KR20190020187A - 구강 점막 전기천공 장치 및 그 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은, 바람직하게는 감내가능한 방식으로, 점막층에서 전기장을 야기하는 전기천공을 발생시킬 수 있는 구강 전기천공(EP) 장치에 관한 것이다. 더욱이, 전기천공 장치는 면역 순서를 인코딩하는 유전자 구조체와 함께 구강 전기천공 장치를 이용하여, 세포성 및/또는 체액성 방어 면역 반응의 발생을 포함한다.

Description

구강 점막 전기천공 장치 및 그 용도 {ORAL MUCOSAL ELECTROPORATION DEVICE AND USE THEREOF}

본 발명은 환자에 대한 치료제의 전달을 가능하게 하는 전기천공 장치에 관한 것이다.

점막 표면에서 감염을 일으켜서, 위장, 비뇨 생식기, 및 기도를 신체에 대한 주 유입 경로로 만드는, 다양한 인체 병원균이 알려져 있다. 그 결과, 감염이 이루어지는 다른 주요 방식은 주사, 수혈, 및 교상과 같은 혈행성 경로를 통한다. 점막-감염제의 예는 감기 바이러스, 인플루엔자, 식중독 작용제, 결핵, 성전염성 질환, 콜레라, 디프테리아, 및 페스트를 포함한다.

점막은 신체의 가장 큰 기관 중 하나다. 집합적으로, 점막은 (테니스 코트 면적의 1.5배와 동등한) 400m²보다 큰 표면적을 커버하고, 위장, 비뇨 생식기, 및 기도의 내벽을 포함한다. 이러한 점막은 신체 내부에 위치하면서, "전신"(systemic) 환경으로 알려진 신체의 무균 내부 공동과 외부 사이의 실제로 물리적인 장벽이다. 주요 양분, 산소, 및 다른 분자들이 이러한 점막 장벽 사이에서 연속적으로 흡수되지만, 점액의 또 다른 중요 기능은 병원균의 침입을 물리치는 것이다. 매일 이러한 점막에 외부 요소들이 충돌하고, 점액의 고유 면역계가, 잠재적으로 해로운 것과 유익한 것을 결정한다.

점막 면역학의 중요성은 점막 반응과 전신 면역 반응 사이의 상호작용에 있다. 여러 연구에서 밝혀진 바에 따르면, 전신적으로 면역계를 자극할 경우(즉, 주사 또는 혈행 경로를 통해), 신체의 무균, 내부 환경 내에서만 방어 항체 및 T 세포를 생성하게 될 것이다 - 어떤 점막 반응도 발생되지 않는다. 다른 한편, 점막 면역 반응의 자극은 점막 환경과 전신 환경 모두에서 방어 B 및 T 세포를 생성하게 하여, 감염이 신체 내로 유입되기 전에 중단된다.

점막은 분비성(secretaory) IgA 또는 sIgA 불리는 특별한 타입의 항체를 생성한다. 점막은 침투성 병원균을 중화시키기 위해 제 1 수비 라인으로 작용하는 다량의 sIgA에 잠긴다. 실험 결과에 따르면, sIgA의 존재는 박테리아, 바이러스, 기생충, 및 균류를 포함하는 다양한 병원균에 의한 감염에 대한 내성에 상관된다. 병원균의 배출을 이끌어내고 성숙한 바이러스 입자들의 결합을 방지하면서, 바이러스를 중화시키고 점액을 피복하는 상피 세포에 대한 접촉을 방지하는(따라서 감염을 방지하는) 것이 또한 알려져 있다.

점막 면역의 다른 중요한 구성요소는 T 세포-도출 면역 반응이다. 병원균을 특별하게 인지하는 T-세포는, 항체로 하여금 감염을 제거시켜버리거나 또는 침입자 자체를 직접적으로 해치우게 도울 수 있다. 점액에서 생성되는 T 세포는 막 상에서 특별한 "귀소" 수용체를 통해 점막 조직을 거쳐갈 수 있다. 이는 면역 반응이 위장 내부에 발생된 경우, 거기서 생성되는 T 세포가 다른 점막 위치, 예를 들어, 폐 또는 비강까지 이어질 수 있어서, 넓은 면적에 대한 방어를 제공한다.

