KR20200016101A - Method for producing the extracts of natural material using ethyl lactate - Google Patents

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Abstract

A method for preparing a natural substance extract using ethyl lactate according to the present invention comprises the following steps: (a) obtaining a mixture by mixing an ethyl lactate solvent with a natural substance; (b) extracting an extract from the mixture; and (c) concentrating the extract to obtain a concentrated extract. The extraction yield of the extract from natural substances is excellent, the content of physiologically active substances in the extract can be increased, and an extract harmless to human body without toxicity can be obtained.

Description

에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법{METHOD FOR PRODUCING THE EXTRACTS OF NATURAL MATERIAL USING ETHYL LACTATE} Method for producing natural extract using ethyl lactate {METHOD FOR PRODUCING THE EXTRACTS OF NATURAL MATERIAL USING ETHYL LACTATE}

본 발명은 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법에 관한 것으로서, 천연물질 추출물의 추출 효과가 우수하며 인체에 무해한 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing a natural substance extract using ethyl lactate, and to a method for producing a natural substance extract using ethyl lactate excellent in the extraction effect of the natural substance extract and harmless to the human body.

식품, 화장품, 농약, 의약 업체들은 자연계 천연물질 예를 들어 식물, 해조류, 미세조류 등으로부터 추출물을 추출한다. 상기 추출된 추출물은 에센셜 오일, 안료, 약효물질, 향료 등의 제품에 사용된다. 상기 천연물질로부터 추출물을 추출하기 위해 열수 추출법, 초임계 추출법, 용매 추출법이 사용된다. 또한 상기 추출물의 추출에 사용되는 용매는 헥산, 에틸아세테이트, 메탄올, 물 등이 사용된다.Food, cosmetics, pesticides and pharmaceutical companies extract extracts from natural natural substances such as plants, algae and microalgae. The extracted extract is used in products such as essential oils, pigments, medicinal substances, fragrances. In order to extract the extract from the natural substance, hot water extraction, supercritical extraction, solvent extraction is used. In addition, the solvent used for the extraction of the extract is used, such as hexane, ethyl acetate, methanol, water.

상기 용매는 천연물질에 녹아있는 상태에서 인체에 직접 접촉되므로 인체유해성이 없어야 한다. 그러나 메탄올 용매 및 헥산 용매는 인체에 유해하다. 또한 에틸 아세테이트 용매 및 헥산 용매는 천연물질로부터 추출물을 추출하는 수율이 낮다. 아울러 물 용매는 천연물질로부터 추출물을 추출하는 수율은 우수하나, 상기 천연물질로부터 추출된 추출물의 종류 및 추출물의 양이 적다.Since the solvent is in direct contact with the human body in a state dissolved in natural materials, it should not be harmful to humans. However, methanol solvent and hexane solvent are harmful to human body. In addition, ethyl acetate solvent and hexane solvent have a low yield of extract extraction from natural substances. In addition, the water solvent is excellent in the yield to extract the extract from the natural substance, but the type and extract amount of the extract extracted from the natural substance.

따라서 천연물질로부터 추출물을 추출하는데 있어 보다 높은 효율을 구현할 수 있고, 인체에 무해한 용매에 대한 연구가 여전히 필요하다. Therefore, it is possible to implement higher efficiency in extract extraction from natural substances, and there is still a need for research on solvents that are harmless to humans.

본 발명은 상기한 문제점을 해결하기 위해 신규의 용매를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.The present invention aims to provide a method for producing a natural substance extract using a novel solvent to solve the above problems.

그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.However, the technical problem to be achieved by the present invention is not limited to the above-mentioned problem, another task that is not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the following description.

본 발명의 일실시예에 의하면, 본 발명에 따른 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법은 (a) 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 천연물질을 혼합하여 혼합물을 얻는 단계, (b) 상기 혼합물로부터 추출액을 추출하는 단계 및 (c) 상기 추출액을 농축하여 농축된 추출액을 얻는 단계를 포함한다.According to one embodiment of the present invention, the method for producing a natural substance extract using ethyl lactate according to the present invention comprises the steps of (a) obtaining a mixture by mixing an ethyl lactate solvent and a natural substance, (b) Extracting the extract from the mixture and (c) concentrating the extract to obtain a concentrated extract.

본 발명에 따른 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법은 천연물질로부터 추출물의 추출 수율이 우수하고 상기 추출액 내의 생리활성물질 함량을 증대시킬 수 있는 효과가 있다.According to the present invention, a method for preparing a natural substance extract using ethyl lactate has an effect of increasing the extraction yield of the extract from the natural substance and increasing the content of a bioactive substance in the extract.

또한, 본 발명에 따른 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법은 에틸 락테이트를 용매로 사용함으로써 인체에 무해하고 독성이 없는 추출물을 수득할 수 있는 효과가 있다.In addition, the method for producing a natural material extract using ethyl lactate according to the present invention has the effect of obtaining an extract that is harmless to humans and non-toxic by using ethyl lactate as a solvent.

