KR20070032055A

KR20070032055A - 아미노알킬 글루코사미니드 포스페이트 화합물 및 그의용도

Info

Publication number: KR20070032055A
Application number: KR1020077002955A
Authority: KR
Inventors: 데이비드 에이. 존슨; 데이비드 에이치. 퍼싱
Original assignee: 코릭사 코포레이션
Priority date: 2004-07-08
Filing date: 2005-06-24
Publication date: 2007-03-20

Abstract

보조제 및 면역 효과기인 화합물을 기재하고 청구한다. 이 화합물은 면역화된 동물에서 항체 생산을 증강하고, 뿐만 아니라 사이토킨 생산을 자극하고, 대식세포를 활성화시킨다. 이 화합물을 보조제 및 면역 효과기로 사용하기 위한 조성물 및 방법도 기재되어 있다.

아미노알킬 글루코사미니드 포스페이트, 보조제, 면역 효과기

Description

아미노알킬 글루코사미니드 포스페이트 화합물 및 그의 용도{CERTAIN AMINOALKYL GLUCOSAMINIDE PHOSPHATE COMPOUNDS AND THEIR USE}

관련 출원 상호 참조

본원은 2003년 1월 6일자로 출원된 미국 가출원 60/438,585를 우선권 주장의 기초로 하는 2004년 1월 6일자로 출원된 미국 특허 출원 10/752,660의 일부 계속 출원이다. 상기 두 출원의 내용을 전부 본원에 혼입한다.

발명의 배경

톨 유사 수용체(Toll-like receptor,TLR)는 강력한 선천성 면역 반응과 관련 있고, 병원체에 유일한 독특한 구조 성분을 인지한다; 이 상호작용은 면역 시스템을 활성화된 상태로 만들고, 단기 및 장기 결과를 가져온다. 선천성 면역 반응의 약물학적 조작은 자기면역, 아토피, 악성 및 감염 질환에 대한 더 효과적인 백신 및 새로운 치료적 접근으로 이끌 수 있기 때문에 TLR의 효현제 및 길항제 개발에 중요한 관심이 있다. 톨 유사 수용체 효현제로 밝혀진 최초의 미생물 생성물은 그람음성세균에 특이적인 세균 막 성분인 LPS이고, 이것은 톨 유사 수용체 4(TLR-4)를 활성화시킨다. LPS는 강력한 면역조절제이긴 하지만, 전신성 염증 반응 증후군 유도를 포함해서 그의 극심한 독성 때문에 그의 의약적 사용은 제한된다. LPS의 생물학적 활성 내독성 서브구조 부분은 그람 음성 세균의 외막에 전체 구조를 앵커링하는 구실을 하는 포스포릴화 멀티플라이(multiply) 지방산 아실화 글루코사민 이당류인 지질-A이다. 지질 A의 독성 효과는 모노포스포릴 지질 A 화합물(MPL™ 면역 자극제; 코릭사 코포레이션(Corixa Corporation); 미국 워싱턴주 시애틀 소재)을 생성하는 지질 A의 선택적 화학적 개질에 의해 호전될 수 있다. MPL™ 면역 자극제 및 구조적 유사 화합물을 제조하는 방법 및 그것을 백신 보조제 및 다른 응용에 사용하는 방법은 기재되어 있다(참조: 예를 들어, 미국 특허 4,436,727; 4,877,611; 4,866,034 및 4,912,094; 4,987,237; 존슨(Johnson) 등, J Med Chem 42:4640-4649(1999) 및 울리치(Ulrich) 및 마이어즈(Myers), Vaccine Design: The Subunit and Adjuvant Approach; 포웰(Powell) 및 뉴맨(Newman) 편집; 플럼(Plenum): 뉴욕, 495-524, 1995). 특히, 이들 참고 문헌 및 다른 참고 문헌은 MPL™ 면역 자극제 및 관련 화합물이 항원에 대한 체액성 및(또는) 세포 매개 면역을 증진시키는 단백질 및 탄수화물 항원과 백신 제제에 사용될 때 중요한 보조제 활성을 가지고 톨 유사 수용체와 상호작용한다는 것을 입증하였다.

MPL™ 면역 자극제 및 다른 세균 세포벽 성분을 이용한 경험으로부터, 아미노알킬 글루코사미니드 포스페이트(AGP)라는 신규 합성 화합물군을 개발하였다. 또한, AGP 화합물은 TLR-4와 효현제 및 길항제로서 상호작용한다. AGP는 비시클릭 및 시클릭 화합물 둘 모두를 포함한다(미국 특허 6,113,918 및 6,303,347, WO 98/50399(1998년 10월 12일자로 공개됨), WO 01/34617(2001년 5월 17일자로 공개됨), WO 01/90129(2001년 11월 29일자로 공개됨), 및 WO 02/12258(2002년 2월 14일 자로 공개됨)). MPL™ 면역 자극제와 마찬가지로, 이 화합물은 백신 조성물에서 항원과 함께 제제화될 때 중요한 보조제 특성을 보유하고, 게다가 MPL™ 면역 자극제와 비교할 때 유사하거나 또는 개선된 독성 프로필을 가진다는 것이 입증되었다. 또, AGP는 점막 보조제 활성을 나타내고 항원 부재시에 효과적이어서, 그들은 예방 및(또는) 치료 용도로 관심을 끄는 화합물이다.

AGP에 의해 제공되는, MPL™ 면역 자극제 및 유사 물질보다 나은 다른 한 중요한 이점은 AGP가 합성 수단에 의해 상업적으로 쉽게 생산할 수 있다는 점이다. 그것이 합성에 의해 생산되기 때문에, AGP는 MPL에서 발견되는 미량의 생물학적 오염물이 없다. 이러하므로, 보조제 발열성이 최소화되어야 하는 경우인 소아 면역화 프로토콜에서와 같은 몇몇 상황에서는 백신 보조제로서 MPL보다 나은 이점을 가질 것이다. 그러나, AGP가 화학적으로 합성되기 때문에, 화합물의 안정성이 최적이 아니면 결국은 열화 생성물이 축적하게 되고, 이는 로트간에 가변적인 생물학적 활성 및 안정성을 초래할 수 있다. 따라서, MPL™ 면역 자극제 및 유사 물질에 비해 증가된 생물학적 활성을 갖고(갖거나) 톨 유사 수용체와 상호 작용하고(하거나) 대규모 GPL 합성에 최적화된 화합물이 요망된다. 본 발명은 증진된 생물학적 활성, 효소적 및 화학적 열화에 대한 증가된 내성을 갖는 안정성, 및(또는) 개선된 안전성 프로필을 갖도록 개질된 화합물을 제공함으로써 이러한 필요성을 역점을 두고 다룬다.

발명의 요약

한 양상으로서, 본 발명은 본 명세서에서 정의되는 몇몇 신규 아미노알킬 글루코사미니드 포스페이트 화합물 및 그의 제약학적으로 허용되는 염을 포함한다. 추가로, 본 발명은 그 화합물 및(또는) 그의 염을 함유하는 조성물, 및 그 화합물을 당연히 보조제로서 및 제약학적으로 유효한 화합물로서 사용하는 방법을 포함한다.

발명의 상세한 설명

본 발명의 화합물은 아미노알킬 글루코사미니드 4-포스페이트(AGP) 과(family)의 구성원이다. 하기하는 바와 같이, 본 발명의 화합물은 다양하게 6 개의 아실 사슬(1차 및 2차)에 대한 개질, 포스페이트 부분을 포함하도록 하는 알킬 아암(arm)의 구조적 개질, C-3 당 위치에 1 차 에테르 지질 뿐만 아니라 3 개의 2 차 에테르 지질을 포함하도록 하는 구조적 개질, 및(또는) 6-히드록실 블록킹 기(blocking group)를 가진다.

화학적으로는 ω-아미노알킬 2-아미노-2-데옥시-4-포스포노-β-D-글루코피라노시드라고 알려져 있는 AGP는 모노포스포릴 지질 A의 성분 중 주요 생물학적 활성 성분과 구조적으로 관련 있는 합성 지질 A 모방체 부류이다. AGP에서는, 환원당이 N-[(R)-3-n-알카노일옥시테트라데카노일]아미노알킬 아글리콘 단위로 교체되었다. 다른 이당류 지질 A 유도체와 마찬가지로, AGP는 최대 생물학적 활성을 위한 6 개의 지방산을 포함하지만, 이당류 유도체와 달리, AGP는 에너지 면에서 선호되는 6 개의 지방 아실 사슬의 치밀 충전을 허용하는 형태학적으로 유연성이 있는 β-결합 아글리콘 단위를 함유한다. 육각형 어레이로 6 개 지방산이 밀접 충전된 것이 지질 A 유사 분자의 생체활성에 필수적인 역할을 하는 것이라고 믿어진다(세이델(Seydel) 등, Immunobiol; 187(3-5):191-211,1993).

