KR20160063552A - Composition for promoting sleep including hop extract - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 호프 추출물을 포함하는 수면 촉진용 조성물에 대한 것이다.The present invention relates to a composition for accelerating sleep surface comprising a hop extract.
수면은 인간 수명의 1/3을 차지하고 있으며 가장 근본적이고 필수적인 생리현상으로 건강 유지 및 정신적 안정에 있어 매우 중요한 요소이다. 만성적인 수면 부족 및 장애는 심혈관 질환, 고혈압, 기억, 학습, 대사조절, 체중, 면역력, 암 저항력, 당뇨병, 안전사고 및 기분 등 전반적인 신체적 및 정신적 건강에 부정적인 영향을 끼친다. 현재, 세계 인구의 30% 정도가 불면증을 경험하고 있으며 10%는 만성적으로 겪고 있을 만큼 수면장애로 인한 문제가 최근 크게 대두되고 있다.
Sleep constitutes one-third of human life and is the most fundamental and essential physiological phenomenon and is a very important factor in health maintenance and mental stability. Chronic sleep deprivation and disability negatively impacts overall physical and mental health, including cardiovascular disease, hypertension, memory, learning, metabolic control, weight, immunity, cancer resistance, diabetes, safety accidents and mood. Currently, about 30% of the world's population is suffering from insomnia, and 10% is suffering from chronic sleep disorders.
불면증의 평생 유병율이 지난 수년간 36%에서 49%로 증가되고 있다고 한다. 이로 인한 문제도 심각해서 국제보건기구에서 실시한 공동연구에 의하면 지난 한달 동안에 일을 할 수 없었던 날이 신체질환이 있는 환자의 경우는 평균 4.4일인 반면에 수면장애가 있는 사람들의 경우는 평균 5.2일로, 수면장애가 우리의 생활 에 끼치는 영향이 매우 심각함을 보여주었다. 또한 1995년 미국에서 실시한 갤럽조사에 의하면 조사대상 성인의 52%는 지난 한해 동안에 졸음운전을 한 경험이 있다고 하였고 수면장애가 있다고 보고한 성인 10명중 3명만이 자신들의 문제를 의료인과 상의하였다고 하였다. 설령 불면증 환자들이 자신의 증상을 의사에게 호소하더라도, 대부분의 의사들은 수연장애에 대한 지식이 단편적이어서 결국 의사들은 수면제를 부적절하게 사용하는 경우가 많다.
The lifetime prevalence of insomnia has increased from 36% to 49% over the past several years. This is a serious problem, and according to a joint study conducted by the International Health Organization, the average day for people who can not work during the past month is 4.4 days for people with physical illness, while the average for people with sleep disorders is 5.2 days, The impact of disability on our lives has been very severe. In addition, according to a Gallup survey conducted in the United States in 1995, 52% of adults surveyed reported experiencing drowsiness during the past year, and only three out of ten adults reporting sleep disorders had consulted their physicians about their problems. Even if patients with insomnia complain to their doctor about their symptoms, most doctors have a fragmented knowledge of the disorder, so doctors often use the sleeping pills improperly.
수면제는 일반적으로 불면증의 단기적 치료에 효과적이나 약물의존성, 인지기능저하 등 각종 부작용이 있다 하여 초기에는 비약물적 치료를 권고하며 심한 경우 수면제를 처방하는 것이 일반적인 불면증의 치료법이다. 치료약물로는 benzodiazepine계열의 약물, non-benzodiazepine계열의 약물, benzodiazepine receptor agonists와 진정작용이 있는 항우울약 등이 사용되고 있으나, 이러한 약물들은 장기간 사용하였을 때 내성 및 의존성이 형성되는 부작용과 더불어 불안, 흥분 및 금단현상과 유사한 증상이 나타날 수 있어, 일상생활의 어려움뿐만 아니라 인지적 장애나 우울 등 다른 질병을 일으키는 위험요인이 되기도 한다(Waldman, S.A., Terzic, A. Pharmacology and Therapeutics. Saunders, pp 849-855, 2009). 따라서 부작용이 적으면서 불안과 불면을 치료할 수 있는 약물을 개발하는 것이 시급한 실정이다.
Sleeping drugs are generally effective for short-term treatment of insomnia. However, there are various side effects such as drug dependence and cognitive impairment. Therefore, nonpharmacologic treatment is recommended at the beginning, and severe hypnotics is a common treatment for insomnia. In addition to benzodiazepine, non-benzodiazepine, and benzodiazepine receptor agonists and sedative antidepressants, these drugs have been associated with long-term tolerance and dependence, as well as anxiety, (Waldman, SA, Terzic, A., Pharmacology and Therapeutics, Saunders, pp. 849). In addition, -855, 2009). Therefore, it is urgent to develop a drug that can treat anxiety and insomnia while having fewer side effects.
한편, 호프(hop)은 삼과(Cannabinaceae)의 덩굴성 여러해살이식물로, 황록색 꽃이 맥주 원료로 쓰인다. 꽃만을 홉이라고도 부르는데, 다양한 종류의 기름과 수지가 들어 있는 작은 샘이 있다. 호프는 맥주의 중요한 첨가물로서 맥주 특유의 향기와 쓴맛을 내며, 방부의 효능이 있어 단백질의 혼탁을 방지하고, 맥주의 거품을 잘 일어나게 하며 저장성을 높여주는 작용도 한다. 쓴맛의 주성분은 후물론(humulon)과 루풀론(lupulon)이고, 향기의 주성분은 후물렌(humulene)과 미르센(myrcene)으로 방부 효과도 있고, 거품을 잘 일게도 한다.
On the other hand, hop is a vineous perennial plant of Cannabinaceae, and yellow-green flowers are used as beer ingredients. Flowers are also called hops, and there is a small fountain with various kinds of oil and resin. Hope is an important additive of beer. It gives beer specific flavor and bitter taste. It has antiseptic effect, prevents turbidity of protein, improves beer bubbles and increases shelf life. The main components of bitter taste are humulon and lupulon, and the main ingredients of fragrance are humulene and myrcene, which have a preservative effect and a good bubble.
본 발명자들은 호프의 효능에 대하여 연구하던 중 호프 추출물이 수면 촉진 효과를 갖는 것을 확인하였으며, 나아가 호프를 발효시키거나 쥐오줌풀 추출물과 혼합함으로써 상기 수면 촉진 효과가 유의하게 증진되는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
The inventors of the present invention found that the extract of the hop has an effect of accelerating sleep during the study of the efficacy of the hop, further confirmed that the effect of accelerating the sleep is significantly enhanced by fermenting the hop or mixing with the extract of the Snail grass. Completed.
본 발명의 목적은 수면 촉진용 조성물을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a composition for promoting sleep.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 호프 추출물을 포함하는 수면 촉진용 식품 조성물을 제공한다.
In order to accomplish the above object, the present invention provides a food composition for promoting sleep, comprising a hop extract.
또한 본 발명은 호프 추출물을 포함하는 수면장애 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
The present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing and treating sleep disorder comprising a hop extract.
본 발명의 식품 조성물 및 약학적 조성물은 수면 시간 증진 및 숙면 촉진 효능을 갖는다.The food composition and the pharmaceutical composition of the present invention have the effect of improving sleeping time and promoting sleeping.
도 1은 SD 래트의 뇌파를 측정하는 모습을 나타낸다.
도 2는 SD 래트의 뇌파 측정을 위한 전극 삽입 수술을 나타낸다.
도 3은 SD 래트의 뇌전도 패턴 분석을 나타낸다.
도 4는 수면구조 분석을 위한 FFT(fast Fourier transform) 알고리즘을 나타낸다.
도 5는 호프 추출물 내 총 당, 플라보노이드 및 총 폴리페놀을 나타낸다.
도 6은 호프 추출물 첨가에 따른 초파리의 Actogram을 나타낸다.
A 행: Cascade 호프 추출물 및 대조군(control)의 actogram이다(C: Cascade 호프 추출물을 표준시료와 함께 2, 5, 10 mg 투여).
