KR20160081194A - Skin external composition for moisturing skin or whitening skin containing isoflavone and picrionoside a - Google Patents

Skin external composition for moisturing skin or whitening skin containing isoflavone and picrionoside a Download PDF

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황경환
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Abstract

The present invention relates to a skin composition comprising isoflavone and picrionoside A for external applications for moisturizing or whitening skin and, more particularly, to a skin composition using a synergic effect of isoflavone and picrionoside A for external applications for enhancing skin barrier functions, and improving complexion and skin tone. According to the present invention, the skin composition for external uses enhances skin barrier functions, suppresses generation of melanin, and improves complexion and skin tones, thereby exhibiting a skin moisturizing effect, and a skin whitening effect.

Description

이소플라본 및 피크리오노시드 A를 함유하는 보습용 또는 미백용 피부 외용제 조성물{SKIN EXTERNAL COMPOSITION FOR MOISTURING SKIN OR WHITENING SKIN CONTAINING ISOFLAVONE AND PICRIONOSIDE A}BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention [0001] The present invention relates to a composition for external use for skin moisturizing or whitening, which comprises isoflavone and picronoside A,

본 발명은 이소플라본 및 피크리오노시드 A를 함유하는 보습용 또는 미백용 피부 외용제 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 이소플라본 및 피크리오노시드 A의 시너지 효과를 이용한 피부 장벽 기능 강화용, 혈색 및 피부톤 개선용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for external use for skin moisturizing or whitening comprising isoflavone and picronoside A. More specifically, the present invention relates to a composition for enhancing skin barrier function using synergistic effects of isoflavone and picronoside A, And a composition for external application for skin for improving skin tone.

피부는 외부로부터 개체를 보호하는 장벽기능이라는 매우 중요한 역할을 수행한다. 장벽기능은 외부로부터의 다양한 자극(화학물질, 대기오염물질, 건조한 환경, 자외선 등)에 대한 방어와 피부를 통한 체내 수분의 과도한 발산을 막는 보호 기능이며, 이러한 보호기능은 각질형성세포로 구성된 각질층이 정상적으로 형성되어 있을 경우에만 그 기능을 유지할 수 있다. Skin plays a very important role as a barrier function to protect individuals from the outside. The barrier function is a protection function for protecting against various stimuli (chemicals, air pollutants, dry environment, ultraviolet rays, etc.) from the outside and excessive divergence of water in the body through the skin. Such protection function is a function of protecting the stratum corneum The function can be maintained only when it is normally formed.

표피 중에서도 가장 바깥쪽에 존재하는 각질층(Stratum corneum, horney layer)은 각질형성세포로부터 형성되며, 분화가 완결된 각질세포와 그를 둘러싼 지질층으로 구성되어 있다(Marcelo C. L. et al, J. Invest . Dermatol .,80, pp37-44, 1983).The outermost stratum corneum (horney layer) of the epidermis is formed from keratinocytes, and consists of keratinocytes with complete differentiation and a surrounding lipid layer (Marcelo CL et al . , J. Invest . Dermatol . 80 , pp 37-44, 1983).

각질세포는 표피 최하층에서 지속적으로 증식(proliferation)하는 기저세포(basal cell)가 단계적으로 형태 및 기능상의 변화를 거치며, 피부 표면까지 상승한 특징적인 세포이며, 일정 기간이 경과하면 오래된 각질세포는 피부에서 탈락되고 새로운 각질세포가 그 기능을 대신하게 되는데, 이러한 반복적인 일련의 변화 과정을 “표피 세포의 분화” 또는 “각화(keratinization)”라고 부른다. The keratinocyte is a characteristic cell in which basal cells continuously proliferating in the lowest epidermis undergo a stepwise change in morphology and function and are elevated to the surface of the skin. After a certain period of time, And the new keratinocyte replaces its function. This repetitive sequence of changes is called "epidermal cell differentiation" or "keratinization".

또한, 각화과정 중에 각질형성세포는 천연보습인자(Natural moisturizing factor; NMF)와 세포간 지방질(세라마이드, 콜레스테롤, 지방산)을 생성하면서 각질층을 형성하여 각질층이 견고함과 유연성을 가지게 하여 피부 장벽(skin barrier)으로서의 기능을 보유하게 한다. In addition, during keratinization, keratinocytes form natural moisturizing factors (NMF) and intercellular lipids (ceramides, cholesterol, fatty acids) and form stratum corneum, which gives firmness and flexibility to the stratum corneum, barrier function.

이러한 각질층은 과도한 세안이나, 목욕 등의 생활 습관적 요소나, 건조한 대기 오염 물질 등의 환경적인 요인, 및 아토피성 피부나 노인성 피부 같은 내인성 질환 등으로 인해 쉽게 그 기능이 손실될 수 있으며, 실제로 현대에 들어서 더욱 늘어난 다양한 요인들로 인해 최근에는 건조피부증상 및 이로 인한 제반 장해를 호소하는 부분들이 점점 증가하고 있는 추세이다. Such stratum corneum can easily lose its function due to environmental factors such as excessive washing, bathing and other lifestyle factors, dry air pollutants, and endogenous diseases such as atopic skin and senile skin. In fact, Due to the increasing number of factors, dry skin symptoms and their complaints have been increasing recently.

따라서, 적절한 피부 수분을 유지하기 위하여 외부로부터 수분을 공급하거나, 체내로부터의 수분 손실을 방지하기 위한 연구가 다양하게 진행되어 왔으며, 실제로 수분 보유 능력이 있는 다양한 보습제(moisturizer)가 개발되어 있다. 피부 보습제로는 세라마이드 등의 지질성분과 필수지방산 및 지질복합체 등 각질층에서의 수분보유를 증가시킬 수 있는 물질을 사용하는 것이 일반적이다(Rawlings A. V. et al, J. Invest . Dermatol ., 5, pp731-741, 1994).Therefore, in order to maintain proper skin moisture, various studies have been made to supply water from the outside or to prevent water loss from the body. Various moisturizers having moisture retention ability have been developed. As a skin moisturizing agent, it is common to use a substance capable of increasing water retention in the stratum corneum such as ceramide and essential fatty acid and lipid complex (Rawlings AV et al . , J. Invest . Dermatol . , 5, pp731- 741, 1994).

그러나, 최근 피부에 대한 위해 요인이 점점 증가되고 있고, 식생활 양상의 변화로 각질층의 생성, 탈락 속도가 늦어지며, 각질형성세포의 기능 저하로 각질층의 보습인자와 지질의 양이 감소되어 각질층이 정상적인 피부 장벽 기능을 발휘하지 못하는 피부를 가진 사람들이 증가하고 있는 추세이다. 이런 피부 장벽 기능의 와해는 피부건조증, 아토피 피부염, 접촉성 피부염, 건선 등의 다양한 피부 질환을 유발하게 된다. 이와 같은 질환들은 기존의 통상적인 수분보유기능을 갖는 보습제만으로도 증상 완화는 기대할 수 있지만 근본적인 치유는 어려운 실정이다.However, recently, the risk factors for skin are increasing, and changes in dietary patterns slow down the generation and decline of the stratum corneum, and the function of the keratinocyte is reduced, so that the amount of the moisturizing factor and lipid in the stratum corneum is decreased, There is an increasing trend in people with skin that can not function as a skin barrier. Such breakdown of the skin barrier function causes various skin diseases such as dry skin, atopic dermatitis, contact dermatitis and psoriasis. Such diseases can be expected to be alleviated by moisturizing agents having a conventional moisture retention function but it is difficult to achieve fundamental healing.

