KR20110036332A - Herb medicine extract having anti-obesity activity and manufacturing method thereof - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 지방세포로의 분화억제 및 지방축적억제 활성을 갖는 생약 추출물과 당 성분이 제거된 분획물의 비만질환 예방 및 치료를 위한 약학조성물 또는 건강기능성 식품에 관한 것이다.The present invention relates to a pharmaceutical composition or a health functional food for preventing and treating obesity diseases of herbal extracts and sugar fractions having differentiation and fat accumulation inhibitory activity to adipocytes.
사삼(沙蔘)은 잔대(Adenophora triphylla var. japonica Hara) 또는 기타 동속식물 (초롱꽃과 Campanulaceae)의 뿌리이다. 이 약은 제니 또는 딱주라고도하며 한국, 일본, 중국, 대만 등지에 널리 분포하며, 우리나라에서는 7 ~ 9 월경 전국 각지의 산과 들에서 자생하는 것으로 알려져 있다. 한방에서는 보중(補中), 소종 (消腫), 진해 (鎭咳), 거담 (祛痰), 해열 (解熱), 강장 (强壯), 배농제 (排膿劑)로 이용되어 왔으며, 민간에서는 기관지염이나 복통, 기침 등에 거담, 건위 강장약으로 사용하였다. 성분연구로는 pyrrolidine 및 piperidine alkaloid (homonojirimycin 유도체)와 triterpenoid 계열 성분이 보고되었으며, homonojirimycin 유도체들은 α-glucosidase 및 α-galactosidase에 강한 저해 작용을 보고하였다 (Konno, C., Planta Med ., 42, pp268-274, 1981; Asano, N., Phytochemistry, 53, pp379-382, 2000; Ikeda, K., Carbohydrate Res., 323, pp73-80, 2000). 또한, 사삼의 증류수 추출물은 항염증 및 천식 억제 효과가 보고되었고 에탄올 추출물은 항돌연변이, 항종양 및 항산화 효과 등에 대한 연구가 이루어져 왔다 (Roh, S. S., Mediators Inflamm ., 2008, pp1-11, 2008; Ham, Y. A., Korean Soc . Food Sci . Nutr ., 38, pp274-279, 2009; Ham, Y. A., J. Korean Soc . Food Sci . Nutr ., 38, pp25-31, 2009).Four ginsengAdenophora triphylla var.japonica Hara) or other plant of the same genus (Campanulaceae Campanulaceae). This drug is also known as Jenny or Cheju. It is widely distributed in Korea, Japan, China, Taiwan, etc., and is known to grow wild in mountains in Korea from July to September. In Chinese medicine, it has been used as bojung, sojong, Jinhae, expectorant, antipyretic, tonic, and drainage. It was used as an expectorant or bronchial tonic for bronchitis, abdominal pain and cough. Pyrrolidine and piperidine alkaloids (homonojirimycin derivatives) and triterpenoids were reported as component studies, and homonojirimycin derivatives reported strong inhibitory effects on α-glucosidase and α-galactosidase (Konno, C.,Planta Med .,42, pp268-274, 1981; Asano, N.,Phytochemistry,53, pp 379-382, 2000; Ikeda, K.,Carbohydrate Res.,323, pp 73-80, 2000). In addition, anti-inflammatory and asthma inhibitory effects have been reported for distilled water extract of Samsam and ethanol extract has been studied for antimutation, antitumor and antioxidant effects (Roh, S. S.,Mediators Inflamm .,2008, pp 1-11, 2008; Ham, Y. A.,Korean Soc . Food Sci . Nutr .,38, pp274-279, 2009; Ham, Y. A., J.Korean Soc . Food Sci . Nutr .,38, pp 25-31, 2009).
비만은 에너지 섭취와 소비의 불균형으로 발생하는 질병으로, 체내에 지방이 과다하게 축적되어 있는 상태를 말하고 원인으로는 유전적 소인과 환경인자, 불규칙적인 식사의 지속과 스트레스의 가중 등으로 발병된다고 밝혀지고 있다. 비만이 발생된 경우에는 체내의 물질대사 이상뿐 아니라 지방조직으로 대식세포가 침투하여 염증반응을 일으키고 지방세포 자체가 염증성 사이토카인과 여러 급성기 단백질들의 생산자가 되어 비만이 있을 때는 TNF-α, leptin, IL-6, adiponectin, resistin 등의 아디포사이토 카인이 증가될수 있다 (Trayhurn P., Br J Nutr ., 92, pp347-355, 2004; Wellen KE., J clin Inves .t, 115, pp1111-1119, 2005). 비만은 소아비만을 시작으로 성인비만으로 이어지고, 성인이 된 후에 발병하는 대사증후인 복부비만, 이상지질대사, 혈압상승에 따른 심혈관계 질환 및 인슐린저항성에 따른 당뇨병 유발할 수 있다 (Garantoni M., Association Medica Sabin . Metabolism, 5, pp535-540, 1998). Obesity is a disease caused by an imbalance between energy intake and consumption, which is caused by excessive accumulation of fat in the body, and is caused by genetic predisposition, environmental factors, and irregular dietary continuity and stress. ought. When obesity occurs, macrophages penetrate into fat tissue as well as metabolic abnormalities in the body, causing inflammatory reactions, and fat cells themselves become producers of inflammatory cytokines and various acute phase proteins, and when obesity occurs, TNF-α, leptin, Adipocytokines such as IL-6, adiponectin, and resistin may be increased (Trayhurn P., Br J Nutr . , 92 , pp347-355, 2004; Wellen KE., J clin Inves .t, 115, pp1111-1119, 2005 ). Obesity can lead to adult obesity, beginning with childhood obesity, and can lead to diabetes, abdominal obesity, abnormal lipid metabolism, cardiovascular disease caused by elevated blood pressure, and insulin resistance (Garantoni M., Association). Medica Sabin . Metabolism , 5 , pp 535-540, 1998).