B 행: Hallertau 호프 추출물 및 대조군의 actogram이다(H: Hallertau 호프 추출물을 표준시료와 함께 2, 5, 10 mg 투여)).
C 행: Saaz 호프 추출물의 및 대조군의 actogram이다(Saaz 호프 추출물을 표준시료와 함께 2, 5, 10 mg 투여)).
Control: 표준시료(5% 수크로스와 1% agar).
도 7은 호프 추출물 첨가에 따른 초파리의 운동 능력 차이를 나타낸다.
Control: 표준시료(5% 수크로스와 1% agar),
C 2, 5, 10 mg: 표준시료 + 2, 5, 10 mg의 Cascade 호프 추출물,
H 2, 5, 10 mg: 표준시료 + 2, 5, 10 mg의 Hallertau 호프 추출물,
S 2, 5, 10 mg: 표준시료 + 2, 5, 10 mg의 Saaz 호프 추출물.
도 8은 Cascade 호프의 발효 전/후의 성분 변화를 나타낸다.
도 9는 쥐오줌풀 추출물의 첨가에 따른 초파리의 Actogram이다(V: 쥐오줌풀(Valerian) 추출물) (Control: 표준시료 (5% 수크로스와 1% agar), V: 쥐오줌풀 추출물을 표준시료와 함께 2, 5, 10, 20 mg 투여).
도 10은 쥐오줌풀 추출물의 첨가에 따른 초파리의 운동 능력(locomotor) 차이를 나타낸다(Control: 표준시료(5% 수크로스와 1% agar), V: 쥐오줌풀 추출물을 표준시료와 함께 1, 5, 10, 20 mg 투여).
도 11은 호프 추출물 및 쥐오줌풀 추출물의 혼합물의 이용 시 초파리의 Actogram이다(V: 쥐오줌풀(Valerian) 추출물) (Control: 표준시료(5% 수크로스와 1% agar), V: 쥐오줌풀 추출물을 표준시료와 함께 투여, V + C: 쥐오줌풀 추출물(V) 및 호프 추출물(C)의 혼합물 투여)
도 12는 호프 발효 전/후 추출물 및 쥐오줌풀 추출물의 혼합물의 이용 시 초파리의 운동 능력(locomotor) 차이를 나타낸다(Control: 표준시료(5% 수크로스와 1% agar), Valerian: 쥐오줌풀 추출물을 표준시료와 함께 투여, VA + H: 쥐오줌풀 추출물(VA) 및 cascade 호프 추출물(H)의 혼합물 투여)
도 13 내지 도 15는 쥐오줌풀 추출물 및 호프 추출물의 혼합물을 투여 시 SD 래트에서의 수면 촉진 효과를 나타낸다(도 13: 경구투여 1일, 도 14: 경구투여 2일, 도 15: 경구투여 3일).
Control: 식염수 투여군,
VA+H: 쥐오줌풀 추출물(VA) 및 Cascade 호프 추출물(H) 혼합물 투여군,
VA+FH: 쥐오줌풀 추출물(VA) 및 발효 Cascade 호프 추출물(FH) 혼합물 투여군 Fig. 1 shows a state in which EEG rats are measured.
2 shows an electrode insertion operation for EEG measurement of the SD rat.
Figure 3 shows an analysis of the electroencephalogram pattern of SD rats.
Fig. 4 shows a fast Fourier transform (FFT) algorithm for the sleep structure analysis.
Figure 5 shows the total sugars, flavonoids and total polyphenols in the hop extract.
6 shows the Actogram of Drosophila in accordance with the addition of the hop extract.
Column A: Cascade hop extract and control actogram (C: Cascade hop extract administered at 2, 5, and 10 mg with standard samples).
Column B: Hallertau Hop extract and control actogram (H: Hallertau Hop
Line C: Saazoff extract and actogram of control (2, 5, 10 mg of Saazoff extract with standard samples)).
Control: Standard samples (5% sucrose and 1% agar).
FIG. 7 shows the difference in the exercise capacity of the fruit flies according to the addition of the hop extract.
Control: Standard samples (5% sucrose and 1% agar),
Fig. 8 shows changes in the components before and after fermentation of the Cascade hop.
FIG. 9 is an Actogram of Drosophila with addition of Swan grass extract (V: Valerian extract) (Control: Standard sample (5% sucrose and 1% agar), V: 2, 5, 10, 20 mg administered).
Figure 10 shows the locomotor difference of Drosophila as a result of the addition of Rhizosphere Grass Extract (Control: standard sample (5% sucrose and 1% agar), V: Rhizome grass extract with 1, 5, 10, 20 mg).
Figure 11 is an Actogram of Drosophila in the use of a mixture of Hop extract and Swallow grass extract (V: Valerian extract) (Control: Standard sample (5% sucrose and 1% agar), V: Administered with a standard sample, V + C: administration of a mixture of a crude extract (V) and a hop extract (C)
Figure 12 shows the difference in locomotor of the fruit flies when using a mixture of the pre-fermentation and post-fermentation extracts and the ginseng grass extract (Control: standard samples (5% sucrose and 1% agar), Valerian: Administration with a standard sample, administration of a mixture of VA + H: Rhizospheric extract (VA) and cascade hop extract (H)
Figures 13 to 15 show the effect of accelerating sleep in SD rats upon administration of a mixture of extracts of Zygomycetes vulgaris and Hop extract (Figure 13: 1 day of oral administration, Figure 14: 2 days of oral administration, Figure 15: 3 days of oral administration ).
Control: saline group,
VA + H: group administered with a mixture of a crude extract of a mouse (VA) and a Cascade hop extract (H)
VA + FH: a mixture of the extract of Valerium vulgare (VA) and the fermented Cascade hop extract (FH)
본 발명은 호프 추출물을 포함하는 수면 촉진용 식품 조성물에 대한 것이다.
The present invention relates to a food composition for promoting sleeping which comprises a hop extract.
또한 본 발명은 호프 추출물을 포함하는 수면장애 예방 및 개선용 식품 조성물에 대한 것이다.
The present invention also relates to a food composition for prevention and improvement of sleep disorders comprising a hop extract.
또한 본 발명은 호프 추출물을 포함하는 수면장애 예방 및 치료용 약학적 조성물에 대한 것이다.
The present invention also relates to a pharmaceutical composition for preventing and treating sleep disorder comprising a hop extract.
이하, 본 발명을 자세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
호프Hope
본 발명의 호프는 일반적으로 통용되는 호프이다. 본 발명에서는 호프의 품종을 단일 품종으로 사용하거나 또는 둘 이상의 품종을 혼합하여 사용할 수 있다. 본 발명의 호프는 카스케이드(Cascade), 할러타우(Hallertau) 및 사즈(Saaz)로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있으며, 바람직하게는 카스케이드이다.
The hopes of the present invention are commonly used hops. In the present invention, the variety of hops can be used as a single variety or a mixture of two or more varieties. The hop of the present invention may be at least one selected from the group consisting of Cascade, Hallertau and Saaz, and is preferably a cascade.
호프 추출물Hop extract
본 발명의 호프 추출물은 호프의 유기용매 추출물 또는 발효 호프의 유기용매 추출물일 수 있다.
The hop extract of the present invention may be an organic solvent extract of the hop or an organic solvent extract of the fermentation hop.
상기 유기용매는 물 또는 알코올일 수 있으며, 바람직하게는 물 또는 탄소 수 5 이하의 저가 알코올이고, 더욱 바람직하게는 물, 메탄올 또는 에탄올이고, 가장 바람직하게는 에탄올이다.
The organic solvent may be water or alcohol, preferably water or a lower alcohol having 5 or less carbon atoms, more preferably water, methanol or ethanol, and most preferably ethanol.
상기 발효 호프는 호프에 유산균을 접종하여 발효시켜 제조할 수 있다. 상기 유산균은 락토바실러스(Lactobacillus), 락토코커스(Lactococcus), 류코노스톡(Leuconostoc), 페디오코커스(Pediococcus), 비피도박테리움(Bifidobacterium) 등이 될 수 있으며, 바람직하게는 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis)이나, 이에 제한되는 것은 아니다.