전술한 목적, 특징 및 장점은 상세하게 후술되며, 이에 따라 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 발명의 기술적 사상을 용이하게 실시할 수 있을 것이다. 본 발명을 설명함에 있어서 본 발명과 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 상세한 설명을 생략한다. 이하, 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다.The above objects, features, and advantages will be described in detail below, and therefore, those skilled in the art may easily implement the technical idea of the present invention. In describing the present invention, when it is determined that the detailed description of the known technology related to the present invention may unnecessarily obscure the gist of the present invention, the detailed description will be omitted. Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail.

본 발명은 이하에서 개시되는 실시예에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 수 있으며, 단지 본 실시예는 본 발명의 개시가 완전하도록 하며 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위하여 제공되는 것이다.The present invention is not limited to the embodiments disclosed below, but can be implemented in various different forms, only this embodiment to make the disclosure of the present invention complete and completely to the person skilled in the art the scope of the invention It is provided to inform you.

< 에틸 <Ethyl 락테이트를Lactate 이용한 천연물질 추출물의 제조방법> Manufacturing Method of Natural Material Extract Using>

본 발명에 따른 에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법은 (a) 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 천연물질을 혼합하여 혼합물을 얻는 단계, (b) 상기 혼합물로부터 추출액을 추출하는 단계 및 (c) 상기 추출액을 농축하여 농축된 추출액을 얻는 단계를 포함하여, 천연물질 추출물을 제조한다.The method for producing a natural substance extract using ethyl lactate according to the present invention comprises the steps of: (a) mixing an ethyl lactate solvent and a natural substance to obtain a mixture, (b) extracting an extract from the mixture, and (c) concentrating the extract to obtain a concentrated extract to prepare a natural substance extract.

먼저, 본 발명에 따른 제조방법은 (a) 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 천연물질을 혼합하여 혼합물을 얻는 단계를 포함한다.First, the preparation method according to the present invention includes the steps of (a) mixing an ethyl lactate solvent and a natural material to obtain a mixture.

본 발명에 따른 제조방법은 에틸 락테이트(ethyl lactate)를 용매로 사용한다. The preparation method according to the present invention uses ethyl lactate as a solvent.

에틸 락테이트의 IUPAC 명칭은 에틸-2-하이드록시프로파노에이트(Ethyl-2-hydroxypropanoate)로서 락트산 및 에탄올로부터 형성된 에스테르 유도체이다.상기 에틸 락테이트는 2번 탄소에 하이드록시기(-OH)를 가지며, 구체적으로 하기 화학식 1구조이다.The IUPAC name for ethyl lactate is an ester derivative formed from lactic acid and ethanol as Ethyl-2-hydroxypropanoate. The ethyl lactate has a hydroxyl group (-OH) on carbon 2 It has a structure of following General formula (1) specifically ,.

[화학식 1][Formula 1]

Figure pat00001
Figure pat00001

상기 에틸 락테이트는 와인, 닭고기 등 다양한 식품에 함유되어 있으며, -26℃ 내지 154℃ 에서 액체로 존재한다. 상기 에틸 락테이트는 용매로 사용될 수 있으며, 상기 에틸 락테이트 용매는 외관상 무색투명하다.The ethyl lactate is contained in various foods such as wine and chicken, and is present as a liquid at -26 ° C to 154 ° C. The ethyl lactate may be used as a solvent, and the ethyl lactate solvent is colorless and transparent in appearance.

상기 에틸 락테이트 용매는 기존의 메탄올 용매 및 헥산 용매와 달리 독성이 없다. 또한 상기 에틸 락테이트 용매는 완전한 생분해가 가능하다. 아울러 상기 에틸 락테이트 용매는 에틸 락테이트의 분자 내에 -OH기를 포함하고 있는 양성자성 극성 용매인바 물, 알코올 등에 완전히 용해될 수 있다. 또한 상기 에틸 락테이트 용매는 천연물질로부터 추출물을 추출하는데 있어 수율이 우수하다. 아울러 상기 에틸 락테이트 용매는 천연물질로부터 추출물을 추출하는데 있어 상기 추출물의 종류 및 상기 추출물의 양을 증대시키는 효과가 있다.The ethyl lactate solvent is not toxic unlike conventional methanol solvents and hexane solvents. The ethyl lactate solvent is also fully biodegradable. In addition, the ethyl lactate solvent is a protic polar solvent containing an -OH group in the molecule of ethyl lactate and can be completely dissolved in water, alcohol, and the like. In addition, the ethyl lactate solvent has an excellent yield in extracting the extract from natural substances. In addition, the ethyl lactate solvent has an effect of increasing the type of the extract and the amount of the extract in extracting the extract from the natural substance.

