KR20110109423A - Composition of chicken forage - Google Patents

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Abstract

본 발명은 생선 부산물 분말을 주원료로 하여 제조된 닭 사료인 탑 바이오에 항산화물질인 프로폴리스와 해독능력이 뛰어난 구연산을 배합하여 제조된 닭의 사료 조성물로서 탑 바이오 90~99 중량%와 프로폴리스 분말 0.9~9 중량% 및 구연산 분말 0.1~1 중량%를 배합하여 제조된다. The present invention is a feed composition of a chicken prepared by combining an antioxidant propolis and an excellent detoxification citric acid to a top bio, a chicken feed manufactured with fish by-product powder as a main raw material, 90 to 99% by weight of top bio and propolis powder It is prepared by mixing 0.9 to 9% by weight and 0.1 to 1% by weight citric acid powder.

Description

닭 사료 조성물{Composition of Chicken Forage}Composition of Chicken Forage

본 발명은 탑 바이오(Top Bio), 프로폴리스 및 구연산을 주원료로 하여 제조된 닭 사료 조성물에 관한 것으로 보다 구체적으로는 발효미 분말을 주원료로 하여 제조된 닭 사료인 탑 바이오에 항산화물질인 프로폴리스와 해독능력이 띠어난 구연산을 배합하여 제조된 닭 사료 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a chicken feed composition prepared using Top Bio, propolis and citric acid as the main ingredients, and more specifically, propolis which is an antioxidant to Top Bio, a chicken feed prepared using fermented rice powder as the main raw material. It relates to a chicken feed composition prepared by combining citric acid with a detoxifying ability.

조류인플루엔자(Avian Influenza, AI)는 조류가 걸리는 전염성 호흡기 질병인 바, 한번 발병되면 철새를 통해 대양과 대륙을 넘어 전 세계로 순식간에 퍼지므로 인류의 대 재앙으로까지 불리고 있다. 1918년 제1차 세계대전중에 발생하여 4~5천만명의 사망자를 낸 스페인독감(H1N1)이 그 하나이다.Avian Influenza (AI) is a contagious respiratory disease that affects birds. Once it occurs, it spreads across the oceans and continents through migratory birds, and is called the catastrophe of humanity. One example is the Spanish flu (H1N1), which occurred during the First World War in 1918, killing 40 to 50 million people.

현재까지 알려져 있는 모든 조류인플루엔자는 하나의 종(種)인 'A형 인플루엔자'에 속한다. A형 인플루엔자 바이러스에는 H1N1, H5N1, H7N1 등 여러 아종(亞種)이 있는 바, 문제는 이들 조류인플루엔자가 일반 독감과 같이 사람에서 사람으로 공기 전염되는 새로운 변종이 될 수 있다는 것이다.All avian influenza known to date belong to one species, influenza A. There are several subspecies of influenza A virus, such as H1N1, H5N1, and H7N1. The problem is that avian influenza can be a new strain of airborne transmission from person to person like the common flu.

일본에서는 이들 중 특히 H5N1, H7N1을 H5아형(亞型), H7아형이라고 하여 고병원성 조류인플루엔자로 분류하여 특별 관리하고 있다. In Japan, among them, H5N1 and H7N1 are classified as H5 subtype and H7 subtype as highly pathogenic avian influenza, and specially managed.

그간 조류인플루엔자의 감염확대를 방지하는 대책으로 양계장에 야생조류의 침입 방지, 스크리닝 실시 등에 의한 바이러스 침입의 조기 발견, 비활성화 백신의 사용, 조류인플루엔자 바이러스의 정화를 목적으로 한 소독 등을 거론하고 있지만 모두 비용만 많이 들고 효율도 나쁘다.
In the meantime, measures to prevent the spread of avian influenza include the early detection of viral invasion in poultry farms, screening, etc., early detection of virus invasion, use of inactivated vaccines, and disinfection to purify avian influenza virus. It costs a lot, and the efficiency is bad.

따라서 효율적으로 조류인플루엔자의 발생을 가능한 한 차단할 수 있는 방법의 개발이 절실하게 요구되고 있다.
Therefore, there is an urgent need to develop a method that can effectively block the occurrence of avian influenza as efficiently as possible.

상기 과제는 가금인 닭에게 항바이러스, 면역활력 보조성분이 들어 있는 사료를 급이하여 닭에게 면역력을 키워줌으로써 해결할 수 있다.
The problem can be solved by feeding the poultry chicken feed containing antiviral, immune vitality supplements to increase the immunity to the chicken.

닭에게 필요한 필수 영양분과 항바이러스, 면역 활력 보조성분이 들어 있는 본 발명의 사료를 닭에게 장기간 급이함으로써 닭의 체력과 면역력을 키워 조류 인플루엔자에 대한 면역력을 증진시킬 수 있다.
Feeding the feed of the present invention containing essential nutrients, antiviral and immune vitality supplements necessary for chickens to chickens for a long time can increase chicken's stamina and immunity, thereby enhancing immunity against avian influenza.

