KR20170024190A - Fish sauce having enhanced safety and reduced fermentation period and preparing process thereof - Google Patents

Fish sauce having enhanced safety and reduced fermentation period and preparing process thereof Download PDF

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KR20170024190A
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Abstract

The present invention relates to a fish soy sauce which produces salted seafood by adding salt to fish, crushed fish or enzymatic crushed product of the fish and/or the crushed fish, which are targets to be fermented, adds glycine to the produced salted fish, and is produced by fermenting the same, and to a production method thereof. The fish soy sauce obtained by the production method of the present invention can greatly reduce the content of biogenic amines which are harmful to human bodies, and fermentation time can be greatly shortened when using enzymatic degradation products of fish obtained by using suitable proteolytic enzymes.

Description

안전성이 향상되고 발효시간이 단축된 어간장 및 그 제조 방법{FISH SAUCE HAVING ENHANCED SAFETY AND REDUCED FERMENTATION PERIOD AND PREPARING PROCESS THEREOF}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to a fish sauce having improved safety and shortened fermentation time,

본 발명은 어간장 및 그 제조 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 예를 들어 효소 분해를 통하여 발효 시간을 단축하고 이취의 저감 효과가 있으며, 발효 시 생성되는 위해 물질을 저감화시킨 어간장 및 그 제조 방법에 관한 것이다. More particularly, the present invention relates to an eulogangjang which is effective for reducing fermentation time and reducing odor by enzymatic degradation, reducing the harmful substances produced during fermentation, and a method for producing the same. .

아미노산은 생명체에서 다양한 역할과 기능을 수행하는 단백질의 구성 단위인데, 아미노산의 탈탄산 작용, 알데하이드 및 케톤의 아미노화와 아미노기 전이 반응 등에 의해서 바이오제닉 아민(Biogenic amines, BA)이 생성된다. 바이오제닉 아민은 저분자량의 아민으로서 생물의 대사과정에서 합성되므로 생물세포에서 흔히 발견되는 구성 성분이다. Amino acids are constituent units of proteins that perform various roles and functions in living organisms. Biogenic amines (BA) are formed by the decarboxylation of amino acids, the amination of aldehydes and ketones, and the transamination of amino acids. Biorenic amines are low molecular weight amines that are synthesized in the metabolism of living organisms and are a common component in living cells.

또한, 농축산식품과 다양한 종류의 식품이나 음료 중의 바이오제닉 아민은 원재료의 효소 작용과 미생물의 아미노산 탈탄산 작용으로 생성되는데, 특히 발효 식품의 저장, 숙성 및 발효 과정 중에 생성되기도 한다. 하기 반응식에 기술한 것과 같이, 식품 등에서 바이오제닉 아민의 생성 메커니즘은 식품 및 식품원료의 저장, 숙성 및 발효 과정 중에 생성된 유리 아미노산(free amino acids)이 발효 미생물이 생산한 탈탄산 효소(decarboxylase, E.C. 4.1.1)에 의해 바이오제닉 아민으로 전환된다(Hallasz, A. et al. (1994) Biogenic amines and their production by microorganisms in food. Trends Food Sci. vol. 5, 42-48)In addition, biogenic amines in agricultural foods and various foods and beverages are produced by the enzymatic action of raw materials and the decarboxylation of amino acids of microorganisms, especially during storage, aging and fermentation of fermented foods. As described in the following reaction formula, the mechanism of production of biogenic amines in foods and the like is that the free amino acids produced during storage, aging and fermentation of food and food ingredients are converted to decarboxylase, EC 4.1.1) (Hallasz, A. et al. (1994) Biogenic amines and their production by microorganisms in food. Trends Food Sci. Vol. 5, 42-48)

[반응식] 탈탄산 효소에 의한 아미노산의 바이오제닉 아민으로의 전환[Reaction] Conversion of amino acid to biogenic amine by decarboxylase

Figure pat00001
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바이오제닉 아민은 아민기의 개수에 따라 아민기가 1개인 모노아민(monoamines), 2개인 디아민(diamines) 및 3개 이상인 폴리아민(polyamines)으로 구분될 수 있다. 식품 및 식품 원료에서 주로 발견되는 바이오제닉 아민은 히스타민(histamine), 푸트레신(putrescine), 카다베린(cadaverine), 티라민(tyramine), 트립타민(trytamine), 베타-페닐에틸아민(-phenylethylamine), 스퍼미딘(spermidine), 스퍼민(spermine), 노르아드레날린(nor-adrenaline), 도파민(dopamine), 세로토닌(serotonin), 아그마틴(agmatine) 등이 있다. 대표적인 바이오제닉 아민의 종류 및 생체 내에서의 역할 및 유해성 등이 하기 표 1에 표시되어 있다. The biogenic amines can be classified into monoamines having one amine group, diamines having two amines, and polyamines having three or more amines depending on the number of amine groups. The biogenic amines found mainly in food and food raw materials are histamine, putrescine, cadaverine, tyramine, trytamine, beta-phenylethylamine, Spermidine, spermine, nor-adrenaline, dopamine, serotonin, agmatine, and the like. Typical types of biogenic amines, their role in vivo and their harmfulness are shown in Table 1 below.

바이오제닉 아민의 종류, 약리 작용 및 유해성(식품의약품안전청)Types, pharmacokinetics and harmfulness of biogenic amines (Korea Food and Drug Administration) 종류Kinds 유래 물질Derived material 약리 작용 및 유해성Pharmacological action and harmfulness 비고Remarks

모노
아민


Mono
Amine
티라민Tyramine 티로신Tyrosine 말초혈관 수축, 심장박출량 증가,
혈당수치 증가, 호흡 증가, 편두통 야기
Peripheral vasoconstriction, increased cardiac output,
Increased blood sugar levels, increased respiration, migraine attacks
베타-페닐
에틸아민
Beta-phenyl
Ethylamine
페닐알라닌Phenylalanine 혈압 상승, 편두통 야기Blood pressure rise, migraine headache
노르아드
레날린
Norad
Linalyn
티로신Tyrosine 신경전달물질;
심장박출량 증가, 혈압 상승
Neurotransmitters;
Increased cardiac output, increased blood pressure
도파민Dopamine 티로신Tyrosine 신경전달물질; 혈압 상승Neurotransmitters; Blood pressure rise





디아민






Diamine
히스타민Histamine 히스티딘Histidine 소장 및 기도의 평활근 자극, 감각신경과 운동신경을 자극, 위산분비 조절;
국소적인 피부 염증, 구토, 설사, 심한 복통, 저혈압, 두통, 호흡 곤란 등
Smooth muscle stimulation of small intestine and airway, stimulation of sensory nerve and motor nerve, regulation of gastric acid secretion;
Localized skin inflammation, vomiting, diarrhea, severe abdominal pain, hypotension, headache, difficulty breathing, etc.
CODEX
규제 대상
CODEX
Regulated subject
트립타민Tryptamine 트립토판Tryptophan 심장박출량 증가, 호흡 중가, 혈압 상승, 편두통 유발Increased cardiac output, increased breathing, elevated blood pressure, and migraine headaches 푸트레신Futuresyn 오르니틴Ornithine 세포 성장과 증식;
저혈압, 팔다리 마비, 다른 아민들의 독성 증가시킴
Cell growth and proliferation;
Hypotension, limb paralysis, increased toxicity of other amines
카다베린Cadaverine 세포 성장과 증식;
저혈압, 서맥, 팔다리 마비, 다른 아민들의 독성을 증가시킴
Cell growth and proliferation;
Increased toxicity of hypotension, bradycardia, limb paralysis, and other amines
세로토닌Serotonin 히드록시
트립토판
Hydroxy
Tryptophan
신경전달물질;
혈관 수축
Neurotransmitters;
Vasoconstriction


폴리
아민


Poly
Amine
스퍼미딘Spudmin 아르기닌Arginine 세포 성장과 증식;
다른 아민들의 독성을 증가시킴
Cell growth and proliferation;
Increases toxicity of other amines
스퍼민Spermine 아르기닌Arginine 세포 성장과 증식;
다른 아민들의 독성을 증가시킴
Cell growth and proliferation;
Increases toxicity of other amines
아그마틴Agmartin 아르기닌Arginine NO 생성 억제, 펩티드 호르몬 유리 촉진NO production inhibition, peptide hormone glass promotion

폴리아민인 푸트레신, 스퍼미딘, 스퍼민과 카다베린 등은 생체 세포에서 핵산 작용 조절, 단백질 합성 등에 중요한 역할을 수행하며, 일부 바이오제닉 아민은 체내에서 직, 간접적으로 신경전달물질(neurotransmitter)로 작용하며, 혈압 조절, 세포의 성장과 증식에 관여한다. Polyamines such as putrescine, spermidine, spermine and cadaverine play an important role in regulation of nucleic acid function and protein synthesis in living cells, and some biogenic amines act directly or indirectly as neurotransmitters in the body And is involved in blood pressure control, cell growth and proliferation.

하지만, 식품 등에서 생성된 바이오제닉 아민을 섭취하였을 경우에 인체에서 바이오제닉 아민의 종류에 따라 유해성 발현 농도는 다르지만, 모든 종류의 바이오제닉 아민은 유해성을 가지고 있다. 일반적으로 인체에는 이들 바이오제닉 아민을 분해하는 모노아민/디아민 산화효소(monoamine/diamine oxidase)가 소장에 존재하여 이들 바이오제닉 아민을 무독화하는 시스템을 갖추고 있다. 하지만, 과잉의 아민을 섭취하거나 모노아민 저해제(inhibitor)를 복용하는 경우, 소장 질환이 있는 경우에는 이들 효소가 제대로 작용하지 않아 소량의 바이오제닉 아민을 섭취하여도 인체에 유해한 증상이 나타날 수 있다. However, when the biogenic amines produced from foods and the like are ingested, the concentrations of the harmful agents vary depending on the kind of the biogenic amines in the human body, but all types of biogenic amines have harmful effects. In general, the human body contains a monoamine / diamine oxidase that degrades these biogenic amines in the small intestine, and has a system for detoxifying these biogenic amines. However, when ingesting excessive amounts of amines or taking monoamine inhibitors, these enzymes may not function properly in the presence of small bowel disease, so even if a small amount of biogenic amine is consumed, harmful symptoms may appear to the human body.

바이오제닉 아민은 신경계 및 혈관계를 자극하여 식중독 증상을 유발하거나 또는 휘발성 니트로사민(N-nitrosamine)과 같은 강력한 발암 물질로 전환될 수 있는 잠재성을 가지고 있다. 예를 들어, 비위생적으로 처리된 어류에서 부패가 일어나는 경우에 발생하는 히스타민은 이른바 고등어 중독증으로 알려진 식중독을 유발하며, 티라민은 혈관 수축에 관여하여 고혈압을 일으키고 편두통을 유발하기도 한다. 특히, 히스타민의 경우 가장 낮은 농도(ORLLD 50 2,534 mg/kg)에서도 유해성을 나타낸다. Biogenic amines have the potential to stimulate the nervous system and vascular system to cause food poisoning symptoms or to be converted into potent carcinogens such as volatile N-nitrosamine. For example, histamine that occurs when corruption occurs in unsanitary fish causes food poisoning known as mackerel addiction, and tyramine is involved in vasoconstriction leading to hypertension and migraine. Especially, the lowest concentration of histamine (ORLLD 50 2,534 mg / kg) shows toxicity.

이처럼, 바이오제닉 아민의 유해성이 알려지면서, 코덱스(CODEX) 국제식품규격 위원회를 포함하여 세계 각국에서는 바이오제닉 아민을 규제 물질로 지정하여 식품 및 식품 원료 중에 검출되는 바이오제닉 아민의 한계 농도를 설정하여 관리하고 있다. 구체적으로, 고농도의 바이오제닉 아민 함량이 검출될 가능성이 큰 식품 및 식품원료에 대해서는 미국, 유럽, 일본 등 선진국을 중심으로 바이오제닉 아민 검출 허용치를 설정하여 해당 원료 및 제품의 판매 및 수입을 제한하고 있다(표 2 참조). 특히 CODEX 국제식품규격 위원회에서는 어류, 가공어육에 대하여 바이오제닉 아민 상한 농도를 100 ppm 이하로 설정하고 엄격히 관리하고 있으며, 미국 식품의약품안전청(FDA)에서는 수산물의 바이오제닉 아민 상한 농도를 50 ppm 이하로 설정하여 관리하고 있다. Thus, as the harmfulness of biogenic amines has become known, biologic amines have been designated as regulatory substances in all over the world including the Codex Alimentarius Commission, and the limit concentration of biogenic amines detected in food and food ingredients has been set Taking care of it. Specifically, for foods and foodstuffs that are likely to contain high concentrations of biogenic amine, the limits for the detection of biogenic amines in developed countries such as the US, Europe, and Japan are set to limit sales and imports of such raw materials and products (See Table 2). In particular, the Codex Alimentarius Commission has established strict limits on the concentration of biogenic amines in fish and processed fish less than 100 ppm, and the US Food and Drug Administration (FDA) recommends that the upper limit of the biogenic amine of marine products be less than 50 ppm And manage it.

Figure pat00002
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반면, 국내의 경우 현재까지 바이오제닉 아민 생성 가능성이 있는 발효 식품에 대해서 바이오제닉 아민 함량에 대한 규제 농도가 설정되어 있지 않다. 하지만, 최근 식품의약품안전처(KFDA)와 한국장류협회를 중심으로 우리나라 전통 발효 식품, 특히 장류 식품에서의 바이오제닉 아민의 저감화에 대한 논의가 활발하게 진행되고 있다. KFDA와 한국장류협회는 전통 발효 식품을 대상으로 바이오제닉 아민 함량의 현황 파악 및 저감화 가이드라인 설정을 위한 협의를 매년 진행하고 있다. 국내에서 유통되는 식품 종류별 바이오제닉 아민의 농도를 측정한 결과에 따르면, 주로 고단백 발효 식품 류에서 고농도의 바이오제닉 아민이 검출되었다(하기 식품의약품안전처, 식품 중 바이오제닉 아민 모니터링 결과 및 저감화 방안, 2011 참조). 특히 젓갈류에서는 최고 1,150 ppm의 바이오제닉 아민이 검출되었으며, 전통 발효 식품의 하나인 장류에서는 최고 950 ppm이 검출되었다. 그 다음으로 높은 바이오제닉 아민 함량이 검출된 식품으로는 발효 주류, 배추김치 등이 있었다. On the other hand, in Korea, there is no regulatory concentration for biogenic amine content in fermented foods that have the potential to produce biogenic amines. However, recent discussions on the reduction of biogenic amines in Korean traditional fermented foods, especially in the pulverized foods, have been actively conducted by the KFDA and the Korean Soybean Association. The KFDA and the Korean Soybean Association are conducting annual consultations on establishing guidelines for identifying and reducing the biogenic amine content of traditional fermented foods. According to the results of measurement of the concentration of biogenic amines by type of food distributed in Korea, a high concentration of biogenic amine was detected mainly in high protein fermented foods (hereinafter referred to as the Food and Drug Administration, the result of monitoring and reduction of biogenic amines in foods, 2011). In particular, the highest level of 1,150 ppm of biogenic amine was detected in fermented seafood, and up to 950 ppm in traditional fermented soybean was detected. The next highest biogenic amine content was fermented liquor and cabbage kimchi.

