KR20160001318A - Microorganisms for decomposition of human hairand decomposition method of using this. - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to biological decomposition of a keratin material which is a non-soluble and non-degradable protein, especially human hair and, more specifically, to Chrysosporiumtropicum which is a human hair decomposing microorganism identified from soil by baiting, and to an efficient decomposing method of human hair, comprising the steps of culturing human hair in a solid phase by using the strain; and culturing the solid cultured product and bacillus strain in a liquid phase. The method for decomposing human hair of the present invention effectively decomposes non-degradable keratin materials such as human hair, cow hair, feathers of poultry etc., thereby being used in processing of detergents for clothes, foods, feeds, and fertilizers, treating of organic wastes, etc.

Description

인모 분해 미생물 및 이를 이용한 인모 분해방법{Microorganisms for decomposition of human hairand decomposition method of using this.}[0001] The present invention relates to a microorganism for degrading human hair and a method for decomposing human hair using the microorganism.

본 발명은 케라틴소재 특히 인모를 분해하는 미생물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 미생물을 이용한 인모의 분해 방법에관한 것이다. The present invention relates to keratin materials, especially microorganisms that degrade human hair. The present invention also relates to a method for degrading human hair using the microorganism.

식육가공업 및 피혁산업에는 케라틴과같은 불용성 단백질이 대량으로 방출되고 있고 대부분은 재이용되지 않고 소각처리되고 있다。그러나 소각이라는 방법자체가 에너지효율이 나쁘고 이산화 탄소배출 측면의 문제가 있기 때문에 케리틴과같은 불용성단백질을 용이하게 분해하는 저가의 안전한 처리법의 연구가 이루어지고 있다.In meat processing and leather industries, insoluble proteins such as keratin are released in large quantities and most of them are incinerated without being reused. However, since the incineration method itself has a problem of energy efficiency and a problem of carbon dioxide emission, Studies have been made on a low-cost and safe treatment method for easily decomposing insoluble proteins.

케라틴(keratin)이란 손톱·발톱·머리털 및 뿔 따위의 성분이 되는 경(硬)단백질로 각질이라고도 한다. 머리털 ·양털 ·깃털 ·뿔 ·손톱 ·말굽 등을 구성하는 진성케라틴과, 피부 ·신경조직 등에 존재하는 유사 케라틴으로 구별된다.Keratin is a hard protein that is a component of nails, claws, hair, and horns. It is also called keratin. It is distinguished by the intrinsic keratin which forms the hair, the fleece, the feather, the horn, the nail, the horseshoe, and the like keratin which exists in the skin, the nervous tissue and the like.

케라틴은 불용성 단백질로서 굉장히 안정한 구조를 하고 있다. 케라틴의 기능적 안정성과 생화학적 분해에 대한 저항성은 알파 헬릭스와 베타시트구조인 단백질사슬의 치밀한 구조와 시스테인끼리의이황화결합(disulfide)에 의한 것이다. 아주 분해되기 어렵지만바실러스리케니포미스(Bacillus licheniformis) 등 케라틴분해 미생물에 관한 보고가 있다. 케라틴소재로서 깃털이나 우모를 분해하는 미생물하는 미생물은 보고되어 있지만,생물학적인 분해가 매우 어려운 인모의 경우 인모를 분해하는 미생물은 여전히 연구 중이다.Keratin is an insoluble protein with a very stable structure. The functional stability of keratin and its resistance to biochemical degradation are due to the dense structure of the protein chains of alpha helical and beta-sheet structure and disulfide between cysteines. There is a report on keratinolytic microorganisms, such as Bacillus licheniformis, which is very difficult to decompose. Microorganisms that break down feathers or feathers as keratin materials have been reported, but microorganisms that degrade human hair are still under study in the case of human hair that is very difficult to biodegrade.

인모의 구조는 아미노산 사슬이 뭉쳐서 이룬 구조로 사슬간의 이황화결합으로 연결되어여러 사슬이 결속되고, 이결속이 재차 결속되어 미생물에 의한 분해가 어려운 구조를 하고 있고 이러한 코텍스 파이버(cortex fiber) 위에 갑옷같은 큐티클(cuticle)층이 있어 분해를 더욱 어렵게 만드는 것으로 알려져 있다.The structure of the human hair is composed of a chain of amino acid chains, which is connected by disulfide bonds between the chains, which binds several chains, and is tightly bound by the microcrystals. there is a cuticle layer which is known to make decomposition more difficult.