제1도는컨트롤 군과 배합 군에 대한 백혈구 수를 측정한 결과를 보여 주는 도표
제2도는 컨트롤 군과 배합 군에 대한 임파구 수를 측정한 결과를 보여 주는 도표
제3도는 컨트롤 군과 배합 군에 대한 단핵백혈구 수를 측정한 결과를 보여 주는 도표
제4도는 컨트롤 군과 배합 군에 대한 SOD효소를 측정한 결과를 보여 주는 도표
Figure 1 shows the results of measuring white blood cell counts for the control and combination groups
Figure 2 shows the results of measuring lymphocyte counts for the control and combination groups.
Figure 3 is a chart showing the results of measuring mononuclear leukocyte counts for the control and combination groups.
Figure 4 shows the results of measuring SOD enzymes for the control and combination groups.

본 발명은 생선 부산물 분말을 주원료로 하여 제조된 닭 사료인 탑 바이오에 항산화물질인 프로폴리스와 해독능력이 뛰어난 구연산을 배합하여 제조된 닭의 사료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a feed composition of a chicken prepared by combining an antioxidant propolis and an excellent detoxification citric acid to Top Bio, a chicken feed prepared from fish by-product powder as a main raw material.

탑 바이오는 본 발명인이 개발한 닭 사료로서 건조시킨 콩 껍질 분말과 건조시킨 생선부산물 분말, 숯 분말, 미네랄 및 해초 분말을 배합하여 제조한 것이다. Top Bio is a chicken feed developed by the present inventors is prepared by mixing the dried soybean skin powder, dried fish by-product powder, charcoal powder, mineral and seaweed powder.

콩 껍질에는 섬유질이 풍부하고 이외에 조단백질, 조지방질 및 회분이 함유되어 있어 동물의 사료로 사용하기에 적합하다.Soy skin is rich in fiber and contains crude protein, crude fat and ash, making it suitable for animal feed.

탑 바이오에는 콩 껍질 분말 32~35 중량%가 배합되어 있다.Top Bio contains 32 to 35% by weight of bean husk powder.

생선에는 불포화지방산과 질 좋은 단백질이 풍부하며, 특히 등 푸른 생선에는 오메가-3가 풍부하므로 생선부산물은 동물의 사료로 사용하기에 적합하다. 탑 바이오에는 건조시킨 생선 부산물 분말 50~50 중량%가 배합되어 있다. Fish is rich in unsaturated fatty acids and quality proteins, especially back blue fish is rich in omega-3s, so fish by-products are suitable for animal feed. Top Bio contains 50-50% by weight of dried fish by-product powder.

숯은 공기정화, 원적외선 방사, 질병치료, 해독작용 외에 미네랄도 풍부하다. 숯에 함유된 미네랄은 칼슘(Ca), 나트륨(Na), 철(Fe), 마그네슘(Mg), 칼륨(K), 인(P) 등이다. 탑 바이오에는 숯 분말 3~5 중량%가 배합되어 있다. Charcoal is rich in minerals in addition to air purification, far-infrared radiation, disease treatment and detoxification. Minerals contained in charcoal are calcium (Ca), sodium (Na), iron (Fe), magnesium (Mg), potassium (K), and phosphorus (P). Top bio is blended with 3 to 5% by weight of charcoal powder.

미네랄은 에너지 생산과정에서 결정적인 역할을 하는 효소의 생성과 활성화를 돕는 필수성분이다. 체내에 미네랄이 부족해지면 무기력증이 생긴다. 따라서 동물의 사료에도 꼭 필요한 성분이다. 탑 바이오에는 미네랄이 8~10 중량%가 배합되어 있다.  Minerals are essential ingredients in the production and activation of enzymes that play a crucial role in energy production. Lack of minerals in the body leads to lethargy. Therefore, it is an essential ingredient in animal feed. Top Bio contains 8 to 10% by weight of minerals.

해조류에 함유된 수많은 무기질이나 다당류, 단백질, 비타민은 인체의 세포나 혈액 속에서 건강유지에 중요한 역할을 한다. 탑 바이오에는 해조 분말 9~10 중량%가 배합되어 있다.  Numerous minerals, polysaccharides, proteins, and vitamins in algae play an important role in maintaining health in human cells and blood. Top bio is blended with 9 to 10% by weight seaweed powder.

본 발명에서는 상기와 같이 건조시킨 콩 껍질 분말과 건조시킨 생선부산물 분말, 숯 분말, 미네랄 및 해초 분말을 배합하여 제조한 닭 사료인 탑 바이오를 90~99 중량% 배합하였다.In the present invention, 90 ~ 99% by weight of Top Bio, a chicken feed prepared by mixing the dried soybean hull powder, dried fish by-product powder, charcoal powder, minerals and seaweed powder as described above.

프로폴리스(Propolis)는 벌집에서 추출한 천연항생물질로서 레진과 왁스, 플라노보이드, 에센셜오일, 각종 비타민과 미네랄, 아미노산으로 구성되어 있으며, 항생제나 소염작용을 한다고 알려져 있다.Propolis is a natural antibiotic extracted from honeycomb and consists of resins, waxes, flavonoids, essential oils, various vitamins, minerals and amino acids.

