KR20160126694A - Method for producing soy sauce with decreased biogenic amine - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a method of manufacturing soy sauce having reduced content of biogenic amine, a method of reducing the content of biogenic amine of soy sauce, and soy sauce having reduced content of biogenic amine manufactured thereby. According to the present invention, the method of manufacturing soy sauce having reduced content of biogenic amine comprises the following steps: (a) soaking washed soybean in water, dewatering and steaming the soaked soybean; (b) inoculating Bacillus subtilis and Aspergillus oryzae into the steamed soybean, and forming the inoculated soybean into a fermented soybean lump; (c) drying and fermenting the lump formed in the step (b), washing the fermented soybean lump with flowing water, and cutting the washed fermented soybean lump; and (d) immersing the cut fermented soybean lump cut in the step (c) in a salt water to age the mixture, and separating say sauce from the mixture.

Description

바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장의 제조방법{Method for producing soy sauce with decreased biogenic amine}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to a method for producing soy sauce having reduced biogenic amine content,

본 발명은 (a) 세척한 대두를 수침하고 탈수시킨 후 증자하는 단계; (b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바실러스 서브틸리스 및 아스퍼질러스 오리재를 접종한 후 메주로 성형하는 단계; (c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 건조한 후 발효하고, 흐르는 물에 세척한 후 절단하는 단계; 및 (d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 염수에 침지하여 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장의 제조방법, 간장의 바이오제닉 아민 함량을 감소시키는 방법 및 상기 방법으로 제조된 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장에 관한 것이다.The present invention relates to a process for producing soybean milk, comprising the steps of: (a) soaking washed soybeans, dehydrating and dehydrating them; (b) inoculating Bacillus subtilis and Aspergillus oryzae to the soybeans added in step (a), and then molding them into meju; (c) fermenting the dried meju of step (b), washing it in running water, and cutting it; And (d) immersing the Meju in step (c) in a saline solution and aging the resulting Meju, followed by isolating the liver. The method for producing a liver having reduced biogenic amine content, A method for reducing the content of genic amines and a soy sauce having reduced biogenic amine content prepared by the above method.

간장은 콩을 주원료로 하여 발효, 숙성시킨 우리나라의 대표적인 대두 발효식품이다. 간장은 단백질과 아미노산 함량이 높을 뿐만 아니라 저장성이 뛰어나며, 그 특유의 맛과 향을 지니고 있어 우리 조상들의 식생활에 널리 애용되어 왔다. 간장의 숙성과정 중 맛, 향, 색 등의 품질을 결정짓는 데에는 여러 가지 요인이 있으나 크게 원료, 제조방법, 메주 및 이에 적용되는 균주 등으로 나눌 수 있다. 좋은 원료와 숙성과정 중 미생물의 작용에 따라 그 맛과 향 등이 결정되지만, 간장은 제조방법에 따라 품질에 많은 영향을 미친다.Soy is fermented soybean fermented food, which is the representative fermented soybean fermented in Korea. Soy sauce has high protein and amino acid content, is excellent in storage, has its unique taste and flavor and has been widely used in the diet of our ancestors. There are many factors in determining the quality of taste, flavor, color, etc. during the ripening process of soy sauce, but it can be roughly divided into raw materials, manufacturing method, meju and strains applied thereto. Although the taste and flavor are determined depending on the action of the microorganisms during the good raw material and aging process, the soy sauce has a great influence on the quality depending on the production method.

한편, 간장은 장류의 특성상 자연에서 유래한 수십 종의 곰팡이와 세균이 복합적으로 서식하며, 발효, 숙성 과정 중 미생물과 이들의 대사산물에 의한 오염 및 식중독 등 식품안전 측면에서는 위험성을 안고 있다.On the other hand, soy sauce is a combination of dozens of fungi and bacteria derived from nature due to the characteristics of soy sauce, and it poses a danger in terms of food safety such as contamination by microorganisms and their metabolites and food poisoning during fermentation and aging.

식품위생법상에서는 유해 미생물인 바실러스 세레우스의 정량 기준을 도입하여 미생물 관리를 실시하고 있으나, 최근 들어 주목을 받고 있는 바이오제닉 아민에 대한 위해성과 관리 및 규제에 대한 명확한 설정 지표가 없는 실정이다. 바이오제닉 아민은 단백질을 함유한 식품이 부패하거나 발효식품의 발효, 숙성 과정 중 생성되는 알러지 유발물질인 히스타민(Histamine)과 티라민(Tyramine)이 대표적이다. 바이오제닉 아민은 세포의 성장과 증식에 관여하기도 하지만 니트로사민(N-nitrosamin)과 같은 발암물질로 전환될 수 있는 잠재성도 있다. 특히, 단백질 함량이 높은 콩을 주원료로 하여 발효시키는 간장의 경우 바이오제닉 아민의 위험이 쉽게 노출될 수 있어 지속적인 모니터링 검사 및 관리가 필요하다.In the Food Sanitation Law, microbial control has been introduced by introducing quantitative standards of harmful microorganisms, Bacillus cereus. However, there is no clear set point for the risk management and regulation of biogenic amines, which have been receiving attention recently. Biogenic amines are typical examples of allergenic substances such as histamine (Histamine) and tyramine (Tyramine), which are produced during fermentation and fermentation of fermented food products. Biogenic amines are also involved in cell growth and proliferation, but also have the potential to be converted to carcinogens such as N-nitrosamine. Especially, in the case of soy sauce fermenting soybean with high protein content as a main ingredient, the risk of biogenic amines can be easily exposed, and continuous monitoring and inspection is required.

장류의 바이오제닉 아민 감소를 위한 연구로는 바이오제닉 아민 비/저 생산성 스타터 컬쳐를 적용하여 제어하는 방법과 천연 추출물 적용에 의한 억제효과 등이 이루어진 상태이지만, 공정개선에 대한 연구는 이루어지지 않은 실정이다.Studies on the reduction of biogenic amines in soybean have been conducted by applying biogenamic amine ratio / low productivity starter culture and inhibition effect by application of natural extract. However, there is no research on process improvement. to be.

한국등록특허 제0874785호에는 항균성 성분이 함유된 간장의 제조방법이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1399276호에는 단기숙성 간장의 제조방법이 개시되어 있으나, 본 발명의 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장의 제조방법과는 상이하다.Korean Patent No. 0874785 discloses a method for producing soy sauce containing an antimicrobial component. Korean Patent No. 1399276 discloses a method for preparing short-term aged soy sauce. However, . ≪ / RTI >

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명의 목적은 간장 제조 시 바이오제닉 아민과 같은 유해물질 생성을 감소시키고 바실러스 세레우스와 같은 유해 미생물의 오염을 방지하면서 기호도가 우수한 간장을 제조하기 위해, 메주 전처리 조건, 숙성조건 등을 최적화하여 품질이 우수하면서 유해물질로부터 안전성이 우수한 간장의 제조방법을 제공하는 데 있다.SUMMARY OF THE INVENTION The present invention has been made in view of the above-mentioned needs, and it is an object of the present invention to provide a soy sauce which is excellent in preference while preventing harmful microorganisms such as Bacillus cereus from being contaminated, The present invention is to provide a method for producing soy sauce which is superior in quality and safety from harmful substances by optimizing pre-meju pretreatment conditions, aging conditions and the like.

