum, candy, oral spray, oral ointment, oral varnish It may have a formulation such as mouthwash, gum massage cream, but is not limited thereto.

본 발명의 식물 추출물 및 그의 유산균 발효물은 포르피로모나스 진지발리스에 대한 항균 활성을 가져 치주질환 개선 및 치료를 위한 다양한 형태의 제품에 응용될 수 있다.The plant extract of the present invention and its lactic acid bacteria fermented product have antimicrobial activity against Porphyromonas gingivalis and can be applied to various types of products for the improvement and treatment of periodontal disease.

도 1 내지 8은 포르피로모나스 진지발리스에 대한 항균 활성 측정(Disk diffusion test) 결과이다.
구체적으로, 도 1은 음성 대조군, 도 2는 양성 대조군, 도 3은 실험군 A, 도 4는 실험군 B, 도 5는 실험군 C, 도 6은 실험군 D, 도 7은 실험군 E, 도 8은 실험군 F의 항균 활성 측정 결과이다.
1 to 8 show the results of the antimicrobial activity (Disk diffusion test) for Porphyromonas jinjivalis.
Specifically, FIG. 1 is a negative control, FIG. 2 is a positive control, FIG. 3 is an experimental group A, FIG. 4 is an experimental group B, FIG. 5 is an experimental group C, FIG. 6 is an experimental group D, FIG. 7 is an experimental group E, and FIG. 8 is an experimental group F It is a result of measurement of antibacterial activity.

이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, these examples are for illustrative purposes only and the scope of the present invention is not limited to these examples.

실시예 1: 재료 준비Example 1: Material Preparation

항균 활성의 대상이 되는 포르피로모나스 진지발리스 (Porphyromonas Gingivalis) 균주는 한국생명공학연구원 생물자원센터 (KCTC) 에서 구입하였다 (균주 번호 272572).Porphyromonas Gingivalis strain, which is an antimicrobial activity, was purchased from the Korea Institute of Bioscience and Biotechnology (KCTC) (strain number 272572).

동결건조된 포르피로모나스 진지발리스는 유리 절단용 칼을 사용하여 앰플에 홈을 낸 후 절단하여, 멸균 증류수 0.5ml을 첨가하여 현탁하였다. 현탁한 시료를 200㎕ 채취하여 200ml의 Yeast Mold (YM) Broth 액체 배지에 옮기고, 일회용 도말봉으로 소량 채취하여 Yeast Mold (YM) Agar 고체 배지로 옮겨 접종하였다. 포르피로모나스 진지발리스를 접종한 배지는 37°C shaking incubator에서 배양하였다. 24시간 후 YM Agar 고체배지의 균은 세균감별염색법인 그람염색방법 (gram staining)을 사용하여 배양된 균을 확인하였다. 이후 여러 번의 계대배양을 통해 균을 활성화 한 후 실험에 사용하였다.The lyophilized Porphyromonas ginjivalis was cut into slotted ampoules using a glass cutting knife, cut, and suspended by adding 0.5 ml of sterile distilled water. 200 μl of the suspended sample was collected and transferred to 200 ml of Yeast Mold (YM) Broth liquid medium, and a small amount was taken with a disposable smear rod and transferred to Yeast Mold (YM) Agar solid medium for inoculation. The medium inoculated with Porphyromonas gingivalis was incubated in a 37 ° C shaking incubator. After 24 hours, the bacteria of YM Agar solid medium were identified by gram staining, which is a bacterial differentiation method. Thereafter, the bacteria were activated through multiple passages and used for experiments.

아울러, 귀리 추출물, 녹차 추출물, 어성초 추출물 및 병풀 추출물의 총 4종의 식물 추출물 및 유산균인 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus)를, 포르피로모나스 진지발리스 항균 활성을 측정하기 위하여 준비하였다.In addition, a total of four plant extracts of oat extract, green tea extract, eochocho extract and centella extract and Lactobacillus rhamnosus (lactobacillus rhamnosus) were prepared to measure the antibacterial activity of Porphyromonas gingivalis.