Figure pat00003
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따라서 다른 식품에 비하여 상대적으로 높은 바이오제닉 아민 함량을 가지는 발효 식품에서 바이오제닉 아민의 함량을 줄이기 위한 방안이 모색되었다. 하나의 방법으로서는 발효 식품을 제조할 때 바이오제닉 아민을 생성하는 것으로 알려진 미생물의 성장을 억제시키는 방법이다. 예를 들어 특허문헌 1에서는 식품 위해 미생물에 대한 항균성이 우수하고, 면역성 및 항암 활성을 가지며 히스타민 및 티라민과 같은 바이오제닉 아민의 생산을 저감시킬 수 있는 새로운 바실러스 서브틸리스 CSY388 균주 및 이 균주의 배양물이 첨가되어 히스타민 및 티라민이 저감된 발효 식품을 개시하고 있다. 하지만, 특허문헌 1에서 제시된 새로운 균주를 사용하려면 발효 식품을 제조할 때 제조비용이 증가할 수밖에 없으므로 발효 식품을 대량으로 생산하는데 한계가 있을 뿐만 아니라, 발효 미생물의 성장을 억제함으로써 발효 시간이 지나치게 장기간이 되어 생산성이 저하된다는 문제가 있다. Therefore, a method for reducing the content of biogenic amine in fermented foods having a relatively higher biogenic amine content than other foods has been sought. One method is to inhibit the growth of microorganisms known to produce biogenic amines when producing fermented foods. For example, Patent Document 1 discloses a new strain of Bacillus subtilis CSY388 which is excellent in antimicrobial activity against food-borne microorganisms, has immunity and anticancer activity, and can reduce the production of biogenic amines such as histamine and tyramine, Discloses a fermented food in which water is added to reduce histamine and tyramine. However, the use of the new strains disclosed in Patent Document 1 has a limitation in producing a large amount of fermented food because the manufacturing cost of the fermented food is inevitably increased, and the fermentation time is too long There is a problem that productivity is lowered.

한국, 일본, 중국 등 동양권에서는 전통 발효식품으로서 '장(醬)' 문화가 발달하였는데, 아미노산, 맥아당, 포도당, 젖산 등 풍부한 영양분을 가지고 있다. 우리나라에서는 고추장, 된장, 청국장 및 간장 등을 총칭하는 의미로 사용된다. 우리나라에서는 주로 콩을 발효시킨 두장(豆醬)이 활용되었으나, 중국에서는 육류로 만든 육장((肉醬)이나 생선으로 만든 어장(魚醬)이 발달하였다. In Korea, Japan, and China, traditional fermented foods have developed a "jang (醬)" culture. They have rich nutrients such as amino acids, maltose, glucose and lactic acid. In Korea, it is commonly used to refer to kochujang, miso, chonggukjang, and soy sauce. In Korea, soybean fermented soybeans were mainly used. In China, fish meat (fish meat) and fish fish made fish were developed.

간장은 대표적인 전통 발효 식품으로 음식 맛을 내는 중요한 조미료이다. 간장은 제조 방법에 따라 콩으로 빚은 메주에 식염수를 붓고 삭힌 뒤에 우러난 국물인 재래식 간장; 콩이나 탈지 대두 또는 여기에 쌀, 보리, 밀 등의 전분을 섞어 곰팡이균을 넣어 발효, 숙성시킨 뒤 가공하는 양조 간장; 탈지 대두와 소맥 전분의 부산물인 글루텐을 염산으로 가수분해하여 아미노산을 생성시키고 중화제로 중화시킨 후에 만들어지는 산 분해 간장; 탈지 대두, 소맥을 전-처리하여 얻어진 간장덧에 효소제를 첨가하여 침적, 숙성시키는 효소분해 간장; 이들을 혼합하여 가공한 혼합 간장; 및 어패류의 발효에 의해 얻어지는 어간장 등으로 구분될 수 있다. Soy sauce is a typical traditional fermented food, and it is an important seasoning to taste food. Soy sauce is a traditional soy sauce, which has been poured and poured saline into bean meju, which is produced according to the manufacturing method; Soy beans or defatted soybeans, or brewed soy sauce mixed with starch such as rice, barley or wheat to ferment and mature the fungus; Acid-decomposed soy sauce made by hydrolyzing gluten, a by-product of defatted soybean and wheat starch, with hydrochloric acid to produce amino acid and neutralizing with neutralizing agent; Degraded soy sauce, Soy sauce, Soy sauce, Soy sauce, Soy sauce; Mixed soy sauce mixed and processed; And fish tanks obtained by fermentation of fish and shellfish.

그 중에서도 어간장(Fish source)은 신선한 어패류에 식염을 첨가한 뒤 장기간 숙성, 발효되는 과정에서 자가소화 작용에 의해 생성되는 액즙으로서, 원료인 어류의 체내에 존재하였던 효소 및 미생물의 발효 과정에 의하여 가수분해된 액상 단백질 조미료이다. 그런데 종래 어간장을 제조할 때에는 최소한 1년 이상, 길게는 3년 정도의 발효 시간이 요구된다. 이처럼 종래 어간장을 제조할 때 요구되는 장기간의 발효 시간으로 인하여 생산성이 저하된다는 문제점이 있다. Among them, fish source is a juice produced by adding salt to fresh seafood and then self-digesting during fermentation for a long period of fermentation. By the fermentation process of enzymes and microorganisms, It is a decomposed liquid protein seasoning. However, the conventional fermentation process requires a fermentation time of at least one year and at least three years. Thus, there is a problem that the productivity is deteriorated due to the long fermentation time required in the conventional pasta season.

대한민국등록특허 제10-1201184호Korean Patent No. 10-1201184

본 발명은 전술한 종래 기술의 문제점을 해소하기 위하여 제안된 것으로, 본 발명의 목적은 경제적인 공정을 통하여 인체 위해 물질로 알려진 바이오제닉 아민의 함량이 크게 절감된 어간장 및 그 제조 방법을 제공하고자 하는 것이다. DISCLOSURE Technical Problem The present invention has been proposed in order to solve the problems of the prior art described above, and an object of the present invention is to provide an eulogangjang which is greatly reduced in biogenic amine content, will be.

본 발명의 다른 목적은 발효 시간을 크게 절감하여 신속하게 제조될 수 있으며, 맛과 풍미가 개선된 어간장 및 그 제조 방법을 제공하고자 하는 것이다. It is another object of the present invention to provide an eulogy field improved in flavor and flavor, which can be rapidly produced by greatly reducing fermentation time, and a method for producing the eelgrass.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 후술하는 발명의 상세한 설명 등을 참조하면 더욱 분명해질 것이다. Other objects and advantages of the present invention will become more apparent from the following detailed description of the invention.

전술한 목적을 가지는 본 발명은 인체 위해 성분인 바이오제닉 아민의 함량이 감소되고, 필요에 따라 발효 시간이 단축되며 풍미와 맛 등이 크게 개선된 어간장 및 그 제조 방법에 에 관한 것이다. The present invention having the above-mentioned object is directed to a fish tongue field in which the content of biogenic amine as a harmful component for human body is reduced, fermentation time is shortened as necessary, and flavor and taste are greatly improved.

본 발명의 일 측면에 따르면, 본 발명은 발효 대상인 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물 100 중량부에 대하여 식염 20 ~ 30 중량부를 첨가하여 제조된 염장 어류에 글리신을 첨가한 뒤 발효시켜 제조되는 어간장을 제공한다. According to one aspect of the present invention, there is provided an edible fish which is prepared by adding glycine to salted fish prepared by adding 20 to 30 parts by weight of salt to 100 parts by weight of a fish, fish crush, .

예를 들어, 상기 글리신은 상기 어류, 상기 어류 분쇄물 또는 상기 어류 효소 분해물 100 중량부에 대하여 0.1 ~ 10 중량부, 바람직하게는 0.1 ~ 5 중량부, 더욱 바람직하게는 1 ~ 5 중량부, 가장 바람직하게는 3 ~ 5 중량부로 첨가될 수 있다. For example, the glycine is added in an amount of from 0.1 to 10 parts by weight, preferably from 0.1 to 5 parts by weight, more preferably from 1 to 5 parts by weight, most preferably from 1 to 5 parts by weight, based on 100 parts by weight of the fish, crushed fish, Preferably 3 to 5 parts by weight.

하나의 예시적인 실시형태에서, 상기 어류 효소 분해물은, 상기 어류 또는 상기 어류 분쇄물 100 중량부에 대하여 단백질 분해 효소 0.1 내지 10 중량부를 첨가하고 1 ~ 5 시간 동안 40 ~ 60℃의 온도에서 100 ~ 800 rpm에서 교반하여 얻어질 수 있다. In one exemplary embodiment, the fish enzyme hydrolyzate is prepared by adding 0.1 to 10 parts by weight of a protease to 100 parts by weight of the fish or the fish crush, 800 rpm. ≪ / RTI >

이때, 상기 단백질 분해 효소는 예를 들어 델보라아제(delvorase), 플라보자임(flavourzyme), 뉴트라아제(neutrase), 프로타멕스(protamex), 알칼라아제(Alcalase), 키모트립신(α-chymotrypsin), 펩신(pepsin), 트립신(trypsin), 파파인(papain) 및 이들의 조합으로 구성되는 군에서 선택될 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. The proteolytic enzymes may be, for example, delvorase, flavorzyme, neutrase, protamex, Alcalase,? -Chymotrypsin ), Pepsin, trypsin, papain, and combinations thereof. However, the present invention is not limited thereto.

어간장을 제조하기 위하여 사용되는 발효 대상인 상기 어류는 예를 들어 멸치, 디포리, 꽁치, 까나리, 또는 까껌(cacom)을 포함하지만, 본 발명에 따라 사용될 수 있는 어류가 이에 제한되는 것은 결코 아니다. The fish to be fermented which are used to produce the eelgrass include, for example, anchovies, depots, saury, canaries, or cacom, but the fishes which can be used according to the invention are not limited thereto.

본 발명의 다른 측면에 따르면, 본 발명은 발효 대상인 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물 100 중량부에 대하여 식염 20 ~ 30 중량부를 첨가하여 염장 어류를 제조하는 단계; 및 제조된 염장 어류에 글리신을 첨가한 뒤 발효시키는 단계를 포함하는 어간장의 제조 방법을 제공한다. According to another aspect of the present invention, there is provided a method for preparing a salted fish by adding 20 to 30 parts by weight of salted salt to 100 parts by weight of a fish, a fish crushing product or a fish enzyme degradation product to be fermented; And a step of adding glycine to the prepared salted fish, followed by fermentation.

필요한 경우, 상기 발효 단계 이후에 발효 과정에서 얻어진 액젓에서 액체를 선택적으로 여과시키는 단계와, 상기 여과된 액젓에 식염을 투입하는 단계를 더욱 포함할 수 있다. If necessary, the method may further include a step of selectively filtering the liquid from the fish sauce obtained in the fermentation process after the fermentation step, and a step of adding the salt to the filtered fish sauce.

본 발명에 따라 어간장을 발효시키기 전에 아미노산의 하나인 글리신을 첨가하는 간단하면서도 경제적인 공정을 통하여, 최종적으로 제조되는 어간장에서 인체에 유해한 것으로 알려진 바이오제닉 아민의 함량을 효율적으로 저감할 수 있었다. 즉, 본 발명에 따라 제조된 어간장은 종래 제조된 어간장과 비교해서 인체에 위해성이 있으며 특히 발암 유발 물질로 알려진 바이오제닉 아민의 함량이 절감되어 위생 안전성을 향상시킬 수 있다. According to the present invention, a simple and economical process of adding glycine, which is one of the amino acids, before fermentation of the fish paste is effective in reducing the content of biogenic amines which are known to be harmful to human body in the finally prepared eel. In other words, the eelland produced according to the present invention has a health risk compared to conventional eelgrass, and the content of biogenic amine, which is known as a carcinogenic substance, is reduced, thereby improving sanitary safety.

또한, 액젓으로 발효되기 전에 소정의 단백질 분해 효소를 첨가함으로써, 어간장을 제조하기까지의 발효 시간이 종전 12개월 이상 소요되었던 것을 6개월 전후까지로 단축할 수 있으므로, 어간장 제조를 위한 발효 시간을 크게 절감할 수 있어서 어간장 제조를 위한 생산성을 향상시킬 수 있다. 아울러, 본 발명에 따라 제조된 어간장은 맛과 풍미가 크게 개선되었다. In addition, by adding a predetermined proteolytic enzyme before fermentation with a fish sauce, the fermentation time until the preparation of the fish paste can be shortened to about 6 months before the fermentation time for the fish paste production was shortened to 12 months or more. It is possible to improve the productivity for manufacturing the fish paste. In addition, the fish eel prepared according to the present invention has greatly improved taste and flavor.

