KR20090072079A - Soybean fermented milk using starter of streptococci and preparing method thereof - Google Patents

Soybean fermented milk using starter of streptococci and preparing method thereof Download PDF

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Abstract

Soybean fermented milk using Streptococcus spp. lactobacillus starter and a preparation method thereof are provided to secure high content of genistein, daidzein and glycitein as well as cancer-preventive effects. A method for preparing soybean fermented milk comprises the following steps of: adding distilled water 2.8-3.2 times the amount of dried soybeans and dipping the soybeans at 92-96°C for 30 minutes; removing the skins and embryos of the soybeans; re-adding the distilled water 3.8-4.2 times the amount of dried soybeans and warming them up at 92-96°C; pulverizing and extracting the soybeans to obtain soy milk; homogenizing the soy milk at 140-160 bar and sterilizing it at high temperature; inoculating one or more lactobacillus starters selected from the group consisting of Streptococcus thermophilus 3 and Streptococcus thermophilus St-body-1 and fermenting the inoculated soy milk at 28-32°C for 24 hours.

Description

스트렙토코커스속 유산균 스타터를 이용한 두유발효유 및 그 제조방법{Soybean fermented milk using starter of Streptococci and Preparing method thereof}Soybean fermented milk using starter of Streptococci and Preparing method according to Streptococcus lactobacillus starter

본 발명은 스트렙토코커스 유산균을 이용하여 제조한 두유발효유 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게 설명을 하면, 연쇄상구균(Streptococci)인 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상을 함유하는 단종 또는 혼합유산균으로 발효시킨 것을 특징으로 하는 두유발효유 및 그 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a soymilk fermented milk prepared using Streptococcus lactobacillus and a method for manufacturing the same, and more specifically, Streptococcus thermophilus 3 ( Streptococcus ), which is Streptococci thermophilus 3) and Streptococcus thermophilus Stbody-1 ( Streptococcus It relates to a soybean milk fermented milk characterized in that the fermented with single or mixed lactic acid bacteria containing at least one selected from thermophilus Stbody-1) and a method for producing the same.

일반적으로 두유발효식품에 포함한 대두 이용 제품에서 발생하는 풋(날취, 생콩취)냄새 혹은 콩비린내(beany flavor) 등의 이취로 인하여 이취에 민감한 사람들에게 거부감을 일으켜서 두유발효식품을 외면하였다. 본 발명에서는 특정 유산균을 선택적으로 사용하여 두유발효유을 제조함으로써, 두유발효유의 이취를 제거하고 또한 소화율을 높이면서 생리활성 개선에 효과가 있는 비배당체(aglycones)형태 이소플라본의 함유량이 매우 높은 두유발효유를 제공하고자 한 다.Generally, soy milk fermented foods have been rejected by people who are sensitive to odors due to off-flavors such as green (raw, raw soy) smells or beany flavors that occur in soy milk products. In the present invention, by producing a soy milk fermented milk selectively using a specific lactic acid bacteria, soy milk fermented milk having a very high content of aglycones type isoflavones that is effective in removing the off-flavor of soy milk fermented milk and improving digestion rate and improving physiological activity. To provide.

대두는 옛부터 우리민족이 재배하고 섭취해온 우리민족의 식생활에서는 없어서는 안될 중요한 식품의 재료이다. 대두단백은 필수아미노산을 풍부하게 함유하고 있는 식물성 단백으로서 최근에는 동물성단백의 대체식품으로서도 각광 받고 있으며, 생리활성 물질을 함유한 고기능성 식품으로서 간식이나 음료로도 많이 이용되고 있다. 특히 대두의 효능과 밀접한 관련이 있는 이소플라본은 배당체(glycoside)인 제니스틴(genistin), 다이진(daidzin), 글리시틴(glycitin)의 형태로 대두에 존재하고, 비배당체(aglycone)인 제니스테인(genistein), 다아제인(daidzein), 글리시테인(glycitein)을 및 이 밖의 여러 유도체 등으로 구성되어 있는데, 대두발효식품의 배당체는 미생물의 β-글루코시다제(glucosidase)에 의해 당잔기가 가수분해되어 체내에 흡수가 용이한 비배당체(aglycones)의 형태로 전환된다. 비배당체인 제니스테인(genistein)은 뛰어난 항암효과를 보이는데 그 효과 중 전립선암, 유방암의 예방효과가 높은 것으로 알려져 있다. 또한 여성호르몬인 에스트로겐(estrogen)과 유사한 작용 효과가 있기 때문에 폐경기 여성의 골다공증 예방과 진행억제에 그 효과가 크다고 알려져 있다. 그러나 대두에 존재하는 이소플라본은 대부분이 제니스틴(genistin), 다이진(daidzin), 글리시틴(glycitin)인 배당체로 존재하기 때문에 체내 흡수율이 높고, 인체에 유익한 성분인 비배당체의 함유성분이 높은 발효식품을 제공하는데는 그 한계가 있었다.Soybean is an important food ingredient that is essential to the diet of our people, which has been grown and consumed by our people since ancient times. Soy protein is a vegetable protein containing abundant essential amino acids, and has recently been in the spotlight as a substitute food of animal protein. It is also widely used as a snack or drink as a high functional food containing a bioactive substance. In particular, isoflavones, which are closely related to the efficacy of soybean, are present in soybeans in the form of glycosides, genistin, didzin, and glycidin, and non-glycone, genistein. genistein), daidzein, glycidin and many other derivatives. Soybean glycosides are hydrolyzed by the microbial β-glucosidase. And converted into aglycones that are easily absorbed into the body. Genistein, a non-glycoside, has an excellent anti-cancer effect, and is known to be highly effective in preventing prostate and breast cancer. In addition, since it has an effect similar to that of the female hormone estrogen, it is known to have a great effect on the prevention and progression of osteoporosis in postmenopausal women. However, since isoflavones present in soybeans exist mostly as glycosides such as genistin, didzin, and glycytin, they have high absorption rate in the body and high content of non-glycosides, which are beneficial to the human body. There was a limit to providing fermented foods.

두유의 경우, 특유의 콩 비린내(beany flavor)를 지니고 있는데, 이러한 두유의 이취를 개선하기 위하여, 유산균을 접종하여 발효시키는 단계를 포함하는 방법들이 개발되어 있다. 예를 들어, 대한민국 공개특허 제 1992-11383 호에 콩 요구르트 및 그의 제조방법이 개시되어 있고, 대한민국 공개특허 제 1999-008908 호에 효소 처리된 두유를 이용한 두유발효유의 제조방법이 개시되어 있으며, 대한민국 공개특허 제 1998-70641 호에는 발효두유 제조방법이 개시되어 있고, 대한민국 공개특허 제 2003-0097264 호에는 비피도박테리움속 유산균(Bifidobacterum)을 이용하여 이소플라본이 완전히 가수분해된 두유발효식품 및 그 제조방법이 개시되어 있고, 또한, 대한민국 등록번호 제 10-0773059 호에는 락토바실러스(Lactobacillus)를 이용한 유제품 등이 공지되어 있다.Soy milk has a unique beany flavor. In order to improve the off-flavor of soy milk, methods have been developed that include inoculating and fermenting lactic acid bacteria. For example, the Republic of Korea Patent Publication No. 1992-11383 discloses soybean yogurt and a method for producing the same, the Republic of Korea Patent Publication No. 1999-008908 discloses a method for producing soy milk fermented milk using enzyme-treated soy milk, Republic of Korea Korean Unexamined Patent Publication No. 1998-70641 discloses a method for producing fermented soymilk, and Korean Patent Publication No. 2003-0097264 discloses a soymilk fermented food in which isoflavones are completely hydrolyzed using Bifidobacterum spp. A manufacturing method is disclosed, and Korean Patent No. 10-0773059 discloses dairy products using Lactobacillus and the like.