현재 시판중인 대표적인 비만치료제는 장내의 지방분해효소인 lipase의 억제로 섭취한 지방의 소화와 흡수를 억제하는 로슈사의 전문의약품 '제니칼'과 중추신 경계에 작용하여 신경말단에서 serotonin과 noradrenaline의 재흡수를 억제하여 포만감을 항진시키고 식욕을 조절하는 작용을 하는 애보트사의 전문의약품 '리덕틸'이 있다. 그러나 이 치료제들은 지방변, 위장장애, 과민증, 담즙분비장애, 지용성 비타민 흡수억제, 구토, 변비 등의 여러 가지 부작용을 나타내므로 이에 대한 문제가 제기되고 있다. 따라서 본 발명에서는 이러한 합성의약품의 부작용을 최소화하고 예로부터 식용으로 사용되어왔던 천연물 소재를 이용하여 안전성이 확보된 천연물원료 비만치료제 또는 치료보조제를 개발하고자 하였다.Representative anti-obesity drugs currently on the market reactivate the seronin and noradrenaline at nerve endings by acting on the central nervous system and Roche's specialty drug, 'Genical', which inhibits digestion and absorption of ingested fat by inhibiting lipase, an intestinal lipolytic enzyme. There is Abbott's specialty drug 'Reductil' that acts to suppress satiety and promote satiety and regulate appetite. However, these therapies have a number of side effects such as fatty stools, gastrointestinal disorders, hypersensitivity, bile secretion disorders, fat-soluble vitamin absorption inhibition, vomiting, constipation, and so on. Therefore, the present invention aims to minimize the side effects of such synthetic drugs and to develop a natural raw material obesity treatment or therapeutic aid using natural materials that have been used for food since ancient times.
현대성 비만의 원인은 스트레스성에 의한 영양과잉섭취를 들 수 있다. 비만은 지방의 과잉섭취 또는 당질의 과잉섭취에 의해 발생하는 질환으로 현대에는 지방의 과잉섭취보다 당질의 과잉섭취로 인한 비만발병률이 높아지고 있다. 탄수화물과잉섭취는 인체 내의 혈당을 상승시키고 높아진 혈당을 낮추기 위한 인슐린의 작용에 의해 지방세포가 자극이 되어 분화가 활발히 진행되어 지방으로 축적되고 이로써 중성지방이 증가하는 현상을 만들어낸다. 따라서 인슐린의 작용은 혈당을 낮춤으로서 지방세포의 활성화를 촉진시키는 역할을 하므로 지방량을 증가시키는 작용을 하게 된다. The cause of modern obesity is the overnourishment caused by stress. Obesity is a disease caused by excessive intake of fat or excessive intake of sugar. In modern times, the incidence of obesity due to excessive intake of sugar is higher than that of fat. Carbohydrate overdose is the stimulation of fat cells by the action of insulin to raise blood sugar and lower the blood sugar in the human body, differentiation progresses actively accumulates into fat, thereby creating a phenomenon that increases triglycerides. Therefore, the action of insulin lowers blood sugar, thereby promoting the activation of fat cells, thereby increasing the amount of fat.
체내에서 혈당은 항상 일정하게 유지되는데, 이 과정에는 췌장의 베타세포와 알파세포에서 각각 분비되는 인슐린과 글루카곤이 관여한다. 체내에 당이 공급되면, 혈당이 상승하고 이때 분비된 인슐린은 간, 근육, 지방세포 등의 말초조직에 에너지원으로 사용할 수 있게 공급하고, 또한 간에 포도당을 글리코겐으로 저장시켜 혈당을 조절한다. 이런 문제들 때문에, 많은 연구자들이 일반적인 에탄올 추출 물과 열수추출물등이 지방세포 (3T3-L1)대사에 미치는 영향을 조사하였다. 3T3-L1 전지방세포는 인슐린과 같은 유도물질의 존재 하에서는 효소활성을 급격히 증가시켜 3T3-L1 전지방세포를 분화시킨다. 열수추출물은 섭씨 100도에서 약재 등을 다리는 방법으로, 약재를 다릴 때 가장 많이 사용하는 방법이라 할 수 있다. 물추출물 상태의 약재들은 이들 방법을 가장 많이 사용하나, 이 방법을 통해서, 약효 성분뿐만 아니라 다양한 당 성분등이 함께 추출되어진다. 이재은 등은 조위승청탕의 알코올 및 열수추출물에 대한 비만세포 대사에 미치는 영향을 조사하는 논문에, 알코올추출물이 전반적으로 열수추출물보다 비만 치료에 큰 효과를 나타낸다고 결론지었다. (대한약침학회지 11(1): 127-141, 2008) 이상민 등이 알코올 추출물과 열수추출물 등 추출방법에 따른 방풍통성산의 지방세포 (3T3-L1)에 미치는 영향에서도 농도별 차이가 확연하게 다른 것을 알 수 있다. (대한약침학회지 11(1): 163-176, 2008) 이는 추출법에 따른 당 함유량이 비만세포에 대한 억제 효과 차이가 있음을 알 수 있다. 따라서 비만을 억제하기 위한 사삼 추출물을 사용함에 있어서, 당 성분을 제거하는 것은 매우 중요한 의미를 갖는다고 말할 수 있다.In the body, blood sugar is always kept constant, which involves insulin and glucagon, which are secreted by the pancreatic beta and alpha cells, respectively. When sugar is supplied to the body, blood sugar rises, and the secreted insulin is supplied to peripheral tissues such as liver, muscle, and fat cells for use as an energy source, and glucose is stored as glycogen in the liver to regulate blood sugar. Because of these problems, many researchers investigated the effects of common ethanol extracts and hot water extracts on fat cell metabolism (3T3-L1). 3T3-L1 cells are rapidly increasing the activity of enzymes in the presence of inducers such as insulin to differentiate 3T3-L1 cells. Hot water extract is a method of bridging the medicine at 100 degrees Celsius, etc., it can be said to be the most commonly used method of medicine. Herbal extracts use the most of these methods, but through this method, not only the active ingredient but also various sugars are extracted together. In a paper investigating the effects of jowiseungcheongtang on mast cell metabolism of alcohol and hot water extracts, it was concluded that alcohol extracts generally have a greater effect on obesity treatment than hot water extracts. (The Journal of Korean Pharmacopuncture Institute on Acupuncture 11 (1): 127-141, 2008) The effects of Sang-Min Lee on the adipocytes (3T3-L1) of windbreakable acid by alcohol extraction method and hot water extract were significantly different. Able to know. (Korean Journal of Pharmacopuncture Institute 11 (1): 163-176, 2008) It can be seen that the sugar content according to the extraction method has a difference in inhibitory effect on mast cells. Therefore, in using ginseng extract for suppressing obesity, it can be said that removing the sugar component has a very important meaning.
