KR20130071028A - Agent for sacbrood virus of bees - Google Patents

Agent for sacbrood virus of bees Download PDF

Info

Publication number
KR20130071028A
KR20130071028A KR1020110138322A KR20110138322A KR20130071028A KR 20130071028 A KR20130071028 A KR 20130071028A KR 1020110138322 A KR1020110138322 A KR 1020110138322A KR 20110138322 A KR20110138322 A KR 20110138322A KR 20130071028 A KR20130071028 A KR 20130071028A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
weight
rot
bee
bees
parts
Prior art date
Application number
KR1020110138322A
Other languages
Korean (ko)
Inventor
안창기
박진규
전종운
현풍미
이경진
Original Assignee
(주)비센
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by (주)비센 filed Critical (주)비센
Priority to KR1020110138322A priority Critical patent/KR20130071028A/en
Publication of KR20130071028A publication Critical patent/KR20130071028A/en

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/01Hydrocarbons
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12Ketones
    • A61K31/122Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin
    • A61K31/125Camphor; Nuclear substituted derivatives thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02Inorganic compounds

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

PURPOSE: A therapeutic agent for treating sacbrood virus of bees is provided to protect honey bees from infection by sacbrood by injecting to a beehive before the bees are infected. CONSTITUTION: A therapeutic agent for treating sacbrood virus of bees contains 0.1-10 wt% of thymol, 0.1-10 wt% of camphorum, 0.1-10 wt% of tea tree oil, 0.1-10 wt% of pinene, 0.1-5 wt% of chlorine dioxide, 0.1-5 wt% of acetic acid, 0.1-5 wt% of a red ginseng extract, and 50-80 wt% of purified water. The therapeutic agent is used by mixing with 1L of sugar liquid. The therapeutic agent is injected to a beehive with a sponge containing a disinfectant for beekeeping. When larvae of honey bees are dead, the therapeutic agent is used after removing eggs and larvae. [Reference numerals] (AA) Average accumulated number of dead larvae; (BB) The number of dead larvae; (CC) A group; (DD) B group; (EE) C group; (FF) D group; (GG) Artificial infection

Description

꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제{AGENT FOR SACBROOD VIRUS OF BEES}AGENT FOR SACBROOD VIRUS OF BEES

본 발명은 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제에 대한 것으로서, 더욱 상세하게는 살균효과가 우수한 티몰과 안정화 이산화 염소수를 포함하고 있어서 꿀벌의 낭충봉아부패병을 치료할 수 있는 꿀벌의 바이러스용 치료제에 대한 것이다.The present invention relates to an agent for treating beetleworm rot of bees, and more particularly, to a bee virus cure agent for treating bee bugworms because of thymol and stabilized chlorine dioxide having excellent bactericidal effects.

최근 꿀벌을 보호하고자 하는 노력과 꿀벌의 산출물과 관련된 상품으로 인해 꿀벌에게 발생하고 있는 질병에 대하여 세상에서 관심이 많다. 꿀벌에 기생하는 바이러스는 전세계적으로 발견된다.There is much interest in the world about the disease that has occurred in honeybees due to the recent efforts to protect honeybees and products related to honeybee products. Bee parasitic viruses are found throughout the world.

그러한 바이러스 중에서 가장 흔하고 평범한 바이러스로는 변형 날개 바이러스(Deformed Wing Virus; DWV), 급성 꿀벌 숙주바이러스(Acute Bee Paralysis Virus; ABPV), 만성 꿀벌 숙주 바이러스(Chronic Bee Paralysis Virus; CBPV), 흑여왕셀바이러스(Black Queen Cell Virus; BQCV), 케시미르바이러스(Kashmir Bee Virus; KBV)과 낭충봉아부패바이러스(Sacbrood Bee Virus; SBV) 등이 있다. 이런 바이러스의 대부분은 어떠한 증후군없이 벌을 감염시킨다. The most common and common among such viruses are Deformed Wing Virus (DWV), Acute Bee Paralysis Virus (ABPV), Chronic Bee Paralysis Virus (CBPV), and Black Queen Cell Virus. (Black Queen Cell Virus; BQCV), Kashmir Bee Virus (KBV), and Sacbrood Bee Virus (SBV). Most of these viruses infect bees without any syndrome.

현재 우리나라의 양봉규모는 약 4만 가구의 농가에 200만군 정도이다. 대다수 양봉 농가는 매년 꿀벌 응애, 석고병(백묵병), 노제마병, 부저병, 낭충봉아부패병 등의 많은 피해를 받고 있다.Currently, the beekeeping scale of Korea is about 2 million counties in 40,000 households. Most beekeeping farmers are suffering from bee mite, gypsum disease, old horse disease, buzzer disease, and wormworm rot disease.

특히 토종 농가에서는 바이러스성 질병인 낭충봉아 부패병으로 많은 피해를 보고 있으나 공식적으로 허가된 치료제가 없는 상태이며 검증되지 않은 약제를 사용하고 있는 상황은 속히 개선되어야 할 과제이다.In particular, native farms are suffering from worms, which are viral diseases, but there is no officially approved treatment, and the use of unvalidated drugs should be improved quickly.

우리나라에서는 2009년에 토종벌(동양종 꿀벌: Apis cerana)에서 중국 낭충봉아부패병 바이러스(chinese sacbrood virus;CSBV)가 확인되었다. 이 바이러스는 아시아 대륙에 토착하여 오랜 세월 동안 동양종 꿀벌과 함께 진화하였다고 알려져 있다. 1981년 태국에서 발견된 이래 인도, 파키스탄, 네팔 그리고 동양종 꿀벌이 분포하는 거의 모든 아시아 국가에서 발견되고 있다. 안일벌(nurse bee: 젖(로얄제리)을 주거나 먹이(꿀과 화분)를 주는 모든 육아활동을 담당)의 분비선에서 나오는 분비물을 통해 애벌레가 감염된다고 보고 있다. 우리나라에서는 2009년 봄부터 발생하기 시작하여 전국적으로 확산되어 2011년7월 현재 약 90%의 토종벌이 폐사한 것으로 보고되고 있다. In 2009, Chinese sacbrood virus (CSBV) was identified in domestic bees (American bee: Apis cerana). The virus is indigenous to the Asian continent and has been known to evolve with Asian bees for many years. Since its discovery in Thailand in 1981, it has been found in nearly all Asian countries with distributions of Indian, Pakistan, Nepal and Asian bees. It is believed that larvae are infected through secretions from the glands of the nurse bee, which is responsible for all child-rearing activities such as feeding milk (royal jelly) or feeding (honey and pollen). In Korea, it started to occur in spring 2009 and spread throughout the country. As of July 2011, about 90% of native bees are reported to have died.

이 전염병이 발생한 토봉지역에서는 약 한 달안에 모든 봉군이 감염되어 그 후 약 한달이면 모두 폐사된다. 바이러스가 토종 지역에 도달하지 않아야 봉군이 살아남을 수 있으며 현재로서는 바이러스가 발병하면, 예방과 치료가 불가능한 상황이다. 확산 방지를 위해서는 반경 6킬로미터 안의 모든 토종벌을 살처분해야 한다고 알려져 있다.In the Tobong area, where the epidemic occurred, all the rebels became infected within about a month, and died in about one month thereafter. If the virus does not reach the indigenous area, the rebels can survive, and if the virus develops, it is currently impossible to prevent or treat it. In order to prevent spread, it is known that all native bees within a radius of six kilometers must be killed.

한국 토봉(토종벌) 협회에 따르면 충청, 전라, 강원지역의 2천 500여 토종벌 사육 농가에서 5만 5000여통의 토종벌이 낭충봉아 부패병에 감염되었고, 폐사가 진행되고 있다고 한다.According to the Korea Tobong (National Bee) Association, more than 55,000 native bees have been infected with worms and worms from 2,500 native bee farms in Chungcheong, Jeolla and Gangwon.

국립수의과학검역원에서도 전북 남원, 순창, 임실지역에 3개 농가에 대한 조사 결과 감염이 심한 농가의 경우 봉군의 70% 이상이 이 병에 감염된 것으로 확인되었다. 농민 신문은 강원, 충북, 전남, 전북, 경남 등 39.9%(2011년7월말 기준)의 토종벌 농가가 피해를 입은 것으로 보도했다.The National Veterinary Research and Quarantine Service also surveyed three farms in Namwon, Sunchang, and Imsil, Jeonbuk, and found that more than 70% of Bonggun were infected with this disease. The Farmers Newspaper reported that 39.9% (as of the end of July 2011) of native bee farms in Gangwon, Chungbuk, Jeonnam, Jeonbuk, and Gyeongnam were affected.