또한, 사람의 피부색은 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께, 및 카로티노이드, 빌리루빈 등 인체 내외의 색소 함유 유무와 같은 여러 요인들에 의해 결정된다. 특히, 멜라노사이트에서 타이로시나제(tyrosinase) 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소가 가장 중요한 요인이다. 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비, 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인이 영향을 미친다. 멜라닌은 피부에 존재하여 자외선 등으로부터 신체를 보호하는 중요한 기능을 하지만 멜라닌이 과잉생산됨으로써 색소침착 및 피부노화를 촉진하고 피부암 유발에도 주요한 작용을 하는 것으로 알려져 있다. 피부색소 이상 침착 증상과 자외선 노출 등에 의해 발생된 과도한 멜라닌 색소 침착을 치료 또는 경감시켜주기 위해서 이전부터 아스코르빈산(ascorbic acid), 코지산(kojic acid), 알부틴(arbutin), 하이드로퀴논(hydroquinone), 글루타치온(glutathione) 또는 이들의 유도체, 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용해 왔는데, 이들은 불충분한 미백 효과, 피부에 대한 안전성 문제, 및 화장료에 배합시 제형 내에서의 안정성 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.In addition, human skin color is determined by various factors such as the activity of melanocyte making melanocyte, the distribution of blood vessels, the thickness of skin, and the presence or absence of pigment inside and outside the body, such as carotenoids and bilirubin. In particular, melanin, which is produced by the action of various enzymes such as tyrosinase in melanocytes, is the most important factor. The formation of melanin pigment is affected by environmental factors such as genetic factors, hormonal secretion, physiological factors such as stress, and ultraviolet irradiation. Melanin is present in the skin and protects the body from ultraviolet rays, but it is known that melanin is overproduced, thereby promoting pigmentation and aging of the skin and leading to skin cancer induction. (Ascorbic acid), kojic acid, arbutin, hydroquinone, and so on to treat or relieve excessive melanin pigmentation caused by skin pigmentation abnormalities and ultraviolet exposure. Glutathione or a derivative thereof and a substance having inhibitory activity against tyrosinase have been used in cosmetics or medicines in combination with insufficient whitening effect, safety problems to the skin, Its use is restricted due to stability problems and so on.

본 발명에서 사용된 이소플라본(isoflavone)은 주로 콩에 함유된 식물성 화합물로서, 이소플라본은 제니스테인(genistein) 글리코시드, 다이드제인(daidzein) 글리코시드, 글리시테인(glycitein) 글리코시드 및 이들의 배당체와 유도체로 구성되어 있는데, 대부분이 제니스틴(genistin) 및 다이드진(daidzin)과 같은 배당체 형태이다. 이들은 미생물 발효 또는 글루코시다제 등의 효소에 의하여 당 잔기가 가수분해되어 체내 흡수율이 높은 비배당체(aglycone)인 제니스테인(genistein) 등으로 변한다 (한국등록특허 제10-0500641호). 이소플라본은 항산화제, 항균제 및 금속 킬레이트제의 효과가 있다고 보고된 바 있으며 (Middleton et al., 1992; Dixon et al., 2002), 항노화, 피부 주름 개선 등의 효과가 있다고 알려져 있다.The isoflavones used in the present invention are mainly vegetable compounds contained in soybean, and isoflavones include genistein glycoside, daidzein glycoside, glycitein glycoside, It is composed of glycosides and derivatives, most of which are glycoside forms such as genistin and daidzin. They are hydrolyzed by enzymes such as microbial fermentation or glucosidase to change sugar residues into genistein, an aglycone which has a high uptake rate in the body (Korean Patent No. 10-0500641). Isoflavones have been reported to be effective against antioxidants, antimicrobials and metal chelating agents (Middleton et al., 1992; Dixon et al., 2002), and are known to have anti-aging and skin wrinkle benefits.

한편, 피크리오노시드 A(Picrionoside A)는 양치식물꼬리고사릿과에 속한 여러해살이풀인 골고사리 (Aspleniumscolopendrium)의 일부분에서 추출한 터페노이드 (terpenoid) 성분에서 분리하거나, 화학적으로도 합성이 가능하다(Natural Product Sciences, 14(4): 265-268 (2008)). 이카리시드 계열 화합물인 이카리시드 II (icarisideII)에 대하여, 미백 활성은 이미 알려 져있다 (국제특허공개공보 WO 2008/035918, 2008년 3월 27일 공개). 반면, 이카리시드 계열 화합물인 피크리오노시드 A에 대한 주목할만한 연구성과는 아직까지 보고된 바 없다.On the other hand, Picrionoside A can be isolated from the terpenoid component extracted from a part of the perennial plant Asplenium scolopendrium belonging to the fern gossypii and can be chemically synthesized (Natural Product Sciences, 14 (4): 265-268 (2008)). For icaricide II compound icariside II, whitening activity is already known (International Patent Publication No. WO 2008/035918, published on Mar. 27, 2008). On the other hand, remarkable research results of picronoside A, an icaricide-based compound, have not been reported yet.

상기 이소플라본 및 피크리오노시드 A 두 화합물의 성질에 착안하여, 본 발명자들은 각질형성세포의 기능을 촉진하여 피부 장벽기능을 강화하고 멜라노사이트의 멜라닌 색소 생성을 억제시킬 수 있는 물질을 찾고자 예의 노력한 결과, 이소플라본 및 피크리오노시드 A를 혼합하여 사용했을 때 피부 보습 및 미백 효과가 뛰어남을 발견하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
In view of the properties of the two isoflavones and picronoside A compounds, the present inventors sought to find a substance capable of promoting the function of keratinocytes to enhance the skin barrier function and inhibit melanocyte pigment production in melanocytes As a result, it was found that when mixed with isoflavone and picronoside A, skin moisturizing and whitening effect was excellent, the present invention was completed.

한국등록특허 제10-0500641호Korean Patent No. 10-0500641 국제특허공개공보 WO 2008/035918International Patent Publication No. WO 2008/035918

본 발명의 목적은 이소플라본 및 피크리오노시드 A를 유효성분으로 함유하여 피부 보습 효과 및 피부 미백 효과가 우수한 보습용 피부 외용제 조성물을 제공하는데 있다.
An object of the present invention is to provide a composition for external application for moisturizing skin, which contains isoflavone and picronoside A as an active ingredient and is excellent in skin moisturizing effect and skin whitening effect.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 이소플라본 및 피크리오노시드 A를 유효성분으로 함유하는 보습용 또는 미백용 피부 외용제 조성물을 제공한다.
In order to achieve the above object, the present invention provides a composition for external application for skin for moisturizing or whitening comprising isoflavone and picronoside A as an active ingredient.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 피부 장벽 기능을 강화하고, 멜라닌 생성을 억제하며, 혈색 및 피부톤을 개선함으로써 피부 보습 효과 및 피부 미백 효과를 나타낸다.
INDUSTRIAL APPLICABILITY The composition for external application for skin according to the present invention exhibits skin moisturizing effect and skin whitening effect by enhancing skin barrier function, inhibiting melanin production, improving color and skin tone.

다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술 분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.Unless otherwise defined, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. In general, the nomenclature used herein is well known and commonly used in the art.

본 발명은 이소플라본 및 피크리오노시드 A를 유효성분으로 함유하는 보습용 또는 미백용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for external application for skin for moisturizing or whitening comprising isoflavone and picronoside A as an active ingredient.

