KR20150114637A - Pharmaceutical Composition for Treating Gastric Cancer Comprising an Inhibitor for Gene Silencing of SerpinA1 - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 SerpinA1 유전자의 발현을 저해하는 저해제를 유효성분으로 포함하는 위암 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a pharmaceutical composition for the treatment of gastric cancer comprising an inhibitor which inhibits the expression of the SerpinA1 gene as an active ingredient.
위암(gastric cancer)은 전세계적으로 암 관련 질환에 대하여 사망률이 2, 3위를 차지할 정도로 사망률이 높은 암의 하나이다. 우리나라에서도 위암은 전체 암 발생의 두 번째를 차지한다. 위암의 대부분은 선암(adenocarcinoma)으로서 해부학적으로나 조직학적으로 특징이 다양하고, 환자의 임상적 경과도 다양하다. 위암의 검사수단은 위장 X-선 촬영과 위내시경과 같은 물리적인 것이 대부분이다. 또한 현재까지 진행되고 있는 위암의 최선의 치료는 외과적인 절제방법 밖에는 없다. 광범위한 절제로 인한 후유증과 항암제 투여에 따른 부작용이 야기되기도 한다. 따라서 위암을 치료할 수 있는 치료법의 개발이 필수적이다. 세린 프로테아제 저해제(Serine protease inhibitors, serpins)는 프로테아제 저해제(protease inhibitors)의 상과에 속하고, 세포외 물질(extracellular molecules)인 clade A와 intracellular serpins인 clade B로 분류된다(참조 J Biol Chem 2001, 276:33293 33296 및 Genome Biol 2006, 7:216). 세프린 페티다아제 저해제 클레이드 A 멤버 1(Serpin peptidase inhibitor clade A member 1, SerpinA1) 은 1-proteinase inhibitor 또는 1-antitrypsin(AAT)로도 알려져 있다. AAT의 발현증가가 폐암, 대장암, 편평상피세포암에서 전이의 불량한 예후와 관계가 있다고 보고되어 있다(참조 Br J Cancer 1992, 65:300-302, Int J Cancer 1990, 45:244-250 및 Am J Pathology 2011, 179:1110-1119). 또한 위암에서도 진행된 선암(well-differentiated adenocarcinoma)과 관련성이 있음이 확인되었다(참조 Hum Pathol 1984, 15:957-964).Gastric cancer is one of the most deadly cancers in the world, with a death rate of 2 or 3 for cancer-related diseases. Gastric cancer is the second most common cancer in Korea. Most of the gastric cancer is adenocarcinoma, which is anatomically and histologically distinctive, and the clinical course of the patient varies. Most gastrointestinal examination methods are physical such as gastrointestinal X-ray and gastroscopy. In addition, the best treatment for gastric cancer that has been going on so far is surgical resection. There are also side effects due to extensive resection and sequelae of anticancer drugs. Therefore, it is essential to develop a treatment that can treat gastric cancer. Serine protease inhibitors (serpins) belong to the superfamilies of protease inhibitors and are classified as extracellular molecules, clade A, and intracellular serpins, clade B (see J Biol Chem 2001, 276: 33293 33296 and Genome Biol 2006, 7: 216). Serpin peptidase inhibitor clade A member 1 (SerpinA1) is also known as 1-proteinase inhibitor or 1-antitrypsin (AAT). Increased expression of AAT has been reported to be associated with poor prognosis of metastases in lung, colon, and squamous cell carcinomas (see Br J Cancer 1992, 65: 300-302, Int J Cancer 1990, 45: 244-250 Am J Pathology 2011, 179: 1110-1119). It was also found to be associated with well-differentiated adenocarcinoma in stomach cancer (see Hum Pathol 1984, 15: 957-964).
따라서, 본 발명자들은 위암에서 SerpinA1의 발현과 중요한 임상적 특징과의 관계에 대해 분석하여, 위암세포에서 그 기능이 밝히고자 하였다. 이러한 암종에서 과발현 혹은 미발현되는 유전자를 동정하고 생물학적 기능을 밝히는 과정은 다양한 유전적 변화에 의해 이루어지는 위암의 발생 및 악성과정을 이해하는데 있어 중요하다.Therefore, the present inventors analyzed the relationship between SerpinA1 expression and important clinical features in stomach cancer and tried to clarify its function in stomach cancer cells. Identification of overexpressed or underexpressed genes in these carcinomas and identification of their biological functions is important in understanding the occurrence and malignant processes of gastric cancer caused by various genetic changes.
본 발명자들은 SerpinA1과 위암의 연관성을 확인하기 위하여 예의 연구노력하였다. 그 결과, 위암에서 SerpinA1의 과발현 여부와 환자의 임상병리학적 특징과의 연관성을 조사하였고, 이러한 결과를 기반으로 SerpinA1 유전자 또는 SerpinA1 단백질의 발현을 저해하는 저해제를 이용하여 위암세포에서 SerpinA1의 기능을 억제함으로써, 위암의 치료에 응용할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.The present inventors have sought to elucidate the relationship between SerpinA1 and gastric cancer. As a result, we investigated the relationship between the overexpression of SerpinA1 in gastric cancer and the clinicopathologic features of the patient. Based on these results, we investigated the inhibition of SerpinA1 function in gastric cancer cells by using inhibitors that inhibit the expression of SerpinA1 gene or SerpinA1 protein. Thus, the present invention can be applied to the treatment of gastric cancer.
따라서, 본 발명의 목적은 SerpinA1 유전자 또는 SerpinA1 단백질의 발현을 저해하는 저해제를 유효성분으로 포함하는 위암 개선 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for improving or treating gastric cancer, which comprises an inhibitor which inhibits expression of SerpinA1 gene or SerpinA1 protein as an active ingredient.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 SerpinA1 유전자 또는 SerpinA1 단백질의 발현을 저해하는 저해제를 유효성분으로 포함하는 위암 개선 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for improving or treating gastric cancer, comprising an inhibitor which inhibits the expression of SerpinA1 gene or SerpinA1 protein as an active ingredient.