농림수산식품부의 집계에 따르면, 낭충봉아부패병으로 올해 들어 전체 41만8000군중 49.9%인 16만 6782군에서 토종벌이 폐사하거나 감염됐다고 발표하였다.According to the Ministry of Food, Agriculture, Forestry and Fisheries, native bees died or became infected in 16,6782 groups, or 49.9% of the 418,000 groups this year.

벌통 하나(이를 지칭하여 1봉군이라고 한다.)에는 대략 1만 마리의 벌이 살고 있다. 지난해 5월 강원도에서 처음 발병된 낭충봉아부패병은 올해 충남, 충북과 경남을 거쳐 전남, 전북까지 확산되었고, 이미 강원도에서는 토종벌의 절반이 피해를 입은 것으로 판단된다. 낭충봉아 부패병의 발생은 생산량 급감으로 이어져 토종꿀 가격이 크게 상승하는 것은 물론 벌이 폐사한 지역은 예전처럼 자연 수정이 어려워져 과수 및 화훼 농가의 2차 피해가 우려된다.There are approximately 10,000 bees living in one beehive (referred to as Bonggun). Nangchungbonghyeong disease, which first developed in Gangwon-do in May last year, spread to Chungnam, Chungbuk and Gyeongnam to Jeonnam and Jeonbuk, and it is estimated that half of native bee has already been damaged in Gangwon-do. Occurrence of worms can lead to a sharp drop in production, leading to a sharp rise in native honey prices, as well as to the fact that the bees have died in nature, making natural fertilization difficult, as well as secondary damage to fruit trees and flower farmers.

정확히 검증되지 않은 예방법과 치료법이 사용되고 있으며, 공인된 임상시험에 의해 도출된 약제나 예방 또는 치료법은 2011년7월 현재 없는 상태이다. Prophylactic methods and treatments that are not accurately validated are used, and there are no drugs, prophylaxis or treatments derived from accredited clinical trials as of July 2011.

Study on Sacbrood Virus and Major Royal Jelly Protein family from Honeybee Apis mellifera and on AHLase from Bacillus thuringiensis : Part 1. Study on Honeybee Virus and Honeybee Products : Part 2. Study on quorum quenching from Bacillus thuringiensis, 경기대학교 생물학과(2010)Study on Sacbrood Virus and Major Royal Jelly Protein family from Honeybee Apis mellifera and on AHLase from Bacillus thuringiensis: Part 1.Study on Honeybee Virus and Honeybee Products: Part 2. Study on quorum quenching from Bacillus thuringiensis, Department of Biology, Kyonggi University (2010)

본 발명은 상술한 바와 같은 문제를 해결하기 위하여 안출한 것으로서, 본 발명의 목적은 토봉 농가에서 일어나고 있는 문제인 바이러스 질병의 일종인 낭충봉아부패병의 확산을막고 토종 꿀벌에 대한 보호를 도모할 수 있는 낭충봉아부패병에 대한 치료제를 제공하고자 하는 것이다. The present invention has been made to solve the problems described above, the object of the present invention is to prevent the spread of worms rot decay disease, a kind of viral disease that is a problem occurring in Tobong farms and to protect the native bees It is intended to provide a cure for bony rot.

상기한 목적을 달성하기 위하여 본 발명의 낭충봉아 부패병 치료제는, 티몰 0.1-10 중량%, 장뇌 0.1-10 중량%, 티트리오일 0.1-10중량%, 파이넨 0.1-10 중량%, 이산화염소수(Chlorine dioxide) 0.1-5중량%, 초산(Acetic acid) 0.1-5중량% 및 홍삼 엑기스 0.1-5 중량% 및 정제수 50-80 중량%를 포함한다.In order to achieve the above object, cystic rodent rot treatment agent of the present invention, thymol 0.1-10% by weight, camphor 0.1-10% by weight, tea tree oil 0.1-10% by weight, Pinene 0.1-10% by weight, chlorine dioxide water (Chlorine dioxide) 0.1-5% by weight, 0.1-5% by weight acetic acid and 0.1-5% by weight red ginseng extract and 50-80% by weight purified water.

본 발명에 따른 낭충봉아 부패병치료제에 있어서, 낭충봉아 부패병 치료제 0.005~0.02ℓ를 50중량% 설탕액 1ℓ에 혼합하여 만든 사양 약액을 사용한다.In the nematode rodent rot treatment agent according to the present invention, the specification drug solution made by mixing 0.005 ~ 0.02L worm rodent rot disease treatment agent to 1L of 50% by weight sugar solution is used.

본 발명에 따른 낭충봉아 부패병치료제에 있어서, 낭충봉아부패병 치료제는 양봉용 소독 약제를 흡수한 스펀지와 함께 꿀벌의 출입구에 설치된 벌통에서 투입한다.In the nematode rodent rot treatment agent according to the present invention, the rodent rodent rot treatment agent is injected from the beehive installed at the entrance of the bee with the sponge which absorbed the bee disinfection agent.

본 발명에 따른 낭충봉아 부패병 치료제에 있어서, 꿀벌이 서식하는 벌통에서 꿀벌의 유충 사망 시에는 상기 벌통에서 꿀벌의 산란 및 육아를 제거하고 오염이 없는 산란 판을 투입하여 봉군의 안정을 취하고 소독을 행한다.In the nematode rodent rot treatment agent according to the present invention, when bee larvae die in the beehive beehives, it removes the bee spawning and granulation from the beehives, and puts a scattering plate free of contamination to stabilize the bee group and perform disinfection. .

본 발명에 따른 낭충봉아 부패병치료제에 있어서, 꿀벌의 낭충봉아 부패병 치료제는 1일 1회 또는 2회 꿀벌에게 투여한다. In the nematode rodent rot treatment agent according to the present invention, the beetle rodent rot treatment agent is administered to bees once or twice a day.

본 발명에 따른 낭충봉아부패병에 대한 치료제를 감염전 벌통에 투입하여 꿀벌에 대한 지속적인 예방 치료를 하면 낭충봉아 부패병에 감염되는 일 없이 꿀벌에 대한 보호가 가능하다.If the therapeutic agent for cystic beetle rot disease according to the present invention is put into a beehive before infection and continuously preventive treatment for honey bees, it is possible to protect the honey bee without being infected with cystic beetle rot disease.

본 발명에 따른 낭충봉아부패병에 대한 조성물을 감염전 봉군에 투입시 22% 이상의 생존율을 확인할 수 있으며, 낭충봉아부패 병 바이러스의 감염전의 건강한 봉군에 예방적 차원에서 일정기간 지속적으로 처리할 경우에 벌의 면역력 증가로 벌의 폐사를 막고, 봉군의 세력이 회복 될 수 있는 수단이 될 수 있다.Survival rate of 22% or more can be confirmed when the composition for cystic beetle rot disease according to the present invention is put into the pre-infection Bong-gun. Increased immunity can prevent bees from dying and be a means of restoring the rebel forces.

도 1은 본 발명에 따른 꿀벌의 낭충봉아 부패병 바이러스의 실험결과를 보여주는 그래프이다.Figure 1 is a graph showing the experimental results of the beetle insect rot virus of the bee according to the present invention.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 상세하게 설명한다. 그러나, 이하의 실시예는 이 기술분야에서 통상적인 지식을 가진 자에게 본 발명이 충분히 이해되도록 제공되는 것으로서 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 다음에 기술되는 실시예에 한정되는 것은 아니다. 도면상에서 동일 부호는 동일한 요소를 지칭한다. Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. However, it should be understood that the following embodiments are provided so that those skilled in the art will be able to fully understand the present invention, and that various modifications may be made without departing from the scope of the present invention. It is not. Wherein like reference numerals refer to like elements throughout.

본 발명에 따른 낭충봉아부패병에 대한 치료제는, 티몰 0.1-10 중량%, 장뇌 0.1-10 중량%, 티트리오일 0.1-10중량%, 파이넨 0.1-10 중량%, 이산화염소수(Chlorine dioxide) 0.1-5중량%, 초산(Acetic acid) 0.1-5중량% 및 홍삼 엑기스 0.1-5 중량% 및 정제수 50-80 중량%를 포함한다.The therapeutic agent for cystic beetle rot disease according to the present invention, 0.1-10% by weight of thymol, 0.1-10% by weight of camphor, 0.1-10% by weight of tea tree oil, 0.1-10% by weight of pinene, Chlorine dioxide 0.1-5% by weight, acetic acid (0.1-5% by weight) and red ginseng extract 0.1-5% by weight and purified water 50-80% by weight.

