KR20150031928A - DNA amplification using the non-contact radiant heating device - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 비접촉 가열식 유전자증폭장치에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 증폭할 유전자가 포함된 시료가 수용된 칩의 국부에 레이저를 조사하여, 레이저에 의해 조사된 복사열이 상기 칩의 인근에 구비된 열발산판에 흡수되며, 흡수된 복사열을 인근의 시료가 포함된 칩에 전달하여, 지정 국부의 위치에서 지정 온도로 유전자 증폭반응이 이루어나도록 하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치에 관한 것이다.
More particularly, the present invention relates to a non-contact heating type gene amplification apparatus, and more particularly, to a non-contact heating type gene amplification apparatus which irradiates a local portion of a chip containing a sample containing a gene to be amplified with a laser, Contact heating type gene amplification apparatus using radiant heat which is absorbed by a plate and transfers the absorbed radiant heat to a chip containing a nearby sample so that a gene amplification reaction is performed at a designated temperature at a specified local position.
최근 분자생물학이 비약적으로 발전함에 따라 종래의 항원-항체 반응이나 유기분자간 상호작용을 통하여 진단하는 것보다 유전자를 이용하여 진단하는 기술이 더욱 빠르게 발전하고 있다.Recently, as the molecular biology has developed remarkably, the technology for diagnosing using the gene has been developed more rapidly than the conventional diagnosis using the antigen-antibody reaction or the organic molecule interactions.
이러한 유전자 진단기술은 신속한 진단을 위하여 필요한 DNA를 복제, 증폭시켜야 하는데, 미국의 생화학자인 캐리 멀리스(Kary Mullis)가 DNA의 복제, 증폭을 위한 방법으로서 중합효소연쇄반응(PCR: Polymerase Chain Reaction)을 제안하였다.This genetic diagnosis technology needs to replicate and amplify the necessary DNA for rapid diagnosis. Kary Mullis, a biochemist in the United States, has developed polymerase chain reaction (PCR) as a method for DNA replication and amplification, .
상기 중합효소연쇄반응을 일으키기 위해서는 DNA를 해리(Denaturation), 어닐링(Annealing) 및 확장(Elongation)의 3단계가 필요하다.Three steps of DNA denaturation, annealing, and elongation are required to cause the polymerase chain reaction.
상기 해리, 어닐링 및 확장의 3단계는 상온보다 높은 온도를 유지해야 하기 때문에 열원이 반드시 구비되어야 한다.Since the three steps of dissociation, annealing and expansion must maintain a temperature higher than room temperature, a heat source must be provided.
상기 DNA를 가열하기 위한 열원으로는 열원과 시료챔버가 직접 접촉하는 접촉식과 열원과 직접 접촉하지 않는 비접촉식으로 나눌 수 있다.The heat source for heating the DNA can be divided into a contact type in which the heat source is in direct contact with the sample chamber and a non-contact type in which the heat source is not in direct contact.
여기서 접촉식은 열원으로 펠티어 소자 또는 저항열을 이용하는 히터 등이 사용되고 있으며, 비접촉식으로는 열원으로 근적외선, 원적외선, 열풍 및 마그네트론 등이 사용되고 있다.Here, a Peltier element or a heater using resistance heat is used as a heat source, and near infrared rays, far-infrared rays, hot wind, and magnetron are used as a heat source in a noncontact manner.
먼저 접촉식은 펠티어 소자나 저항소자로 이루어진 히팅블록에 시료챔버를 접촉시켜 시료챔버에 수용된 DNA를 간접적으로 가열하는 방식으로 열원인 히팅블록에서 DNA까지 열전달하는 데 별도의 시간이 소요되는 문제점이 있다.First, the contact type has a problem that the sample chamber is brought into contact with the heating block composed of the Peltier element or the resistance element, indirectly heating the DNA contained in the sample chamber, and thus it takes extra time to transfer heat from the heating block to the DNA.
한편 비접촉식은 시료챔버에 수용된 DNA를 열전달 매체의 접촉 없이 직접적으로 가열하도록 하는 방식으로 열풍을 이용할 경우 공기를 가열해야 하므로 열풍을 만들 수 있는 공간이 필요한 단점이 있고, 마그네트론의 경우 물의 공진 주파수에 해당하는 고주파를 발생시켜 대상물질을 가열하는데 이 경우 고속으로 대상물질을 가열할 수는 있으나 열원 주변에 공진 주파수에 영향을 미치는 금속재질을 사용할 수 없을뿐더러 열원 및 대상물질을 가열할 공간이 크게 소요되며 전자기파를 방출시키므로 인체에 해를 끼치는 단점이 있다.On the other hand, non-contact type is a method in which DNA stored in a sample chamber is directly heated without contacting with a heat transfer medium. In case of using hot air, there is a disadvantage that space for making hot air is required because air must be heated. In case of magnetron, In this case, it is possible to heat the target material at a high speed, but it is not possible to use a metal material which affects the resonance frequency around the heat source, and a space for heating the heat source and the target material is large There is a disadvantage that it harms the human body because it emits electromagnetic waves.
