KR20120074498A - Composition for improving allergy disease using an extract of sargassum muticum or the effective compound isolated from the extract - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A composition containing Sargassum muticum extract for relieving allergic diseases is provided to suppress degranulation and cytokine generation. CONSTITUTION: A composition for treating allergic diseases contains Sargassum muticum extract or 3-beta-hydroxy-5 alpha, 6 alpha-epoxy-7-megastigmen-9-one as an active ingredient. The extract is prepared using ethanol, water, or a mixture solvent thereof. The composition is a pharmaceutical, food, or cosmetic composition. A composition for treating inflammatory diseases contains 3-beta-hydroxy-5 alpha, 6 alpha-epoxy-7-megastigmen-9-one as an active ingredient. The daily dose of the pharmaceutical composition is 0.001-150 mg/kg.

Description

경단구슬모자반 추출물 또는 이로부터 분리한 유효물질을 이용한 알러지성 질환의 개선제 조성물{Composition for Improving Allergy Disease Using an Extract of Sargassum muticum or the Effective Compound Isolated from the Extract}Composition for Improving Allergy Disease Using an Extract of Sargassum muticum or the Effective Compound Isolated from the Extract}

본 발명은 경단구슬모자반(Sargassum muticum) 추출물 또는 이로부터 분리한 유효물질을 이용한 알러지성 질환의 개선제 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for improving allergic diseases using Sargassum muticum extract or an active substance isolated therefrom.

알러지(allergy)란 일반적으로 이물질인 알러지원(allergen)에 의해 면역학적 기전을 통해 야기되는 반응으로 신체에 해로운 손상을 유발하는 현상을 말한다.Allergy is a reaction caused by immunological mechanisms caused by allergen, which is a foreign substance, which generally causes harmful damage to the body.

비만세포(mast cell)는 알러지 반응을 매개하는 중요한 세포로, 피부, 호흡기, 위장관의 점막, 임파관 주위, 혈관 주위, 뇌 등 전신의 장기에 널리 분포하여 있으며, 세포질 내 풍부한 과립을 가지고 있다.Mast cells are important cells that mediate allergic reactions. They are widely distributed throughout the organs of the body, such as the skin, respiratory organs, mucous membranes of the gastrointestinal tract, around lymphatic vessels, around blood vessels, and in the brain, and have rich granules in the cytoplasm.

알러지 반응은 집먼지진드기, 꽃가루, 동물 비듬, 곰팡이, 난알부민, 우유단백질, 땅콩 등의 알러지원에 대항하기 위하여 생성된 IgE가 비만세포에 작용함으로써 야기된다(Wills-Karp M., et al., Science, 282, pp 2258-61, 1998; Grunig G., et al., Science, 282, pp 2261-2263, 1998). The allergic reaction is caused by the action of IgE on mast cells against house dust mites, pollen, animal dander, mold, egg albumin, milk proteins, and peanuts (Wills-Karp M., et al., Science, 282, pp 2258-61, 1998; Grunig G., et al., Science, 282, pp 2261-2263, 1998).

알러지원이 생체에 침입하면 알러지원은 먼저 항원제시세포에 의해 인지되며, 이 항원제시세포는 IL-4 존재하에서 알러지원 제시를 통해 Th0를 Th2 세포로 분화시킨다. 이렇게 분화된 Th2 세포는 IL-4, IL-5, IL-13와 같은 사이토카인을 분비하는데, IL-4, IL-5 등이 B세포에 작용하여 IgE의 생성을 유도한다(Kato, Y. et al., J. Immuno. 1999, 162, 7470-7479; Toru, H. et al., J. Allergy. Clin. Immunol. 1998, 102, 491-502).When allergens invade a living body, allergens are first recognized by antigen presenting cells, which differentiate Th0 into Th2 cells by presenting allergens in the presence of IL-4. These differentiated Th2 cells secrete cytokines such as IL-4, IL-5, IL-13, IL-4, IL-5 and the like act on B cells to induce the production of IgE (Kato, Y. et al., J. Immuno. 1999, 162, 7470-7479; Toru, H. et al., J. Allergy. Clin. Immunol. 1998, 102, 491-502).

IgE는 비만세포의 고친화도 IgE 수용체인 FcεRⅠ에 결합하는데, 알러지원이 비만세포의 FcεRⅠ와 결합된 IgE에 결합하여 이들 수용체들의 교차결합을 일으키고, 이것이 신호로서 작용하여 일련의 신호전달 반응이 진행되게 된다(Marshall, J. S. Nat. Rev. Immunol. 2004, 4, 787-799).IgE binds to the high-affinity IgE receptor, FcεRI, in mast cells.Allergens bind to IgE, which is bound to FcεRI in mast cells, causing cross-linking of these receptors, which acts as a signal to trigger a series of signaling reactions. (Marshall, JS Nat. Rev. Immunol. 2004, 4, 787-799).

이 신호전달 반응을 통해서 비만세포가 활성화되면 세포의 과립 내에 존재하던 화학매개체들인 히스타민(histamine), 프로테오글리칸(proteoglycan), TNF-α 등이 분비되며, 또 세포막 인지질에서 유리된 아라키돈산 대사를 통해 류코트리엔(leukotriens)과 프로스타글라딘(prostaglandins)와 같은 염증 매개물질을 생성한다(Nadler, M. J. et al., Adv. Immunol. 2004, 76, 325-355).이들 물질들은 혈관 확장이나 투과성의 항진, 신경종말의 자극, 점액 분비의 항진, 평활근의 수축 등 일련의 알러지 염증 반응을 매개한다고 알려져 있다(Meltzer, E. O. et al., Ann Allergy Asthma Immunnol. 2000, 84, 176-187).When the mast cell is activated through this signaling reaction, histamine, proteoglycan, and TNF-α, which are chemical mediators present in the cell granules, are secreted, and leukotrienes are released through the arachidonic acid metabolism liberated from cell membrane phospholipids. (leukotriens) and prostaglandins, such as inflammatory mediators (Nadler, MJ et al., Adv. Immunol. 2004, 76, 325-355). It is known to mediate a series of allergic inflammatory responses, including stimulation of nerve endings, increased mucus secretion, and contraction of smooth muscle (Meltzer, EO et al., Ann Allergy Asthma Immunnol. 2000, 84, 176-187).

항히스타민제, 류코트리엔 길항제, 항-IgE 항체, IgE의 합성과 분비를 저해하는 물질(예컨대 미국 특허 제6,369,091호가 개시하는 디아실벤지미다졸 동족체 등) 등이 알러지성 증상을 개선할 수 있다는 사실이 상기 기작을 뒷받침한다.The fact that antihistamines, leukotriene antagonists, anti-IgE antibodies, substances that inhibit the synthesis and secretion of IgE (such as diacylbenzimidazole homologues disclosed in US Pat. No. 6,369,091, etc.) may improve allergic symptoms. Support the mechanism.

본 발명은 경단구슬모자반으로 분리한 유효물질이 비만세포의 활성화 등을 억제함을 확인함으로써 완성된 것이다.
The present invention has been completed by confirming that the active substance separated by a dandelion moles plaque inhibits the activation of mast cells.

본 발명의 목적은 본 발명의 목적은 알러지성 질환의 개선제 조성물을 제공하는 데 있다.An object of the present invention is to provide a composition for improving allergic diseases.

본 발명의 다른 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다.
Other and specific objects of the present invention will be presented below.

본 발명자들은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 경단구슬모자반(Sargassum muticum)으로부터 분리한 3-베타-하이드록시-5 알파, 6 알파-에폭시-7-메카스틱멘-9-원(3β-Hydroxy-5α,6α-epoxy-7-megastigmen-9-one)이 IgE 및 항원(DNP-BSA)으로 활성화시킨 비만세포주 RBL-2H3(rat basophilic leukemia)에 처리한 결과, 베타-헥소사미니다아제(β-hexosaminidase)의 생성이 억제됨을 확인할 수 있었다. 상기 비만세포주인 RBL-2H3는 그 표면에 IgE 항체의 수용체(FcεRI)를 갖고 있어 IgE와 항원으로 활성화되면 탈과립 등에 의하여 히스타민 등의 알러지 반응의 매개물질을 분비하는 것으로 알려져 있는 세포이며, 베타-헥소사미니다아제는 탈과립의 지표 물질로 알려져 있는 물질이다(J. Korean Soc. Appl. Biol. Chem. 48(4), 315-321(2005)). 본 발명자들은 또한 상기 경단구슬모자반으로부터 분리한 물질이 TNF-α, IL-4, IL-6, IL-10 등의 알러지 반응과 염증 반응에 관여하는 사이토카인의 생성을 억제함을 확인할 수 있었으며, 나아가 p-AKT의 생성을 억제함을 확인할 수 있었다. p-AKT는 phosphoinositol 3-kinase(PI3K)를 매개로 비만세포의 증식과 사이토카인의 생성에 관여하는 것으로 알려져 있다(Huang, F. et al., Int. Immunopharmacol. 2008, 8, 502-507).The inventors of the present invention, as confirmed in the following examples and experimental examples, the dandelion ball cap ( Sargassum) 3beta-Hydroxy-5α, 6α-epoxy-7-megastigmen-9-one) isolated from 3-beta-hydroxy-5 alpha, 6 alpha-epoxy-7-mechanisticmen-9-one isolated from muticum ) And treatment with the mast cell line RBL-2H3 (rat basophilic leukemia) activated with the antigen (DNP-BSA), it was confirmed that the production of beta-hexosaminidase (β-hexosaminidase) is inhibited. The mast cell line RBL-2H3 has a receptor of IgE antibody (FcεRI) on its surface, and when activated with IgE and antigen, it is a cell known to secrete allergic mediators such as histamine by degranulation. Sosaminidase is a substance known as an indicator of degranulation (J. Korean Soc. Appl. Biol. Chem. 48 (4), 315-321 (2005)). The present inventors also confirmed that the material isolated from the meridian bead caps inhibits the production of cytokines involved in allergic and inflammatory reactions, such as TNF-α, IL-4, IL-6, IL-10, Furthermore, it was confirmed that the production of p-AKT was suppressed. p-AKT is known to be involved in mast cell proliferation and cytokine production via phosphoinositol 3-kinase (PI3K) (Huang, F. et al., Int. Immunopharmacol. 2008, 8, 502-507) .

