KR20180074113A - 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스(HSV) 감염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 HSV의 자손바이러스 생성 억제, HSV의 숙주세포 침입과 복제의 억제 및 항염증 효과를 통해 Raw 264.7에 대한 HSV의 감염을 저해하는 것으로 확인된 감초 추출물을 이용하여 HSV 감염 및 이로 인한 피부질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물, 건강기능식품 조성물 및 화장료 조성물을 제공한다.

Description

감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물{Pharmaceutical composition for preventing or treating Herpes simplex virus infection comprising Glycyrrhiza uralensis extract}
본 발명은 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스(HSV) 감염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 HSV의 자손바이러스 생성 억제, HSV의 숙주세포 침입과 복제의 억제 및 항염증 효과를 통해 Raw 264.7에 대한 HSV의 감염을 저해하는 것으로 확인된 감초 추출물을 이용하여 HSV 감염 및 이로 인한 피부질환의 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물, 건강기능식품 조성물 및 화장료 조성물을 제공한다.
단순포진바이러스(Herpes Simplex Virus, HSV)는 투명액으로 가득 차있는 수포형태로 나타나는 통증을 수반한 피부 또는 점막 병변을 일으키는 원인이다. 단순포진바이러스 1형(HSV-1)은 주로 입, 얼굴 및 눈을 감염시킨다. 단순포진바이러스 2형(HSV-2)은 주로 생식기 및 엉덩이를 감염시킨다. 그러나, 1형 및 2형 혈청형 각각은 모든 부위에서 감염을 일으킬 수 있다(문헌[Stalkup JR et al., Chapter 80, Human Herpesviruses in Dermatology, Bolognia JL et al. eds. 2003, Mosby Edingurgh, United Kindom]).
HSV에 의한 1차 감염은 일반적으로 감염 부위에 약한 발열 병변을 발생시킨다. 치료기간은 평균적으로 8일 내지 12일이며, 이 기간에 바이러스가 신경절로 이동하여 이곳에서 잠복상태로 지내게 된다.
잠복상태의 바이러스는 육체적 또는 감정적 스트레스, 추위, 열, 면역기능 저하 또는 분명치 않은 원인 등을 포함한 여러가지 원인에 의해 다시 활성화될 수 있다. 활성화되면 이로 인해 2차 감염 발생을 유발한다.
감염 발생은 많은 경우에 국소적 통증과 일반화된 미열을 유발한다. 일반적으로 처음에는 가려움증, 통증, 작열감이 있으며 몇 시간 동안 피부나 점막에 국소적 홍반이 나타난다. 그런 후에 그 피부나 점막에 수포가 생긴다. 며칠이 지나면 궤양이 건조되고 표면에 딱지가 생겨서, 일반적으로 약 10일 정도면 회복된다.
HSV-1은 바이러스를 보유하고 있는 타액과의 접촉에 의해 전파되는 것으로 추정된다. HSV-2는 일반적으로 성적 접촉에 의해 전파된다. 이러한 하나 또는 두 혈청형의 HSV에 의한 감염은 매우 흔한 것이다. 일부 연구에서는 세계 인구의 90%가 HSV-1에 대한 항체를 보유하고 있다고 추산하고 있다. 미국의 경우 4천만 내지 6천만 명의 사람이 HSV-2에 감염되어 있다(문헌[Stalkup JR et al., Supra]).
각종 바이러스에 의해 유발되는 전염성 질병은 백신을 투여해서 거의 퇴치할 수 있으나, HSV에 기인하는 전염병의 예방은 아직도 심각한 문제점을 내포하고 있다. 현재 HSV 감염에 대한 치료법이 없다. 항바이러스 요법은 바이러스 유출 및 2차적 병변의 증상을 다소 감소시킬 수 있다. 항바이러스 치료로서 면역기능 저하 환자의 만성 감염을 치료할 수 있다. 항바이러스제는 또한 예방학적으로 사용될 수 있다. 그러나, 항바이러스제가 감염에 대한 치료가 아니며, 따라서 예방적 차원에서의 치료는 환자의 평생 동안 필요할 수도 있다(문헌[Chakrabaty A et al. 2005, Skin Therapy Lett. 10(1): 1 ~ 4]). 예방적 차원에서의 항바이러스 치료를 시행한다 하더라도, 일반적으로, 자주는 아니지만 감염이 발생할 것이다.
