KR20130111849A - Bilayer hydrogel moist wound dressing containig amniotic membranes-loaded and method for preparing the same - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 및 그 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는, 단백질 변성을 일으키지 않는 창상 및 화상 치유용으로 안정성이 확보된 폴리비닐알코올 하이드로겔과 양막 추출물 하이드로겔로 이루어진 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 및 그 제조방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a bilayer hydrogel wet dressing containing amniotic membrane extract and a method for producing the same. More particularly, the present invention relates to a polyvinyl alcohol hydrogel for wound healing without protein denaturation, Layered hydrogel wet dressing made of a gel and a method for producing the same.
화상 및 창상 치료에 있어서 사용되는 재료는 상피화(epithelialization)에 의한 창상치유(wound healing)의 기간을 줄이고 교체시 출혈이나 통증으로 인한 불편이 없어야 하며 상피화 후의 반흔 형성을 최소화할 수 있어야 한다. 또한 2차 감염율(secondary infection rate)이 낮고 제조 및 저장이 용이하여 쉽게 이용할 수 있어야 한다. 이를 토대로 창상 치유를 촉진하기 위하여 창상에 습윤 창상 치유(moist wound healing)를 적용하여 다양한 생물학적 드레싱으로 사용되고 있으며, 상피 재생을 돕는 효과가 있다. The materials used for burn and wound treatment should reduce the duration of wound healing by epithelialization and should be free of discomfort due to bleeding or pain during replacement and minimize scar formation after epithelialisation. In addition, the secondary infection rate should be low and easy to manufacture and store. Based on this, moist wound healing is applied to the wound to promote healing of the wound, so that it is used in various biological dressings and it has an effect of helping epithelial regeneration.
한편, 양막 추출물은 데이비스(Davis)가 피부를 대체하기 위하여 처음 사용한 후(Davis JW. et al ., Johns Hopkins Hosp Rep , 15; 307, 1910) 안과에서 수술 후 상처 치유의 목적으로 사용되고 있다(Dua et al., Surv Ophthalmol , 49; 51, 2004). 양막은 태반의 가장 안쪽에 있는 막으로 태아를 둘러싸고 있어 모체로부터 태아를 보호하는 장벽역할을 한다. 양막은 양막 세포, 기저막, 세포외 기질로 구성되어 있으며 피브로넥틴(Fibronectin), 라미닌(laminin), 콜라겐 IV(Collagen IV), 인테그린 α6 & β4(integrin α6 & β4) 등이 포함되어 있고(Van Herendael et al., Am J Obstet Gynecol , 131; 872, 1978) 그 외 여러 가지 단백분해 효소 억제성분이 있는데(Kim et al., Exp Eye Res, 70; 329, 2000), 이러한 양막은 창상 치유과정에서 조직의 유착을 억제하고 상피화를 촉진할 뿐만 아니라, 정상상피 형질을 보존하며 염증과 신생혈관 생성을 감소시켜서, 반흔생성을 줄여주는 효과가 있다 (Tseng et al., J Cell Physiol., 179; 325, 1999). Amniotic membrane extracts, on the other hand, were first used by Davis to replace skin (Davis JW. Et al . , Johns Hopkins Hosp Rep , 15; 307, 1910) are used for ocular wound healing after surgery (Dua et al ., Surv Ophthalmol , 49; 51, 2004). The amniotic membrane is the innermost membrane of the placenta that surrounds the fetus and acts as a barrier to protect the fetus from the mother. Amniotic membrane is composed of amniotic membrane cells, basement membrane and extracellular matrix and contains fibronectin, laminin, collagen IV, integrin α6 & β4 (Van Herendael et al ., Am J Obstet Gynecol , 131; 872, 1978) and various other protease inhibitors (Kim et al ., Exp Eye Res, 70; 329, 2000). These amniotic membranes inhibit tissue adhesion and promote epithelization during wound healing, preserve normal epithelial traits, and reduce inflammation and neovascularization, thereby reducing scar formation (Tseng meat al ., J Cell Physiol ., 179; 325, 1999).
이상적인 습윤드레싱은 상처 부위에 습윤 환경을 조성하고 상처 부위로부터 침출물을 흡수하여야 하며, 특히 하이드로겔은 이상적인 습윤드레싱 역할을 한다(Ajji et al., Radiat . Phys . Chem ., 77; 200, 2008; Morin and Tomaselli, Clin. Plast . Surg ., 34; 643, 2007; Valenta and Auner, Eur . J. Pharm . Biopharm., 58; 279, 2004). 습윤드레싱 제조방법은 기존에 동결-해동법, 붕산, 글루타르알데히드 및 포름알데히드 등과 같은 가교제를 이용한 화학 반응 방법(Hassan et al., Eur . J. Pharm . Biopharm., 49; 161, 2000; Yang et al., J. Membr. Sci ., 236; 39, 2004) 및 전자빔이나 g-선에 의한 방사선 방법(Razzak et al., Radiat . Phys . Chem., 62; 107, 2001) 등이 있다. 동결-해동법은 항생제 등 약물의 안정성을 확보할 수 있으나, 화학 반응 방법이나 방사선 방법은 약물을 변형시키기 때문에 일반적으로 습윤드레싱은 동결-해동법으로 제조한다 (Kim et al., International Journal of Pharmaceutics, 359; 79, 2008; Kim et al., Biological & Pharmaceutical Bulletin, 31; 2277, 2008). 아울러, 기존 동결-해동법은 폴리비닐알코올(PVA), 키토산(chitosan) 및 알긴산 나트륨(sodium alginate) 등 여러 수용성 고분자들 및 약물 함유 수용액의 온도를 높여 잘 용해하고 혼합시켜 18시간동안 -20℃ 에서 동결시키고 6시간 동안 실온에서 해동하는 과정을 3번 반복하여 제조하는 방법으로서 열에 강한 약물의 경우에는 안정성에 문제가 없으나 단백질이나 펩타이드성 약물의 경우에는 변성을 일으킬 우려가 있다 (Sung et al ., International Journal of Pharmaceutics, 392; 232, 2010; Hwang et al., AAPS Pharm SciTech, 11; 1092, 2010). 따라서 단백질인 양막 추출물을 함유하는 습윤드레싱은 기존의 동결-해동법으로는 제조가 불가능하다는 문제점이 있으며, 폴리비닐피롤리돈, 키토산 및 다가알코올로 구성되는 하이드로겔 드레싱을 제조한 기술이 있으나(한국공개 제10-2003-0060458호, 한국공개 제10-2004-0085646호), 12시간 이상 공기 중에 노출될 경우, 수분이 증발되어 상처 치료의 기능을 저하되어 사용 가능 시간이 짧은 문제가 있었다.Ideal wet dressing should create a moist environment at the wound site and absorb the leachate from the wound site, especially hydrogels serve as ideal wet dressing (Ajji et < RTI ID = 0.0 > al ., Radiat . Phys . Chem . , 77; 200, 2008; Morin and Tomaselli, Clin. Plast . Surg ., 34; 643, 2007; Valenta and Auner, Eur . J. Pharm . Biopharm. , 58; 279, 2004). The wet dressing manufacturing method is a chemical reaction method using a freezing-thawing method, a boric acid, a crosslinking agent such as glutaraldehyde and formaldehyde (Hassan et al ., Eur . J. Pharm . Biopharm ., 49; 161, 2000; Yang et al ., J. Membr. Sci . , 236; 39, 2004) and method by electron beam radiation or g- line (Razzak et al, Radiat Phys Chem, 62;.... And the like 107, 2001). The freeze-thaw method can secure the stability of drugs such as antibiotics, but since the chemical reaction method or the radiation method transforms the drug, the wet dressing is generally prepared by the freeze-thaw method (Kim et al ., International Journal of Pharmaceutics , 359; 79, 2008; Kim et al ., Biological & Pharmaceutical Bulletin , 31; 2277, 2008). In addition, conventional freezing-thawing methods are performed by dissolving and mixing various water-soluble polymers such as polyvinyl alcohol (PVA), chitosan and sodium alginate and a drug-containing aqueous solution at a high temperature and mixing them for 18 hours at -20 ° C. Freezing and thawing at room temperature for 6 hours is repeated three times. In the case of a heat-resistant drug, there is no problem in stability, but in the case of a protein or peptide drug, it may cause denaturation (Sung et al . , International Journal of Pharmaceutics , 392; 232, 2010; Hwang et al ., AAPS Pharm SciTech , 11; 1092, 2010). Therefore, there is a problem that a wet dressing containing amniotic membrane extract as a protein can not be prepared by the conventional freezing-thawing method, and there is a technique of producing a hydrogel dressing composed of polyvinylpyrrolidone, chitosan and polyhydric alcohol Open No. 10-2003-0060458, Korean Unexamined Patent Publication No. 10-2004-0085646). When exposed to air for 12 hours or more, moisture is evaporated and the function of wound healing deteriorates, shortening the usable time.