이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명에서 사용된 대두배아 이소플라본 (Soybean Germ Isoflavone)은 식물, 특히 콩과식물에 많이 존재하는 물질로 바이오이소젠이라 지칭하기도 한다.The soybean germ isoflavone used in the present invention is a substance which is abundant in plants, especially soybean plants, and may be referred to as bioisogen.

상기 대두배아 이소플라본의 구체적인 예로는 당과 결합된 형태인 제니스틴, 다이드진, 그리시틴; 당이 제거된 형태인 제니스테인, 다이드제인, 그리시테인 또는 이들의 혼합물 등이 있다. 한편, 대두배아 이소플라본은 효소를 이용하여 당을 제거한 어글리콘(aglycone) 형태가 50%이상 함유되어 있으며, 일반적으로 당과 결합한 형태인 천연 이소플라본에 비해 당을 제거한 형태가 피부 흡수력이 훨씬 우수하다(한국특허 제99020416호 및 제99039042호). Specific examples of the soybean embryo isoflavones include sugar-linked forms such as genistin, daidzin, glycitin; Sugar-removed forms such as genistein, daidzein, gristitene, or mixtures thereof. On the other hand, soybean embryo isoflavones contain more than 50% of the aglycone form in which the sugar is removed by using an enzyme, and the sugar-removed form has a much better absorption capacity than the natural isoflavone, (Korean Patent Nos. 99020416 and 99039042).

대두 이소플라본류 중 항암 활성이 가장 뛰어난 것으로 알려진 제니스테인은 다양한 연구를 통하여 디에틸스틸베스트롤 (DiEthylStilbestrol, DES) 또는 에스트라디올(estradiol)의 1×10-3∼1×10-5 정도의 에스트로겐 효과를 갖고 있는 것으로 알려져 있어, 본 발명의 실시예에서는 이소플라본 중 제니스테인을 사용하였으나, 반드시 이에만 한정되는 것은 아니다.Genistein, which is known to have the highest anticancer activity among soy isoflavones, has been extensively studied through diestylstilbestrol (DES) or estradiol at a concentration of 1 × 10 -3 to 1 × 10 -5 estrogen , And in the examples of the present invention, genistein is used as the isoflavone, but the present invention is not limited thereto.

본 발명에 의한 조성물은 이소플라본을 조성물 총 중량에 대하여 0.01~20 중량%, 바람직하게는 0.1~10 중량%의 양으로 함유할 수 있다. 상기 이소플라본의 함량이 0.01중량% 미만이면 상기 성분에 의한 효능, 효과가 미약하고, 20중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.The composition according to the present invention may contain isoflavone in an amount of 0.01 to 20% by weight, preferably 0.1 to 10% by weight, based on the total weight of the composition. If the content of the isoflavone is less than 0.01% by weight, the effect or effect of the ingredient is insufficient, and if it exceeds 20% by weight, skin safety or shape problems may occur.

본 발명에서 사용되는 피크리오노시드 A(분자량: 370)은 하기 화학식 1의 구조를 가진다.Pycryonoside A (molecular weight: 370) used in the present invention has a structure represented by the following formula (1).

[화학식 1][Chemical Formula 1]

Figure pat00001
Figure pat00001

본 발명의 피크리오노시드 A는 식물에서 추출될 수도 있고, 당업계에 공지된 방법에 따라 합성하여 사용할 수도 있으며, 상업적으로 시판되는 것을 사용할 수도 있다.The picronoside A of the present invention may be extracted from a plant, synthesized according to a method known in the art, or commercially available one may be used.

본 발명에 의한 조성물은 피크리오노시드 A를 조성물 총 중량에 대하여 0.01~20중량%, 바람직하게는 0.1~10중량%의 양으로 함유할 수 있다. 상기 피크리오노시드 A의 함량이 0.01중량% 미만이면 상기 성분에 의한 효능, 효과가 미약하고, 20중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.The composition according to the present invention may contain picronoside A in an amount of 0.01 to 20% by weight, preferably 0.1 to 10% by weight based on the total weight of the composition. If the content of picronoside A is less than 0.01% by weight, the effect and effect of the component are insignificant. If the content is more than 20% by weight, skin stability or shape problems may occur.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 이소플라본 및 피크리오노시드 A를 함께 사용하여 주름, 탄력 감소 등의 증상을 전반적으로 효과적으로 개선할 수 있다.INDUSTRIAL APPLICABILITY The composition for external application for skin according to the present invention can effectively improve symptoms such as wrinkles and elasticity by using isoflavones and picronoside A together.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 피부 장벽 기능 강화용 및 피부 각질형성세포 분화 유도용으로 사용될 수 있으며, 따라서 표피 분화의 불완전함으로 생기는 피부건조증, 아토피 피부염, 접촉성 피부염 또는 건선 등을 예방 또는 개선하는 피부 외용제 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.The composition for external application for skin according to the present invention can be used for enhancing skin barrier function and inducing differentiation of dermal keratinocyte. Therefore, it is possible to prevent or ameliorate skin dryness, atopic dermatitis, contact dermatitis or psoriasis caused by imperfections of epidermal differentiation Can be usefully used as an external composition for skin.

또한, 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 손상된 피부 장벽의 회복능을 높이고, 피부 수분량을 증가시키는 능력이 우수하여 피부 재생용 조성물로도 사용될 수 있다.In addition, the composition for external application for skin according to the present invention has excellent ability to recover damaged skin barrier and increase skin moisture content, and can be used as a composition for skin regeneration.

또한, 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 멜라노사이트의 멜라닌 생성을 억제하고, 혈색 및 피부톤 개선시키는 능력이 우수하여 피부 미백용 조성물로도 사용될 수 있다.In addition, the composition for external application for skin according to the present invention is excellent in the ability to inhibit the melanin formation of melanocytes and improve the color and skin tone, and can be used as a composition for skin whitening.

상기한 본 발명의 피부 외용제 조성물은 화장료 조성물로서 제형화될 수 있으며, 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.The above composition for external application for skin of the present invention can be formulated as a cosmetic composition, and can be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, for example as a solution, a gel, a solid, a paste anhydrous product, an emulsion obtained by dispersing an oil phase in water, a suspension, a microemulsion, a microcapsule, a microgranule or an ionic form (liposome) In the form of ionic fibrin dispersions, or in the form of creams, skins, lotions, powders, ointments, sprays or conical sticks. It can also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant. These compositions may be prepared according to conventional methods in the art.

상기 화장료 조성물은 구체적으로 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 및 바디에센스 등의 화장료로 제형화될 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention can be applied to cosmetics such as softening agents, convergent lotion, nutritional lotion, nutritional cream, massage cream, essence, eye cream, eye essence, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, powder, body lotion, body cream, And body essence.

또한 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.In addition, the composition according to the present invention may further comprise at least one selected from the group consisting of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickening agents, gelling agents, softening agents, antioxidants, suspending agents, stabilizing agents, Such as fillers, emulsifiers, emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, moisturizers, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or any other ingredient commonly used in cosmetics May contain adjuvants commonly used in the field of cosmetics or dermatology. Such adjuvants are introduced in amounts commonly used in the cosmetics or dermatological fields.

또한, 본 발명의 조성물은 피부 개선 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.In addition, the composition of the present invention may contain a skin absorption promoting substance to increase the skin improving effect.

이하, 실시예 및 시험예를 들어 본 발명을 보다 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들 예로만 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples and test examples, but the present invention is not limited to these examples.

[참고예 1][Referential Example 1]

본 발명의 조성물의 효능을 실험하기 위한 이소플라본(제니스테인)은 하기와 같이 농축 분말의 형태로 제조하였다.
Isoflavones (genistein) for testing the efficacy of the compositions of the present invention were prepared in the form of concentrated powders as described below.