점막 표면의 중요한 역할에도 불구하고, 백신 중 얼마 안되는 백신만이 면역계의 이 영역을 구체적으로 표적으로 하고, 따라서, 점막 조직에서 방어형 면역 반응을 제공하기 위해 점막 표면을 향해 지향되는 백신에 대한 필요성이 존재한다.

포유류의 점막의 세포를 전기천공할 수 있는 전기천공 장치가 제공된다. 이러한 장치는 전극 마이크로니들 플레이트와, 카운터 전극 플레이트와, 메인 하우징과, 에너지 공급원을 포함한다. 메인 하우징은 상기 마이크로니들 플레이트 및 카운터 전극 플레이트와 물리적으로 연통되고, 상기 메인 하우징은 운반을 위해 의약제를 저장할 수 있는 주사기와 유체 연통된다. 에너지 공급원은 마이크로니들 플레이트와 전기적으로 연결되고, 전위를 발생시킬 수 있으며, 이러한 전위를 마이크로니들 플레이트를 통해 세포에 전달할 수 있다.

다른 형태에서, 제공되는 장치를 이용하여 포유류의 점막의 세포에 의약제를 주사하는 방법이 제공된다. 이 방법은 상기 점막에 상기 마이크로니들 플레이트를 접촉시키는 단계와, 상기 의약제를 상기 점막까지 운반하는 단계와, 상기 에너지 공급원에 의해 발생된 전기 펄스를 일으키는 전기천공법을, 마이크로니들 플레이트를 통해 점막에 적용하는 단계를 포함한다.

