KR20110073897A - Lactobacillus plantarum pmo08 having anticancer or antibacterial activity and method for preparing fermented product by lactic acid bacteria using vegetable ingredients - Google Patents
Lactobacillus plantarum pmo08 having anticancer or antibacterial activity and method for preparing fermented product by lactic acid bacteria using vegetable ingredients Download PDFInfo
- Publication number
- KR20110073897A KR20110073897A KR1020090130699A KR20090130699A KR20110073897A KR 20110073897 A KR20110073897 A KR 20110073897A KR 1020090130699 A KR1020090130699 A KR 1020090130699A KR 20090130699 A KR20090130699 A KR 20090130699A KR 20110073897 A KR20110073897 A KR 20110073897A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- lactic acid
- acid bacteria
- lactobacillus plantarum
- kfcc
- cancer
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/13—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using additives
- A23C9/133—Fruit or vegetables
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
Abstract
Description
본 발명은 항암 또는 항균 활성을 가지는 락토바실러스 플란타룸 피엠오08 및 식물성 원재료를 이용한 유산균 발효제품의 제조방법에 관한 것으로 보다 상세하게는 위액 및 장액에서 우수한 생존율을 가져 장 생존율이 우수하고, 인체 소장세포와의 부착능이 우수하여 체내에서 기능성을 적절히 발휘할 수 있으며, 항균 활성을 가져 유해 미생물을 억제함으로써 장 균총을 정상화 할 수 있으며, 대장암 세포에 대한 항암 활성을 가지는 유산균인 락토바실러스 플란타룸 피엠오08를 식물성 원료로 발효하는 유산균 발효제품의 제조방법, 상기 유산균을 포함하는 항암 또는 항균용 조성물 및 이를 함유하는 식물성 유산균 음료 등의 건강 식품에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing a lactobacillus fermented product using Lactobacillus plantarum P.E.O08 and vegetable raw materials having anticancer or antimicrobial activity, and more particularly, having excellent survival rate in gastric juice and intestinal fluid and excellent intestinal survival. Excellent adhesion to small intestine cells, it can exert its proper function in the body, normalize the intestinal flora by inhibiting harmful microorganisms with antibacterial activity, and Lactobacillus plantarum, a lactic acid bacterium having anti-cancer activity against colon cancer cells The present invention relates to a method for producing a lactic acid bacteria fermented product fermenting PMO 08 as a vegetable raw material, an anticancer or antimicrobial composition containing the lactic acid bacteria, and a health food such as a vegetable lactic acid bacteria beverage containing the same.
유산균(lactic acid bacteria)은 탄수화물을 분해를 하고, 이를 이용하여 유산을 만드는 세균으로서, 산소가 적은 곳에서 잘 증식하는 통성 혐기성균 또는 편 성 혐기성균이다. 유산균은 크게 5개 속으로 구분할 수 있는데, 스트렙토코커스(Streptococcus), 락토바실러스(Lactobacillus), 루코노스탁(Leuconostoc), 비피도박테리아(Bifidobacteria) 그리고 페디오코커스(Pediococcus)로 나뉜다. 연쇄상 구균인 스트렙토코커스 속 미생물은 동형발효균으로, 우유를 발효시켜 유산을 생성함으로써 부패균이나 병원균을 억제하는 것으로 알려져 있다. 락토바실러스 속 미생물은 동형 또는 이형발효를 하는 유산간균으로, 유제품이나 채소의 발효과정에서 흔히 볼 수 있는 균이며, 쌍구균인 루코노스탁 속 미생물은 이형 발효를 하며 채소류의 발효에 주로 관여한다. 또한, 비피도박테리아 속 미생물은 산소가 있는 곳에서는 생육하지 못하는 편성 혐기성균으로, 당을 발효하여 유아에게 유용하게 대사될 수 있는 L(+)형의 유산을 생성한다. 마지막으로, 페디오코커스 속 미생물은 사련균의 형태를 가지는 동형 발효균으로, 김치나 절임 식품에 존재하며 소시지 등의 육류 발효에 관여한다.Lactic acid bacteria are bacteria that break down carbohydrates and use them to make lactic acid. Lactic acid bacteria can be divided into five genera, which are classified into Streptococcus, Lactobacillus, Leukonostoc, Bifidobacteria and Pediococcus. Microorganisms of Streptococcus, a Streptococcus, are homozygous and are known to inhibit rot and pathogens by fermenting milk to produce lactic acid. The microorganisms of the genus Lactobacillus are lactic acid bacillus that is homozygous or heterozygous, and are commonly found in the fermentation process of dairy products or vegetables. In addition, Bifidobacteria genus microorganisms are organized anaerobic bacteria that do not grow in the presence of oxygen, ferment sugar to produce L (+) type lactic acid that can be usefully metabolized in infants. Lastly, the microorganism of the genus Pediococcus is a homozygous fermentation in the form of Lactobacillus, which is present in kimchi or pickled food and is involved in meat fermentation such as sausage.
유산균은 장내 pH를 산성으로 유지시켜 대장균이나 크로스트리디움(Clostridium sp.)과 같은 유해균의 번식을 억제하고 설사와 변비를 개선할 뿐 아니라, 비타민 합성, 항암작용, 혈청 콜레스테롤 저하 등의 역할을 한다. 특히, 유산균은 장의 점막과 상피세포에 강하게 결합할 수 있는 특정 단백질을 가지고 있어 유해 세균의 성장을 막는 정장 작용에 많은 도움을 준다. 또한, 유산균은 대식세포의 증식을 촉진하여 대식세포의 장내 유해 세균에 대한 인지능력, 살균능력 등을 강화시키고, 면역 관련 물질의 분비를 촉진하여 면역증강 효과를 나타내는 것으 로 알려져 있다(Gabriela perdigon et al., J. of food Protection 53:404-410, 1990; Katsumasa sato et al., Microbiol. Immunol., 32(7):689-698, 1988). 그 중에서도 락토바실러스 속 미생물은 애시도필린(acidophillin)을 생산하여 이질균, 살모넬라균, 포도상구균 등의 유해균의 성장을 저해하고, 설사 원인균의 증식을 억제하여 장내균총을 정상화함으로써 설사를 멈추게 하는 작용을 하는 것으로 알려져 있다.Lactobacillus maintains acidic intestinal pH, inhibits the growth of harmful bacteria such as Escherichia coli and Crosstridium sp., Improves diarrhea and constipation, and also plays a role in vitamin synthesis, anticancer activity, and serum cholesterol reduction. . In particular, lactic acid bacteria have a specific protein that can bind strongly to the intestinal mucosa and epithelial cells, help a lot of work to prevent the growth of harmful bacteria. In addition, lactic acid bacteria are known to promote the proliferation of macrophages to enhance the cognitive and bactericidal ability of macrophage intestinal harmful bacteria, and to promote the secretion of immune-related substances (Gabriela perdigon et al. al., J. of food Protection 53: 404-410, 1990; Katsumasa sato et al., Microbiol. Immunol., 32 (7): 689-698, 1988). Among them, the microorganism of the genus Lactobacillus produces acidophillin, which inhibits the growth of harmful bacteria such as dysentery, salmonella and staphylococcus, and inhibits the growth of diarrheal causative bacteria to normalize the intestinal flora to stop diarrhea. It is known.
한편, 유산균이 생균제로서 유용한 효과를 갖기 위해서는 섭취 후 위와 장을 통과하여 장에 도달할 수 있어야 하며, 숙주 조직 내에 부착함으로써 군락을 형성하고 유산균 고유 기능을 발휘할 수 있어야 한다. 특히 한국인의 경우 예로부터 섬유질이 많은 채식 위주의 식사를 해 왔기 때문에 소화에 많은 시간이 필요해 유전적으로 장의 길이가 서양인 보다 평균 80cm 더 길며, 이처럼 긴 장을 가진 한국인은 서양인에 비해 같은 양의 유산균을 섭취하더라도 유산균이 장 끝부분까지 생존할 확률이 낮기 때문에 생존율이 보다 우수한 균주를 섭취하는 것이 필요하다. On the other hand, in order to have a useful effect as a probiotic, lactic acid bacteria must be able to reach the intestine through the stomach and the intestine after ingestion, and must be able to form colonies and exert the unique function of lactic acid bacteria by attachment in host tissues. In particular, Koreans have been eating fiber-based diets since ancient times, which requires a lot of time to digest. Genetic intestinal length is 80cm longer than Westerners, and Koreans with such long intestines have the same amount of lactic acid bacteria as Westerners. Even if ingested, lactic acid bacteria are unlikely to survive to the end of the intestine, so it is necessary to take strains with better survival rate.
