KR20110006424A

KR20110006424A - 아데포비어 다이피복실 및 아세틸-ｌ-카르니틴을 포함하는 약제학적 조성물

Info

Publication number: KR20110006424A
Application number: KR1020090064054A
Authority: KR
Inventors: 김경수; 박영준; 송현남; 이인숙; 김준우; 김은진; 유기원
Original assignee: 주식회사 셀트리온제약; 주식회사 셀트리온화학연구소
Priority date: 2009-07-14
Filing date: 2009-07-14
Publication date: 2011-01-20

Abstract

본 발명은 신규 복합제인 (a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염 및 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염을 포함하는 HIV 또는 B형 간염 바이러스 감염의 치료를 위한 약제학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 약제학적 조성물은 아데포비어 다이피복실의 복용에 따른 부작용을 감소시키고, 아세틸-L-카르니틴이 미토콘드리아가 지방을 분해하여 에너지를 생산하는 작용을 도움으로써 HIV 및 B형 간염에 대한 치료 효과를 높일 수 있는 장점을 갖는다.

아데포비어 다이피복실, 아세틸-L-카르니틴, HIV, B형 간염

Description

아데포비어 다이피복실 및 아세틸-Ｌ-카르니틴을 포함하는 약제학적 조성물 {Pharmaceutical composition comprising adefovir dipivoxil and acetyl-L-carnitine}

본 발명은 신규 복합제인 아데포비어 다이피복실 및 아세틸-L-카르니틴을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 (a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염 및 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염을 포함하는 HIV 또는 B형 간염 바이러스 감염의 치료를 위한 약제학적 조성물에 관한 것이다.

하기 화학식 (I)로 표시되는 아데포비어 다이피복실(9-[2-[[비스[(피발로일옥시)-메톡시]포스포닐]메톡시]에틸]아데닌)은 뉴클레오타이드 역전사효소 저해제로서, HIV 및 B형 간염(HBV)에 대한 뛰어난 생체 내 항바이러스 활성을 나타내고 있다 (미국특허등록 제5663159호, J. Infect. Dis., 176(2): 406, 1997 및 J. Med. Chem., 37: 1857 ~ 1864, 1994).

아데포비어 다이피복실은 이에 앞서 항바이러스제로 개발되었던 9-(포스포닐메톡시에틸)아데닌(아데포비어; 미국특허등록 제4808716호)의 낮은 경구 흡수율을 개선하기 위해 개발되었다. 아데포비어의 전구약물(prodrug)로 개발된 아데포비어 다이피복실은 HIV 치료용으로 개발되었던 역전사효소 저해제이며, 신장에 독성을 유발하는 문제로 인해 HIV 치료제로의 용도는 중단되었다. 현재는 바이러스 증식이 활발하다는 증거가 있고 혈중 ALT(alanine aminotransferase)나 AST(aspartate aminotransferase)가 증가한 만성 B형 간염 성인 환자에 대한 치료제로 개발되어 사용되고 있다. 아데포비어 다이피복실은 퓨린계 뉴클레오사이드의 일종으로 경구 사용이 가능하며, 다른 뉴클레오사이드 계열들과 같이 사슬형성 종료자(chain terminator) 역할, DNA 중합효소(polymerase) 억제 효과 및 면역체계의 기능 항진 역할이 있어 만성 간염의 진전을 늦추는 작용을 한다. 또한 라미부딘에 대한 내성 HBV 변이종에 대한 억제효과도 있는 것으로 밝혀져 있다.

그러나 아데포비어 다이피복실은 B형 간염환자에게 6 개월 이상 장기 투여시 간세포 내 미토콘드리아 기능 저하로 인해 더욱 간질환이 심화되어지거나 심한 지방간 또는 지방 간염을 일으키는 경우가 발생하는 문제점을 유발하고 있다. 이는 아데포비어 다이피복실의 장기투여로 인한 간세포 내 L-카르니틴의 급격한 결핍으로 인한 결과이며, 이로 인해 간세포 내 미토콘드리아의 기능이 저하되고 그 결과 심한 지방간을 일으켜 ALT 수치의 급격한 상승과 만성피로를 수반하는 락트산 산혈증(lactic acidemia)을 초래하는 등 많은 치료상의 문제점이 나타나고 있다(Curr Opin Infect Dis. 2000 Feb;13(1):5-11).

한편, 하기 화학식 (IV)로 표시되는 L-카르니틴은 1 차성 및 2 차성 카르니틴 결핍증과 허혈성 심질환에 의한 심근대사장애(협심증, 급성심근경색, 만성심부전)의 치료제로 사용되고 있으며, 간헐성 파행증, 만성폐색성폐질환, 알츠하이머, 경증의 우울증, 고콜레스테롤혈증, 유약 X 증후군(Fragile X Syndrome)에서의 과잉행동장애, 만성피로증후군, 부정맥, 알코올성 지방간, 다운증후군, 근이영양증, 정자 운동장애, 에이즈 치료제인 AZT 독성 치료 등에도 효능이 있는 것으로 알려져 있다.