본 발명은 전술한 바의 실험 결과에 기초하여 완성된 것으로서, 경단구슬모자반 추출물, 또는 이로부터 분리될 수 있는 3β-Hydroxy-5α,6α-epoxy-7-megastigmen-9-one을 유효성분으로 포함함을 특징으로 한다.The present invention has been completed on the basis of the above-described experimental results, and includes a dandruff bead capillary extract, or 3β-Hydroxy-5α, 6α-epoxy-7-megastigmen-9-one which can be separated therefrom as an active ingredient. It is characterized by.

상기 3-베타-하이드록시-5 알파, 6 알파-에폭시-7-메카스틱멘-9-원은 문헌[Duan, H. et al.; Phytochemistry; 2002; 59; 1; 85-90] 등에서 보고된 바 있는 공지의 물질이며, 그것의 IUPAC 명칭 및 화학식은 아래에서 확인할 수 있다.Said 3-beta-hydroxy-5 alpha, 6 alpha-epoxy-7-mechasticmen-9-one is described in Duan, H. et al .; Phytochemistry; 2002; 59; One; 85-90, and the like, as known in the art, and its IUPAC name and chemical formula can be found below.

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본 명세서에서, 상기 "추출물"이란 추출 방법을 불문하고 추출 대상인 경단구슬모자반 전초, 줄기, 잎, 뿌리, 꽃, 종자, 및/또는 이들의 혼합물을 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 조추출물과 그 조추출물을 상기 열거된 용매로 분획된 추출물을 포함하는 의미로서 이해된다. 추출 방법을 불문하므로, 추출 대상을 추출 용매에 침지시키는 단계를 통하여 추출되는 한, 추출 방법은 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사 등 임의의 방식이 모두 적용될 수 있다. 분획된 추출물의 경우 상기 조추출물을 특정 용매에 현탁시킨 후 다른 극성의 용매와 혼합?정치시켜 얻은 분획물, 상기 조추출물을 실리카겔 등이 충진된 칼럼에 흡착시킨 후 상기 용매를 이동상으로 하여 얻은 분획물을 포함하는 의미이다. 바람직하게는 에탄올, 물 또는 이들의 혼합용매 추출물 또는 그 추출물을 디클로로메탄, 헥산, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜 등으로 분획하여 얻어진 분획물을 의미한다. 상기 추출물의 의미에는 추출 용매가 제거된 농축된 액상의 추출물 또는 고형상의 추출물이 포함된다. In the present specification, the term "extract" refers to a light bulb bead capillary starch, stem, leaf, root, flower, seed, and / or mixtures thereof, regardless of the extraction method, having 1 to 3 carbon atoms such as water, methanol, ethanol, butanol, and the like. 4, lower alcohol, ethylene, acetone, hexane, ether, chloroform, ethyl acetate, butyl acetate, dichloromethane, N, N-dimethylformamide (DMF), dimethyl sulfoxide (DMSO), 1,3-butylene glycol, The crude extract obtained using propylene glycol or a mixed solvent thereof and the crude extract are understood as meaning including the extract fractionated with the solvents listed above. Regardless of the extraction method, as long as the extraction object is extracted through the step of immersing in the extraction solvent, the extraction method may be any method such as cooling, refluxing, heating, ultrasonic radiation, and the like. In the case of the fractionated extract, the crude extract is suspended in a specific solvent, mixed with a solvent of different polarity and fixed, and the crude extract is adsorbed onto a column filled with silica gel. It is meant to include. Preferably, it means a fraction obtained by distilling ethanol, water or a mixed solvent extract thereof or the extract thereof with dichloromethane, hexane, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, and the like. The meaning of the extract includes a concentrated liquid extract or solid extract from which the extraction solvent is removed.

또 본 명세서에서, 상기 "유효성분"의 의미는 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.In addition, in the present specification, the meaning of the "active ingredient" means a component that can exhibit activity alone or in combination with a carrier that is not active alone.

또 본 명세서에서, 상기 "알러지성 질환"은 비만세포의 탈과립 등 비만세포의 활성화에 의하여 야기되는 알러지 반응으로 인하여 초래되는 임상적 증상을 의미하는데, 이러한 임상적 증상에는 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 습진, 소양(搔痒), 화분증, 천식, 기관지염, 두드러기, 혈관염, 비염, 위장증, 설사, 간질성 폐렴, 관절염, 안염, 결막염, 신경염, 중이염, 육아종증, 뇌척수염, 방광염, 후두염, 자반병(紫斑病), 음식물 알러지, 곤충 알러지, 약물 알러지, 금속 알러지, 아나필락시성 쇼크(anaphylactic shock) 등이 포함된다(Bierman CW, et al.(eds.) Allergy, asthma, and immunology from infancy to adulthood. page xvii, Saunders, Philadelphia, 1996).In the present specification, the "allergic disease" is caused by activation of mast cells such as degranulation of mast cells. Refers to clinical symptoms caused by allergic reactions, which may include contact dermatitis, atopic dermatitis, eczema, pruritus, hay fever, asthma, bronchitis, urticaria, vasculitis, rhinitis, gastroenteritis, diarrhea, Interstitial pneumonia, arthritis, ophthalmitis, conjunctivitis, neuritis, otitis media, granulomatosis, encephalomyelitis, cystitis, laryngitis, purpura, food allergy, insect allergy, drug allergy, metal allergy, anaphylactic shock (Bierman CW, et al. (Eds.) Allergy, asthma, and immunology from infancy to adulthood. Page xvii, Saunders, Philadelphia, 1996).

또 본 명세서에서, 상기 "개선"이란 병리적 증상의 예방, 치료, 발병 억제, 또는 지연을 의미한다.In addition, in the present specification, the "improvement" means the prevention, treatment, inhibition of onset, or delay of pathological symptoms.

한편 본 발명의 조성물은 그 유효성분인 경단구슬모자반 추출물 또는 상기 [화학식 1]의 화합물을 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 치료를 의도하는 알러지성 질환의 개선 활성을 나타낼 수 있는 한 임의의 양(유효량)으로 포함할 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 15 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 그 적용 대상인 포유동물 바람직하게는 사람에게서, 알러지성 질환의 개선, 치료, 또는 그러한 병리적 증상의 발병 억제/지연을 유도할 수 있는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.On the other hand, the composition of the present invention is any amount as long as it can show the activity of allergic disease intended to treat the extract according to its use, formulation, formulation, etc. Effective amount), a conventional effective amount will be determined within the range of 0.001% to 15% by weight, based on the total weight of the composition. An "effective amount" as used herein refers to an amount of an active ingredient in a mammal, preferably a human subject to which it is applied, that can induce improvement, treatment, or suppression / delay of the development of such pathological symptoms. Such effective amounts can be determined experimentally within the range of ordinary skill in the art.

다른 측면에 있어서, 본 발명은 상기 [화학식 1]의 화합물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 개선제 조성물에 관한 것이다.In another aspect, the present invention relates to an inflammatory disease improving composition comprising the compound of the formula [1] as an active ingredient.

IgE 및 그것의 항원에 의하여 활성화된 비만세포는 탈과립에 의하여 알러지 반응을 일으키는 히스타민 등을 분비할 뿐만 아니라 프로스타글란딘, 류코트리엔, TNF-α, IL-1β, IL-4, IL-5, IL-6, IL-13 등의 사이토카인을 합성하고 분비한다. 프로스타글라딘, 류코트리엔은 COX나 리폭시게나제(lipooxygenase)에 의해 아라키돈산으로부터 생성되는 염증 매개 물질이며, TNF-α, IL-1β, IL-6 등은 대표적인 염증성 사이토카인이다(Thomas. R., Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol., 100, 1984). 상기 프로스타글란딘 등은 염증 부위로의 백혈구의 이주를 촉진하며, 상기 염증성 사이토카인은 세포 독성과 각종 염증 반응을 일으키는 NO를 생성하는 iNOS의 발현과 염증과 통증에 관여하는 COX-2의 발현을 유도한다. 또한 IL-3, IL-5, IL-13 등은 만성 알러지성 염증을 매개하는 호산구의 침윤과 활성화를 일으키는 것으로 알려져 있다(Erb KJ., Immunol. Today, 20, pp 317-322, 1999; Rothenberg ME., Eosinophilia., N. Engl. Med. , 338, pp 1592-1600, 1998).IgE and its antigen-activated mast cells not only secrete histamine, which causes allergic reactions by degranulation, but also prostaglandins, leukotrienes, TNF-α, IL-1β, IL-4, IL-5, IL-6, Cytokines such as IL-13 are synthesized and secreted. Prostagladins and leukotrienes are inflammatory mediators produced from arachidonic acid by COX or lipoxygenase, and TNF-α, IL-1β, IL-6 and the like are representative inflammatory cytokines (Thomas. R. , Rev. Physiol.Biochem.Pharmacol., 100, 1984). The prostaglandins and the like promote the migration of leukocytes to the site of inflammation, and the inflammatory cytokines induce the expression of iNOS producing NO which causes cytotoxicity and various inflammatory reactions and the expression of COX-2 involved in inflammation and pain. . IL-3, IL-5 and IL-13 are also known to cause infiltration and activation of eosinophils that mediate chronic allergic inflammation (Erb KJ., Immunol. Today, 20, pp 317-322, 1999; Rothenberg ME., Eosinophilia., N. Engl. Med., 338, pp 1592-1600, 1998).