아울러 적외선을 이용하는 경우 고속으로 대상물을 목표온도까지 신속하게 가열할 수 있고 중간 열전달 매질 없이도 직접적으로 대상물을 가열할 수 있는 장점은 있지만 열원의 온도변화를 위한 시간이 필요하고 대부분의 재질에 적외선이 흡수되며 시료 또한 직접적으로 열을 흡수하기 때문에 작은 시료 부피에서는 급격한 온도 변화로 시료의 불안정성을 초래할 수 있다는 단점이 있다.In addition, when using infrared rays, it is possible to quickly heat the object to a target temperature at a high speed and directly heat the object without intermediate heat transfer medium. However, since it takes time to change the temperature of the heat source, And since the sample also directly absorbs heat, there is a disadvantage in that the sample may be instable due to a rapid temperature change in a small sample volume.
이러한 적외선을 이용하여 중합효소연쇄반응을 일으키는 유전자 고속 증폭장치의 선행기술은 미국특허공개 제2005/0287661호에 개시되어 있다. 상기 특허문헌에 기재된 증폭장치는 단일 열원을 사용하여 동일 챔버의 내부를 해리, 어닐링 및 확장에 해당하는 온도로 유지되도록 제어한다.Prior art of a gene high-speed amplification device that causes a polymerase chain reaction using such infrared rays is disclosed in U.S. Patent Publication No. 2005/0287661. The amplifying device described in the patent document controls the inside of the same chamber to be maintained at a temperature corresponding to dissociation, annealing and expansion using a single heat source.
하지만 이와 같은 종래기술에 따른 중합효소연쇄반응을 일으키기는 유전자 증폭장치는 주변의 다른 재질에도 적외선이 흡수 되므로 국소적인 가열이 힘들어 다른 시약에도 영향을 미칠 수가 있으며 대상물의 직접 가열 하므로 온도의 미세한 조절이 힘들어 초과 가열 (over shoot) 현상을 초래 할 수 있다는 문제점이 있다.
However, since the gene amplification apparatus which causes the polymerase chain reaction according to the conventional technology absorbs infrared rays to other materials around it, the local heating can be difficult to affect other reagents. Since the object is heated directly, There is a problem that it is difficult to over shoot.
본 발명은 증폭할 유전자가 포함된 시료가 수용된 칩의 국부에 레이저를 조사하여, 조사된 레이저에 의해 발산된 복사열이 상기 칩의 인근에 구비된 열발산판에 의해 흡수되면서 이 열을 다시 발산하여, 시료가 담긴 칩의 국부에 온도를 변화시켜 유전자(핵산) 증폭 반응시키는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치를 제공하는 것에 그 목적을 가진다.The present invention irradiates a local part of a chip containing a sample containing a gene to be amplified with a laser to radiate radiant heat radiated by the irradiated laser to the heat dissipating plate provided near the chip, , And a non-contact heating type gene amplification apparatus using radiant heat in which a gene (nucleic acid) amplification reaction is performed by changing the temperature of a local portion of a chip containing a sample.
또한 본 발명은 레이저를 조사하는 레이저모듈의 높이 및 레이저 출력을 제어하여 복사열의 온도가 조절되는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치를 제공하는 것에 그 목적을 가진다.
It is another object of the present invention to provide a non-contact heating type gene amplification apparatus using a radiant heat whose temperature is adjusted by controlling the height and the laser output of the laser module for irradiating the laser.
본 발명에 따른 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치는 증폭할 유전자가 포함된 시료를 수용하는 칩과, 시료를 수용한 상기 칩에 배치되고, 복사열을 흡수하여 흡수한 열을 시료로 재발산하는 열발산판과, 상기 칩을 지정위치에 안치하는 안치대와, 상기 안치대의 지정위치에 안치한 상기 칩의 국부에 지정파장 대역의 레이저를 조사하여 복사열을 발생하는 레이저모듈 및 상기 레이저모듈과 연결되고, 시료를 수용한 상기 칩의 국부 온도를 조절하는 메인제어부를 포함한다.The noncontact heating type gene amplification apparatus using radiant heat according to the present invention includes a chip for accommodating a sample containing a gene to be amplified, a column arranged in the chip for accommodating the sample, A laser module for generating radiant heat by irradiating a laser of a designated wavelength band to a local portion of the chip placed at a designated position of the bench, and a laser module connected to the laser module, And a main control unit for controlling a local temperature of the chip accommodating the sample.
이때 본 발명에 따른 상기 칩은 증폭할 유전자가 포함된 시료를 수용하는 수용부를 형성한다.At this time, the chip according to the present invention forms a receptacle for receiving a sample containing a gene to be amplified.
그리고 본 발명에 따른 상기 열발산판은 상기 칩의 하부 및 상부 또는 내부 중 어느 한 지정위치 또는 하나 이상의 지정위치 인근에 배치한다.The heat dissipating plate according to the present invention is disposed at any one of a lower position, an upper position, and an inner position of the chip or one or more designated positions.