The fermentation hopper may be manufactured by inoculating lactobacillus to the hopper and fermenting the same. The lactic acid bacteria may be Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Bifidobacterium and the like, preferably Lactobacillus brevis brevis), but are not limited thereto.
예컨대, 상기 호프의 유기용매 추출물은 호프를 유기용매로 추출하여 제조할 수 있다. 또한 상기 발효 호프의 유기용매 추출물은, 예컨대, 호프를 유산균으로 발효시킨 후, 상기 유산균으로 발효된 호프를 유기용매로 추출하여 제조할 수 있다.
For example, the organic solvent extract of the hop may be prepared by extracting the hop with an organic solvent. The organic solvent extract of the fermentation hopper can be produced, for example, by fermenting the hop with lactic acid bacteria and then extracting the hopper fermented with the lactic acid bacteria with an organic solvent.
쥐오줌풀 추출물Swallow grass extract
본 발명의 식품 조성물 및 약학적 조성물은 호프 추출물 외 쥐오줌풀 추출물을 추가로 포함할 수 있다. 상기 쥐오줌풀은 쥐오줌풀의 뿌리 또는 근경을 이용할 수 있으며, 바람직하게는 쥐오줌풀의 뿌리를 이용한다.
The food composition and the pharmaceutical composition of the present invention may further comprise a jujuba grass extract other than the hop extract. The pupa may utilize the roots or rhizomes of the pupa, preferably the roots of the pupa.
상기 쥐오줌풀 추출물은 쥐오줌풀의 유기용매 추출물이다. 상기 유기용매는 물 또는 알코올일 수 있으며, 바람직하게는 물 또는 탄소 수 5 이하의 저가 알코올이고, 더욱 바람직하게는 물, 메탄올 또는 에탄올이고, 가장 바람직하게는 물이다.
The jujuba grass extract is an organic solvent extract of Pyralidae. The organic solvent may be water or alcohol, preferably water or a lower alcohol having 5 or less carbon atoms, more preferably water, methanol or ethanol, and most preferably water.
수면 촉진용 조성물Composition for accelerating sleep
본 발명은 호프 추출물을 포함하는 수면 촉진용 조성물에 대한 것이다. 상기 수면 촉진용 조성물은 잠드는데 걸리는 시간의 단축능(즉, 수면 유도능, sleep latency), 수면 시간의 증진능 또는 숙면 시간의 증진능 등을 갖는다.
The present invention relates to a composition for accelerating sleep surface comprising a hop extract. The composition for promoting sleep has the ability to shorten the sleeping time (i.e., sleep inducing ability, sleep latency), ability to enhance sleeping time, or ability to improve sleeping time.
수면장애 예방, 개선 또는 치료용 조성물Composition for preventing, ameliorating or treating sleep disorders
본 발명은 호프 추출물을 포함하는 수면장애 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 대한 것이다. 상기 수면장애는 충분한 수면 또는 숙면을 취하지 못하여 만성피로를 느끼거나 낮에 졸리거나 두통을 느끼는 등 일상 생활에 지장이 되는 것을 의미한다. 본 발명의 수면장애는 불면증 등이 될 수 있으며, 또한 잠이 쉽게 들지 못하거나 잠이 들더라도 얕게 잠이 들고 숙면을 취하지 못하는 경우 등을 가리킨다.
The present invention relates to a composition for preventing, ameliorating or treating sleep disorder comprising a hop extract. The above-mentioned sleeping disorder means that the user is suffering from chronic fatigue due to insufficient sleeping or sleeping, or sleeping in the daytime or feeling a headache. The sleeping disorder of the present invention may be insomnia, etc., and also refers to cases where sleeping is not easy or when sleeping, sleeping shallow and unable to take a good night's sleep.
식품 조성물Food composition
본 발명은 호프 추출물 또는 호프 추출물/쥐오줌풀 추출물을 포함하는 수면 촉진용 식품 조성물에 대한 것이다. 또한 본 발명은 호프 추출물 또는 호프 추출물/쥐오줌풀 추출물을 포함하는 수면장애 예방 및 개선용 식품 조성물에 대한 것이다.
The present invention relates to a food composition for accelerating sleep that comprises a hop extract or a hop extract / pine nuts grass extract. The present invention also relates to a food composition for prevention and improvement of sleep disorders, which comprises a hop extract or a hop extract / ginseng grass extract.
상기 식품 조성물은 일반 식품, 건강보조식품, 건강기능식품, 기능성 식품, 운동 보조제 등이나 이에 제한되는 것은 아니며, 천연식품, 가공식품, 일반적인 식자재 등에 본 발명의 호프 추출물 또는 호프 추출물/쥐오줌풀 추출물을 첨가한 것도 포함된다. 바람직하게는 본 발명의 식품 조성물은 수면 유도 식품, 숙면 유도 식품, 수면 촉진 식품 등이 될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 건강기능식품, 기능성 식품 등이다.
The food composition is not limited to a general food, a health supplement, a health functional food, a functional food, an exercise aide, and the like. The hop extract of the present invention or the hop extract / And the like. Preferably, the food composition of the present invention may be a water-surface-inducing food, a sleep-inducing food, a sleep-promoting food, and the like, more preferably a health functional food, a functional food,
본 발명의 호프 추출물 또는 호프 추출물/쥐오줌풀 추출물을 포함하는 식품 조성물은, 상기 호프 추출물 또는 호프 추출물/쥐오줌풀 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 조성물과 함께 사용될 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방 또는 건강 유지 목적)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 호프 추출물 또는 호프 추출물/쥐오줌풀 추출물을 식품 또는 음료의 제조시에 원료에 대하여 0.01 내지 70.00 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 30.00 중량%의 양으로 첨가할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10.00 중량%의 양으로 첨가할 수 있다.
The food composition comprising the hop extract of the present invention or the hop extract / paddy grass extract may be used as it is or may be used in combination with other food or food compositions, Lt; / RTI > The amount of the active ingredient to be mixed can be suitably determined according to its use purpose (prevention or health maintenance purpose). In general, the hop extract or hop extract / pine nut extract of the present invention may be added in an amount of 0.01 to 70.00% by weight, preferably 0.01 to 30.00% by weight, based on the raw material, By weight may be added in an amount of 0.01 to 10.00% by weight.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 호프 추출물 또는 호프 추출물/쥐오줌풀 추출물을 포함하는 식품 조성물은 정제, 경질 또는 연질 캅셀제, 액제, 현탁제 등과 같은 경구투여용 제제의 형태로 이용될 수 있으며, 이들 제제는 허용 가능한 통상의 담체, 예를 들어 경구투여용 제제의 경우에는 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 가용화제, 현탁화제, 보존제 또는 증량제 등을 사용하여 조제할 수 있다.There is no particular limitation on the kind of the food. The food composition comprising the hop extract or the hop extract / pine nut extract may be used in the form of tablets, hard or soft capsules, solutions, suspensions, and the like, which may contain an acceptable conventional carrier, For example, in the case of a preparation for oral administration, it can be prepared using excipients, binders, disintegrants, lubricants, solubilizers, suspending agents, preservatives or extenders.
상기 호프 추출물 또는 호프 추출물/쥐오줌풀 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료, 파우더 제제 및 비타민 복합제 등을 들 수 있으나 이들 종류의 식품으로 제한되는 것은 아니다.
Examples of the food to which the hop extract or the hop extract / pine nut extract can be added include dairy products including meat, sausage, bread, chocolate, candy, snack, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, ice cream, Soups, drinks, tea, drinks, alcoholic beverages, powder formulations and vitamin complexes, but are not limited to these types of foods.
약학적 조성물Pharmaceutical composition
본 발명은 호프 추출물 또는 호프 추출물/쥐오줌풀 추출물을 포함하는 수면장애 예방 및 치료용 약학적 조성물에 대한 것이다. 상기 약학적 조성물은 수면장애로 고통받는 환자에게 처방할 수 있다.
