KR20100093327A - Ultrafast laser device for selective ablation of retinal blood vessels - Google Patents

Ultrafast laser device for selective ablation of retinal blood vessels Download PDF

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KR20100093327A
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정세채
메라 싱 시두
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한국표준과학연구원
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Abstract

PURPOSE: A selective retina blood vessel eliminator is provided to enable a user to selectively remove the retina blood vessel corresponding to the structure and characteristic of the eyes blood vessel using a high speed laser. CONSTITUTION: A selective retina blood vessel eliminator includes: a laser system which generates laser beams; an optical system which focuses the laser beams from the laser light source; a stage which controls organs including retinal blood vessels; and a monitoring apparatus which monitors the organs including retinal blood vessel. The laser beam system includes a laser control unit which regulates the fluence of laser beam corresponding to the type of each blood vessel.

Description

초고속레이저를 이용한 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치{Ultrafast laser device for selective ablation of retinal blood vessels}Ultrafast laser device for selective ablation of retinal blood vessels}

본 발명은 초고속레이저를 이용한 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치에 관한 것으로 보다 상세하게는 안구내 망막상 혈관의 유형별 또는 구조적인 특성별에 따른 초고속레이저를 이용한 안전한 혈관의 절제 및 제거를 위한 망막상 혈관의 선택적 제거용 수술장치를 제공하는 것이다.The present invention relates to a surgical device for the selective removal of retinal vessels using ultrafast laser, and more particularly to retinal and safe retinal vessel removal using ultrafast laser according to the type or structural characteristics of intraocular retinal vessels. It is to provide a surgical device for the selective removal of upper vessels.

레이저 기술의 급속한 진보에 따라 최근에는 흥미롭고 실현가능성이 있는 새로운 레이저 수술장치들이 출현하고 있다. 특히 첨단레이저는 소규모 병소 부위에 레이저를 집속하여 조직의 트랜잭션(transaction), 어블레이션(ablation)과 코아귤레이션(coagulation) 수술을 위해 쉽게 활용되고 있다. 레이저 빔의 이러한 잠재적인 특성은 이미 유리체 망막수술(vitreoretinal surgery)에 실현가능성을 확신하기 위한 다기관 임상 실험을 거친 보고가 있다. 한편 최초의 레이저 기술을 사용한 망막절제술은 Nd: YAG 레이저을 가반하여 시도되었고, 혈관벽의 절제술은 2940 nm: YAG 레이저 파장을 도입하기 전에는 가능하지 않았다[D. J. D'Amico et al., "Erbium: YAG laser photothermal retinal ablation in enucleated rabbit eyes," Am. J. Ophthalmol. 117, 783790 (1994)]. Rapid advances in laser technology have led to the emergence of exciting and feasible new laser surgical devices. In particular, high-tech lasers are easily used for tissue transaction, ablation and coagulation surgery by focusing lasers on small lesions. This potential characteristic of laser beams has already been reported in multicenter clinical trials to ensure feasibility in vitreoretinal surgery. Retinal resection using the first laser technique was attempted with a Nd: YAG laser, and resection of the vessel wall was not possible before introducing the 2940 nm: YAG laser wavelength [D. J. D'Amico et al., "Erbium: YAG laser photothermal retinal ablation in enucleated rabbit eyes," Am. J. Ophthalmol. 117, 783790 (1994).

상기의 비교적 긴 펄스의 레이저의 임상 실험은 다양한 망막수술에 시도되어왔지만, 이러한 시스템은 망막조직에 상당한 손상을 일으켰고 내경계막(Inner Limiting Membrane, ILM)의 선택적이고 재생 가능한 절제수술에는 적당하지 않다는 보고가 있다.Although clinical trials of these relatively long pulsed lasers have been attempted for a variety of retinal surgeries, these systems have caused significant damage to the retinal tissues and are not suitable for selective and regenerative excision of the Inner Limiting Membrane (ILM). There is a report.

일반적으로 레이저를 이용한 조직 절제술은 옵티컬 브레이크다운 모델(optical breakdown model) 또는 서멀 컨파인먼트 모델(thermal confinement model)로 설명해왔다. 옵티컬 브레이크다운 모델(optical breakdown model)은 플라즈마 형성, 단계적인 충격파 형성, 캐비테이션(cavitations), 조직 파괴를 고려한 모델이다. 서멀 컨파인먼트 모델(thermal confinement model)은 격렬한 절제술을 물의 흐름에 따른 증발 등의 열적인 효과와 2차적인 손상을 일으키는 열의 확산효과가 서로 비견하는 모델이다. 만약 펄스 지속 시간이 절제된 조직의 크기에 의한 열 이완시간(thermal relaxation time)보다 적다고 가정을 한다면, 이 모델은 2차적인 손상에 대해 설명하기에는 매우 부적절하다는 보고도 있다.In general, laser-assisted tissue resection has been described as an optical breakdown model or a thermal confinement model. The optical breakdown model considers plasma formation, staged shock wave formation, cavitations, and tissue destruction. The thermal confinement model compares the thermal effects of evaporation with water flow and the diffusion of heat that causes secondary damage. If we assume that the pulse duration is less than the thermal relaxation time due to the size of the excised tissue, then this model is also very inadequate to account for secondary damage.

최근 증폭된 초고속레이저는 기존의 수십 나노초의 긴 연속파 레이저 보다 열적인 손상이 적고, 높은 정밀도를 제공하고 있으며, 에너지를 박탈하는 빠른 펄스로 기계적 변형과 열적 변형을 최소화하는 재료의 미세가공과 표면을 양식화하는 비접촉성질때문에 재료에 직접적인 미세기계가공(micromachining)에 매우 능률적이라는 보고가 있다. 레이저 절제술에서 절제 임계값인 Fth(J/cm2)는 효과적인 재료의 제거를 위해 필요한 최소한의 열적 노출(radiant exposure)을 말하는 것으로, 플루언스 임계값은 조직의 절제와 더 세밀한 절제에 사용하는 레이저의 적절한 정밀도를 결정하여 일반적으로 재료에 초고속레이저 펄스를 집속하는 낮은 절제 임계값은 절제된 지역의 근접한 부위에 빛에 의한 손상을 최소화하기 위해 적절하다는 보고가 있다.The recently amplified ultrafast lasers offer less thermal damage, higher precision, and faster processing of microstructures and surfaces of materials that minimize mechanical and thermal strain with energy-depleted fast pulses. It is reported that because of the contactless nature of the form, it is very efficient for micromachining directly to the material. In laser ablation, the ablation threshold, F th (J / cm 2 ), is the minimum thermal exposure required for effective material removal, and the fluence threshold is used for tissue ablation and finer ablation. It has been reported that the low ablation threshold, which determines the proper precision of the laser and generally focuses ultrafast laser pulses on the material, is adequate to minimize light damage in the immediate vicinity of the ablation area.

또한 강력한 초고속 레이저 빔의 빛은 목표 재료에 다광자 자극을 일으켜 레이저 펄의 지속 시간 폭이 대략 수 피코초의 일정한 진동완화시간보다 짧으므로, 물질에 흡수된 에너지는 인접한 재료의 영역으로 열적인 확산 없이 전자 상태로 운반되며 그 결과, 조직 주위에 열적인 손상은 최소화 하고, 또한 생물학적인 조직은 단계적으로 일어나는 광음향학적인 충격파에 의한 손상에 영향을 받지 않게 되어 효과적으로 비열성 초고속레이저 절제술(fs-laser surgical process non-thermal)을 가능하게 해준다. 그러나 고밀도의 자유전자는 목표 재료의 국부적인 플라즈마를 형성하게 되며 이렇게 가열된 플라즈마 형성은 마이크로이하 범위의 내부 세포에서도 영구적인 손상을 일으키므로 이전의 각막간질(corneal stroma)과 같은 조직 절제 및 제거는 레이저의 의한 펄스 폭을 감소시킴으로써 매우 낮은 절제 임계 플루언스값을 보고한 바 있다. 상기의 이유로 하여 초고속 레이저는 의료용 레이저 중 특히 안과학에서매우 특이적으로 망막 및 신생혈관 등 생물조직에 열적인 손상 또는 충격압을 최소화하여 정확한 조직치료에 이용할 수 있다는 보고가 있다. In addition, the light of the powerful ultrafast laser beam causes multiphoton stimulation of the target material, so that the duration of the laser pearl is shorter than the constant vibration relaxation time of approximately several picoseconds, so that the energy absorbed by the material does not thermally diffuse into the region of the adjacent material. It is transported electronically, minimizing thermal damage around the tissues, and also making biological tissues insensitive to damage caused by photoacoustic shock waves that occur in stages, effectively fs-laser surgical process non-thermal). However, high-density free electrons form a local plasma of the target material, and this heated plasma formation causes permanent damage even in the submicron range of internal cells, so tissue excision and removal such as corneal stroma is not possible. Very low ablation critical fluence values have been reported by reducing the pulse width by the laser. For these reasons, ultra-fast lasers have been reported to be used for precise tissue treatment by minimizing thermal damage or impact pressure on biological tissues such as retina and neovascularization, particularly in ophthalmology among medical lasers.