최근 채소나 과일과 같은 식물, 혹은 김치와 같은 과채류를 발효한 식품에서 분리해낸 식물유래 유산균들의 기능성이 밝혀지면서 새로운 기능성 소재로 떠오르고 있다. 특히 식물유래 유산균은 낮은 pH, 높은 염 농도와 같은 척박한 환경에서도 강한 생존력을 갖는 장점을 가지고 있어 생균제로서 새롭게 주목받고 있다. 김치에서 분리한 미생물인 페디오코커스 펜토사세우스 CPC0511은(대한민국특허출원 제2008-0109585호)는 내산성, 내담즙성, 내염성 및 항균 효과를 식물성 유산균으로 개시된 바 있으며, 김치에서 분리한 락토바실러스 플란타룸 J124는 pH2.5에서 60분 처리 시 90% 이상의 생존력을, 90분 처리 시 50%의 생존력을 갖는 내산성 유산균으로 개시된 바 있다(대한민국특허 제0443254호). 또한 김치에서 분리한 내산성 및 내담즙성이 우수한 신규 락토바실러스 플랜타룸 YM 0105(대한민국특허 제0455832호) 개시되었는데, 인공위액 조건에서 약 82.5%의 생존력이 있는 것으로 보고된 바 있다. 이 외에도 김치에서 분리한 유산균의 항바이러스효과(대한민국특허 10-0808910), 항유전독성 효과(대한민국특허 10-0637413), 항알레르기 효과(대한민국특허 10-0745013), 항헬리코박터 효과(대한민국특허 10-0474942), 항콜레스테롤 효과(대한민국특허 10-0264361), 항유전독성 (대한민국특허 10-0637413) 등 다양한 생리활성을 갖는 유산균이 개시되었다. Recently, as the functionalities of plant-derived lactic acid bacteria isolated from fermented foods such as vegetables and fruits, or fruit and vegetable such as kimchi, are emerging as a new functional material. In particular, plant-derived lactic acid bacteria are attracting new attention as probiotics because they have a strong viability even in harsh environments such as low pH, high salt concentration. Pediococcus pentosaceus CPC0511 (Korean Patent Application No. 2008-0109585), a microorganism isolated from kimchi, has been disclosed as a vegetable lactic acid bacterium with acid, bile, salt and antibacterial effects. Plantarum J124 has been disclosed as acid-resistant lactic acid bacteria having a 90% viability at 60 minutes treatment at pH2.5, 50% viability at 90 minutes treatment (Korean Patent No. 0443254). In addition, a new Lactobacillus plantarum YM 0105 (Korean Patent No. 0455832), which has excellent acid resistance and bile resistance isolated from kimchi, has been disclosed, and has been reported to have about 82.5% viability in artificial gastric juice conditions. In addition, the antiviral effect of the lactic acid bacteria isolated from kimchi (Korea Patent 10-0808910), anti-genetic toxicity effect (Korea Patent 10-0637413), anti-allergic effect (Korea Patent 10-0745013), anti-helicobacter effect (Korea Patent 10- 0474942), lactic acid bacteria having various physiological activities such as anti-cholesterol effect (Korean Patent 10-0264361), anti-genetic toxicity (Korean Patent 10-0637413) has been disclosed.
그러나 상기 결과들은 in vitro에서 유산균의 생리활성을 검증한 것으로 위액이나 장액에서의 생존율에 따라 효과 차이가 발생할 수 있음에도 이에 대해 고려되지 않았으며, 유산균의 내산성에 대한 자료만으로 장에서의 생존율을 예측하고 있는 제한점이 있었다.However, these results verify the physiological activity of lactic acid bacteria in vitro, and even though the effects may differ depending on the survival rate in gastric juice or intestinal fluid, they were not considered. There was a limitation.
이에 본 발명자들은 위장에서의 생존율이 뛰어나고 장 부착능이 우수한 유산균을 개발하여 서양인 보다 긴 장을 가진 한국인에게 적합한 유산균을 제공하고 이로부터 발효유를 대체할 수 있는 식물성 유산균 음료를 제공하기 위하여 연구한 결과, 락토바실러스 플란타룸 피엠오08이 그러한 요구에 부합하는 균주임을 확인하여 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the present inventors have developed a lactic acid bacterium which has excellent survival rate in the stomach and excellent intestinal adhesion, thereby providing a suitable lactic acid bacterium for Koreans with longer intestines than Westerners, and to provide a vegetable lactic acid bacterium beverage which can replace fermented milk therefrom. The present invention was completed by confirming that Lactobacillus plantarum POM08 is a strain that meets those needs.
따라서, 본 발명의 목적은 락토바실러스 플란타룸 피엠오08의 새로운 용도로써, 위장에서의 생존율이 뛰어나고 장 부착능이 우수하며, 식물성 원재료에 대한 발효능이 우수하고, 항암 및 항균활성을 가진다는 점을 제공하는데 있다.Accordingly, an object of the present invention is a novel use of Lactobacillus plantarum POM08, which has excellent survival rate in the stomach, excellent intestinal adhesion, and excellent fermentation ability against vegetable raw materials, and has anticancer and antibacterial activity. To provide.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 유산균 발효제품의 제조방법에 있어서, 식물성 원재료가 포함된 원료를 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08(KFCC-11028)로 배양, 발효시키는 것을 특징으로 하는 유산균 발효제품의 제조방법을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention is a method for producing a lactic acid bacterium fermentation product, characterized in that the raw material containing the plant material is incubated with Lactobacillus plantarum POM 08 (KFCC-11028), fermentation It provides a method for producing lactic acid bacteria fermented products.
본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08을 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물을 제공한다.In order to achieve another object of the present invention, the present invention provides a composition for anticancer comprising Lactobacillus plantarum POM 08 as an active ingredient.
본 발명의 또다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 락토바실러스 플란타 룸 피엠오 08을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 제공한다.In order to achieve another object of the present invention, the present invention provides an antimicrobial composition comprising Lactobacillus planta room PMP 08 as an active ingredient.
본 발명의 또다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 항암 또는 항균활성을 가지는 본 발명의 유산균을 포함하는 건강 기능식품 또는 유산균 발효제품을 제공한다.In order to achieve another object of the present invention, the present invention provides a health functional food or lactic acid bacteria fermentation products comprising the lactic acid bacteria of the present invention having anticancer or antibacterial activity.
이하 본 발명의 내용을 보다 상세히 설명하기로 한다.Hereinafter, the content of the present invention will be described in more detail.
본 발명의 유산균 발효제품의 제조방법은 식물성 원재료가 포함된 원료를 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08(KFCC-11028)로 배양, 발효시켜, 유산균 발효제품을 제조하는 것을 특징으로 한다.The method for producing a lactic acid bacterium fermentation product of the present invention is characterized in that the lactic acid bacterium fermentation product is prepared by culturing and fermenting a raw material containing a plant raw material with Lactobacillus plantarum POM 08 (KFCC-11028).
유산균 발효제품의 제조방법은 통상적으로 원료의 준비, 유산균의 첨가, 발효, 완성된 제품의 회수 등의 과정으로 이루어진다:Processes for producing lactic acid bacteria fermentation products typically consist of preparation of raw materials, addition of lactic acid bacteria, fermentation, recovery of finished products, etc .:
원료의 준비 단계는 발효 대상이 되는 재료를 준비하고, 유산균 발효가 잘 이루어지도록 발효 조건을 준비하는 단계로서, 본 발명에서는 식물성 원재료를 포함하는 원재료를 준비하는 것을 특징으로 한다. 이는 본 발명의 유산균이 야채, 과일 등의 과채류에 대한 발효능이 우수하기 때문에 이를 통해 제품의 유효성분을 충실히 확보하기 위함이다.The preparation step of the raw material is to prepare the material to be fermentation target, and to prepare the fermentation conditions so that the lactic acid bacteria fermentation well, in the present invention is characterized by preparing a raw material including a vegetable raw material. This is because the lactic acid bacteria of the present invention is excellent in fermentation ability for vegetables, fruits and the like, through which the active ingredient of the product is faithfully secured.