따라서 본 발명자 등은 사삼 에탄올 추출물로부터 미분화된 지방세포 내에서 지방의 형성을 억제하는 작용과 비만이 유도된 상태에서 장내지방의 양과 체중을 등을 감소시켜 항비만의 효과를 우수하게 나타내는 추출물을 얻는 방법을 구축하는 것으로, 사삼 추출물의 유효성분은 그대로 유지하면서 비만억제에 비활성 성분으로 작용 될 수 있는 당을 선택적으로 제거하여 비활성 성분이 될 수 있는 당을 제거하지 않은 기존의 사삼 추출물보다 월등히 우수한 사삼 추출방법을 개발 제조함으로 써 본 발명을 완성하였다.Therefore, the present inventors obtain an extract that exhibits an excellent effect of anti-obesity by reducing the amount and weight of intestinal fat in the state of obesity-induced action and inhibiting the formation of fat in undifferentiated adipocytes from Samsam ethanol extract. By constructing the method, ginseng is superior to conventional ginseng extract that does not remove sugar which can be an inactive ingredient by selectively removing sugar which can act as an inactive ingredient for obesity while maintaining the active ingredient of ginseng extract. The present invention was completed by developing and manufacturing an extraction method.
본 발명은 사삼 에탄올 및 에탄올 수용액 추출법으로 재차 추출하는 단계를 포함하는 사삼 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.The present invention is to provide a method for producing ginseng extract comprising the step of extracting again with the extract of ethanol and ethanol aqueous solution.
본 발명은 사삼 추출물중 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물을 포함하는 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.An object of the present invention is to provide a pharmaceutical or food composition for the prevention and treatment of obesity, including ethanol and an aqueous solution of ethanol in Samsam extract.
본 발명의 다른 목적은 사삼 에탄올 및 에탄올수용액 추출물중 당 성분을 제거하는 방법을 포함하는 비만의 예방 및 치료용 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.Another object of the present invention is to provide a composition for the prevention and treatment of obesity, including the method of removing the sugar component in the four ethanol and ethanol aqueous solution extract.
본 발명의 다른 목적은 사삼 에탄올 및 에탄올수용액 추출물중 당 성분을 제거하는 방법을 포함하는 비만의 예방 및 치료용 조성물을 제공하는데 있어서, 반복적이고, 대량화, 및 표준화를 통해, 일반제약 생산의 기반을 제공하는데 그 목적이 있다.Another object of the present invention to provide a composition for the prevention and treatment of obesity, including the method of removing the sugar component in the extract of ethanol and ethanol solution Samsa, iterative, mass, and standardized, through the base of general pharmaceutical production The purpose is to provide.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 사삼 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물을 포함하는 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 제공하는데 있어서, 가장 추출률이 높은 방법을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a medicament or food composition for the prevention and treatment of obesity, including four ginseng ethanol and ethanol aqueous solution extract, the method having the highest extraction rate.
또한, 본 발명은 사삼 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물을 포함하는 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 제공하는데 있어서, 수용성인 당 성분을 제거하여, 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a pharmaceutical or food composition for the prevention and treatment of obesity comprising ethanol and extract of ethanol in Samsam, a method of obtaining a pharmaceutical or food composition for the prevention and treatment of obesity by removing the water-soluble sugar component. To provide.
이와 같은 본 발명을 더욱 상세하게 설명하면 다음과 같다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명에 따른 사삼의 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물은 전구지방세포 (Preadipocyte)가 성숙한 지방세포 (Adipocyte)로 분화해 가는 과정을 억제하여 지방의 형성을 방해하는 효과가 뛰어나다. 3T3-L1인 전구지방세포는 선택적 조건하에서 성장시키면 지방세포로 분화하는 성질을 가지고 있는데, 사삼의 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물과 에탄올 추출물을 XAD-4, XAD-7, XAD-7HP, Diaion HP-20, MCI gel 레진 (resin)들을 이용한 컬럼을 통과한 후 얻어진 분획물들은 이러한 전구지방세포인 3T3-L1 세포가 성숙한 지방세포로 분화되는 것을 억제시키는 효능이 관찰되었다.Ethanol and ethanol aqueous solution extract of ginseng according to the present invention is excellent in inhibiting the process of differentiating proliferative cells (Preadipocyte) into mature adipocytes (Adipocyte) to hinder the formation of fat. Progenitor cells, 3T3-L1, have the property of differentiating into adipocytes when grown under selective conditions. The extracts of ethanol and ethanol aqueous solution and ethanol extracts of four ginseng are XAD-4, XAD-7, XAD-7HP, Diaion HP-20. The fractions obtained after passing through a column using MCI gel resins were observed to inhibit the proliferation of 3T3-L1 cells into mature adipocytes.
따라서 본 발명에 따른 사삼의 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물을 섭취하는 경우 와 사삼의 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물로부터 당 성분을 제거한 추출물을 섭취하는 경우는 전구지방세포가 지방세포로의 분화되는 것을 억제함으로 지방세포 내의 지방형성을 차단하여 체지방의 증가를 효과적으로 막을 수 있다.Therefore, when ingesting the extract of ethanol and ethanol aqueous solution of ginseng in accordance with the present invention and the extract from which the sugar component is removed from the extract of ethanol and ethanol aqueous solution of ginseng is inhibited from the proliferation of fat cells into adipocytes. Blocking fat formation can effectively prevent the increase of body fat.