또한, 본 발명은 개체의 위암치료 후, 상기 개체로부터 얻어진 생물학적 시료 내의 SerpinA1 유전자 또는 SerpinA1 단백질의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는 위암의 치료 효과에 대한 정보 제공방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for providing information on the therapeutic effect of gastric cancer, comprising the step of measuring the expression level of SerpinA1 gene or SerpinA1 protein in a biological sample obtained from the subject after gastric cancer treatment of the subject.
또한, 본 발명은 개체의 위암치료 후, 상기 개체로부터 얻어진 생물학적 시료 내의 SerpinA1 유전자 또는 SerpinA1 단백질의 발현 수준을 측정하는 제제를 포함하는 위암의 치료 효과 확인용 진단 키트를 제공한다Further, the present invention provides a diagnostic kit for evaluating the therapeutic effect of gastric cancer, comprising an agent for measuring the expression level of SerpinA1 gene or SerpinA1 protein in a biological sample obtained from the subject after gastric cancer treatment of the subject
또한, 본 발명은 SerpinA1 유전자의 발현을 저해하는 저해제를 세포에 접촉시키는 단계를 포함하는 SerpinA1 유전자 또는 단백질의 발현 억제 방법을 제공한다.The present invention also provides a method of inhibiting the expression of SerpinA1 gene or protein, comprising the step of contacting the cell with an inhibitor which inhibits expression of the SerpinA1 gene.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 개체(subject)에게 투여하는 단계를 포함하는 위암 개선 또는 치료 방법을 제공한다.
The present invention also provides a method for improving or treating gastric cancer, comprising the step of administering the composition to a subject.
이하, 본 발명에 대하여 더욱 자세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 SerpinA1 유전자 또는 SerpinA1 단백질의 발현을 저해하는 저해제를 유효성분으로 포함하는 위암 개선 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.According to one aspect of the present invention, there is provided a pharmaceutical composition for improving or treating gastric cancer, which comprises, as an active ingredient, an inhibitor which inhibits the expression of SerpinA1 gene or SerpinA1 protein.
바람직하게는, 본 발명의 상기 SerpinA1 유전자는 서열번호 1의 염기서열로 구성되며, 상기 SerpinA1 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열로 구성된다.Preferably, the SerpinA1 gene of the present invention comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1, and the SerpinA1 protein comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2.
본 발명의 가장 큰 특징은 SerpinA1 유전자 또는 단백질의 발현을 억제하는 저해제를 세포 내로 도입시켜, SerpinA1 유전자의 발현을 특이적으로 억제하여 위암을 치료하는 효과를 갖는다는 것이다.The most important feature of the present invention is that the inhibitor which inhibits the expression of the SerpinA1 gene or protein is introduced into the cells to specifically inhibit the expression of the SerpinA1 gene and thus has an effect of treating gastric cancer.
본 명세서에서 사용되는 용어 "저해제"는 "억제제"와 동일한 의미이며, 특정 유전자 또는 단백질의 기능을 억제, 저하 또는 경감시킬 수 있는 어떠한 것도 포함한다. As used herein, the term "inhibitor " is synonymous with an" inhibitor ", and includes anything capable of inhibiting, reducing or alleviating the function of a particular gene or protein.
바람직하게는, 본 발명의 저해제는 SerpinA1 유전자의 mRNA에 상보적으로 결합하는 siRNA(short interfering RNA), shRNA(short hairpin RNA), miRNA(microRNA), 리보자임(ribozyme), DNAzyme, PNA(peptide nucleic acids), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 펩타이드(peptide), 항체 및 앱타머로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상이며, 보다 바람직하게는 SerpinA1 유전자의 mRNA에 상보적으로 결합하는 siRNA(short interfering RNA), shRNA(short hairpin RNA) 및 miRNA(microRNA)로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상이고, 가장 바람직하게는 SerpinA1 유전자의 mRNA에 상보적으로 결합하는 siRNA(short interfering RNA)이다.Preferably, the inhibitor of the present invention comprises siRNA (short interfering RNA), shRNA (short hairpin RNA), miRNA (microRNA), ribozyme, DNAzyme, PNA (peptide nucleotide) complementary to mRNA of SerpinA1 gene an siRNA (short interfering RNA) that binds complementarily to the mRNA of the SerpinA1 gene, and more preferably at least one selected from the group consisting of an antisense oligonucleotide, an antisense oligonucleotide, a peptide, an antibody, and an aptamer, shRNA (short hairpin RNA), and miRNA (microRNA), and most preferably siRNA (short interfering RNA) that binds complementarily to mRNA of SerpinA1 gene.
본 명세서에서 사용되는 용어 "siRNA(short interfering RNA)"는 특정 mRNA의 절단(cleavage)을 통하여 RNAi(RNA interference) 현상을 유도할 수 있는 짧은 이중사슬 RNA를 의미한다. 표적유전자의 mRNA와 상동인 서열을 가지는 센스 RNA 가닥과 이와 상보적인 서열을 가지는 안티센스 RNA 가닥으로 구성된다. siRNA는 표적 유전자의 발현을 억제할 수 있기 때문에 효율적인 유전자 넉다운 방법으로서 또는, 유전자치료(gene therapy)의 방법으로 제공된다. As used herein, the term "siRNA (short interfering RNA)" refers to a short double-stranded RNA capable of inducing RNAi (RNA interference) through cleavage of a specific mRNA. A sense RNA strand having a sequence homologous to the mRNA of the target gene, and an antisense RNA strand having a complementary sequence. Since siRNA can inhibit expression of a target gene, it is provided as an efficient gene knockdown method or as a method of gene therapy.