미국특허등록 제6,451,340호 및 대한민국특허등록 제0618663호에는 결정성 아데포비어 다이피복실 및 부형제를 포함하는 배합물에 L-카르니틴 또는 L-카르니틴의 염, 예컨대 L-카르니틴-L-타르트레이트(2:1)를 포함시키면 아데포비어 다이피복실의 분해시 생성되는 피발산이 L-카르니틴을 감소시키는 효과를 감소시킬 수 있다고 제시되어 있다.

그러나 실제로 L-카르니틴 또는 L-카르니틴의 염에 의한 아데포비어 다이피복실의 복용에 따른 약리학적 부작용 감소 효과는 기대한 만큼 높지 않아 보다 탁월한 효과를 가지는 약제의 개발이 절실히 요구되어 왔다.

본 발명자들은 아데포비어 다이피복실의 복용에 따른 약리학적 부작용을 해소하기 위해 예의 연구 검토한 결과, 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염 및 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물이 아데포비어 다이피복실의 복용에 따른 부작용을 현저히 감소시킬 수 있음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서 본 발명의 목적은 (a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염 및 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염을 포함하는 HIV 또는 B형 간염 바이러스 감염의 치료를 위한 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 신규 복합제인 (a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염 및 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염을 포함하는 HIV 또는 B형 간염 바이러스 감염, 특히 만성 B형 간염 바이러스 감염의 치료를 위한 약제학적 조성물에 관한 것이다.

본 명세서에서 아데포비어 다이피복실의 약제학적 허용 가능한 염은 아데포 비어 다이피복실에 산을 첨가하는 방법으로 만들어질 수 있는 약제학적으로 허용되는 모든 염을 포함하며, 이들은 바람직하지 못한 독성이나 부작용이 야기되지 않는다. 의약적으로 허용되는 산부가염을 제조하는 방법은 제약기술 분야에 있어서 잘 알려져 있다. 그러한 염의 예로서 염산염, 브롬화수소산염, 질산염, 황산염, 인산염, 아세트산염, 니코틴산염, 옥살산염, 말산염, 푸마르산염, 락트산염, 타르타르산염, 시트르산염, 말론산염, 글루타르산염, 오로트산염, 만델산염, 살리실산염, 젠티산염, 베실산염, 말레산염, 헤미세바신산염, L-만델산염, 메탄술폰산염, 벤젠술폰산염, 알파케토글루타르산염, 히푸르산염, 크로톤산염 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

바람직하게는 아데포비어 다이피복실의 약제학적 허용 가능한 염으로서 하기 화학식 (II)로 표시되는 아데포비어 다이피복실 말론산염 또는 하기 화학식 (III)으로 표시되는 아데포비어 다이피복실 헤미세바신산염을 사용할 수 있다. 상기 염들은 열과 수분에 대한 안정성과 용해도가 아데포비어 다이피복실보다 크게 향상된 특성을 가지고 있다[참조: 대한민국특허출원 제2009-0051748호 및 대한민국특허출원 제2009-0054247호].

한편, 아세틸-L-카르니틴은 L-카르니틴의 하이드록시기에 아세틸기가 도입된 화합물로 1차적 퇴행성 질환 또는 뇌혈관 질환에 대한 2차적 퇴행성 질환의 치료제로 사용되고 있으며 하기 화학식 (V)로 표시된다.

본 명세서에서 아세틸-L-카르니틴의 약제학적 허용 가능한 염은 아세틸-L-카르니틴에 산을 첨가하는 방법으로 만들어질 수 있는 약제학적으로 허용되는 모든 염을 포함하며, 이들은 바람직하지 못한 독성이나 부작용이 야기되지 않는다. 아세틸-L-카르니틴의 의약적으로 허용되는 산부가염을 제조하는 방법 또한 제약기술 분야에 있어서 잘 알려져 있다. 그러한 염의 예로서 염산염, 브롬화수소산염, 질산염, 황산염, 인산염, 아세트산염, 옥살산염, 아스파트산염, 시트르산염, 말레산염, 푸마르산염, 락트산염, 오로트산염 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 가장 바람직하게는 아세틸-L-카르니틴의 약제학적 허용 가능한 염으로서 아세틸-L- 카르니틴 염산염을 사용할 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 (a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염과 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염 이외에 또 다른 생리활성물질을 함께 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물은 성분 (a) 및 (b)를 각각 단독으로 개개의 단위 투여형태로 또는 혼합하여 1개의 단위 투여형태로 제조할 수 있으며, 이러한 단위 투여형태는 정제, 캡슐제, 과립제, 산제, 유탁액제, 현탁액제, 시럽제 등 여러 형태로 제형화될 수 있다. 상기 여러 형태의 제형은 부형제, 충진제, 증량제, 결합제, 붕해제(disintegrator), 윤활제, 방부제, 항산화제, 등장제(isotonic agent), 완충제, 피막제, 감미제, 용해제, 기제(base), 분산제, 습윤제, 현탁제, 안정제, 착색제, 방향제 등 각 제형에 통상적으로 사용되는 약제학적으로 허용되는 담체(carrier)를 사용하여 공지 기술에 의해 제조될 수 있다.