본 발명의 화합물은 AGP과의 구성원인 것으로 여겨진다. 이 화합물은 6 개 아실 사슬(1 차 및 2 차) 길이에 대한 개질을 포함한다.

가장 넓은 양상들 중 한 양상에서, 본 발명의 한 특징은 하기 화학식 (I)을 갖는 AGP 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염이다.

상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택된다.

본 발명의 이 양상의 바람직한 실시태양은,

- X 및 Y가 바람직하게는 둘 모두 산소 원자이고;

- R₁, R₂ 및 R₃가 바람직하게는 동일하거나 또는 상이할 수 있는 노르말 아실기이고, 가장 바람직하게는 C₆ - C₁₄ 직쇄 아실기(가장 바람직하게는 포화 아실기)로부터 독립적으로 선택되고;

- R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 10 개, 바람직하게는 3 내지 9 개, 더 바람직하게는 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 비치환 포화 지방족(즉, 알킬) 기인 것이 바람직하고, 가장 바람직하게는 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 동일한 비치환 포화 지방족 기이다.

화합물 1a-c 및 2a-c, 및 그의 제약학적으로 허용되는 염은 이러한 유형의 화합물 (I)의 예시적인 구성원이다.

따라서, 본 발명의 화합물 (I)은 이들이 더 짧은 1 차 지방산 사슬을 가진다는 점을 제외하고는(기존의 공지 AGP 화합물에서는 1 차 지방산 사슬이 14 개의 탄소 원자를 가지고, 즉, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 C₁₁ 직쇄 알킬기임) 몇몇 공지 AGP와 공통점이 있다. 2 차 지방산 사슬 길이의 변화가 AGP 및 3-D-MPL의 2 차 지방산 동족체의 면역 자극 능력에 영향을 준다는 것을 발견하였다(존슨(Johnson) 등, J Med Chem; 42:4640-4649, 1999). 알. 스파에로이데스(R. sphaeroides) 지질 A와 같은 몇몇 천연 지질 A 변이체의 낮은 내독성은 이 분자에 짧은 (C₁₀) 1 차 지방산이 존재한다는 것에 부분적으로 원인이 있다(큐레쉬(Qureshi) 등, J. Biol Chem; 266(10):6532-6538,1991). 마찬가지로, 몇몇 헬리코박테르 및 슈도모나스 LPS의 낮은 독성은 독성 살모넬라 지질 A에서 발견되는 것과는 길이가 상이한 1 차 지방산 함유 헥사아실 성분의 존재 때문일 수 있다(모란(Moran) 등, J Bacteriol;179(20):6453-6463,1997; 쿨쉰(Kulshin) 등, Eur J Biochem;198(3):697-704,1991). 1 차 아실 사슬 길이 간의 관계가 3 개 이하의 지방산을 함유하는 지질 A의 합성 서브유닛 유사체(하세가와(Hasegawa) 등, Biosci Biotech Biochem;59(9):1790-1792,1995) 및 오가와(Ogawa) 등, Carbohydr Res;220:155-164,1991) 및 지질 IVa의 테트라아실 이당류 유사체(푸카세(Fukase) 등, Tetrahedron;54:4043-4050,1998)를 이용해서 제한된 정도로 연구되어 있긴 하지만, 본 발명자들이 아는 바로는, 지질 A의 염기성 헥사아실화 약리작용단 또는 지질 A 모방체를 이용한 체계적인 연구는 지금까지 수행되지 않았다.

또한, 본 발명의 특징에는 몇몇 글리실 및 포스포노옥시에틸(PE) 화합물이 포함된다. 이들은 R₄, R₅ 및 R₆이 수소이고, n, m 및 p가 0이고; q가 1 이고, R₇이 COOH이거나, 또는 q가 2이고, R₇이 OPO₃H₂인 상기 화학식 (I)의 화합물이다. 따라서, 이들은 하기 화학식 (II) 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 갖는다:

상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄는 H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; q는 1이고, R₇은 COOH이거나, 또는 q는 2이고, R₇은 OPO₃H₂이고; R₈ 및 R₉는 동일하거나 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택되고,

다만, R₇이 COOH이면, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂ 중 1 개 이상은 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기이다.

본 발명의 화합물 (II)의 바람직한 실시태양은,

- X 및 Y가 바람직하게는 둘 모두 산소 원자이고;

- R₁, R₂ 및 R₃가 바람직하게는 동일하거나 또는 상이할 수 있는 노르말 아실기이고, 바람직하게는 C₆ - C₁₄ 직쇄 아실기로부터 또는 C₆ - C₁₀ 직쇄 아실기로부터 독립적으로 선택되고;

- R₇이 COOH이면, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂ 기들은 바람직하게는 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 비치환 포화 지방족(즉, 알킬) 기이다.

화합물 (II)의 R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 동일하거나 또는 상이한 포화 지방족 기일 수 있지만, 가장 바람직하게는 동일한 비치환 포화 지방족 기이다.

화합물 11a, 11b 및 12a, 12b는 이러한 유형의 화합물 (II)의 예시적인 구성원이다.

화합물 12a, 12b는 포스페이트 부분을 포함하는 알킬 아암(arm)의 구조적 개질을 함유한다. 이러한 화합물은 그 과의 다른 구성원들보다 잠재적으로 더 안정 한 것으로 고려된다. 이들 화합물은 그들이 합성을 복잡하게 해서 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체 불순물 분리를 힘들게 할 수 있는 특징인 아글리콘 단위에 입체 중심이 결여되어 있다는 점에서 AGP의 세릴/세리놀 포스페이트 부류보다 나은 이점을 갖는다. 화합물 12a, 12b는 신규 화합물 부류, 즉 R₇이 포스포노기이고 q가 2인 화학식 (II)의 화합물을 나타낸다.

본 발명의 또 다른 한 유형의 화합물은 (R)-3-알킬옥시테트라데칸산 유도체이다. 이들은 R₁, R₂ 및 R₃가 아실기가 아니라 직쇄 알킬기이어서, 카르복실산 유도체가 아니라 R₁O-, R₂O- 및 R₃O-에테르 기를 형성한다는 점을 제외하고는 상기 화학식 (I)과 동일한 화학식을 갖는다. 이 유형의 화합물에서, R₁, R₂ 및 R₃는 바람직하게는 C₆-C₁₁ 알킬기이다. 그들은 동일하거나 또는 상이한 기일 수 있지만, 가장 바람직한 것은 동일한 것이다.

이러한 화합물은 하기 화학식 (III) 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 갖는다.

상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 포화 지방족 기(즉, 직쇄 알킬기)이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택된다.

본 발명의 화합물 (III)의 바람직한 실시태양은,

- X 및 Y가 바람직하게는 둘 모두 산소 원자이고;

- R₁, R₂ 및 R₃가 동일하거나 또는 상이할 수 있는 것으로, 바람직하게는 비치환 C₆ - C₁₄ 직쇄 알킬기로부터 또는 비치환 C₆ - C₁₀ 직쇄 알킬기로부터 독립적으로 선택된다.

화합물 18a, 18b는 3 개의 2차 에테르 지질(R₁ - R₃)을 함유하는 이러한 군의 예시적인 구성원이다.

본 발명의 또 다른 한 유형의 화합물은 하기 화학식 (IV) 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 갖는다.

상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으 로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 포화 지방족 기(즉, 직쇄 알킬기)이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택된다.

본 발명의 화합물 (IV)의 바람직한 실시태양은,

- X가 바람직하게는 산소이고;

- R₁, R₂ 및 R₃가 동일하거나 또는 상이할 수 있는 것으로, 가장 바람직하게는 비치환 C₆ - C₁₄ 직쇄 알킬기로부터 또는 C₆ - C₁₀ 직쇄 알킬기로부터 독립적으로 선택된다.

화합물 20a, 20b는 이 화합물 부류의 예시적인 구성원이다.