이하, 본 발명을 상세히 설명하고자 한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명은The present invention
1) 사삼을 세절 및 마쇄하고, 추출 후 바로 사용가능한 탄소수 2의 에탄올 또는 에탄올 수용액으로 추출하고 여과한 후 그 여액을 감압농축하여 그 추출물을 얻는 단계 (단계 1)1) chopped and crushed ginseng, extracted with ethanol or an aqueous ethanol solution of
2) 상기 1 단계에서 얻어진 추출물을 Amberlite XAD-4 레진 (resin)으로 당 을 제거하는 단계 (단계 2)2) removing sugar from the extract obtained in step 1 with Amberlite XAD-4 resin (step 2)
3) 상기 1 단계에서 얻어진 추출물을 Amberlite XAD-7 레진 (resin)으로 당을 제거하는 단계 (단계 3)3) removing the sugar obtained in step 1 with Amberlite XAD-7 resin (step 3)
4) 상기 1 단계에서 얻어진 추출물을 Amberlite XAD-7HP 레진 (resin)으로 당을 제거하는 단계 (단계 4)4) removing the sugar obtained in step 1 with Amberlite XAD-7HP resin (step 4)
5) 상기 1 단계에서 얻어진 추출물을 Diaion HP-20 레진 (resin)으로 당을 제거하는 단계 (단계 5)5) removing sugar from the extract obtained in step 1 with Diaion HP-20 resin (step 5)
6) 상기 1 단계에서 얻어진 추출물을 MCI gel 레진 (resin)으로 당을 제거하는 단계 (단계 6)이며,6) removing the sugar obtained in step 1 with MCI gel resin (resin) (step 6),
이하 실시예에서 자세히 설명되는 바와 같다.As described in detail in the following examples.
이상에서 상술한 바와 같이, 본 발명은 사삼 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것으로서, 당 성분을 제거한 비만예방 및 비만치료용 약제 또는 건강기능식품의 유효성분으로 활용하는 경우, 천연물의 성분이 적용된 것이므로 사용자의 거부감을 없앨 수 있으며, 비만억제에 따른 다른 신체부위 및 장기에 부정적인 영향이 없는 우수한 제품의 제공이 가능하게 된다.As described above, the present invention relates to a composition comprising four ginseng ethanol and an ethanol aqueous solution extract, when used as an active ingredient in obesity prevention and obesity prevention drug or health functional foods from which the sugar component is removed, Since it is applied to eliminate the user's rejection, it is possible to provide an excellent product without negative effects on other body parts and organs according to the obesity suppression.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.Hereinafter, examples and the like will be described in detail to help understand the present invention. However, embodiments according to the present invention can be modified in many different forms, the scope of the invention should not be construed as limited to the following examples. Embodiments of the present invention are provided to more fully describe the present invention to those skilled in the art.
본 발명을 단계별로 상세히 설명하면 다음과 같다.The present invention will be described in detail step by step as follows.
먼저, 단계 1의 사삼을 세절 및 마쇄한 다음 건강 중량(kg)의 1 ~ 100배 량(L) 바람직하게는 5 ~ 15배량의 탄소수 2의 에탄올 및 에탄올 수용액으로 추출하고 여과한 후 그 여액을 감압 농축하여 건강 추출물을 얻는다.First, the three ginseng of step 1 is chopped and crushed, and then extracted with 1 to 100 times the amount (L) of the healthy weight (kg), preferably 5 to 15 times the
제조예 1: 사삼 추출물의 제조Preparation Example 1 Preparation of Samsam Extract
사삼은 건조물로써 세절 및 마쇄하고, 세절 및 마쇄한 사삼 1 kg을 100% 에탄올 7~20 L씩 3회 반복 추출하여 그 추출물을 여과하여 건조한다.The ginseng is chopped and crushed as a dried product, 1 kg of the chopped and crushed ginseng is repeatedly extracted three times with 7-20 L of 100% ethanol, and the extract is filtered and dried.
제조예Production Example 2: 2: 사삼Four 추출물의 제조 Preparation of Extract
사삼 건조물로써 세절 및 마쇄하고, 세절 및 마쇄한 사삼 1 kg을 70% 에탄올수용액 7~20 L씩 3회 반복추출 후 여과하여 건조한다.Cut and crushed as ginseng dry matter, 1 kg of shredded and crushed ginseng is repeatedly extracted three times with 7-20 L of 70% ethanol solution and then filtered and dried.
제조예 3: 사삼 추출물의 제조Preparation Example 3 Preparation of Samsam Extract
사삼 건조물로써 세절 및 마쇄하고, 세절 및 마쇄한 사삼 1 kg을 50% 에탄올수용액 7~20 L씩 3회 반복추출 후 여과하여 건조한다.Cut and crushed as ginseng dry matter, 1 kg of shredded and crushed ginseng is repeatedly extracted three times with 7-20 L of 50% ethanol solution and then filtered and dried.
제조예 4: 사삼 추출물의 제조Preparation Example 4 Preparation of Samsam Extract
사삼 건조물로써 세절 및 마쇄하고, 세절 및 마쇄한 사삼 1 kg을 30% 에탄올수용액 7~20 L씩 3회 반복추출 후 여과하여 건조한다.Cut and crushed as ginseng dry matter, 1 kg of shredded and crushed ginseng is repeatedly extracted three times with 7 ~ 20 L of 30% ethanol solution and filtered and dried.
단계 1에서 얻은 추출물에 대해서, 각 단계에서 제시한 resin을 이용하여 당 성분이 가장 확실하게 제거된 조성물을 얻는다.With respect to the extract obtained in step 1, using the resin suggested in each step, a composition in which the sugar component is most certainly removed is obtained.
