KR20100104144A - Skin whitening composition comprising horse fats and horse placenta extracts encapsulated in water soluble nanoliposome - Google Patents

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KR20100104144A
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이성권
우제욱
최차해
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기미와 가부시키가이샤
최차해
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Abstract

PURPOSE: A composition containing water soluble nano liposome having horse fat and horse placenta extract is provided to enhance stability without skin irritation and to ensure skin whitening effect. CONSTITUTION: A composition for skin whitening comprises a 0.001-10 weight% of nano liposome containing 2-10 weight% of horse fat and 1-5 weight% of horse placenta extract as active ingredients. The horse fat is contained I 2-10 weight% based on total weight. The nano liposome contains emulsifier, cluster dextrin and water soluble solvent. A method for preparing water soluble nano liposome comprises: a step of dissolving horse placenta extract in water soluble solvent; a step of adding cluster dextrin and heating at 50-60°C; a step of gradually adding horse fat and emulsifier; and a step of adding amino acid and stirring at 0~4°C.

Description

마유 및 말태반 추출물이 내포된 수용성 나노리포좀을 포함하는 피부 미백용 조성물{Skin whitening composition comprising horse fats and horse placenta extracts encapsulated in water soluble nanoliposome} Skin whitening composition comprising horse fats and horse placenta extracts encapsulated in water soluble nanoliposome}

본 발명은 마유 및 말태반 추출물이 내포된 수용성 나노리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for skin whitening comprising a water-soluble nanoliposome containing horse oil and placenta extract as an active ingredient.

인간의 피부색은 피부 내부의 멜라닌 색소의 농도 및 분포에 따라 결정된다. 정상 상태에서는 멜라닌의 과다 생성이 일어나지 않지만, 피부가 자외선, 환경 오염, 스트레스 등과 같은 외부 자극이나 호르몬, 염증 유발인자 등과 같은 내적 요인에 대해 반응하면 멜라닌 색소가 과다 생성되고, 정상적으로 피부로부터 배출되지 못하고 피부에 축적되면 색소 침착이 유발된다. 이와 같이, 피부의 색소 침착은 피부의 염증 반응 이후의 체내 호르몬 이상, 유전질환, 및 자외선 조사 등 여러 요인에 의해 발생될 수 있는데, 주된 요인은 멜라닌 색소 합성 이상 및 분포 이상에 의한 것이다.Human skin color is determined by the concentration and distribution of melanin pigments inside the skin. Under normal conditions, melanin overproduction does not occur, but when the skin reacts to external stimuli such as ultraviolet rays, environmental pollution, stress, or internal factors such as hormones or inflammation factors, the melanin is overproduced, and it is not normally released from the skin. Accumulation on the skin causes pigmentation. As such, pigmentation of the skin may be caused by various factors such as hormonal abnormalities in the body after the inflammatory response of the skin, hereditary diseases, and ultraviolet irradiation, and the main factors are due to melanin synthesis abnormalities and distribution abnormalities.

멜라닌의 주요한 기능은 산소 라디칼을 제거하여 이에 의한 손상으로부터 피부를 보호하는 것이다. 그러므로, 멜라닌이 많다는 것은 물리적, 화학적 독성 물질 로부터 피부를 보호하기 위한 효과적인 대응체계를 가지고 있다는 것을 의미한다. 멜라닌은 멜라닌 세포(melanocyte) 내에서 티로신(tyrosine)이 티로시나아제(tyrosinase)의 작용에 의해 도파퀴논(dopaquinone)으로 전환된 후, 효소의 작용 및 자발적인 산화 반응에 의하여 생성된다. 따라서, 멜라닌의 생성을 억제하여 피부 미백을 유지하거나 또는 개선하기 위해 다양한 방법들이 적용되고 있다. 예를 들면, 자외선을 차단하여 멜라닌 생성의 주원인을 제거하기 위해, 광산란제 또는 광차단제를 함유한 화장품 조성물을 이용하거나 티로시나아제의 활성을 위해 필수적으로 요구되는 글루코사민(glucosamine)과 같은 코어 탄수화물의 합성을 저해하여 멜라닌 생성을 억제하고 있다. 또는 코지산(kojic acid)이나 알부틴(arbutin)과 같이 멜라닌 생성에 관여하는 효소인 티로시나아제의 활성을 저해하는 물질을 이용하거나, 하이드로퀴논(hydroquinone)과 같이 멜라닌을 생성하는 세포인 멜라닌 세포에 대해 특이적인 독성을 갖는 물질을 이용하여 멜라닌 세포의 분열을 방해하는 방법이 이용되고 있다. 그 밖에, 생성된 멜라닌을 환원시켜 탈색하는 방법이 있다.The main function of melanin is to remove oxygen radicals and protect the skin from the damage thereby. Therefore, high levels of melanin mean that it has an effective response system to protect the skin from physical and chemical toxic substances. Melanin is produced by the action of enzymes and spontaneous oxidation after tyrosine is converted to dopaquinone by the action of tyrosinase in melanocytes. Therefore, various methods have been applied to inhibit the production of melanin to maintain or improve skin whitening. For example, core carbohydrates such as glucosamine, which are essential for the activity of tyrosinase or for use in cosmetic compositions containing light scattering agents or light blockers, in order to remove the main cause of melanin production by blocking UV rays. It inhibits synthesis and inhibits melanin production. Alternatively, using a substance that inhibits the activity of tyrosinase, an enzyme involved in melanogenesis, such as kojic acid or arbutin, or melanocytes, which are cells that produce melanin, such as hydroquinone. A method of interfering with the division of melanocytes using a substance having a specific toxicity to the has been used. In addition, there is a method of reducing the produced melanin to decolorize.

대표적으로, 천연물에서 수득된 하이드로퀴논(hydroquinone), 코지산(kojic acid), 아스코르브산(ascorbic acid) 및 그 유도체 등이 티로시나아제 활성의 억제에 의한 피부 미백과, 햇볕에 의한 기미, 주근깨 등의 피부 과색소 침착증 개선의 목적으로 연고, 에센스 등의 화장료에 첨가제로 이용되었다. 그러나, 하이드로퀴논은 소정의 미백효과를 발휘하지만, 피부에 대한 자극성이 높아 안전성 문제로 인해 화장료로 사용되지 못하고 있으며, 코지산은 용액 내에서 불안전하여 화장료의 제조공정이 복잡해진다는 단점이 있다. 또한 아스코르브산은 산화하기 쉬워 이를 배 합한 화장료는 변색, 변취되는 등의 문제가 발생이 되어 미백 원료로는 적합하지 않다. 따라서, 멜라닌 색소의 과다 생성을 억제하고, 피부에 대한 독성이 낮으며 안정성이 높은 피부미백용 활성 물질에 대한 요구가 여전히 존재한다. Typically, hydroquinone, kojic acid, ascorbic acid and derivatives thereof obtained from natural products are used for skin whitening by inhibiting tyrosinase activity, blemishes caused by sun, freckles, etc. It was used as an additive in cosmetics such as ointments and essences for the purpose of improving skin hyperpigmentation. However, hydroquinone exhibits a predetermined whitening effect, but due to its high irritation to the skin, it cannot be used as a cosmetic due to safety problems, and kojic acid is unstable in a solution, which complicates the manufacturing process of the cosmetic. In addition, ascorbic acid is easy to oxidize, and cosmetics containing the same may cause discoloration and deodorization, which is not suitable as a whitening raw material. Therefore, there is still a need for an active substance for skin whitening that suppresses the excessive production of melanin pigments, has low toxicity to the skin and high stability.

