KR20190073069A - Lactobacillus paracasei GLU70 strain having gluten degradation activity and uses thereof - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a Lactobacillus paracasei GLU70 strain having a gluten degradation activity separated from fermented foods, and a usage thereof. By fermenting gluten-containing grains (flours, rye, barley, oats and the like) using Lactobacillus paracasei strains, it is possible to degrade gluten existing in grain powder and use gluten degraded grain powder manufactured thereby to manufacture popular gluten-free processed foods such as noodles, udon, pizzas, bread and the like. Accordingly, the present invention may be useful to people who do not take grain powder processed foods due to celiac diseases caused by gluten intolerance or a gluten allergy.

Description

글루텐 분해능을 가지는 락토바실러스 파라카제이 GLU70 균주 및 이의 용도{Lactobacillus paracasei GLU70 strain having gluten degradation activity and uses thereof}Glutathione Lactobacillus paracase GLU70 strain and its use {Lactobacillus paracasei GLU70 strain having gluten degradation activity and uses thereof}

본 발명은 글루텐 분해능을 가지는 락토바실러스 파라카제이 GLU70 균주 및 이의 용도에 관한 것이다.The present invention relates to a lactobacillus paracase GLU70 strain having gluten degradability and its use.

밀가루는 우리나라 식품산업에서 가장 중요한 원료의 하나로서 주용도는 제면제과제빵으로 2001년도 밀가루 생산량은 1,779,000 만톤으로, 이 중 제면용이 37.7%, 제과제빵용이 21.9%를 차지하고 있다. 우리나라에서 생산되는 밀가루는 강력 밀가루, 중력 밀가루, 박력 밀가루로서 1986년부터 생산된 혼합 밀가루와 전립 밀가루가 있는데, 혼합 밀가루는 제면용으로 중력 밀가루에 속한다. 전립 밀가루는 밀 전체를 분쇄한 것으로 특수 제빵제과용으로 이용되며, 강력 밀가루는 주로 미국의 경질봄 밀(Dark Northern Spring, DNS)로 만들며, 1991년부터 캐나다의 CWRS(Canada Western Red Spring)도 제빵용으로 이용되기 시작하였다.Wheat flour is one of the most important raw materials in Korea's food industry, and the main product is flour production of 1,779 million tons in 2001 with 37.9% of flour production and 21.9% of baking and baking industry. Wheat flour produced in Korea is mixed flour and whole wheat flour produced from 1986 as strong flour, gravity flour, and powerful flour. Mixed flour belongs to gravity flour for noodles. The whole wheat flour is milled whole wheat, which is used for special baking confectionery. The strong flour is mainly made by American Dark Northern Spring (DNS). Since 1991, Canadian CWRS (Canada Western Red Spring) .

중력 밀가루는 미국 밀을 원료로 하는 경우 흰 밀(Western White)과 경질 겨울 밀(Hard Red Winter)을 같은 비율로 섞어 제분하여 생산하며 주로 제면용과 가정용 다목적 밀가루로 쓰이고 있다. 최근에는 제면용 밀가루로 호주 밀을 이용하기도 하며, 호주 밀은 크게 호주 표준 흰 밀(Australian Standard White), 호주 흰 밀(Australian White)과 호주 경질 밀(Australian Hard) 등으로 이루어져 있으며, 최근 국수 종류의 다양화와 품질의 고급화에 따라 호주 밀의 주종인 ASW의 선호도가 크게 증가함에 따라 도입량 면에서도 해마다 증가하고 있는 추세이다. 밀가루의 경우, 100여 년 동안 체계적인 연구 축적과 산업화가 이뤄져 각각의 음식에 최적화된 수백 가지 제품이 생산되고 있으며, 밀을 주식으로 하는 서구 사회에서는 대부분 밀가공 식품인 빵, 과자, 국수, 튀김, 피자 등으로 발전해 왔으며, 탄수화물을 주로 하는 가공에 있어서 밀 가공식품은 거의 대부분이다. 최근 국내의 경우에서도 음식문화가 점차적으로 서구화되면서 쌀이 주식이기는 하나 매년 1인당 쌀 소비량이 1998년에 99.2 kg에서 2009년에는 77.4 kg으로 약 23 % 감소하고 있으며, 쌀 대신 밀가루 음식의 소비는 점차 증가하고 있는 추세이다. 그러나, 보리나 밀 등 곡류에는 불용성 단백질인 글루텐(Gluten)이 함유되어 있어 자체로 소화가 잘 안되며 글루텐 불내증을 유발하기도 한다.Gravity Wheat flour is produced by milling and blending the same amount of white wheat and hard red winter wheat as raw wheat for American wheat, mainly used for noodles and household multi-purpose flour. In recent years, wheat flour has been used in Australian wheat. Australian wheat is largely composed of Australian Standard White, Australian White and Australian Hard. Recently, As the diversity of quality and quality has increased, the popularity of Australian wheat ASW has increased significantly, and this trend is increasing year by year. In the case of wheat flour, systematic research accumulation and industrialization have been carried out for over 100 years, and hundreds of products optimized for each food have been produced. In the western society where wheat is used as a stock, most wheat processed foods such as bread, sweets, noodles, Pizza, etc., and in the case of carbohydrate-based processing, almost all wheat-processed foods are produced. In recent years, the food culture has gradually become westernized in Korea, but rice consumption per capita is decreasing by 23% per year from 99.2 kg in 1998 to 77.4 kg in 2009. The consumption of flour food instead of rice gradually . However, grains such as wheat and wheat contain gluten (insoluble protein), which is difficult to digest itself and may cause gluten intolerance.

글루텐은 밀전분 생산 시 발생하는 부산물로 물에 불용성 단백질로서, 주로 글리아딘(gliadin)과 글루테닌(glutenin)으로 구성되어 있으며 글리아딘은 분자량이 30,000~80,000 Da이고, 글루테닌은 수백만 Da 정도로 큰 분자량을 갖고 있다. 특히, 글루텐의 글리아딘은 알코올에 용해하나 글루테닌은 불용인데, 제빵에서 중요한 역할을 하는 것은 글루테닌이다. 즉, 밀가루를 물과 혼합하면 글리아딘과 글루테닌이 결합하여 글루텐을 형성하며, 글루텐 단백질 중 글리아딘은 점성과 신장성이 있고 글루테닌은 탄력성을 가지고 있다. 이 2개의 단백질이 밀가루 종류에 따라 점유하는 비율이 다르게 되며, 이러한 것은 밀가루만이 가지고 있는 독특한 성질로서, 예를 들면 빵을 만드는데 사용하는 강력분용 밀에는 글리아딘이 65%, 글루테닌이 35%이고 케이크류를 만드는데 사용하는 박력분용 밀에는 글리아딘이 75%, 글루테닌이 25%를 함유하며, 이것의 역할은 빵의 부피와 관계가 있으며 반죽의 골격형성과 발효 중 생성되는 가스를 보유하는 기능을 갖게 된다. 글루텐은 그 자체로 소화가 잘 안되며 글루텐 불내증에 걸리면 피부, 신경계, 면역계, 체력, 관절, 치아를 비롯하여 행동과 기분까지 악영향을 받게 되며, 흔히 글루텐 알레르기라고 알려져 있지만, 실제 병명은 '글루텐 과민성 장 질환'이다.Gluten is a byproduct of wheat starch production. It is a water-insoluble protein composed mainly of gliadin and glutenin. Gliadin has a molecular weight of 30,000 ~ 80,000 Da and glutenin is millions of Da Of the molecular weight. In particular, gliadin in gluten is soluble in alcohol but glutenin is insoluble. Glutenin plays an important role in baking. That is, when flour is mixed with water, glialine and glutenine are combined to form gluten. Glyadine in gluten protein has viscosity and elongation and glutenin has elasticity. These two proteins occupy different proportions depending on the type of flour. This is a unique property that only flour has. For example, in the wheat flour used for making bread, gliadin is 65%, glutenin is 35 %, And wheat flour used for making cakes contains 75% of gliadin and 25% of glutenin. Its role is related to the volume of the bread, and the skeleton of the dough and the gas produced during fermentation It has a function to hold. Gluten is not digestible by itself, and when it is afflicted with gluten intolerance, it affects the skin, nervous system, immune system, physical strength, joints and teeth as well as behavior and mood. It is often known as gluten allergy, 'to be.

