KR20120111388A - 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 의한 지구자 추출물은 천연물로서 부작용이 없고, 뼈의 분해 억제가 아닌 형성을 촉진하여 기존의 뼈 분해억제제의 단점을 보완하여 골다공증 및 관련 질병의 치료에 효과적이다.
Description
본 발명은 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
골다공증이란 뼈의 화학적 조성에는 변화가 없고, 단위용적 내의 골량의 감소를 초래하여 경미한 충격에도 쉽게 골절을 일으킬 수 있는 질환을 말한다. 현재 골다공증 치료제의 대부분은 병의 증상을 완화하거나 진행을 막는 것이 목표라 주로 골흡수 억제제(antiresorptive drug)로 골 손실을 지연시키는 작용을 한다. 현재 사용하는 골다공증 치료제는 파골세포(골 흡수에 관여하는 세포)의 기능을 약화시켜 뼈 손실을 막아주는 비스포스포네이트(Bisphosphonates) 제제가 주류를 이루며, 머크사(社)의 `포사맥스`, 프록터갬블사(社)의 `악토넬` 등이 있다. 하지만 이들 치료제는 뼈를 형성을 촉진하는 것이 아닌 분해 억제제로 지속적인 사용시 뼈를 푸석푸석하게 하여 지속적인 사용시 추가적인 골절을 유도 할 수 있기 때문에 근본적인 치료는 될 수 없는 상황으로 대체제가 절실한 실정이다.
최근 들어 뼈의 형성과 관련된 여러 종류의 단백질과 유전자의 기능이 밝혀짐으로써 이러한 단백질 및 유전자들을 표적으로 하는 `뼈 형성 촉진제`의 개발에 대한 다양한 시도가 다국적 제약회사나 국내에서 이루어지고 있다, Wnt/β-catenin 신호전달계는 이 신호전달계의 보조수용체(co-receptor)인 LRP5가 골밀도 감소로 인해 나타나는 대표적인 유전질환인 osteoporosis pseudoglioma syndrome (OPPG)의 원인이 됨이 보고된 이래로 뼈 성장 및 골밀도 조절에 대한 관련성이 활발하게 연구되고 있으며, Wnt/β-카테닌 신호전달계의 활성화가 뼈 부피의 증가를 유도한다는 것이 알려져 있으며, 골다공증 치료에 있어 효과적이고 안전한 약물 치료 표적으로 각광받고 있다(Boyden et al.N. Engl. J. Med. 2002; Little et al.Am. J. Hum.Genet.2002; Einhorn et al., Science Translational Medicine, 2010; Yavropoulous et al., Exepert Review of Endocrinology and Metabolism, 2010; Wagner et al. Current Molecular Pharmacology, 2011).현재로는 뼈 형성을 치료하는 안전한 골다공증 치료제는 비싸고 적용이 용이치 않은 Paratyroidhormone(PTH)을 제외하고는 개발 된 바 없다. 이에 본 발명자들은 오랜 임상을 바탕으로 하기 때문에 부작용의 부담이 적고, 상대적으로 신약으로 개발 시 비용이 저렴한 천연물인 지구자(Hoveniadulcis Thunb.) 를 이용하여 Wnt/β-카테닌 신호전달계를 활성화 시킬 수 있다는 것을 발견하여 본 발명에 이르렀다.
본 발명의 목적은 뼈를 푸석푸석하게 하는 기존의 뼈 분해억제제의 단점을 보완하여 부작용이 없는 골다공증 및 관련 질병에 크게 도움을 줄 수 있는 천연물인 지구자를 이용한 골 질환 예방 및 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여 일 구체예에서, 지구자(Hoveniadulcis Thunb.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다. 다른 구체예에서, 상기 골 질환은 이에 한정된 것은 아니지만 골다공증(osteoporosis), 골연화증(osteomalacia), 구루병, 섬유성 골염, 무형성 골질환 및 대사성 골질환으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 골 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다. 또 다른 구체에에서, 상기 추출물은 Wnt/β-카테닌 신호전달계의 활성을 촉진하는 것을 특징으로 하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 상기 추출물은 Wnt/β-카테닌 신호전달계 활성에 의한 뼈 형성을 촉진하는 것을 특징으로 하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 상기 골 질환이 골다공증(osteoporosis)인 것을 특징으로 하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 투여량은 0.1 내지 10g/kg인 것을 특징으로 하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 경구, 비경구, 동맥내, 피내, 경피, 근육내, 복강내, 정맥내, 피하 및 비내 투여되는 것을 특징으로 하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.