이에, 본 발명자들은 상기 문제점을 해결하기 위하여 예의 노력한 결과, 양막 추출물의 안정성을 확보한 약물을 동결-해동법으로 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱을 제조하는 경우, 상처 부위에 습윤 환경을 조성하여 상처 부위로부터 침출물을 흡수함으로써 창상 및 화상에 약효가 탁월함을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
The present inventors have made intensive efforts to solve the above problems. As a result, the inventors of the present invention have found that when preparing a double-layer hydrogel wet dressing containing amniotic membrane extract by freezing-thawing a drug that secures the stability of the amniotic membrane extract, And it is confirmed that the drug efficacy is excellent for wound and burns by absorbing the leached product from the wound site, thereby completing the present invention.
본 발명의 목적은 단백질 변성을 일으키지 않는 창상 및 화상 치유용으로 안정성이 확보된 폴리비닐알코올 하이드로겔과 양막 추출물 하이드로겔을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 및 그 제조방법을 제공하는데 있다.
It is an object of the present invention to provide a double-layer hydrogel wet dressing containing a polyvinyl alcohol hydrogel and amniotic membrane extract hydrogel which are stable for wound healing and not causing protein denaturation, and a method for producing the same.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 폴리비닐알코올, 수용성 고분자 및 정제수를 포함하는 폴리비닐알코올 하이드로겔층; 및 상기 폴리비닐알코올 하이드로겔 상층부에 첨가되며, 수용성 고분자, 양막 추출물 및 정제수를 포함하는 양막 추출물 하이드로겔층을 포함하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a polyvinyl alcohol hydrogel layer comprising polyvinyl alcohol, a water-soluble polymer, and purified water; And a bilayer hydrogel wet dressing comprising an amniotic membrane extract hydrogel layer added to the polyvinyl alcohol hydrogel upper layer and including a water-soluble polymer, amniotic membrane extract and purified water.
본 발명은 또한, (a) 폴리비닐알코올 및 수용성 고분자를 정제수에 용해시켜 수용액을 제조한 다음, 상기 수용액을 동결 후 해동하여 폴리비닐알코올 하이드로겔을 형성하는 단계; (b) 수용성 고분자 및 양막 추출물을 정제수에 용해시켜 수용액을 제조한 다음, 상기 수용액을 동결 후 해동하여 양막 추출물 하이드로겔을 형성하는 단계; 및 (c) 상기 양막 추출물 하이드로겔을 폴리비닐알코올 하이드로겔에 첨가하여 이중층 하이드로겔 습윤드레싱을 제조하는 단계를 포함하는 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱의 제조방법을 제공한다.
(A) dissolving polyvinyl alcohol and a water-soluble polymer in purified water to prepare an aqueous solution, and then freezing and thawing the aqueous solution to form a polyvinyl alcohol hydrogel; (b) dissolving the water-soluble polymer and amniotic membrane extract in purified water to prepare an aqueous solution, then freezing the aqueous solution and thawing to form an amniotic membrane extract hydrogel; And (c) adding the amniotic membrane extract hydrogel to a polyvinyl alcohol hydrogel to prepare a bilayer hydrogel wet dressing. The present invention also provides a method for producing a bilayer hydrogel wet dressing comprising amniotic membrane extract.
본 발명에 따른 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 제조공정 중 단백질의 변성을 일으키지 않아 유효성분인 양막 추출물의 안정성이 확보되며, 감염 예방, 상피조직화 촉진, 각질화 경감이 가능한 특성으로 인하여 창상 및 화상 치료의 효과가 향상되므로 피부재생 치료에 탁월한 효력이 있다.
The double-layer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract according to the present invention does not cause protein denaturation during the manufacturing process, thus securing the stability of the amniotic membrane extract as an active ingredient, and is capable of preventing infection, promoting epithelialization, and alleviating keratinization, And the effect of burn treatment is improved, so that it has an excellent effect on skin regeneration treatment.
도 1은 기존제품(메디폼)으로 처리한 상처 부위의 사진이다.
도 2는 본 발명에 따른 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱으로 처리한 상처 부위의 사진이다.
도 3은 대조군(가아제 처리군), 기존제품(메디폼) 및 본 발명에 따른 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱으로 처리한 상처 부위의 크기 감소를 나타낸 그래프이다.
도 4는 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 처리한 상처의 조직학 사진으로, A, B, D, E, G 및 H는 헤모스타틴-에오신 염색 결과이고, C, F 및 I는 매손 트리크롬 염색 결과이고, 스케일 막대는 160μm이다.
도 5는 화상치유실험에서 기존제품(메디폼)으로 처리한 상처 부위의 사진이다.
도 6은 화상 치유 실험에서 본 발명에 따른 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱으로 처리한 상처 부위의 사진이다.
도 7은 화상 치유 실험에서 대조군(가아제 처리군), 기존제품(메디폼) 및 본 발명에 따른 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱으로 처리한 상처 부위의 크기 감소를 나타낸 그래프이다.
도 8은 화상 치유 실험에서, 상처의 조직학 사진으로, A, B, D, E, G 및 H는 헤모스타틴-에오신 염색 결과이고, C, F 및 I는 매손 트리크롬 염색 결과이고, 스케일 막대는 160μm이다.Figure 1 is a photograph of a wound site treated with an existing product (Medifom).
Figure 2 is a photograph of a wound site treated with a bilayer hydrogel wet dressing containing an amniotic membrane extract according to the present invention.
FIG. 3 is a graph showing the size reduction of a wound site treated with a double-layer hydrogel wet dressing containing a control (group treated with a gauze), a conventional product (Medifoam), and amniotic membrane extract according to the present invention.
Fig. 4 is a histological photograph of a wound treated with a double-layer hydrogel wet dressing containing amniotic membrane extract, wherein A, B, D, E, G and H are the results of hemostatin-eosin staining, C, F, And the scale bar is 160 mu m.
Figure 5 is a photograph of a wound site treated with an existing product (Medifom) in an image healing experiment.
6 is a photograph of a wound site treated with a bilayer hydrogel wet dressing containing amniotic membrane extract according to the present invention in an image healing test.
FIG. 7 is a graph showing the size reduction of a wound area treated with a double-layer hydrogel wet dressing containing a control group (group of wax-treated), a conventional product (medicom) and amniotic membrane extract according to the present invention in the image healing test.
Fig. 8 is a histological photograph of the wound in the image healing experiment, in which A, B, D, E, G and H are the results of hemostatin-eosin staining, C, F and I are the results of the hemorrhagic trichrome staining, Respectively.
본 발명은 일 관점에서, 폴리비닐알코올, 수용성 고분자 및 정제수를 포함하는 폴리비닐알코올 하이드로겔층; 및 상기 폴리비닐알코올 하이드로겔 상층부에 첨가되며, 수용성 고분자, 양막 추출물 및 정제수를 포함하는 양막 추출물 하이드로겔층을 포함하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱에 관한 것이다.In one aspect, the present invention relates to a polyvinyl alcohol hydrogel layer comprising polyvinyl alcohol, a water-soluble polymer, and purified water; And a bilayer hydrogel wet dressing comprising an amniotic membrane extract hydrogel layer added to the polyvinyl alcohol hydrogel upper layer and comprising a water-soluble polymer, amniotic membrane extract and purified water.
본 발명에 사용된 폴리비닐알코올은 친수성 고분자로서 비독성이며 탁월한 생체 적합성을 가지고 있고, 기계적 및 열적 강도가 우수하며, 동결 및 해동을 수 회 수행하면 물리적 방법으로 가교가 가능하여 다양한 하이드로겔 제조 및 막의 제조에 사용된다. 또한, 상기 양막 추출물은 태반의 가장 안쪽에 있는 얇고 반투명한 막인 양막으로부터 추출한 물질로서 상피의 증식과 분화를 촉진시켜 창상 치유에 중요한 역할을 하는 피브로넥틴(Fibronectin), 라미닌(laminin), 콜라겐 IV(Collagen IV), 인테그린 α6 & β4(integrin α6 & β4) 등이 포함되어 있다.The polyvinyl alcohol used in the present invention is a hydrophilic polymer which is non-toxic, has excellent biocompatibility, has excellent mechanical and thermal strength, can be crosslinked by physical methods when frozen and thawed several times, It is used in the manufacture of membranes. In addition, the amniotic membrane extract is a material extracted from the amniotic membrane, which is the thin and translucent membrane of the innermost placenta, and promotes the proliferation and differentiation of the epithelium, thereby causing fibronectin, laminin, Collagen IV IV), integrin [alpha] 6 & beta4 (integrin [alpha] 6 & beta4), and the like.
