KR20160050342A - Composition comprising an extract of Phellinus linteus mushroom for preventing and treating dementia diseas - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 상황버섯의 추출물을 포함하는 치매 질환의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for the prophylaxis and treatment of dementia diseases comprising extracts of mushroom.
최근 노인성 치매를 비롯하여 치매질환으로 인한 사회문제가 크게 대두되고 있다. 알츠하이머형 치매증 및 뇌졸중 후나 혹은 뇌동맥경화에 의한 광범위한 뇌병변이 발생함으로써 유발되는 뇌혈관성 치매증이 치매질환의 약 90%를 차지하며, 이외 픽(Pick)병, 크루츠펠트-야곱(Creutzfeldt-jakob)병, 두부손상에 의한 치매, 파킨슨(Parkinson)병 등이 있다. Recently, social problems caused by dementia including senile dementia have been increasing. Alzheimer type dementia and cerebral vascular dementia caused by extensive cerebral lesions caused by stroke or cerebral artery sclerosis account for about 90% of dementia diseases. In addition, Pick disease, Creutzfeldt-Jacob disease, Disease, dementia caused by head injury, and Parkinson's disease.
치매질환은, 단기간 및 장기간 기억장해가 기본적이며 또한 중핵증상으로 관찰되며, 기억장해와 이것에 기인한 부위감각상실(disorientation) 및 이것에 대한 고도의 뇌기능 장해로 이루어지는 것으로 생각되어 진다. 치매 환자는, 주로 대뇌 피질 및 대뇌 변연계에서 다양한 신경전달물질계의 현저한 기능 저하 및 대뇌 에너지 물질 대사의 기능저하를 나타낸다. 특히 알츠하이머형 치매증(Alzheimer's Disease, 이하 'AD'로 약칭함)에 있어서는, 환자의 아세틸콜린(acetylcholine, 이하 'ACh'로 약칭함)계, 글루타민산(glutamic acid)계, 신경펩티드(neuropeptides)계 및 모노아민(monoamine)계에서의 신경전달의 기능저하가 나타나, 이들 신경전달계의 기능 장해가 AD의 주된 원인인 것으로 추정되고 있다(Coyle, J.T. et al., Science, 219, pp1184-1190 (1983); Gottfries, C.G et al., Psychopharmacology, 86, pp245-252 (1985)). 또한, -아밀로이드 펩티드(-amyloid peptide)에 의해 유발된 신경세포 독성작용의 관점으로부터, -아밀로이드 펩티드의 세포 밖으로의 노인 반점의 집적을 통한 해마 신경세포의 탈락에 의한 발증기전도 AD의 주요 원인 중 하나로 추정되고 있다(Selkoe D.J., Annu. Rev. Neurosci., 12, pp463-490 (1989)).It is believed that dementia is characterized by short-term and long-term memory impairment as well as core symptoms, memory impairment, disorientation due to this, and a high degree of brain dysfunction to this. Dementia patients exhibit marked deterioration of various neurotransmitter systems and deterioration of cerebral energy metabolism, mainly in cerebral cortex and cerebral limbic system. In particular, in the case of Alzheimer's Disease (abbreviated as AD), acetylcholine (hereinafter abbreviated as ACh), glutamic acid, neuropeptides, (Coyle, JT et al ., Science , 219 , pp. 1184-1190 (1983)). In addition, the neurotransmitter function of the neurotransmitter has been suggested to be a major cause of AD. ; Gottfries, CG et al ., Psychopharmacology , 86 , pp. 245-252 (1985)). Also, from the viewpoint of the neurotoxic action induced by the amyloid peptide, the mechanism of the excretion of the hippocampal neuronal cell through the accumulation of senile exocytosis of the extracellular peptide of the amyloid peptide is also a major cause of AD (Selkoe DJ, Annu. Rev. Neurosci ., 12 , pp. 463-490 (1989)).
이에 따라, 치매 질환의 치료를 위한 의약품이나 기능성 식품을 개발하기 위하여 여러 가지 연구가 진행되고 있기는 하지만 극히 일부 어느 정도의 효능을 보이는 정도의 치료제가 있을 뿐이지 치료효과가 뚜렷한 명약이 아직까지 개발되고 있지 못하다. Accordingly, various studies have been carried out to develop drugs or functional foods for the treatment of dementia diseases, but there are only a few therapeutic agents showing a certain degree of efficacy. I can not.
현재 치료제로는 AD 환자에서 시냅스의 ACh이 제거되는 비율을 늦춤으로써 콜린 기능 손실을 조절하고 결과적으로 AD 증상을 개선하기 위한 접근법으로 아세틸콜린에스테라제(acetylcholinesterase, 이하 'AChE'라 약칭함)의 억제가 시도되고 있다. Current therapies include acetylcholinesterase (abbreviated as 'AChE') as an approach to modulate cholinergic loss and consequently AD symptoms by slowing the rate at which synaptic ACh is removed in AD patients Suppression is being attempted.
AChE는 신경전달물질 ACh을 퇴화시키는 효소로, 아세틸콜린에스테라제 억제제는 이 퇴화 과정을 억제함으로써, ACh 신경전달물질은 증가된 시간 동안 신경 클레프트(cleft)에 남게 되고, 따라서 신경전달물질의 화학적 및 기능적 효과를 상승시켜, 예를 들어 인지 작용을 향상시킨다. AChE is an enzyme that degrades the neurotransmitter ACh. The acetylcholinesterase inhibitor inhibits this degradation process, so that the ACh neurotransmitter remains in the neural cleft for an increased amount of time, Enhances chemical and functional effects, for example, improves cognitive function.
지금까지 개발된 AChE 억제제로 1,2,3,4-테트라히드로-9-아크리딘아민 (1,2,3,4-tetra-9-acridine amine; 타크린(tacrine), THA; '코그넥스' (COGNEX)), 도네페질(Done Pezyl, E2020; '아리셉트' (ARICEPT)) 및 리바스티그민 (Rivastigmine, ENA713; '엑셀론' (EXELON))이 있다. 이들 약품은 치매를 다스리는 작용기전이 중추신경전달계에 중심적인 역할을 하는 아세틸콜린에스테라제(AChE) 효소의 활성억제를 통해 신경전달물질인 아세틸콜린의 농도를 증가시킴으로써 알츠하이머 질환을 예방 및 치료하는 약제로 알려지고 있다.The AChE inhibitors developed so far include 1,2,3,4-tetra-9-acridine amine (tacrine, THA; (COGNEX), Done Pezyl (E2020; ARICEPT) and Rivastigmine (ENA713; EXELON). These drugs prevent and treat Alzheimer's disease by increasing the concentration of acetylcholine, a neurotransmitter, by inhibiting the activity of the acetylcholinesterase (AChE) enzyme, which plays a central role in the central nervous system It is known as a medicine.
