KR20170005699A - Microalgae having exhaust gas tolerance and method for culuturing thereof - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a technology for increasing lipid contents in microalgae via a method for injecting exhaust gas produced in thermoelectric power plants. More specifically, the present invention relates to a technology which involves the use of exhaust gas produced in thermoelectric power plants while culturing high concentration microalgae, in an attempt to increase lipid contents present in microalgae produced thereby. Additionally, reduction in an amount of carbon dioxide in the exhaust gas is possible as microalgae grow.

Description

배기가스 내성의 미세조류 및 그 배양방법{MICROALGAE HAVING EXHAUST GAS TOLERANCE AND METHOD FOR CULUTURING THEREOF}TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a microalgae of exhaust gas resistance and a method of culturing microalgae,

본 명세서에는 신규한 미세조류, 배기가스를 이용하여 미세조류를 배양하는 방법, 미세조류의 지질함량을 증대시키는 방법, 및 지질함량이 우수한 미세조류의 선별방법이 개시된다.Disclosed herein are novel microalgae, methods for culturing microalgae using the exhaust gas, methods for increasing the lipid content of microalgae, and methods for selecting microalgae with high lipid content.

고도 산업화에 의한 화석연료의 사용은 다량의 온실가스를 배출하였으며 지구온난화의 주범으로 작용하고 있다. 또한 과도한 화석연료의 사용은 현재 인류가 처해있는 석유경제사회에서 석유의 고갈로 이어지고 있으며 이에 국내외 많은 연구자들은 화석연료를 대체할 수단으로 대체에너지를 개발하여왔다. The use of fossil fuels by highly industrialization has produced a large amount of greenhouse gases and has played a role in global warming. In addition, excessive use of fossil fuels leads to depletion of petroleum in the present economic society, and many researchers at home and abroad have developed alternative energy as a means of replacing fossil fuels.

대체에너지는 화석연료의 대체뿐만 아니라 무공해이며 환경오염을 유발하지 않아야 한다. 대체에너지원으로 신재생 에너지를 포함 할 수 있으며 그 종류는 태양열, 바이오, 풍력, 수력, 해양, 폐기물, 지역, 연료전지, 수소이다. 이중 바이오 에너지는 원료물질이 다양하며 현재 3세대 원료로 미세조류를 이용하고 있다. Alternative energy should not be pollution-free and environmental pollution as well as replacement of fossil fuels. Alternative energy sources can include renewable energy and include solar, bio, wind, hydro, marine, waste, geothermal, fuel cells, and hydrogen. Bio-energy is a diverse range of raw materials and currently uses microalgae as a raw material for the third generation.

한편, 기존 미세조류의 생산방법으로는 상업적 이산화탄소를 원료로 하여 생산하고 있다. 또한, 유용한 물질을 함유하는 미세조류에 대한 수요가 증가하고 있다.On the other hand, conventional microalgae are produced using commercial carbon dioxide as a raw material. In addition, the demand for microalgae containing useful substances is increasing.

대한민국 공개특허 제 10-2013-0091524호Korean Patent Publication No. 10-2013-0091524

본 명세서의 일 측면에서는, 신규한 미세조류를 제공하고자 한다.In one aspect of the present disclosure, there is provided a novel microalgae.

또한, 본 명세서의 다른 일 측면에서는, 배기가스를 이용하여 미세조류를 배양하는 방법을 제공하고자 한다. In another aspect of the present invention, there is also provided a method for culturing microalgae using an exhaust gas.

또한, 본 명세서의 다른 일 측면에서는, 미세조류의 배양과 배기가스 내 이산화탄소 제거를 동시에 수행하는 방법을 제공하고자 한다.In another aspect of the present invention, there is provided a method for simultaneously cultivating microalgae and removing carbon dioxide from the exhaust gas.

또한, 본 명세서의 다른 일 측면에서는, 미세조류의 지질함량을 증대시키는 방법을 제공하고자 한다.In another aspect of the present disclosure, there is also provided a method for increasing the lipid content of microalgae.

또한, 본 명세서의 다른 일 측면에서는, 지질함량이 우수한 미세조류의 선별방법을 제공하고자 한다.In another aspect of the present invention, there is provided a method for selecting microalgae having an excellent lipid content.

본 발명의 일 측면은, 아쿠도데스무스 속(Acutodesmus sp .) KGE 30 미세조류를 제공하고자 한다.One aspect of the present invention relates to a method for the treatment of acutodesmus sp . ) KGE 30 We want to provide microalgae.

본 발명의 일 측면은, 미세조류에 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류의 배양과 배기가스 내 이산화탄소 제거를 동시에 수행하는 방법을 제공한다.One aspect of the present invention provides a method for simultaneously cultivating a microalgae and removing carbon dioxide from the exhaust gas, which comprises culturing a microalgae by supplying an exhaust gas containing carbon dioxide to the microalgae.

본 발명의 일 측면은, 미세조류에 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류의 성장을 촉진시키는 방법을 제공한다.One aspect of the present invention provides a method for promoting the growth of microalgae, comprising culturing microalgae by supplying an exhaust gas containing carbon dioxide to the microalgae.

본 발명의 일 측면은, 미세조류에 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류 내 지질 생산량을 증대시키는 방법을 제공한다.One aspect of the present invention provides a method for increasing lipid production in a microalgae, comprising culturing a microalgae by supplying an exhaust gas containing carbon dioxide to the microalgae.

본 발명의 일 측면은, 미세조류에 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류 내 지방산의 생산량을 증대시키는 방법을 제공한다.An aspect of the present invention provides a method for increasing the production amount of fatty acids in a microalgae, comprising culturing a microalgae by supplying an exhaust gas containing carbon dioxide to the microalgae.

본 발명의 일 측면은, 지질 생산성이 우수한 미세조류의 선별방법으로서, 상기 방법은 하기 중 어느 하나 이상을 측정하는 것을 포함하는 방법: ⅰ) 배기가스와 상업용 이산화탄소를 이용하여 미세조류를 배양하여 성장량 측정; 및 ⅱ) 배기가스와 상업용 이산화탄소를 이용하여 미세조류를 배양하여 지질함량 측정하는 방법을 제공한다.One aspect of the present invention is a method for screening microalgae that is superior in lipid productivity, the method comprising measuring one or more of the following: i) culturing microalgae using exhaust gas and commercial carbon dioxide, Measure; And ii) a method for measuring lipid content by culturing microalgae using exhaust gas and commercial carbon dioxide.

본 발명의 일 측면에 따른 방법으로 단 시간내 미세조류의 바이오매스 확보를 기대할 수 있다.The method according to one aspect of the present invention can be expected to secure microbial biomass in a short time.

본 발명의 일 측면에 따른 방법은 기존 이산화탄소 공급 미세조류 배양장치를 이용할 수 있기 때문에 기존설비의 변화 없이 적용 가능한 효과가 있다.The method according to one aspect of the present invention can be applied without changing the existing facilities because the conventional carbon dioxide supplying microalgae culture apparatus can be used.

본 발명의 일 측면에 따른 방법으로 상업적 이산화탄소를 이용하여 배양하는 속도와 동일 혹은 그 이상의 속도로 미세조류 생산성을 구축할 수 있다.Microalgae productivity can be established at a rate equal to or higher than the rate of culturing using commercial carbon dioxide by the method according to one aspect of the present invention.

본 발명의 일 측면에 따른 방법은 이산화탄소 공급에 발생하는 비용의 절감 효과가 있다.The method according to one aspect of the present invention has a cost saving effect on the supply of carbon dioxide.

본 발명의 일 측면에 따른 방법은 미세조류의 지질함량을 높이는 효과가 있다.The method according to one aspect of the present invention has the effect of increasing the lipid content of microalgae.

본 발명의 일 측면에 따른 방법으로 생산된 미세조류는 생산성이 높은 바이오디젤 원료를 생산할 수 있다.The microalgae produced by the method according to one aspect of the present invention can produce the biodiesel raw material with high productivity.

본 발명의 일 측면에 따른 방법은 화력발전소 배기가스를 이용하기 때문에 배기가스 내 존재하는 이산화탄소를 제거하여 온실가스 배출을 저감할 수 있다.Since the method according to one aspect of the present invention uses a thermal power plant exhaust gas, the carbon dioxide present in the exhaust gas can be removed to reduce greenhouse gas emissions.

본 발명의 일 측면에 따른 방법은 탄소배출권거래 시행 시 탄소 배출 거래를 통해 이산화탄소 판매수익을 창출할 수 있다.The method according to one aspect of the present invention can generate carbon dioxide sales revenue through carbon emission trading during carbon trading.