그러나, 상기 공지의 두유발효유 특유의 콩 냄새 제거 및 체내에서 소화되지 않고 복부 팽만감을 유발시키는 α-D-갈라토실 올리고당(α-D-galactosyl oligosaccharides)의 분해, 체내 흡수가 용이하도록 비배당체 이소플라본으로의 전환율을 높이는 등의 문제를 개선하기 위하여 발효 등의 방법이 도입되긴 하였으나, 이를 완전히 극복하지 못하는 한계가 있었으며, 또한, 이소플라본의 전환율이 높은 특정 미생물을 사용하여 두유 등의 발효식품에 이용하는 방법이 요구되어오고 있다.However, the non-glycoside isoflavones are easy to decompose and absorb in the body so as to remove the soybean odor peculiar to the known soy milk fermented milk and cause abdominal bloating without digestion in the body. In order to improve the problem of increasing the conversion rate, such as fermentation method was introduced, but there was a limitation that could not be completely overcome. In addition, by using a specific microorganism with high conversion rate of isoflavone, it was used in fermented foods such as soymilk. There is a demand.

상기 문제점 및 요구를 해결하기 위하여 본 발명자들이 이소플라본 비배당체의 함유율이 높아서 이취가 제거된 그리고 인체에 유익한 성분이 다량 함유된 두유 발효유를 제공하기 위하여 끊임없이 연구한 결과, 스트렙토코커스속 유산균을 이용하여 비배당체의 함유성분이 높은 발효유 및 그 제조방법을 안출하게 되었다.In order to solve the above problems and demands, the present inventors have continuously studied to provide soymilk fermented milk containing a high content of isoflavone non-glycosides, which is free of odors and contains a large amount of beneficial ingredients to the human body, using Streptococcus lactic acid bacteria. Fermented milk with a high content of non-glycosides and a method for producing the same have been devised.

주 발효미생물로서 기존의 비피도박테리움속 또는 락토바실러스속 유산균이 아닌 스트렙토코커스속 유산균 중에서 이소플라본의 전환율을 높은 미생물을 찾아내어 이를 이용하여 이취가 거의 없고 이소플라본의 비배당체 함유량이 높은 두유발효식품을 제공하고자 한다.As a main fermentation microorganism, microorganisms with high conversion rate of isoflavones were found among the Streptococcus lactic acid bacteria, not Lactobacillus spp. Or Lactobacillus spp. To provide food.

본 발명은 스트렙토코커스속 유산균 스타터를 이용한 두유발효유 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 자세하게 설명을 하면,The present invention relates to a soymilk fermented milk using the Streptococcus lactic acid starter, and a method of manufacturing the same, which will be described in more detail.

이취가 적은 두유발효유 제조용 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상을 함유하는 단종 또는 혼합 유산균 스타터(starter)에 관한 것이며,To starter or mixed lactobacillus starters containing at least one selected from Streptococcus thermophilus 3 and Streptococcus thermophilus Stbody-1 for the production of low-odor soy milk fermented milk Is about

또한 본 발명은In addition, the present invention

스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코 커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상의 유산균을 함유하는 단종 또는 혼합 유산균 스타터(starter)로 발효시킨 두유발효유에 그 특징이 있다. Streptococcus thermophilus 3) and Streptococcus thermophilus Stbody-1 ( Streptococcus The soymilk fermented milk fermented by a single or mixed lactic acid starter containing one or more lactic acid bacteria selected from thermophilus Stbody-1) is characteristic.

또한, 본 발명은In addition, the present invention

두유에 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상의 단종 또는 혼합유산균 스타터를 접종시킨 후, 28 ~ 32℃에서 24 시간 동안 발효시킨 것을 특징으로 하는 두유발효유 제조방법에 관한 것이다. Streptococcus thermophilus 3 in soymilk 3) and Streptococcus thermophilus Stbody-1 ( Streptococcus The present invention relates to a method for producing soymilk fermented milk, characterized in that after inoculating at least one species or mixed lactobacillus starter selected from thermophilus Stbody-1), and fermenting for 24 hours at 28 ~ 32 ℃.

본 발명은 이소플라본의 배당체로부터 비배당체로의 전환율이 높은 스트렙토코구스속 유산균을 취사선택 및 이를 이용하여 두유발효유에 관한 것으로서, 본 발명의 두유발효유는 이취가 거의 없을 뿐만 아니라 나아가 제니스테인(genistein), 다아제인(daidzein), 글리시테인(glycitein)이 풍부하여 암 예방효과가 있다.The present invention relates to the selection and selection of Streptococcus lactic acid bacteria having a high conversion rate from the glycoside of isoflavone to the non-glycoside, and the soymilk fermented milk using the same. , Rich in dazezein, glycidin (glycitein) is effective in preventing cancer.

최근 웰빙(wellbeing)문화 추세에 따라 식물성 건강식품 중 특히 콩 식품에 대한 수요가 꾸준히 증가하고 있다. 이러한 콩 식품을 섭취하는 방법은 여러 가지가 있으나, 두부, 두유 등의 형태가 가장 대표적이라 할 수 있다. 특히, 두유는 휴대가 간편하고 시음이 편리하기 때문에 그 수요증가가 눈에 띄고 있는데, 이러한 추세에 따라 식품업계에서는 기능성 두유에 대한 연구 및 판매에 대한 노력을 꾸준히 해 오고 있다. 그러나, 두유 자체가 가지고 있는 풋(날취, 생콩취)냄새 및 콩 자체의 냄새로 인해서 그 식음에 거부감을 일으키는 경우가 종종 있는 바, 이러한 이취를 제거하는 방법이 문제시 되며, 또한 두유의 기능성 면을 극대화 시킬 수 있도록 이를 특정 미생물로 발효시킨 두유발효식품에 대한 식품업계 및 수요자의 요구가 증가되고 있는 바, 이러한 상기 문제점과 요구를 해결하고자 본 발명자들이 끊임없이 연구한 결과 아래와 같은 발명을 안출하게 된 것이다. Recently, as the wellbeing culture trend, the demand for vegetable health food, especially soybean food, is steadily increasing. There are many ways to eat these soy foods, but the most representative form of tofu, soy milk and the like. In particular, the demand for soy milk is easy to carry and the tasting is convenient, and according to this trend, the food industry has been making efforts to research and sell functional soy milk. However, the smell of soy milk itself and the smell of soybeans themselves and the smell of the soybeans often cause rejection of the food. Therefore, the method of removing these odors is problematic, and the functional aspect of soy milk is also problematic. The demand of the food industry and the consumer for fermented soy milk fermented with a specific microorganism to maximize the bar has been increased, and the present inventors have continuously studied to solve the above problems and demands. will be.

본 발명은 스트렙토코구스속 유산균을 이용한 두유발효유에 관한 것으로서 이하에서 자세하게 설명을 하겠다.The present invention relates to a soymilk fermented milk using the Streptococcus lactic acid bacteria will be described in detail below.

본 발명은The present invention

이취가 적은 두유발효유 제조용 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상을 함유하는 단종 또는 혼합 유산균 스타터(starter)에 관한 것이다.To starter or mixed lactobacillus starters containing at least one selected from Streptococcus thermophilus 3 and Streptococcus thermophilus Stbody-1 for the production of low-odor soy milk fermented milk It is about.

또한, 본 발명은 In addition, the present invention

스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상을 함유하는 단종 또는 혼합유산균 스타터로 발효시킨 두유발효유에 그 특징이 있다. Streptococcus thermophilus 3) and Streptococcus thermophilus Stbody-1 ( Streptococcus It is characterized by fermented soy milk fermented by single or mixed lactobacillus starter containing one or more selected from thermophilus Stbody-1).

