KR20130083980A

KR20130083980A - SHSy5y cell line 을 포함하는 신경세포에 엔돌핀 처리를 통한 hsa-miR-106b miRNA의 발현증가 및 신호전달체계 변경 방법

Info

Publication number: KR20130083980A
Application number: KR1020120004627A
Authority: KR
Inventors: 김승찬
Original assignee: 김승찬
Priority date: 2012-01-16
Filing date: 2012-01-16
Publication date: 2013-07-24

Abstract

베타엔돌핀은 특히 몰핀과 다르게 사람의 몸속에 자연적으로 존재하는 물질로써, 스트레스의 조절 등에 자주 쓰이는 신경전달물질 중의 하나이다. 그러나, 이 진통제역할을 하는 베타엔돌핀을 처리할시 어떻게 몸에 작용하고 그 miRNA 기전은 정확이 밝혀져 있지 않았다.본 발명에서는 신경세포에 베타엔돌핀을 처리 한 후, 나타나는 miRNA 의 증감을 보았으며 이들이 targeting 하는 여러 가지 세포내 신호전달물질을 발굴하였다.이 hsa-miR-106b miRNA를 이용해서 antagomer또는 서열과 같은 miRNA를 투입해 줌으로써 엔돌핀과 동일한 효과를 나타낼 수 있다. 또한 이 hsa-miR-106b miRNA를 엔돌핀 그자체로 조절함으로써, 여러 가지 signal transduction response를 조절할 수 있는 근간이 될 수 있다.

Description

ＳＨＳｙ5ｙｃｅｌｌｌｉｎｅ 을 포함하는 신경세포에 엔돌핀 처리를 통한 ｈｓａ-ｍｉＲ-106ｂｍｉＲＮＡ의 발현증가 및 신호전달체계 변경 방법{The alteration of signal transduction by applying endorphin Neuronal cell line including SHSy5y cell line with increased hsa-miR-106b miRNA expression}

본 발명은 신경세포의 오피오이드 수용체에 작용하는 엔돌핀의 유전자 발현시 생성되는 miRNA 중 하나에 상보적으로 결합하는 유전자들의 mRNA를 조절하면서 그 단백질이나 산물의 발현을 조절하는 방법이다.

베타엔돌핀은 오피오이드 수용체에 결합하는 물질로써, 엔케팔린, 몰핀과 더불어 여러 가지 고통을 감수할 수 있게끔 마취제로 많이 이용된다. 베타엔돌핀은 특히 몰핀과 다르게 사람의 몸속에 자연적으로 존재하는 물질로써, 스트레스의 조절 등에 자주 쓰이는 신경전달물질 중의 하나이다. 그러나, 이 진통제역할을 하는 베타엔돌핀을 처리할시 어떻게 몸에 작용하고 그 miRNA 기전은 정확이 밝혀져 있지 않았다.

Horace H. Loh, L. F. Tseng, Eddie Wei, and Choh Hao Li (106b). "beta-endorphin is a potent analgesic agent". PNAS 73 (8): 2895 - 2898

신경세포에 처리한 엔돌핀으로 인하여 생성되는 miRNA를 통해 신호전달체계를 조절하는 방법.

본 발명에서는 신경세포에 베타엔돌핀을 처리 한 후, 나타나는 miRNA 의 증감을 보았으며 이들이 targeting 하는 여러 가지 세포내 신호전달물질을 발굴하였다.

1. 이 hsa-miR-106b miRNA를 이용해서 antagomer또는 서열과 같은 miRNA를 투입해 줌으로써 엔돌핀과 동일한 효과를 나타낼 수 있다.

2. 이 hsa-miR-106b miRNA를 엔돌핀 그자체로 조절함으로써, 여러 가지 signal transduction response를 조절할 수 있는 근간이 될 수 있다.

[도1] hsa-miR-106b 의 서열 및 targeting 서열
[도2] hsa-miR-106b 의 targeting molecule 의 리스트

우선 [도1]에 이 miRNA 의 서열이 나와 있다. 이 miRNA 가 엔돌핀을 넣어주면 감소되어 특정 [도2] 에 나와있는 molecule의 mRNA 에 targeting을 저해함으로써 그 단백질의 발현량을 증가시킨다. 이를 이용하면 이러한 signal transducing molecule 의 발현조절이 용이하게 될 수 있다. 또한 이 miRNA를 직접 집어넣거나 이것에 대한 antagomer을 넣어주면 엔돌핀의 효과를 mimic하거나 특정 signal 에 대해 보완할 수 있다.

Claims

시험관 내 배양된 SHSy5y 세포를 포함하는 신경세포주에 hsa-miR-106b miRNA를 직접 처리하거나 이것에 대한 antagomer을 처리하여 엔돌핀의 효과를 mimic하는 방법 및 특정 signal 에 대해 보완하는 것을 포함하는 방법.
제 1항에 있어서 그 반대로 세포주에 엔돌핀을 처리하여 hsa-miR-106b의 발현량을 감소시켜 eukaryotic translation initiation factor 5A2, zinc finger/ NFX1-type containing 1, FYVE and coiled-coil domain containing 1, polycystic kidney disease 2 (autosomal dominant), programmed cell death 1 ligand 2, cytochrome b reductase 1, pleckstrin homology domain containing- family A (phosphoinositide binding specific) member 3, myelin transcription factor 1-like, N-acyl phosphatidylethanolamine phospholipase D, ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 5 (putative function) 단백질의 발현을 촉진하는 방법