통상적으로 사용되는 HSV에 대한 항바이러스제로는 아시클로버 및 그 유도체, 예들 들면, 발라시클로버 및 팜시클로버 등이 있다. 이러한 항바이러스제는 주로 경구 투여되지만, 정맥주사로 투여될 수도 있고 국소적 크림 형태로 사용될 수도 있다. 도코사놀 크림(Docosanol cream; ABREVA 제품)도 병변의 지속기간을 다소 감소시키는 것으로 알려져 있다(문헌[Sacks SL et al. 2001, J Am Acad Dermatol. 45(2): 220~30]). 그러나, 이러한 종래 항바이러스제에 대한 내성이 나타나고 있어 단순포진바이러스(HSV) 감염의 예방 및 치료를 위한 신규한 물질의 개발 및 치료방법이 필요하다.
이에, 본 발명자들은 HSV에 대한 항바이러스 효과를 갖는 물질을 약용작물로부터 탐색하던 중 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물이 HSV 감염을 예방 또는 치료하는 효과가 있다는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는데 목적이 있다.
본 발명의 다른 목적은 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스성 피부질환 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상술한 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 감초 추출물은 물, C1 ~ C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 추출할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 상기 감초 추출물은 99% 에탄올을 사용하여 추출할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 약학적 조성물은 정제, 환제 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 동결건조 제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형일 수 있다.
본 발명은 또한, 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 건강기능식품 조성물은 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 껌류, 아이스크림류, 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있다.
본 발명은 또한, 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스성 피부질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 겔, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있다.
본 발명에 따른 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물, 건강기능식품 조성물 및 화장료 조성물은 HSV의 자손바이러스 생성 억제, HSV의 숙주세포 침입과 복제의 억제 및 항염증 효과를 통해 Raw 264.7에 대한 HSV의 감염을 저해하는 것으로 확인되어 HSV 감염 및 이로 인한 피부질환의 예방, 개선 또는 치료에 유용하다.
도 1은 감초 추출물(G), 코디셉틴(C) 또는 감초 추출물+코디셉틴의 농도에 따른 HSV 감염 억제율을 용균반검사를 통해 측정한 결과이다.
도 2는 감초 추출물, 코디셉틴 또는 감초 추출물+코디셉틴 처리에 따른 ICP0 유전자의 발현율을 웨스턴 블랏을 통해 측정한 결과이다.
도 3은 감초 추출물, 코디셉틴 또는 감초 추출물+코디셉틴 처리에 따른 NFkB의 발현율을 웨스턴 블랏을 통해 측정한 결과이다.
도 4는 감초 추출물, 코디셉틴, 또는 감초 추출물+코디셉틴 처리에 따른 TNF-α생성 억제를 ELISA를 통해 측정한 결과이다.
이하, 본 발명을 더욱 자세히 설명한다.
상술한 바와 같이, 종래의 HSV에 대한 항바이러스제의 내성으로 HSV 감염의 예방 또는 치료를 위한 신규한 물질의 개발 및 치료방법이 요구되고 있다.
이에 본 발명은 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물, 건강기능식품 조성물 및 화장료 조성물을 제공함으로써 상술한 문제의 해결방안을 모색하였다. 본 발명에 따른 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물, 건강기능식품 조성물 및 화장료 조성물은 HSV의 자손바이러스 생성 억제, HSV의 숙주세포 침입과 복제의 억제 및 항염증 효과를 통해 Raw 264.7에 대한 HSV의 감염을 저해하는 것으로 확인되어 HSV 감염 및 이로 인한 피부질환의 예방, 개선 또는 치료에 유용하다.
본 발명에서 사용되는 용어는 다음과 같이 정의된다.
용어 “약학적 조성물(pharmaceutical composition)”은 본 발명의 감초 추출물에 희석제 또는 담체와 같은 다른 화학 성분들의 혼합물을 의미한다.
용어 “담체(carrier)”는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로 정의된다. 예를 들어, 디메틸술폭사이드(DMSO)는 생물체의 세포 또는 조직 내로의 많은 유기 화합물들의 투입을 용이하게 하는 통상 사용되는 담체이다.