The present invention relates to a pharmaceutical composition for prevention and treatment of sleep disorders, which comprises a hop extract or a hop extract / ginseng grass extract. The pharmaceutical composition can be prescribed to a patient suffering from a sleep disorder.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 바람직한 약제학적 제제는 정제, 경질 또는 연질 캅셀제, 액제, 현탁제 등과 같은 경구투여용 제제가 있으며 이들 약제학적 제제는 약제학적으로 허용 가능한 통상의 담체, 예를 들어 경구투여용 제제의 경우에는 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 가용화제, 현탁화제, 보존제 또는 증량제 등을 사용하여 조제할 수 있다.
The pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally and can be used in the form of a general pharmaceutical preparation. The preferred pharmaceutical preparations are those for oral administration such as tablets, hard or soft capsules, liquids, suspensions, etc. These pharmaceutical preparations can be prepared into conventional pharmaceutically acceptable carriers, for example, excipients such as excipients, Binders, disintegrators, lubricants, solubilizers, suspending agents, preservatives or extenders.
본 발명의 약학적 조성물의 투여 용량은, 환자의 상태, 연령, 성별 및 합병증 등의 다양한 요인에 따라 전문가에 의해 결정될 수 있지만 일반적으로는 성인 1 kg 당 0.1 mg 내지 10 g, 바람직하게는 10 mg 내지 1 g의 용량으로 투여될 수 있다. 또, 단위 제형당 상기 약학적 조성물의 1일 용량 또는 이의 1/2, 1/3 또는 1/4의 용량이 함유되도록 하며, 하루 1 내지 6 회 투여될 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
The dosage of the pharmaceutical composition of the present invention may be determined by a specialist depending on various factors such as the patient's condition, age, sex, and complications, but is generally from 0.1 mg to 10 g, preferably 10 mg ≪ / RTI > to 1 g. Also, the daily dosage of the pharmaceutical composition per unit dosage form, or a half, 1/3 or 1/4 dose thereof, may be contained, and may be administered 1 to 6 times per day. However, in the case of long-term intake for the purpose of health and hygiene or for the purpose of controlling health, the amount may be less than the above range, and the active ingredient may be used in an amount of more than the above range since there is no problem in terms of safety.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나, 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS The advantages and features of the present invention and the manner of achieving them will become apparent with reference to the embodiments described in detail below with reference to the accompanying drawings. It should be understood, however, that the invention is not limited to the disclosed embodiments, but is capable of many different forms and should not be construed as limited to the embodiments set forth herein. Rather, these embodiments are provided so that this disclosure will be thorough and complete, To fully disclose the scope of the invention to those skilled in the art, and the invention is only defined by the scope of the claims.
<재료 및 방법>≪ Materials and methods >
재료material
호프는 Cascade, Hallertau 및 Saaz의 3가지 품종을 사용하였으며, 쥐오줌풀은 아마존(Amazone.com)에서 구입하여 사용하였다. 그 외 분석용 시약은 일급 이상의 시약을 시중에서 구매하여 사용하였다.
Hope uses three varieties of Cascade, Hallertau and Saaz, and the goby paste is purchased from Amazon (Amazone.com). Other analytical reagents were purchased from the market and used more than the first reagent.
호프 추출물의 제조Manufacture of Hope Extracts
호프 추출물은 세계 각지에서 재배되는 대표적인 품종인 Cascade, Hallertau 및 Saaz를 이용하여 70% 에탄올로 환류추출하였다. 구체적으로는 호프 50 g에 70% 에탄올을 500 mL 가한 후 90 ℃에서 4시간 환류추출하고, 상기 환류 추출액을 원심분리(2,800 g, 20 min)한 후 농축기를 이용하여 용매를 모두 휘발시켰다. 그 후 동결건조를 통해 호프 추출물을 획득하여 실험에 사용하였다.
Hope extracts were refluxed with 70% ethanol using Cascade, Hallertau and Saaz, representative cultivars cultivated all over the world. Specifically, 500 g of 70% ethanol was added to 50 g of the hopper, followed by reflux extraction at 90 ° C. for 4 hours. The reflux extract was centrifuged (2,800 g, 20 min) and the solvent was evaporated using a concentrator. After that, the hop extract was obtained through freeze drying and used in the experiment.
호프 추출물의 성분 분석Analysis of components of hop extract
호프 추출물의 총 당 함량은 페놀-황산법을 이용하여 측정하였으며, 시료를 5% 페놀 용액과 진한 황산으로 반응시킨 후 UV spectrophotometer(TECAN Infinite M200 systems INC., Seestrasse 103 CH-8708 Mannedorf Switzerland)를 이용하여 파장 490 nm에서 흡광도를 측정하여 포도당(glucose)을 표준 시약으로 작성한 표준곡선으로부터 총당의 함량을 계산하였다.
The total sugar content of the hop extract was measured by phenol-sulfuric acid method. The sample was reacted with 5% phenol solution and concentrated sulfuric acid and then analyzed by UV spectrophotometer (TECAN Infinite M200 systems INC., Seestrasse 103 CH-8708 Mannedorf Switzerland) Absorbance was measured at a wavelength of 490 nm and the content of total sugar was calculated from a standard curve formed of glucose as a standard reagent.
플라보노이드 함량의 측정은 DMACA (p-dimethylaminocinnamaldehyde)를 이용하여 측정하였다. 이는 0.1% DMACA를 1 N HCl이 들어있는 메탄올에 희석하여 DMACA 용액을 제조한 후 호프 추출물과 표준 시약 catechin을 각각 섞어 실온에서 10분간 방치한 후 640 nm에서 표준곡선 및 함량을 측정하였다.
The content of flavonoid was measured by DMACA (p-dimethylaminocinnamaldehyde). The DMACA solution was prepared by diluting 0.1% DMACA in methanol containing 1 N HCl. The DMACA solution was prepared by mixing the hop extract and the standard reagent catechin at room temperature for 10 minutes. The standard curve and the content were measured at 640 nm.
총 페놀 함량의 측정은 Folin-Denis법을 변형하여 실험하였다. 96 well plate에 시료와 Folin-Ciocalteu’s phenol 시약을 넣고 혼합하였으며, 실온에서 3분 동안 반응시킨 후 포화 sodium carbonate 용액을 넣고 20분 동안 반응시킨 뒤, 반응용액을 750 nm에서 흡광도를 측정하였다. 호프 추출물의 페놀 함량은 gallic acid을 표준 시약으로 작성한 표준곡선으로부터 계산하였다.
The total phenol content was measured by modifying the Folin-Denis method. The sample was mixed with Folin-Ciocalteu's phenol reagent in a 96-well plate, and the mixture was reacted at room temperature for 3 minutes, then saturated sodium carbonate solution was added for 20 minutes, and the absorbance of the reaction solution was measured at 750 nm. The phenol content of the hop extract was calculated from the standard curve of gallic acid prepared with standard reagents.
호프 Hope 발효물의Fermented 제조 Produce
유산균으로 락토바실러스 브레비스 M-2(Lactobacillus brevis M-2)를 이용하고, 또한 Cascade 호프를 이용하여 호프 발효물을 제조하였다. 락토바실러스 브레비스 M-2는 MRS broth에 2% 접종하여 37℃ 배양기에 18시간 배양하여 준비하였다. 호프 발효물을 제조하기 위하여 Cascade 호프를 100 g씩 배양용기에 분취하였다. 이후 121℃에서 15분간 가압 멸균하고 실온으로 냉각시킨 다음 L. brevis 배양액을 5% (v/w)로 접종 한 후 37℃에서 5일간 발효하였다. 발효가 완료된 후 70% 에탄올을 5 배(부피 기준) 양으로 가하여 환류 추출 후 농축하였다. 농축한 호프 추출물은 동결 건조한 후 분쇄하여 냉동보관 하면서 실험에 필요한 시료로 사용하였다.
Lactobacillus brevis M-2 was used as a lactic acid bacterium, and a fermentation product was prepared using a Cascade hop. Lactobacillus brevis M-2 was prepared by inoculating 2% in MRS broth and incubating in a 37 ° C incubator for 18 hours. To prepare the fermentation product of Hope, 100 g of Cascade Hope was collected into a culture container. Thereafter, the cells were autoclaved at 121 ° C for 15 minutes, cooled to room temperature, inoculated with 5% (v / w) L. brevis culture, and then fermented at 37 ° C for 5 days. After completion of the fermentation, 70% ethanol was added in an amount of 5 times (by volume), refluxed and concentrated. The concentrated HOPE extract was lyophilized, pulverized and used as a sample required for the experiment.