티몰은 백리향과 같은 몇 가지 식물에서 발견되는 천연유제이다. 이러한 티몰은 꿀벌응애류 기생충의 방제에 효과가 있다는 것이 알려져 있다. 그러나 티몰의 기화성은 온도의 변화에 민감하여 날씨가 추워지면, 응애 방제 효율이 떨어지는 반면 뜨거운 여름철엔 기화하는 정도가 커져서 꿀벌에 독성이 가해지는 단점이 있다. 이러한 단점들을 보완하기 위해서 티몰의 기화성을 일관화하기 위하여 젤 형태로 개발되었고, 최근엔 마이크로 캡슐 기법을 적용한 제품도 개발된 상황이다.Timol is a natural emulsion found in some plants, such as thyme. It is known that these thymols are effective in controlling bee mite parasites. However, the vaporization of thymol is sensitive to changes in temperature, so when the weather is cold, the mite control efficiency is lowered, while the degree of vaporization in the hot summer is increased, and the bee is toxic to bees. In order to make up for the shortcomings, the gel was developed in order to cope with the vaporization of thymol, and a product using the microcapsule technique has recently been developed.

이와 같이 에센셜 오일인 티몰 성분의 액체 형태의 꿀벌 응애 진드기 방제효과를 갖는 진드기 방제약품인 티몰을 분무방식이나 점적 방식 또는 흘림 방식으로 투여하면, 꿀벌의 진드기에 대한 살상 효과는 탁월하다고 알려져 있다.Thus, when the thymol, a tick control agent having a liquid form bee mite control effect of the thymol component of the essential oil, is administered in a spray method, a drip method or a shedding method, the killing effect on the bee mite is known to be excellent.

장뇌는 침투성이 있고 곰팡이 냄새가 다소 나는 방향성 유기 화합물이다. 분자식은 C10H16O이며, 향의 성분과 의약품으로 수세기 동안 사용되어 왔다. 현대에는 질산 셀룰로오스를 만들 때 사용되는 가소제와 방충제(특히 나방에 대한 방충제로 사용된다.)로 쓰인다. 주로 중국, 타이완 일본 등지에 서식하는 녹나무에서 산출된다. 가루 상태의 나무에 증기를 통과시켜 생기는 기체를 응축하여 장뇌(캠퍼)를 분리한다. 장뇌는 증류액의 기름 성분으로부터 결정화되며, 압착과 승화과정을 거쳐 정제된다.Camphor is an aromatic organic compound that is permeable and has a mildew odor. The molecular formula is C 10 H 16 O and has been used for centuries as a component of fragrances and medicines. In modern times, it is used as a plasticizer and insect repellent (particularly as an insect repellent against moths) used to make cellulose nitrate. It is mainly produced from camphor trees in China, Taiwan and Japan. The camphor is separated by condensing the gas produced by passing steam through the powdered wood. Camphor is crystallized from the oil component of the distillate and is purified by compression and sublimation.

1930년대 초부터 알파(α)-파이넨에서 몇 가지 공정을 거쳐 장뇌를 만들었다. 장뇌는 테르펜류형 케톤에 속하는 유기화합물 중의 하나이다. 19세기 유기화학에서 장뇌의 구조와 그 반응을 연구하는 일이 중요한 과제였다. 순수한 화합물은 백색을 띠며 매끈한 고체로 녹는점은 178~179℃이다.Since the early 1930's, camphors have been made in alpha-α-Pyenne through several processes. Camphor is one of the organic compounds belonging to the terpene type ketone. In 19th-century organic chemistry, studying the structure of camphor and its response was an important task. Pure compound is white and has a melting point of 178 ~ 179 ℃ as a smooth solid.

티트리오일은 광역 스펙트럼 항균성 활동을 보여준다. 세포막 구조의 투과벽을 붕괴시키는 티트리 오일의 기능과 그리고 그에 따라 수반되는 화학적 침투압 조절기능의 손실은 티트리 오일의 치사작용 때문이다. 게다가 입술 포진성 발진의 치료에 있어서 티트리 오일을 가지고 실시한 플라세보 통제 선행 연구에서 티트리오일이 5%의 아사클로비어와 유사한 정도의 효과를 가지는 것으로 발견되었다.Tea tree oil shows broad spectrum antimicrobial activity. The ability of tea tree oil to disrupt the permeation walls of cell membrane structures, and thus the loss of its ability to control chemical penetration, is due to the lethal action of tea tree oil. In addition, a placebo controlled previous study with tea tree oil in the treatment of herpes rashes found that tea tree oil had a similar effect to 5% asaclovir.

티트리오일의 경우에 여드름의 원인이 되는 박테리아를 죽이는 국소살균제로서 효과적일 것이라는 보고가 있다. Tea tree oil has been reported to be effective as a local disinfectant that kills the bacteria that cause acne.

파이넨은 모노테르펜류에 속하는 탄화수소로, 분자 안에 2개의 고리구조와 1개의 이중결합을 가지고 있는데, 그 이중결합의 차이에 따라 3종의 위치이성질체와 각각의 광학이성질체가 존재한다. Pinene is a hydrocarbon belonging to the monoterpenes, and has two ring structures and one double bond in the molecule. There are three positional isomers and respective optical isomers according to the difference of the double bonds.

화학식 C10H16이며 분자량 136.24이다. 물에는 녹지 않지만, 에탄올·에테르·벤젠 등의 유기용매에는 녹는다. α-피넨은 d형·l형 모두 테레빈유의 주성분인 외에, 침엽수의 정유를 비롯하여 다른 정유 속에 다량으로 분포되어 있다. 녹는점 -55℃, 끓는점 156℃, 비중 0.87이다. 무색의 액체로 상쾌한 향기를 가진다.Formula C 10 H 16 has a molecular weight of 136.24. Insoluble in water, but insoluble in organic solvents such as ethanol, ether and benzene. α-pinene is a main component of terebin oil in both d-type and l-type, and is widely distributed in other essential oils, including conifer oil. Melting point -55 ℃, boiling point 156 ℃, specific gravity 0.87. It is a colorless liquid with a fresh scent.

도료의 용제, 장뇌의 합성원료 등에 사용된다. β-피넨은 α-피넨과 공존하는데, 그 양은 적은 편이다. 무색의 액체로 녹는점 -50℃, 끓는점 165℃, 비중 0.87이다. δ-피넨은 천연으로는 존재하지 않지만, 각각 d-이소베르반올 및 d-피노캄페올의 토실레이트로부터 합성된다. d-시스이성질체는 끓는점 159∼161℃인 무색의 액체이다. l-트랜스이성질체는 끓는점 157∼158℃인 무색의 액체이다. Used as a solvent for paints, synthetic raw materials for camphor. β-pinene coexists with α-pinene, but in small amounts. It is a colorless liquid, melting point -50 ℃, boiling point 165 ℃, specific gravity 0.87. δ-pinene does not exist in nature, but is synthesized from tosylate of d-isoberbanol and d-pinocamperol, respectively. The d-cis isomer is a colorless liquid with a boiling point of 159-161 ° C. The l-trans isomer is a colorless liquid with a boiling point of 157 to 158 ° C.

이산화 염소수(ClO2)는 비염소계 살균소독제로 오존에 이어 가장 강력한 살균력과 탈취 표백력을 갖고 있는 순수한 이산화염소가스가 물에 녹아 있는 수용성 산화제이다. 인체에 무해하며, 부산물로 트리할로메탄 등의 발암 물질 생성이 없고 빛에 의해 쉽게 분해되는 환경 친화적인 물질이다. Chlorine dioxide (ClO 2 ) is a non-chlorine disinfectant that is a water-soluble oxidant in which pure chlorine dioxide gas has the strongest sterilizing power and deodorizing bleaching power following ozone. It is harmless to human body, and it is an environmentally friendly substance that does not produce carcinogens such as trihalomethane and is easily decomposed by light.

이산화염소수는 저농도로도 단시간에 조류 인플루엔자, 신종플루(H1N1)를 포함한 각종 바이러스와 슈퍼박테리아, 여드름균, 진균, 녹농균, 황색포도상구균, 대장균, 살모넬라균, 칸디다진균 등 각종 박테리아(곰팡이)균을 살균하며, 트리할로메탄(Trihalomethane; THM), 할로이세토니트릴(Haloisenitril; HAN) 등의 유해 부산물을 생성하지 않는다.Chlorine dioxide is a low concentration of a variety of bacteria (fungal) bacteria such as avian influenza, swine flu (H1N1), superbacteria, acne, fungi, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella, Candida, etc. It does not produce harmful by-products such as trihalomethane (THM) and haloisetonitrile (HAN).