siRNA는 RNA끼리 짝을 이루는 이중사슬 RNA 부분이 완전히 쌍을 이루는 것에 한정되지 않고 미스매치(대응하는 염기가 상보적이지 않음), 벌지(일방의 사슬에 대응하는 염기가 없음) 등에 의하여 쌍을 이루지 않는 부분이 포함될 수 있다. 전체 길이는 10 내지 100 염기, 바람직하게는 15 내지 80 염기, 더욱 바람직하게는 20 내지 70 염기이다. siRNA 말단 구조는 표적유전자의 발현을 RNAi 효과에 의하여 억제할 수 있는 것이면 평활(blunt)말단 혹은 점착(cohesive) 말단 모두 가능하다. 점착 말단 구조는 3 말단 돌출한 구조와 5 말단 쪽이 돌출한 구조 모두 가능하다. 돌출하는 염기 수는 한정되지 않는다. 예를 들어, 염기 수로는 1 내지 8 염기, 바람직하게는 2 내지 6 염기로 할 수 있다. 본 명세서에서 siRNA의 전장은, 중앙의 이중사슬 부분의 길이와 양 말단의 단일사슬 돌출을 구성하는 길이의 합으로 나타내었다. 또한, siRNA는 표적유전자의 발현억제 효과를 유지할 수 있는 범위에서 예를 들어, 한 쪽 말단의 돌출 부분에 저분자 RNA(예를 들어, tRNA, rRNA, 바이러스 RNA와 같은 천연의 RNA분자 또는 인공의 RNA분자)를 포함할 수 있다. siRNA 말단구조는 양측 모두 절단 구조를 가질 필요는 없고, 이중사슬 RNA의 일방의 말단 부위가 링커 RNA에 의하여 접속된 스템 루프형 구조일 수도 있다. 링커의 길이는 스템 부분의 쌍을 이루는 데 지장이 없는 길이면 특별히 한정되지 않는다. The siRNA is not limited to a complete pair of double-stranded RNA portions that are paired with each other, but is paired by a mismatch (the corresponding base is not complementary), a bulge (no base corresponding to one chain) May be included. The total length is 10 to 100 bases, preferably 15 to 80 bases, more preferably 20 to 70 bases. The siRNA terminal structure is capable of blunt or cohesive termini as long as it can inhibit the expression of the target gene by the RNAi effect. The sticky end structure can have both a 3-terminal protruding structure and a 5-terminal protruding structure. The number of protruding bases is not limited. For example, the base water may be from 1 to 8 bases, preferably from 2 to 6 bases. In the present specification, the total length of the siRNA is represented by the sum of the length of the central double-stranded portion and the length of the single-stranded protrusion at both ends. In addition, the siRNA may be added to a protruding portion at one end in a range that can maintain the effect of suppressing the expression of the target gene, for example, a small RNA (for example, natural RNA molecules such as tRNA, rRNA, Molecules). The siRNA terminal structure does not need to have a cleavage structure on both sides, and a stem loop structure in which one terminal region of double-stranded RNA is connected by linker RNA may be used. The length of the linker is not particularly limited as long as it does not interfere with the pairing of the stem portions.
본 명세서에서 사용되는 용어 "특이적"은 세포 내에서 다른 유전자에 영향을 미치지 않고 목적 유전자만 억제하는 능력을 의미하고, 본 발명에서는 SerpinA1 특이적이다. 본 발명의 siRNA는 SerpinA1 특이적으로 작동하도록 SerpinA1 mRNA와 상동인 서열을 포함하는 센스 RNA 가닥과 이와 상보적인 서열을 포함하는 안티센스 RNA 가닥을 가진다. As used herein, the term "specific" means the ability to suppress only the target gene without affecting other genes in the cell, and is specific for SerpinA1 in the present invention. The siRNA of the present invention has a sense RNA strand comprising a sequence homologous to SerpinA1 mRNA and an antisense RNA strand comprising a sequence complementary thereto to specifically function as SerpinA1.
본 명세서에서 사용되는 표현 "유전자 또는 단백질 발현의 저해" 란 목적 유전자에서 생성된 mRNA 및/또는 단백질의 수준이 제거 또는 감소된 것을 의미하고, 이는 mRNA의 절단(cleavage)을 통해 일어나는 RNA 간섭(RNA interference) 현상에 의한다.As used herein, the expression "inhibition of gene or protein expression" means that the level of mRNA and / or protein produced in a gene of interest is eliminated or reduced, which means that RNA interference (RNA interference phenomenon.
siRNA를 제조하는 방법은 시험관에서 siRNA를 직접 합성한 뒤, 형질전환(transfection) 과정을 거쳐 세포 안으로 도입시키는 방법과 siRNA가 세포 안에서 발현되도록 제조된 siRNA 발현 벡터 또는 PCR-derived siRNA 발현 카세트를 세포안으로 형질전환 또는 감염(infection) 시키는 방법이 있다. siRNA를 제조하고 세포 또는 동물로 도입하는 방법의 결정은 실험의 목적 및 표적 유전자 산물의 세포 생물학적 기능에 따라 달라질 수 있다. Methods for preparing siRNA include direct synthesis of siRNA in a test tube, transfection into a cell, and introduction of siRNA expression vector or PCR-derived siRNA expression cassette into a cell Transformation, or infection. The determination of how to prepare siRNA and introduce it into a cell or animal may depend on the purpose of the experiment and the cellular biological function of the target gene product.
또한, 본 발명의 siRNA는 SerpinA1 mRNA를 특이적으로 감소시킬 수 있는 한, 서열과 길이는 특별히 제한되지 않으며, 본 발명의 실시예에서는 상업적인 siRNA를 이용하였으며, siRNA가 세포내 SerpinA1의 세포 내 수준을 감소시키고 암세포의 침윤 및 이동성을 감소시켰음을 확인하였다. 따라서, SerpinA1의 발현수준을 감소시키는 저해제인 siRNA를 유효성분으로 이용하여 위암을 치료 또는 개선할 수 있다.In addition, as long as the siRNA of the present invention can specifically reduce the SerpinA1 mRNA, the sequence and the length are not particularly limited. In the examples of the present invention, the commercial siRNA was used, and the intracellular level of the intracellular SerpinA1 And decreased invasion and mobility of cancer cells. Therefore, siRNA, which is an inhibitor for decreasing the expression level of SerpinA1, can be used as an active ingredient to treat or improve gastric cancer.