도 1은 마우스에서 수행될 (표준 주사를 통한) 면역 조치 및 공격 시간표(challenge timeline)를 도시한다.
도 2는 점막 폐 감염의 마우스 모델에서 케모카인 증강제(chemokine adjuvants)가 인플루엔자 APR/8/34-특이적 세포성 면역을 유도함을 보여주는 그래프를 디스플레이한다.
도 3a는 공격전 인플루엔자 A/PR/8/34-특이적 혈청 장수 IgA 및 lgG를 디스플레이하고, 도 3b는 공격전 인플루엔자 A/PR/8/34 중화 항체를 보여주는 그래프를 디스플레이하며, 도 3c는 날짜가 지남에 따라 평균 중량 감소를 보여주는 라인 그래프를 디스플레이하고, 도 3d는 공격후 다양한 생존율을 보여주는 라인 그래프를 디스플레이한다.
도 4는 인도 레서스 원숭이(rhesus macaques) 면역 처치 스케쥴에 관한 시간표 및 추가 정보를 디스플레이한다.
도 5는 DNA 백신의 공지된 근육내(IM)/전기천공법(EP) 운반으로부터 ELI스팟 데이터가 근육내 운반 단독 방식에 비해 우월함을 보여주는 그래프를 디스플레이한다.
도 6은 강한 면역 반응이 발생되었음을 보여주는 그래프 및 이미지를 디스플레이하되, 도 6a는 ELI스팟 데이터를 보여주는 그래프를 디스플레이하고, 도 6b는 T 세포 증식의 레벨을 보여주는 그래프를 디스플레이하며, 도 6c는 R10 또는 SIV 펩타이드 배양 조직으로부터의 플레이트를 보여주고, 도 6d는 CFSE 증식을 제안하는 그래프를 보여준다.
도 7은 CTACK 공동-면역화가 BAL 내 CD4+ T 세포에 의해 사이토카인 분비를 증강시킴을 보여주는 그래프를 디스플레이하되, 도 7a는 주변부의 세포성 반응을 보여주는 그래프를 디스플레이하고, 도 7b는 BAL 내 세포성 반응을 보여주는 그래프를 디스플레이한다.
도 8은 CTACK가, 폐 내에 높은 레벨의 사이토카인을 분비하는 CD8+ T 세포를 유도함을 보여주는 그래프를 디스플레이하되, 도 8a는 107a+ CD8+ 레벨을 보여주는 그래프를 디스플레이하고, 도 8b는 IFN-감마 CD+ 레벨을 보여주는 그래프를 디스플레이하며, 도 8c는 TNF+ CD8+ 레벨을 보여주는 그래프를 디스플레이하고, 도 8d는 IL-2+ CD8+ 레벨을 보여주는 그래프를 디스플레이한다.
도 9는 형광을 이용한 양성 GFP 발현을 보여주는 사진을 디스플레이한다.
도 10은 4x4 어레이(미국, Pennsylvania, Blue Bell 소재, Inovio Pharmaceuticals, Inc.)를 디스플레이한다.
도 11은 SynCon^TM 인플루엔자 백신으로 면역 처리된 원숭이로부터의 혈청의 HAI 역가 레벨을 보여주는 그래프를 디스플레이한다. 도시되는 결과는 두번째 면역처리로부터 2주 후다. 도 11a는 A/H1N1/멕시코/2009 스트레인에 대한 HAI 역가이고, 도 11b는 A/H1N1/뉴칼레도니아에 대한 HAI 역가다.
도 12a는 GFP 플라스미드의 얕은 주사 및 전기천공에 이어 기니피그 구강 점막 조직에서 GFP 발현을 보여주는 사진을 디스플레이한다. 전체 뺨 슬라이드(mounts)를 3일 후 수거하고, 양성 GFP 발현 결정을 위해 형광 현미경 하에서 보았다.
도 12b는 기니피그의 3회의 면역 처치 후 H5-특이적 IgA 역가를 보여주는 그래프를 디스플레이한다.
도 13은 펄스 발생기, 주사, 및 전기천공 장치를 포함하는 구강 전기천공/주사 장치의 3/4 도면이다.
도 14는 구강 전기천공/주사 장치의 수직 단면 A-A을 보여주는 도면이다.
도 15는 전기천공/주사 장치의 전개 조립도다.
도 16은 전기천공/주사 장치의 주전극 마이크로-니들 플레이트다.
도 17은 개구강에 관련된 OM-I/EP 장치를 보여준다.
도 18은 a) 타액, b) 배설물, c) 혈액 내 IgA 역가(titers)를 보여주는 그래프를 디스플레이한다.

포유류의 점막의 세포를 전기천공할 수 있는 전기천공 장치가 제공된다. 이러한 장치는 전극 마이크로니들 플레이트와, 카운터 전극 플레이트와, 메인 하우징과, 에너지 공급원을 포함한다. 메인 하우징은 상기 마이크로니들 플레이트 및 카운터 전극 플레이트와 물리적으로 연통되고, 상기 메인 하우징은 운반을 위해 의약제를 저장할 수 있는 주사기와 유체 연통된다. 에너지 공급원은 마이크로니들 플레이트와 전기적으로 연결되고, 전위를 발생시킬 수 있으며, 이러한 전위를 마이크로니들 플레이트를 통해 세포에 전달할 수 있다. 일 실시예에서, 상기 메인 하우징과 상기 마이크로니들 플레이트 사이에 물리적으로 연통하는 피스톤이 또한 존재한다. 피스톤은 작동가능하고, 작동에 의해, 마이크로니들 밸브를 통해 의약제의 균등한 분포를 야기할 수 있다.