초파리 배양Drosophila culture
하기 실험을 위하여 Bloomington Drosophila Stock Center(BDSC) 에서 제공받은 wild type의 Canton S 라인을 사용하였다. 어린 수컷 성체의 초파리를 24℃ 온도에서 12시간 간격(12:12LD) 으로 낮과 밤 상태를 조절한 환경에서 초파리 먹이(8% yeast, 10% sucrose, 5% corn meal and 1% agar)를 공급하여 2~5일간 체내의 일주기 리듬이 안정화시킨 후 실험을 진행하였다.
For the following experiment, the wild type Canton S line provided by Bloomington Drosophila Stock Center (BDSC) was used. Drosophila (8% yeast, 10% sucrose, 5% corn meal and 1% agar) was fed to the juvenile male adult flies in an environment controlled at 24 ° C for 12 hours (12: 12LD) After the stabilization of circadian rhythm in the body for 2 ~ 5 days, the experiment was carried out.
초파리 운동능력 측정기(Drosophila Activity Monitor & Locomotor Activity Monitor)Drosophila Activity Monitor & Locomotor Activity Monitor
초파리의 운동 능력(Locomotor ability)을 측정하기 위하여 Drosophila Activity Monitor 2 및 Locomotor Activity Monitor(TriKinetics) 하드웨어와 DAMSystem(TriKinetics) 소프트웨어를 이용하여 각 그룹별 초파리의 운동 능력을 기록하였다. 대조군 초파리 시료는 증류수에 5% sucrose와 1% agar를 넣어 사용하는 sucrose-agar media를 표준시료로 이용하고, 실험군 초파리 시료는 표준시료에 호프 추출물 2, 5 그리고 10 mg/mL을 넣어 제조 후 사용하였다. Drosophila Activity Monitor(DAM) 와 Locomotor Activity Monitor(LAM) 의 원리는 다음과 같다. DAM system에서는 총 32개의 독립된 튜브에 한 마리씩 투입된 초파리가 튜브의 앞쪽과 뒤쪽으로 몇 차례 움직였는지 가운데 설치된 센서가 감지하여 기록하게 된다. 초파리의 수면유도를 관찰하기 위해 튜브 한쪽에 대조군 초파리 시료 및 실험군 초파리 시료를 제공하여, 24℃ 배양기에서 24시간 동안 추적측정을 수행하였다. 불빛 조절은 24시간 모두 밤 환경으로 설정하여 제공한 시료에 의한 체내의 일주기리듬 및 행동의 변화를 관찰하였다.
To measure locomotor ability, Drosophila Activity Monitor 2 and Locomotor Activity Monitor (TriKinetics) hardware and DAMSystem (TriKinetics) software were used to record the exercise capacity of Drosophila in each group. As a control, Drosophila samples were prepared by adding sucrose-agar media containing 5% sucrose and 1% agar to distilled water. Drosophila samples were prepared by adding
SDSD 래트Rat 모델에서의 수면 구조 분석 Analysis of sleep structure in model
6주령의 SD 래트(200-250 g, 웅성)를 1 주일간 사육케이지 (20×26×13 cm)에 온도 22-24℃, 습도 60±5%가 유지되며 밤낮 주기(12:12LD) 가 자동 조절되는 실험실에서 순화 및 적응을 거친 후 뇌파(Electroencephalogram, EEG) 측정을 위해 전극 삽입 수술을 실시하였다. 실험동물 SD rat을 isoflurane (Troikaa Pharmaceuticals Ltd, Gujarat, India)로 호흡 마취시키고, 정위고정기(stereotaxic instrument)에 두부를 고정시켰다(도 1). 두부 피하 결합조직을 절개한 후 노출된 두개골의 bregma 봉합을 확인한 후 뇌정위적 지표로써 이용하였으며, 표면전극의 말단을 뇌 피질 표면에 위치하도록 미세 천공기를 사용하였다. 천공 부위에서의 출혈이 멈춘 후 전극을 삽입하였으며 치과용 시멘트(dental cement)로 고정시킨 후 피부를 봉합하였다(도 2). 수술부위의 소독 및 항생제 투여를 3일 동안 실시하여 수술로 인한 염증을 예방하였으며, 일주일간 회복기간으로 두며 행동, 몸무게, 식이상태를 확인하였다.
Day and night cycles (12: 12LD) were automatically maintained in a cage (20 × 26 × 13 cm) for 6 weeks at a temperature of 22-24 ° C and a humidity of 60 ± 5% Electroencephalogram (EEG) measurements were performed after conditioning and adaptation in a controlled laboratory. Experimental animals SD rats were anesthetized with isoflurane (Troikaa Pharmaceuticals Ltd, Gujarat, India) and fixed on a stereotaxic instrument (Fig. 1). After bifurcation of the subcutaneous connective tissues, bregma suture of the exposed skull was confirmed and used as a parenchyma indicator. Microholes were used to position the distal end of the surface electrode on the surface of the cerebral cortex. After bleeding from the puncture site, the electrode was inserted, fixed with dental cement, and the skin was closed (FIG. 2). Surgical site disinfection and antibiotic treatment were performed for 3 days to prevent inflammation caused by surgery, and the behavior, weight, and dietary status were checked for one week of recovery period.
SD 래트들을 측정환경에 적응시키기 위하여 측정 4일 전부터 대조군에 사용하는 0.5% Saline용액을 경구투여한 후 레코딩 장치(transmitter)를 연결하여 본 실험과정에 순응하도록 유도하였으며, 기준기록(baseline recording)과 대조기록(control recording)을 먼저 실시한 후 수면촉진 관련 기능성을 측정을 위한 실험기록(experimental recording)을 실시하였다. 호프 추출물 및 쥐오줌풀 추출물을 경구투여 후 5분간 안정화 시킨 다음 iox2(emka Technologies, Paris, France)를 이용하여 10:00부터 18:00까지 8시간동안 뇌전도(Electroencephalogram, EEG)를 측정하였다(도 3). EEG 샘플링 레이트(Sampling Rate)는 500 Hz로 설정하고 15 mm/sec으로 EEG는 0.1-25 Hz의 필터 영역을 설정하여 데이터를 기록하였다. 수면구조 분석은 FFT(fast Fourier transform) 알고리즘에 의해 수행 하였으며, ecgAUTO3 프로그램(Ver. 3.3, emka Technologies, Paris, France)을 이용하였다(도 4). 분석결과는 각성(Awake), 렘수면(REM sleep, rapid eye movement, theta band: 6-15 Hz), 논렘수면(NREM sleep, non-rapid eye movement, delta band: 0.5-3 Hz)으로 구분하여 나타내었다. 또한 두개골의 connector와 결합되어 있는 transmitter의 움직임을 측정하여 뇌전도와 비교하여 분석하였다.
In order to adapt SD rats to the measurement environment, 0.5% saline solution used for the control group was orally administered 4 days before the measurement, and then a recording device was connected to induce compliance with this experiment procedure. Baseline recording Control recording was performed first, and then experimental recording was conducted to measure sleep related functioning. The extracts of the hops and the geranium grass were stabilized for 5 minutes after oral administration, and the electroencephalogram (EEG) was measured for 8 hours from 10:00 to 18:00 using iox2 (emka Technologies, Paris, France) ). The EEG sampling rate was set to 500 Hz and the EEG was set to a filter range of 0.1 to 25 Hz at 15 mm / sec to record the data. The sleep structure analysis was performed by the FFT (fast Fourier transform) algorithm and the ecgAUTO3 program (Ver. 3.3, emka Technologies, Paris, France) was used (Fig. The results were classified into Awake, REM sleep, rapid eye movement, theta band (6-15 Hz), NREM sleep (non-rapid eye movement, delta band: 0.5-3 Hz) . In addition, the movement of the transmitter coupled with the connector of the skull was measured and compared with the electroencephalogram.