이들 화합물은 바람직하지 못한 대사 및(또는) 수성 가수분해에 대해 내성을 허용하는 속성을 갖는다. 사람 아실옥시아실 가수분해효소(AOAH)에 의해 구조적으로 다양한 지질 A 분자에서 노르말 지방산을 선택적으로 제거해서 길항제 지질 IVa를 얻는 것이 지질 A 독성을 감소시키는 방어 메카니즘으로 발전했다고 가정하였다(어윈(Erwin) 및 먼포드(Munford), J Biol Chem 265(27):16444-16449,1990). 그러나, 자연 유래 3-D-MPL의 독성이 주요 헥사아실 성분의 독성에 비해 더 큰 것은 지질 IVa와 다른 구조를 갖는 고도로 아실화된 성분이 덜 존재하기 때문일 가능성이 높다(울리취(Ulrich) 및 마이어즈(Myers), "Monophosphoryl lipid A as an Adjuvant. Past experiences and new directions. In: Vaccine Design: The Subunit and Adjuvant Approach. Ed. Powell M.F., Newman M.J. Plenum Press, New York, 1995; 495-524, Johnson 등, J Med Chem; 42:4640-4649,1999). 3-D-MPL 및 다른 지질 A 조제물에서의 구조적 변화는 동족체 LPS로부터 뿐만 아니라 반합성 및 단리 과정 동안의 에스테르 절단으로부터 본질적으로 생긴다. 사실상, LPS-유도 TNF-α 생산의 강력한 길항제인 추정상의 알. 캡술라투스(R. capsulatus) 지질 A의 화학적 합성 동안 에스테르 연결 아실기의 용이한 가수분해 절단이 미량의 원하지 않는 효현 작용 부산물을 생산한다고 보고되어 있다(크리스트(Christ) 등, Science;268:80-83,1995). 따라서, 화학적 및(또는) 효소적 불안정성은 불안정한 에스테르 연결을 함유하는 잠재적 지질 A 기재 약물의 알킬레스건일 수 있다. 지질 A 효현제 및 길항제 분자에 존재하는 에스테르 연결 지방산의 화학적 및 대사적 불안정성은 1 차 및(또는) 2 차 에스테르 연결 지방산 대신에 에테르 연결을 갖는 가수분해에 대해 안정한 유사체로 극복하였다(크리스트(Christ) 등의 상기 문헌, 리엔(Lien) 등, J Biol Chem:276(3):1873-1880,2001).

본 발명의 다른 화합물은 6-히드록실 블록킹기 또는 플루오로와 같은 6-치환체를 갖는다. 이들 화합물은 하기 화학식 (V) 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 갖는다.

상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개 의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기 또는 직쇄 포화 지방족 기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈은 포스포노이고; R₁₃은 F 또는 O-PG이고; PG는 하기하는 바와 같은 히드록실 보호기이고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택된다.

"보호기"("PG"로 나타냄)라는 용어는 기의 반응성을 차단, 방지 또는 감소시키도록 히드록시기의 수소를 대체하는 데 사용되는 많은 기를 의미한다. 보호기(및 흔히 사용되는 이들의 약어 목록)의 예는 티.더블유. 그린(T.W. Greene) 및 피.쥐. 펏츠(P.G. Futs)의 문헌["Protective Groups in Organic Chemistry"(Wiley)], 보케이쥐(Beaucage) 및 아이어(Iyer)의 문헌[Tetrahedron 48:2223(1992)], 및 해리슨(Harrison) 등의 문헌[Compendium of Synthetic Organic Methods, 제 1 - 8 권(Wiley)]에서 찾을 수 있다. 대표적인 히드록시 보호기는 예를 들어 메틸, 아세틸, 벤질, 트리틸, 알킬, 테트라히드로피라닐, 알릴 또는 삼치환 실릴기를 이용해서 에테르 또는 에스테르를 형성하는 것과 같이 히드록시기가 아실화 또는 알킬화된 것을 포함한다.

어떤 주어진 화합물을 위한 보호기, 목적 또는 조건 세트의 선택은 당업계 숙련자의 기술 내에 있고, 우세한 조건(다른 반응성 화합물의 존재, pH, 온도 등) 하에서 문제의 반응성 기를 전체적으로 또는 선택적으로 보호하도록 행한다. 본 발명에서 사용될 수 있는 보호기는 메틸, 프탈로일, 아세틸(Ac), 벤질(Bn), 2,2,2-트리클로로에톡시카르보닐(Troc), t-부틸디메틸실릴(TBS), t-부틸디페닐실릴(TBDPS) 및 2,2,2-트리클로로-1,1-디메틸에틸 클로로포르밀(TCBOC)기를 포함한다. 당업계에 알려진 바와 같이, 어떤 특정 화합물과 함께 또는 어떤 주어진 상황에 사용하기에는 어떤 한 보호기 또는 어떤 유형의 기가 다른 것들보다 더 안정할 수 있고, 히드록시와 같은 반응성 기를 갖는 화합물을 포함하는 방법을 개발함에 있어서 이러한 적합성을 이용한다.

본 발명의 화합물 (V)의 바람직한 실시태양은,

- X 및 Y가 바람직하게는 둘 모두 산소 원자이고;

- R₁, R₂ 및 R₃가 바람직하게는 노르말 아실 또는 알킬기이고, 가장 바람직하게는 C₆-C₁₀ 직쇄 아실기로부터 독립적으로 선택된다.

이 군의 예시적인 구성원은 세릴 또는 세리놀 포스페이트 AGP와 함께 사용되는 메틸 에테르를 갖는 화합물 25a, 25b, 또는 플루오로기를 갖는 화합물 26a, 26b를 포함한다.

비보호 C-6 당 히드록실기는 결국 지질 A 유도체 합성 동안 제거하기가 어려울 수 있는 미량의 오염물을 생성할 수 있게 된다(크리스트의 상기 문헌). 이들 부산물은 초기 4,6-시클릭 포스페이트 형성 및 후속 재배열로부터 생길 가능성이 높다(이모토(Imoto) 등, Tetrahedron Lett;29(28):2227-2230,1988).

본 명세서에서 논의된 바와 같이, 그 자체로 또는 다른 치환기의 일부로서 "지방족"이라는 용어는 달리 언급되지 않으면, 직쇄 또는 분지쇄 또는 시클릭 탄화수소 라디칼 또는 그의 조합을 의미하고, 이것은 완전 포화, 일불포화 또는 다중불포화될 수 있으며, 지정된 탄소 원자 수를 갖는(즉, C₁-C₁₀은 1 내지 10 개의 탄소) 이가 또는 다가 라디칼을 포함할 수 있다. 포화 탄화수소 라디칼의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, t-부틸, 이소부틸, sec-부틸, 시클로헥실, (시클로헥실)메틸, 시클로프로필메틸, 예를 들어 n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸 등의 동족체 및 이성질체와 같은 기를 포함한다. 불포화 지방족 기는 1 개 이상의 이중 결합 또는 삼중 결합을 갖는 것이다. 불포화 지방족 기의 예는 비닐, 2-프로페닐, 크로틸, 2-이소펜테닐, 2-(부타디에닐), 2,4-펜타디에닐, 3-(1,4-펜타디에닐), 에티닐, 1- 및 3-프로피닐, 3-부티닐, 및 고급 동족체 및 이성질체를 포함한다. 대표적으로, 지방족 기는 1 내지 24 개의 탄소 원자를 가질 것이다. "저급 지방족" 기는 짧은 사슬 지방족 기이고, 일반적으로 8 개 이하의 탄소 원자를 갖는 것이다.

"아실"이라는 용어는 유기산으로부터 히드록시기의 제거에 의해 유래되는 기를 의미한다. 아실기의 예는 아세틸, 프로피오닐, 도데카노일, 테트라데카노일, 이소부티릴 등을 포함한다. 따라서, 본 명세서에서 사용되는 "아실"이라는 용어는 -C(O)-지방족(여기서, 지방족 기는 바람직하게는 포화 지방족 기임)이라고 달리 정의되는 기를 포함하는 것을 의미한다.