제조예 5: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 5 Preparation of Samsam Extract Extracted from Sugar Components
1) Amberlite XAD-4 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-4 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-4 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-4 resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 1에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 1 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-4 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하 여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) 100% ethanol 10-30 bed volume is eluted (to prevent the Amberlite XAD-4 resin from drying out) before the loaded water has run out, and it is concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Obtain a medicinal or food composition.
제조예 6: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 6 Preparation of Samsam Extract with Sugar Components Removed
1) Amberlite XAD-7 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-7 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-7 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-7 resin bed to a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 1에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 1 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-7 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) is poured down (so that the Amberlite XAD-7 resin does not dry out) and it is concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Or a food composition is obtained.
제조예 7: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 7 Preparation of Samsam Extract with Sugar Components Removed
1) Amberlite XAD-7HP 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-7HP resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-7HP 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-7HP resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 1에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 1 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. The water eluing through the column washes away the most polar substances, including sugars.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-7HP 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water comes down, 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) is poured (so that the Amberlite XAD-7HP resin does not dry out) and concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity Or a food composition is obtained.
제조예 8: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 8 Preparation of Samsam Extract with Sugar Components Removed
1) Diaion HP-20 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Diaion HP-20 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Diaion HP-20 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Diaion HP-20 resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 1에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으 로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 1 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Diaion HP-20 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume is eluted (so that Diaion HP-20 resin does not dry out), and it is concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Or a food composition is obtained.
제조예Production Example 9: 9: 당성분이Sugar content 제거된 Removed 사삼Four 추출물의 제조 Preparation of Extract
1) MCI gel 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the MCI gel resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) MCI gel 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen MCI gel resin bed in a column that is at least 50 centimeters (cm) to several meters (m) long.
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 1에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 1 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. The water eluing through the column washes away the most polar substances, including sugars.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (MCI gel 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) before the loaded water comes down (to prevent the MCI gel resin from drying out) and concentrate it under reduced pressure to prevent or treat obesity Obtain the composition.
제조예Production Example 10: 10: 당성분이Sugar content 제거된 Removed 사삼Four 추출물의 제조 Preparation of Extract
1) Amberlite XAD-4 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-4 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-4 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-4 resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 2에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 2 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-4 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume is eluted (so that the Amberlite XAD-4 resin does not dry out) and concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Or a food composition is obtained.
제조예Production Example 11: 11: 당성분이Sugar content 제거된 Removed 사삼Four 추출물의 제조 Preparation of Extract
1) Amberlite XAD-7 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-7 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-7 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-7 resin bed to a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 2에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 2 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-7 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) is poured down (so that the Amberlite XAD-7 resin does not dry out) and it is concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Or a food composition is obtained.
제조예 12: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 12 Preparation of Ginseng Extract with Sugar Components Removed
1) Amberlite XAD-7HP 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-7HP resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-7HP 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-7HP resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 2에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가 장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 2 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar-containing substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, thereby removing it.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-7HP 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water comes down, 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) is poured (so that the Amberlite XAD-7HP resin does not dry out) and concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity Or a food composition is obtained.
제조예 13: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 13 Preparation of Samsam Extract with Sugars
1) Diaion HP-20 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Diaion HP-20 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Diaion HP-20 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Diaion HP-20 resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 2에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 2 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Diaion HP-20 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압 농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) is poured (so that Diaion HP-20 resin does not dry out) and concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity Or a food composition is obtained.
제조예 14: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 14 Preparation of Ginseng Extract with Sugar Components Removed
1) MCI gel 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the MCI gel resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) MCI gel 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen MCI gel resin bed in a column that is at least 50 centimeters (cm) to several meters (m) long.
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 2에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 2 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (MCI gel 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) before the loaded water comes down (to prevent the MCI gel resin from drying out) and concentrate it under reduced pressure to prevent or treat obesity Obtain the composition.
제조예Production Example 15: 15: 당성분이Sugar content 제거된 Removed 사삼Four 추출물의 제조 Preparation of Extract
1) Amberlite XAD-4 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-4 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-4 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-4 resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 3에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 3 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-4 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume is eluted (so that the Amberlite XAD-4 resin does not dry out) and concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Or a food composition is obtained.
제조예Production Example 16: 16: 당성분이Sugar content 제거된 Removed 사삼Four 추출물의 제조 Preparation of Extract
1) Amberlite XAD-7 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-7 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-7 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-7 resin bed to a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 3에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 3 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-7 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) is poured down (so that the Amberlite XAD-7 resin does not dry out) and it is concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Or a food composition is obtained.
제조예Production Example 17: 17: 당성분이Sugar content 제거된 Removed 사삼Four 추출물의 제조 Preparation of Extract
1) Amberlite XAD-7HP 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-7HP resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-7HP 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-7HP resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 3에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 3 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-7HP 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water comes down, 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) is poured (so that the Amberlite XAD-7HP resin does not dry out) and concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity Or a food composition is obtained.
제조예 18: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 18 Preparation of Ginseng Extract with Sugar Components Removed
1) Diaion HP-20 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Diaion HP-20 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Diaion HP-20 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Diaion HP-20 resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 3에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 3 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Diaion HP-20 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume is eluted (so that Diaion HP-20 resin does not dry out), and it is concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Or a food composition is obtained.
제조예 19: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 19 Preparation of Samsam Extract with Sugar Components Removed
1) MCI gel 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the MCI gel resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) MCI gel 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen MCI gel resin bed in a column that is at least 50 centimeters (cm) to several meters (m) long.
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 3에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으 로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 3 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (MCI gel 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) before the loaded water comes down (to prevent the MCI gel resin from drying out) and concentrate it under reduced pressure to prevent or treat obesity Obtain the composition.
제조예 20: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 20 Preparation of Ginseng Extract with Sugar Components Removed
1) Amberlite XAD-4 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-4 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-4 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-4 resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 4에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 4 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-4 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume is eluted (so that the Amberlite XAD-4 resin does not dry out) and concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Or a food composition is obtained.