따라서 현재 인모를 포함한 케라틴 처리 방법이 많이 연구되어 왔으며, 지금까지 케라틴 분해 미생물에 관한 연구는 우선적으로 자연계에서 케라틴 분해 미생물을 분리하는데 집중되어 왔다. 그 결과 분리된 균은 주로 구조단백질에 기생하는 균주로 이에 대해 피부의학 연구진에 의한 발표가 주를 이루어 왔다(Biotechnol. Bioproc.Eng. 9, 17-22, 2004;Sangali. S. et al., J. Appl. Microbiol.89, 735-743, 2000; Riffel. A. et al., Arch. Microbiol. 179,258-265, 2003).Therefore, keratin treatment methods including human hair have been studied extensively. Heretofore, keratinolytic microorganisms have been primarily focused on the separation of keratinolytic microorganisms from the natural world. As a result, the isolated bacteria are mainly parasitic strains of structural proteins, which have been reported by dermatologists (Biotechnol. Bioproc.Eng. 9, 17-22, 2004; Sangali, S. et al. J. Appl. Microbiol. 89, 735-743, 2000; Riffel, A. et al., Arch. Microbiol., 179, 258-265, 2003).

그러나 인모와 같은 생물학적인 분해가 어려운 난분해성 단백질을 분해하는 미생물에 대한 연구결과는 여전히 미미한 실정이다.However, the results of studies on microorganisms that decompose biodegradable proteins, such as human hair, are still insignificant.

미생물이용에 의한 털이나 깃털의 처리방법 (일본특허공개 2001-000956호)A method for treating hairs and feathers by using microorganisms (Japanese Patent Laid-Open No. 2001-000956)

(1) Yamamura, S., Morita, Y., Hasan, Q., Yokoyama, K., and Tamiya, E. (2002) Keratin degradation: a cooperative action of two enzymes from Stenotrophomonas sp. BiochemBiophys Res Commun. 294, 1138-1143。(2002) Keratin degradation: a cooperative action of two enzymes from Stenotrophomonas sp. (1) Yamamura, S., Morita, Y., Hasan, Q., Yokoyama, K. and Tamiya, Biochem Biophys Res Commun. 294, 1138-1143. (2) Biotechnol. Bioproc. Eng. 9, 17-22, 200(2) Biotechnol. Bioproc. Eng. 9, 17-22, 200 (3) J. Appl. Microbiol. 89, 735-743, 2000(3) J. Appl. Microbiol. 89, 735-743, 2000 (4) Arch Microbiol. 179,258-265, 2003(4) Arch Microbiol. 179, 258-265, 2003

본 발명에서는 불용성이면서 난분해성 단백질인 케라틴 소재 특히 인모를 생물학적으로 분해 할 수 있는 미생물을 분리하고, 상기 미생물을 이용한 인모의 효율적인 분해 방법을 제공하는데 목적이 있다.In the present invention, it is an object of the present invention to isolate keratin materials, especially insoluble and degradable proteins, particularly microorganisms capable of biologically degrading human hair, and to provide a method for efficiently degrading human hair using the microorganisms.

본 발명에서는 상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 난분해성 단백질인 케라틴 소재인 인모를 분해하는 미생물 및 이를 이용해 분해하는 방법을 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention provides a microorganism capable of degrading human hair, which is a non-degradable protein, keratin, and a method for degrading microorganisms using the same.

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 미생물은 호케라틴성 진균(keratinophilic fungi)인 크리소스포리움트로피쿰(Chrysosporiumtropicum)인 것을 특징으로 한다.According to a preferred embodiment of the present invention, the microorganism is characterized by being a keratinophilic fungi, Chrysosporium tropicum.

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 호케라틴성 진균(keratinophilic fungi)과 인모를 고체 배양 하는 단계;및 상기 고체배양물과바실러스속균주(Bacillus sp.)를 액체 배양하는 단계를 통하여 인모를 분해시키는 것을 특징으로 하는 미생물을 이용한 인모의 분해방법인 것을 특징으로 한다.According to a preferred embodiment of the present invention, there is provided a method for culturing a solid body comprising solid culturing keratinophilic fungi and human hair, and culturing the solid culture and Bacillus sp. Characterized in that it is a method for degrading human hair using microorganisms.