발명의 일 형태에서, 바람직하게는 감내가능한 방식으로, 점막층에서 전기장을 야기하는 전기천공을 발생시킬 수 있는 구강 전기천공(EP) 장치가 제공된다. 본 형태의 일 실시예에서, DNA 백신과 같은 치료제(또는 예방제)의 운반과, 구강 내부 상의 점막 조직/세포 내로 트랜스펙션을 수행하는 데 적합한 구강 점막 주사 및 전기천공 장치(OM-I/EP: Oral Mucosal Injection and Electroporation Device)가 존재한다. DNA 백신 접종 과정 중, 장치는 환자의 뺨 영역에 걸쳐 고정될 것이다. 주 전극 마이크로니들 플레이트를 갖는 본체는 구강 내부 상에, 그리고, 카운터 전극 플레이트는 뺨 외부 상에 인접하여 조인다. DNA 백신은 마이크로니들 플레이트를 통해 주사될 것이고, 그 후, 동일 전극의 마이크로니들 플레이트에 저-전압 EP 펄스가 인가되며, 이러한 설계는 DNA 백신 및 전기천공을 동일 영역에 함께 배치한다. 연구 결과에 따르면, DNA 백신과 전기천공의 동-위치 배치는 주변 세포 내로 DNA 백신의 트랜스펙션되는 양에 있어서 매우 중요하다.

일부 실시예에서, 마이크로니들 플레이트의 마이크로니들은 금 및 은으로 도금된 황동, 금 및 은으로 도금된 구리, 스테인레스강, 또는, 티타늄, 또는, 다른 공공연히 알려진 전도성 금속 또는 금속성 물질을 포함하는 전기 전도성 물질로 제조된다. 일부 실시예에서, 에너지 공급원은 1V 내지 30V 사이, 2mA 내지 100mA 사이, 또는 1msec 내지 250msec 사이의 특성을 갖는 전기 에너지의 적어도 하나의 펄스를 마이크로니들 플레이트를 통해 점막의 피부에 전달할 수 있다. 점막 또는 점막 조직은 구강, 비강, 식도, 직장, 질, 음문, 장, 창자, 위, 방광, 요로, 또는, 눈 조직, 그리고, 바람직하게는 구강 조직, 예를 들어, 입의 내측 표면일 수 있다.

다른 형태에서, 제공되는 장치를 이용하여 포유류의 점막의 세포에 의약제를 주사하는 방법이 제공된다. 이 방법은 상기 점막에 상기 마이크로니들 플레이트를 접촉시키는 단계와, 상기 점막에 상기 의약제를 운반하는 단계와, 상기 에너지 공급원에 의해 발생된 전기 펄스를 일으키는 전기천공법을, 마이크로니들 플레이트를 통해 점막에 적용하는 단계를 포함한다.