이때 본 발명에 따른 상기 열발산판은 상기 칩의 국부에 열이 발산되도록, 전도성이 높은 금속재 또는 실리콘재 중 어느 하나의 재질로 이루어질 수 있다.At this time, the heat dissipating plate according to the present invention may be made of any one of a metal material having high conductivity or a silicon material so that heat is radiated to the local part of the chip.
또한 본 발명에 따른 상기 칩은 별도의 몸체에 삽입되어 가열되거나, 또는 상기 칩 자체를 가열하기 위해 상기 칩이 안치되는 안치대를 포함한다.Further, the chip according to the present invention includes a stand which is inserted into a separate body to be heated or to which the chip is placed to heat the chip itself.
이때 본 발명에 따른 상기 칩이 안치되는 안치대는 지정된 위치에 상기 칩을 고정하도록, 상기 칩의 형태와 상응하는 홈을 형성하여 상기 홈을 통해 상기 칩을 고정하는 지그(jig)를 더 포함할 수 있다.At this time, the cradle according to the present invention may further include a jig for fixing the chip through the groove by forming a groove corresponding to the shape of the chip so as to fix the chip at a designated position have.
또한 상기 지그(jig)는 상기 칩에 복사열이 전달되도록, 가열하는 상기 칩의 국부와 상응하는 위치 상의 국소부를 개방되거나, 또는 투명한 재질로 이루어질 수 있다.Also, the jig may be made of a transparent or open material so that radiant heat is transferred to the chip, and the local part on the position corresponding to the local part of the chip to be heated may be open or transparent.
그리고 본 발명에 따른 상기 레이저모듈은 상기 열발산판의 재질 및 시료의 종류에 따라 지정파장 대역의 레이저모듈이 선택적으로 장착한다.The laser module according to the present invention selectively mounts a laser module of a specified wavelength band according to the material of the heat dissipating plate and the type of the sample.
더불어 본 발명에 따른 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치는 상기 메인제어부와 연결되고, 시료의 온도를 실시간으로 측정할 수 있는 온도센서를 구비할 수 있다.In addition, the non-contact heating type gene amplification apparatus using radiant heat according to the present invention may include a temperature sensor connected to the main control unit and capable of measuring the temperature of the sample in real time.
이때 본 발명에 따른 상기 온도센서는 열전도대, 적외선 카메라, 온도 표시색소 및 색 관찰을 위한 카메라 중 어느 하나로 구성할 수 있다.At this time, the temperature sensor according to the present invention can be composed of any one of a thermal conduction band, an infrared camera, a temperature display pigment, and a camera for color observation.
그리고 본 발명에 따른 상기 메인제어부에는 상기 온도센서와 연결되어, 상기 온도센서에 의해 측정된 온도값을 토대로 한 상기 레이저모듈의 출력조건을 저장하는 메모리부를 포함한다.The main control unit according to the present invention includes a memory unit connected to the temperature sensor and storing an output condition of the laser module based on a temperature value measured by the temperature sensor.
이때 본 발명에 따른 상기 메모리부는 미리 저장된 상기 레이저모듈의 출력조건을 바탕으로 차후, 상기 온도센서와의 인가하는 온도값 없이 저장된 출력조건으로, 상기 메인제어부가 상기 레이저모듈의 출력을 제어한다.At this time, based on the output condition of the laser module previously stored, the memory unit controls the output of the laser module in an output condition stored without a temperature value to be applied to the temperature sensor.
그리고 본 발명에 따른 상기 메인제어부의 메모리부에 저장되는 출력조건은 상기 레이저모듈과 상기 칩 사이의 높이이다.The output condition stored in the memory unit of the main control unit according to the present invention is a height between the laser module and the chip.
이때 본 발명에 따른 상기 레이저모듈의 출력조건인 상기 레이저모듈의 높이를 변경하도록, 상기 메인제어부의 출력값에 따라 선택적으로 상기 레이저모듈 승강 또는 하강시키는 높이조절수단을 포함한다.And a height adjusting unit for selectively raising or lowering the laser module according to an output value of the main control unit to change the height of the laser module, which is an output condition of the laser module according to the present invention.
본 발명에 따른 상기 높이조절수단은 상기 안치대의 일측에 결합하는 지지블럭과, 상기 지지블럭에 고정되어, 상기 안치대와 직각을 이루고, 내부에는 승강구동부가 구비되는 가이드바와, 일측에는 상기 레이저모듈이 설치되고, 타측단은 상기 가이드바의 승강구동부와 연결되며, 상기 메인제어부 출력값에 의해 선택적으로 상기 가이드바를 따라 승강하는 승강블럭을 포함한다.The height adjusting means according to the present invention includes a support block coupled to one side of the stand, a guide bar fixed to the support block, the guide bar being perpendicular to the stand and having an elevation driving part therein, And the other end thereof is connected to the elevation driving part of the guide bar and is selectively moved up and down along the guide bar according to the output value of the main control part.
또한 상기 메인제어부의 메모리부에 저장되는 출력조건은 상기 레이저모듈의 레이저 출력이고, 상기 메인제어부의 출력값에 따라 선택적으로 레이저의 출력을 제어하는 레이저출력제어부를 포함할 수 있다.Also, the output condition stored in the memory unit of the main control unit may be a laser output of the laser module, and may include a laser output control unit for selectively controlling an output of the laser according to an output value of the main control unit.