그러나 현존하는 치료기술은 주로 레이저 유발 열적인 작용이나 광화학적인 기작에 의존하는 방법을 이용하고 있으며. 상기 방법은 기저 조직이나 병변 조직 부위 심각한 부작용을 유발하는 경우가 대부분이었다. 따라서 이상의 부작용을 최소화하는 안전한 도구로서의 망막상 혈관에 대한 선택적이며 부작용을 최소화하는 매우 안전한 혈관의 절제 및 제거가 가능하도록 하고자 본 발명을 완성하였다.However, existing treatment techniques mainly use methods that rely on laser-induced thermal action or photochemical mechanisms. In most cases, the method causes serious side effects of the underlying tissue or lesion tissue. Therefore, the present invention has been completed in order to enable the removal and removal of very safe blood vessels that are selective for retinal blood vessels as a safe tool for minimizing adverse side effects.

본 발명은 안구내 망막상 혈관의 유형별 또는 구조적인 특성별에 따른 초고속레이저를 이용한 망막상 혈관의 선택적 제거용 수술장치를 제공하고자 한다.The present invention is to provide a surgical device for the selective removal of retinal vessels using ultrafast laser according to the type or structural characteristics of intraocular retinal vessels.

또한, 본 발명의 또 다른 목적은 선택적 혈관 병소 이외의 주변조직이나 부위의 정상 혈관에서는 레이저 빛의 의한 손상을 최소화하며, 초점 주위에는 열에너지 또는 기계적인 에너지로부터 비교적 자유롭고 매우 안전한 혈관의 절제 및 제거하는 새로운 수술장치를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to minimize damage caused by laser light in normal blood vessels of peripheral tissues or regions other than selective vascular lesions, and to remove and remove blood vessels relatively free and very safe from thermal energy or mechanical energy around the focal point. It is to provide a new surgical device.

본 발명은 초고속레이저 초미세 공정 기술 및 광학적인 방법을 이용하여 망막상 혈관에 집속함으로써 선택적이고 안전하게 혈관을 절제 및 제거하는 망막상 혈관의 선택적 제거용 수술장치로, 상기 수술장치는 레이저 빔을 발생시키는 레이저 시스템; 상기 레이저 광원으로부터의 레이저 빔을 집속하기위한 광학계; 망막상 혈관을 포함한 조직을 위치제어하는 스테이지; 및 망막상 혈관을 포함한 조직을 모니터링하는 모니터링 장치; 를 포함하여 구성되며, 상기 레이저 빔 시스템은 망막 중심으로부터 나온 1차 혈관(primary blood vessel), 상기 1차 혈관으로부터 분지된 2차 혈관(secondary blood vessel), 상기 2차 혈관으로부터 분지된 3차 혈관(tertiary blood vessel) 및 상기 3차 혈관으로부터 분지된 4차 혈관(quaternary blood vessel)으로 구성된 혈관 유형을 갖는 망막상 혈관을 제거 대상으로 하여, 상기 혈관 유형별로 상기 레이저 빔 플루언스를 조절하는 레이저 제어부를 포함하 는 것을 특징으로 하는 망막상 혈관의 선택적 제거용 수술장치를 제공한다.The present invention is a surgical device for the selective removal of the retinal vessels selectively and safely by resecting and removing the vessels by focusing on the retinal vessels using ultrafast laser ultra-fine processing technology and optical method, the surgical device generates a laser beam Laser system; An optical system for focusing the laser beam from the laser light source; Positioning the tissue including retinal vessels; And a monitoring device for monitoring tissue including retinal vessels; Wherein the laser beam system comprises a primary blood vessel from the retinal center, a secondary blood vessel branched from the primary vessel, and a tertiary vessel branched from the secondary vessel Laser control unit for controlling the laser beam fluence for each vessel type to remove the retinal vessels having a blood vessel type consisting of a tertiary blood vessel and a quaternary blood vessel branched from the tertiary vessel It provides a surgical device for the selective removal of retinal vessels comprising a.

상기 본 발명에 따른 초고속레이저를 이용한 망막상 혈관의 선택적 제거용 수술장치는 레이저 빔을 발생시키는 레이저 시스템; 상기 레이저 광원으로부터의 레이저 빔을 집속하기위한 광학계; 망막상 혈관을 포함한 조직을 위치제어하는 스테이지; 및 망막상 혈관을 포함한 조직을 모니터링하는 모니터링 장치; 를 포함한다.The surgical device for the selective removal of retinal vessels using an ultrafast laser according to the present invention comprises a laser system for generating a laser beam; An optical system for focusing the laser beam from the laser light source; Positioning the tissue including retinal vessels; And a monitoring device for monitoring tissue including retinal vessels; It includes.

상기 광학계는 초고속 레이저 광원으로부터 생성되는 빔을 처리하고 경로를 조정하여 집속시키기 위하여 채용된 것으로, 통상의 레이저빔 광학계를 모두 포함할 수 있으며, 파장에 따라 빛을 선택적으로 반사시키는 이색 미러(dichroic mirror), 대물 렌즈(objective lens), 노치 필터를 포함한 광 필터를 이용하여 순수 단파장의 레이저 빔의 경로를 조절하고 집속할 수 있으며, 중성농도 필터(neutral density filter)를 이용하여 레이저빔의 세기를 조절하고, 빠른 광학 셔터를 이용하여 레이저 빔의 펄스 열로부터 단일 펄스만을 추출할 수 있다. The optical system is adopted to process the beam generated from the ultra-fast laser light source and adjust the path to focus, and may include all of the conventional laser beam optical systems, and a dichroic mirror for selectively reflecting light according to the wavelength. ), The optical filter including the objective lens and the notch filter can be used to control and focus the path of the pure short wavelength laser beam, and the intensity of the laser beam can be controlled using the neutral density filter. In addition, only a single pulse can be extracted from the pulse train of the laser beam using a fast optical shutter.

망막상 혈관을 포함하는 집속 대상 개체를 위치제어하는 스테이지는 망막상 혈관이 위치하는 부위에의 정확한 레이저 빔 조사를 위하여 레이저 빔의 조사위치 설정을 제어하기위하여 채용하는 것으로서, 상기 위치제어 스테이지는 망막상 혈관에 대한 갈바노스캔 또는 혈관 조영술을 이용하여 구동하게 된다. 레이저 빔의 조사위치 설정을 제어하기위해 집속 대상 개체를 실시간 이미지로 관찰할 수 있는 장치를 포함하는 것이 바람직하다.The stage for positioning the focused object including the retinal vessels is employed to control the irradiation position setting of the laser beam for accurate laser beam irradiation to the site where the retinal vessels are located. It is driven using galvanoscopy or angiography of the upper vessels. In order to control the irradiation position setting of the laser beam, it is preferable to include a device that can observe the object to be focused in real time image.

망막상 혈관을 포함한 조직을 모니터링하는 모니터링 장치로 상기 실시간 이 미징 장치를 활용할 수 있으며, 광 분할기(beam splitter)에 의해 분할된 광발광 신호를 검출하는 CCD(charge coupled device) 카메라가 구비될 수 있다. The real-time imaging device may be used as a monitoring device for monitoring tissue including retinal vessels, and a CCD (charge coupled device) camera may be provided to detect a photoluminescence signal split by a beam splitter. .

이때, 갈바노스캔(갈바노-스캐너 미러), 광검출기, 광학 셔터 및 CCD 카메라는 디지털 프로세서에서 구동되는 제어 프로그램과 연동하여 제어되는 것이 바람직하다.At this time, the galvano scan (galvano-scanner mirror), the photodetector, the optical shutter, and the CCD camera are preferably controlled in conjunction with a control program driven by the digital processor.

상기 망막상 혈관은 하기 식 1 내지 4 모두를 만족하는 망막상 혈관이어야 한다.The retinal vessels should be retinal vessels that satisfy all of Equations 1 to 4 below.