양막 추출물은 우수한 생체 적합성 및 상피의 증식과 분화를 촉진시켜 창상 및 화상 치유에 효과를 나타낸다. The amniotic membrane extract promotes excellent biocompatibility and epithelial proliferation and differentiation, and is effective for wound healing and burning.
상기 양막 추출물은 다음과 같이 제조하였다. 태반 탯줄을 중심으로 주변에 가위로 1~2cm가량 살짝 칼집을 낸 후 상처 낸 부위의 양막을 조심스럽게 벗겨내어 양막을 채취하고, 채취한 양막을 세척용 염분에 옮겨 담은 뒤 세척하고, 양막의 점액질 및 혈액을 제거한 후 일정량을 절개하여 2번 더 세척해 주고, 액체질소를 이용하여 막자사발에서 20분간 충분히 마쇄시켰다. 마쇄한 양막과 동일 양의 완충용액을 가하여 양막 내 단백질이 충분히 유리되어 나오도록 4℃에서 하룻밤 방치시킨 다음, 추출액을 원심분리하여 상층액을 수집하고, 상층액을 실린지 필터(Syringe filter ; Micropore size: 0.45㎛)를 통과시킨 후 단백질 농도를 측정한 다음 70℃에 보관하였다. The amniotic membrane extract was prepared as follows. The amniotic membrane of the injured area was carefully removed and the amniotic membrane was taken. The collected amniotic membrane was transferred to saline for washing, and the amniotic membrane of the amniotic membrane was removed. After removing the blood, a certain amount of incision was made and the plate was washed twice more. The plate was thoroughly polished in a mortar for 20 minutes using liquid nitrogen. After adding the same amount of buffered solution to the ground amniotic membrane, the mixture was allowed to stand overnight at 4 ° C. so that the protein in the amniotic membrane was sufficiently freed. After passing through the size: 0.45㎛) the protein concentration was measured and stored at 70 ℃.
본 발명에 있어서, 폴리비닐알코올은 조성물 중 2.5 ~ 10 중량%의 함량으로 사용하고, 또한 본 발명의 조성물이 가교 형성을 잘하기 위해서는 물에 용해 후 온도를 60 ~ 70℃까지 가열하여야 한다. 또한, 상기한 폴리비닐알코올 기제는 본 발명의 조성물 중에 2.5 중량% 미만일 경우에는, 가교 형성을 하지 않아 습윤드레싱 제조가 불가능하고, 10 중량% 이상일 경우에는 점도가 너무 높아 습윤드레싱 제조시 취급이 불편한 문제점을 나타내었다.In the present invention, the polyvinyl alcohol is used in an amount of 2.5 to 10 wt% in the composition, and in order to form the crosslinking of the composition of the present invention, the polyvinyl alcohol should be heated to 60 to 70 DEG C after dissolution in water. When the content of the polyvinyl alcohol base is less than 2.5% by weight, crosslinking is not formed and wet dressing can not be prepared. When the content is 10% by weight or more, the viscosity of the polyvinyl alcohol base is too high, Problem.
본 발명에 따른 수용성 고분자류는 키토산, 알긴산 나트륨, 덱스트란 및 카르복시메칠셀룰로오즈나트륨으로 구성된 군에서 2종 이상 선택되고, 바람직하게는 알긴산나트륨 및 키토산을 사용한다. 수용성 고분자는 이중층 하이드로겔 양막추출물 함유 습윤드레싱에서 습윤드레싱의 겔 특성 및 용출 조절을 하며 이중층 중 약물이 함유된 층의 기제로 사용된다. 이때, 수용성 고분자는 조성물 중 0.25 ~ 1 중량%의 함량으로 사용하며, 중량은 약물 함유층의 두께에 따라 결정되어진다. 수용성 고분자류의 함량이 0.25 중량% 미만일 경우, 본 발명에서 목적으로 하는 이중층을 형성할 약물 함유층을 형성하지 못하는 문제점이 있으며, 1 중량%를 초과할 경우, 다른 이중층인 폴리비닐알코올의 겔 특성을 약화시켜 이상적인 습윤드레싱을 제조하지 못한다. The water-soluble polymer according to the present invention is selected from the group consisting of chitosan, sodium alginate, dextran and carboxymethyl cellulose sodium, preferably sodium alginate and chitosan. The water-soluble polymer is used as a base for the drug-containing layer in the bilayer, which controls the gel properties and elution of the wet dressing in the wet dressing containing the bilayer hydrogel amniotic membrane extract. At this time, the water-soluble polymer is used in an amount of 0.25 to 1 wt% in the composition, and the weight is determined depending on the thickness of the drug-containing layer. When the content of the water-soluble polymer is less than 0.25% by weight, the desired drug-containing layer for forming the double layer of the present invention can not be formed. When the content of the water-soluble polymer is more than 1% by weight, So that the ideal wet dressing can not be produced.
상기 유효성분인 양막 추출물은 조성물 중 0.01 ~ 1 중량%의 함량으로 사용한다. 이때, 양막 추출물의 함량이 0.01 중량% 미만일 경우, 본 발명에서 목적으로 하는 창상 및 화상치료 효과를 가지고 못하는 문제점이 있으며, 5 중량%를 초과할 경우, 양막 추출물 함유층을 형성을 방해한다.
The amniotic membrane extract used as the active ingredient is used in an amount of 0.01 to 1% by weight in the composition. If the content of the amniotic membrane extract is less than 0.01% by weight, the object of the present invention is not able to have a wound and image treatment effect. If the content of the amniotic membrane extract is more than 5% by weight, it interferes with the formation of the amniotic membrane extract-containing layer.
본 발명은 다른 관점에서, (a) 폴리비닐알코올 및 수용성 고분자를 정제수에 용해시켜 수용액을 제조한 다음, 상기 수용액을 동결 후 해동하여 폴리비닐알코올 하이드로겔을 형성하는 단계; (b) 수용성 고분자 및 양막 추출물을 정제수에 용해시켜 수용액을 제조한 다음, 상기 수용액을 동결 후 해동하여 양막 추출물 하이드로겔을 형성하는 단계; 및 (c) 상기 양막 추출물 하이드로겔을 폴리비닐알코올 하이드로겔에 첨가하여 이중층 하이드로겔 습윤드레싱을 제조하는 단계를 포함하는 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱의 제조방법에 관한 것이다.(A) dissolving polyvinyl alcohol and a water-soluble polymer in purified water to prepare an aqueous solution, and then freezing and thawing the aqueous solution to form a polyvinyl alcohol hydrogel; (b) dissolving the water-soluble polymer and amniotic membrane extract in purified water to prepare an aqueous solution, then freezing the aqueous solution and thawing to form an amniotic membrane extract hydrogel; And (c) adding the amniotic membrane extract hydrogel to a polyvinyl alcohol hydrogel to prepare a bilayer hydrogel wet dressing. The present invention also relates to a method for producing a bilayer hydrogel wet dressing containing amniotic membrane extract.
구체적으로, 상기 (a)단계에서 수용액의 제조 시 반응 온도는 60 ~ 70℃로 수행하여 한다. 반응 온도가 60 ~ 70℃를 벗어날 경우, 폴리비닐알코올의 용해도가 낮아지므로, 폴리비닐알코올 하이드로겔 형성에 어려움이 있다.Specifically, the reaction temperature in the preparation of the aqueous solution in step (a) is 60 to 70 ° C. When the reaction temperature is outside the range of 60 to 70 캜, the solubility of the polyvinyl alcohol is lowered, so that it is difficult to form the polyvinyl alcohol hydrogel.
상기 (a)단계 및 (b)단계에서 동결 반응은 -20℃에서 18시간 동안 수행되고, 해동 반응은 15 ~ 20℃에서 6시간 동안 수행된다. 또한, 상기 동결-해동법은 1 ~ 5회 반복 수행한다. In the steps (a) and (b), the freezing reaction is performed at -20 ° C for 18 hours, and the thawing reaction is performed at 15 to 20 ° C for 6 hours. The freezing-thawing method is repeated 1 to 5 times.