상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (a) 세척한 대두를 수침하고 탈수시킨 후 증자하는 단계; (b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바실러스 서브틸리스 및 아스퍼질러스 오리재를 접종한 후 메주로 성형하는 단계; (c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 건조한 후 발효하고, 흐르는 물에 세척한 후 절단하는 단계; 및 (d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 염수에 침지하여 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장의 제조방법을 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention provides a process for producing soybean milk, comprising the steps of: (a) soaking, washing and dehydrating washed soybeans; (b) inoculating Bacillus subtilis and Aspergillus oryzae to the soybeans added in step (a), and then molding them into meju; (c) fermenting the dried meju of step (b), washing it in running water, and cutting it; And (d) aging the Meju cut in step (c) in saline, and then aging the soybean, and isolating the soy sauce. The present invention also provides a method for preparing a soy sauce having reduced biogenic amine content.

또한, 본 발명은 (a) 세척한 대두를 수침하고 탈수시킨 후 증자하는 단계; (b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바실러스 서브틸리스 및 아스퍼질러스 오리재를 접종한 후 메주로 성형하는 단계; (c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 건조한 후 발효하고, 흐르는 물에 세척한 후 절단하는 단계; 및 (d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 염수에 침지하여 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함하는 간장의 바이오제닉 아민 함량을 감소시키는 방법을 제공한다.The present invention also provides a method for producing soybean milk, comprising the steps of: (a) soaking washed soybeans, dehydrating and dehydrating them; (b) inoculating Bacillus subtilis and Aspergillus oryzae to the soybeans added in step (a), and then molding them into meju; (c) fermenting the dried meju of step (b), washing it in running water, and cutting it; And (d) immersing the Meju in step (c) in saline, aging it, and isolating the liver, wherein the method comprises the steps of:

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장을 제공한다.The present invention also provides a soy sauce having reduced biogenic amine content prepared by the above method.

본 발명의 방법으로 제조된 간장은 기존의 간장에 비해 맛, 색깔 및 품질이 우수할 뿐만 아니라, 바이오제닉 아민 감소를 위한 첨가물을 첨가하지 않고도 공정 개선만으로 바이오제닉 아민 함량이 감소하여 간장 고유의 맛과 향을 유지할 수 있으며, 또한, 바실러스 세레우스와 같은 유해 미생물의 오염을 방지하여, 품질 및 안전성이 우수한 간장을 제공할 수 있다.The soy sauce produced by the method of the present invention is superior in flavor, color and quality compared with the conventional soy sauce, and the content of the biogenic amine is reduced only by the process improvement without adding the additive for the reduction of the biogenic amine, And it is also possible to prevent contamination of harmful microorganisms such as Bacillus cereus and to provide a soy sauce excellent in quality and safety.

도 1은 간장의 숙성기간에 따른 (A) 당도(Brix), (B) 염도(%), (C) pH, (D) 산도(%) 변화를 비교한 그래프이다.
도 2는 간장의 숙성기간에 따른 총 질소 함량(㎎%)을 비교한 그래프이다.
도 3은 간장의 숙성기간에 따른 아미노태 질소 함량(㎎%)을 비교한 그래프이다.
도 4는 간장의 숙성기간에 따른 바이오제닉 아민 함량(ppm)을 비교한 그래프이다.
도 1 내지 4의 NWNS: 메주를 세척하지 않음+쪼개지 않음, WNS: 메주를 세척+쪼개지 않음, WS: 메주를 세척+쪼갬 조건으로 제조된 간장을 의미한다.
FIG. 1 is a graph comparing changes in (A) sugar content (Brix), (B) salinity (%), (C) pH and (D) acidity (%) according to the ripening period of the liver.
FIG. 2 is a graph comparing the total nitrogen content (mg%) with the aging period of the liver.
FIG. 3 is a graph comparing the amino nitrogen content (mg%) according to the ripening period of the liver.
4 is a graph comparing the content (ppm) of the biogenic amine with the aging period of the liver.
NWNS of Figs. 1 to 4: Meju not washed + not split, WNS: Meju washed + not split, WS: Meju washed and cleaved.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은In order to achieve the object of the present invention,

(a) 세척한 대두를 수침하고 탈수시킨 후 증자하는 단계;(a) soaking the washed soybeans, dehydrating and growing the soybeans;

(b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 및 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 접종한 후 메주로 성형하는 단계;(b) the step (a) the increase of the Bacillus subtilis a soybean (Bacillus subtilis and Aspergillus oryzae , and then shaping into meju;

(c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 건조한 후 발효하고, 흐르는 물에 세척한 후 절단하는 단계; 및(c) fermenting the dried meju of step (b), washing it in running water, and cutting it; And

(d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 염수에 침지하여 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장의 제조방법을 제공한다.(d) immersing the Meju in step (c) in saline, aging it, and isolating the liver, wherein the method comprises the steps of:

본 발명의 간장의 제조방법에서, 상기 (a)단계는 바람직하게는 세척한 대두를 12~18시간 동안 수침하고 1~3시간 동안 탈수시킨 후 110~120℃에서 8~12분 동안 증자할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 세척한 대두를 15시간 동안 수침하고 2시간 동안 탈수시킨 후 115℃에서 10분 동안 증자할 수 있다. 상기와 같이 수침한 대두는 증자에 적합한 상태로 대두를 불릴 수 있었고, 또한, 탈수시킨 대두를 상기와 같이 고온에서 증자하는 과정을 통해 곰팡이나 기타 세균의 오염을 방지하고, 콩 비린내가 나지 않으면서 간장에 적합한 대두로 준비할 수 있었다.In step (a) of the present invention, the washed soybeans may be dipped for 12 to 18 hours, dehydrated for 1 to 3 hours, and then allowed to grow at 110 to 120 ° C for 8 to 12 minutes. More preferably, the washed soybeans can be soaked for 15 hours, dehydrated for 2 hours, and then heated at 115 ° C for 10 minutes. The soybean soaked in water as described above can be called soybeans in a state suitable for growth, and the dehydrated soybeans are prevented from being contaminated with fungi and other bacteria through the process of elevating the soybeans at a high temperature as described above, It was possible to prepare soybeans suitable for soy sauce.

또한, 본 발명의 간장의 제조방법에서, 상기 (b)단계의 성형은 바람직하게는 가로 7~9 cm, 세로 7~9 cm 및 높이 9~11 cm의 크기의 메주로 성형할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 가로 8 cm, 세로 8 cm 및 높이 10 cm의 크기의 메주로 성형할 수 있다. 상기 크기의 메주로 성형하는 것이 건조 및 발효가 용이한 이점이 있으나, 메주의 크기가 상기 범위보다 클 경우 메주 속까지 잘 건조되거나 발효되지 않고, 상기 범위보다 작을 경우 메주 성형 시 더 많은 양의 메주로 만들어야 하기 때문에 효율이 떨어지는 문제점이 있다.In addition, in the method for producing a liver of the present invention, the step (b) may be molded into a meju having a size of 7 to 9 cm in length, 7 to 9 cm in length and 9 to 11 cm in height, Preferably 8 cm in length, 8 cm in length, and 10 cm in height. When the size of the meju is larger than the above range, it is not dried or fermented well until the meju is formed. When the size of the meju is smaller than the above range, a larger amount of meju So that the efficiency is lowered.