도 1은 미세조류 아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus) KGE 30 을 공기, 상업용 이산화탄소, 화력발전소 배기가스 에서 배양한 생산속도 모식도이다.
도 2는 아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus) KGE 30에 화력발전소 배기가스를 연속적으로 주입하여 최대성장량을 증가시킨 모식도이다.
도 3은 아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus)KGE 30 배양 시 화력발전소 내 이산화탄소 제거 속도를 나타낸 모식도이다.
Figure 1 shows the microalgae Acudodesmus < RTI ID = 0.0 > obliquus ) KGE 30 in air, commercial carbon dioxide, and thermal power plant exhaust gas.
Fig. 2 is a schematic view of an Acutodesmus Obliquus ) This is a schematic diagram in which the maximum growth rate is increased by continuously injecting thermal power plant exhaust gas into KGE 30.
FIG. 3 shows a schematic diagram of an Acutodesmus obliquus ) KGE 30, the rate of carbon dioxide removal in a thermal power plant.

바이오 에너지는 바이오 디젤의 원료로 사용될 수 있으며 타 원료에 비해 단위면적당 생산량이 매우 우수하다. 미세조류를 이용 할 경우 장점은 1) 미세조류의 배양에는 태양과, 물, 대기 이산화탄소 혹은 인위적 배출 탄소원 만을 이용하여 생산이 가능함 2) 광합성작용으로 인해 지구 온실가스의 주요인인 이산화탄소를 고정하고 산소를 배출함 3) 1세대 목질계 2세대 사탕수수의 바이오 매스에 비해 단위 면적당 생산량이 매우 우수함 4) 미세조류의 건조중량 대비 지질의 함량이 매우 고농도로 (20~70%)이루어져있어 생산 효율이 우수하다.Bio-energy can be used as a raw material for biodiesel and has a very high yield per unit area compared to other raw materials. The advantages of using microalgae are as follows: 1) Microalgae can be cultivated using only sun, water, atmospheric carbon dioxide or anthropogenic carbon source. 2) Photosynthesis works to fix carbon dioxide, which is the main cause of global greenhouse gas, 3) First generation lignocellulosic second generation The production per unit area is superior to the biomass of sugar cane. 4) The production efficiency is excellent because the lipid content is very high (20 ~ 70%) compared to the dry weight of microalgae. Do.

또한, 화력발전소 내 존재하는 다량의 이산화탄소로 인해 미세조류의 성장을 촉진할수 있으며 독성물질로 알려진 SOx, NOx 등에 의해 미세조류내 존재하는 지질의 함량이 증가할 수 있다.In addition, the large amount of carbon dioxide present in the thermal power plant can promote the growth of microalgae, and the amount of lipid present in the microalgae can be increased by SOx, NOx, etc. known as toxic substances.

또한, 생산된 미세조류는 오메가3, 카로티노이드 등과 같은 기능성 식품원료 물질로 사용이 가능하며 이산화탄소를 주입하여 함량을 증대하거나 생산량을 증대할 수 있다.In addition, the produced microalgae can be used as a raw material for functional food such as omega 3, carotenoid, etc., and the content can be increased or the production amount can be increased by injecting carbon dioxide.

본 발명의 일 관점에서, 아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus)KGE 30 미세조류를 제공한다. 구체적으로 상기 미세조류는 기탁번호가 KCTC18367P인 미세조류일 수 있다.In one aspect of the present invention, Acutodesmus obliquus KGE 30 microalgae are provided. Specifically, the microalgae may be microalgae having the accession number KCTC18367P.

본 발명의 일 관점에서, 미세조류에 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류의 배양과 배기가스 내 이산화탄소 제거를 동시에 수행하는 방법을 제공한다.In one aspect of the present invention, there is provided a method for simultaneously cultivating a microalgae and removing carbon dioxide in an exhaust gas, which comprises culturing a microalgae by supplying an exhaust gas containing carbon dioxide to the microalgae.

본 발명의 일 관점에서, 미세조류에 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류의 성장을 촉진시키는 방법을 제공한다.In one aspect of the present invention, there is provided a method for promoting the growth of microalgae, comprising culturing microalgae by supplying an exhaust gas containing carbon dioxide to the microalgae.

본 발명의 일 관점에서, 미세조류에 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류 내 지질 생산량을 증대시키는 방법을 제공한다.In one aspect of the present invention, there is provided a method for increasing lipid production in a microalgae, comprising culturing a microalgae by supplying an exhaust gas containing carbon dioxide to the microalgae.

본 발명의 일 관점에서, 미세조류에 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류 내 지방산의 생산량을 증대시키는 방법을 제공한다.In one aspect of the present invention, there is provided a method for increasing the production amount of fatty acids in a microalgae, comprising culturing a microalgae by supplying an exhaust gas containing carbon dioxide to the microalgae.

본 발명의 일 관점에서 상기 지방산의 함량은 총 지질 대비 1.00%(w/w)이상, 1.05%(w/w)이상, 1.10%(w/w)이상, 1.15%(w/w)이상, 1.20%(w/w)이상, 1.25%(w/w)이상, 1.30%(w/w)이상, 1.35%(w/w)이상, 1.40%(w/w)이상, 1.45%(w/w)이상, 1.50%(w/w)이상, 1.55%(w/w)이상, 1.60%(w/w)이상, 1.65%(w/w)이상, 1.70%(w/w)이상, 1.75%(w/w)이상, 1.80%(w/w)이상, 1.90%(w/w)이상, 2.00%(w/w)이상, 2.10%(w/w)이상, 2.20%(w/w)이상, 2.30%(w/w)이상, 2.40%(w/w)이상, 2.50%(w/w)이상, 2.60%(w/w)이상, 2.70%(w/w)이상, 2.75%(w/w)이상, 2.80%(w/w)이상, 2.85%(w/w)이상, 2.90%(w/w)이상, 2.95%(w/w)이상, 3.00%(w/w)이상, 3.05%(w/w)이상, 3.10%(w/w)이상, 3.15%(w/w)이상, 3.20%(w/w)이상, 3.22%(w/w)이상 또는 3.25%(w/w)이상일 수 있다.In one aspect of the present invention, the fatty acid content is at least 1.00% (w / w), at least 1.05% (w / w), at least 1.10% (w / 1.25% (w / w), 1.30% (w / w), 1.35% (w / w), 1.40% (w / w / w or more, 1.50% w / w, 1.55% w / w, 1.60% w / w, 1.65% w / w, 1.70% (w / w), not less than 1.80% (w / w), not less than 1.90% (w / w), not less than 2.00% (w / 2.30% (w / w), 2.40% (w / w), 2.50% (w / w), 2.60% (w / w), 2.70% (w / (w / w), not less than 2.80% (w / w), not less than 2.85% (w / w), not less than 2.90% (w / w), not less than 2.95% (w / (W / w), 3.10% (w / w), 3.15% (w / w), 3.20% (w / w), 3.22% (w / w / w).

본 발명의 일 관점에서, 상기 배기가스의 이산화탄소 농도는 0.1% 이상, 0.2% 이상, 0.3% 이상, 0.4% 이상, 0.5% 이상, 0.6% 이상, 0.7% 이상, 0.8% 이상, 0.9% 이상, 1% 이상, 2% 이상, 3% 이상, 4% 이상, 5% 이상, 6% 이상, 7% 이상, 8% 이상, 9% 이상, 10% 이상, 11% 이상, 12% 이상, 13% 이상, 14% 이상, 15% 이상, 16% 이상, 17% 이상, 18% 이상 또는 19% 이상일 수 있다.In one aspect of the present invention, the concentration of carbon dioxide in the exhaust gas is at least 0.1%, at least 0.2%, at least 0.3%, at least 0.4%, at least 0.5%, at least 0.6%, at least 0.7%, at least 0.8% More than 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12% , At least 14%, at least 15%, at least 16%, at least 17%, at least 18%, or at least 19%.

한편, 상기 배기가스의 이산화탄소 농도는 80% 이하, 70% 이하, 60% 이하, 50% 이하, 40% 이하, 30% 이하, 29% 이하, 28% 이하, 27% 이하, 26% 이하, 25% 이하, 24% 이하, 23% 이하, 22% 이하, 21% 이하, 20% 이하, 19% 이하, 18% 이하, 17% 이하, 16% 이하, 15% 이하, 14% 이하, 13% 이하, 12% 이하, 11% 이하 또는 10% 이하일 수 있다.The carbon dioxide concentration of the exhaust gas is 80% or less, 70% or less, 60% or less, 50% or less, 40% or less, 30% or less, 29% or less, 28% or less, 27% or less, Or less, 24% or less, 23% or less, 22% or less, 21% or less, 20% or less, 19% or less, 18% or less, 17% or less, 16% or less, 15% or less, 14% or less, 13% , 12% or less, 11% or less, or 10% or less.