일 구체예에서, 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환의 개선 및 완화용 식품 조성물을 제공한다. 다른 구체예에서, 상기 골 질환은 이에 한정된 것은 아니지만 골다공증(osteoporosis), 골연화증(osteomalacia), 구루병, 섬유성 골염, 무형성 골질환 및 대사성 골질환으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 골 질환의 개선 및 완화용 식품 조성물을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 상기 추출물은 Wnt/β-카테닌 신호전달계의 활성을 촉진하는 것을 특징으로 하는 골질환의 개선 및 완화용 식품 조성물을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 상기 추출물은 Wnt/β-카테닌 신호전달계 활성에 의한 뼈 형성을 촉진하는 것을 특징으로 하는 골질환의 개선 및 완화용 식품 조성물을 제공한다. 또 다른 구체예에서, 상기 골 질환이 골다공증(osteoporosis)인 것을 특징으로 하는 골질환의 개선 및 완화용 식품 조성물을 제공한다.
투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약학적으로 허용가능한 담체를 1종 이상 포함하여 제조할 수 있다. 약학적으로 허용가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로오스 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 비경구, 동맥내, 피내, 경피, 근육내, 복강내, 정맥내, 피하, 경구 및 비내 투여 경로를 포함하여 다양한 경로에 의해 인간이나 동물에 투여될 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강 상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 상기 조성물의 일일 투여량은 약 10ng/㎏~10㎎/㎏, 바람직하게는 약 80~400ng/㎏이며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여하는 것이 더욱 바람직하다.
본 발명에서 “지구자”는 갈매나무과의 헛개나무(Hoveniadulcis Thunb.)의 과병을 가진 열매 또는 씨를 말한다.
본 발명에서 “골질환”은 뼈 내의 파골세포와 조골세포의 불균형에 의한 결과로서 그 예로는 이에 한정하지는 않지만, 암세포의 골전이에 의해 초래되는 뼈의 손상, 골다공증, 골연화증, 구루병, 섬유성 골염, 무형성 골질환 및 대사성골질환이 있다(한국등록특허 제 10-0399374 및 제 10-0720026 참조).
본 발명에 의한 지구자 추출물은 천연물로서 부작용이 없고, 뼈의 분해 억제가 아닌 형성을 촉진하여 기존의 뼈 분해억제제의 단점을 보완하여 골다공증 및 관련 질병의 치료에 효과적이다.
도 1은 Wnt/β-카테닌 신호전달계를 활성화하는 천연물 스크리닝 결과이다.
도 2는 지구자 추출물을 HEK-TOP에서 β-카테닌에 의한 전사를 측정한 결과이다.
도 3은 지구자 추출물을 통하여 β-카테닌의 단백질 증가를 나타낸 결과이다.
도 4는 면역조직염색법을 통하여 β-카테닌의 증가를 확인한 사진이다.
도 5는 지구자 추출물을 처리한 군의 머리덮개뼈 두께의 증가를 나타낸 사진이다.
도 6은 지구자 추출물을 처리한 군의 머리덮개뼈 두께의 증가를 나타낸 그래프이다.
도 2는 지구자 추출물을 HEK-TOP에서 β-카테닌에 의한 전사를 측정한 결과이다.
도 3은 지구자 추출물을 통하여 β-카테닌의 단백질 증가를 나타낸 결과이다.
도 4는 면역조직염색법을 통하여 β-카테닌의 증가를 확인한 사진이다.
도 5는 지구자 추출물을 처리한 군의 머리덮개뼈 두께의 증가를 나타낸 사진이다.
도 6은 지구자 추출물을 처리한 군의 머리덮개뼈 두께의 증가를 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예
실시예
1.
