KR20170087570A - 메탄과 이산화탄소 동시 고정능을 가지는 플랫폼 균주 및 이를 이용한 유용 물질의 생산방법 - Google Patents

메탄과 이산화탄소 동시 고정능을 가지는 플랫폼 균주 및 이를 이용한 유용 물질의 생산방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20170087570A
KR20170087570A KR1020160007074A KR20160007074A KR20170087570A KR 20170087570 A KR20170087570 A KR 20170087570A KR 1020160007074 A KR1020160007074 A KR 1020160007074A KR 20160007074 A KR20160007074 A KR 20160007074A KR 20170087570 A KR20170087570 A KR 20170087570A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
methane
carbon dioxide
platform
same
present
Prior art date
Application number
KR1020160007074A
Other languages
English (en)
Inventor
이은열
이옥경
황인엽
Original Assignee
경희대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 경희대학교 산학협력단 filed Critical 경희대학교 산학협력단
Priority to KR1020160007074A priority Critical patent/KR20170087570A/ko
Publication of KR20170087570A publication Critical patent/KR20170087570A/ko

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/74Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0008Oxidoreductases (1.) acting on the aldehyde or oxo group of donors (1.2)
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/93Ligases (6)
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12YENZYMES
    • C12Y102/00Oxidoreductases acting on the aldehyde or oxo group of donors (1.2)
    • C12Y102/99Oxidoreductases acting on the aldehyde or oxo group of donors (1.2) with other acceptors (1.2.99)
    • C12Y102/99002Carbon-monoxide dehydrogenase (acceptor) (1.2.99.2)
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12YENZYMES
    • C12Y602/00Ligases forming carbon-sulfur bonds (6.2)
    • C12Y602/01Acid-Thiol Ligases (6.2.1)
    • C12Y602/01001Acetate-CoA ligase (6.2.1.1)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

본 발명은 미세포기(microaerobic) 배양조건하에서 메탄과 이산화탄소를 동시에 고정시킬 수 있는 플랫폼 균주, 상기 균주를 이용하여 메탄과 이산화탄소를 동시에 고정시키는 방법 및 상기 균주를 이용하여 유용물질을 생산하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에서 제공하는 형질전환체를 이용하면, 동일한 조건에서 메탄과 이산화탄소를 동시에 고정시켜서, 유용물질을 제조할 수 있으므로, 지구온난화의 원인을 제거하는데 널리 활용될 수 있을 것이다.