[식 1] [Equation 1]

9.6 < H1 < 10.4 (H1은 1차 혈관의 두께이다.) 9.6 <H1 <10.4 (H1 is the thickness of the primary vessel)

[식 2][Equation 2]

7.7 < H2 < 8.0 (H2는 2차 혈관의 두께이다.)7.7 <H2 <8.0 (H2 is the thickness of the secondary vessel)

[식 3][Equation 3]

5.8 < H3 < 7.5 (H3은 3차 혈관의 두께이다.)5.8 <H3 <7.5 (H3 is the thickness of the tertiary vessel)

[식 4][Equation 4]

4.8 < H4 < 6.8 (H4는 4차 혈관의 두께이다.)4.8 <H4 <6.8 (H4 is the thickness of the fourth vessel)

상기 망막상 혈관은 상대적으로 복잡한 형태를 갖고 있다. 도 2를 참조한다. 먼저 망막 중심으로부터 나온 혈관은 1차 혈관으로써 망막 주변부로 가면서 나무의 가지와 같은 가지가 나오기 시작한다. 이때 1차 혈관으로부터 처음 가지가 나온 혈관은 2차 혈관, 다음은 3차 혈관, 마지막으로 4차 혈관으로 명명지어진다. 이때 안구에 공급된 혈류는 1차 혈관으로부터 2차 혈관, 3차 혈관, 4차 혈관 순서로 지나 마지막으로 모세혈관을 통하여 망막 상 세포에 영양을 공급하게 된다. The retinal vessels have a relatively complex shape. See FIG. 2. First, the blood vessels from the center of the retina are the primary blood vessels and go to the periphery of the retina. In this case, the first branch from the primary vessel is named the secondary vessel, the third vessel, and finally the fourth vessel. At this time, the blood flow supplied to the eye passes from the primary vessel to the secondary vessel, the third vessel, and the fourth vessel, and finally supplies the nutrition to the cells on the retina through the capillaries.

상기 식 1 내지 4 혈관들의 망막을 동결절단(cryo-sectioning) 한 후, H&E 염색을 하여 광학현미경으로 관찰한 결과, 관찰된 혈관 벽 및 혈과 위에 존재하는 내경계막의 두께를 각각의 혈관의 상태에 대하여 플롯한 결과는 상기 혈관의 지름 및 내경계막 두께와 혈관벽 두께 모두는 혈관의 유형별로 매우 의미 있는 변화를 보여주고 있다. 즉 혈관지름은 1차 혈관, 2차 혈관, 3차 혈관, 4차 혈관으로 각각 10.1 mm, 7.8 mm, 6.6 mm 과 5.8 mm로 감소하고 있으며, 혈관벽의 두께 또한 1차 혈관, 2차 혈관, 3차 혈관, 4차 혈관으로 각각 21.5 mm, 16.4 mm, 13.6 mm 과 12.3 mm로 감소하고 있음을 확인하였다. 이러한 망막상 혈관의 구조적인 특성이 혈관 유형별로 매우 강하게 변화하고 있었다. 도 3 및 5 그리고 표 1을 참조한다.After cryo-sectioning the retinas of the blood vessels of Formulas 1 to 4, and using H & E staining and observing them with an optical microscope, the vascular wall and blood and the thickness of the inner boundary membrane present in the stomach were examined. The plotted results show that the diameter of the blood vessel, the thickness of the internal boundary membrane, and the thickness of the blood vessel wall are very significant according to the type of blood vessel. In other words, the diameter of blood vessels is reduced to 10.1 mm, 7.8 mm, 6.6 mm and 5.8 mm, respectively, with primary, secondary, tertiary and quaternary vessels. The primary and fourth vessels were reduced to 21.5 mm, 16.4 mm, 13.6 mm, and 12.3 mm, respectively. Structural characteristics of these retinal vessels were changing strongly by vessel type. See FIGS. 3 and 5 and Table 1.

상기 망막상 혈관의 구조적인 특성이 혈관 유형별로 매우 강하게 변화함을 발견은 초고속 레이저를 이용한 안전하고 선택적인 혈관을 제하기 위해 혈관 유형별로 제거 조건을 달리해야 함을 알 수 있었다.It was found that the structural characteristics of the retinal vessels changed very strongly for each vessel type, and that the removal conditions of the vessel types had to be changed in order to remove a safe and selective vessel using an ultrafast laser.

본 발명에 따른 레이저 빔 플루언스의 범위는 처치하고자 하는 동물의 종류와 부위에 따라 달라질 수 있으나 조사되는 레이저 빔 플루언스(F)의 범위는 혈관 유형별로 제어 되어야만 하고, 상기 레이저 빔의 플루언스(F)의 범위는 바람직하게는 1차 혈관 3.6 내지 99.4 J/cm2, 2차 혈관 3.6 내지 71.0 J/cm2, 3차 혈관 3.6 내지 56.8 J/cm2 및 4차 혈관 3.6 내지 28.4 J/cm2이여야 한다.The range of the laser beam fluence according to the present invention may vary depending on the type and part of the animal to be treated, but the range of the laser beam fluence (F) to be irradiated should be controlled by blood vessel type, and the fluence of the laser beam ( The range of F) preferably ranges from primary vessels 3.6 to 99.4 J / cm 2 , secondary vessels 3.6 to 71.0 J / cm 2 , tertiary vessels 3.6 to 56.8 J / cm 2 and quaternary vessels 3.6 to 28.4 J / cm Must be 2

상기 망막상 혈관에의 레이저빔 조사 과정에서 망막상 혈관에 인접한 조직 또는 정상혈관에 필연적으로 레이저 빔이 조사될 수밖에 없기 때문에 상기 망막상 혈관에 레이저 빔을 조사하는 레이저 빔 플루언스를 일정 범위 이상으로 하는 경우 망막상 혈관을 제거되지만 상기 망막상 혈관에 인접함으로 인하여 레이저 빔 조사에 의하여 손상받는 정상혈관은 레이저 빔 조사 후 다시 정상적인 기능을 하는 정상혈관으로 회복하지 못하고, 또한 레이저 빔 조사시 망막상 혈관 또는 정상혈관 이외의 조직세포에 손상을 주어 상기 조직의 복구할 수 없는 손상을 야기하기 때문에 본 발명에 따른 망막 혈관의 선택적 제거용 수술장치에 있어서 조사되는 레이저 빔의 플루언스(F)의 채용범위는 본 발명의 수술장치의 목적하는 바를 달성하는 데 있어서 가장 중요한 구성이다. Since the laser beam is inevitably irradiated to tissues or normal blood vessels adjacent to the retinal vessels during the laser beam irradiation to the retinal vessels, the laser beam fluence for irradiating the laser beam to the retinal vessels is above a certain range. When the retinal blood vessels are removed, the normal blood vessels damaged by the laser beam irradiation due to adjacent to the retinal blood vessels do not recover to normal blood vessels that function normally after the laser beam irradiation. Or range of the application of the fluence (F) of the laser beam irradiated in the surgical device for the selective removal of retinal blood vessels according to the present invention because it damages tissue cells other than normal blood vessels causing irreparable damage of the tissues Is most important in achieving the object of the surgical device of the present invention One configuration.

또한 본 발명에 따른 망막상 혈관 선택적 제거용 수술장치는 혈관 유형별의 제거대상에 따라 제어 될 수 있어야 하고, 상기 제거대상이 혈관 유형별의 내경계막인 경우 조사되는 레이저 빔 플루언스(F)의 범위는 바람직하게는 1차 혈관 3.0 ± 0.8 J/cm2, 2차 혈관 1.27 ± 0.47 J/cm2, 3차 혈관 0.69 ± 0.14 J/cm2 및 4차 혈관 0.15 ± 0.04 J/cm2이다. 상기 혈관별 내경계막에 따른 값은 제거된 내경계막의 두께에 대한 영향을 받지 않는 조직의 제거에 필요한 최소 레이저 플루언스를 의미한다.In addition, the surgical device for selective retinal vessel removal according to the present invention should be able to be controlled according to the removal target for each vessel type, the scope of the laser beam fluence (F) irradiated when the removal target is an internal boundary membrane for each vessel type Is preferably primary vessel 3.0 ± 0.8 J / cm 2 , secondary vessel 1.27 ± 0.47 J / cm 2 , tertiary vessel 0.69 ± 0.14 J / cm 2 and quaternary vessel 0.15 ± 0.04 J / cm 2 . The value according to the blood vessel-specific inner boundary membrane means a minimum laser fluence required for the removal of tissue that is not affected by the thickness of the removed inner boundary membrane.

상기 제거대상이 혈관 유형별의 혈관벽인 경우 조사되는 레이저 빔 플루언스(F)의 범위는 바람직하게는 1차 혈관 6.2 ± 2.0 J/cm2, 2차 혈관 4.88 ± 1.86 J/cm2, 3차 혈관 2.53 ± 1.22 J/cm2 및 4차 혈관 0.98 ± 0.6 J/cm2이다. When the object to be removed is a blood vessel wall of each vessel type, the range of the laser beam fluence (F) to be irradiated is preferably the primary vessel 6.2 ± 2.0 J / cm 2 , the secondary vessel 4.88 ± 1.86 J / cm 2 , the third vessel 2.53 ± 1.22 J / cm 2 and fourth vessel 0.98 ± 0.6 J / cm 2 .