따라서, 본 발명자들은 높은 미백 활성과 안정성 및 안전성을 갖는 피부 미백 활성 물질을 탐색하여, 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀이 마유 및 말태반 추출물의 변폐현상을 방지하여 안정성을 증진시키고, 세포독성 없이 높은 멜라닌 생성 억제 활성을 갖는다는 것을 발견하고 본 발명을 완성하였다. Therefore, the present inventors search for skin whitening active substances having high whitening activity and stability and safety, and the nanoliposomes containing horse oil and placenta extract prevent the consequent phenomenon of horse oil and placenta extract to enhance stability, and improve the cells. The present invention was found to have high melanogenesis inhibitory activity without toxicity.

본 발명의 목적은 안정성, 안전성 및 피부 미백 활성이 높은 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공하는 것이다. It is an object of the present invention to provide a composition for skin whitening comprising nanoliposomes containing horse oil and placenta extract having high stability, safety and skin whitening activity as an active ingredient.

본 발명의 또 다른 목적은 마유 및 말태반 추출물이 내포된 수용성 나노리포좀을 제조하는 방법을 제공하는 것이다. Still another object of the present invention is to provide a method for preparing a water-soluble nanoliposome containing horse oil and placenta extract.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a composition for skin whitening comprising nanoliposome containing horse oil and placenta extract as an active ingredient.

말태반 추출물은 티로신으로부터 멜라닌 과립 생성을 촉진하는 효소인 티로시나아제의 활성을 저해하는 효과가 있어 멜라닌 색소 형성을 억제함과 동시에 멜라닌 색소를 포함하는 세포의 배출을 촉진하는 작용을 발휘하여 기미의 예방 및 개선에도 효과가 있으며, 색소 침착을 예방하는 작용뿐만 아니라 미백작용도 나타낸다(Mallick S et el., Pigment Cell Res. Feb 18(1), 25-33, 2005). 그러나, 말태반 추출물은 미백 효능은 우수하나 특유의 냄새 및 불안정성으로 인해 제품 생산시 쉽게 변폐되고, 고농도에서 사용시 피부에 자극이 나타나는 단점이 있다. 따라서, 말태반 추출물을 제품화하기 위해서는 안정성을 증가시키고 피부 자극을 감소시켜야 한다. 말태반 추출물의 안정화 및 피부 독성을 감소시키기 위해 말태반 추출물을 리포좀 형태로 캡슐화시킬 수 있다. 나노리포좀은 내포된 유효 성분의 피부 투과를 증가시키며, 세포에 대한 직접적인 효과도 증가시킬 수 있기 때문에 안정성 및 생체이용율을 증가시키기 위해 유용한 제형으로 이용되고 있다. Placenta extract has the effect of inhibiting the activity of tyrosinase, an enzyme that promotes the production of melanin granules from tyrosine, inhibits melanin pigment formation and promotes the release of cells containing melanin pigment. It is effective in prevention and improvement, and shows whitening as well as preventing pigmentation (Mallick S et el., Pigment Cell Res. Feb 18 (1), 25-33, 2005). However, horse placenta extract is excellent in whitening efficacy, but due to its peculiar smell and instability, it is easily transformed during product production, and has a disadvantage in that irritation occurs in the skin when used at high concentrations. Therefore, in order to commercialize horse placenta extract, it is necessary to increase stability and reduce skin irritation. The placenta extract can be encapsulated in liposome form to stabilize the placenta extract and reduce skin toxicity. Nanoliposomes have been used as useful formulations to increase stability and bioavailability because they increase the skin penetration of the active ingredient contained therein and can also increase the direct effect on cells.

마유는 상처 및 화상치료, 피부재생, 항염작용, 아토피부염의 치료에 효과를 갖는 것으로 알려진 올레인산, 리놀레인산, 및 팔미토올레인산과 같은 불포화지방산이 60% 이상 다량 함유된 천연오일로서, 특히 자외선에 손상된 피부를 보호해 주는 효능이 있는 알파리놀렌산이 함유되어 있다고 알려져 있다(Takamura N, Takahashi K, Tanaka H et al. Dietary, but not topical, alpha-linolenic acid suppress UVB-induced skin injury in hairless mice when compared with linoleic acids. Phtochem Phtobiol 2002; 76:657-63). 따라서, 마유를 사용하여 말태반 추출물을 나노리포좀화하면 말태반 추출물의 안정성이 개선되고 염증을 감소시키며, 피부자극도 감소시킬 수 있다. Horse oil is a natural oil containing 60% or more of unsaturated fatty acids, such as oleic acid, linoleic acid, and palmitooleic acid, which are known to be effective in treating wounds and burns, skin regeneration, anti-inflammatory and atopic dermatitis. Is known to contain alpha linolenic acid, which is effective in protecting damaged skin (Takamura N, Takahashi K, Tanaka H et al. Dietary, but not topical, alpha-linolenic acid suppress UVB-induced skin injury in hairless mice when compared with linoleic acids.Phtochem Phtobiol 2002; 76: 657-63). Therefore, nanoliposomes of horse placenta extract using horse oil can improve the stability of horse placenta extract, reduce inflammation, and reduce skin irritation.

본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 제조하기 위해 이용되는 마유 및 말태반 추출물은 본 출원인이 특허출원한 방법에 의해 준비하였다(한국특허출원 공개 제2008-01000313호 및 제2008-0103490호). 구체적으로, 마유에 요소를 첨가하여 형성된 결정을 제거하는 단계, 수득된 여액에 활성탄과 활성백토를 첨가하여 진공 하에 반응시키는 단계, 여과에 의해 활성탄과 활성백토를 제거하는 단계, 수득된 여액을 상온으로 냉각시키는 단계 및 상기 여액에 물을 첨가하고 진공 하에 박막 증발을 수행하는 단계를 포함하는 방법에 의해 정제된 마유를 수득할 수 있다. 상기 방법에 의해 수득된 마유는 색과 냄새가 전혀 없고, 마유의 효능 및 생체흡수율이 높다. 말태반 추출물은 말태반에 파파인과 같은 단백질 분해 효소를 첨가하여 1차 반응시키는 단계, 상기 반응물에 상기 단백질 분해 효소를 추가하여 2차 반응시키는 단계, 및 상기 반응물에 활성탄을 넣고 진공 하에 냄새 및 색깔을 제거하는 단계를 포함하는 방법에 의해 말태반 추출물을 수득할 수 있다. 상기 방법에 의해 수득된 말태반 추출물은 말태반 내의 생리활성 물질의 파괴를 최소화하고 유효성분의 함량을 높다. Horse oil and horse placenta extract used to prepare nanoliposomes containing horse oil and horse placenta extract according to an embodiment of the present invention was prepared by a method filed by the applicant (Korean Patent Application Publication No. 2008-01000313 And 2008-0103490). Specifically, removing the crystals formed by adding urea to horse oil, adding activated carbon and activated clay to the obtained filtrate and reacting under vacuum, removing activated carbon and activated clay by filtration, and the filtrate obtained at room temperature Purified horse oil can be obtained by a process comprising the step of cooling to and adding water to the filtrate and performing thin film evaporation under vacuum. Horse oil obtained by the above method has no color and smell, and horse oil has high efficacy and bioabsorption rate. The horse's placenta extract is subjected to the first reaction by adding a proteolytic enzyme such as papain to the horse's placenta, the second reaction by adding the proteolytic enzyme to the reactant, and adding activated charcoal to the reactant under the odor and color under vacuum. The placenta extract can be obtained by a method comprising the step of removing the. The horse placenta extract obtained by the above method minimizes the destruction of the bioactive substance in the horse placenta and increases the content of the active ingredient.