초산(acetic acid)은 자극성냄새와 산미를 가진 무색의 액체. 탄소, 산소, 수소화합물로 산성의 약한 일염기산이다. 빙초산 섬유소, 빙초산섬유소비닐, 무수 빙초산,아세톤 등의 원료가 되며, 섬유가공 등에도 사용되는 특징이 있다.Acetic acid is a colorless liquid with an irritating odor and acidity. Carbon, oxygen, hydrogen compounds, acidic weak monobasic acid. It is a raw material such as glacial acetic acid fiber, glacial acetic acid vinyl, anhydrous glacial acetic acid, acetone, etc., and has a characteristic of being used in fiber processing and the like.

홍삼엑기스는 인삼 추출물을 말한다. 인삼은 면역학 적인 기능을 갖고 있는 것으로 알려져 있으며, 특히 홍삼 추출물은 쥐에서 자연 살해 세포의 기능 활성화 및 증가를 시키고 세포기인성 면역 및 항체 의존성 세포 독성을 증가시킨다. 다른 연구에서도 인삼은 숙주 면역체계를 활성화시켜 항암 작용을 한다고 하고 있다. Red ginseng extract refers to ginseng extract. Ginseng is known to have an immunological function. Especially, red ginseng extract activates and increases the function of natural killer cells in rats and increases cytotoxic immunity and antibody-dependent cytotoxicity. Other studies have also suggested that ginseng acts as an anticancer by activating the host's immune system.

여기에 혼합할 수 있는 용제로 정제수(distilled water)를 사용한다.Distilled water is used as a solvent that can be mixed therein.

꿀벌의 낭충봉아 부패병 치료제는 1일 1회 또는 2회 꿀벌에게 투여한다. Honey bee worms are given once or twice daily.

낭충봉아 부패병치료제는 낭충봉아 부패병 치료제 0.005~0.02ℓ를 50중량% 설탕액 1ℓ에 혼합하여 만든 사양 약액을 사용한다.Cystic beetle rot disease treatment agent is a specification drug made by mixing 0.005 to 0.02 liters of cystic beetle rot disease treatment agent in 1 liter of 50% by weight sugar solution.

상기 낭충봉아 부패병치료제는 양봉용 소독 약제를 흡수한 스펀지와 함께 꿀벌의 출입구에 설치된 벌통에서 투입하는 것이 바람직하다. 또한 꿀벌이 서식하는 벌통에서 꿀벌의 유충 사망 시에는 상기 벌통에서 꿀벌의 산란 및 육아를 제거하고 오염이 없는 산란 판을 투입하여 봉군의 안정을 취하고 소독을 행하는 것이 바람직하다.
The cystic rod decay treatment agent is preferably injected from a beehive installed at the entrance of the bee together with the sponge absorbing the beekeeping disinfectant. In addition, when bee larvae die in the beehive beehives, it is preferable to remove the bees spawning and granulation from the beehives, and to put the scattering plate free of contamination to stabilize the bee group and perform disinfection.

이하에서, 본 발명에 따른 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제의 실시예들을 더욱 구체적으로 제시하며, 다음에 제시하는 실시예들에 본 발명이 한정되는 것은 아니다. In the following, embodiments of the bee worm worm rot disease treatment agent according to the present invention will be described in more detail, the present invention is not limited to the following examples.

<실시예1>&Lt; Example 1 >

시험 약제인 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제150㎖를 50중량% 18리터에 섞어 사양약액을 만들었다. 시험약제인 낭충봉아 부패병 치료제는 티몰 0.1-10 중량%, 장뇌 0.1-10 중량%, 티트리오일 0.1-10중량%, 파이넨 0.1-10 중량%, 이산화염소수(Chlorine dioxide) 0.1-5중량%, 초산(Acetic acid) 0.1-5중량% 및 홍삼 엑기스 0.1-5 중량% 및 정제수 50-80 중량%를 포함한다.The test drug was mixed with 150 ml of a bee worm bug rot decay disease drug in 50 weight% 18 liters to make a specification drug. The test drug for the wormworm worms, 0.1-10% by weight of thymol, 0.1-10% by weight of camphor, 0.1-10% by weight of tea tree oil, 0.1-10% by weight of pinene, 0.1-5% by weight of chlorine dioxide %, Acetic acid (0.1-5% by weight) and red ginseng extract 0.1-5% by weight and purified water 50-80% by weight.

이렇게 만들어진 시험약제를 1일 1회씩 10일을 매일 또는 격일로 해질 무렵에 사양하는 방식으로 경구 투여를 하였다. The test drug thus prepared was administered orally in the manner of refraining about once every 10 days or every other day.

이하에서 시험하고자 하는 항목에 따라 시험약제를 나누는 방식에 대하여 간략하게 상술한다. Hereinafter, the method of dividing the test drug according to the item to be tested will be described in detail.

A조는 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제에 대한 예방효과 시험 봉군이다. 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제의 투여 전 꿀벌의 봉군에 대한 분석결과가 음성이어야 한다. 꿀벌의 낭충봉아부패병 바이러스에 대한 예방효과를 확인하기 위해서 인공 감염 전에 1일 1회씩 해질 무렵에 10일간 사양방식으로 투약하였다. 투약이 완료된 익일에 낭충봉아부패병 바이러스를 인공감염시키고, 바이러스 예방 효과 검증 및 안전성을 확인하였다.Group A is a test group of prophylactic effects on the treatment of beeworm rot decay. Analysis of honey bee swarm prior to administration of bee nematode rot rot treatment should be negative. In order to confirm the preventive effect of the beetle beetle rot virus, the bee was administered once a day before artificial infection for 10 days. The next day after the completion of the administration artificial infection of the cystic rodent rot virus was confirmed, the virus prevention effect verification and safety was confirmed.

B조는 꿀벌의 낭충봉아부패병 감염 초기 치료 효과 시험 봉군에 대한 분석결과이다. A조와 동일하게 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제의 투여 전 꿀벌의 봉군에 대한 분석 결과가 음성이어야 한다. Group B is the result of the bee group's initial treatment effect test. As in Group A, the results of an analysis of honey bee swarm prior to administration of a bee worm decay disease treatment should be negative.

꿀벌의 낭충봉아부패병 바이러스에 대한 감염 초기 치료 효과를 확인하기 위하여 인공감염과 동시에 앞에서 상술한 사양약액 50㎖ 씩을 기준으로 1일 1회씩 10일간 사양방식으로 해질 무렵에 투약하여 바이러스 감염효과 및 안전성을 확인하였다.In order to confirm the initial treatment effect of bee worm rodentine rot virus, it was administered once a day for 10 days based on the 50 ml of the above-mentioned specification chemicals at the same time as the artificial infection at the time of sunset for the virus infection effect and safety. Confirmed.

C조는 꿀벌의 낭충봉아부패병 바이러스의 감염확인 치료효과 시험 봉군으로서 치료 효과를 확인하기 위하여 인공 감염 1주일 후 인공 감염시킨 성봉의 소화관을 채취하여 PCR(polymerase chain reaction; PCR) 기법을 이용하여 낭충봉아부패 병의 감염여부에 대한 확인과 양성일 경우에 치료용 약제인 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제를 투약하여 바이러스 치료 효과 및 안전성을 점검하였다.
Group C is a test for the identification of the therapeutic effect of the bee worm bug rot virus. In order to confirm the therapeutic effect, group C was collected from the digestive tract of artificially infected Sungbong rods by PCR (polymerase chain reaction; PCR) technique. Confirmation of infection and positivity of decay disease was confirmed, and the therapeutic effect and safety of the virus were checked by administering a cure for beetle worm decay disease, which is a therapeutic drug.

<< 실험예Experimental Example 1> 야외 효력 시험 1> open air effect test

1One -1 벌의 몸 내부에 있는 바이러스 퇴치 시험-1 virus eradication test inside the body of a bee

벌의 몸 내부에 기생하는 바이러스 퇴치 여부에 대한 시험을 수행하기 위해 본 발명에 따른 꿀벌의 낭충봉아 부패병 바이러스 치료제를 혼합하여 만든 사양약액을 벌들에게 먹여서 벌들이 내장에 있는 바이러스가 치료되는 지 확인하였다.In order to perform a test for the parasitic virus in the body of the bee to feed the bees to the specification drug made by mixing the beetle bug rot decay virus treatment of the bee according to the present invention to determine whether the bee virus is treated in the gut .