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 호케라틴성 진균이 크리소스포리움트로피쿰(Chrysosporiumtropicum)인 것을 특징으로 하는 미생물을 이용한 인모의 분해방법인 것을 특징으로 한다.According to a preferred embodiment of the present invention, there is provided a method for degrading human hair using a microorganism, wherein the phoca keratinous fungus is Chrysosporium tropicum.

발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 고체 배양은 인모를 유일한 탄소 원 및 질소 원으로 사용하는 고체배지를 사용하는 것을 특징으로 하는 미생물을 이용한 인모의 분해 방법인 것을 특징으로 한다.According to a preferred embodiment of the present invention, the solid culture is characterized by using a solid medium in which human hair is used as a sole carbon source and nitrogen source, and is a method of degrading human hair using microorganisms.

발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 액체 배양은 인모를 유일한 탄소 원 및 질소 원으로 사용하는 액체배지를 사용하는 것을 특징으로 하는 미생물을 이용한 방법인 것을 특징으로 한다.According to a preferred embodiment of the present invention, the liquid culture is a microorganism-based method characterized by using a liquid medium in which human hair is used as a sole carbon source and nitrogen source.

또한, 본 발명에서는 상기 균주를 이용한 유기 폐기물 분해 방법, 가금류 깃털을 분해하는 방법 및 사료, 비료를 가공하는 방법을 포함하는 것을 특징으로한다.The present invention also includes a method for decomposing organic wastes using the strain, a method for decomposing poultry feathers, and a method for processing feed and fertilizer.

본 발명은 난분해성 단백질인 케라틴 소재 특히 인모를 분해하는 미생물을 제공하고, 상기 미생물을 이용한 인모의 분해 방법에 관한 것이다. 본 발명의 미생물을 이용하여 인모뿐만 아니라 깃털이나 우모를 또한 분해 할 수 있어 미생물 분해를 통한 폐기 환경 오염물질을 줄일 수 있으며, 폐기되는 인모를 포함한 깃털이나 우모를 미생물 분해를 통한 가축의 사료나 유기질 비료의 생산 등 다양하게 활용될 수 있다. The present invention relates to a method for decomposing human erythropoietin protein keratin, in particular, a microorganism capable of degrading human hair, and a method for degrading human hair using the microorganism. By using the microorganism of the present invention, not only human hair but also feathers and hair follicles can be decomposed to reduce pollutants in the waste environment through degradation of microorganisms, and feathers or feces containing human beings, Fertilizer production, and so on.

도 1은 인모를 유일 탄소원 및 질소원으로 사용하는 배지에서의 미생물성장 및 갈색 색소의 형성을 나타낸다.
도 2는 인모가 분해되는 시료에서 분리된 곰팡이(A,B) 및 세균(C)를 나타낸다.
도 3의 (A)는 인모를 분해 하는 시료에서 분수 분리된 곰팡이를, (B)는 분수 분리된 세균을 나타낸다.
도 4는 동정된 인모 분해 미생물의18S RNA 염기서열을 나타낸다.
도 5는 분리된 인모 분해 미생물 균주(A;곰팡이, B,C;세균)의 스킴 밀크 고체배지에서의 단백질 활성을 나타낸다.
도 6은 인모를 유일 탄소원 및 질소원으로 사용하는 최소 배지에서 크리소스포리움트로피쿰의 시간에 따른 인모 분해 양상을 나타낸다.
도 7은 인모를 유일 탄소원과질소원으로 사용하는 고체 배지에서의 크리소스포리움트로피쿰의 생육을 나타낸다.
도 8은 크리소스포리움트로피쿰이 자란 모발에 바실러스를 혼합배양 하였을 때의 모발 분해 양상을 나타낸다.
도 9는 인모에 인모 분해 미생물을 처리한 후의 전자현미경 관찰 결과를 나타낸다.
도 10의 (A)는 크리소스포리움트로피쿰처리 인모에서의 균사체 흔적을, (B)는 바실러스 처리 인모에서의 바실러스균체 흔적을 보이는 전자현미경 사진을 나타낸다.
도 11은 인모의 화학적 분해 결과를 나타낸다.
도 12는 오리털 분해 결과를 나타낸다.
Figure 1 shows the growth of microorganisms and the formation of brown pigments in media using humanoid as the sole carbon source and nitrogen source.
Fig. 2 shows fungi (A, B) and bacteria (C) isolated from a sample in which human hair is degraded.
Fig. 3 (A) shows the fungus separated by fractionation in the human skin degrading sample, and Fig. 3 (B) shows the fractionated bacteria.
Fig. 4 shows the 18S RNA base sequence of the identified human-degrading microorganism.
Figure 5 shows the activity of the isolated human degrading microorganism strain (A (fungal, B, C; bacteria) in skim milk solid medium.
Figure 6 shows the degradation pattern of chrysopholium tropacumum in terms of human degradation over time in minimal media using human hair as the sole carbon source and nitrogen source.
Figure 7 shows the growth of chrysosporium tropicum in solid media using human hair as the sole carbon source and nitrogen source.
FIG. 8 shows the breakdown of hair when mixed culture of bacillus was carried out on the hair grown by the creatine phosphate tropicum.
Fig. 9 shows electron microscopic observation results of human hair after treatment with humanoid degrading microorganism.
Fig. 10 (A) shows mycelium traces in the human chrysogenium tropicum treated bones, and Fig. 10 (B) shows electron micrographs showing bacillary cell traces in bacillus-treated human hair.
Figure 11 shows the chemical degradation result of human hair.
Fig. 12 shows the result of decomposing orifice.