또한, 본 발명의 간장의 제조방법에서, 상기 (c)단계의 건조한 후 발효는 바람직하게는 성형한 메주를 55~65℃에서 20~28시간 동안 건조한 후 28~32℃에서 12~18일 동안 발효할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 성형한 메주를 60℃에서 24시간 동안 건조한 후 30℃에서 15일 동안 발효할 수 있다. 상기와 같이 건조한 후 발효한 메주는 메주 겉면의 수분이 충분히 말라 유해한 세균 및 곰팡이가 번식하지 않으면서 이로운 곰팡이가 충분히 번식하여 간장 제조에 적합한 메주로 제조할 수 있었다.In addition, in the method for producing a liver of the present invention, after the drying in step (c), the dried meju is preferably dried at 55 to 65 ° C for 20 to 28 hours and then at 28 to 32 ° C for 12 to 18 days More preferably, the molded Meju can be dried at 60 DEG C for 24 hours and then fermented at 30 DEG C for 15 days. After drying as described above, the fermented meju did not propagate harmful germs and fungi because the water on the surface of the meju was sufficiently dried, so that the beneficial fungi were sufficiently propagated, and thus it was possible to prepare meju suitable for soy sauce production.

또한, 본 발명의 간장의 제조방법에서, 상기 (c)단계의 세척한 후 절단은 바람직하게는 흐르는 물에 8~12초간 세척한 후 2~3등분으로 절단할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 흐르는 물에 10초간 세척한 후 2등분으로 절단할 수 있다. 상기 절단한 메주의 크기는 가로 7~9 cm, 세로 7~9 cm 및 높이 3~6 cm이고, 바람직하게는 가로 8 cm, 세로 8 cm 및 높이 5 cm이다. 메주를 염수에 침지하기 전에 상기와 같은 방법으로 세척한 후 절단하는 것이 식품첨가물을 첨가하지 않고도 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장으로 제조할 수 있었다. 메주를 세척하는 시간이 상기 범위 미만일 경우 세척하는 효과가 미미하고, 상기 범위를 초과할 경우 메주 표면에 붙어있는 유익균이 많이 제거되어 간장으로 발효가 용이하지 않은 문제점이 있다. 또한, 상기 범위를 초과하여 절단한 메주를 염수에 침지한 후 발효할 경우 메주에 있는 영양성분 및 맛이 염수로 많이 빠져나가 간장의 영양성분뿐만 아니라 감칠맛 및 구수한 맛이 떨어지는 문제점이 있다.In addition, in the method for manufacturing a liver of the present invention, the cutting after washing in the step (c) is preferably performed for 8 to 12 seconds in flowing water, and then cut into 2 to 3 portions, more preferably, After washing for 10 seconds in water, it can be cut into two halves. The size of the cut meju is 7 to 9 cm in length, 7 to 9 cm in length and 3 to 6 cm in height, preferably 8 cm in width, 8 cm in height and 5 cm in height. Meju was washed and then cut in the same manner as described above before immersion in saline, and it was possible to produce a soy sauce having a reduced biogenic amine content without adding a food additive. If the time for washing the meju is less than the above range, the effect of washing is insignificant. If the time exceeds the above range, the beneficial bacteria attached to the meju surface are removed to a great extent and the fermentation of the soy sauce is not easy. In addition, when the Meju cut above the above range is immersed in saline and fermented, the nutrients and flavor in Meju may be abundant as salty water, resulting in not only the nutritional content of the soy sauce but also the richness and savor taste.

본 발명의 간장의 제조방법은 보다 구체적으로는The method for producing a liver of the present invention is more specifically

(a) 세척한 대두를 12~18시간 동안 수침하고 1~3시간 동안 탈수시킨 후 110~120℃에서 8~12분 동안 증자하는 단계;(a) soaking the washed soybeans for 12 to 18 hours, dehydrating for 1 to 3 hours, and then growing at 110 to 120 ° C for 8 to 12 minutes;

(b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P) 및 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 접종한 후, 가로 7~9 cm, 세로 7~9 cm 및 높이 9~11 cm의 크기의 메주로 성형하는 단계;(b) Bacillus subtilis (Bacillus having a degrading activity of the glutamic acid-producing ability, and biogenic amines (biogenic amine) to increase the rise of the step (a) subtilis SCKB1319 strain (KCCM 11684P) and Aspergillus oryzae , followed by molding into meju of 7 to 9 cm in length, 7 to 9 cm in length and 9 to 11 cm in height;

(c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 55~65℃에서 20~28시간 동안 건조한 후 28~32℃에서 12~18일 동안 발효하고, 흐르는 물에 8~12초간 세척한 후 2~3등분으로 절단하는 단계; 및(c) The dried Meju of step (b) is dried at 55 to 65 ° C for 20 to 28 hours, fermented at 28 to 32 ° C for 12 to 18 days, washed for 8 to 12 seconds in flowing water, Truncating into three equal parts; And

(d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 22~28%(w/v) 염수에 침지하여 20~25℃에서 25~35일 동안 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함할 수 있으며,(d) immersing the Meju in step (c) in 22-28% (w / v) saline, aging the mixture at 20-25 ° C for 25-35 days, and isolating the liver,

더욱 구체적으로는More specifically,

(a) 세척한 대두를 15시간 동안 수침하고 2시간 동안 탈수시킨 후 115℃에서 10분 동안 증자하는 단계;(a) soaking the washed soybeans for 15 hours, dehydrating for 2 hours, and growing at 115 ° C for 10 minutes;

(b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P) 및 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 접종한 후, 가로 8 cm, 세로 8 cm 및 높이 10 cm의 크기의 메주로 성형하는 단계;(b) Bacillus subtilis (Bacillus having a degrading activity of the glutamic acid-producing ability, and biogenic amines (biogenic amine) to increase the rise of the step (a) subtilis SCKB1319 strain (KCCM 11684P) and Aspergillus oryzae , followed by molding into meju of 8 cm in length, 8 cm in height and 10 cm in height;

(c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 60℃에서 24시간 동안 건조한 후 30℃에서 15일 동안 발효하고, 흐르는 물에 10초간 세척한 후 2등분으로 절단하는 단계; 및(c) drying the formed Meju of step (b) at 60 ° C for 24 hours, fermenting at 30 ° C for 15 days, washing for 10 seconds in flowing water, and cutting into two equal parts; And

(d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 25%(w/v) 염수에 침지하여 20~25℃에서 30일 동안 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함할 수 있다.(d) immersing the meju cut in step (c) in 25% (w / v) saline, aging at 20 ~ 25 ° C for 30 days, and isolating the liver.

본 발명은 또한, The present invention also relates to

(a) 세척한 대두를 12~18시간 동안 수침하고 1~3시간 동안 탈수시킨 후 110~120℃에서 8~12분 동안 증자하는 단계;(a) soaking the washed soybeans for 12 to 18 hours, dehydrating for 1 to 3 hours, and then growing at 110 to 120 ° C for 8 to 12 minutes;

(b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P) 및 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 접종한 후, 가로 7~9 cm, 세로 7~9 cm 및 높이 9~11 cm의 크기의 메주로 성형하는 단계;(b) Bacillus subtilis (Bacillus having a degrading activity of the glutamic acid-producing ability, and biogenic amines (biogenic amine) to increase the rise of the step (a) subtilis SCKB1319 strain (KCCM 11684P) and Aspergillus oryzae , followed by molding into meju of 7 to 9 cm in length, 7 to 9 cm in length and 9 to 11 cm in height;

(c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 55~65℃에서 20~28시간 동안 건조한 후 28~32℃에서 12~18일 동안 발효하고, 흐르는 물에 8~12초간 세척한 후 2~3등분으로 절단하는 단계; 및(c) The dried Meju of step (b) is dried at 55 to 65 ° C for 20 to 28 hours, fermented at 28 to 32 ° C for 12 to 18 days, washed for 8 to 12 seconds in flowing water, Truncating into three equal parts; And

(d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 22~28%(w/v) 염수에 침지하여 20~25℃에서 25~35일 동안 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 간장의 바이오제닉 아민 함량을 감소시키는 방법을 제공한다.(d) immersing the cleaved Meju in step (c) in 22 to 28% (w / v) saline, aging the mixture at 20 to 25 ° C for 25 to 35 days, and isolating the liver The amount of the biogenic amine in the liver is reduced.