체내에서 진행되는 전기천공 중, 전기 펄스는 세포외 분자의 흡수를 개선시키기 위해 조직에 직접 인가된다. 현재 타입의 생체 내 전기천공법은 매우 높은 V/cm의 전기장 강도로 수행되며, 이러한 높은 전기장 강도의 이용은 고밀도의 신경으로 인해 점막 조직에서 환자에게 고통스러울 것이다. 현재의 OM-I/EP 장치를 이용할 때, 피내(ID: intradermal) 주사 위치에서 인가되었던 저에너지 전기 펄스를 이용하는 것처럼, 매우 낮은 전계 강도의 전기천공법을 전달하도록 장비될 수 있고, 이는 본 출원의 명의자의 선출원인 2010년 4월 16일자 국제특허출원 PCT/US10/31431호(발명의 명칭: "CONTACTLESS ELECTROPERMEABILIZATION ELECTRODE AND METHOD")에 기재되어 있고, 그 내용 전체는 본 발명에 포함된다. 이러한 피내 전기천공법은 환자의 고통을 최소한으로 줄이거나 전혀 없도록 매우 낮은 전압으로 수행될 수 있다. 점막 조직에 대한 종래의 실험에서, 이러한 낮은 전기천공법 전계 강도는 유사한 결과를 갖는, 점막 조직 내로의 트랜스펙션을 보여주었다(데이터는 도시하지 않음). 전기천공 파라미터는 0.1V 내지 30V, 0.1V 내지 20V, 0.1V 내지 15V, 0.1V 내지 10V, 0.1V 내지 9V, 0.1V 내지 8V, 0.1V 내지 7V, 0.1V 내지 6V, 0.1V 내지 5V, 0.1V 내지 4V, 0.1V 내지 3V, 0.1V 내지 2V, 0.1V 내지 1V, 2V 내지 30V, 2V 내지 20V, 2V 내지 15V, 2V 내지 10V, 2V 내지 9V, 2V 내지 8V, 2V 내지 7V, 2V 내지 6V, 2V 내지 5V, 2V 내지 4V, 2V 내지 3V, 4V 내지 30V, 4V 내지 20V, 4V 내지 15V, 4V 내지 10V, 4V 내지 9V, 4V 내지 8V, 4V 내지 7V, 4V 내지 6V, 4V 내지 5V, 6V 내지 30V, 6V 내지 20V, 6V 내지 15V, 6V 내지 10V, 6V 내지 9V, 6V 내지 8V, 8V 내지 30V, 8V 내지 20V, 8V 내지 15V, 8V 내지 10V, 8V 내지 9V, 10V 내지 30V, 10V 내지 20V, 또는, 10V 내지 15V의 범위를 갖는 전압과, 2mA 내지 100mA, 3mA 내지 100mA, 4mA 내지 100mA, 5mA 내지 100mA, 6mA 내지 100mA, 7mA 내지 100mA, 8mA 내지 100mA, 9mA 내지 100mA, 10mA 내지 100mA, 20mA 내지 100mA, 30mA 내지 100mA, 40mA 내지 100mA, 60mA 내지 100mA, 80mA 내지 100mA, 2mA 내지 80mA, 3mA 내지 80mA, 4mA 내지 80mA, 5mA 내지 80mA, 6mA 내지 80mA, 7mA 내지 80mA, 8mA 내지 80mA, 9mA 내지 80mA, 10mA 내지 80mA, 20mA 내지 80mA, 30mA 내지 80mA, 40mA 내지 80mA, 60mA 내지 80mA, 2mA 내지 60mA, 3mA 내지 60mA, 4mA 내지 60mA, 5mA 내지 60mA, 6mA 내지 60mA, 7mA 내지 60mA, 8mA 내지 60mA, 9mA 내지 60mA, 10mA 내지 60mA, 20mA 내지 60mA, 30mA 내지 60mA, 40mA 내지 60mA, 2mA 내지 40mA, 3mA 내지 40mA, 4mA 내지 40mA, 5mA 내지 40mA, 6mA 내지 40mA, 7mA 내지 40mA, 8mA 내지 40mA, 9mA 내지 40mA, 10mA 내지 40mA, 20mA 내지 40mA, 30mA 내지 40mA, 2mA 내지 30mA, 3mA 내지 30mA, 4mA 내지 30mA, 5mA 내지 30mA, 6mA 내지 30mA, 7mA 내지 30mA, 8mA 내지 30mA, 9mA 내지 30mA, 10mA 내지 30mA, 20mA 내지 30mA, 2mA 내지 20mA, 3mA 내지 20mA, 4mA 내지 20mA, 5mA 내지 20mA, 6mA 내지 20mA, 7mA 내지 20mA, 8mA 내지 20mA, 9mA 내지 20mA, 10mA 내지 20mA, 2mA 내지 10mA, 3mA 내지 10mA, 4mA 내지 10mA, 5mA 내지 10mA, 6mA 내지 10mA, 7mA 내지 10mA, 8mA 내지 10mA, 9mA 내지 10mA, 2mA 내지 9mA, 3mA 내지 9mA, 4mA 내지 9mA, 5mA 내지 9mA, 6mA 내지 9mA, 7mA 내지 9mA, 8mA 내지 9mA, 2mA 내지 8mA, 3mA 내지 8mA, 4mA 내지 8mA, 5mA 내지 8mA, 6mA 내지 8mA, 7mA 내지 8mA, 2mA 내지 7mA, 3mA 내지 7mA, 4mA 내지 7mA, 5mA 내지 7mA, 6mA 내지 7mA, 2mA 내지 6mA, 3mA 내지 6mA, 4mA 내지 6mA, 5mA 내지 6mA, 2mA 내지 5mA, 3mA 내지 5mA, 4mA 내지 5mA, 2mA 내지 4mA, 또는, 3mA 내지 4mA의 범위를 갖는 전류를 포함할 수 있다. 일부 실시예에서, 사용되는 전기천공 파라미터는 하이 엔드에서 30V 및 100mA로부터, 로우 엔드에서 2V 및 2mA까지의 범위를 갖는다. 전기천공법 운반을 위해, 요망 조직은 각각 100msec씩의 2개의 펄스를 수신하였고, 두 펄스 사이에 100msec의 지연이 있었다.