Description

메탄과 이산화탄소 동시 고정능을 가지는 플랫폼 균주 및 이를 이용한 유용 물질의 생산방법{Platform microbs for fixation of free methane and carbon dioxide at the same time and process for preparing valuable substance using the same}
본 발명은 미세포기(microaerobic) 배양조건하에서 메탄과 이산화탄소를 동시에 고정시킬 수 있는 플랫폼 균주, 상기 균주를 이용하여 메탄과 이산화탄소를 동시에 고정시키는 방법 및 상기 균주를 이용하여 유용물질을 생산하는 방법에 관한 것이다.
메탄은 셰일가스의 주요성분이며 지구온난화를 일으키는 대표적 온실가스 중 하나이고, 이산화탄소는 메탄에 비하여 지구온난화지수는 낮지만 온실가스 배출량이 최대인 것으로 알려져 있다. 이에 따라, 메탄 또는 이산화탄소를 이용하여 지구온난화의 수준을 감소시키면서도 유용물질을 생산하는 기술을 개발하기 위한 연구가 활발히 진행되고 있다. 그러나, 저분자량을 갖는 기체형태인 메탄과 이산화탄소를 이용하여 유용물질을 합성하는 과정은 막대한 자본과 시간이 소요되면서도, 유용물질의 생산수율이 낮다는 문제점이 있어, 산업화되지 못하고 있는 실정이다.
최근에는, 이러한 문제점을 극복하는 방안으로서 다양한 미생물을 이용한 생물학적 전환공정에 대한 연구가 진행되고 있는데, 이러한 생물학적 전환공정에서 사용되는 주요 미생물로서 메탄자화균이 주목받고 있다. 상기 메탄자화균은 메탄을 유일 탄소원과 에너지원으로 활용하여 메탄을 연료 및 화학원료로 전환시킬 수 있고, 호기성 조건하에서 MMO(methane monooxygenase)를 이용하에 메탄을 메탄올로 전환시킬 수 있으며, 아세토젠(acetogen)의 Wood?Ljungdahl 경로와 CODH/ACS 복합체를 이용하여 이산화탄소로부터 아세틸 CoA를 합성할 수 있다고 알려져 있다.
그러나, 상기 메탄자화균을 이용하여 메탄으로부터 메탄올을 생산할 경우에는 산소의 공급이 계속 요구되고, 메탄자화균 자체의 대사경로가 복잡하여 목적산물 외 부가산물이 대량으로 생성되며, 이산화탄소를 전환시키는 Wood-Ljungdhl 경로와 CODH/ACS 복합체의 주요 효소들이 산소에 민감하여 혐기적 조건하에서만 반응이 수행되므로, 세포성장 속도가 느리며 목적산물의 생산 수율이 낮다는 문제점이 해결되지 않고 있는 실정이다.
본 발명의 하나의 목적은 메탄과 이산화탄소를 동시에 고정시킬 수 있는 플랫폼 균주를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 균주를 이용하여 메탄과 이산화탄소를 동시에 고정시키는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 균주를 이용하여 유용물질을 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명자들은 풍부한 가스 자원인 메탄과 이산화탄소 동시 고정능을 가지는 미생물 플랫폼 균주를 개발하기 위하여,
의 개발은 메탄자화균 내 reductive acetyl CoA pathway 구현을 통해 가능하다. 메탄을 유일탄소원 또는 에너지원으로 이용하는 메탄자화균을 플랫폼 균주로 선정하고 여기에 이산화탄소까지 이용할 수 있는 경로를 구축한다. 이를 위해,
메탄자화균 내 Teterahydrofolate cycle(또는 Tetrahydromethanopterin cycle)을 이용하고 acetogen 유래의 CODH/ACS complex(또는 메탄생성균 유래 ACDS)를 도입하고 발현시킴으로써 reductive acetyl CoA 경로가 구비된 형질전환체를 제작하였다. 상기 형질전환체는 혐기조건하에서 이산화탄소로부터 acetyl CoA를 합성할 수 있으나, 메탄자화균의 주된 기능인 메탄산화를 수행하기 위하여는 산소를 필요로 하기 때문에, 동일조건에서 이산화탄소와 메탄을 동시에 고정시킬 수 없다는 문제점이 있다.
본 발명자들은 상기 문제점을 해결하기 위하여, 상기 형질전환체를 미세포기(microaerobic) 조건 또는 혐기적 조건에서 denitrification (배지 중에 존재하는 nitrate(또는 nitrite)의 환원을 통해 발생되는 산소를 메탄 산화에 즉시 활용)을 응용하였다.
상술한 바와 같이, 메탄과 이산화탄소 동시 고정능을 가지는 미생물 플랫폼 균주를 개발하기 위하여, 메탄자화균에 reductive acetyl CoA 경로에 관여하는 CODH/ACS(carbon monoxide dehydrogenase/acetyl-CoA synthase) 복합체를 코딩하는 유전자를 도입하여 제작된 형질전환체는 지금까지 보고되지 않았고, 본 발명자에 의해 최초로 개발되었다.
상술한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하나의 양태로서 메탄자화균에 CODH/ACS(carbon monoxide dehydrogenase/acetyl-CoA synthase) 복합체를 코딩하는 유전자를 도입한 형질전환체를 제공한다.
본 발명은 다른 하나의 양태로서, 상기 형질전환체를 이용하여 메탄과 이산화탄소를 동시에 고정시키는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명은 또 다른 하나의 양태로서, 상기 형질전환체를 이용하여 유용물질을 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명에서 제공하는 형질전환체를 이용하면, 동일한 조건에서 메탄과 이산화탄소를 동시에 고정시켜서, 유용물질을 제조할 수 있으므로, 지구온난화의 원인을 제거하는데 널리 활용될 수 있을 것이다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 메탄자화균을 이용한 형질전환체의 제작
본 발명자들은 reductive acetyl CoA 경로에 관여하는 CODH/ACS(carbon monoxide dehydrogenase/acetyl-CoA synthase) 복합체를 코딩하는 유전자를 클로닝하였다. 상기 클로닝된 유전자를 메탄자화균에 도입하여 형질전환시켜서, reductive acetyl CoA 경로가 구비된 형질전환체를 제작하였다.