통계 처리Statistical processing
실험에서 얻은 결과는 통계프로그램인 SPSS (SPSS Inc., Chicago, USA)를 사용하여, 3회 반복 분석한 평균값과 표준오차(Mean ± Standard error)를 계산하였다. 호프 추출물의 일반분석 측정값들의 차이는 p <0.05 수준에서 one-way ANOVA와 Turkey range test를 이용하여 유의성을 검증하였으며, 초파리 행동 분석과 뇌전도 분석은 실험군과 대조군의 평균값에 대한 p-value를 t-test로 구하여 유의성을 검증하였다.
The results obtained from the experiments were analyzed using the statistical program SPSS (SPSS Inc., Chicago, USA). The mean and standard error of three repeated analyzes were calculated. The differences in the general analytical values of the hop extracts were verified by using one-way ANOVA and the Turkey range test at p <0.05 level. Drosophila behavioral analysis and electroencephalographic analysis were performed to determine the p-value for the mean value of the experimental group and the control group as t -test and the significance was verified.
<실험 결과><Experimental Results>
<실험예 1> 호프 추출물의 일반분석<Experimental Example 1> General analysis of the hop extract
호프 추출물의 일반 성분(즉, 총 당 함량, 플라보노이드, 폴리페놀 함량)의 함량을 측정하였다.The contents of the general components of the hop extract (i.e., total sugar content, flavonoid, polyphenol content) were measured.
그 결과는 도 5와 같다. 구체적으로는 Cascade 호프 추출물의 총당은 163.66±10.96 μg/mL로 가장 낮은 함량을 보였으며, Hallertau 호프 추출물 및 Sazz 호프 추출물은 각각 297.25±2.64 μg/mL과 310.59±14.80 μg/mL로 높은 함량을 보였다. The results are shown in Fig. Specifically, the total content of Cascade hop extract was 163.66 ± 10.96 μg / mL, and the content of Hallertau hop extract and Sazz hop extract was 297.25 ± 2.64 μg / mL and 310.59 ± 14.80 μg / mL, respectively .
총 플라보노이드 함량은 역시 Sazz 호프 추출물이 16.26±0.19 μg/mL 로 가장 높은 함량이 존재하였으며, 다음으로 Hallertau 호프 추출물(11.59 ± 0.08 μg/mL), Cascade 호프 추출물(3.68±0.08 μg/mL) 순으로 낮은 함량을 보였다. The total flavonoid content was also highest in Sazz hop extract (16.26 ± 0.19 μg / mL), followed by Hallertau Hof extract (11.59 ± 0.08 μg / mL) and Cascade hop extract (3.68 ± 0.08 μg / mL) Respectively.
총 폴리페놀 함량 역시 Sazz 호프 추출물(144.27±0.52 μg/mL)이 가장 높은 함량으로 존재하였으며, 다음으로 Hallertau 호프 추출물(104.21±0.49 μg/mL), Cascade 호프 추출물(75.58 ± 0.05 μg/mL)로 유의적으로 적은 함량이 존재하였다.
The total polyphenol content was also highest in Sazz hop extract (144.27 ± 0.52 μg / mL), followed by Hallertau Hof extract (104.21 ± 0.49 μg / mL) and Cascade hop extract (75.58 ± 0.05 μg / mL) There was a significantly lower content.
그러므로 Saaz 호프 추출물의 총 당 함량, 총 플라보노이드 및 총 폴리페놀 함량이 가장 높았다.
Therefore, total sugar content, total flavonoid and total polyphenol contents of SaaShop extract were the highest.
<실험예 2> 호프 추출물의 수면활성 평가Experimental Example 2 Evaluation of Sleep Activity of Hop Extract
초파리 수면행동의 변화 측정Measurement of change in Drosophila sleep behavior
호프의 품종에 따라 각각의 호프 추출물들을 2, 5, 10 mg/mL로 수크로스 agar(한천) 배지에 첨가하여 초파리의 수면행동의 변화를 분석하였다. 상기 초파리의 수면행동의 변화 분석에는 Actogram J 프로그램을 이용하였다. 대조군과 호프 추출물 실험군의 Actogram은 22:00시부터 시작하여 24시간 측정한 초파리의 행동의 변화를 나타내며, 5일간 측정한 수면행동의 변화를 모두 나타내었다. 초파리는 22:00부터 10:00까지 수면을 취하며 움직임이 적어지는 것을 확인할 수 있으며, 대조군 초파리의 행동의 변화를 통하여 일주기 리듬이 형성되어 있음을 확인하였다(도 6). 모든 호프 품종에서 공통적으로, 호프 추출물 2 mg/mL을 섭취한 초파리 실험군에서는 대조군보다 밤과 낮의 행동의 변화가 높아진 것으로 확인되었으며, Saaz 호프 추출물을 섭취한 초파리 실험군에서는 농도와 관계없이 5일 동안 가장 많은 행동의 변화를 나타내었다(도 6). 밤시간의 초파리 행동의 합은 22:00부터 10:00로 설정하였으며, 낮시간의 초파리의 행동은 합은 10:00부터 22:00로 설정하여 그래프로 나타내었다. 호프 Cascade 추출물 10 mg/mL을 섭취한 초파리 실험군에서 밤시간의 초파리 행동의 변화가 유의적으로 적게 나타나는 것을 확인하였으며, 즉, 호프 Cascade 추출물의 10 mg/mL에서 수면유도 활성을 확인할 수 있었다(도 7).
Each hop extract was added to sucrose agar (agar) medium at 2, 5, and 10 mg / mL according to the variety of hops to analyze changes in sleep behavior of Drosophila. Actogram J program was used to analyze changes in sleep behavior of the fruit flies. Actograms of the control group and the hop extract group showed changes in the behavior of the fruit flies measured from 24:00 to 22:00, and all the changes in the sleep behavior measured for 5 days were shown. Drosophila showed sleeping from 22:00 to 10:00 with less movement, and it was confirmed that diurnal rhythm was formed through the change of behavior of control flies (Fig. 6). In all of the hop varieties, the behavioral changes at night and day were higher in the Drosophila experimental group receiving 2 mg / mL of the Hope extract than in the control group, and in the Drosophila experimental group consuming the Saaz Hop extract, Showing the greatest change in behavior (Fig. 6). The sum of the Drosophila behaviors at night time was set from 22:00 to 10:00, and the behavior of the Drosophila during the day was graphically set from 10:00 to 22:00. In the Drosophila experimental group receiving the Hope Cascade extract at 10 mg / mL, it was confirmed that the change of the Drosophila behavior at night was significantly less, that is, the 10 mg / mL of the Hope Cascade extract was able to confirm the sleep inducing activity 7).
낮시간에서는 Hallertau 호프 추출물 5 mg/mL에서 유의적으로 행동의 변화가 적게 나타내었지만, 수면유도 물질 섭취에 따른 행동의 감소는 밤시간에 존재해야 하며 밤시간의 행동의 감소가 유의적으로 차이가 없으므로 수면유도 물질이라는 함유되어 있다고 판단하기 어려웠다. 이를 통하여 호프의 여러 품종들 중 Cascade 호프 추출물에 수면유도 물질이 함유되어 있을 것으로 확인되었으며, 그 함량은 10 mg/mL 이상이 필요하다는 사실을 확인하였다.
At daytime, Hallertau Hof extract showed a significantly lower behavioral change at 5 mg / mL. However, the decrease in behavior with sleep inducer intake should be present at night and the decrease in nighttime behavior was significantly different It is difficult to judge that it is contained as a water-inducing substance. The results showed that the extract of Cascade hop contains several kinds of water inducing substances, and the content of Cascade hop extract needs more than 10 mg / mL.
<실험예 3> Cascade 호프의 발효물의 성분 분석<Experimental Example 3> Analysis of components of fermented product of Cascade hop
상기 실험예 2에서 초파리 locomotor test를 통해 수면 촉진 활성이 있는 것으로 확인된 Cascade 호프의 유산균 발효 전과 후의 성분 변화를 측정하였다.