제1단계. 대두 추출물의 제조Step 1. Production of soybean extract

대두 2 ㎏에 각각 헥산 6 ℓ를 넣고, 상온에서 3회 교반 추출하여 탈지시킨 다음, 탈지된 대두 1 kg에 80 % 메탄올 4 ℓ를 넣고, 3회 환류 추출한 후, 15 ℃에서 1일간 침적시켰다. 그 후, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 감압농축하여 얻은 엑기스를 물에 현탁한 후, 에테르 1 ℓ로 5회 추출하여 색소를 제거하고, 수층을 1-부탄올 500 ㎖로 3회 추출하였다. 이로부터 얻은 총 1-부탄올층을 감압농축하여 1-부탄올 엑기스를 얻고, 이를 소량의 메탄올에 녹인 다음, 대량의 에틸아세테이트에 추가하여, 생성된 침전물을 건조함으로써, 대두 추출물 300 g을 수득하였다.
6 ℓ of hexane was added to 2 ㎏ of soybeans, and the mixture was degreased with stirring at room temperature for 3 times. Then, 4 kg of 80% methanol was added to 1 kg of defatted soybeans, refluxed three times, and then immersed at 15 ° C for 1 day. Thereafter, the residue and the filtrate were separated by filtration through a filter cloth and centrifugation. The separated filtrate was concentrated under reduced pressure, and the resulting extract was suspended in water. The filtrate was extracted 5 times with 1 L of ether to remove the pigment. And extracted three times with 500 ml of butanol. The total 1-butanol layer thus obtained was concentrated under reduced pressure to obtain a 1-butanol extract. The extract was dissolved in a small amount of methanol and then added to a large amount of ethyl acetate. The resultant precipitate was dried to obtain 300 g of a soybean extract.

제2단계. 미생물을 이용한 제니스테인(Step 2. Genistein using microorganisms ( genisteingenistein , 4',5,7-, 4 ', 5,7- 트리하이드록시Trihydroxy 이소플라본)의 제조 Isoflavone)

상기 (1)에서 수득한 대두 추출물 10 g을 100 ㎖의 이온수에 용해시키고, 121 ℃에서 30분간 멸균하여 30 ℃로 냉각한 후, 미리 배양된 아스퍼질러스 니거(Aspergillus niger, KCCM 11885)를 액체량 대비 5~10 %로 접종하여 30 ℃에서 7일 동안 배양시킨 후, 박층 크로마토그래피로 기질의 소거율을 확인하여 기질이 완전히 소실되면 반응을 종료시켰다. 이 배양액을 5,000 내지 10,000 rpm으로 원심분리하여 회수한 침전물을 증류수로 3회 세척 후 원심분리하여 침전물로써 반응액을 얻은 다음, 상기 침전물에 에탄올(200㎖)을 가해 교반시킨 후(3회), 침전된 염들을 여과를 통해 제거하였다. 그 다음, 여과된 여액을 감압농축하여 조 생성물을 수득하였다. 이후 상기 수득된 조 생성물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(클로로포름: 메탄올 = 8:1 ~ 4:1)로 분리하여 제니스테인 0.12 g을 수득하였다.
10 g of the soybean extract obtained in the above (1) was dissolved in 100 ml of ionized water, sterilized at 121 캜 for 30 minutes, cooled to 30 캜, and pre-cultured Aspergillus niger (KCCM 11885) And incubated at 30 ° C for 7 days. Substrate clearance was confirmed by thin layer chromatography and the reaction was terminated when the substrate completely disappeared. The culture solution was centrifuged at 5,000 to 10,000 rpm. The collected precipitate was washed three times with distilled water and centrifuged to obtain a reaction solution. The precipitate was added with ethanol (200 ml) and stirred (3 times) The precipitated salts were removed by filtration. The filtered filtrate was then concentrated under reduced pressure to give a crude product. Then, the obtained crude product was separated by silica gel column chromatography (chloroform: methanol = 8: 1 to 4: 1) to obtain 0.12 g of genistein.

[참고예 2][Reference Example 2]

본 발명의 조성물의 효능을 실험하기 위한 피크리오노시드 A는 ㈜코스비전(한국)으로부터 구입하여 사용하였다.
Pycryonoside A was used to test the efficacy of the composition of the present invention was purchased from COSVISION (Korea).

[시험예 1] 각질형성세포 분화 촉진 효과 측정[Test Example 1] Measurement of promoting effect of keratinocyte differentiation

본 발명에 따른 피부 외용제조성물의 분화 촉진 효과를 알아보기 위해, 하기와 같이 각질형성세포의 분화시 생성되는 CE(Cornified Envelope)양을 흡광도를 이용하여 측정하였다.In order to examine the differentiation promoting effect of the composition for external application for skin according to the present invention, the amount of corned envelope (CE) produced upon differentiation of keratinocytes was measured by absorbance as described below.

먼저, 신생아의 표피로부터 분리해 일차 배양한 사람의 각질형성세포(HEK; Lonza사, NHEK-Neo-Neonatal Normal Human Epidermal Keratinocytes, Pooled)를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 뒤 시험물질을 하기 표 1의 농도(2ppm농도- 상기 참고예 1의 제니스테인 또는 상기 참고예 2의 피크리오노시드 A 2mg 을 증류수 1L로 희석, 2.5 ppm 농도- 상기 참고예 1의 제니스테인 또는 상기 참고예 2의 피크리오노시드 A 2.5mg 을 증류수 1L로 희석, 3 ppm 농도- 상기 참고예 1의 제니스테인 또는 상기 참고예 2의 피크리오노시드 A 3mg 을 증류수 1L로 희석)로 처리한 후, 세포가 바닥 면적의 70~80% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. First, keratinocytes (HEK; Lonza Co., NHEK-Neonatal Normal Human Epidermal Keratinocytes, Pooled) isolated from epidermis of a newborn baby were placed in a culture flask and adhered to the bottom. (Concentration of 2 ppm) - Genistein of Reference Example 1 or 2 mg of picronoside A of Reference Example 2 was diluted with 1 L of distilled water to give 2.5 ppm concentration - Genistein of Reference Example 1 or Pycrino 2.5 mg of seed A was diluted with 1 L of distilled water, and 3 ppm of concentration - genistein of Reference Example 1 or 3 mg of picronoside A of Reference Example 2 was diluted with 1 L of distilled water) And cultured for 5 days until it grew to about 80%.

이때, 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2mM) 처리군을 각각 음성 대조군, 양성 대조군으로 하였으며, 상기 참고예 1의 제니스테인 (5 ppm 농도- 제니스테인 5mg 을 증류수 1L로 희석)와 상기 참고예 2의 피크리오노시드 A (5 ppm 농도- 피크리오노시드 A 5mg 을 증류수 1L로 희석)을 비교 대조군으로 하였다. At this time, the treated group of low calcium (0.03 mM) and the treated group of high calcium (1.2 mM) were used as a negative control and a positive control group, respectively. The genistein (5 ppm concentration of the reference example 1-diluted with 1 L of distilled water) Picoionoside A (5 ppm concentration - Picoionoside A 5 mg diluted with 1 L of distilled water) of Example 2 was used as a comparative control.