용어 “희석제(diluent)”는 대상 화합물의 생물학적 활성 형태를 안정화시킬 뿐만 아니라, 화합물을 용해시키게 되는 물에서 희석되는 화합물로 정의된다. 버퍼 용액에 용해되어 있는 염은 당해 분야에서 희석제로 사용된다. 통상 사용되는 버퍼 용액은 포스페이트 버퍼 식염수이며, 이는 인간 용액의 염 상태를 모방하고 있기 때문이다. 버퍼 염은 낮은 농도에서 용액의 pH를 제어할 수 있기 때문에, 버퍼 희석제가 화합물의 생물학적 활성을 변형하는 일은 드물다.
용어 “치료”는 이롭거나 바람직한 임상적 결과를 수득하기 위한 접근을 의미한다. 본 발명의 목적을 위해서, 이롭거나 바람직한 임상적 결과는 비제한적으로, 증상의 완화, 질병 범위의 감소, 질병 상태의 안정화(즉, 악화되지 않음), 질병 진행의 지연 또는 속도의 감소, 질병 상태의 개선 또는 일시적 완화 및 경감 (부분적이거나 전체적으로), 검출가능하거나 또는 검출되지 않거나의 여부를 포함한다. 또한, “치료”는 치료를 받지 않았을 때 예상되는 생존율과 비교하여 생존율을 늘이는 것을 의미할 수도 있다. “치료”는 치료학적 치료 및 예방적 또는 예방조치 방법 모두를 가리킨다. 상기 치료들은 예방되는 장애뿐만 아니라 이미 발생한 장애에 있어서 요구되는 치료를 포함한다. 질병을 “완화(alleviating)”하는 것은 치료를 하지 않은 경우와 비교하여, 질병상태의 범위 및/또는 바람직하지 않은 임상적 징후가 감소되거나 및/또는 진행의 시간적 추이(time course)가 늦춰지거나 길어지는 것을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다.
본 발명은 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용된 감초는 만주 감초(Glycyrrhiza uralensis)로 불리는 콩과에 속하는 여러해살이풀로서 중국 북부, 시베리아, 이태리 남부, 만주, 몽고 등지에 자생 또는 재배된다. 감초는 모든 한약처방에서 독성을 줄이는 성분으로 들어가고 진해제로 쓰이는 약초 중 하나이며(Rauchensteiner F. et al., JPharmBiomedAnal., 38(4), pp.594-600, 2005), 유럽에서는 담배나 껌 그리고 사탕 등에 단맛을 내기 위해 사용하기도 한다. 최근 연구 결과에 따르면 감초는 신장의 산화적 손상을 완화시키며 (Yokozawa T. et al., FreeRadicRes., 39(2), pp.203-211, 2005) 카드뮴에 의해 손상되는 간세포를 보호하는 효과도 있는 것으로 확인된 바 있다 (Kim SC. et al., Toxicology., 197(3), pp.239-251, 2004).
본 발명에서 감초는 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 자연에서 직접 채취 또는 재배한 것을 사용할 수 있다.
상기 감초의 추출물을 제조하는 방법은 초음파 추출법, 여과법 및 환류 추출법 등 당업계의 통상적인 추출방법을 사용할 수 있다.
추출용매는 특별히 이로 한정되는 것은 아니나, 물, C1 ~ C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매일 수 있고, 바람직하게는 에탄올, 더욱 바람직하게는 99%의 에탄올일 수 있다. 본 발명의 바람직한 일실시예서는 세척 및 건조로 이물질이 제거된 감초를 건조 분쇄하여 얻은 감초 건조물을 99% 에탄올로 추출하였다. 이때, 추출용매는 감초의 건조중량의 2~4 배로 하는 것이 바람직하다. 감초 건조물을 세절한 후 추출용기에 넣고 에탄올을 넣어 일정기간 상온에서 방치한 다음, 여과 후 농축한 추출물을 얻을 수 있다. 이때, 추출은 상온에서 24시간 5회 반복 추출하는 방법으로, 이후에 농축 및 동결건조 등의 방법을 통하여 분말로 제조될 수 있다.