In Experimental Example 2, changes in components before and after fermentation of lactic acid bacteria in Cascade hops which were confirmed to have sleep-promoting activity through the fruit fly locomotor test were measured.
그 결과, 총당의 경우 발효 전 163.2 μg/mL의 함량을 보인 반면 발효 후 104.3 μg/mL으로 감소하였으며, 활성성분으로 알려진 플라보노이드들과 폴리페놀들의 함량은 발효 전 각각16.26 과 144.27 μg/mL이었으나 발효 후 21.3과 179.3 μg/mL으로 증가하였다(도 8).
As a result, total sugar content was 163.2 μg / mL before fermentation, but decreased to 104.3 μg / mL after fermentation. The content of flavonoids and polyphenols, known as active ingredients, was 16.26 and 144.27 μg / mL before fermentation, And 21.3 and 179.3 μg / mL, respectively (FIG. 8).
그러므로 발효를 통해 활성 성분으로 추정되는 성분들이 증가하는 것으로 확인되었다.
Therefore, it was confirmed that the components estimated to be active ingredients increased by fermentation.
<실험예 4> 쥐오줌풀의 수면 촉진 활성 평가≪ Experimental Example 4 > Evaluation of sleep-promoting activity of Swallow Pool
쥐오줌풀(Valerian)의 뿌리를 10배 중량의 열수로 추출하여, 쥐오줌풀 열수 추출물(이하, 쥐오줌풀 추출물이라 한다)을 수득하였다. 그리고 상기 쥐오줌풀 추출물 2, 5, 10, 20 mg/mL을 수크로스 아가 배지에 첨가여 초파리의 수면행동의 변화를 분석하다. 이 때 상기 분석에는 ActogramJ 프로그램을 이용하였다.
The roots of Valerian were extracted with ten times the weight of hot water to obtain a hydrothermal extract of Valerian (hereinafter referred to as Valerian Extract). Then, the watery behavior of Drosophila is analyzed by adding
그 결과는 도 9와 같다. 대조군과 쥐오줌풀 추출물 실험군의 Actogram은 22:00부터 시작하여 24시간 측정한 초파리의 행동의 변화를 나타내며, 5일간 측정한 수면행동의 변화를 모두 나타내었다. 대조군 초파리의 행동의 변화를 통하여 일주기 리듬이 형성되어 있음을 확인하였지만, 쥐오줌풀 추출물을 이용한 실험군에서는 쥐오줌풀 추출물의 특유의 향과 맛에 의하여 초파리의 행동의 변화가 일주기리듬과는 다른 형태가 나타내었다. 하지만 쥐오줌풀 추출물의 함량이 높아질수록 밤과 낮 시간의 초파리의 행동이 적어짐이 확인되었으며, 이를 통하여 향과 맛에 따라 거부 반응이 존재함에도 불구하고 함량이 높아 섭취되는 양이 많아질수록 수면시간의 연장 또는 진정효과를 나타내었다. 특히 가장 높은 농도인 20 mg/mL에서 밤과 낮 시간 모두 행동의 총합이 유의적으로 감소되었다(도 10).
The results are shown in Fig. Actograms of control group and jujuba grass extract group showed changes in behavior of fruit flies measured at 24 hours, starting at 22:00, and showed all the changes in sleep behavior measured for 5 days. In the experimental group, the behavior of the fruit flies was different from that of the circadian rhythms due to the unique flavor and taste of the extracts of the Rhesus vulgaris extracts. Respectively. However, it was found that the activity of fruit flies at night and day time was decreased as the content of Extract of Pyranthrene Extract was increased. As a result, it was found that although the amount of rejection was high depending on the flavor and taste, Extended or soothing effect. In particular, at the highest concentration of 20 mg / mL, the sum of the behaviors was significantly reduced both at night and at daytime (FIG. 10).
<실험예 5> 발효 호프 추출물 및 쥐오줌풀 혼합 사용에 따른 수면 촉진 활성 평가<Experimental Example 5> Assessment of sleep-promoting activity by use of fermented hop extract
상기 실험예 2 및 실험예 4에서 호프 및 쥐오줌풀 추출물에 대한 수면 효과를 확인하였다. 특히 호프 품종 중 Cascade 호프 추추물의 수면활성이 우수하였으므로, 이 후 실험에서는 수면활성 증진을 위해 Cascade 호프 유산균 발효물을 제조하여 이용하였으며, 발효 전후의 Cascade 호프 추출물과 쥐오줌풀 추출물을 혼합하여 수면 증진 활성을 평가하였다.
In Experimental Example 2 and Experimental Example 4, the sleep effect on the extracts of hops and pupae was confirmed. Especially, Cascade hop extracts of the hops were superior to those of the Cascade hop extracts. Therefore, in the experiment, Cascade hop lactobacillus fermentations were prepared and used for the improvement of sleep activity. Activity.
<5-1> 초파리 모델을 이용한 호프추출물/ 쥐오줌풀 추출물의 혼합 사용시 수면 증진능 평가<5-1> Estimation of Sleep Enhancement Ability when Mixed with Extract of Hope Extract / Extract of Extract from Grapevine using Drosophila Model
초파리 행동분석을 통하여 호프 추출물과 쥐오줌풀 추출물의 비율에 따른 행동의 변화를 분석, 측정하였다. 이 때, Cascade 호프 발효 전/후 추출물 6, 12, 18 mg/mL 및 쥐오줌풀 추출물 50 mg/mL을 수크로스 아가 배지에 첨가하여 초파리의 수면행동의 변화를 분석하였으며, 상기 분석에는 ActogramJ 프로그램을 이용하였다.
Behavioral changes were analyzed and measured according to the ratio of the hop extracts and the jujuba grass extracts. At this time, the changes of sleep behavior of Drosophila were analyzed by adding sucrose to the medium at 6, 12, 18 mg / mL and 50 mg / mL of extract before and after Cascade Hope fermentation. Respectively.
그 결과는 도 11과 같다. 대조군과 호프 Cascade 추출물 및 쥐오줌풀 추출물의 혼합물을 실험한 실험군의 Actogram은 22:00부터 시작하여 24시간 동안 측정한 초파리의 행동의 변화를 나타내며, 3일간 측정한 수면행동의 변화를 모두 나타내었다. 대조군 초파리의 행동의 변화를 통하여 일주기 리듬이 형성되어 있음을 확인하였지만, 호프 Cascade 추출물 및 쥐오줌풀 추출물 혼합물 실험군에서는 특유의 향과 맛에 의하여 첫째날 밤시간의 행동이 줄어들지 않았으며, 낮시간부터 행동이 유의적으로 감소하였다.The results are shown in Fig. Actograms of the experimental group that tested the mixture of the control and the Hope Cascade extract and Rhizome grass extract showed changes in the behavior of Drosophila measured for 24 hours starting at 22:00 and showed all the changes of the sleep behavior measured for 3 days. In the experimental group of Hope Cascade Extract and Rhizopus japonicus extract, the behavior of the first nighttime time did not decrease due to the unique flavor and taste, Respectively.
밤과 낮 시간의 행동 변화의 합을 기준으로 볼 때, 낮 시간대 호프 Cascade 추출물 18 mg/mL 과 쥐오줌풀 추출물 50 mg/mL의 혼합물을 제외한 모든 그룹에서 유의적(p<0.01)으로 행동 변화의 합이 감소하는 것이 확인되었다.(P <0.01) in all groups except for the mixture of 18 mg / mL of daytime Hope Cascade extract and 50 mg / mL of Pseudomonas aeruginosa extract on the basis of the sum of nighttime and daytime behavioral changes It was confirmed that the sum decreased.