불내증이란 영양분이 몸 안에 들어왔을 때 우리 몸이 영양분을 흡수하지 못하고 거부하는 반응으로 대표적인 예는 글루텐 불내증 증상으로 설사, 복통, 변비, 복부팽만 등 소화기능 장애를 동반하기도 한다. 글루텐 과민성 장 질환은 글루텐을 소화시키는 효소가 없거나 부족하여 생기는 증상으로, 글루텐을 섭취하면 장을 자극하고 장 점막의 돌기가 위축돼 영양소를 흡수할 수 없는 상태가 되며 이러한 글루텐 부작용은 유전적인 요인에 의한 발병으로서 선천적으로 글루텐 소화 효소가 없는 사람에게만 생기는 유전 질병으로 일단 글루텐 과민성 장 질환으로 진단받으면 평생 식사를 통해 조절해야 하는 불편함을 나타낸다.Intoxication is a reaction in which the body can not absorb nutrients when the nutrients enter the body. Typical examples are gluten intoxication, accompanied by digestive dysfunction such as diarrhea, abdominal pain, constipation, and abdominal distension. Gluten-induced irritable bowel disease is a condition caused by lack or lack of enzymes that digest gluten. When gluten is ingested, it stimulates the intestine and the atrophy of the intestinal mucosa becomes ineffective, making it unable to absorb nutrients. Is a hereditary disease caused only by a person who does not have a gluten digestive enzyme naturally, and once diagnosed as a gluten-induced intestinal disorder, it is inconvenient to control it through lifelong eating.

흔히 알려져 있듯이 글루텐 저항증인 셀리악 질병(Celiac disease)은 소장에서 일어나는 알레르기 질환으로 장내 영양분 흡수를 저해하는 글루텐에 대한 감수성이 일어남으로써 증세가 나타나는 질병으로서 대부분 유아기에 시작하지만 드물게는 성인이 되어서 처음 나타나는 경우도 있다. 미국인들 가운데는 최소한 133명 중 1명의 비율로 셀리악 병를 겪고 있으나 이보다 세 배 이상의 인구가 글루텐에 대한 예민 증상을 갖고 있는 것으로 추정하고 있으며 최근 유럽인(특히 북유럽)에게 급격히 발생하고 있고 라틴아메리카계인, 흑인 그리고 아시아인 또한 질병 발생 인구가 증가하는 추세이다.As is commonly known, Celiac disease is a disease of the small intestine that is susceptible to gluten, which is an allergic disease in the small intestine. It is a disease in which symptoms usually begin in infancy but rarely occurs in adults. There are also cases. Among Americans, it is estimated that at least one in 133 Americans suffer from sialic acid, but more than three times more people are suspected of having gluten-sensitive symptoms. This is a recent occurrence in Europeans (especially in Northern Europe) Blacks and Asians are also on the rise in disease outbreak populations.

한편, 한국등록특허 제1530055호에서는 '비알레르기성 프로바이오틱 박테리아 배양물의 제조 방법 및 관련 용도'가 개시되어 있고, 한국등록특허 제1360379호에서는 '셀리악병에 의한 영향을 받는 사람을 위한 무글루텐 블루바인 유제품'이 개시되어 있으나, 본 발명에서와 같이 '글루텐 분해능을 가지는 락토바실러스 파라카제이 GLU70 균주 및 이의 용도'에 대해서는 밝혀진 바가 전혀 없다.Korean Patent No. 1530055 discloses a method for producing a non-allergenic probiotic bacterial culture and related uses, and Korean Patent No. 1360379 discloses a method for producing gluten free gluten Blue Vine Dairy Products' have been disclosed. However, as in the present invention, the 'Lactobacillus paracasei GLU70 strain having gluten breakdown ability and its use' have not been disclosed at all.

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명자는 각종 젓갈로부터 분리된 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei) GLU70 균주가 효과적인 글루텐 분해능을 가지는 것을 확인한 것으로, 상기 유산균을 이용하여 글루텐 함유 곡류(밀, 호밀, 보리, 귀리 등) 가루를 발효시키면 곡류 가루에 존재하는 글루텐을 분해할 수 있고, 이로부터 제조된 글루텐 분해 곡류 가루를 이용하여 국수, 우동, 피자 및 빵 등 대중적인 글루텐 프리 가공식품을 제조할 수 있을 것이며, 따라서 관련 식품 업계에 매우 유용할 것으로 기대됨으로써 본 발명을 완성하였다.DISCLOSURE OF THE INVENTION The present invention has been made in view of the above-mentioned needs, and it is an object of the present invention to provide Lactobacillus paracase paracasei ) GLU70 has an effective gluten-resolving ability. When the above-mentioned lactic acid bacteria are used to ferment the gluten-containing cereal flour (wheat, rye, barley, oats, etc.), the gluten present in the cereal flour can be decomposed, By using the prepared gluten-decomposed grain flour, it is possible to produce popular gluten-free processed foods such as noodles, udon, pizza and bread, and thus it is expected to be very useful for the related food industry.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 글루텐(gluten) 분해능을 가지는 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei) GLU70 균주(KCTC 13415BP)를 제공한다.In order to achieve the object of the present invention, the present invention provides a Lactobacillus paracasei GLU70 strain (KCTC 13415BP) having gluten-resolving ability.

또한, 본 발명은 상기 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 글루텐 분해용 미생물제제를 제공한다.The present invention also provides a microorganism preparation for degrading gluten, comprising the strain or a culture solution thereof as an active ingredient.

또한, 본 발명은 상기 균주를 배양하는 단계를 포함하는 글루텐 분해용 미생물제제의 제조 방법을 제공한다.The present invention also provides a method for producing a microorganism preparation for degrading gluten, which comprises culturing the strain.

또한, 본 발명은 상기 균주 또는 이의 배양액을 곡류 가루에 처리 후 발효하여 곡류 가루에 존재하는 글루텐을 분해하는 단계를 포함하는 글루텐 프리(gluten-free) 곡류 가루 발효물의 제조방법을 제공한다.The present invention also provides a method for producing a gluten-free cereal meal fermented product, which comprises fermenting the strain or a culture thereof to a cereal flour and then decomposing the gluten present in the cereal flour.

또한, 본 발명은 상기 방법에 의해 제조된 글루텐 프리 곡류 가루 발효물을 제공한다.The present invention also provides a fermented product of gluten-free cereal flour produced by the above method.

또한, 본 발명은 상기 글루텐 프리 곡류 가루 발효물로 제조된 글루텐 프리 가공식품을 제공한다.The present invention also provides a gluten-free processed food made from the fermented product of the gluten-free cereal flour.