아래의 실험예는 상기 [화학식 1]의 화합물이 활성화된 비만세포의 염증성 사이토카인의 생성을 억제할 뿐만 아니라 COX-2의 발현을 억제함을 보여준다. 그리고 염증성 사이토카인의 전사인자인 NF-κB의 생성 억제 활성과 NF-κB의 활성화에 관여하는 MAPK(mitogen-activated protein kinase)(ERK, JNK 및 p-38)의 생성 억제 활성을 보여주며, 또 리폭시게나제의 활성도 억제함을 보여준다.Experimental Example below shows that the compound of [Formula 1] not only inhibits the production of inflammatory cytokines of activated mast cells but also inhibits the expression of COX-2. And inhibits the production of NF-κB, an inflammatory cytokine transcription factor, and the inhibition of the production of mitogen-activated protein kinase (MAPK) (ERK, JNK and p-38), which are involved in the activation of NF-κB. It also shows that it inhibits the activity of lipoxygenase.

이러한 실험 결과는 상기 [화학식 1]의 화합물이 염증성 질환의 개선제로서도 유용하게 사용될 수 있음을 보여주는 것이라 할 수 있다.These experimental results can be said to show that the compound of [Formula 1] can also be usefully used as an inflammatory disease improver.

본 명세서에서, 상기 "염증성 질환"이란 외부의 물리?화학적 자극 또는 박테리아, 곰팡이, 바이러스, 각종 알러지 유발 물질 등 외부 감염원의 감염에 대한 국부적 또는 전신적 생체 방어 반응으로 특정되는 어떠한 상태로서 정의될 있다. 이러한 반응은 각종 염증 매개 인자와 면역세포와 관련된 효소(예컨대 iNOS, COX-2 등) 활성화, 염증 매개 물질의 분비(예컨대, NO, TNF-α, IL-6, IL-1β, PGE2의 분비), 체액 침윤, 세포 이동, 조직 파괴 등의 일련의 복합적인 생리적 반응을 수반하며, 홍반, 통증, 부종, 발열, 신체의 특정 기능의 저하 또는 상실 등의 증상에 의해 외적으로 나타난다. 상기 염증성 질환은 급성, 만성, 궤양성, 알러지성 또는 괴사성을 띨 수 있으므로, 어떠한 질환이 상기와 같은 염증성 질환의 정의에 포함되는 한 그것이 급성이든지, 만성이든지, 궤양성이든지, 알러지성이든지 또는 괴사성이든지를 불문한다. 구체적으로 상기 염증성 질환에는 천식, 알러지성 및 비-알러지성 비염, 만성 및 급성 비염, 만성 및 급성 위염 또는 장염, 궤양성 위염, 급성 및 만성 신장염, 급성 및 만성 간염, 만성 폐쇄성 폐질환, 폐섬유증, 과민성 대장 증후군, 염증성 통증, 편두퐁, 두통, 허리 통증, 섬유 근육통, 근막 질환, 바이러스 감염(예컨대, C형 감염), 박테리아 감염, 곰팡이 감염, 화상, 외과적 또는 치과적 수술에 의한 상처, 프로스타글라딘 E 과다 증후군, 아테롬성 동맥 경화증, 통풍, 관절염, 류머티스성 관절염, 강직성 척추염, 호지킨병, 췌장염, 결막염, 홍채염, 공막염, 포도막염, 피부염(아토피성 피부염 포함), 습진, 다발성 경화증 등이 포함될 것이다. In the present specification, the "inflammatory disease" may be defined as any condition specified by a local or systemic biological defense response against external physical and chemical stimuli or infection of an external infectious agent such as bacteria, fungi, viruses, and various allergens. This response activates various inflammatory mediators and enzymes associated with immune cells (eg iNOS, COX-2, etc.), secretion of inflammatory mediators (eg NO, TNF-α, IL-6, IL-1β, PGE 2) . ), Accompanied by a series of complex physiological reactions such as fluid infiltration, cell migration, tissue destruction, etc., and are manifested externally by symptoms such as erythema, pain, edema, fever, deterioration or loss of certain functions of the body. The inflammatory disease may be acute, chronic, ulcerative, allergic or necrotic, so as long as any disease is included in the definition of such inflammatory disease it is acute, chronic, ulcerative, allergic or Irrespective of necrosis Specifically, the inflammatory diseases include asthma, allergic and non-allergic rhinitis, chronic and acute rhinitis, chronic and acute gastritis or enteritis, ulcerative gastritis, acute and chronic nephritis, acute and chronic hepatitis, chronic obstructive pulmonary disease, pulmonary fibrosis Irritable bowel syndrome, inflammatory pain, migraines, headache, back pain, fibromyalgia, fascia disease, viral infections (eg, type C infections), bacterial infections, fungal infections, burns, surgical or dental wounds, Prostaglandin E excess syndrome, atherosclerosis, gout, arthritis, rheumatoid arthritis, ankylosing spondylitis, Hodgkin's disease, pancreatitis, conjunctivitis, irisitis, scleritis, uveitis, dermatitis (including atopic dermatitis), eczema, multiple sclerosis, etc. Will be included.

본 발명의 염증성 질환의 개선제 조성물에 있어서, 개선의 의미, 유효량 등과 관련하여서는 상기 본 발명의 알러지성 질환의 개선제 조성물과 관련하여 설명한 바가 그대로 유효하다. In the improver composition of the inflammatory disease of the present invention, as described in connection with the improver composition of the allergic disease of the present invention, the meanings of the improvement, the effective amount and the like are effective as they are.

본 발명의 알러지성 질환의 개선제 조성물과 염증성 질환의 개선제 조성물(이하 "본 발명의 조성물")은 구체적인 양태에 있어서는 약제학적 조성물로 이용될 수 있다.The allergic disease improver composition of the present invention and the inflammatory disease improver composition (hereinafter “composition of the present invention”) may be used as pharmaceutical compositions in specific embodiments.

본 발명의 약제학적 조성물은 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 등을 포함하여, 경구용 제형(정제, 현탁액, 과립, 에멀젼, 캡슐, 시럽 등), 비경구형 제형(멸균 주사용 수성 또는 유성 현탁액), 국소형 제형(용액, 크림, 연고, 겔, 로션, 패치) 등으로 제조될 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention includes oral formulations (tablets, suspensions, granules, emulsions, capsules, syrups, etc.), parenteral formulations (sterile injectable aqueous or Oily suspensions), topical formulations (solutions, creams, ointments, gels, lotions, patches) and the like.

상기에서 "약제학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응가능한 이상의 독성(충분히 낮은 독성)을 지니지 않는다 의미이다.As used herein, "pharmaceutically acceptable" means that the subject of application (prescription) does not have more toxicity (adequately low toxicity) to which the subject of application (prescription) is adaptable without inhibiting the activity of the active ingredient.

약제학적으로 허용되는 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 전분(예컨대 옥수수 전분, 감자 전분 등), 셀룰로오스, 그것의 유도체(예컨대 나트륨 카르복시메틸 셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 등) 맥아, 젤라틴, 탈크, 고체 윤활제(예컨대 스테아르산, 스테아르산 마그네슘 등), 황산 칼슘, 식물성 기름(예컨대 땅콩 기름, 면실유, 참기름, 올리브유 등), 폴리올(예컨대 프로필렌 글리콜, 글리세린 등), 알긴산, 유화제(예컨대 TWEENS), 습윤제(예컨대 라우릴 황산 나트륨), 착색제, 풍미제, 정제화제, 안정화제, 항산화제, 보존제, 물, 식염수, 인산염 완충 용액 등을 들 수 있다. 이러한 담체는 본 발명의 약제학적 조성물의 제형에 따라 적당한 것을 하나 이상 선택하여 사용할 수 있다.Examples of pharmaceutically acceptable carriers include lactose, glucose, sucrose, starch (such as corn starch, potato starch, etc.), cellulose, derivatives thereof (such as sodium carboxymethyl cellulose, ethylcellulose, etc.) malt, gelatin, talc, solids Lubricants (e.g. stearic acid, magnesium stearate, etc.), calcium sulfate, vegetable oils (e.g. peanut oil, cottonseed oil, sesame oil, olive oil, etc.), polyols (e.g. propylene glycol, glycerin, etc.), alginic acid, emulsifiers (e.g. TWEENS), wetting agents (e.g. Sodium lauryl sulfate), colorants, flavoring agents, tableting agents, stabilizers, antioxidants, preservatives, water, saline, phosphate buffer solutions and the like. The carrier may be selected from one or more of suitable pharmaceutical formulations according to the formulation of the pharmaceutical composition of the present invention.