도 1은 본 발명의 예시적인 실시형태에 따라 바이오제닉 아민 함량이 저감되고 발효 시간을 단축시킬 수 있는 어간장을 제조하는 공정을 개략적으로 도시한 순서도이다.
도 2a 내지 도 2d는 각각 본 발명의 예시적인 실시예에 따라 멸치 분쇄물에 단백질 분해효소를 첨가하여 효소 분해한 뒤의 시간 경과에 따른 Brix 변화를 측정한 그래프이다.
도 3은 본 발명의 예시적인 실시예에 따라 멸치 분쇄물에 단백질 분해효소를 첨가하여 효소 분해한 뒤에 유리 아미노산의 함량을 측정한 그래프이다.
도 4a 내지 도 4c는 각각 본 발명의 예시적인 실시예에 따라 멸치 분쇄물에 첨가되는 뉴트라아제 첨가 농도에 따른 멸치 분쇄물의 분해 정도를 측정한 그래프이다.
도 5a 내지 도 5c는 각각 본 발명의 예시적인 실시예에 따라 멸치 분쇄물에 첨가되는 플라보자임 첨가 농도에 따른 멸치 분쇄물의 분해 정도를 측정한 그래프이다.
도 6은 본 발명의 예시적인 실시예에 따라 멸치 효소 분해물에 각각 다른 농도의 글리신을 첨가하고 숙성 기간 별 유리 아미노산의 함량 변화를 측정한 그래프이다. 도 6에서 C1 내지 C3는 각각 비교예 1 내지 비교예 3에서 제조된 어간장을 대상으로 한 것이고, T1 내지 T3는 각각 실시예 1 내지 실시예 3에서 제조된 어간장을 대상으로 한 것을 나타낸다.
도 7a 내지 도 7f는 각각 본 발명의 예시적인 실시예에 따라 멸치 효소 분해물에 각각 다른 농도의 글리신을 첨가하고 숙성 기간 별 아미노산 함량의 변화 및 로그 함수를 나타낸 그래프이다. 도 7a 내지 도 7f에서 T1 내지 T3은 각각 실시예 1 내지 실시예 3에서 제조된 어간장을 대상으로 한 것이고, C1 내지 C3은 비교예 1 내지 비교예 3에서 제조된 어간장을 대상으로 한 것을 나타낸다.
도 8은 본 발명의 예시적인 실시예에 따라 멸치 효소 분해물에 각각 다른 농도의 글리신을 첨가하고 숙성 기간 별 바이오제닉 아민 함량의 변화를 측정한 그래프이다. 도 8에서 T1 내지 T3는 각각 실시예 1 내지 실시예 3에서 제조된 어간장을 대상으로 한 것이고, C3은 비교예 3에서 제조된 어간장을 대상으로 한 것을 나타낸다.
도 9는 본 발명의 예시적인 실시예에 따라 멸치 효소 분해물에 각각 다른 농도의 글리신을 첨가하고 4개월 숙성시킨 상태에서 바이오제닉 아민 함량 분석을 위한 HPLC 크로마토그램을 나타낸 그래프이다. 도 9에서 T1 내지 T3은 각각 실시예 1 내지 실시예 3에서 제조된 어간장을 대상으로 한 것이고, C3은 비교예 3에서 제조된 어간장을 대상으로 한 것을 나타낸다.
도 10a 내지 도 10e는 각각 본 발명의 예시적인 실시예에 따라 멸치 효소 분해물에 각각 다른 농도의 글리신을 첨가하여 얻어진 어간장 발효 여과액의 향기 성분 분석(GC/MS) 결과를 도시한 그래프이다. 도 10a 내지 도 10e에서 T1 내지 T3은 각각 실시예 1 내지 실시예 3에서 제조된 어간장을 대상으로 한 것이고, C2 및 C3은 각각 비교예 2 및 비교예 3에서 제조된 어간장을 대상으로 한 것을 나타낸다. 또한 1은 트리메틸아민, 2는 아세트산, 6은 부탄산, 7은 3-메틸부탄산, 8은 2-메틸부탄산, 11은 벤즈알데하이드, 12는 벤젠아세트알데하이드를 나타낸다.
BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a flow chart schematically illustrating a process for producing a fish trough which can reduce the fermentation time and reduce the biogenic amine content in accordance with an exemplary embodiment of the present invention. FIG.
FIGS. 2A to 2D are graphs showing changes in Brix over time after enzymatic degradation by adding proteolytic enzyme to anchovy crushed according to an exemplary embodiment of the present invention. FIG.
FIG. 3 is a graph showing the content of free amino acid after enzymatic degradation by adding proteolytic enzyme to anchovy crushed according to an exemplary embodiment of the present invention. FIG.
4A to 4C are graphs showing the degree of decomposition of the anchovy crushed material according to the concentration of the added ntrease added to the anchovy crushed material according to the exemplary embodiment of the present invention, respectively.
FIGS. 5A to 5C are graphs showing the degree of decomposition of the anchovy crush according to the concentration of flavosymes added to the anchovy crush according to the exemplary embodiment of the present invention, respectively.
FIG. 6 is a graph showing changes in content of free amino acids in different fermented anchovy hydrolysates according to an exemplary embodiment of the present invention, with different concentrations of glycine added. In FIG. 6, C1 to C3 are for the fishy spots prepared in Comparative Examples 1 to 3 respectively, and T1 to T3 are for the fishy spots prepared in Examples 1 to 3, respectively.
FIGS. 7A to 7F are graphs showing changes in amino acid content and logarithmic functions of anchovy enzyme hydrolysates with different concentrations of glycine added according to an exemplary embodiment of the present invention, respectively. FIG. In FIGS. 7A to 7F, T1 to T3 are intended for the fish-breeding grounds prepared in Examples 1 to 3, and C1 to C3 are for the fish-breeding grounds prepared in Comparative Examples 1 to 3.
FIG. 8 is a graph showing changes in the content of biogenic amines in different fermentation periods by adding glycine at different concentrations to anchovy enzyme hydrolyzate according to an exemplary embodiment of the present invention. FIG. In FIG. 8, T1 to T3 are for the fish-breeding grounds prepared in Examples 1 to 3, respectively, and C3 is for the fish-breeding ground prepared in Comparative Example 3. FIG.
FIG. 9 is a graph showing HPLC chromatograms for analyzing the content of biogenic amines in anchovy enzyme hydrolyzate with different concentrations of glycine added and aged for 4 months according to an exemplary embodiment of the present invention. FIG. In FIG. 9, T1 to T3 are for the fish-breeding grounds prepared in Examples 1 to 3, respectively, and C3 is for the fish-breeding ground prepared in Comparative Example 3. FIG.
10A to 10E are graphs showing the results of analysis of fragrance components (GC / MS) of an anchovy fermented filtrate obtained by adding glycine at different concentrations to anchovy enzyme hydrolyzate according to an exemplary embodiment of the present invention, respectively. T1 to T3 in Figs. 10A to 10E are for the fishy spots prepared in Examples 1 to 3, respectively, and C2 and C3 are for the fishy spots prepared in Comparative Example 2 and Comparative Example 3, respectively . 1 represents trimethylamine, 2 represents acetic acid, 6 represents butanoic acid, 7 represents 3-methylbutanoic acid, 8 represents 2-methylbutanoic acid, 11 represents benzaldehyde, and 12 represents benzeneacetaldehyde.

본 발명자들은 바이오제닉 아민의 함량을 절감하고 짧은 시간에 발효될 수 있는 어간장 및 그 제조 방법을 연구하여, 어간장을 제조할 때 글리신을 첨가하고 단백질 분해 효소를 가함으로써 이러한 기술적 효과를 달성할 수 있다는 점에 착안하여 본 발명을 완성하였다. 이하, 필요한 경우에는 첨부하는 도면을 참조하면서 본 발명을 상세하게 설명한다. The inventors of the present invention have studied a fish tongue which can be fermented in a short time by reducing the content of bio-genic amines and a method for preparing the fish tongue, and can achieve such a technical effect by adding glycine and adding protease The present invention has been completed. Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings when necessary.

도 1은 본 발명의 예시적인 실시형태에 따라 바이오제닉 아민 함량이 저감되고 발효 시간을 단축시킬 수 있는 어간장을 제조하는 공정을 개략적으로 도시한 순서도이다. 도 1을 참조하면서 본 발명에 따라 바이오제닉 아민의 함량을 저감할 수 있으며 필요한 경우에 어간장을 제조하기까지의 발효 시간이 크게 단축된 어간장 및 그 제조 방법을 동시에 설명한다. BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a flow chart schematically illustrating a process for producing a fish trough which can reduce the fermentation time and reduce the biogenic amine content in accordance with an exemplary embodiment of the present invention. FIG. 1, the euglenoid having a reduced fermentation time until the preparation of the fish paste can be reduced, if necessary, according to the present invention and its preparation method will be explained at the same time.

먼저, 어간장을 제조할 때 발효 대상이 되는 원료인 어류를 필요한 경우에 흐르는 물로 깨끗이 세수하여 준비한다(S110 단계). 어간장의 원료인 어류로는 종래 어간장을 제조하였을 때 발효 대상인 임의의 어류가 사용될 수 있다. 예시적인 실시형태에 따르면, 발효 대상으로 사용되는 어류로서 멸치, 디포리, 밴댕이, 꽁치 및/또는 까껌(cacom)과 같이 종래 어간장을 제조하기 위하여 사용되었던 어류가 사용될 수 있으며, 바람직하게는 멸치가 본 발명에 따른 어간장을 제조하기 위한 어류로서 사용될 수 있다. First, when producing the fish paste, fish, which is a raw material to be fermented, is cleaned with water flowing when necessary and prepared (Step S110). As the raw fish of the eel, there may be used any kind of fish which is the object of fermentation when the conventional eel of the fish is manufactured. According to an exemplary embodiment, the fish used for fermentation may be those fish which have been used to produce conventional eelgrass such as anchovies, depots, wand, saury and / or cacom, And can be used as a fish for manufacturing an ejaculation field according to the invention.

이어서 선택적으로 준비된 어류를 분쇄(chopping), 바람직하게는 습식 분쇄하여 어류 분쇄물을 얻는다(S120 단계). 하나의 예시적인 실시형태에서, 준비된 어류를 chopper로 분쇄하여 페이스트(paste) 상태로 만들거나, 또는 준비된 어류를 2 ~ 20 ㎜의 크기로 마쇄하여 어간장 원료로 활용될 수 있다. 특히 분쇄 공정을 거치지 않은 어류와 비교해서 분쇄 공정에 따라 예를 들어 페이스트 상태로 변환된 어류 분쇄물을 어간장 원료로 사용하는 경우, 예를 들어 단백질 분해 효소의 처리에 따른 가수분해 효율을 개선할 수 있으며, 발효 과정에서 작용하는 미생물의 작용을 향상시킬 수 있어서, 이에 따라 전체적인 발효, 숙성 시간이 단축될 수 있는 이점을 가질 수 있다. Subsequently, optionally prepared fish is chopped, preferably wet-milled to obtain a crushed fish (step S120). In one exemplary embodiment, the prepared fish may be pulverized with a chopper into a paste state, or the prepared fish may be ground to a size of 2 to 20 mm to be used as a fish tongue raw material. Particularly, when crushed fish pulverized in a pulverizing process, for example, in paste form, is used as a raw material for tongue-in-ground, compared to fish which have not undergone pulverization, for example, the efficiency of hydrolysis due to proteolytic enzyme treatment can be improved And can improve the action of the microorganisms acting in the fermentation process, thereby having an advantage that the overall fermentation and aging time can be shortened.

분쇄되지 않은 어류 또는 분쇄 단계(S120 단계)를 거친 어류 분쇄물을 예를 들어 대략 50 ~ 70℃의 온도에서 약 30분 ~ 1시간 동안 저온 열처리 처리한다(S130 단계). 저온 열처리에 의하여 어류 또는 어류 분쇄물 중에 부패를 야기하는 균주를 일정량 감소시키거나 또는 이들 균주의 초기 활동 및 활성을 일시적 저해시킬 수 있으며, 후술하는 발효 공정에서 어류 또는 어류 분쇄물의 초기 부패를 방지할 수 있다. The unfrozen fish or the crushed fish which has undergone the crushing step (step S 120) is subjected to a low-temperature heat treatment at a temperature of, for example, about 50 to 70 ° C for about 30 minutes to 1 hour (step S 130). It is possible to reduce a certain amount of the microorganism causing the microorganism to corruption in the fish or fish crushed material by the low temperature heat treatment or to temporarily inhibit the initial activity and activity of the microorganism and to prevent the initial corruption of the fish or fish crushed material in the fermentation process .

이어서, 저온 열처리된 어류 또는 어류 분쇄물에 대하여 선택적으로 단백질 분해 효소를 처리하여 어류 또는 어류 분쇄물을 가수분해시킨 효소 분해물을 얻는다(S140 단계). 본 단계에서 어류 또는 어류 분해물에 대하여 첨가, 처리되는 단백질 분해 효소(protease)는 식품을 가공, 처리할 때 사용되는 임의의 단백질 분해 효소로서 식품 등급의 것을 사용할 수 있다. Next, the low-temperature heat-treated fish or the fish crushed material is selectively treated with a proteolytic enzyme to obtain an enzyme hydrolyzate obtained by hydrolyzing the fish or fish crushed material (step S140). Protease, which is added to and processed for fish or fish lysates in this step, can be any food grade proteinaceous enzyme used for processing and processing food.

본 발명에 따른 하나의 비제한적인 예시적인 실시형태에서, 사용될 수 있는 단백질 분해 효소는 델보라아제(delvorase), 플라보자임(flavourzyme), 뉴트라아제(neutrase), 프로타멕스(protamex), 알칼라아제 (Alcalase), 키모트립신(α-chymotrypsin), 펩신(pepsin), 트립신(trypsin), 파파인(papain) 및 이들의 조합으로 구성되는 군에서 선택될 수 있지만, 이에 제한되지 않는다. 예를 들어, 단백질 분해 효소로서, 분해 원료로 사용된 어류의 발효 효율 상승을 위한 가수분해에 적합한 것으로 알려진 델보라아제, 플라보자임, 뉴트라아제, 프로타멕스, 알칼라아제 및 이들의 조합으로 구성되는 군에서 선택될 수 있다. In one non-limiting exemplary embodiment according to the present invention, proteolytic enzymes that may be used include delvorase, flavorzyme, neutrase, protamex, But are not limited to, those selected from the group consisting of Alcalase,? -Chymotrypsin, pepsin, trypsin, papain, and combinations thereof. For example, as a protease, it is possible to use, as a digesting raw material, delborase, flavozyme, neutraze, protramase, alkalase and combinations thereof known to be suitable for hydrolysis for increasing the fermentation efficiency of fish And the like.

하나의 예시적인 실시형태에 따라 어류 또는 그 분쇄물에 처리되는 단백질 분해 효소의 하나인 플라보자임(flavourzyme)은 높은 엑소(exo) 활성 및 낮은 엔도(endo) 활성을 가지는 복합 효소이다. 일반적인 가수분해물과 달리 플라보자임으로 처리하여 얻어지는 단백질 가수분해물은 쓴맛이 거의 생성되지 않으며, 특히 양호한 식염 내성을 가지고 있어 본 발명에 따른 어류 또는 그 분쇄물의 단백질 가수분해에 적합할 수 있다. According to one exemplary embodiment, flavorzyme, one of the proteolytic enzymes that are processed into fish or its pulverized material, is a complex enzyme having high exo activity and low endo activity. Unlike a general hydrolyzate, the protein hydrolyzate obtained by treatment with flavosaurus hardly produces a bitter taste. In particular, the protein hydrolyzate has good salt tolerance and can be suitable for protein hydrolysis of a fish or a pulverized product according to the present invention.

하나의 예시적인 실시형태에서, 풍미 향상 및/또는 어간장의 발효 시간을 단축, 감소하기 위하여 첨가되는 단백질 분해 효소는 발효 원료로 사용된 어류 또는 어류 분쇄물 100 중량부에 대하여 0.1 ~ 10 중량부, 바람직하게는 0.1 ~ 5 중량부, 더욱 바람직하게는 0.5 ~ 3 중량부의 비율로 첨가, 처리될 수 있다. 본 명세서에서 달리 언급하지 않는 한, '중량부'라는 용어는 배합되는 성분들에 대한 상대적인 중량 비율을 의미하는 것으로 이해된다. In one exemplary embodiment, the proteolytic enzyme added to improve the flavor and / or shorten or reduce the fermentation time of the eel of the eel is 0.1 to 10 parts by weight based on 100 parts by weight of the fish or fish meal used as the fermentation raw material, Preferably 0.1 to 5 parts by weight, more preferably 0.5 to 3 parts by weight. Unless otherwise stated herein, the term " parts by weight " is understood to mean the relative weight ratios to the ingredients being compounded.