유산균의 첨가는 발효 대상의 양에 따라 적량의 유산균을 첨가하는 것으로 본 발명에서는 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08을 사용하는 것을 특징으로 한다. 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08은 대한민국 특허 제264361호(2000. 5. 30)에 기재된 유산균으로 담즙산을 탈포합하여 생체내에 혈중 콜레스테롤 저하효과를 나타내는 효과가 있음이 공지되어 있다. 본 발명에서는 상기 유산균이 위장에서의 생존율이 뛰어나고 장 부착능이 우수하며, 식물성 원재료에 대한 발효능이 우수하여 서양인 보다 긴 장을 가진 한국인에게 적합한 유산균이라는 점을 확인하였다.The addition of lactic acid bacteria is the addition of a suitable amount of lactic acid bacteria in accordance with the amount of the fermentation target in the present invention is characterized in that Lactobacillus plantarum PEMO 08 is used. It is known that Lactobacillus plantarum PMP 08 is effective in degrading bile acid with lactic acid bacteria described in Korean Patent No. 2264361 (May 30, 2000), which shows the effect of lowering blood cholesterol in vivo. In the present invention, it was confirmed that the lactic acid bacterium has excellent survival rate in the stomach, excellent intestinal adhesion ability, and excellent fermentation ability for vegetable raw materials, which is suitable for Koreans with longer intestines than Westerners.
발효는 통상의 유산균의 발효조건에 따라 수행되는 것으로 바람직하게는 37 내지 43℃에서 4 내지 168시간동안 수행된다.Fermentation is carried out according to the fermentation conditions of conventional lactic acid bacteria, preferably at 37 to 43 ℃ for 4 to 168 hours.
완성된 제품의 회수는 발효물에서 불필요한 부산물이나 미발효된 재료를 제거하는 것에서부터 저장, 운반을 용이하게 하기 위한 모든 후처리과정 및 포장 등을 포함한다.Recovery of the finished product includes all post-processing and packaging to facilitate storage and transport, from the removal of unnecessary by-products or unfermented materials from the fermentation.
본 발명의 유산균이 야채, 과일 등의 과채류의 발효능이 우수하기 때문에 본 발명에서 사용되는 식물성 원재료는 바람직하게는 신선초, 토마토, 당근, 적채, 돌미나리, 호박, 알로에, 푸룬, 블루베리, 석류, 포도, 키위, 배, 사과 등일 수 있다.Since the lactic acid bacterium of the present invention has excellent fermentation ability of fruits and vegetables such as vegetables and fruits, the vegetable raw material used in the present invention is preferably fresh vinegar, tomato, carrot, red vegetable, parsley, pumpkin, aloe, puron, blueberry, pomegranate, Grapes, kiwis, pears, apples, and the like.
본 발명의 제조방법에 따라 제조되는 유산균 발효제품은 바람직하게는 유산균 음료일 수 있으며, 유산균 음료는 예를 들어, 유산균을 배양하여 젖산 발효시킨 것에 살균수를 가해서 희석하고 당분, 향료 등을 가한 다음 용기에 충전한 제품을 나타낸다. 유산균 음료에는 일반적으로 유산균이 살아 있는 채로 함유되어 있으므 로, 음용 후 장(腸) 안에서 정장작용이 되며, 유산의 효과를 기대할 수 있다.The lactic acid bacteria fermented product prepared according to the production method of the present invention may be preferably a lactic acid bacteria beverage, the lactic acid bacteria beverage, for example, by culturing lactic acid bacteria and lactic acid fermentation was diluted by adding sterilized water and added sugar, flavoring, etc. The product filled in the container is shown. Lactobacillus beverages generally contain lactic acid bacteria alive, so that after ingestion of the intestinal action (음), the effect of lactic acid can be expected.
한편, 본 발명의 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08은 항암 또는 항균 활성이 있음이 새롭게 발견되었으므로 본 발명의 항암 또는 항균용 조성물은 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 한다. On the other hand, the Lactobacillus plantarum PEMO 08 of the present invention has been newly found to have anti-cancer or antimicrobial activity, so the anti-cancer or antimicrobial composition of the present invention is characterized in that it comprises Lactobacillus plantarum PEMO 08 as an active ingredient. do.
본 발명의 일 실시예에서는 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08이 인공 위액이나 인공 장액에서의 생존율을 확인하였다. 그 결과, 본 발명의 락토바실러스 플란타룸 피엠오08은 대조군으로 사용된 동물 유래 유산균이자 흔히 사용되는 유산균인 락토바실러스 카제이(KCPC-3930) 유산균 대비 생존력이 월등히 우수함을 알 수 있었다.In one embodiment of the present invention, Lactobacillus plantarum POM 08 was confirmed the survival rate in artificial gastric juice or artificial intestinal fluid. As a result, it was found that Lactobacillus plantarum POM08 of the present invention is superior in viability compared to Lactobacillus casei (KCPC-3930) lactobacillus, which is an animal-derived lactic acid bacterium used as a control and a commonly used lactic acid bacterium.
본 발명의 다른 실시예에서는 락토바실러스 플란타룸 피엠오08의 장 부착능 조사하였다. 그 결과, 락토바실러스 플란타룸 피엠오08는 대조군인 락토바실러스 카세이에 비해서 장 상피세포인 Caco-2 세포에 잘 부착하여, 사람의 위와 소장을 통과하여 장내에 높은 농도로 점착할 수 있을 것으로 생각되었다. 아울러, 병원성균주인 살모넬라균(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus) 2종과 동시에 배양 시에도 우수한 장 부착능이 있음을 확인하였고, 병원성균이 장 세포와 결합하는 것을 억제함을 알 수 있었다.In another embodiment of the present invention, the intestinal adhesion ability of Lactobacillus plantarum POM08 was investigated. As a result, Lactobacillus plantarum POM08 is more likely to adhere to Caco-2 cells, which are intestinal epithelial cells, than to control Lactobacillus cassei, and to adhere to human intestine and intestine at high concentrations. It became. In addition, two strains, Salmonella typhimurium and Staphylococcus aureus, were found to have excellent intestinal adhesion during incubation and inhibit the binding of pathogenic bacteria to intestinal cells. .
본 발명의 또다른 실시예에서는 락토바실러스 플란타룸 피엠오08의 병원성균에 대한 항균활성 조사하였다. 그 결과, 락토바실러스 플란타룸피엠오08(KFCC-11028)균주는 락토바실러스 카제이(KCPC-3930) 균주 보다 살모넬라균(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 대장균(E. coli)에 대해서 높은 항균활성을 가지고 있음을 확인할 수 있었다.In another embodiment of the present invention, the antimicrobial activity of the Lactobacillus plantarum POM08 against pathogenic bacteria was investigated. As a result, Lactobacillus plantarummpeo 08 (KFCC-11028) strains were found to be Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus, and Escherichia coli (E. coli). It was confirmed that it has a high antimicrobial activity against.
본 발명의 또다른 실시예에서는 락토바실러스 플란타룸 피엠오08의 대장암에 대한 항암활성 조사하였다. 그 결과, 락토바실러스 플란타룸피엠오08(KFCC-11028)은 대장암 세포인 HT-29 세포의 증식을 억제하는 것으로 확인되었고, 비교균주인 락토바실러스 카제이(KCPC-3930) 균주 보다 활성이 더 우수한 것으로 나타났다. 뿐만 아니라 인공 위, 장액 통과 후에도 비교군 대비 항암 활성이 높게 지속됨을 확인 할 수 있었다.In another embodiment of the present invention, the anticancer activity of Lactobacillus plantarum POM08 against colorectal cancer was investigated. As a result, it was confirmed that Lactobacillus plantarumpiom08 (KFCC-11028) inhibited the proliferation of HT-29 cells, which are colorectal cancer cells, and was more active than the Lactobacillus casei (KCPC-3930) strain. Appeared to be better. In addition, the anticancer activity was maintained higher than that of the control group even after the passage of the artificial stomach and serous fluid.
따라서, 본 발명은 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08(KFCC-11028)을 유효성분으로 포함하는 항암용 조성물을 제공한다. Therefore, the present invention provides an anticancer composition comprising Lactobacillus plantarum PEMO 08 (KFCC-11028) as an active ingredient.