상기 (a) 단계의 천연물질은 생약과 같은 식물로서 자연계에 존재하는 물질이다. 구체적으로 상기 (a) 단계의 천연물질은 건강(생강), 담배잎, 당귀, 대황, 마치현, 맥문동, 산수유, 상백피, 애엽, 유근피, 인삼, 작약, 적하수오, 천궁, 황기, 황칠잎, 감초, 박하, 제충국, 포포나무잎 등을 포함할 수 있다. 바람직하게는 상기 (a) 단계의 천연물질은 대황, 작약, 천궁, 당귀, 및 인삼 가운데 1종 이상을 포함할 수 있다.The natural substance of step (a) is a substance existing in nature as a plant, such as a herbal medicine. Specifically, the natural materials of the step (a) are health (ginger), tobacco leaves, Angelica, rhubarb, machi, mammundong, cornus, baekbaekpi, love leaf, root root, ginseng, peony, red sesame, cheongung, astragalus, hwangchil leaves, licorice , Peppermint, pyrethrum, paw paw leaves, and the like. Preferably, the natural material of step (a) may include one or more of rhubarb, peony, cheonggung, tangwi, and ginseng.

바람직하게는, 상기 (a) 단계는 상기 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 상기 천연물질이 부피비가 5:1 내지 100:1의 범위로 혼합되어 수행될 수 있다. 보다 바람직하게는, 상기 에틸 락테이트 용매와 천연물질의 부피비는 15:1 내지 25:1의 범위일 수 있다. 상기 에틸 락테이트 용매/천연물질의 부피비가 5 미만인 경우 상기 천연물질로부터 추출물을 추출하는 수율이 저하될 수 있다. 또한 상기 에틸 락테이트 용매/천연물질의 부피비가 100을 초과하는 경우 상기 천연물질로부터 추출물을 추출하는 효율이 저하될 수 있다.Preferably, step (a) may be performed by mixing the ethyl lactate solvent and the natural material in a volume ratio of 5: 1 to 100: 1. More preferably, the volume ratio of the ethyl lactate solvent and the natural material may range from 15: 1 to 25: 1. When the volume ratio of the ethyl lactate solvent / natural material is less than 5, the yield of extracting the extract from the natural material may be lowered. In addition, when the volume ratio of the ethyl lactate solvent / natural material exceeds 100, the efficiency of extracting the extract from the natural material may be reduced.

다음으로 본 발명에 따른 제조방법은 (b) 상기 혼합물로부터 추출액을 추출하는 단계를 포함한다.Next, the production method according to the present invention includes the step of (b) extracting the extract from the mixture.

상기 (b) 단계는 상기 혼합물을 교반하여 상기 에틸 락테이트 용매에 상기 천연물질을 균일하게 혼합하고, 일정 온도와 시간 동안 추출액을 추출하는 단계일 수 있다.The step (b) may be a step of uniformly mixing the natural material in the ethyl lactate solvent by stirring the mixture, extracting the extract for a predetermined temperature and time.

바람직하게는, 상기 (b) 단계에서 추출 공정은 20℃ 내지 200℃의 온도범위에서 1 내지 24시간 동안 수행될 수 있다. 보다 바람직하게는, 상기 (b) 단계에서 추출 공정은 60℃ 내지 180℃의 온도범위에서 2 내지 5시간 동안 수행될 수 있다. 상기 추출액을 추출하는 온도범위가 20℃ 미만인 경우 상기 천연물질로부터 추출물을 추출하는 수율이 저하될 수 있다. 또한 상기 추출액을 추출하는 온도범위가 200℃를 초과하는 경우 상기 천연물질로부터 추출된 추출물의 종류 및 추출물의 양이 저하될 수 있다.Preferably, the extraction process in step (b) may be performed for 1 to 24 hours at a temperature range of 20 ℃ to 200 ℃. More preferably, the extraction process in step (b) may be performed for 2 to 5 hours at a temperature range of 60 ℃ to 180 ℃. When the temperature range for extracting the extract is less than 20 ℃ yield may be reduced to extract the extract from the natural material. In addition, when the temperature range for extracting the extract exceeds 200 ℃, the kind and amount of the extract extracted from the natural material may be lowered.

다음으로 본 발명에 따른 제조방법은 (c) 상기 추출액을 농축하여 농축된 추출액을 얻는 단계를 포함한다.Next, the manufacturing method according to the present invention includes the step of obtaining the concentrated extract (c) by concentrating the extract.

상기 (c) 단계에서는 상기 추출액을 일정시간 동안 농축하는 단계를 거쳐 상기 추출액에 존재하는 에틸 락테이트 용매를 상당량 제거하고, 상기 추출액으로부터 농축된 추출액을 수득할 수 있다.In the step (c), the extract is concentrated for a predetermined time to remove a considerable amount of the ethyl lactate solvent present in the extract, to obtain a concentrated extract from the extract.

바람직하게는, 상기 (c) 단계는 상기 추출액에 존재하는 침천물 및 불순물을 여과한 후 상기 추출액을 농축하는 공정이 수행될 수 있다. 상기 추출액의 농축 공정은 공지의 농축 공정이 사용될 수 있으며 바람직하게는 진공감압농축기를 이용하여 수행될 수 있다. 상기 농축 공정에 의해서 상기 추출액에 포함된 에틸 락테이트 용매는 상당량 제거될 수 있다. 이에 따라, 상기 (c) 단계에서는 침전물, 불순물 및 에틸 락테이트 용매가 상당량 제거된 농축된 추출액을 수득할 수 있고, 상기 농축된 추출액으로부터 천연물질 추출물을 얻게 된다.Preferably, the step (c) may be carried out a process of concentrating the extract after filtering the precipitates and impurities present in the extract. The concentration process of the extract may be a known concentration process may be used and preferably may be carried out using a vacuum pressure concentrator. By the concentration process, the ethyl lactate solvent included in the extract may be removed in substantial amounts. Accordingly, in the step (c), it is possible to obtain a concentrated extract from which precipitates, impurities, and ethyl lactate solvent are removed, and natural extract is obtained from the concentrated extract.