"제약학적으로 허용되는 염"이라는 용어는 본 명세서에 기재된 화합물에서 발견되는 특정 치환기에 의존해서, 상대적으로 비독성인 산 또는 염기와 함께 제조되는 활성 화합물의 염을 포함하는 것을 의미한다. 본 발명의 화합물이 상대적으로 산성인 관능기를 함유할 때는, 이러한 화합물의 중성 형태와 충분한 양의 원하는 염기를 니트 상태로 또는 적당한 불활성 용매 중에서 접촉시킴으로써 염기 부가염을 얻을 수 있다. 제약학적으로 허용되는 염기 부가 염의 예는 나트륨, 칼륨, 칼슘, 암모늄, 유기 아미노 또는 마그네슘 염, 또는 유사한 염을 포함한다. 본 발명의 화합물이 상대적으로 염기성인 관능기를 함유할 때는, 이러한 화합물의 중성 형태와 충분한 양의 원하는 산을 니트 상태로 또는 적당한 불활성 용매 중에서 접촉시킴으로써 산 부가염을 얻을 수 있다. 제약학적으로 허용되는 산 부가 염의 예는 염산, 브롬화수소산, 질산, 탄산, 탄산일수소, 인산, 인산일수소, 인산이수소, 황산, 황산일수소, 요오드화수소산 또는 아인산 등과 같은 무기산으로부터 유래되는 것들 뿐만 아니라 아세트산, 프로피온산, 이소부티르산, 말레산, 말론산, 벤조 산, 숙신산, 수베르산, 푸마르산, 락트산, 만델산, 프탈산, 벤젠술폰산, p-톨릴술폰산, 시트르산, 타르타르산, 메탄술폰산 등과 같은 상대적으로 비독성인 유기산으로부터 유래되는 염을 포함한다. 또한, 아르기네이트 등과 같은 아미노산의 염, 및 글루쿠론산 또는 갈락투론산 등 같은 유기산의 염도 포함한다(참조: 예를 들어, 버쥐 에스.엠.(Berge, S.M.) 등, "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Science, 66,1-19,1977). 본 발명의 몇몇 특이한 화합물은 염기성 관능기 및 산성 관능기 둘 모두를 함유하고, 이것은 그 화합물이 염기 부가염 또는 산 부가염 중 어느 것으로도 전환되는 것을 허용한다.

본 발명의 화합물의 중성 형태는 염을 염기 또는 산과 접촉시키고, 모 화합물을 통상의 방식으로 단리함으로써 재생할 수 있다. 본 발명의 화합물의 모 화합물 형태는 극성 용매 중에서의 용해도와 같은 몇몇 물성이 다양한 염 형태와 상이하지만, 그 밖의 점에서는 염은 본 발명의 목적상 화합물의 모 화합물 형태와 균등하다.

염 형태 이외에도, 본 발명은 전구약물 형태인 화합물을 제공한다. 본 명세서에 기재된 화합물의 전구약물은 생리적 조건 하에서 쉽게 화학 변화해서 본 발명의 화합물을 제공하는 화합물이다. 추가로, 전구약물은 생체외 환경에서 화학적 또는 생화학적 방법에 의해 본 발명의 화합물로 전환될 수 있다. 예를 들어, 전구약물은 적당한 효소 또는 화학 시약과 함께 경피 패치 저장소에 놓일 때 본 발명의 화합물로 서서히 전환될 수 있다.

본 발명의 몇몇 화합물은 비용매화 형태 뿐만 아니라 수화 형태를 포함해서 용매화 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 용매화 형태는 비용매화 형태와 균등하고, 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 의도한다. 본 발명의 몇몇 화합물은 다수의 결정성 또는 무결정성 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 모든 물리적 형태는 본 발명에 의해 고려되는 용도에 대해서 균등하고, 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 의도한다.

본 발명의 몇몇 화합물은 비대칭 탄소 원자(광학 중심) 또는 이중 결합을 가지고; 라세미체, 부분 입체 이성질체, 기하 이성질체 및 개별 이성질체가 모두 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 의도한다.

또한, 본 발명의 화합물은 이러한 화합물을 구성하는 원자들 중 1 개 이상에 원자 동위원소를 부자연적 비율로 함유할 수 있다. 예를 들어, 화합물은 예를 들어 삼중수소(³H), 요오드-125(¹²⁵I) 또는 탄소-14(¹⁴C)와 같은 방사활성 동위원소로 방사표지될 수 있다. 방사활성이든 아니든 본 발명의 화합물의 모든 동위원소 변형은 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 의도한다.

본 발명의 화합물은 적당한 어떠한 수단에 의해서도 제조할 수 있다: 하기 실시예 섹션을 참조하고, 이들 중 다수가 기재되어 있다. 예를 들어, 본 발명에 유용한 몇몇 화합물의 제조 방법은 미국 특허 6,113,918; 미국 특허 6,303,347; 및 PCT/US98/09385(WO 98/50300, 1998년10월12일)에 기재되어 있다. 다른 화합물은 존슨(Johnson) 등의 문헌(J. Med. Chem. 42:4640-4649(1999)); 존슨 등의 문헌(Bioorg. Med. Chem. Lett. 9:2273-2278(1999)), 및 PCT/US98/50399(WO 98/50399, 1998년 11월 12일)에 개요된 방법을 이용하여 제조할 수 있다. 일반적으로, 상기 참고 문헌에 기재된 합성 방법 및 당업계에 잘 알려진 그 밖의 다른 합성 방법도 본 발명의 화합물의 제조에 넓게 적용할 수 있다. 예를 들어, 상이한 아실기 및 치환기를 갖는 화합물을 제조함에 있어서, 당업계 숙련자는 이들 문헌에 기재된 수렴적 방법들을 다른 아실화제를 사용하도록 변경할 수 있거나, 또는 적당한 아실기가 부착된 상업적으로 입수가능한 물질로 개시할 수 있다는 것을 잘 알 것이다.

면역 반응을 이끌어 내거나 증진시키기 위한 조성물에 있어서, 본 발명의 화합물을 단백질 또는 폴리펩티드 항원과 같은 항원 또는 단백질 또는 폴리펩티드 항원을 발현하는 폴리뉴클레오티드와 함께 사람을 포함한 온혈 동물에게 투여한다. 원하는 반응을 이끌어 내기 위해 투여되는 항원의 양은 당업계 숙련자에 의해 쉽게 결정할 수 있고, 투여되는 항원의 유형, 투여 경로 및 면역화 일정에 따라 변할 것이다.

또, 본 발명의 화합물은 하기하는 바와 같이, 비특이적 내성 효과를 매개로 하여 즉각적인 보호를 이끌어 내기 위해 외인성 항원 없이 투여할 수 있다; 참조: 퍼싱(Persing) 등, WIPO 공개 WO 01/90129, 2001년 11월 29일. 비특이적 내성을 자극하고(하거나) 보조제 효과를 이끌어 내는 능력을 갖는 화합물은 신속한 백신 제제에 사용할 수 있다. 본 발명의 화합물을 항원과 함께 투여하면 결국은 3 주 내지 4 주 이내에 후천성 점막 면역 반응이 일어난다. 이러한 화합물을 4 주에 걸쳐, 예를 들어 비내 경로로, 매주 투여하면, 관심 항원에 대해 초기 선천성 면역 반응에 의해 제공되는 보호와 뒤따르는 후천성 면역 반응에 의한 보호를 조합함으 로써 신속하고 오래 지속되는 보호를 제공할 것이다.

본 발명의 화합물은 본 발명의 주어진 응용에 가장 적합한 특성들을 갖는 것들을 동정 및 선택하기 위해 다양한 검정 포맷으로 평가할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물 투여 후 전신 순환으로의 사이토킨 방출 프로필을 동정 및 평가하는 데는 동물 모델을 이용할 수 있다. 추가로, 관심 대상인 특이적 면역 반응을 이끌어 내기에 가장 적합한 화합물을 동정하기 위해 상이한 항원 성분에 대한 면역 반응의 하나 이상의 양상의 변화를 검사하는 데는 다양한 시험관내 및 생체내 모델이 존재한다. 예를 들어, 한 화합물을 시험관 내에서 대식세포, 수지상 세포 또는 랑게르한스 세포와 같은 표적 세포와 접촉시킬 수 있고, 정교화된(elaborated) 사이토킨을 측정할 수 있다. 추가로, 관심 대상인 특정 화합물에 의해 활성화 또는 억제되는 특이적 경로를 동정하는 데는 유전자 발현 어레이를 사용할 수 있다.

사이토킨 유도/생성은 본 발명의 화합물로 사람 혈액 및(또는) 세포를 처리하고, ELISA(R&D Systems)로 유도를 측정함으로써 결정할 수 있다. 또한, 이러한 방법을 이용해서 유도가 톨 수용체 의존성인지 아닌지를 결정할 수 있다. 본 발명의 화합물 투여 후의 세포독성 T 임파구 반응은 ⁵¹Cr-기반 세포독성 검정에 의해 결정한다. 원한다면, 이러한 점에서 본 발명의 화합물의 성능은 지질 A, MPL, AGP 등과 같이 이러한 점에서 기능성이 있는 것으로 알려진 다른 화합물에 필적할 수 있다. 추가로, 본 발명의 화합물은 상승 효과를 동정하기 위해 1 개 이상의 보조제 및(또는) 면역 조절제와 조합해서 평가할 수 있다(참조: 예를 들어, 미국 특허 6,303,347 및 6,113,918, 및 WO 01/90129(2001년 11월 29일 공개)).