배기가스의 이산화탄소 농도가 상기 범위내일 때 미세조류의 성장을 효과적으로 촉진시키며, 미세조류의 지질 또는 지방산의 생산량을 효과적으로 증대시킬 수 있다.When the carbon dioxide concentration of the exhaust gas is within the above range, the growth of the microalgae is effectively promoted and the production amount of the lipid or fatty acid of the microalgae can be effectively increased.

본 발명의 일 관점에서, 상기 배기가스는 화력 발전소의 배기가스인 방법을 제공한다.In one aspect of the present invention, the exhaust gas is an exhaust gas from a thermal power plant.

본 발명의 일 관점에서, 상기 배기가스는 상기 미세조류의 성장 둔화 시점마다 주입되며, 상기 미세조류의 성장 둔화 시점은, 측정시점의 680 nm에서 측정한 OD값이 측정시점 하루 전의 680 nm에서 측정한 OD값 대비 1.25배 이하, 1.24배 이하, 1.23배 이하, 1.22배 이하, 1.21배 이하, 1.20배 이하, 1.19배 이하, 1.18배 이하, 1.17배 이하, 1.16배 이하 또는 1.15배 이하인 경우의 측정 시점인 것을 특징으로 하는 방법을 제공한다.In one aspect of the present invention, the exhaust gas is injected at each growth slowing point of the microalgae, and the growth slowing point of the microalgae is measured by measuring the OD value measured at 680 nm at 680 nm 1.24 times, 1.21 times, 1.21 times, 1.21 times, 1.21 times, 1.21 times, 1.19 times, 1.18 times, 1.17 times, 1.16 times, or 1.15 times the OD value And a time point of time when the first time point is reached.

OD 값의 비율이 상기 범위 내일 때, 미세조류의 성장이 둔화되는 시점이며, 상기 둔화되는 시점에 배기가스를 투입함으로써 미세조류의 성장을 효과적으로 촉진시키며, 미세조류의 지질, 지방산, 또는 불포화 지방산의 생산량을 효과적으로 증대시킬 수 있다.When the ratio of the OD value is within the above range, the growth of the microalgae is slowed down. By injecting the exhaust gas at the time of the slowing, the growth of the microalgae is effectively promoted and the lipid, fatty acid or unsaturated fatty acid The production amount can be effectively increased.

본 발명의 일 관점에서 상기 미세 조류는 pH 3 내지 7의 환경에서 성장 속도가 최적 pH에서의 성장 속도에 비해 35% 내지 95% 이상의 성장률을 나타내는 미세조류 일 수 있다. In one aspect of the present invention, the microalgae may be microalgae having a growth rate of 35% to 95% or more in growth rate at an optimum pH in an environment of pH 3 to 7.

본 발명의 일 관점에서, 상기 미세조류는 pH 5.5의 환경에서 배양 시 미세조류의 최적 pH(Optimal pH)에서의 배양 시 성장 속도의 35% 이상의 성장률, 40% 이상의 성장률, 45% 이상의 성장률, 50% 이상의 성장률, 55% 이상의 성장률, 60% 이상의 성장률, 65% 이상의 성장률, 70% 이상의 성장률, 75% 이상의 성장률, 80% 이상의 성장률, 85% 이상의 성장률, 90% 이상의 성장률, 또는 95% 이상의 성장률을 나타내는 미세조류인 것을 특징으로 하는 방법을 제공한다. In one aspect of the present invention, the microalgae have a growth rate of 35% or more, a growth rate of 40% or more, a growth rate of 45% or more, a growth rate of 50% or more of the growth rate at the optimal pH (optimal pH) % Growth rate, more than 55% growth rate, more than 60% growth rate, more than 65% growth rate, more than 70% growth rate, more than 75% growth rate, more than 80% growth rate, more than 85% growth rate, more than 90% Characterized in that the microalgae are microalgae representing the microalgae.

본 발명의 일 관점에서, 상기 미세조류는 pH 5.0의 환경에서 배양 시 미세조류의 최적 pH(Optimal pH)에서의 배양 시 성장 속도의 35% 이상의 성장률, 40% 이상의 성장률, 45% 이상의 성장률, 50% 이상의 성장률, 55% 이상의 성장률, 60% 이상의 성장률, 65% 이상의 성장률, 70% 이상의 성장률, 75% 이상의 성장률, 80% 이상의 성장률, 85% 이상의 성장률, 90% 이상의 성장률, 또는 95% 이상의 성장률을 나타내는 미세조류인 것을 특징으로 하는 방법을 제공한다.In one aspect of the present invention, the microalgae have a growth rate of 35% or more, a growth rate of 40% or more, a growth rate of 45% or more, a growth rate of 50% or more of the growth rate at the optimum pH (optimal pH) % Growth rate, more than 55% growth rate, more than 60% growth rate, more than 65% growth rate, more than 70% growth rate, more than 75% growth rate, more than 80% growth rate, more than 85% growth rate, more than 90% Characterized in that the microalgae are microalgae representing the microalgae.

본 발명의 일 관점에서, 상기 미세조류는 pH 4.5의 환경에서 배양 시 미세조류의 최적 pH(Optimal pH)에서의 배양 시 성장 속도의 35% 이상의 성장률, 40% 이상의 성장률, 45% 이상의 성장률, 50% 이상의 성장률, 55% 이상의 성장률, 60% 이상의 성장률, 65% 이상의 성장률, 70% 이상의 성장률, 75% 이상의 성장률, 80% 이상의 성장률, 85% 이상의 성장률, 90% 이상의 성장률, 또는 95% 이상의 성장률을 나타내는 미세조류인 것을 특징으로 하는 방법을 제공한다. In one aspect of the present invention, the microalgae has a growth rate of 35% or more, a growth rate of 40% or more, a growth rate of 45% or more, a growth rate of 50% or more of the growth rate at the optimal pH (optimal pH) % Growth rate, more than 55% growth rate, more than 60% growth rate, more than 65% growth rate, more than 70% growth rate, more than 75% growth rate, more than 80% growth rate, more than 85% growth rate, more than 90% Characterized in that the microalgae are microalgae representing the microalgae.

본 발명의 일 관점에서, 상기 미세조류는 pH 4.0의 환경에서 배양 시 미세조류의 최적 pH(Optimal pH)에서의 배양 시 성장 속도의 35% 이상의 성장률, 40% 이상의 성장률, 45% 이상의 성장률, 50% 이상의 성장률, 55% 이상의 성장률, 60% 이상의 성장률, 65% 이상의 성장률, 70% 이상의 성장률, 75% 이상의 성장률, 80% 이상의 성장률, 85% 이상의 성장률, 90% 이상의 성장률, 또는 95% 이상의 성장률을 나타내는 미세조류인 것을 특징으로 하는 방법을 제공한다. In one aspect of the present invention, the microalgae have a growth rate of 35% or more, a growth rate of 40% or more, a growth rate of 45% or more, a growth rate of 50% or more of the growth rate at the optimal pH (optimal pH) % Growth rate, more than 55% growth rate, more than 60% growth rate, more than 65% growth rate, more than 70% growth rate, more than 75% growth rate, more than 80% growth rate, more than 85% growth rate, more than 90% Characterized in that the microalgae are microalgae representing the microalgae.

본 발명의 일 관점에서, 상기 미세조류는 pH 3.5의 환경에서 배양 시 미세조류의 최적 pH(Optimal pH)에서의 배양 시 성장 속도의 35% 이상의 성장률, 40% 이상의 성장률, 45% 이상의 성장률, 50% 이상의 성장률, 55% 이상의 성장률, 60% 이상의 성장률, 65% 이상의 성장률, 70% 이상의 성장률, 75% 이상의 성장률, 80% 이상의 성장률, 85% 이상의 성장률, 90% 이상의 성장률, 또는 95% 이상의 성장률을 나타내는 미세조류인 것을 특징으로 하는 방법을 제공한다. In one aspect of the present invention, the microalgae have a growth rate of 35% or more, a growth rate of 40% or more, a growth rate of 45% or more, a growth rate of 50% or more of the growth rate at the optimum pH (optimal pH) % Growth rate, more than 55% growth rate, more than 60% growth rate, more than 65% growth rate, more than 70% growth rate, more than 75% growth rate, more than 80% growth rate, more than 85% growth rate, more than 90% Characterized in that the microalgae are microalgae representing the microalgae.