Claims (1)

  1. 메탄자화균에 CODH/ACS(carbon monoxide dehydrogenase/acetyl-CoA synthase) 복합체를 코딩하는 유전자를 도입한 형질전환체.
KR1020160007074A 2016-01-20 2016-01-20 메탄과 이산화탄소 동시 고정능을 가지는 플랫폼 균주 및 이를 이용한 유용 물질의 생산방법 KR20170087570A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160007074A KR20170087570A (ko) 2016-01-20 2016-01-20 메탄과 이산화탄소 동시 고정능을 가지는 플랫폼 균주 및 이를 이용한 유용 물질의 생산방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160007074A KR20170087570A (ko) 2016-01-20 2016-01-20 메탄과 이산화탄소 동시 고정능을 가지는 플랫폼 균주 및 이를 이용한 유용 물질의 생산방법

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20170087570A true KR20170087570A (ko) 2017-07-31

Family

ID=59418910

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020160007074A KR20170087570A (ko) 2016-01-20 2016-01-20 메탄과 이산화탄소 동시 고정능을 가지는 플랫폼 균주 및 이를 이용한 유용 물질의 생산방법

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20170087570A (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102043367B1 (ko) 2018-11-05 2019-11-12 한국건설기술연구원 하수처리수 및 혼합종 메탄산화균(Type I 및 Type X)과 혐기성소화조 소화가스를 연계 이용한 하수처리공정에서의 메탄올 생산방법

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102043367B1 (ko) 2018-11-05 2019-11-12 한국건설기술연구원 하수처리수 및 혼합종 메탄산화균(Type I 및 Type X)과 혐기성소화조 소화가스를 연계 이용한 하수처리공정에서의 메탄올 생산방법

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Akutsu et al. Effects of temperature and substrate concentration on biological hydrogen production from starch
Hafez et al. Effect of organic loading on a novel hydrogen bioreactor
Kantzow et al. Effects of hydrogen partial pressure on autotrophic growth and product formation of Acetobacterium woodii
Dams et al. Production of medium-chain carboxylic acids by anaerobic fermentation of glycerol using a bioaugmented open culture
Zhang et al. Simultaneous production of acetate and methane from glycerol by selective enrichment of hydrogenotrophic methanogens in extreme-thermophilic (70 C) mixed culture fermentation
Peintner et al. Bioreactor systems for thermophilic fermentative hydrogen production: evaluation and comparison of appropriate systems
Ferreira et al. Selection of metabolic pathways for continuous hydrogen production under thermophilic and mesophilic temperature conditions in anaerobic fluidized bed reactors
RU2010119233A (ru) Новые гидрогеназы, выделенные из thermococcus spp., гены, кодирующие эти гидрогеназы, и способы продуцирования водорода с использованием микроорганизмов, содержащих указанные гены
JP2018532433A5 (ko)
Jayachandran et al. Novel strategies towards efficient molecular biohydrogen production by dark fermentative mechanism: present progress and future perspective
Kim et al. A biological process effective for the conversion of CO-containing industrial waste gas to acetate
Okonkwo et al. Bioaugmentation enhances dark fermentative hydrogen production in cultures exposed to short-term temperature fluctuations
Willquist et al. Growth and hydrogen production characteristics of Caldicellulosiruptor saccharolyticus on chemically defined minimal media
Kulkarni et al. Selection of methanotrophic platform for methanol production using methane and biogas
Krishnan et al. Recent advances in process improvement of dark fermentative hydrogen production through metabolic engineering strategies
Xiu et al. Stoichiometric analysis and experimental investigation of glycerol–glucose co-fermentation in Klebsiella pneumoniae under microaerobic conditions
Bernacchi et al. Experimental methods for screening parameters influencing the growth to product yield (Y (x/CH4)) of a biological methane production (BMP) process performed with Methanothermobacter marburgensis
Lacroux et al. Dark fermentation and microalgae cultivation coupled systems: outlook and challenges
Lazaro et al. Optimization of the yield of dark microaerobic production of hydrogen from lactate by Rhodopseudomonas palustris
Jo et al. Hydrogen production from methane by Methylomonas sp. DH-1 under micro-aerobic conditions
Jawed et al. Enhanced H 2 production and redirected metabolic flux via overexpression of fhlA and pncB in Klebsiella HQ-3 strain
Zhu et al. Efficient utilization of carbon to produce aromatic valencene in Saccharomyces cerevisiae using mannitol as the substrate
Akaniro et al. Metabolic engineering approaches for scale-up of fermentative biohydrogen production–A review
CN103184243A (zh) 一种木糖醇的发酵生产方法
Piemonte et al. Sequencing batch reactors (SBRs) for BioH2 production: reactor operation criteria