프로폴리스의 성분으로는 유기물과 미네랄(무기염류)이 가장 많으며 이와 함께 104종정도의 성분이 들어 있다. 많은 성분 중에서 미네랄비타민아미노산지방유기산플라보노이드 등은 세포대사에 중요한 역할을 하며, 테르펜류 등은 항암 작용을 한다. 특히 100종류가 넘는 플라보노이드가 들어 있어 건강 증진에 큰 도움을 준다. Propolis contains the most organics and minerals (inorganic salts), and contains 104 kinds of ingredients. Among many components, mineral vitamin amino acid fatty acid flavonoids play an important role in cell metabolism, and terpenes have anticancer activity. In particular, there are more than 100 kinds of flavonoids, which are very helpful for promoting health.

주요한 효능으로는 항염항산화면역증강 등이 있다. 항염 효과를 내는 것은 사람의 몸에 염증을 일으키는 프로스타그란딘을 만들어내는 효소를 절반까지 줄이기 때문이다. 또 주요 성분인 플라보노이드가 활성산소를 없애기 때문에 항산화 효과가 있다. 항암 효과를 나타내는 케르세틴 등이 있어 암세포의 유전자가 복제되기 전에 차단하는 일을 한다. The main efficacy is anti-inflammatory acid screen. The anti-inflammatory effect is due to half the enzymes that make prostaglandins that cause inflammation in the body. In addition, the flavonoids, the main ingredient, eliminates free radicals, which have antioxidant effects. Quercetin, which has anti-cancer effects, blocks cancer genes before they are replicated.

본 발명에서는 프로폴리스 분말 0.9~9 중량% 배합하였다. In the present invention, 0.9 to 9% by weight of propolis powder was blended.

구연산(CHO, citric acid)은 매실이나 감귤류 그리고 신맛이 강한 레몬이나 딸기 등에 많이 들어있으며 청량음료의 산미료(酸味料)로서 이용되고 있다. 한편, 구연산은 면역기구의 핵심인 대식세포 활성화, 피부의 노화방지, 뼈의 노화 방지, 지방세포분해 작용을 통해 체질을 강화하고 살균작용, 해독작용, 진정작용, 체질개선작용, 간 기능 촉진작용, 혈액의 산성화 방지, 칼슘 결석 억제, 무좀 예방, 타액 분비 촉진, 위액분비 촉진 등의 효과가 있다.Citric acid (CHO) is contained in plums, citrus fruits, lemons and strawberries with strong sourness, and is used as acidic acid in soft drinks. Citric acid, on the other hand, strengthens the constitution by activating macrophages, anti-aging of the skin, anti-aging of the bones, and lipocytolysis, which is the core of the immune system, and promotes sterilization, detoxification, sedation, constitution improvement, and liver function. Prevents acidification of blood, inhibits calcium stones, prevents athlete's foot, promotes saliva secretion, and promotes secretion of gastric juice.

본 발명에서는 구연산 분말 0.1~1 중량% 배합하였다.  In this invention, 0.1-1 weight% of citric acid powders were mix | blended.

따라서 본 발명의 닭 사료는 탑 바이오 90~99 중량%, 프로폴리스 분말 0.9~9 중량% 및 구연산 분말 0.1~1 중량% 배합하여 제조된다.Therefore, the chicken feed of the present invention is prepared by blending 90 to 99% by weight of top bio, 0.9 to 9% by weight of propolis powder and 0.1 to 1% by weight of citric acid powder.

상기와 같이 배합된 사료를 닭에게 급이하여 섭취하게 함으로써 조류인플루엔자를 위시하여 각종 병에 대한 저항력을 강하게 하였다.By feeding the feed formulated as above to feed the chickens, including avian influenza to strengthen the resistance to various diseases.

이하, 실험예를 통하여 본 발명 배합사료의 항산화작용, 면역 활력작용과 말초혈액중의 혈구 수에 미치는 영향을 조사하여 총 T임파구의 활성 및 항산화작용을 측정, 면역증강의 메카니즘을 검토하였다. Hereinafter, the effects of antioxidant activity, immune vitality, and blood cell counts in the peripheral blood of the compound of the present invention through the experimental examples were measured, and the activity and antioxidant activity of total T lymphocytes were measured.

실험예 1Experimental Example 1

1-1. 실험재료1-1. Experimental material

실험동물로는 생후 5 주령의 ICR마우스(흰쥐)를 11일간 예비사역을 한 후에 실험에 사용하였다. 즉, 상기 ICR마우스를 아무 것도 투여하지 않은 컨트롤(Control)군, 용매에 용해시킨 프로폴리스 용액만 투여한 프로폴리스 군, 용매에 용해시킨 구연산 용액만 투여한 구연산 군 및 용매에 탑 바이오분말 98.9 중량%와 프로폴리스 분말 1 중량% 및 구연산 분말 0.1 중량%를 혼합하여 용해시킨 용액을 투여한 탑 바이오프로폴리스구연산 배합군(이하, ‘배합군’이라 함)으로 분류하였다. 또 2GY(고선량 방사선)를 조사한 조사군을 컨트롤군과 탑 바이오프로폴리스구연산 배합군으로 분류하였다. 상기 용액의 농도는 500mg/kg로 정하였다.  As experimental animals, ICR mice (rats) of 5 weeks old were used for experiments after 11 days of preliminary work. That is, 98.9 weight of the top biopowder in the control group to which no ICR mouse was administered, the propolis group administered only a propolis solution dissolved in a solvent, the citric acid group administered only a citric acid solution dissolved in a solvent, and the solvent % And 1% by weight of propolis powder and 0.1% by weight of citric acid powder were classified into a top biopropolis citric acid compound group (hereinafter, referred to as a 'compound group') to which a solution was dissolved. In addition, the irradiation group irradiated with 2GY (high dose radiation) was classified into a control group and a top biopropolis citric acid compound group. The concentration of the solution was set at 500 mg / kg.