제조예 21: 당성분이 제거된 사삼 추출물의 제조Preparation Example 21 Preparation of Ginseng Extract with Sugar Components Removed
1) Amberlite XAD-7 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-7 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-7 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-7 resin bed to a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 4에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 4 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-7 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) is poured down (so that the Amberlite XAD-7 resin does not dry out) and it is concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Or a food composition is obtained.
제조예Production Example 22: 22: 당성분이Sugar content 제거된 Removed 사삼Four 추출물의 제조 Preparation of Extract
1) Amberlite XAD-7HP 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Amberlite XAD-7HP resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Amberlite XAD-7HP 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Amberlite XAD-7HP resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 4에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 4 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Amberlite XAD-7HP 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water comes down, 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) is poured (so that the Amberlite XAD-7HP resin does not dry out) and concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity Or a food composition is obtained.
제조예Production Example 23: 23: 당성분이Sugar content 제거된 Removed 사삼Four 추출물의 제조 Preparation of Extract
1) Diaion HP-20 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the Diaion HP-20 resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) Diaion HP-20 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen Diaion HP-20 resin bed into a column of at least 50 centimeters (cm) to several meters (m).
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 4에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가 장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 4 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar-containing substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, thereby removing it.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (Diaion HP-20 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) Before the loaded water is finished, 100% ethanol 10-30 bed volume is eluted (so that Diaion HP-20 resin does not dry out), and it is concentrated under reduced pressure to prevent and treat obesity. Or a food composition is obtained.
제조예Production Example 24: 24: 당성분이Sugar content 제거된 Removed 사삼Four 추출물의 제조 Preparation of Extract
1) MCI gel 레진 베드 (bed)를 30분간 에탄올에 부풀린다. (swelling)1) Inflate the MCI gel resin bed in ethanol for 30 minutes. (swelling)
2) 부풀려진 (swelling) MCI gel 레진 베드를 최소 50 센티미터 (cm)에서 수 미터 (m)에 해당하는 컬럼 (column)에 옮겨 충진한다.2) Fill a swollen MCI gel resin bed in a column that is at least 50 centimeters (cm) to several meters (m) long.
3) 충진되어진 컬럼에 증류수 수∼수십 베드볼륨 (bed volume)의 물을 시간당 수∼수십 리터로 흘려준다.3) The distilled water of several tens of bed volume is poured into the packed column at several tens of liters per hour.
4) 제조예 4에서 얻어진 추출물에 대해서, 물 리터 (liter) 당 수∼수십 그램 (gram) 이 로딩 (loading)될 수 있도록 현탁시킨 후, 컬럼 내부 레진 (resin)으로 흘려보내준다. 그리고, 컬럼을 통해 빠져 나온 (eluing) 물에는 당을 포함한 가장 극성이 높은 물질이 씻겨 나오므로, 이를 제거한다.4) The extract obtained in Preparation Example 4 was suspended to allow loading of several to several tens of grams per liter of water, and then flowed into a resin inside the column. In addition, the most polar substance including sugar is washed out in the water eluing through the column, and thus is removed.
5) 로딩된 물이 다 내려오기 전에, (MCI gel 레진이 마르지 않도록) 100% 에탄올 10∼30 베드볼륨 (bed volume)을 흘려내려 (eluting) 이를 감압농축하여 비만의 예방 및 치료용 의약 또는 식품 조성물을 얻는다.5) 100% ethanol 10-30 bed volume (eluting) before the loaded water comes down (to prevent the MCI gel resin from drying out) and concentrate it under reduced pressure to prevent or treat obesity Obtain the composition.
실시예 1 : 실험동물 세포주 등의 확보Example 1: Securing experimental animal cell lines
마우스의 전구지방 세포주 3T3-L1은 ATCC (American Type Culture Collection)에서 구입하였고, DMEM 배양액, 트립신, FBS (Fetal bovine serum)와 BCS (Bovine calf serum)은 깁코 (GibcoTM, Invitrogen corporation)에서 구입하였다.Mouse bulb fat cell lines 3T3-L1 were purchased from ATCC (American Type Culture Collection), DMEM culture medium, trypsin, FBS (Fetal bovine serum) and BCS (Bovine calf serum) were purchased from Gibco (Gibco TM, Invitrogen corporation) .
실시예Example 2 : 2 : 사삼Four 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물, 에탄올 추출물에서 당을 제거한 Ethanol and aqueous ethanol extract, sugar removed from ethanol extract 분획물들의Fractions 지방세포 분화 억제 작용 확인 Confirmation of fat cell differentiation inhibitory effect
3T3-L1 전지방세포는 10% 혈청과 항생제가 포함된 DMEM 배지를 사용하였으며, 5%의 이산화탄소의 공급과 37℃가 유지되는 배양기에서 배양하였다. 5× 104/ml의 3T3-L1 세포를 24 well plate 에 분주해 세포가 100%로 융합될 때까지 배양하였으며, 지방세포로 분화시키기 위하여 MDI (0.5 mM 3-isobutyl-1-methyxanthine, 1 μM dexamethason, 10 ㎍/ml insulin, Sigma) 칵테일을 처리하였다. 이틀 후에 배지를 교체하고, 인슐린 (Insulin)만을 같은 농도로 처리하였으며, 이틀 후 DMEM 배지에 10% 혈청만 포함된 배양액으로 배지를 교체하여 4일 동안 배양하였다. 분화억제 활성 시험을 위해 MDI 배지 처리 시 사삼 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물과 각각의 당 제거를 위해 사용한 레진 (resin)을 통화시킨 에탄올 분획물들을 농도별로 처리하였다. 총 8일 동안 분화시킨 지방세포를 4% 포름알데하이드 (Formaldehyde) 용액으로 5시간 고정시킨 뒤 인산완충용액 (Phosphate buffered saline, PBS)으로 2번 세척하고, 지방염색용 시약 (oil red O)으로 3~4시간 동안 염색하였다. 염색된 세포를 세척한 후 현미경으로 관찰하였고, 이소프로필알콜(isoprophyl alcohol)을 이용하여 붉게 염색된 부분을 녹여내어 510nm파장에서 흡광도 값을 측정하였다. 3T3-L1 battery cells were used in DMEM medium containing 10% serum and antibiotics, and cultured in an incubator maintained at 37 ° C. with 5% carbon dioxide. 5 × 10 4 / ml of 3T3-L1 cells were aliquoted into 24 well plates and cultured until the cells were 100% fused, and MDI (0.5 mM 3-isobutyl-1-methyxanthine, 1 μM) was used to differentiate into adipocytes. dexamethason, 10 μg / ml insulin, Sigma) cocktail. After two days, the medium was replaced, and only insulin (Insulin) was treated at the same concentration, and after two days, the medium was replaced with a culture medium containing only 10% serum in the DMEM medium, followed by incubation for 4 days. For the differentiation inhibitory activity test, ethanol fractions were treated by extracting Samsam ethanol and ethanol aqueous solution and resin used to remove sugars. Adipocytes differentiated for a total of 8 days were fixed with 4% formaldehyde solution for 5 hours, washed twice with phosphate buffered saline (PBS), and then stained with an oil staining agent (oil red O). Staining for ˜4 hours. After washing the stained cells and observed under a microscope, the red stained portion was dissolved using isopropyl alcohol (isoprophyl alcohol) to measure the absorbance value at 510nm wavelength.