본 발명의 일 구체예에서, 피부 미백용 조성물에 포함된 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀은 조성물의 총 중량에 대해 0.001 내지 10 중량%로 포함될 수 있고, 보다 바람직하게는 0.01 내지 5 중량%로 포함될 수 있다. 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀의 함량이 조성물의 총 중량에 대해 0.001 중량% 미만이면 피부 미백 효과가 미미하고, 10 중량%를 초과하면 사용량의 증가에 따른 피부 미백 효과의 증가가 미미하다. In one embodiment of the present invention, the nanoliposome containing horse oil and placenta extract contained in the composition for skin whitening may be included in 0.001 to 10% by weight, more preferably 0.01 to 5% by weight relative to the total weight of the composition May be included as a%. When the content of nanoliposome containing horse oil and placenta extract is less than 0.001% by weight relative to the total weight of the composition, the skin whitening effect is insignificant. .

본 발명의 일구체예에서, 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀에서 마유와 말태반 추출물의 함량은 크게 한정되지는 않으나, 바람직하게는 리포좀의 상안정성을 고려하여 미백기능을 갖는 말태반 추출물은 나노리포좀의 총 중량 대비 1 내지 5 중량%일 있고, 항염, 화상, 상처치유, 항아토피 작용이 있는 마유는 리포좀 제조시 리포좀의 상안정성을 고려하여 나노리포좀의 총 중량 대비 2 내지 10 중 량%일 수 있다. In one embodiment of the present invention, horse oil and horse placenta extract containing the horse oil and horse placenta extract content in the nanoliposomes are not limited, but preferably placenta extract having a whitening function in consideration of the phase stability of liposomes 1 to 5% by weight relative to the total weight of silver nanoliposomes, horse oil with anti-inflammatory, burn, wound healing, anti-atopic action is 2 to 10% by weight relative to the total weight of nanoliposomes in consideration of the phase stability of liposomes during liposome preparation May be%.

본 발명의 일 구체예에서, 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀은 유화제, 클러스터 덱스트린 및 친수성 용매를 포함할 수 있다.In one embodiment of the invention, the nanoliposomes containing horse oil and placenta extract may comprise an emulsifier, cluster dextrin and a hydrophilic solvent.

본 발명의 또 다른 구체예에서, 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀은 아미노산을 더 포함하는 수용성 나노리포좀일 수 있다. In another embodiment of the invention, the nanoliposomes containing horse oil and placenta extract may be water-soluble nanoliposomes further comprising amino acids.

마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀의 제조시 아미노산 및 클러스터 덱스트린을 같이 사용함으로써, 나노리포좀을 수용성으로 만들어 수용성 제품에 리포좀을 사용할 수 있게 하고, 또한 상기 나노리포좀이 예상하지 못한 현저한 멜라닌 생성억제 효과를 갖는 것으로 확인하였다. 즉, 본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 내포된 수용성 나노리포좀은 피부 미백 효과를 갖는 말태반 추출물의 함량 대비 효능을 크게 증가시키는 것으로 확인되었다.By using amino acids and cluster dextrins together in the preparation of nanoliposomes containing horse oil and placenta extract, the nanoliposomes are made water-soluble so that liposomes can be used in water-soluble products, and the nanoliposomes also inhibit the unexpected melanin production. It was confirmed to have an effect. That is, the water-soluble nanoliposomes containing horse oil and horse placenta extract according to one embodiment of the present invention were found to greatly increase the efficacy compared to the content of horse placenta extract having a skin whitening effect.

본 발명의 일 구체예에서, 피부 미백용 조성물에서 유효성분으로 사용하는 마유 및 말태반 추출물이 내포된 수용성 나노리포좀은 말태반 추출물을 클러스터 덱스트린을 이용하여 분자 수준에서 포접(Inclusion)시키는 분자캡슐 제형화를 수행하고 형성된 분자캡슐에 유화제를 이용하여 마유와 리포좀화한 후 양이온성고분자인 아미노산을 이용하여 안정성을 더욱 증가시키는 수용성 지질로 전환시키는 방법을 사용하여 제조될 수 있다. In one embodiment of the present invention, the water-soluble nanoliposomes containing horse oil and placenta extract used as active ingredients in the composition for skin whitening are encapsulated at the molecular level using a cluster dextrin, the molecular capsule formulation And liposomes may be formed using an emulsifier in the formed molecular capsule, and then converted into a water-soluble lipid which further increases stability using amino acids which are cationic polymers.

본 발명의 일 구체예에서, 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀에 포함된 친수성 용매는 증류수, 정제수, 탈염수, 및 에탄올 수용액을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. In one embodiment of the present invention, the hydrophilic solvent included in the nanoliposomes containing horse oil and placenta extract includes distilled water, purified water, demineralized water, and ethanol aqueous solution, but is not limited thereto.

본 발명의 일 구체예에서, 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀에 수용성을 부가하는 아미노산은 아르기닌, 알라닌, 페닐알라닌, 라이신, 및 히스티딘으로 구성된 필수아미노산의 군으로부터 선택될 수 있다.In one embodiment of the invention, the amino acid that adds water solubility to the nanoliposomes containing horse oil and placenta extract may be selected from the group of essential amino acids consisting of arginine, alanine, phenylalanine, lysine, and histidine.

본 발명의 일 구체예에서, 나노리포좀의 제조 시 사용되는 유화제는 레시틴일 수 있고, 바람직하게는 대두 레시틴일 수 있다. In one embodiment of the present invention, the emulsifier used in the preparation of the nanoliposomes may be lecithin, preferably soybean lecithin.

본 발명의 일 구체예에 따른 수용성 나노리포좀에서, 아미노산은 리포좀의 물에 대한 용해도를 크게 증가시키며 유상(oil phase)을 수상으로부터 유지, 보호해주는 매우 유용한 재료로 사용되며, 알라닌, 페닐알라닌, 아르기닌 등 모든 필수아미노산 중에서 선택하여 사용할 수 있다.In the water-soluble nanoliposome according to one embodiment of the present invention, the amino acid is used as a very useful material that greatly increases the solubility of the liposome in water and maintains and protects the oil phase from the water phase, such as alanine, phenylalanine, arginine, and the like. Any essential amino acid can be selected and used.

본 발명의 일 구체예에서, 나노리포좀의 형성은 0℃ 내지 4℃의 저온에서 수행하는 것이 바람직하다.In one embodiment of the present invention, the formation of nanoliposomes is preferably carried out at a low temperature of 0 ℃ to 4 ℃.

도 1은 본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀의 층구조 모식도이고, 도 2는 본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀이 정제수에 용해된 상태를 보여주는 사진이다. 1 is a layered schematic diagram of nanoliposomes containing horse oil and placenta extract according to an embodiment of the present invention, Figure 2 is a nano liposome containing horse oil and placenta extract according to an embodiment of the present invention purified water This is a picture showing the dissolved state.