상기 (b)단계의 수용액은 기존 동결-해동법과 달리 수용성 고분자 및 양막 추출물을 15 ~ 20℃에서 정제수에 잘 녹인 후 폴리비닐알코올 하이드로겔 상층부에 첨가하여 동일하게 동결-해동법로 제조하여 이중층 하이드로겔 양막 추출물 함유 습윤드레싱으로 제조한다.Unlike the conventional freeze-thawing method, the aqueous solution of step (b) is prepared by dissolving the water-soluble polymer and the amniotic membrane extract in purified water at 15 to 20 ° C, and then adding the solution to the upper part of the polyvinyl alcohol hydrogel by the same freeze-thawing method. Amniotic membrane extract-containing wet dressing.
본 발명에 따른, 창상 및 화상 치유에 효과적인 이중층 하이드로겔 양막 추출물 함유 습윤드레싱은 통상의 겔특성 및 용출 조정제를 포함한 통상의 부형제를 포함하는 약제학적 형태로 제조할 수 있다.
The wet dressing containing the bilayer hydrogel amniotic membrane extract effective for wound healing and wound healing according to the present invention can be prepared in a pharmaceutical form containing conventional excipients including conventional gel properties and dissolution adjusting agents.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for illustrating the present invention and that the scope of the present invention is not construed as being limited by these embodiments.
실시예Example 1 : 양막 추출물의 제조 1: Production of amniotic membrane extract
70% 알코올로 소독된 테이블에 호일을 깔고 태반을 꺼내고, 태반 탯줄을 중심으로 주변에 가위로 1~2cm가량 살짝 칼집을 낸 후 상처 낸 부위의 양막을 조심스럽게 벗겨내어 양막을 채취하였으며, 채취한 양막을 세척용 염분(saline ; +a.a 4x)에 옮겨 담은 뒤 세척해 주었다. 세척 후 가위, 겸자로 양막의 점액질 및 혈액 제거 후 일정량을 절개하여 2번 더 세척해 주고, 액체질소를 이용하여 막자사발에서 20분간 충분히 마쇄시킨다. 마쇄한 양막과 동일 양의 완충용액을 가하여 양막 내 단백질이 충분히 유리되어 나오도록 4℃에서 하룻밤 방치시켰다. 그 후, 추출액을 4℃에서 3000rpm으로 15분간 원심분리하여 상층액을 수집하고, 상층액을 실린지 필터(Syringe filter ; Micropore size: 0.45㎛)를 통과시킨 후 단백질 농도 측정 키트(Protein assay; BIO-RAD 500-0116)를 이용하여 단백질 농도를 측정한 다음 70℃에 보관하였으며, 사용 1시간 전 37℃ 보온기에서 녹여서 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱을 제조에 사용하였다.
The foil was placed on a 70% alcohol-disinfected table and the placenta was removed. The placental cord was carefully placed around the umbilical cord with a pair of scissors. The amniotic membrane was carefully peeled off and the amniotic membrane was removed. Amniotic membrane was transferred to wash saline (+ aa 4x) and washed. After washing, scissors and forceps are used to remove mucous membranes and blood from the amniotic membrane, and then a certain amount of incision is made. Then, the mouse is washed twice more and the mouse is polished with liquid nitrogen for 20 minutes in a mortar. The same amount of buffer solution as that of the scraped amniotic membrane was added and allowed to stand overnight at 4 ° C so that the amniotic membrane protein was sufficiently liberated. Thereafter, the supernatant was collected by centrifuging the extract at 3000 ° C. for 15 minutes at 4 ° C., and the supernatant was passed through a syringe filter; Protein concentration was measured using -RAD 500-0116) and then stored at 70 ° C., and a bilayer hydrogel wet dressing containing an amniotic membrane extract was dissolved in 37 ° C. warmer 1 hour before use.
실시예Example 2 : 양막 추출물을 함유하는 2: Amniotic membrane extract-containing 이중층Double layer 하이드로겔Hydrogel 습윤드레싱의 제조 Manufacture of wet dressing
실시예 1에 의해 제조된 양막 추출물을 이용하여 표 1에 나타낸 바와 같이 실험군 1 ~ 4 및 비교군 1 ~ 8의 조성으로 폴리비닐알코올 및 수용성 고분자들을 60 ~ 70℃까지 온도를 높여 잘 용해하고 혼합시켜 18시간 동안 -20℃에서 동결시키고 6시간 동안 실온에서 해동하는 과정을 3번 반복하여 제조하였다. 또한 수용성 고분자 및 양막 추출물을 실온에서 물에 잘 녹인 후 폴리비닐알코올 하이드로겔 상층부에 첨가하여 동일하게 동결-해동법으로 제조하여 이중층 하이드로겔로 제조하였다. The amniotic membrane extract prepared in Example 1 was used to dissolve polyvinyl alcohol and water-soluble polymers at a temperature of 60 to 70 ° C with the composition of Experimental Groups 1 to 4 and Comparative Groups 1 to 8 as shown in Table 1, Followed by freezing at -20 ° C for 18 hours and thawing at room temperature for 6 hours. The water - soluble polymer and amniotic membrane extract were dissolved in water at room temperature and added to the upper part of the polyvinyl alcohol hydrogel. The same was prepared by freeze - thawing method to prepare a double layer hydrogel.
그 결과, 실험군 1 ~ 4와 비교군 5 ~ 8의 경우 이중층 하이드로겔로 형성된 양막 추출물 함유 습윤드레싱이 제조되었으나 비교군 5 ~ 6의 경우와 같이 본 발명의 조성물 중에 2.5 중량% 미만일 경우에는 본 발명에서 가교 형성을 하지 않아 습윤드레싱이 제조되지 않았다. 또한 비교군 7 ~ 8의 경우와 같이 폴리비닐알코올이 본 발명의 습윤드레싱 중에 10 중량% 이상일 경우에는 점도가 너무 높아 제조시 취급이 불편하여 제조를 중단하였다. 아울러 비교군 7 ~ 8의 경우와 같이 상기 폴리비닐알코올 기제는 습윤드레싱 중 수용성 고분자류의 함량이 0.25 중량% 미만이면 습윤드레싱은 제조가 되나 이중층을 형성하는 습윤드레싱은 제조하지 못하였다.
As a result, in the case of the experimental groups 1 to 4 and the
실시예Example 3 : 양막 추출물을 함유하는 3: Amniotic membrane extract-containing 이중층Double layer 하이드로겔Hydrogel 습윤드레싱의 특성 확인 Identify the characteristics of wet dressing
3-1 : 겔화정도3-1: degree of gelation
상기에서 제조한 실험군 1 ~ 4 및 비교군 5 ~ 6 각각을 50℃에서 6시간 동안 건조시켜 무게(Wo)를 측정된 후 이 샘플을 일정한 무게 (equilibrium swelling, Ws)가 될 때까지 24시간 동안 물속에 담가두었다. 그 후 이 샘플을 다시 50℃에서 6시간 동안 건조시켜 무게(We)를 측정하였다. 겔화 정도 (Gel fraction %)는 다음과 같이 구하였다.Each of the experimental groups 1 to 4 and the
겔화 정도 % = (We/Wo)× 100 Gelation degree% = (W e / W o ) × 100
표 2와 같이 실험군 1 ~ 4의 겔화 정도는 55 ~ 85%인 반면에, 수용성 고분자류가 본 발명의 조성물 중 1 중량% 이상인 비교군 5 ~ 6의 경우에는 겔화 정도가 50% 이하로서 겔 특성이 매우 약화되었다. As shown in Table 2, the degree of gelation of experimental groups 1 to 4 was 55 to 85%, while in the case of
± 1.382.6
± 1.3
± 2.059.0
± 2.0
± 1.278.4
± 1.2
± 1.076.4
± 1.0
± 1.443.0
± 1.4
± 1.932.8
± 1.9
3-2 : 팽윤율3-2: swelling rate
상기에서 제조한 실험군 1 ~ 4 및 비교군 5 ~ 6 각각을 가로 2 cm x 세로 2 cm로 절단하여 1시간 동안 50℃에서 보관하고 바로 무게(We)를 측정하였다. 그 후, 이 샘플을 인산완충용액에서 37℃에서 보관하고 바로 무게(Ws)를 측정하였고 팽윤율(swelling ratio, SR%)은 다음 식으로 계산하였다.Each of the experimental groups 1 to 4 and the
팽윤율 % = (Ws/Wa)× 100Swelling rate% = (W s / W a ) x 100
표 3과 같이 실험군 1 ~ 4의 팽윤율이 125 ~ 190%인 반면에, 수용성 고분자류가 본 발명의 조성물 중 1 중량% 이상인 비교군 5 ~ 6의 경우에는 팽윤율이 250% 이상으로 매우 증가되었고 이는 겔 특성의 약화에 따라 나타나는 현상이다. As shown in Table 3, the swelling rate of the experimental groups 1 to 4 was 125 to 190%, whereas the swelling rate of the
± 18.4136.2
± 18.4
± 12.0175.9
± 12.0
± 14.2127.6
± 14.2
± 14.0135.4
± 14.0
± 21.3251.2
± 21.3
± 31.1291.8
± 31.1
3-3 : 투습율 (Water vapor transmission rate) 3-3: Water vapor transmission rate
상기에서 제조한 실험군 1 ~ 8 및 비교군 4 ~ 7 각각을 직경 70mm로 절단하여 염화칼슘 50g을 함유한 입구 70mm의 유리병 입구(면적 (m2): S)에 고정시키고 온도 40±2℃ 및 상대습도 90±5%의 항온기에 1시간 동안 보관한 후 무게를 측정하였다(Wo). 그리고 1시간 더 항온기에 보관한 후 그 무게 (Wt)를 측정하여 투습율을 계산하였다.Each of the experimental groups 1 to 8 and the comparative groups 4 to 7 prepared above was cut into a diameter of 70 mm to prepare calcium chloride (W 2 ) of 50 mm in diameter was placed in a glass bottle inlet (area (m 2 ): S) having an inlet of 70 mm and containing 50 g of water. The weight was stored in a thermostat at a temperature of 40 ± 2 ° C. and a relative humidity of 90 ± 5% . After storing in the thermostat for one hour, the weight (Wt) was measured to calculate the moisture permeability.