유산균은 미생물 분류학상으로는 유박테리알레스목(Eubacteriales)에 포함되 며, 이 과는 락토바실레에족(Lactobacilleae)과 스트렙토코카시에족(Streptococcaceae)으로 크게 구분되는데, 전자에서는 락토바실루스속(Lactobacillus)이, 후자에서는 스트렙토코커스속(Streptococcus), 페디오코커스속(Pediococcus), 류코노스톡속(Leuconostoc)이 중요하다. 형태학상으로는 젖산 간균(桿菌:락토바실러스속)과 젖산 구균(球菌:스트렙토코커스속, 페디오코커스속, 류코노스톡속)으로 대별되고, 생리학적으로는 당을 혐기적으로 분해하여 주로 젖산만을 생성하는 호모(homo)발효균과, 젖산 외에 부산물(알코올, 이산화탄소 등)을 생성하는 헤테로(hetero)발효균으로 분류되며, 생성된 젖산의 광회전성 등에 의해서도 나누어진다Lactobacillus microbiological taxonomic triangulation oil cake said included in the Terry ALES neck (Eubacteriales), this and is there is classified into Lactococcus Basile the group (Lactobacilleae) and Group (Streptococcaceae) when streptomycin coca, the electronics in Lactobacillus (Lactobacillus) the latter in the Streptococcus (Streptococcus), five caucuses in Peddie (Pediococcus), current stock in Pocono (Leuconostoc) is important. In terms of morphology, they are classified into Lactic Acid Bacillus (Lactobacillus) and Lactic Acid Cocci (Streptococcus, Pediococcus, and Leukonostok). Are classified into homo-fermenting bacteria and hetero-fermenting bacteria that produce by-products (alcohol, carbon dioxide, etc.) in addition to lactic acid.

스트렙토코커스 써모필루스(Streptococcus thermophilus)는 상기에서 설명한 것과 같이 유산균에 속하는 미생물로서, 발효유 제조 시 발효과정에 중추적인 역할을 한다. 주로 Lactobacillus acidophillus나 Bifidobacteria와 혼합하여 유산균 스타터로 이용하는데 혼합유산균 스타터를 첨가하여 발효 시 대부분 스트렙토코커스 써모필루스(Streptococcus thermophilus) 에 의해 발효가 이루어기 때문에 완제품에서 유산균수 측정 시 스트렙토코커스 써모필루스(Streptococcus thermophilus)가 주로 검출된다.Streptococcus thermophilus (Steptococcus thermophilus) is a microorganism belonging to the lactic acid bacteria as described above, plays a pivotal role in the fermentation process in the production of fermented milk. It is mainly mixed with Lactobacillus acidophillus or Bifidobacteria to use as a lactic acid bacteria starter.By adding Lactobacillus starter, most of the fermentation is done by Streptococcus thermophilus during fermentation. Streptococcus thermophilus) is mainly detected.

발효유(fermented milk)는 우유, 염소젖, 말젖 등에 유산균 또는 효모를 배양, 유당(락토오스)을 발효시켜 유산이나 알코올을 생성시켜 특수한 풍미를 가지도록 만든 음료를 말하며, 발효유 중에서도 대표적인 식품인 요구르트(yogurt)는 동물성 우유 등을 이용한 발효유로서 요구르트의 제조에 쓰이는 일반적인 유산균은 불가리아 젖산간균(Lactobacillus bulgaricus), 스트렙토코커스 써모필루스(Streptococcus thermophilus), 호산성 젖산간균(L. acidophillus), 비피더스균(Bifidobacteria) 등을 사용한다.Fermented milk refers to a beverage made by culturing lactic acid bacteria or yeast in milk, goat's milk, horse's milk, etc., and fermenting lactose (lactose) to produce lactic acid or alcohol to have a special flavor. ) Is a fermented milk using animal milk, and the common lactic acid bacterium used in the production of yogurt is Lactobacillus bulgaricus ), Streptococcus thermophilus ), L. acidophillus , Bifidobacteria, and the like.

혼합배양은 단독배양보다 균주간의 상호보완적인 상승작용이 있어서 배양시간단축과 유용한 대사산물의 생성에도 유리하다. 그런 이유로 최근 단독배양보다는 혼합배양이 점점 증가되는 추세이다. 혼합배양에 주로 사용되는 락토바실러스속과 비피도박테리움속은 발효자체에 의미가 있는 것이 아니라 생균제(probiotics)로써 살아있는 미생물 자체가 우리 몸에 유익한 효능을 지니고 있기 때문에 혼합배양 시 스트렙토코커스 써모필루스(Streptococcus thermophilus)와 섞어서 발효에 이용된다. 그러나 락토바실러스속은 배양이 잘 되지 않아 목표로 하는 유산균수를 확보하기 힘들고, 비피도박테리움속은 절대혐기성미생물로서 혐기조건에서만 증식하기 때문에 일반적으로 제조사에서 보유하고 있는 배양탱크로 배양하기 힘들기 때문에 오히려 완제품에 후 첨가해주는 것이 효율적이다. 또한 락토바실러스속 중 몇몇 종은 두유에서 매우 잘 자라는 종도 있지만 제품화 시킬 경우 후산발효(배양종료 후 완제품이 유통되어지는 과정 중에 유산이 증가되어 산미가 발생하는 현상)가 강하여 원하지 않는 신맛을 내기 때문에 제품화시키는데 어려움이 따른다. 그러므로 본 발명은 스트렙토코커스 써모필루스(Streptococcus thermophilus) 단독배양으로 생리활성 및 이취를 저감화시키는 장점을 가지며, 하기 실시예 및 실험예를 통하여 스트렙토코커스 써모필루스 유산균을 이용하여 본 발명을 실시하였다.Mixed cultures have a complementary synergistic effect between strains than single cultures, which is advantageous for shortening the incubation time and producing useful metabolites. For this reason, mixed culture is increasing more recently than single culture. The Lactobacillus genus and Bifidobacterium genus, which are mainly used in the mixed culture, are not meaningful to the fermentation itself, but because the living microorganism itself as a probiotics has a beneficial effect on the body, the Streptococcus thermophilus ( Streptococcus thermophilus) is used for fermentation. However, because Lactobacillus genus is not well cultured, it is difficult to secure the target number of lactic acid bacteria, and Bifidobacterium genus is an absolute anaerobic microorganism, which grows only in anaerobic conditions. It is efficient to add after-product to finished product. In addition, some of the genus Lactobacillus grow very well in soymilk, but when they are commercialized, they are produced after fermentation (a phenomenon in which acidity is increased due to lactic acid increase during the distribution of the finished product after the end of culture), resulting in an undesired sour taste. Difficult to follow Therefore, the present invention has the advantage of reducing physiological activity and off-flavor by streptococcus thermophilus culture alone, using the Streptococcus thermophilus lactic acid bacteria through the following examples and experimental examples.

본 발명은 두유를 이용한 발효식품으로서, 일반적인 동물성 발효식품과는 달리 식물성 발효식품으로서, 기존에 동물성 발효식품에 사용된 유산균으로 식물성 발효식품을 제조 및 상업화 하기에는 어려운 점이 있었으며, 본 발명자들이 연구 및 실험을 통하여 두유를 발효시키기 위해서는 유산균의 선택이 중요함을 알게 되었고, 스트렙토코커스 중 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상의 단종 또는 혼합유산균을 이용하여 두유를 발효시키는 것이 바람직한데, 이들 스트렙토코커스는 α-갈락토시다제(α-galactosidase) 및 β-글루코시다제(β-glucosidase)의 생성율이 특히 높기 때문에 이소플라본의 배당체로부터 비배당체로의 전환율이 매우 높으며, 대표적인 이취성분인 n-헥사날(n-hexanal), 2-에틸퓨란(2-ethylfuran), 2-펜틸퓨란(2-penthylfuran), 2-헵타논(2-heptanone), 1-옥텐-3-올(1-octen-3-ol), 2-노나논(2-nonanone), 2-운데카논(2-undecanone), 벤즈알데하이드(benzaldehyde) 및 이들의 유도체 등의 두유발효유 내의 함유량을 최소화시킴으로서, 이취를 저감 또는 제거할 수 있기 때문이다. 또한, 높은 비배당체로의 전환율로 인하여, 인체에 유익한 성분인 제니스테인(genistein), 다이제인(daidzein), 글리시테인(glycitein) 등을 많이 함유할 수 있기 때문이다.The present invention is a fermented food using soy milk, unlike a general animal fermented food, as a vegetable fermented food, it was difficult to manufacture and commercialize a vegetable fermented food with lactic acid bacteria previously used in animal fermented foods, the present inventors research and experiment In order to ferment soy milk, it was found that the selection of lactic acid bacteria was important, and one selected from Streptococcus thermophilus 3 and Streptococcus thermophilus Stbody-1 among Streptococcus It is preferable to ferment soy milk using more than one species or mixed lactic acid bacteria, and these Streptococcus isoisolates are particularly high in the production rate of α-galactosidase and β-glucosidase. The conversion of flavone glycosides to nonglycosides is very high. N-hexanal, 2-ethylfuran, 2-pentylfuran, 2-heptanone, 2-heptanone, 1-octene-3- By minimizing the content in soy milk fermented milk, such as all- (1-octen-3-ol), 2-nonanone, 2-undecanone, benzaldehyde and derivatives thereof, This is because odor can be reduced or eliminated. In addition, due to the high conversion rate to the non-glycoside, it may contain a lot of beneficial ingredients such as genistein, (daidzein), glycidin (glycitein).