그러나, 이러한 AChE 억제 약물들은 콜린성 신경이 기능적으로 손상되지 않았을 때 가장 효과적이다. 즉, 이들 약물의 효능은 콜린성 신경 기능의 감퇴 시에는 따라서 감소되기 때문에 경증이나 중등도의 노인성 치매의 초기 단계에만 효과가 있다. 또한, 대부분이 말초신경의 콜린성 부작용을 나타내며, 반감기가 너무 짧고, 간 독성 등의 심각한 부작용이 있다(Br.J.Psychiatry, 138, p46, 1981). 특히 코그넥스(Cognex)의 유효성분인 9-아미노-1,2,3,4-테트라하이드로아크리딘(THA)은 경구 투여시 지각능력의 향상의 소견을 보이기는 하지만(N. Engl. J. Med., 315, p1241, 1986) 떨림증, 어지럼증, 간 독성 등의 심각한 부작용을 수반하고 있어 널리 활용되지 못하고 있는 실정이다. However, these AChE inhibiting drugs are most effective when the cholinergic nerve is not functionally impaired. In other words, the efficacy of these drugs is only effective in the early stages of mild or moderate senile dementia, as it decreases with decline in cholinergic function. Also, most of them show cholinergic side effects of peripheral nerves, their half-life is too short, and there are serious side effects such as liver toxicity ( Br.J. Psychiatry , 138 , p46 , 1981). Particularly, 9-amino-1,2,3,4-tetrahydroacridine (THA), an active ingredient of Cognex, shows improvement in perception ability upon oral administration ( N. Engl. J . Med. , 315 , p1241, 1986), which is accompanied by severe side effects such as tremor, dizziness and liver toxicity.
한편, 이러한 AChE 억제 약물의 단점을 발현하지 아니하는 생약으로서 인삼을 주성분으로 하여 수종의 생약을 혼합 추출한 제품이 한국특허공개 제99-85202호와 미국특허 제6,010,702호에 개시되어 있다. 그러나, 이러한 생약 혼합 추출물의 경우 노인성 치매에 어느 정도의 약효를 보이고 있기는 하지만, 부작용 등 아직도 확실하고 안정적인 효과를 보장하지 못하며, 종래의 다른 치매치료제와는 작용기전이 다른 것으로 추측되고 있을 뿐이지 확실한 처방이라고 볼 수 없는 불완전한 조성물로 나타나고 있다. 특히, 인삼성분이 주성분으로 구성되어 있어서 고혈압 환자의 경우는 심계항진과 같은 부작용을 초래하거나 신체의 항상성 불균형을 초래할 수 있는 경향이 있어서 또 다른 문제가 될 수 있다. On the other hand, Korean Patent Publication No. 99-85202 and US Pat. No. 6,010,702 disclose a product obtained by mixing and extracting several herbal medicines containing ginseng as a main ingredient as a herbal medicine which does not manifest the drawbacks of the AChE inhibitory drug. However, these herbal medicine mixed extracts have some effects on geriatric dementia, but they do not guarantee a reliable and stable effect such as adverse effects, and it is presumed that the mechanism of action is different from other conventional dementia treatment agents. It appears to be an imperfect composition that can not be considered a prescription. In particular, the ginseng component is composed mainly of hypertensive patients, which can cause side effects such as palpitations or tends to cause homeostasis of the body.
이와 같이 종래의 치매 치료용 조성물의 경우, 그 부작용이 가장 커다란 문제가 되고 있으며, 특히 생약제의 경우 다른 약물에 비하여 부작용이 크게 적은 특징으로 보여주고는 있으나, 경우에 따라서는 또 다른 부작용이 우려되고 치료효과도 아직까지는 충분하지 않아서 효과적인 임상적 효능의 증진이 필요한 실정이므로 이에 관한 개선이 절실히 요구되고 있다.In the case of conventional dementia treating compositions, the side effects have been the biggest problem. Particularly, the herbal medicine has a remarkably low side effect as compared with other drugs, but there are other side effects Since the therapeutic effect is not yet sufficient, it is necessary to improve effective clinical efficacy.
이에 따라, 본 발명자는 상기와 같은 부작용에 대한 우려가 없으며 AChE의 효과적인 억제를 통한 치매 환자 특히, 알츠하이머병 환자의 인지능력 개선 효능을 가진 천연물 소재를 도출하기 위해 다양한 식물 및 버섯을 대상으로 하여 연구를 수행하였다. Accordingly, the present inventors have conducted research on various plants and mushrooms in order to elicit a natural material having a cognitive-ability-improving effect on dementia patients, particularly, patients suffering from Alzheimer's disease through effective inhibition of AChE without the above- Respectively.
상황버섯은 담자균류의 다년생 버섯으로 학명으로는 [Phellinus linteus] (페리누스 린테우스)라고 한다. 상황버섯(phellinus linteus (L.ex Fr) Quel) 은 민주름 버섯목 (aphylloporales) 진흙버섯과(phellinaceae) 에 속하는 백색부후균으로 자실체는 목질로 되어 있다. The mushroom is a perennial mushroom of basidiomycetes. It is called [ Phellinus linteus ] by scientific name. Phellinus linteus (L. ex Fr) Quel is aphylloporales molluscum (phellinaceae) belonging to the white rot fungus and fruiting bodies are woody.
상황버섯은 수십 년 자란 고사목에서 주로 기생 하며본초강목이나동의보감같은 한의학(韓醫學) 古書에 '상이 (桑耳)' '상목이(桑木耳)' '상신(桑臣)' 침열제(針裂蹄)등의 이름으로 기록에 남아 있으나 실제 구하기가 너무 어려워 한약상들 사이에서 전설의 약제로 전해 내려오고 있다. 또한 재배에 있어서도 번식이 잘되지 않아 아직도 대량생산에 성공하지 못하고 있다.Situ mushrooms are largely parasitic in decades-old dead wood, and have been used for many years in traditional Korean medical textbooks such as Kangwon Gangmok and Dongbokgam, which are called "Mulberry Ear", "Mulberry Ear", "Sangshin" ), But it is too difficult to obtain, and it is being passed down as a legendary drug among the Chinese medicines. In addition, breeding is not good in cultivation, and mass production is still not succeeded.