이때 본 발명에 따른 상기 레이저출력제어부는 상기 레이저모듈과 상기 메인제어부와 연결되어, 상기 메인제어부의 출력값을 토대로 상기 레이저모듈로 제공되는 전원의 전압 또는 전류를 조절한다.
At this time, the laser output control unit according to the present invention is connected to the laser module and the main control unit, and controls a voltage or a current of a power supply provided to the laser module based on an output value of the main control unit.
본 발명에 따른 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치는 다음과 같은 효과를 가진다.The non-contact heating type gene amplification apparatus using radiant heat according to the present invention has the following effects.
첫째, 증폭할 유전자가 포함된 시료가 수용된 칩의 국부에 레이저를 조사하여, 조사된 레이저가 상기 칩의 하부에 구비된 열발산판에 의해 흡수되면서 열을 재발산하여, 그 열로 고속 및 안정성이 뛰어난 유전자(핵산) 증폭 반응시킬 수 있는 효과를 가진다.First, a laser is irradiated to a local part of a chip containing a sample to be amplified, and the irradiated laser is absorbed by the heat dissipating plate provided at the lower part of the chip to recapture the heat. It has an effect of amplifying an excellent gene (nucleic acid).
둘째, 시료가 수용된 칩의 전체가 아닌 지정 국부에만 가열하도록 하여 추후 상기의 칩이 다른 기능들을 가진 몸체에 일체화될 때 다른 부분에 보관된 시료의 안정성을 확보할 수 있는 효과를 가진다. Second, since the sample is heated only at a designated local portion rather than the entire chip, the stability of the sample stored in another portion can be ensured when the chip is later integrated with the body having other functions.
셋째, 본 발명은 레이저를 조사하는 레이저모듈의 높이 및 레이저 출력을 제어하여, 정확한 복사열의 온도가 조절이 가능한 효과를 가진다.
Third, the present invention has an effect that the temperature of the radiant heat can be controlled by controlling the height and the laser output of the laser module that irradiates the laser.
도 1은 본 발명에 따른 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치의 구성을 보인 예시도이다.
도 2는 본 발명의 구성에 따른 칩의 구성을 보인 예시도이다.
도 3은 본 발명의 구성에 따른 메인제어부의 구성을 보인 예시도이다.
도 4는 본 발명의 실시 예에 따른 설정 온도와, 레이저가 조사된 열발산판의 복사열 온도와, 실제 시료 용액의 온도를 측정한 결과를 보인 그래프이다.
도 5는 본 발명의 실시 예에 따른 결과물과 상용 증폭반응키트의 결과물을 젤-전기영동법으로 보인 사진이다.
도 6은 도 1은 본 발명에 따른 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치의 다른 구성예를 보인 예시도이다.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a diagram illustrating the configuration of a noncontact heating type gene amplification apparatus using radiant heat according to the present invention. FIG.
Fig. 2 is a diagram showing a configuration of a chip according to the configuration of the present invention. Fig.
3 is an exemplary diagram showing a configuration of a main control unit according to the configuration of the present invention.
4 is a graph showing the results of measuring the set temperature according to the embodiment of the present invention, the radiant heat temperature of the heat radiation plate irradiated with the laser, and the temperature of the actual sample solution.
FIG. 5 is a photograph showing the result of the present invention and the result of a commercial amplification reaction kit by gel electrophoresis. FIG.
FIG. 6 is an exemplary diagram showing another configuration example of a non-contact heating type gene amplification apparatus using radiant heat according to the present invention.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명에 따른 바람직한 실시 예를 상세히 설명하기로 한다. 이에 앞서, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여, 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. Prior to this, terms and words used in the present specification and claims should not be construed as limited to ordinary or dictionary terms, and the inventor should appropriately interpret the concepts of the terms appropriately The present invention should be construed in accordance with the meaning and concept consistent with the technical idea of the present invention.
따라서 본 명세서에 기재된 실시예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 실시 예에 불과할 뿐이고, 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들은 대체할 수 있는 균등한 변형 예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.Therefore, the embodiments described in the present specification and the configurations shown in the drawings are merely the most preferred embodiments of the present invention, and not all of the technical ideas of the present invention are described. Therefore, at the time of the present application, It should be understood that variations can be made.
도 1은 본 발명에 따른 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치의 구성을 보인 예시도이고, 도 2는 본 발명의 구성에 따른 칩의 구성을 보인 예시도이며, 도 3은 본 발명의 구성에 따른 메인제어부의 구성을 보인 예시도이고, 도 4는 본 발명의 실시 예에 따른 설정 온도와, 레이저가 조사된 열발산판의 복사열 온도와, 실제 시료 용액의 온도를 측정한 결과를 보인 그래프이며, 도 5는 본 발명의 실시 예에 따른 결과물과 상용 증폭반응키트의 결과물을 젤-전기영동법으로 보인 사진이다.FIG. 1 is a diagram illustrating a configuration of a noncontact heating type gene amplification apparatus using radiant heat according to the present invention, FIG. 2 is a diagram illustrating the configuration of a chip according to the configuration of the present invention, and FIG. FIG. 4 is a graph showing a result of measuring the set temperature according to the embodiment of the present invention, the radiant heat temperature of the heat radiation plate irradiated with the laser, and the temperature of the actual sample solution, FIG. 5 is a photograph showing the result of the present invention and the result of a commercial amplification reaction kit by gel electrophoresis. FIG.