단백질 분해 효소의 첨가량이 전술한 범위를 충족하는 경우 식품의 풍미 또는 당도(Brix)의 향상을 기대할 수 있고(도 2a 내지 도 2d 참조), 유리 아미노산의 함량이 크게 증가하여(도 3 참조), 효소 첨가에 따른 어류의 분해도가 향상되어(도 4a 내지 도 4c; 도 5a 내지 도 5e 참조), 어간장을 제조하기 위한 발효 시간을 크게 단축할 수 있다. 단백질 분해 효소의 첨가량이 전술한 범위 미만이면 이러한 효과를 기대하기 어렵다. 반면, 단백질 분해 효소의 첨가량이 전술한 범위를 초과하면, 추가적으로 첨가되는 효소의 양에 비례하여 풍미의 향상, 유리 아미노산의 함량 증가, 분해도 향상을 통한 발효 시간 단축의 효과는 증가하지 않기 때문에, 상대적으로 고가의 단백질 분해 효소를 낭비하는 결과가 초래될 수 있다. When the addition amount of the protease is within the above range, improvement of the flavor or sugar content of the food can be expected (see Figs. 2A to 2D), and the content of the free amino acid is greatly increased (see Fig. 3) The degree of degradation of fish according to the addition of the enzyme is improved (see Figs. 4A to 4C; Figs. 5A to 5E), and the fermentation time for producing the fish-growing season can be greatly shortened. If the addition amount of the protease is less than the above-mentioned range, it is difficult to expect such an effect. On the other hand, if the addition amount of the protease exceeds the above range, the effect of shortening the fermentation time by increasing the flavor, content of the free amino acid and increasing the degree of degradation does not increase in proportion to the amount of the enzyme added additionally, Which may result in wasting expensive proteolytic enzymes.

하나의 예시적인 실시형태에서, 어류 또는 어류 분쇄물에 단백질 분해 효소를 처리하여 어류 효소 분해물을 얻는 공정(S140 단계)은 전술한 단백질 분해 효소를 어류 또는 어류 분쇄물에 대하여 0.1 ~ 10 중량부, 바람직하게는 0.1 ~ 5 중량부, 더욱 바람직하게는 0.5 ~ 3 중량부를 첨가한 뒤, 이들 단백질 가수분해 효소의 최적 활성 온도, 예를 들어 40 ~ 60℃의 온도에서 1 ~ 5 시간, 예를 들어 1 ~ 3 시간 가수분해 공정을 수행할 수 있다. 이러한 조건에서 단백질 가수분해 효소에 의하여 어류의 가수분해가 신속하게 일어나기 때문에, 어류의 초기 분해율을 향상시킬 수 있다. 이때, 바람직하게는 단백질 가수분해 효소가 첨가된 용기 등을 적절히 회전시키면서 이 과정을 진행할 수 있는데, 예를 들어 100 ~ 800 rpm, 바람직하게는 100 ~ 500 rpm의 속도로 교반하면서 단백질 가수분해 과정을 진행할 수 있다. 이러한 과정에 의하여 어류 효소 분해물을 얻을 수 있다. In one exemplary embodiment, the step of obtaining a fish enzyme hydrolyzate by treating the fish or fish meal with proteolytic enzyme (step S140) comprises adding 0.1 to 10 parts by weight of the protease to the fish or fish meal, Preferably from 0.1 to 5 parts by weight, more preferably from 0.5 to 3 parts by weight, and then the protein hydrolyzing enzyme is allowed to react at an optimum activity temperature of, for example, 40 to 60 ° C for 1 to 5 hours, A hydrolysis process can be performed for 1 to 3 hours. Under these conditions, hydrolysis of the fish occurs rapidly by the protein hydrolyzing enzyme, so that the initial degradation rate of the fish can be improved. In this case, preferably, the protein hydrolyzate-containing container may be rotated while appropriately rotating. For example, the protein hydrolysis process may be performed while stirring at 100 to 800 rpm, preferably 100 to 500 rpm. You can proceed. By this process, the fish enzyme hydrolyzate can be obtained.

어간장 제조를 위해 사용되는 원료인 어류, 어류 분쇄물, 또는 선택적인 단백질 가수분해 효소 처리에 의하여 얻어지는 어류 효소 분해물에 식염을 투입하고, 어간장에 적절한 농도의 염분을 가지도록 조정한다(S150 단계). 첨가되는 식염은 어간장 특유의 간을 내는데 활용될 수 있으며, 어류가 발효, 숙성될 때 수분 활성도와 삼투압을 조절하여 어류를 산패시킬 수 있는 부패 미생물의 생장을 억제하여 어간장의 관능성과 저장성을 향상시키는데 기여한다. 염장 상태의 어류를 얻기 위하여 첨가되는 식염의 종류는 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 천일염, 정제염 및 천일염과 정제염의 혼합 염을 사용할 수 있다. In step S150, salt is added to the digestive enzymes obtained by treatment with fish, crushed fish, or selective protein hydrolytic enzymes, which are raw materials used for the preparation of the fish fillet, and the salty fish has an appropriate concentration in the fish fillet. The added salt can be used to produce liver specific liver. When the fish is fermented and aged, it regulates water activity and osmotic pressure to inhibit the growth of spoilage microorganisms that can spoil the fish, thereby improving the sensory and storage properties of the fish. Contributing. There is no particular limitation on the type of salt added to obtain a salted fish. For example, salts of sodium chloride, salts of tablets and salts of salt and salt may be used.

이때, 식염은 발효 대상인 어류, 어류 분쇄물 또는 어류의 효소 분해물 100 중량부에 대하여 20 ~ 30 중량부의 비율로 첨가될 수 있다. 식염의 첨가량이 이보다 적으면 분해 대상인 분쇄 어류에 식염이 염장되지 않아 어류가 발효되지 못하고 오히려 부패하는 문제가 있을 수 있다. 한편, 식염의 첨가량이 이보다 많게 되면 발효에 의하여 최종적으로 제조되는 어간장 중에 염분의 함량이 지나치게 높아져서 식감이 저하될 우려가 있다. At this time, the salt may be added in a proportion of 20 to 30 parts by weight based on 100 parts by weight of the enzyme decomposition product of the fish, fish crushing product or fish to be fermented. If the added amount of salt is less than this, the salt can not be salted in the crushed fish to be degraded, and the fish may not be fermented, but may be corrupted. On the other hand, if the added amount of the salt is more than the above, the content of the salt in the tongue made finally by fermentation becomes too high, and the texture may be lowered.

이어서, 염장 처리가 된 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물에 글리신을 첨가한다(S160 단계). 글리신은 천연 상태에 존재하는 아미노산 중에서 구조가 가장 간단한 아미노산으로서, 척추동물의 피부에 다수 존재하는 콜라겐을 구성하는 주요 아미노산이다. 글리신은 생체 내에서 중앙 신경계에서 억제 신경전달물질(inhibitory neurotransmitter)로 기능하며, 동물 및 애완동물용 사료 첨가제나 음식물의 단맛을 보충하거나 약물의 흡수를 보조하는 성분으로서 사용되기도 하며, 화장품에서 버퍼링제로서 기능하기도 하며, 다른 화합물을 생산하기 위한 중간체로서 활용되고 있다. Then, glycine is added to the salted fish, fish pulverized product or fish enzyme degraded product (step S160). Glycine is the simplest amino acid among the amino acids present in the natural state, and it is the main amino acid constituting the collagen existing in the skin of the vertebrate. Glycine functions as an inhibitory neurotransmitter in the central nervous system in vivo and can be used as a feed additive for animals and pets or as a component to supplement the sweetness of food or to aid absorption of drugs, And is used as an intermediate for producing other compounds.

본 발명의 예시적인 실시형태에 따르면, 어간장으로 발효되기 전에 염장된 상태인 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물에 글리신을 첨가한 뒤, 발효 공정을 진행하면 최종적으로 제조되는 어간장에 함유된, 인체에 해로운 바이오제닉 아민의 함량을 크게 줄일 수 있다(도 8 및 도 9 참조). 종래 어간장을 제조하기 위하여 어류를 발효, 숙성시키는 과정에서 어류가 부패하면서 티라민, 히스타민, 푸트레신, 카다베린, 스퍼미딘, 베타-페닐에틸아민, 트립타민, 아그마틴, 또는 이들의 혼합물, 특히 히스타민 또는 카다베린과 같은 다수의 바이오제닉 아민이 생성된다. 이들 바이오제닉 아민은 인체 내에서 식중독과 같은 독성을 유발할 수 있어 위해 물질로 보고되었다. 본 발명에 따르면, 어간장을 제조할 때, 글리신을 첨가함으로써 어간장이 발효될 때 생성되는 이들 바이오제닉 아민, 특히 히스타민이나 카다베린과 같은 인체 위해 물질인 바이오제닉 아민의 함량을 크게 저감할 수 있다. According to an exemplary embodiment of the present invention, glycine is added to a fish, fish crush, or fish enzyme degraded material which is in a salted state before fermentation into an eel, and then the fermentation process is performed, Can significantly reduce the content of harmful biogenic amines (see FIGS. 8 and 9). In the process of fermenting and aging the fish in order to manufacture the conventional fish paste, the fish are decayed and the fish are decomposed by the action of tyramine, histamine, putrescine, cadaverine, spermidine, beta-phenylethylamine, tryptamine, Many biogenic amines such as histamine or cadaverine are produced. These biogenic amines have been reported to be harmful because they can cause toxicity such as food poisoning in the human body. According to the present invention, it is possible to greatly reduce the content of biogenic amines, especially biogenic amines, such as histamine and cadaverine, which are generated when fermented fish tongue is added to glycine when glycine is added.

하나의 예시적인 실시형태에서, 글리신은 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물의 식염 투입에 의한 염장 어류 100 중량부에 대하여 0.1 ~ 10 중량부, 바람직하게는 0.1 ~ 5 중량부, 더욱 바람직하게는 1 ~ 5 중량부, 가장 바람직하게는 3 ~ 5 중량부로 첨가될 수 있다. 글리신의 함량이 이보다 적은 경우에는 바이오제닉 아민의 저감 효과를 기대하기 어렵고, 글리신의 함량이 이보다 많은 경우라 하더라도 바이오제닉 아민 함량의 저감화 효과는 추가되는 양에 비례하여 증가하지 않으며, 오히려 글리신의 감미로 인하여 최종적으로 제조되는 어간장의 풍미와 맛을 저하시킬 가능성이 있다. In one exemplary embodiment, glycine is added in an amount of from 0.1 to 10 parts by weight, preferably from 0.1 to 5 parts by weight, more preferably from 0.1 to 5 parts by weight, per 100 parts by weight of salted fish by the addition of salt of fish, fish crush or fish enzyme hydrolyzate 1 to 5 parts by weight, and most preferably 3 to 5 parts by weight. When the content of glycine is less than that, it is difficult to expect a reduction effect of the biogenic amine. Even when the content of glycine is larger than that, the effect of decreasing the content of the biogenic amine does not increase in proportion to the added amount. There is a possibility that the flavor and taste of the finally produced eel.

글리신의 첨가가 끝나면, 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물을 숙성, 발효시킨다(S170 단계). 발효 단계를 통하여 염장 처리된 어류 또는 효소 분해물이 액젓 상태로 변화하게 된다. 발효 과정은 통상적인 방법에 의하여 진행될 수 있는데, 온도 및 습도 등 발효 조건을 적절히 조절할 수 있는 저장고에서 진행되거나, 실온 조건에서 직사광선을 피할 수 있는 장소를 선택하여 보관할 수 있다. 숙성, 발효 단계는 예를 들어 30 ~ 40℃의 온도, 20 ~ 30%의 염도 및 정치 조건에서 이루어질 수 있다. 만약, 전술한 단백질 분해 효소 처리 단계(S140 단계)인 경우에는 발효 기간은 12개월 이상, 예를 들어 12 ~ 24개월 동안 수행될 수 있다. 반면, 단백질 분해 효소 처리 단계에 따라 얻어진 어류 효소 분해물을 염장 처리하고, 글리신을 첨가한 뒤 발효 단계를 수행하는 경우에는, 단백질 가수분해 효소에 의한 초기 가수분해물로 인하여 발효 시간을 4 ~ 12개월, 바람직하게는 6 ~ 8 개월 정도로 크게 줄일 수 있는 이점이 있다. When the addition of glycine is completed, the fish, the fish crushed product or the fish enzyme hydrolyzate is aged and fermented (step S170). The fish or the enzymatic degradation product subjected to the salting treatment through the fermentation step is changed into the sauce. The fermentation process can be carried out by a conventional method. The fermentation process can be carried out in a storage room where the fermentation conditions such as temperature and humidity can be appropriately controlled, or a place where direct sunlight can be avoided at room temperature can be selected and stored. The aging and fermentation step can be carried out at a temperature of, for example, 30 to 40 ° C, a salinity of 20 to 30% and a stationary condition. In the case of the protease treatment step (step S140), the fermentation period may be 12 months or more, for example, 12 to 24 months. On the other hand, when the enzymatic hydrolyzate obtained by the protease treatment step is salted and the fermentation step is carried out after adding glycine, the fermentation time is 4 to 12 months due to the initial hydrolyzate by the protein hydrolyzing enzyme, And preferably 6 to 8 months.

발효 단계에서 원료로 사용된 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물이 원료로 사용된 어류에 함유된 효소 또는 첨가된 단백질 가수분해 효소 및 미생물 등의 작용으로 가지 분해 및 숙성되면서 액젓이 얻어진다. 예를 들어, 발효 단계(S170 단계)를 통하여 젓갈 또는 액젓 형태의 발효 식품이 얻어질 수 있다. 사용되는 원료 어류에 따라 멸치젓갈(액젓), 꽁치젓갈(액젓), 디포리젓갈(액젓), 까껌젓갈(액젓) 등이 얻어질 수 있으며, 하나의 예로서 멸치젓갈(액젓)을 얻을 수 있다. The fish sauce is obtained by decomposing and aging the fish, the fish crushed product or the fish enzyme used as the raw material in the fermentation stage by the action of the enzyme contained in the fish used as the raw material, the added protein hydrolyzing enzyme and the microorganism. For example, a fermented food in the form of a salted or a fish sauce may be obtained through a fermentation step (step S170). Anchovy salted fish (fish sauce), saury salted fish sauce (fish sauce), deporit fermented fish sauce (fish sauce), and cauliflower salted fish sauce (fish sauce) can be obtained according to the raw fish to be used, and an anchovy salted fish sauce (fish sauce) can be obtained as an example.

소정 기간의 발효 단계를 통하여 변환된 액젓에서 액상만을 분리하는 단계가 수행된다(S180 단계). 예시적인 여과 공정으로서, 적절한 크기의 체 또는 거름망, 또는 면포를 이용하여 젓갈 상태인 어류와 액젓 상태인 액상을 분리할 수 있다. A step of separating only the liquid phase from the converted fish sauce through the fermentation step for a predetermined period is performed (operation S180). As an exemplary filtration process, an appropriately sized sieve or sieve can be used to separate the fish in the fermented state and the liquid phase in the fish sauce state by using cotton.

이어서, 필요한 경우에 다시 소정의 식염을 투입하여 어간장에 적절한 염도로 조정하여(S190 단계), 최종적으로 바이오제닉 아민의 함량이 저감된 어간장을 제조한다(S200 단계). Subsequently, if necessary, a predetermined salty salt is added to adjust the salinity to an appropriate salinity (Step S190), and finally a saliva containing the reduced amount of the biogenic amine is prepared (Step S200).