이하에서 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described more specifically.

본 발명은 불용성이면서 난분해성 단백질인 캐라틴 소재 특히 인모의 생물학적 분해에 관한 것이다.The present invention relates to the biological degradation of carrageenan material, especially human hair, which is an insoluble and degradable protein.

케라틴은 불용성 단백질로서 굉장히 안정한 구조를 하고 있다. 케라틴의 기능적 안정성과 생화학적 분해에 대한 저항성은 알파 헬릭스와 베타시트구조인 단백질사슬의 치밀한 구조와 시스테인끼리의이황화결합(disulfide)에 의한 것이다. 아주 분해되기 어렵지만 바실러스리케니포미스(Bacillus licheniformis) 등 케라틴분해 미생물에 관한 보고가 있다. 케라틴소재로서 깃털이나 우모를 분해하는 미생물은 보고되어 있지만,생물학적인 분해가 매우 어려운 인모의 경우 인모를 분해하는 미생물은 여전히 연구 중이다.Keratin is an insoluble protein with a very stable structure. The functional stability of keratin and its resistance to biochemical degradation are due to the dense structure of the protein chains of alpha helical and beta-sheet structure and disulfide between cysteines. There is a report on keratinolytic microorganisms, such as Bacillus licheniformis, which is very difficult to decompose. Microorganisms that break down feathers or feathers have been reported as keratin, but microorganisms that degrade human beings are still being studied in the case of human beings with very difficult biological degradation.

인모의 구조는 아미노산 사슬이 뭉쳐서 이룬 구조로 사슬간의 이황화결합으로 연결되어여러 사슬이 결속되고, 이결속이 재차 결속되어 미생물에 의한 분해가 어려운 구조를 하고 있고 이러한 코텍스 파이버(cortex fiber) 위에 갑옷같은 큐티클(cuticle)층이 있어 분해를 더욱 어렵게 만드는 것으로 알려져 있다.The structure of the human hair is composed of a chain of amino acid chains, which is connected by disulfide bonds between the chains, which binds several chains, and is tightly bound by the microcrystals. there is a cuticle layer which is known to make decomposition more difficult.

보다 구체적으로는 토양으로부터 베이팅기술을 사용하여 동정한 인모 분해 미생물인 크리소스포리움트로피쿰(Chrysosporiumtropicum)균주, 상기 균주를 이용한 인모의 고체 배양 단계;및 상기 고체 배양물과바실러스균주를 액체 배양하는 단계를 통한 인모의 효율적인 분해 방법에 관한 것이다.More particularly, the present invention relates to a culture of Chrysosporium tropicum, which is a human degrading microorganism identified using a bioting technique from a soil, a solid culture step of human hair using the strain, and a step of culturing the solid culture and the Bacillus strain in a liquid culture To a method for efficiently degrading human hair.

본 발명의 인모 분해 방법은 인모를 포함한, 우모, 가금류의 깃털 등 난분해성캐라틴 소재의 효과적인 분해가 가능하여 의류용 세제, 식품, 사료, 비료, 천연 가죽의 가공, 유기 폐기물의 처리 등에 사용될 수 있다.The human degradation method of the present invention is capable of effectively decomposing degradable carrageenan materials including human hair, feathers of poultry and poultry, and can be used for processing detergents for clothes, foods, feeds, fertilizers, have.