본 발명은 글루텐 함유 곡류(밀, 호밀, 보리, 귀리 등) 가루를 락토바실러스 파라카제이 균주를 이용하여 발효시킴으로써 곡류 가루에 존재하는 글루텐을 분해할 수 있고, 이로 인해 제조된 글루텐 분해 곡류 가루를 이용하여 국수, 우동, 피자 및 빵 등 대중적인 글루텐 프리 가공식품을 제조할 수 있어 글루텐 불내증으로 인해 발생하는 셀리악 질병(Celiac disease) 또는 글루텐 알레르기 등으로 인해 곡류 가루 가공 식품을 섭취하지 못했던 사람들에게 매우 유용하게 제공될 수 있다.The present invention relates to a method for producing gluten-containing cereal grains by fermenting glutinous cereal flour (wheat, rye, barley, oats, etc.) with lactobacillus paracase strains to degrade the gluten present in the cereal flour, It can be used to produce popular gluten-free processed foods such as noodles, udon, pizza and bread, and to people who have not been able to ingest cereal flour processed food due to gluten intolerance caused by Celiac disease or gluten allergy. Can be very usefully provided.

도 1은 본 발명에서 분리한 락토바실러스 파라카제이 GLU70 균주의 플레이트 배양 사진이다.
도 2는 본 발명에서 분리한 락토바실러스 파라카제이 GLU70 균주의 글루텐 발효 전(A), 후(B)를 비교한 사진이다.
도 3은 글루텐 함유 배지에서 본 발명에서 분리한 락토바실러스 파라카제이 GLU70 균주에 의한 글루텐 분해능 및 세포성장에 관한 그림이다.
도 4는 본 발명에서 분리한 락토바실러스 파라카제이 GLU70 균주를 이용한 발효면의 제조 공정을 나타낸 그림이다.
1 is a plate culture photograph of a lactobacillus paracase strain GLU70 isolated in the present invention.
Fig. 2 is a photograph of the lacto-bacillus paracase isolate GLU70 isolated in the present invention before (A) and (B) before fermentation with gluten.
FIG. 3 is a graph showing the gluten resolving ability and cell growth by the Lactobacillus paracase strain GLU70 isolated in the present invention in a gluten-containing medium. FIG.
FIG. 4 is a view showing a process for producing a fermented surface using the Lactobacillus paracase strain GLU70 isolated in the present invention. FIG.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 글루텐(gluten) 분해능을 가지는 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei) GLU70 균주(KCTC 13415BP)를 제공한다.In order to achieve the object of the present invention, the present invention provides a Lactobacillus paracasei GLU70 strain (KCTC 13415BP) having gluten-resolving ability.

이에 본 발명자들은 국내 발효식품인 젓갈로부터 글루텐을 분해할 수 있는 유산균을 탐색하고 이들 중에 글루텐 분해능이 우수한 유산균을 선별하여 글루텐 분해능을 분석하였다. 최종 확보된 유산균을 한국생명공학연구원 유전자은행(KCTC, Korean Collection for Type Cultures)에 2017년 12월 06일자로 기탁하여 기탁번호(Lactobacillus paracasei GLU70 KCTC 13415BP)를 부여받음으로써 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the present inventors have searched for lactic acid bacteria capable of degrading gluten from fermented Korean fermented foods, and analyzed the gluten resolving ability by selecting lactic acid bacteria having excellent gluten resolvability among them. The recently obtained lactic acid bacteria were deposited at KCTC (Korean Collection for Type Cultures) ( Lactobacillus paracasei GLU70 KCTC 13415BP) deposited on Dec. 06, 2017 and completed the present invention.

본 발명에서, 글루텐 불내증으로 인해 발생하는 셀리악 질병(Celiac disease)은 몇몇 곡물에 자연적으로 포함되어 있는 "저장" 단백질인 글루텐의 섭취에 의하여 일어나는, 장 질환성의(enterophatic), 만성, 면역 매개형 염증 질병이다. 이러한 음식 불내증은 밀가루 글루텐, 스펠트(밀가루의 일종), 카무트(kamut) 및 스펠라 (밀가루의 일종), 보리, 호밀, 라이밀(밀가루와 호밀의 교잡종) 및 그 파생물의 전형적인 단백질 분획들의 섭취에 비정상적인 방법으로 반응하는 면역 시스템을 갖는 유전학적 소인이 있는(predisposed) 사람들에게 영향을 미친다. 몇몇 개인들은 귀리 단백질에 대해 불내성인 경우도 있다.In the present invention, Celiac disease caused by gluten intolerance is caused by the ingestion of gluten, a "storage" protein naturally contained in some grains, which causes enteropathic, chronic, Inflammatory disease. Such food intolerance may include ingestion of typical protein fractions of wheat gluten, spelled (flour), kamut and spela (a type of flour), barley, rye, lime (hybrid of wheat and rye) To those who are genetically predisposed to have an immune system that responds abnormally to the immune system. Some individuals are intolerant to oat proteins.

본 발명에서, 기술적으로 "글루텐"이라는 용어는 "글리아딘"이라고 불리우는 간단한 프로라미닉(prolaminic) (프롤린이 풍부한) 단백질과 상기에서 언급한 곡물들의 단백질인 "글루테닌"이라고 불리우는 글루테리닉(glutelinic)(글루타민이 풍부한) 단백질의 조합을 말한다. 셀리악병과 관련하여, "글루텐"은 글루텐을 형성하는 다양한 단백질 분획을 비롯하여, 흔히 곡물에 포함되는 단백질들을 통칭하는데 이용되며, 이 중에서 글리아딘이 가장 유해한 것으로 여겨진다. 셀리악병의 발달을 예방하거나 치료할 가능성은 지금까지는 존재하지 않았으므로, 전 생애에 걸쳐 엄격하게 무글루텐 식사를 하는 것이 오직 셀리악병에 걸린 사람들에게 완벽한 건강을 보장해줄 수 있는 유일한 치료법이다.In the present invention, the term "gluten" is technically referred to as a simple prolaminic (proline rich) protein called "gliadin " and a glutarinic (glutamine-rich) proteins. In connection with Celiac disease, "gluten" is commonly used to refer to the proteins contained in cereals, including the various protein fractions that form gluten, among which gliadin is considered the most deleterious. The possibility of preventing or treating the development of celiac disease has not existed so far, so strictly non-gluten meal over the course of life is the only cure to ensure complete health for those with celiac disease.

본 발명은 또한, 본 발명의 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 글루텐(gluten) 분해용 미생물제제를 제공한다. 상기 균주는 바람직하게는 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei)이며, 더욱 바람직하게는 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei) GLU70 균주(KCTC 13415BP)이다.The present invention also provides a microorganism preparation for degrading gluten comprising the strain of the present invention or a culture thereof as an active ingredient. The strain is preferably Lactobacillus paracasei , more preferably Lactobacillus paracasei GLU70 strain (KCTC 13415BP).

또한, 본 발명은 상기 균주를 배양하는 단계를 포함하는 글루텐(gluten) 분해용 미생물제제의 제조 방법을 제공한다.Also, the present invention provides a method for producing a microorganism preparation for degrading gluten, which comprises culturing the strain.