상황버섯의 모양은, 초기에는 진흙덩어리가 뭉쳐진 것 같은 형태로 유지 되다가 다 자란 후 모습은 나무 그루터기에 혓바닥을 내민 모습이어서 수설(樹舌) 이라고도 한다. 혓바닥 같은 형태의 윗부분은 진흙과 같은 색깔을 나타내기도 하고 감나무의 표피와 같이 검게 갈라진 모습 등으로 나타나기도 하며, 아랫부분은 노란 융단같은 형태로, 윗부분은 검은색 또는 진흙색으로 나타나기도 한다. 상황버섯 자실체는 처음에는 진흙덩어리 형태로 자라다가 겨울이 되면 성장을 멈추고 노란부분이 진흙 색으로 변하며 다시 봄이 되면 노랗게 덧 자라는 다년생 버섯이다. 버섯을 달였을 때는 노랗거나 담황색으로 맑게 나타나며, 맛과 향이 없는 게 특징이고, 맛이 순하고 담백하다.The shape of the mushroom is maintained in the form of a clump of clay at the beginning, and after the mushroom is grown, it is also called a tree (tongue) because it is shaped like a stump in a tree stump. The upper part of the tongue-like shape may be the same color as the mud, or it may appear as a blackened part like the skin of the persimmon tree. The lower part may appear as yellow carpet, and the upper part may appear as black or mud color. The mushroom fruiting body grows in the form of clay at first, then stops growing in winter, turns into a mud color in the yellow part, and is a perennial mushroom that grows yellow in spring. When it is mushroomed, it appears to be yellow or pale yellow. It is characterized by lack of flavor and fragrance, and its taste is pure and light.
지금까지 상황버섯 추출물의 AChE 저해활성 및 이를 이용한 치매질환 예방 및 치료를 위한 약제에 대해서는 연구가 거의 이루어진 바 없다.There have been few studies on AChE inhibitory activity of Phellinus linteus extract and medicines for the prevention and treatment of dementia diseases using the AChE inhibitory activity.
본 발명자는 500여종의 식물 및 버섯을 수집하여 각각으로부터 수득한 70% 에탄올 가용 조추출물에 대하여 AChE에 대한 저해활성을 스크리닝한 결과, 상황버섯의 70% 에탄올 가용 조추출물이 강한 아세틸콜린에스테라제 저해활성을 나타냄을 확인하였고, 상황버섯 조추출물을 n-헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, n-부탄올, 증류수 등의 용매를 이용하여 극성에 따른 분획화를 실시한 후 각 용매추출물에 대한 아세틸콜린에스테라제 저해활성을 측정한 결과, 모두 특히, n-부탄올 가용추출물이 가장 높은 아세틸콜린에스테라제 저해활성을 가짐을 발견하고, 이들 상황버섯의 추출물을 포함하는 조성물을 적용함으로서 본 발명을 완성하였다.
The present inventors collected about 500 kinds of plants and mushrooms and screened the inhibitory activity against AChE on the extract of 70% ethanol-soluble ethanol obtained from each of them. As a result, it was found that the extract of 70% ethanol-soluble mushroom had strong acetylcholinesterase The extracts were fractionated according to the polarity using a solvent such as n - hexane, chloroform, ethyl acetate, n - butanol and distilled water. The extracts of acetylcholinesterase As a result of the measurement of the inhibitory activity, it was found that the n-butanol soluble extract had the highest acetylcholinesterase inhibitory activity, and the present invention was completed by applying a composition containing the extracts of these mushrooms.
본 발명의 목적은 치매 질환 특히, 아세틸콜린의 감소를 포함하는 콜린성 신경기능 퇴화로 인한 알츠하이머병의 치료 및 예방 효과를 나타내는 약학조성물 및 건강 기능 식품을 제공하는 것이다.
It is an object of the present invention to provide a pharmaceutical composition and a health functional food showing the therapeutic and preventive effects of Alzheimer's disease due to cholinergic neuronal dysfunction including reduction of dementia diseases, especially acetylcholine.
상기 목적에 따라, 본 발명은 상황버섯(Phellinus linteus)의 추출물을 포함하는 치매 질환의 예방 및 치료용 조성물을 제공한다. According to the above object, the present invention provides a composition for the prevention and treatment of dementia diseases comprising an extract of Phellinus linteus .
상세하게는, 본 발명은 상황버섯의 조추출물을 포함하고 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 치매질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.In particular, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing and treating dementia diseases comprising a crude extract of Phellinus linteus and comprising a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient.
상기 조추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 및 이들의 혼합용매로부터 선택된 극성용매, 바람직하게는 70% 에탄올에 가용한 추출물을 포함한다.The crude extract includes extracts soluble in polar solvents, preferably 70% ethanol, selected from water, lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms, and mixed solvents thereof.
또한, 본 발명은 상황버섯의 비극성용매 가용추출물을 포함하고 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 치매질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing and treating dementia diseases comprising a non-polar solvent-soluble extract of Phellinus linteus, comprising a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient.
상기 비극성용매 가용추출물은 n-헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 메틸렌클로라이드로부터 선택된 비극성 용매, 바람직하게는 에틸아세테이트에 가용한 추출물을 포함한다. The nonpolar solvent soluble extract comprises an extract which is soluble in a non-polar solvent, preferably ethyl acetate, selected from n-hexane, chloroform, ethyl acetate and methylene chloride.
또한, 본 발명은 상황버섯의 극성용매 가용추출물을 포함하고 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 치매질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing and treating dementia diseases comprising a polar solvent-soluble extract of Phellinus linteus and a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient.