본 발명의 일 관점에서, 상기 미세조류는 pH 3.0의 환경에서 배양 시 미세조류의 최적 pH(Optimal pH)에서의 배양 시 성장 속도의 35% 이상의 성장률, 40% 이상의 성장률, 45% 이상의 성장률, 50% 이상의 성장률, 55% 이상의 성장률, 60% 이상의 성장률, 65% 이상의 성장률, 70% 이상의 성장률, 75% 이상의 성장률, 80% 이상의 성장률, 85% 이상의 성장률, 90% 이상의 성장률, 또는 95% 이상의 성장률을 나타내는 미세조류인 것을 특징으로 하는 방법을 제공한다. In one aspect of the present invention, the microalgae have a growth rate of 35% or more, a growth rate of 40% or more, a growth rate of 45% or more, a growth rate of 50% or more of the growth rate at the optimal pH (optimal pH) % Growth rate, more than 55% growth rate, more than 60% growth rate, more than 65% growth rate, more than 70% growth rate, more than 75% growth rate, more than 80% growth rate, more than 85% growth rate, more than 90% Characterized in that the microalgae are microalgae representing the microalgae.

미세조류의 성장률이 상기 범위 내일 때 이산화탄소를 탄소원으로 하는 배기가스 내에서 우수한 성장율을 보일 수 있다.When the growth rate of the microalgae is within the above range, an excellent growth rate can be shown in the exhaust gas containing carbon dioxide as a carbon source.

구체적으로 상기 미세조류는 세네데스무스 속(Scenedesmus sp.), 네프로셀미스 속(Nephroselmis sp .), 마이크락티니움 속(Micractinium sp .) 및 아쿠도데스무스 속(Acutodesmus sp.)중 어느 하나 이상일 수 있다. 더욱 구체적으로, 상기 미세조류는 세네데스무스 오블리쿠스(Scenedesmus obliquus), 마이크락티니움 레이저리(Micractinium reisseri) 및 아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus)중 어느 하나 이상일 수 있다.Specifically, the microalgae are selected from the group consisting of Scenedesmus sp .), Neoplaselmis sp . ), ≪ / RTI > Micractinium sp . And Acutodesmus sp. ) . ≪ / RTI > More specifically, the microalgae are selected from the group consisting of Scenedesmus obliquus , Micractinium reisseri , and Acutodesmus obliquus . In the present invention,

본 발명의 일 관점에서, 상기 미세조류는 아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus) KGE 30인 방법을 제공한다. 구체적으로 상기 미세조류는 기탁번호가 KCTC18367P인 미세조류일 수 있다.In one aspect of the present invention, the microalgae is Acutodesmus obliquus KGE 30. Specifically, the microalgae may be microalgae having the accession number KCTC18367P.

본 발명의 일 관점에서, 상기 미세조류를 배양시키는 것은, 상기 배기가스 이외에 폐수를 함께 공급하여 배양시키는 것을 포함하는 방법을 제공한다.In one aspect of the present invention, culturing the microalgae comprises culturing the microalgae by supplying wastewater together with the exhaust gas in addition to the exhaust gas.

한편, 상기 폐수는 가축분뇨, 광산배수, 생활폐수 및 음식물 폐수 중 어느 하나를 포함하는 폐수일 수 있다.On the other hand, the wastewater may be wastewater containing any one of livestock manure, mine drainage, domestic wastewater and food wastewater.

본 발명의 일 관점에서, 지질 생산성이 우수한 미세조류의 선별방법으로서, 상기 방법은 하기 중 어느 하나 이상을 측정하는 것을 포함하는 방법: ⅰ) 배기가스와 상업용 이산화탄소를 각각 이용하여 미세조류를 배양하여 각각의 성장량 측정; 및 ⅱ) 배기가스와 상업용 이산화탄소를 각각 이용하여 미세조류를 배양하여 각각의 지질함량 측정을 제공한다.In one aspect of the present invention, there is provided a method for screening microalgae that is superior in lipid productivity, the method comprising measuring one or more of the following: i) culturing microalgae using exhaust gas and commercial carbon dioxide, Measurement of each growth; And ii) culturing microalgae using exhaust gas and commercial carbon dioxide, respectively, to provide a measure of the respective lipid content.

본 발명의 일 관점에서, 상기 ⅰ) 또는 ⅱ)중 어느 하나 이상의 측정은 KH2PO4, CaCl2 ·2H2O, MgSO4 ·7H2O, NaNO3, K2HPO4, NaCl, H3BO3, 및 Na2EDTA 중 어느 하나 이상을 포함하는 합성배지에서 배양하여 측정할 수 있다.In one aspect of the invention, the ⅰ) or ⅱ) any one or more measures of the KH 2 PO 4, CaCl 2 · 2H 2 O, MgSO 4 · 7H 2 O, NaNO 3, K 2 HPO 4, NaCl, H 3 BO 3 , and Na 2 EDTA in a synthetic medium.

본 발명의 일 관점에서, 지질 생산성이 우수한 미세조류의 선별방법은 상기 ⅱ)의 배기가스를 이용한 지질함량이 상업용 이산화탄소를 이용한 지질함량에 비해 더 높은 함량을 가지는 것 일 수 있다.
In one aspect of the present invention, the method for selecting microalgae having excellent lipid productivity may be such that the lipid content using the exhaust gas of the above ii) has a higher content than the lipid content using commercial carbon dioxide.

본 명세서에서 “배기가스”는 특정 물질이 연소, 합성 또는 분해되면서 발생하는 기체성 물질을 모두 포함할 수 있다. 구체적으로 본 명세서의 배기가스는 화력발전소로부터 배출되는 기체를 포함할 수 있고, 이러한 배기가스는 이산화탄소를 포함할 수 있다. As used herein, the term " exhaust gas " may include all gaseous substances generated by burning, synthesizing or decomposing a specific substance. Specifically, the exhaust gas in the present specification may include gas discharged from a thermal power plant, and such exhaust gas may include carbon dioxide.

본 명세서에서 “미세조류”는 광합성 색소를 가지고 광합성을 하는 단세포생물을 모두 포함하는 것으로 담수 및/또는 해수에 생존하는 조류를 제한 없이 포함한다. 구체적으로, 본 명세서의 미세조류는 산성의 환경 또는 염도가 높은 환경에서 잘 생존하는 종일 수 있다. 예컨대, 본 명세서의 미세조류는 pH 4 내지 6의 환경에서 우수한 생존력을 보이는 종일 수 있다. As used herein, the term " microalgae " includes all single-celled organisms that are photosynthetic with photosynthetic pigments, and include, without limitation, algae that survive in freshwater and / or seawater. Specifically, the microalgae of the present specification can be species that survive well in an acidic or salty environment. For example, the microalgae of the present specification may be species exhibiting excellent viability in an environment of pH 4 to 6.

본 명세서에서 "배기가스 내성의 미세조류"는 상기 배기가스에서도 실시예1과 같이 미세조류의 성장이 정상적인 미세조류를 포함할 수 있다.In the present specification, "microalgae of exhaust gas resistance" may include normal microalgae in the above-mentioned exhaust gas even when growth of microalgae as in Example 1 is concerned.

본 발명의 일 관점에서, 미세조류의 배양은 15 내지 35℃, pH 5 내지 8에서 배양하는 것이 바람직하다. 또한, BBM 배지(KH2PO4, CaCl2 ·2H2O, MgSO4 ·7H2O, NaNO3, K2HPO4, NaCl, H3BO3, Na2EDTA 및 미량원소를 함유하는 배지)에서 배양하는 것이 보다 바람직하다. 상기 미량원소는 ZnSO4 ·7H2O, MnCl2 ·4H2O, MoO3, CuSO4 ·5H2O 및 Co(NO3)6H2O 로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있다.In one aspect of the present invention, it is preferable that the microalgae are cultured at 15 to 35 占 폚, pH 5 to 8. Also, BBM culture medium (KH 2 PO 4, CaCl 2 · 2H 2 O, MgSO 4 · 7H 2 O, NaNO 3, K 2 HPO 4, NaCl, H 3 BO 3, Na 2 medium containing EDTA and trace elements) It is more preferable to cultivate the cells. The trace elements are ZnSO 4 · 7H 2 O, MnCl 2 · 4H 2 O, MoO 3, CuSO 4 · 5H 2 O and Co (NO 3) 2 · may be at least one selected from the group consisting of 6H 2 O.