부형제도 본 발명의 약제학적 조성물의 제형에 따라 적합한 것을 선택하여 사용할 수 있는데, 예컨대 본 발명의 약제학적 조성물이 수성 현탁제로 제조될 경우에 적합한 부형제로서는 나트륨 카르복시메틸 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 히드로프로필메틸셀룰로오스, 알긴산 나트륨, 폴리비닐피롤리돈 등의 현탁제나 분산제 등을 들 수 있다. 주사액으로 제조되는 경우 적합한 부형제로서는 링거액, 등장 염화나트륨 등을 들 수 있다.Excipients may be selected and used according to the formulation of the pharmaceutical composition of the present invention, for example, when the pharmaceutical composition of the present invention is prepared with an aqueous suspending agent, suitable excipients are sodium carboxymethyl cellulose, methyl cellulose, hydropropylmethylcellulose And suspending agents and dispersing agents such as sodium alginate and polyvinylpyrrolidone. Suitable excipients when prepared from injection solutions include Ringer's solution, isotonic sodium chloride, and the like.

본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있고, 경우에 따라서는 국소적으로 투여될 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally, and in some cases, can be administered topically.

본 발명의 약제학적 조성물은 그 1일 투여량이 통상 0.001 ~ 150 mg/kg 체중 범위이고, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 본 발명의 약제학적 조성물의 투여량은 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중, 환자의 중증도 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되는 것이므로 상기 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 아니 된다. The daily dose of the pharmaceutical composition of the present invention is usually 0.001 to 150 mg / kg body weight, and may be administered once or several times. However, since the dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is determined in view of various related factors such as the route of administration, the age, sex, weight of the patient, the severity of the patient and the like, the dosage may limit the scope of the present invention in any aspect. It should not be understood as.

본 발명의 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서, 식품 조성물로서 파악할 수 있다.The composition of this invention can be grasped | ascertained as a food composition in another specific aspect.

본 발명의 식품 조성물은 건강 보조식품, 특수 영양 보충용 식품, 기능성 음료 등으로 제조될 수 있다.The food composition of the present invention may be prepared as a dietary supplement, a special nutritional supplement, a functional beverage, and the like.

본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 감미제, 풍미제, 생리활성 성분, 미네랄 등이 포함될 수 있다.The food composition of the present invention may include sweeteners, flavoring agents, bioactive ingredients, minerals, etc. in addition to the active ingredients.

감미제는 식품이 적당한 단맛을 나게 하는 양으로 사용될 수 있으며, 천연의 것이거나 합성된 것일 수 있다. 바람직하게는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다. Sweeteners may be used in amounts that give the food a suitable sweet taste, and may be natural or synthetic. Preferably, natural sweeteners are used. Examples of natural sweeteners include sugar sweeteners such as corn syrup solids, honey, sucrose, fructose, lactose and maltose.

풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다. Flavoring agents can be used to enhance the taste or aroma, both natural and synthetic. Preferably, a natural one is used. When using natural ones, the purpose of nutritional fortification can be performed in addition to the flavor. The natural flavor may be obtained from apples, lemons, citrus fruits, grapes, strawberries, peaches, and the like, or may be obtained from green tea leaves, round leaves, jujube leaves, cinnamon, chrysanthemum leaves, jasmine and the like. Also, those obtained from ginseng (red ginseng), bamboo shoots, aloe vera, banks and the like can be used. The natural flavoring agent may be a liquid concentrate or a solid form of extract. In some cases, synthetic flavoring agents may be used, and synthetic flavoring agents may include esters, alcohols, aldehydes, terpenes, and the like.

생리 활성 물질로서는 카테킨, 에피카테킨, 갈로가테킨, 에피갈로카테킨 등의 카테킨류나, 레티놀, 아스코르브산, 토코페롤, 칼시페롤, 티아민, 리보플라빈 등의 비타민류 등이 사용될 수 있다.As the physiologically active substance, catechins such as catechin, epicatechin, gallocatechin, epigallocatechin, vitamins such as retinol, ascorbic acid, tocopherol, calciferol, thiamine, riboflavin, and the like can be used.

미네랄로서는 칼슘, 마그네슘, 크롬, 코발트, 구리, 불소화물, 게르마늄, 요오드, 철, 리튬, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 인, 칼륨, 셀레늄, 규소, 나트륨, 황, 바나듐, 아연 등이 사용될 수 있다.As minerals, calcium, magnesium, chromium, cobalt, copper, fluoride, germanium, iodine, iron, lithium, magnesium, manganese, molybdenum, phosphorus, potassium, selenium, silicon, sodium, sulfur, vanadium, zinc and the like can be used.

또한 본 발명의 식품 조성물은 상기 감미제 등 이외에도 필요에 따라 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등을 포함할 수 있다. In addition, the food composition of the present invention may contain a preservative, an emulsifier, an acidulant, a thickener, and the like, in addition to the sweetener.

이러한 보존제, 유화제 등은 그것이 첨가되는 용도를 달성할 수 있는 한 극미량으로 첨가되어 사용되는 것이 바람직하다. 극미량이란 수치적으로 표현할 때 식품 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.0005중량％ 내지 약 0.5중량％ 범위를 의미한다.Such preservatives, emulsifiers and the like are preferably added and used in very small amounts as long as the use to which they are added can be achieved. By trace amount is meant numerically expressed in the range of 0.0005% to about 0.5% by weight based on the total weight of the food composition.

사용될 수 있는 보존제로서는 소듐 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등을 들 수 있다. Examples of preservatives that can be used include sodium sorbate, sodium sorbate, potassium sorbate, calcium benzoate, sodium benzoate, potassium benzoate, EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid), and the like.

사용될 수 있는 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있다.Emulsifiers that can be used include acacia gum, carboxymethylcellulose, xanthan gum, pectin and the like.

사용될 수 있는 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등을 들 수 있다. 이러한 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다.Examples of acidulants that may be used include lead acid, malic acid, fumaric acid, adipic acid, phosphoric acid, gluconic acid, tartaric acid, ascorbic acid, acetic acid, phosphoric acid, and the like. Such acidulant may be added so that the food composition is at an appropriate acidity for the purpose of inhibiting the growth of microorganisms in addition to the purpose of enhancing taste.

사용될 수 있는 점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등을 들 수 있다. Thickeners that can be used include suspending implements, sedimenters, gel formers, swelling agents and the like.

본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서 화장품 조성물로 파악할 수 있다. The composition of this invention can be grasped | ascertained as a cosmetic composition in a specific aspect.

본 발명의 조성물이 화장품 조성물로서 파악될 경우, 그 화장품 조성물은 다양한 형태로 제조될 수 있는데, 예컨대, 에멀젼, 로션, 크림(수중유적형, 유중수적형, 다중상), 용액, 현탁액(무수 및 수계), 무수 생성물(오일 및 글리콜계), 젤, 마스크, 팩, 분말 등의 제형으로 제조될 수 있다.When the composition of the present invention is conceived as a cosmetic composition, the cosmetic composition can be prepared in various forms, for example, emulsions, lotions, creams (oil-in-water, water-in-oil, multiphase), solutions, suspensions (anhydrous and Aqueous), anhydrous products (oil and glycol based), gels, masks, packs, powders and the like.

본 발명의 조성물은 그 유효성분을 포함하는 이외에 화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체를 포함할 수 있다. The composition of the present invention may include an acceptable carrier in a cosmetic preparation in addition to including the active ingredient.

여기서 "화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체"란 화장품 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는 것을 말한다.Herein, "acceptable carrier in cosmetic preparation" means a compound or composition already known and used that can be included in cosmetic preparations or a compound or composition which will be developed in the future and does not have more toxicity than the body can adapt to when contacted with the skin.

상기 담체는 본 발명의 조성물에 그것의 전체 중량에 대하여 약 1 중량 % 내지 약 99.99 중량 %, 바람직하게는 조성물의 중량의 약 50 중량% 내지 약 99 중량 %로 포함될 수 있다. The carrier may be included in the composition of the present invention from about 1% to about 99.99% by weight, preferably from about 50% to about 99% by weight of the composition.

그러나 상기 비율은 화장품의 전술한 바의 제형에 따라 또 그것의 구체적인 적용 부위(얼굴이나 손)나 그것의 바람직한 적용량 등에 따라 달라지는 것이기 때문에, 상기 비율은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다. However, it is understood that the ratios limit the scope of the present invention in any aspect because the ratios vary depending on the formulation of the cosmetics as described above and their specific application site (face or hand) or their preferred application amount. It should not be.

한편, 상기 담체로서는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선 차단제, 발색제, 향료 등이 예시될 수 있다. Meanwhile, examples of the carrier include alcohols, oils, surfactants, fatty acids, silicone oils, wetting agents, moisturizers, viscosity modifiers, emulsions, stabilizers, sunscreen agents, colorants, fragrances, and the like.

상기 담체로서 사용될 수 있는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선 차단제, 발색제, 향료 로 사용될 수 있는 화합물/조성물 등은 이미 당업계에 공지되어 있기 때문에 당업자라면 적절한 해당 물질/조성물을 선택하여 사용할 수 있다.
Alcohols, oils, surfactants, fatty acids, silicone oils, wetting agents, humectants, viscosity modifiers, emulsions, stabilizers, sunscreens, colorants, compounds / compositions that can be used as fragrances, etc., which can be used as the carrier are already known in the art. As a result, those skilled in the art can select and use appropriate materials / compositions.

전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 알러지성 질환의 개선제 조성물을 제공할 수 있다. 또한 본 발명에 따르면 염증성 질환의 개선제 조성물을 제공할 수 있다. 본 발명의 알러지성 질환의 개선제 조성물과 염증성 질환의 개선제 조성물은 약품이나 기능성 식품 등으로 제품화될 수 있다.
As described above, according to the present invention, it is possible to provide a composition for improving allergic diseases. In addition, according to the present invention can provide a composition for improving inflammatory diseases. The allergic disease improver composition of the present invention and the inflammatory disease improver composition may be commercialized as drugs, functional foods and the like.