밤시간의 행동 변화의 합에서는 유의적인 차이는 없었지만, 첫 째날을 제외하고는 대조군에 비교하여 행동의 변화가 감소하였으며 이를 통해 두 추출물의 혼합이 수면을 유도하는 것을 확인하였다. 또한 발효 전 호프 추출물에 비하여 발효 후의 호프 추출물의 수면 유도 효과가 큰 것을 확인하였다. 아울러, 발효 전과 발효 후의 호프 Cascade 추출물 12 mg/mL 과 쥐오줌풀 추출물 50 mg/mL의 혼합물에서 수면유도 효과가 가장 높은 것을 확인하였다. 특히 발효 후의 호프 추출물 첨가시 locomotor activity가 발효 전에 비해 유의적인 감소를 보였다. 그러므로, 발효 후의 호프 추출물과 쥐오줌풀 추출물을 혼합하여 사용할 때 수면 촉진 활성이 큰 것으로 확인하였다(도 12).
There was no significant difference in the sum of the behavioral changes at night, but the change of behavior was decreased compared to the control group except the first day, and it was confirmed that the mixture of the two extracts induced the sleeping. In addition, it was confirmed that the water - induced induction effect of the hop extract after fermentation was greater than that of the pre - fermented hops extract. In addition, it was confirmed that the mixture of 12 mg / mL of Hope Cascade extract and 50 mg / mL of Cryptomeria japonica extract before fermentation and after fermentation showed the highest sleep inducing effect. Especially, the addition of hops extract after fermentation showed significant decrease of locomotor activity compared to before fermentation. Therefore, it was confirmed that when the hop extract after fermentation was mixed with the extract of Rhizosphere vulgaris, the sleep-promoting activity was high (FIG. 12).
<5-2> SD rat 모델을 이용한 호프 추출물/쥐오줌풀 추출물의 혼합 사용시 수면 증진능 평가<5-2> Assessment of Sleep Enhancement Ability when Mixed with Extract of Hope Extract / Extra Extract Using SD rat Model
초파리 행동 분석을 통하여 확인된, 발효 전/후 Cascade 호프 추출물 12 mg/mL와 쥐오줌풀 추출물 50 mg/mL 혼합물의 수면유도 효과를 SD 래트를 이용하여 다시 한 번 분석하였다. 상기 분석은 SD 래트를 이용하여, 뇌파(Electroencephalogram, EEG) 측정을 실시함으로써 수행하였다. 대조군은 식염수를 경구 투여하였고 실험군은 발효 전/후 Cascade 호프 추출물 12 mg/mL과 쥐오줌풀 추출물 50 mg/mL의 혼합물을 경구 투여하여 10:00부터 18:00까지 총 8시간의 뇌파를 측정하였다. 실험동물 SD 래트는 대조군 및 실험군 각각 4마리를 사용하였으며, 3일 동안 경구투여를 하여 수면 시간의 증진과 수면의 질의 변화를 측정하였다.
The water - induced effects of the mixture of 12 mg / mL of Cascade hop extract and 50 mg / mL of P. japonicus extract before and after fermentation were analyzed once again using SD rats. The analysis was performed by performing Electroencephalogram (EEG) measurement using SD rats. The control group was orally administered saline. In the experimental group, a total of 8 hours of EEG was measured from 10:00 to 18:00 by oral administration of a mixture of
그 결과, Cascade 호프 추출물 12 mg/mL과 쥐오줌풀 추출물 50 mg/mL을 경구 투여한 1일과 2일 동안 실험군과 대조군에서의 총수면 시간과 각성 시간 모두 유의적인 차이가 없었으며, 수면의 질을 측정하는 NREM 수면과 REM 수면에서도 유의적인 차이가 없었다(도 13 및 도 14). As a result, there was no significant difference in the total sleep time and the awakening time in the experimental group and the control group during the 1 and 2 days of oral administration of the
그러나 둘째 날부터 수면의 질을 나타내는 NREM 수면이 증가하는 경향을 나타내었다. 특히 Cascade 발효 호프 추출물을 첨가한 경우 쥐오줌풀 추출물을 단독 투여한 경우보다 NREM 수면이 유의적으로 증가하였다(도 14). 또한 총 수면 시간도 증가는 경향을 보였으나 쥐오줌풀 추출물 첨가군과는 유의적인 차이는 없었다.However, from the second day, NREM sleep, which indicates the quality of sleep, tended to increase. In particular, the addition of the Cascade fermentation hop extract significantly increased NREM sleep (Fig. 14). Total sleep time also tended to increase, but there was no significant difference between the groups.
경구 투여한지 셋째 날에는 발효 전/후의 호프추출물 첨가에 따라 수면시간의 연장의 경향을 보였으며, 특히 발효 후 호프 추출물의 첨가 경우 쥐오줌풀 추출물을 단독 사용한 경우보다 총 수면 시간이 연장되었다. 그러나 발효 전 호프 추출물은 총 수면시간이 늘어나는 경향은 보였으나 쥐오줌풀 추출물을 단독 사용한 경우와 유의적인 차이가 없었다. 그러나 발효 전/후의 호프 추출물은 양자 모두 쥐오줌풀 추출물을 단독 사용 시보다 NREM시간이 유의적으로 증가하는 것을 나타났다(도 15).
On the third day of oral administration, the sleeping time was prolonged according to the addition of the hop extract before and after the fermentation. In particular, when the hop extract was added after fermentation, the total sleep time was prolonged when the extract was used alone. However, before fermentation, the total amount of sleeping time seemed to increase, but there was no significant difference between the extracts of Root Extracts alone. However, before and after the fermentation, the extracts of H. japonica showed significantly higher NREM times than those of the extracts alone (Fig. 15).
이상의 결과에 의하면 호프 12 mg/mL과 쥐오줌풀 추출물 50 mg/mL을 혼합하여 사용할 경우 2일 차부터 수면 시간이 증가하는 경향을 보였다. 또한 3일째 되는 날 발효 전과 발효 후의 호프 추출물을 투여 시 NREM이 증가함에 따라 숙면을 취할 수 있는 시간이 증감하였고, 이에 따라 수면의 질이 증가하는 효과를 기대할 수 있었다. 또한 발효 호프 추출물을 쥐오줌풀 추출물과 함께 사용시 수면시간의 증가와 더불어 NREM이 증가함에 따라 수면의 질도 증가하는 것을 알 수 있었다.
These results suggest that the use of 12 mg / mL of Hope and 50 mg / mL of Pseudomonas aeruginosa extract tends to increase the sleeping time from day 2. On the third day, the time to take a sleep increased as the NREM increased during the fermentation and after the fermentation, and thus the quality of sleep was increased. In addition, when the fermented hops extract was used together with the extract of Rhizopus spp., The sleep quality increased with the increase of NREM.
Claims (10)
A food composition for promoting sleep, comprising a hop extract.
상기 호프는 카스케이드, 할러타우 및 사즈로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 수면 촉진용 식품 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the hop is at least one selected from the group consisting of cascade, hallowth and sauce.
상기 호프 추출물은 호프 알코올 추출물인 것을 특징으로 하는 수면 촉진용 식품 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the hop extract is a hop alcohol extract.
상기 호프 추출물은 호프를 유산균으로 발효시킨 후, 상기 유산균으로 발효된 호프를 유기용매로 추출하여 제조하는 것을 특징으로 하는 수면 촉진용 식품 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the hop extract is prepared by fermenting a hop with a lactic acid bacterium and then extracting the hopper fermented with the lactic acid bacterium with an organic solvent.
쥐오줌풀 추출물을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 수면 촉진용 식품 조성물.
The method according to claim 1,
A food composition for accelerating sleep, characterized by further comprising a pine nut extract.
상기 쥐오줌풀은 쥐오줌풀의 뿌리 또는 근경인 것을 특징으로 하는 수면 촉진용 식품 조성물.
6. The method of claim 5,
Wherein the gill grass is root or rootstock of the gill grass.
상기 수면 촉진용 식품 조성물은 수면 시간 증진능 또는 숙면 시간 증진능을 갖는 것을 특징으로 하는, 수면 촉진용 식품 조성물.
The method according to claim 1,
The food composition for promoting sleep is characterized by having a sleeping time improving ability or a sleeping time improving ability.
A food composition for prevention and improvement of sleep disorders comprising a hop extract.
쥐오줌풀 추출물을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 수면장애 예방 및 치료용 약학적 조성물.
10. The method of claim 9,
A pharmaceutical composition for the prevention and treatment of sleep disorders, which further comprises a crude extract.
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