도 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀의 구조는 화학적 결합을 형성한 복합체는 아니며, 말태반 추출물이 클러스터 덱스트린에 포접된 상태로 나노리포좀의 가장 안쪽에 위치하며, 그 다음 껍질은 마유와 레시틴이 아미노산과 물리적 결합을 형성한 층구조를 이루고 있다. 또한, 도 2에서 보면, 본 발명의 나노리포좀은 수용성을 향상시키는 아미노산을 사용하여 수용성을 가짐을 알 수 있다.As shown in Figure 1, the structure of the nanoliposome containing the horse oil and horse placenta extract according to an embodiment of the present invention is not a complex that formed a chemical bond, the nanoliposome in a state that the placenta extract is enclosed in the cluster dextrin It is the innermost layer of, followed by a layered layer of horse oil and lecithin that forms a physical bond with amino acids. In addition, in Figure 2, it can be seen that the nanoliposomes of the present invention has water solubility using amino acids to improve water solubility.

본 발명의 일 구체예에서, 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 포함하는 피부 미백용 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형일 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 일 구체예에 따른 피부 미백용 조성물은 유연화장수(스킨), 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 피부접착용 패취 및 피부접착용 겔 등과 같이 여러 가지 제형의 화장품으로 제조될 수 있다. 본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 포함하는 피부 미백용 조성물은 피부외용연고 등으로도 사용가능하다.In one embodiment of the invention, the skin whitening composition comprising nanoliposomes containing horse oil and placenta extract is from the group consisting of solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps and sprays The formulation may be selected. For example, the composition for skin whitening according to one embodiment of the present invention is a softening longevity (skin), astringent longevity, nourishing longevity, nutrition cream, massage cream, essence, pack, skin adhesive patch and skin adhesive gel, etc. It can be prepared in various formulations of cosmetics. Skin whitening composition comprising nanoliposomes containing horse oil and placenta extract according to an embodiment of the present invention can also be used as an external skin ointment.

또한, 본 발명은 마유와 말태반 추출물을 유화제, 아미노산 및 클러스터 덱스트린과 혼합하여 수용성으로 유화(emulsion)시키는 단계를 포함하는 마유 및 말태반 추출물이 내포된 수용성 나노리포좀을 제조하는 방법을 제공한다.The present invention also provides a method for producing a water-soluble nanoliposome containing horse oil and horse placenta extract comprising the step of mixing the horse oil and horse placenta extract with an emulsifier, amino acids and cluster dextrin to emulsify the water.

본 발명의 일 구체예에서, 마유 및 말태반 추출물이 내포된 수용성 나노리포좀을 제조하는 방법은In one embodiment of the invention, the method for producing a water-soluble nanoliposome containing horse oil and placenta extract

말태반 추출물을 친수성 용매에 용해시키는 단계, Dissolving the placenta extract in a hydrophilic solvent,

상기 용액에 클러스터 덱스트린을 첨가하고 50 내지 60℃까지 가온하는 단계,Adding cluster dextrin to the solution and warming to 50-60 ° C.,

상기 가온된 용액을 0 내지 4℃까지 냉각시키는 단계, Cooling the warmed solution to 0-4 ° C.,

상기 용액에 교반 하에 마유와 유화제를 서서히 첨가하는 단계, 및Slowly adding horse oil and an emulsifier to the solution under stirring, and

아미노산을 첨가하고 0 내지 4℃로 유지하면서 교반하여 수용성 나노리포좀을 형성하는 단계를 포함할 수 있다. Adding amino acids and stirring while maintaining at 0-4 ° C. to form water-soluble nanoliposomes.

본 발명의 일 구체예에서, 수용성 나노리포좀을 제조하는 방법은 형성된 수용성 나노리포좀을 동결건조시키는 단계를 더 포함할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the method for preparing a water-soluble nanoliposome may further comprise lyophilizing the formed water-soluble nanoliposome.

본 발명의 일 구체예에서, 수용성 나노리포좀을 제조하는 방법에서 사용되는 마유 및 말태반 추출물은 본 출원인이 출원한 한국특허출원 공개 제2008-01000313호 및 제2008-0103490호에 기재된 방법에 따라 제조될 수 있다. In one embodiment of the present invention, horse oil and horse placenta extract used in the method for producing a water-soluble nanoliposome is prepared according to the methods described in Korean Patent Application Publication Nos. 2008-01000313 and 2008-0103490 filed by the present applicant Can be.

본 발명의 일 구체예에서, 말태반 추출물 및 클러스터 덱스트린을 포함하는 가온된 용액을 0 내지 4℃까지 냉각시키는 단계는 0.2 내지 0.5℃/분의 냉각 속도로 수행될 수 있다. In one embodiment of the present invention, the step of cooling the warmed solution comprising the placenta extract and the cluster dextrin to 0-4 ° C. may be performed at a cooling rate of 0.2-0.5 ° C./min.

본 발명의 일 구체예에서, 말태반 추출물은 증류수, 정제수 및 탈염수를 포함하나, 이에 한정되지 않는 친수성 용매에 용해될 수 있다. In one embodiment of the present invention, the placenta extract may be dissolved in a hydrophilic solvent, including but not limited to distilled water, purified water and demineralized water.

본 발명의 일 구체예에서, 수용성 나노리포좀의 제조를 위해 사용되는 유화제는 인지질일 수 있고, 아미노산은 아르기긴, 페닐알라닌, 발린, 루이신, 이소루이신, 메티오닌, 쓰레오닌, 라이신, 트립토판 및 히스티딘으로 구성된 군으로부터 선택되는 필수 아미노산일 수 있다.In one embodiment of the invention, the emulsifier used for the preparation of water soluble nanoliposomes may be phospholipids and the amino acids may be arginine, phenylalanine, valine, leucine, isoleucine, methionine, threonine, lysine, tryptophan and It may be an essential amino acid selected from the group consisting of histidine.

본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물을 포함하는 수용성 나노리포좀은 하기와 같이 제조될 수 있다.Water-soluble nanoliposomes comprising horse oil and horse placenta extract according to one embodiment of the present invention may be prepared as follows.

먼저 물(3차 증류수) 1 kg에 말태반 추출분말 10 내지 50 g을 상온에서 완전 용해시킨다. 그 후, 클러스터 덱스트린 50 내지 250g을 넣고 50 내지 60℃에서 혼합시킨 후 4℃까지 냉각속도 0.2 내지 0.5℃/분으로 초정밀 제어냉각을 수행한다. 결정화가 완료되면 팔미토올레인산을 포함한 마유(팔미토올레인산 함유량 8%) 20 내지 100 g과 대두 레시틴 3 내지 4g을 서서히 주입하여 5000 내지 8000 rpm의 속도로 교반한다. 그 후, 아미노산 10 내지 50g을 넣고 4℃를 유지하면서 5000 rpm 이상의 속도로 교반하여 나노리포좀을 제조한다. 이후 사용편의성에 따라 이 액상을 동결건조를 통하여 수용성 분말로 제조하여 사용할 수 있다. First, 10-50 g of placenta extract powder is completely dissolved at room temperature in 1 kg of water (tertiary distilled water). Thereafter, 50 to 250 g of cluster dextrin was added, mixed at 50 to 60 ° C, and ultra-precision controlled cooling was performed at a cooling rate of 0.2 to 0.5 ° C / min to 4 ° C. After the crystallization is completed, 20 to 100 g of horse oil (palmitooleic acid content 8%) containing palmitooleic acid and 3 to 4 g of soy lecithin are slowly injected and stirred at a speed of 5000 to 8000 rpm. Thereafter, 10 to 50 g of amino acid was added thereto and maintained at 4 ° C. to prepare a nanoliposome by stirring at a speed of 5000 rpm or more. after Depending on the ease of use, this liquid can be prepared into a water-soluble powder through lyophilization.