OM-I/EP 장치는 메인 하우징(번호 1, 도 15)의 헤드에 고정되는 주 전극 마이크로니들 플레이트(번호 3, 도 15)를 갖는다. 전압 리턴 전극 플레이트 및 암(번호 5 및 6)은 입 바깥 인근에 위치한다. 메인 하우징(번호 1)은 표준 1-ml 루어-락 주사기(번호 8)에 장착될 수 있다. 이용시, 마이크로니들 플레이트 어레이(번호 3, 도 15)는 구강 내에 위치하고, 구강 점막 내벽(뺨의 내측 표면)과 밀접하게 접촉한다. 전압 리턴 전극(번호 5)은 뺨의 외측 인접 표면과 접촉할 것이다. 마이크로니들 플레이트 어레이(번호 3, 도 15), 메인 하우징(번호 1), 및 부착된 주사기(번호 8)는 주사/전기천공 장치를 형성한다. 대형 마이크로니들 어레이의 설계로 인해, 넓은 면적에 걸쳐 DNA 백신을 주사할 수 있다. 작은 크기 및 짧은 길이의 마이크로니들은 DNA 백신을 제어되는 특정 깊이로 배치시킨다. 피스톤(번호 2) 및 밀봉 O-링(번호 9)은 공통 매니폴드 영역 및 드라이버를 형성하여, 마이크로니들 플레이트(번호 3, 도 15)를 통한 DNA 백신의 균등한 분포를 보장할 것이다.

주 전극(번호 3, 도 15)에 대한 요건은 특정 길이 및 직경의 많은 마이크로니들을 갖는 것이다. 전극은 또한, (금/은 도금된 황동, 또는 구리, 스테인레스강, 및/또는 티타늄과 같은) 전기 전도성 물질로 제조되어야 한다. DNA 백신은 점막의 최상층에 배치되어야 한다. 주 전극(번호 3, 도 15)은 화학적 식각, 전기 방전 기계가공(EDM: Electric Discharge Machining), 및 희생 패턴 상의 무전해 니켈 도금과 같은 몇 가지 제조 기술에 의해 제조될 수 있다. 메인 하우징 및 지지부는 (ABS, 폴리카보니트, 및 폴리올레핀과 같은) 사출 성형 물질로 제조될 수 있다.

도 4 - 8은 아래의 사항을 뒷받침하는 결과를 보여준다.

최적화된 SIV DNA 구조체 + EP 유도 IFN-g (~12,000 SFC/106) 및 증식하는 CD8+ T 세포 반응(~20%)(CTACK과의 차이 없음). 이러한 반응들은 제4차 면역 처리 이후 가장 높았다. 최적화된 CTACK DNA의 첨가는 아래의 사항에 의해 주변부 내 유도된 반응을 더 개선시키지 않았다.

- IFN-g ELI스팟

- CFSE 증식

- PBMC 사이토카인 분비

- 혈청 내 IgA.

최적화된 CTACK DNA의 첨가는 아래에 의해 측정되는 바와 같이 점막 반응의 표현형을 변화시킨다.