1-2 투여방법1-2 administration method

프로폴리스용액과 구연산용액 및 탑 바이오프로폴리스구연산 혼합물의 용액을 1-1의 각 군에게 매일 위 존데법에 의한 강제 경구투여를 하였다. 컨트롤 군에게는 동일한 양의 증류수를 동일하게 투여하였다.   A solution of the propolis solution, citric acid solution, and the top biopropolis citric acid mixture was subjected to forced oral administration by gastric soda method daily to each group of 1-1. The control group received the same amount of distilled water equally.

투여량은 체중 변화에 따라 달라지므로 3일마다 체중 측정을 하고, 체중에 맞게 투여량을 조절하였다.Dosage depends on body weight change, so the body weight was measured every 3 days and the dose was adjusted according to the body weight.

1-3 조사(照射)방법1-3 Irradiation method

면역력 저하 조건에서 기능성 발휘 유무를 조사하기 위하여 아래와 같이 실험을 실시하였다. 즉, 탑 바이오프로폴리스구연산 혼합물의 용액과 증류수를 배합군과 컨트롤 군에게 투여한지 2주 후에 필립스 X선 조사장치(225kv)를 이용하여 배합군과 컨트롤 군에게 2GY선량율(0.35GY/mln)을 전신 조사하였다. In order to investigate the functional exertion in the condition of lowering immunity, the following experiment was conducted. That is, two weeks after the solution of the top biopropolis citric acid mixture and distilled water were administered to the blending group and the control group, a 2GY dose rate (0.35GY / mln) was applied to the blending group and the control group using the Philips X-ray irradiation apparatus (225kv). Systemic irradiation

1-4 혈구수 측정1-4 Blood count

마우스의 꼬리정맥을 절개하여 10㎕ Caliberated Pipets(Doramond제)을 채혈하고 그 후 자동 혈구측정기(Celitac-α MEK-6318, 일본 광전사)를 이용하여 백혈구 수, 임파구 수를 측정하였다. 또 시간 경과에 따른 변화를 측정하기 위하여 X선을 조사하지 않은 비 조사군에 대해서는 투여 전, 투여개시 2,4,6,8주후의 그리고 X선을 조사한 조사군에 대해서는 조사 전날, 조사 2,12,24시간 후, 2,7,14,30일 후의 혈액을 측정하였다. The tail vein of the mouse was excised to collect 10 μl Caliberated Pipets (manufactured by Doramond), and then the white blood cell count and lymphocyte count were measured using an automatic hemocytometer (Celitac-α MEK-6318, Japanese photoelectric company). In addition, for the non-irradiated group not irradiated with X-rays to measure changes over time, 2,4,6,8 weeks after the start of the administration, and irradiated groups irradiated with X-rays on the day before irradiation, irradiation 2, After 12,24 hours, blood was measured after 2,7,14,30 days.

1-5 SOD효소 활성 측정1-5 Determination of SOD Enzyme Activity

SOD효소 활성 측정에는 SOD 테스트킷트(와코순약공업)를 이용하였다. ICR마우스의 안저로부터 적혈구 용적률 모세관을 이용하여 채혈한 혈액을 캐피타리원심분리기로 혈청을 분리하였다. 얻어진 혈청 8㎕에 발광시약 80㎕과 효소액 80㎕을 더하고 37℃로 20분간 가온하였다. 그 후 반응정지액 1.6 ㎖을 더하고 Multiskan JX(Thermo)에 의해 흡광도를 측정하여 SOD활성 값을 요구하였다. SOD test kit (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used for the measurement of SOD enzyme activity. Blood was collected from the fundus of the ICR mouse by using a red blood cell volume capillary tube, and serum was separated by a capillary centrifuge. 80 µl of the luminescent reagent and 80 µl of the enzyme solution were added to 8 µl of the obtained serum, and the mixture was warmed at 37 ° C for 20 minutes. After that, 1.6 ml of the reaction stopper was added, and the absorbance was measured by Multiskan JX (Thermo) to request the SOD activity value.

1-6 Flow Cytometer(유세포분석기) 측정1-6 Flow Cytometer Measurements

ICR마우스의 심장으로부터 채혈하여 혈액응고방지를 위해 헤파린처리를 한 후 적혈구제거시약을 혼합하고 세정한 후 세포수를 카운트하고 형광 염색하여 해석하였다. 측정 시기는 조사 30일 후, 처리는 전혈법을 이용하였다. Blood was collected from the heart of the ICR mouse and treated with heparin to prevent blood coagulation. Then, the erythrocyte removal reagent was mixed and washed, and the cell number was counted and analyzed by fluorescence staining. The measurement time was 30 days after irradiation, and the treatment used whole blood method.