본 발명의 유산균이 적용될 수 있는 암은 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게는 대장암, 폐암, 간암, 위암, 식도암, 췌장암, 담낭암, 신장암, 방광암, 전립선암, 고환암, 자궁경부암, 자궁내막암, 융모암, 난소암, 유방암, 갑상선암, 뇌암, 두경부암, 악성흑색종, 림프종, 재생불량성 빈혈일 수 있으며, 더 바람직하게는 대 장암일 수 있다. Cancer to which the lactic acid bacteria of the present invention can be applied is not limited thereto, but preferably, colon cancer, lung cancer, liver cancer, gastric cancer, esophageal cancer, pancreatic cancer, gallbladder cancer, kidney cancer, bladder cancer, prostate cancer, testicular cancer, cervical cancer, endometrial cancer , Chorionic cancer, ovarian cancer, breast cancer, thyroid cancer, brain cancer, head and neck cancer, malignant melanoma, lymphoma, aplastic anemia, more preferably colon cancer.
아울러, 본 발명의 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08(KFCC-11028)는 살모넬라균(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 대장균(E. coli) 등의 병원성 미생물에 대해서 특이적으로 항균활성을 보이므로 본 발명은 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08(KFCC-11028)을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 제공한다.In addition, the Lactobacillus plantarum PEMO 08 of the present invention (KFCC-11028) is specifically antibacterial against pathogenic microorganisms such as Salmonella (Salmonella typhimurium), Staphylococcus aureus, Escherichia coli (E. coli) Since the present invention shows activity, it provides an antimicrobial composition comprising Lactobacillus plantarum PEMO 08 (KFCC-11028) as an active ingredient.
본 발명의 유산균이 항균활성을 보이는 병원성 미생물은 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게는 살모넬라균(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 대장균(E. coli)일 수 있으며, 상기 미생물에 대해서 특이적으로 항균활성을 나타낸다.Pathogenic microorganisms of the lactic acid bacteria of the present invention exhibits antimicrobial activity is not limited thereto, but may be preferably Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus, E. coli, Specifically, it exhibits antimicrobial activity.
상기한 바와 같이, 본 발명의 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08(KFCC-11028)는 종래에 공지되어 흔히 사용되는 균주인 락토바실러스 카세이에 비해서 우수한 위장내 생존율, 부착율 및 항암/항균 활성을 가진다. 따라서, 락토바실러스 플란타룸 피엠오 08(KFCC-11028)은 락토바실러스 카세이를 대체하여 식물성 유산균 음료 등의 다양한 건강 식품에 사용될 수 있다. As described above, the Lactobacillus plantarum PEMO 08 (KFCC-11028) of the present invention has superior gastrointestinal viability, adhesion rate and anticancer / antibacterial activity compared to the Lactobacillus casei which is a known and commonly used strain. . Therefore, Lactobacillus plantarum PEMO 08 (KFCC-11028) can be used in various health foods, such as vegetable lactic acid beverages in place of Lactobacillus casei.
건강 기능식품의 예로는 유산균 발효음료 등의 유산균 발효제품일 수 있으 며, 본 발명의 유산균이 식물성 원료, 즉 야채, 과일 등의 과채류에 대한 발효능이 우수하기 때문에 상기 유산균 발효제품은 식물성 원료를 함유한 제품일 수 있다.An example of a health functional food may be a lactic acid bacteria fermented product such as lactic acid bacteria fermented beverage, the lactic acid bacteria fermented product is a vegetable raw material because the lactic acid bacteria of the present invention has excellent fermentation ability for vegetable raw materials, that is, vegetables, fruits, etc. It may be a product containing.
본 발명의 항암 또는 항균용 조성물은 이에 한정되지 않지만 바람직하게는 약학적 조성물 또는 식품 조성물을 나타내어 본 발명의 조성물은 식품 조성물(또는 식품) 또는 약학적 조성물(또는 의약품)으로 제공될 수 있다.The anticancer or antimicrobial composition of the present invention is not limited thereto, but preferably represents a pharmaceutical composition or a food composition, so that the composition of the present invention may be provided as a food composition (or food) or a pharmaceutical composition (or pharmaceutical).
상기 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형의 식품 조성물은 당 업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다.The food composition includes all forms such as functional foods, nutritional supplements, health foods and food additives. Food compositions of this type can be prepared in various forms according to conventional methods known in the art.
예를 들면, 건강식품으로는 본 발명의 유산균 또는 유산균 발효물을 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 본 발명의 유산균 또는 유산균 발효물을 기타의 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다. For example, as a health food, the lactic acid bacteria or lactic acid bacteria fermented product of the present invention may be prepared in the form of tea, juice, and drink for drinking, or granulated, encapsulated, and powdered. In addition, the lactic acid bacteria or lactic acid bacteria fermentation products of the present invention can be mixed with other active ingredients to prepare in the form of a composition.
또한, 기능성 식품으로는 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마 카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치이즈 등), 식용식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 본 발명의 유산균 발효물을 첨가하여 제조할 수 있다.In addition, functional foods include beverages (including alcoholic beverages), fruits and processed foods (e.g. canned fruit, canned foods, jams, marmalade, etc.), fish, meat and processed foods (e.g. ham, sausage corned beef) Etc.), breads and noodles (e.g. udon, soba noodles, ramen, spaghetti, macaroni, etc.), fruit juices, various drinks, cookies, syrups, dairy products (e.g. butter, cheese), edible vegetable oils, margarine, It can be prepared by adding the lactic acid bacterium fermentation product of the present invention to vegetable protein, retort food, frozen food, various seasonings (eg, miso, soy sauce, sauce, etc.).
또한, 본 발명의 유산균 발효물을 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다.In addition, in order to use the lactic acid bacteria fermented product of the present invention in the form of food additives can be prepared in the form of powder or concentrate.
본 발명의 식품 조성물 중 본 발명의 유산균 발효물의 바람직한 함유량으로는 식품의 전체 중량에 대해 약 0.01 내지 100중량%를 포함할 수 있다.A preferred content of the lactic acid bacteria fermentation product of the present invention in the food composition of the present invention may include about 0.01 to 100% by weight relative to the total weight of the food.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양의 본 발명의 유산균 발효물을 단독으로 포함하거나 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함할 수 있다. 상기에서 "약학적으로 유효한 양"이란 음성 대조군에 비해 그 이상의 반응을 나타내는 양을 말하며 바람직하게는 항암 또는 항균활성을 나타내기에 충분한 양을 말한다. 본 발명에 따른 유산균 발효물의 약학적으로 유효한 양으로는 0.01 내지 100 mg/day/kg 체중이다. 그러나 상기 약학적으로 유효한 양은 질환 또는 대상세균 및 이의 중증정도, 환자의 연령, 체중, 건강상태, 성별, 투여 경로 및 치료기간 등과 같은 여러 인자에 따라 적절히 변화될 수 있다.The pharmaceutical composition according to the present invention may include a pharmaceutically effective amount of the lactic acid bacterium fermentation product of the present invention alone or further include one or more pharmaceutically acceptable carriers. As used herein, the term “pharmaceutically effective amount” refers to an amount that exhibits a higher response than a negative control, and preferably an amount sufficient to exhibit anticancer or antimicrobial activity. Pharmaceutically effective amount of the lactic acid bacteria fermentation according to the present invention is 0.01 to 100 mg / day / kg body weight. However, the pharmaceutically effective amount may be appropriately changed depending on various factors such as the disease or the target bacterium and its severity, the patient's age, weight, health condition, sex, route of administration and duration of treatment.
상기에서 "약학적으로 허용되는" 이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여 될 때, 활성성분의 작용을 저해하지 않으며 통상적으로 위장 장애, 현기증과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 비독성의 조성물을 말한다. 본 발명의 조성물은 상기 약학적으로 허용되는 담체와 함께 당업계에 공지된 방법으로 투여경로에 따라 다양하게 제형화될 수 있다. 투여 경로로는 이에 한정되지는 않으나 경구적 또는 비경구적으로 투여될 수 있다. 비경구적 투여 경로로는 예를 들면, 경피, 비강, 복강, 근육, 피하 또는 정맥 등의 여러 경로가 포함된다. As used herein, "pharmaceutically acceptable" means a non-toxic composition that, when administered to humans, does not inhibit the action of the active ingredient and usually does not cause an allergic reaction such as gastrointestinal disorders, dizziness, or the like. Say The composition of the present invention may be formulated in various ways according to the route of administration by a method known in the art together with the pharmaceutically acceptable carrier. Routes of administration may be administered orally or parenterally, but not limited to these. Parenteral routes of administration include, for example, several routes such as transdermal, nasal, abdominal, muscle, subcutaneous or intravenous.