본 발명은 두유발효유에 관한 것으로서, The present invention relates to a soy milk fermented milk,

본 발명에 사용되는 두유는 이에 한정되는 것은 아니나, 강낭콩, 쥐눈이콩, 메주콩(백태), 풋콩, 잠두, 녹두, 완두콩, 선흑콩 및 올콩 등 중에서 선택된 1 종 이상으로 제조될 수 있는 것을 그 특징으로 하며, 단종의 콩을 이용하여 제조한 두유를 사용할 수 있고, 또한, 맛 또는 영양을 고려하여 2 종 이상의 콩을 이용하여 제조한 두유를 발효시켜서 두유발효유를 제조할 수 있다.Soy milk used in the present invention is not limited thereto, but characterized in that it can be produced by one or more selected from kidney beans, rat eye beans, soybeans (baektae), green soybeans, green beans, green beans, peas, sun black beans and ol beans. And, soymilk prepared using a single species of soybean can be used, and in consideration of taste or nutrition can be fermented soymilk prepared using two or more soybeans can be produced soymilk fermented milk.

또한, 본 발명의 두유발효유에 사용되는 두유는 상기 콩 이외에 호두, 땅콩, 카라멜, 검은깨 페이스트 및 백설탕 등을 더 포함하여 제조할 수 있다.In addition, the soy milk used in the soy milk fermented milk of the present invention may be prepared by further comprising walnut, peanut, caramel, black sesame paste and white sugar in addition to the soybean.

이하에서 본 발명의 두유발효유의 제조방법에 대해서 자세하게 설명을 하겠다.Hereinafter, a method for preparing the soymilk fermented milk of the present invention will be described in detail.

본 발명은 두유에 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상의 단종 또는 혼합 유산균 스타터를 접종시킨 후, 28 ~ 32℃에서 24 시간 정도 발효시킨 두유발효유 제조방법에 관한 것이다.The present invention is Streptococcus thermophilus 3 in soymilk 3) and Streptococcus thermophilus Stbody-1 ( Streptococcus It relates to a method for producing soymilk fermented milk fermented at 28 ~ 32 ℃ for 24 hours after inoculating at least one species or mixed lactic acid bacteria starter selected from thermophilus Stbody-1).

이를 더욱 상세하게 설명을 하면,If you explain this in more detail,

대두건조중량에 대하여 2.8 ~ 3.2배(volume/weight)의 증류수를 가한 후, 92 ~ 96 ℃에서 대두를 30 분 이상 침지 및 대두의 껍질과 씨눈을 제거하는 제 1 단계;A first step of adding 2.8 to 3.2 times (volume / weight) of distilled water relative to the dry weight of soybeans, immersing the soybeans at 92 to 96 ° C. for at least 30 minutes, and removing the shells and seeds of the soybeans;

제 1 단계의 상기 대두건조중량에 대하여 3.8 ~ 4.2배(volume/weight)의 증류수를 다시 가한 후, 92 ~ 96 ℃에서 대두를 가온, 분쇄 및 두유를 추출하는 제 2 단계;A second step of adding 3.8 to 4.2 times the volume / weight of distilled water to the soybean dry weight of the first step, and then heating, grinding and extracting soy milk at 92 to 96 ° C .;

제 2 단계의 상기 두유를 140 ~ 160 bar조건의 균질화 공정을 거친 후, 고압 멸균시키는 제 3 단계; A third step of high pressure sterilization of the soymilk of the second step after a homogenization process of 140 to 160 bar conditions;

제 3 단계의 고압 멸균된 두유에 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상의 단종 또는 혼합 유산균 스타터를 접종시킨 후, 28 ~ 32℃에서 24 시간 정도 발효시켜서 두유배양액을 제조하는 제 4 단계; Streptococcus thermophilus 3 in a third stage autoclaved soymilk 3) and a fourth soymilk culture solution prepared by inoculating at least one single or mixed lactobacillus starter selected from Streptococcus thermophilus Stbody-1 and fermenting at 28-32 ° C. for 24 hours. step;

제 4 단계의 발효된 두유배양액을 냉각한 후, 호두, 땅콩, 카라멜, 검은깨 페이스트 및 백설탕 중에서 선택된 1종 이상을 첨가하여 제조한 당액을 일정비율로 혼합한 다음 균질 및 숙성시키는 제 5 단계;A fifth step of cooling the fermented soymilk culture solution of the fourth step, mixing the sugar solution prepared by adding at least one selected from walnut, peanut, caramel, black sesame paste, and white sugar in a constant ratio, and then homogeneizing and ripening;

를 포함하는 것을 특징으로 하는 스트렌토코커스속 유산균 스타터를 이용한 두유발효유 제조방법에 관한 것이다.It relates to a soymilk fermented milk manufacturing method using a Streptococcus lactic acid bacteria starter comprising a.

여기서, 상기 제 1 단계에 있어서, 2.8 ~ 3.2배(volume/weight)의 증류수를 가하는 이유는 콩을 침지시키면 콩이 물을 콩 자체의 중량에 대하여 2 ~ 2.5배 정도 흡수하기 때문이다.Here, in the first step, the reason for adding distilled water of 2.8 to 3.2 times (volume / weight) is because soaking soybean absorbs water by 2 to 2.5 times the weight of the beans themselves.

상기 제 2 단계에 있어서, 상기 대두건조중량에 대하여 3.8 ~ 4.2배(volume/weight)의 증류수를 다시 가하는데, 콩 : 물 중량비가 1 : 7이 되어야 두유의 총고형분(total solid)이 10 %가 되어야 두유의 점도의 물성이 가장 적합하기 때문이다. 4.2 배 초과시 점도가 너무 묽어지는 문제가 발생하며, 3.8 배 미만시 점도가 너무 높은 문제가 발생하기 때문이다.In the second step, 3.8 ~ 4.2 times (volume / weight) of distilled water is added again to the soybean dry weight, soybean: water weight ratio of 1: 7 total solids (total solid) of 10% This is because the physical properties of the viscosity of the soy milk is most suitable. This is because when the viscosity is more than 4.2 times, the viscosity becomes too thin, and when the viscosity is less than 3.8 times, the viscosity is too high.

상기 제 4 단계에 있어서, 28 ~ 32℃ 더욱 바람직하게는 29~30?에서 발효시킬 수 있는데, 이때 28℃ 미만에서 발효시키면 발효온도가 낮아서 발효시간이 지연 되는 문제점이 발생하며, 32℃ 초과시 이취가 발생하는 문제가 발생한다.In the fourth step, it can be fermented at 28 ~ 32 ℃ more preferably 29 ~ 30 ℃, when the fermentation at less than 28 ℃ problem occurs that the fermentation time is delayed due to the low fermentation temperature, when the odor exceeds 32 ℃ A problem arises.

이하에서 실시예를 통하여 본 발명에 대하여 더욱 상세하게 설명하겠다. 그러나, 하기의 실시예가 본 발명의 권리범위를 한정하는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, the following examples do not limit the scope of the present invention.