본 발명의 일 관점에서, 조류의 지질을 분석하는 방법으로는 Bligh and Dyer (CHCl3 + MeOH) 법 등을 실시하여 추출된 지질을 분석해 낼 수 있다. 또한, 상기의 분리한 지질을 황산과 메탄올을 이용하여 메틸레이션시켜 지방산 메틸이써 (fatty acid methyl ester)화 하여 GC-FID (BRUKER) 를 이용하여 지방산을 분석한 결과, 팔미틴산 (palmitic acid)이 총 지방산 함량에 대하여 34 중량%, 올레인산(oleic acid) 이 총 지방산 함량에 대하여 13 중량%, 감마 리놀레닉산 (γ-linolenic acid) 35 중량% 포함되어 있음을 확인하였고, 분리된 지질(지방산)을 사용하여 바이오 디젤을 생산할 수 있는 바, 본 발명은 상기 지질을 이용한 바이오 디젤 생산방법도 포함할 수 있다.
In one aspect of the present invention, the lipid of the algae can be analyzed by Bligh and Dyer (CHCl 3 + MeOH) method or the like. Fatty acid was analyzed by GC-FID (BRUKER) by fatty acid methyl ester by methylation using sulfuric acid and methanol, and palmitic acid It was confirmed that 34 wt%, oleic acid and 13 wt% of gamma-linolenic acid were contained in the total fatty acid content, 13 wt% and 35 wt%, respectively, The present invention can also include a method for producing biodiesel using the lipid.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 더욱 상세히 설명한다. 단, 하기의 실시예는 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail by way of examples. It should be noted, however, that the following examples are illustrative of the invention and are not intended to limit the scope of the invention.

[실시예1] 미세조류 종의 선별[Example 1] Selection of microalgae species

고농도의 화력발전소 내에서 정상적으로 생장할 수 있는 미세조류를 선별하기 위한 실험을 진행하였다. 기본 배지인 Bold Basal Media (이하 "BBM"이라 함) 에서 배기가스 이산화탄소 농도 14.1 볼륨%를 연속적으로 주입한 배양액에서 선별 실험을 진행하였다. 아래 표 1에서 제시한 3종의 미세조류를 배양액에 접종 후 5일간 항온 수평 진탕기에서 배양을 진행하였다. 이때 배양조건은 온도 27℃, pH 6.0-6.5, 교반은 150 rpm, 조도는 100 μmol/㎡-sec를 유지 하였다. 배양완료 후 각각의 미세조류 성장 정도를 OD(Optical density at 680nm) Hach DR-2800 흡광광도계를 이용하여 결과를 얻었다. Experiments were conducted to select microalgae that can normally grow in a high concentration thermal power plant. A selection experiment was carried out in the culture medium in which the exhaust gas carbon dioxide concentration 14.1 volume% was continuously injected from the basic medium Bold Basal Media (hereinafter referred to as "BBM"). Three kinds of microalgae shown in Table 1 below were inoculated into the culture medium and incubated for 5 days on a constant-temperature shaker. At this time, the culture conditions were maintained at a temperature of 27 ° C, pH 6.0-6.5, stirring of 150 rpm, and illumination of 100 μmol / m 2 -sec. After the incubation, the degree of growth of each microalgae was obtained by using OD (optical density at 680 nm) Hach DR-2800 absorption spectrophotometer.

Algal speciesAlgal species Strain IDStrain ID Accession NumberAccession Number ODOD ScenedesmusScenedesmus obliquusobliquus KGE 9KGE 9 HE861884HE861884 0.500.50 NephroselmisNephroselmis spsp .. KGE 11KGE 11 HE861883HE861883 0.100.10 MicractiniumMicractinium reisserireisserier KGE 22KGE 22 HE974910HE974910 0.150.15

또한, Acutodesmus obliquus(KGE30)를 상기 미세조류의 성장정도 측정방법과 같은 방법으로 흡광도를 측정한 결과, OD 값이 1.15로 측정되었다. 성장 정도가 가장 우수하였던 균주인 Acutodesmus obliquus(KGE30)를 한국생명공학연구원에 2015년 4월 21일에 기탁하였다. 상기 KGE 30 의 OD값이 높으므로 고농도 배기가스 실험에 용이한 것으로 판단하고 이를 이하 실험에 사용하였다.
Also, Acutodesmus The OD value of the obliquus (KGE30) was measured to be 1.15 as a result of measurement of the absorbance by the same method as that for measuring the degree of growth of the microalgae. Acutodesmus, the strain with the highest growth rate obliquus (KGE30) was deposited at Korea Biotechnology Research Institute on April 21, 2015. Since the OD value of the KGE 30 was high, it was judged to be easy to test the exhaust gas at a high concentration and it was used in the following experiments.

[실시예2] 배기가스 성분 분석 및 배양액 치환[Example 2] Analysis of exhaust gas components and replacement of culture liquid

영동화력 발전소 배기가스를 포집 후 testo 350K 연소효율분석기(독일 테스토 社)를 이용하여 배기가스 내 성분을 분석하였다. 그 결과, NOx 200ppm, SOx 50ppm, CO 100ppm, CO2 14.1% 로 나타났다. 배기가스를 펌프를 이용하여 이동 시킨 후 분배기를 통해 실험용 병에 포함된 배양액에 30분간 0.5L/min 의 속도로 치환하여 사용하였다.
After collecting the exhaust gas from the Yeongdong Thermal Power Plant, the components in the exhaust gas were analyzed using a testo 350K combustion efficiency analyzer (Testo, Germany). As a result, NOx 200 ppm, SOx 50 ppm, CO 100 ppm, and CO 2 14.1%. The exhaust gas was transferred by a pump and then replaced at a rate of 0.5 L / min for 30 minutes in the culture solution contained in the experimental bottle through a distributor.

[실시예3] 미세조류 배양[Example 3] Microalgae culture

BBM의 부피가 300 mL가 되도록 실험용 병에 채운 후 배기가스의 퍼징(perging)을 실시하였다(실험군). 미세조류(KGE30)의 초기 농도는 실험용 병 내 초기 OD680농도를 0.015로 조절하였다. 실험용기는 형광등이 부착된 항온 수평 진탕기를 이용하여 온도 27℃, pH 5.5, 150 rpm, 120 μmol/㎡-sec의 조건하에 5일 동안 배양시켰다. 이때, 배기가스에 의한 효과를 확인하기 위해 상업용 CO2 (대일가스)14.1% 및 대기공기를 치환한 병 각각을 대조군으로 하였다. The flask was filled with the test bottle so that the volume of the BBM became 300 mL, and the exhaust gas was pergaged (experimental group). The initial concentration of microalgae (KGE30) was adjusted to an initial OD 680 concentration of 0.015 in the experimental bottle. The experimental vessel was incubated for 5 days at a temperature of 27 ° C, pH 5.5, 150 rpm, and 120 μmol / ㎡-sec using a thermostatic shaker equipped with a fluorescent lamp. At this time, in order to confirm the effect of the exhaust gas, 14.1% of commercial CO 2 (Japanese gas) and each of the bottles in which atmospheric air was replaced were used as a control group.

실험 결과를 도 1에 표시하였다. 실험 결과, 공기를 대조군으로 한 경우에 비해 배기가스를 사용한 경우(실험군)가 성장속도와 최대성장량이 더 우수하였다. 또한, 상업용 이산화탄소를 사용하여 배양한 대조군과 실험군을 비교 시 비슷한 성장속도와 최대성장량을 보였다. 따라서, 배기가스를 이용하여 미세조류를 배양함에 있어 기존 상업용 이산화탄소를 사용한 경우와 비교하여 미세조류의 성장에 특이한 문제가 없었다.
The experimental results are shown in Fig. Experimental results showed that the growth rate and maximum growth rate were better in the case of using the exhaust gas than in the control group. In addition, the growth rate and maximum growth rate were similar in the control group and the experimental group cultured with commercial carbon dioxide. Therefore, there was no particular problem in the growth of microalgae when cultivating the microalgae using the exhaust gas as compared with the case of using the conventional commercial carbon dioxide.