본 발명의 약학적 조성물을 경구 투여하는 경우 본 발명의 약학적 조성물은 적합한 경구 투여용 담체와 함께 당 업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 현탁액, 웨이퍼 등의 형태로 제형화될 수 있다. 적합한 담체의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 및 말티톨 등을 포함하는 당류와 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분 및 감자 전분 등을 포함하는 전분류, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 등을 포함하는 셀룰로즈류, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈 등과 같은 충전제가 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있다. 나아가, 상기 약학적 조성물은 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다. 이들 제형 및 담체는 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995)에 기재되어 있다.In the case of oral administration of the pharmaceutical composition of the present invention, the pharmaceutical composition of the present invention is prepared in powder, granule, tablet, pill, dragee, capsule, liquid, gel according to a method known in the art together with a suitable oral carrier. , Syrups, suspensions, wafers and the like. Examples of suitable carriers include sugars, including lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol and maltitol and starch, cellulose, starch including corn starch, wheat starch, rice starch and potato starch, and the like. Fillers such as cellulose, gelatin, polyvinylpyrrolidone, and the like, including methyl cellulose, sodium carboxymethylcellulose, hydroxypropylmethyl-cellulose, and the like. In addition, crosslinked polyvinylpyrrolidone, agar, alginic acid or sodium alginate and the like may optionally be added as a disintegrant. Furthermore, the pharmaceutical composition may further include an anticoagulant, a lubricant, a humectant, a perfume, an emulsifier, and a preservative. These formulations and carriers are described in Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995, which is a prescription generally known in pharmaceutical chemistry.
따라서, 본 발명은 인공위액 및 장액에서의 내성이 탁월하여 경구 섭취 시 장에 도달하는 능력이 뛰어날 뿐만 아니라 장에서의 부착능이 우수하여 유산균 고유 기능을 적절히 발휘할 수 있어 한국인의 긴 장에 적합한 유산균으로 락토바실러스 플란타룸 피엠오08(KFCC-11028)을 제공한다. 본 발명의 유산균은 병원성균에 대한 항균활성과 대장암에 대한 항암활성을 보유하여 장 건강 증진에 이용할 수 있으며, 야채 발효능이 우수하여 종래의 발효용 유산균을 대체하여 우수한 유산균 발효음료의 제조 등에 유용하게 사용할 수 있다.Therefore, the present invention is excellent in resistance to artificial gastric juice and intestinal fluid, not only has excellent ability to reach the intestine upon oral ingestion, but also has excellent adhesion ability in the intestine so that it can properly exert its unique function as a lactic acid bacterium suitable for Korean intestines. Lactobacillus plantarum PEMO 08 (KFCC-11028). The lactic acid bacteria of the present invention can be used to promote intestinal health by having antimicrobial activity against pathogenic bacteria and anticancer activity against colon cancer, and have excellent vegetable fermentation ability, thereby replacing the conventional lactic acid bacteria for fermentation and producing excellent fermented beverages. It can be useful.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.However, the following examples are illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following examples.
<실시예 1>≪ Example 1 >
유산균 배양 및 위장내 생존율 확인Lactobacillus culture and gastrointestinal viability
<1-1> 유산균 배양<1-1> lactic acid bacteria culture
유산균 배양은 MRS 배지(MRS broth)에 유산균 분말 2% 접종 하여 37℃에서 18시간 배양하였으며, 연속해서 2회 계대 배양하여 사용하였다. Lactic acid bacteria culture was inoculated 2% lactic acid bacteria powder in MRS broth (MRS broth) and incubated for 18 hours at 37 ℃, it was used in two successive passages.
<1-2> 인공위ㆍ장액에서의 생존율 조사<1-2> Survival Rate Survey
시험에 사용된 인공위액은 1N-HCl로 pH를 2.5로 조정한 MRS 배지(MRS broth)에 펩신(pepsin; 1000unit/ml)을 첨가하여 사용하였으며, 인공장액은 뮤신(musin), 판크레아틴(pancreatin), 담즙염(bile salt), NaCl이 함유된 GAM 배지를 pH 6.8로 조정하여 사용하였다. The artificial gastric fluid used in the test was used by adding pepsin (peptin (1000unit / ml) to MRS broth) in which pH was adjusted to 2.5 with 1N-HCl, and the artificial intestinal fluid was mucin and pancreatin. ), Bile salt (bile salt), NaCl-containing GAM medium was used to adjust to pH 6.8.
인공위액 및 장액에서의 생존율을 확인하기 위해, 먼저 락토바실러스 플란타룸 피엠오08(KFCC-11028)와 대조군으로써 락토바실러스 카제이(KCPC-3930) 각각을 인공위액에 접종시킨 뒤 37℃에서 3시간 배양 후 원심 분리하여 균체를 회수하였으며, 회수된 균체에 다시 인공장액을 첨가하여 37℃ 3시간 배양한 후 MRS 아가(MRS agar)에 분주하여 살아있는 유산균수를 각각 측정하였다.To confirm viability in artificial gastric juice and intestinal fluid, first inoculate each of the Lactobacillus plantarum PEMO 08 (KFCC-11028) and each of Lactobacillus casei (KCPC-3930) as a control in artificial gastric fluid and then incubate at 37 ° C. After incubation for a time, the cells were recovered by centrifugation, and the recovered cells were incubated for 3 hours by adding artificial intestine solution at 37 ° C., and then aliquoted to MRS agar to measure the number of live lactic acid bacteria.
그 결과, 도 1에서 보는 바와 같이 본 발명의 락토바실러스 플란타룸 피엠오08(KFCC-11028)은 동물 유래 락토바실러스 카제이(KCPC-3930) 유산균 대비 인공ㆍ위장관 통과 후 생존력이 월등히 우수함을 알 수 있다.As a result, as shown in Figure 1, the Lactobacillus plantarum PEMO 08 (KFCC-11028) of the present invention is superior to the survivability after passing the artificial and gastrointestinal tract compared to the Lactobacillus casei (KCPC-3930) lactic acid bacteria derived from animals Can be.
<실시예 2><Example 2>
락토바실러스 플란타룸 피엠오08의 장 부착능 조사Intestinal Attachment Investigation of Lactobacillus Planta Room POM08
<2-1> 유산균주의 장 부착능 확인<2-1> Intestinal adhesion ability of lactic acid strain
본 연구에 사용된 장 상피세포는 Caco-2 세포(KCLB 30037.1)로서 한국 세포주은행(KCLB)에서 분양받아 사용하였다. Caco-2 세포는 10% FBS(Fetal Bovine Serum)가 함유된 MEM(Gibco, USA) 배지를 이용하여 5% CO2 존재 하에 37℃에서 배양하였다. Caco-2 세포는 2x105 cell/ml이 되도록 분주하여, 격일로 배지를 교환하였으며, 완전하게 단일층(monolayer)이 형성될 때까지 배양하여 실험에 사용하였다. Intestinal epithelial cells used in this study were Caco-2 cells (KCLB 30037.1) and used by Korea Cell Line Bank (KCLB). Caco-2 cells were cultured at 37 ° C. in the presence of 5% CO 2 using MEM (Gibco, USA) medium containing 10% FBS (Fetal Bovine Serum). Caco-2 cells were aliquoted to 2 × 10 5 cells / ml, medium was exchanged every other day, and cultured until complete monolayer formation was used for the experiment.
인체소장세포와의 부착능을 확인하기 위해 시험균은 원심분리하여 균체를 회수하고 PBS로 2회 세척한 후 1ml로 재현탁하여 무혈청(serum free) MEM으로 1x107cfu/ml 농도로 희석하여 조제하였다. In order to confirm the ability to adhere to human small intestine cells, the test bacteria were recovered by centrifugation, washed twice with PBS, resuspended in 1 ml and diluted to 1x10 7 cfu / ml with serum-free MEM. It prepared.