본 발명에서는 불용성이면서 난분해성 단백질인 케라틴 소재 특히 인모를 생물학적으로 분해 할 수 있는 미생물을 분리하고, 상기 미생물을 이용한 인모의 효율적인 분해 방법을 제공할 수 있다.In the present invention, it is possible to isolate keratin materials, particularly insoluble and degradable proteins, particularly microorganisms capable of biologically degrading human hair, and provide a method for efficiently degrading human hair using the microorganisms.

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 미생물은 호케라틴성 진균(keratinophilic fungi)인 크리소스포리움트로피쿰(Chrysosporiumtropicum)인 것을 특징으로 한다.According to a preferred embodiment of the present invention, the microorganism is characterized by being a keratinophilic fungi, Chrysosporium tropicum.

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 호케라틴성 진균(keratinophilic fungi)과 인모를 고체 배양 하는 단계;및 상기 고체배양물과바실러스속균주(Bacillus sp.)를 액체 배양하는 단계를 통하여 인모를 분해시키는 것을 특징으로 하는 미생물을 이용한 인모의 분해 방법인 것을 특징으로 한다. According to a preferred embodiment of the present invention, there is provided a method for culturing a solid body comprising solid culturing keratinophilic fungi and human hair, and culturing the solid culture and Bacillus sp. Characterized in that it is a method for degrading human hair using microorganisms.

본 발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 호케라틴성 진균이 크리소스포리움트로피쿰(Chrysosporiumtropicum)인 것을 특징으로 하는 미생물을 이용한 인모의 분해 방법인 것을 특징으로 한다.According to a preferred embodiment of the present invention, there is provided a method for degrading human hair using a microorganism, wherein the phoca keratinous fungus is Chrysosporium tropicum.

발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 고체 배양은 인모를 유일한 탄소 원 및 질소 원으로 사용하는 고체배지를 사용하는 것을 특징으로 하는 미생물을 이용한 인모의 분해 방법인 것을 특징으로 한다.According to a preferred embodiment of the present invention, the solid culture is characterized by using a solid medium in which human hair is used as a sole carbon source and nitrogen source, and is a method of degrading human hair using microorganisms.

발명의 바람직한 실시예에 따르면, 상기 액체 배양은 인모를 유일한 탄소 원 및 질소 원으로 사용하는 액체배지를 사용하는 것을 특징으로 하는 미생물을 이용한 방법인 것을 특징으로 한다.According to a preferred embodiment of the present invention, the liquid culture is a microorganism-based method characterized by using a liquid medium in which human hair is used as a sole carbon source and nitrogen source.

또한, 본 발명에서는 상기 균주를 이용한 유기 폐기물 분해 방법, 가금류 깃털을 분해하는 방법 및 사료, 비료를 가공하는 방법을 포함하는 것을 특징으로한다.The present invention also includes a method for decomposing organic wastes using the strain, a method for decomposing poultry feathers, and a method for processing feed and fertilizer.

이하 실시예 및 비교예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Comparative Examples. However, the following examples are illustrative of the present invention, and the contents of the present invention are not limited to the following examples.

실험예Experimental Example 1: 토양으로부터  1: from the soil 인모Human 분해 미생물의 분리  Isolation of degrading microorganisms

본 발명에서는 인모 분해 미생물을 자연계에서 분리하기 위해서 베이팅(baiting)기술을 사용하였다. 인모를 닭을 매장하였던 토양과 혼합하여 놓아 두었을 때 인모의 분해가 관찰되는 시료를 미생물 분리 원으로 한다. In the present invention, a baiting technique was used to isolate human degrading microorganisms from the natural world. When the human hair is mixed with the soil from which the chicken is buried, the sample in which human hair is degraded is regarded as a microorganism separating source.

상기 베이팅 기술로 선정된 미생물 분리 원에서의 인모 분해 미생물의 분리를 위하여, 탄소원이나질소원이 없는 최소배지(표1)를 사용하고, 탄소원이나질소원으로 인모를 첨가한 후, 상기 미생물 분리 원인 토양을 소량 넣어 30°C에서 배양하면서 인모가 분해되는지 관찰하였다.In order to isolate the human degrading microorganisms from the microorganism isolates selected by the above-mentioned pasting technique, the minimum medium without carbon or nitrogen source (Table 1) was used, human hair was added with a carbon source or nitrogen source, Were incubated at 30 ° C to observe the degradation of human hair.