본 발명은 증폭할 유전자가 포함된 시료가 수용된 칩의 국부에 레이저를 조사하여, 조사된 레이저가 상기 칩의 인근에 구비된 열발산판에 의해 흡수되면서 복사열을 발산하여, 지정 국부의 위치에서 지정 온도로 유전자 증폭반응이 이루어나도록 하는 것이 특징인 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치에 관한 것으로, 도면을 참조하여 더욱 상세하게 살펴보면 다음과 같다.The present invention irradiates a local part of a chip containing a sample containing the gene to be amplified with a laser to emit radiant heat while the irradiated laser is absorbed by the heat dissipating plate provided near the chip, Contact heating type gene amplification apparatus using radiant heat, which is characterized in that the gene amplification reaction is performed at a predetermined temperature, and more particularly, will be described in detail with reference to the drawings.
본 발명에 따른 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치는 칩(10), 안치대(20), 레이저모듈(30), 온도센서(31), 높이조절수단(40), 메인제어부(50)을 포함하는데, 먼저 증폭할 유전자가 포함된 시료를 수용하는 칩(10)을 도 1 및 도 2를 참조하여 살펴보면, 상기 칩(10)의 몸체는 레이저가 하부로 투과될 수 있도록, 투명한 재질로 구성하는 것이 바람직하고, 상기 칩(10)의 상부에는 증폭할 유전자가 포함된 시료를 수용하는 수용부(11)를 형성한다.The noncontact heating type gene amplification apparatus using radiant heat according to the present invention includes a
그리고 상기 칩(10)의 인근에는 레이저모듈(30)에서 국부적으로 조사된 레이저를 흡수하여 복사열을 발산하는 열발산판(12)을 구비하는데, 상기 열발산판(12)은 레이저를 흡수하여 복사열을 발산하도록 열전도성이 높은 금속재 또는 실리콘재로 구성하는 것이 바람직하다.And a
상기한 칩(10)에 레이저를 조사할 시 상기 칩(10)은 안치대(20)에 안치되어 레이저 조사가 실시되는데, 상기 안치대(20)는 판 상으로, 그 상면에 상기 칩(10)이 지정위치에 안치될 수 있도록, 지정위치를 표시할 수 있다.When the laser beam is irradiated onto the
또한 도 6에 도시한 바와 같이 상기 안치대(20)는 지정된 위치에 상기 칩(10)을 고정하도록, 상기 칩(10)의 형태와 상응하는 홈을 형성하여 상기 홈을 통해 상기 칩(10)을 고정하는 지그(21)를 더 포함할 수 있다.6, the
이때 상기 지그(21)는 상기 칩(10)에 복사열이 전달되도록, 가열하는 상기 칩(10)의 국부와 상응하는 위치 상의 국소부를 개방되거나, 또는 투명한 재질로 이루어진다. At this time, the jig 21 is made of a transparent or open material so that the radiant heat is transmitted to the
레이저는 상기 레이저모듈(30)에서 조사하는데, 상기 레이저모듈(30)은 상기 안치대(20)의 지정위치에 안치된 칩(10)의 상부에 위치하고, 상기 칩(10)의 전체가 아닌 한정된 국부에 지정파장 대역의 레이저를 조사한다. The laser is irradiated by the
이때 상기 레이저모듈(30)의 일측에는 온도센서(31)를 구비하는데, 상기 온도센서(31)는 상기 레이저모듈(30)에서 조사한 레이저가 닿는 상기 칩(10) 국부의 온도를 감지하여 그 값을 출력한다. At this time, a
상기 온도센서(31)로는 열전도대, 적외선 카메라, 온도 표시색소 및 색 관찰을 위한 카메라 중 어느 하나로 구성할 수 있다.The
또한 상기 안치대(20)에는 높이조절수단(40)을 결합하는데, 상기 높이조절수단(40)에는 상기 레이저모듈(30)이 장착되어, 상기 온도센서(31)의 출력값에 따라 선택적으로 상기 레이저모듈(30)의 높이를 조절하여, 국부의 온도를 제어한다.The height adjustment means 40 is provided with the
상기 높이조절수단(40)을 보다 상세하게 살펴보면, 상기 높이조절수단(40)은 상기 안치대(10)의 일측에 결합하는 지지블럭(41)을 구비하고, 상기 지지블럭(41)에는 가이드바(42)가 고정되어, 상기 안치대(10)와 직각을 이루고, 내부에는 승강구동부(43)를 구비한다.The height adjustment means 40 includes a
그리고 상기 가이드바(42)에는 승강블럭(44)이 연결되는데, 상기 승강블럭(44)의 일측에는 상기 레이저모듈(30)이 설치되고, 타측단은 상기 가이드바(42)의 승강구동부(43)와 연결되어, 상기 온도센서(31)에서 감지한 온도에 의해 선택적으로 상기 가이드바(42)를 따라 승강한다.An
이때 승강구동부(43)는 통상의 이송수단인 모터와 이송스크류 또는 이송벨트로 구성할 수 있다.At this time, the lifting
또한 상기 레이저모듈(30), 상기 온도센서(31), 상기 높이조절수단(40)의 승강구동부(43)는 메인제어부(50)와 전기적으로 연결되어, 상기 온도센서(31)에서 출력한 값을 토대로 상기 레이저모듈(30)의 출력을 조절하여, 온도제어가 이루어지고, 더불어 상기 온도센서(31)에서 출력한 값을 토대로 상기 높이조절수단(40)의 승강구동부(43)를 제어하여, 상기 레이저모듈(30)의 승강 높이를 조절하여, 온도제어가 이루어진다.The