그 다음, 상기 배양한 세포를 수확하여 PBS(Phophate buffered saline)로 세척한 뒤 2% SDS(sodium dodecyl sulfate)와 20mM 농도의 DTT(Dithiothreitol)를 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액(Tris-HCl, pH 7.4) 1ml를 가하여 소니케이션(sonication), 보일링(boiling), 원심분리를 하고, 침전물을 다시 PBS 1ml에 현탁시켜 340nm에서의 흡광도를 측정하였다. 이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액을 일부 취하여 단백질 함량을 측정하고, 세포 분화정도 평가시 기준으로 삼았다. 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.Then, the cultured cells were harvested, washed with PBS (Phosphate buffered saline), and then suspended in 10 mM Tris-HCl buffer (Tris-HCl buffer containing 2% SDS (sodium dodecyl sulfate) and 20 mM DTT (Dithiothreitol) , pH 7.4) was added, sonication, boiling, and centrifugation. The precipitate was suspended again in 1 ml of PBS and the absorbance at 340 nm was measured. Separately, a part of the solution after the sonication was taken to measure the protein content and used as a standard in evaluating the degree of cell differentiation. The results are shown in Table 1 below.

시험물질Test substance 각질형성세포에서의 분화능(%)The ability to differentiate in keratinocytes (%) 저칼슘(0.03mM) 용액
(음성 대조군)
Low calcium (0.03 mM) solution
(Negative control)
100100
고칼슘(1.2mM) 용액
(양성 대조군)
High calcium (1.2 mM) solution
(Positive control group)
210210
제니스테인 (2.5ppm)+
피크리오노시드 A (2.5ppm)
Genistein (2.5 ppm) +
Picronoside A (2.5 ppm)
271271
제니스테인 (3ppm)+
피크리오노시드 A (2ppm)
Genistein (3ppm) +
Picronoside A (2 ppm)
289289
제니스테인 (2ppm)+
피크리오노시드 A (3ppm)
Genistein (2ppm) +
Picronoside A (3 ppm)
300300
제니스테인 (5ppm)Genistein (5ppm) 256256 피크리오노시드 A (5ppm)Picronoside A (5 ppm) 213213

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 이소플라본(제니스테인)이나 피크리오노시드 A를 단독으로 처리한 경우 각질 형성 세포의 분화 촉진 효과가 존재함을 확인할 수 있었으며, 이소플라본 및 피크리오노시드 A를 함께 처리한 경우 시너지 효과에 의하여 각질 형성 세포의 분화 촉진 효과가 우수함을 확인할 수 있었다.As shown in Table 1, it was confirmed that when isoflavone (genistein) or picronoside A alone was treated, the differentiation promoting effect of keratinocytes was present, and isoflavones and picronoside A It was confirmed that the effect of promoting differentiation of keratinocytes was excellent due to the synergy effect.

또한, 제니스테인 2.5 ppm + 피크리오노시드 A 2.5 ppm으로 처리한 경우보다, 제니스테인 3 ppm + 피크리오노시드 A 2 ppm으로 처리한 경우가 더 각질 형성 세포의 분화 촉진 효과가 우수하였으며, 제니스테인 2 ppm + 피크리오노시드 A 3 ppm으로 처리한 경우의 각질 형성 세포의 분화 촉진 효과가 가장 우수함을 확인할 수 있었다.
In addition, the treatment with genistein 3 ppm + picronoside A 2 ppm was more effective in promoting the differentiation of keratinocytes than when 2.5 ppm of genistein + 2.5 ppm of picronoside A, and 2 ppm of genistein + Picronoside A at 3 ppm, it was confirmed that the effect of promoting the differentiation of keratinocytes was the best.

[시험예 2] 피부 장벽기능 회복 효과 측정[Test Example 2] Measurement of skin barrier function recovery effect

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물의 피부 손상으로 인해 손상된 피부 장벽기능의 회복에 미치는 효과 측정하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다. 성인 남녀 10명의 상박을 테이프 스트립핑(Tape Stripping) 방법을 이용하여 피부 장벽에 손상을 주고 각각 하기 표 2의 조성으로 제조한 제형예 1 내지 3 및 비교제형예 1 내지 3의 6개 군을 도포하면서 7일 동안 하루에 한번씩 경피수분손실량(TWEL)의 회복 정도를 Vapometer(Delfin, 핀란드)로 측정 비교하였다. 비교제형예 1은 음성대조군으로서 비히클(vehicle)이며, 비교제형예 2는 상기 참고예 1의 이소플라본을 단독으로 함유하는 비교 대조군이고, 비교제형예 3은 상기 참고예 2의 피크리오노시드 A를 단독으로 함유하는 비교 대조군이다. 실험 결과는 하기 표 3에 나타내었다. 표 3의 결과는 장벽 손상 전과 장벽 손상 후의 처리전 차이를 100% 기준으로 하여 비교하였다. In order to measure the effect of the composition for external application for skin according to the present invention on the recovery of damaged skin barrier function due to skin damage, the following experiment was conducted. The tops of 10 adult males and females were damaged by damaging the skin barrier using a tape stripping method and applied to the six groups of Formulation Examples 1 to 3 and Comparative Formulation Examples 1 to 3, (TWEL) was measured and compared with the Vapometer (Delfin, Finland) once a day for 7 days. Comparative Formulation Example 1 is a vehicle as a negative control, Comparative Formulation Example 2 is a comparative control containing only the isoflavone of Reference Example 1, and Comparative Formulation Example 3 is a comparative control containing the picronoside A Lt; / RTI > alone. The experimental results are shown in Table 3 below. The results in Table 3 were compared before treatment before barrier damage and after treatment before barrier damage on the basis of 100%.

(단위: 중량%)(Unit: wt%) 배합성분Compounding ingredient 제형예 1Formulation Example 1 제형예 2Formulation Example 2 제형예 3Formulation Example 3 비교제형예 1Comparative Formulation Example 1 비교제형예2Comparative Formulation Example 2 비교제형예3Comparative Formulation Example 3 정제수Purified water 6969 6969 6969 7070 6969 6969 프로필렌글리콜Propylene glycol 3030 3030 3030 3030 3030 3030 제니스테인Genistein 0.50.5 0.60.6 0.40.4 -- 1One -- 피크리오노시드 APicronoside A 0.50.5 0.40.4 0.60.6 -- -- 1One

시험군Test group TWEL 변화 (%)TWEL Change (%) 처리전Before processing 1일1 day 2일2 days 3일3 days 4일4 days 5일5 days 6일6 days 제형예1Formulation Example 1 100100 123123 120120 114114 111111 109109 108108 제형예2Formulation Example 2 100100 123123 123123 120120 116116 114114 110110 제형예3Formulation Example 3 100100 123123 127127 125125 123123 119119 116116 비교제형예1Comparative Formulation Example 1 100100 122122 110110 9797 7070 6262 4343 비교제형예2Comparative Formulation Example 2 100 100 123123 119119 112112 111111 108108 105105 비교제형예3Comparative Formulation Example 3 100100 122122 117117 109109 108108 102102 100100

상기 표 3에서 알 수 있는 바와 같이, 이소플라본 및 피크리오노시드 A를 함께 처리한 경우 시너지 효과에 의하여 이소플라본 또는 피크리오노시드 A를 단독으로 처리한 경우보다 빠른 속도로 경피 수분 손실량이 정상으로 돌아오며 장벽 손상이 회복됨을 확인할 수 있다.
As shown in Table 3 above, when isoflavone and picronoside A were treated together, the transdermal water loss was faster than that of isoflavone or picronoside A alone by synergy effect And the barrier damage is recovered.

[참고예 3] 제형예 4 내지 6, 및 비교제형예4 내지 6[Reference Example 3] Formulation examples 4 to 6 and comparative formulations 4 to 6

하기 표 4의 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다(단위: 중량%).Nutritive creams were prepared according to the composition of Table 4 below in a conventional manner (unit: wt%).