모발 분해 미생물 분리용 배지A medium for the separation of hair-decomposing microorganisms 성분ingredient 중량(g)Weight (g) NaClNaCl 0.50.5 KH2PO4 KH 2 PO 4 0.70.7 K2HPO4 K 2 HPO 4 1.41.4 MgSO4 MgSO 4 0.10.1 머리카락hair 5~105 to 10 증류수Distilled water 1000ml1000ml

약 2개월 배양하였을 때 미생물의 생육과 머리카락의 분해에 의하여 생성되는 멜라닌유래의 갈색 색소의 형성이 관찰 되었다(도 1).When cultured for about 2 months, formation of brown pigment derived from melanin, which is caused by growth of microorganisms and degradation of hair, was observed (Fig. 1).

상기 인모가 분해된 배양액을 계단희석(serial dilution)으로 희석액을 만든 후 고체의 완전 배지에 도말 하여 인모 분해 미생물을 분리하였다(도 2, 도3). 이때, 세균을 분리하기 위해서 LB 배지를, 진균의 분리를 이해서 PDA 배지를 사용하였다. The culture broth obtained by dissolving the human hair was subjected to serial dilution to prepare a diluted solution, and then plated on a complete solid medium to separate the human degrading microorganisms (FIGS. 2 and 3). At this time, in order to separate bacteria, LB medium was used and PDA medium was used for understanding the separation of fungi.

그 결과, 도 2에서 나타내어진 것과 같이 두 가지 종류(도 2 A,B)의 곰팡이 균과, 한가지 종류(도 2 C)의 세균을 확인 할 수 있었고, 이 결과를 바탕으로 동정한 결과 도 3에서 보여지는 것과 같이 곰팡이 균(도 3 A)과, 세균 (도3 B) 각각 한종을 동정하였다.As a result, as shown in Fig. 2, two kinds of fungi (Figs. 2A and 2B) and bacteria of one kind (Fig. 2C) could be identified. Based on these results, (Fig. 3A) and bacteria (Fig. 3B), respectively, as shown in Fig.

실험예Experimental Example 2: 토양으로부터  2: from the soil 인모Human 분해 미생물의 동정  Identification of degrading microorganisms

본 발명에서는상기 실험예 1에서 분리된 인모 분해 균주를 분자생물학적으로 18S RNA 시퀀싱(sequencing)을 통하여 염기서열을 분석한 결과 본 발명에서 동정한 미생물의 염기서열이 호케라틴성 진균(keratinophilic fungi)인 크리소스포리움트로피쿰(Chrysosporiumtropicum) 균주의 염기서열과 99% 일치하는 것을 확인 할 수 있었다(도 4).
In the present invention, the phosphorylase-degrading strains isolated in Experimental Example 1 were sequenced by 18S RNA sequencing to find that the nucleotide sequence of the microorganism identified in the present invention was keratinophilic fungi And 99% of the nucleotide sequence of the Chrysosporium tropicum strain (Fig. 4).

실험예Experimental Example 3:  3: 인모Human 분해 미생물의 단백질 분해 Proteolysis of degrading microorganisms

본 발명에서는 상기 실험예 1과 2에서 분리·동정된 인모 분해 미생물의 단백질 분해 능력을 알아보기 위하여 스킴밀크(skim milk)가 포함된 LB배지에서 미생물 배양을 통하여 확인하였다(도 5).In the present invention, the proteolytic ability of the human degrading microorganism isolated and identified in Experimental Examples 1 and 2 was confirmed by microbial culture in LB medium containing skim milk (FIG. 5).

그 결과, 실험예 1에서 분리한 미생물 3가지 종류모두 단백질 분해능력이 있는 것을 확인 할 수 있었다.
As a result, it was confirmed that all three kinds of microorganisms isolated in Experimental Example 1 were able to decompose proteins.