상기 극성용매 가용추출물은, 상기 조추출물로부터 비극성용매 가용부를 제외한 추출물로서, 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 및 이들의 혼합용매로부터 선택된 극성용매, 바람직하게는 n-부탄올에 가용한 추출물을 포함한다. The polar solvent-soluble extract is an extract obtained by removing the non-polar solvent-soluble portion from the crude extract, and contains an extract soluble in polar solvents, preferably n-butanol, selected from water, lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms and a mixed solvent thereof do.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명의 상황버섯 추출물은, 건조하여 분말화한 상황버섯을 그 중량의 약 1 내지 10배, 바람직하게는 약 2 내지 5배 부피의 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜 또는 이들의 약 1:0.1 내지 1:10, 바람직하게는 1:0.2 내지 1:3의 혼합비를 갖는 혼합용매로 20 내지 100℃, 바람직하게는 30 내지 70℃의 추출 온도에서 약 1 시간 내지 2일, 바람직하게는 2 시간 내지 1일 동안 열수 추출, 환류냉각 추출, 초음파 추출 등의 추출방법, 바람직하게는 초음파 추출의 추출방법으로 1회 내지 5회, 바람직하게는 2회 내지 3회 반복하여 추출물을 수득한 후, 감압여과하고 여과한 추출물을 혼합하여 회전진공농축기로 20 내지 100℃, 바람직하게는 50 내지 70℃에서 감압 농축하여 용매를 제거하여 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합용매에 따른 가용추출물인 조추출물을 얻을 수 있다. The mushroom extract of the present invention may be prepared by mixing dry mushroom with about 1 to 10 times, preferably about 2 to 5 times its weight of water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, Preferably at a temperature of from 20 to 100 DEG C, preferably from 30 DEG C to 70 DEG C, for a period of from about 1 hour to 2 days, preferably from 2 minutes to 2 days, in a mixed solvent having a mixing ratio of 0.1: 1 to 1:10, The extract is obtained by repeating the extraction method such as hot water extraction, reflux cooling extraction, ultrasonic extraction, and the like, preferably extraction method of ultrasonic extraction, once to 5 times, preferably twice to 3 times, The mixture is filtered under reduced pressure, and the filtered extract is mixed and concentrated under reduced pressure at 20 to 100 ° C, preferably 50 to 70 ° C by using a rotary vacuum concentrator to remove the solvent. Thus, water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, Extract crude extract The can.
또한, 비극성 용매 가용추출물은 상기 조추출물을 물에 현탁한 후 이들 현탁액의 약 1 내지 10배, 바람직하게는 약 1 내지 5배 부피의 n-헥산을 가하여 1 내지 5회, 바람직하게는 2 내지 4회 분획하여 n-헥산 가용성 분획부과 수가용성 분획부로 분리하고, 수가용성 분획부에 다시 클로로포름을 가하여 클로로포름 가용성 분획부와 수가용성 분획부로 분리하고, 수가용성 분획부에 다시 에틸아세테이트를 가하여 에틸아세테이트 가용성 분획부와 수가용성 분획부를 분리한 후 각각의 용매 분획부를 회전 진공 농축기로 감압농축하여 용매를 제거하여 각각의 추출물을 얻을 수 있다.The non-polar solvent-soluble extract is prepared by suspending the crude extract in water, adding n-hexane at a ratio of about 1 to 10 times, preferably about 1 to 5 times, of the suspension to 1 to 5 times, The mixture was separated into four fractions and separated into n-hexane-soluble fraction and water-soluble fraction. Chloroform was added to the water-soluble fraction, and chloroform-soluble fraction and water-soluble fraction were separated. Ethyl acetate was added to the water- After separating the soluble fraction and the water-soluble fraction, each solvent fraction is concentrated under reduced pressure using a rotary vacuum concentrator to remove the solvent to obtain each extract.
또한, 극성용매 가용추출물은 비극성 용매 가용성분 추출과정을 거친 수가용성 분획부에 n-부탄올을 가하여 n-부탄올 가용성 분획부와 수가용성 분획부를 수득할 수 있으며, 각각의 용매 분획부를 회전 진공 농축기로 감압농축시켜 용매를 제거하여 n-부탄올 가용성 추출물 및 수가용성 추출물을 얻을 수 있다. In addition, the polar solvent-soluble extract can be obtained by adding n-butanol to the water-soluble fraction which has been subjected to a non-polar solvent-soluble fraction extraction process to obtain an n-butanol-soluble fraction and a water-soluble fraction. Each solvent fraction is dissolved in a rotary vacuum concentrator The solvent is removed by concentration under reduced pressure to obtain an n-butanol soluble extract and a water-soluble extract.
본 발명의 조성물은 상기 제조방법에 따라 얻어진 상황버섯의 조추출물, 비극성용매 가용추출물 또는 극성용매 가용추출물을 포함한다.The composition of the present invention includes a crude extract, a non-polar solvent-soluble extract or a polar solvent-soluble extract obtained from the above-mentioned preparation method.
본 발명의 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.1 내지 50 % 중량으로 포함한다.The composition of the present invention contains 0.1 to 50% by weight of the extract, based on the total weight of the composition.
상기 치매질환은 알츠하이머형 치매증, 뇌혈관성 치매증, 픽(Pick)병, 크루츠펠트-야곱(Creutzfeldt-jakob)병, 두부손상에 의한 치매, 파킨슨(Parkinson)병을 포함하며, 특히 본 발명의 조성물은 아세틸콜린의 감소를 포함하는 콜린성 신경기능 퇴화로 인한 알츠하이머병의 치료 및 예방에 유효하다.The dementia diseases include Alzheimer's type dementia, cerebrovascular dementia, Pick's disease, Creutzfeldt-jakob disease, dementia caused by head injury, Parkinson's disease, Is effective in the treatment and prevention of Alzheimer ' s disease due to cholinergic neuronal dysfunction, including reduction of acetylcholine.
본 발명의 상황버섯의 추출물을 포함하는 조성물은 통상의 방법에 따른 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다. The composition comprising the extract of the mushroom of the present invention may further comprise an appropriate carrier, excipient or diluent according to a conventional method.
본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. Examples of carriers, excipients and diluents that can be included in the composition of the present invention include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, Cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil.
본 발명에 따른 추출물을 포함하는 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. The composition containing the extract according to the present invention may be formulated in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols or the like, oral preparations, suppositories or sterilized injection solutions, Can be used.
상세하게는, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.More specifically, when formulating the composition, it can be prepared using a diluent or an excipient such as a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrant, a surfactant, and the like. Solid formulations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules and the like, which may contain at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose ), Lactose, gelatin and the like. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc may also be used. Examples of the liquid preparation for oral use include suspensions, solutions, emulsions, syrups and the like, and various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives, etc. in addition to commonly used diluents such as water and liquid paraffin . Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations and suppositories. Examples of the suspending agent include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like. Examples of the suppository base include witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin, glycerogelatin and the like.