다음으로 본 발명에 따른 제조방법은 추가적으로 (d) 상기 농축된 추출액을 건조하는 단계를 더 포함할 수 있다.Next, the manufacturing method according to the present invention may further include (d) drying the concentrated extract.

상기 (d) 단계에 의해 상기 농축된 추출액에 존재하는 잔여분의 에틸락테이트 용매가 제거될 수 있다. 바람직하게는, 상기 (d) 단계에서는 상기 농축된 추출액의 손상을 최소화하기 위해 동결건조공정이 수행될 수 있다. 상기 동결건조공정에 의해 수득한 천연물질 추출물은 보존 기간이 증가되는 효과가 있다.The remaining amount of the ethyl lactate solvent present in the concentrated extract may be removed by step (d). Preferably, in step (d), a freeze-drying process may be performed to minimize the damage of the concentrated extract. Natural material extract obtained by the freeze-drying process has the effect of increasing the shelf life.

본 발명의 제조방법에 따라 제조된 상기 천연물질 추출물은 폴리페놀(polyphenol) 및 플라보노이드(flavonoid) 가운데 1종 이상의 성분을 포함할 수 있다. 상기 폴리페놀은 식물에서 발견되는 화학물질로서 인체 내의 활성 산소를 제거하는 황산화 효과가 있다. 또한, 상기 폴리페놀은 인체 내의 DNA, 세포구성 단백질 및 효소를 보호하는 효과가 있다. 아울러, 상기 폴리페놀은 항암작용과 함께 심장 질환을 막아주는 효과가 있다. 상기 플라보노이드는 상기 폴리페놀과 같이 식물에서 발견되는 화학물질로서 항알레르기, 항염증 등 생물학적 및 약리학적 효과가 있다.The natural material extract prepared according to the production method of the present invention may include one or more components of polyphenols and flavonoids. The polyphenol is a chemical found in plants and has a sulfated effect of removing active oxygen in the human body. In addition, the polyphenol has the effect of protecting DNA, cellular proteins and enzymes in the human body. In addition, the polyphenol has an anticancer effect and prevents heart disease. The flavonoids are chemicals found in plants such as polyphenols and have biological and pharmacological effects such as anti-allergic and anti-inflammatory properties.

또한, 상기 천연물질 추출물은 DPPH(1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 라디칼 소거활성을 나타낼 수 있다. 상기 DPPH는 일종의 자유 라디칼로서 상기 천연물질 추출물은 인체 내의 유해한 물질인 DPPH 자유 라디칼을 소거하는 효과가 있다. 아울러, 상기 천연물질 추출물은 인체 내의 DPPH 라디칼을 소거함으로써 인체 내에 활성산소를 효과적으로 제거하는 항산화 활성 효과가 있다.In addition, the natural substance extract may exhibit DPPH (1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) radical scavenging activity. The DPPH is a kind of free radicals, and the extract of natural substances has an effect of eliminating DPPH free radicals, which are harmful substances in the human body. In addition, the natural substance extract has an antioxidant activity effect that effectively removes free radicals in the human body by eliminating DPPH radicals in the human body.

이하, 실시예를 통해 본 발명의 구체적인 태양을 살펴보기로 한다.Hereinafter, specific embodiments of the present invention will be described through examples.

<< 실시예Example >>

<실시예 1><Example 1>

대황, 작약, 천궁, 당귀, 인삼, 박하, 제충국, 및 포포나뭇잎을 분쇄하여 에틸 락테이트(100%) 용매와 교반한 후 80℃에서 3시간 동안 추출하였다. 이후 상기 추출액을 여과한 후 진공감압농축기로 농축하여 농축된 추출액을 얻었다. 이후 상기 농축된 추출액을 동결건조하여 천연물질 추출물을 얻었다.Rhubarb, Peony, Cheongung, Angelica, Ginseng, Peppermint, Pyrethrum, and Popo Leaves were pulverized, stirred with ethyl lactate (100%) solvent, and extracted at 80 ° C. for 3 hours. Thereafter, the extract was filtered and concentrated by vacuum concentrator to obtain a concentrated extract. Thereafter, the concentrated extract was lyophilized to obtain a natural substance extract.

<실시예 2><Example 2>

대황, 작약, 천궁, 당귀, 인삼, 박하, 제충국, 및 포포나뭇잎을 분쇄하여 에틸 락테이트(100%) 용매와 교반한 후 150℃에서 추출한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하다.Rhubarb, Peony, Cheongung, Dongguk, Ginseng, Peppermint, Pyrethrum, and Popo Leaves were pulverized and stirred with ethyl lactate (100%) solvent and extracted at 150 ° C.