따라서 본 발명의 일 관점에 따르면 본 발명은 전술한 과정을 통하여 얻어지는, 바이오제닉 아민의 함량이 저감된 어간장에 관한 것이다. 예를 들어, 본 발명에 따른 어간장은 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물 100 중량부에 대하여 식염 20 ~ 30 중량부를 첨가하여 제조된 염장 어류에 글리신을 예를 들어 2 ~ 20 중량부, 바람직하게는 3 ~ 10 중량부로 첨가한 뒤 발효시켜 제조될 수 있다. 전술한 것과 같이, 바이오제닉 아민에 대한 중독은 인체에 독성을 유발할 수 있는 것으로 보고되었다. 이에, 본 발명에 따르면 발효 단계 이전에 글리신을 첨가함으로써 어간장에서 바이오제닉 아민의 함량을 감소시킬 수 있다는 점에 근거한다. 본 발명에 따라 어간장에 그 함량이 감소될 수 있는 바이오제닉 아민은 티라민, 히스타민, 푸트레신, 카다베린, 스퍼민, 스퍼미딘, 페닐에틸아민, 트립타민, 아그마틴 및 이들의 혼합물이며, 특히 바람직하게는 카다베린, 히스타민일 수 있다. Therefore, according to one aspect of the present invention, the present invention relates to a fish paste which is obtained through the above-described process and whose content of biogenic amine is reduced. For example, the eel of the present invention may be prepared by adding 20 to 30 parts by weight of salt to 100 parts by weight of fish, fish crush or fish enzyme degradation product, adding 2 to 20 parts by weight of glycine, May be added in an amount of 3 to 10 parts by weight and fermented. As noted above, poisoning to biogenic amines has been reported to be toxic to humans. Thus, the present invention is based on the fact that the content of biogenic amines can be reduced in the eel by adding glycine before the fermentation step. According to the present invention, the biogenic amines which can be reduced in the content of the eel in the eel gland are selected from the group consisting of tyramine, histamine, putrescine, cadaverine, spermine, spermidine, phenylethylamine, tryptamine, It may be cadaverine, histamine.

또한, 본 발명의 다른 측면에 따르면 본 발명은 전술한 단계를 통하여 바이오제닉 아민의 함량이 저감된 어간장을 제조하는 방법에 관한 것이다. 예시적인 실시형태에서 어간장을 제조하는 방법은, 발효 대상인 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물 100 중량부에 대하여 소금 20 ~ 30 중량부를 첨가하여 염장 어류를 제조하는 단계와, 제조된 염장 어류에 글리신, 예를 들어 2 ~ 20 중량부를 첨가한 뒤 발효시키는 단계를 포함할 수 있다. According to another aspect of the present invention, there is provided a method for producing an amino acid reduced in content of bianenic amines through the above-described steps. In an exemplary embodiment, a method for manufacturing an eel gill is provided by adding 20 to 30 parts by weight of salt to 100 parts by weight of a fish, a fish crush or a fish enzyme hydrolyzate to be fermented to prepare salted fish, , For example, 2 to 20 parts by weight, and then fermenting.

이하, 예시적인 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 하기 기재된 실시예는 단지 본 발명을 설명하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 권리범위가 하기 기재된 실시예에 기재된 발명으로 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to exemplary embodiments. The embodiments described below are only for explaining the present invention, and the scope of the present invention is not limited to the invention described in the embodiments described below.

[원료 구입][Purchase of raw materials]

원료인 멸치는 기장제일수산에서 냉동멸치를 구매하였으며, 식염인 소금은 정제염과 천일염이 혼합되어 있는 형태의 꽃소금을 사용하였다. 단백질 분해 효소로 사용한 델보라아제(delvorase), 플라보자임(flavourzyme), 뉴트라아제(neutrase), 알칼라아제(alcalase)는 식품 등급의 것을 노보자임社 및 DSM社에서 구매하였다. The raw anchovy was purchased from frozen anchovy at Cheil Kyu San, and the salt, salt, was mixed with purified salt and solar salt. Delvorase, flavorzyme, neutrase, and alcalase, which were used as proteinases, were purchased from Novozymes and DSM.

실험예Experimental Example 1: 멸치의 효소 분해 1: Enzymatic degradation of anchovy

본 실험예에서는 멸치의 효소 분해에 따른 Brix 향상 정도, 유리 아미노산의 함량 및 분해도, 풍미(관능평가)를 실시하였다. 냉동 멸치(이하, 멸치)를 분쇄(초핑)하여 얻어진 멸치 분쇄물 100 중량부에 대하여 단백질 분해 효소인 델보라아제, 플라보자임 1000L, 뉴트라아제 0.8L 및 알칼라아제 2.4L을 각각 1 내지 5 중량부 첨가하고, 50℃의 온도에서 400 rpm으로 2시간 동안 효소분해 하였다. 효소분해 실험을 통해 (1) 최대 생산 유리 아미노산의 함량(분해도), (2) 풍미(관능평가)을 평가하였다.In this experimental example, the degree of Brix enhancement, content of free amino acid, degree of degradation, and flavor (sensory evaluation) were analyzed by enzymatic degradation of anchovy. To 100 parts by weight of the anchovy crush obtained by pulverizing (chopping) the anchovy with the freezing anchovy (hereinafter referred to as anchovy), proteolytic enzymes delborase, flavozyme 1000 L, neutraze 0.8 L and alcalase 2.4 L were added to 1 to 5 And enzymatically decomposed at a temperature of 50 DEG C at 400 rpm for 2 hours. (1) content of maximum free amino acid (degree of degradation) and (2) flavor (sensory evaluation) were evaluated.

먼저, 멸치 100 중량부에 대해 델보라아제, 플라보자임, 뉴트라아제, 알칼라아제 3 중량부를 투입하여 효소분해를 실시하였다. 초기 멸치의 당도는 21.9 brix로 4개의 실험군이 모두 동일하였고 효소분해 후 2시간이 지나서 4개의 실험군 모두 25~27 brix의 최고 brix에 도달하였다(도 2a ~ 도 2d 및 표 3 참조).First, 3 parts by weight of delborase, flavozymes, ntrease, and alcalase were added to 100 parts by weight of anchovy to perform enzymatic degradation. The sugar content of the first anchovy was 21.9 brix, which was the same for all four experimental groups. After 2 hours after the enzymatic digestion, the highest brix of 25-27 brix was reached in all four experimental groups (see Figs. 2a to 2d and Table 3).

아미노산 분석결과 단백질 분해 효소 무처리군의 유리 아미노산 총 함량은 1,982 ppm, Alcalase 2.4L 효소 분해물은 65,970 ppm, Delvorase 효소 분해물은 67,582 ppm, Flavourzyme 1000L 효소 분해물은 116,685 ppm, Neutrase 0.8L 효소 분해물은 62,168 ppm로 Flavourzyme 1000L의 아미노산 함량이 다른 효소분해물에 비해 월등히 높았고 다른 효소분해물은 60,000~70,000 ppm 으로 비슷한 수준이었다. 각각의 효소분해물은 무처리군에 비해 30 내지 60배의 유리아미노산 함량을 보였다. 따라서 효소분해 시 기존에 비해 높은 유리아미노산 함량을 가지고 발효를 시작할 수 있게 됨을 확인하였다(도 3 및 하기 표 3 참조).Amino acid analysis showed that total free amino acid content in the untreated group was 1,982 ppm, that of Alcalase 2.4L was 65,970 ppm, that of Delvorase enzyme was 67,582 ppm, that of Flavourzyme 1000L was 116,685 ppm, that of Neutrase 0.8L was 62,168 ppm , The amino acid content of 1000 L of Flavourzyme was much higher than other enzymatic degradation products and the other enzymatic degradation products were about 60,000 ~ 70,000 ppm. Each enzyme hydrolyzate showed a free amino acid content of 30 to 60 times that of the untreated group. Therefore, it was confirmed that fermentation can be started with high free amino acid content when the enzyme is decomposed (see FIG. 3 and the following Table 3).

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관능평가 결과 Alcalase 2.4L과 Delvorase 분해물의 경우 고미가 다소 느껴졌다. Neutrase 0.8L의 분해물은 정미와 고미가 양호한 정도였고, Flavourzyme 1000L의 경우 고미는 별로 없고 정미가 제일 우수하였다(표 4 참조).Sensory evaluation showed that Alcalase 2.4L and Delvorase digestion showed a little bitter taste. Neutrase 0.8L degradation products showed good quality of yellowness and redness. Flavourzyme 1000L had the least bitter taste and the best yellowness (see Table 4).

멸치 100 중량부 대비 효소 3 중량부 투입 시 효소 분해물의 관능 평가Sensory evaluation of enzymatic degradation product when 3 parts by weight of enzyme was added to 100 parts by weight of anchovy ProteaseProtease 정미Sweet rice 고미Gomi Flavourzyme 1000LFlavourzyme 1000L 우수Great 느끼지 못함I do not feel Neutrase 0.8LNeutrase 0.8L 양호Good 보통usually Alcalase 2.4LAlcalase 2.4L 양호Good 강함Strong DelvoraseDelvorase 양호Good 강함Strong

계속해서, 네 가지 효소 중 적정량과 분해시간을 결정하기 위해 세부실험을 실시하였다. 예로, Neutrase 0.8L과 Flavourzyme 1000L의 적정 최대 효소량을 선정하기 위해 각 효소량을 기질 대비 0.5, 1.0, 1.5%를 첨가하여 3.0%을 투입했을 때와 비교하였다. Neutrase 0.8L의 경우 0.5% 투입한 후 2시간이 지났을 때 3.0% 투입 시와 유사한 수준의 유리아미노산 함량을 나타내었다. 따라서 Neutrase 0.8L의 사용시 0.5% 이상의 효소량으로 2시간 이상 분해 시 최대 분해도를 나타냄을 확인하였다(도 4a 내지 도 4c). Flavourzyme 1000L의 경우 0.5% 투입 시 3시간이 지났을 때 3.0% 투입 시에 비해 유리아미노산의 함량은 65% 수준으로 총 유리아미노산의 함량은 74,593ppm이었고, 1.0% 투입 시에는 75% 수준으로 87,562ppm을 나타내었다. 1.5% 투입 시 3시간이 지났을 때 82%의 수준으로 95,294ppm을 나타내어 Flavourzyme 1000L의 사용시 0.5% 이상의 효소량으로 3시간 이상 분해 시, 또는 1.0% 이상의 효소량으로 1시간 이상 분해 시 충분히 높은 분해도를 나타냄을 확인하였다(도 5a 내지 도 5c).Subsequently, a detailed experiment was conducted to determine the proper amount and decomposition time of four enzymes. For example, in order to select the optimum amount of enzyme for Neutrase 0.8L and Flavourzyme 1000L, the amount of each enzyme was compared with that of 3.0% added with 0.5, 1.0 and 1.5% of the substrate. Neutrase 0.8L showed a free amino acid content similar to that of 3.0% added at 2 hours after 0.5% addition. Therefore, when using 0.8 L of Neutrase, it was confirmed that the degradation rate was more than 0.5% when degraded for 2 hours or more (FIGS. 4A to 4C). In the case of Flavourzyme 1000L, the content of free amino acid was 74,593ppm, and the content of free amino acid was 75,562ppm at 1.0% when 3 hours after the addition of 0.5% Respectively. At the time of 3 hours after 1.5 hours of application, it was 95,294ppm at the level of 82%. When using 1000L of Flavourzyme, decomposition of more than 0.5% enzyme for 3 hours or decomposition for more than 1 hour at 1.0% (Figs. 5A to 5C).

실시예 1: 효소 분해된 멸치를 이용한 어간장(T1) 제조Example 1: Preparation of an amino acid (T1) using an enzyme-degraded anchovy

본 실시예에서는 어간장의 원료로서 발효 대상인 멸치를 분쇄한 뒤, 단백질 분해 효소로 처리한 상태에서 글리신을 첨가하여 어간장을 제조하였다. 정제수로 세척하여 준비된 멸치를 초핑(chopping, 3 mm chopper)하여 얻어진 멸치 분쇄물(초핑 멸치) 70 kg을 50℃에서 30분 동안 저온 열처리하였다. 멸치 분쇄물 70 kg을 추출농축기에 투입하고 400 rpm으로 교반하여 50℃에 도달한 상태에서 뉴트라아제 122.5 g을 투입하고, 50℃, 400 rpm에서 3시간 동안 효소 분해하였다. 멸치 효소 분해물 15 kg에 정제염 4.85 kg을 혼합하여 염장된 멸치 효소 분해물에 글리신 0.194 kg을 첨가하여, 염장된 멸치 효소 분해물 및 글리신이 혼합된 어간장 제조를 위한 멸치 혼합물을 400 mL씩 소분(500 mL tall beaker 50개)하고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this example, anchovy as a raw material of the eelgrass was pulverized, and glycine was added in the state of being treated with a protease to prepare an eelgrass. 70 kg of anchovy (chopped anchovy) obtained by chopping (3 mm chopper) prepared anchovy prepared by washing with purified water was subjected to low-temperature heat treatment at 50 ° C for 30 minutes. 70 kg of the anchovy crushed product was put into an extractor, stirred at 400 rpm, and 122.5 g of Ntase was added at 50 캜 and enzymatically decomposed at 50 캜 and 400 rpm for 3 hours. Anchovy enzyme hydrolyzate (15 kg) was mixed with 4.85 kg of purified salt, and 0.194 kg of glycine was added to the anchored enzyme hydrolyzate. The anchovy mixture for the preparation of the anchovy mixture containing salted anchovy hydrolyzate and glycine was subdivided into 500 mL tall 50 beakers) and covered with the gauze at the entrance of the beaker to prevent the inclusion of foreign matter, and then stored in a thermostat at 30 ° C for 4 months.

실시예 2: 효소 분해된 멸치를 이용한 어간장(T2) 제조Example 2: Preparation of an echinacea (T2) using an enzyme-degraded anchovy

본 실시예에서는 실시예 1과 비교하여, 뉴트라아제 처리에 의하여 얻어진 멸치 효소 분해물 17 kg에 정제염 5.73 kg을 혼합하여 염장된 멸치 효소 분해물에 글리신 0.70 kg을 첨가한 것을 제외하고 실시예 1의 절차를 반복하였다. 염장된 멸치 효소 분해물 및 글리신이 혼합된 어간장 제조를 위한 멸치 혼합물을 400 mL 씩 소분(500 mL tall beaker 50개)하고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this Example, the procedure of Example 1 was repeated except that 5.73 kg of purified salt was mixed with 17 kg of anchovy lysate obtained by the treatment with Nitration, and 0.70 kg of glycine was added to the salted anchovy lysate. And repeated. The anchovy mixture for the preparation of the anchovy mixed with the anchovy enzyme hydrolyzate and the glycine was subdivided into 400 mL portions (500 mL tall beaker 50 pieces), and the entrance of the beaker was covered with gauze to prevent foreign matter from entering. And stored for 4 months.