본 발명의 추출물은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 일반적으로 0.01 내지 500mg/의 양, 바람직하게는 0.1 내지 100mg/의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 또한 그 추출물의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.The extract of the present invention may vary depending on the patient's age, sex, and body weight. Generally, the extract may be administered in an amount of 0.01 to 500 mg /, preferably 0.1 to 100 mg / per day, once or several times a day. The dose of the extract may also be increased or decreased depending on the route of administration, degree of disease, sex, weight, age, and the like. Thus, the dosage amounts are not intended to limit the scope of the invention in any manner.
본 발명의 약학 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention can be administered to mammals such as rats, mice, livestock, humans, and the like in various routes. All modes of administration may be expected, for example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intra-uterine or intracerebroventricular injections.
본 발명의 상황버섯 추출물은 독성 및 부작용은 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다. The mushroom extract of the present invention has little toxicity and side effects, and therefore can be safely used for long-term administration for preventive purposes.
본 발명은 또한, 상황버섯의 추출물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 치매질환 예방 및 개선을 위한 건강 기능 식품을 제공한다.The present invention also provides a health functional food for the prevention and improvement of dementia diseases comprising an extract of Phellinus linteus and a pharmaceutically acceptable food supplementary additive.
본 발명의 상황버섯의 추출물을 포함하는 조성물은 치매질환의 예방을 위한 약제, 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 발명의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 각종 식품류, 예를 들어, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있으며, 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.The composition of the present invention comprising the extract of Phellinus linteus can be used variously for medicines, foods and beverages for the prevention of dementia diseases. Examples of the foods to which the extract of the present invention can be added include various foods such as beverages, gums, tea, vitamin complexes and health supplements. Examples of such foods include pills, powders, granules, infusions, tablets, Can be used.
이때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출물의 양은, 일반적으로 본 발명의 건강식품 조성물의 경우 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물의 경우 100를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다. At this time, the amount of the extract in the food or beverage may generally be 0.01 to 15% by weight of the total food weight of the health food composition of the present invention, 0.02 to 10 g of 100% Can be added in a proportion of 0.3 to 1 g.
본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 외에는 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예로는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린; 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.The health beverage composition of the present invention has no particular limitation on the liquid ingredient other than the above-mentioned extract as an essential ingredient in the indicated ratio, and may contain various flavors or natural carbohydrates as an additional ingredient such as ordinary beverages. Examples of the above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose and the like; Polysaccharides such as dextrin, cyclodextrins; And sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As natural flavors other than those described above, natural flavors (such as tau martin, stevia extract (e.g., rebaudioside A, glycyrrhizin)) and synthetic flavors (saccharin, aspartame, etc.) have. The ratio of the natural carbohydrate is generally about 1 to 20 g, preferably about 5 to 12 g per 100 composition of the present invention.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above-mentioned composition, the composition of the present invention can be used as a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, coloring agents and aging agents (cheese, chocolate etc.), pectic acid and its salts, , Organic acids, protective colloid thickening agents, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonating agents used in carbonated drinks, and the like. In addition, the compositions of the present invention may contain flesh for the production of natural fruit juices and fruit juice drinks and vegetable drinks. These components may be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so critical, but is generally selected in the range of 0 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.
본 발명자는 예비실험 결과, 상황버섯의 70% 에탄올 가용 조추출물이 강한 아세틸콜린에스테라제 저해활성이 탁월함을 관찰한 바 있다. 이를 토대로 상황버섯의 70% 에탄올 가용 조추출물을 n-헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, n-부탄올 등의 용매를 이용하여 극성에 따른 분획화를 실시한 후 각 용매추출물에 대한 아세틸콜린에스테라제 저해활성을 측정한 결과, 에틸아세테이트 및 n-부탄올 가용추출물이 모두 우수한 아세틸콜린에스테라제 저해활성을 나타내었으며, 특히 n-부탄올 가용추출물이 가장 높은 아세틸콜린에스테라제 저해활성을 나타냄을 확인할 수 있었다.As a result of preliminary experiments, the inventors of the present invention have observed that a 70% ethanol-soluble crude extract of Phellinus linteus exhibits a strong acetylcholinesterase inhibitory activity. Based on this, the 70% ethanol-soluble crude extract of Sasa mushroom was fractionated according to the polarity by using a solvent such as n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol, etc., and the acetylcholinesterase inhibitory activity The results showed that ethyl acetate and n-butanol soluble extract showed excellent acetylcholinesterase inhibitory activity and that n-butanol soluble extract showed the highest acetylcholinesterase inhibitory activity.
본 발명은 다음의 실시예에 의거하여 더욱 상세히 설명되나, 본 발명이 이에 의해 제한되지는 않는다.The present invention will be described in more detail based on the following examples, but the present invention is not limited thereto.
본 발명의 상황버섯의 추출물들은 탁월한 아세틸콜린에스테라제 저해활성을 나타내어, 이를 포함하는 조성물은 치매 특히, 아세틸콜린의 감소를 포함하는 콜린성 신경기능 퇴화로 인한 알츠하이머병의 치료 및 예방에 유용한 약제 및 건강 기능 식품으로서 이용할 수 있다.
The extracts of the mushroom of the present invention exhibit excellent acetylcholinesterase inhibitory activity and the compositions comprising them are useful for the treatment and prevention of Alzheimer's disease due to cholinergic neuronal dysfunction including reduction of dementia and especially acetylcholine, It can be used as a health functional food.
실시예 1. 상황버섯의 조추출물 제조EXAMPLES Example 1 Preparation of Crude Extract of Situ Mushroom
분쇄한 상황버섯 (경동약재시장에서 구입) 200g에 70% 에탄올 500를 가한 후 초음파 파쇄기(Branson Ultrasonics, 8150) 를 이용하여 실온에서 2시간 동안 추출한 후 여과하여 감압 건조시켜 70% 에탄올 가용추출물인 상황버섯 조추출물 분말 15.7g을 얻었다.
200% of the ground mushroom (purchased from Kyungdong Pharmaceutical Market) was added with 70% ethanol 500 and extracted with a sonicator (Branson Ultrasonics, 8150) for 2 hours at room temperature, followed by filtration and drying under reduced pressure to obtain 70% 15.7 g of mushroom crude extract powder was obtained.