배합성분Compounding ingredient 제형예4Formulation Example 4 제형예 5Formulation Example 5 제형예 6Formulation Example 6 비교제형예4Comparative Formulation Example 4 비교제형예5Comparative Formulation Example 5 비교제형예6Comparative Formulation Example 6 정제수Purified water To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 To 100To 100 제니스테인Genistein 0.250.25 0.30.3 0.20.2 -- 0.50.5 -- 피크리오노시드 APicronoside A 0.250.25 0.20.2 0.30.3 -- -- 0.50.5 식물성경화유Vegetable hydrogenated oil 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 스테아린산Stearic acid 0.600.60 0.600.60 0.600.60 0.600.60 0.600.60 0.600.60 글리세롤스테아레이트Glycerol stearate 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 스테아릴알코올Stearyl alcohol 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트&베헤닐알코올&소디움스테아로일락틸에이트Polyglyceryl-10pentastearate and behenyl alcohol and sodium stearoyl lactylate 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 아라키딜베헤닐알코올&아라키딜글루코사이드Arachidyl behenyl alcohol & arachidyl glucoside 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 1.001.00 세틸아릴알코올&세테아릴글루코사이드Cetylaryl Alcohol and Cetearyl Glucoside 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 2.002.00 PEG-100 스테아레이트&글리세롤올레이트&프로필렌글리콜PEG-100 Stearate & Glycerololate & Propylene Glycol 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 1.501.50 카프릴릭/카르릭트리글리세라이드Caprylic / Carrick Triglyceride 11.0011.00 11.0011.00 11.0011.00 11.0011.00 11.0011.00 11.0011.00 사이클로메디콘Cyclomedicone 6.006.00 6.006.00 6.006.00 6.006.00 6.006.00 6.006.00 방부제, 향Preservative, incense 적량Suitable amount 적량Suitable amount 적량Suitable amount 적량Suitable amount 적량Suitable amount 적량Suitable amount 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1 0.10.1

[시험예 3] 피부 보습력 증가 효과 측정[Test Example 3] Measurement of skin moisturizing effect

본 발명의 조성물의 피부 보습력 증가에 미치는 효과를 측정하기 위하여, 상기 제형예 4 내지 6 및 비교제형예 4 내지 6을 이용하였고, 하기와 같이 평가하였다.Formulations 4 to 6 and Comparative Formulations 4 to 6 were used to measure the effect of the composition of the present invention on the skin moisturizing effect, and were evaluated as follows.

건조 피부로 분류된 40~50대 성인 남녀 60명을 각각 제형예 4 내지 6 및 비교제형예 4 내지 6의 6개 군에 대해 10명씩 6개조로 나누어 영양크림을 매일 2회씩 4주간 안면에 도포하게 하였다. 도포 개시 전과, 도포 후 1주, 2주, 4주 경과한 시점, 그리고 도포를 중지한 2주 경과(총 6주 경과) 후에 항온, 항습 조건(24℃, 상대습도 40%)에서 피부수분량측정기(Corneometer CM825, C+K Electronic Co., 독일)로 피부수분량을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다. 표 5의 결과는 시험개시 직전에 측정한 피부 수분량 측정기 값을 기준으로 하여 일정기간 처치한 후의 측정값의 증가분을 백분율로 표시한 것이다. Sixty male and female adult persons aged 40 to 50 classified as dry skin were divided into 6 groups of 10 persons for each of the six groups of Formulation Examples 4 to 6 and Comparative Formulation Examples 4 to 6, and the nutritional cream was applied twice daily for 4 weeks to the face . (24 ° C, relative humidity 40%) after 1 week, 2 weeks, and 4 weeks after application, and after 2 weeks (total 6 weeks) (Corneometer CM825, C + K Electronic Co., Germany). The results are shown in Table 5 below. The results in Table 5 are based on the skin moisture meter measured just before the start of the test, and the increase in the measured value after a certain period of treatment is expressed as a percentage.

시험군Test group 수분 증가율 (%)Moisture growth rate (%) 1주 경과1 week 2주 경과Two weeks 4주 경과4 weeks 6주 경과6 weeks 제형예 4Formulation Example 4 4848 4545 4343 4040 제형예 5Formulation Example 5 5050 4848 4545 4141 제형예 6Formulation Example 6 5858 5353 5050 4747 비교제형예 4Comparative Formulation Example 4 3030 3232 3232 1515 비교제형예 5Comparative Formulation Example 5 3232 3535 3434 3232 비교제형예 6Comparative Formulation Example 6 3131 3333 3030 2727

상기 표 5의 결과를 보면, 비교제형예 4를 도포한 경우에는 도포가 이루어진 4주까지는 약 30% 정도의 수분 증가율을 보이지만, 도포를 중지한 후(6주 경과)에는 피부수분량이 급격하게 감소하였고, 제니스테인을 단독으로 함유한 비교제형예 5 나 피크리오노시드 A를 단독으로 함유한 비교제형예 6을 도포한 경우에는 피부 수분 증가율이 대부분 30% 대에 머물렀으나, 제니스테인 및 피크리오노시드 A를 함께 함유한 제형예 4 내지 6을 도포한 경우에는 시너지 효과에 의하여 도포를 중지한 후에도 40% 이상의 피부수분 증가율을 보임을 확인할 수 있다. 이를 통해 본 발명의 조성물은 피부 보습력 효과가 우수함을 알 수 있다.
The results of Table 5 show that when Comparative Formulation Example 4 was applied, the water increase rate was about 30% until 4 weeks of application, but after the application was stopped (6 weeks), the skin moisture amount decreased sharply And comparative Formulation Example 5 containing only genistein alone and comparative Formulation Example 6 containing only picronoside A alone, the skin moisture increase rate remained mostly at about 30%, while genistein and picronoside A It is confirmed that the skin moisture increase rate is 40% or more even after stopping the application due to the synergy effect. Thus, it can be seen that the composition of the present invention has excellent skin moisturizing effect.

[시험예 4] B16/F10 멜라노마 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제 효과[Test Example 4] Inhibitory effect on melanin formation by B16 / F10 melanoma cells

본 시험예에 사용된 B16/F10 멜라노마는 마우스에서 유래한 세포주이며, 멜라닌이라는 흑색 색소를 분비하는 세포의 악성화로 생긴 암세포이다. 이 세포의 인공배양 중에 시험물질을 처리하여 멜라닌 생성이 감소하는 정도를 비교 평가하였다. 본 시험예에서 사용된 B16/F10 멜라노마는 한국세포주은행(KCLB No: 8008)으로부터 분양받아 사용하였다.The B16 / F10 melanoma used in this test example is a mouse-derived cell line, and is a cancer cell caused by malignantization of a cell that secretes a melanin pigment called melanin. During the artificial incubation of these cells, the test material was treated to compare the degree of decrease in melanin production. The B16 / F10 melanoma used in this test was purchased from Korean Cell Line Bank (KCLB No: 8008).