도 1은 경단구슬모자반으로부터의 유효물질 분리 과정의 모식도이다.
도 2는 경단구슬모자반으로부터 분리한 유효물질의 MS 스펙트럼이다.
도 3은 경단구슬모자반으로부터 분리한 유효물질의 1H-NMR 스펙트럼이다.
도 4는 경단구슬모자반으로부터 분리한 유효물질의 13C-NMR 스펙트럼이다.
도 5는 경단구슬모자반으로부터 분리한 유효물질의 1H-1H COSY 스펙트럼이다.
도 6은 경단구슬모자반으로부터 분리한 유효물질의 HSQC 스펙트럼이다.
도 7은 경단구슬모자반으로부터 분리한 유효물질의 HMBC 스펙트럼(도 7a)과 HMBC의 상관관계(도 7b)이다.
도 8은 경단구슬모자반으로부터 분리한 유효물질의 탈과립 억제 활성을 보여주는 결과이다.
도 9는 경단구슬모자반으로부터 분리한 유효물질의 사이토카인 생성 억제 활성을 보여주는 결과이다.
도 10은 경단구슬모자반으로부터 분리한 유효물질의 사이토카인 전사 인자인 NF-κB의 발현을 억제함을 보여주는 결과이다.
도 11은 MAPK 발현 억제 활성 및 p-AKT 발현 억제 활성을 보여주는 결과이다.Figure 1 is a schematic diagram of the process of separating the effective material from the ball dan ball cap.
2 is an MS spectrum of an active substance isolated from a light-end bead hat.
Figure 3 is a 1 H-NMR spectrum of the active material separated from the hard ball bead cap.
FIG. 4 is a 13 C-NMR spectrum of an active material isolated from a hard bead cap.
FIG. 5 is a 1 H- 1 H COSY spectrum of an active material isolated from a hard bead cap.
6 is an HSQC spectrum of an active material isolated from a hard bead cap.
7 is a correlation between the HMBC spectrum (FIG. 7A) and the HMBC of the effective material separated from the dandelion bead cap (FIG. 7B).
Figure 8 is a result showing the degranulation inhibitory activity of the active material isolated from the dandelion bead cap.
Figure 9 is a result showing the cytokine production inhibitory activity of the active material isolated from the dumpling bead cap.
10 is a result showing the suppression of the expression of NF-κB, a cytokine transcription factor of the active material isolated from the dandelion moles.
11 is a result showing the MAPK expression inhibitory activity and p-AKT expression inhibitory activity.

이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described with reference to Examples and Experimental Examples. However, the scope of the present invention is not limited to these examples and experimental examples.

<< 실시예Example > > 경단구슬모자반으로부터From dumpling ball hat 항알러지Anti-allergy 활성을 갖는 유효물질의 분리 및 동정 Isolation and Identification of Active Substances Having Activity

<실시예 1> 경단구슬모자반으로부터의 유효물질의 분리 Example 1 Separation of an Active Substance from a Hard Tip Bead Hat

건조 분말 경단구슬모자반(Sargassum muticum)에 물, 20%, 40%, 60%, 80%, 및 100% 에탄올을 가하고 24시간 3회 냉침 추출하였다. Water, 20%, 40%, 60%, 80%, and 100% ethanol were added to Sargassum muticum , followed by cold extraction three times for 24 hours.

이중 80% 에탄올 추출액을 여과한 후에 여액을 감압 농축기를 이용하여 에탄올 추출물을 얻었으며, 추출물을 증류수에 현탁시킨 후 디클로로메탄(CH2Cl2)으로 용매 분획하였다. 엽록소를 제거하기 위해 디클로로메탄 분획물을 헥산과 50% 메탄올로 용매 분획하였고, 메탄올 추출물에 대하여 물-메탄올 이동상(물 100%, 20:80(메탄올:물), 40:60(메탄올:물), 80:20(메탄올:물), 메탄올 100%, 디클로로메탄:메탄올(CM)=1:1)으로 Diaion HP-20 컬럼크로마토그래피를 실시하여 7개의 소분획으로 나누었다(G40-12-1~7). 이 7개의 소분획 중 분획 G40-12-4에 대하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 이동상을 디클로로메탄:메탄올(80:1, 50:1, 30:1, 15:1, 7:1, 2:1)로 시행하여 6개의 분획(G40-15-1~6)으로 나누었고, 소분획 G40-15-2로부터 prep. HPLC(20→30% 아세토니트릴; 20ml/min; ODS 컬럼)를 진행하여 3번 분획에서 유효물질(Compound 1)을 분리하였다. The 80% ethanol extract was filtered and the filtrate was obtained by using a vacuum concentrator to obtain an ethanol extract. The extract was suspended in distilled water and then solvent-distilled with dichloromethane (CH 2 Cl 2 ). To remove chlorophyll, the dichloromethane fractions were solvent fractionated with hexane and 50% methanol, and water-methanol mobile phase (100% water, 20:80 (methanol: water), 40:60 (methanol: water), Diaion HP-20 column chromatography was performed using 80:20 (methanol: water), methanol 100%, dichloromethane: methanol (CM) = 1: 1), and the mixture was divided into seven subfractions (G40-12-1 ~ 7). ). Silicagel column chromatography on fraction G40-12-4 of these seven fractions was carried out using dichloromethane: methanol (80: 1, 50: 1, 30: 1, 15: 1, 7: 1, 2: 1). And divided into 6 fractions (G40-15-1 ~ 6) and prep. HPLC (20 → 30% acetonitrile; 20ml / min; ODS column) was carried out to separate the active substance (Compound 1) from fraction 3.

상기 유효물질의 분리 과정의 모식도를 [도 1]에 나타내었다. A schematic diagram of the separation process of the active material is shown in FIG. 1.

<실시예 2> 유효물질의 동정 Example 2 Identification of Active Substances

상기 유효물질의 분자량을 측정하기 위하여 ESI-MS(electrospray ionization mass spectrometer, Waters Q-TOF micro mass spectrometer, USA)를 사용하였으며, 구조를 규명하기 위하여 핵자기분광기(NMR, Bruker Co., 400 MHz)를 사용하였다. 상기 화합물을 NMR 전용 용매(CDCl3, Merck Co.)에 녹여 5mm NMR 튜브 내에 넣고 1D-NMR(1H 및 13C) 및 2D-NMR(1H-1H COSY, HSQC, HMBC)을 측정하였고, NMR 용매의 피크를 내부 표준물질로 하거나 TMS(tetramethylsilane)의 피크를 기준으로 하여 측정하였다.ESI-MS (Electrospray ionization mass spectrometer, Waters Q-TOF micro mass spectrometer, USA) was used to measure the molecular weight of the active material, nuclear magnetic spectroscopy (NMR, Bruker Co., 400 MHz) to identify the structure Was used. The compound was dissolved in NMR solvent (CDCl 3 , Merck Co.) and placed in a 5 mm NMR tube and 1D-NMR ( 1 H and 13 C) and 2D-NMR ( 1 H- 1 H COSY, HSQC, HMBC) were measured. The peak of NMR solvent was measured as an internal standard or based on the peak of tetramethylsilane (TMS).

MS 스펙트럼, 1H-NMR 스펙트럼, 13C-NMR 스펙트럼, 1H-1H COSY 스펙트럼, HSQC 스펙트럼 및 HMBC 스펙트럼은 도 2 내지 7에 각각 나타내었다.MS spectrum, 1 H-NMR spectrum, 13 C-NMR spectrum, 1 H- 1 H COSY spectrum, HSQC spectrum and HMBC spectrum are shown in Figs.

유효물질은 각종 컬럼 크로마토그래피를 진행하여 무색의 오일상 (colorless oil)로 분리되었다. 1H-와 13C-NMR로부터 4개의 tertiary methyl group [δH 2.30, 1.21, 1.21, 0.99 (each 3H, s); δC 29.3, 28.3, 25.0, 19.9], 하나의 oxygenated methine [δH 3.92 (each 1H, m); δC 64.0], 한 쌍의 olefin [δH 7.04, 6.30 (each 1H, d, J = 15.6 Hz); δC 142.4, 132.6], 2 개의 methylene carbon [δC 46.6, 40.6], epoxy carbon을 포함한 3개의 quaternary carbon (δC 69.5, 67.3, 35.1), 그리고 하나의 ketone carbon (δC 197.5)을 포함하여 총 13개의 carbon signal을 확인하였다. 한 쌍의 이중결합은 커플링 상수(J)값이 15.6 Hz로 나타남으로 trans 형태임을 알 수 있었고 COSY spectrum으로부터 -CH2(C-3)-CH(C-4)-CH2(C-5)-와 -CH(C-7)-CH(C-8)-의 부분 구조를 확인하였다. HMBC spectrum에서는 H-7이 C-6, 9과의 correlation을, H-8은 C-6, 7, 9, 10과의 cross peak를 확인하였으며, H-13은 C-4, 5, 6과 correlation을, 두 개의 methyl group인 H-11와 12는 C-1, 2, 6, 12, 13과의 correlation을 관찰하였다. 또한, H-2와 H-4는 oxygenated methine인 C-6과의 cross peak를 확인하였다. 이상의 spectra data로부터 유효물질은 ionol 골격의 성분임을 알 수 있었으며, 기기분석 결과를 통해 상기 화합물이 [화학식 1]로 표시된 E-4-[(1R,4S,6S)-4-hydroxy-2,2,6-trimethyl-7-oxabicyclo[4.1.0]hept-1-yl]but-3-en-2-one로 확인되었다(Miyase, T. et al., Chem . Pharm . Bull. 1987, 35, 1109-1117; D'Abrosca, B. et al., Phytochemistry 2004, 65, 497-505).The active material was subjected to various column chromatography to separate it into a colorless oil. Four tertiary methyl groups [δ H 2.30, 1.21, 1.21, 0.99 (each 3H, s) from 1 H- and 13 C-NMR; δ C 29.3, 28.3, 25.0, 19.9], one oxygenated methine [δ H 3.92 (each 1H, m); δ C 64.0], a pair of olefins [δ H 7.04, 6.30 (each 1 H, d, J = 15.6 Hz); δ C 142.4, 132.6], two methylene carbons [δ C 46.6, 40.6], three quaternary carbons including epoxy carbon (δ C 69.5, 67.3, 35.1), and one ketone carbon (δ C 197.5) A total of 13 carbon signals were identified. The pair of double bonds were found to be in the trans form with a coupling constant (J) of 15.6 Hz. From the COZY spectrum, -CH 2 (C-3) -CH (C-4) -CH 2 (C-5) The partial structure of)-and -CH (C-7) -CH (C-8)-was confirmed. In the HMBC spectrum, H-7 correlated with C-6 and 9, H-8 correlated with C-6, 7, 9, and 10, and H-13 correlated with C-4, 5, 6 Correlation between two methyl groups, H-11 and 12, was observed for C-1, 2, 6, 12 and 13. In addition, H-2 and H-4 confirmed the cross peak with the oxygenated methine C-6. From the above spectra data, it was found that the active substance is a component of the ionol skeleton, and through the analysis of the device, the compound is represented by E-4-[(1R, 4S, 6S) -4-hydroxy-2,2 represented by [Formula 1]. , 6-trimethyl-7-oxabicyclo [4.1.0] hept-1-yl] but-3-en-2-one (Miyase, T. et al., Chem . Pharm . Bull . 1987, 35, 1109-1117; D'Abrosca, B. et al., Phytochemistry 2004, 65, 497-505).