뮤린(murine) 인플루엔자 공격(challenge) 모델 및 뮤린 리스테리아 모노사이토게네스(Listeria monocytogenes) 공격 모델과 같은 동물 모델이 보조제 및 면역 조절제 활성을 사정하는 데 유용하다. 간략하면, 화합물을 투여한 후 인플루엔자 또는 엘. 모노사이토게네스 공격물을 투여한다. 본 발명의 화합물의 투여에 의해 제공되는 보호를 표시하는 것으로서는, 질환 지수(정갈하지 못한 피모, 곱사등 자세 및 격한 호흡), 체중 손실 및 치사율(인플루엔자의 경우), 처리/비처리 마우스의 비장에서의 콜로니 형성 단위의 수(엘. 모노사이토게네스의 경우)를 모니터링한다(참조: 예를 들어, WO 01/90129(2001년 11월 29일 공개).

본 명세서에서 사용되는 "폴리펩티드"라는 용어는 통상적인 의미로, 즉 아미노산의 서열로 사용된다. 폴리펩티드는 생성물의 특정 길이로 제한되지 않는다; 따라서, 펩티드, 올리고펩티드 및 단백질이 폴리펩티드의 정의 내에 포함되고, 이러한 용어는 특별히 달리 지시하지 않으면 호환적으로 사용할 수 있다. 또, 이 용어는 폴리펩티드의 후발현 개질, 예를 들어 글리코실화, 아세틸화, 포스포릴화 등 뿐만 아니라 자연 발생 및 비자연 발생의 당업계에 공지된 다른 개질을 제외하는 것을 의미하지 않는다. 폴리펩티드는 전체 단백질, 또는 그의 서브서열일 수 있다. 본 발명의 맥락에서 관심 대상인 특정 폴리펩티드는 폴리펩티드의 면역성 성질의 실질적 원인이고 면역 반응을 일으킬 수 있는 항원 결정인자인 에피톱(epitope)을 포함하는 아미노산 서브서열이다.

본 발명에 유용한 폴리펩티드는 본 명세서에서는 때때로 그들의 동정이 종양 시료에서의 증가된 수준의 발현에 적어도 부분적으로 기반을 둔다는 것을 가리키는 것으로 종양 단백질 또는 종양 폴리펩티드라고 부른다. 따라서, "종양 폴리펩티드" 또는 "종양 단백질"은 일반적으로 본 명세서에서 제공되는 대표적인 검정을 이용하여 결정할 때, 정상 조직에서의 발현 수준보다 2 배 이상, 바람직하게는 5 배 이상 더 높은 수준으로 종양 시료의 실질적 비율, 예를 들어 바람직하게는 시험되는 종양 시료의 약 20% 초과, 더 바람직하게는 약 30% 초과, 가장 바람직하게는 약 50% 초과 또는 그 이상에서 발현되는 본 발명의 폴리펩티드 서열, 또는 이러한 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 의미한다.

몇몇 바람직한 실시태양에서, 본 발명의 폴리펩티드는 면역성이고, 즉, 그들은 암 환자의 항혈청 및(또는) T-세포를 이용한 면역 검정(ELISA 또는 T-세포 자극 검정)에서 검출가능할 정도로 반응한다. 면역성 활성의 스크리닝은 당업계 기술자에게 알려진 기술을 이용하여 수행할 수 있다. 예를 들어, 이러한 스크린은 할로우(Harlow) 및 레인(Lane)의 문헌(Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory,1988)에 기재된 것과 같은 방법을 이용하여 수행할 수 있다. 한 예시적인 예에서, 폴리펩티드를 고체 지지체 위에 고정시키고, 환자 혈청과 접촉시켜서 혈청 내의 항체가 고정된 폴리펩티드에 결합하는 것을 허용할 수 있다. 이어서, 결합되지 않은 혈청을 제거하고, 결합된 항체를 예를 들어 ¹²⁵I-표지 단백질 A를 사용해서 검출할 수 있다.

당업계 숙련자들이 인지하고 있는 바와 같이, 본 명세서에 개시된 폴리펩티 드의 면역성 부분도 또한 본 발명의 범위에 포함된다. 본 명세서에서 사용되는 "면역성 부분"은 그 자체가 폴리펩티드를 인식하는 B-세포 및(또는) T-세포 표면 항원 수용체와 면역학적으로 반응성이 있는(즉, 특이적으로 결합하는) 본 발명의 면역성 폴리펩티드의 단편이다. 일반적으로, 면역성 부분은 폴(Paul)의 문헌(Fundamental Immunology,제3판,243-247(Raven Press,1993)) 및 거기에 인용된 참고 문헌에 요약된 것들과 같은 잘 알려진 기술을 이용해서 동정할 수 있다. 이러한 기술은 항원 특이적 항체, 항혈청 및(또는) T-세포주 또는 클론과 반응할 수 있는 능력에 대해 폴리펩티드를 스크리닝하는 것을 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 항혈청 및 항체는 그들이 항원에 특이적으로 결합하면(즉, 그들이 ELISA 또는 다른 면역 검정에서 단백질과 반응하고 무관한 단백질과는 검출가능할 정도로 반응하지 않는다면) "항원 특이적"이다. 이러한 항혈청 및 항체는 공지 기술을 이용하여 본 명세서에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

바람직한 한 실시태양에서, 본 발명의 폴리펩티드의 면역성 부분은 전체 길이 폴리펩티드의 반응성보다 실질적으로 낮지 않은 수준으로(예를 들어, ELISA 및(또는) T-세포 반응성 검정에서) 항혈청 및(또는) T-세포와 반응하는 부분이다. 바람직하게는, 면역성 부분의 면역성 활성의 수준은 전체 길이 폴리펩티드의 면역원성의 약 50% 이상, 바람직하게는 약 70% 이상, 가장 바람직하게는 약 90% 초과이다. 몇몇 경우에서는, 상응하는 전체 길이 폴리펩티드보다 높은 면역성 활성 수준을 갖는, 예를 들어 약 100% 또는 150% 초과 또는 그 이상의 면역성 활성을 갖는 바람직한 면역성 부분이 동정될 것이다.

몇몇 다른 실시태양에서, 예시적인 면역성 부분은 N-말단 리더(leader) 서열 및(또는) 트랜스멤브레인 도메인이 결실된 펩티드를 포함할 수 있다. 다른 예시적인 면역성 부분은 성숙 단백질에 비해 작은 N- 및(또는) C-말단 결실(예를 들어, 1 - 30 개 아미노산, 바람직하게는 5 - 15 개 아미노산)을 함유할 것이다.

다른 한 실시태양에서, 본 발명의 폴리펩티드 조성물은 또한 본 발명의 폴리펩티드, 특히 본 명세서에 기재된 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드에 대해 생성되는 또는 그의 면역성 단편 또는 변이체에 대한 T-세포 및(또는) 항체와 면역학적으로 반응성이 있는 1 개 이상의 폴리펩티드를 포함할 수 있다.

본 발명의 다른 한 실시태양에서는, 본 명세서에 기재된 1 개 이상의 폴리펩티드, 또는 본 명세서에 기재된 폴리뉴클레오티드에 함유된 인접 핵산 서열들에 의해 코딩되는 1 개 이상의 폴리펩티드, 또는 그의 면역성 단편 또는 변이체와 면역학적으로 반응성이 있는 T 세포 및(또는) 항체를 이끌어 낼 수 있는 1 개 이상의 폴리펩티드를 포함하는 폴리펩티드를 제공한다.

폴리펩티드는 단백질의 전달을 동시번역 또는 후번역에 의해 명령하는, 단백질의 N-말단의 신호(또는 리더) 서열을 포함할 수 있다. 또한, 폴리펩티드는 폴리펩티드의 합성, 정제 또는 동정의 용이성을 위해 또는 고형 지지체에 대한 폴리펩티드의 결합을 증진시키기 위해 링커 또는 다른 서열에 컨쥬게이션(conjugation)시킬 수 있다. 예를 들어, 폴리펩티드는 면역글로불린 Fc 영역에 컨쥬게이션시킬 수 있다.

다른 예시적인 실시태양에서, 폴리펩티드는 공지의 종양 단백질과 같은, 본 명세서에 기재된 다수의 폴리펩티드를 포함하거나 또는 본 명세서에 기재된 1 개 이상의 폴리펩티드 및 무관한 서열을 포함하는 융합 폴리펩티드일 수 있다. 융합 파트너는 예를 들어 T-헬퍼 에피톱(면역학적 융합 파트너), 바람직하게는 사람에 의해 인식되는 T-헬퍼 에피톱을 제공하는 데 도움을 줄 수 있거나, 또는 천연 재조합 단백질보다 더 높은 수율로 단백질(발현 인핸서)을 발현하는 데 도움을 줄 수 있다. 몇몇 바람직한 융합 파트너는 면역학적 및 발현 증진 융합 파트너이다. 폴리펩티드의 용해도를 증가시키거나 또는 폴리펩티드가 원하는 세포내 구획으로 표적화될 수 있도록 다른 융합 파트너를 선택할 수도 있다. 추가의 융합 파트너는 폴리펩티드의 정제를 촉진하는 친화성 태그를 포함한다.