상기 균주는 바람직하게는 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei) GLU70 균주(KCTC 13415BP)이다. 본 발명의 균주를 배양하는 방법은 당업계에 통상적으로 이용되는 방법을 이용할 수 있다.The strain is preferably a Lactobacillus paracasei GLU70 strain (KCTC 13415BP). As a method for culturing the strain of the present invention, a method commonly used in the art can be used.

또한 본 발명에서 제공되는 유산균 균주 및 유산균 배양액, 입상, 고상 등 대상 곡류의 종류 및 사용 목적에 따라 제형화하여 공급할 수 있다.The lactic acid bacteria and the lactic acid bacteria provided in the present invention may be formulated and supplied in accordance with the type of the cereal grains to be used and the intended use such as the culture liquid, granule, solid phase and the like.

또한, 본 발명은 상기 균주 또는 이의 배양액을 곡류 가루에 처리 후 발효하여 곡류 가루에 존재하는 글루텐(gluten)을 분해하는 단계를 포함하는 글루텐 프리(gluten-free) 곡류 가루 발효물의 제조방법을 제공한다.The present invention also provides a method for producing a gluten-free grain flour fermentation product comprising a step of treating the strain or a culture thereof with a cereal flour, followed by fermentation to decompose the gluten present in the cereal flour .

본 발명의 일 구현 예에 따른 방법에서, 상기 곡류는 밀, 호밀, 보리, 귀리, 스펠트(spelt) 및 카무트(kamut)로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the method according to one embodiment of the present invention, the cereal may be at least one selected from the group consisting of wheat, rye, barley, oats, spelled and kamut, but is not limited thereto.

또한, 본 발명은 상기 방법에 의해 제조된 글루텐 프리(gluten-free) 곡류 가루 발효물을 제공한다. 상기 "글루텐 프리 곡류 가루 발효물"은 글루텐이 완전히 제거된 곡류 가루 발효물 외에도 글루텐이 대부분 제거된 곡류 가루 발효물도 포함하는 의미로 해석된다.The present invention also provides a gluten-free cereal meal fermentation product prepared by the above method. The above-mentioned "gluten-free cereal flour fermentation product" is interpreted to mean a cereal flour fermentation product in which gluten is largely removed in addition to the cereal flour fermentation product in which gluten is completely removed.

또한, 본 발명은 상기 글루텐 프리(gluten-free) 곡류 가루 발효물로 제조된 글루텐 프리 가공식품을 제공한다. 상기 글루텐 프리 가공식품으로는 글루텐 프리 곡류 가루 발효물로 제조된 국수, 우동, 과자, 라면, 피자 또는 빵 등일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The present invention also provides a gluten-free processed food made from the gluten-free cereal meal fermentation product. The gluten free processed food may be, but not limited to, noodles, noodles, cookies, ramen noodles, pizza or bread made from a fermented product of gluten-free cereal flour.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to examples. However, the following examples are illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following examples.

실시예Example 1. 글루텐 분해 유산균의 확보 1. Provision of gluten-decomposing lactic acid bacteria

각종 발효식품으로부터 글루텐 분해능을 갖는 유산균을 분리하기 위하여 각종 젓갈을 무균적으로 잘게 다진 다음, 이 중 1g을 취하여 멸균 생리식염수(0.85% NaCl) 9 ㎖에 현탁하고 단계적으로 희석하여 글루텐 1%가 함유된 MRS 고체 배지에 각각 도말하였다. 30℃에서 48시간 배양한 후 나타난 콜로니(colony) 주변에 글루텐을 분해하면서 발생되는 환(Clear zone)을 형성하는 미생물만을 분리하였다. 이어 상기 젓갈로부터 순수 분리한 미생물을 MRS 고체배지에 도말하여 30℃에서 배양하였으며, 이때 형성된 집락을 20% 글리세롤 용액에 현탁시킨 후 -80℃ 냉동고에 보관하면서 하기 글루텐 분해 유산균의 탐색에 사용하였다.To separate the lactic acid bacteria having the ability to degrade gluten from various fermented foods, various kinds of fermented fish meal were aseptically minced, and 1 g of the fermented foods was suspended in 9 ml of sterilized physiological saline (0.85% NaCl) and gradually diluted to obtain 1% Lt; RTI ID = 0.0 > MRS < / RTI > After culturing at 30 ° C for 48 hours, only microorganisms forming a clear zone formed by decomposing gluten around the colonies were isolated. Then, the microorganisms isolated from the fermented fish meal were plated on a MRS solid medium and cultured at 30 ° C. The colonies formed were suspended in a 20% glycerol solution and stored in a -80 ° C freezer to be used for searching for the following gluten-digesting lactic acid bacteria.

실시예Example 2. 발효식품으로부터 분리한 유산균의 분류학적 성질 및 유전학적 동정 2. Taxonomic properties and genetic identification of lactic acid bacteria isolated from fermented foods

분리 유산균은 엠알에스 액체배지(MRS broth)에서 24시간 배양한 배양액이나 엠알에스 고체배지(MRS 아가)의 단일 콜로니를 CHL 배지에 접종하였다. API 50 CHL 스트립은 건조된 기질을 함유하고 있는 50개의 튜브로 되어 있다. 각 캡슐에 시험균을 접종하고 37℃에서 48시간 배양한 후, 색의 변화를 체크하였다. 50개 탄수화물이 유일한 탄소원으로 들어있는 키트의 캡슐에 배양한 후 시험균이 당을 이용할 수 있는지 여부를 색의 변화로 판정할 수 있다. 보라색의 배지는 각각의 당을 이용하면서 노란색으로 변하게 되며, 이를 양성(+)으로 표시하였다. 결과 값은 API 웹사이트에 있는 웹 소프트웨어에서 확인하여 하기 표 1에 나타내었다.The isolated lactic acid bacteria were inoculated into the CHL medium with a culture medium obtained by culturing in an MRS broth for 24 hours or a single colony of an MMSE solid medium (MRS agar). The API 50 CHL strip consists of 50 tubes containing a dried substrate. Each capsule was inoculated with the test organism and cultured at 37 DEG C for 48 hours, and the color change was checked. After 50 carbohydrates are incubated in a capsule of a kit containing the only carbon source, a change in color can be used to determine if the test bacteria can utilize the sugar. The medium of purple was changed to yellow by using each sugar and it was marked as positive (+). The results are shown in Table 1 below, confirmed by the web software on the API web site.

API 50 CHLAPI 50 CHL ControlControl -- EsculinEsculin ++ GlycerolGlycerol -- salicinsalicin ++ ErythritolErythritol -- D-cellobioseD-cellobiose ++ D-ArabinoseD-Arabinose -- D-maltoseD-maltose ++ L-ArabinoseL-Arabinose -- D-lactoseD-lactose ++ RiboseRibose ++ D-melibioseD-melibiose -- D-xyloseD-xylose -- D-sacharoseD-sacharose ++ L-xyloseL-xylose -- D-trehaloseD-trehalose ++ AdonitolAdonitol -- InulinInulin ++ Methyl-B-D-XylopyranosideMethyl-B-D-Xylopyranoside -- D-melezitoseD-melezitose -- D-galactoseD-galactose ++ D-raffinoseD-raffinose -- D-glucoseD-glucose ++ AmidonAmidon -- D-fructoseD-fructose ++ GlycogeneGlycogene -- D-mannoseD-mannose ++ XylitolXylitol -- L-sorboseL-sorbose -- GentiobioseGentiobiose ++ L-rhamnoseL-rhamnose -- D-turanoseD-turanose -- DulcitolDulcitol -- D-LyxoseD-Lyxose -- InositolInositol -- D-TagatoseD-Tagatose ++ D-mannitolD-mannitol ++ D-FucoseD-Fucose -- D-sorbitolD-sorbitol -- L-FucoseL-Fucose -- Methyl-a,D-MannopyranosideMethyl-a, D-Mannopyranoside -- D-ArabitolD-arabitol -- Methyl-a,D-GlucopyranosideMethyl-a, D-Glucopyranoside -- L-ArabitolL-Arabitol -- N-Acetyl-GlucosamineN-Acetyl-Glucosamine ++ GluconateGluconate -- AmygdalineAmygdaline -- 2-Keto-Gluconate2-Keto-Gluconate -- ArbutinArbutin ++ 5-Keto-Gluconate5-Keto-Gluconate -- 동정결과: Identification result: Lactobacillus Lactobacillus paracaseiparacasei (99.8%)  (99.8%) API 50 CHL kit 동정, + : 양성, - : 음성API 50 CHL kit identification, +: positive, -: negative