<비교예 1> Comparative Example 1

용매로서 메탄올(MeOH)을 사용하고 65℃에서 추출한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하다.It is the same as Example 1 except using methanol (MeOH) as a solvent and extracted at 65 ℃.

<비교예 2>Comparative Example 2

용매로서 헥산(Hexane)을 사용하고 65℃에서 추출한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하다.It is the same as Example 1 except using hexane (Hexane) as a solvent and extracted at 65 ℃.

<비교예 3>Comparative Example 3

용매로서 에틸 아세테이트(Ethyl acetate)를 사용하고 75℃에서 추출한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하다.It was the same as Example 1 except using ethyl acetate as a solvent and extracting at 75 ℃.

<비교예 4><Comparative Example 4>

용매로서 물(H2O)를 사용하고 100℃에서 추출한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일하다.Is the same as in Example 1 except for using the water (H 2 O) as the solvent and extracted from 100 ℃.

<실험예>Experimental Example

1. 폴리페놀(Polyphenol) 함량 측정1. Determination of Polyphenol Content

실시예 1,2 및 비교예 1 내지 4의 용매에 따른 시료별 폴리페놀(Polyphenol) 함량을 확인하기 위해, 1mg/mL 농도로 메탄올에 용해시킨 추출물 400μL 와 Folin-Denis reagent 400μL, 10% Na2CO3 400μL를 혼합하였다. 이후 상기 혼합액을 암실에서 50분간 반응시키고 원심분리기를 이용하여 13,000rpm에서 5분간 원심분리 하였다. 이후 상기 혼합액 중 상등액 120μL를 96-well plate에 분주하여 700nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로 tannic acid를 이용하여 검량선을 작성하고, 각 추출물의 phenolic 화합물의 함량을 mg/g tannic acid equivalent(TAE)로서 하기 표 1에 나타내었다.In order to confirm the polyphenol content of each sample according to the solvents of Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 to 4, 400 μL of an extract dissolved in methanol at a concentration of 1 mg / mL and 400 μL of Folin-Denis reagent, 10% Na 2 400 μL CO 3 was mixed. After the reaction mixture for 50 minutes in the dark and centrifuged for 5 minutes at 13,000rpm using a centrifuge. Thereafter, 120 μL of the supernatant in the mixture was dispensed on a 96-well plate, and the absorbance was measured at 700 nm. A calibration curve was prepared using tannic acid as a standard, and the content of the phenolic compound of each extract was shown in Table 1 as mg / g tannic acid equivalent (TAE).

2. 플라보노이드(flavonoid) 함량 측정2. Determination of Flavonoid Content

실시예 1,2 및 비교예 1 내지 4의 용매에 따른 시료별 플라보노이드(flavonoid) 함량을 확인하기 위해, 1mg/mL 농도로 메탄올에 용해시킨 추출물 100μL와 10% aluminum nitrate 20μL, 1M potassium acetate 20μL, 메탄올 860μL를 혼합하였다. 이후, 상기 혼합액을 40분간 반응시킨 후 100μL를 96-well plate에 분주하고 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로 rutin을 이용하여 검량선을 작성하고, 각 추출의 flavonoid 함량을 mg/g rutin equivalent (RE)로서 하기 표 2에 나타내었다.In order to confirm the flavonoid content of each sample according to the solvents of Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 to 4, 100 μL of extract dissolved in methanol at a concentration of 1 mg / mL, 20 μL of 10% aluminum nitrate, 20 μL of 1M potassium acetate, 860 μL of methanol was mixed. Thereafter, the mixture was reacted for 40 minutes, and 100 μL was dispensed on a 96-well plate, and the absorbance was measured at 420 nm. A calibration curve was prepared using rutin as a standard, and the flavonoid content of each extract was shown in Table 2 as mg / g rutin equivalent (RE).

3. DPPH 라디칼 소거활성 평가3. Evaluation of DPPH Radical Scavenging Activity

실시예 1,2 및 비교예 1 내지 4의 용매에 따른 시료별 DPPH 라디칼 소거활성을 평가하기 위해, 메탄올에 희석한 추출물을 96well plate에 20μL씩 분주하고, 200μM DPPH(1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)용액 180μL를 가하여 15분간 암실에서 반응시킨 후 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 상기 결과에 기반하여 DPPH 라디칼 50%를 소거하는데 필요한 추출물의 농도를 나타내는 SC50 값을 산출하였다. 또한, 대조군으로서 ascorbic acid(비타민 C)의 SC50 값을 기준으로 각 추출물의 SC50 값을 비교한 Relative activity(%)를 산출하였다. 하기 [표 3] 및[표 4] 각각에 추출물의 SC50 및 Relative activity(%) 를 나타내었다. SC50 값이 낮고, Relative activity(%) 수치가 높을수록 우수한 DPPH 라디칼 소거활성을 가지는 것으로 판단한다.In order to evaluate the DPPH radical scavenging activity for each sample according to the solvents of Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 to 4, 20 μL of the extract diluted in methanol was dispensed in a 96well plate, and 200 μM DPPH (1-diphenyl-2-picryl 180 μL of a hydrazyl) solution was added thereto, followed by reaction in the dark for 15 minutes, and the absorbance was measured at 517 nm. Based on the results, an SC 50 value representing the concentration of the extract needed to eliminate 50% of the DPPH radicals was calculated. In addition, Relative activity (%) was calculated by comparing the SC 50 value of each extract based on the SC 50 value of ascorbic acid (vitamin C) as a control. Tables 3 and 4 show the SC 50 and Relative activity (%) of the extract, respectively. The lower the SC 50 value and the higher the relative activity (%) value, the better the DPPH radical scavenging activity.