실시예Example 3: 효소 분해된 멸치를 이용한  3: Enzymatically Degraded Anchovy 어간장Eccentrics (( T3T3 ) 제조) Produce

본 실시예에서는 실시예 1과 비교하여, 뉴트라아제 처리에 의하여 얻어진 멸치 효소 분해물 17 kg에 정제염 5.90 kg을 혼합하여 염장된 멸치 효소 분해물에 글리신 1.20 kg을 첨가한 것을 제외하고 실시예 1의 절차를 반복하였다. 염장된 멸치 효소 분해물 및 글리신이 혼합된 어간장 제조를 위한 멸치 혼합물을 400 mL 씩 소분(500 mL tall beaker 50개)하고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this Example, the procedure of Example 1 was repeated except that 5.90 kg of purified salt was mixed with 17 kg of anchovy enzyme hydrolyzate obtained by the treatment with Nitration, and 1.20 kg of glycine was added to the salted anchovy enzyme hydrolyzate. And repeated. The anchovy mixture for the preparation of the anchovy mixed with the anchovy enzyme hydrolyzate and the glycine was subdivided into 400 mL portions (500 mL tall beaker 50 pieces), and the entrance of the beaker was covered with gauze to prevent foreign matter from entering. And stored for 4 months.

실시예 4: 생멸치를 이용한 어간장(T4) 제조Example 4: Production of fish tongue (T4) using live anchovy

본 실시예에서는 어간장의 원료로서 발효 대상인 멸치를 염장한 상태에서 글리신을 첨가하여 어간장을 제조하였다. 정제수로 세척한 멸치 15 kg을 50℃에서 30분 동안 저온 열처리하고, 열처리된 멸치 15 kg에 정제염 4.94 kg을 혼합하여 염장된 멸치 효소 분해물에 글리신 0.194 kg을 첨가하였다. 염장된 멸치 및 글리신이 혼합된 어간장 제조를 위한 멸치 혼합물을 400 mL씩 소분(500 mL tall beaker 50개)하고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this example, anchovy was prepared by adding glycine while salting anchovy, which is a fermentation target, as a raw material of the eel. 15 kg of anchovy washed with purified water was subjected to low temperature heat treatment at 50 ° C for 30 minutes and then 0.194 kg of glycine was added to the salted anchovy lysate by mixing 4.94 kg of purified salt with 15 kg of heat treated anchovy. The anchovy mixture for salted anchovy and glycine mixed syrup was subdivided into 400 mL portions (500 mL tall beaker 50 pieces) and covered with a gauze at the entrance of a beaker to prevent foreign matter from entering. And stored for 4 months.

실시예 5: 생멸치를 이용한 어간장(T5) 제조Example 5: Production of fish tongue (T5) using live anchovy

본 실시예에서는 정제수로 세척한 멸치 17 kg에 정제염 5.73 kg을 혼합하여 염장된 멸치에 글리신 0.70 kg을 첨가한 것을 제외하고 실시예 4의 절차를 반복하였다. 염장된 멸치 및 글리신이 혼합된 어간장 제조를 위한 멸치 혼합물을 400 mL씩 소분(500 mL tall beaker 50개)하고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this example, the procedure of Example 4 was repeated except that 5.73 kg of purified salt was mixed with 17 kg of anchovy washed with purified water and 0.70 kg of glycine was added to the salted anchovy. The anchovy mixture for salted anchovy and glycine mixed syrup was subdivided into 400 mL portions (500 mL tall beaker 50 pieces) and covered with a gauze at the entrance of a beaker to prevent foreign matter from entering. And stored for 4 months.

실시예 6: 생멸치를 이용한 어간장(T6) 제조Example 6: Production of fish tongue (T6) using live anchovy

본 실시예에서는 정제수로 세척한 멸치 17 kg에 정제염 5.90 kg을 혼합하여 염장된 멸치에 글리신 1.20 kg을 첨가한 것을 제외하고 실시예 4의 절차를 반복하였다. 염장된 멸치 및 글리신이 혼합된 어간장 제조를 위한 멸치 혼합물을 400 mL씩 소분(500 mL tall beaker 50개)하고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this Example, the procedure of Example 4 was repeated except that 5.90 kg of purified salt was mixed with 17 kg of anchovy washed with purified water and 1.20 kg of glycine was added to the salted anchovy. The anchovy mixture for salted anchovy and glycine mixed syrup was subdivided into 400 mL portions (500 mL tall beaker 50 pieces) and covered with a gauze at the entrance of a beaker to prevent foreign matter from entering. And stored for 4 months.

실시예 7: 멸치 분쇄물을 이용한 어간장(T7) 제조Example 7: Preparation of fish paste (T7) using anchovy crushed product

본 실시예에서는 어간장의 원료로서 발효 대상인 멸치를 분쇄한 뒤, 글리신을 첨가하여 어간장을 제조하였다. 정제수로 세척하여 준비된 멸치를 초핑(chopping, 3 mm chopper)하여 얻어진 멸치 분쇄물(초핑 멸치) 70 kg을 50℃에서 30분 동안 저온 열처리 하였다. 멸치 분쇄물 15 kg에 정제염 4.94 kg을 혼합하여 염장된 멸치 분쇄물에 글리신 0.194 kg을 첨가하였다. 염장된 멸치 분쇄물 및 글리신이 혼합된 어간장 제조를 위한 멸치 혼합물을 400 mL씩 소분(500 mL tall beaker 50개)하고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this example, anchovy, which is a fermentation target, was pulverized as a raw material of the fish-jellies, and glycine was added thereto to prepare an eel. 70 kg of anchovy (chopped anchovy) obtained by chopping (3 mm chopper) prepared anchovy prepared by washing with purified water was subjected to low-temperature heat treatment at 50 ° C for 30 minutes. To 15 kg of anchovy crushed product, 4.94 kg of purified salt was mixed, and 0.194 kg of glycine was added to the salted anchovy crushed product. The anchovy mixture for the preparation of the salted anchovy crushed product and the anchovy mixed with glycine was subdivided into 400 mL portions (500 mL tall beaker 50 pieces), and the entrance of the beaker was covered with gauze to prevent foreign matter from entering. And stored for 4 months.

실시예 8: 멸치 분쇄물을 이용한 어간장(T8) 제조Example 8: Preparation of fish tongue (T8) using anchovy crushed product

본 실시예에서는 정제수로 세척한 멸치를 초핑하여 얻어진 멸치 분쇄물 17 kg에 정제염 5.73 kg을 혼합하여 염장된 멸치 분쇄물에 글리신 0.70 kg을 첨가한 것을 제외하고 실시예 4의 절차를 반복하였다. 염장된 멸치 분쇄물 및 글리신이 혼합된 어간장 제조를 위한 멸치 혼합물을 400 mL씩 소분(500 mL tall beaker 50개)하고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this Example, the procedure of Example 4 was repeated except that 5.73 kg of purified salt was mixed with 17 kg of the anchovy crushed product obtained by chopping anchovy washed with purified water, and 0.70 kg of glycine was added to the salted anchovy crushed product. The anchovy mixture for the preparation of the salted anchovy crushed product and the anchovy mixed with glycine was subdivided into 400 mL portions (500 mL tall beaker 50 pieces), and the entrance of the beaker was covered with gauze to prevent foreign matter from entering. And stored for 4 months.

실시예 9: 멸치 분쇄물을 이용한 어간장(T9) 제조Example 9: Preparation of fish tongue (T9) using anchovy crushed product

본 실시예에서는 정제수로 세척한 멸치를 초핑하여 얻어진 멸치 분쇄물 17 kg에 정제염 5.90 kg을 혼합하여 염장된 멸치 분쇄물에 글리신 1.20 kg을 첨가한 것을 제외하고 실시예 4의 절차를 반복하였다. 염장된 멸치 분쇄물 및 글리신이 혼합된 어간장 제조를 위한 멸치 혼합물을 400 mL씩 소분(500 mL tall beaker 50개)하고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this Example, the procedure of Example 4 was repeated except that 5.90 kg of purified salt was mixed with 17 kg of the anchovy crushed product obtained by chopping anchovy washed with purified water, and 1.20 kg of glycine was added to the salted anchovy crushed product. The anchovy mixture for the preparation of the salted anchovy crushed product and the anchovy mixed with glycine was subdivided into 400 mL portions (500 mL tall beaker 50 pieces), and the entrance of the beaker was covered with gauze to prevent foreign matter from entering. And stored for 4 months.

비교예 1: 생멸치를 이용한 어간장(C1) 제조COMPARATIVE EXAMPLE 1: Preparation of fish paste (C1) using live anchovy

본 비교예에서는 생 멸치를 이용하여 글리신을 첨가하지 않은 어간장을 제조하였다. 정제수로 세척한 생멸치를 내장이 상하지 않도록 1마리씩 분리한 생멸치 300 g에 정제염 80 g을 지퍼-백에 넣어 혼합(shaking)하고, 이를 500 ml tall beaker에 담아, 손으로 누른 뒤에 소금 17 g을 상층부에 덮었다. gauge로 덮고 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this Comparative Example, an anchovy paste without glycine was prepared using raw anchovy. One hundred eighty grams of fresh sea anchovy washed with purified water was shaken in 300 g of fresh sea anchovy, 100 g of purified salt was put in a zipper-bag and placed in a 500 ml tall beaker. . gauge, and incubated in a thermostat at 30 ° C for 4 months.

비교예 2: 멸치 분쇄물을 이용한 어간장(C2) 제조COMPARATIVE EXAMPLE 2: Preparation of fish paste (C2) using anchovy crushed product

본 비교예에서는 멸치 분쇄물을 이용하여 글리신을 첨가하지 않은 어간장을 제조하였다. 정제수로 세척한 생멸치를 초핑(3 mm chopper)하여 얻어진 멸치 분쇄물(초핑 멸치) 17 kg에 정제염 5.50 kg을 혼합하여 상온에서 24시간 방치하였다. 이어서 초핑 멸치와 정제염이 혼합된 멸치 혼합물을 500 ml tall beaker에 400 g씩 나누어 담고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다.In this Comparative Example, anchovy paste without added glycine was prepared using anchovy crushed product. To the anchovy crush (chopped anchovy) obtained by chopping (3 mm chopper) of the live whip washed with purified water, 5.50 kg of tablets were mixed and allowed to stand at room temperature for 24 hours. Then, the anchovy mixture containing chopped anchovy and purified salt was divided into 400 g portions in a 500 ml tall beaker. The mixture was covered with a gauze at the entrance of a beaker to prevent foreign matter from entering, and then stored in a thermostat at 30 ° C for 4 months.

비교예 3: 멸치 효소 분해물을 이용한 어간장(C3) 제조COMPARATIVE EXAMPLE 3: Preparation of an amino acid (C3) using anchovy enzyme degradation product

본 비교예에서는 분쇄된 멸치의 효소 분해물을 이용하여 글리신을 첨가하지 않은 어간장을 제조하였다. 정제수로 세척한 생멸치를 초핑(3 mm chopper)하여 얻어진 멸치 분쇄물(초핑 멸치) 70 kg을 발효 용기에 투입하고, 뉴트라아제 0.8L 122.5 g을 투입하고, 3시간 동안 50℃에서 400 rpm의 속도로 교반하면서 효소 분해하였다. 뉴트라아제 처리에 의하여 얻어진 멸치 효소 분해물 15 kg에 정제염 4.94 kg을 혼합한 염장된 멸치 효소 분해물(멸치 혼합물)을 400 ml씩 소분(500 ml tall beaker 50개)하고, gauze로 비커의 입구를 덮어 이물질의 혼입을 방지한 뒤, 30℃의 항온기에서 정치 배양하여 4개월 저장하였다. In this comparative example, the enzyme digest of the ground anchovy was used to prepare an unglycosylated euglycemia. 70 kg of the anchovy crushed product (chopped anchovy) obtained by chopping (3 mm chopper) of the purified live juice washed with purified water was put into a fermentation vessel, and 122.5 g of Nitration 0.8 L was added. The mixture was stirred for 3 hours at a rate of 400 rpm Deg.] C with stirring. 400 ml aliquots of salted anchovy lysate (anchovy mixture) obtained by mixing 4.94 kg of purified anchovy lysate with 15 kg of the anthrax hydrolyzate obtained by Ntrease treatment were subdivided into 500 ml tall beaker (50), and the beaker inlet was covered with gauze , The cells were incubated in a thermostat at 30 DEG C for 4 months.

하기 표 5는 전술한 실시예 및 비교예에서 효소 분해 여부, 원료, 정제염 및 글리신의 함량을 표시하고 있다. Table 5 below shows the decomposition of the enzyme, the raw material, the purified salt and the content of glycine in the above-mentioned Examples and Comparative Examples.

어간장 발효 실험 설계Experimental design of fish paste 구분division 효소분해Enzymatic degradation 원료 (%)Raw material (%) 정제염 (%)Purified salt (%) Glycine (%)Glycine (%) 실시예 1Example 1 ProteaseProtease 7575 2525 1One 실시예 2Example 2 ProteaseProtease 7575 2525 33 실시예 3Example 3 ProteaseProtease 7575 2525 55 실시예 4Example 4 -(생멸치)- (live anchovy) 7575 2525 1One 실시예 5Example 5 -(생멸치)- (live anchovy) 7575 2525 33 실시예 6Example 6 -(생멸치)- (live anchovy) 7575 2525 55 실시에 7Implementation 7 -(분쇄 멸치)- (crushed anchovy) 7575 2525 1One 실시예 8Example 8 -(분쇄 멸치)- (crushed anchovy) 7575 2525 33 실시예 9Example 9 -(분쇄 멸치)- (crushed anchovy) 7575 2525 55 비교예 1Comparative Example 1 -(생멸치)- (live anchovy) 7575 2525 -- 비교예 2Comparative Example 2 -(분쇄 멸치)- (crushed anchovy) 7575 2525 -- 비교예 3Comparative Example 3 ProteaseProtease 7575 2525 --

실시예 및 비교예에서 제조된 어간장은 16주씩 총 3회 반복하여 각 48개의 샘플을 항온기에 저장하였으며, 매주마다 샘플링하여 후술하는 아미노산 함량과 바이오제닉 아민 함량을 분석하고, 관능 평가하였다. The eelgrass produced in the Examples and Comparative Examples was repeated three times for 16 weeks in total, and each of 48 samples was stored in a thermostat. The amino acid content and the biogenic amine content, which will be described later, were sampled and analyzed for sensory evaluation.

실험예Experimental Example 2:  2: 어간장의Eel 기간 별By period 유리 아미노산 함량 분석 Free amino acid content analysis

전술한 실시예 1-3 및 비교예 1-3에서 제조된 어간장의 저장 기간에 따른 유리 아미노산의 함량을 HPLC를 이용하여 분석하였다. HPLC 분석 조건은 하기 표 6에 표시되어 있다. The contents of free amino acids in the fish galls prepared in Examples 1-3 and 1-3 were analyzed by HPLC. HPLC analysis conditions are shown in Table 6 below.

유리 아미노산 함량 분석을 위한 HPLC 조건HPLC conditions for free amino acid content analysis Instrument Instrument Agilent 1200series HPLC Agilent 1200series HPLC Column Column Zorbax Eclips-AAA, 4.6 X 150 mm, 5 um Zorbax Eclips-AAA, 4.6 X 150 mm, 5 um Mobile phase Mobile phase A : 40 mM Na2HPO4, pH 7.8
B : ACN : MeOH : water = 45:45:10 (v/v/v)
A: 40 mM Na2HPO4, pH 7.8
B: ACN: MeOH: water = 45: 45: 10 (v / v / v)
Pump settings Pump settings Flow : 2 ml/min, Stop time : 26 min Flow: 2 ml / min, Stop time: 26 min Derivatization Derivatization OPA(o-phthalaldehyde)
FMOC(9-fluorenylmethyl chloroformate)
OPA (o-phthalaldehyde)
FMOC (9-fluorenylmethyl chloroformate)
Gradient conditionGradient condition Time %A %B
0 100 0
10 100 0
18.1 55 45
18.6 0 100
20 0 100
26 100 0
Time% A% B
0 100 0
10 100 0
18.1 55 45
18.6 0 100
20 0 100
26 100 0

본 실험예에 따른 분석 결과는 표 7 및 도 6에 표시되어 있다. The results of the analysis according to this experimental example are shown in Table 7 and FIG.