본 발명의 일실시예에서는 상기와 같은 방법으로 제조된 감초 추출물을 HSV에 감염된 마우스 대식세포인 Raw 264.7에 처리하여 용균반검사로 HSV 감염 억제 효과를 측정하였다. 그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이 50㎍/ml의 감초 추출물을 처리한 실험군에서 HSV 용균반 형성 억제 효과가 확인되었다.
추가로, HSV에 감염된 Raw 264.7에 50㎍/ml의 감초 추출물을 처리하여 숙주세포 침입 및 복제에 관여하는 유전자인 ICP0의 발현율과 염증발현관련 전사인자인 NFkB의 발현율을 측정하였다. 그 결과, 도 2 및 3에 나타난 바와 같이 감초 추출물은 ICP0 유전자의 발현 및 NFkB 발현을 감소시키는 것으로 확인되었다.
나아가, 강력한 TNF-α 유도물질인 LPS(Lipopolysaccharide)로 활성화시킨 Raw 264.7에 감초 추출물(10㎍/ml, 25㎍/ml 또는 50㎍/ml)을 처리하여 항염증 효과를 측정하였다. 그 결과, 도 4에 나타난 바와 같이 감초 추출물은 TNF-α 생성 및 분비 억제를 통해 항염증 작용을 나타내는 것으로 관찰되었다.
도 1 내지 4에 나타난 바와 같이, 감초 추출물은 HSV의 자손바이러스 생성 억제, HSV의 숙주세포 침입과 복제의 억제 및 항염증 효과를 통해 Raw 264.7에 대한 HSV의 감염을 저해하는 것으로 확인되어 HSV 감염 및 이로 인한 피부질환을 예방, 개선 또는 치료하는데 효과적이라는 것을 확인할 수 있었다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물에 함유될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오즈(lactose), 덱스트로즈, 수크로스(sucrose), 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다.
본 발명에서 용어 "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 감염된 바이러스 종류, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
상기 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명은 또한, 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 건강기능식품 조성물에 함유된 감초 추출물은 본 발명의 약학적 조성물에 함유된 감초 추출물과 동일한 방법으로 제조될 수 있으며, 제조된 추출물의 효과 또한 동일하므로 이에 대한 설명은 생략한다.
본 발명의 감초 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에는 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 0.01 ~ 10 중량%, 바람직하게는 0.05 ~ 1 중량%의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하로도 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일 주스 및 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 또한, 건강기능식품은 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 껌류, 아이스크림류, 스프, 음료수, 차, 기능수, 드링크제, 알코올 및 비타민 복합제 중 어느 하나의 형태일 수 있다.
본 발명의 건강 음료 조성물은 감초 추출물을 함유하는 것 외에는 액체성분에는 특별한 제한은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
또한, 상기 건강기능식품은 식품첨가물을 추가로 포함할 수 있으며, “식품첨가물”로서의 적합여부는 다른 규정이 없는 한 식품의약품안정청에 승인된 식품첨가물공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.
상기 “식품첨가물공전”에 수재된 품목으로 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산 칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성품, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고랭색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합 제제류 등을 들 수 있다.
본 발명은 또한, 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스성 피부질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 화장료 조성물에 함유된 감초 추출물은 본 발명의 약학적 조성물에 함유된 감초 추출물과 동일한 방법으로 제조될 수 있으며, 제조된 추출물의 효과 또한 동일하므로 이에 대한 설명은 생략한다.
상기 바이러스성 피부질환의 예방 및 치료용 화장료 조성물로 제조되는 화장품은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 본 발명의 감초 추출물을 함유하는 화장품 이외에도 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소 적용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.
적합한 화장품의 제형으로는 예를 들면, 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로 에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 여고, 스프레이 또는 콘실 스틱(Conceal stick)의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(Foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 감초 추출물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(Foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고 상기의 성분들은 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 구체적인 제형으로서는 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 겔, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더, 아이섀도 등의 제형을 포함한다.