이하 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 단, 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며 본 발명이 이들에 의해 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, an Example is for illustrating this invention and this invention is not limited by these.

본 발명의 피부 미백용 조성물은 마유 및 말태반 추출물을 나노리포좀에 내포시켜 종래 문제가 되었던 마유 및 말태반의 변폐현상을 방지하여 안정성을 증진시키고, 고농도에서 사용하여도 피부자극이 없으며, 멜라닌 합성을 억제하여 우수한 피부 미백 효과를 가져온다. The composition for skin whitening of the present invention contains horse oil and horse placenta extract in nanoliposomes to prevent the constipation of horse oil and placenta, which has been a problem in the past, to improve stability, and there is no skin irritation even at high concentrations, and melanin synthesis. By suppressing it brings an excellent skin whitening effect.

실시예 1. 말태반 추출물의 제조 및 마유의 정제 Example 1 Preparation of Horse Placenta Extract and Purification of Horse Oil

(1) 효소를 이용한 말태반 추출물의 제조(1) Preparation of Horse Placenta Extract Using Enzyme

냉동된 말태반 1.5 kg을 해빙시킨후 민수기를 이용하여 분쇄시켰다. 분쇄된 태반을 교반기에 넣고 핏물이 제거될 때까지 세척한 후 여과하여 탈수시켰다. 탈수된 태반 1.2kg에 파파인 9g 및 증류수 3kg을 첨가하여 60℃에서 5시간 반응시켜 태반을 물에 완전히 용해시켰다. 그 후 완벽한 분해를 위해 파파인 3g을 분해된 태반용액에 더 첨가한 후, 70℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 그 후 뷰렛반응 및 트리클로로 초산반응을 통해 완전한 단백질 가수분해를 확인하고 식품이나 화장품의 원료 에 적합한 색도와 냄새를 위하여 활성화된 활성탄 30g을 넣고 0.2 기압의 진공압 및 70℃의 반응 온도로 교반기에서 30분간 교반하며 색깔과 냄새를 제거하였다. 그 후 상기 용액을 여과하여 활성탄을 제거하였다. 이 때, 1차 여과는 2 μm 필터로, 2차 여과는 0.45 μm 필터로, 3차 여과는 0.2 μm 필터를 사용하여 수행하여 말태반 추출물을 수득하였다. Frozen 1.5 kg of placenta was thawed and ground using a civilian machine. The ground placenta was placed in an agitator, washed until the blood was removed, and then filtered and dehydrated. 9 g of papain and 3 kg of distilled water were added to 1.2 kg of the dehydrated placenta and reacted at 60 ° C. for 5 hours to completely dissolve the placenta in water. Then, 3 g of papain was further added to the decomposed placental solution for complete decomposition, followed by stirring at 70 ° C. for 2 hours. After that, complete protein hydrolysis was confirmed through burette reaction and trichloroacetic acid reaction, and 30 g of activated carbon was added for color and odor suitable for food or cosmetic raw materials, and the mixture was stirred in a stirrer with a vacuum pressure of 0.2 atm and a reaction temperature of 70 ° C. Stir for 30 minutes to remove color and odor. The solution was then filtered to remove activated carbon. At this time, the primary filtration with a 2 μm filter, the secondary filtration with a 0.45 μm filter, the third filtration using a 0.2 μm filter to obtain a placental extract.

(2) 마유의 정제(2) refining horse oil

정제되지 않은 마유 1kg에 대하여 요소 100g을 반응기에 첨가하여 일정한 교반속도로 상온에서 반응시켰다. 반응이 진행되면서 요소 표면이 팽창되는 현상을 관찰한 후 1시간 뒤에 여과를 수행하였다. 수득된 여액에 활성탄과 활성백토를 2: 8 정도의 비율로 혼합하여 50g을 여액에 첨가하고 200mmHg의 진공압, 75℃의 반응 온도로 2시간 반응을 수행하였다. 상기 반응 후에 여과 공정을 통하여 활성탄과 활성백토를 제거하였다. 이에 의해 수득된 정제된 마유는 825g 이었다. 상기 정제된 마유를 상온까지 0.2도/분의 냉각속도와 교반속도 0rpm 즉, 정치결정하에서 냉각시켰다. 이 과정에서 백색 결정체가 석출되었고 상온까지 냉각 후 여과를 수행하였다. 여과후 수득된 고순도로 분리정제된 마유의 탈취를 위하여 여과액에 180g의 물을 넣고 교반시키면서 박막증발을 수행하였다. 박막증발은 60℃, 진공압 0.05기압에서 원액을 0.5L/시의 투입속도로 수행하여 휘발성 냄새 성분과 물을 동시에 완전히 제거시켰다.100 g of urea was added to the reactor for 1 kg of unrefined horse oil and reacted at room temperature at a constant stirring speed. Filtration was performed after 1 hour after observing the phenomenon that the surface of the urea expanded as the reaction proceeded. Activated carbon and activated clay were mixed in the obtained filtrate at a ratio of about 2: 8, and 50 g was added to the filtrate, and the reaction was carried out at a vacuum pressure of 200 mmHg and a reaction temperature of 75 ° C. for 2 hours. After the reaction, activated carbon and activated clay were removed through a filtration process. The purified horse oil thus obtained was 825 g. The purified horse oil was cooled to room temperature under a cooling rate of 0.2 degrees / minute and a stirring speed of 0 rpm, that is, stationary crystals. In this process, white crystals were precipitated and filtered after cooling to room temperature. 180 g of water was added to the filtrate in order to deodorize the horse oil separated and purified to a high purity obtained after filtration, and thin film evaporation was performed while stirring. Thin film evaporation was carried out at a feed rate of 0.5 L / hr at 60 ° C. and 0.05 atm to completely remove volatile odor and water.

실시예 2. 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀의 제조Example 2 Preparation of Nanoliposomes Containing Horse Oil and Placenta Extract

물(3차 증류수) 1 kg에 실시예 1의 방법으로 제조된 말태반 추출분말 10 내지 50 g을 상온에서 완전 용해시켰다. 그 후, 클러스터 덱스트린 50 내지 250g을 넣고 50에서 60℃에서 혼합시킨 후 4℃까지 냉각속도 0.2 내지 0.5℃/분으로 초정밀 제어냉각을 수행하였다. 결정화가 완료되면 팔미토올레인산을 포함하는 마유(팔미토올레인산 함유량 8%) 20 내지 100 g과 대두 레시틴 3 내지 4g을 서서히 주입하면서 5000 내지 8000 rpm의 속도로 교반하였다. 그 후, 아르기닌, 알라닌, 페닐알라닌, 라이신 및 히스티틴으로 구성된 군으로부터 선택된 아미노산 10 내지 50g을 넣고 4 ℃를 유지하면서 5000 rpm 이상의 속도로 교반하여 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 제조하였다. 리포좀이 제조된 후 사용 편의성에 따라 이 액상을 동결건조를 통하여 수용성 분말로 제조하여 사용할 수 있다. 10 to 50 g of placental placenta extract powder prepared by the method of Example 1 was completely dissolved in 1 kg of water (tertiary distilled water) at room temperature. Thereafter, 50 to 250 g of cluster dextrin was added, mixed at 50 to 60 ° C., and ultra-precision controlled cooling was performed at a cooling rate of 0.2 to 0.5 ° C./min to 4 ° C. When crystallization was completed, 20 to 100 g of horse oil (palmitooleic acid content 8%) containing palmitooleic acid and 3 to 4 g of soy lecithin were slowly injected and stirred at a speed of 5000 to 8000 rpm. Thereafter, 10 to 50 g of amino acids selected from the group consisting of arginine, alanine, phenylalanine, lysine and histitin were added and stirred at a speed of 5000 rpm or more while maintaining 4 ° C to prepare nanoliposomes containing horse oil and placenta extract. After liposomes are prepared, this liquid can be prepared into a water-soluble powder through lyophilization according to the convenience of use.