숙성 기간 별 실험군의 유리 아미노산 함량(ppm)Free amino acid content (ppm) 실험군Experimental group 1개월1 month 2개월2 months 3개월3 months 4개월4 months C1C1 11,53411,534 27,61327,613 29,19029,190 31,97431,974 C2C2 11,53411,534 30,84630,846 33,21433,214 36,68036,680 C3C3 36,78036,780 41,01141,011 50,52750,527 48,52048,520 T1T1 36,22136,221 41,02741,027 45,02445,024 47,36447,364 T2T2 35,47235,472 40,43640,436 43,62043,620 46,43246,432 T3T3 36,10136,101 37,04337,043 42,71942,719 44,92444,924

숙성기간별로 유리 아미노산의 함량은 꾸준히 증가하였고 시간이 지남에 따라 증가 폭은 완만하였다. 비교예 1, 비교예 2(C1, C2)(멸치)의 경우 초기 아미노산 함량 11,000~12,000 ppm에서 4개월에는 32,000~37,000 ppm을 나타내었다. 실시예 1(T1), 실시예 2(T2), 실시예 3(T3)의 경우, 초기 아미노산 함량 35,000 ppm에서 4개월 차에는 45,000~48,000 ppm을 나타내었다. 아미노산 함량의 절대값으로는 실시예 1-3의 경우, 비교예 1-2의 샘플에 비하여 약 1.2~1.4배 높은 함량을 나타내었다. The content of free amino acids increased steadily over the period of fermentation and gradually increased with time. In the case of Comparative Example 1 and Comparative Example 2 (C1, C2) (anchovy), the initial amino acid content was from 11,000 to 12,000 ppm, and from 4,000 to 32,000 to 37,000 ppm. In the case of Example 1 (T1), Example 2 (T2), and Example 3 (T3), the initial amino acid content was 35,000 ppm and 45,000 to 48,000 ppm in 4 month. The absolute value of the amino acid content was about 1.2 to 1.4 times higher than the sample of Comparative Example 1-2 in Examples 1-3.

이러한 결과를 토대로 4개월 치의 분석자료를 통해 각 분석치의 로그함수를 취해 12개월의 경향을 살펴보았다(도 7a 내지 도 7f). 각 실험군의 숙성기간별 예상 아미노산 함량을 비교해 볼 때 대조군 C1의 12개월 아미노산함량 49,766ppm을 상회하는 함량을 보이는 발효기간은 실험군 T1에서 6개월, T2에서 7개월, T3에서 10개월을 보여 효소분해 시 Control 1에서 비해 발효기간을 적게는 2개월에서 길게는 5개월까지 단축시킬 수 있을 것으로 예상된다(표 8).Based on these results, the logarithmic function of each analysis value was taken from the analysis data for four months, and the tendency of 12 months was examined (FIGS. 7A to 7F). The fermentation period, which is more than 49,766ppm of 12-month amino acid content of control C1, was 6 months in T1, 7 months in T2, and 10 months in T3 in comparison with the estimated amino acid content of each experimental group. It is expected that the fermentation period can be shortened from 2 months to 5 months longer than in Control 1 (Table 8).

Figure pat00005
Figure pat00005

실험예 3: 어간장의 기간 별 바이오제닉 아민 함량 분석Experimental Example 3: Analysis of content of biogenic amine by period

전술한 실시예 1-3 및 비교예 1-3에서 제조된 어간장의 저장 기간에 따른 바이오제닉 아민의 함량을 HPLC를 이용하여 분석하였다. 각각의 샘플은 다음과 같은 방법으로 전 처리하였다. 각각의 샘플을 2.5 g씩 취하고, 0.1N HCl 20 mL을 첨가하고 homegenize하였다. 3000 rpm에서 4℃에서 15분간 원심분리하고, 상층액을 취하였다. 이 과정을 반복하고, 0.1N HCl을 사용하여 50 mL mass-up하여 추출액을 얻었다. 이어서, derivative 단계로서 추출액과 표준 용액을 각각 튜브에 1 mL씩 넣고, 각각의 용액에 내부 표준(internal standard, ISTD) 0.1 mL을 첨가하였다. 포화 Na2CO3 용액 0.5 mL을 첨가하고, 1% dancyl chloride acetone 용액 1 mL을 첨가하였다. 코르크를 놓은 뒤에 derivative 45℃에서 1시간 진행한 뒤, 10% 프롤린 0.5 mL을 첨가하고, 에테르 5 mL을 첨가한 뒤에 3분 동안 shaking하였다. 얻어진 상층을 취하고, 질소농축 후에 아세토니트릴 1 mL을 첨가하고, 0.45 μm 멤브레인 필터로 여과한 뒤, HPLC 분석하였다. 표준으로 히스타민(HIS)와 카다베린(CAD) 10, 20, 50, 100 ppm을 사용하였다. 바이오제닉 아민을 분석하기 위한 조건이 하기 표 9에 표시되어 있다. The content of the biogenic amines was analyzed by HPLC according to the storage periods of the fish galls prepared in Examples 1-3 and 1-3. Each sample was pretreated in the following manner. Take 2.5 g of each sample, add 20 mL of 0.1 N HCl and homegenize. Centrifugation was carried out at 3000 rpm at 4 DEG C for 15 minutes, and the supernatant was taken. This procedure was repeated and 50 mL mass-up was performed using 0.1 N HCl to obtain an extract. Then, add 0.1 mL of internal standard (ISTD) to each solution, and add 1 mL of extract and standard solution to each tube as a derivative step. 0.5 mL of saturated Na2CO3 solution was added and 1 mL of 1% dancyl chloride acetone solution was added. After corking, the derivative was allowed to proceed at 45 ° C for 1 hour, then 0.5 mL of 10% proline was added, 5 mL of ether was added and shaking was performed for 3 minutes. The obtained upper layer was taken, concentrated under nitrogen, added with 1 mL of acetonitrile, filtered through a 0.45 μm membrane filter, and analyzed by HPLC. Histamine (HIS) and cadaverine (CAD) 10, 20, 50 and 100 ppm were used as standards. Conditions for analyzing the biogenic amines are shown in Table 9 below.

바이오제닉 아민 분석 조건 및 방법Biogenic amine analysis conditions and methods Instrument Instrument Agilent 1200 series HPLC Agilent 1200 series HPLC Column Column C 18 (3.0 x 150 mm, 5 ㅅm), 40℃C 18 (3.0 x 150 mm, 5 mm), 40 ° C Mobile phase Mobile phase A: 0.1N acetic acid in Acetonitrile
B: 0.1N acetic acid in Distilled Water
A: 0.1 N acetic acid in Acetonitrile
B: 0.1 N acetic acid in distilled water
Pump settings Pump settings Flow : 1 ml/min, Stop time : 35 min Flow: 1 ml / min, Stop time: 35 min DetectorDetector UV 254nmUV 254 nm Gradient conditionGradient condition Time %A %B
0 55 45
10 55 45
15 65 35
20 80 20
25 80 20
30 90 10
35 90 10
Time% A% B
0 55 45
10 55 45
15 65 35
20 80 20
25 80 20
30 90 10
35 90 10

본 실험예에 따른 분석 결과가 하기 표 10, 도 8 및 도 9에 표시되어 있다. 히스타민은 초기부터 거의 검출이 되지 않은 반면 카다베린이 주로 검출되었다(도 9). 그 외의 바이오제닉 아민은 미미한 양을 나타내어 히스타민과 카다베린을 본 실험의 주요 바이오제닉 아민으로 정의하고 총 함량으로 분석하였다. 글리신의 첨가량에 따른 바이오제닉 아민 함량의 변화를 살펴보고자 그 결과를 비교해 보았다. 효소분해 후 글리신의 첨가량에 따라 바이오제닉아민 함량이 유의적으로 감소한 것을 볼 수 있었다. 글리신을 첨가하지 않은 효소분해 실험군(C3)의 경우 4개월 차 바이오제닉아민 함량이 1개월 차에 비해 137% 정도 증량하였다. 글리신을 첨가한 효소분해 실험군(T1-T3)은 대조군(C3)에 비하여 전체적으로 바이오제닉 아민의 함량이 크게 감소하였다. 특히, 글리신을 3% 첨가한 T2 실험군의 경우 96% 수준으로 1개월 차에 비해 더 이상 증량하지 않는 경향을 보였고, 글리신을 5% 첨가한 T3 실험군의 경우에는 66% 수준으로 바이오제닉 아민의 함량이 감소되는 경향을 보였다(표 10, 도 8). 전체적으로 볼 때 글리신을 첨가하지 않은 실험군에 비해 글리신을 5% 첨가한 실험군의 바이오제닉 아민의 함량은 4개월 차에 70%정도 저감화된 효과를 보였다(도 8).The results of the analysis according to the present experimental example are shown in Table 10, Fig. 8 and Fig. Histamine was rarely detected from the beginning, while cadaverine was mainly detected (Fig. 9). Other biogenic amines showed a negligible amount and histamine and cadaverine were defined as major biogenic amines of this experiment and analyzed by total content. The effect of glycine addition on the biogenic amine content was compared. After the enzymatic degradation, the content of biogenic amine was significantly decreased according to the amount of glycine added. In the enzyme digestion experiment group (C3) without glycine addition, the content of biogenetic amine for 4 months was increased by 137% as compared with the one month difference. Compared with the control (C3), the content of the biogenic amine was significantly decreased in the enzyme digestion experiment group (T1-T3) with glycine addition. Particularly, in the case of T2 treated with 3% glycine, the level of 96% was not increased more than that of 1 month. In the case of T3 containing 5% of glycine, the content of biogenic amine was 66% (Table 10, Fig. 8). Overall, the amount of biogenic amine in the 5% glycine supplemented group was reduced by 70% compared to the untreated group (Fig. 8).

숙성기간 별 바이오제닉 아민의 함량(ppm)Content of biogenic amine (ppm) by aging period 실험군Experimental group 1개월1 month 2개월2 months 3개월3 months 4개월4 months C3C3 151.43151.43 198.58198.58 205.24205.24 208.12208.12 T1T1 119.24119.24 166.36166.36 148.79148.79 167.44167.44 T2T2 98.2598.25 98.8698.86 70.3370.33 95.1595.15 T3T3 92.2392.23 84.2784.27 72.1172.11 60.4360.43

실험예 4: 어간장 발효 여과액의 향기 성분 분석Experimental Example 4: Analysis of fragrance component of the filtrate

본 실험예에서는 전술한 실시예에서 제조된 어간장에서 향기 성분의 함량을 분석하였다. 본 실험예에 따른 향기 성분의 분석 방법은 하기 표 11에 표시되어 있다. In this Experimental Example, the contents of the fragrance components were analyzed in the eardrums prepared in the above-mentioned Examples. The method of analyzing the fragrance component according to the present experimental example is shown in Table 11 below.

향기 성분 분석 방법Analysis method of fragrance component InstrumentInstrument Agilent 7890A GC system, 5975C inert XL MSD Agilent 7890A GC system, 5975C inert XL MSD SPME fiberSPME fiber 65㎛ DVB/CAR/ PDMS Blue plain 65μm DVB / CAR / PDMS Blue plain Sample preparation conditionSample preparation condition 60℃, 20min preincubation(agitation speed 250 rpm)
→ 60℃, 30min extraction
→ Desorption 5min(inlet temperature 250℃)
60 C, 20 min preincubation (agitation speed 250 rpm)
→ 60 ° C, 30 min extraction
→ Desorption 5 min (inlet temperature 250 ° C)
Column conditionColumn condition Rate (℃/min)Rate (° C / min) Hold time(min)Hold time (min) 4040 55 4 4 180180 22 Injector temperatureInjector 온도 250℃, split 20 : 1 250 < 0 > C, split 20: 1 MS 조건MS condition Auto tune, scan mode Auto tune, scan mode

향기 성분을 분석하기 위한 샘플은 다음과 같이 준비하였다. 각 실험군의 내용물을 광목천에 붓고 액을 짜낸 후 액을 광목천에 다시 붓고 정치하여 여과하기를 3번 하여 맑은 청징액이 나오도록 하였다. 각 샘플을 0.5 g씩 칭량하여 GC/MS를 이용하여 향기성분을 분석하였다. C1의 경우 동일한 생멸치를 분쇄하여 발효시킨 C2와 유사할 것으로 판단하여 C2을 대조군으로 분석하였다. 각각의 멸치 발효물을 여과한 샘플로 시료당 0.5 g씩 칭량하여 분석하였다. Samples for analyzing the fragrance components were prepared as follows. The contents of each experimental group were poured into the Kwang Mok Stream and squeezed out. After pouring the solution back into the Kwang Myol Stream, the filtrate was filtered three times to obtain a clear purifying solution. 0.5 g of each sample was weighed and the fragrance components were analyzed by GC / MS. In the case of C1, it was judged that C2 was similar to C2 fermented by crushing the same live anchovy, and C2 was analyzed as a control group. Each anchovy fermented product was weighed and weighed 0.5 g per sample.

어간장에서 나타나는 주요 향기성분으로는 Trimethylamine, thiobismethane, acetic acid, butanoic acid, 3-methylbutanoic acid, pentanoic acid, heptanoic acid, 2,6-dimethylpyrazine, benzaldehyde, dimethyl trisulfide 등이 알려져 있다. 본 실험예에 따른 분석 결과는 도 10a-10e 및 하기 표 12에 표시되어 있다. 각 실험군의 향기성분을 GC/MS를 이용하여 분석한 결과 Butanoic acid는 cheesy, Sharp, buttery 향을 나타내며 C3에서 가장 많은 양이 검출되었고 T1, T2, T3, C2의 순으로 향이 검출되었다. 3-Methyl-Butanoic acid와 2-Methyl-Butanoic acid는 stinky, pungent, feet, cheesy, dirty 향을 나타내며 C2에서 가장 많은 양이 검출되었고 C3, T1-T3는 유사한 수준이었다. 기타 향기성분으로 Trimethylamine(Fishy), Acetic acid(Vinegar), Benzaldehyde(Sweet), Benzeneacetaldehyde(Floral), 3-Ethyl-2,5-Dimethyl-Pyrazine(Buttery popcorn)의 향은 C3/T1-T34에 비해 C2에서 다소 높은 경향을 나타내었지만 큰 차이를 보이지는 않았다. 전체적인 어간장의 주요향기성분의 함량을 상대 비교하면, C3 > T1 = T2 > C2 > T4의 순으로 많았다.The major fragrance components in the eelgrass are known as trimethylamine, thiobismethane, acetic acid, butanoic acid, 3-methylbutanoic acid, pentanoic acid, heptanoic acid, 2,6-dimethylpyrazine, benzaldehyde and dimethyl trisulfide. The results of the analysis according to the present experimental example are shown in Figs. 10A to 10E and Table 12 below. Butanoic acid showed cheesy, Sharp, and buttery flavor, and the highest amount of C3 was found in T1, T2, T3 and C2. 3-Methyl-Butanoic acid and 2-Methyl-Butanoic acid showed the stinky, pungent, feet, cheesy, and dirty flavors. C2 and C3 and T1-T3 were similar. The aroma of Trimethylamine (Fishy), Acetic acid (Vinegar), Benzaldehyde (Sweet), Benzeneacetaldehyde (Floral) and 3-Ethyl-2,5-Dimethyl-Pyrazine (Buttery popcorn) C2, but showed no significant difference. Relative comparisons of the main fragrance components of the total eelgrass were in the order of C3> T1 = T2> C2> T4.