또한, 본 발명은 상기 감초 조성물을 로타바이러스와 접촉시키는 단계를 포함하는 단순포진바이러스의 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 이때, 상기 접촉은 통상적인 방법으로 이루어지고, 로타바이러스는 살아있는 유기체, 조직 또는 세포 배양체, 생물학적 물질 시료 (혈액, 혈청, 뇨, 뇌척수액, 눈물, 가래, 타액, 조직 시료 등) 등이 포함되며, 대개 바이러스와 같은 병인성 유기체를 함유할 수 있다. 이러한 시료들은 물 및 유기 용매/물 혼합물을 포함하는 어떠한 배지 내에 담길 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물을 투여한 후에 항단순포진바이러스 활성을 진단하는 직접 또는 간접 방법을 포함한 어떠한 방법에 의해서도 관찰될 수 있다. 로타바이러스 감염 억제 활성을 진단하는 정량적인, 정성적인 또는 세미-정량적인 방법들 모두가 사용 가능하며, 살아있는 유기체의 생리학적인 특성을 관찰하는 등 다른 어떠한 방법도 적용될 수 있다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기로 하지만, 하기의 실시예가 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니며, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로 해석되어야 할 것이다.
감초 추출물 제조
원료인 건조된 감초를 추출용기에 넣고 99% 에탄올을 2~4배정도 첨가하여 감초를 침지시킨 후, 밀봉하여 24시간 상온에서 정치한다. 24시간 정치 후, 추출된 에탄올 추출물을 대용량 농축기를 사용하여 농축한다. 위의 방법을 5회 반복한 후, 모든 추출된 시료를 혼합한 것을 시료로 사용하였다.
감초추출물의 단순포진바이러스 실험
마우스 대식세포인 Raw 264.7에 단순포진바이러스(HSV)를 감염시키고 동시에 감초 추출물, 코디셉틴, 감초 추출물+코디셉틴 또는 배지(대조군)를 처리한 후 24시간 뒤에 세포 펠릿을 획득하여 Raw 264.7에 대한 HSV의 감염률을 용균반검사(plaque assay)를 통하여 측정분석하였다.
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이 코디셉틴은 어떤 농도에서도 HSV 감염률에 영향을 끼치지 않았다. 감초 추출물의 경우, 10㎍/ml 또는 20㎍/ml 처리군에서 대조군(HSV 단독)과 차이를 보이지 않으나, 50㎍/ml 처리군에서 HSV 용균반(HSV plaque) 형성을 억제하여 Raw 264.7에 대한 HSV의 감염을 저해하는 것으로 확인되었다.
감초 추출물의 HSV 숙주세포 침입 및 복제에 관여하는 유전자 ICP0에 대한 영향
마우스 대식세포인 Raw 264.7에 단순포진바이러스(HSV)를 감염시키고 동시에 감초 추출물, 코디셉틴 또는 감초 추출물+코디셉틴을 처리한 후 24시간 뒤에 세포 펠릿을 획득하여 HSV의 숙주세포 침입 및 복제에 관여하는 유전자 ICP0의 발현율을 측정 분석하였다.
그 결과, 도 2에 나타난 바와 같이 감초 추출물의 HSV 감염률 감소는 HSV의 숙주세포(Raw 264.7 cells)내 침입(entry) 및 복제(replication)에 관여하는 HSV ICP0 유전자의 발현 감소와 상관관계가 있는 것으로 판단된다.
감초 추출물의 Raw 264.7 세포내 염증발현관련 전사인자 NFkB에 대한 영향
마우스 대식세포인 Raw 264.7에 단순포진바이러스(HSV)를 감염시키고 동시에 감초 추출물, 코디셉틴 또는 감초 추출물+코디셉틴을 처리한 후 24시간 뒤에 세포 펠릿을 획득하여 Raw 264.7 세포에서의 염증발현관련 전사인자 NFkB의 발현을 측정 분석하였다.
그 결과, 도 3에 나타난 바와 같이 감초 추출물에 의해 NFkB의 발현이 감소됨을 확인하였다.
감초 추출물의 염증발현사이토카인 TNF - α생성 억제를 통한 항염증 기전
마우스 대식세포인 Raw 264.7를 강력한 TNF-α 유도물질인 LPS(Lipopolysaccharide)로 활성화시키고 동시에 감초 추출물, 코디셉틴, 또는 감초 추출물+코디셉틴을 처리한 후 24시간 뒤에 세포 배양액의 TNF-α생성을 ELISA로 측정 분석하였다.