본 발명의 조성물은 약학적으로 허용 가능한 희석제, 부형제 또는 담체를 추가로 포함할 수 있다.The composition of the present invention may further comprise a pharmaceutically acceptable diluent, excipient or carrier.
상기 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.Such carriers are those conventionally used in the field of the present invention and include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, gelatin, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone , Cellulose, water, syrup, methylcellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil, and the like. The pharmaceutical composition of the present invention may further contain a lubricant, a wetting agent, a sweetening agent, a flavoring agent, an emulsifying agent, a suspending agent, a preservative, etc., in addition to the above components. Suitable pharmaceutically acceptable carriers and formulations are described in detail in Remington ' s Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995).
본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 바람직하게는 비경구 투여이고, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입, 피하 주입, 국소 주입, 근육 주입 등으로 투여할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally, preferably parenterally, and in the case of parenteral administration, it can be administered by intravenous injection, subcutaneous injection, local injection, muscle injection or the like.
본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 한편, 본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 바람직하게는 1일 당 0.0001-100 mg/kg(체중)이다.The appropriate dosage of the pharmaceutical composition of the present invention may vary depending on factors such as the formulation method, administration method, age, body weight, sex, pathological condition, food, administration time, route of administration, excretion rate, . On the other hand, the dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is preferably 0.0001-100 mg / kg (body weight) per day.
본 발명의 약학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may be formulated into a unit dosage form by using a pharmaceutically acceptable carrier and / or excipient according to a method which can be easily carried out by those having ordinary skill in the art to which the present invention belongs. Or by intrusion into a multi-dose container. The formulations may be in the form of solutions, suspensions or emulsions in oils or aqueous media, or in the form of excipients, powders, granules, tablets or capsules, and may additionally contain dispersing or stabilizing agents.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 개체의 위암치료 후, 상기 개체로부터 얻어진 생물학적 시료 내의 SerpinA1 유전자 또는 SerpinA1 단백질의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는 위암의 치료 효과에 대한 정보 제공방법을 제공한다.According to another aspect of the present invention, there is provided a method for providing information on the therapeutic effect of gastric cancer, comprising the step of measuring the expression level of SerpinA1 gene or SerpinA1 protein in a biological sample obtained from the subject after gastric cancer treatment of the subject do.
상기 방법은 개체의 위암치료 후 SerpinA1의 발현 수준을 측정한 것을 치료 전의 발현 수준 측정값과 비교하는 단계를 더 포함할 수 있다.The method may further comprise comparing the level of expression of SerpinA1 to the level of expression level of the subject prior to the treatment of gastric cancer.
개체의 위암치료 후, 상기 개체로부터 얻어진 생물학적 시료 내의 SerpinA1 유전자 및/또는 SerpinA1 단백질의 발현 수준이 치료 전의 발현 수준보다 감소하면, 위암의 활성이 감소된 것으로 판단하며 이로써 임의의 치료 요법의 반응 경과를 확인할 수 있다.When the expression level of the SerpinA1 gene and / or the SerpinA1 protein in the biological sample obtained from the subject after the gastric cancer treatment of the individual is lower than the expression level before the treatment, the activity of the gastric cancer is judged to be decreased, Can be confirmed.
본 발명에서 SerpinA1 유전자의 발현 수준 변화의 측정은 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 실시될 수 있다. 또한, 본 발명에서 SerpinA1 단백질의 발현 수준 변화의 측정은 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 실시될 수 있다.In the present invention, the measurement of the level of expression of the SerpinA1 gene can be performed through various methods known in the art. In addition, the measurement of the level of expression of SerpinA1 protein in the present invention can be carried out through various methods known in the art.
본 발명의 방법은 상술한 SerpinA1의 발현 수준을 분석하는 과정을 포함하기 때문에, 상술한 본 발명의 조성물과 중복된 내용은 중복된 내용의 기재에 의한 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여 그 기재를 생략한다.
Since the method of the present invention includes a step of analyzing the expression level of SerpinA1 described above, the contents overlapping with the composition of the present invention described above are omitted in order to avoid the excessive complexity of the present invention by the description of the overlapping contents. do.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 개체의 위암치료 후, 상기 개체로부터 얻어진 생물학적 시료 내의 SerpinA1 유전자 또는 SerpinA1 단백질의 발현 수준을 측정하는 제제를 포함하는 위암의 치료 효과 확인용 진단 키트를 제공한다.According to another aspect of the present invention, there is provided a diagnostic kit for evaluating the therapeutic effect of gastric cancer comprising an agent for measuring the expression level of SerpinA1 gene or SerpinA1 protein in a biological sample obtained from the subject after gastric cancer treatment of the subject .
본 발명의 키트는 상술한 SerpinA1의 발현 수준을 측정하는 제제를 포함하기 때문에, 상술한 본 발명의 조성물과 중복된 내용은 중복된 내용의 기재에 의한 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여 그 기재를 생략한다.
Since the kit of the present invention includes the agent for measuring the expression level of SerpinA1 described above, the content of the present invention and the duplicated contents of the present invention are omitted in order to avoid the excessive complexity of the present invention by the description of the overlapping contents. do.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 SerpinA1 유전자의 발현을 저해하는 저해제를 세포에 접촉시키는 단계를 포함하는 SerpinA1 유전자 또는 단백질의 발현 억제 방법을 제공한다.According to another aspect of the present invention, there is provided a method of inhibiting the expression of SerpinA1 gene or protein, comprising the step of contacting the cell with an inhibitor which inhibits expression of the SerpinA1 gene.