상기 혈관의 유형별 레이저 플루언스는 상대적으로 크고 두꺼운 혈관벽을 갖고 있는 혈관과 모세혈관으로 대별되는 매우 작은 혈관이 혼재한 조직 혹은 장기인 경우 적절하게 조절된 레이저 풀루언스의 레이저 에너지를 조사함으로써 상대적으로 큰 혈관의 벽에는 손상없이 작은 혈관벽만을 효과적으로 절제할 수 있는 장점이 있다.The laser fluence for each type of blood vessel is relatively large by irradiating the laser energy of a properly controlled laser pullion in the case of tissues or organs in which a blood vessel having a relatively large and thick vessel wall and a very small blood vessel divided into capillaries are mixed. The walls of blood vessels have the advantage of being able to effectively ablate only small vessel walls without damage.

본 발명에 따른 망막상 혈관을 선택적 제거용 수술장치에서 채용되는 레이저 빔은 근적외선 영역의 레이저 빔이며, 바람직한 것은 단일 펄스 레이저 빔이고, 더욱 바람직하게는 펨토초 단일 펄스 레이저 빔으로 빔은 펄스폭은 100 내지 200 fs 이고, 파장이 780 내지 840㎚인 것이 바람직하다. 조직에 펄스가 반복적으로 조사되는 경우, 직전에 조사된 펄스에 의해 일정한 온도의 상승이 유발되고 계속되어지는 펄스의 도달 이전에 열적 평형상태로 돌아가지 않는 경우 계속된 열의 축적에 의한 온도의 상승이 있을 수 있다. 이러한 광열역학적인 손상 및 광화학적인 손상의 축적을 최소화 할 수 있는 방법이 단일 펄스 레이저 빔을 사용하는 것이며, 더욱 바람직하게는 펨토초 단일 펄스 레이저 빔을 사용하는 것이다.The laser beam employed in the surgical device for selective removal of retinal vessels according to the present invention is a laser beam in the near infrared region, preferably a single pulse laser beam, more preferably a femtosecond single pulse laser beam, the beam width of 100 It is preferable that it is -200 fs, and a wavelength is 780-840 nm. If the tissue is repeatedly irradiated with pulses, a rise in temperature due to continued accumulation of heat will occur if a constant temperature rise is caused by the immediately irradiated pulse and does not return to thermal equilibrium prior to the arrival of the continuing pulse. There may be. The method of minimizing the accumulation of photo-thermodynamic damage and photochemical damage is to use a single pulse laser beam, more preferably to use a femtosecond single pulse laser beam.

본 발명에 따른 수술장치는 망막상 혈관의 선택적 제거용 수술장치는 목적으로 하는 망막상 혈관만을 선택적이고 안전한 방법으로 제거할 수 있으면서 선택적 혈관의 병소 이외의 주변조직이나 부위의 정상 혈관에서의 레이저 빛에 의한 손상 을 최소화하며, 초점 주위의 열에너지 또는 기계적인 에너지로부터 자유롭고 매우 안전한 혈관의 절제 및 제거가 가능하여 정확하고 정밀한 조직의 치료 및 수술에 적용 가능할 것이다.The surgical device according to the present invention is a surgical device for the selective removal of retinal vessels, the laser light in the normal vessels of the surrounding tissues or areas other than the lesions of the selective vessels while being able to remove only the target retinal vessels in a selective and safe manner. Minimizes damage caused by heat, and can be removed and removed from the thermal or mechanical energy around the focal point and can be applied to accurate and precise tissue treatment and surgery.

본원에 도시되고 기술된 구체적인 실시예는 단지 본 발명의 원리를 설명하기 위한 것이며 다양한 변형이 본 발명의 범위 및 사상으로부터 벗어나지 않으면서 당업자에게는 자명할 것이라는 것이 이해되어야 할 것이다.It is to be understood that the specific embodiments shown and described herein are merely illustrative of the principles of the invention and that various modifications will be apparent to those skilled in the art without departing from the scope and spirit of the invention.

[실시예 1]Example 1

펨토초레이저 절제술을 이용하여 돼지의 망막혈관을 뚫기 위한 실험적인 장치는 하기와 같다. 레이저 시스템은 1 kHz(Quantronix, USA)의 반복률에서 펄스폭은 약 150 fs인 Regenerative-amplified Ti: Sapphire (810 nm) 레이저로 구성되어있다. 레이저 빔은 대물렌즈 (N.A. = 0.4)를 이용하여 망막상 혈관표면에 집속하였다. 이때 레이저 빔의 지름은 약 1.3 micron이다. 망막상 혈관조직은 자동 XY translation stage에 고정시켰다고, 이 스테이지는 각 레이저 펄스마다 조직의 새로운 부위를 집속하기 위한 샘플의 조절을 위해 사용되었다. 샘플에 단일 레이저 펄스를 정확하게 집속하기 위해 반응 속도가 0.6 ms 미만의 광학셔터를 사용하였다.Experimental apparatus for penetrating porcine retinal vessels using femtosecond laser resection is as follows. The laser system consists of a Regenerative-amplified Ti: Sapphire (810 nm) laser with a pulse width of about 150 fs at a repetition rate of 1 kHz (Quantronix, USA). The laser beam was focused on the retinal vessel surface using an objective lens (N.A. = 0.4). The diameter of the laser beam is about 1.3 micron. Retinal vascular tissue was fixed in an automatic XY translation stage, which was used to control the sample to focus new areas of tissue at each laser pulse. An optical shutter with a response speed of less than 0.6 ms was used to accurately focus a single laser pulse on the sample.

돼지 안구는 도살장에서 적출하여 4℃의 HBSS(Hank's Balanced Salt Solution,Welgene Inc. Korea )에 보관하여 도살한 후 1 시간 이내에 연구실로 이송하였다. 차가운 HBSS에서 거상연(ora-serrata), 각막(cornea), 홍채(iris), 렌 즈(lens) 바로 뒤의 안구를 조심스럽게 절개한 후 점성이 있는 유리체액(vitreous humour)을 제거했다[V. Enzmann et al., "Alterations of sensory retinal explantsexposed to choroidal melanoma cells ex vivo", Graefe's. Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 238, 985-992 (2000)]. 색소상피세포로부터 망막을 벗겨낸 후, 약 3 x 5 mm2 크기의 망막 조각을 여과지(Whatman, UK)에 얹어 준비하였다. 실험을 진행하는 동안 망막이 건조되는 것을 방지하고 in vivo 상태와 가깝게 만들기 위해 모든 망막 조각은 100 micro-l의 유리체액으로 덮었다. 그리고 모든 실험은 도살 후 3시간 이내에 끝냈다. 주사전자현미경(scanning electron microscopy, SEM) 사진을 얻기 위해, 약 10 x 10 mm2 크기의 망막조각을 커버글라스에 올린 후 레이저로 절제한 망막조직을 일반적으로 4℃의 0.1% 고정액(p-formaldehyde solution)에서 1시간, 0.5% 고정액에서 30분, 1.0% 고정액에서 30분, 1.5% 고정액에서 30 분 그리고 2.0%에서 1시간을 고정시켰다. 고정된 조직은 실내 온도에서 4 내지 6시간 이내에 완전히 건조시킨 후 얇게 백금코팅을 하였다.Pig eyes were harvested from the slaughterhouse and stored in HBSS (Hank's Balanced Salt Solution, Welgene Inc. Korea) at 4 ° C. In cold HBSS, the eyes immediately behind the ora-serrata, cornea, iris and lens were carefully dissected and the viscous vitreous humour removed. . Enzmann et al., "Alterations of sensory retinal explantsexposed to choroidal melanoma cells ex vivo", Graefe's. Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 238, 985-992 (2000). After removing the retina from the pigment epithelial cells, a retinal piece of about 3 × 5 mm 2 size was prepared by placing it on a filter paper (Whatman, UK). During the experiment, all retinal fragments were covered with 100 microl of vitreous fluid to prevent the retina from drying out and bring it closer to in vivo. All experiments were completed within 3 hours after slaughter. To obtain a scanning electron microscopy (SEM) image, a retinal tissue of about 10 x 10 mm 2 was placed on the cover glass and the laser-resected retinal tissue was generally 0.1% fixed solution (p-formaldehyde) at 4 ° C. solution was fixed for 1 hour, 30 minutes in 0.5% fixative, 30 minutes in 1.0% fixative, 30 minutes in 1.5% fixative and 1 hour at 2.0%. The fixed tissue was completely dried within 4 to 6 hours at room temperature and then thinly coated with platinum.