그 결과, 도 4에 나타난 바와 같이 감초 추출물이 Raw264.7 세포의 TNF-α 생성 및 분비능력을 감소시킨다는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 항염증작용은 항 HSV 효능과 직접적으로 관련이 있는 것으로 판단된다.
제조예 1: 약학적 제제의 제조
1-1. 산제의 제조
감초 추출물 2 g 및 유당 1 g을 혼합한 후, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
1-2. 정제의 제조
감초 추출물 100 ㎎, 옥수수 전분 100 ㎎, 유당 100 ㎎ 및 스테아린산 마그네슘 2 ㎎을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
1-3. 캡슐제의 제조
감초 추출물 100 ㎎, 옥수수 전분 100 ㎎, 유당 100 ㎎ 및 스테아린산 마그네슘 2 ㎎을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
1-4. 주사액제의 제조
적당한 주사용 염화나트륨 BP에 감초 추출물 10 ㎍/㎖을 용해시키고, 생성된 용액의 pH를 묽은염산 BP를 사용하여 pH 3.5로 조절하고, 주사용 염화나트륨 BP(최대 1 ㎖)를 사용하여 용적을 조절하여 충분히 혼합하였다. 용액을 투명 유리로 된 5 ㎖ 타입 I 앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120 ℃에서 15분 이상 오토클래이브시켜 살균하여 주사액제를 제조하였다.
제조예 2: 건강식품의 제조
2-1. 조리용 양념의 제조
감초 추출물 0.2 ~ 10 중량%로 첨가하여 건강 증진용 조리용 양념을 제조하였다.
2-2. 토마토 케찹 및 소스의 제조
감초 추출물 0.2 ~ 1.0 중량%를 토마토 케찹 또는 소스에 첨가하여 건강 증진용 토마토 케찹 또는 소스를 제조하였다.
2-3. 밀가루 식품의 제조
감초 추출물 0.1 ~ 5.0 중량%를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
2-4. 스프 및 육즙 (gravies)의 제조
감초 추출물 0.1 ~ 1.0 중량%를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
2-5. 그라운드 비프 (ground beef)의 제조
감초 추출물 10 중량%를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
2-6. 유제품 (dairy products)의 제조
감초 추출물 0.1 ~ 1.0 중량%를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
2-7. 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지된 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지된 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
감초 추출물을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍 건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 감초 추출물의 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류 (현미 30 중량%, 율무 15 중량%, 보리 20 중량%),
종실류 (들깨 7 중량%, 검정콩 8 중량%, 검정깨 7 중량%),
감초 추출물의 건조분말 (1 중량%),
영지 (0.5 중량%), 및
지황 (0.5 중량%)
2-8. 탄산음료의 제조
설탕 5~10%, 구연산 0.05 ~ 0.3 %, 카라멜 0.005 ~ 0.02 %, 비타민 C 0.1 ~ 1 %의 첨가물을 혼합하고, 여기에 79 ~ 94 %의 정제수를 섞어서 시럽을 만들었다. 상기에서 제조한 시럽을 85 ~ 98 ℃에서 20 ~ 180초 동안 살균하여 냉각수와 1 : 4의 비율로 혼합시킨 다음, 탄산가스를 0.5 ~ 0.82 % 주입하여 감초 추출물을 함유하는 탄산음료를 제조하였다.
2-9. 건강음료의 제조
액상과당 (0.5 %), 올리고당 (2 %), 설탕 (2 %), 식염 (0.5 %), 물 (75 %)과 같은 부재료와 감초 추출물을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조하였다.
2-10. 야채쥬스의 제조
감초 추출물 0.5 g을 토마토 또는 당근 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 건강 증진용 야채쥬스를 제조하였다.
2-11. 과일쥬스의 제조
감초 추출물 0.1 g을 사과 또는 포도 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 건강 증진용 과일쥬스를 제조하였다.
제조예 3: 화장품의 제조
3-1. 유연 화장수의 제조
정제수에 부틸렌 글리콜, 글리세린, 폴리옥시에틸렌(60) 경화 피마자유, 베타인, 구연산, 구연산나트륨 및 방부제를 첨가하여 교반한 후 용해시킨 다음, 에탄올에 향료를 넣어 용해시킨 혼합물을 첨가하였다. 여기에 본 발명에 따른 감초 추출물을 가하여 충분히 교반한 후, 숙성시켜 유연 화장수를 제조하였다. 하기 표 1에 각 성분의 함량을 나타내었다.