그리고 상기 메인제어부(50)는 도 3에 도시한 바와 같이 마이컴(51), 높이조절제어부(52), 레이저출력제어부(53)를 포함하는데, 상기 마이컴(51)은 상기 온도센서(31)에서 출력한 측정 온도값을 받아 미리 키패드에 의해 입력된 설정 온도값과 비교 연산하여, 상기 연산된 비교값을 토대로 상기 높이조절제어부(52) 및 레이저출력제어부(53)로 제어신호를 인가한다.3, the
상기 높이조절제어부(52)는 상기 마이컴(51)에서 인가한 제어신호를 토대로 상기 승강구동부(43)를 구동시켜, 상기 레이저모듈(30)의 높이를 조절하여 상기 칩(10)의 열발산판(12)에서 발산되는 복사열의 온도를 제어한다.The height
상기 레이저출력제어부(53)는 상기 마이컴(51)에서 인가한 제어신호를 토대로 상기 레이저모듈(30)으로 공급되는 전원의 전압 및 전류를 조절하여, 상기 레이저모듈(30)에서 조사되는 레이저의 출력을 조절로, 상기 칩(10)의 열발산판(12)에서 발산되는 복사열의 온도를 제어한다.The laser
그리고 상기 메인제어부(50)에는 메모리부(54)가 더 포함되어, 선행된 온도 제어값이 저장되고, 사전 보정 작업을 통해 일정한 온도 프로파일을 구동 및 유지하여 반응을 진행할 수 있다. The
따라서 본 발명에 따른 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치는 상기 레이저모듈의 출력조건으로는 상기 레이저모듈의 높이 및 상기 레이저모듈의 레이저 출력인데, 상기 레이저모듈의 높이는 상기 메인제어부의 출력값에 따라 선택적으로 상기 레이저모듈 승강 또는 하강시키는 높이조절수단에 의해 출력조건이 변경되고, 상기 레이저모듈의 레이저 출력은 상기 메인제어부의 출력값을 토대로 상기 레이저모듈로 제공되는 전원의 전압 또는 전류를 조절하는 상기 레이저출력제어부에 의해 출력조건이 변경된다.Therefore, the output condition of the laser module is the height of the laser module and the laser output of the laser module, and the height of the laser module is selectively set according to the output value of the main control unit Wherein the output condition of the laser module is changed by a height adjusting means for raising or lowering the laser module and the laser output of the laser module is controlled by the laser output control unit for adjusting the voltage or current of the power supply provided to the laser module based on the output value of the main control unit. The output condition is changed.
이러한 출력조건은 최소 1회를 실시한 후 상기 메인제어부에 포함된 메모리부에 저장되고, 상기 열발산판 및 시료가 변경되지 않는 차후에 실시되는 유전자증폭에서는 상기 온도센서와의 인가하는 온도값 없이 상기 메모리부에 저장된 출력조건으로, 상기 메인제어부가 상기 레이저모듈의 출력을 제어할 수 있다.
The output condition is stored at least once in the memory unit included in the main control unit, and in the subsequent gene amplification in which the heat dissipation plate and the sample are not changed, The main control unit can control the output of the laser module.
본 발명에 따른 실시 예를 살펴보면, 먼저 유전자(핵산) 증폭 반응은 고온유지 및 정확한 온도 조절이 반응의 정확도에 큰 영향을 미치며, 반응을 수행하기 전에 각 부분의 온도를 정확하게 보정작업이 필요하다. In the embodiment according to the present invention, the gene (nucleic acid) amplification reaction greatly affects the accuracy of the reaction by maintaining high temperature and accurate temperature control, and it is necessary to correct the temperature of each part accurately before performing the reaction.
유전자(핵산) 증폭 반응을 위해서는 시료 용액의 온도가 94°C 및 62°C를 유지해야 하는데, 도 4는 레이저모듈의 출력값을 각각 99.4°C 및 63.6°C의 값으로 레이저를 조사하였을 때 레이저가 조사된 열발산판의 복사열 온도와, 실제 시료 용액의 온도를 측정한 결과를 보인 그래프로, 시료 용액의 실제 온도가 반응을 위해 필요한 온도를 유지하는 것으로 관찰할 수 있다. In order to amplify the gene (nucleic acid), the temperature of the sample solution should be maintained at 94 ° C and 62 ° C. FIG. 4 is a graph showing the relationship between the output of the laser module at 99.4 ° C and 63.6 ° C, And the actual temperature of the sample solution, it can be seen that the actual temperature of the sample solution maintains the temperature necessary for the reaction.