투습율 (g/m2-day) = [(Wo Wt)/ S] × 24Moisture permeation rate (g / m 2 -day) = [(Wo Wt) / S] x 24
표 4와 같이 실험군 1 ~ 4의 투습율은 2000 g/m2-day이며 수용성 고분자류가 본 발명의 조성물 중 1 중량% 이상인 비교군 5 ~ 6의 경우도 마찬가지로 투습율이 2000 g/m2-day으로 팽윤율은 차이를 나타내지 않았다.Moisture permeability of the test group 1-4 as shown in Table 4 was 2000 g / m 2 -day and likewise the case of the water-soluble compared to the group 5-6 polymer stream is at least 1% by weight of the composition of the present invention, moisture permeability is 2000 g / m 2 -day, the swelling rate did not show any difference.
(g/m2-day)Water permeability
(g / m 2 -day)
± 95.22621.4
± 95.2
± 120.12917.7
± 120.1
± 221.42346.1
± 221.4
± 76.12335.83
± 76.1
± 83.12457.6
± 83.1
± 123.72191.8
± 123.7
3-4 : 영스모듈 (인장력, Young’s modulus) 3-4: Young's modulus (Young's modulus)
상기에서 제조한 실험군 1 ~ 8 및 비교군 4 ~ 7을 개뼈다귀 모양(길이 6 cm, 끝부분의 폭 2cm 그리고 중간 부분의 폭 1cm)로 절개하여 인장 강도 측정기 (tensile test machine, Instron 4464, UK)로 인장 강도(tensile strength)와 절단 강도(breaking elongation)를 측정하였다. 실험 직전에 각각의 습윤드레싱의 두께를 디지털 두께 측정기(digimatic caliper, CD-15CPX, Mitutoyo Co., Japan)를 통해서 측정하였다. 아울러 겔의 영스 모듈(인장력, Young’s modulus)은 겔의 인장 강도 및 절단 강도에 의해 계산된다.The test groups 1 to 8 and the comparative groups 4 to 7 prepared above were cut into a dog bone shape (
표 5와 같이 실험군 1 ~ 4의 영스 모듈은 10 kgf/mm2 이상이며 수용성 고분자류가 본 발명의 조성물 중 1 중량% 이상인 비교군 5 ~ 6의 경우에는 영스 모듈이 5 kgf/mm2 이하로 겔의 인장력이 매우 낮아 제조 후 습윤드레싱으로 사용할 경우 절단되는 경향을 보인다. 실험군 1 ~ 4의 경우와 같이 상기 수용성 고분자류는 본 발명의 조성물 중 0.25 ~ 1 중량%의 함량으로 사용하여 제조한 습윤드레싱은 탁월한 겔 강도를 나타내었다. Youngstown module of the test group 1-4 as shown in Table 5 below 10 kgf / mm 2 or greater, and compares the group 5-6 is water-soluble polymers at least 1% by weight of the composition of the present invention, Youngstown module is 5 kgf / mm 2 The tensile strength of the gel is so low that it tends to be cut when used as a post-manufacturing wet dressing. As in Experiment Groups 1 to 4, the wet dressing prepared by using the water-soluble polymers in an amount of 0.25 to 1% by weight in the composition of the present invention exhibited excellent gel strength.
(kgf/mm2)Youngs module
(kgf / mm 2 )
± 1.314.8
± 1.3
± 1.212.6
± 1.2
± 1.413.1
± 1.4
± 0.514.9
± 0.5
± 0.54.9
± 0.5
± 0.93.7
± 0.9
실시예Example 4 : 양막 추출물을 함유하는 4: Amniotic membrane extract-containing 이중층Double layer 하이드로겔Hydrogel 습윤드레싱의 상처 치유 효과 확인 Confirm wound healing effect of wet dressing
마우스((주)오리엔트 바이오)를 졸레틸 50(티레타민/졸라제팜)의 피하주사로 마취시키고 등의 털을 제거한 다음, 등에 상처부위 (1.5×1.5cm)를 내었다. 각각 상처 부위에 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱(실험예 1), 메디폼(기존제품)(일동제약, 한국) 및 가아제(gauze)로 처치하고 접착붕대(Soft cloth tape, 3M, USA)로 부위를 보호하였다. 3일 간격으로 15일까지 육안으로 상처 부위를 관찰하고 디지털 카메라로 촬영한 상처 사진을 바탕으로 해서 상처 크기 감소는 어도비 아크로벳 7 프로그램(Adobe Acrobat 7 Program)을 사용하여 상처 크기를 측정하였으며 다음과 같은 식으로 계산하였다.A mouse (Orient Bio) was anesthetized by subcutaneous injection of Zoletile 50 (tritamine / zolazepam), and the hair was removed, and the wound area (1.5 x 1.5 cm) was applied to the back. Treated with a double layer hydrogel wet dressing (Experimental Example 1), medifoam (conventional product) (Ildong Pharm, Korea) and gauze containing amniotic membrane extract of the present invention at each wound site, and a soft cloth tape (3M , USA). The wound size was measured by using the Adobe Acrobat 7 program (Adobe Acrobat 7 program) based on the wound images taken with a digital camera and the wound size was measured by the naked eye for 15 days at intervals of 3 days. .
상처 크기 감소 (%) = [(A o - A t )/A o ]×100Wound size reduction (%) = [( A o - A t ) / A o ] x 100
A o 및 A t 는 각각 처음 및 시간 't'에서의 상처크기
A o And & lt; RTI ID = 0.0 > A t & lt; / RTI & gt;
상처 치료 사진 결과는 도 1 및 도 2에 나타나 있으며 육안으로 관찰한 결과, 모든 마우스는 15일 동안 관찰할 때까지 모두 생존하였으며 어떤 괴사도 나타나지 않았다. 어떤 감염도 나타나지 않았으나 약간의 수축과 염증 반응이 나타났다. 가아제 대조군에서는 출혈현상을 나타내었으며 상처부위에는 약간의 상처가 남았다. 또한 상처의 감소는 나타나지 않았다. 9일 지났을 경우에는, 가아제 대조군이나 검토물질 부위에서 약간의 변화를 나타내었다. 가아제 대조군은 거즈를 제거하였을 경우 출혈현상을 나타내었으며 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 부위에서는 이차 손상을 나타내지 않았으며 상피조직화가 촉진되었으며 각질화를 경감시켰으며 (Winter, 1962). 부상 크기도 감소함을 나타내었다. 그리고 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱을 처지한 그룹과는 달리 메디폼(기존제품)으로 처치한 그룹은 털이 많이 자라서 상처가 작은 것처럼 보이나 털을 제거하면서 관찰하면 상처가 매우 크다.The results of the wound treatment photographs are shown in Figs. 1 and 2, and all the mice were observed until they were observed for 15 days without any necrosis. No infection was seen, but slight contractions and inflammatory reactions were noted. In the gauze control group, hemorrhage was observed, and some wound remained in the wound area. There was no reduction in wound. After 9 days, slight changes were observed in the gauze control group or the study material site. The gauze control showed a bleeding phenomenon when the gauze was removed. In the bilayer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention, secondary damage was not exhibited, epithelialization was promoted, and keratinization was alleviated (Winter, 1962). And the size of the injuries was also reduced. Unlike the group treated with the bilayer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention, the group treated with medifoam (conventional product) appears to have a small number of hairs and a small wound, but the wound is very large when observed while removing hairs.