본 발명의 간장의 바이오제닉 아민 함량을 감소시키는 방법은, 보다 구체적으로는The method of reducing the biogenic amine content of the liver of the present invention, more specifically,

(a) 세척한 대두를 15시간 동안 수침하고 2시간 동안 탈수시킨 후 115℃에서 10분 동안 증자하는 단계;(a) soaking the washed soybeans for 15 hours, dehydrating for 2 hours, and growing at 115 ° C for 10 minutes;

(b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P) 및 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 접종한 후, 가로 8 cm, 세로 8 cm 및 높이 10 cm의 크기의 메주로 성형하는 단계;(b) Bacillus subtilis (Bacillus having a degrading activity of the glutamic acid-producing ability, and biogenic amines (biogenic amine) to increase the rise of the step (a) subtilis SCKB1319 strain (KCCM 11684P) and Aspergillus oryzae , followed by molding into meju of 8 cm in length, 8 cm in height and 10 cm in height;

(c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 60℃에서 24시간 동안 건조한 후 30℃에서 15일 동안 발효하고, 흐르는 물에 10초간 세척한 후 2등분으로 절단하는 단계; 및(c) drying the formed Meju of step (b) at 60 ° C for 24 hours, fermenting at 30 ° C for 15 days, washing for 10 seconds in flowing water, and cutting into two equal parts; And

(d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 25%(w/v) 염수에 침지하여 20~25℃에서 30일 동안 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함할 수 있다.(d) immersing the meju cut in step (c) in 25% (w / v) saline, aging at 20 ~ 25 ° C for 30 days, and isolating the liver.

본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장을 제공한다. 상기 바이오제닉 아민은 히스타민 또는 티라민일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
The present invention also provides a soy sauce having reduced biogenic amine content prepared by the above method. The biogenic amine may be histamine or thiamine, but is not limited thereto.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to examples. However, the following examples are illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following examples.

1) 재료 1) Materials

간장 제조에 사용한 균주는 전국에서 수거한 전통 장류에서 분리, 선별한 균주들 중에서 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해율이 높고, 글루탐산 생성이 높은 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis SCKB1319) 균주(기탁번호 KCCM 11684P)와 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae SCAB03)를 이용하였고, 천일염은 국내산(전남 신안군) 천일염을 사용하였다.
Strain used in the soy sauce is produced in a separate traditional sauces collected in the country, among the selected strains biogenic amines (biogenic amine) with high degradation rate, a high glutamic acid produced Bacillus subtilis (Bacillus subtilis SCKB1319) (Accession No. KCCM 11684P) and Aspergillus oryzae SCAB03 were used. The salted salmon (Salmonella spp.

2) 실험방법2) Experimental method

(1) 균주 실험(1) Strain experiment

(가) 바이오제닉 아민 분해 활성(A) Biogenic amine-decomposing activity

선발 균주의 바이오제닉 아민 분해 능력을 관찰하기 위해 HPLC를 수행하였다. 증기 멸균한 삶은 콩가루 0.3 g에 각 16 mg의 티라민(tyramine), 퓨트레신(putrescine), 카다베린(cadaverine)을 녹인 0.8 mL NB(nutrient broth) 배지를 첨가하고 선발된 균주의 배양액 0.2 mL를 접종하였다. 비교를 위해 균을 첨가하지 않은 대조군을 사용하였다. 37℃에서 48시간 배양 후 13,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 얻은 배양 상등액 0.1 mL, 80 ㎕ 아세톤 용해 1% 댄실염화물, 50 ㎕ 포화 Na2CO3를 섞어 45℃에서 1시간 유도체화 시켰다. 유도체화한 시료 용액에 0.5 mL 에테르를 넣고 3분 후 분리된 상층액을 모아 50℃에서 배양하며 증발한 후 0.1 mL 아세토나이트릴에 녹였다. HPLC 분석으로 역상 칼럼은 C18(Capcellpak, 4.6 mm×150 mm, 5 ㎛), 이동상은 H2O에 녹인 0.1% 포름산(A)과 아세토나이트릴에 녹인 0.1% 포름산(B), 농도 경사는 0~10분, A:B=45:55; 11~15분, A:B=35:65; 16~25분, A:B=20:80; 26~30분, A:B=10:90, 30분 유속은 1 mL/min이었으며 10 ㎕ 시료를 주입하였다.
HPLC was performed to observe the ability of the selected strain to degrade the biogenic amine. Steam sterilized boiled rice flour was prepared by adding 0.8 mL of NB (nutrient broth) medium containing 16 mg of tyramine, putrescine and cadaverine to 0.3 g of soy flour, and 0.2 mL of the selected strain. Respectively. For comparison, a control group without addition of bacteria was used. In 37 ℃ 48 hours of incubation mix the culture supernatant 0.1 mL, 80 ㎕ acetone soluble 1% daensil chloride, 50 ㎕ saturated Na 2 CO 3 obtained by separating 10 minutes centrifugation at 13,000 rpm was screen 1 hours derivative in 45 ℃. To the derivatized sample solution, 0.5 mL of ether was added. After 3 minutes, the separated supernatant was collected, cultured at 50 ° C, evaporated, and dissolved in 0.1 mL of acetonitrile. In the HPLC analysis, 0.1% formic acid (A) dissolved in H 2 O and 0.1% formic acid (B) dissolved in acetonitrile were used as the reversed phase column and C18 (Capcellpak, 4.6 mm × 150 mm, ~ 10 minutes, A: B = 45: 55; 11-15 minutes, A: B = 35: 65; 16 to 25 minutes, A: B = 20: 80; 26 to 30 min, A: B = 10: 90, 30 min flow rate was 1 mL / min and 10 μl samples were injected.

(나) 글루탐산 생성능(B) Glutamic acid production ability

선별된 균주를 2% 콩가루 배지에서 47℃에서 48시간 배양 후 13,000 rpm에서 10분 동안 원심분리하여 균체를 제거하였다. 상등액 50 ㎕를 96 웰 플레이트에 분주한 뒤 글루탐산 분석 키트(Catalog #K629-100; 100 reactions; Store kit at -20℃)의 분석 버퍼 90 ㎕, 글루탐산 현상액 8 ㎕, 글루탐산 효소 믹스 2 ㎕를 상등액이 있는 웰에 분주하였다. 37℃에서 30분간 빛을 차단하며 배양한 뒤 450 nm 마이크로플레이트 리더로 흡광도 값을 측정하였다.
The selected strains were cultured in 2% soy flour medium at 47 ° C for 48 hours and then centrifuged at 13,000 rpm for 10 minutes to remove the cells. 50 μl of the supernatant was dispensed into a 96-well plate, and then 90 μl of an assay buffer of Glutamic Acid Assay Kit (Catalog # K629-100; 100 reactions; Store kit at -20 ° C), 8 μl of glutamic acid developer and 2 μl of glutamic acid enzyme mix, Lt; / RTI > wells. After incubation at 37 ° C for 30 min, the absorbance was measured with a 450 nm microplate reader.