본 발명의 락토바실러스 플란타룸 피엠오08 및 대조군으로써 락토바실러스 카제이를 각각 Caco-2 세포 단일층이 형성된 각 웰(well)에 107 cfu/ml 농도로 넣고 120분간 반응시켰다. 반응 후 상층액을 제거하고 Caco-2 세포를 PBS(phosphate buffered saline)로 2회 세척하여 부착되지 않은 시험균를 제거하였다. Caco-2 세포에 부착된 시험균의 생균수를 측정하기 위해 0.2% Trypsin-EDTA를 가하여 시험균을 회수하였다.Lactobacillus plantarum POM08 of the present invention and Lactobacillus casei as a control was put in each well formed with Caco-2 cell monolayer at 10 7 cfu / ml concentration was reacted for 120 minutes. After the reaction, the supernatant was removed, and Caco-2 cells were washed twice with PBS (phosphate buffered saline) to remove unattached test bacteria. To determine the viable cell count of the test bacteria attached to Caco-2 cells, the test bacteria were collected by adding 0.2% Trypsin-EDTA.
그 결과, 도 2에서 보는 바와 같이 락토바실러스 플란타룸 피엠오08(KFCC-11028)은 락토바실러스 카제이(KCPC-3930)보다 장세포와의 부착능이 우수한 균주임을 알 수 있었다. 따라서, As a result, as shown in Figure 2, Lactobacillus plantarum POM 08 (KFCC-11028) was found to be a better strain than the Lactobacillus casei (KCPC-3930) to enterocytes. therefore,
본 발명의 락토바실러스 플란타룸 피엠오08는 사람의 위와 소장을 통과하여 장내에 높은 농도로 점착할 수 있을 것으로 생각되었다.It was thought that the Lactobacillus plantarum PEMO 08 of the present invention could stick to high concentrations in the intestine through the human stomach and small intestine.
<2-2> <2-2> 시험균과Test bacteria and 병원성균 동시 부착에 따른 Due to simultaneous attachment of pathogenic bacteria 부착능Adhesion 비교 compare
시험에 사용된 병원성균주로는 살모넬라균(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus) 2종으로 한국미생물보존협회에서 분양받아 사용하였다. 본 발명의 락토바실러스 플란타룸 피엠오08와 각각의 병원성균을 동량으로 혼합하고 Caco-2 세포 단일층이 형성된 각 웰에 혼합액을 넣어 120분간 반응시켰다. 대조군으로는 락토바실러스 플란타룸 피엠오08 대신 MEM 배지만을 첨가한 것으로 하였다. 반응 후 상층액을 제거하고 Caco-2 세포를 PBS로 2회 세척하여 부착되지 않은 시험균과 병원성균을 제거하였다. Caco-2 세포에 부착된 시험균과 병원성균의 생균수를 측정하기 위해 0.2% Trypsin-EDTA를 가하여 균을 회수하고 각 선택배지를 이용하여 생균수를 측정하였다. The pathogenic strains used for the test were Salmonella typhimurium and Staphylococcus aureus, which were used by the Korea Society for Conservation of Microorganisms. The Lactobacillus plantarum PEMO 08 of the present invention and each pathogenic bacterium were mixed in the same amount, and the mixed solution was added to each well in which a Caco-2 cell monolayer was formed and allowed to react for 120 minutes. As a control, only MEM medium was added instead of Lactobacillus plantarum POM08. After the reaction, the supernatant was removed and Caco-2 cells were washed twice with PBS to remove unattached test and pathogens. In order to measure the viable count of test and pathogenic bacteria attached to Caco-2 cells, 0.2% Trypsin-EDTA was added to recover the bacteria and the viable count was measured using each selective medium.
그 결과, 도 3에서 보는 바와 같이 락토바실러스 플란타룸 피엠오08(KFCC- 11028)은 병원성균과 동시 배양 시에도 우수한 장 부착능이 있음을 확인하였고, 병원성균이 장 세포와 결합하는 것을 억제함을 알 수 있었다.As a result, as shown in Figure 3 Lactobacillus plantarum POM 08 (KFCC-11028) was confirmed to have excellent intestinal adhesion even when co-culture with pathogenic bacteria, inhibiting the binding of pathogenic bacteria to intestinal cells And it was found.
<< 실시예Example 3> 3>
락토바실러스Lactobacillus 플란타룸Planta Room 피엠오08의PM08 병원성균에 대한 항균활성 조사 Investigation of antimicrobial activity against pathogenic bacteria
프로바이오틱스 유산균들은 유산의 생성을 통해 주변의 pH를 낮춤으로써 다른 미생물들이 성장하는 것을 억제할 뿐 아니라 균주에 따라 박테리오신과 같은 항균물질을 생산하는 것으로 알려져 있다. 따라서 본 발명의 유산균 락토바실러스 플란타룸 피엠오08(KFCC-11028)의 항균력을 조사하였다.Probiotics lactic acid bacteria are known to produce antibacterial substances such as bacteriocin depending on the strain, as well as inhibit the growth of other microorganisms by lowering the surrounding pH through the production of lactic acid. Therefore, the antimicrobial activity of the lactic acid bacteria Lactobacillus plantarum POM08 (KFCC-11028) of the present invention was investigated.
시험에 사용된 균주로는 살모넬라균(Salmonella typhimurium), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 대장균(E. coli) 3종으로 한국미생물보존협회에서 분양받아 사용하였다. The strains used for the test were Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus, and E. coli.
실험은 다음의 과정으로 이루어 졌다. 락토바실러스 플란타룸 피엠오08 균주와 비교균주인 락토바실러스 카제이 균주를 각 배양 배지로 37℃, 18시간 배양 후, 젖산균과 병원성 균주를 각각 초기 농도 107cfu/ml이 되게 MRS 배지에 접종한 후 37℃에서 20시간 배양 후 병원성균의 선택배지를 이용하여 균수를 측정하였다. 대조 군으로는 병원성균주만을 MRS 배지에 접종하여 동일 조건으로 배양 후 선택배지에서 균수를 측정 비교하였다.The experiment consisted of the following steps. Lactobacillus plantarum PEMO 08 strain and Lactobacillus casei strain, which is a comparative strain, were incubated at 37 ° C. for 18 hours in each culture medium, and then lactic acid bacteria and pathogenic strains were inoculated in MRS medium to an initial concentration of 10 7 cfu / ml. After incubation at 37 ° C. for 20 hours, the number of bacteria was measured using a selective medium of pathogenic bacteria. As a control group, only pathogenic strains were inoculated in MRS medium and cultured under the same conditions.
그 결과, 표 1에서 보는 바와 같이 락토바실러스 플란타룸피엠오08(KFCC-11028)균주는 락토바실러스 카제이(KCPC-3930) 균주 보다 시험에 사용된 모든 병원성균주에 대해 항균활성이 높은 것으로 확인되었다. As a result, as shown in Table 1, the Lactobacillus plantarumpiom 08 (KFCC-11028) strain was confirmed to have higher antibacterial activity against all pathogenic strains used in the test than the Lactobacillus casei (KCPC-3930) strain. It became.
% = {1-log (시험군)/log(대조군)}x100% = {1-log (test) / log (control)} x100
<< 실시예Example 4> 4>
락토바실러스Lactobacillus 플란타룸Planta Room 피엠오08의PM08 대장암에 대한 항암활성 조사 Investigation of anticancer activity against colorectal cancer
본 연구에 사용된 대장암 세포는 HT-29 세포(KCLB3038)로서 한국 세포주은행(KCLB)에서 분양받아 사용하였다. HT-29 세포는 10% FBS가 함유된 RPMI 1640(Gibco, USA) 배지를 이용하여 5% CO2 존재 하에 37℃에서 배양하였다. HT-29 세포가 105cell/ml이 되도록 분주하여, 격일로 배지를 교환하였으며, 완전하게 단일층이 형성될 때까지 배양하여 실험에 사용하였다.Colorectal cancer cells used in this study were HT-29 cells (KCLB3038) and were used by the Korea Cell Line Bank (KCLB). HT-29 cells were cultured at 37 ° C. in the presence of 5% CO 2 using RPMI 1640 (Gibco, USA) medium containing 10% FBS. HT-29 cells were aliquoted to 10 5 cell / ml, medium was exchanged every other day, and cultured until complete monolayers were used for the experiment.