한편, 말태반 추출물을 용해시키는 단계를 제외하고 상기와 같은 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 제조하는 방법을 수행하여, 마유를 포함하는 마유-나노리포좀을 제조하였다. On the other hand, except for the step of dissolving the placenta extract was carried out a method for producing a nanoliposome containing the horse oil and horse placenta extract as described above, to prepare horse oil-nanoliposomes containing horse oil.

실시예 3. 멜라닌 세포에서의 멜라닌 합성 억제 실험Example 3. Melanin synthesis inhibition experiment in melanocytes

C57BL/6 마우스 유래의 색소 세포인 Mel-Ab 멜라닌 세포를 이용하여 실시예 2의 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀(이후, 마유-말태반 추출물 나노리포좀으로 기재함)의 멜라닌 합성 억제 효과, 즉, 미백효과를 관찰하였다. 각각 10, 20, 50 μM의 농도에서 말태반 추출물, 마유-나노리포좀과 실시예 2의 마유-말태반 추출물 나노리포좀의 멜라닌 생성 억제실험을 실시하였다. 멜라닌 합성 억제 실험을 위하여, 37℃, 5% CO2의 조건 하에, 10% 우태아 혈청, 100 nM 12-O-테트라데카노일포르볼(tetradecanoylphorbol)-13-아세테이트 및 1 nM 콜레라 독소(cholera toxin)가 첨가된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media)에서 Mel-Ab 세포를 배양하였다. 배양된 세포를 0.25% 트립신-EDTA로 떼어내고 6-웰 배양접시에 105(세포/웰)의 농도로 세포를 접종하고, 배양 2일차부터 3일 연속으로 테스트 물질인 말태반 추출물, 마유-나노리포좀 및 마유-말태반 추출물 나노리포좀을 0 μM, 10 μM, 20 μM 및 50 μM의 농도로 각각 첨가하여 4일 동안 배양하였다. 상기 배양된 세포를 수집하여 배양액을 제거하고 PBS(phosphate buffered solution)로 세척한 후, 1N 수산화나트륨으로 세포를 처리하여 멜라닌을 녹여내어 400 nm에서 ELISA 판독기로 흡광도를 측정하였다. 또한, 상기 실시예 2의 마유-말태반 추출물 나노리포좀을 첨가하지 않은 세포를 대조군으로 하여 상기 방법과 동일하게 실험하였다. 멜라닌 합성 농도(5 ㎍/㎖ 내지 300 ㎍/㎖)의 표준곡선을 사용하여 멜라닌 생성 억제율을 계산하였고, 그 결과를 하기 표에 표시하였다. Inhibitory effect of melanin synthesis of nanoliposomes containing horse oil and placenta extract of Example 2 (hereinafter referred to as horse oil-placental extract nanoliposomes) using Mel-Ab melanin cells, pigment cells derived from C57BL / 6 mice That is, the whitening effect was observed. Inhibition of melanin production of horse placenta extract, horse oil-nanoliposomes and horse oil-placenta extract nanoliposomes of Example 2 were carried out at concentrations of 10, 20 and 50 μM, respectively. For melanin synthesis inhibition experiment, 10% fetal calf serum, 100 nM 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate and 1 nM cholera toxin under 37 ° C., 5% CO 2 conditions Mel-Ab cells were cultured in Dulbecco's Modified Eagle's Media (DMEM). The cultured cells were detached with 0.25% trypsin-EDTA and seeded with a concentration of 10 5 (cells / well) in a 6-well dish, and the placenta extract, horse oil- Nanoliposomes and horse oil-placental extract nanoliposomes were added at concentrations of 0 μM, 10 μM, 20 μM and 50 μM, respectively, and cultured for 4 days. The cultured cells were collected to remove the culture solution, washed with PBS (phosphate buffered solution), treated with 1N sodium hydroxide to dissolve the melanin, and absorbance was measured at 400 nm with an ELISA reader. In addition, the cells without the horse oil-placental placenta extract nanoliposomes of Example 2 were tested as the control method in the same manner as described above. The inhibition of melanogenesis was calculated using a standard curve of melanin synthesis concentration (5 μg / ml to 300 μg / ml) and the results are shown in the table below.

멜라닌생성억제율 =(C-A)/C × 100 (%) Melanogenesis inhibitory rate = (C-A) / C × 100 (%)

상기 식에서, C는 대조군 시료의 멜라닌 농도(멜라닌 ㎍/단백질 ㎍)이고, A는 테스트 시료의 멜라닌농도 (멜라닌 ㎍/단백질 ㎍)이다.Wherein C is the melanin concentration (melanin μg / protein μg) of the control sample and A is the melanin concentration (melanin μg / protein μg) of the test sample.

표. 마유-말태반 추출물 나노리포좀의 멜라닌 생성억제효과table. Inhibitory Effect of Horse Oil-Placenta Extract Nanoliposomes on Melanin Production

농도density 말태반 추출물
(%)
Placenta Extract
(%)
마유-나노리포좀
(%)
Horse oil-nanoliposomes
(%)
마유-말태반 추출물 나노리포좀(%)Horse oil-Placenta Extract Nanoliposomes (%)
0 μM0 μM 00 00 00 10 μM10 μM 14.2 14.2 00 29.9 29.9 20 μM20 μM 19.919.9 55 45.145.1 50 μM50 μM 43.1 43.1 12.512.5 71.0 71.0

상기 표에 나타난 바와 같이, 마유-말태반 추출물 나노리포좀은 말태반 추출물 단독 성분에 비하여 우수한 멜라닌생성 억제효능을 보여주었다.As shown in the table, horse oil-placental placenta extract nanoliposomes showed an excellent melanogenesis inhibitory effect compared to horse placenta extract alone.

즉, 마유-말태반 추출물 나노리포좀은 10 μM 농도에서 29.9%의 억제효과가 있었다. 특히, 말태반 추출물과 비교하면 같은 농도에서 2.1배에 해당하는 효과를 보여주었으며, 20 μM, 50 μM에서도 각각 2.3배, 1.6배의 효과를 보여 효능이 크게 증가함을 알 수 있었다.That is, horse oil-placental placenta extract nanoliposomes had an inhibitory effect of 29.9% at a concentration of 10 μM. In particular, compared to horse's placenta extract showed the effect corresponding to 2.1-fold at the same concentration, it was found that the effect is greatly increased by 2.3 times, 1.6 times even in 20 μM, 50 μM respectively.