천연 추출물의 제조 및
스크리닝
HEK-TOP은 HEK293에 β-catenin의 리포터를 측정할 수 있는 Topflash를 가지고 있는 안정한 세포주이다. 이 세포에 300여종의 천연물을 1ug/ml의 농도로 처리한 뒤, 24시간 후에 β-카테닌에 의한 전사를 리포터를 통해 측정하였다(도 1). 스크리닝을 통해 β-카테닌에 의한 전사를 증가시키는 물질로 지구자(Hoveniadulcis Thunb.)를 선정하고, 선정된 지구자를 HEK-TOP에서 β-카테닌에 의한 전사를 다시 한번 측정하여 리포터 값이 증가함을 확인하였다(도 2). 지구자 추출물은 증류수를 용매로 사용하여 추출한 지구자를 한국식물추출물은행에서 구입하였다.
실시예
2. 동물실험을 통한 지구자의 효능 확인
오리엔트 바이오에서 공급받은 생후 4일된 쥐의 머리덮개뼈 (Calvaria)에서 POB (primary osteoblast)를 분리하여 5ug/ml의 지구자를 24시간 동안 처리한 후에 β-카테닌의 단백질이 증가했음을 확인하였다(도 3).
생후 4일된 쥐의 머리덮개뼈(Calvaria)에서 분화를 유도하면서 5ug/ml의 지구자 추출물을 일주일간 처리하였다. 면역조직염색법(Immunohistochemistry)를 통해서 β-카테닌이 지구자 추출물을 처리한 군에서 증가되는 것을 확인하였다(도 4). 또한, 그 두께를 측정한 결과 대조군에 비해 지구자를 처리한 군에서 머리덮개뼈의 두께가 증가되었음을 확인하였다(도 5 내지 도 6).
실시예
3
.
골질환 치료를 위한 추출물의 생체 내 투여
대한실험공급센터에서 공급받은 6주령의 특정병원체부재(specific pathogen-free, SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성독성실험을 하기와 같이 실시하였다. 각 그룹당 2마리씩의 동물에 상기 실시예 1의 추출물을 1g/㎏의 용량으로 1회 경구 투여 후, 동물의 폐사여부, 임상증상 및 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 강장기와 흉강 장기의 이상 여부를 관찰하였다. 실험결과, 실험 물질을 투여한 모든 동물에서 특이할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사 및 부검 소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과, 본 발명의 추출물은 랫트에서 각각 1g/㎏까지도 독성변화를 나타내지 않았으며, 경구투여 최소치사량(LD 50 )은 1g/㎏이상인 안전한 물질로 판단됨을 확인할 수 있었다.
제제예
1:
산제의
제조
실시예 1의 지구자 추출물-----------------------------300 mg
유당-------------------------------------------------100 mg
탈크--------------------------------------------------10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예
2: 정제의 제조
실시예 1의 지구자 추출물-----------------------------50 mg
옥수수전분-------------------------------------------100 mg
유당-------------------------------------------------100 mg
스테아린산 마그네슘------------------------------------2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예
3: 캅셀제의 제조
실시예 1의 지구자 추출물------------------------------50 mg
옥수수전분-------------------------------------------100 mg
유당-------------------------------------------------100 mg
스테아린산 마그네슘------------------------------------2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예
4: 주사제의 제조
실시예 1의 지구자 추출물-----------------------------50 mg
주사용 멸균 증류수------------------------------------적량
pH 조절제---------------------------------------------적량
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
제제예
5:
액제의
제조
실시예 1의 지구자 추출물-----------------------------100 mg
이성화당----------------------------------------------10 g
만니톨-------------------------------------------------5 g
정제수-------------------------------------------------적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예
6: 건강 식품의 제조
실시예 1의 지구자 추출물-----------------------------1000 ㎎
비타민 혼합물-------------------------------------------적량
비타민 A 아세테이트------------------------------------70 ㎍
비타민 E----------------------------------------------1.0 ㎎
비타민 B1--------------------------------------------0.13 ㎎
비타민 B2--------------------------------------------0.15 ㎎
비타민 B6---------------------------------------------0.5 ㎎
비타민 B12---------------------------------------------0.2 ㎍
비타민 C-----------------------------------------------10 ㎎