[실시예4] 지질 함량 분석[Example 4] Analysis of lipid content

상기 실시예 3의 배양액에서 배기가스(실험군) 및 상업용 이산화탄소(대조군)에서 4일간 배양된 미세조류 아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus) KGE 30를 회수하여 스윙타입원심분리기(Hanil 社, 한국)에서 3500rpm으로 원심분리하였다. 원심 분리된 미세조류 아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus) KGE 30를 동결건조기를 이용하여 3일간 동결건조하고 그 중 500mg 를 채취하여 지질 추출용 용기(원심분리가 가능한 유리용기 및 뚜껑에 테프론 라이너가 삽입된)에 넣은 후, 용매로 클로로포럼 1.25 ml과 메탄올 2.5 ml를 유리 피펫을 이용하여 첨가하였다. 그 후, 미세조류 KGE30에 용매를 첨가한 시료를 고속교반기(Scinetific Ind 社)로 5분 동안 잘 섞어주고, 30분 동안 소니케이터(sonicatier, Bransonic 社)를 이용하여 파쇄시켜서 추출을 시작하였다. 파쇄된 미세조류 KGE30를 150 rpm, 30℃의 조건에서 항온수평진탕기로 하루 동안 교반(30℃, 150 rpm) 추출하였다. 상기 추출된 시료에 클로로포럼 1.25 ml를 유리피펫을 이용하여 첨가하고 2시간 동안 항온수평진탕기에서 추가 교반 하였다. 추출한 시료에 증류수 1.25 ml를 마이크로피펫을 이용하여 첨가하여 원심분리 한 후 유기층과 물층을 분리하였다. 상기 분리된 유기층(1차 추출물)을 파스춰피펫을 이용하여 새로운 용기(원심분리가 가능한 유리용기 및 뚜껑에 테프론 라이너가 삽입된)에 옮기고 남은 물질에 증류수 1.25 ml를 첨가하여 한 번 더 원심분리 시켰다. 이후 생성된 유기층 (2차 추출물)과 물층을 분리하고 유기층(2차 추출물)을 파스춰피펫을 이용하여 분리하여 1차 추출물과 2차 추출물을 합하여 지질 추출물을 얻었다. 이렇게 얻어진 지질 추출물에 NaCl(5%) 5ml 첨가하여 혼합한 후 원심분리하여 유기층만 옮겨 담은 후, 유기층을 회전 진공 증발 농축기를 이용하여 증발시켜 순수 지질을 분리하였다. 분리한 지질의 무게를 측정하여 지질의 무게 125 mg를 산출하였고, 사용된 미세조류의 무게는 500 mg이었다. 이를 수학식 1에 대입하여 미세조류 KGE 30 총 지질함량을 계산하였다. The microalgae, Acutodesmus ovicus , which had been cultivated in the culture medium of Example 3 for 4 days in the exhaust gas (experimental group) and the commercial carbon dioxide (control group) Obliquus KGE 30 was recovered and centrifuged at 3500 rpm in a swing type centrifuge (Hanil, Korea). Centrifuged microalgae Akudodesumesusuburikusu ( Acutodesmus Obliquus ) KGE 30 was lyophilized for 3 days using a freeze drier, 500 mg of which was collected and placed in a container for lipid extraction (a centrifugeable glass container and a lid with a Teflon liner inserted) ml and 2.5 ml of methanol were added using a glass pipette. Thereafter, the sample to which the solvent was added to the microalgae KGE30 was thoroughly mixed with a high-speed stirrer (Scinetific Ind) for 5 minutes and crushed for 30 minutes using a sonicator (Bransonic) to start extraction. The shredded microalgae KGE30 was extracted with stirring (30 ° C, 150 rpm) for one day on a constant-temperature shaker at 150 rpm and 30 ° C. 1.25 ml of chloroprene was added to the extracted sample using a glass pipette and further stirred for 2 hours on a thermostatic shaker. To the extracted sample, 1.25 ml of distilled water was added using a micropipette, centrifuged, and the organic layer and the water layer were separated. The separated organic layer (primary extract) was transferred to a new container (with a teflon liner inserted into a centrifugeable glass container and lid) using a pasture pipette, and 1.25 ml of distilled water was added to the remaining material, followed by one more centrifugation . The resulting organic layer (secondary extract) and water layer were separated, and the organic layer (secondary extract) was separated using a pasture pipette to obtain a lipid extract by combining the primary extract and the secondary extract. To the lipid extract thus obtained, 5 ml of NaCl (5%) was added and mixed. After centrifuging, only the organic layer was transferred, and the organic layer was evaporated using a rotary vacuum evaporator to separate the pure lipids. The weight of the separated lipid was measured and the weight of lipid was calculated to be 125 mg. The weight of the microalgae used was 500 mg. The total lipid content of microalgae KGE30 was calculated by substituting this into equation (1).

[수학식 1][Equation 1]

지질함량(%)=지질추출물의 건조중량(mg)/미세조류 건조중량(mg) X 100
Lipid content (%) = dry weight of lipid extract (mg) / dry weight of microalgae (mg) X 100

상기 실험 조건과 실험결과는 하기 표 2와 같다.The experimental conditions and experimental results are shown in Table 2 below.

Gas typeGas type Type of Wastewater or mediumType of Wastewater or medium Cultivation periodCultivation period
(Day)(Day)
Gas purging timeGas purging time
(min)(min)
Lipid contentLipid content
(( %% biomassbiomass ))
Commercial CO2
(대조군)
Commercial CO2
(Control group)
BBMBBM 44 3030 12.3±0.7212.3 ± 0.72
Flue gas CO2
(실험군)
Flue gas CO2
(Experimental group)
BBMBBM 44 3030 17.5±2.2517.5 ± 2.25

상기 지질 분석 실험결과, 실시예3의 결과와 같이 성장속도 및 성장량은 대조군과 실험군이 비슷하여도 지질의 함량이 배기가스 이산화탄소를 이용하였을 때 약 5% 증가함을 확인하였다. 이는 추후 지질 생산에 있어서 생산성이 우수한 미세조류를 확보하는 미세조류 배양방법이 될 수 있다.
As a result of the above lipid analysis, it was confirmed that the growth rate and growth amount of the lipid were increased by about 5% when the exhaust gas carbon dioxide was used even though the control group and the experimental group were similar. This can be a microalgae culture method for securing microalgae with high productivity in the production of lipids in the future.

[실시예5] 지방산 추출 및 분석[Example 5] Extraction and analysis of fatty acids

지방산 함량 및 조성은 Lepage와 Roy [Lepage, G., C.C. Roy (1984) Improved recovery of fatty acid through direct transesterification without prior extraction or purification, Journal of Lipid Research, 25, 1391-1396]의 방법을 변형하여 분석하였다. Fatty acid content and composition were determined by Lepage and Roy [Lepage, G., C.C. Roy (1984) Improved recovery of fatty acid through direct transesterification without prior extraction or purification, Journal of Lipid Research, 25, 1391-1396.

표준물질로 지방산 메틸 에스테르 혼합물인 FAME Quantitative Standard Mix 37 comps.[AccuStandard, USA]를 사용하였다. 테프론 마개를 가진 유리 튜브[11 mL, DH.GL28020, Daihan Scientific, Korea]에 질량을 측정한 상기 실시예4의 미세조류 지질시료를 넣고 클로로포름-메탄올(2:1, vol/vol) 2 mL을 주입한 후 상온에서 10분간 볼텍스 믹서(vortex mixer)[Vorex Genius 3. Ika, Italy]로 섞었다. FAME Quantitative Standard Mix 37 comps. [AccuStandard, USA], a mixture of fatty acid methyl esters, was used as a standard. 2 mL of chloroform-methanol (2: 1, vol / vol) was added to the microalgae lipid sample of Example 4, which had been mass-measured in a glass tube [11 mL, DH.GL28020, Daihan Scientific, After injection, the mixture was mixed at room temperature for 10 minutes with a vortex mixer (Vorex Genius 3. Ika, Italy).

내부표준물질인 노나데칸산(nonadecanoic acid)[Sigma Co., USA]를 함유한 클로로포름 1 mL (500 ㎍/L), 메탄올 1 mL, 황산 300 ㎕를 순차적으로 유리튜브에 첨가한 후 5분간 믹서로 섞었다. 튜브를 항온수조에 넣고 100℃에서 10분간 반응시켰다. 튜브를 상온까지 냉각시킨 후 증류수 1 mL을 주입하고, 믹서로 5분 정도 격렬히 섞은 후 4,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 층분리를 시켰다. 아래층 (유기상)을 1회용 PP 재질 주사기(Norm-ject, Germany)로 뽑아 1회용 0.22 ㎛ PVDF 실린지 필터[(Millex-Gv, Millipore, USA)로 여과 후 자동 주입기를 가진 가스크로마토그래피[Bruker]로 분석하였다. 분석결과는 하기 표 3과 같았다.1 mL (500 μg / L) of chloroform containing an internal standard substance nonadecanoic acid (Sigma Co., USA), 1 mL of methanol, and 300 μL of sulfuric acid were sequentially added to a glass tube, Lt; / RTI > The tube was placed in a constant-temperature water bath and reacted at 100 ° C for 10 minutes. After cooling the tube to room temperature, 1 mL of distilled water was poured, mixed vigorously for 5 minutes with a mixer, and centrifuged at 4,000 rpm for 10 minutes to separate layers. The bottom layer (organic phase) was extracted with a disposable PP material syringe (Norm-ject, Germany) and analyzed by gas chromatography [Bruker] using a disposable 0.22 μm PVDF syringe filter [(Millex-Gv, Millipore, USA) Respectively. The results of the analysis are shown in Table 3 below.