- BAL 사이토카인 분비

- 더욱 다기능적인 CD8+ T 세포

- CD4+ 및 CD8+ T 세포에 더 높은 빈도로 반응

- 대소변 및 BAL 샘플의 IgA

예

본 발명은 다음의 예에서 추가적으로 설명된다. 이러한 예는 발명의 바람직한 실시예들을 나타내는 것이지만, 설명을 위해 주어지는 것일 뿐이다. 앞서의 설명과 이러한 예들로부터, 본 발명의 본질적 특성은, 발명의 사상 및 범위로부터 벗어남이 없이, 발명의 다양한 변화 및 변형예를 다양한 용도 및 조건에 적응시킬 수 있다. 따라서, 여기서 도시 및 설명된 사항에 추가하여 발명의 다양한 변형예는 전술한 설명으로부터 당 업자에게 명백할 것이다. 이러한 변형예는 첨부된 청구범위의 범위 내에 포함되는 것을 또한 의도한다.

인플루엔자 HA 항원을 이용하여 EP-개선 점막 (경구) 경로를 통해 면역화된 동물의 혈액, 비강 분비물, 타액, 및 배설물 내 IgA 역가를 평가하기 위해 실험이 수행되었다. 타액에서 관찰된 상당한 IgA 역가는 점막 면역 반응이 국부 점막 영역에서 성공적으로 상승함을 나타낸다. 배설물 샘플에서 IgA 반응 검출은 이격된 위치에서 점막 반응이 상승하였음을 표시한다. 혈청 내 IgA 역가 검출은 전신 반응이 또한 상승하였음을 제시한다.

H5 IgA ELISA

3회의 점막 EP-개선 면역 처리 이후, 양성 H5-특이적 IgA 역가가, 4x4 장치(미국, Pennsylvania, Blue Bell 소재, Inovio Pharmaceuticals, Inc.)로 전기천공된 네 동물 중 셋의 혈청에서 관찰되었고, 캘리퍼 전기천공 장치로 전기천공된 네 동물 중 넷의 혈청에서 관찰되었다. 한 동물은 주사 단독 그룹에서만 양성이었다. 도 18a-18c를 참조할 수 있다.

두 동물은 4x4 장치로 3회 면역 처리 이후 혈액 샘플에서 표적-특이적 양성 IgA 역가를 가졌다.

4x4 장치 및 캘리퍼 그룹 모두로부터 한 동물은, 그 배설물에서 표적-특이적 IgA 반응을 가졌다.

음성 대조군 또는 주사 단독군 동물들 중 어느 것도 양성 IgA 배설물 또는 혈액 샘플을 갖지 않았다.

Claims (2)

1. 포유류의 점막의 세포를 전기천공하기 위한 장치로서,
   상기 점막에 접촉하고, 상기 세포를 전기천공하기에 충분한 전위를 갖는 전기 에너지의 적어도 하나의 펄스를 전달하도록 배치되는 복수의 마이크로니들을 포함하는, 전극 마이크로니들 플레이트;
   상기 전극 마이크로니들 플레이트와 대향하여 위치되는 전압 리턴 전극으로서, 상기 전압 리턴 전극과 상기 전극 마이크로니들 플레이트는 상기 점막의 양측에 대향하여 배치되는 것인, 전압 리턴 전극; 및
   상기 전극 마이크로니들 플레이트 및 상기 전압 리턴 전극과 전기적으로 연결되는 에너지 공급원으로서, 상기 에너지 공급원은 전위를 발생시킬 수 있고 상기 전극 마이크로니들 플레이트 및 상기 전압 리턴 전극을 통해 상기 점막의 세포를 전기천공하기 위해 상기 세포에 상기 전위를 전달할 수 있는 것인, 에너지 공급원
   을 포함하는, 포유류 점막 세포의 전기천공 장치.
2. 제 1 항에 있어서,
   상기 마이크로니들 플레이트의 마이크로니들은 금 및 은으로 도금된 황동, 금 및 은으로 도금된 구리, 스테인레스강, 또는 티타늄을 포함하는 전기 전도성 물질로 제조되는
   포유류 점막 세포의 전기천공 장치.

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