바람직하게는, 본 발명의 저해제는 SerpinA1 유전자의 mRNA에 상보적으로 결합하는 siRNA(short interfering RNA), shRNA(short hairpin RNA), miRNA(microRNA), 리보자임(ribozyme), DNAzyme, PNA(peptide nucleic acids), 안티센스 올리고뉴클레오타이드(antisense oligonucleotide), 펩타이드(peptide), 항체 및 앱타머로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상이며, 보다 바람직하게는 SerpinA1 유전자의 mRNA에 상보적으로 결합하는 siRNA(short interfering RNA), shRNA(short hairpin RNA) 및 miRNA(microRNA)로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상이고, 가장 바람직하게는 SerpinA1 유전자의 mRNA에 상보적으로 결합하는 siRNA(short interfering RNA)이다.Preferably, the inhibitor of the present invention comprises siRNA (short interfering RNA), shRNA (short hairpin RNA), miRNA (microRNA), ribozyme, DNAzyme, PNA (peptide nucleotide) complementary to mRNA of SerpinA1 gene an siRNA (short interfering RNA) that binds complementarily to the mRNA of the SerpinA1 gene, and more preferably at least one selected from the group consisting of an antisense oligonucleotide, an antisense oligonucleotide, a peptide, an antibody, and an aptamer, shRNA (short hairpin RNA), and miRNA (microRNA), and most preferably siRNA (short interfering RNA) that binds complementarily to mRNA of SerpinA1 gene.
상기 siRNA는 SerpinA1 유전자의 mRNA 수준을 세포에서 70% 이상, 바람직하게는 80% 이상, 가장 바람직하게는 90% 이상 감소시킨다.The siRNA reduces the mRNA level of the SerpinA1 gene by at least 70%, preferably at least 80% and most preferably at least 90% in the cells.
본 발명의 방법은 상술한 SerpinA1의 발현 수준을 저해하는 저해제를 포함하기 때문에, 상술한 본 발명의 조성물과 중복된 내용은 중복된 내용의 기재에 의한 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여 그 기재를 생략한다.
Since the method of the present invention includes an inhibitor that inhibits the expression level of SerpinA1 described above, redundant contents of the above-described composition of the present invention are omitted in order to avoid the excessive complexity of the present invention by the description of the overlapping contents. do.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 조성물을 개체(subject)에게 투여하는 단계를 포함하는 위암 개선 또는 치료 방법을 제공한다.According to another aspect of the present invention, the present invention provides a method of improving or treating gastric cancer comprising the step of administering the composition to a subject.
본 발명의 방법은 상술한 SerpinA1의 발현 수준을 저해하는 저해제를 포함하는 조성물을 투여하기 때문에, 상술한 본 발명의 조성물과 중복된 내용은 중복된 내용의 기재에 의한 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여 그 기재를 생략한다.Since the method of the present invention administers a composition comprising an inhibitor that inhibits the expression level of SerpinA1 as described above, the overlap with the composition of the present invention described above can be used to avoid undue complexity The description thereof is omitted.
본 발명의 SerpinA1 유전자 또는 SerpinA1 단백질의 발현을 저해하는 저해제를 유효성분으로 포함하는 위암 개선 또는 치료제의 경우 위암 환자 조직에서 암세포의 침윤 및 이동성을 현저하게 감소시켜 위암의 개선 또는 치료에 효과적으로 적용될 수 있다.In the case of gastric cancer improving or treating agent containing an inhibitor which inhibits the expression of SerpinA1 gene or SerpinA1 protein of the present invention as an effective ingredient, the infiltration and mobility of cancer cells can be remarkably reduced in gastric cancer patient tissues, so that it can be effectively applied to the improvement or treatment of gastric cancer .
도 1은 SerpinA1 발현과 그에 따른 위암 환자(n=400)의 누적 생존 확률을 확인한 Kaplan-Meier 생존분석 결과를 보여준다.
도 2는 SerpinA1을 과발현 시킨 후 위암세포주의 침윤과 이동성을 확인한 결과를 보여준다.
도 3은 serpinA의 발현을 억제 시킨 후 위암세포주의 침윤과 이동성을 확인한 결과를 보여준다.Figure 1 shows the results of Kaplan-Meier survival analysis confirming SerpinA1 expression and the cumulative survival probability of gastric cancer patients (n = 400).
FIG. 2 shows the results of confirming the invasion and mobility of gastric cancer cell lines after overexpressing SerpinA1.
FIG. 3 shows the results of confirming the infiltration and mobility of gastric cancer cell lines after inhibiting the expression of serpinA.
이하, 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
It will be apparent to those skilled in the art that various modifications and variations can be made in the present invention without departing from the spirit or scope of the present invention as defined by the appended claims. It will be obvious to you.
실시예 1: SerpinA1 발현 여부 확인Example 1: Confirmation of Expression of SerpinA1
SerpinA1 발현 여부는 부산대학교병원에서 위암 진단하에 수술을 시행한 환자 400명의 조직에서 SerpinA1의 항체(HPA000927, Sigma-Aldrich)를 이용한 면역조직화학 염색법으로 조사하였다. 상기 면역조직화학 염색법은 당업계에 공지된 일반적인 방법을 이용하였다. 도 1a 내지 1d에 도시된 바와 같이, SerpinA1 발현은 negative(-), mide(+), moderate(++), marked(+++)으로 구분하고, 발현이 없거나 낮은 그룹 ((-), (+))과 발현이 높은 그룹 ((++), (+++))으로 분류하여 분석하였다. SerpinA1의 과발현 여부와 환자의 임상병리학적 특징과의 연관성은 SPSS10.1을 이용하여 chi square 검정과 Kaplan-Meier 생존분석을 하였으며, 통계학적 유의성은 p<0.05를 기준으로 하였다. 상기 결과는 표 1에 나타내었다.SerpinA1 expression was assessed by immunohistochemical staining using serpinA1 antibody (HPA000927, Sigma-Aldrich) in 400 tissues of patients undergoing gastric cancer diagnosis at Pusan National University Hospital. The immunohistochemical staining method was a general method known in the art. SerpinA1 expression is classified as negative (-), mide (+), moderate (++), marked (+++) +)) And high expression group ((++), (+++)). The correlation between SerpinA1 overexpression and the clinicopathologic features of the patients was analyzed using chi square test and Kaplan-Meier survival analysis using SPSS10.1. The statistical significance was based on p <0.05. The results are shown in Table 1.