1-7 용혈과정1-7 Hemolysis Process

실온 보존의 적혈구제거시약(염화암모니움 용혈제) 14㎖가 들어간 15㎖의 파르콘 원심튜브에 채혈한 혈액 1㎖을 더해 잘 혼합한 다음 혼합액을 3분간 방치하였다. 다음에 300G(1150rpm)로 5분간 교반한 후 실온에서 원심분리(HEMAT CRIT KH-120, 久保田商社(주))하여 상등액을 제거하였다. 다음에 냉각한 완충액(0.1% 아지화나트륨을 포함한 PSB(-))를 더하여 상온에서 혼합하여 냉각원심분리기로 300G (1150rpm)로 5분간 교반하여 2~8℃로 원심분리하였다. 다음에 상등액을 없애고 1㎖의 연색완충액(0.1% 아지화나트륨과 2% FBS를 포함한 PBS(-))를 더하여 재 혼탁하였다. 그리고 생 세포수를 카운트하여 검사대상물체에는 90% 이상의 생세포가 포함되도록, 또 항체의 양의 관계상 염색되지 않는 세포의 출현을 막기 위해 1 검사대상 물체 당 세포의 수는 1×10Cell이하로 하였다.  1 ml of collected blood was added to a 15 ml parcon centrifuge tube containing 14 ml of a red blood cell removal reagent (ammonium chloride hemolytic agent) stored at room temperature, mixed well, and the mixed solution was left for 3 minutes. Then, the mixture was stirred at 300 G (1150 rpm) for 5 minutes and centrifuged at room temperature (HEMAT CRIT KH-120, 久保 田 商社) to remove the supernatant. Next, the cooled buffer (PSB (-) containing 0.1% sodium azide) was added, mixed at room temperature, stirred at 300G (1150 rpm) for 5 minutes with a cooling centrifuge, and centrifuged at 2 to 8 ° C. The supernatant was then removed and re-clouded with 1 ml of color buffer (PBS (-) containing 0.1% sodium azide and 2% FBS). The number of cells per test object was 1 × 10 Cell or less in order to count the number of live cells so that the test object contains 90% or more live cells and prevent the appearance of unstained cells due to the amount of antibody. .

1-8 염색과정 1-8 Dyeing Process

파르콘튜브에 조절한 세포 50㎕를 취하고 교대로 부가하여 냉암소로 30분간 반응시켰다. 다음에 세정완충액을 2㎖ 더해 상온에서 혼합한 다음200G (950rpm)로 5분간 교반한 후 실온에서 원심 분리하여 상등액을 제거하였다.  50 µl of the adjusted cells were taken from the parcon tube, alternately added, and reacted with cold dark for 30 minutes. Next, 2 ml of the washing buffer was added and mixed at room temperature, followed by stirring at 200 G (950 rpm) for 5 minutes, followed by centrifugation at room temperature to remove the supernatant.

그리고 0.5㎖의 PBS(phosphate-buffered saline)용액을 더하여 잘 혼합한 후 2∼8℃에서 보존하였다. 0.5 ml of PBS (phosphate-buffered saline) solution was added thereto, mixed well, and stored at 2 to 8 ° C.

1-9 조류인플루엔자 바이러스 감염1-9 Avian Influenza Virus Infection

격리된 양계장에서 1-1에서 분류한 각 군에 1-2의 투여방법에 따라 2개월 이상 증류액 또는 프로폴리스 등 해당 용액을 섭취시킨 후 조류인플루엔자 바이러스(H5N1)를 감염시켰다. 1주일(?)후 생존율을 조사하였다. Avian influenza virus (H5N1) was infected after ingesting the corresponding solution, such as distillate or propolis, for two months or more according to the administration method of 1-2 in each group classified in 1-1 in an isolated poultry farm. Survival was checked after 1 week (?).

2. 실험 결과2. Experimental results

2-1. 조류인플루엔자 바이러스(H5N1)의 제거율
2-1. Removal rate of avian influenza virus (H5N1)

조류인플루엔자 바이러스
(H5N1)
Avian Influenza Virus
(H5N1)
제 거 율Removal rate
컨트롤 군Control group 프로폴리스 군Propolis County 구연산 군Citric acid 탑 바이오프로폴리스구연산 혼합Top Biopropolis Citric Acid Blend 0%(010⁴/21010⁴)0% (010⁴ / 21010⁴) 86.66%(18210⁴/21010⁴)86.66% (18210⁴ / 21010⁴) 95.71%(20110⁴/21010⁴)95.71% (20110⁴ / 21010⁴) 88.57%(18610⁴/21010⁴)88.57% (18610⁴ / 21010⁴)

위 표1에서 보는 바와 같이 증류수만 투여한 컨트롤 군에서는 조류인플루엔자 바이러스가 전혀 제거되지 않았으나 프로폴리스 군에서는 86.66%. 구연산 군에서는 95.71%가 제거되었다. 한편, 배합 군에서도 88.57%의 높은 제거율을 보였다.As shown in Table 1 above, avian influenza virus was not removed at all in the control group administered with distilled water, but at 86.66% in the propolis group. 95.71% of citric acid was removed. On the other hand, the compounded group also showed a high removal rate of 88.57%.