B16/F10 멜라노마의 멜라닌 생합성 억제효과 측정은 다음과 같이 행하였다. B16/F10 멜라노마를 6 웰플레이트에 5×105/웰로 분주하여 37℃, 5% CO2 배양기(MCO-20AIC, Sanyo)에서 약 24시간 동안 10% FBS(fetal bovine serum)를 함유한 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)에서 배양하였다. FBS가 없는 새로운 DMEM 배지에 시험물질을 첨가하고 72시간 경과시켰다. 이 때 사용한 시험물질은 하기 표 6에 기재된 바와 같다. 트립신-EDTA를 처리하고 원심분리하여 세포를 분리한 후, DMSO를 함유한 1N NaOH를 이용해 95℃에서 멜라닌을 용해하였다. ELISA 리더(DIbiotech, Korea)를 활용하여 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 시험물질을 첨가하지 않은 세포를 대조군으로 하여 대조군에서의 멜라닌 함량과 비교하여 각 시험물질의 멜라닌 생성 저해 정도를 측정하였다. 수학식 1에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하여 그 결과를 표 6에 나타내었다.Melanin biosynthesis inhibitory effect of B16 / F10 melanoma was measured as follows. B16 / F10 melanoma dries to a 6-well plate at 5 × 10 5 / well of frequency divider 37 ℃, 5% CO 2 And cultured in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) containing 10% FBS (fetal bovine serum) for 24 hours in an incubator (MCO-20AIC, Sanyo). The test material was added to fresh DMEM medium without FBS and aged for 72 hours. The test materials used at this time are as shown in Table 6 below. After treatment with trypsin-EDTA, the cells were separated by centrifugation, and melanin was dissolved at 95 ° C in 1N NaOH containing DMSO. Absorbance was measured at 405 nm using an ELISA reader (DIbiotech, Korea). Cells to which the test substance was not added were used as a control group, and the melanin formation inhibition degree of each test substance was measured by comparing with the melanin content in the control group. The inhibition rate of melanin production was calculated according to Equation (1) and the results are shown in Table 6.

[수학식 1][Equation 1]

Figure pat00002
Figure pat00002

시험물질Test substance 멜라닌생성 저해율(%)Melanin inhibition rate (%) 대조군(무첨가)Control group (no addition) 00 코지산Kojic acid 5353 제니스테인 (0.05중량%) + 피크리오노시드 A (0.05중량%)(0.05% by weight) + picronoside A (0.05% by weight) 5454 제니스테인 (0.03중량%) + 피크리오노시드 A (0.02중량%)(0.03% by weight) + picronoside A (0.02% by weight) 5656 제니스테인 (0.02중량%) + 피크리오노시드 A (0.03중량%)(0.02% by weight) + picronoside A (0.03% by weight) 6060 제니스테인 (0.1중량%)Genistein (0.1% by weight) 4848 피크리오노시드 A (0.1중량%)Pycryonoside A (0.1% by weight) 3636

상기 표 6의 결과에서, 제니스테인 및 피크리오노시드 A를 함께 사용할 경우 멜라닌 생성 억제율이 상승되며, 특히 이소플라본 및 피크리오노시드 A를 혼합하여 사용할 경우에 시너지 효과에 의하여 현저하게 우수한 멜라닌 생성 억제율을 나타냄을 확인할 수 있다.
In the results shown in Table 6 above, when melanin production inhibitory rate is increased when both genistein and picronoside A are used, particularly when isoflavones and picronoside A are mixed and used, the melanin production inhibitory rate As shown in FIG.

[시험예 5] 피부톤 개선 효과[Test Example 5] Skin tone improvement effect

본 발명의 조성물의 피부톤 개선 효과를 알아보기 위하여 20~50대 성인 남녀 60명을 각각 제형예 4 내지 6 및 비교제형예 4 내지 6의 4개 군에 대해 10명씩 6개조로 나누어 각 군의 피험자에게 상기 제형예 4 내지 6 및 비교제형예 4 내지 6을 각각 사용(저녁 1회/일 도포, 총 1주간)하도록 한 후, Facial Stage DM-3(Moritex, Japan) 기기를 활용하여 피부톤 개선 정도를 평가하였다. 피부톤 개선율은 피부의 명도 및 색채 측정값으로부터 피부의 명도 및 색채 변화 값을 구하여 판단하였으며, 그 결과의 평균값을 구하여 하기 표 7에 나타내었다. 명도 및 색채 변화값이 클수록 피부톤이 개선되었음을 의미한다.To examine the effect of the composition of the present invention on the improvement of skin tone, 60 male and female adults in the 20s to 50s were divided into 6 groups of 10 groups for each of the four groups of Formulations 4 to 6 and Comparative Formulations 4 to 6, (Morningx, Japan) was applied to each of the above Formulation Examples 4 to 6 and Comparative Formulation Examples 4 to 6 (once a day / once a day for a total of one week) . The improvement rate of the skin tone was determined by determining the brightness and color change value of the skin from the brightness and color measurement values of the skin, and the average value of the results was obtained and is shown in Table 7 below. The larger the change in brightness and color, the better the skin tone.

시험물질Test substance 피부톤 개선율(%)Skin tone improvement rate (%) 명도brightness 색채Color 제형예 4Formulation Example 4 2626 2828 제형예 5Formulation Example 5 2929 2626 제형예 6Formulation Example 6 3535 3131 비교제형예4Comparative Formulation Example 4 99 77 비교제형예 5Comparative Formulation Example 5 1313 1111 비교제형예 6Comparative Formulation Example 6 1111 1010

표 7의 결과를 보면, 제니스테인 및 피크리오노시드 A 중 어느 것도 함유하지 않은 비교제형예 4는 유의적인 피부톤 개선 효능을 보이지 않은 반면, 제니스테인을 함유하는 비교제형예 5 또는 피크리오노시드 A를 함유하는 비교제형예 6은 사용 전보다 피부톤이 개선됨을 보이며, 이들 2가지 성분을 동시에 함유하는 제형예 4 내지 6의 경우에는 시너지 효과에 의하여 피부톤이 현저하게 개선됨을 알 수 있다.
The results in Table 7 show that Comparative Formulation Example 4, which does not contain any of the genistein and picronoside A, shows no significant skin tone-improving effect, whereas Comparative Formulation Example 5 or picronoside A containing genistein Comparative Example 6 containing Comparative Example 6 shows improvement of skin tone before use, and in Formulations 4 to 6 which simultaneously contain these two components, skin tone is remarkably improved by synergy effect.

이하, 본 발명에 따른 조성물의 제제예를 설명하나, 약학 조성물 및 화장료 조성물은 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
Hereinafter, formulation examples of the composition according to the present invention will be described. However, the pharmaceutical composition and the cosmetic composition can be applied to various formulations, and the present invention is not limited thereto but is specifically described.

[제제예 1] 화장수[Formulation Example 1] Lotion

아래 표 8에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 화장수를 제조한다.Lotions are prepared according to a conventional method with the composition shown in Table 8 below.

함량(중량%)Content (% by weight) 제니스테인Genistein 1.01.0 피크리오노시드 APicronoside A 1.01.0 글리세린glycerin 3.03.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 2.02.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 2.02.0 카르복시비닐폴리머Carboxyvinyl polymer 0.10.1 PEG 12 노닐페닐에테르PEG 12 nonyl phenyl ether 0.20.2 폴리솔베이트 80Polysorbate 80 0.40.4 에탄올ethanol 10.010.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance

[제제예 2] 영양 크림[Formulation Example 2] Nourishing cream

아래 표 9에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 영양 크림을 제조한다.Nutrition cream is prepared according to a conventional method with the composition shown in Table 9 below.

함량(중량%)Content (% by weight) 제니스테인Genistein 1.01.0 피크리오노시드 APicronoside A 1.01.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 솔비탄세스퀴올리에이트Sorbitan sesquioleate 0.50.5 PEG 60 경화피마자유 PEG 60 hardened castor oil 2.02.0 유동파라핀Liquid paraffin 10.010.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 카프릴릭/카프락트리글리세라이드Caprylic / caproic triglyceride 5.05.0 글리세린glycerin 5.05.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 3.03.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance

[제제예 3] 마사지 크림[Formulation Example 3] Massage cream

아래 표 10에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 마사지 크림을 제조한다.A massage cream is prepared according to a conventional method with the composition shown in Table 10 below.