상부
중부 location
Top
Central
12943
129
89(69.0)23 (53.5)
89 (69.0)
40(31.0)20 (46.5)
40 (31.0)
혼합형(Mixed)Diffuse
Mixed
4167
4
3(75.0)119 (71.3)
3 (75.0)
1(25.0)48 (28.7)
1 (25.0)
* 융기형+편평/함몰형 vs 함요형, * 위장관+혼합형 vs 확산형, *** T1 vs T2+T3+T4, **** N0 vs N1+N2+N3
* T1 + T2 + T3 + T4, **** N0 vs N1 + N2 + N3
면역조직화학염색 결과, 대상환자(n=400) 중 37.75%(151/400)에서 SerpinA1 과발현 소견이 관찰되었다(도 1). serpinA 과발현 그룹 환자들의 평균연령은 62.5±0.86세, 그렇지 않은 그룹은 58.2±0.72세로 serpinA의 과발현 여부와 환자의 평균연령은 통계적으로 유의하였다(p=0.003). SerpinA1 과발현 그룹의 암종의 크기는 5.27±0.24 cm, 그렇지 않은 그룹은 4.35±0.19 cm로 serpinA의 과발현 여부와 암종의 크기 또한 통계적으로 유의한 차이가 나타났다(p=0.003). 그러나, 환자의 성별 및 암의 위치에 따른 SerpinA1의 발현여부는 통계적으로 유의한 차이가 없었다. 병변 유형에 따라 융기형(47례, 51.6%)와 편평/함몰형(25례, 16.6%)에 비해 함요형(79례, 50.0%)에서 통계적으로 유의하게 SerpinA1이 과발현되었다(p<0.0001). 병리학적 유형에 따라 확산형(48례, 28.7%)에 비해 혼합형(1례, 25.0%)과 위장관형(102례, 44.5%)에서 통계적으로 유의한 SerpinA1의 발현 증가를 보였다(p=0.002). 침윤 깊이에 따른 결과는 T1(44례, 23.3%)에 비해 T2(29례, 47.5%), T3(36례, 56.2%)와 T4(42례, 48.8%)에서 SerpinA1이 유의하게 과발현되었다(p<0.0001). 신경 주위 침윤(Perineural invasion)은 음성(75례, 30.9%)에 비해 양성(76례, 48.4%)에서 SerpinA1이 과발현되었다(p<0.0001). 또한, 림프순환계 색전(lymphovascular emboli)은 음성(72례, 28.8%)에 비해 양성(79례, 52.7%)에서 SerpinA1이 과발현되었다(p<0.0001). 림프절 전이에 따라 N0(56례, 25.9%)에 비해 N1(22례, 40.0%), N2(37례, 59.7%)와 N3(36례, 53.7%)에서 SerpinA1의 발현이 증가되었다(p<0.0001). Immunohistochemical staining revealed SerpinA1 overexpression in 37.75% (151/400) of the patients (n = 400) (Fig. 1). The mean age of patients with serpinA overexpression was 62.5 ± 0.86 years and the group without serpinA overexpression was 58.2 ± 0.72 years (p = 0.003). SerpinA1 overexpression group was 5.27 ± 0.24 cm in size and 4.35 ± 0.19 cm in the other group. There was a statistically significant difference in overexpression of serpin A and carcinoma size (p = 0.003). However, there was no statistically significant difference in the expression of SerpinA1 according to the patient's sex and cancer location. SerpinA1 was overexpressed (79 cases, 50.0%) in the hymen type (47 cases, 51.6%) and flat / depressed type (25 cases, 16.6%) according to the lesion type (p <0.0001). SerpinA1 expression was statistically significant (p = 0.002) in mixed type (1 case, 25.0%) and gastrointestinal type (102 cases, 44.5%) compared with diffuse type (48 cases, 28.7% . SerpinA1 was significantly overexpressed in T2 (29 cases, 47.5%), T3 (36 cases, 56.2%) and T4 (42 cases, 48.8%) compared to T1 (44 cases, 23.3% p < 0.0001). Perineural invasion was overexpressed in SerpinA1 (76 cases, 48.4%) compared with negative (75 cases, 30.9%) (p <0.0001). SerpinA1 was also overexpressed in lymphovascular emboli (79 cases, 52.7%) compared with negative cases (72 cases, 28.8%) (p <0.0001). SerpinA1 expression was increased in N1 (22 cases, 40.0%), N2 (37 cases, 59.7%) and N3 (36 cases, 53.7%) compared with N0 (56 cases, 25.9%) according to lymph node metastasis (p < 0.0001).
또한, 생존분석에서 SerpinA1 발현 증가에 따라 환자군의 생존률이 짧은 것을 확인하였다(도 1 E). SerpinA1 발현에 따른 (-), (+), (++), (+++)그룹의 평균생존시간이 각각 75.58월, 72.20월, 63.88월, 61.64월로 유의하게 감소하였다(p=0.001).Also, survival analysis showed that the survival rate of the patient group was short with increasing SerpinA1 expression (Fig. 1E). The mean survival times of the (+), (++), and (+++) groups were significantly decreased to 75.58, 72.20, 63.88, and 61.64 months, respectively (p = 0.001).