실시예 2. 상황버섯 n-헥산 가용추출물의 제조Example 2 Preparation of Sucrose n-Hexane Soluble Extract
상기 실시예 1에서 얻은 상황버섯 조추출물 50㎎에 1㎖의 증류수를 가하여 현탁하고, n-헥산 1㎖를 가하여 혼합한 후 n-헥산 가용성 분획 및 수가용성 분획으로 분리하였다. 동일 과정을 3회 반복하여 n-헥산 가용성 분획만을 모은 후 이를 여과하고 감압 건조하여 n-헥산 가용추출물 분말 7.7㎎을 얻었다. To 50 mg of the mushroom crude extract obtained in Example 1, 1 ml of distilled water was added to suspend, 1 ml of n-hexane was added thereto, and the mixture was separated into a n-hexane soluble fraction and a water soluble fraction. The same procedure was repeated three times to collect only n-hexane soluble fraction, which was then filtered and dried under reduced pressure to obtain 7.7 mg of n-hexane soluble extract powder.
실시예 3. 상황버섯 클로로포름 가용추출물의 제조Example 3 Preparation of Chloroform Soluble Extract of Mushroom Mushroom
상기 실시 예 2에서 얻은 수가용성 분획부에 클로로포름 1㎖를 가하여 혼합한 후 클로로포름 가용성 분획 및 수가용성 분획으로 분리하였다. 동일 과정을 3회 반복하여, 클로로포름 가용성 분획만을 모은 후, 이를 여과하고 감압건조하여 클로로포름 가용추출물 분말 8.3㎎을 얻었다.
1 ml of chloroform was added to the water-soluble fraction obtained in Example 2, and the mixture was separated into a chloroform-soluble fraction and a water-soluble fraction. The same procedure was repeated three times to collect only the chloroform-soluble fraction, which was then filtered and dried under reduced pressure to obtain 8.3 mg of a chloroform soluble extract powder.
실시예 4. 상황버섯의 에틸아세테이트 가용추출물의 제조Example 4. Preparation of Ethyl Acetate Soluble Extract of Mushroom
상기 실시 예 3에서 얻은 수가용성 분획부에 에틸아세테이트 1㎖를 가하여 혼합한 후 에틸아세테이트 가용성 분획부 및 수가용성 분획부로 분리하였다. 동일과정을 3회 반복하여 에틸아세테이트 가용성 분획부만을 모은 후 이를 여과하고 감압건조하여 에틸아세테이트 가용추출물 분말 0.9㎎을 얻었다.
To the water-soluble fraction obtained in Example 3, 1 ml of ethyl acetate was added and mixed, followed by separation into an ethyl acetate soluble fraction and a water soluble fraction. The same procedure was repeated three times to collect only the ethyl acetate soluble fraction, which was then filtered and dried under reduced pressure to obtain 0.9 mg of the ethyl acetate soluble extract powder.
실시예 5. 상황버섯의 n-부탄올 가용추출물 및 수가용추출물의 제조Example 5: Preparation of n-butanol soluble extract and water-soluble extract of Mushroom
상기 실시예 4에서 얻은 수용성 분획부에 n-부탄올 1㎖를 가하여 혼합한 후 n-부탄올 가용성 분획부와 수가용성 분획부로 분리하였다. 동일과정을 3회 반복한 후 각각의 분획물을 여과하고 감압건조하여 n-부탄올 가용추출물 분말 10.8㎎ 및 수가용성 추출물 분말 32.1mg을 얻었다.
1 ml of n-butanol was added to the water-soluble fraction obtained in Example 4, and the mixture was separated into an n-butanol soluble fraction and a water-soluble fraction. The same procedure was repeated three times. Each fraction was filtered and dried under reduced pressure to obtain 10.8 mg of n-butanol soluble extract powder and 32.1 mg of water-soluble extract powder.
실험예 1. 상황버섯 추출물의 아세틸콜린에스테라제 활성 저해 효과Experimental Example 1. Inhibition of acetylcholinesterase activity of Phellinus linteus extract
실시예 1 내지 5에서 얻어진 상황버섯 추출물들에 대하여 아세틸콜린에스테라제 활성저해효과를 측정하였다. The inhibitory effect of acetylcholinesterase activity on the mushroom extracts obtained in Examples 1 to 5 was measured.
아세틸콜린에스테라제 저해활성실험에서 효소활성은 엘만(Ellman) 방법에 따라 기질인 아세틸티오콜린 요오드(acetylthiocholine iodide)이 아세틸콜린에스테라제에 의해 가수분해되어 유리되어 나오는 티오콜린(thiocholine)을 DTNB(디티오니트로벤조산)와 반응시켜 생성되는 디티오 화합물과 니트로벤조산의 티오음이온을 405nm UV로 검출하여 효소활성을 측정하고 아세틸콜린에스테라제 저해 물질로 알려진 타크린(tacrine; 1,2,3,4-테트라히드로-9-아크리딘아민)에 의한 저해활성과 비교하여 저해활성 수준을 평가하였다(Ellman, G. L., et al., Biochem. Pharmacol., 7, p88 (1961)).In the acetylcholinesterase inhibitory activity assay, thiocholine, in which the substrate acetylthiocholine iodide was hydrolyzed by acetylcholinesterase and liberated according to the Ellman method, was dissolved in DTNB (Dithionitrobenzoic acid) and the thioanion of nitrobenzoic acid were detected with UV at 405 nm to measure the enzyme activity, and tacrine (1,2,3), which is known as an acetylcholinesterase inhibitor, (Ellman, GL, et al ., Biochem. Pharmacol ., 7, p88 (1961)).
실시예 1 내지 5로부터 얻어진 용매별 추출물들을 각각 50mg/㎖ 농도로 함유한 DMSO 용액과 비교군으로 타크린(SIGMA-ALDRICH)을 2㎎/㎖ 농도로 함유한 DMSO 용액, 대조군으로 100% DMSO를 하기 표 2에 제시한 농도가 되도록 인산완충액 (0.1M, pH 8.0)으로 희석한 후 시료별로 10㎕씩을 취하여 시험관에 담고 50mM 디티오비스-니트로벤조산(Dithiobis-nitrobenzoic acid) 용액 5㎕, 인산완충액(0.1M, pH 8.0) 132.5㎕ 및 50unit/㎖ 아세틸콜린에스테라제 효소액 2.5㎕(SIGMA-ALDRICH)을 가하여 25? 항온기에서 5분간 반응시킨 후 분광광도계(BIO-TEK사, FL600)를 이용하여 405nm에서 흡광도를 측정하고 0.1mM 아세틸티오콜린 요오드 (acetylthiocholine Iodide)용액 50㎕ 가한 후 25? 항온기에서 3분간 반응시키고 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 효소활성의 저해도는 하기의 수학식을 통하여 계산하였다. DMSO solutions containing the solvent extracts obtained in Examples 1 to 5 at a concentration of 50 mg / ml, DMSO solution containing 2 mg / ml of tacrine (SIGMA-ALDRICH) as a comparative group, 100% DMSO as a control group 10 μl of each sample was diluted with phosphate buffer (0.1 M, pH 8.0) to the concentration shown in Table 2 below, and 5 μl of 50 mM dithiobis-nitrobenzoic acid solution, 0.1M, pH 8.0) and 2.5 占 퐇 of 50 units / ml acetylcholinesterase enzyme solution (SIGMA-ALDRICH) After incubation in a thermostat for 5 minutes, absorbance was measured at 405 nm using a spectrophotometer (BIO-TEK, FL600) and 50 μl of 0.1 mM acetylthiocholine iodide solution was added. The reaction was carried out in a thermostat for 3 minutes and absorbance was measured at 405 nm. The degree of inhibition of the enzyme activity was calculated by the following equation.