(1) 성상 : amorphous white powder(1) Appearance: amorphous white powder

(2) 분자식 : C13H20O3 (2) Molecular formula: C 13 H 20 O 3

(3) 불포화도: 4(3) Unsaturation: 4

(4) 분자량 : 224.30 (4) Molecular weight: 224.30

(5) 1H-NMR(CDCl3, 400 MHz) δ: 7.04(1H, d, J = 15.6 Hz), 6.30(1H, d, J = 15.6 Hz), 3.92(1H, m), 2.40(1H, ddd, J = 14.0, 4.8, 1.2 Hz), 2.30(3H, s), 1.67(1H, m), 1.66(1H, m), 1.28(1H, m), 1.21(6H, s), 0.99(3H, s)(5) 1 H-NMR (CDCl 3 , 400 MHz) δ: 7.04 (1H, d, J = 15.6 Hz), 6.30 (1H, d, J = 15.6 Hz), 3.92 (1H, m), 2.40 (1H) , ddd, J = 14.0, 4.8, 1.2 Hz), 2.30 (3H, s), 1.67 (1H, m), 1.66 (1H, m), 1.28 (1H, m), 1.21 (6H, s), 0.99 ( 3H, s)

(6) 13C-NMR(CDCl3, 100 MHz) δ: 197.5, 142.4, 132.6, 69.5, 67.3, 64.0, 46.6, 40.6, 35.1, 29.3, 28.3, 25.0, 19.9
(6) 13 C-NMR (CDCl 3 , 100 MHz) δ: 197.5, 142.4, 132.6, 69.5, 67.3, 64.0, 46.6, 40.6, 35.1, 29.3, 28.3, 25.0, 19.9

<< 실험예Experimental Example > > 경단구슬모자반으로부터From dumpling ball hat 분리한 유효물질의  Of the separated active substances 항알러지Anti-allergy 및 항염증 활성 실험 And anti-inflammatory activity experiment

<< 실험예Experimental Example 1> 1> 경단구슬모자반Dumpling ball hat 추출물 및 이로부터 분리한 유효물질의 비만세포주의  Mast cell line of extract and active substance isolated from it 탈과립Degranulation 억제 활성 실험 - β- Inhibitory Activity Experiment-β- HexosaminidaseHexosaminidase assayassay

Rat basophlic leukemia 셀 라인인 RBL-2H3 세포주를 15% FBS, 100 unit/ml의 페니실린과 스트렙토마이신을 포함하는 MEM 배지와 37, 5% CO2 조건에서 24 well plate에 2X105/well로 분주한 후 24시간 배양하였다. RBL-2H3 cell line, a rat basophlic leukemia cell line, was dispensed in 2 × 10 5 / well in a 24 well plate at MEM medium containing 15% FBS, 100 units / ml penicillin and streptomycin, and 37, 5% CO 2. Incubated for 24 hours.

상등액을 제거 후 25 ng/ml anti-DNP IgE 가 포함된 MEM 배지를 넣고 4시간 배양 후 PIPES buffer 500㎕로 두 번 세척하고 4mM MgCl2, 5.6mM glucose, 0.1% BSA를 포함시킨 PIPES buffer를 180㎕ 넣고 10분 동안 배양하였다. 전 배양 후 실시예의 시료(경단구슬모자반의 물, 에탄올 또는 이들의 혼합 용매의 추출물(이하 "경단구슬모자반의 조추출물")과 80% 에탄올 추출물로부터 분리한 유효물질)를 농도별로 20분간 처리 후 50ng/ml DNP-BSA 20분간 반응시켰다. ice 에서 10분 방치하여 반응을 종결시킨 후 상등액을 25㎕ 씩 96 웰 플레이트에 넣고, 1 mM P-니트로페닐-아세틸-β-D-글루코사미니드를 25㎕ 넣은 후 37℃에서 1시간 반응시켰다. stop solution(0.1M NaHCO3, 0.1M Na2CO3)을 넣고 반응을 종결시킨 후 405nm 파장대에서 ELISA 리더로 흡광도를 측정하였다. 양성 대조군으로는 ketotifen을 사용하였다. After removing the supernatant, add MEM medium containing 25 ng / ml anti-DNP IgE, incubate for 4 hours, wash twice with 500 μl PIPES buffer, and wash PIPES buffer containing 4 mM MgCl 2 , 5.6 mM glucose, and 0.1% BSA. Μl was incubated for 10 minutes. After pre-cultivation, the sample of the example (water from the sweet bead cap, extract of ethanol or a mixed solvent thereof (hereinafter referred to as "crude extract of the hard bead cap") and 80% ethanol extract) was treated for 20 minutes by concentration. 50 ng / ml DNP-BSA was reacted for 20 minutes. After the reaction was terminated by 10 minutes on ice, the supernatant was added to a 96-well plate with 25 µl each, and 25 µl of 1 mM P-nitrophenyl-acetyl-β-D-glucosaminid was reacted at 37 ° C for 1 hour. . Stop solution (0.1M NaHCO 3 , 0.1M Na 2 CO 3 ) was added to terminate the reaction and the absorbance was measured by an ELISA reader in the wavelength range of 405nm. Ketotifen was used as a positive control.

시료로 경단구슬모자반 조추출물을 사용하였을 때의 결과를 아래의 [표 1]에 타나내었고, 시료로 유효물질을 사용하였을 때의 결과를 [도 8]에 나타내었다. The results of using the crude bead hat jar crude extract as a sample are shown in [Table 1] below, and the results of using the active material as the sample are shown in [FIG. 8].

아래 [표 1]의 결과는 60% 에탄올 추출물의 탈과립 억제 활성이 가장 높음을 보여주며, 또 [도 8]을 참조하여 보면 상기 분리된 유효물질이 농도 의존적으로 탈과립을 억제함을 확인할 수 있다(EC50=185.8 uM).The results in [Table 1] below show the highest degranulation inhibitory activity of the 60% ethanol extract, and referring to [FIG. 8], it can be seen that the separated active substance inhibits degranulation in a concentration-dependent manner ( EC 50 = 185.8 uM).

경단구슬모자반 조추출물의 탈과립 억제 활성(EC50(ug/ml))Degranulation Inhibitory Activity of Crude Extracts from Cruciferous Ball Caps (EC 50 (ug / ml)) 시료sample EC50(ug/ml)EC 50 (ug / ml) 경단구슬모자반의 물 추출물Water Extract of Dandelion Bead Cap Hat >100> 100 경단구슬모자반의 20% 에탄올 추출물Ethanol Extract of 20% of Pandan Beads Hat 48.2848.28 경단구슬모자반의 40% 에탄올 추출물40% Ethanol Extract of Pandan Bead Hat 37.1137.11 경단구슬모자반의 60% 에탄올 추출물60% Ethanol Extract of Pandan Bead Cap Hat 25<25 < 경단구슬모자반의 80% 에탄올 추출물80% Ethanol Extract of Pandan Bead Cap Hat 39.3639.36 경단구슬모자반의 100% 에탄올 추출물100% Ethanol Extract of Light Ball Beaded Hat 36.1736.17 케토티펜(ketotifen, 양성대조군)Ketotifen (positive control) 18.0718.07

<< 실험예Experimental Example 2>  2> 사이토카인의 생성 억제 활성 실험 - Inhibitory Activity of Cytokine Production- RT-PCRRT-PCR

BL-2H3 세포를 1X106/well로 6 well plate에 배양 후 IgE를 넣고 4시간 반응시킨다. 그 이후 시료 처리 후 DNP-BSA를 첨가하여 각각 37℃에서 20분씩 반응시킨다. PBS로 2번 세척 후 Trizol(Invitrogen)을 넣어서 세포를 용해시킨 후 chloroform(Sigma)를 넣고 13,000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 얻었다. 상층액과 isopropanol을 섞은 후 반응시켜 RNA를 침전시킨 후 에탄올로 1회 세척하여 RNA를 분리하였다.BL-2H3 cells were incubated in 6 well plates with 1X10 6 / well, and then IgE was added and reacted for 4 hours. Thereafter, after sample treatment, DNP-BSA was added and reacted at 37 ° C. for 20 minutes. After washing twice with PBS, Trizol (Invitrogen) was added to lyse the cells, chloroform (Sigma) was added and centrifuged at 13,000 rpm for 15 minutes to obtain a supernatant. After mixing the supernatant and isopropanol and reacting to precipitate RNA, the RNA was isolated by washing once with ethanol.