4. 시료별 추출 수율 평가4. Evaluation of Extraction Yield by Sample

실시예 1,2 및 비교예 1 내지 4의 용매에 따른 시료별 추출 수율을 확인하기 위해, 추출물의 무게(g)/시료의 무게(g) ×100에 의해 수율(%)을 측정하여 [표 5] 에 나타내었다.In order to confirm the extraction yield for each sample according to the solvents of Examples 1,2 and Comparative Examples 1 to 4, the yield (%) was measured by the weight of the extract (g) / the weight of the sample (g) x 100 [Table] 5].

시료별 폴리페놀(Polyphenol) 함량Polyphenol Content by Sample

폴리페놀(Polyphenol) 함량(mg/g(TAE))Polyphenol Content (mg / g (TAE)) 대황 rhubarb 작약Peony 천궁Cheongung 당귀Donkey 인삼Ginseng 박하mint 제충국Pyrethrum 포포
나뭇잎
papaw
leaf
실시예1Example 1 208.70208.70 63.7063.70 21.0721.07 23.9023.90 21.0021.00 -- -- -- 실시예2Example 2 139.80139.80 73.5073.50 29.1129.11 27.9027.90 50.2050.20 -- -- -- 비교예1Comparative Example 1 7.307.30 97.4097.40 20.3620.36 7.307.30 10.1010.10 -- -- -- 비교예2Comparative Example 2 29.6029.60 15.2015.20 9.899.89 7.407.40 1.101.10 -- -- -- 비교예3Comparative Example 3 217.70217.70 33.1033.10 18.3018.30 10.8010.80 3.903.90 -- -- -- 비교예4Comparative Example 4 7.607.60 68.3068.30 7.807.80 7.607.60 3.603.60 -- -- --

상기 표 1의 결과를 살펴보면 천궁, 당귀, 인삼으로부터 에틸 락테이트 용매를 사용하여 추출된 폴리페놀의 함량은 천궁, 당귀, 인삼으로부터 메탄올 용매, 헥산 용매, 에틸 아세테이트 용매 및 물을 사용하여 추출된 폴리페놀의 함량보다 높은 것을 알 수 있다. 특히 천궁, 당귀, 인삼으로부터 150℃의 에틸 락테이트 용매를 사용하여 추출된 폴리페놀의 함량이 가장 높은 것을 알 수 있다. Looking at the results of Table 1, the content of polyphenol extracted using ethyl lactate solvent from Cheongung, Angelica, and Ginseng was poly-extracted using methanol solvent, hexane solvent, ethyl acetate solvent, and water from Cheongung, Angelica, Ginseng It can be seen that it is higher than the content of phenol. In particular, it can be seen that the content of polyphenols extracted using ethyl lactate solvent at 150 ° C. from Cheongung, Angelica and Ginseng was the highest.

시료별 플라보노이드(flavonoid) 함량 Flavonoid Content by Sample

플라보노이드(flavonoid) 함량 (mg/g(RE))Flavonoid Content (mg / g (RE)) 대황 rhubarb 작약Peony 천궁Cheongung 당귀Donkey 인삼Ginseng 박하mint 제충국Pyrethrum 포포
나뭇잎
papaw
leaf
실시예1Example 1 4.24.2 0.70.7 1.231.23 0.40.4 0.10.1 -- -- -- 실시예2Example 2 0.00.0 1.71.7 1.851.85 0.80.8 0.50.5 -- -- -- 비교예1Comparative Example 1 3.53.5 0.30.3 1.541.54 0.00.0 0.80.8 -- -- -- 비교예2Comparative Example 2 0.40.4 -0.2-0.2 0.440.44 3.23.2 11.811.8 -- -- -- 비교예3Comparative Example 3 -3.7-3.7 0.00.0 0.930.93 0.50.5 11.911.9 -- -- -- 비교예4Comparative Example 4 0.00.0 -0.3-0.3 2.552.55 0.00.0 -1.6-1.6 -- -- --

상기 표 2의 결과를 살펴보면 특히 대황, 작약으로부터 에틸 락테이트 용매를 사용하여 추출된 플라보노이드의 함량은 비교예에서 사용된 용매로 추출된 플라보노이드 함량보다 높은 것을 알 수 있다. Looking at the results of Table 2 it can be seen that the content of the flavonoids extracted with ethyl lactate solvent from rhubarb, peony, in particular, is higher than the flavonoids extracted with the solvent used in the comparative example.