1-2 벌의 몸 외부에서 기생하는 바이러스 퇴치 시험1-2 virus-proof test outside the body of a bee

벌의 몸 외부에 있는 꿀벌의 낭충봉아 부패병 바이러스에 대한 치료 효과가 있는 지 확인하기 위하여 외부의 벌통에 대한 양봉용 소독제로 소독을 먼저 실시하였다. 상술한 양봉용 소독제는 50배로 희석하여 벌을 포함한 벌통 내부 및 외부를 소독하고 사용하는 양봉 기구들을 분무 또는 침전 방식으로 소독처리하고 치료가 완료될 때까지 반드시 도봉 예방과 소독을 목적으로 양봉용 소독제를 흡수한 스펀지를 벌 출입구에 설치하여 출입하는 벌들이 밟고 다니게 하였다. In order to check whether there is a therapeutic effect against the bee worm bug rot virus outside the body of the bee, the bee disinfectant for external beehives was first disinfected. The above-mentioned beekeeper disinfectant is diluted 50 times to disinfect internal and external beehives including bees, and disinfects beekeepers using spray or precipitation method and absorbs beekeeper disinfectant for the purpose of prevention and disinfection until the treatment is completed. A sponge was installed at the entrance of the bee, allowing the bees to step on it.

양봉용 소독제로는 과산화 술페이트 칼륨(potassium monopersulfate), 술파믹산(sulfamic acid), 아디픽산(adipic acid), 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나를 포함하는 유기산, 탄산수소나트륨을 포함하는 탄산염, 계면활성제, 그리고 바인더를 포함하는 발포형 소독제이며, 이 발포형 소독제는 발포형 소독제 전체 100 중량부에 대하여, 과산화 술페이트 칼륨 45 내지 50 중량부, 술파믹산 10 내지 25 중량부, 아디픽산 1.0 내지 15.0 중량부, 탄산수소나트륨 7.5 내지 15.0 중량부, 계면활성제로 α-올레핀 설포네이트를 포함하는 계면활성제 0.2 내지 2.0 중량부, 바인더로 폴리비닐피롤리돈 및 하이드록실 프로필메틸셀룰로오스를 포함하는 바인더 1.0 내지 5.0 중량부, 소듐 클로라이드(sodium chloride)를 포함하는 산화보조제 0.5 내지 5.0 중량부, 소듐 헥사메타포스페이트(sodium hexametaphosphate)를 포함하는 안정제 3.0 내지 7.5 중량부, 그리고 색소 및 향료 0.01 내지 1.0 중량부를 포함하는 것인 발포형 소독제이다. Beekeeping disinfectants include organic acid, sodium bicarbonate, including any one selected from the group consisting of potassium perpersium monopersulfate, sulfamic acid, adipic acid, and combinations thereof. A foamed disinfectant comprising a carbonate, a surfactant, and a binder, wherein the foamed disinfectant comprises 45 to 50 parts by weight of potassium peroxide, 10 to 25 parts by weight of sulfamic acid, and adipic acid based on 100 parts by weight of the total of the foamed disinfectant. 1.0 to 15.0 parts by weight, 7.5 to 15.0 parts by weight of sodium bicarbonate, 0.2 to 2.0 parts by weight of a surfactant including α-olefin sulfonate as a surfactant, polyvinylpyrrolidone and hydroxyl propylmethylcellulose as a binder 1.0 to 5.0 parts by weight of the binder, 0.5 to 5.0 parts by weight of an oxidizing aid including sodium chloride, sodium hexameta Stabilizer 3.0 to 7.5 parts by weight comprising a switch sulfate (sodium hexametaphosphate), and a foam-type disinfectant comprises dye and a flavoring 0.01 to 1.0 parts by weight.

이러한 발포형 소독제는 소독력이 우수하며, 물에 간단히 투입하는 방식으로 필요한 만큼의 소독약 정량 및 소독력을 쉽게 얻을 수 있고, 발포정 형태이기 때문에 용해 장치 없이도 빠른 시간 내에 완전 용해가 가능하여 작업 시간을 단축시킬 수 있고, 정제 형태이기 때문에 보관, 취급, 운송 비용이 절감되고 특히 필요한 만큼 농도나 양을 조절할 수 있기 때문에 과잉 투여나 낭비가 없고, 과립이나 분말 제제 사용시처럼 소독제 성분이 날림으로 인해 작업자에게 유해할 수 있는 요소가 없어 취급시 안전하고, 작업장 여건상 희석 농도를 단순화 시켜야 할 경우에는 표준 용량 계산이 간편하고, 타 계측기기 없이 필요 농도를 간단히 맞출 수 있다.
These foamed disinfectants have excellent disinfection power and can be easily obtained by quantifying disinfectant as needed by simply putting in water, and because they are foamed tablets, they can be completely dissolved in a short time without dissolving device, thereby reducing work time. It can be stored in the form of tablets, which reduces the cost of storage, handling and transportation, and in particular, the concentration or amount can be adjusted as needed, so there is no overdose or waste, and the disinfectant component is blown away as when using granules or powder formulations. It is safe to handle because there is no workable factor, and it is easy to calculate the standard volume when the dilution concentration needs to be simplified due to the workplace conditions.

이와 같은 외부에 기생하는 바이러스 퇴치 시험에 대한 제반 환경의 구축을 위해서 야외 임상 시험 봉장을 기점으로 반경 4km 이내에는 다른 봉장이 없는 곳을 시험 봉장으로 선택하였다. 상술한 바와 같은 조치는 도봉 및 기타 질병의 전염으로 인하여 시험에 방해가 되는 일이 없도록 하기 위한 조치였다.In order to establish a general environment for this external parasitic virus eradication test, a test rod was selected as a place where no other rods were located within a radius of 4 km starting from an outdoor clinical test rod. The measures described above were intended to ensure that the spread of dobong and other diseases would not interfere with the test.

이때 꿀벌의 사육방식으로는 장×폭×고=500㎜×550㎜×430㎜(외경)의 규격으로 한 랑스트로트 방식의 개량식벌통에서 수행하였다.At this time, the bee breeding method was carried out in an improved hive of the langstrope type, which had a length × width × high = 500 mm × 550 mm × 430 mm (outer diameter).

시험 봉군에 대한 선정시에는 봉세가 비슷하고 질병 감염이 없는 건강한 봉군으로 하였다.In selecting the test group, the group was a healthy group with similar taxes and no disease infection.

야외시험장에 대한 시험을 추진할 때에는 양봉용 소독제로 소독을 실시하고 실험 2에 투입될 벌들의 안정을 위하여 실험 2 수행 전 10일 전에 미리 배치하였다.When the field test site was promoted, sterilization was performed with a beekeeper disinfectant and placed in advance 10 days before the experiment 2 to stabilize the bees to be used in the experiment 2.

각각의 시험예에 대한 시험결과가 서로 영향이 없도록 하기 위하여 고유번호를 부여하고 사충 및 사봉의 수를 확인하기 위하여 벌통의 간격은 4m 이상 띄어 배치하였다.In order to ensure that the test results for each test example do not influence each other, the beehives are spaced at least 4 m apart to give a unique number and to check the number of insects and sand sticks.

표 1은 본 발명에 따른 실험의 조건에 따른 분류와 방식을 비교하여주는 표이다. Table 1 is a table comparing the classification and the method according to the conditions of the experiment according to the present invention.

구 분division 예방효과 시험군(약제 투여후 감염)Prevention effect test group (infection after drug administration) 감염초기 효과 시험군(감염시킨 날 투약)Initial infection test group (dose on the day of infection) 감염확인 후 치료효과 시험Treatment effect test after confirmation of infection 무투약대조군No-Drug Control 분 류Classification A조Group A B조Group B C조Group C D조Group D 사육방식Breeding way 개량방식Improvement Method 개량방식Improvement Method 개량방식Improvement Method 개량방식Improvement Method 봉군수Bonggun 55 55 55 55 번호number A1-A5A1-A5 C1-C5C1-C5 C1-C5C1-C5 D1-D5D1-D5

액상 사료의 자동 공급을 위하여 실험 2에 대한 수행 전 10일 전에 액상 사료 자동 사양 공급시스템을 설치하였다. 이때 사용한 사료는 사양액과 화분 떡이었다.For the automatic feeding of the liquid feed, a liquid feed automatic specification feeding system was installed 10 days before the experiment 2 was conducted. The feed used at this time was the specification solution and potted rice cake.