(2) 간장 실험(2) Soy experiment

(가) 간장 제조방법(A) Soy sauce manufacturing method

선별한 대두를 3회 세척한 후 대두와 물을 1:3 비율로 15시간 침지한 후 2시간 동안 탈수하여 NK증자기에서 115℃에서 10분 동안 증자하였다. 삶은 대두는 컨베이어벨트를 이용하여 이동된 후 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis SCKB1319) 균주(기탁번호 KCCM 11684P)를 증자 전 대두 무게의 0.05% 접종시키고 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae SCAB03)는 증자 전 대두 무게의 0.1% 접종한 후 가로 8 cm, 세로 8 cm 및 높이 10 cm의 크기의 사각 메주로 성형하였다. 성형한 사각 메주는 24시간 동안 60℃의 건조실에서 건조한 후 발효온도 30℃, 발효습도 30%의 발효실로 옮겨 15일간 발효하였다. 발효가 완료된 메주를 염수에 침지하는 단계에서 조건을 달리하였다. 메주를 세척 및 쪼갬 여부에 따라 세척하지 않음+쪼개지 않음(NWNS), 세척함+쪼개지 않음(WNS), 세척함+쪼갬(WS) 총 세가지 조건으로 전처리한 메주와 소금물(25%)의 비율을 1:2로 하여 침지하였다. 상기 세척은 흐르는 물에 10초간 세척하였고, 쪼갬은 메주를 2등분으로 쪼개주었다. 메주를 소금물에 약 30일 동안 상온(20~25℃)에서 침지한 후 된장으로부터 간장을 분리하여 숙성 연구를 진행하였으며, 간장을 분리하고 숙성하면서 14일 간격으로 간장을 채취하여 상온(20~25℃)에서 총 70일간 숙성하면서 품질 변화를 실험하였다.The selected soybeans were washed three times, and the soybeans and water were immersed in a ratio of 1: 3 for 15 hours, then dehydrated for 2 hours, and then incubated at 115 ° C for 10 minutes in NK magnetism. The boiled soybeans were transferred using a conveyor belt and then transferred to Bacillus subtilis subtilis SCKB1319) ( Aspergillus oryzae SCAB03) was inoculated 0.1% of the soybean weight before the addition, and 8 cm in length, 8 cm in length, and 10 cm in height were inoculated with the strain (accession number KCCM 11684P) Sized square meju. The molded square meju was dried in a drying chamber at 60 ° C. for 24 hours, and then transferred to a fermentation chamber having a fermentation temperature of 30 ° C. and a fermentation temperature of 30%, followed by fermentation for 15 days. The fermented Meju was immersed in brine and the conditions were changed. The ratio of meju to brine (25%) pretreated with all three conditions, NWNS, WNM, WC and WS, was not cleaned according to washing and cleavage. 1: 2. The washing was carried out for 10 seconds in running water, and the cleaved meju was divided into two equal portions. Meju was immersed in salt water for about 30 days at room temperature (20 ~ 25 ℃), and the soy sauce was isolated from the soybean paste. The soy sauce was removed and the soy sauce was collected at intervals of 14 days. ℃) for a total of 70 days.

간장의 대조구 및 실험구 목록List of control and experiment of soy sauce 시료sample 메주 세척 여부Whether washing meju 메주 쪼갬 여부Separate Meju 대조구(NWNS)Control (NWNS) 세척하지 않음Do not wash 쪼개지 않음Not split 실험구 1(NWS)Experiment 1 (NWS) 세척함Washed 쪼개지 않음Not split 실험구 2(WS)Experiment 2 (WS) 세척함Washed 쪼갬Split

(나) pH 및 적정 산도 측정 (B) Measurement of pH and titratable acidity

시료를 채취하여 믹서기로 마쇄한 후 무게 5 g을 취하고 증류수를 가하여 50 mL로 맞춘 후 이를 충분히 혼합한 후 pH 미터(Mettler Toledo Gmbh, Switzerland)를 이용하여 측정하였고, 적정 산도는 0.1N-NaOH를 가하여 pH 8.4가 될 때까지 적정하였다.The sample was collected and ground with a blender, and weighed 5 g. Distilled water was added to make 50 mL. The mixture was thoroughly mixed and measured using a pH meter (Mettler Toledo Gmbh, Switzerland). Titratable acidity was 0.1 N NaOH And the pH was adjusted to 8.4.

적정 산도(%) = (0.1N-NaOH 적정량×0.009(젖산)×F×희석배수×100) / 시료량(g)
Titratable acidity (%) = (0.1 N-NaOH titration amount 占 0.009 (lactic acid) 占 F 占 dilution multiple 占 100) / sample amount (g)

(다) Brix 측정(C) Brix measurement

시료 0.5 mL를 취한 후 당도계(ATAGO, PAL-1)를 이용하여 측정하였다.
0.5 mL of the sample was taken and measured using a sugar meter (ATAGO, PAL-1).

(라) 염도 측정(D) Salinity measurement

시료 10 g에 증류수 90 mL를 가하여 1분 동안 교반한 후 염도계(ATAGO, TM-30D)로 측정하였다.
90 g of distilled water was added to 10 g of the sample, and the mixture was stirred for 1 minute and then measured with a salinity meter (ATAGO, TM-30D).

(마) 총 질소(Total Nitrogen) 측정(E) Total Nitrogen Measurement

총 질소 함량은 시료 1 g을 분해장치(Foss Digester 2020)로 분해시키고 켈텍 장치(Foss Kjeltec System 2400)를 이용하여 증류한 후 적정하여 0.1N-HCl의 mL 수를 총 질소로 환산하여 양을 구하였다.
The total nitrogen content was determined by dissolving 1 g of the sample in a digestion apparatus (Foss Digester 2020), distilling it using a Kossek system (Foss Kjeltec System 2400), titrating it, and converting the number of mL of 0.1 N HCl into total nitrogen Respectively.

(바) 아미노태 질소(amino-type nitrogen) 측정(F) Amino-type nitrogen measurement

아미노태 질소는 Formol법으로 측정하였다. 시료 1 g을 비커에 취하고 증류수 50 mL를 가하고 240초 동안 진탕 혼합하여 충분히 용해한 다음 0.1N-NaOH 용액으로 적정하여 pH 8.4로 맞추었다. 여기에 중성 포르말린(formalin) 20 mL를 가하고 20초 동안 진탕 혼합한 뒤 다시 0.1N-NaOH 용액으로 pH 8.4가 되도록 중화 적정하였다.Amino nitrogen was measured by the Formol method. 1 g of the sample was taken in a beaker, mixed with 50 mL of distilled water, shaken for 240 seconds, sufficiently dissolved, and then adjusted to pH 8.4 with 0.1N NaOH solution. To this was added 20 mL of formalin, shaken for 20 seconds, and neutralized to pH 8.4 with 0.1 N NaOH solution.