이와 같이 사삼 에탄올 추출물과 사삼 에탄올 수용액 및 사삼 에탄올 추출물을 XAD-4, XAD-7, XAD-7HP, Diaion HP-20, MCI gel 레진 (resin)을 통과한 후 얻은 에탄올 분획물들이 비만세포의 분화를 억제 하는 그래프와 사진은 각각 도2와 도3에 도시하였다.As such, the ethanol fractions obtained after passing the ginseng ethanol extract, the ginseng ethanol aqueous solution, and the ginseng ethanol extract through XAD-4, XAD-7, XAD-7HP, Diaion HP-20, and MCI gel resin were used for differentiation of mast cells. Inhibiting graphs and photographs are shown in FIGS. 2 and 3, respectively.
실시예 3 : C57/BL 마우스의 비만 예방 및 억제 효과Example 3 Anti-obesity and Inhibitory Effects of C57 / BL Mice
체중 18~20g의 6주령 C57/BL 마우스 (듀얼바이오텍에서 구입)를 7 개의 군으로 10마리씩 분배한 후 1군은 정상적인 사료를 공급하였으며, 나머지 6군은 60% 지방을 함유하고 있는 고지방식이사료를 공급하였다. 6주 동안 비만을 유도하면서 1군과 2군은 음용수 (D.W)를 처리하였고, 3군에는 제니칼 (Xenical, 로슈) 6 mg/kg을 4군에는 리덕틸 (Reductil, 애보트) 0.25mg/kg, 5군~7군은 사삼 에탄올 추출물을 XAD-7 레진 (resin)에 통과시켜 얻은 분획물을 농도별로 6주 동안 매일 25 mg/kg, 50 mg/kg, 200 mg/kg의 각각의 농도로 경구투여 하였다. 6주 후 각 군에 대한 체중과 부고환지방량, 내장지방량 및 간조직내의 지방량을 조사하였으며 (표1,2, 도4,5) 같은 날 혈액을 채취하여, 혈 중 총 콜레스테롤양과 중성지방의 양을 측정하였다 (도6). Six-week-old C57 / BL mice weighing 18-20 g (purchased from Dual Biotech) were divided into ten groups of seven animals, and the first group fed normal diet, while the other six groups fed a high-fat diet containing 60% fat. Feed was provided. Induction of obesity for 6 weeks,
[표 1] 사삼 에탄올 추출물을 XAD-7 레진 (resin)에 통과시켜 얻은 분획물을 고지방식이를 하는 마우스에 6주동안 투여후 체중이 억제되는 효과[Table 1] The effect of inhibiting body weight after 6 weeks of administration of the fraction obtained by passing the ginseng ethanol extract through XAD-7 resin (resin) to mice fed a high fat diet
[표 2] 사삼 에탄올 추출물을 XAD-7 레진 (resin)에 통과시켜 얻은 분획물을 고지방식이를 하는 마우스에 6주 동안 투여 후 부고환지방량을 감소시키는 효과[Table 2] The effect of reducing fractions of epididymal fat after 6 weeks of administration of the fraction obtained by passing the ginseng ethanol extract through XAD-7 resin (resin) to high-fat diet mice
상기 표 1과 2, 도 4에서 나타낸 바와 같이 본 발명에서 당을 제거하기 위한 방법으로, 사삼 에탄올 분획물을 XAD-7 레진 (resin)을 이용하여 컬럼을 통해 얻은 분획물을 투여한 군의 경우 50mg/kg과 200mg/kg 농도에서, 비만치료제의 대표적인 약물 리덕틸에 비해 체중억제율과 부고환지방 억제율이 우수하고 제니칼과 비교하였을 때 그 효력이 비슷한 수치로 관찰되는 것으로 보아 본 발명의 추출물이 체지방축적 억제에 따른 복부비만감소 및 체중감소효과가 우수함을 알 수 있다. 또한 도 5를 통해서도 간조직에 지방이 축적되는것을 억제할 수 있는 효력을 확인 할 수 있었다. 도 6을 통해서는 혈액관련 수치 중 총 콜레스테롤 함량이 본 발명 추출액 200mg/kg 농도로 투여된 마우스 군에서 대조군에 비해 감소되는 것을 확인하였으며, 중성지방 (Triglyceride) 수치는 전 농도군에서 대조군과 비교해 현저히 낮은 것을 확인되었다. As shown in Table 1 and 2, Figure 4 as a method for removing the sugar in the present invention, 50 mg / in the case of administering the fraction obtained through the column using a four-sam ethanol fraction XAD-7 resin (resin) At the concentration of kg and 200mg / kg, the weight inhibition rate and epididymal fat suppression rate are superior to the representative drug reductil of obesity treatment agent, and its effect is observed to be comparable to that of Zenical. Abdominal obesity reduction and weight loss effect is excellent. In addition, through Figure 5 it was confirmed that the effect that can inhibit the accumulation of fat in liver tissue. 6, it was confirmed that the total cholesterol content of blood-related values in the mouse group administered at the concentration of 200 mg / kg of the extract of the present invention was reduced compared to the control group, and triglyceride level was significantly higher than the control group in all concentration groups. It was confirmed to be low.