또한, 분리 균주의 유전학적 동정을 위해서 엠알에스 액체배지에 접종한 다음 37℃에서 18시간 2차 계대 배양하여 배양액 2mL을 4,000 rpm에서 10분 동안 원심분리하였다. 원심분리하여 얻은 세포 침전물을 0.85% NaCl로 3회 세척하였다. 세척 후, 리소자임(lysozyme, 10 mg/mL) 0.5 mL을 첨가하여 37℃, 1시간 동안 처리하였다. 단백질 분해효소인 프로테아제 K(Protease K) 20㎕와 10% 소듐 도데실 설페이트(sodium dodecyl sulfate, SDS) 25㎕를 첨가한 후, 60 워터배스(water bath)에서 30분 처리한 후 RNA 분해효소인 알엔에즈(RNase) 1㎕ 첨가하여 37℃, 1시간 처리하였다. 동량의 페놀(Phenol)-클로로포름(Chloroform)-이소아밀 알콜(Isoamyl alcohol)을 25:24:1의 비율로 첨가하여 현탁한 후, 14,000 rpm으로 5분 동안 4℃에서 원심분리하여 상층액만 취한 다음, 이와 같은 과정을 2회 반복하였다. 상층액 양의 1/2 양의 3M 암모늄 아세테이트(ammonium acetate, pH 4.8)와 2배 양의 100% 알콜(alcohol)을 첨가하고 -20℃에서 1시간 정치하였다. 3,000 rpm으로 5분 동안 4℃에서 원심분리 하여 세포 침전물을 확인하고, 상등액을 완전히 제거한 후에 70% 에탄올(ethanol) 1 mL을 넣고 다시 3,000 rpm으로 5분 동안 4℃에서 원심분리 하였다. 상층액 제거 후에 건조시키고 TE 버퍼나 증류수로 현탁하여 DNA를 분리하였다. 미생물의 16S rRNA를 증폭하기 위해 정방향 프라이머(27f) : (5'- AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG -3' ; 서열번호 2)와 역방향 프라이머(1492r) : (5'- GGT TAC CTT TGT TAC GAC TT -3' ; 서열번호 3)를 사용하였다. PCR 프리믹스 (Bioneer, Cat No. K-2012)에 증류수 17㎕, 정방향 프라이머 1㎕, 역방향 프라이머 1㎕, DNA 1㎕를 첨가하여 혼합한 후 PCR을 수행하였다. PCR 조건은 94℃에서 5분간 처리 후, 94℃에서 1분, 62℃에서 40초, 72℃에서 40초로 30회를 반복하였으며, 72℃에서 7분으로 반응을 종료하였다. PCR 반응 산물을 0.8% 아가로스 겔(agarose gel)로 전기영동을 실시하여 확인하였다. 최종 염기서열(서열번호 1)을 분석하고 이를 데이터베이스와 비교하여 유산균주를 동정한 결과, 본 발명에 의해 분리된 균주는 락토바실러스 파라카제이로 나타났으며, 상기 유산균주는 한국생명공학연구원 생물자원센터에 2017년 12월 06일자로 기탁하였다(기탁번호 KCTC 13415BP).In order to identify the isolates, 2 ml of the culture broth was centrifuged at 4,000 rpm for 10 minutes. The cell suspension obtained by centrifugation was washed three times with 0.85% NaCl. After washing, 0.5 mL of lysozyme (10 mg / mL) was added and treated at 37 ° C for 1 hour. 20 μl of protease K (protease K) and 25 μl of 10% sodium dodecyl sulfate (SDS) were added thereto, followed by treatment in a 60-water bath for 30 minutes. 1 占 퐇 of RNase was added and treated at 37 占 폚 for 1 hour. The same amount of phenol-chloroform-isoamyl alcohol was added at a ratio of 25: 24: 1, and the suspension was centrifuged at 14,000 rpm for 5 minutes at 4 ° C to remove supernatant Then, this process was repeated twice. The supernatant was added with 1/2 volume of 3M ammonium acetate (pH 4.8) and twice the amount of 100% alcohol, and the mixture was allowed to stand at -20 ° C for 1 hour. After centrifugation at 3,000 rpm for 5 minutes at 4 ° C, cell suspensions were identified. After the supernatant was completely removed, 1 ml of 70% ethanol was added and centrifuged at 3,000 rpm for 5 minutes at 4 ° C. After removing the supernatant, it was dried and suspended in TE buffer or distilled water to isolate DNA. (5'-AGT GTT TGA TCM TGG CTC AG-3 '; SEQ ID NO: 2) and the reverse primer (1492 r): (5'-GGT TAC CTT TGT TAC GAC TT -3 '; SEQ ID NO: 3) was used. To the PCR premix (Bioneer, Cat No. K-2012), 17 μl of distilled water, 1 μl of the forward primer, 1 μl of the reverse primer and 1 μl of DNA were added and mixed. The PCR conditions were 94 ° C for 5 minutes, followed by 30 cycles of 94 ° C for 1 minute, 62 ° C for 40 seconds, and 72 ° C for 40 seconds, and the reaction was terminated at 72 ° C for 7 minutes. The PCR reaction product was confirmed by electrophoresis on 0.8% agarose gel. The final base sequence (SEQ ID NO: 1) was analyzed and the lactic acid bacteria were identified by comparison with the database. As a result, the strain isolated by the present invention was found to be Lactobacillus paracase, On Dec. 06, 2017 (Accession No. KCTC 13415BP).