아미노태 질소(mg%) = (0.1N-NaOH 적정량×1.401×F×희석배수×100) / 시료량(g)
Amino nitrogen (mg%) = (0.1 N-NaOH titration amount 占 1.401 占 F 占 dilution multiple 占 100) / amount of sample (g)

(사) 바이오제닉 아민 측정(G) Biogenic amine measurement

시료와 표준용액을 각각 시험관에 0.5 mL씩 취한 후 1,7-디아미노헵탄(0.1 g/L) 0.25 mL씩 첨가하였다. 포화탄산나트륨 용액 0.25 mL와 1% 댄실염화물 아세톤 용액 0.4 mL를 추가하여 혼합한 후 마개를 하여 45℃에서 1시간 동안 유도체화 하였다. 유도체화 후 10% 프롤린 용액 0.25 mL를 가하여 과잉의 댄실염화물을 제거하고, 시험관에 에테르 2.5 mL를 가하여 3분간 진탕한 후 상등액을 취하여 이를 질소농축기에서 완전히 증발시킨 후 잔사를 아세토나이트릴 0.5 mL에 녹이고 0.45 ㎕ 필터로 여과한 후 표 2의 분석조건으로 HPLC를 이용하여 분석하였다.0.5 mL of each sample and standard solution was taken in a test tube, and then 0.25 mL of 1,7-diaminoheptane (0.1 g / L) was added. 0.25 mL of saturated sodium carbonate solution and 0.4 mL of 1% dansyl chloride acetone solution were added and mixed. The mixture was then plugged and derivatized at 45 ° C for 1 hour. After the derivatization, add 0.25 mL of 10% proline solution to remove excess dynechyl chloride, add 2.5 mL of ether to the test tube and shake for 3 minutes. Take the supernatant, evaporate it completely in a nitrogen concentrator, add 0.5 mL of acetonitrile And analyzed by HPLC under the analytical conditions in Table 2 after filtration with a 0.45 [mu] l filter.

바이오제닉 아민 정량을 위한 HPLC 분석 조건HPLC analysis conditions for quantification of biogenic amine InstrumentInstrument Agilent 1200 series
(Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)
Agilent 1200 series
(Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)
ColumnColumn CapcellPak C18 ColumnCapcellPak C18 Column DetectorDetector DAD detector(254 nm)DAD detector (254 nm) Mobile phaseMobile phase A: 0.1% formic acid in H2OA: 0.1% formic acid in H 2 O B: 0.1% formic acid in ACNB: 0.1% formic acid in ACN Gradient conditionGradient condition A:B = 45:55, 0~10 minA: B = 45:55, 0 to 10 min A:B = 35:65, 10~15 min A: B = 35:65, 10-15 min A:B = 20:80, 15~20 minA: B = 20: 80, 15 - 20 min A:B = 10:90, 20~30 minA: B = 10: 90, 20 - 30 min A:B = 10:90, 40 min overA: B = 10: 90, 40 min over Flow rateFlow rate 1.0 mL/min1.0 mL / min TemperatureTemperature 40℃40 ℃ Injection volumeInjection volume 20 ㎕20 μl

(아) 바실러스 세레우스 균주(A) Bacillus cereus strain

시료 50 g에 450 mL의 멸균 생리식염수로 10배 희석하여 균질화시킨 후 시험용액으로 사용하였다. 전처리한 샘플 용액을 멸균 생리식염수를 사용하여 단계적으로 10배씩 희석하여 희석액을 만든 후, 각 단계별 희석용액 0.2 mL씩 MYP 한천평판배지에 5장으로 도말하여 총 접종액이 1 mL가 되게 한 후, 30℃에서 24시간 배양한 후, 집락 주변에 레시티나아제(lecithinase)를 생성하는 혼탁한 환이 있는 분홍색 집락을 계수하였다.
50 g of the sample was diluted 10-fold with 450 mL of sterile physiological saline, homogenized and used as a test solution. The diluted solution was prepared by diluting the pretreated sample solution with sterilized physiological saline by 10 times in a stepwise manner, and then 0.2 mL of each dilution solution in each step was plated in 5 sheets on a MYP agar plate medium to make the total inoculum to be 1 mL, After incubation at 30 ° C for 24 hours, pink colonies with turbid rings producing lecithinase around the colonies were counted.

실시예Example 1:  One: 바이오제닉Biogenic 아민 분석 결과 Amine analysis result

분리 균주인 바실러스 서브틸리스 SCKB1319 균주의 바이오제닉 아민 분해율의 분석 결과를 표 3에 나타내었다. 본 실험에서는 히스타민(histamine), 티라민(tyramine), 퓨트레신(putrescine), 카다베린(cadaverine)의 총 4종의 바이오제닉 아민을 검사하였다. 그 결과, 바실러스 서브틸리스 SCKB1319 균주는 총 4종의 바이오제닉 아민 분해능을 지니고 있으며, 특히, 티라민, 퓨트레신 및 카다베린에 대해 각각 90% 이상의 분해능을 나타내어, 바이오제닉 아민을 효율적으로 제거할 수 있음을 확인할 수 있었다.Table 3 shows the results of analysis of the biogenic amine degradation rate of the strain Bacillus subtilis SCKB1319. In this experiment, four types of biogenic amines were tested: histamine, tyramine, putrescine, and cadaverine. As a result, the Bacillus subtilis SCKB1319 strain has a total of four types of biogenic amine cleavage ability, and in particular, cleavage efficiency of 90% or more with respect to each of tyramine, putrescine and cadaverine to efficiently remove biogenic amines .

바이오제닉 아민 분해율(%)Biogenic Amine Degradation Rate (%) 균주Strain 히스타민Histamine 티라민Tyramine 퓨트레신Putrescine 카다베린Cadaverine 바실러스 서브틸리스 SCKB1319Bacillus subtilis SCKB1319 52%52% 95%95% 91%91% 95%95%

실시예Example 2: 글루탐산  2: Glutamic acid 생성능Generation

분리 균주인 바실러스 서브틸리스 SCKB1319 균주의 글루탐산 생성능은 하기 표 4와 같다. 2%의 콩배지 1 mL 당 글루탐산의 함량을 환산한 결과 5.954 nmol로 측정되었다.The glutamic acid-producing ability of the isolate strain Bacillus subtilis SCKB1319 is shown in Table 4 below. The content of glutamic acid per 1 mL of 2% soybean medium was converted to 5.954 nmol.

글루탐산 생성능Glutamic acid production ability 균주Strain 글루탐산(nmol/2% 콩배지 1 mL)Glutamic acid (nmol / 2% soybean broth 1 mL) 바실러스 서브틸리스 SCKB1319Bacillus subtilis SCKB1319 5.9545.954

실시예Example 3: 간장의 일반성분 분석 결과 3: Analysis of general components of liver

Brix는 염분농도를 제외한 값이 메주로부터 유래한 성분의 용출과 분해에 기인하는 것으로 간장의 숙성 정도를 가늠할 수 있는 척도이며, Brix의 변화는 도 1의 (A)에 나타내었다. 숙성기간이 경과하여도 비슷한 함량을 유지하였으며, NWNS 간장은 숙성초기부터 숙성완료까지 거의 변화가 없었으나 가장 높은 Brix를 보여주었다. WS 간장 또한 숙성기간 내내 큰 변화는 없었으나 숙성 56일째에 소폭 증가하여 NWNS 간장과 비슷한 수치를 보였다. 다른 시료들과 차이를 보이며 가장 낮은 Brix를 나타낸 WNS 간장은 숙성 70일째에 27.8 brix를 나타내었다.Brix is a measure of the degree of aging of the liver due to elution and degradation of components derived from Meju except for salinity, and the change of Brix is shown in FIG. 1 (A). NWNS soy sauce showed the highest Brix, although there was almost no change from the early stage of fermentation to the completion of fermentation. There was no significant change in WS soy sauce during fermentation period but it increased slightly at 56 days of fermentation and was similar to that of NWNS soy sauce. The WNS liver showed the lowest Brix of 27.8 brix at 70 days of fermentation.