추출한 RNA를 이용하여 정량 후 역전사 효소인 SuperscriptⅢ(Invitrogen)를 사용하여 역전사 연쇄중합반응에 의해 cDNA를 합성하였다. PCR 조건은 94℃ 45초, 55℃ 45초, 72℃ 1분 30초를 35 cycle 반응시켜 DNA를 증폭시켰다. 유전자의 발현 억제 효과를 agarose gel 상에서 비교하였다. 사용한 primer는 아래의 [표 2]와 같고 대조군 유전자는 GAPDH를 사용하였다. 양성 대조군으로는 ketotifen을 사용하였다.After quantification using the extracted RNA, cDNA was synthesized by reverse transcriptase chain polymerization using Superscript III (Invitrogen), a reverse transcriptase enzyme. PCR conditions were amplified DNA by 35 cycles of 94 ℃ 45 seconds, 55 ℃ 45 seconds, 72 ℃ 1 minutes 30 seconds. Gene expression inhibition was compared on agarose gel. The primers used are shown in [Table 2] below, and the control gene was GAPDH. Ketotifen was used as a positive control.

프라이머primer rCOX-2rCOX-2 F: 5' TGT ATG CTA CCA TCT GGC TTC GG 3'(서열번호 1)F: 5 'TGT ATG CTA CCA TCT GGC TTC GG 3' (SEQ ID NO: 1) R: 5' GTT TGG AAC AGT CGC TCG TCA TC 3'(서열번호 2)R: 5 'GTT TGG AAC AGT CGC TCG TCA TC 3' (SEQ ID NO: 2) rTNF-αrTNF-α F: 5' CAC CAC GCT CTT CTG TCT ACT GAA C 3'(서열번호 3)F: 5 'CAC CAC GCT CTT CTG TCT ACT GAA C 3' (SEQ ID NO: 3) R: 5' CCG GAC TCC GTG ATG TCT AAG TAC T 3'(서열번호 4)R: 5 'CCG GAC TCC GTG ATG TCT AAG TAC T 3' (SEQ ID NO: 4) rIL-4rIL-4 F: 5' ACC TTG CTT CAC CCT GTT C 3'(서열번호 5)F: 5 'ACC TTG CTT CAC CCT GTT C 3' (SEQ ID NO: 5) R: 5' TTG TGA GCG TGG ACT CAT TC 3'(서열번호 6)R: 5 'TTG TGA GCG TGG ACT CAT TC 3' (SEQ ID NO: 6) rIL-6rIL-6 F: 5' GCC CTT CAG GAA CAG CTA TGA 3'(서열번호 7)F: 5 'GCC CTT CAG GAA CAG CTA TGA 3' (SEQ ID NO: 7) R: 5' TGT CAA CAA CAT CAG TCC CAA GA 3'(서열번호 8)R: 5 'TGT CAA CAA CAT CAG TCC CAA GA 3' (SEQ ID NO: 8) rIL-10rIL-10 F: 5' TAG AAG TGA TGC CCC AGG 3'(서열번호 9)F: 5 'TAG AAG TGA TGC CCC AGG 3' (SEQ ID NO: 9) R: 5' TCA TCC TCC ACC TGC TCC ACT GC 3'(서열번호 10)R: 5 'TCA TCC TCC ACC TGC TCC ACT GC 3' (SEQ ID NO: 10) GAPDHGAPDH F: 5' GAG TCA ACG GAT TTG GTC GT 3'(서열번호 11)F: 5 'GAG TCA ACG GAT TTG GTC GT 3' (SEQ ID NO: 11) R: 5' GAC AAG CTT CCC GTT CTC AG 3'(서열번호 12)R: 5 'GAC AAG CTT CCC GTT CTC AG 3' (SEQ ID NO: 12)

결과를 [도 9]에 나타내었다. [도 9]를 참조하여 보면 상기 분리된 유효물질은 대체로 농도 의존적으로 사이토카인의 생성을 억제함을 알 수 있으며, 처리 농도(300uM)가 같을 경우 양성대조군(Ketotifen)과 유사한 정도의 활성을 보임을 알 수 있다.The results are shown in [FIG. 9]. Referring to FIG. 9, the isolated effective substance generally inhibits the production of cytokines in a concentration-dependent manner, and exhibits similar activity to that of the positive control group (Ketotifen) at the same treatment concentration (300 uM). It can be seen.

<< 실험예Experimental Example 3>  3> 사이토카인 생성의 작용 기전 조사Investigation of the mechanism of action of cytokine production

<실험예 3-1> NF -κB 발현 억제 활성 실험 - luciferase assay <Experiment 3-1> NF -κB expression inhibitory activity- luciferase assay

HEK 293T 세포를 5X104/well로 24 well plate에 배양 후 pGL3-basic luciferase expression 벡터(Promega)에 NF-κB 유전자를 삽입하여 얻은 재조합 벡터와 control reporter로서 Renilla luciferase의 cDNA를 가지는 pRL-SV-40 프라스미드(Promega)를 HEK 293T cell에 lipofectamine(Invitrogen)을 사용하여 co-transfection 하였다. 24시간 후 시료를 처리한 후 세포를 lysis시켜 발광효소의 활성화를 luciferase assay system(Promega)으로 측정하였다. 양성 대조군으로는 ketotifen을 사용하였다. Renilla is a recombinant vector and control reporter obtained by incubating HEK 293T cells in 24 well plates at 5X10 4 / well and inserting the NF-κB gene into the pGL3-basic luciferase expression vector (Promega). pRL-SV-40 Pramide (Promega) with luciferase cDNA was co-transfected into HEK 293T cells using lipofectamine (Invitrogen). After 24 hours, the samples were treated and the cells were lysed to measure the activation of luminescent enzymes by luciferase assay system (Promega). Ketotifen was used as a positive control.

결과를 [도 10]에 나타내었다. 상기 분리된 유효물질은 대체로 양성 대조군과 비슷한 수준으로 NF-κB의 발현을 억제함을 보여주고 있다. The results are shown in FIG. 10. The isolated active substance is shown to inhibit the expression of NF-κB to a level generally similar to the positive control.

<실험예 3-2> MAPK 및 p- AKT 생성 억제 활성 실험 - western blot Experimental Example 3-2 MAPK and p- AKT Production Inhibitory Activity Test- western blot

IgE와 그것의 항원으로 활성되고 실시예의 시료가 처리된 상기 <실험예 2>의 RBL-2H3 세포를 PBS로 세척 후 lysis buffer(50mM Tris-HCl, pH 8.0 with 150mM sodium chloride, 1% NP40, 0.5% sodium deoxycholate, 0.1% sodium dodecyl s㎕fate)에 용해시켰다. 13,000rpm으로 20분간 원심 분리하여 단백질을 추출하여 정량하였다. 정량된 단백질을 SDS-PAGE(sodium dodecyl s㎕fate polyacrylamide gel electrophoresis) 를 이용하여 전기 영동 후 polyvinylidene difluoride membrane으로 이동시켰다. membrane은 0.1% Tween 20과 5% 탈지 건조된 우유를 포함하고 있는 phosphate buffered saline으로 blocking 하였다. membrane은 0.1% Tween 20과 5% 탈지 건조된 우유를 포함하고 있는 phosphate buffered saline으로 blocking 하였다. membrane의 단백질은 1차 항체(1:1000)(Cell signaling) 와 horseradish peroxidase와 복합된 2차 항체(1:10000)(SantaCruz)에 반응시킨 후 ECL western detection 시약(Thermo scientific)으로 MAPK(ERK, JNK 및 p38) 및 p-AKT의 발현 정도를 β-actin의 발현 정도와 비교하여 평가하였다.RBL-2H3 cells of Example 2, which were activated with IgE and its antigen and treated with the sample of Example, were washed with PBS, followed by lysis buffer (50 mM Tris-HCl, pH 8.0 with 150 mM sodium chloride, 1% NP40, 0.5). % sodium deoxycholate, 0.1% sodium dodecyl sμl). Protein was extracted and quantified by centrifugation at 13,000 rpm for 20 minutes. Quantified proteins were transferred to polyvinylidene difluoride membrane after electrophoresis using SDS-PAGE (sodium dodecyl sμlFate polyacrylamide gel electrophoresis). The membrane was blocked with phosphate buffered saline containing 0.1% Tween 20 and 5% skim dried milk. The membrane was blocked with phosphate buffered saline containing 0.1% Tween 20 and 5% skim dried milk. Membrane protein was reacted with primary antibody (1: 1000) (Cell signaling) and secondary antibody (1: 10000) (SantaCruz) combined with horseradish peroxidase, and then MAPK (ERK, JNK and p38) and p-AKT expression level was evaluated by comparing the expression level of β-actin.