일반적으로, 융합 폴리펩티드는 화학적 컨쥬게이션을 포함하는 표준 기술을 이용해서 제조할 수 있다. 바람직하게는, 융합 폴리펩티드는 재조합 폴리펩티드로 발현되고, 발현 시스템에서 비융합 폴리펩티드에 비해 증가된 수준의 생성을 허용한다. 간략하면, 폴리펩티드 성분을 코딩하는 DNA 서열들을 개별적으로 어셈블리해서 적당한 발현 벡터에 결찰할 수 있다. 1 개의 폴리펩티드 성분을 코딩하는 DNA 서열의 3' 말단을 펩티드 링커를 이용하거나 또는 이용하지 않고서 제 2 폴리펩티드 성분을 코딩하는 DNA 서열의 5' 말단에 서열의 판독 프레임들이 같은 위상이 되도록 결찰한다. 이것은 성분 폴리펩티드 둘 모두의 생물학적 활성을 보유하는 단일 융합 폴리펩티드로 번역할 수 있게 한다.

제 1 및 제 2 폴리펩티드 성분을 각 폴리펩티드가 그의 이차 및 삼차 구조로 폴딩하는 것을 보장하기에 충분한 거리로 분리하는 데 펩티드 링커 서열을 이용할 수 있다. 이러한 펩티드 링커 서열은 당업계에 잘 알려진 표준 기술을 이용해서 융합 단백질에 혼입시킨다. 적당한 펩티드 링커 서열은 다음 인자들에 기초해서 선택할 수 있다: (1) 유연성 확장 구조를 채용할 수 있음; (2) 제 1 및 제 2 폴리펩티드 상의 기능성 에피톱과 상호작용할 수 있는 이차 구조를 채용할 수 없음; (3) 폴리펩티드 기능성 에피톱과 반응할 수도 있는 소수성 또는 하전 잔기가 없음. 바람직한 펩티드 링커 서열은 Gly, Asn 및 Ser 잔기를 함유한다. Thr 및 Ala와 같은 다른 중성에 가까운 아미노산도 링커 서열에 사용할 수 있다. 링커로 유용하게 사용할 수 있는 아미노산 서열은 마라테아(Maratea) 등의 문헌(Gene 40:39-46,1985); 머피(Murphy) 등의 문헌(Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:8258-8262,1996); 미국 특허 4,935,233 및 미국 특허 4,751,180에 기재된 것들을 포함한다. 링커 서열은 일반적으로 길이가 1 내지 약 50 개 아미노산일 수 있다. 제 1 및 제 2 폴리펩티드가 기능성 도메인 분리 및 입체 방해 방지에 사용할 수 있는 비필수 N-말단 아미노산 영역을 가질 때는 링커 서열이 필요하지 않다.

결찰된 DNA 서열은 적당한 전사 또는 번역 조절 요소에 조작가능하게 연결된다. DNA의 발현의 원인이 되는 조절 요소는 제 1 폴리펩티드를 코딩하는 DNA 서열에 5'에만 위치한다. 마찬가지로, 번역 및 전사 종결 신호를 끝내는 데 필요한 중지 코돈은 제 2 폴리펩티드를 코딩하는 DNA 서열에 3'에만 존재한다.

융합 폴리펩티드는 리콜(recall) 반응을 이끌어 낼 수 있는 면역성 단백질과 같은 무관한 면역성 단백질과 함께 본 명세서에 기재된 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 이러한 단백질의 예는 파상풍, 결핵 및 간염 단백질을 포함한다(참조: 예를 들어, 스타우트(Stoute) 등, New Engl. J. Med.,336:86-91,1997).

바람직한 한 실시태양에서, 면역학적 융합 파트너는 마이코박테리움 투베르쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis) 유래 Ra12 단편과 같은 마이코박테리움 에스피.로부터 유래된다. Ra12 조성물 및 이종 폴리뉴클레오티드/폴리펩티드 서열의 발현 및(또는) 면역원성을 증진시키는 데에 이들을 사용하는 방법은 미국 특허 출원 60/158,585에 기재되어 있다. 간략하면, Ra12는 마이코박테리움 투베르쿨로시스 MTB32A 핵산의 서열인 폴리뉴클레오티드 영역을 의미한다. MTB32A는 마이코박테리움 투베르쿨로시스의 독성 및 비독성 균주에서 유전자에 의해 코딩되는 32 KD 분자량의 세린 프로테아제이다. MTB32A의 뉴클레오티드 서열 및 아미노산 서열은 기재되어 있다(예를 들어, 미국 특허 출원 60/158,585; 참조: 예를 들어 스케이키(Skeiky) 등, Infection and Immun.(1999)67:3998-4007). MTB32A 코딩 서열의 C-말단 단편은 높은 수준으로 발현하고, 정제 과정 전반에 걸쳐 가용성 폴리펩티드로서 남는다. 게다가, Ra12는 그것이 융합된 이종 면역성 폴리펩티드의 면역원성을 증진시킬 수 있다. 한가지 바람직한 Ra12 융합 폴리펩티드는 MTB32A의 아미노산 잔기 192 내지 323에 상응하는 14KD C-말단 단편을 포함한다. 일반적으로, 다른 바람직한 Ra12 폴리뉴클레오티드는 Ra12 폴리펩티드의 일부를 코딩하는 약 15개 이상의 연속 뉴클레오티드, 약 30 개 이상의 뉴클레오티드, 약 60 개 이상의 뉴클레오티드, 약 100 개 이상의 뉴클레오티드, 약 200 개 이상의 뉴클레오티드, 또는 약 300 개 이상의 뉴클레오티드를 포함한다. Ra12 폴리뉴클레오티드는 천연 서열(즉, Ra12 폴리펩티드 또는 그의 일부를 코딩하는 내인성 서열)을 포함할 수 있거나, 또 는 이러한 서열의 변이체를 포함할 수 있다. Ra12 폴리뉴클레오티드 변이체는 천연 Ra12 폴리펩티드를 포함하는 융합 폴리펩티드에 비해 코딩된 융합 폴리펩티드의 생물학적 활성을 실질적으로 감소시키지 않는 1 개 이상의 치환, 첨가, 결실 및(또는) 삽입을 함유할 수 있다. 변이체는 천연 Ra12 폴리펩티드 또는 그의 일부를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열과 바람직하게는 약 70% 이상의 동일성, 더 바람직하게는 약 80% 이상의 동일성, 가장 바람직하게는 약 90% 이상의 동일성을 나타낸다.

다른 바람직한 실시태양에서, 면역학적 융합 파트너는 그람 음성 세균 하에모필루스 인플루엔자(Haemophilus influenza) B(WO 91/18926)의 표면 단백질인 단백질 D로부터 유래된다. 바람직하게는, 단백질 D 유도체는 그 단백질의 약 1/3(예를 들어, 처음 N-말단 100-110개 아미노산)을 포함하고, 단백질 D 유도체는 지질화될 수 있다. 몇몇 바람직한 실시태양에서는, 폴리펩티드에 추가의 외인성 T-세포 에피톱을 제공하고 이. 콜리(E. Coli)에서의 발현 수준을 증가(따라서, 발현 인핸서로 기능함)시키기 위해 리포프로테인 D 융합 파트너의 처음 109 개의 잔기를 N-말단에 포함시킨다. 이 지질 꼬리는 항원 제시 세포에 항원을 최적으로 제시하는 것을 보장한다. 다른 융합 파트너는 인플루엔자 바이러스 NS1(헤마글루티닌)으로부터의 비구조 단백질을 포함한다. T-헬퍼 에피톱을 포함하는 상이한 단편을 사용할 수도 있지만, 대표적으로는 N-말단 81개 아미노산을 사용한다.