[실험예 1] 망막상 혈관의 유형별 조직학적인 구조 조사 분석Experimental Example 1 Analysis of Histologic Structure by Type of Retinal Veins

도 2에서 보여주는 바와 같이 안구 망막의 혈관은 상대적으로 복잡한 형태를 갖고 있다. 먼저 망막 중심으로부터 나온 혈관은 1차 혈관으로써 망막 주변부로 가면서 나무의 가지와 같은 가지가 나오기 시작한다. 이때 1차 혈관으로부터 처음 가지가 나온 혈관은 2차 혈관, 다음은 3차 혈관, 마지막으로 4차 혈관으로 명명지어진다. 이때 안구에 공급된 혈류는 1차 혈관으로부터 2차 혈관, 3차 혈관, 4차 혈관 순서로 지나 마지막으로 모세혈관을 통하여 망막 상 세포에 영양을 공급하게 된다. As shown in FIG. 2, the blood vessels of the eye retina have a relatively complicated shape. First, the blood vessels from the center of the retina are the primary blood vessels and go to the periphery of the retina. In this case, the first branch from the primary vessel is named the secondary vessel, the third vessel, and finally the fourth vessel. At this time, the blood flow supplied to the eye passes from the primary vessel to the secondary vessel, the third vessel, and the fourth vessel, and finally supplies the nutrition to the cells on the retina through the capillaries.

한편 이들 혈관의 형태에 대한 정보를 얻기 위하여 망막을 동결절단(cryo-sectioning) 한 후 H&E 염색을 하여 광학현미경을 이용하여 관찰한 결과를 도 3에 나타내었다. 3 개의 다른 안구로부터 각각 150개의 이미지를 획득-조사하여 관찰된 혈관 벽 및 혈과 위에 존재하는 내경계막의 두께를 각각의 혈관의 상태에 대하여 플롯(plot)한 결과를 하기 표 1 및 도 5에 나타내었다.Meanwhile, in order to obtain information about the shape of these blood vessels, the retina was cryo-sectioned and subjected to H & E staining, and the results of observation using an optical microscope are shown in FIG. 3. 150 images from three different eyeballs were acquired and irradiated, respectively, to plot the observed vascular wall and blood and the thickness of the inner boundary membrane present in the stomach with respect to the state of each blood vessel. Indicated.

Figure 112009009413831-PAT00001
Figure 112009009413831-PAT00001

상기 혈관의 지름 및 내경계막 두께와 혈관벽 두께 모두는 혈관의 유형별로 매우 의미 있는 변화를 보여주고 있다. 즉 혈관지름은 1차 혈관, 2차 혈관, 3차 혈관, 4차 혈관으로 각각 10.1 mm, 7.8 mm, 6.6 mm 과 5.8 mm로 감소하고 있음을 보여주고 있다. 혈관벽의 두께 또한 1차 혈관, 2차 혈관, 3차 혈관, 4차 혈관으로 각각 21.5 mm, 16.4 mm, 13.6 mm 과 12.3 mm로 감소하고 있음을 보여주고 있으며, 혈관표면의 내경계막의 두께 또한 1차 혈관, 2차 혈관, 3차 혈관, 4차 혈관으로 갈수록 매우 강한 의존성을 보여주고 있으며 11.5 mm, 8.5 mm, 6.9 mm 과 7.1 mm로 감소하고 있음을 보여주고 있다. 이러한 망막상 혈관의 구조적인 특성이 혈관 유형별로 매우 강하게 변화하고 있다는 사실을 확인하였다.Both the diameter of the blood vessel, the thickness of the internal boundary membrane, and the thickness of the blood vessel wall show very significant changes according to the types of blood vessels. In other words, the blood vessel diameters are decreased to 10.1 mm, 7.8 mm, 6.6 mm and 5.8 mm in primary, secondary, tertiary and quaternary vessels, respectively. The thickness of the vessel wall was also decreased to 21.5 mm, 16.4 mm, 13.6 mm and 12.3 mm, respectively, with primary, secondary, tertiary and quaternary vessels. It shows strong dependence toward secondary, secondary, tertiary and quaternary vessels and decreases to 11.5 mm, 8.5 mm, 6.9 mm and 7.1 mm. It was confirmed that the structural characteristics of these retinal vessels are very strongly changed by vessel type.

[실험예 2] 망막 혈관의 레이저 절제Experimental Example 2 Laser Ablation of Retinal Vessels

망막 혈관벽의 손상을 백분율을 구하기 위해, 1.4 J/cm2 내지 99.4 J/cm2의 레이저 플루언스 범위에서 혈관에 연속적으로 손상을 일으키기 위하여 74개의 샘플을 5번 반복실험을 실행하였다. 상기 망막 혈관의 표면에서 약 수십 J/cm2 이상의 높은 레이저 플루언스에서 혈관벽의 뚜렷하게 파괴되고 2 내지 3 초간의 지속적인 혈액유출이 되는 것을 도 4에서 확인할 수 있었다. 혈관의 붉은색은 약 5 분 후에 사라졌고, 10 분 후에 출혈은 거의 멈추었다. 반면에 낮은 레이저 플루언스에 의한 출혈은 적은 양의 혈액이 유출된 후 1분 안에 출혈이 멈추었다.In order to determine the percentage of damage to the retinal vessel wall, 74 samples were run five times to continuously damage the vessel in the laser fluence range of 1.4 J / cm 2 to 99.4 J / cm 2 . In the high laser fluence of about several tens of J / cm 2 or more at the surface of the retinal vessels, it was confirmed in FIG. 4 that the blood vessel wall was clearly destroyed and continuous blood leakage for 2 to 3 seconds. The red color of the vessels disappeared after about 5 minutes, and after 10 minutes the bleeding almost stopped. On the other hand, bleeding caused by low laser fluence stopped bleeding within 1 minute after a small amount of blood leaked.

[실험예 3] 망막상 1차 혈관의 초고속레이저 절제시술 결과Experimental Example 3 Ultrafast Laser Ablation of Primary Retinal Veins

초고속레이저 광선을 이용하여 돼지의 망막상 1차 혈관벽의 절제 및 제거 수술에 대한 특성을 밝히기 위하여 제 1 망막 혈관벽이 포함되도록 하면서 조직을 20 ㎛의 두께로 연속적인 절편을 만들었다. 낮은 레이저 플루언스에서 레이저 광선을 이용하여 혈관 표면의 손상을 일으키는 확률은 낮았지만, 높은 레이저 플루언스에서는 주로 글리아 세포층(glial cell layer)을 이루고 있는 내경계막 대부분에서 뚜렷하게 파괴되었다. 망막에 28.4 J/cm2의 레이저 플루언스 이용한 내경계막의 뚜렷한 부분적인 절제가 1번째와 5번째 절편에서 관찰할 수 있었다. 레이저 광선에 의한 어떠한 혈관 표피층의 뚜렷한 손상과 출혈이 관찰되지 않았다.In order to clarify the characteristics of the resection and removal of the primary retinal vascular wall of pigs using ultrafast laser light, the tissues were continuously sliced to a thickness of 20 μm while the first retinal vascular wall was included. At low laser fluence, the probability of damaging the surface of the blood vessels using laser beams was low, but at high laser fluences, most of the inner boundary membranes, which form the glial cell layer, were clearly destroyed. Significant partial resection of the internal limiting membrane using laser fluence of 28.4 J / cm 2 was observed in the 1st and 5th sections. No obvious damage and bleeding of the vascular epidermal layer was observed by laser light.

또한 56.8 J/cm2의 높은 레이저 플루언스의 단일 펄스 레이저 광선은 혈관벽 을 완전히 절제시키는 것을 확일 할 수 있었으며, 더 높은 71.0 J/cm2의 레이저 플루언스의 단일 펄스 레이저 광선은 종종 혈관벽의 뚜렷한 손상이 연속적으로 관찰되는 것을 볼 수 있다. 이 손상의 지름은 높은 레이저 플루언스에서 20 ㎛이상임을 말한다. 또한 실험적인 결과를 토대로 85.2 J/cm2 이상의 레이저 플루언스에서는 망막혈관벽과 내경계막에서의 파괴를 제외한 망막세포층 아래의 변화를 관찰할 수 없었다. 하지만, 99.4 J/cm2의 높은 레이저 플루언스에서 조직 아래의 경미한 파괴가 관찰하였다.In addition, a single pulsed laser beam with a high laser fluence of 56.8 J / cm 2 was able to ensure complete ablation of the vessel wall, while a single pulsed laser beam with a higher 71.0 J / cm 2 laser fluence often resulted in marked damage to the vessel wall. It can be seen that this is observed continuously. The diameter of this damage is greater than 20 µm at high laser fluences. In addition, based on the experimental results, it was not possible to observe changes below the retinal cell layer in the laser fluence of 85.2 J / cm 2 or more except for destruction at the retinal vessel wall and internal boundary membrane. However, a slight break down of tissue was observed at a high laser fluence of 99.4 J / cm 2 .