시료별 DPPH 라디칼 소거활성 - SC50 DPPH radical scavenging activity by sample-SC 50

SC50 (mg/mL)SC 50 (mg / mL) 대황 rhubarb 작약Peony 천궁Cheongung 당귀Donkey 인삼Ginseng 박하mint 제충국Pyrethrum 포포
나뭇잎
papaw
leaf
실시예1Example 1 0.3160.316 0.9740.974 7.3217.321 11.0711.07 9.4879.487 0.5030.503 0.7990.799 2.1382.138 실시예2Example 2 0.6490.649 1.6211.621 8.0698.069 9.1459.145 4.9084.908 0.5900.590 0.8810.881 0.3050.305 비교예1Comparative Example 1 0.3020.302 1.0811.081 7.4137.413 16.4716.47 23.6223.62 0.9240.924 1.1051.105 1.7621.762 비교예2Comparative Example 2 5.005.00 15.3615.36 6.3166.316 22.8022.80 141.5141.5 48.0248.02 14.5514.55 7.4497.449 비교예3Comparative Example 3 0.1760.176 0.9870.987 4.0804.080 13.7713.77 29.5329.53 3.9043.904 6.5096.509 8.6438.643 비교예4Comparative Example 4 0.9590.959 0.7770.777 11.3411.34 15.2915.29 25.4825.48 0.9210.921 1.3451.345 2.8922.892 비타민 C(대조군)Vitamin C (Control) 0.0540.054 0.1050.105 0.1840.184 0.1050.105 0.1840.184 0.0760.076 0.2010.201 0.2010.201

시료별 DPPH 라디칼 소거활성 - Relative activity DPPH radical scavenging activity by sample-Relative activity

Relative activity (%)Relative activity (%) 대황rhubarb 작약Peony 천궁Cheongung 당귀Donkey 인삼Ginseng 박하mint 제충국Pyrethrum 포포
나뭇잎
papaw
leaf
실시예1Example 1 17.1017.10 10.7810.78 2.512.51 0.950.95 0.750.75 39.9739.97 25.0325.03 9.409.40 실시예2Example 2 8.328.32 6.486.48 2.282.28 1.151.15 1.451.45 34.0634.06 22.7022.70 65.8265.82 비교예1Comparative Example 1 17.8917.89 13.5113.51 2.482.48 0.640.64 0.300.30 21.7721.77 19.7019.70 11.4111.41 비교예2Comparative Example 2 1.081.08 0.680.68 2.912.91 0.460.46 0.050.05 0.420.42 1.371.37 2.702.70 비교예3Comparative Example 3 30.6630.66 10.6410.64 4.514.51 0.760.76 0.240.24 5.155.15 3.073.07 2.332.33 비교예4Comparative Example 4 5.635.63 9.719.71 1.621.62 0.690.69 0.280.28 21.8221.82 14.8714.87 6.956.95 비타민 C(대조군)Vitamin C (Control) 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100 100100

상기 표 3, 표 4의 결과를 살펴보면 특히 당귀, 인삼, 박하, 제충국, 포포 나뭇잎으로부터 에틸 락테이트 용매를 사용하여 추출된 항산화 물질의 함량이 비교예 대비 월등히 높은 것을 알 수 있다. Looking at the results of Table 3, Table 4 it can be seen that the content of antioxidants extracted using ethyl lactate solvent, especially from Angelica, ginseng, peppermint, wormwood, paw paw leaves.

시료별 추출 수율Extraction yield by sample

추출 수율 (%)Extraction yield (%) 대황 rhubarb 작약Peony 천궁Cheongung 당귀Donkey 인삼Ginseng 박하mint 제충국Pyrethrum 포포
나뭇잎
papaw
leaf
실시예1Example 1 17.1517.15 5.725.72 11.1111.11 17.9617.96 4.384.38 2.452.45 5.315.31 5.475.47 실시예2Example 2 44.2044.20 27.5727.57 33.2633.26 6.656.65 8.638.63 6.806.80 6.376.37 11.5811.58 비교예1Comparative Example 1 27.1627.16 18.5018.50 22.9022.90 29.2729.27 12.9712.97 16.7016.70 16.4016.40 14.7314.73 비교예2Comparative Example 2 0.430.43 0.300.30 3.333.33 1.131.13 0.970.97 2.402.40 2.832.83 3.023.02 비교예3Comparative Example 3 4.084.08 0.790.79 4.604.60 1.571.57 1.081.08 3.713.71 4.044.04 5.375.37 비교예4Comparative Example 4 43.6043.60 25.8625.86 29.0229.02 68.9668.96 7.307.30 28.0628.06 20.2620.26 19.1419.14

상기 표 5의 결과를 살펴보면 대황, 작약, 천궁으로부터 에틸 락테이트 용매를 사용하여 추출하는 경우 특히 헥산 용매, 에틸 아세테이트 용매 대비 추출 수율이 우수한 것을 알 수 있다.Looking at the results of Table 5 it can be seen that the extraction yield compared to hexane solvent, ethyl acetate solvent especially when extracted using rhubarb, peony, cheongung using an ethyl lactate solvent.