상기 약제의 제조에 있어서 성분 (a) 및/또는 (b)의 함량은 약제의 형태에 따라 다르지만, 바람직하게는 0.01 내지 100 중량%의 농도이다.

본 발명에서 사용되는 (a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염과 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염의 투여량은 치료받는 사람을 포함한 포유동물의 종류, 투여경로, 체중, 성별, 나이, 질환의 정도, 의사의 판단 등에 따라 넓은 범위에서 다양하게 변화된다. 일반적으로 경구투여의 경우에 성분 (a)는 체중 1 kg당 하루에 활성성분 0.05 내지 0.5 mg이 투여될 수 있고, 성분 (b)는 체중 1 kg당 하루에 활성성분 0.5 내지 50 mg이 투여될 수 있다. 상술한 일일 투여량은 질환의 정도, 의사의 판단 등에 따라 한번에 또는 나누어서 사용될 수 있다. 상기 두 성분의 투여량 비율도 역시 크게 변화될 수 있는데, 일반적으로 (a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염과 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염의 투여량 비율은 활성성분을 기준으로 1:1 내지 1:100의 중량비 범위, 바람직하게는 1:10 내지 1:50의 중량비 범위이다.

본 발명에서 (a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염과 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염은 상기 투여량 각각을 동시에 또는 시간을 달리하여 개별적으로 투여할 수 있다.

본 발명에 따른 (a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염 및 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물은 아데포비어 다이피복실의 복용에 따른 부작용을 감소시키고, 아세틸-L-카르니틴이 미토콘드리아가 지방을 분해하여 에너지를 생산하는 작용을 도움으로써 HIV 및 B형 간염에 대한 치료 효과를 높일 수 있는 장점을 갖는다.

따라서 본 발명에 따른 약제학적 조성물은 HIV 및 B형 간염 바이러스 감염의 치료에 매우 유용한 약물로 사용될 수 있다.

이하, 실시예에 의해 본 발명을 보다 구체적으로 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오직 본 발명을 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국 한되지 않는다는 것은 당업자에게 있어서 자명하다.

실시예 1: 정제 제형

하기에 기재된 조성과 함량으로 정제 제형을 제조하였다.

[제형 A]

아데포비어 다이피복실: 10 mg

아세틸-L-카르니틴 염산염: 236 mg (아세틸-L-카르니틴으로서 200 mg)

미결정 셀룰로오스: 250 mg

저치환도 히드록시프로필셀룰로오스: 80 mg

락토스: 100 mg

경질무수규산: 5 mg

스테아린산 마그네슘: 19 mg

[제형 B]

아데포비어 다이피복실 말론산염: 10 mg (아데포비어 다이피복실로서 8.3 mg)

아세틸-L-카르니틴 염산염: 472 mg (아세틸-L-카르니틴으로서 400 mg)

전분: 40 mg

젤라틴: 20 mg

미결정 셀룰로오스: 56 mg

저치환도 히드록시프로필셀룰로오스: 30 mg

경질무수규산: 5 mg

스테아린산 마그네슘: 17 mg

[제형 C]

아데포비어 다이피복실 헤미세바신산염: 12 mg (아데포비어 다이피복실로서 10 mg)

아세틸-L-카르니틴 염산염: 590 mg (아세틸-L-카르니틴으로서 500 mg)

전분: 30 mg

젤라틴: 10 mg

락토스: 20 mg

미결정 셀룰로오스: 98 mg

저치환도 히드록시프로필셀룰로오스: 30 mg

스테아린산 마그네슘: 10 mg

실시예 2: 캡슐 제형

하기에 기재된 조성과 함량으로 캡슐 제형을 제조하였다.