제조예Production Example

두유원액의 제조Preparation of Soy Milk Solution

대두를 불순물을 제거한 후 세척하여 대두건조중량의 3배(v/w) 증류수를 가하여 95℃에서 30분간 침지시킨 후 껍질과 씨눈을 제거하고, 대두건조중량의 4배(v/w) 증류수를 다시 가하여 건조대두와 증류수의 비율이 최종적으로1 : 7이 되도록 조정한 다음 95℃ 수조에서 30분간 가온하여 분쇄기로 3,500rpm, 120 메쉬(mesh)로 2회 반복하여 분쇄하였다.Soybeans were washed after removing impurities, and then distilled water three times (v / w) of soybean dried and soaked at 95 ° C. for 30 minutes to remove shells and seeds, and distilled water four times (v / w) of soybean dried. After adding again, the ratio of dry soybeans and distilled water was finally adjusted to 1: 7, and then warmed in a 95 ° C. water bath for 30 minutes, and pulverized twice with 3,500 rpm and 120 mesh using a grinder.

추출된 두유는 원활한 균질화 공정(150bar)을 거친 후 121℃에서 15분간 고압 멸균하여 4℃에서 냉장 보관하였다. 두유원액 제조 시 수율은 대두건조중량의 5.5배였다. The extracted soy milk was autoclaved at 121 ° C. for 15 minutes after a smooth homogenization process (150 bar) and refrigerated at 4 ° C. The yield of soymilk concentrate was 5.5 times the dry weight of soybean.

유산균의 선택 및 배양Selection and Cultivation of Lactic Acid Bacteria

하기 표 1에 나타난 상업용 분말균주 28종을 멸균희석수(0.85%)에 녹여 BL agar plate에 도말한 후 혐기배양기에서 37℃에서 48 시간 동안 배양하였다. 그 후, 분리된 컬러니(colony)를 취하여 modified MRS broth에 1% 접종하여 혐기배 양기에서 37℃에서 24시간 동안 증균시킨 후 증균된 스트렙토코커스속 유산균(Streptococci)을 M17 agar plate에 도말하여 37℃에서 48 시간 동안 배양한 후 분리된 컬러니(colony)를 취하여 2 회 계대배양하였다. 28 commercial powder strains shown in Table 1 were dissolved in sterile dilution water (0.85%) and plated on a BL agar plate, and then incubated at 37 ° C. for 48 hours in an anaerobic incubator. Then, separated colonies were inoculated with 1% of modified MRS broth and incubated at 37 ° C. for 24 hours in an anaerobic culture. The expanded Streptococci were plated on M17 agar plate 37 After 48 hours of incubation, separated colonies were taken and passaged twice.

실험예Experimental Example

실험예Experimental Example 1 One

상기 두유원액을 이용하여 유산균주 28종의 생장력 및 산생성능을 측정하였다. 121℃에서 15분간 고압 멸균된 두유를 무균적으로 팔콘튜브(Falcon tube)에 30ml씩 분주하여 활성화된 유산균 189종을 각각 1% 접종한 후 37℃에서 24시간 배양하여 커드(curd)생성유무, pH, 산도를 측정하였으며, 그 결과는 하기 표 1에 나타내었다.Growth and acid production of 28 kinds of lactic acid bacteria were measured using the soymilk solution. 30 ml of autoclaved soymilk for 15 minutes at 121 ° C aseptically dispensed 189 kinds of activated lactic acid bacteria each 1% and incubated at 37 ° C for 24 hours to produce curd, pH and acidity were measured, and the results are shown in Table 1 below.

구 분division 제조사manufacturer RemarksRemarks 산도Acidity pHpH 커드발생여부Curd occurrence S-1S-1 Str . thermophilus ST-B01 Str . thermophilus ST-B01 Chr. HansenChr. Hansen 상업종균Commercial spawn 0.68 0.68 4.22 4.22 OO S-2S-2 Str . thermophilus ST-M3 Str . thermophilus ST-M3 Chr. HansenChr. Hansen 상업종균Commercial spawn 0.65 0.65 4.25 4.25 OO S-3S-3 Str . thermophilus TH-4 Str . thermophilus TH-4 Chr. HansenChr. Hansen 상업종균Commercial spawn 0.65 0.65 4.23 4.23 OO S-4S-4 Str . thermophilus STAM3 Str . thermophilus STAM3 Danisco(wisby)Danisco (wisby) 상업종균Commercial spawn 1.09 1.09 3.85 3.85 OO S-5S-5 Str . thermophilus TH-3 Str . thermophilus TH-3 Chr. HansenChr. Hansen 상업종균Commercial spawn 0.69 0.69 4.27 4.27 OO S-6S-6 Str . thermophilus ST-36 Str . thermophilus ST-36 Chr. HansenChr. Hansen 상업종균Commercial spawn 0.67 0.67 4.25 4.25 OO S-7S-7 Str . thermophilus St-body-2 Str . thermophilus St-body-2 Chr. HansenChr. Hansen 상업종균Commercial spawn 1.10 1.10 3.86 3.86 OO S-8S-8 Str . thermophilus St-body-1 Str . thermophilus St-body-1 Chr. HansenChr. Hansen 상업종균Commercial spawn 0.72 0.72 4.21 4.21 OO S-9S-9 Str . thermophilus ST-M6 Str . thermophilus ST-M6 Chr. HansenChr. Hansen 상업종균Commercial spawn 0.67 0.67 4.28 4.28 OO S-10S-10 Str . thermophilus ST2 Str . thermophilus ST2 Culture systemCulture system 상업종균Commercial spawn 0.68 0.68 4.28 4.28 OO S-11S-11 Str . thermophilus ST-1 Str . thermophilus ST-1 Culture systemCulture system 상업종균Commercial spawn 0.67 0.67 4.28 4.28 OO S-12S-12 Str . thermophilus 3 Str . thermophilus 3 Culture systemCulture system 상업종균Commercial spawn 0.65 0.65 4.28 4.28 OO S-13S-13 Str . thermophilus ST-5 Str . thermophilus ST-5 Culture systemCulture system 상업종균Commercial spawn 0.68 0.68 4.26 4.26 OO S-14S-14 Str . thermophilus 십승 Str . thermophilus tenus 십승요구르트Cruciform yogurt 상업종균  Commercial spawn   0.70 0.70 4.27 4.27 OO S-15S-15 Str . thermophilus St-body-3 Str . thermophilus St-body-3 Chr. HansenChr. Hansen 상업종균Commercial spawn 0.69 0.69 4.28 4.28 OO S-16S-16 Str . thermophilus A Str . thermophilus A Danisco(wisby)Danisco (wisby) 상업종균Commercial spawn 0.61 0.61 4.36 4.36 OO S-17S-17 Str . thermophilus Choozit 985 Str . thermophilus Choozit 985 Danisco(wisby)Danisco (wisby) 상업종균Commercial spawn 0.60 0.60 4.38 4.38 OO S-18S-18 Str . thermophilus LBB-36 Str . thermophilus LBB-36 LB bulgaricumLB bulgaricum 상업종균Commercial spawn 0.65 0.65 4.33 4.33 OO S-19S-19 Str . thermophilus LBB-554 Str . thermophilus LBB-554 LB bulgaricumLB bulgaricum 상업종균Commercial spawn 0.65 0.65 4.31 4.31 OO S-20S-20 Str . thermophilus TH-1 Str . thermophilus TH-1 Chr. Hansen (ABT-1)Chr. Hansen (ABT-1) 상업종균Commercial spawn 0.58 0.58 4.46 4.46 OO S-21S-21 Str . thermophilus TH-2 Str . thermophilus TH-2 Chr. Hansen (ABT-2)Chr. Hansen (ABT-2) 상업종균Commercial spawn 0.57 0.57 4.56 4.56 OO S-22 S-22 Str . thermophilus TH-5 Str . thermophilus TH-5 Chr. Hansen (ABT-5)Chr. Hansen (ABT-5) 상업종균Commercial spawn 0.63 0.63 4.38 4.38 OO S-23S-23 Str . thermophilus JST-1 Str . thermophilus JST-1 분리균주 (매일유업보유균주)Separated strains (daily dairy owned strains) MK-SW-001MK-SW-001 0.62 0.62 4.38 4.38 OO S-24S-24 Str . thermophilus JST-2 Str . thermophilus JST-2 분리균주 (매일유업보유균주)Separated strains (daily dairy owned strains) MK-SW-002MK-SW-002 0.68 0.68 4.22 4.22 OO S-25S-25 Str . thermophilus JST-3 Str . thermophilus JST-3 분리균주 (매일유업보유균주)Separated strains (daily dairy owned strains) MK-SW-003MK-SW-003 0.61 0.61 4.37 4.37 OO S-26S-26 Str . thermophilus JST-7 Str . thermophilus JST-7 분리균주 (매일유업보유균주)Separated strains (daily dairy owned strains) MK-SW-004MK-SW-004 0.67 0.67 4.27 4.27 OO S-27S-27 Str . thermophilus JST-8 Str . thermophilus JST-8 분리균주 (매일유업보유균주)Separated strains (daily dairy owned strains) MK-SW-005MK-SW-005 0.71 0.71 4.20 4.20 OO S-28S-28 Str . thermophilus JST-9 Str . thermophilus JST-9 분리균주 (매일유업보유균주)Separated strains (daily dairy owned strains) MK-SW-006MK-SW-006 0.66 0.66 4.30 4.30 OO