요약하자면, 본 실험에서는 결과의 신뢰도를 높이기 위해 400명의 위암환자를 대상으로 하였고, 다양하고 중요한 임상병리학적 특징과 상관관계를 분석하였다. 환자의 평균연령이 높고, 암종의 크기가 큰 경우, 함요형, 혼합형 및 위장관형에서 SerpinA1이 과발현되었다. 또한 T1기의 위암보다 T2, T3, T4기의 위암에서 SerpinA1이 과발현되는 결과를 얻었다. 이것은 SerpinA1의 과발현이 위암의 병기에 특이적이라는 사실을 확인한 것이다. 또한, 신경주위 침윤이 있고, 림프순환계 색전이 양성이며, 림프절 변이가 있는 위암에서 SerpinA1 발현이 높은 빈도로 발현되는 것은 위암의 발생 및 진행에 영향을 미친다는 것을 나타낸다. 또한, SerpinA1의 발현과 5년 이상 생존률을 비교했을 때 SerpinA1 과발현된 환자의 생존률이 감소하는 것을 확인함으로써 SerpinA1이 위암의 진행에 있어 중요한 인자임을 확인하였다. In summary, 400 gastric cancer patients were included in this study in order to improve the reliability of the results, and correlations with various important clinicopathologic features were analyzed. SerpinA1 was overexpressed in habitus, mixed type, and gastrointestinal tract when the mean age of the patients was high and the size of the carcinoma was large. In addition, SerpinA1 was overexpressed in T2, T3, and T4 gastric cancers compared with T1 stomach cancer. This confirms that overexpression of SerpinA1 is specific to the stage of gastric cancer. In addition, high expression of SerpinA1 expression in gastric cancer with lymph node involvement, lymph node metastasis, and lymph node involvement is associated with the development and progression of gastric cancer. SerpinA1 was found to be an important factor in the progression of gastric cancer by comparing the survival rate of SerpinA1 with the survival rate of SerpinA1 over 5 years.
또한, 나라마다 다른 유전적, 환경적 특성이 질환에 반영되기 때문에 본 연구의 대상이 한국인이라는 점도 주목할 만 하다.
It is also noteworthy that the subject of this study is Korean because different genetic and environmental characteristics are reflected in diseases.
실시예 2: SerpinA1 기능 확인Example 2: Identification of SerpinA1 function
SerpinA1의 기능을 조사하기 위해 한국 세포주 은행으로부터 구입한 위암세포주 AGS와 MKN45에 SerpinA1 플라스미드 또는 siRNA를 각각 이용하여 serpinA를 과발현 또는 억제시켜 세포의 침윤과 이동성을 트랜스웰 어세이를 이용하여 비교하였다. To investigate SerpinA1 function, SerpinA was overexpressed or suppressed by using SerpinA1 plasmid or siRNA in gastric cancer cell lines AGS and MKN45 purchased from Korean Cell Line Bank, and cell invasion and mobility were compared using Transwell assay.
암세포 배양 후 상기 플라스미드, 또는 siRNA를 세포내 도입하여 24시간 시간 동안 배양하여 형질 전환하였다. 세포의 침윤성은 상용의 마이크로케모어트랙션 챔버(microchemoattraction chamber) (Corning, Life sciences, NY, USA)인 트랜스웰(Transwell)을 이용하여 시행하였다. 하부 웰에는 1% 소혈청이 포함된 배지를 분주하고 폴리카보네이트 막(polycarbonate membrane)이 부착된 인서트(insert)는 매트리겔(matrigel)로 코팅을 한 다음 배양접시 중간에 삽입하여 위쪽에 배양한 세포를 분주하고 막을 통과한 세포, 즉 침윤이 일어난 세포를 아래쪽에서 관찰한다. 아래 쪽에 이동이 일어난 세포의 수를 Hoechst로 핵염색하여 형광현미경으로 관찰하고 이미지를 저장하였다. 그 이미지를 이용하여 세포의 수를 세고 대조군에 대해 유의성을 계산하였다. 또한, 세포의 이동성은 마이크로케모어트랙션 챔버를 이용하여 시행하였다. 폴리카보네이트 막 위쪽에 배양한 세포를 분주한 후 막을 통과한 세포, 즉 이동이 일어난 세포를 아래쪽에서 관찰한다. 이동이 일어난 세포의 수를 Hoechst로 세포의 핵을 염색하여 세포의 수를 세었으며 대조군에 대해 유의성을 계산하였다.After the cancer cells were cultured, the plasmid or siRNA was introduced into the cells and cultured for 24 hours to transform them. Cell invasion was performed using Transwell, a commercially available microchemoattraction chamber (Corning, Life sciences, NY, USA). In the lower well, a medium containing 1% bovine serum was dispensed, and an insert with a polycarbonate membrane was coated with matrigel, then inserted into the middle of the culture dish, And the cells passing through the membrane, that is, cells infiltrating, are observed from below. The number of cells that migrated downward was nuclear stained with Hoechst and observed with a fluorescence microscope and images were saved. The number of cells was counted using the image and the significance was calculated for the control group. In addition, cell mobility was performed using a Micro-Chemo attraction chamber. Cells cultured above the polycarbonate membrane are dispensed, and cells passing through the membrane, that is, migrated cells, are observed from below. The number of cells that migrated was counted by Hoechst staining the nuclei of cells and the significance was calculated for the control group.
본 발명의 SerpinA1 유전자는 서열번호 1의 염기서열을 포함하며, SerpinA1 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함한다. The SerpinA1 gene of the present invention comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1, and the SerpinA1 protein comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2.
SerpinA1 cDNA 플라스미드(pCMV6-SerpinA1, Origene Technology Inc.)를 이용하여 SerpinA1을 과발현 시킨 후 위암세포주인 MKN45(도 2a 내지 2e)와 AGS (도 2f 내지 2j)의 침윤과 이동성을 확인하였다. 그 결과, 도 2에 도시된 바와 같이, SerpinA1의 cDNA 플라스미드(SerpinA1)와 대조군으로 플라스미드 벡터 (Vector)를 각각 위암세포주에 도입하고, 웨스턴 블롯팅(western blotting)으로 serpinA1의 과발현을 확인하였다(도 2a, MKN45 세포; 도 2f, AGS 세포). 막과 매트리겔을 통과한 세포수가 대조군에 비하여 SerpinA1이 과발현된 세포주에서 증가하는 것을 확인함으로써 SerpinA1의 발현 증가가 암세포의 이동(도 2b 및 2c, MKN45 세포; 도 2g 및 2h, AGS 세포)과 침윤(도 2d 및 2e, MKN45 세포; 도 2i 및 2j, AGS 세포)을 유의하게 증가시키는 것을 알 수 있었다. SerpinA1 was overexpressed using the SerpinA1 cDNA plasmid (pCMV6-SerpinA1, Origene Technology Inc.) to confirm the invasion and mobility of the gastric cancer cell line MKN45 (FIGS. 2A-2E) and AGS (FIGS. 2F-2J). As a result, as shown in Fig. 2, a serpinA1 cDNA plasmid (SerpinA1) and a control plasmid vector (Vector) were respectively introduced into a gastric cancer cell line and overexpression of serpinA1 was confirmed by western blotting 2a, MKN45 cells; Fig. 2f, AGS cells). The number of cells transfected with membrane and matrigel increased in the cell line overexpressing SerpinA1 as compared to the control group, indicating that the increase in SerpinA1 expression was due to the migration of cancer cells (Fig. 2b and 2c, MKN45 cells; Fig. 2g and 2h, AGS cells) (Fig. 2d and 2e, MKN45 cells; Figs. 2i and 2j, AGS cells).