[제형 A]

아데포비어 다이피복실: 7.5 mg

락토스: 241.5 mg

미결정 셀룰로오스: 15 mg

[제형 B]

아세틸-L-카르니틴 염산염: 354 mg (아세틸-L-카르니틴으로서 300 mg)

락토스: 234 mg

스테아린산 마그네슘: 2 mg

시험예 1: 세포독성 시험

10% FBS(fetal bovine serum), RPMI(Rosewell Park Memorial Institute medium) 및 1% 페니실린/스트렙토마이신(penicillin/streptomycin)을 함유하는 배지를 이용하여, 4 x 10⁴세포/㎖를 함유하는 간(liver) 배양세포 HepG2의 현탁액을 제조하였다. 제조된 현탁액을 세포배양 및 세포실험용 94 well의 각 well에 주입하여 24 시간 동안 배양하였다. 이때 각 샘플 당 3개의 well에 주입 배양하였다 (n=3). 24 시간이 경과한 후 각 well에서 배지를 제거하고 PBS(phosphate buffered saline) 용액으로 세척하였다. 아데포비어 다이피복실을 무혈청 배지(serum free media)에 녹인 용액(5 μg/㎖)을 제조하여 각 well에 주입하고, 37 ℃의 인큐베이터에서 24 시간 동안 다시 배양하였다. 각 well을 PBS 용액으로 세척한 후, 아세틸-L-카르니틴 염산염과 L-카르니틴을 각각 투여하고 37 ℃의 인큐베이터에서 24 시간 동안 다시 배양하였다.

각각의 샘플에 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) 용액을 10 ㎖ 첨가하고 추가로 4 시간 동안 배양한 후, 570 nm에서 ELIZA 분석기를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 대조군(control)은 아데포비어 다이피복실만을 투여하였을 때 측정된 MTT 흡광도 값을 나타내었다. 아세틸-L-카르니틴 염산염과 L-카르니틴에 대해 측정된 결과를 각각 도 1 및 도 2에 나타내었다.

아데포비어 다이피복실만을 투여하고 24 시간 동안 배양한 후 측정된 흡광도의 값을 100%로 하였을 때, 아세틸-L-카르니틴 염산염은 0.3 mM, 0.6 mM 및 1.2 mM의 농도에서 각기 192%, 232% 및 310%로 확인되었다. 같은 방법으로 L-카르니틴은 0.3 mM, 0.6 mM 및 1.2 mM의 농도에서 각기 164%, 158% 및 159%로 확인되었다. 아세틸-L-카르니틴 염산염과 L-카르니틴은 모두 아데포비어 다이피복실의 부작용에 의해 감소된 세포의 수를 크게 회복시키는 것으로 확인되었으나, 아세틸-L-카르니틴 염산염이 L-카르니틴 보다 훨씬 더 우수한 결과를 보여 주었다.

도 1은 시험예 1에서 아데포비어 다이피복실만을 투여하고 24 시간 동안 배양한 후 측정된 MTT 흡광도 값을 100%로 하였을 때, 아세틸-L-카르니틴 염산염을 0.3 mM, 0.6 mM 및 1.2 mM의 농도로 투여하고 얻어진 흡광도 값을 %로 나타낸 도이다.

도 2는 시험예 1에서 아데포비어 다이피복실만을 투여하고 24 시간 동안 배양한 후 측정된 MTT 흡광도 값을 100%로 하였을 때, L-카르니틴을 0.3 mM, 0.6 mM 및 1.2 mM의 농도로 투여하고 얻어진 흡광도 값을 %로 나타낸 도이다.

Claims

(a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염 및 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염을 포함하는 HIV 또는 B형 간염 바이러스 감염의 치료를 위한 약제학적 조성물.
제1항에 있어서, 아데포비어 다이피복실의 약제학적 허용 가능한 염이 염산염, 브롬화수소산염, 질산염, 황산염, 인산염, 아세트산염, 니코틴산염, 옥살산염, 말산염, 푸마르산염, 락트산염, 타르타르산염, 시트르산염, 말론산염, 글루타르산염, 오로트산염, 만델산염, 살리실산염, 젠티산염, 베실산염, 말레산염, 헤미세바신산염, L-만델산염, 메탄술폰산염, 벤젠술폰산염, 알파케토글루타르산염, 히푸르산염 또는 크로톤산염인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제2항에 있어서, 아데포비어 다이피복실의 약제학적 허용 가능한 염이 말론산염인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제2항에 있어서, 아데포비어 다이피복실의 약제학적 허용 가능한 염이 헤미세바신산염인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제1항에 있어서, 아세틸-L-카르니틴의 약제학적 허용 가능한 염이 염산염, 브롬화수소산염, 질산염, 황산염, 인산염, 아세트산염, 옥살산염, 아스파트산염, 시트르산염, 말레산염, 푸마르산염, 락트산염 또는 오로트산염인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제5항에 있어서, 아세틸-L-카르니틴의 약제학적 허용 가능한 염이 염산염인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, (a) 아데포비어 다이피복실 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염 및 (b) 아세틸-L-카르니틴 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염이 활성성분을 기준으로 1:1 내지 1:100의 중량비로 존재하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제7항에 있어서, 중량비가 1:10 내지 1:50인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 만성 B형 간염 바이러스 감염의 치료를 위한 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.