대장암 세포에 대한 암 세포 억제능을 확인하기 위해 시험균은 원심분리하여 균체를 회수하고 PBS로 2회 세척한 후 무혈청 RPMI 1640으로 재현탁 후 1x107cfu/ml 농도로 희석하여 조제하였다. 준비된 유산균을 HT-29 세포에 각 농도로 분주한 후 24시간 배양한 후 살아있는 세포수를 헤마토싸이토메타 (Hematocytometer)를 이용하여 카운팅하였다. 대조군은 유산균이 첨가되지 않은 무혈청 RPMI-1640 배지만을 첨가하여 사용하였다.In order to confirm the ability of the cancer cell to inhibit the colorectal cancer cells, the test cells were collected by centrifugation, the cells were washed twice with PBS, resuspended in serum-free RPMI 1640 and diluted to a concentration of 1 × 10 7 cfu / ml. The prepared lactic acid bacteria were dispensed into HT-29 cells at each concentration, and then cultured for 24 hours, and the number of living cells was counted using a hematocytometer. As a control, only serum-free RPMI-1640 medium without lactic acid bacteria was added thereto.
암 세포 성장 억제능은 다음과 같이 계산하였다: 암 세포 성장 억제능(%)=[1-(시험군 암 세포 수 /대조군 암 세포 수)]*100 Cancer cell growth inhibitory activity was calculated as follows: Cancer cell growth inhibitory activity (%) = [1- (test cancer cell number / control cancer cell number)] * 100
그 결과, 도 5와 같이 락토바실러스 플란타룸피엠오08(KFCC-11028)은 대장암 세포의 세포 증식을 억제하는 것으로 확인되었고, 비교균주인 락토바실러스 카제이(KCPC-3930) 균주 보다 활성이 더 우수한 것으로 나타났다. 뿐만 아니라 인공 위, 장액 통과 후에도 비교군 대비 항암 활성이 높게 지속됨을 확인 할 수 있었다.As a result, as shown in Fig. 5, Lactobacillus plantarummpeo 08 (KFCC-11028) was confirmed to inhibit the cell proliferation of colorectal cancer cells, it was more active than the comparative strain Lactobacillus casei (KCPC-3930) strain Appeared to be better. In addition, the anticancer activity was maintained higher than that of the control group even after the passage of the artificial stomach and serous fluid.
<< 제조예Manufacturing example 1> 1>
락토바실러스Lactobacillus 플란타룸Planta Room 피엠오08을PM08 이용한 식물성 유산균 음료 제조 Manufacture of Vegetable Lactic Acid Bacteria Beverage
신선초 농축액을 3% 용해한 후 락토바실러스 플란타룸피엠오08(KFCC-11028)를 0.1%(w/w)접종하여 40℃에서 7시간 배양하여 배양액으로 사용하였다. 대조균으로 락토바실러스 카제이균을 상기와 같은 방법으로 배양하여 사용하였다. 각 배양액의 산도, pH, 유산균수를 측정하여 발효능을 확인하였다. After dissolving 3% of fresh vinegar concentrate, inoculated with 0.1% (w / w) of Lactobacillus plantarummpeo 08 (KFCC-11028) and incubated at 40 ° C for 7 hours to use as a culture solution. As a control bacterium, Lactobacillus casei was cultured and used as described above. The fermentation ability was confirmed by measuring the acidity, pH, and lactic acid bacteria count of each culture solution.
그 결과, 표 2에서 보는 바와 같이, 식물성 유산균인 락토바실러스 플란타룸 피엠오08(KFCC-11028)은 동물성 균인 락토바실러스 카제이(KCPC-3930) 보다 야채 발효능이 더 우수한 것으로 확인되어 식물성 유산균 음료 제조에 적합한 균주임을 알 수 있다. 당액을 제조하기 위해 당액 100g 기준 올리고당 8%, 과즙 5%, 젤란검, 향료, 물을 혼합하여 용해하였다. 최종 제품은 배양액 50%, 당액 50%를 혼합하여 제조한 후 5℃에서 보관하였다. As a result, as shown in Table 2, the vegetable lactic acid bacteria Lactobacillus plantarum POM 08 (KFCC-11028) was confirmed that the vegetable fermentation ability is better than the animal bacterium Lactobacillus casei (KCPC-3930), the vegetable lactic acid bacteria It can be seen that the strain is suitable for the production of beverages. In order to prepare a sugar solution, the oligosaccharides based on 100 g of sugar solution 8%, fruit juice 5%, gellan gum, flavoring, water was mixed and dissolved. The final product was prepared by mixing 50% of the culture solution and 50% of the sugar solution, and then stored at 5 ° C.
이상 살펴본 바와 같이, 본 발명은 인공위액 및 장액에서의 내성이 탁월하여 경구 섭취 시 장에 도달하는 능력이 뛰어날 뿐만 아니라 장에서의 부착능이 우수하여 유산균 고유 기능을 적절히 발휘할 수 있어 한국인의 긴 장에 적합한 유산균으로 락토바실러스 플란타룸 피엠오08(KFCC-11028)을 제공한다. 본 발명의 유산균은 병원성균에 대한 항균활성과 대장암에 대한 항암활성을 보유하여 장 건강 증진에 이용할 수 있으며, 야채 발효능이 우수하여 종래의 발효용 유산균을 대체하여 우수한 유산균 발효음료의 제조 등에 유용하게 사용할 수 있다.As described above, the present invention has excellent resistance to artificial gastric juice and intestinal fluids, and is excellent in the ability to reach the intestine upon oral ingestion, as well as excellent adhesion in the intestine, so that the proper function of lactic acid bacteria can be properly exhibited in Korean long intestine. A suitable lactic acid bacterium provides Lactobacillus plantarum PEMO 08 (KFCC-11028). The lactic acid bacteria of the present invention can be used to promote intestinal health by having antimicrobial activity against pathogenic bacteria and anticancer activity against colon cancer, and have excellent vegetable fermentation ability, thereby replacing the conventional lactic acid bacteria for fermentation and producing excellent fermented beverages. It can be useful.
도 1은 락토바실러스 플란타룸 피엠오08의 인공 위액 및 인공 장액에서의 생존율을 나타낸 것이다.Figure 1 shows the survival rate in artificial gastric juice and artificial serous of Lactobacillus plantarum POM08.
도 2는 락토바실러스 플란타룸 피엠오08의 장 부착능을 나타낸 것이다.2 shows the intestinal adhesion of Lactobacillus plantarum POM08.
도 3은 락토바실러스 플란타룸 피엠오08과 병원성균 동시 부착에 따른 유산균 부착능을 나타낸 것이다.Figure 3 shows the lactic acid bacteria adhesion ability according to the simultaneous attachment of Lactobacillus plantarum POM 08 and pathogenic bacteria.
도 4는 락토바실러스 플란타룸 피엠오08과 병원성균 동시 부착에 따른 병원성균 부착능을 나타낸 것이다.Figure 4 shows the adhesion of pathogenic bacteria according to the simultaneous attachment of Lactobacillus plantarum POM08 and pathogenic bacteria.
도 5는 락토바실러스 플란타룸 피엠오08의 대장암 세포 성장 억제능을 나타낸 것이다.Figure 5 shows the ability of Lactobacillus plantarum POM08 to inhibit the growth of colorectal cancer cells.