실시예Example 1: One: 크리소스포리움트로피쿰의한One of the chrysopholium tropicum 인모Human 분해 decomposition

본 발명에서는 상기 실험예 1과 2에서 분리·동정된 인모 분해 미생물(크리소스포리움트로피쿰(Chrysosporiumtropicum))을 인모를 유일한 탄소원 및 질소원으로 하는 액체배지에서 진탕 배양(도 6) 및페트리디쉬에서탄소원과질소원이 없는 최소배지를 이용하여 고체 배양(도7)을 통하여 인모 분해 능력을 알아보았다.In the present invention, the human-degrading microorganism (Chrysosporium tropicum) isolated and identified in Experimental Examples 1 and 2 was cultured in a shake culture (Fig. 6) and a petri dish in a liquid medium in which human hair was the only carbon source and nitrogen source The ability of degrading human hair through solid culture (Fig. 7) was examined using a minimal medium without carbon and nitrogen sources.

그 결과, 액체 배양의 경우 액에 담겨있는 모발보다 삼각플라스크의 측면에 붙어 있는 모발에서 먼저 분해가 나타나는 것이 관찰되었고, 나중에 배양액중의 모발이 분해 되는 것을 확인 할 수 있었고, 고체 배양하였을 경우 액체 배양의 경우보다 먼저 분해가 일어나는 것을 관찰 할 수 있었다.
As a result, in the case of liquid culture, it was observed that the hair decomposed first on the hair attached to the side of the Erlenmeyer flask rather than the hair contained in the liquid, and it was confirmed that the hair was decomposed later in the culture liquid. The decomposition was observed earlier than in the case of.

실시예2Example 2 :: 크리소스포리움트로피쿰과바실러스에Chrysosporium tropicum and Bacillus 의한  by 인모Human 분해 decomposition

본 발명에서는 상기 실시예 1에서 고체 배양한 인모가 액체 배양의 경우보다 먼저 분해 되는 것을 확인하고, 인모를 상기 동정된 미생물을 이용하여 고체 배양 후, 바실러스균주를 이용한 액체 배양을 하였을 때 인모의 분해 정도를 알아보았다.In the present invention, it was confirmed that the human hair cultured in solid state in Example 1 was degraded earlier than in the liquid culture, and when the human hair was solid-cultured using the identified microorganism and then cultured in liquid using Bacillus strain, I examined the degree.

그 결과,고체 배양만 하였을 때 보다 고체 배양후 액체 배양을 하였을 때 인모 분해가 더욱 원활히 나타나는 것을 확인 할 수 있었다(도 8).
As a result, it was confirmed that when the solid culture was performed and then the liquid culture was performed, the degradation of human hair was more smooth than that of solid culture (Fig. 8).

실시예Example 3:  3: 인모Human 분해 미생물에 의한  By decomposition microorganism 인모Human 분해 과정 Decomposition process

본 발명에서는 인모에 인모 분해 미생물 처리 전(비교예1), 크리소스포리움트로피쿰배양 모발(실시예 1), 크리소스포리움트로피쿰배양 후 바실러스 배양 모발(실시예 2) 시료를 전자현미경으로 관찰하여 보았다(도 9).In the present invention, samples of human hair before culturing with humanoid degrading microorganism (Comparative Example 1), cultivated with chrysosporium tropicum (Example 1), cultured with Bacillus tropicum after cultivation of chrysosporium tropicum (Example 2) (Fig. 9).

그 결과, 실시예 1에서 큐티클층이 완전히 분해되어 모발의 두께가 감소된 것을 확인 할 수 있었고, 실시예 2에서 케라틴 섬유의 번들이 해체되어 있음을 확인 할 수 있었고, 번들의 해체를 통하여 멜라닌이 해리되어 갈색이 되는 것으로 추정된다. 또한, 모발에 붙어 있는 미생물도 크리소스포리움트로피쿰과바실러스균주를 관찰 할 수 있었다(도 10).
As a result, it was confirmed that the cuticle layer was completely decomposed and the thickness of the hair was reduced in Example 1, and that the bundle of keratin fibers was disassembled in Example 2, and melanin It is assumed to be dissociated to become brown. Also, microorganisms attached to the hair were able to observe Chrysosporium tropicum and Bacillus strains (Fig. 10).

비교예Comparative Example 2:  2: 인모의Human 화학적 방법에 의한 분해 Decomposition by chemical method

본 발명에서는 인모의 화학적 방법에 의한 분해 정도를 확인 하기 위하여 인모를 알칼리와 산을 이용하여 분해 하여 보았다. 산으로는 황산과 염산을 알칼리로는KOH와 NaOH를 사용하였고, 농도는 0.1%, 0.3%, 1%, 3% 용액을 만들어 사용하였고 반응온도는 상온, 50°C, 80°C, 고온멸균기(autoclave)로 나누어 조사였다(도 11).In the present invention, in order to confirm the degree of degradation by the chemical method of human hair, human hair was decomposed using alkali and acid. Sulfuric acid and hydrochloric acid were used as acids and KOH and NaOH were used as alkali. Concentrations of 0.1%, 0.3%, 1% and 3% solutions were used and the reaction temperature was room temperature, 50 ° C, 80 ° C, (autoclave) (Fig. 11).