초고속레이저에 의한 단일 펄스 레이저 광선을 이용한 망막 조각의 동결절편은 임의적으로 아무런 변화 없는 절편과 내경계막만의 절제된 절편, 혈관벽의 절제된 절편 세 그룹으로 나누었다. 3.6 J/cm2 내지 99.4 J/cm2 플루언스 범위에서 혈관벽의 절제 확률은 증가하였고, 반면에 내경계막 절제 확률은 대부분 28.4 J/cm2 이상의 플루언스 범위였다. 내경계막층의 손상에 대한 레이저 플루언스는 1.4 J/cm2 내지 3.6 J/cm2 사이의 값이 였으며, 혈관벽의 절제는 3.6 J/cm2 내지 7.1 J/cm2 사이의 높은 플루언스의 초고속레이저 광선에 의해 현저하게 일어났다. 만약에 낮은 플루언스에 대한 최소자승 근사법을 시도하면 내경계막의 절제와 혈관벽의 절제가 일어나는 레이저 플루언스 임계값은 각각 3.0 ± 0.8 J/cm2 와 6.2 ± 2.0 J/cm2로 결정할 수 있었다. Frozen sections of retinal slices using a single pulsed laser beam by ultrafast laser were divided into three groups: one without any change, one with internal boundary membrane, and one with vessel wall. In the range of 3.6 J / cm 2 to 99.4 J / cm 2 fluence, the probability of resection of the vascular wall was increased, while the probability of internal boundary membrane resection was mostly in the fluence range of 28.4 J / cm 2 or more. Laser fluence for damage of the inner membrane layer was between 1.4 J / cm 2 and 3.6 J / cm 2 , and excision of the vascular wall was high fluence of high fluence between 3.6 J / cm 2 and 7.1 J / cm 2. It was markedly caused by the laser beam. If the least squares approximation for low fluence was attempted, the laser fluence thresholds for ablation of the internal boundary membrane and ablation of the vessel wall were determined to be 3.0 ± 0.8 J / cm 2 and 6.2 ± 2.0 J / cm 2 , respectively.

[실험예 4] 망막상 2차 혈관의 초고속레이저 절제시술 결과Experimental Example 4 Ultrafast Laser Ablation of Secondary Retinal Veins

망막상 2차 혈관의 벽두께는 내경계막 두께인 8.5 micron을 포함하여 약 16.3 micron이다. 초고속레이저 광선을 이용하여 돼지의 망막상 2차 혈관 벽의 절제 및 제거 수술에 대한 특성을 밝히기 위하여, 먼저 레이저 처리한 망막 조직을 고정한 후 20 ㎛의 두께로 연속적인 절편을 만들었다. 1차 혈관의 경우와 같이 낮은 레이저 플루언스에서 레이저 광선을 이용하여 혈관 표면의 손상을 일으키는 확률은 낮다. 하지만, 이러한 낮은 레이저 플루언스에서는 주로 글리아 세포층(glial cell layer)을 이루고 있는 내경계막 대부분에서 뚜렷하게 파괴되고 있음을 보여주고 있다. 한편 이러한 내경계막의 부분적인 제거가 있는 경우에도 타 조직에는 어떠한 광학적인 변화가 없음을 확인할 수 있었다.The wall thickness of the secondary vessel on the retina is about 16.3 microns, including 8.5 microns of the inner boundary membrane thickness. In order to elucidate the characteristics of the resection and removal of the retinal secondary vascular wall of pigs using ultrafast laser beam, laser-treated retinal tissues were first fixed, and continuous sections were made to a thickness of 20 μm. At low laser fluence, as in the case of primary vessels, the probability of damaging the surface of the vessel using a laser beam is low. However, this low laser fluence shows that most of the inner boundary membranes that form the glial cell layer are clearly destroyed. On the other hand, even when there is a partial removal of the internal boundary membrane, it was confirmed that there is no optical change in other tissues.

더욱더 높은 레이저 플루언스의 단일 펄스 레이저 광선은 더욱 큰 확률을 갖고 내경계막 층을 제거될 수 있음을 보여주는 것으로, 더 높은 42.6 J/cm2의 레이저 플루언스의 단일 펄스 레이저 광선은 혈관 벽의 뚜렷한 절단 손상이 연속적으로 관찰되는 것을 볼 수 있었다. A single pulsed laser beam of higher laser fluence shows a greater probability that the inner layer layer can be removed and a higher 42.6 J / cm 2 laser fluence of single pulsed laser beam produces a clear It can be seen that cutting damage is observed continuously.

초고속레이저에 의한 단일 펄스 레이저 광선을 이용한 망막 조각의 동결절편은 임의적으로 아무런 변화 없는 절편과 내경계막만의 절제된 절편, 혈관벽의 절제된 절편 세 그룹으로 나누었다. 도 8의 그래프에서는 상기 세 그룹의 손상의 통계적인 상호관계를 보여준다. 3.6 J/cm2 내지 71.0 J/cm2 플루언스 범위에서 혈관벽의 절제 확률은 증가하였고, 내경계막층의 손상에 대한레이저 플루언스는 1.5 J/cm2 내지 2.0 J/cm2 사이의 값을 가진다. 하지만, 혈관벽의 절제는 3.0 J/cm2 내지 6.7 J/cm2사이의 높은 플루언스의 초고속레이저 광선에 의해 현저하게 일어난다. 만약에 낮은 플루언스에서 최소자승 근사법을 이용하여 플롯(plot)하면, 내경계막의 절제와 혈관벽의 절제가 일어나는 임계 플루언스의 값은 1.27 ± 0.47 J/cm2 와 4.88 ± 1.86 J/cm2로 추측할 수 있다.Frozen sections of retinal slices using a single pulsed laser beam by ultrafast laser were divided into three groups: one without any change, one with internal boundary membrane, and one with vessel wall. The graph of Figure 8 shows the statistical interrelationship of the three groups of damage. The probability of ablation of the vessel wall was increased in the range of 3.6 J / cm 2 to 71.0 J / cm 2 fluence, and the laser fluence for damage of the inner membrane layer was between 1.5 J / cm 2 and 2.0 J / cm 2. . However, ablation of the vessel wall is markedly caused by high fluence ultrafast laser beams between 3.0 J / cm 2 and 6.7 J / cm 2 . If you plot using a least-squares approximation at low fluences, the critical fluences at which the internal membrane and excision of the vessel wall occur are 1.27 ± 0.47 J / cm 2 and 4.88 ± 1.86 J / cm 2 . I can guess.

[실험예 5] 망막상 3차 혈관의 초고속레이저 절제시술 결과Experimental Example 5 Ultrafast Laser Ablation of Tertiary Vein