2-2. 면역력 증강작용2-2. Immunity enhancement

2-2-1 백혈구 수2-2-1 white blood cell count

컨트롤 군과 배합 군에 대한 백혈구 수를 측정한 결과는 도 1과와 같다. 도 1에서 보는 바와 같이 4주 후에 배합 군의 경우 면역력이 대폭 증강되었음을 알 수 있다. The results of measuring white blood cell counts for the control group and the combination group are shown in FIG. 1. As shown in Figure 1 it can be seen that the immunity was significantly enhanced in the combination group after 4 weeks.

2-2-2 임파구 수2-2-2 lymphocyte number

컨트롤 군과 배합 군에 대한 임파구 수를 측정한 결과는 도 2와 같다. 도 2에서 보는 바와 같이 4주 후에 배합 군의 경우 임파구 수가 대폭 저하되었음을 알 수 있다. The result of measuring lymphocyte counts for the control group and the blended group is shown in FIG. 2. As shown in FIG. 2, the number of lymphocytes was significantly reduced in the blended group after 4 weeks.

2-2-3 단핵백혈구(monocyte) 수2-2-3 Monocyte count

컨트롤 군과 배합 군에 대한 단핵백혈구 수를 측정한 결과는 도 3과 같다. 도 3에서 보는 바와 같이 조류인플루엔자 바이러스가 체내에 침투하면 컨트롤 군의 경우 2주까지는 단핵백혈구의 수가 저하되다가 차차 증가하여 6주 이후 급격히 증가하였다. 이는 체내에 침투한 조류인플루엔자 바이러스가 계속 증가하고 있음을 알 수 있다. 그러나 배합 군의 경우 4주 이후 단핵백혈구의 수가 증가하지만 6주 이후 차차 감소하고 있다. 이는 체내에 침투하였던 조류인플루엔자 바이러스가 소멸되고 있음을 보여주는 것이다.The results of measuring mononuclear leukocyte counts for the control group and the combination group are shown in FIG. 3. As shown in FIG. 3, when the avian influenza virus penetrated the body, the number of mononuclear leukocytes decreased until 2 weeks in the control group, and gradually increased after 6 weeks. It can be seen that the avian influenza virus has penetrated the body continues to increase. However, the number of mononuclear leukocytes increased after 4 weeks in the combination group, but gradually decreased after 6 weeks. This shows that the avian influenza virus that has penetrated the body is disappearing.

2-2-4 SOD(항산화) 효소의 활성화2-2-4 Activation of SOD (Antioxidant) Enzyme

컨트롤 군과 배합 군에 대한 SOD효소를 측정한 결과는 도 4와 같다. 도 4에서 보는 바와 같이 SOD효소의 활성화가 탑 바이오프로폴리스구연산 혼합군에서 높은 것을 알 수 있다.As a result of measuring the SOD enzyme for the control group and the combination group is shown in FIG. As shown in Figure 4 it can be seen that the activation of the SOD enzyme is high in the top biopropolis citric acid mixed group.

2-2-5 CD4, CD8 및 CD16의 측정결과2-2-5 Measurement results of CD4, CD8 and CD16

가. 2GY를 조사하지 않은 경우 end. If you did not investigate 2GY

2GY를 조사하지 않은 경우 CD4, CD8 및 CD16의 측정결과는 표2와 같다.
If 2GY is not investigated, the measurement results of CD4, CD8 and CD16 are shown in Table 2.

군(群)County CD4CD4 CD8CD8 CD16CD16 컨트롤 군Control group 14.5+-3.214.5 + -3.2 14+-2.714 + -2.7 8.5+-2.38.5 + -2.3 배합 군Formulation 22.3+-4.522.3 + -4.5 17.2+-3.817.2 + -3.8 41.8+-6.541.8 + -6.5

나. 2GY(고선량 방사선)를 조사한 경우 I. When irradiated with 2GY (high dose radiation)

2GY를 조사한 경우 CD4, CD8 및 CD16의 측정결과는 표3과 같다.
In the case of 2GY, the measurement results of CD4, CD8 and CD16 are shown in Table 3.

군(群)County CD4CD4 CD8CD8 CD16CD16 컨트롤 군Control group 10.5+-2.510.5 + -2.5 8.5+-2.28.5 + -2.2 10.3+-2.510.3 + -2.5 배합 군Formulation 15.2+-2.615.2 + -2.6 12.6+-4.112.6 + -4.1 22.5+-7.322.5 + -7.3

2GY를 조사한 경우와 2GY를 조사하지 않은 경우 모두 배합군의 경우 CD4, CD8 및 CD16의 측정값의 상승을 볼 수 있어 면역력이 증가하였음을 알 수 있다.In the case of irradiating 2GY and not irradiating 2GY, the combination group showed an increase in the measured values of CD4, CD8 and CD16, indicating that the immunity was increased.

2-2-6 배합사료에 대한 항 조류인플루엔자 효과 2-2-6 Anti-Avian Influenza Effects on Combined Feeds

격리된 양계장에서 1-1에서 분류한 각 군 중 컨트롤 군에는 보통사료를, 프로폴리스 군과 구연산 군 및 배합 군에는 본 발명의 배합사료를 2개월 이상 급이한 후 조류인플루엔자 바이러스(H5N1)를 감염시켰다. 1주일(?)후 생존율을 조사한 결과는 표4에서 보는 바와 같다.
In the isolated poultry farm, each group classified in 1-1 was fed a normal feed for the control group, and the propolis group, the citric acid group, and the blended group of the present invention were fed with the avian influenza virus (H5N1). Infected. The results of the survival rate after one week (?) Are shown in Table 4.