숙성기간 중 염도 변화를 관찰한 결과 모든 시료에서 약 13.5%로 일정 수준을 유지하며 큰 변화를 보이지 않았다(도 1의 B). pH의 경우 NWNS 간장과 WS 간장이 숙성기간 내내 큰 폭의 변화를 나타내지 않아 평균 pH 5.1을 유지하였다. 반면 WNS 간장의 pH는 숙성 0일째 pH 6.2에서 숙성 14일째 pH 5.0으로 급격히 감소하였고, 이후로 큰 변화 없이 유지하였고 숙성 70일째에는 pH 5.1을 나타내었다(도 1의 C). 적정 산도는 숙성기간에 따라 증가하다가 숙성 42일째에 NWNS 간장은 1.7%, WNS 간장은 1.2%, WS 간장은 1.5%를 나타내어 최대치를 보였으며, 이후 약간 감소하여 숙성종료일인 70일째에는 모든 시료가 약 1.2%를 나타내었다(도 1의 D).
As a result of observing the change in salinity during the ripening period, all samples showed a constant level of about 13.5% and showed no significant change (FIG. 1B). In the case of pH, NWNS soy sauce and WS soy sauce did not show any significant change during aging period, and the average pH was maintained at 5.1. On the other hand, the pH of the WNS soy sauce rapidly decreased from pH 6.2 on the 0th day of ripening to pH 5.0 on the 14th day of ripening, and remained unchanged after that on the 14th day of ripening. The titratable acidity increased with aging. At 42 days of ripening, the NWNS was 1.7%, the WNS was 1.2%, and the WS soy was 1.5%, showing the maximum value. About 1.2% (D in Fig. 1).

실시예Example 4: 간장의 총 질소 함량 결과 4: total nitrogen content of liver

간장 맛을 좌우함은 물론 간장의 수율에 관여하는 총 질소 함량의 변화를 측정한 결과는 도 2와 같으며 숙성기간이 경과함에 따라 시료별 약간의 유의적 차이를 보였다. NWNS 간장은 숙성 70일째에 1.4 ㎎%의 함량을 나타내었으며, WS 간장의 경우 이보다 약간 낮은 1.3 ㎎%를, WNS 간장은 1.2 ㎎%로 brix 함량 결과와 부합하는 경향을 나타내었다.
The results of measuring the total nitrogen content of the soy sauce as well as the total nitrogen content of the soy sauce were as shown in Fig. 2, and there was a slight difference between the samples according to aging. NWNS showed the content of 1.4 ㎎% at 70 days of fermentation, 1.3 ㎎% lower than that of WS soy and 1.2 ㎎% of WNS soybean.

실시예Example 5: 간장의  5: of the liver 아미노태Amino acid 질소 함량 결과 Nitrogen content results

숙성기간별 간장의 아미노태 질소는 도 3에 제시하였다. 아미노태 질소는 프로테아제 활성이 높고, 대두의 양이 많을수록 저분자 펩티드와 아미노산이 다량으로 생성됨에 따라 생성되는 것으로 간장의 숙성 정도와 보존기간 품질의 지표가 된다. 아미노태 질소 함량이 높은 간장이 성분 및 관능적 특성에서 좋은 것으로 평가되고 있다. 본 실험에서 숙성기간에 따른 아미노태 질소 변화에서 전반적으로 모든 시료가 약 650 mg%로 비슷한 함량을 나타내어 유의적 차이는 보이지 않았다.
Amino nitrogen of liver by aging period is shown in Fig. Amino nitrogen is a protease activity, and as the amount of soybeans is increased, a large amount of low molecular weight peptide and amino acid are produced, which is an indicator of the degree of ripening of soy sauce and quality of preservation period. Soy sauce with high amino nitrogen content has been evaluated as good in component and sensory properties. In the present experiment, amino acid nitrogen changes with aging period showed similar contents of all samples at about 650 mg%, showing no significant difference.

실시예Example 6: 간장의  6: of soy sauce 바이오제닉Biogenic 아민 분석 결과  Amine analysis result

간장의 바이오제닉 아민의 분석 결과를 도 4에 나타내었다. 본 실험에서는 히스타민(histamine), 티라민(tyramine) 등 총 2종의 바이오제닉 아민을 검사하여 총 함량으로 나타내었다. 메주를 세척하지 않고 담은 간장인 NWNS에 비해 메주를 세척하고 담은 간장 시료인 WNS와 WS에서 바이오제닉 아민 함량이 낮게 측정되었으며 특히 장 분리한 직후인 숙성 0일째와 14일째에서는 큰 차이가 있었다. NWNS 간장의 함량은 91.1~154.1 ppm으로 분포되어 다른 시료에 비해 높았으며, WNS 간장의 함량은 48.6~98.8 ppm으로 분포되었고, WS 간장의 함량은 14.3~106.6 ppm으로 분포되었다. 결과적으로, WS 간장이 NWNS 및 WNS 간장에 비해 낮은 바이오제닉 아민 함량을 나타내었고, 또한, 분리한 WS 간장을 다시 숙성시키는 것에 비해 숙성시키지 않는 것이 가장 낮은 바이오제닉 아민 함량을 나타내었다.
The analysis results of the bioenzymine of the liver are shown in FIG. In this experiment, two kinds of biogenic amines such as histamine and tyramine were examined and expressed as the total content. Compared to NWNS, which is a soy sauce without washing meju, the content of biogenic amines in WNS and WS was lower than that of soy sauce. Especially, on the 0th day and 14th day after fermentation, there was a big difference. The content of NWNS liver was 91.1 ~ 154.1 ppm, which was higher than that of other samples. The contents of WNS liver were distributed in 48.6 ~ 98.8 ppm and the content of WS liver was in 14.3 ~ 106.6 ppm. As a result, WS liver showed lower biogenic amine content than NWNS and WNS soy sauce, and the lowest biogenic amine content showed that aged WS soy sauce was not aged.

실시예Example 7: 간장의  7: Soy 바실러스Bacillus 세레우스균Cereus 검사 결과  test results

간장의 바실러스 세레우스균 정량 분석을 실시한 결과를 표 5에 나타내었다. 검사 결과 모든 샘플에서 바실러스 세레우스균은 검출되지 않았다. 현재 식약처 허용기준인 10,000 CFU/g 이하보다 매우 낮은 수치로 확인되어 모든 시료에서 바실러스 세레우스균에 대해 안전함을 확인하였다.The results of quantitative analysis of Bacillus cereus of soy sauce are shown in Table 5. As a result of the test, no Bacillus cereus was detected in all the samples. Was confirmed to be much lower than the current limit of 10, 000 CFU / g, and it was confirmed that all samples were safe for Bacillus cereus.

간장의 바실러스 세레우스 정량 분석 결과Quantitative analysis of Bacillus cereus in soy sauce 숙성일Aging date 바실러스 세레우스Bacillus cereus NWNSNWNS WNSWNS WSWS 0일0 days ND1 ) ND 1 ) NDND NDND 14일14 days NDND NDND NDND 28일28th NDND NDND NDND 42일42 days NDND NDND NDND 56일56 days NDND NDND NDND 70일70 days NDND NDND NDND

1) ND: 검출되지 않음
1) ND: Not detected

실시예Example 6: 간장의 관능검사 6: Sensory evaluation of soy sauce

된장으로부터 분리한 간장을 훈련된 관능검사 요원 20명을 대상으로 관능검사를 실시하여 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다. 관능검사 항목은 색, 향, 맛 및 전체적인 기호도에 대하여 실시하였으며, 5점 척도법에 따라 5점을 만점으로 하여 다음의 평가기준에 의하여 피시험자가 점수를 기록한 후 이들의 평균값을 구하여 기록하였다. 5: 아주 좋다, 4: 좋다, 3: 보통이다, 2: 나쁘다, 1: 아주 나쁘다.The sensory evaluation was performed on 20 sensory test workers trained in soy sauce isolated from miso. The results are shown in Table 6 below. The sensory test items were evaluated for color, flavor, taste, and overall acceptability. The scores were recorded on a 5-point scale using the following criteria. 5: very good, 4: good, 3: normal, 2: bad, 1: very bad.