[수학식][Mathematical Expression]
활성저해도 (%) = (A/B) x 100%Active inhibition (%) = (A / B) x 100%
A: 추출물을 포함하는 각 실험군에서 아세틸티오콜린 요오드 반응전 흡광도와 반응후 흡광도의 차A: Absorbance before acetylthiocholine iodine reaction and difference in absorbance after reaction in each experimental group containing extract
B : 대조군에서 아세틸티오콜린 요오드 반응 전 흡광도와 반응 후 흡광도의 차
B: Absorbance before acetylthiocholine iodine in the control group and difference in absorbance after the reaction
실험 결과, 하기 표 2에 나타난 바와 같이 본 발명의 상황버섯의 추출물들 모두 우수한 아세틸콜린에스테라제 저해활성을 나타내었다. 또한, 상황버섯의 용매별 가용추출물 역시 농도 의존적으로 강력한 아세틸콜린에스테라제 저해활성을 나타내었으며, 특히 n-부탄올 가용추출물이 가장 우수한 저해효과를 나타내었다. As shown in Table 2, all of the extracts of the present invention showed excellent acetylcholinesterase inhibitory activity. Soluble extracts of Solanum mushroom also showed strong acetylcholinesterase inhibitory activity in a concentration dependent manner. Especially, n - butanol soluble extract showed the most inhibitory effect.
실험예 2. 급성 독성 연구Experimental Example 2. Acute toxicity study
25± 5g의 ICR계 마우스(대한실험동물)와 235±10g의 특정병원부재(SPF) 스프라그-도올리(Sprague Dawley, Biogenomics사) 래트를 각각 3마리씩 36군으로 나누어 본 발명의 실시예 1 내지 5의 상황버섯 추출물들을 각각 20mg/㎏, 10mg/㎏, 1mg/㎏의 용량으로 복강투여한 후 24시간 동안 독성여부를 관찰하였다.The mice were divided into 36 groups each consisting of 25 ± 5 g ICR mice (for experimental animals) and 235 ± 10 g SPF Sprague Dawley (Biogenomics) rats each of 3 groups of 235 ± 10 g. To 5 mushroom extracts were intraperitoneally administered at a dose of 20 mg / kg, 10 mg / kg, and 1 mg / kg, respectively, and then observed for toxicity for 24 hours.
실험 결과, 36군 모두에서 사망한 예를 전혀 관찰할 수 없었고, 체중 증가, 사료 섭취량 등에서 외견상 대조군과 별다른 증상을 찾아볼 수 없었다. 따라서 본 발명의 추출물이 안전한 약물임을 확인할 수 있었다.
As a result of the experiment, we could not observe any cases of death in all of the 36 groups, and we could not find any symptoms except for the control group in weight gain and feed intake. Therefore, it was confirmed that the extract of the present invention is a safe drug.
본 발명의 상황버섯의 추출물을 포함하는 약학조성물의 제제 예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
The preparation examples of the pharmaceutical composition comprising the extract of the present invention are described below, but the present invention is not intended to be limited thereto but is specifically described.
제제예 1. 산제의 제조Preparation Example 1. Preparation of powder
실시예 1의 상황버섯 70% 에탄올 가용추출물 건조분말.............300 mgThe mushroom 70% ethanol soluble extract of Example 1, dried powder 300 mg
유당............................................................100 mgLactose ................................................. ........... 100 mg
탈크 ............................................................10 mgTalc ................................................. ........... 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
The above components are mixed and filled in airtight bags to prepare powders.
제제예 2. 정제의 제조Formulation Example 2. Preparation of tablets
실시예 4의 상황버섯 에틸아세테이트 가용추출물 건조분말 ....300 mgThe mushroom ethyl acetate soluble extract of Example 4, dried powder .... 300 mg
옥수수전분......................................................100 mgCorn starch ................................................ ...... 100 mg
유당............................................................100 mgLactose ................................................. ........... 100 mg
스테아린산 마그네슘...............................................2 mgMagnesium stearate ................................................... 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
After mixing the above components, tablets are prepared by tableting according to the usual preparation method of tablets.
제제예 3. 캅셀제의 제조Formulation Example 3. Preparation of capsules
실시예 5의 상황버섯 n-부탄올 가용추출물 건조분말................300 mgThe dried mushroom n-butanol soluble extract powder of Example 5: 300 mg
옥수수전분......................................................100 mgCorn starch ................................................ ...... 100 mg
유당............................................................100 mgLactose ................................................. ........... 100 mg
스테아린산마그네슘................................................2 mgMagnesium stearate ................................................ 2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
The above components are mixed according to a conventional capsule preparation method and filled in gelatin capsules to prepare capsules.
제제예 4. 주사제의 제조Formulation Example 4. Preparation of injection
실시예 1의 상황버섯 조추출물 건조분말......................300 mgThe condition of Example 1 Dry powder of mushroom crude extract ............ 300 mg
주사용 멸균 증류수...............................................적량Sterile sterilized water for injection .............................................. .Equate
pH 조절제........................................................적량pH adjusting agent ................................................ ........
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
(2 ml) per 1 ampoule according to the usual injection preparation method.
제제예 5. 액제의 제조Formulation Example 5. Preparation of a liquid preparation
실시예 4의 상황버섯 부탄올 추출물 건조분말........................1 gDry powder of the mushroom butanol extract of Example 4: 1 g
이성화당..........................................................10 gIsolation Party ................................................ .......... 10 g
만니톨............................................................ 5 gMannitol ................................................. ........... 5 g
정제수............................................................적량Purified water................................................. ............