또한, 본 발명에서 사용한 siRNA는 Dharmacon(Thermo Fisher Scientific Biosciences Inc.)에서 구입하였고, 서열들은 다음과 같다: 5'-GAACUCACCCACGAUAUCA-3', 5'-GAUGAAGCGUUUAGGCAUG-3', 5'-CCUAUGAUCUGAAGAGCGU-3', 및 5'-CCAAGAAACAGAUCAACGA-3'. The siRNAs used in the present invention were purchased from Dharmacon (Thermo Fisher Scientific Biosciences Inc.) and the sequences were as follows: 5'-GAACUCACCCACGAUAUCA-3 ', 5'-GAUGAAGCGUUUAGGCAUG-3', 5'-CCUAUGAUCUGAAGAGCGU- , And 5'-CCAAGAAACAGAUCAACGA-3 '.
상기 siRNA를 이용하여 serpinA의 발현을 억제 시킨 후 위암세포주인 MKN45(도 3a 내지 3e)와 AGS(도 3f 내지 3j)의 침윤과 이동성을 확인하였다. 그 결과, 도 3에 도시된 바와 같이, SerpinA1의 siRNA(si-SerpinA1)와 대조군으로 타겟하고자 하는 부분이 없는 non-targeted siRNA(si-NT)를 각각 위암세포주에 도입하고 웨스턴 블롯팅으로 serpinA1의 발현 억제가 이루어졌음을 확인하였다(도 3a, MKN45 세포; 도 3f, AGS 세포). 과발현시킨 경우와 달리, 막과 매트리겔을 통과한 세포수가 대조군에 비하여 SerpinA1의 발현이 억제된 세포주에서 감소하는 것을 확인함으로써 SerpinA1의 발현 억제가 암세포의 이동(도 3b 및 3c, MKN45 세포; 도 3g 및 3h, AGS 세포)과 침윤(도 3d 및 3e, MKN45 세포; 도 3i 및 3j, AGS 세포)을 유의하게 감소시키는 것을 알 수 있었다.After the expression of serpinA was inhibited by using the siRNA, infiltration and mobility of the gastric cancer cell line MKN45 (FIGS. 3A to 3E) and AGS (FIGS. 3F to 3J) were confirmed. As a result, as shown in Fig. 3, non-targeted siRNA (si-NT) without SerpinA1 siRNA (si-SerpinA1) and a target to be targeted as a control group were respectively introduced into the gastric cancer cell line and seropinA1 (Fig. 3A, MKN45 cells; Fig. 3F, AGS cells). In contrast to the overexpression, it was confirmed that the number of cells passing through the membrane and the matrigel decreased in the cell line in which the expression of SerpinA1 was suppressed compared to that in the control, so that the suppression of SerpinA1 expression was inhibited by the migration of cancer cells (Fig. 3b and 3c, MKN45 cells; And 3h, AGS cells) (Figs. 3d and 3e, MKN45 cells; Figs. 3i and 3j, AGS cells).
따라서 SerpinA1이 위암세포의 침윤과 이동에 중요한 역할을 한다는 것을 알 수 있다. 이는 SerpinA1이 암세포의 이동성 및 전이를 촉진함으로써 위암의 발생과 진행에 영향을 미칠 수 있다는 것을 나타내고 SerpinA1 유전자가 암 치료 타겟으로 활용 가능함을 제시하는 것이다.Therefore, it can be seen that SerpinA1 plays an important role in gastric cancer cell invasion and migration. This suggests that SerpinA1 can affect the development and progression of gastric cancer by promoting mobility and metastasis of cancer cells, suggesting that SerpinA1 gene can be used as a cancer treatment target.
<110> Pusan National University Industry-University Cooperation Foundation <120> Pharmaceutical Composition for Treating Gastric Cancer Comprising an Inhibitor for Gene Silencing of SerpinA1 <130> pusan1.178p <160> 6 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1254 <212> DNA <213> Homo sapiens SerpinA1 mRNA <400> 1 atgccgtctt ctgtctcgtg gggcatcctc ctgctggcag gcctgtgctg cctggtccct 60 gtctccctgg ctgaggatcc ccagggagat gctgcccaga agacagatac atcccaccat 120 gatcaggatc acccaacctt caacaagatc acccccaacc tggctgagtt cgccttcagc 180 ctataccgcc agctggcaca ccagtccaac agcaccaata tcttcttctc cccagtgagc 240 atcgctacag cctttgcaat gctctccctg gggaccaagg ctgacactca cgatgaaatc 300 ctggagggcc tgaatttcaa cctcacggag attccggagg ctcagatcca tgaaggcttc 360 caggaactcc tccgtaccct caaccagcca gacagccagc tccagctgac caccggcaat 420 ggcttgttcc tcagcgaggg cctgaagcta gtggataagt ttttggagga tgttaaaaag 480 ttgtaccact cagaagcctt cactgtcaac ttcggggaca ccgaagaggc caagaaacag 540 atcaacgatt acgtggagaa gggtactcaa gggaaaattg tggatttggt 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| CN110114463A (en) * | 2016-11-23 | 2019-08-09 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | Silk amino acid protease inhibitors A1 iRNA composition and its application method |
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2014
- 2014-04-01 KR KR1020140038834A patent/KR20150114637A/en not_active Application Discontinuation
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