원료 함량(w/w %)
감초 추출물 25.0
부틸렌 글리콜 3.5
글리세린 2.5
폴리옥시에틸렌(60) 경화 피마자유 0.1
에탄올 2.5
베타인 1.0
구연산 0.01
구연산 나트륨 0.03
방부제 미량
향료 미량
정제수 잔량
3-2. 영양 화장수의 제조
본 발명에 따른 감초 추출물과 부틸렌 글리콜, 글리세린, 카르복시비닐폴리머, 아르기닌, 방부제 및 정제수를 70~75 ℃에서 교반하면서 가열하였다. 여기에 75~80 ℃에서 교반하여 가열시킨 스쿠알란, 부틸렌글리콜 디카프릴레이트/디카프레이트, 소르비탄스테아레이트, 포리소르베이트 60, 글리세릴스테아레이트 및 스테아릴글리세레티네이트 혼합물을 가하여 유화시킨 후, 교반하면서 45 ℃정도로 냉각하면서 향료를 첨가하여 교반한 다음, 30 ℃까지 냉각한 후 숙성시켜 영양화장수를 제조하였다. 하기 표 2에 각 성분의 함량을 나타내었다.
원료 함량(w/w %)
감초 추출물 40.0
부틸렌 글리콜 8.0
글리세린 5.0
스쿠알란 10.0
부틸렌글리콜 디카프릴레이트/디카프레이트 5.0
소르비탄스테아레이트 1.5
폴리소르베이트 60 1.0
글리세릴스테아레이트 0.5
스테아릴글리시레티네이트 0.2
카르복시비닐폴리머 0.1
아르기닌 0.1
방부제 미량
향료 미량
정제수 잔량
3-3. 에센스의 제조
시토 시테롤, 폴리글리세릴-2-올레이트, 세라마이드, 세테아레스-4 및 콜레스테롤을 교반하여 혼합한 다음, 시토 시테롤, 폴리글리세릴-2-올레이트, 세라마이드, 세테아레스-4 및 콜레스테롤을 교반하여 혼합한 다음, 본 발명에 따른 감초 추출물과 디세틸포스페이트, 농글리세린 및 정제수 혼합 용액을 첨가하여 유화시킨 후, 교반하면서 45 ℃로 냉각되면 향료를 첨가하여 교반하고 30 ℃까지 냉각시켜 숙성시켰다. 여기에 카르복시비닐폴리머, 산탄검 및 방부제를 첨가하여 안정화시킨 후 숙성시켜 에센스를 제조하였다. 하기 표 3에 각 성분의 함량을 나타내었다.
원료 함량(w/w %)
감초 추출물 10.0
시토 스테롤 1.7
폴리글리세릴-2-올레이트 1.5
세라마이드 0.7
세테아레스-4 1.2
콜레스테롤 1.5
디세틸포스페이트 0.4
농글리세린 5.0
카르복시비닐폴리머 0.2
산탄검 0.2
방부제 미량
향료 미량
정제수 잔량
본 발명의 감초 추출물을 함유하는 조성물들은 HSV의 자손바이러스 생성 억제, HSV의 숙주세포 침입과 복제의 억제 및 항염증 효과를 통해 우수한 항 HSV 효과를 나타내므로, HSV 감염 및 이로 인한 피부질환의 예방, 개선 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있어 산업상 이용가능성이 크다.

Claims (8)

  1. 감초(Glycyrrhiza uralensis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 감초 추출물은 물, C1 ~ C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로부터 추출한 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  3. 제2항에 있어서, 상기 감초 추출물은 99% 에탄올을 사용하여 추출한 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 정제, 환제 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 동결건조 제제 및 좌제로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  5. 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스 감염의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 건강기능식품 조성물은 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 껌류, 아이스크림류, 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 건강기능식품 조성물.
  7. 감초 추출물을 유효성분으로 함유하는 단순포진바이러스성 피부질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
  8. 제7항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 겔, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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