다른 한 실시태양에서, 면역학적 융합 파트너는 LYTA라고 알려진 단백질 또는 그의 부분(바람직하게는, C-말단 부분)이다. LYTA는 아미다제 LYTA(LytA 유전자에 의해 코딩됨; Gene 43:265-292,1986)로 알려진 N-아세틸-L-알라닌 아미다제를 합성하는 스트렙토코쿠스 뉴모니애(Streptococcus pneumoniae)로부터 유래된다. LYTA는 펩티도글리칸 골격에 있는 몇몇 결합을 특이적으로 분해하는 자기 분해제이다. LYTA 단백질의 C-말단 도메인은 콜린 또는 DEAE와 같은 일부 콜린 유사체와의 친화성의 원인이 된다. 이 성질은 융합 단백질의 발현에 유용한 이. 콜리 C-LYTA 발현 플라스미드의 개발에 이용되었다. 아미노 말단에 O-LYTA 단편을 함유하는 하이브리드 단백질의 정제는 기재되어 있다(참고: Biotechnology 10:795-798,1992). 바람직한 한 실시태양에서는, LYTA의 반복 부분이 융합 폴리펩티드에 혼입될 수 있다. 한 반복 부분은 잔기 178에서 시작하는 C-말단 영역에서 발견된다. 특히 바람직한 반복 부분은 잔기 188-305를 혼입한다.

다른 예시적인 실시태양은 융합 폴리펩티드 및 그를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하고, 여기서 융합 파트너는 미국 특허 5,633,234에 기재된 바와 같이 폴리펩티드를 엔도좀/리소좀 구획으로 이끌 수 있는 표적 신호를 포함한다. 본 발명의 면역성 폴리펩티드는 이 표적 신호와 융합될 때, MHC 부류 II 분자들과 더 효과적으로 연합할 것이고, 이렇게 함으로써 폴리펩티드에 대해 특이적인 CD4⁺T-세포에 대한 증진된 생체내 자극을 제공한다.

본 발명의 폴리펩티드는 다양한 공지의 합성 및(또는) 재조합 기술을 이용해서 제조한다. 일반적으로 약 150 개 미만의 아미노산을 갖는 폴리펩티드, 부분 및 다른 변이체는 당업계 통상의 기술을 가진 자에게 잘 알려진 기술을 이용해서 합성 수단에 의해 생성할 수 있다. 한 예시적인 예에서, 이러한 폴리펩티드는 성장하는 아미노산 사슬에 아미노산을 순차적으로 첨가하는 메리필드(Merrifield) 고체상 합성 방법과 같은 상업적으로 입수가능한 고체상 기술 중 어느 것을 이용해서도 합성한다. 메리필드의 문헌(J. Am. Chem. Soc. 85:2149-2146,1963)을 참조한다. 폴리펩티드의 자동 합성을 위한 장비는 퍼킨 엘머/어플라이드 바이오시스템즈 디비전(Perkin Elmer/Applied Biosystems Division)(미국 캘리포니아주 포스터 시티 소재)과 같은 공급처로부터 상업적으로 입수가능하고, 제조자의 지시에 따라 운전할 수 있다.

일반적으로, 본 발명의 폴리펩티드 조성물(융합 폴리펩티드를 포함함)은 단리된다. "단리된" 폴리펩티드는 그의 원래 환경으로부터 제거된 것이다. 예를 들어, 자연 발생 단백질 또는 폴리펩티드는 자연계에 공존하는 물질들 중 일부 또는 전부로부터 분리되면 단리된다. 바람직하게는, 이러한 폴리펩티드는 또한 정제되고, 예를 들어 약 90% 이상의 순도, 더 바람직하게는 약 95% 이상의 순도, 가장 바람직하게는 약 99% 이상의 순도를 갖는다.

다른 양상들로서, 본 발명은 상기한 폴리펩티드 항원을 코딩하는 1 개 이상의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 화합물을 제공한다. "DNA" 및 "폴리뉴클레오티드"라는 용어는 본 명세서에서는 본질적으로 호환해서 사용되며 특정 종의 전체 게놈 DNA가 없는 단리된 DNA 분자를 의미한다. 본 명세서에서 사용되는 "단리된'이라는 용어는 폴리뉴클레오티드가 다른 코딩 서열로부터 실질적으로 떨어져 있다는 것 및 DNA 분자가 많은 염색체 단편 또는 다른 기능성 유전자 또는 폴리펩티드 코딩 영역과 같은 많은 부분의 무관한 코딩 DNA를 함유하지 않는다는 것을 의미한다. 물론, 이것은 원래 단리된 DNA 분자를 의미하고, 사람 손에 의해 세그먼트에 나중에 첨가된 유전자 또는 코딩 영역을 배제하지 않는다.

폴리뉴클레오티드는 천연 서열(본 발명의 폴리펩티드/단백질 또는 그의 부분을 코딩하는 내인성 서열)을 포함할 수 있거나, 또는 이러한 서열의 변이체 또는 유도체, 바람직하게는 면역성 변이체 또는 유도체를 코딩하는 서열을 포함할 수 있다. 대표적으로, 폴리뉴클레오티드 변이체는 1 개 이상의 치환, 첨가, 결실 및(또는) 삽입, 바람직하게는 폴리뉴클레오티드 변이체에 의해 코딩되는 폴리펩티드의 면역원성을 본 명세서에 구체적으로 나타낸 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩되는 폴리펩티드에 비해 실질적으로 감소시키지 않는 1 개 이상의 치환, 첨가, 결실 및(또는) 삽입을 함유할 것이다. 또한, "변이체"라는 용어는 이질성 기원의 이종 유전자를 포함하는 것으로 이해해야 한다.

몇몇 바람직한 실시태양에서, 상기 폴리뉴클레오티드, 예를 들어 폴리뉴클레오티드 변이체, 단편 및 하이브리드화 서열은 상기한 바와 같은 항원성 또는 면역성 폴리펩티드와 면역학적으로 교차 반응성이 있는 폴리펩티드를 코딩한다. 다른 바람직한 실시태양에서, 이러한 폴리뉴클레오티드는 본 명세서에 구체적으로 나타낸 폴리펩티드 서열의 면역성 활성의 약 50% 이상, 바람직하게는 약 70% 이상, 더 바람직하게는 약 90% 이상의 면역성 활성 수준을 갖는 폴리펩티드를 코딩한다.

코딩 서열 그 자체의 길이와 상관 없이 본 발명의 폴리뉴클레오티드 또는 그의 단편은 그들의 전체 길이가 상당히 변화할 수 있도록 프로모터, 폴리아데닐화 신호, 추가의 제한 효소 부위, 다수 클로닝 부위, 다른 코딩 세그먼트 등과 같은 다른 DNA와 결합할 수 있다. 따라서, 거의 모든 길이의 핵산 단편을 이용할 수 있고, 총 길이는 바람직하게는 의도된 재조합 DNA 프로토콜에서의 사용 및 제조 용이성에 의해 제한되는 것으로 여겨진다. 예를 들어, 총 길이가 약 10,000, 약 5000, 약 3000, 약 2000, 약 1000, 약 500, 약 200, 약 100, 약 50개 염기쌍 길이 등등인(중간의 모든 길이를 포함함) 예시적인 폴리뉴클레오티드 세그먼트가 본 발명의 많은 실시에 유용한 것으로 여겨진다.

본 발명의 폴리뉴클레오티드 조성물은 다양한 잘 확립된 기술 중 어느 기술을 이용해서도 동정, 제조 및(또는) 조작할 수 있다(참고: 일반적으로, 샘브룩(Sambrook) 등, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratories, Cold Spring Harbor, NY,1989, 및 다른 유사 문헌). 예를 들어, 폴리뉴클레오티드는 아래에서 더 상세하게 기재하는 바와 같이, 종양 관련 발현(즉, 본 명세서에 제공된 대표적인 검정을 이용해서 결정할 때, 정상 조직에서보다 종양에서 2 배 이상 더 큰 발현)을 위해 cDNA의 마이크로어레이를 스크리닝함으로써 동정할 수 있다. 이러한 스크린은 예를 들어 어피메트릭스, 인크.(Affymetrix, Inc.)(미국 캘리포니아주 산타 클라라 소재)의 마이크로어레이 기술을 이용해서 제조자의 지시에 따라(및 본질적으로는 쉐나(Schena) 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:10614-10619,1996; 및 헬러(Heller) 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:2150-2155,1997에 기재된 바와 같이) 수행할 수 있다. 별법으로, 폴리뉴클레오티드는 종양 세포와 같은 본 명세서에 기재된 단백질을 발현하는 세포로부터 제조된 cDNA로부터 증폭시킬 수 있다.