상기한 실시 예를 토대로 E. coli gDNA를 활용하여 94°C에서 사전변성(pre-denaturation)을 거친 후에 94°C에서의 변성(denaturation)과 62°C에서의 확장(extension) 단계를 40회 반복하여 원하는 유전자(핵산) 증폭을 수행하였으며, 도 5의 젤-전기영동법 결과에서 보는 바와 같이 음성 샘플(1)에서는 아무 결과를 보여 주지 않고 있으며, 양성 샘플(2)에서는 해당 유전자(DNA)의 길이에 해당되는 부분에서 진한 밴드를 보여 주고 있다. After pre-denaturation at 94 ° C using E. coli gDNA based on the above example, denaturation at 94 ° C and extension at 62 ° C were performed 40 times As shown in the results of the gel electrophoresis of FIG. 5, the negative samples (1) show no results, whereas the positive samples (2) It shows the dark band in the part corresponding to the length.
본 발명을 활용하여 수행한 핵산 증폭 결과(1,2)를 상용증폭키트(3,4)와 비교하였을 시에도 음성, 양성 각각 모두 동일한 결과를 보여 주었으며 이로 인해 본 발명의 실시가 정확하게 작동함을 알 수 있다.Even when the nucleic acid amplification results (1, 2) performed using the present invention were compared with the commercial amplification kits (3, 4), both the negative and positive results were all the same, Able to know.
본 발명은 도면에 도시된 실시 예를 참고로 설명되었으나 이는 예시적인 것에 불과하며, 본 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 다른 실시 예가 가능하다는 점을 이해할 것이다. 따라서 본 발명의 진정한 기술적 보호 범위는 첨부된 특허청구범위의 기술적 사상에 의하여 정해져야 할 것이다.
While the present invention has been described with reference to exemplary embodiments, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed exemplary embodiments, but, on the contrary, is intended to cover various modifications and equivalent arrangements included within the spirit and scope of the appended claims. Accordingly, the true scope of the present invention should be determined by the technical idea of the appended claims.
10: 칩 11: 수용부
12: 열발산판 20: 안치대
30: 레이저모듈 31: 온도센서
40: 높이조절수단 41: 지지블럭
42: 가이드바 43: 승강구동부
44: 승강블럭 50: 메인제어부
51: 마이컴 52: 높이조절제어부
53: 레이저출력제어부 54: 메모리부10: chip 11:
12: Heat sink plate 20:
30: laser module 31: temperature sensor
40: height adjusting means 41: support block
42: guide bar 43:
44: ascending / descending block 50:
51: Micom 52: Height adjustment control part
53: laser output control unit 54: memory unit
Claims (17)
시료를 수용한 상기 칩에 배치되고, 복사열을 흡수하여 흡수한 열을 시료로 재발산하는 열발산판;
안치대의 지정위치에 안치한 상기 칩의 국부에 지정파장 대역의 레이저를 조사하여 복사열을 발생하는 레이저모듈; 및
상기 레이저모듈과 연결되고, 시료를 수용한 상기 칩의 국부 온도를 조절하는 메인제어부를 포함하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
A chip for accommodating a sample containing the gene to be amplified;
A heat dissipating plate disposed in the chip housing the sample and recirculating the heat absorbed by the radiant heat to the sample;
A laser module for generating radiant heat by irradiating a laser of a designated wavelength band to a local portion of the chip located at a designated position of the stand; And
And a main controller connected to the laser module and controlling a local temperature of the chip containing the sample.
상기 칩은
증폭할 유전자가 포함된 시료를 수용하는 수용부를 형성하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method according to claim 1,
The chip
A non-contact heating type gene amplification apparatus using a radiant heat forming a receiving portion for accommodating a sample containing a gene to be amplified.
상기 열발산판은
상기 칩의 하부 및 상부 또는 내부 중 어느 한 지정위치 또는 하나 이상의 지정위치 인근에 배치하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method according to claim 1,
The heat-
And a radiating heat disposed at a specified position of the lower, upper, or inner part of the chip or near one or more designated positions.
상기 열발산판은
상기 칩의 국부에 열이 발산되도록, 전도성이 높은 금속재 또는 실리콘재 중 어느 하나의 재질로 이루어지는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method according to claim 1,
The heat-
Contact heating type gene amplification apparatus using radiant heat made of any one of a metal material or a silicon material having high conductivity so that heat is radiated to a local part of the chip.
상기 칩은
별도의 몸체에 삽입되어 가열되거나, 또는 상기 칩 자체를 가열하기 위해 상기 칩이 안치되는 안치대를 포함하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method according to claim 1,
The chip
Wherein the chip is placed in a separate body to heat the chip or to heat the chip itself.