또한 도 3과 같이 처치 3일 후부터 15일까지 상처크기 감소는 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱> 메디폼(기존제품) > 가아제 대조군으로 나타내었다. 특히, 6일의 경우에는 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 메디폼 및 가아제 대조군보다 유의할 만한 상처크기 감소를 보였으며, 또한, 95 ~ 100%에 가까운 상처 크기 감소를 나타내었기 때문에 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 기존 제품보다 상처치유 효과가 매우 크다.
As shown in FIG. 3, the wound size reduction from
상기 상처 치유 실험 후 15일 경과 후 표 1의 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱, 메디폼(기존제품) 및 가아제 대조군으로 각각 처리한 쥐를 죽이고 상피 및 진피를 포함한 상처부위를 채취하여 포르말린으로 처리한 후 파라핀 엠보딩 및 헤마토실린-에오신 염색 후 현미경으로 관찰하였다. 이때, 표 6과 같은 조직학 검토 인자들은 디지털 이미지 분석기(DMI-300, DMI, South Korea)를 사용하여 측정하였다. 통계처리는 레벤 테스트(Levene test), 아오바 테스트(ANOVA test) 등 여러 테스트 방법을 사용하였다.After 15 days from the wound healing experiment, rats treated with the double-layer hydrogel wet dressing, medifoam (conventional product) and gauze control each containing the amniotic membrane extract of the present invention shown in Table 1 were killed and wound areas including epithelium and dermis were collected After formalin treatment, the cells were observed with paraffin embedding and hematocylin-eosin staining and then microscopically. At this time, the histological examination factors as shown in Table 6 were measured using a digital image analyzer (DMI-300, DMI, South Korea). Statistical analysis was performed using various test methods such as Levene test and ANOVA test.
본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 및 메디폼 (기존제품)은 가아제 대조군보다 상피 지역의 재생 상피 (A, D, G; 화살표)이 선명하게 확장되는 것을 보였다. 또한, 이 두 가지 검토 물질은 가아제 대조군보다 과립조직에서 침윤 염증셀 수 및 신혈관 형성(B, E, H; 화살표)가 매우 작으며 더 많은 콜라겐 증식현상(C, F, I; 청색)을 나타내었다. 또한, 유의적인 값은 나타내지는 않았으나, 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 메디폼(기존제품)보다 상피 지역의 재생 상피가 선명하게 확장되는 것을 보이며 과립조직에서 침윤 염증셀 수 및 신혈관 형성 값이 작고 더 많은 콜라겐 증식현상을 나타내었다. 즉, 조직병리학적으로 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 메디폼(기존제품) 처리보다 더 우수한 상처 치유 촉진 효과 즉, 더 빠른 육아조직 소실을 나타내었다. 가아제 대조군과 비교하여, 상피결손 부위의 유의성 있는 (p<0.01) 감소가 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 및 메디폼(기존제품) 처리군에서 인정되었으며, 결과적으로 상피 재생율의 유의성 있는 (p<0.01) 증가가 각각 인정되었다. 또한, 모든 약물 도포군에서는 가아제 대조군에 비해 유의성 있는 (p<0.01 또는 p<0.05) 신생모세혈관 및 침윤 염증세포의 감소가 육아조직에서 인정되었고, 육아조직 자체의 면적 역시 유의성 있게 (p<0.01) 감소되었다. 따라서 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 및 메디폼(기존제품)은 상처 치유 촉진 효과가 있는 것으로 판단되며, 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 메디폼(기존제품)보다 더 우수한 상처 치유 촉진 효과를 나타낸다.The bilayer hydrogel wet dressing and medicament (existing product) containing the amniotic membrane extract of the present invention showed a clear expansion of the regenerated epithelium (A, D, G; arrows) in the epithelial area than the gauze control group. In addition, these two review materials showed significantly less invasive inflammatory cell count and neovascularization (B, E, H; arrows) in the granular tissue than in the gauze control, and more collagen proliferation phenomena (C, F, I; Respectively. In addition, although the significant values are not shown, the bilayer hydrogel wet dressing containing amniotic membrane extract of the present invention clearly shows that the regenerated epithelium in the epithelial region is clearly expanded compared to the medicom (existing product), and the number of infiltrating inflammatory cells The new blood vessel formation value was small and showed more collagen proliferation phenomenon. Histopathologically, the double layer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention showed a better wound healing promotion effect than the medifoam (conventional product) treatment, that is, faster loss of the granulation tissue. A significant (p < 0.01) reduction in epithelial defect sites was recognized in the dual-layer hydrogel wet dressing and medifoam-treated groups containing the amniotic membrane extract of the present invention, as compared to the gauges control group, (P <0.01), respectively. In addition, the reduction of neovascular capillary and infiltrating inflammatory cells in all drug application groups was significantly (p <0.01 or p <0.05) significant in the granulation tissues and the area of the granulation tissues was also significant (p <0.01 ). Therefore, the double-layer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention and the medicom (existing product) are considered to have an effect of promoting wound healing, and the bilayer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention is a medicament And exhibits a better wound healing promoting effect.
과립조직
Granule tissue
* p<0.01 and ** p<0.05 ; LSD 테스트에 의한 가아제 대조군에 대한 통계 * p < 0.01 and ** p <0.05; Statistical Analysis of GaAs Control by LSD Test
†p<0.01 and ††p<0.05 ; MW 테스트에 의한 가아제 대조군에 대한 통계
† p <0.01 and †† p <0.05; Statistics for GaAs control by MW test
실시예Example 5 : 양막 추출물을 함유하는 5: Amniotic membrane extract-containing 이중층Double layer 하이드로겔Hydrogel 습윤드레싱의 화상 치유 효과 확인 Confirmation of the healing effect of wet dressing
마우스((주)오리엔트 바이오)를 졸레틸 50(티레타민/졸라제팜)의 피하주사로 마취시키고 등의 털을 제거한 다음 등에 상처부위(1.5×1.5cm)를 토치로 2cm 가까이에서 화상을 입히고 10분 후에 가층을 제거한다. 각각 상처 부위에 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱(실험예 1), 메디폼(기존제품)(일동제약, 한국) 및 가아제(gauze)로 처치하고 접착붕대(Soft cloth tape, 3M, USA)로 부위를 보호하였다. 3일 간격으로 15일까지 육안으로 상처 부위를 관찰하고 디지털 카메라로 촬영한 상처 사진을 바탕으로 해서 상처 크기 감소는 어도비 어크로벳 7 프로그램(Adobe Acrobat 7 Program)을 사용하여 상처 크기를 측정하였으며 다음과 같은 식으로 계산하였다.The mouse (Orient Bio) was anesthetized by subcutaneous injection of Zoletile 50 (tritamine / zolazepam), and the wound was removed from the back of the wound (1.5 × 1.5 cm) and burned to near 2 cm with a torch. Thereafter, the layers are removed. Treated with a double layer hydrogel wet dressing (Experimental Example 1), medifoam (conventional product) (Ildong Pharm, Korea) and gauze containing amniotic membrane extract of the present invention at each wound site, and a soft cloth tape (3M , USA). The wound size was measured using an Adobe Acrobat 7 program using the Adobe Acrobat 7 program. The wound size was measured using a digital camera. .
상처 크기 감소 (%) = [(A o - A t )/A o ]×100Wound size reduction (%) = [( A o - A t ) / A o ] x 100
A o 및 A t 는 각각 처음 및 시간 't'에서의 상처크기
A o and A t are the first and the wound size at time 't'
상처 치료 사진 결과는 도 5 및 도 6에 나타나 있으며 육안으로 관찰한 결과 모든 마우스는 15일 동안 관찰할 때까지 모두 생존하였고 어떤 괴사도 나타나지 않았다. 어떤 감염도 나타나지 않았으나 약간의 수축과 염증 반응이 나타났다. 상처부위에는 약간의 상처가 남았다. 또한, 상처의 감소는 나타나지 않았다. 화상치료실험에서는 6일 지났을 경우에 가아제 대조군이나 검토물질 부위에서 약간의 변화를 나타내었다. 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 부위에서는 이차 손상을 나타내지 않았으며 상피조직화가 촉진되었고 각질화를 경감시켰으며(Winter, 1962). 부상 크기도 감소함을 나타내었다. The results of the wound treatment photographs are shown in FIG. 5 and FIG. 6, and all the mice were observed until they were observed for 15 days without any necrosis. No infection was seen, but slight contractions and inflammatory reactions were noted. There were some scars on the wound. In addition, there was no reduction in wound. In the burn treatment experiment, slight changes were observed in the gauges control group or the examination substance area after 6 days. The bilayer hydrogel wetting dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention did not show secondary damage, promoted epithelialization and alleviated keratinization (Winter, 1962). And the size of the injuries was also reduced.