상기와 같이 에틸 락테이트 용매를 이용한 천연물질 추출은 헥산 용매 천연 및 에틸 아세테이트 용매를 이용한 천연물질 추출 대비 천연물질 추출물의 수율이 우수한 점을 알 수 있다. 또한 에틸 락테이트 용매를 이용한 천연물질 추출은 메탄올 용매, 헥산 용매, 에틸 아세테이트 용매 및 물 대비 폴리페놀 성분을 추출하는 효율이 우수한 점을 알 수 있다. 아울러 에틸 락테이트 용매를 이용한 천연물질 추출은 메탄올 용매 및 물 대비 플라보노이드 성분을 추출하는 효율이 우수한 점을 알 수 있다. 또한 에틸 락테이트 용매를 이용하여 인산, 박하, 제충국, 포포 나뭇잎으로부터 추출된 천연물질 추출물은 항산화 활성을 나타내는 성분의 함량이 높은 점을 알 수 있다. As described above, the extraction of natural materials using ethyl lactate solvent can be seen that the yield of the extraction of natural materials is superior to the extraction of natural materials using natural hexane solvent and ethyl acetate solvent. In addition, the extraction of natural materials using ethyl lactate solvent can be seen that the efficiency of extracting the polyphenol components compared to methanol solvent, hexane solvent, ethyl acetate solvent and water. In addition, the extraction of natural substances using ethyl lactate solvent can be seen that the efficiency of extracting the flavonoid components compared to methanol solvent and water. In addition, it can be seen that the natural substance extract extracted from phosphoric acid, peppermint, P. pylori, and paw paw leaves using ethyl lactate solvent has a high content of antioxidant activity.

이상과 같이 본 발명에 대해 설명하였으나, 본 명세서에 개시된 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술사상의 범위 내에서 통상의 기술자에 의해 다양한 변형이 이루어질 수 있음은 자명하다. 아울러 앞서 본 발명의 실시예를 설명하면서 본 발명의 구성에 따른 작용 효과를 명시적으로 기재하여 설명하지 않았을지라도, 해당 구성에 의해 예측 가능한 효과 또한 인정되어야 함은 당연하다.Although the present invention has been described as described above, the present invention is not limited to the embodiments disclosed herein, and it is obvious that various modifications can be made by those skilled in the art within the scope of the technical idea of the present invention. In addition, even if the above described embodiments of the present invention while not explicitly described and described the effect of the effect of the configuration of the present invention, it is obvious that the effect predictable by the configuration is also to be recognized.

Claims (7)

(a) 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 천연물질을 혼합하여 혼합물을 얻는 단계;
(b) 상기 혼합물로부터 추출액을 추출하는 단계; 및
(c) 상기 추출액을 농축하여 농축된 추출액을 얻는 단계;를 포함하여 천연물질 추출물을 제조하는,
에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.
(a) mixing an ethyl lactate solvent with a natural substance to obtain a mixture;
(b) extracting the extract from the mixture; And
(c) concentrating the extract to obtain a concentrated extract; to prepare a natural substance extract, including
Method for preparing natural substance extract using ethyl lactate.
제1항에 있어서,
상기 (c) 단계 이후,
(d) 상기 농축된 추출액을 건조하는 단계;를 더 포함하는 것을 특징으로 하는
에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.
The method of claim 1,
After step (c),
(d) drying the concentrated extract;
Method for preparing natural substance extract using ethyl lactate.
제 1항에 있어서,
상기 천연물질 추출물은 폴리페놀(polyphenol) 및 플라보노이드(flavonoid) 가운데 1종 이상의 성분을 포함하는 것을 특징으로 하는
에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.
The method of claim 1,
The natural extract is characterized in that it comprises at least one component of polyphenol (polyphenol) and flavonoids (flavonoid)
Method for preparing natural substance extract using ethyl lactate.
제 1항에 있어서,
상기 천연물질은 대황, 작약, 천궁, 당귀 및 인삼 가운데 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는
에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.
The method of claim 1,
The natural material is characterized in that it comprises one or more of rhubarb, peony, cheonggung, tangwi and ginseng
Method for preparing natural substance extract using ethyl lactate.
제 1항에 있어서,
상기 천연물질 추출물은 DPPH(1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 라디칼 소거활성을 갖는 것을 특징으로 하는
에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.
The method of claim 1,
The natural substance extract is characterized in that it has a DPPH (1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) radical scavenging activity
Method for preparing natural substance extract using ethyl lactate.
제 1항에 있어서,
상기 (a) 단계는,
상기 에틸 락테이트(ethyl lactate) 용매와 상기 천연물질이 부피비가 5:1 내지 100:1의 범위로 혼합되는 것을 특징으로 하는
에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.
The method of claim 1,
In step (a),
The ethyl lactate solvent and the natural material are characterized in that the volume ratio is mixed in the range of 5: 1 to 100: 1.
Method for preparing natural substance extract using ethyl lactate.
제 1항에 있어서,
상기 (b) 단계는,
상기 혼합물을 20℃ 내지 200℃에서 1 내지 24시간 동안 추출하는 것을 특징으로 하는
에틸 락테이트를 이용한 천연물질 추출물의 제조방법.

The method of claim 1,
Step (b),
The mixture is extracted for 1 to 24 hours at 20 ℃ to 200 ℃
Method for preparing natural substance extract using ethyl lactate.

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