또한, 37℃, 5% CO2의 조건 하에, 10% 우태아 혈청, 100 nM 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트 및 1 nM 콜레라 독소가 첨가된 DMEM에서 배양한 Mel-Ab 멜라닌 세포와 실시예 2에서 제조된 마유-말태반 추출물 나노리포좀으로 처리한 Mel-Ab 멜라닌 세포를 현미경으로 관찰하고, 그 결과를 도 3에 나타내었다. 도 3에서 보는 바와 같이, 일반조건에서 정상적으로 배양한 Mel-Ab 멜라닌 세포의 검은 멜라닌이, 본 발명의 마유-말태반 추출물 나노리포좀으로 처리한 Mel-Ab 멜라닌 세포에서 농도 의존적으로 강하게 감소함이 관찰되었다. 이러한 결과로부터, 마유-말태반 추출물 나노리포좀이 말태반 추출물에 비하여 멜라닌 세포에서 멜라닌 합성을 더욱 더 강하게 억제함을 알 수 있었다.In addition, Mel-Ab melanin incubated in DMEM with 10% fetal bovine serum, 100 nM 12-O-tetradecanoylphorball-13-acetate and 1 nM cholera toxin under 37 ° C. and 5% CO 2 conditions The cells and Mel-Ab melanin cells treated with horse oil-placental extract nanoliposome prepared in Example 2 were observed under a microscope, and the results are shown in FIG. 3. As shown in FIG. 3, it was observed that black melanin of Mel-Ab melanin cells normally cultured under normal conditions strongly decreased concentration-dependently in Mel-Ab melanocytes treated with horse oil-placental placenta extract nanoliposomes of the present invention. It became. From these results, it was found that horse oil-placental extract nanoliposomes inhibit melanin synthesis more strongly in melanocytes than horse placenta extract.

실시예 4. 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀의 안정성 테스트Example 4 Stability Test of Nanoliposomes Containing Horse Oil and Placenta Extracts

마유-말태반 추출물 나노리포좀 (1.1% = 말태반 추출물 함량으로 0.1%)과 말태반 추출물 (0.1%)을 함유한 에센스를 하기의 실시예 9의 방법에 따라 제조한 후, 각각을 상온과 45℃에서 방치하고 시간 경과에 따라 색상의 변화를 관찰하였고, 그 결과를 도 4에 나타내었다. 도 4에서 보는 바와 같이, 총 기간 30일 동안의 관찰 결과 마유-말태반 추출물 나노리포좀은 말태반 추출물과 비교하여 갈변속도가 둔화되어 안정성이 증가하였음을 알 수 있었다.Essences containing horse oil-placental placenta extract nanoliposomes (1.1% = 0.1% placenta extract content) and placenta placenta extract (0.1%) were prepared according to the method of Example 9 below, and then, respectively, at room temperature and 45 ° C. It was left at ℃ and observed the change in color over time, the results are shown in FIG. As shown in FIG. 4, the observation result for a total period of 30 days showed that horse oil-placental placenta extract nanoliposomes have increased stability by slowing browning rate compared to horse placenta extract.

실시예 5. 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀의 피부 자극성 테스트Example 5 Skin Irritation Test of Nanoliposomes Containing Horse Oil and Placenta Extract

마유-말태반 추출물 나노리포좀(1.1% = 말태반 추출물 함량으로 0.1%)과 말태반 추출물(0.1%)을 함유한 에센스를 하기의 실시예 9의 방법에 따라 제조한 후, 20명의 자원자를 대상으로 피부 첩포테스트를 시행하였다. 10명의 마유-말태반 추출물 나노리포좀 적용자는 모두에서 아무런 자극 반응이 없었던 반면, 말태반 추출물 적용자는 10명 중 1명에서 경미한 자극과 홍반현상을 경험하였고 그 결과를 도 5에 나타내었다. 따라서, 본원의 마유-말태반 추출물 나노리포좀은 말태반 추출물과 비교하여 자극이 크게 감소하였음을 알 수 있었다.Essences containing horse oil-placental placenta extract nanoliposomes (1.1% = 0.1% in placenta extract content) and horse placenta extract (0.1%) were prepared according to the method of Example 9 below, and then volunteered for 20 volunteers. The skin patch test was performed. Ten horse oil-placental placenta extract nanoliposome applicators had no irritant response in all, whereas the placenta placenta extract applicator experienced mild irritation and erythema in one of ten patients and the results are shown in FIG. 5. Therefore, it can be seen that the horse oil-placental placenta extract nanoliposomes of the present application had a significant decrease in stimulation compared to the horse placenta extract.

실시예 6. 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 포함하는 유연 화장수(스킨)의 제조Example 6. Preparation of flexible skin lotion (skin) comprising nanoliposomes containing horse oil and placenta extract

통상적인 방법에 따라, 상기 실시예 2의 마유-말태반 추출물 나노리포좀 1 중량%, 글리세롤 3 중량%, 에탄올 5 중량%, 1,3-부틸렌글리콜 2 중량%, 향 미량, 및 정제수 잔량을 혼합하여 유연화장수를 제조하였다.According to a conventional method, 1% by weight of horse oil-placenta extract nanoliposome of Example 2, 3% by weight of glycerol, 5% by weight of ethanol, 2% by weight of 1,3-butylene glycol, and the remaining amount of purified water Mixing cosmetics were prepared by mixing.

실시예 7. 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 포함하는 수렴 화장수의 제조Example 7. Preparation of astringent lotion containing nanoliposomes containing horse oil and horse placenta extract

통상적인 방법에 따라, 상기 실시예 2의 마유-말태반 추출물 나노리포좀 1 중량%, 밀랍 4 중량%, 유동파라핀 4 중량%, 스쿠알렌 4 중량%, 글리세린 3 중량%, 방부제 미량, 향 미량, 및 정제수 잔량을 혼합하여 수렴화장수를 제조하였다.According to a conventional method, 1% by weight of horse oil-placenta extract nanoliposome of Example 2, 4% by weight of beeswax, 4% by weight of liquid paraffin, 4% by weight of squalene, 3% by weight of glycerin, trace amounts of preservatives, and flavors, and The remaining amount of purified water was mixed to prepare astringent cosmetic water.

실시예 8. 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 포함하는 영양 크림의 제조Example 8 Preparation of Nutritional Cream Comprising Nanoliposomes Containing Horse Oil and Placenta Extract

통상적인 방법에 따라, 상기 실시예 2의 마유-말태반 추출물 나노리포좀 1 중량%, 1,3-부틸렌글리콜 6 중량%, 글리세린 4 중량%, 유동파라핀 5 중량%, 스쿠알렌 3 중량%, 폴리솔베이트60 1.5 중량%, 및 정제수 잔량을 혼합하여 영양크림을 제조하였다.According to a conventional method, 1% by weight of horse oil-placenta extract nanoliposome of Example 2, 6% by weight of 1,3-butylene glycol, 4% by weight of glycerin, 5% by weight of liquid paraffin, 3% by weight of squalene, poly A nourishing cream was prepared by mixing 1.5 wt% of Solvate 60 and the remaining amount of purified water.