조류인플루엔자 바이러스
(H5N1)
Avian Influenza Virus
(H5N1)
감염률(%)Infection Rate (%)
컨트롤 군Control group 프로폴리스 군Propolis County 구연산 군Citric acid 혼합 군Mixed military 100%(10匹/10匹)100% (10 匹 / 10 匹) 60%(6匹/10匹)60% (6 匹 / 10 匹) 20%(2匹/10匹)20% (2 匹 / 10 匹) 10%(1匹/10匹)10% (1 匹 / 10 匹)

즉, 본 발명의 배합사료를 급이한 경우 조류인플루엔자에 대한 저항력이 강화되어 감염률이 컨트롤 군에 비하여 현저하게 낮음을 알 수 있다.That is, when the feed compound of the present invention is fed a strong resistance to avian influenza it can be seen that the infection rate is significantly lower than the control group.

3. 한편, 항균작용을 조사하기 위하여 웨르슈균과 그램양성균 및 대장균(이하, ‘웨르슈균’이라 함)에 대해서도 한천평판반전법으로 조사하였다. 또 상기 균의 항균작용에 대한 균 공존의 영향에 대해서는 감수성 디스크를 이용하고 한천평판중층법으로 검토하였다. 3. On the other hand, to investigate the antimicrobial activity, Werech and Gram-positive bacteria and Escherichia coli (hereinafter referred to as "Weursch") were also investigated by the agar plate inversion method. In addition, the effect of bacterial coexistence on the antimicrobial activity of the bacteria was examined by using a sensitive disk and agar plate layering method.

검토 대상은 1-1의 경우와 마찬가지로 아무 것도 투여하지 않은 컨트롤(Control)군, 용매에 용해시킨 프로폴리스만 투여한 프로폴리스 군, 용매에 용해시킨 구연산만 투여한 구연산 군 및 용매에 탑 바이오와 프로폴리스 및 구연산을 배합하여 용해시킨 용액을 투여한 배합 군의 4개 부류이다. As in the case of 1-1, the subjects of the study were the control group without any administration, the propolis group with only the propolis dissolved in the solvent, the citric acid group with only the citric acid dissolved in the solvent, and the top bio and Four classes of formulation groups in which a solution in which propolis and citric acid are combined and dissolved is administered.

3-1 웨르슈균에 대한 발육억제 측정3-1 Determination of growth inhibition against Welsh bacteria

3-1-1 웨르슈균 발육억제작용 측정3-1-1 Measurement of Welsh germ growth inhibition

웨르슈균 유주능 억제를 위해 한천농도를 3%로 조정한 Mueller-Hinton한천배지에 웨르슈균을 백금 이(白金耳)로 화선도말(畵線塗抹)하고 호기(好氣)적으로 35℃에서 24시간 배양하였다. Weerch bacteria are plated with platinum teeth on a Mueller-Hinton agar medium in which the agar concentration is adjusted to 3% in order to suppress the Weirsch fungal activity. Time incubation.

그 후 한천에서 스파텔을 이용해 무균으로 뒤집어 웨르슈균을 이용하여 화선도말, 35℃로 24~48시간 배양한 후 지시균으로서의 웨르슈균의 발육저지직경을 측정하였다. 즉, 웨르슈균과의 교점부근에 있어서 지시균이 많이 발육한 것 및 지시균의 발육이 1군집(잘 발생되지 않은 상태)도 되지 않는 부분 즉, 발육저지직경이 10mm 미만의 것을 발육억제작용(-)의 균주라 하고, 발육저지직경이 10mm 이상의 것을 발육억제작용(+)의 균주라고 하였다. 또 24시간, 48시간 배양하여 비교하였다.Afterwards, the agar was inverted aseptically using a spatel, incubated for 24 to 48 hours at 25 ° C, using a Weirsch bacterium, and the growth inhibition diameter of the Welsh bacterium as an indicator was measured. That is, in the vicinity of the intersection with the Welsh bacterium, a large number of indicator bacteria have been developed, and a portion where the growth of the indicator bacteria is not even in one group (well-prone state), that is, the growth inhibition diameter is less than 10 mm. The strain of-), the growth inhibition diameter of 10mm or more was called a strain of growth inhibition (+). In addition, it was compared by incubating for 24 hours and 48 hours.

3-1-2 웨르슈균에 의한 각 군에 대한 항균활성의 억제작용(중층법)Inhibition effect of antibacterial activity to each group by 3-1-2 Wersch bacteria (layered method)

직경 150mm의 Mueller-Hinton한천배지의 표면에 웨르슈균을 NCCLS에 준한 균량도말(108cfuml)하여 24시간 35℃로 배양하였다. 그 후 직경 85mm의 5% 양탈섬유소 혈액 첨가 Mueller-Hinton한천배지를 놓고 그 표면에 웨르슈균을 NCCLS에 준한 균량을 도말하여 각 군의 감수성에 대해서 디스크를 넣어 24시간 35℃로 배양하여 저지 원 직경을 측정하였다. On the surface of the Mueller-Hinton agar medium with a diameter of 150 mm, the Weirsch bacteria were cultured at 108 ° C for 24 hours in a homogenous smear (108 cfuml) according to NCCLS. Subsequently, a Mueller-Hinton agar medium containing 5% sheep fiber fiber with 85% diameter was placed on the surface, and the germs were spread on the surface of NCCLS. Was measured.