망막상 3차 혈관의 벽 두께는 내경계막 두께인 6.9 micron을 포함하여 약 13.6 micron이다. 앞서 2차 혈관과 동일 방법으로 초고속레이저 광선을 이용하여 돼지의 망막상 3차 혈관 벽을 실험하기 위해, 레이저를 조사한 후 망막 조직을 20 ㎛의 두께로 연속적인 절편을 만들었다. 도 9는 이 조직 절편의 조직학적인 사진을 보여준다. 1차 및 2차 혈관의 경우와 같이 낮은 레이저 플루언스에서 레이저 광선을 이용하여 혈관 표면의 손상을 일으키는 확률은 낮았지만 망막에 3.6 J/cm2이하의 레이저 플루언스에 해당하는 에너지의 초고속레이저 펄스를 조사하는 경우에도 내경계막의 뚜렷한 파괴가 있음을 확인할 수 있었다. 하지만 이 경우에도 기저층 조직이나 타조직에 어떠한 손상 흔적이 없음을 관찰할 수 있었다. 초고속레이저에 의한 단일 펄스 레이저 광선을 처리한 망막 조각의 동결절편은 임의적으로 아무런 변화 없는 절편과 내경계막만의 절제된 절편, 혈관벽의 절제된 절편 세 그룹으로 나누었다. 도 10의 그래프에서는 상기 세 그룹의 손상의 통계적인 상호관계를 보여 준다. 3.6 J/cm2 내지 56.8 J/cm2 플루언스 범위에서 혈관벽의 절제 확률은 증가하였다. 낮은 플루언스에서 최소자승 근사법을 이용하여 플롯(plot)하면, 내경계막의 절제와 혈관벽의 절제가 일어나는 임계 플루언스의 값은 0.69 ± 0.14 J/cm2 와 2.53 ± 1.22 J/cm2로 결정할 수 있다.The wall thickness of the retinal tertiary vessel is about 13.6 microns, including 6.9 microns, the thickness of the internal border membrane. In order to test the retinal tertiary vessel wall of pigs using ultrafast laser light in the same manner as the secondary vessel, the retinal tissues were continuously sliced to a thickness of 20 μm after laser irradiation. 9 shows a histological picture of this tissue section. At low laser fluence, as in the case of primary and secondary vessels, the probability of damaging the surface of the vessel using the laser beam was low, but the ultrafast laser pulse of energy corresponding to the laser fluence below 3.6 J / cm 2 was applied to the retina. In the case of irradiation, it was confirmed that there was a marked destruction of the inner membrane. However, even in this case, there was no evidence of damage to the basement tissue or other tissues. Frozen sections of retinal slices treated with a single pulsed laser beam by ultrafast laser were divided into three groups: one without any change, one with internal border membrane and one with vessel wall. The graph of FIG. 10 shows the statistical interrelationship of the damages of the three groups. In the range of 3.6 J / cm 2 to 56.8 J / cm 2 fluence, the excision probability of the vessel wall was increased. Plotting using a least-squares approximation at low fluence, the critical fluences at which the internal boundary membrane and the vessel wall are excised can be determined as 0.69 ± 0.14 J / cm 2 and 2.53 ± 1.22 J / cm 2 . have.

[실험예 6] 망막상 4차 혈관의 초고속레이저 절제시술 결과Experimental Example 6 Ultrafast Laser Ablation of Retinal Fourth Vessel

망막상 4차 혈관의 벽두께는 내경계막의 두께인 7.1 micron을 포함하여 약 12.3 micron으로써 3차 혈관과 그 구조적인 형태가 매우 흡사하다. 앞서 다른 유형의 혈관과 동일 방법으로 초고속레이저 광선을 이용하여 돼지의 망막상 4차 혈관벽을 실험하기 위해, 레이저를 조사한 후 망막 조직을 20 ㎛의 두께로 연속적인 절편을 만들었다. 도 11은 이 조직 절편의 조직학적인 사진을 보여준다. 타 유형의 혈관의 경우와 같이 낮은 레이저 플루언스에서 레이저 광선을 이용하여 혈관 표면의 손상을 일으키는 확률은 낮았지만, 망막에 0.36 J/cm2의 레이저 플루언스 이용한 내경계막의 뚜렷한 파괴는 기저층 조직이나 타조직에 어떠한 손상 흔적 없이 관찰할 수 있었다. 초고속레이저에 의한 단일 펄스 레이저 광선을 이용한 망막 조각의 동결절편은 임의적으로 아무런 변화 없는 절편과 내경계막만의 절제된 절편, 혈관벽의 절제된 절편 세 그룹으로 나누었다. 도 12의 그래프에서는 상기 세 그룹의 손상의 통계적인 상호관계를 보여준다. 3.6 J/cm2 내지 28.4 J/cm2 플루언스 범위에서 혈관벽의 절제 확률은 증가하였다. 낮은 플루언스에서 최소자승 근사법을 이용하여 plot하면, 내경계막의 절제와 혈관벽의 절제가 일어나는 임계 플루언스의 값은 0.15 ± 0.04 J/cm2 와 0.98 ± 0.6 J/cm2로 추측할 수 있다.The wall thickness of the retinal fourth vessels is about 12.3 microns, including 7.1 microns of the internal limiting membrane, which is very similar to the tertiary vessels. In the same way as the other types of blood vessels, in order to test the retinal fourth vessel wall of pigs using ultrafast laser light in the same manner, after the laser irradiation, the retinal tissue was made a continuous section of 20 ㎛ thickness. 11 shows a histological picture of this tissue section. As with other types of blood vessels, the probability of damaging the surface of the blood vessels by using laser beams was low at low laser fluences, but the apparent destruction of the internal boundary membranes with 0.36 J / cm 2 laser fluences in the retina was not significant. The tissues could be observed without any signs of damage. Frozen sections of retinal slices using a single pulsed laser beam by ultrafast laser were divided into three groups: one without any change, one with internal boundary membrane, and one with vessel wall. The graph of Figure 12 shows the statistical interrelationship of the three groups of damage. In the range of 3.6 J / cm 2 to 28.4 J / cm 2 fluence, the excision probability of the vessel wall was increased. Using the least squares approximation method at low fluence, the critical fluence values for the ablation of the internal boundary membrane and the ablation of the vessel wall can be estimated as 0.15 ± 0.04 J / cm 2 and 0.98 ± 0.6 J / cm 2 .

도 1은 본 발명에 따른 펨토초레이저를 이용한 망막상 혈관의 선택적 제거용 수술장치를 도식화한 것이고,1 is a schematic diagram of a surgical device for selective removal of retinal vessels using a femtosecond laser according to the present invention,

도 2는 안구 망막상 혈관을 검안경을 이용하여 관찰한 이미지이고,2 is an image of an ocular retinal vessel observed using an ophthalmoscope,

도 3은 안구 망막상 혈관을 동결절단하고 H&E 염색 후 광학현미경을 이용하여 관찰한 이미지이고,3 is an image observed using an optical microscope after cryocleaving the blood vessels of the eye retina and H & E staining,

(A: 4차 혈관, B: 3차 혈관, C: 2차 혈관, D: 1차 혈관)(A: 4th vessel, B: 3rd vessel, C: 2nd vessel, D: 1st vessel)

도 4는 안구 망막상 혈관을 810㎚ 파장의 단일 펄스 레이저 빔을 조사한 후 혈류량의 변화를 보여주는 이미지이고,4 is an image showing changes in blood flow after irradiating a single pulsed laser beam of 810 nm wavelength to the ocular retinal vessels,

(Scale bar: 100 ㎛)Scale bar: 100 μm

도 5는 150개의 적출된 돼지의 안구로부터 망막상 혈관의 혈관벽 및 내경계막의 두께를 혈관의 상태에 대하여 조사한 결과이고,5 is a result of examining the thickness of the blood vessel wall and the internal boundary membrane of the retinal blood vessels from the eyeballs of 150 extracted pigs for the state of blood vessels,

도 6은 펨토초레이저를 이용한 돼지의 망막상 혈관의 혈과벽에 대한 절제 및 제거 수술 후 혈관벽의 20 ㎛ 두께의 연속적인 절편의 조직학적 이미지를 보여주는 것이고,FIG. 6 shows histological images of 20 μm thick continuous sections of the vascular wall after resection and removal of the hematopoietic wall of porcine retinal vessels using femtosecond laser,

도 7은 펨토초레이저를 이용한 돼지 2차 혈관의 혈관벽에 대한 절제 및 제거 수술 후 2차 혈관벽의 20 ㎛ 두께의 연속적인 절편의 조직학적 이미지를 보여주는 것이고,FIG. 7 shows histological images of 20 μm thick continuous sections of the secondary vessel wall after resection and removal of porcine secondary vessels using femtosecond laser;

도 8은 펨토초레이저를 이용한 2차 혈관의 절제된 절편에서의 내경계막 및 혈관벽의 손상에 대한 통계적인 상호관계를 보여주는 그래프이고,FIG. 8 is a graph showing the statistical correlation of damage to the internal boundary membrane and blood vessel wall in the excised section of secondary vessels using femtosecond laser,

(■: 내경계막의 절제된 절편, ●: 혈관벽의 절제된 절편, ▲: 변화가 없는 절편)(■: excision of the internal limiting membrane, ●: excision of the blood vessel wall, ▲: excision without change)

도 9는 펨토초레이저를 이용한 돼지 3차 혈관의 혈관벽에 대한 절제 및 제거 수술 후 2차 혈관벽의 20 ㎛ 두께의 연속적인 절편의 조직학적 이미지를 보여주는 것이고,9 shows histological images of 20 μm thick continuous sections of the secondary vessel wall after resection and removal of the porcine tertiary vessel using femtosecond laser.

도 10은 펨토초레이저를 이용한 3차 혈관의 절제된 절편에서의 내경계막 및 혈관벽의 손상에 대한 통계적인 상호관계를 보여주는 그래프이고,FIG. 10 is a graph showing the statistical correlation between damage of the internal boundary membrane and blood vessel wall in the resected section of the tertiary vessel using femtosecond laser,

(■: 내경계막의 절제된 절편, ●: 혈관벽의 절제된 절편, ▲: 변화가 없는 절편)(■: excision of the internal limiting membrane, ●: excision of the blood vessel wall, ▲: excision without change)

도 11은 펨토초레이저를 이용한 돼지 4차 혈관의 혈관벽에 대한 절제 및 제거 수술 후 2차 혈관벽의 20 ㎛ 두께의 연속적인 절편의 조직학적 이미지를 보여주는 것이고,FIG. 11 shows a histological image of a 20 μm thick continuous section of the secondary vessel wall after resection and removal of the pig vessel fourth vessel using femtosecond laser.