실시예Example 3.  3. 락토바실러스Lactobacillus 파라카제이Paracase 유산균의 글루텐 분해능 Gluten Resolution of Lactic Acid Bacteria

글루텐 함유 엠알에스 배지에서 락토바실러스 파라카제이 유산균을 2일 동안 배양한 후, 글루텐 양을 측정하는 분석 키트(gluten assay kit, Neogen)을 이용하여 글루텐 분해능을 분석하였다. 락토바실러스 파라카제이 유산균은 배양 시간 동안 시간별로 샘플을 채취하였으며, 각각의 배양액은 증류수로 희석하여 섞어주고 글루텐 함유 마이크로웰 플레이트(microwell plate)에 100 ㎕ 분주하였다. 마이크로웰은 진탕기에서 60분 배양한 후, 마이크로웰 내 액체는 버리고 증류수로 세 번 세척하였다. 그리고 항-글리아딘 퍼록시다제 콘주게이트(단클론 항체)를 100 ㎕ 분주하고 30분 동안 플레이트 쉐이커에서 배양하였다. 세척액을 이용해 세 번 세척한 후, TMB 기질 100 ㎕를 분주하고 평편한 바닥에서 스트립을 충분히 섞어주었다. 상온에서 30분 배양한 후, 정지액(stop solution) 50 ㎕를 분주하고 충분히 섞어준 후, 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 도 2에 나타낸 바와 같이 락토바실러스 파라카제이 GLU70 균주를 접종하여 2일간 배양한 결과, 배양 내 존재하는 글루텐이 분해되어 맑은 액으로 변화됨을 확인할 수 있었다. 또한, 도 3에 나타낸 바와 같이 배양액 내 존재하는 글루텐의 함량을 정량 분석한 결과, 배양 2일 후에는 완전히 글루텐이 분해됨을 확인하였다.Lactobacillus paracasei lactic acid bacteria were cultured in glutamine-containing MS medium for 2 days and gluten assay kit (Neogen) was used to analyze the gluten degradation ability. Lactobacillus paracasei lactic acid bacteria were sampled at different times during the incubation time. Each culture was diluted with distilled water and mixed, and 100 μl was added to a gluten-containing microwell plate. The microwells were incubated in a shaker for 60 minutes, then the liquid in the microwells was discarded and washed three times with distilled water. 100 [mu] l of anti-gliadin peroxidase conjugate (monoclonal antibody) was added and cultured in a plate shaker for 30 minutes. After washing three times with a washing solution, 100 μl of TMB substrate was dispensed and the strips were thoroughly mixed on a flat bottom. After incubation at room temperature for 30 minutes, 50 μl of stop solution was dispensed and mixed well, and the absorbance was measured at 450 nm. As shown in Fig. 2, when Lactobacillus paracase strain GLU70 was inoculated and cultured for 2 days, it was confirmed that the gluten present in the culture was decomposed and changed into a clear liquid. Further, as shown in Fig. 3, the content of gluten present in the culture solution was quantitatively analyzed. As a result, it was confirmed that gluten was completely decomposed after 2 days of culture.

실시예Example 4.  4. 락토바실러스Lactobacillus 파라카제이의Paracay 밀가루 글루텐 분해능 Flour Gluten Resolution

락토바실러스 파라카제이를 발효면 생산을 위한 목적으로 밀가루 내 글루텐 분해력을 평가하였다. 실험방법은 중력분 밀가루 1 kg에 물 500 g을 넣고 반죽함과 동시에 글루텐 발효 유산균을 첨가하여 반죽하였다. Lactobacillus paracase was evaluated for the degradability of gluten in wheat flour for the purpose of producing fermented cotton. In the experimental method, 500 g of water was added to 1 kg of gravity flour and kneaded by adding gluten fermented lactic acid bacteria at the same time as kneading.

이때, 밀가루 반죽에 글루텐 발효 유산균을 0.15 g(0.015%)를 첨가한 군을 시험군 5, 0.3 g(0.03%)를 첨가한 군을 시험군 2, 0.6 g(0.06%)를 첨가한 군을 시험군 1, 1.5 g(0.15%) 첨가한 군을 시험군 0.5로 기록하였다. 밀가루를 반죽한 후, 30℃에서 숙성과정을 거쳐 글루텐 분해력을 평가하였다. 시험분석은 글루텐 함량 평가가 가능한 시험기관((주)씨티케이)에서 평가하였다. 글루텐 함량 평가방법은 농촌진흥청 국립식량과학원의 식품단백질의 분리(밀가루로부터 글루텐의 분리) 방법을 이용하여 분석하였다. 글루텐 발효 유산균(시제품)을 적용한 발효 우동면의 글루텐 분해력 평가 결과는 대조군이 8.95%의 글루텐 함량을 보였다. 이러한 수치는 중력분은 약 10±2%의 글루텐 함량을 보이는데 중력분의 글루텐 함량을 보였다. 시험군 5는 대조군(100%) 대비 16.1%의 글루텐 분해를 보여 약 83.9%의 글루텐 함량을 보였으며 시험군 2는 16.7%의 글루텐 분해를 보여 약 83.3%의 글루텐 함량을 보였다. 시험군 1은 28.8%의 글루텐 분해로 약 71.2%의 글루텐 함량을 보였으며, 시험군 0.5는 가장 많은 47.7%의 글루텐 분해를 보여 52.3%의 글루텐이 함유된 것을 확인하였다. 따라서 시험군 5, 2, 1, 0.5는 글루텐 분해 유산균(시제품)의 배합 농도에 따라 글루텐 분해율이 증가함을 보였다(표 2). 본 연구결과는 공인분석기관에서 글루텐 시험 결과서와 같다.In this experiment, 0.15 g (0.015%) of glutinous fermented lactic acid bacterium was added to the flour dough, and the test group was added with 0.6 g (0.06%) of test group 2 and 0.3 g (0.03% The test group 1, 1.5 g (0.15%) added groups were recorded in the test group 0.5. After kneading the flour, the gluten degrading ability was evaluated by aging at 30 캜. The test analysis was evaluated by a test institute (Citikake Inc.) capable of evaluating the gluten content. The gluten content was analyzed using the method of separation of food protein (separation of gluten from flour) of National Institute of Food Science and Technology (RDA). The gluten breakdown of the fermented noodles with the gluten fermented lactic acid bacterium (prototype) showed 8.95% gluten content in the control group. These figures show that the gravity content is about 10 ± 2% gluten content, indicating the gravity content of gluten. Test group 5 showed a gluten content of about 83.9% with 16.1% of gluten breakdown compared to the control group (100%), and test group 2 had a gluten breakdown of 16.7% with a gluten content of about 83.3%. Test group 1 showed a gluten content of about 71.2% due to 28.8% of gluten breakdown, and the test group 0.5 showed the most gluten breakdown of 47.7%, indicating that it contained 52.3% of gluten. Therefore, test groups 5, 2, 1, and 0.5 showed an increase in gluten breakdown depending on the concentration of gluten-degrading lactic acid bacteria (prototype) (Table 2). The results of this study are the same as those of the gluten test results in a certified analytical laboratory.

글루텐 발효 유산균 적용 우동면의 글루텐 분해율 평가Evaluation of Gluten Degradation Rate of Udon Cotton Using Lactic Acid Fermented with Gluten 시험군Test group 글루텐 함량 (Gluten content ( %% ) ) 대조군 대비 글루텐 함량 (Gluten content versus control ( %% )) 글루텐 분해력 (Gluten degradability ( %% )) 대조군Control group 8.95 8.95 100% 함유, 기준100%, standard -- 시험군 5Test group 5 7.517.51 대조군 대비 83.9% 함유Containing 83.9% of the control group 16.1%16.1% 시험군 2Test group 2 7.467.46 대조군 대비 83.3% 함유Containing 83.3% of the control group 16.7%16.7% 시험군 1Test group 1 6.386.38 대조군 대비 71.2% 함유71.2% of the control group 28.8%28.8% 시험군 0.5Test group 0.5 4.68 4.68 대조군 대비 52.3% 함유Compared with the control group, 52.3% 47.7%47.7%

실시예Example 5. 글루텐 발효 유산균을 이용한 발효  5. Fermentation using lactobacillus fermented with gluten 우동면Udon noodle 시제품 제조 Manufacture of prototype