상기 칩이 안치되는 안치대는
지정된 위치에 상기 칩을 고정하도록, 상기 칩의 형태와 상응하는 홈을 형성하여 상기 홈을 통해 상기 칩을 고정하는 지그(jig)를 더 포함하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
In claim 5
The cradle on which the chip is placed
Further comprising a jig for fixing the chip to the predetermined position by forming a groove corresponding to the shape of the chip and fixing the chip through the groove.
상기 지그(jig)는
상기 칩에 복사열이 전달되도록, 가열하는 상기 칩의 국부와 상응하는 위치 상의 국소부를 개방되거나, 또는 투명한 재질로 이루어지는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method of claim 6,
The jig
Contact heating type gene amplification apparatus using radiant heat of a transparent material or a local part opened at a position corresponding to a local part of the chip to be heated so that radiant heat is transmitted to the chip.
상기 레이저모듈은
상기 열발산판의 재질 및 시료의 종류에 따라 지정파장 대역의 레이저모듈이 선택적으로 장착하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method according to claim 1,
The laser module
Contact heating type gene amplifying apparatus using radiant heat selectively mounted by a laser module of a specified wavelength band according to the material of the heat dissipating plate and the kind of the sample.
상기 메인제어부와 연결되고, 시료의 온도를 실시간으로 측정할 수 있는 온도센서를 구비하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method according to claim 1,
And a temperature sensor connected to the main control unit and capable of measuring the temperature of the sample in real time.
상기 온도센서는
열전도대, 적외선 카메라, 온도 표시색소 및 색 관찰을 위한 카메라 중 어느 하나로 구성하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method of claim 9,
The temperature sensor
Contact heating type gene amplification apparatus using radiant heat composed of a thermal conduction band, an infrared camera, a temperature indicating pigment and a camera for color observation.
상기 메인제어부에는
상기 온도센서와 연결되어, 상기 온도센서에 의해 측정된 온도값을 토대로 한 상기 레이저모듈의 출력조건을 저장하는 메모리부를 포함하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method according to claim 1,
The main control unit
And a memory unit connected to the temperature sensor and storing an output condition of the laser module based on a temperature value measured by the temperature sensor.
상기 메모리부는
미리 저장된 상기 레이저모듈의 출력조건을 바탕으로 차후, 상기 온도센서와의 인가하는 온도값 없이 저장된 출력조건으로, 상기 메인제어부가 상기 레이저모듈의 출력을 제어하도록 하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
12. The method of claim 11,
The memory unit
Wherein the main controller controls the output of the laser module based on an output condition of the laser module stored in advance without a temperature value applied to the temperature sensor.
상기 메인제어부의 메모리부에 저장되는 출력조건은
상기 레이저모듈과 상기 칩 사이의 높이인 것을 특징으로 하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method according to claim 1 or 11,
The output condition stored in the memory unit of the main control unit
Wherein the height of the laser module is the height between the laser module and the chip.
상기 레이저모듈의 출력조건인 상기 레이저모듈의 높이를 변경하도록,
상기 메인제어부의 출력값에 따라 선택적으로 상기 레이저모듈 승강 또는 하강시키는 높이조절수단을 포함하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
14. The method of claim 13,
And changing the height of the laser module, which is an output condition of the laser module,
And a height adjusting means for selectively raising or lowering the laser module according to an output value of the main control unit.
상기 높이조절수단은
상기 안치대의 일측에 결합하는 지지블럭과,
상기 지지블럭에 고정되어, 상기 안치대와 직각을 이루고, 내부에는 승강구동부가 구비되는 가이드바와,
일측에는 상기 레이저모듈이 설치되고, 타측단은 상기 가이드바의 승강구동부와 연결되며, 상기 메인제어부 출력값에 의해 선택적으로 상기 가이드바를 따라 승강하는 승강블럭을 포함하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
15. The method of claim 14,
The height adjusting means
A support block coupled to one side of the bench,
A guide bar fixed to the support block, the guide bar being perpendicular to the stand,
And a lifting block that is selectively lifted and lowered along the guide bar according to an output value of the main control unit, wherein the laser module is installed at one side and the elevation driving unit of the guide bar at the other side.
상기 메인제어부의 메모리부에 저장되는 출력조건은
상기 레이저모듈의 레이저 출력이고, 상기 메인제어부의 출력값에 따라 선택적으로 레이저의 출력을 제어하는 레이저출력제어부를 포함하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.
The method according to claim 1 or 11,
The output condition stored in the memory unit of the main control unit
And a laser output controller for selectively controlling an output of the laser according to an output value of the main controller.
상기 레이저출력제어부는
상기 레이저모듈과 상기 메인제어부와 연결되어, 상기 메인제어부의 출력값을 토대로 상기 레이저모듈로 제공되는 전원의 전압 또는 전류를 조절하는 복사열을 이용한 비접촉 가열식 유전자증폭장치.18. The method of claim 16,
The laser output controller
Wherein the laser module is connected to the main control unit and controls a voltage or current of a power source provided to the laser module on the basis of an output value of the main control unit.
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WO2024019200A1 (en) * | 2022-07-20 | 2024-01-25 | 연세대학교 산학협력단 | Optical-based fluid control bio-chip, and manufacturing and fluid control methods therefor |
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