결과를 [도 11]에 나타내었는데, 상기 분리된 유효물질은 농도 의존적으로 MAPK 및 p-AKT의 발현을 억제함을 알 수 있으며, 처리 농도(300uM)가 같을 경우 양성대조군(Ketotifen)과 유사한 정도의 활성을 보임을 알 수 있다.The results are shown in [Fig. 11], wherein the isolated effective substance inhibits the expression of MAPK and p-AKT in a concentration-dependent manner, and similar to the positive control group (Ketotifen) at the same treatment concentration (300 uM). It can be seen that the activity of.

<< 실험예Experimental Example 4>  4> 리폭시게나제Lipoxygenase 활성 억제 실험 Activity inhibition experiment

0.1 M 트리스 완충용액(Tris buffer, pH 8.5) 2 ㎖에 각각의 농도별로 추출물 시료 20 ㎕를 첨가하고, 기질인 linoleic acid(최종농도 110 uM) 20 ㎕를 혼합하고 실온에서 5분간 전 반응시켰다. 반응액에 soybean lipoxygenase(Type , 500 UNIT/ 최종농도) 20 ㎕를 첨가한 후 5분간 반응시키고 234 nm에서 흡광도를 측정하였다.20 µl of the extract sample was added to 2 ml of 0.1 M Tris buffer (pH 8.5), and 20 µl of the substrate linoleic acid (final concentration 110 uM) was mixed and reacted for 5 minutes at room temperature. 20 μl of soybean lipoxygenase (Type, 500 UNIT / final concentration) was added to the reaction solution, followed by reaction for 5 minutes, and absorbance at 234 nm was measured.

양성대조군으로 페놀계 식품 항산화제인 NDGA(nordihydroguaiaretic acid)를 사용하였고, 각각의 시료에 대한 IC50 값을 구해 평가하였다.As a positive control, NDGA (nordihydroguaiaretic acid), a phenolic food antioxidant, was used, and the IC 50 value of each sample was obtained and evaluated.

리폭시게나제 활성 억제 결과 Inhibition of lipoxygenase activity samplesample IC50(uM)IC 50 (uM) G40-20-3G40-20-3 132.18132.18 NDGANDGA 67.4667.46

<110> JejuTechnopark KyunggiBiocenter <120> Composition for Improving Allergy Disease Using an Extract of Sargassum muticum or the Effective Compound Isolated from the Extract <130> PP10-000-Jeju&Kyunggi <160> 12 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 1 tgtatgctac catctggctt cgg 23 <210> 2 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 2 gtttggaaca gtcgctcgtc atc 23 <210> 3 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 3 caccacgctc ttctgtctac tgaa 24 <210> 4 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 4 ccggactccg tgatgtctaa gtac 24 <210> 5 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 5 accttgcttc accctgtt 18 <210> 6 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 6 ttgtgagcgt ggactcattc 20 <210> 7 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 7 gcccttcagg aacagctatg a 21 <210> 8 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 8 tgtcaacaac atcagtccca aga 23 <210> 9 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 9 tagaagtgat gccccagg 18 <210> 10 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 10 tcatcctcca cctgctccac tgc 23 <210> 11 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 11 gagtcaacgg atttggtcgt 20 <210> 12 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 12 gacaagcttc ccgttctcag 20 <110> JejuTechnopark          KyunggiBiocenter <120> Composition for Improving Allergy Disease Using an Extract of          Sargassum muticum or the Effective Compound Isolated from the          Extract <130> PP10-000-Jeju & Kyunggi <160> 12 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 1 tgtatgctac catctggctt cgg 23 <210> 2 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 2 gtttggaaca gtcgctcgtc atc 23 <210> 3 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 3 caccacgctc ttctgtctac tgaa 24 <210> 4 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 4 ccggactccg tgatgtctaa gtac 24 <210> 5 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 5 accttgcttc accctgtt 18 <210> 6 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 6 ttgtgagcgt ggactcattc 20 <210> 7 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 7 gcccttcagg aacagctatg a 21 <210> 8 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 8 tgtcaacaac atcagtccca aga 23 <210> 9 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 9 tagaagtgat gccccagg 18 <210> 10 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 10 tcatcctcca cctgctccac tgc 23 <210> 11 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 11 gagtcaacgg atttggtcgt 20 <210> 12 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer <400> 12 gacaagcttc ccgttctcag 20

Claims (11)

경단구슬모자반 추출물 또는 3-베타-하이드록시-5 알파, 6 알파-에폭시-7-메카스틱멘-9-원을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환의 개선제 조성물.
Composition for improving the allergic disease comprising a dandelion bead capillary extract or 3-beta-hydroxy-5 alpha, 6 alpha-epoxy-7-methicmen-9-source as an active ingredient.
제1항에 있어서,
상기 경단구슬모자반 추출물은 경단구슬모자반의 에탄올, 물 또는 이들의 혼합용매에 의한 추출물 또는 그 분획물인 것을 특징으로 하는 알러지성 질환의 개선제 조성물.
The method of claim 1,
The dandelion bead capillary extract is an allergic disease improver composition, characterized in that the extract or fraction thereof by ethanol, water or a mixed solvent of the dandelion bead cap.
제1항에 있어서,
상기 알러지성 질환은 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 습진, 소양(搔痒), 화분증, 천식, 기관지염, 두드러기, 혈관염, 비염, 위장증, 설사, 간질성 폐렴, 관절염, 안염, 결막염, 신경염, 중이염, 육아종증, 뇌척수염, 방광염, 후두염, 자반병(紫斑病), 음식물 알러지, 곤충 알러지, 약물 알러지, 금속 알러지 및 아나필락시성 쇼크로 구성된 군에서 선택된 하나인 것을 특징으로 하는 알러지성 질환 개선제 조성물.
The method of claim 1,
The allergic diseases include contact dermatitis, atopic dermatitis, eczema, pruritus, hay fever, asthma, bronchitis, urticaria, vasculitis, rhinitis, gastroenteritis, diarrhea, interstitial pneumonia, arthritis, ophthalmitis, conjunctivitis, neuritis, otitis media , Granulomatosis, encephalomyelitis, cystitis, laryngitis, purpura (紫 물), food allergy, insect allergy, drug allergy, metal allergy and anaphylactic shock, allergic disease improver composition, characterized in that one selected from the group consisting of.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 알러지성 질환 개선제 조성물.
4. The method according to any one of claims 1 to 3,
The composition is an allergic disease improving composition, characterized in that the pharmaceutical composition.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 알러지성 질환 개선제 조성물.
4. The method according to any one of claims 1 to 3,
The composition is an allergic disease improving composition, characterized in that the food composition.
제1항 내지 제3항에 있어서,
상기 조성물은 화장품 조성물인 것을 특징으로 하는 염증성 질환 개선제 조성물.
The method according to claim 1, wherein
The composition is an inflammatory disease improving composition, characterized in that the cosmetic composition.
3-베타-하이드록시-5 알파, 6 알파-에폭시-7-메카스틱멘-9-원을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 개선제 조성물.
Inflammatory disease improver composition comprising 3-beta-hydroxy-5 alpha, 6 alpha-epoxy-7-methicmen-9-one as an active ingredient.
제7항에 있어서,
상기 염증성 질환은 천식, 알러지성 및 비-알러지성 비염, 만성 및 급성 비염, 만성 및 급성 위염 또는 장염, 궤양성 위염, 급성 및 만성 신장염, 급성 및 만성 간염, 만성 폐쇄성 폐질환, 폐섬유증, 과민성 대장 증후군, 염증성 통증, 편두퐁, 두통, 허리 통증, 섬유 근육통, 근막 질환, 바이러스 감염, 박테리아 감염, 곰팡이 감염, 화상, 외과적 또는 치과적 수술에 의한 상처, 프로스타글라딘 E 과다 증후군, 아테롬성 동맥 경화증, 통풍, 관절염, 류머티스성 관절염, 강직성 척추염, 호지킨병, 췌장염, 결막염, 홍채염, 공막염, 포도막염, 피부염, 아토피성 피부염, 습진 및 다발성 경화증으로 구성된 군에서 선택된 하나인 것을 특징으로 하는 염증성 질환제 조성물.
The method of claim 7, wherein
The inflammatory diseases include asthma, allergic and non-allergic rhinitis, chronic and acute rhinitis, chronic and acute gastritis or enteritis, ulcerative gastritis, acute and chronic nephritis, acute and chronic hepatitis, chronic obstructive pulmonary disease, pulmonary fibrosis, irritability Bowel Syndrome, Inflammatory Pain, Migraine, Headache, Back Pain, Fibromyalgia, Fascia Disease, Viral Infection, Bacterial Infection, Fungal Infection, Burn, Surgical or Dental Surgery, Prostaglandin E-Over Syndrome, Atherosclerosis Atherosclerosis, gout, arthritis, rheumatoid arthritis, ankylosing spondylitis, Hodgkin's disease, pancreatitis, conjunctivitis, irisitis, scleritis, uveitis, dermatitis, atopic dermatitis, eczema and multiple sclerosis Disease composition.
제7항 또는 제8항에 있어서,
상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 염증성 질환 개선제 조성물.
9. The method according to claim 7 or 8,
The composition is an inflammatory disease improving composition, characterized in that the pharmaceutical composition.
제7항 또는 제8항에 있어서,
상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 염증성 질환 개선제 조성물.
9. The method according to claim 7 or 8,
The composition is an inflammatory disease improving composition, characterized in that the food composition.
제7항 또는 제8항에 있어서,
상기 조성물은 화장품 조성물인 것을 특징으로 하는 염증성 질환 개선제 조성물.9. The method according to claim 7 or 8,
The composition is an inflammatory disease improving composition, characterized in that the cosmetic composition.
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