상기 표 1의 결과를 통하여, 두유에서의 산 생성 정도가 스트렙토코커스균들은 낮은 편이었으며, 28종 모두 커드(curd)를 생성하였다. 상기 표 1의 유산균들 대부분의 산도 및 pH가 유산균으로서 적합하나, 이 중 임의로 S-5, S-8, S-11, S-12, S-16을 선택하였으며, 이를 이용하여 하기 실험예 2의 α-갈락토시다제, β-글루코시다제의 역가측정 및 실험예 3의 휘발성 향미실험, 실험예 4의 이소플라본의 배당체에서 비배당체로의 전환측정실험을 행하였다.Through the results of Table 1, the acid production degree in soymilk was low in Streptococcus bacteria, all 28 species produced a curd (curd). Acidity and pH of most of the lactic acid bacteria of Table 1 are suitable as lactic acid bacteria, of which S-5, S-8, S-11, S-12, S-16 was selected arbitrarily, using the following Experimental Example 2 The titer of α-galactosidase and β-glucosidase and the volatile flavor test of Experimental Example 3, and the conversion of the isoflavone glycoside to the non-glycoside of Experimental Example 4 were measured.

실험예Experimental Example 2 2

α-α- 갈락토시다제Galactosidase 및 β- And β- 글루코시다제의Glucosidase 역가측정Activity test

상기에서 제조한 두유원액을 121℃에서 15분간 고압 멸균시킨 후, 멸균된 두유원액제조 하였다. 상기 멸균된 두유원액을 여과망을 이용하여 대두를 제거하고, 그 여과액의 염산(HCl)을 이용하여pH 3.5로 조절한 다음 침전된 단백질을 15분간 원심분리기를 이용하여 상층액을 회수한 후 pH를 6.5로 10N 수산화나트륨(NaOH)을 이용하여 조정한 후, 필터종이로 여과시켰다.The soymilk solution prepared above was autoclaved at 121 ° C. for 15 minutes, and then sterilized soymilk solution was prepared. The sterilized soybean milk solution was removed soybean using a filter network, adjusted to pH 3.5 with hydrochloric acid (HCl) of the filtrate, and the precipitated protein was recovered by supernatant using a centrifuge for 15 minutes. Was adjusted to 6.5 using 10N sodium hydroxide (NaOH), followed by filtration with filter paper.

조효소액은 modified MRS broth에서 상기 표 4의 유산균들 각각을 2회 계대배양한 후 두유원액에 37℃에서 24시간 배양하여 5분간 원심분리한 후 상등액을 엑스트라셀룰러(extracellular) 조효소액으로 사용하였다. 균체를 회수하여 인산나트륨 버퍼용액(sodium phosphate buffer, pH 6.0)로 2회 세척한 후 1% 리소자임(lysozyme)을 처리하여 37℃, 30분간 정치시킨 후 균체를 얼음상에서 초음파 세포파쇄기를 이용하여 1분간 분해처리시켰다. 그리고 다시 5분간 원심분리하여 상등액을 인트라셀룰러(intracellular) 조효소액으로 사용하였다. The coenzyme solution was subcultured twice in each of the lactic acid bacteria of Table 4 in a modified MRS broth, incubated in soymilk for 24 hours at 37 ° C., and centrifuged for 5 minutes, and the supernatant was used as an extracellular coenzyme solution. The cells were collected, washed twice with sodium phosphate buffer (pH 6.0), treated with 1% lysozyme, and allowed to stand at 37 ° C. for 30 minutes. It was digested for a minute. After centrifugation for 5 minutes, the supernatant was used as an intracellular coenzyme solution.

α-갈락토시다제(α-galactosidase) 활성 측정을 위하여 10mM p-니트로페닐- α-D-갈락토피라노사이드(p-nitrophenyl-α-D-galactopyranoside, 이하 "PNPG"로 칭한다. 제조사 : 미국Sigma Chemical Co.)를 함유한 50mM 인산나트륨 버퍼용액(pH 6.0) 50㎕와 β-글루코시다제(β-glucosidase) 활성 측정을 위해 10mM PNPG를 함유한 50mM 인산나트륨 버퍼용액(pH 6.0) 50㎕에 조효소액을 각각 50㎕씩 첨가하여 37℃에서 15분간 반응시킨 후 0.5M Na2CO3 용액 100㎕를 첨가하여 반응을 중지시켰다. α-갈락토시다제와 β-글루코시다제가 PNPG를 분해하면 p-니트로페놀(p-nitrophenol, 이하 "PNP"로 칭한다.)이 분리되면서 노란색을 나타내므로 역가가 높을수록 진한 노란색을 나타낸다.For measuring α-galactosidase activity, 10 mM p-nitrophenyl-α-D-galactopyranoside (hereinafter referred to as "PNPG") is referred to. 50 μl 50 mM sodium phosphate buffer solution (pH 6.0) containing Sigma Chemical Co.) and 50 mM sodium phosphate buffer solution (pH 6.0) containing 10 mM PNPG for measuring β-glucosidase activity 50 50 μl of the crude enzyme solution was added to the solution, and the reaction was stopped at 37 ° C. for 15 minutes. Then, 100 μl of 0.5 M Na 2 CO 3 solution was added to stop the reaction. When α-galactosidase and β-glucosidase decompose PNPG, p-nitrophenol (hereinafter referred to as "PNP") is separated and yellow, so that the higher the titer, the darker the yellow color.

유리된 PNP의 양을 414nm에서 흡광도를 측정하였고, 효소활성의 단위는 1분 동안에 1 μmole의 PNP를 유리시키는데 필요한 효소량을 1 unit으로 정의하였으며, 역가측정 결과는 하기 표 2에 나타내었으며, 하기 표 2의 측정 결과는 3회 측정한 결과의 평균값이다. The amount of free PNP was measured for absorbance at 414 nm, and the unit of enzymatic activity was defined as 1 unit of the amount of enzyme required to release 1 μmole of PNP for 1 minute, and the results of titer measurement are shown in Table 2 below. The measurement result of 2 is an average value of the results measured three times.