실시예Example 4 : 독성실험 4: Toxicity Test
마우스를 이용하여 사삼 에탄올 추출물을 XAD-7 레진 (resin)에 통과시켜 얻은 에탄올 분획물의 반복독성 시험을 실시하였다. 수컷 C57/BL 마우스를 열 마리씩 7군으로 나누어서 대조군 1군과 실험군 6군으로 분리해 본 발명 추출액을 25 mg/kg, 50 mg/kg, 100 mg/kg, 200 mg/kg, 400 mg/kg, 800 mg/kg 체중의 용량으로 21일간 투여하였고 대조군은 물을 투여하였다. 독성의 징후는 체중의 변화, 혈액분석 및 조직검사를 통해서 21일 후 확인하였다. Repeated toxicity test of the ethanol fraction obtained by passing the ginseng ethanol extract through the XAD-7 resin using a mouse. The male C57 / BL mice were divided into seven groups of ten animals and separated into a control group 1 and an experimental group 6, and the extract of the present invention was 25 mg / kg, 50 mg / kg, 100 mg / kg, 200 mg / kg, 400 mg / kg. , 800 mg / kg body weight for 21 days and the control group was given water. Signs of toxicity were identified after 21 days through body weight changes, hematology and biopsies.
실험결과 사삼의 에탄올 추출물을 XAD-7 레진 (resin)에 통과시켜 얻은 분획물은 전 농도에서 사망현상 및 체중의 유의성 있는 증감, 사료섭취량 조직검사, 혈구 혈청검사 결과 수치에서 큰 유의성 있는 변화를 발견할 수 없었다.Experimental results showed that the fraction obtained by passing the ethanol extract of Samsam in XAD-7 resin showed significant changes in mortality and body weight, feed intake biopsy, and blood cell serum at all concentrations. Could not.
(1) 체중 및 육안 관찰 결과(1) weight and visual observation results
[표 3][Table 3]
(2) 혈액학 검사 결과(2) hematology test result
[표 4][Table 4]
(3) 혈청 생화학 검사 결과(3) serum biochemical test result
[표 5]TABLE 5
(4) 조직검사 결과 : 육안으로 관찰한 결과 신장, 비장, 간, 흉선의 조직에서 별다른 이상이 관찰되지 않았다. (4) Results of histological examination: No abnormalities were observed in the tissues of the kidney, spleen, liver and thymus as a result of visual observation.
도 1은 사삼 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물, 사삼 에탄올 추출물에서 항비만 활성이 다량 함유된 분획물 조제과정을 나타낸 것이다.Figure 1 shows the preparation process of fractions containing a large amount of anti-obesity activity in Samsam ethanol and ethanol aqueous extract, Samsam ethanol extract.
도 2a, 2b는 사삼의 각 에탄올 및 에탄올 수용액 추출물과 에탄올 추출물에서 당을 제거하기 위해 사용된 각각의 레진들을 통과후 얻어진 추출물을 50 /ml의 농도로 전구지방세포에 (3T3-L1) 처리하여 지방세로로의 분화가 억제효과 되는 효과를 나타낸 그래프이다.Figures 2a, 2b is treated with (3T3-L1) to the profat cells at a concentration of 50 / ml of the extract obtained after passing through each of the ethanol and ethanol aqueous solution extract and the resins used to remove the sugar from the ethanol extract of Samsam It is a graph showing the effect of inhibiting the differentiation into fat vertical.
도 3a, 3b는 도 2의 결과인 전구지방세포 (3T3-L1)에서 지방세포로의 분화억제효과를 사진으로 나타낸 것이다.3a and 3b are photographs showing the effect of inhibiting the differentiation of adipocytes from adipocytes (3T3-L1) resulting from Fig. 2 into adipocytes.
도 4a, 4b는 사삼 에탄올 추출물을 XAD-7 레진 (resin)에 통과 시켜 얻은 분획물과 비만치료제 제니칼, 리덕틸이 고지방식이를 섭취한 쥐의 체중과 내장지방량을 감소시키는 효과를 사진으로 나타낸 것으로, 모두 6주 후의 실험 결과이다.Figure 4a, 4b is a photograph showing the effect of reducing the weight and visceral fat of the fraction obtained by passing the four ginseng ethanol extract through XAD-7 resin (resin) and the obesity drug Jenical, Reductil diet high-fat diet rats. All were experimental results after 6 weeks.
도 5는 사삼 에탄올 추출물을 XAD-7 레진 (resin)에 통과 시켜 얻은 분획물과 비만치료제 제니칼이 간조직내의 지방량을 감소시키는 효과를 나타내는 간조직 염색 사진이다.Figure 5 is a liver tissue staining picture showing the effect of reducing the amount of fat in liver and fractions obtained by passing the ginseng ethanol extract through XAD-7 resin (resin).
도 6a, 도6b는 사삼 에탄올 추출물을 XAD-7 레진 (resin)에 통과 시켜 얻은 분획물이 고지방식이를 섭취한 쥐에 6주 동안 처리된 후 혈액 내 총 콜레스테롤 수치와 중성지방수치를 감소시키는 영향을 나타낸 결과도이다.6a and 6b show that the fraction obtained by passing the ginseng ethanol extract through XAD-7 resin was treated for 6 weeks in rats fed high-fat diet and then reduced the total cholesterol and triglyceride levels in the blood. The results are also shown.
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