실시예 9. 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 포함하는 에센스의 제조Example 9 Preparation of Essence Containing Nanoliposomes Containing Horse Oil and Placenta Extract

통상적인 방법에 따라, 상기 실시예 2의 마유-말태반 추출물 나노리포좀 1 중량%, 프로필렌글리콜 2 중량%, 글리세린 4 중량%, 에탄올 7 중량%, 방부제 미량, 향 미량, 및 정제수 잔량을 혼합하여 나노리포좀을 함유하는 에센스를 제조하였다.According to a conventional method, the horse oil-placental placenta extract nanoliposome 1% by weight, propylene glycol 2% by weight, glycerin 4% by weight, ethanol 7% by weight, preservatives, flavor, and purified water balance Essences containing nanoliposomes were prepared.

실시예 10. 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 포함하는 팩의 제조Example 10 Preparation of a Pack Containing Nanoliposomes Containing Horse Oil and Placenta Extract

통상적인 방법에 따라, 상기 실시예 2의 마유-말태반 추출물 나노리포좀 1 중량%, 프로필렌글리콜 6 중량%, 글리세린 4 중량%, 밀랍 2 중량%, 유동파라핀 30 중량%, 방부제 미량, 향 미량, 및 정제수 잔량을 혼합하여 나노리포좀을 함유하는 팩을 제조하였다.According to a conventional method, 1% by weight of horse oil-placenta extract nanoliposome of Example 2, 6% by weight of propylene glycol, 4% by weight of glycerin, 2% by weight of beeswax, 30% by weight of liquid paraffin, trace amounts of preservatives, And a residual amount of purified water was mixed to prepare a pack containing nanoliposomes.

도 1은 본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀의 층구조 모식도를 보여준다. Figure 1 shows a schematic diagram of the layered structure of the nano liposome containing horse oil and placenta extract according to an embodiment of the present invention.

도 2는 본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 정제수에 용해된 상태를 보여준다.Figure 2 shows the horse oil and placenta extract in accordance with an embodiment of the present invention dissolved in purified water.

도 3은 말태반 추출물(I), 본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀(II), 및 마유 나노리포좀으로 각각 처리된 Mel-Ab 멜라닌 세포의 현미경 관찰 결과를 보여준다. Figure 3 is a microscopic observation of Mel-Ab melanocytes treated with horse placenta extract (I), nanoliposomes (II) containing horse oil and horse placenta extracts according to one embodiment of the present invention, and horse oil nanoliposomes, respectively Shows.

도 4는 말태반 추출물(A) 및 본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀(B)을 각각 유효성분으로 포함하는 에센스의 경시적 안정성을 보여준다. 도 4의 좌측과 우측은 각각 상온 및 45℃에서 30일 보관시 A와 B의 갈변 정도를 나타낸다. Figure 4 shows the time-lapse stability of the essence containing the placenta extract (A) and nanoliposome (B) containing horse oil and horse placenta extract according to an embodiment of the present invention as an active ingredient, respectively. 4 shows the browning degree of A and B when stored at room temperature and 45 ° C. for 30 days, respectively.

도 5는 말태반 추출물(가) 및 본 발명의 일 구체예에 따른 마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀(나)을 각각 유효성분으로 포함하는 에센스의 피부 자극성 테스트 결과를 보여준다. 도 5의 우측 상단과 하단은 각각 (가) 및 (나)의 적용 전과 적용 후 48시간 경과 시 (가) 적용 부위에서 나타난 자극 및 홍반 현상을 보여준다. Figure 5 shows the skin irritation test results of the essence containing the placenta extract (A) and nanoliposomes (B) containing horse oil and horse placenta extract according to an embodiment of the present invention as an active ingredient, respectively. 5 shows the irritation and erythema occurring at the site of application (A) before and after application of (A) and (B) for 48 hours.

Claims (12)

마유 및 말태반 추출물이 내포된 나노리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물. Skin whitening composition comprising a nanoliposome containing horse oil and placenta extract as an active ingredient. 제1항에 있어서, 상기 마유는 나노리포좀 총 중량에 대해 2 내지 10 중량%로 함유되는 것인 피부 미백용 조성물. The composition of claim 1, wherein the horse oil is contained in 2 to 10% by weight based on the total weight of the nanoliposomes. 제1항에 있어서, 상기 말태반 추출물은 나노리포좀 총 중량에 대해 1 내지 5 중량%로 함유되는 것인 피부 미백용 조성물. According to claim 1, The placenta extract is a composition for skin whitening is contained in 1 to 5% by weight relative to the total weight of nanoliposomes. 제1항에 있어서, 상기 나노리포좀은 상기 피부 미백용 조성물의 총 중량에 대해 0.001 내지 10 중량%로 함유되는 것인 피부 미백용 조성물. The skin whitening composition of claim 1, wherein the nanoliposome is contained in an amount of 0.001 to 10 wt% based on the total weight of the skin whitening composition. 제1항에 있어서, 상기 나노리포좀은 유화제, 클러스터 덱스트린 및 친수성 용매를 포함하는 것인 피부 미백용 조성물. The composition of claim 1, wherein the nanoliposomes comprise emulsifiers, cluster dextrins, and hydrophilic solvents. 제5항에 있어서, 상기 나노리포좀은 아미노산을 더 포함하는 수용성 나노리포좀인 것인 피부 미백용 조성물.The composition of claim 5, wherein the nanoliposomes are water-soluble nanoliposomes further comprising amino acids. 제6항에 있어서, 상기 아미노산은 아르기닌, 알라닌, 페닐알라닌, 라이신, 및 히스티딘으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 피부 미백용 조성물.The composition of claim 6, wherein the amino acid is selected from the group consisting of arginine, alanine, phenylalanine, lysine, and histidine. 제5항에 있어서, 상기 유화제는 레시틴인 것인 피부 미백용 조성물. The composition for skin whitening according to claim 5, wherein the emulsifier is lecithin. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 피부 미백용 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것인 피부 미백용 조성물. The composition of claim 1, wherein the composition for skin whitening has a formulation selected from the group consisting of solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps and sprays. Composition for skin whitening. 말태반 추출물을 친수성 용매에 용해시키는 단계, Dissolving the placenta extract in a hydrophilic solvent, 상기 용액에 클러스터 덱스트린을 첨가하고 50 내지 60℃까지 가온하는 단계,Adding cluster dextrin to the solution and warming to 50-60 ° C., 상기 가온된 용액을 0 내지 4℃까지 냉각시키는 단계, Cooling the warmed solution to 0-4 ° C., 상기 용액에 교반 하에 마유와 유화제를 서서히 첨가하는 단계, 및Slowly adding horse oil and an emulsifier to the solution under stirring, and 아미노산을 첨가하고 0 내지 4℃로 유지하면서 교반하여 수용성 나노리포좀을 형성하는 단계를 포함하는, 마유 및 말태반 추출물이 내포된 수용성 나노리포좀을 제조하는 방법. A method for preparing a water-soluble nanoliposomes containing horse oil and placenta extract, comprising the step of adding amino acids and stirring while maintaining at 0 to 4 ℃ to form a water-soluble nanoliposomes. 제10항에 있어서, 상기 말태반 추출물 및 클러스터 덱스트린을 포함하는 가온된 용액을 0 내지 4℃까지 냉각시키는 단계는 0.2 내지 0.5℃/분의 냉각 속도로 수행되는 것인 방법. The method of claim 10, wherein the step of cooling the warmed solution comprising placenta extract and cluster dextrin to 0-4 ° C. is performed at a cooling rate of 0.2-0.5 ° C./min. 제10항에 있어서, 상기 유화제는 레시틴인 것인 방법. The method of claim 10, wherein the emulsifier is lecithin.
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