구 분division 균 종Fungal species α-갈락토시다제α-galactosidase β-글루코시다제β-glucosidase IntraIntra ExtraExtra IntraIntra ExtraExtra S-5S-5 Str . thermophilus TH-3 Str . thermophilus TH-3 -------- -------- -------- -------- S-8S-8 StrStr . . thermophilusthermophilus StSt -- bodybody -1-One 0.060.06 0.300.30 0.270.27 0.030.03 S-11S-11 StrStr . . thermophilusthermophilus STST -1-One 0.100.10 0.270.27 0.480.48 00 S-12S-12 StrStr . . thermophilusthermophilus 3 3 0.170.17 0.140.14 0.510.51 00 S-16S-16 StrStr . . thermophilusthermophilus A A 0.000.00 00 0.110.11 0.430.43

실험예Experimental Example 3 3

휘발성 향미성분 분석실험Volatile Flavor Component Assay

두유와 두유배양액의 휘발성향미성분을 추출하기 위해서 SPME(Solid Phase Microextraction)를 이용하였고, Carboxen-Polydimethylsiloxane(Carboxen-PDMS 75㎛) fiber를 사용하였다. 시료는 3℃에서 보관하고 실험을 수행하기 30분전에 상온에 꺼내놓았으며, 시간이 경과한 후 시료를 60㎖-vial에 20㎖을 넣고, 염화나트륨(NaCl) 2.00g과 내부표준물질로 1%의 제라니올(geraniol, 제조사 : 미국Sigma사)을 3.3㎍ 첨가한 뒤 60℃에서 45분 동안 평형상태에서 유지시킨 후 SPME fiber를 넣고 30분 동안 휘발성 향미성분을 흡착하였다. 탈착은 200℃의 GC-인젝터(GC-injector)에 넣고 크라이오-포커싱(Cryo-focusing)으로 5분간 진행하였다.Solid phase microextraction (SPME) was used to extract the volatile flavor components of soymilk and soymilk culture, and Carboxen-Polydimethylsiloxane (Carboxen-PDMS 75㎛) fiber was used. The sample was stored at 3 ° C and taken out at room temperature 30 minutes before the experiment. After a period of time, 20 ml of the sample was added to 60 ml-vial, 2.00 g of sodium chloride (NaCl) and 1% of internal standard. Geraniol of Geraniol (manufactured by Sigma, USA) was added to 3.3㎍ maintained at equilibrium for 45 minutes at 60 ℃ and then added SPME fiber adsorbed volatile flavor components for 30 minutes. Desorption was carried out in a GC-injector at 200 ° C. and proceeded for 5 minutes by cryo-focusing.

두유 및 두유배양액에서 분석대상 이취성분으로 8종을 선정하여 분석한 결과를 하기 표 3에 나타내었으며, 표 3의 결과를 살펴보면, 시료들의 관능적인 특성은 전체적으로 비피도박테리움속 유산균 시료들의 이취가 높은 편이었다. 스트렙토코커스속 유산균의 시료들에서는 콩 삶은 냄새 이외의 다른 특징적인 이취는 약하거나 거의 없는 편이었으나, 하기 표 3의 결과로 미루어 보아 2-ethylfuran, 2-pentylfuran, hexanal, 1-octen-3-ol은 두유배양액에서 상대적으로 다른 성분들에 비해 높게 검출되었다. 표 3의 수치 값은 Relative peak area를 의미하는 것으로 각 휘발성 성분의 peak area / Internal standard peak area 에 의해서 구한 값이다.In the soy milk and soy milk culture solution, the results of selecting 8 kinds of odorants for analysis were shown in Table 3 below. Looking at the results of Table 3, the sensory characteristics of the samples were significantly different from the off-flavor of lactic acid bacteria samples of Bifidobacterium. It was high side. In the samples of Streptococcus lactic acid bacteria, the characteristic off-flavor other than the soy boiled odor was weak or almost free, but the result of Table 3 shows 2-ethylfuran, 2-pentylfuran, hexanal, 1-octen-3-ol. Was detected higher in soymilk culture than in the other components. The numerical values in Table 3 refer to the relative peak areas, which are obtained from the peak area / internal standard peak area of each volatile component.

시료sample 2- ethylfuran2- ethylfuran 2- pentylfuran2- pentylfuran hexanal hexanal 2- heptanone2- heptanone 1-octen- 3-ol1-octen- 3-ol 2- nonanone2- nonanone 2- undecanone2- undecanone S-5S-5 49.349.3 26.9726.97 30.6830.68 0.390.39 37.2037.20 5.695.69 5.075.07 S-8S-8 7.43 7.43 24.12 24.12 4.83 4.83 6.77 6.77 32.78 32.78 13.65 13.65 5.11 5.11 S-11S-11 55.34 55.34 1.89 1.89 22.27 22.27 3.35 3.35 23.67 23.67 4.46 4.46 4.84 4.84 S-12S-12 8.99 8.99 16.16 16.16 2.99 2.99 4.96 4.96 23.78 23.78 6.51 6.51 4.52 4.52 S-16S-16 15.41 15.41 21.80 21.80 3.77 3.77 3.05 3.05 26.28 26.28 5.95 5.95 5.14 5.14 표준시료Standard Sample xx 37.38 37.38 5.80 5.80 0.73 0.73 31.07 31.07 xx 0.51 0.51

실험예Experimental Example 4 4

이소플라본 분석실험Isoflavone Assay

표 2의 유산균을 접종시켜 제조한 두유발효유 시료 1g에 내부표준용액(internal standard solution)를 0.1g을 넣고 아세토나이트릴(acetonitril) 7ml, 3차 증류수 3ml, 0.1N 염산 2ml을 첨가하여 보텍싱(vortexing)한 후 교반기를 사용하여 1시간 동안 교반시켰다. 그리고 5000rpm에서 10 분간 원심분리하여 상층약을 여과지로 거른 후 여액을 1ml 취하여 10 ml 시료병에 넣고 질소를 불어 넣어 용매를 제거했다. 용매가 제거되면 1ml 메탄올을 첨가하여 녹인 후 시린지 필터(Acrodisc, CR PTEE 0.2μm, 25mm syringe filter filtering)로 여과하여 HPLC 분석을 시행한 결과 두유발효유 시료의 이소플라본을 분석한 결과 유산균에 의한 발효과정시 하기 표 4에 이소플라본 분석실험 결과를 나타내었다. 0.1 g of an internal standard solution was added to 1 g of the soymilk fermented milk sample prepared by inoculating the lactic acid bacteria of Table 2, followed by vortexing by adding 7 ml of acetonitrile, 3 ml of tertiary distilled water, and 2 ml of 0.1N hydrochloric acid. vortexing) and then stirred for 1 hour using a stirrer. After centrifugation at 5000 rpm for 10 minutes, the supernatant was filtered through filter paper, 1 ml of the filtrate was taken into a 10 ml sample bottle, and nitrogen was blown to remove the solvent. After the solvent was removed, 1 ml of methanol was added to dissolve it, and then filtered through a syringe filter (Acrodisc, CR PTEE 0.2 μm, 25 mm syringe filter filtering) to perform HPLC analysis. As a result, the isoflavones of the soymilk fermented milk samples were analyzed. Table 4 shows the results of the isoflavone assay.

구 분division 비배당체Non-glycoside (( aglyconesaglycones )) β-글루코시드β-glucoside 아세틸-β-글루코시드(Acetyl-β-glucoside ( AcetylAcetyl -β--β- glucosideglucoside )) 말로니-β-Maloney-β- 글루코시드Glucoside (( MalonyMalony -β--β- glucosideglucoside )) 표준시약Standard reagent 5.285.28 81.9681.96 7.467.46 5.305.30 S-5S-5 50.3650.36 70.6170.61 5.235.23 3.393.39 S-8S-8 82.2082.20 7.947.94 5.755.75 4.114.11 S-11S-11 84.0284.02 5.075.07 7.677.67 3.233.23 S-12S-12 86.4986.49 7.177.17 2.772.77 3.573.57 S-16S-16 4.734.73 89.1289.12 2.402.40 3.743.74

상기 표 4의 표준시약은 유산균을 접종하여 배양하지 않은 두유원액을 의미한다. 즉, 최초의 두유원액에는 비배당체가 거의 없으나, S-5, S-8, S-11, S-12, S-16 의 유산균을 배양한 결과 상기 표 4와 같이 배당체가 비배당체로 전환되었음을 의미한다.The standard reagents of Table 4 refer to soy milk stock solutions that are not cultured by inoculating lactic acid bacteria. That is, the first soymilk solution contains little non-glycoside, but as a result of culturing the lactic acid bacteria of S-5, S-8, S-11, S-12, and S-16, the glycoside was converted to the non-glycoside as shown in Table 4 above. it means.