그 결과, 위 농도의 산으로 분해가 잘 되지 않았고, NaOH 3% 고온멸균 조건에서 가장 잘 분해되는 것을 확인할 수 있었다.
As a result, it was confirmed that the decomposition was not carried out with acid at the above concentration, and it was most decomposed under the conditions of 3% NaOH sterilization at high temperature.

비교예Comparative Example 3:미생물을 이용한 오리털의 분해 3: Degradation of Oriental Fur using microorganisms

본 발명에서는 본 발명의 미생물이 인모뿐만 아니라 다른 종류의 모발 또한 분해하는 것을 확인 하기 위하여, 오리털을 유일 탄소원 및 질소원으로 하는 최소배지에서 오리털을 분해 정도를 관찰하였다(도 12).In the present invention, in order to confirm that the microorganism of the present invention not only dissolves human hair but also other types of hair, the degree of degradation of Oriental flea was observed in a minimal medium consisting of a single carbon source and a nitrogen source (Fig. 12).

그 결과, 인모뿐만 아니라 오리털 도 잘 분해 하는 것을 확인 할 수 있었다.
As a result, it was confirmed that not only human hair but also duck hair was well decomposed.

Claims (9)

호케라틴성 진균(keratinophilic fungi)과 인모를 고체 배양하는 단계;및
상기 고체배양물과바실러스속균주(Bacillus sp.)를 액체 배양하는 단계;를포함하는, 인모의 분해방법.
Solid culturing keratinophilic fungi and human hair; and
Liquid culture of the solid culture and a strain of Bacillus sp. (Bacillus sp.).
제1항에 있어서,
상기 호케라틴성 진균이 크리소스포리움트로피쿰(Chrysosporiumtropicum)인 것을 특징으로 하는 인모의 분해방법.
The method according to claim 1,
Characterized in that the fokeretic fungus is Chrysosporium tropicum.
제1항에 있어서,
상기 고체 배양 단계에서 사용되는 고체 배지가인모를 유일한 탄소 원 및 질소 원으로 사용하는 것을 특징으로 하는 인모의 분해방법.
The method according to claim 1,
Wherein the solid medium used in said solid culture step is used as the only carbon source and nitrogen source.
제1항에 있어서, 상기 액체 배양에서 사용되는 액체 배지가 인모를 유일한 탄소 원 및 질소 원으로 사용하는 것을 특징으로 하는 인모의 분해 방법.2. The method of claim 1, wherein the liquid medium used in the liquid culture uses human hair as the sole source of carbon and nitrogen. 호케라틴성 진균(keratinophilic fungi)을 포함하는 인모 분해 미생물.
Human-degrading microorganisms including keratinophilic fungi.
제5항에 있어서,
상기 호케라틴성 진균(keratinophilic fungi)이 크리소스포리움트로피쿰(Chrysosporiumtropicum)인 것을 특징으로 하는 인모 분해 미생물.
6. The method of claim 5,
Characterized in that the keratinophilic fungi is Chrysosporium tropicum. ≪ RTI ID = 0.0 > 11. < / RTI >
제5항 또는 제6항의 인모 분해 미생물을 이용하여 유기 폐기물을 분해하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 유기 폐기물의 분해방법.
A method for decomposing organic wastes, comprising the step of decomposing organic wastes using the human-degrading microorganism of claim 5 or 6.
제5항 또는 제6항의 인모 분해 미생물을 이용하여 가금류 깃털을 분해하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 가금류 깃털의 분해방법.
A method for degrading poultry feathers, comprising the step of degrading poultry feathers using the human-degrading microorganism of claim 5 or 6.
제5항 또는 제6항의 인모 분해 미생물을 이용하여 사료,비료 또는 이들의 혼합물을 가공하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 가공방법.
A method for processing, comprising the step of processing a feed, a fertilizer or a mixture thereof using the human-degrading microorganism of claim 5 or 6.
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