표 2는 사양액과 화분 떡의 조성을 보여주는 표이다. Table 2 is a table showing the composition of the specification solution and potted rice cake.

구 분division 제조방법Manufacturing method 사양 약액Specification Chemical 물:설탕 =50:50(50% 당액)Water: Sugar = 50:50 (50% sugar) 화분 떡Potted rice cake 자연화분:설탕: 물 = 5:5:1.5의 혼합한 떡 형태Natural pot: Sugar: Water = 5: 5: 1.5 mixed rice cake form

위와 같은 사양 약액은 1매당 50㎖을 기준으로 1일 1회씩 매일 또는 격일 간격으로 해질 무렵 사양하는 방식으로 투여하여 도봉을 예방함으로써 순조로운 야외 실험이 되도록 하였다.The above specifications chemical solution was administered once a day or every other day at a rate of 50 ml per sheet at the time of sunset to prevent the dobong to be a smooth outdoor experiment.

화분떡은 1kg 이상 공급 후 실험을 시작하고 부족하면 추가하는 방식을 사용하였다.
Potted rice cake began the experiment after supplying more than 1kg and used a method of adding if insufficient.

<< 실험예Experimental Example 2>  2> 낭충봉아Nymphworm 부패병 바이러스 배양 실험 Corruption virus culture experiment

낭충봉아부패병 바이러스에 감염된 애벌레를 모아 밀폐된 상태로 -80℃에서 보관하며 10일 이내에 사용하였다. 감염된 애벌레의 낭충봉아 부패병 바이러스에 대한 감염 여부를 확인하기 위해 먼저 감염 추정된 애벌레를 액체 질소로 동결시킨 후 마쇄하여 1.5㎖ 원심분리기(eppendrof tube)에 넣고 SV RNA 추출키트(promega)의 방법으로 총 RNA(ribonucleic acid)을 분리하였으며, 최종적으로 50㎕ RNase-free water에 용리(elution)하였다. 총 RNA는 올리고 -dT 프라이머와 cDNA 합성 키트(promega)에 의한 역전사 효소 반응 PCR을 통해 cDNA를 합성하였다. 이렇게 합성된 cDNA를 주형으로 하여 낭충봉아 부패 병 바이러스의 유전자-특성 프라이머인 SBV-F(5`-gctgaggtaggatctttgcgt-3`)와 SBV-R(5`-tcatcatcttc accatccga-3`) 프라이머를 사용하여 PCR을 통해 증폭된 cDNA의 열과 유전자 은행에 등록된 뉴클레오티드 열과 비교하여 감염여부를 판단하였다. 감염이 확인된 애벌레 2g을 6ml 멸균 PBS(phosphate buffered solution)(137mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na2HPO4, pH 7.4)에 넣고 분쇄 후, 4℃ 12,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액만 분취하여 바이러스를 회수하였다.
Larvae infected with the cystic rod rot virus were collected and stored at -80 ° C in a sealed state and used within 10 days. To determine whether the infected larvae were infected with the worm-worm virus, the estimated larvae were first frozen with liquid nitrogen, crushed and placed in a 1.5 ml eppendrof tube. RNA (ribonucleic acid) was isolated and finally eluted in 50 μl RNase-free water. Total RNA was synthesized cDNA by reverse transcriptase reaction PCR with oligo -dT primer and cDNA synthesis kit (promega). PCR was performed using SBV-F (5`-gctgaggtaggatctttgcgt-3`) and SBV-R (5`-tcatcatcttc accatccga-3`) primers, which are gene-specific primers of the beetle rot virus, using the synthesized cDNA as a template. The infection was determined by comparing the sequence of cDNA amplified by the nucleotide sequence registered in the gene bank. 2 g of the confirmed larvae were placed in a 6 ml sterile PBS (phosphate buffered solution) (137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na 2 HPO 4 , pH 7.4), crushed, and centrifuged at 12,000 rpm for 10 minutes at 4 ° C to separate the supernatant. Virus was recovered.

22 -2 꿀벌 애벌레를 이용한 바이러스 배양-2 Virus Culture Using Bee Larvae

꿀벌 애벌레를 세포 배양용 플레이트로 이충하고 37℃,90%의 습도 조건에서 개량 인공 사양액(6% D-글루코제(glucose), 6% D-프록토제(fructose), 1% 효소 추출물(yeast extract), 50% 로얄제리(royal jelly))에 회수된 바이러스를 넣고 2일 배양 후, 배양된 애벌레 0.2g을 6ml 멸균 PBS(phosphate buffered solution)(137mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na2HPO4, pH 7.4)에 넣고 분쇄 후, 4℃ 12,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액만 분취하여 바이러스를 회수하였다. 회수된 바이러스 상등액을 실시간(Real Time) PCR법을 이용하여 바이러스의 농도(copies/㎕)를 측정하고 실험시 1×105(copies/ml)가 되도록 희석하여 실험에 사용하였다.
Bee larvae were transferred to cell culture plates and improved artificial specification solution (6% D-glucose, 6% D-fructose, 1% enzyme extract at 37 ° C, 90% humidity). extracts, 50% royal jelly, and the recovered virus were incubated for 2 days, and 0.2 g of the cultured larvae were 6 ml sterile PBS (phosphate buffered solution) (137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na 2 HPO 4). , pH 7.4), pulverized, and centrifuged at 12,000 rpm for 4 minutes to separate the supernatant and recover the virus. The recovered virus supernatant was measured for virus concentration (copies / μl) using a real time PCR method and diluted to 1 × 10 5 (copies / ml) for the experiment.

<< 실험예Experimental Example 3> 인공감염방법, 감염상태 확인 방법 및 처치 방법 3> Artificial infection method, infection status check method and treatment method

3-1 인공감염 방법3-1 Artificial Infection Methods

50% 설탕 시럽 80㎖에 낭충봉아부패 병 바이러스 105copies/㎖을 섞어서 봉군당 2㎖ 분량을 사양 방식 또는 분무식으로 성봉에 감염시켰다. 80 ml of 50% sugar syrup was mixed with 10 5 copies / ml of nematode rot disease virus and 2 ml aliquots per group were infected by adult feeding or spraying.

3-2 감염상태 확인 방법3-2 How to check for infection

인공 감염 1주일 후 인공감염 시킨 성봉의 소화관을 채취하여 PCR 기법을 이용하여 낭충봉아부패병의 감염여부를 확인하였다.
One week after the artificial infection, the digestive tract of the artificially infected Seongbong was harvested and confirmed by infection with cystic beetle rot.

<< 실험예Experimental Example 4> 야외 실험 안전성 평가 방법 및 평가기준 4> Evaluation method and evaluation standard of outdoor experiment safety

4-1 평가방법4-1 Evaluation Method

시험 약제로 만든 사양 약액을 소비 1매당 50㎖ 씩을 기준으로 1일 1회씩 공급한 양을 어느 정도 소화시켰는지를 육안으로 확인한다. (10일간 공급하면서 관찰하였다.)Visually confirm the degree of digestion of the supplied amount of the specification drug solution made with the test drug once daily, based on 50 ml per consumption. (Observed while feeding for 10 days.)

투약 후 벌들의 소동여부 및 실험 기간 동안 실험 봉군의 사면 2m 이내의 사봉의 숫자 등을 육안으로 확인한다.After dosing, the bee's disturbance and the number of sand bars within 2m of the experimental Bonggun during the experiment shall be checked visually.

실험 약제로 인한 도봉 유무를 확인한다. 실험 약제로 인한 산란 중단 등의 부작용 유무를 확인한다. Check for doping due to the experimental drug. Check if there are any side effects such as stopping spawning due to the experimental drug.

4-2 평가기준4-2 Evaluation Criteria

실험 약제로 만든 사양약액을 1매당 50㎖씩을 기준으로 1일 1회씩 공급한 전량을 소화시켜야 한다.The total amount of the specifications solution prepared as experimental drug should be digested once a day based on 50 ml per sheet.

실험 약제 투약 후 벌들의 소동이 없어야 하고, 실험 기간 동안 실험 봉군의 사면 2m 이내에서 실험 약제로 인한 사봉이 없어야 한다. 실험 약제로 인한 도봉이 없어야 한다. 실험 약제로 인한 산란 중단등의 부작용이 없어야 한다.
There should be no disturbance of bees after administration of the test agent, and there should be no bee due to the test agent within 2 meters of the slope of the test group during the test period. There should be no dosing caused by the test agent. There should be no side effects such as interruption of spawning due to the experimental drug.