도 12는 펨토초레이저를 이용한 4차 혈관의 절제된 절편에서의 내경계막 및 혈관벽의 손상에 대한 통계적인 상호관계를 보여주는 그래프이고,FIG. 12 is a graph showing the statistical correlation between damage of the internal boundary membrane and the vessel wall in the excised section of the fourth vessel using femtosecond laser,

(■: 내경계막의 절제된 절편, ●: 혈관벽의 절제된 절편, ▲: 변화가 없는 절편)(■: excision of the internal limiting membrane, ●: excision of the blood vessel wall, ▲: excision without change)

도 13은 돼지 안구의 망막상 혈관 유형에 따른 내경계막 제거 및 혈관벽의 절제에 대한 펨토초레이저의 임계 플루언스값을 유형별로 보여주는 그래프이다.FIG. 13 is a graph showing critical fluence values of femtosecond lasers for type of retinal vascular removal and resection of blood vessels according to retinal vessel types of porcine ocular.

(■: 내경계막의 절제된 절편, ●: 혈관벽의 절제된 절편)(■: excision of the internal limiting membrane, ●: excision of the vessel wall)

Claims (10)

레이저 빔을 발생시키는 레이저 시스템;A laser system for generating a laser beam; 상기 레이저 광원으로부터의 레이저 빔을 집속하기위한 광학계; An optical system for focusing the laser beam from the laser light source; 망막상 혈관을 포함한 조직을 위치제어하는 스테이지; 및 Positioning the tissue including retinal vessels; And 망막상 혈관을 포함한 조직을 모니터링하는 모니터링 장치;A monitoring device for monitoring tissue including retinal vessels; 를 포함하여 구성되며, It is configured to include, 상기 레이저 빔 시스템은 망막 중심으로부터 나온 1차 혈관(primary blood vessel), 상기 1차 혈관으로부터 분지된 2차 혈관(secondary blood vessel), 상기 2차 혈관으로부터 분지된 3차 혈관(tertiary blood vessel) 및 상기 3차 혈관으로부터 분지된 4차 혈관(quaternary blood vessel)으로 구성된 혈관 유형을 갖는 망막상 혈관을 제거 대상으로 하여, 상기 혈관 유형별로 상기 레이저 빔 플루언스를 조절하는 레이저 제어부를 포함하는 것을 특징으로 하는 망막상 혈관의 선택적 제거용 수술장치.The laser beam system comprises a primary blood vessel from the center of the retina, a secondary blood vessel branched from the primary vessel, a tertiary blood vessel branched from the secondary vessel and And a laser controller for controlling the laser beam fluence for each of the vessel types by removing a retinal vessel having a vessel type composed of a quaternary blood vessel branched from the tertiary vessel. Surgical device for selective removal of retinal vessels. 제 1항에 있어서, The method of claim 1, 상기 혈관은 하기 식 1 내지 4 모두를 만족하는 망막상 혈관인 것을 특징으로 하는 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치.The blood vessel is a surgical device for selective removal of retinal vessels, characterized in that the retinal vessels satisfying all of the following formula 1 to 4. [식 1] [Equation 1] 9.6 < H1 < 10.4 (H1은 1차 혈관의 두께이다.) 9.6 <H 1 <10.4 (H 1 is the thickness of the primary vessel) [식 2][Equation 2] 7.7 < H2 < 8.0 (H2는 2차 혈관의 두께이다.)7.7 <H 2 <8.0 (H 2 is the thickness of the secondary vessel) [식 3][Equation 3] 5.8 < H3 < 7.5 (H3은 3차 혈관의 두께이다.)5.8 <H 3 <7.5 (H 3 is the thickness of the tertiary vessel) [식 4][Equation 4] 4.8 < H4 < 6.8 (H4는 4차 혈관의 두께이다.)4.8 <H 4 <6.8 (H 4 is the thickness of the fourth vessel) 제 2항에 있어서,3. The method of claim 2, 혈관 유형별로 제어되는 상기 레이저 빔의 플루언스(F)는 1차 혈관 3.6 내지 99.4 J/cm2, 2차 혈관 3.6 내지 71.0 J/cm2, 3차 혈관 3.6 내지 56.8 J/cm2 및 4차 혈관 3.6 내지 28.4 J/cm2인 것을 특징으로 하는 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치.The fluence (F) of the laser beam, which is controlled for each vessel type, is 3.6 to 99.4 J / cm 2 for the primary vessel, Surgical device for selective removal of retinal vessels, characterized in that the secondary vessel 3.6 to 71.0 J / cm 2 , the third vessel 3.6 to 56.8 J / cm 2 and the fourth vessel 3.6 to 28.4 J / cm 2 . 제 1항에 있어서,The method of claim 1, 상기 제거대상은 혈관의 내경계막인 것을 특징으로 하는 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치.The removal object is a surgical device for selective removal of retinal vessels, characterized in that the inner membrane of the blood vessels. 제 4항에 있어서,The method of claim 4, wherein 혈관 유형별로 제어되는 상기 레이저 빔의 플루언스(F)는 1차 혈관 3.0 ± 0.8 J/cm2, 2차 혈관 1.27 ± 0.47 J/cm2, 3차 혈관 0.69 ± 0.14 J/cm2 및 4차 혈관 0.15 ± 0.04 J/cm2인 것을 특징으로 하는 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치.The fluence (F) of the laser beam, controlled by vessel type, is: primary vessel 3.0 ± 0.8 J / cm 2 , secondary vessel 1.27 ± 0.47 J / cm 2 , tertiary vessel 0.69 ± 0.14 J / cm 2, and quadratic Surgical device for selective removal of retinal vessels, characterized in that the blood vessels 0.15 ± 0.04 J / cm 2 . 제 1항에 있어서,The method of claim 1, 상기 제거대상은 혈관의 혈관벽인 것을 특징으로 하는 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치.The removal object is a surgical device for selective removal of retinal vessels, characterized in that the blood vessel wall of the blood vessels. 제 6항에 있어서,The method of claim 6, 혈관 유형별로 제어되는 상기 레이저 빔의 플루언스(F)는 1차 혈관 6.2 ± 2.0 J/cm2, 2차 혈관 4.88 ± 1.86 J/cm2, 3차 혈관 2.53 ± 1.22 J/cm2 및 4차 혈관 0.98 ± 0.6 J/cm2인 것을 특징으로 하는 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치.The fluence (F) of the laser beam, controlled by vessel type, is: primary vessel 6.2 ± 2.0 J / cm 2 , secondary vessel 4.88 ± 1.86 J / cm 2 , tertiary vessel 2.53 ± 1.22 J / cm 2, and quadratic Surgical device for selective removal of retinal vessels, characterized in that the blood vessel 0.98 ± 0.6 J / cm 2 . 제 1항에 있어서, The method of claim 1, 상기 레이저 빔은 근적외선 영역의 레이저 빔인 것을 특징으로 하는 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치.The laser beam is a surgical device for selective removal of retinal vessels, characterized in that the laser beam in the near infrared region. 제 8항에 있어서, The method of claim 8, 상기 레이저 빔은 펨토초 단일 펄스 레이저 빔인 것을 특징으로 하는 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치.The laser beam is a femtosecond single-pulse laser beam surgical device for selective removal of retinal vessels, characterized in that. 제 9항에 있어서,The method of claim 9, 상기 레이저 빔은 펄스폭이 100 내지 200 fs 이고, 파장이 780 내지 840㎚인 것을 특징으로 하는 망막상혈관의 선택적 제거용 수술장치.The laser beam has a pulse width of 100 to 200 fs, the wavelength of 780 to 840nm surgical device for selective removal of retinal vessels, characterized in that.
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KR101245190B1 (en) * 2011-01-14 2013-03-20 한국표준과학연구원 Enhancement of retina imaging quality and microsurgery resolution by using optically filtered LED light having maximum absorption by blood in retina vessels
KR101417843B1 (en) * 2012-07-13 2014-07-14 주식회사 루트로닉 Apparatus for treating ocular

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KR101245190B1 (en) * 2011-01-14 2013-03-20 한국표준과학연구원 Enhancement of retina imaging quality and microsurgery resolution by using optically filtered LED light having maximum absorption by blood in retina vessels
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