우동면의 제조를 위해 표 3과 같이 각 종류의 재료를 배합량에 따라 전자저울(ARC120, OHAUS, USA)을 사용하여 칭량하여 첨가하였다. 우동면 제조에 사용된 배합비는 자사 냉동면의 배합비와 동일하게 적용하였다. 모든 분말 재료를 반죽기에 넣고 기타원료 들을 첨가하여 고르게 혼합한 뒤 유산균 발효액을 조금씩 투입하면서 실온에서 10분간 믹싱하여 작은 덩어리로 만들었다. 작은 덩어리를 비닐 포장 하여 배양기(BI-P-250, LabHouse, 한국)에 넣어 35℃에서 24시간 숙성하였다. 이것 30 g을 다시 투명 비닐백에 넣고 용기에 담은 물에 전분을 흘려보낸 후 걸러진 글루텐 함량을 측정하였다. 또한, 숙성된 반죽을 두께 3㎜가 되도록 압연기를 이용해 면을 제조하였다. For the production of the udon surface, each kind of material was weighed and added by using an electronic balance (ARC120, OHAUS, USA) according to the blending amount as shown in Table 3. The blending ratio used in the manufacture of udon cotton was the same as that of the freezing surface. All of the powder materials were put into a kneader, and other ingredients were added thereto. The mixture was mixed evenly and mixed at room temperature for 10 minutes to prepare a small lump. Small chunks were packed in plastic and incubated at 35 ° C for 24 hours in an incubator (BI-P-250, LabHouse, Korea). 30 g of this was put into a transparent plastic bag, and starch was poured into the water contained in the container, and the content of the filtered gluten was measured. In addition, a surface was prepared using a rolling mill so that the aged dough had a thickness of 3 mm.

발효면 제조용 원료의 배합비Mixing ratio of ingredients for fermentation 원료명Raw material name 배합량 (kg)Formulation (kg) 배합비 (Compounding ratio ( %% )) 소맥분Wheat flour 162.800 162.800 57.81 57.81 변성전분Modified starch 80.000 80,000 28.41 28.41 감자전분Potato starch 26.600 26.600 9.45 9.45 폴리글리시톨Polyglycitol 1.580 1.580 0.56 0.56 알긴산프로필렌글리콜Propylene glycol alginate 0.028 0.028 0.01 0.01 치자황색소Gardenia yellow 0.028 0.028 0.01 0.01 미림Mirin 1.370 1.370 0.49 0.49 트랜스글루타미나아제 (Trans glutaminase)Transglutaminase (Trans glutaminase) 1.400 1.400 0.50 0.50 정제염Purified salt 6.000 6.000 2.13 2.13 유산균Lactobacillus 3 g(1.5 x 109 CFU/g)3 g (1.5 x 10 9 CFU / g) --

상기의 배합비로 제조한 후 발효면의 제조 과정은 도 4에 나타낸 바와 같은 공정으로 제조하였다.After the fermented product was prepared at the above mixing ratio, the fermented product was produced by the process shown in FIG.

실시예Example 6. 본 발명의  6. The 락토바실러스Lactobacillus 파라카제이Paracase (( Lactobacillus Lactobacillus paracaseiparacasei ) GLU70 균주와 다른 ) Different from GLU70 strains 락토바실러스Lactobacillus 속을 포함한 균주들과의 글루텐 분해능 비교 Comparison of gluten degradation with strains including genus

유산균 적용 밀가루 글루텐 분해능 우수성 평가를 목적으로 밀가루 내 글루텐 분해력을 평가하였다. 실험방법은 중력분 밀가루 500g에 동일 양의 유산균 수로 맞추어진 유산균을 배양한 배양액의 상등액을 배합수로 하여 반죽을 제조한 후 25℃와 35℃에서 24시간 숙성하였다. 동일양의 숙성된 반죽을 필터백에 담아 전분과 글루텐을 분리하여 얻어진 습부 글루텐을 75℃에서 건조하여 건부 글루텐을 얻어 유산균 간의 글루텐 분해율을 확인하였다. Glucose degradability in wheat flour was evaluated for the purpose of evaluating wheat gluten degradability. As a test method, dough was prepared with the supernatant of the culture solution in which 500 g of gravitational flour was mixed with the same amount of lactic acid bacteria and cultured for 24 hours at 25 ° C and 35 ° C. The same amount of aged dough was put into a filter bag to separate starch and gluten, and the obtained wet gluten was dried at 75 캜 to obtain dry gluten, and the degree of gluten degradation among lactic acid bacteria was confirmed.

유산균 간의 글루텐 분해력 평가 결과는 숙성 온도별 락토바실러스 파라카제이 GLU70의 분해율은 각각 55.68%와 85.41%로 다른 타입 스트레인의 유산균 중 가장 높은 글루텐 분해능을 가진 것을 확인하였다. 게다가 동속의 락토바실러스와 비교시에도 월등히 뛰어난 글루텐 분해능을 보였다(표 4). The results of the evaluation of the degradability of glutinase among lactic acid bacteria showed that the degradation rates of Lactobacillus paracasei GLU70 were 55.68% and 85.41%, respectively, at different aging temperatures. In addition, compared to Lactobacillus in dentin, it exhibited remarkably superior gluten resolution (Table 4).

유산균 첨가에 따른 글루텐 분해율Gluten breakdown by addition of lactic acid bacteria 배양온도Incubation temperature SampleSample 건부글루텐(g) Dried gluten (g) 분해율(%)Decomposition rate (%) 25℃ 25 ℃ 대조구Control 1.851.85 0.00 0.00 L. paracasei GLU70 L. paracasei GLU70 0.820.82 55.68 55.68 L. acidopillus KCTC3145 L. acidopillus KCTC3145 1.181.18 36.22 36.22 L. casei KCTC 3109 L. casei KCTC 3109 1.171.17 36.7636.76 L. paracasei KCTC 3510 L. paracasei KCTC 3510 0.950.95 48.6448.64 L. delbrueckii spp bulgaricu KCTC3635 L. delbrueckii spp bulgaricu KCTC3635 1.361.36 26.4926.49 L. helveticus KCTC 3545 L. helveticus KCTC 3545 1.471.47 20.5420.54 L. fermentum KCTC 3112 L. fermentum KCTC 3112 1.281.28 30.8130.81 L. plantarum KCTC 3108 L. plantarum KCTC 3108 1.081.08 41.6241.62 L. rhamnosus KCTC 13088 L. rhamnosus KCTC 13088 0.990.99 46.4946.49 Lc . lactis KCTC 3769 Lc . lactis KCTC 3769 1.541.54 16.7616.76 S. thermophilus KCTC 3658 S. thermophilus KCTC 3658 1.041.04 43.7843.78 B. animalis ssp . lactis KCTC 5854 B. animalis ssp . lactis KCTC 5854 1.111.11 40.040.0 35℃ 35 ℃ 대조구Control 1.851.85 0.00 0.00 L. paracasei GLU70 L. paracasei GLU70 0.270.27 85.41 85.41 L. acidopillus KCTC3145 L. acidopillus KCTC3145 0.970.97 47.57 47.57 L. casei KCTC 3109 L. casei KCTC 3109 0.680.68 63.2463.24 L. paracasei KCTC 3510 L. paracasei KCTC 3510 0.470.47 74.5974.59 L. delbrueckii spp bulgaricu KCTC3635 L. delbrueckii spp bulgaricu KCTC3635 0.680.68 63.2463.24 L. helveticus KCTC 3545 L. helveticus KCTC 3545 0.870.87 52.9752.97 L. fermentum KCTC 3112 L. fermentum KCTC 3112 0.750.75 59.4559.45 L. plantarum KCTC 3108 L. plantarum KCTC 3108 0.660.66 64.3264.32 L. rhamnosus KCTC 13088 L. rhamnosus KCTC 13088 0.420.42 77.2977.29 Lc . lactis KCTC 3769 Lc . lactis KCTC 3769 0.650.65 64.8664.86 S. thermophilus KCTC 3658 S. thermophilus KCTC 3658 0.470.47 74.5974.59 B. animalis ssp . lactis KCTC 5854 B. animalis ssp . lactis KCTC 5854 0.870.87 52.9752.97