Fatty acid compositionFatty acid composition Fatty acid composition (Fatty acid composition ( %% , w/w), w / w) Exhaust fumesExhaust fumes Synthesis gasSynthesis gas Palmitic acid (C16:0)Palmitic acid (C16: 0) 34.034.0 43.443.4 Oleic acid (C18:1n9c)Oleic acid (C18: 1n9c) 13.013.0 12.412.4 Linolelaidic acid (C18:2n6t)Linolelaidic acid (C18: 2n6t) 7.87.8 3.73.7 γ-Linolenic acid (C18:3n6)γ-Linolenic acid (C18: 3n6) 36.036.0 17.217.2 OtherOther 9.29.2 23.323.3 TotalTotal 32.2±0.33(mg/g)32.2 ± 0.33 (mg / g) 9.4±0.37(mg/g)9.4 ± 0.37 (mg / g)

실험결과, 실시예3의 결과와 같이 성장속도 및 성장량은 대조군과 실험군이 비슷하여도 지방산총량이 배기가스 이산화탄소를 이용한 실험군(32.2±0.33(mg/g))이 대조군(9.4±0.37(mg/g))에 비해 약 3배 증가함을 확인하였다. 이는 추후 지방산 생산에 있어서 생산성이 우수한 미세조류를 확보하는 미세조류 배양방법이 될 수 있다.As a result of the experiment, the growth rate and the amount of growth were similar in the control group and the experimental group, but the total amount of fatty acid was in the control group (32.2 ± 0.33 (mg / g)) using the exhaust gas carbon dioxide (9.4 ± 0.37 mg / g)). This can be a microalgae culture method for securing microalgae with high productivity in fatty acid production later.

또한, 실험군은 총 건조바이오매스 1 g 대비 지방산 함량이 약 3.22% 으로, 총 건조바이오매스 1 g 대비 지방산 함량이 약 0.94%인 대조군에 비해 지방산 함량이 우수하였다.In addition, the fatty acid content of the experimental group was 3.22% higher than the total dry biomass of 1 g, and the fatty acid content was higher than that of the control group, which had a fatty acid content of about 0.94% based on 1 g of total dry biomass.

또한, 실험군이 대조군에 비해 불포화 지방산(Oleic acid (C18:1n9c), Linolelaidic acid (C18:2n6t) 및 γ-Linolenic acid (C18:3n6))의 함량이 33%에서 56%로 증가하여 바이오디젤 생산시 고품질의 바이오디젤 생산원료로 사용가능한 배양방법이 될 수 있다. In addition, the content of unsaturated fatty acids (C18: 1 n9c), linolelaidic acid (C18: 2n6t) and γ-linolenic acid (C18: 3n6) increased from 33% to 56% Can be used as a raw material for production of high quality biodiesel.

상기와 같이 실험군의 지질함량, 지방산 함량 또는 불포화 지방산 함량이 대조군에 비해 높은 것은 독성물질로 알려진 SOx, NOx 등에 의해 미세조류내 존재하는 지질의 함량이 증가할 수 있었던 것으로 추정된다. 이에 더해, 생산된 미세조류는 오메가3, 카로티노이드 등과 같은 기능성 식품원료 물질로 사용이 가능하다.
The lipid content, fatty acid content, and unsaturated fatty acid content of the experimental group were higher than those of the control group as described above. It is considered that the lipid content in the microalgae was increased due to SOx and NOx which are known as toxic substances. In addition, the microalgae produced can be used as raw materials for functional foods such as omega 3, carotenoids and the like.

[실시예6] 배기가스 이산화탄소 주입을 통한 미세조류 최대 성장량 확보[Example 6] Maximal growth of microalgae was secured by injecting carbon dioxide into exhaust gas

BBM 의 부피가 300 mL 가 되도록 실험용 병에 채운 후 실시예 1의 배기가스의 퍼징(perging)을 실시하였다. 미세조류 KGE30의 초기 농도는 실험용 병 내 초기 OD680농도를 0.015로 조절하였다. 실험용기는 형광등이 부착된 항온 수평 진탕기를 이용하여 온도 27℃, pH 5.5, 150 rpm, 120 μmol/㎡-sec의 조건하에 16 일 동안 배양시켰다. 배양시 4, 8, 11일에 30분간 치환을 재 실시하였으며 이후 매일 성장량을 OD로 확인하였다. 본원 발명의 미세조류는 성장 중 OH-를 발산하여 pH가 상승되며, 이때 pH 10 이상이 되게 되면 성장이 둔화되게 된다. 치환을 실시한 구간은 성장량이 둔화되는 부분에서 실시하였으며 치환 후 pH 가 약 7로 감소한 후 성장이 진행되면서 pH 11 로 회복됨을 확인하였다. 상기 실험결과를 도 2에 나타내었다.The flask was filled with a test bottle so that the volume of the BBM became 300 mL, and the exhaust gas of Example 1 was purged. The initial concentration of microalgae KGE30 was adjusted to an initial OD 680 concentration of 0.015 in the experimental bottle. Experimental containers were incubated for 16 days under conditions of temperature of 27 ° C, pH 5.5, 150 rpm, and 120 μmol / ㎡-sec, using a thermostatic shaker equipped with a fluorescent lamp. During the incubation, the cells were replanted on days 4, 8, and 11 for 30 min. The microalgae of the present invention emit OH - during growth and the pH is raised. When the pH is above 10, the growth is slowed down. After the substitution, the pH was decreased to about 7 after the substitution and the pH was restored to 11 as the growth progressed. The experimental results are shown in Fig.

실험 결과 최초 치환을 통해 성장시킨 미세조류 KGE 30의 최대 성장량이 OD 1.15, 2차 치환 후 OD 1.6, 3차 치환 후 OD 2.5 4차 치환후 OD 2.9로 증가함을 확인하였다. 이는 연속적으로 배기가스 이산화탄소를 이용하여 배양시 미세조류의 최대성장량을 증가 시킬 수 있는 결과로 고농도의 미세조류 배양이 가능한 방법이다.
Experimental results show that the maximum growth of the microalgae KGE 30 grown by the first displacement is increased to OD 1.15, OD 1.6 after the second substitution, and OD 2.9 after the fourth substitution of OD 2.5 after the third substitution. This is a method capable of culturing microalgae at a high concentration as a result of continuously increasing the maximum growth amount of microalgae using the exhaust gas carbon dioxide.

[실시예7] 배기가스 내 탄소원의 제거[Example 7] Removal of carbon source in exhaust gas

BBM 의 부피가 300 mL 가 되도록 실험용 병에 채운 후 배기가스(실험군)와 상업용 이산화탄소(대조군)의 퍼징(perging)을 실시하였다. 미세조류의 초기 농도는 실험용 병 내 초기 OD680 값을 0.015로 조절하였다. 실험용기는 형광등이 부착된 항온 수평 진탕기를 이용하여 온도 27℃, pH 5.5, 150 rpm, 120 μmol/㎡-sec의 조건하에 5 일동안 배양시켰다. 이때 TOC 분석기(Simadzu 社)를 이용하여 배양액내 존재하는 탄소원의 형태와 감소량을 확인하였다. 탄소원의 형태는 무기탄소(TIC)와 유기탄소(TOC)로 나누었으며 무기탄소와 유기탄소를 합친량을 총탄소(TC)로 하였다. 분석용 샘플은 배양용기에서 멸균된 실린지를 이용하여 배양액을 채취후 PVDF 필터를 이용하여 미세조류와 용액을 분리하고 용액만을 TOC 분석기에 주입하여 분석을 진행하였다. 실험결과는 도 3에 나타내었다.The test bottle was filled with 300 mL of BBM and purged of exhaust gas (experimental group) and commercial carbon dioxide (control group). The initial concentration of microalgae was adjusted to an initial OD 680 value of 0.015 in the experimental bottle. The experimental vessel was incubated for 5 days at a temperature of 27 ° C, pH 5.5, 150 rpm, and 120 μmol / ㎡-sec using a thermostatic shaker equipped with a fluorescent lamp. At this time, TOC analyzer (Simadzu) was used to confirm the type and amount of carbon source present in the culture solution. The form of the carbon source was divided into inorganic carbon (TIC) and organic carbon (TOC), and the total amount of inorganic carbon and organic carbon was defined as total carbon (TC). For the analysis sample, the culture solution was sampled using a sterilized syringe in a culture vessel, the microalgae and the solution were separated using a PVDF filter, and the solution was injected into the TOC analyzer. The experimental results are shown in Fig.