또한 도 7과 같이 상처치료실험에서는 처치 3일 후부터 15일까지 상처크기 감소는 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 > 메디폼(기존제품) > 가아제 대조군으로 나타내었다. 특히, 전 과정에서 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 메디폼 및 가아제 대조군보다 유의할 만한 상처크기 감소를 보였다. 그러므로, 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 기존 제품보다 상처치유 효과가 매우 크다.
As shown in FIG. 7, in the wound healing test, the wound size reduction from the 3rd day to the 15th day from the treatment was represented by the double layer hydrogel wet dressing> Medifoam (conventional product)> gauze control group containing amniotic membrane extract of the present invention. In particular, the double-layer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention showed significant wound size reduction over the medifoam and the gauze control in the whole process. Therefore, the double-layer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention is much more effective for wound healing than conventional products.
상기 화상 치유 실험 후 15일 경과 후 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱, 메디폼(기존제품) 및 가아제 대조군으로 각각 처리한 쥐를 죽이고 상피 및 진피를 포함한 상처부위를 채취하여 포르말린으로 처리한 후 파라핀 엠보딩 및 헤마토실린-에오신 염색후 현미경 관찰하였다. 이때, 표 7과 같은 조직학 검토 인자들은 디지털 이미지 분석기 (DMI-300, DMI, South Korea)를 사용하여 측정하였다. 통계처리는 레벤 테스트(Levene test), 아오바 테스트(ANOVA test) 등 여러 테스트 방법을 사용하였다.After 15 days from the above-mentioned image-healing experiment, the rats treated with the bilayer hydrogel wet dressing, medicament (conventional product) and the gauze control each containing the amniotic membrane extract of the present invention were killed and wound areas including epithelium and dermis were collected and formalin After treatment, paraffin embedding and hematocylin-eosin staining were followed by microscopic observation. At this time, the histological examination parameters as shown in Table 7 were measured using a digital image analyzer (DMI-300, DMI, South Korea). Statistical analysis was performed using various test methods such as Levene test and ANOVA test.
본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 및 메디폼(기존제품)은 가아제 대조군보다 상피 지역의 재생 상피 (A, D, G; 화살표)이 선명하게 확장되는 것을 보였다. 또한, 이 두 가지 검토 물질은 가아제 대조군보다 과립조직에서 침윤 염증셀 수 및 신혈관 형성(B, E, H; 화살표)이 매우 작으며 더 많은 콜라겐 증식현상(C, F, I; 청색)을 나타내었다. 또한, 유의적인 값은 나타내지는 않았으나, 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 메디폼(기존제품)보다 상피 지역의 재생 상피가 선명하게 확장되는 것을 보이며 과립조직에서 침윤 염증셀 수 및 신혈관 형성 값이 작고 더 많은 콜라겐 증식현상을 나타내었다. 즉, 조직병리학적으로 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 메디폼(기존제품) 처리보다 더 우수한 상처 치유 촉진 효과 즉, 더 빠른 육아조직 소실을 나타내었다. 가아제 대조군과 비교하여, 상피결손 부위의 유의성 있는 (p<0.01) 감소가 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 및 메디폼(기존제품) 처리군에서 인정되었으며, 결과적으로 상피 재생율의 유의성 있는 (p<0.01) 증가가 각각 인정되었다. 또한, 모든 약물 도포군에서는 가아제 대조군에 비해 유의성 있는 (p<0.01 또는 p<0.05) 신생모세혈관 및 침윤 염증세포의 감소가 육아조직에서 인정되었고, 육아조직 자체의 면적 역시 유의성 있게 (p<0.01) 감소되었다. 따라서 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱 및 메디폼(기존제품)은 상처 치유 촉진 효과가 있는 것으로 판단되며, 본 발명의 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱은 메디폼(기존제품)보다 더 우수한 상처 치유 촉진 효과를 나타낸다.The bilayer hydrogel wet dressing and medicament (existing product) containing the amniotic membrane extract of the present invention showed a clear expansion of the regenerated epithelium (A, D, G; arrows) in the epithelial area than the gauze control group. In addition, these two review materials have a much smaller number of invasive inflammatory cells and neovascularization (B, E, H; arrows) in the granular tissue than in the gauze control, and have more collagen proliferation phenomena (C, F, I; Respectively. In addition, although the significant values are not shown, the bilayer hydrogel wet dressing containing amniotic membrane extract of the present invention clearly shows that the regenerated epithelium in the epithelial region is clearly expanded compared to the medicom (existing product), and the number of infiltrating inflammatory cells The new blood vessel formation value was small and showed more collagen proliferation phenomenon. Histopathologically, the double layer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention showed a better wound healing promotion effect than the medifoam (conventional product) treatment, that is, faster loss of the granulation tissue. A significant (p < 0.01) reduction in epithelial defect sites was recognized in the dual-layer hydrogel wet dressing and medifoam-treated groups containing the amniotic membrane extract of the present invention, as compared to the gauges control group, (P <0.01), respectively. In addition, the reduction of neovascular capillary and infiltrating inflammatory cells in all drug application groups was significantly (p <0.01 or p <0.05) significant in the granulation tissues and the area of the granulation tissues was also significant (p <0.01 ). Therefore, the double-layer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention and the medicom (existing product) are considered to have an effect of promoting wound healing, and the bilayer hydrogel wet dressing containing the amniotic membrane extract of the present invention is a medicament And exhibits a better wound healing promoting effect.
과립조직
Granule tissue
* p<0.01 and ** p<0.05 ; LSD 테스트에 의한 가아제 대조군에 대한 통계 * p < 0.01 and ** p <0.05; Statistical Analysis of GaAs Control by LSD Test
†p<0.01 and ††p<0.05 ; MW 테스트에 의한 가아제 대조군에 대한 통계
† p <0.01 and †† p <0.05; Statistics for GaAs control by MW test
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
While the present invention has been particularly shown and described with reference to specific embodiments thereof, those skilled in the art will appreciate that such specific embodiments are merely preferred embodiments and that the scope of the present invention is not limited thereto will be. Accordingly, the actual scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.
Claims (19)
폴리비닐알코올, 수용성 고분자 및 정제수를 포함하는 폴리비닐알코올 하이드로겔층; 및
상기 폴리비닐알코올 하이드로겔 상층부에 첨가되며, 수용성 고분자, 양막 추출물 및 정제수를 포함하는 양막 추출물 하이드로겔층.
Bilayer hydrogel wet dressing containing amnion extract, comprising:
Polyvinyl alcohol hydrogel layer comprising polyvinyl alcohol, a water-soluble polymer, and purified water; And
Amniotic membrane extract hydrogel layer is added to the polyvinyl alcohol hydrogel upper layer, and comprises a water-soluble polymer, amnion extract and purified water.
(a) 태반 탯줄을 중심으로 양막을 벗겨내어 양막을 채취하는 단계;
(b) 상기 채취한 양막을 세척용 염분으로 세척하는 단계;
(c) 상기 세척한 양막을 점액질 및 혈액 제거 후 세척하는 단계;
(d) 상기 점액질 및 혈액 제거 후 세척한 양막을 액체 질소로 냉각 후 마쇄하는 단계;
(e) 상기 마쇄한 양막과 동일 양의 완충용액을 첨가하여 단백질을 유리하는 단계; 및
(f) 상기 용액을 원심분리하여 상층액을 실린지 필터로 단백질 농도 측정 후 -70℃에서 보관하는 단계;
를 거쳐 제조된 것을 특징으로 하는 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱.
The method of claim 1 wherein the amnion extract
(a) peeling the amnion around the placental umbilical cord to obtain amnion;
(b) washing the obtained amniotic membrane with washing salt;
(c) washing the washed amniotic membrane after removing mucus and blood;
(d) cooling and grinding the amniotic membrane washed after removing the mucus and blood, with liquid nitrogen;
(e) adding the same amount of buffer as the ground amnion to liberate the protein; And
(f) centrifuging the solution and storing the supernatant in a syringe filter and then storing the protein at -70 ° C;
Double layer hydrogel wet dressing containing amnion extract, characterized in that it was prepared through.
The double-layer hydrogel wet dressing according to claim 1, wherein the water-soluble polymer is selected from the group consisting of chitosan, sodium alginate, dextran and carboxymethyl cellulose sodium.