<실험 결과> <Experimental Results>

A조 예방 효과실험 결과Group A prevention effect test result

응애 감염 정도는 유사하나 낭충봉아 부패병의 감염여부를 검사방법에 따라 확인한 결과 다른 실험군과 마찬가지로 양성으로 나타났으며 사충도 총 1132마리가 개수되었으나, 무처리군인 D 실험군의 사충(1462마리)과 비교하였을 경우 약 22%의 생존율이 증가하였다. RT -PCR을 통해서도 낭충봉아 부패병의 바이러스의 세력이 약해지는 것을 확인하였다. 본 발명에 따른 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제의 경우 바이러스의 감염 전에 예방 차원에서 처리할 경우에 벌의 면역력 증가 등으로 벌의 폐사를 막고 봉군의 세력이 회복될 수 있는 방법이라고 생각되었다.Although the degree of mite infection was similar, it was found to be positive as in other experimental groups. The total number of worms was 1132, and compared with the worms of the experimental group D (1462). The survival rate increased by about 22%. RT-PCR also confirmed that the forces of the virus of cystic rodent rot were weakened. In the case of bee worm bug rot decay treatment according to the present invention was considered to be a way to prevent the death of the bee and to restore the forces of the bee bong by increasing the immunity of the bee when treated in a preventive manner before the virus infection.

B조 감염 초기 치료 효과 실험 결과Experimental results of early treatment of group B infection

응애 감염 정도는 유사하나 낭충봉아 부패 병의 감염여부를 검사방법에 따라 확인하였다. 감염여부 확인 결과 다른 실험군과 마찬가지로 양성으로 나타났으며, 사충도 총 1343마리에 이르렀다. 무처리군인 D군과 비교하였을 때 약 8%의 생존율이 증가되는 것으로 관찰되었다.The degree of infection of the mites was similar, but the infection of the worms was confirmed according to the test method. As a result of the confirmation of infection, it was positive like other experimental groups, and 1343 worms totaled. The survival rate was increased by about 8% compared to the non-treated group D.

C조 Group C 감염후After infection 치료 효과 확인실험 Treatment effect confirmation experiment

응애 감염 정도는 유사하나 낭충봉아 부패병의 감염여부를 검사방법에 따라 확인하였다.The degree of mite infection was similar, but infection of cystic rod rot was confirmed according to the test method.

감염여부를 확인한 결과 다른 실험군과 마찬가지로 양성으로 나타났으며, 사충도 총 1407마리가 개수되어 무처리군인 D실험군의 사충(1462마리)과 비교하였을 때 생존율이 비슷하며, PCR 의 결과에서도 비슷한 경향을 보여주었다As a result of infection, it was found to be positive like other experimental groups. The total number of 1407 insects was similar, and the survival rate was similar when compared to the insects of the experimental group D (1462), which showed similar trends in PCR results. Showed

표 3은 사충확인 결과를 보여주는 표이다. Table 3 is a table showing the results of insect killing confirmation.

봉군번호Military number 감염여부Infection 0day0day 10day10day 10day10day 17day17day 24day24day 31day31day A군Group A A-1A-1 -- --





sign

ball

feeling

salt
++++++ ++++ ++
A-2A-2 -- -- ++++++ ++++ ++ A-3A-3 -- -- ++++++ ++++ ++++ A-4A-4 -- -- ++++++ ++++ ++ A-5A-5 -- -- ++++++ ++++ ++++ B군Group B B-1B-1 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ B-2B-2 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ B-3B-3 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ B-4B-4 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ B-5B-5 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ C군Group C C-1C-1 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ C-2C-2 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ C-3C-3 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ C-4C-4 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ C-5C-5 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ D군Group D D-1D-1 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ D-2D-2 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ D-3D-3 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ D-4D-4 -- -- ++++++ ++++++ ++++++ D-5D-5 -- -- ++++++ ++++++ ++++++

도 5는 본 발명에 따른 꿀벌의 낭충봉아 부패병 바이러스의 실험결과를 보여주는 표이다.Figure 5 is a table showing the experimental results of the beetle insects rot virus of the bee according to the present invention.

도 5를 참조하면, A군의 경우에서만 사충수가 다른 실험군에 비하여 유의있게 감소했다는 것을 확인할 수 있다.
Referring to Figure 5, it can be seen that the number of larvae significantly decreased compared to the other experimental group only in the case of group A.

<< 실험예5Experimental Example 5 > 야외 실험 안전성 평가 결과> Outdoor Experiment Safety Assessment Results

안전성 평가기준으로 삼았던 지표는 사양약액 소비 정도, 실험 봉군의 사면 2m 내의 사봉의 숫자, 도봉 유무 및 산란 중단 등의 부작용 유무를 기준으로 판단하였다.The indicators used as the safety evaluation criteria were judged based on the degree of consumption of the specification drug, the number of the four-slopes within 2m of the experimental Bong-gun, the presence or absence of the rods and the stopping of spawning.

5-1 안전성5-1 Safety

본 발명에 따른 꿀벌의 낭충봉아 부패병 치료제의 경우 벌들이 소동을 일으키지 않았으며, 사봉은 확인되지 않았다.In the case of the bee worm bug rot disease treatment according to the present invention, the bees did not cause a disturbance, and no sapons were identified.

표 4는 본 발명에 따른 꿀벌이 낭충봉아 부패병 치료제 투입에 대한 안전성 결과를 보여주는 표이다.Table 4 is a table showing the safety results for the bee according to the present invention for the treatment of worms bugs rot.

구분division 1차시험1st test 2차시험Second test 비고Remarks 총량Total amount 평균Average 총량Total amount 평균Average 투약군 사봉총량(10군)Dosing group total salary (10 groups) 138138 13.813.8 142142 14.214.2 무투약군 자연사봉(5군)Non-medicated group natural sapon (Group 5) 6666 13.113.1 6262 12.412.4 자연사봉대비 사봉수Sabongsu compared to natural 0.70.7 1.81.8

5-2 부작용5-2 side effects

본 발명에 따른 꿀벌의 낭충봉아 부패병 치료제의 사용에 따른 부작용은 관찰되지 않았다. 용법 용량에 맞지 않게 과도하게 많이 사용할 경우 치료제의 냄새로 인해 벌들이 먹지 않은 기록은 있었다.
No side effects were observed with the use of a bee worm bug rot decay agent according to the present invention. There was a record that bees did not eat due to the odor of the therapeutic agent when excessively used in excess of the dosage.

이상, 본 발명의 바람직한 실시예를 들어 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예에 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술적 사상의 범위내에서 당 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 여러 가지 변형이 가능하다.As mentioned above, although preferred embodiment of this invention was described in detail, this invention is not limited to the said embodiment, A various deformation | transformation by a person of ordinary skill in the art within the scope of the technical idea of this invention is carried out. This is possible.

Claims (6)