약어: Abbreviation:

TC (Total Carbnon)TC (Total Carbnon)

TIC (Total Inorganic Carbon)TIC (Total Inorganic Carbon)

TOC (Total Organic Carbon)
TOC (Total Organic Carbon)

그 결과 배양이 최대에 도달한 2~3일 TIC 농도가 0에 가깝게 감소하였다. 배기가스 이산화탄소는 무기탄소로 배양액내 TIC를 공급하였는데 이를 모두 이용해 미세조류가 성장하였다. 이는 배기가스 내 존재하는 이산화탄소의 지속적 공급을 통해 배기가스 내 이산화탄소를 제거하는데 활용될 수 있는 배양방법이다.
As a result, the concentration of TIC decreased to near zero at 2 ~ 3 days when the culture reached its maximum. Exhaust gas Carbon dioxide was supplied with TIC in the culture medium with inorganic carbon, and microalgae were grown using all of them. This is a culture method that can be utilized to remove carbon dioxide in the exhaust gas through the continuous supply of carbon dioxide present in the exhaust gas.

이상의 설명은 본 발명의 기술사상을 예시적으로 설명한 것에 불과한 것으로서, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 수정 및 변형이 가능할 것이다. 따라서, 본 발명에 개시된 도면들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 도면들에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.The foregoing description is merely illustrative of the technical idea of the present invention and various changes and modifications may be made by those skilled in the art without departing from the essential characteristics of the present invention. Therefore, the drawings disclosed in the present invention are intended to illustrate and not limit the technical spirit of the present invention, and the scope of the technical idea of the present invention is not limited by these drawings. The scope of protection of the present invention should be construed according to the following claims, and all technical ideas within the scope of equivalents should be construed as falling within the scope of the present invention.

한국생명공학연구원Korea Biotechnology Research Institute KCTC18367PKCTC18367P 2015040620150406

Claims (20)

아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus)KGE 30인 미세조류. Acutodesmus obliquus ) KGE 30 microalgae. 제 1항에 있어서,
상기 미세조류는 기탁번호가 KCTC18367P인 미세조류.
The method according to claim 1,
Wherein said microalgae is KCTC18367P.
미세조류에 탄소원으로서 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류의 배양과 배기가스 내 이산화탄소 제거를 동시에 수행하는 방법.A method for simultaneously cultivating a microalgae and removing carbon dioxide in an exhaust gas, the method comprising culturing a microalgae by supplying an exhaust gas containing carbon dioxide as a carbon source to the microalgae. 미세조류에 탄소원으로서 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류의 성장을 촉진시키는 방법.A method for promoting the growth of microalgae, comprising feeding microalgae with an exhaust gas containing carbon dioxide as a carbon source to cultivate a microalgae. 미세조류에 탄소원으로서 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류 내 지질 생산량을 증대시키는 방법.A method for increasing lipid production in a microalgae, comprising feeding microalgae with an exhaust gas containing carbon dioxide as a carbon source to cultivate microalgae. 미세조류에 탄소원으로서 이산화탄소를 포함하는 배기가스를 공급하여 미세조류를 배양시키는 것을 포함하는, 미세조류 내 지방산의 생산량을 증대시키는 방법.A method for increasing production of fatty acids in microalgae, comprising feeding microalgae with an exhaust gas containing carbon dioxide as a carbon source to cultivate microalgae. 제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 배기가스 내의 이산화탄소 농도는 전체 배기가스 부피를 기준으로 1부피% 내지 20부피% 농도인, 방법.
7. The method according to any one of claims 3 to 6,
Wherein the carbon dioxide concentration in the exhaust gas is from 1 vol% to 20 vol% concentration based on the total exhaust gas volume.
제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 배기가스는 화력 발전소의 배기가스인, 방법.
7. The method according to any one of claims 3 to 6,
Wherein the exhaust gas is an exhaust gas of a thermal power plant.
제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 배기가스는 상기 미세조류의 성장 둔화 시점마다 주입되는 것을 특징으로 하는 방법.
7. The method according to any one of claims 3 to 6,
Wherein the exhaust gas is injected at each of the growth slowing points of the microalgae.
제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 미세조류는 pH 5.5의 환경에서 배양 시 미세조류의 최적 pH(Optimal pH)에서의 배양 시 성장 속도의 50% 이상의 성장을 나타내는 미세조류인 것을 특징으로 하는 방법.
7. The method according to any one of claims 3 to 6,
Wherein the microalgae are microalgae which exhibit growth of 50% or more of the growth rate during cultivation at an optimal pH (optimal pH) of the microalgae when cultured in an environment of pH 5.5.
제 10항에 있어서,
상기 미세조류는 세네데스무스 속(Scenedesmus sp .), 네프로셀미스 속(Nephroselmis sp .), 마이크락티니움 속(Micractinium sp .) 및 아쿠도데스무스 속(Acutodesmus sp.)중 어느 하나 이상인 방법.
11. The method of claim 10,
The microalgae may be selected from the group consisting of Scenedesmus sp . ), Nephroselmis sp . , Micractinium sp . sp . ) And Acutodesmus sp. ).
제 10항에 있어서,
상기 미세조류는 세네데스무스 오블리쿠스(Scenedesmus obliquus), 마이크락티니움 레이저리(Micractinium reisseri) 및 아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus)중 어느 하나 이상인 방법.
11. The method of claim 10,
The microalgae may be selected from the group consisting of Scenedesmus obliquus , Micractinium reisseri , and Acutodesmus obliquus .
제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 미세조류는 아쿠도데스무스 오블리쿠스(Acutodesmus obliquus)KGE 30인 방법.
7. The method according to any one of claims 3 to 6,
The microalgae may be selected from the group consisting of Acutodesmus obliquus ) KGE 30 method.
제 13항에 있어서,
상기 미세조류는 기탁번호가 KCTC18367P인 미세조류.
14. The method of claim 13,
Wherein said microalgae is KCTC18367P.
제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 미세조류를 배양시키는 것은, 상기 배기가스 이외에 폐수를 함께 공급하여 배양시키는 것을 포함하는 방법.
7. The method according to any one of claims 3 to 6,
Culturing the microalgae comprises culturing the microalgae by supplying wastewater in addition to the exhaust gas.
제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 폐수는 가축분뇨, 광산배수, 생활폐수 및 음식물 폐수 중 어느 하나를 포함하는 폐수인 방법.
7. The method according to any one of claims 3 to 6,
Wherein the wastewater is wastewater containing any one of livestock manure, mine drainage, domestic wastewater and food wastewater.
제 6항에 있어서,
상기 지방산의 함량은 총 지질 대비 1.00%(w/w) 이상인 방법.
The method according to claim 6,
Wherein the fatty acid content is 1.00% (w / w) or more of the total lipid.
지질 생산성이 우수한 미세조류의 선별방법으로서,
상기 방법은 하기 중 어느 하나 이상을 측정하는 것을 포함하는 방법:
ⅰ) 배기가스와 상업용 이산화탄소를 각각 이용하여 미세조류를 배양하여 각각의 성장량 측정;및
ⅱ) 배기가스와 상업용 이산화탄소를 각각 이용하여 미세조류를 배양하여 각각의 지질함량 측정.
As a method for selecting microalgae having excellent lipid productivity,
The method comprising measuring one or more of the following:
I) measuring the amount of growth of microalgae by culturing microalgae using exhaust gas and commercial carbon dioxide, respectively;
Ii) Measurement of individual lipid content by culturing microalgae using exhaust gas and commercial carbon dioxide, respectively.
제 18항에 있어서,
상기 ⅰ) 또는 ⅱ)중 어느 하나이상의 측정은 KH2PO4, CaCl2 ·2H2O, MgSO4 ·7H2O, NaNO3, K2HPO4, NaCl, H3BO3, 및 Na2EDTA 중 어느 하나 이상을 포함하는 합성배지에서 배양하여 측정하는 지질 생산성이 우수한 미세조류의 선별방법.
19. The method of claim 18,
The ⅰ) or ⅱ) any one or more measures of the KH 2 PO 4, CaCl 2 · 2H 2 O, MgSO 4 · 7H 2 O, NaNO 3, K 2 HPO 4, NaCl, H 3 BO 3, and Na 2 EDTA And a method for screening microalgae having excellent lipid productivity.
제 18항에 있어서,
상기 ⅱ)의 배기가스를 이용한 지질함량이 상업용 이산화탄소를 이용한 지질함량에 비해 더 높은 함량을 가지는 미세조류를 지질 생산성이 우수한 미세조류로서 선별하는 선별방법.
19. The method of claim 18,
The microalgae having a lipid content higher than that of commercial carbon dioxide by the exhaust gas of the step (ii) is selected as microalgae having excellent lipid productivity.
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