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬행을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
Each component was added to purified water in accordance with the usual preparation method of the liquid preparation and dissolved, and the lemon line was added in an appropriate amount. Then, the above components were mixed, and purified water was added thereto. The whole was adjusted to 100 ml with purified water, And sterilized to prepare a liquid preparation.
제제예 6. 건강 식품의 제조Formulation Example 6. Preparation of Healthy Foods
실시예 1의 상황버섯 조추출물 건조분말....................1000 ㎎The mushroom crude extract powder of Example 1 1000 mg
비타민 혼합물...............................................적량Vitamin mixture ..................................................
비타민 A 아세테이...........................................70 ㎍Vitamin A Acetate ........................................... 70 ㎍
비타민 E...................................................1.0 ㎎Vitamin E ................................................ ... 1.0 mg
비타민 B1 ................................................0.13 ㎎Vitamin B 1 ............................................... .0.13 mg
비타민 B2.................................................0.15 ㎎Vitamin B 2 ............................................... 0.15 mg
비타민 B6..................................................0.5 ㎎Vitamin B 6 ............................................... ... 0.5 mg
비타민B12..................................................0.2 ㎍Vitamin B 12 ............................................... ... 0.2 g
비타민 C.................................................. 10 ㎎Vitamin C ................................................ .. 10 mg
비오틴.....................................................10 ㎍Biotin ................................................. .... 10 μg
니코틴산아미드............................................1.7 ㎎Nicotinic acid amide ............................................... 1.7 mg
엽산.......................................................50 ㎍Folic acid ................................................. ...... 50 μg
판토텐산 칼슘.............................................0.5 ㎎Calcium pantothenate .............................................. 0.5 mg
무기질 혼합물..............................................적량Mineral mixture ....................................................
황산제1철................................................1.75 ㎎Ferrous sulfate .............................................. ..1.75 mg
산화아연.................................................0.82 ㎎Zinc oxide ................................................ 0.82 mg
탄산마그네슘.............................................25.3 ㎎Magnesium carbonate ............................................. 25.3 mg
제1인산칼륨................................................15 ㎎Potassium monophosphate .............................................. ..15 mg
제2인산칼슘................................................55 ㎎Secondary calcium phosphate .............................................. ..55 mg
구연산칼륨.................................................90 ㎎Potassium citrate ................................................ .90 mg
탄산칼슘..................................................100 ㎎Calcium carbonate ................................................ ..100 mg
염화마그네슘.............................................24.8 ㎎Magnesium chloride ..................................... 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 제제예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
Although the composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixture is relatively mixed with a suitable ingredient for health food, the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients may be mixed according to a conventional method for producing healthy foods , Granules can be prepared and used in the manufacture of health food compositions according to conventional methods.
제제예 7. 건강 음료의 제조Formulation Example 7. Preparation of health drink
실시예 1의 상황버섯 조추출물 건조분말................1000 ㎎The dried mushroom crude extract powder of Example 1 ... 1000 mg
구연산....................................................100 ㎎Citric acid ................................................. ... 100 mg
올리고당..................................................100 goligosaccharide................................................. .100 g
매실농축액................................................ 2 gPlum concentrate ................................................ 2 g
타우린.....................................................1 gTaurine ................................................. .... 1 g
정제수를 가하여 전체....................................900 ㎖Purified water was added to the whole ... 900 ml
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85?에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2l용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다. The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was heated at 85 DEG C for about 1 hour. The resulting solution was filtered to obtain a sterilized 2-liter container, which was sealed and sterilized, ≪ / RTI >
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 제제예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
Although the composition ratio of the ingredients suitable for the beverage is comparatively low, it is also possible to arbitrarily modify the blending ratio according to the regional or national preference such as the demand level, the demanded country, and the use purpose.
Claims (14)
A pharmaceutical composition comprising a crude extract of Phellinus Linteus as an active ingredient and a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient for the treatment and prevention of dementia.
2. The method according to claim 1, wherein the crude extract is extracted by a sonication method at 30 to 70 DEG C for 2 hours to 1 day, characterized in that the filtrate is filtered and concentrated under reduced pressure and dried, ≪ / RTI >
4. The pharmaceutical composition according to claim 3, wherein the reduced-pressure concentration is performed at a reduced pressure at 20 to 100 DEG C,
A pharmaceutical composition for the treatment and prevention of dementia diseases comprising a polar solvent-soluble extract of Phellinus linteus as an active ingredient and a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient.
[Claim 6] The method according to claim 5, wherein the polar solvent-soluble extract is selected from the group consisting of extracts from crude extracts of mushroom except for the non-polar solvent-soluble portion, polar solvents selected from the group consisting of water, lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms, . ≪ / RTI >
[Claim 6] The method according to claim 5, wherein the crude extract is extracted at 30 to 70 DEG C for 2 hours to 1 day by an ultrasonic extraction method, and the filtrate is filtered and concentrated under reduced pressure and dried. ≪ / RTI >
The pharmaceutical composition according to claim 5, wherein the polar solvent-soluble extract is extracted with n-butanol.
The composition according to any one of claims 1 to 8, wherein the composition is formulated in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, oral formulations of aerosols, external preparations, suppositories or sterile injectable solutions ≪ / RTI >
The pharmaceutical composition according to claim 1 or 5, wherein the dementia disease includes Alzheimer's dementia, cerebrovascular dementia, Pick's disease, Kruszfeld-Jacob disease, dementia caused by head injury, and Parkinson's disease.
A health functional food for the prevention and improvement of dementia diseases, including crude extracts of the mushroom and food-acceptable food supplementary additives.
Which comprises extracting a polar solvent-soluble extract obtained by extracting a polar solvent from water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms and a mixed solvent thereof, as an active ingredient, Health functional foods for the prevention and improvement of dementia diseases, including dietary allowable food additives
The health functional food according to claim 11 or 12, wherein the dementia disease includes Alzheimer's dementia, cerebrovascular dementia, Pick's disease, Kruszfeld-Jacob disease, dementia caused by head injury, and Parkinson's disease.
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|---|---|---|---|---|
| KR20140037526A (en) * | 2012-09-19 | 2014-03-27 | 건국대학교 산학협력단 | Composition for prevention and treatment of alzheimer's diease |
-
2014
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Non-Patent Citations (1)
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| Mycobiology, 2010, 제38권, 제1호, 페이지 52-57* * |
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