Claims (10)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020090130699A KR101398249B1 (en) | 2009-12-24 | 2009-12-24 | Lactobacillus plantarum PMO08 having anticancer or antibacterial activity and method for preparing fermented product by lactic acid bacteria using vegetable ingredients |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020090130699A KR101398249B1 (en) | 2009-12-24 | 2009-12-24 | Lactobacillus plantarum PMO08 having anticancer or antibacterial activity and method for preparing fermented product by lactic acid bacteria using vegetable ingredients |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20110073897A true KR20110073897A (en) | 2011-06-30 |
| KR101398249B1 KR101398249B1 (en) | 2014-05-23 |
Family
ID=44404358
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020090130699A KR101398249B1 (en) | 2009-12-24 | 2009-12-24 | Lactobacillus plantarum PMO08 having anticancer or antibacterial activity and method for preparing fermented product by lactic acid bacteria using vegetable ingredients |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101398249B1 (en) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101368460B1 (en) * | 2012-03-19 | 2014-03-12 | 신영수 | Composition for curing a hangover and it's making method |
| KR101404285B1 (en) * | 2011-08-08 | 2014-06-05 | 주식회사 풀무원 | Composition for preventing, treating or improving gastrointestinal disease comprising plant originated lactic acid bacteria, Lactobacillus plantarum PMO08 as an active ingredient |
| KR101472190B1 (en) * | 2012-12-24 | 2014-12-12 | 주식회사 풀무원 | Composition for preventing, treating or improving constipation comprising plant originated tyndalized lactic acid bacteria, Lactobacillus plantarum PMO08 dead cell as an active ingredient |
| CN108853478A (en) * | 2018-07-05 | 2018-11-23 | 新疆天健禾牧生物技术有限公司 | A kind of anthocyanidin complex tablet that colon cancer and/or carcinoma of the rectum immunotherapeutic effects can be improved |
| WO2019139229A1 (en) | 2018-01-09 | 2019-07-18 | Cell Biotech Co., Ltd. | Microorganism for delivering drug for treatment of gastrointestinal disease, which expresses and secretes p8 protein, and pharmaceutical composition for preventing or treating gastrointestinal disease, which includes the same |
| KR20190096130A (en) * | 2018-02-08 | 2019-08-19 | 제주대학교 산학협력단 | Composition for antioxidant comprising golden kiwi fruit lactic acid bacteria fermentation product as effective component |
| KR20210029535A (en) * | 2019-09-06 | 2021-03-16 | 주식회사 건강을 지키는 사람들 | Food composition comprising fermented pear and Oenanthe javanica for immunity enhancement and method for preparing the same |
| KR20220028943A (en) * | 2020-08-31 | 2022-03-08 | 주식회사 리비옴 | Lactobacillus plantarum microorganism with anticancer activity, composition comprising the same and method for preventing or treating cancer |
| CN116463264A (en) * | 2023-04-21 | 2023-07-21 | 四川大学 | Lactobacillus plantarum with colon cancer cell growth inhibition effect and application thereof |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102315134B1 (en) * | 2019-11-25 | 2021-10-20 | (주) 바이텍 | Fermented kiwi powder for improving bowel function and method of preparing the same |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100264361B1 (en) * | 1998-04-03 | 2000-08-16 | 남승우 | Lactobacillus plantarum PMO08 (KFCC-11028) with cholesterol lowering ability |
| KR20100063459A (en) * | 2008-12-03 | 2010-06-11 | (주)풀무원홀딩스 | Method of producing lactic acid fermented green juice having improved antioxidant function and highly concentrated polyphenol |
-
2009
- 2009-12-24 KR KR1020090130699A patent/KR101398249B1/en active IP Right Grant
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101404285B1 (en) * | 2011-08-08 | 2014-06-05 | 주식회사 풀무원 | Composition for preventing, treating or improving gastrointestinal disease comprising plant originated lactic acid bacteria, Lactobacillus plantarum PMO08 as an active ingredient |
| KR101368460B1 (en) * | 2012-03-19 | 2014-03-12 | 신영수 | Composition for curing a hangover and it's making method |
| KR101472190B1 (en) * | 2012-12-24 | 2014-12-12 | 주식회사 풀무원 | Composition for preventing, treating or improving constipation comprising plant originated tyndalized lactic acid bacteria, Lactobacillus plantarum PMO08 dead cell as an active ingredient |
| WO2019139229A1 (en) | 2018-01-09 | 2019-07-18 | Cell Biotech Co., Ltd. | Microorganism for delivering drug for treatment of gastrointestinal disease, which expresses and secretes p8 protein, and pharmaceutical composition for preventing or treating gastrointestinal disease, which includes the same |
| US11298385B2 (en) | 2018-01-09 | 2022-04-12 | Cell Biotech Co., Ltd. | Microorganism for delivering drug for treatment of gastrointestinal disease, which expresses and secretes P8 protein, and pharmaceutical composition for preventing or treating gastrointestinal disease, which includes the same |
| KR20190096130A (en) * | 2018-02-08 | 2019-08-19 | 제주대학교 산학협력단 | Composition for antioxidant comprising golden kiwi fruit lactic acid bacteria fermentation product as effective component |
| CN108853478A (en) * | 2018-07-05 | 2018-11-23 | 新疆天健禾牧生物技术有限公司 | A kind of anthocyanidin complex tablet that colon cancer and/or carcinoma of the rectum immunotherapeutic effects can be improved |
| KR20210029535A (en) * | 2019-09-06 | 2021-03-16 | 주식회사 건강을 지키는 사람들 | Food composition comprising fermented pear and Oenanthe javanica for immunity enhancement and method for preparing the same |
| KR20220028943A (en) * | 2020-08-31 | 2022-03-08 | 주식회사 리비옴 | Lactobacillus plantarum microorganism with anticancer activity, composition comprising the same and method for preventing or treating cancer |
| CN116463264A (en) * | 2023-04-21 | 2023-07-21 | 四川大学 | Lactobacillus plantarum with colon cancer cell growth inhibition effect and application thereof |
| CN116463264B (en) * | 2023-04-21 | 2024-02-06 | 四川大学 | Lactobacillus plantarum with colon cancer cell growth inhibition effect and application thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR101398249B1 (en) | 2014-05-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101398249B1 (en) | Lactobacillus plantarum PMO08 having anticancer or antibacterial activity and method for preparing fermented product by lactic acid bacteria using vegetable ingredients | |
| KR101287120B1 (en) | Composition comprising Lactobacillus plantarum DSR CK10 or Lactobacillus plantarum DSR M2 as an effective ingredient for treatment of cancer | |
| JP2019069963A (en) | Novel bacillus velezensis cjbv and antimicrobial composition containing the same | |
| KR102028744B1 (en) | Lactobacillus plantarum HY7717 strain having immune-enhancing activity, antioxidative activity and digestive fluid resistance and use thereof | |
| KR101124660B1 (en) | fermented fruits and vegetables and compositions comprising the same | |
| WO2021177526A1 (en) | Breast milk-derived lactobacillus reuteri lm1071 strain having excellent safety and intestinal adhesiveness, and composition comprising strain or cultured product thereof | |
| KR20080032123A (en) | Novel bacterium belonging to the genus bifidobacterium and utilization of the same | |
| KR101768678B1 (en) | Bifidobacterium longum ssp. infantis BI9988 isolated from Korean longevity village and having high nutraceutical activities | |
| TWI410494B (en) | An inhibitor for production of il-8 and method for producing the inhibitor | |
| KR102155849B1 (en) | Lactobacillus plantarum SRCM102369 strain having antimicrobial activity against pathogenic microorganism and lactic acid production ability and uses thereof | |
| KR101595534B1 (en) | Method for manufacturing fermented milk | |
| KR101109744B1 (en) | A Polysaccharide producing Lactobacillus paracasei and a use thereof | |
| KR102424598B1 (en) | Lactobacillus pentosus OKBL-L.PE 1 strain having antioxidant activity, anti-inflammatory activity, skin whitening activity, antimicrobial activity against pathogenic microorganism and anti-thrombotic activity and uses thereof | |
| KR101839372B1 (en) | Bacillus subtilis SCGB 634 strain having acid-resistance activity, bile acid-resistance activity, antioxidant activity and antimicrobial activity and not producing biogenic amine and secreting protease, cellulase and amylase and uses thereof | |
| KR101884634B1 (en) | Lactobacillus fermented drink mixture having weight control effect | |
| KR101472190B1 (en) | Composition for preventing, treating or improving constipation comprising plant originated tyndalized lactic acid bacteria, Lactobacillus plantarum PMO08 dead cell as an active ingredient | |
| KR102230517B1 (en) | Lactobacillus salivarius having anticariogenic activities and composition comprising the same | |
| KR101473421B1 (en) | Composition for improving irritable bowel syndrome | |
| KR100865075B1 (en) | Novel probiotic strain Lactobacillus sp. SM1 showes high cell adherence | |
| KR20170120264A (en) | Fermented chestnut puree of probiotic lactic acid bacteria and foods composition, medicinal composition including the same | |
| KR101909927B1 (en) | Probiotics Comprising Yeast From Kefir | |
| KR102511656B1 (en) | Lactobacillus plantarum OKBL-L.PL 1 strain having anti-inflammatory activity, skin whitening activity, antimicrobial activity against pathogenic microorganism and anti-thrombotic activity and uses thereof | |
| KR101779719B1 (en) | Novel Lactobacillus kefiranofaciens DN1 and composition for treating or preventing constipation comprising the same | |
| KR102294456B1 (en) | Infant and child origin lactic acid bacteria Lactobacillus rhamnosus MG4502 and composition comprising the lactic acid bacteria for enhancing intestine activity, anti-oxidant and anti-obesity | |
| JP6921350B1 (en) | New lactic acid bacteria belonging to Lactobacillus plantarum isolated from Yaezakura flowers and their utilization |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20170425 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20180410 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20190416 Year of fee payment: 6 |