티몰 0.1-10 중량%, 장뇌 0.1-10 중량%, 티트리오일 0.1-10중량%, 파이넨 0.1-10 중량%, 이산화염소수(Chlorine dioxide) 0.1-5중량%, 초산(Acetic acid) 0.1-5중량%, 홍삼 엑기스 0.1-5 중량% 및 정제수 50-80 중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제.0.1-10% by weight of thymol, 0.1-10% by weight of camphor, 0.1-10% by weight of tea tree oil, 0.1-10% by weight of pinene, 0.1-5% by weight of chlorine dioxide, 0.1% of acetic acid -5% by weight, red ginseng extract 0.1-5% by weight and purified water 50-80% by weight of the bee worms rot rot disease treatment. 제1항에 있어서,
상기 낭충봉아 부패병치료제는 상기 낭충봉아 부패병 치료제 0.005~0.02ℓ를 50중량% 설탕액 1ℓ에 혼합하여 만든 사양 약액을 사용하는 것을 특징으로 하는 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제.
The method of claim 1,
The cystic rod rot treatment agent is a nymph rot rot disease treatment agent characterized in that using the specification drug made by mixing the cystic rod rot treatment agent 0.005 ~ 0.02L to 1L of 50% by weight sugar solution.
제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 낭충봉아 부패병치료제는 양봉용 소독제를 흡수한 스펀지와 함께 꿀벌의 출입구에 설치된 벌통에서 투입하는 것을 특징으로 하는 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제
The method according to claim 1 or 2,
The beetle bug rot treatment agent is a beetle bug rot disease treatment, characterized in that the bee in the beehive installed in the entrance of the bee together with the sponge absorbing the bee disinfectant
제1항 또는 제2항에 있어서,
꿀벌이 서식하는 벌통에서 꿀벌의 유충 사망 시에는 상기 벌통에서 꿀벌의 산란 및 육아를 제거하고 오염이 없는 산란 판을 투입하여 봉군의 안정을 취하고 소독을 행하는 것을 특징으로 하는 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제.
The method according to claim 1 or 2,
When the larvae of the bees in the beehive beehive death, bee larvae and rot decay disease, characterized in that to remove the scattering and granulation of the bees from the beehive and to put the contamination-free scattering plate to stabilize the bonggun and disinfect.
제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 꿀벌의 낭충봉아 부패병 치료제는 1일 1회 또는 2회 꿀벌에게 투여하는 것을 특징으로 하는 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제.
The method according to claim 1 or 2,
The beetle bug decay treatment agent of bees, characterized in that administered to bees once or twice a day beetle bug rot disease.
제3항에 있어서,
상기 꿀벌의 양봉용 소독제는 과산화 술페이트 칼륨(potassium monopersulfate), 술파믹산(sulfamic acid), 아디픽산(adipic acid), 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나를 포함하는 유기산, 탄산수소나트륨을 포함하는 탄산염, 계면활성제, 그리고 바인더를 포함하는 발포형 소독제이며, 상기 발포형 소독제는 상기 발포형 소독제 전체 100 중량부에 대하여, 상기 과산화 술페이트 칼륨 45 내지 50 중량부, 상기 술파믹산 10 내지 25 중량부, 상기 아디픽산 1.0 내지 15.0 중량부, 상기 탄산수소나트륨 7.5 내지 15.0 중량부, 상기 계면활성제로 α-올레핀 설포네이트를 포함하는 계면활성제 0.2 내지 2.0 중량부, 상기 바인더로 폴리비닐피롤리돈 및 하이드록실 프로필메틸셀룰로오스를 포함하는 바인더 1.0 내지 5.0 중량부, 소듐 클로라이드(sodium chloride)를 포함하는 산화보조제 0.5 내지 5.0 중량부, 소듐 헥사메타포스페이트(sodium hexametaphosphate)를 포함하는 안정제 3.0 내지 7.5 중량부, 그리고 색소 및 향료 0.01 내지 1.0 중량부를 포함하는 것인 발포형 소독제인 것을 특징으로 하는 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제.
The method of claim 3,
The bee beekeeping disinfectant includes an organic acid, sodium hydrogencarbonate, including any one selected from the group consisting of potassium perpersium monopersulfate, sulfamic acid, adipic acid, and combinations thereof. It is a foamed disinfectant comprising a carbonate, a surfactant, and a binder, wherein the foamed disinfectant is 45 to 50 parts by weight of the potassium peroxide sulfate, 10 to 25 with respect to 100 parts by weight of the foamed disinfectant Parts by weight, 1.0 to 15.0 parts by weight of the adipic acid, 7.5 to 15.0 parts by weight of the sodium bicarbonate, 0.2 to 2.0 parts by weight of a surfactant containing α-olefin sulfonate as the surfactant, polyvinylpyrrolidone as the binder And 1.0 to 5.0 parts by weight of a binder containing hydroxyl propylmethylcellulose, including sodium chloride. Beetle insects, characterized in that the foaming disinfectant comprising 0.5 to 5.0 parts by weight of the oxidizing aid, 3.0 to 7.5 parts by weight of a stabilizer containing sodium hexametaphosphate, and 0.01 to 1.0 parts by weight of pigments and fragrances. Treatment of bud rot.
KR1020110138322A 2011-12-20 2011-12-20 Agent for sacbrood virus of bees KR20130071028A (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020110138322A KR20130071028A (en) 2011-12-20 2011-12-20 Agent for sacbrood virus of bees

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020110138322A KR20130071028A (en) 2011-12-20 2011-12-20 Agent for sacbrood virus of bees

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20130071028A true KR20130071028A (en) 2013-06-28

Family

ID=48865635

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020110138322A KR20130071028A (en) 2011-12-20 2011-12-20 Agent for sacbrood virus of bees

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20130071028A (en)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101600983B1 (en) * 2014-10-15 2016-03-08 이우철 Therapeutic and preventive agent for sacbrood of bees
KR20160148742A (en) 2015-06-16 2016-12-27 김대립 Block absence for queen bee of native bee, management device using it and method thereof
CN106872697A (en) * 2017-02-10 2017-06-20 江西农业大学 Apis cerana sac brood virus immunity colloidal gold strip
WO2018160821A1 (en) * 2017-03-03 2018-09-07 Arkema Inc. Prevention of diseases in honeybees and reduction of pesticide residues in beeswax
WO2022037554A1 (en) * 2020-08-20 2022-02-24 Sundial Technology Development Limited Disinfectant formulations
KR20220089469A (en) * 2020-12-21 2022-06-28 이종원 Preparation of chlorine dioxide water with improved long-term stability, eco-friendly sterilization, disinfection and deodorant using the same, and method for manufacturing the same
EP3972622A4 (en) * 2019-05-23 2023-06-21 Arkema, Inc. Prevention of diseases in honeybees

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101600983B1 (en) * 2014-10-15 2016-03-08 이우철 Therapeutic and preventive agent for sacbrood of bees
KR20160148742A (en) 2015-06-16 2016-12-27 김대립 Block absence for queen bee of native bee, management device using it and method thereof
CN106872697A (en) * 2017-02-10 2017-06-20 江西农业大学 Apis cerana sac brood virus immunity colloidal gold strip
WO2018160821A1 (en) * 2017-03-03 2018-09-07 Arkema Inc. Prevention of diseases in honeybees and reduction of pesticide residues in beeswax
EP3972622A4 (en) * 2019-05-23 2023-06-21 Arkema, Inc. Prevention of diseases in honeybees
WO2022037554A1 (en) * 2020-08-20 2022-02-24 Sundial Technology Development Limited Disinfectant formulations
KR20220089469A (en) * 2020-12-21 2022-06-28 이종원 Preparation of chlorine dioxide water with improved long-term stability, eco-friendly sterilization, disinfection and deodorant using the same, and method for manufacturing the same

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20130071028A (en) Agent for sacbrood virus of bees
Easton-Calabria et al. Beyond pollination: honey bees (Apis mellifera) as zootherapy keystone species
Li et al. The effects of clove oil on the enzyme activity of Varroa destructor Anderson and Trueman (Arachnida: Acari: Varroidae)
KR102024124B1 (en) pest control composition for honeybee mite
Nwankwo et al. Phytochemical screening and antimicrobial activity of apiary honey produced by honey bee (Apis mellifera) on clinical strains of Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Candida albicans
ES2906261T3 (en) Biocidal composition comprising a water-soluble olea europaea extract for the control of pests that affect honey bees
US20200179473A1 (en) Anti-pathogenic compositions
KR20190042151A (en) Anti-fungal composition derived from natural products
El Zalabani et al. Acaricidal activity of Swietenia mahogani and Swietenia macrophylla ethanolic extracts against Varroa destructor in honeybee colonies
Özdemir et al. Prevention of Saprolegniasis in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) eggs using oregano (Origanum onites) and laurel (Laurus nobilis) essential oils
KR20120122072A (en) The gel type composition for prevention of varroa jacobsoni
Sapaat et al. Anthelmintic activity of papaya seeds on Hymenolepis diminuta infections in rats.
KR101185328B1 (en) Apiary veterinary composition
Lazăr et al. Use of Essential Oils in Bees
KR102104045B1 (en) pest control composition for honeybee mite using bee venom
CN105532756B (en) Bee medicine for treating parasitic mites
Tiwari et al. Efficacy of animal origin products and ajwain powder against honey bee diseases in Apis mellifera (Linnaeus) colonies in Uttarakhand-A novel eco-friendly approach
Jain et al. Animal self-medication through natural sources
Lobo et al. Ethnomedicinal plants for veterinary use in gypsy communities of the northeast of Brazil
Ntalli et al. The role of botanical treatments used in apiculture to control arthropod pests
EP3562495B1 (en) Composition for prevention and control of bee diseases and use of hemp oil for preparation of the composition
KR20040003999A (en) Composition of Bactericidal action and Disinfectant
KR101600983B1 (en) Therapeutic and preventive agent for sacbrood of bees
Molefe Anthelmintic, anticancer and phytochemical screening of Cotyledon orbiculata; Hermannia depressa; Nicotiana glauca and potassium permanganate
Parviz et al. Tea Tree (Melaleuca alternifolia (Maiden & Betche) Cheel) Oil an important medicinal essential oil

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application