The double-layer hydrogel wet dressing according to claim 1, wherein the content of the water-soluble polymer is 0.25 to 1 wt%.
The double-layer hydrogel wet dressing according to claim 1, wherein the content of the polyvinyl alcohol is 2.5 to 10% by weight.
The double-layer hydrogel wet dressing according to claim 1, wherein the purified water content is 84 to 97.24% by weight.
The double-layer hydrogel wet dressing according to claim 1, wherein the content of the amniotic membrane extract is 0.01 to 5% by weight.
(a) 폴리비닐알코올 및 수용성 고분자를 정제수에 용해시켜 수용액을 제조한 다음, 상기 수용액을 동결 후 해동하여 폴리비닐알코올 하이드로겔을 형성하는 단계;
(b) 수용성 고분자 및 양막 추출물을 정제수에 용해시켜 수용액을 제조한 다음, 상기 약물 수용액을 동결 후 해동하여 양막 추출물 하이드로겔을 형성하는 단계; 및
(c) 상기 양막 추출물 하이드로겔을 폴리비닐알코올 하이드로겔에 첨가하여 이중층 하이드로겔 습윤드레싱을 제조하는 단계.
A process for the preparation of a bilayer hydrogel wet dressing containing amnion extract, comprising:
(a) dissolving polyvinyl alcohol and a water-soluble polymer in purified water to prepare an aqueous solution, and then freezing and thawing the aqueous solution to form a polyvinyl alcohol hydrogel;
(b) dissolving a water-soluble polymer and amnion extract in purified water to prepare an aqueous solution, and then freezing and thawing the aqueous drug solution to form amnion extract hydrogel; And
(c) adding the amnion extract hydrogel to a polyvinyl alcohol hydrogel to prepare a bilayer hydrogel wet dressing.
(a) 태반 탯줄을 중심으로 양막을 벗겨내어 양막을 채취하는 단계;
(b) 상기 채취한 양막을 세척용 염분으로 세척하는 단계;
(c) 상기 세척한 양막을 점액질 및 혈액 제거 후 세척하는 단계;
(d) 상기 점액질 및 혈액 제거 후 세척한 양막을 액체 질소로 냉각 후 마쇄하는 단계;
(e) 상기 마쇄한 양막과 동일 양의 완충용액을 첨가하여 단백질을 유리하는 단계; 및
(f) 상기 용액을 원심분리하여 상층액을 실린지 필터로 단백질 농도 측정 후 -70℃에서 보관하는 단계;
를 거쳐 제조된 것을 특징으로 하는 양막 추출물을 함유하는 이중층 하이드로겔 습윤드레싱.
The method of claim 8 wherein the amnion extract
(a) peeling the amnion around the placental umbilical cord to obtain amnion;
(b) washing the obtained amniotic membrane with washing salt;
(c) washing the washed amniotic membrane after removing mucus and blood;
(d) cooling and grinding the amniotic membrane washed after removing the mucus and blood, with liquid nitrogen;
(e) adding the same amount of buffer as the ground amnion to liberate the protein; And
(f) centrifuging the solution and storing the supernatant in a syringe filter and then storing the protein at -70 ° C;
Double layer hydrogel wet dressing containing amnion extract, characterized in that it was prepared through.
The method according to claim 8, wherein the water-soluble polymer is selected from the group consisting of chitosan, sodium alginate, dextran and carboxymethylcellulose sodium.
9. The method according to claim 8, wherein the content of the water-soluble polymer is 0.25 to 1% by weight.
9. The method of claim 8, wherein the content of the polyvinyl alcohol is 2.5 to 10% by weight.
[Claim 9] The method according to claim 8, wherein the content of the purified water is 84-97.24% by weight.
9. The method according to claim 8, wherein the content of the amniotic membrane extract is 0.01 to 5% by weight.
[9] The method of claim 8, wherein the step (a) is performed at a reaction temperature of 60 to 70 [deg.] C during the preparation of the aqueous solution.
9. The method according to claim 8, wherein the freezing of steps (a) and (b) is carried out at -20 ° C for 18 hours.
The method according to claim 8, wherein the steps (a) and (b) are performed at 15 ° C to 20 ° C for 6 hours.
[9] The method of claim 8, wherein the freezing-thawing method of steps (a) and (b) is repeated one to five times.
The method according to claim 8, wherein the step (b) is carried out at a reaction temperature of 15 ° C to 20 ° C during the preparation of the aqueous solution, wherein the amorphous hydrogel wetting dressing comprises the amniotic membrane extract.
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Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104069537A (en) * | 2014-07-17 | 2014-10-01 | 厦门大学 | Sodium alginate-sodium carboxymethylcellulose-chitosan wound dressing and preparation method thereof |
CN107441547A (en) * | 2016-05-30 | 2017-12-08 | 四川大学华西医院 | Wound repair material and preparation method and application thereof |
KR20180016309A (en) * | 2016-08-04 | 2018-02-14 | 고려대학교 산학협력단 | Composition for antibiotic composition including amnion membrane extract or chorion membrane extract and method for preparing the same |
KR101979286B1 (en) | 2018-05-17 | 2019-05-15 | 경북대학교병원 | Partial-hardening contact lens-type dressing using amniotic membrane and preparation method thereof |
KR20200012080A (en) | 2018-07-26 | 2020-02-05 | 조석형 | Manufacturing method for chitin nanofiber having surface modified with chitosan, the chitin nanofiber having surface modified with chitosan made therefrom, chitin-collagen nanofiber made therefrom and wound dressing materials using this |
WO2021114005A1 (en) * | 2019-12-02 | 2021-06-17 | 江南大学 | Method of preparing amnion-spongy chitosan composite double-layer wound dressing |
CN115887731B (en) * | 2022-12-04 | 2024-02-20 | 贵州医科大学 | Preparation method of beta-lactoglobulin fiber-polyvinyl alcohol aerogel and application of beta-lactoglobulin fiber-polyvinyl alcohol aerogel in preparation of skin dressing |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20030187515A1 (en) * | 2002-03-26 | 2003-10-02 | Hariri Robert J. | Collagen biofabric and methods of preparing and using the collagen biofabric |
KR100644078B1 (en) * | 2002-09-30 | 2006-11-10 | 주식회사 바이오랜드 | Dermal substitute consisting of amnion and biodegradable polymer, the preparation method and the use thereof |
KR101091084B1 (en) * | 2008-11-07 | 2011-12-09 | 한국과학기술연구원 | Cell aggregate-hydrogel-polymer scaffold complex for cartilage regeneration, method for the preparation thereof and composition comprising the same |
KR101091575B1 (en) * | 2009-04-29 | 2011-12-13 | 한남대학교 산학협력단 | Manufacturing method of biocompatible polyvinyl alcohol-based hydrogel |
-
2012
- 2012-04-02 KR KR1020120034061A patent/KR101404089B1/en active IP Right Grant
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104069537A (en) * | 2014-07-17 | 2014-10-01 | 厦门大学 | Sodium alginate-sodium carboxymethylcellulose-chitosan wound dressing and preparation method thereof |
CN104069537B (en) * | 2014-07-17 | 2016-04-06 | 厦门大学 | Sodium alginate-sodium carboxymethyl cellulose-Chitosan in Wound Dressing and preparation method thereof |
CN107441547A (en) * | 2016-05-30 | 2017-12-08 | 四川大学华西医院 | Wound repair material and preparation method and application thereof |
CN107441547B (en) * | 2016-05-30 | 2020-11-20 | 四川大学华西医院 | Wound repair material and preparation method and application thereof |
KR20180016309A (en) * | 2016-08-04 | 2018-02-14 | 고려대학교 산학협력단 | Composition for antibiotic composition including amnion membrane extract or chorion membrane extract and method for preparing the same |
KR101979286B1 (en) | 2018-05-17 | 2019-05-15 | 경북대학교병원 | Partial-hardening contact lens-type dressing using amniotic membrane and preparation method thereof |
KR20200012080A (en) | 2018-07-26 | 2020-02-05 | 조석형 | Manufacturing method for chitin nanofiber having surface modified with chitosan, the chitin nanofiber having surface modified with chitosan made therefrom, chitin-collagen nanofiber made therefrom and wound dressing materials using this |
WO2021114005A1 (en) * | 2019-12-02 | 2021-06-17 | 江南大学 | Method of preparing amnion-spongy chitosan composite double-layer wound dressing |
CN115887731B (en) * | 2022-12-04 | 2024-02-20 | 贵州医科大学 | Preparation method of beta-lactoglobulin fiber-polyvinyl alcohol aerogel and application of beta-lactoglobulin fiber-polyvinyl alcohol aerogel in preparation of skin dressing |
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