간장의 관능검사Sensory evaluation of soy sauce 간장 종류Types of soy sauce color incense flavor 전체적인 기호도Overall likelihood NWNSNWNS 3.6±0.13.6 ± 0.1 3.4±0.23.4 ± 0.2 3.6±0.13.6 ± 0.1 3.5±0.13.5 ± 0.1 WNSWNS 3.5±0.23.5 ± 0.2 3.6±0.13.6 ± 0.1 3.7±0.23.7 ± 0.2 3.6±0.23.6 ± 0.2 WSWS 3.7±0.13.7 ± 0.1 4.0±0.24.0 ± 0.2 4.4±0.14.4 ± 0.1 4.2±0.24.2 ± 0.2

그 결과, 표 6에서 알 수 있는 바와 같이, 색에 대한 기호도에서는 모든 간장에서 큰 차이를 나타내지 않았으나, 향과 맛에 대한 기호도에서는 WS 된장이 가장 높은 기호도를 나타내었다. 또한, 전체적인 기호도에서도 WS 된장이 NWNS 된장 및 WNS 된장에 비해 더 좋은 점수를 받아, 메주를 세척하고 쪼갠 후 염수에 침지하여 숙성시켜 간장을 제조하는 것이 기호도가 더욱 향상되는 것을 확인할 수 있었다.
As a result, as shown in Table 6, there was no significant difference in color preference in all the soy sauce, but WS doenjang showed the highest preference in flavor and taste preference. In addition, the overall acceptability of WS miso was better than that of NWNS miso and WNS miso, and it was confirmed that the preference of the soy sauce was improved by washing and breaking meju, followed by immersion in salting water and aging.

한국미생물보존센터(국외)Korea Microorganism Conservation Center (overseas) KCCM11684PKCCM11684P 2015040920150409

Claims (5)

(a) 세척한 대두를 수침하고 탈수시킨 후 증자하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 및 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 접종한 후 메주로 성형하는 단계;
(c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 건조한 후 발효하고, 흐르는 물에 세척한 후 절단하는 단계; 및
(d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 염수에 침지하여 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장의 제조방법.
(a) soaking the washed soybeans, dehydrating and growing the soybeans;
(b) the step (a) the increase of the Bacillus subtilis a soybean (Bacillus subtilis and Aspergillus oryzae , and then shaping into meju;
(c) fermenting the dried meju of step (b), washing it in running water, and cutting it; And
(d) immersing the Meju in step (c) in saline water and aging the resulting Meju, followed by isolating the liver, wherein the reduced biogenetic amine content is reduced.
제1항에 있어서, 상기 (c)단계는 성형한 메주를 건조한 후 발효하고, 흐르는 물에 8~12초간 세척한 후 2~3등분으로 절단하는 것을 특징으로 하는 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장의 제조방법.The method according to claim 1, wherein in step (c), the formed meju is fermented after being dried, washed in flowing water for 8 to 12 seconds, and then cut into two to three equal portions. ≪ / RTI > 제1항에 있어서,
(a) 세척한 대두를 12~18시간 동안 수침하고 1~3시간 동안 탈수시킨 후 110~120℃에서 8~12분 동안 증자하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P) 및 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 접종한 후, 가로 7~9 cm, 세로 7~9 cm 및 높이 9~11 cm의 크기의 메주로 성형하는 단계;
(c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 55~65℃에서 20~28시간 동안 건조한 후 28~32℃에서 12~18일 동안 발효하고, 흐르는 물에 8~12초간 세척한 후 2~3등분으로 절단하는 단계; 및
(d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 22~28%(w/v) 염수에 침지하여 20~25℃에서 25~35일 동안 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 히스타민 및 티라민으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장의 제조방법.
The method according to claim 1,
(a) soaking the washed soybeans for 12 to 18 hours, dehydrating for 1 to 3 hours, and then growing at 110 to 120 ° C for 8 to 12 minutes;
(b) Bacillus subtilis (Bacillus having a degrading activity of the glutamic acid-producing ability, and biogenic amines (biogenic amine) to increase the rise of the step (a) subtilis SCKB1319 strain (KCCM 11684P) and Aspergillus oryzae , followed by molding into meju of 7 to 9 cm in length, 7 to 9 cm in length and 9 to 11 cm in height;
(c) The dried Meju of step (b) is dried at 55 to 65 ° C for 20 to 28 hours, fermented at 28 to 32 ° C for 12 to 18 days, washed for 8 to 12 seconds in flowing water, Truncating into three equal parts; And
(d) immersing the cleaved Meju in step (c) in 22 to 28% (w / v) saline, aging at 20 to 25 ° C for 25 to 35 days, and isolating the liver Wherein the amount of at least one biogenic amine selected from the group consisting of histamine and tyramine is reduced.
(a) 세척한 대두를 12~18시간 동안 수침하고 1~3시간 동안 탈수시킨 후 110~120℃에서 8~12분 동안 증자하는 단계;
(b) 상기 (a)단계의 증자한 대두에 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P) 및 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)를 접종한 후, 가로 7~9 cm, 세로 7~9 cm 및 높이 9~11 cm의 크기의 메주로 성형하는 단계;
(c) 상기 (b)단계의 성형한 메주를 55~65℃에서 20~28시간 동안 건조한 후 28~32℃에서 12~18일 동안 발효하고, 흐르는 물에 8~12초간 세척한 후 2~3등분으로 절단하는 단계; 및
(d) 상기 (c)단계의 절단한 메주를 22~28%(w/v) 염수에 침지하여 20~25℃에서 25~35일 동안 숙성시킨 후 간장을 분리하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 간장의 히스타민 및 티라민으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 바이오제닉 아민 함량을 감소시키는 방법.
(a) soaking the washed soybeans for 12 to 18 hours, dehydrating for 1 to 3 hours, and then growing at 110 to 120 ° C for 8 to 12 minutes;
(b) Bacillus subtilis (Bacillus having a degrading activity of the glutamic acid-producing ability, and biogenic amines (biogenic amine) to increase the rise of the step (a) subtilis SCKB1319 strain (KCCM 11684P) and Aspergillus oryzae , followed by molding into meju of 7 to 9 cm in length, 7 to 9 cm in length and 9 to 11 cm in height;
(c) The dried Meju of step (b) is dried at 55 to 65 ° C for 20 to 28 hours, fermented at 28 to 32 ° C for 12 to 18 days, washed for 8 to 12 seconds in flowing water, Truncating into three equal parts; And
(d) immersing the cleaved Meju in step (c) in 22 to 28% (w / v) saline, aging the mixture at 20 to 25 ° C for 25 to 35 days, and isolating the liver 0.0 > histamine < / RTI > and tyramine in the liver.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 방법으로 제조된 바이오제닉 아민 함량이 감소된 간장.A soy sauce having reduced biogenic amine content produced by the method of any one of claims 1 to 3.
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