실시예 2: 포르피로모나스 진지발리스 항균 활성 측정(Disk diffusion test)Example 2: Porphyromonas ginjivalis antibacterial activity (Disk diffusion test)

포르피로모나스 진지발리스에 대한 각각의 시험 물질의 항균 활성을 측정하기 위하여 한천배지 확산법을 실시하였다. 구체적으로, 포르피로모나스 진지발리스를 YM 액체 배지에 107 CFU/ml 로 희석한 균을 YM 고체배지에 100 ㎕ 떨어뜨리고, 살균된 일회용 spreader를 이용하여 도말 후 5-10분간 건조하였다. 멸균된 6mm paper disc 위에 각각의 대조군 및 실험군을 일정량 점적하여 반건조한 후, 실험균주가 도말된 YM 고체 배지 위에 올려놓았다. 이후, 37℃ shaking incubator에서 24시간 동안 배양하면서 식물 추출물을 유산균 발효 하였다. 이후, paper disc 주위의 생성되는 투명환 (clear zone)을 관찰하였다.Agar medium diffusion was performed to determine the antimicrobial activity of each test substance against Porphyromonas jinjivalis. Specifically, 100 μl of the bacterium diluted with Porphyromonas jinjivalis to YM liquid medium at 10 7 CFU / ml was dropped into YM solid medium, and dried for 5-10 minutes after smearing using a sterilized disposable spreader. Each control and experimental group was semi-dried by dropping each control and experimental groups on a sterile 6 mm paper disc, and then placed on YM solid medium on which test strains were smeared. Thereafter, the plant extract was fermented with lactic acid bacteria while incubated for 24 hours in a shaking incubator at 37 ° C. Then, the resulting clear zone (clear zone) around the paper disc was observed.

각각의 실험군에 포함되는 유산균 및 4종 식물 추출물의 배합비는 다음 표 1과 같다.The blending ratio of the lactic acid bacteria and four plant extracts included in each experimental group is shown in Table 1 below.

실험군Experimental group 유산균 : 4종 식물 추출물 배합비Lactobacillus: 4 plant extracts AA 1 : 11: 1 BB 1 : 21: 2 CC 1 : 51: 5 DD 1 : 101: 10 EE 2 : 12: 1 FF 5 : 15: 1

멸균된 paper disc에 대조군 및 실험군을 점적하여 완전히 건조 후 투명환을 관찰하였다. 각기 다른 실험군 별로 3회에 걸쳐 접종 후, 24시간 후 결과를 관찰하여, paper disc 주위에 생성되는 투명환을 관찰하였다.A control group and an experimental group were added to the sterilized paper disc, and then dried completely and the transparent ring was observed. After inoculation three times for each experimental group, the result was observed after 24 hours, and the transparent ring formed around the paper disc was observed.

그 결과, 시료를 처리하지 않은 음성 대조군에서는 투명환이 전혀 관찰되지 않았으며(도 1), 항균 활성을 가지는 것으로 알려진 에탄올 양성 대조군에서는 투명환이 넓게 관찰되었다(도 2).As a result, no clear ring was observed in the negative control group treated with the sample (FIG. 1), and a clear ring was widely observed in the ethanol positive control group known to have antimicrobial activity (FIG. 2).

아울러, 유산균과 4종 식물 추출물을 혼합하여 처리한 실험군에서 투명환이 관찰됨을 확인함으로써(도 3 내지 8), 4종 식물 추출물, 나아가 유산균과의 혼합 배양물이 항균 효과가 있음을 확인하였다.In addition, by confirming that the transparent ring is observed in the experimental group treated with a mixture of lactic acid bacteria and four plant extracts (FIG. 3 to 8), it was confirmed that the mixed cultures with four plant extracts, further lactic acid bacteria has an antibacterial effect.