한국생명공학연구원Korea Biotechnology Research Institute KCTC13415BPKCTC13415BP 2017120620171206

<110> MEDINUTROL CO., Ltd. <120> Lactobacillus paracasei GLU70 strain having gluten degradation activity and uses thereof <130> PN17552 <160> 3 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 840 <212> DNA <213> Lactobacillus paracasei <400> 1 gatgaacgct ggcggcgtgc ctaatacatg caagtcgaac gagttctcgt tgatgatcgg 60 tgcttgcacc gagattcaac atggaacgag tggcggacgg gtgagtaaca cgtgggtaac 120 ctgcccttaa gtgggggata acatttggaa acagatgcta ataccgcata gatccaagaa 180 ccgcatggtt cttggctgaa agatggcgta agctatcgct tttggatgga cccgcggcgt 240 attagctagt tggtgaggta atggctcacc aaggcgatga tacgtagccg aactgagagg 300 ttgatcggcc acattgggac tgagacacgg cccaaactcc tacgggaggc agcagtaggg 360 aatcttccac aatggacgca agtctgatgg agcaacgccg cgtgagtgaa gaaggctttc 420 gggtcgtaaa actctgttgt tggagaagaa tggtcggcag agtaactgtt gtcggcgtga 480 cggtatccaa ccagaaagcc acggctaact acgtgccagc agccgcggta atacgtaggt 540 ggcaagcgtt atccggattt attgggcgta aagcgagcgc aggcggtttt ttaagtctga 600 tgtgaaagcc ctcggcttaa ccgaggaagc gcatcggaaa ctgggaaact tgagtgcaga 660 agaggacagt ggaactccat gtgtagcggt gaaatgcgta gatatatgga agaacaccag 720 tggcgaaggc ggctgtctgg tctgtaactg acgctgaggc tcgaaagcat gggtagcgaa 780 caggattaga taccctggta gtccatgccg taaacgatga atgctaggtg ttggagggtt 840 840 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 2 agagtttgat cmtggctcag 20 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 3 ggttaccttt gttacgactt 20 <110> MEDINUTROL CO., Ltd. <120> Lactobacillus paracasei GLU70 strain having gluten degradation          activity and uses thereof <130> PN17552 <160> 3 <170> Kopatentin 2.0 <210> 1 <211> 840 <212> DNA <213> Lactobacillus paracasei <400> 1 gatgaacgct ggcggcgtgc ctaatacatg caagtcgaac gagttctcgt tgatgatcgg 60 tgcttgcacc gagattcaac atggaacgag tggcggacgg gtgagtaaca cgtgggtaac 120 ctgcccttaa gtgggggata acatttggaa acagatgcta ataccgcata gatccaagaa 180 ccgcatggtt cttggctgaa agatggcgta agctatcgct tttggatgga cccgcggcgt 240 attagctagt tggtgaggta atggctcacc aaggcgatga tacgtagccg aactgagagg 300 ttgatcggcc acattgggac tgagacacgg cccaaactcc tacgggaggc agcagtaggg 360 aatcttccac aatggacgca agtctgatgg agcaacgccg cgtgagtgaa gaaggctttc 420 gggtcgtaaa actctgttgt tggagaagaa tggtcggcag agtaactgtt gtcggcgtga 480 cggtatccaa ccagaaagcc acggctaact acgtgccagc agccgcggta atacgtaggt 540 ggcaagcgtt atccggattt attgggcgta aagcgagcgc aggcggtttt ttaagtctga 600 tgtgaaagcc ctcggcttaa ccgaggaagc gcatcggaaa ctgggaaact tgagtgcaga 660 agaggacagt ggaactccat gtgtagcggt gaaatgcgta gatatatgga agaacaccag 720 tggcgaaggc ggctgtctgg tctgtaactg acgctgaggc tcgaaagcat gggtagcgaa 780 caggattaga taccctggta gtccatgccg taaacgatga atgctaggtg ttggagggtt 840                                                                          840 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 2 agagtttgat cmtggctcag 20 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 3 ggttaccttt gttacgactt 20

Claims (7)

글루텐(gluten) 분해능을 가지는 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei) GLU70 균주(KCTC 13415BP). Lactobacillus paracasei GLU70 strain (KCTC 13415BP) with gluten degradability. 제1항의 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 글루텐(gluten) 분해용 미생물제제.A microorganism preparation for degrading gluten comprising the strain of claim 1 or a culture thereof as an active ingredient. 제1항의 균주를 배양하는 단계를 포함하는 글루텐(gluten) 분해용 미생물제제의 제조 방법.A method for producing a microorganism preparation for degrading gluten, which comprises culturing the strain of claim 1. 제1항의 균주 또는 이의 배양액을 곡류 가루에 처리 후 발효하여 곡류 가루에 존재하는 글루텐(gluten)을 분해하는 단계를 포함하는 글루텐 프리(gluten-free) 곡류 가루 발효물의 제조방법.A process for producing a gluten-free cereal meal fermented product comprising the step of fermenting the strain of claim 1 or a culture thereof to a cereal flour and decomposing gluten present in the cereal flour. 제4항에 있어서, 상기 곡류는 밀, 호밀, 보리, 귀리, 스펠트(spelt) 및 카무트(kamut)로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 글루텐 프리(gluten-free) 곡류 가루 발효물의 제조방법.The method of claim 4, wherein the cereal is at least one selected from the group consisting of wheat, rye, barley, oats, spelled and kamut. &Lt; / RTI &gt; 제4항 또는 제5항의 방법에 의해 제조된 글루텐 프리(gluten-free) 곡류 가루 발효물.A gluten-free cereal meal fermentation product prepared by the method of claim 4 or 5. 제6항의 글루텐 프리(gluten-free) 곡류 가루 발효물로 제조된 글루텐 프리 가공식품.A gluten-free processed food made from the gluten-free cereal meal fermented product of claim 6.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR102320816B1 (en) * 2021-02-02 2021-11-03 롯데제과 주식회사 Lacticaseibacillus paracasei Strain LRCC5240 for Reduced Fermentation Odor and Increased Volume of Bread, and Uses thereof
JP2023047348A (en) * 2021-09-24 2023-04-05 ロッテ コンフェクショナリー カンパニー リミテッド Lactiplantibacillus plantarum lrcc 5318 strain that increases physical and chemical digestibility of bread by degrading gluten and application thereof
KR102700400B1 (en) * 2023-11-24 2024-09-02 (주)마이크로바이옴 Lactobacillus paracasei GLU70 strain with gluten-degrading ability with antibacterial activity and probiotic properties and uses thereof

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KR102700400B1 (en) * 2023-11-24 2024-09-02 (주)마이크로바이옴 Lactobacillus paracasei GLU70 strain with gluten-degrading ability with antibacterial activity and probiotic properties and uses thereof

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