비오틴-------------------------------------------------10 ㎍
니코틴산아미드----------------------------------------1.7 ㎎
엽산---------------------------------------------------50 ㎍
판토텐산 칼슘-----------------------------------------0.5 ㎎
무기질 혼합물-------------------------------------------적량
황산제1철--------------------------------------------1.75 ㎎
산화아연---------------------------------------------0.82 ㎎
탄산마그네슘-----------------------------------------25.3 ㎎
제1인산칼륨--------------------------------------------15 ㎎
제2인산칼슘--------------------------------------------55 ㎎
구연산칼륨---------------------------------------------90 ㎎
탄산칼슘----------------------------------------------100 ㎎
염화마그네슘-----------------------------------------24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예
7: 건강 음료의 제조
실시예 1의 지구자 추출물------------------------------1000 ㎎
구연산------------------------------------------------1000 ㎎
올리고당------------------------------------------------100 g
매실농축액------------------------------------------------2 g
타우린----------------------------------------------------1 g
정제수를 가하여 전체------------------------------------900 ㎖
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
지금까지 예시적인 실시 태양을 참조하여 본 발명을 기술하여 왔지만, 본 발명의 속하는 기술 분야의 당업자는 본 발명의 범주를 벗어나지 않고서도 다양한 변화를 실시할 수 있으며 그의 요소들을 등가물로 대체할 수 있음을 알 수 있을 것이다. 또한, 본 발명의 본질적인 범주를 벗어나지 않고서도 많은 변형을 실시하여 특정 상황 및 재료를 본 발명의 교시내용에 채용할 수 있다. 따라서, 본 발명이 본 발명을 실시하는데 계획된 최상의 양식으로서 개시된 특정 실시 태양으로 국한되는 것이 아니며, 본 발명이 첨부된 특허청구의 범위에 속하는 모든 실시 태양을 포함하는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (12)
- 지구자(Hoveniadulcis Thunb.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.
- 제 1항에 있어서,
상기 골 질환은 골다공증(osteoporosis), 골연화증(osteomalacia), 구루병, 섬유성 골염, 무형성 골질환 및 대사성 골질환으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 골 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 추출물은 Wnt/β-카테닌 신호전달계의 활성을 촉진하는 것을 특징으로 하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 추출물은 Wnt/β-카테닌 신호전달계 활성에 의한 뼈 형성을 촉진하는 것을 특징으로 하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 골 질환이 골다공증(osteoporosis)인 것을 특징으로 하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물. - 제 1항에 있어서,
투여량은 0.1 내지 10g/kg인 것을 특징으로 하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물. - 제 1항에 있어서,
경구, 비경구, 동맥내, 피내, 경피, 근육내, 복강내, 정맥내, 피하 및 비내 투여되는 것을 특징으로 하는 골질환의 예방 및 치료용 약학 조성물. - 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환의 개선 및 완화용 식품 조성물.
- 제 8항에 있어서,
상기 골 질환은 골다공증(osteoporosis), 골연화증(osteomalacia), 구루병, 섬유성 골염, 무형성 골질환 및 대사성 골질환으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 골 질환의 개선 및 완화용 식품 조성물. - 제 8항에 있어서,
상기 추출물은 Wnt/β-카테닌 신호전달계의 활성을 촉진하는 것을 특징으로 하는 골질환의 개선 및 완화용 식품 조성물. - 제 8항에 있어서,
상기 추출물은 Wnt/β-카테닌 신호전달계 활성에 의한 뼈 형성을 촉진하는 것을 특징으로 하는 골질환의 개선 및 완화용 식품 조성물. - 제 8항에 있어서,
상기 골 질환이 골다공증(osteoporosis)인 것을 특징으로 하는 골질환의 개선 및 완화용 식품 조성물.
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|---|---|---|---|---|
| KR20160116125A (ko) * | 2015-03-25 | 2016-10-07 | 순천대학교 산학협력단 | 헛개나무 가지 추출물을 함유하는 골 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
-
2011
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