대조군으로서 웨르슈균을 도말하지 않은 Mueller-Hinton한천배지위에 5% 양탈섬유소 혈액에 Mueller-Hinton한천배지를 얹어 웨르슈균을 NCCLS에 준한 균량을 도말하여 감수성 디스크를 넣고 저지 원 직경을 측정하였다.As a control, a Mueller-Hinton agar medium was placed on 5% sheep fiber fiber on Mueller-Hinton agar medium without Welsh germ, and a susceptible disc was smeared according to NCCLS, and a susceptible disc was measured.

저지 원 직경의 통계학적 유의차 검정은 Wilcoxon 검정을 이용하였다.The statistically significant difference test for stopping circle diameter was performed using Wilcoxon test.

4. 실험 결과4. Experimental Results

4-1 한천평판반전법에 의한 웨르슈균의 발육억제 확인4-1 Confirmation of growth inhibition of Welsh bacteria by agar plate reversal method

한천평판반전법에 의한 웨르슈균 동시 검출에 있어서 컨트롤 군을 제외한 다른 군에서는 표 5에서 보는 바와 같이 웨르슈균의 발육이 억제되었음을 확인하였다.
In the simultaneous detection of Welsh bacteria by agar plate inversion method, it was confirmed that the growth of Welsh bacteria was suppressed as shown in Table 5 except for the control group.

균의 종류Type of bacteria 소실률Loss rate 컨트롤 군Control group 프로폴리스 군Propolis County 구연산 군Citric acid 배합군Combination 웨르슈균Welsh 0%(0/203)0% (0/203) 86.9%(176/203)86.9% (176/203) 97.04%(197/203)97.04% (197/203) 91.13%(185/203)91.13% (185/203) 그램양성균Gram-positive bacteria 0%(0/67)0% (0/67) 82.08%(55/67)82.08% (55/67) 94.02%(63/67)94.02% (63/67) 91.04%(61/67)91.04% (61/67) 대장균Escherichia coli 0%(0/65)0% (0/65) 95.38%(62/65)95.38% (62/65) 98.46%(64/65)98.46% (64/65) 89.23%(58/65)89.23% (58/65)

4-2 한천평판반전법에 의한 웨르슈균의 항균 작용 확인4-2 Confirmation of antimicrobial activity of Welsh bacteria by agar plate inversion

한천평판반전법에 의한 웨르슈균 동시 검출에 있어서 컨트롤 군을 제외한 다른 군에서는 표 6에서 보는 바와 같이 웨르슈균의 발육이 억제되었음을 확인하였다.  In simultaneous detection of Welsh bacteria by agar plate inversion method, it was confirmed that the growth of Welsh bacteria was suppressed as shown in Table 6 except the control group.

균의 종류Type of bacteria 소실률Loss rate 컨트롤 군Control group 프로폴리스 군Propolis County 구연산 군Citric acid 배합군Combination 웨르슈균Welsh 0%(0/182)0% (0/182) 91.75%(167/182)91.75% (167/182) 94.50%(172/182)94.50% (172/182) 93.40%(170/182)93.40% (170/182) 그램양성균Gram-positive bacteria 0%(0/65)0% (0/65) 78.46%(51/65)78.46% (51/65) 92.30%(60/65)92.30% (60/65) 87.69%(57/65)87.69% (57/65) 대장균Escherichia coli 0%(0/73)0% (0/73) 73.79%(54/73)73.79% (54/73) 97.26%(71/73)97.26% (71/73) 91.78%(61/73)91.78% (61/73)

따라서 본 발명은 탑 바이오 90~99 중량%와 프로폴리스 분말 0.9~9 중량% 및 구연산 분말 0.1~1 중량%를 배합하여 제조된 것을 특징으로 하는 닭 사료 조성물을 제공한다. Therefore, the present invention provides a chicken feed composition, characterized in that the top bio-90 ~ 99% by weight, the propolis powder 0.9 ~ 9% by weight and citric acid powder 0.1 ~ 1% by weight of the formulation.

Claims (2)

탑 바이오 90~99 중량%와 프로폴리스 분말 0.9~9 중량% 및 구연산 분말 0.1~1 중량%를 배합하여 제조된 것을 특징으로 하는 닭 사료 조성물
Chicken feed composition, characterized in that the top bio-90 ~ 99% by weight, propolis powder 0.9 ~ 9% by weight and citric acid powder 0.1 ~ 1% by weight
제1항에 있어서, 상기 탑 바이오는
콩 껍질 분말 32~35 중량%와 생선 부산물 분말 50~50 중량%, 숯 분말 3~5 중량%와 미네랄이 8~10 중량% 및 해조 분말 9~10 중량%를 배합하여 제조된 것을 특징으로 하는 닭 사료 조성물
The method of claim 1, wherein the top bio is
32 to 35% by weight of soybean skin powder, 50 to 50% by weight of fish by-product powder, 3 to 5% by weight of charcoal powder, 8 to 10% by weight of minerals and 9 to 10% by weight of seaweed powder Chicken feed composition
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