두유발효유의 제조Preparation of Soymilk Fermented Milk

실시예Example 1 및  1 and 실험예Experimental Example 5 5

상기 제조한 두유발효유에 상기 표 1에 나타난 S-5, S-8, S-11, S-12 및 S-16 유산균 각각을 1% 씩 인큘럼(Inoculum)에 접종시킨 후, 30℃에서 24 시간 동안 두유를 발효시켰다. 그런 다음 발효된 두유 각각을 매일유업 중앙연구소 관능패널 20명을 상대로 9 점법을 적용하여 관능검사를 실시하였고 평균점수를 계산하여 반올림, 반내림하였으며, 그 실험예 5의 결과는 하기 표 5에 나타내었다.The soymilk fermented milk prepared above was inoculated with 1% of each of S-5, S-8, S-11, S-12 and S-16 lactic acid bacteria shown in Table 1 in an inoculum, and then at 24 ° C. at 24 ° C. Soymilk was fermented for hours. Then, each of the fermented soy milk was subjected to sensory tests by applying the 9-point method to 20 sensory panels of Maeil Dairy Research Center. The average score was calculated and rounded up and down, and the results of Experiment 5 are shown in Table 5 below. It was.

시 료(30℃)Sample (30 ℃) 콩비린내Beany (( hexanalhexanal )(9점)(9 points) 전체적인 풍미(9점)Overall flavor (9 points) S-5S-5 44 77 S-8S-8 33 77 S-11S-11 55 77 S-12S-12 33 88 S-16S-16 55 66

상기 표 5의 실험예 5의 결과 S-8 및 S-12 의 콩비린내가 가장 적게 났으면, 특히 S-12의 경우 전체적인 풍미결과가 가장 좋았는 바, S-8 과 S-12를 선택하여 배양온도를 달리하여 발효시킨 두유 발효유를 제조하여 하기 실험예 6을 다시 실시하였다.As a result of Experiment 5 of Table 5, S-8 and S-12 had the least amount of soybeans, especially in the case of S-12, the overall flavor was the best, S-8 and S-12 was selected and cultured Soymilk fermented milk was prepared by fermenting at a different temperature to carry out the following Experimental Example 6.

실시예Example 2 및  2 and 실험예Experimental Example 6 6

상기 S-8 및 S-12 각각을 1% 씩 Inoculum에 접종시킨 후, 30℃, 37℃, 42℃에서 각각 배양한 후, 실험예 5와 동일한 방법으로 관능검사를 실시하였으며 그 결과는 하기 표 6에 나타내었다.After inoculating 1% each of S-8 and S-12 in Inoculum, and incubated at 30 ° C., 37 ° C., and 42 ° C., respectively, the sensory tests were performed in the same manner as in Experimental Example 5, and the results are shown in the following table. 6 is shown.

시 료sample 콩비린내(hexanal)(9점)Hexanal (9 points) 전체적인 풍미(9점)Overall flavor (9 points) S-8 (30℃)S-8 (30 ℃) 33 77 S-8 (37℃)S-8 (37 ℃) 66 66 S-8 (42℃) S-8 (42 ℃) 55 55 S-12 (30℃)S-12 (30 ℃) 33 88 S-12 (37℃)S-12 (37 ℃) 55 66 S-12 (42℃)S-12 (42 ℃) 66 55

상기 표 6에 나타난 관능검사 결과, 30℃의 배양온도에서 제조한 두유발효유가 37℃ 및 42℃에서 발효시킨 두유발효유보다 콩비린내가 적을 뿐만 아니라, 풍미가 좋다는 것을 확인할 수 있었다. 그 결과, 28 ~ 32℃, 가장 바람직하게는 29 ~ 30℃에서 발효시키는 것이 좋다는 것을 확인할 수 있다.As a result of the sensory test shown in Table 6, it was confirmed that the soybean milk fermented milk prepared at the culture temperature of 30 ℃ is less soybean odor, and the flavor is better than the soy milk fermented milk at 37 ℃ and 42 ℃. As a result, it can confirm that it is good to ferment at 28-32 degreeC, Most preferably, 29-30 degreeC.

상기 실험예 및 실험예들을 종합한 결과, S-8인 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 및 S-12인 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 유산균이 이취저감이 높고 및 미감이 풍부할 뿐만 아니라, 비배당체의 전환율이 매우 높기 때문에 건강식품인 두유발효유의 유산균 스타터로서 가장 적합하다는 결론을 얻을 수 있다.Experimental Example Experimental Example and the synthesized results, S-8 of Streptococcus write a brush loose Stbody-1 (Streptococcus thermophilus Stbody- 1) and S-12 of Streptococcus write a brush loose 3 (Streptococcus thermophilus 3) It is concluded that lactic acid bacteria are the most suitable as a starter for lactic acid bacteria of soymilk fermented milk, which is a health food because of its high off-flavor and rich taste and high conversion of non-glycosides.

따라서, 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 및 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 유산균을 스타터로 이용하여 두유발효유를 제조함으로써, 차후 상업적 성공이 기대된다.Thus, Streptococcus thermophilus Stbody-1 ( Streptococcus thermophilus Stbody-1) and Streptococcus write a brush loose 3 (Streptococcus thermophilus 3) The production of soy milk fermented milk using lactic acid bacteria as a starter is expected in the future.

Claims (4)

이취가 적은 두유발효유 제조용 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상을 함유하는 단종 또는 혼합 유산균 스타터(starter).Endogenous or mixed lactobacillus starters containing at least one selected from Streptococcus thermophilus 3 and Streptococcus thermophilus Stbody-1 for the production of low-odor, soy milk fermented milk. 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상을 함유하는 단종 또는 혼합 유산균 스타터로 발효시킨 것을 특징으로 하는 두유발효유. Streptococcus thermophilus 3) and Streptococcus thermophilus Stbody-1 ( Streptococcus Soymilk fermented milk characterized in that the fermented with a single or mixed lactobacillus starter containing at least one selected from thermophilus Stbody-1). 두유에 스트렙토코커스 써모필루스 3(Streptococcus thermophilus 3) 및 스트렙토코커스 써모필루스 Stbody-1(Streptococcus thermophilus Stbody-1) 중에서 선택된 1 종 이상의 단종 또는 혼합 유산균 스타터를 접종시킨 후, 28 ~ 32℃에서 24 시간 동안 발효시켜 제조된 것을 특징으로 하는 두유발효유 제조방법. Streptococcus thermophilus 3 in soymilk 3) and Streptococcus thermophilus Stbody-1 ( Streptococcus Thermophilus Stbody-1) Soymilk fermented milk manufacturing method characterized in that the inoculated at least one species or mixed incubator starter selected from the following, and then fermented for 24 hours at 28 ~ 32 ℃. 제 3 항에 있어서, 상기 두유는 The method of claim 3, wherein the soy milk is 대두건조중량에 대하여 2.8 ~ 3.2배(volume/weight)의 증류수를 가한 후, 92 ~ 96℃에서 대두를 30 분간 침지 및 대두의 껍질과 씨눈을 제거하는 제 1 단계;Adding a distilled water of 2.8 to 3.2 times (volume / weight) to soybean dry weight, and then immersing soybean for 30 minutes at 92 to 96 ° C. and removing skin and seeds of soybean; 제 1 단계의 상기 대두건조중량에 대하여 3.8 ~ 4.2 배(volume/weight)의 증류수를 다시 가한 후, 92 ~ 96℃에서 대두를 가온, 분쇄 및 두유를 추출하는 제 2 단계; 및A second step of adding 3.8 to 4.2 times distilled water with respect to the soybean dry weight in the first step, and then heating, grinding and extracting soy milk at 92 to 96 ° C; And 제 2 단계의 상기 두유를 140 ~ 160 bar 조건의 균질화 공정을 거친 후, 고압 멸균시키는 제 3 단계;A third step of high pressure sterilization of the soymilk of the second step after a homogenization process of 140 to 160 bar; 를 포함하여 제조된 것을 특징으로 하는 두유발효유 제조방법.Soy milk fermented milk manufacturing method characterized in that it comprises a.
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