Figure pat00006
Figure pat00006

1: Trimethylamine; 2: Acetic acid; 3: 3-Methyl-Butanal; 4: 2-Methyl-Butanal; 5: 2-Ethyl-Furane; 6: Butanoic acid; 7: 3-Methyl-Butanoic acid; 8: 2-Methyl-Butanoic acid; 9: Heptanal; 10: 3-(Methylthio)-Propanal; 11: Benzaldehyde; 12: Benzenacetaldehyde.1: Trimethylamine; 2: Acetic acid; 3: 3-Methyl-Butanal; 4: 2-Methyl-Butanal; 5: 2-Ethyl-Furane; 6: Butanoic acid; 7: 3-Methyl-Butanoic acid; 8: 2-Methyl-Butanoic acid; 9: Heptanal; 10: 3- (Methylthio) -Propanal; 11: Benzaldehyde; 12: Benzenacetaldehyde.

실험예 5: 발효에 따른 관능 평가Experimental Example 5: Sensory Evaluation by Fermentation

상기 실시예 및 비교예에서 각각 최종적으로 제조된 어간장에 대하여, 일반인(성인 남녀) 15명을 대상으로 관능 평가를 실시하였다. 각각의 실험군을 여과한 청징액을 2 brix로 물에 희석시킨 뒤, 맛과 향을 3점 척도법을 이용하여 맛과 풍미가 아주 강한 경우는'+++', 강한 경우는 ++', 보통은 '+'로 평가하였다. 본 실험예에 따른 관능 평가 결과가 하기 표 13에 표시되어 있다. Sensory evaluation was carried out on fifteen ordinary people (adult male and female) of the fish dumplings finally produced in the above Examples and Comparative Examples. Each of the experimental groups was diluted with 2 brix of filtered clarifying solution and the taste and flavor were measured by using 3 point scale method. When the taste and flavor were very strong, '+++' Was evaluated as '+'. The results of the sensory evaluation according to this Experimental Example are shown in Table 13 below.

어간장 발효 여과액의 관능 평가Sensory evaluation of fermented filtrate 실험군Experimental group 꼬릿한 풍미(negative)Negative flavor (negative) 향긋한 풍미(positive)A positive flavor (positive) 우마미Umami C2C2 ++++++ ++++ ++++ C3C3 ++++++ ++++ ++++ T1T1 ++++ ++++++ ++++++ T2T2 ++++ ++++++ ++++++ T3T3 ++++ ++++++ ++++++ T4T4 ++++ ++++++ ++++++ T5T5 ++++ ++++++ ++++++ T6T6 ++++ ++++++ ++++++ T7T7 ++++ ++++++ ++++++ T8T8 ++++ ++++++ ++++++ T9T9 ++++ ++++++ ++++++

대조군으로 사용된 C2 및 C3의 경우 약간 꼬릿한 어간장의 풍미를 가지고 있었으나, 본 발명에 따라 글리신을 첨가한 T1-T9의 경우는 대조군에 비하여 꼬릿한 풍미는 덜하고 향긋한 풍미가 조금 더 있었다. 맛은 전체적으로 액젓의 맛으로 유사하였다.C2 and C3 used as a control group had slightly tangled eelgrass flavor. However, according to the present invention, T1-T9 supplemented with glycine had a slightly chewy flavor and a more fragrant flavor than the control group. The taste was similar to the taste of the whole fish sauce.

비교 실험예 1: 시중 판매되는 어간장의 바이오제닉 아민 함량 분석Comparative Experimental Example 1: Analysis of the content of biogenic amine in commercially available eel

주로 베트남이나 태국에서 어간장이 많이 생산되는데 제조하는 방법은 다음과 같다. 우선 어류를 어획한 후 어류를 세척한다. 원료와 정제염을 3:1이 되도록 가염 및 혼합한다. 이를 커다란 발효조(도기 또는 대나무통)에 넣고 상층부를 정제염으로 덮는다. 액화 진행 시 원료가 상층부로 뜨는 것을 방지하기 위해 대나무 매트를 덮고 무거운 물체를 올려 놓는다. 이를 9~12개월 동안 발효한다. 발효가 끝난 후 여과한 액을 First-grade의 어간장으로 분류하고 이에 염수나 다른 원료와 혼합한 액을 2nd grade로 분류한다. 그리고 First-grade 배출 후 여과 잔사에 염수를 투입하여 2~3개월을 더 발효시킨 액을 3rd grade의 어간장으로 분류한다. 2nd, 3rd grade의 풍미를 보완하기 위해 First-grade 어간장을 가미하기도 한다. 사실상 많은 제조업자들이 수율과 수익을 위해 First-grade보다는 2nd, 3rd grade의 어간장을 판매하는 경우가 많다. 이를 토대로 시중에서 판매되는 어간장의 바이오제닉 아민 함량을 ELISA 방법을 통해 분석하였다. 이를 위하여 시중에 판매되고 있는 어간장을 구입해서 각각 1 g씩 채취한 뒤, ELISA 분석을 통하여 바이오제닉 아민의 함량을 분석하였다. 분석 결과는 하기 표 14에 나타내었다. Most of the production is made in Vietnam or Thailand. First, fish is caught and then the fish is washed. Salt and mix to make the ratio of raw material and purified salt to 3: 1. Put it in a large fermenter (pottery or bamboo container) and cover the upper part with tablets. Cover the bamboo mat with a heavy object to prevent the raw material from floating in the upper layer during liquefaction. It is fermented for 9 to 12 months. After fermentation, the filtrate is classified as first-grade eelgrass, and the solution mixed with salt water or other ingredients is classified as 2nd grade. After the first-grade discharge, brine is added to the filtration residue, and the fermented product is further classified into the 3rd grade eel culture. To complement the flavors of the 2nd and 3rd grades, we also add a first-grade eGG. In fact, many manufacturers are selling 2nd and 3rd grade eclipses rather than first-grade for yield and profitability. On the basis of this, the content of biogenic amine in the fish market was analyzed by ELISA method. For this purpose, 1 g of each of the commercially available urchins was purchased and analyzed for the content of biogenic amines by ELISA analysis. The analysis results are shown in Table 14 below.

시중에 판매되고 있는 어간장에 함유된 바이오제닉 아민 함량Contents of biogenic amine contained in commercially available eel 제조국가Country of manufacture 품명Product Name 원료 함량(%)Raw material content (%) 바이오제닉 아민 (ppm)Biogenic amine (ppm)


대한민국



Republic of Korea
멸치액젓(H社) Anchovy sauce (H Company) 7777 616.1616.1
멸치액젓(C社) Anchovy sauce (C company) 7575 932.6932.6 까나리액젓(H社) Kannari sauce (H Company) 5050 496.7496.7 까나리액젓(C社) Cayarai sauce (C company) 5050 531.4531.4 참치액(A社) Tuna juice (company A) -- 128.6128.6 참치액(HR社) Tuna liquid (HR company) -- 40.040.0 바다천지 어간장 Sea World Heaven 7575 400.2400.2
베트남
(Second grade)

Vietnam
(Second grade)
액젓 베이스(I社) Juice base (I company) -- 433.6433.6
Anchovy fish sauce APT Anchovy fish sauce APT 5454 616.2616.2 Nuocmam COT com Anchovy fish sauce Nuocmam COT com Anchovy fish sauce 6060 604.8604.8 Fish sauce 2.5% TN Fish sauce 2.5% TN -- 142.5142.5 Fish sauce 2.8% TN Fish sauce 2.8% TN -- 583.6583.6 태국
(Second grade)
Thailand
(Second grade)
Suree fish sauce Suree fish sauce 2020 248.4248.4
Tiparos fish sauce Tiparos fish sauce 4040 210.0210.0 Squid fish sauce Squid fish sauce 5757 140.0140.0 말레이시아Malaysia AYAM fish sauce AYAM fish sauce 5858 236.6236.6

국내에서 제조되는 멸치액젓 또는 까나리액젓의 경우 바이오제닉 아민의 함량이 40~932.6 ppm으로 다양하게 나타났다. 원료 함량이 높은 경우(Top-grade) 바이오제닉 아민의 함량도 높았고 원료 함량이 낮을수록(2nd, 3rd grade) 바이오제닉 아민의 함량은 낮은 편이었다. 이는 발효 시 생성된 바이오제닉 아민이 다른 원료와의 혼합을 통해 낮아졌을 것으로 판단된다.In the case of anchovy sauce or canary sauce produced in Korea, the content of biogenic amines varied from 40 to 932.6 ppm. The content of the biogenic amine was high in the case of high raw material content (top-grade) and the content of biogenic amine was low in the low raw material content (2nd and 3rd grade). It is considered that the biogenic amine produced during fermentation was lowered by mixing with other raw materials.

상기에서는 본 발명의 예시적인 실시형태 및 실시예에 기초하여 본 발명을 설명하였으나, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 전술한 실시형태 및 실시예에 기초하여 다양한 변형과 변경을 용이하게 추고할 수 있을 것이다. 하지만, 이러한 변형과 변경은 모두 본 발명의 권리범위에 속한다는 사실은 첨부하는 청구의 범위를 통하여 더욱 분명해질 것이다. While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments. It will be easy to browse. It will be apparent, however, that such modifications and changes are all within the scope of the present invention.

Claims (10)

발효 대상인 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물 100 중량부에 대하여 식염 20 ~ 30 중량부를 첨가하여 제조된 염장 어류에 글리신을 첨가한 뒤 발효시켜 제조되는 어간장.
A fish paste which is prepared by adding glycine to salted fish prepared by adding 20 to 30 parts by weight of salt to 100 parts by weight of a fish, fish crushing product or fish enzyme degradation product to be fermented and fermenting.
제 1항에 있어서, 상기 글리신은 상기 어류, 상기 어류 분쇄물 또는 상기 어류 효소 분해물 100 중량부에 대하여 0.1 ~ 10 중량부로 첨가되는 어간장.
2. The fish paste according to claim 1, wherein the glycine is added in an amount of 0.1 to 10 parts by weight based on 100 parts by weight of the fish, the fish crushed product or the fish hydrolyzate.
제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 어류 효소 분해물은, 상기 어류 또는 상기 어류 분쇄물 100 중량부에 대하여 단백질 분해 효소 0.1 내지 10 중량부를 첨가하고 1 ~ 5 시간 동안 40 ~ 60℃의 온도에서 100 ~ 800 rpm에서 교반하여 얻어지는 어간장.
The method according to claim 1 or 2, wherein the fish enzyme degradation product is prepared by adding 0.1 to 10 parts by weight of a protease to 100 parts by weight of the fish or the fish crushed product at a temperature of 40 to 60 DEG C for 1 to 5 hours Agglomerate obtained by stirring at 100 to 800 rpm.
제 3항에 있어서, 상기 단백질 분해 효소는 델보라아제(delvorase), 플라보자임(flavourzyme), 뉴트라아제(neutrase), 프로타멕스(protamex), 알칼라아제(Alcalase), 키모트립신(α-chymotrypsin), 펩신(pepsin), 트립신(trypsin), 파파인(papain) 및 이들의 조합으로 구성되는 군에서 선택되는 어간장.
4. The method of claim 3, wherein the proteolytic enzyme is selected from the group consisting of delvorase, flavorzyme, neutrase, protamex, alcalase, chymotrypsin, chymotrypsin, pepsin, trypsin, papain, and combinations thereof.
제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 어류는 멸치, 디포리, 꽁치, 까나리, 또는 까껌(cacom)을 포함하는 어간장.
3. The eel of claim 1 or 2, wherein the fish comprises anchovy, depot, saury, canary, or cacom.
발효 대상인 어류, 어류 분쇄물 또는 어류 효소 분해물 100 중량부에 대하여 식염 20 ~ 30 중량부를 첨가하여 염장 어류를 제조하는 단계; 및
제조된 염장 어류에 글리신을 첨가한 뒤 발효시키는 단계를 포함하는 어간장의 제조 방법.
Adding 20 to 30 parts by weight of salt to 100 parts by weight of fish, fish crushing or fish enzyme degradation products to be fermented to prepare salted fish; And
And adding glycine to the prepared salted fish, followed by fermentation.
제 6항에 있어서, 상기 글리신은 상기 염장 어류 100 중량부에 대하여 0.1 ~ 10 중량부로 첨가되는 어간장을 제조하는 방법.
[7] The method of claim 6, wherein the glycine is added in an amount of 0.1 to 10 parts by weight based on 100 parts by weight of the salted fish.
제 6항 또는 제 7항에 있어서, 상기 어류 효소 분해물은, 어류 또는 분쇄 어류 100 중량부에 대하여 단백질 분해 효소 0.1 내지 10 중량부를 첨가하고 1 ~ 5 시간 동안 40 ~ 60℃의 온도에서 100 ~ 800 rpm에서 교반하여 얻어지는 어간장을 제조하는 방법.
[Claim 7] The method according to claim 6 or 7, wherein the fish hydrolyzate is prepared by adding 0.1 to 10 parts by weight of proteolytic enzyme to 100 parts by weight of fish or crushed fishes and incubating the mixture for 1 to 5 hours at a temperature of 40 to 60 [ lt; RTI ID = 0.0 > rpm. < / RTI >
제 8항에 있어서, 상기 단백질 분해 효소는 델보라아제(delvorase), 플라보자임(flavourzyme), 뉴트라아제(neutrase), 프로타멕스(protamex), 알칼라아제 (Alcalase), 키모트립신(α-chymotrypsin), 펩신(pepsin), 트립신(trypsin), 파파인(papain) 및 이들의 조합으로 구성되는 군에서 선택되는 어간장을 제조하는 방법.
9. The method of claim 8, wherein the proteolytic enzyme is selected from the group consisting of delvorase, flavorzyme, neutrase, protamex, alcalase, chymotrypsin, chymotrypsin, pepsin, trypsin, papain, and combinations thereof. < Desc / Clms Page number 13 >
제 6항 또는 제 7항에 있어서, 상기 발효시키는 단계 이후에 발효 과정에서 얻어진 액젓에서 액체를 여과시키는 단계와, 상기 여과된 액젓에 식염을 투입하는 단계를 더욱 포함하는 어간장을 제조하는 방법. The method according to claim 6 or 7, further comprising the step of filtering the liquid from the fish sauce obtained in the fermentation process after the fermentation step, and the step of adding the salt to the filtered fish sauce.
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