한편, 특히 유산균 및 4종 식물 추출물의 배합비가 2:1인 실험군 E에서 가장 넓은 투명환이 관찰됨을 확인함으로써(도 7), 포르피로모나스 진지발리스에 대한 항균 활성이 가장 우수함을 확인하였다.On the other hand, in particular, by confirming that the widest transparent ring was observed in the experimental group E having a combination ratio of lactic acid bacteria and four plant extracts 2: 1 (Fig. 7), it was confirmed that the antibacterial activity against Porphyromonas jinjivalis is the best.

그에 따라, 본 발명의 4종 식물 추출물, 특히 이를 유산균과 혼합하여 배양함으로써 발효시킨 유산균 발효물은 포르피로모나스 진지발리스에 대한 항균 효과 및 치주질환과 같은 구강질환에 대한 효능을 가짐을 알 수 있었다.Accordingly, it can be seen that the four plant extracts of the present invention, in particular, the fermented lactic acid bacteria fermented by mixing them with lactic acid bacteria, have an antimicrobial effect against Porphyromonas jinjivalis and oral diseases such as periodontal disease. there was.

이상의 설명으로부터, 본 출원이 속하는 기술분야의 당업자는 본 출원이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 출원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 출원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.From the above description, those skilled in the art will appreciate that the present application can be implemented in other specific forms without changing the technical spirit or essential features. In this regard, it should be understood that the embodiments described above are exemplary in all respects and not restrictive. The scope of the present application should be construed that all changes or modifications derived from the meaning and scope of the following claims and equivalent concepts rather than the detailed description are included in the scope of the present application.

Claims (9)

귀리, 녹차, 어성초 및 병풀의 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 포르피로모나스 진지발리스(Porphyromonas Gingivalis) 항균용 조성물.
Porphyromonas Gingivalis antimicrobial composition comprising plant extracts of oats, green tea, eochochocho and Centella as an active ingredient.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 유산균을 추가로 포함하는 것인, 항균용 조성물.
The antimicrobial composition of claim 1, wherein the composition further comprises lactic acid bacteria.
제2항에 있어서, 상기 식물 추출물은 유산균에 의해 발효된 것인, 항균용 조성물.
The antimicrobial composition of claim 2, wherein the plant extract is fermented by lactic acid bacteria.
제2항에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus)인 것인, 항균용 조성물.
The antimicrobial composition of claim 2, wherein the lactic acid bacteria is Lactobacillus rhamnosus .
제2항에 있어서, 상기 유산균 및 식물 추출물은 2:1의 중량비로 포함되는 것인, 항균용 조성물.
The antimicrobial composition of claim 2, wherein the lactic acid bacteria and plant extracts are included in a weight ratio of 2: 1.
귀리, 녹차, 어성초 및 병풀의 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 치주질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
Oat, green tea, eoseongcho and medicinal herbs containing plant extracts as an active ingredient, periodontal disease prevention or treatment pharmaceutical composition.
제6항에 있어서, 상기 조성물은 유산균을 추가로 포함하는 것인, 약학적 조성물.
The pharmaceutical composition of claim 6, wherein the composition further comprises lactic acid bacteria.
귀리, 녹차, 어성초 및 병풀의 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 치주질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
Oval, green tea, eoseongcho and medicinal herbs containing plant extracts as an active ingredient, periodontal disease prevention or improvement of quasi-drug composition.
제8항에 있어서, 상기 조성물은 유산균을 추가로 포함하는 것인, 의약외품 조성물.
The quasi-drug composition according to claim 8, wherein the composition further comprises lactic acid bacteria.
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KR20220073219A (en) * 2020-11-26 2022-06-03 김준경 A composition for improving, preventing and treating of obesity comprising Centella asiatica fermentation extract
WO2022163978A1 (en) 2021-01-27 2022-08-04 주식회사 셀아이콘랩 Novel antimicrobial peptide with excellent microbial cytoplasm elution effect

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