함량(중량%)Content (% by weight) 제니스테인Genistein 0.50.5 피크리오노시드 APicronoside A 0.50.5 밀납Wax 10.010.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 PEG 60 경화피마자유PEG 60 hardened castor oil 2.02.0 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 0.80.8 유동파라핀Liquid paraffin 40.040.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드Caprylic / capric triglyceride 4.04.0 글리세린glycerin 5.05.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 3.03.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.20.2 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance

[제제예 4] 팩[Formulation Example 4] Pack

아래 표 11에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 팩을 제조한다.A pack is prepared according to a conventional method with the composition shown in Table 11 below.

함량(중량%)Content (% by weight) 제니스테인Genistein 0.50.5 피크리오노시드 APicronoside A 0.50.5 폴리비닐알콜Polyvinyl alcohol 13.013.0 소듐카르복시메틸셀룰로오스Sodium carboxymethylcellulose 0.20.2 글리세린glycerin 5.05.0 알란토인Allantoin 0.10.1 에탄올ethanol 6.06.0 PEG 12 노닐페닐에테르PEG 12 nonyl phenyl ether 0.30.3 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 0.30.3 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance

[제제예 5] 젤[Formulation Example 5] Gel

아래 표 12에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 젤을 제조한다.A gel is prepared according to a conventional method with the composition shown in Table 12 below.

함량(중량%)Content (% by weight) 제니스테인Genistein 0.250.25 피크리오노시드 APicronoside A 0.250.25 에틸렌디아민초산나트륨Ethylenediamine sodium acetate 0.050.05 글리세린glycerin 5.05.0 카르복시비닐폴리머Carboxyvinyl polymer 0.30.3 에탄올ethanol 5.05.0 PEG 60 경화피마자유PEG 60 hardened castor oil 0.50.5 트리에탄올아민Triethanolamine 0.30.3 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance

[제제예 6] 연고[Formulation Example 6] Ointment

아래 표 13에 기재된 조성으로 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다.Ointment was prepared by a conventional method with the composition shown in Table 13 below.

함량(중량%)Content (% by weight) 제니스테인Genistein 0.50.5 피크리오노시드 APicronoside A 0.50.5 글리세린glycerin 8.08.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 4.04.0 유동파라핀Liquid paraffin 15.015.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드Caprylic / capric triglyceride 3.03.0 스쿠알란Squalane 1.01.0 세테아릴글루코사이드Cetearyl glucoside 1.51.5 소르비탄스테아레이트Sorbitan stearate 0.40.4 세테아릴 알코올Cetearyl alcohol 1.01.0 밀납Wax 4.04.0 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance

[제제예 7] 연질캅셀제[Formulation Example 7] Soft capsule

제니스테인 0.0025g, 피크리오노시드 A 0.0025g, 비타민 C 0.0025g, 팜유 2mg, 팜경화유 8mg, 황납 4mg 및 레시틴 6mg을 혼합하고, 통상의 방법에 따라 1 캡슐당 400 mg씩 충진하여 연질캅셀을 제조하였다.
A soft capsule was prepared by mixing 0.0025 g of genistein, 0.0025 g of picronoside A, 0.0025 g of vitamin C, 2 mg of palm oil, 8 mg of palm kernel oil, 4 mg of yellow radish and 6 mg of lecithin per one capsule according to a conventional method Respectively.

[제제예 8] 정제[Formulation Example 8] Tablets

제니스테인 0.0025g, 피크리오노시드 A 0.0025g, 비타민 C 0.0025g, 포도당 100mg, 전분 96mg 및 마그네슘 스테아레이트 4mg을 혼합하고 30% 에탄올을 40mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하고 타정기를 이용하여 정제로 타정하였다.
0.0025 g of genistein, 0.0025 g of picronoside A, 0.0025 g of vitamin C, 100 mg of glucose, 96 mg of starch and 4 mg of magnesium stearate were mixed and 40 mg of 30% ethanol was added to form granules, followed by drying at 60 ° C, And tableted by tableting.

[제제예 9] 과립제[Formulation Example 9]

제니스테인 150mg, 피크리오노시드 A 150mg, 비타민 C 150mg, 포도당 100mg, 및 전분 600mg을 혼합하고 30% 에탄올을 100 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 다음 포에 충진하였다. 내용물의 최종 중량은 1 g으로 하였다.
Granules were formed by mixing 150 mg of genistein, 150 mg of picronoside A, 150 mg of vitamin C, 100 mg of glucose, and 600 mg of starch and adding 100 mg of 30% ethanol, followed by drying at 60 ° C to form granules, Respectively. The final weight of the contents was 1 g.

[제제예 10] 드링크제[Formulation Example 10]

제니스테인 0.0025g, 피크리오노시드 A 0.0025g, 비타민 C 0.0025g, 포도당 10g, 구연산 2g 및 정제수 187.8g을 혼합하고 병에 충진하였다. 내용물의 최종 용량은 200ml로 하였다.
0.0025 g of genistein, 0.0025 g of picronoside A, 0.0025 g of vitamin C, 10 g of glucose, 2 g of citric acid and 187.8 g of purified water were mixed and filled in a bottle. The final volume of the contents was adjusted to 200 ml.

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to specific embodiments thereof, those skilled in the art will readily appreciate that many modifications are possible in the exemplary embodiments without materially departing from the novel teachings and advantages of this invention. something to do. Accordingly, the actual scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

Claims (8)

이소플라본 및 하기 화학식 1로 표시되는 피크리오노시드 A를 유효성분으로 함유하는 보습용 또는 미백용 피부 외용제 조성물.
[화학식 1]
Figure pat00003
Isoflavone and picronoside A represented by the following formula (1) as an active ingredient.
[Chemical Formula 1]
Figure pat00003
제1항에 있어서, 상기 이소플라본은 제니스틴(genistin), 다이드진(daidzin), 그리시틴(glycitin), 제니스테인(genistein), 다이드제인(daidzein), 및 그리시테인(glycitein)으로 구성되는 군에서 선택되는 1종 이상임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.2. The composition of claim 1, wherein the isoflavone is selected from the group consisting of genistin, daidzin, glycitin, genistein, daidzein, and glycitein. Wherein the composition is at least one selected from the group consisting of the following. 제1항에 있어서, 상기 이소플라본의 함량은 조성물 전체 중량에 대하여, 0.01~20 중량%인 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to claim 1, wherein the isoflavone content is 0.01 to 20% by weight based on the total weight of the composition. 제1항에 있어서, 상기 피크리오노시드 A의 함량은 조성물 전체 중량에 대하여, 0.01~20 중량%인 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to claim 1, wherein the content of picronoside A is 0.01 to 20% by weight based on the total weight of the composition. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 각질형성세포 분화 유도용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to claim 1, wherein the composition is for inducing differentiation of dermal keratinocytes. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 장벽 기능 강화용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to claim 1, wherein the composition is for enhancing skin barrier function. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 혈색 및 피부톤 개선용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.The composition for external application for skin according to claim 1, wherein the composition is for improving color and skin tone. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 및 바디에센스로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.8. The composition according to any one of claims 1 to 7, wherein the composition is selected from the group consisting of softening agents, convergent lotion, nutritional lotion, nutritional cream, massage cream, essence, eye cream, eye essence, cleansing cream, cleansing foam, , A powder, a body lotion, a body cream, a body oil, and a body essence.
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