시료에 존재하는 관심 표적 서열을 증폭하는 데는 많은 주형 의존적 방법들을 이용할 수 있다. 가장 잘 알려진 증폭 방법 중 하나는 미국 특허 4,683,195, 4,683,202 및 4,800,159에 상세하게 기재된 중합효소 연쇄 반응(PCR™)이다. 간략하면, PCR™에서는, 표적 서열의 반대 상보 스트랜드들 상의 영역에 상보적인 2 개의 프라이머 서열을 제조한다. 과량의 데옥시뉴클레오사이드 트리포스페이트를 DNA 중합효소(예: Taq 중합효소)와 함께 반응 혼합물에 첨가한다. 표적 서열이 시료에 존재하면, 프라이머가 표적에 결합하고, 중합효소는 프라이머를 뉴클레오티드 상에 첨가함으로써 표적 서열을 따라 연장하게 할 것이다. 반응 혼합물의 온도를 높이고 낮춤으로써, 연장된 프라이머를 표적으로부터 해리해서 반응 생성물을 형성하고, 과량의 프라이머는 표적 및 반응 생성물에 결합할 것이고, 이 과정이 반복된다. 바람직하게는, 증폭된 mRNA의 양을 정량화하기 위해 역전사 및 PCR™ 증폭 절차를 수행할 수 있다. 중합효소 연쇄 반응 방법은 당업계에 잘 알려져 있다.

다수가 PCR™ 증폭 기술의 변형인 많은 다른 주형 의존적 방법 중 어느 것이라도 당업계에 용이하게 알려져 있고 입수가능하다. 예시적으로, 이러한 몇몇 방법은 예를 들어 문헌(Eur. Pat. Appl. Publ. No. 320,308 및 미국 특허 4,883,750에 기재된 리가제 연쇄 반응(LCR이라고 불림); PCT 국제 특허 출원 공개 PCT/US87/00880에 기재된 큐베타(Qbeta) 레플리카제; 가닥 치환 증폭(SDA) 및 수복 연쇄 반응(Repair Chain Reaction; RCR)을 포함한다. 다른 증폭 방법은 영국 특허 출원 2 202 328 및 PCT 국제 특허 출원 공개 PCT/US89/01025에 기재되어 있다. 다른 핵산 증폭 절차는 핵산 서열 기반 증폭(NASBA) 및 3SR을 포함하는 전사 기반 증 폭 시스템(TAS)(PCR 국제 특허 출원 공개 WO 88/10315)를 포함한다. 유럽 특허 출원 공개 329,822는 단일 스트랜드 RNA("ssRNA"), ssDNA, 및 이중 스트랜드 DNA(dsDNA)를 주기적으로 합성하는 것을 포함하는 핵산 증폭 방법을 기재한다. PCT 국제 특허 출원 공개 WO 89/06700은 표적 단일 스트랜드 DNA("ssDNA")에 프로모터/프라이머 서열을 혼성화한 후 서열의 많은 RNA 카피(copy)를 전사하는 것에 기반을 둔 핵산 서열 증폭 개요를 기재한다. "RACE"(프로맨(Frohman, 1990) 및 "일측 PCR"(one-sided PCR)(오하라(Ohara),1989)과 같은 다른 증폭 방법도 당업계 숙련자에게 잘 알려져 있다.

잘 알려진 기술을 이용해서 적당한 라이브러리(예: 종양 cDNA 라이브러리)로부터 전체 길이 유전자를 단리하는 데 본 발명의 폴리뉴클레오티드의 증폭된 부분을 사용할 수 있다. 이러한 기술에서는, 증폭에 적당한 1 개 이상의 폴리뉴클레오티드 프로브 또는 프라이머를 이용해서 라이브러리(cDNA 또는 게놈)를 스크리닝한다. 바람직하게는, 라이브러리는 큰 분자를 포함하도록 크기별로 선택한다. 또한, 유전자의 5' 및 상류 영역을 동정하는 데는 랜덤 프라이밍된(random primed) 라이브러리가 바람직할 수 있다. 인트론을 얻어서 5' 서열을 연장하는 데는 게놈 라이브러리가 바람직하다.

혼성화 기술의 경우에는, 부분 서열을 잘 알려진 기술을 이용해서 표지화할 수 있다(예: 닉-번역 또는 ³²P를 이용한 말단 표지화에 의함). 이어서, 일반적으로, 변성된 세균 콜로니를 함유하는 필터(또는 파지 플라크를 함유하는 론(lawn)) 를 표지된 프로브로 혼성화시킴으로써 세균 또는 박테리오파지 라이브러리를 스크리닝한다(참고: 샘브룩 등, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratories, Cold Spring Harbor, NY,1989). 혼성화 콜로니 또는 플라크를 선택 및 확장하고, 추가 분석을 위해 DNA를 단리한다. 예를 들어, 부분 서열로부터의 프라이머 및 벡터로부터의 프라이머를 사용하여 PCR에 의해 cDNA 클론을 분석해서 추가 서열의 양을 결정할 수 있다. 1 개 이상의 중첩 클론을 동정하기 위해 제한 지도 및 부분 서열을 생성할 수 있다. 이어서, 일련의 결실 클론을 생성하는 것을 포함할 수 있는 표준 기술을 이용해서 완전 서열을 결정할 수 있다. 이어서, 그 결과로 얻은 중첩 서열을 단일의 인접 서열에 어셈블리할 수 있다. 잘 알려진 기술을 이용해서 적당한 단편을 결찰함으로써 전체 길이 cDNA 분자를 생성할 수 있다.

별법으로, 상기한 것과 같은 중복 기술이 부분 cDNA 서열로부터 전체 길이 코딩 서열을 얻는 데 유용할 수 있다. 이러한 증폭 기술 중 한가지는 제한 효소를 이용해서 유전자의 기지 영역에 단편을 생성하는 인버스(inverse) PCR(참고: 트리글리아(Triglia) 등, Nucl. Acids Res.16:8186,1988)다. 이어서, 단편을 분자내 결찰에 의해 원형으로 만들고, 기지 영역으로부터 유래된 발산형 프라이머와 함께 PCR을 위한 주형으로 사용한다. 다른 접근법에서는, 링커 서열에 대한 프라이머 및 기지 영역에 특이적인 프라이머를 이용한 증폭에 의해 부분 서열에 인접한 서열을 회복할 수 있다. 대표적으로, 증폭된 서열에 대해서는 동일 링커 프라이머 및 기지 영역에 특이적인 제 2 프라이머를 이용해서 제 2 회의 증폭을 행한다. 기지 서열로부터 반대 방향으로의 연장을 개시하는 2 개의 프라이머를 사용하는 이 절차에 대한 변화가 WO 96/38591에 기재되어 있다. 또 다른 이러한 기술은 "cDNA 말단의 신속 증폭"(rapid amplification of cDNA ends; RACE)으로 알려져 있다. 이러한 기술은 기지 서열의 5' 및 3'에 있는 서열을 동정하는 데 polyA 영역 또는 벡터 서열에 혼성화하는 내부 프라이머 및 외부 프라이머를 사용하는 것을 포함한다. 추가의 기술은 캡쳐 PCR(capture PCR)(라저스트롬(Lagerstrom) 등, PCR Methods Applic. 1:111-19,1991) 및 워킹 PCR(walking PCR)(파커(Parker) 등, Nucl. Acids. Res. 19:3055-60,1991)을 포함한다. 증폭을 이용하는 다른 방법들도 전체 길이 cDNA 서열을 얻는 데 이용할 수 있다.

몇몇 경우, 젠뱅크(GenBank)로부터 입수가능한 것과 같은 발현된 서열 태그(EST) 데이터베이스에 제공된 서열 분석에 의해 전체 길이 cDNA 서열을 얻는 것이 가능하다. 중첩 EST에 대한 조사는 일반적으로 잘 알려진 프로그램(예: NCBI BLAST 조사)를 이용해서 수행하고, 이러한 EST를 이용해서 인접 전체 길이 서열을 생성할 수 있다. 또한, 전체 길이 DNA 서열은 게놈 단편 분석에 의해 얻을 수 있다.

본 발명의 다른 실시태양에서는, 상기 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열 또는 그의 단편, 또는 융합 단백질 또는 그의 기능적 균등물을 이용하여 재조합 DNA 분자에서 적절한 숙주 세포에서의 폴리펩티드 발현을 지시할 수 있다. 유전자 암호의 본래의 퇴화 때문에, 실질적으로 동일하거나 또는 기능적으로 균등한 아미노산 서열을 코딩하는 다른 DNA 서열을 생성할 수 있고, 이들 서열을 이용 해서 주어진 폴리펩티드를 클로닝 및 발현할 수 있다.

원하는 폴리펩티드를 코딩하는 서열은 당업계에 잘 알려진 화학적 방법을 이용해서 전부 또는 일부 합성할 수 있다(참고: 카루더스, 엠. 에이취.(Caruthers, M.H.) 등(1980) Nucl. Acids Res. Symp. Ser. 215-223, 호른; 티.(Horn, T.) 등 Nucl. Acids Res. Symp. Ser. 225-232).

원하는 폴리펩티드를 발현하기 위해, 폴리펩티드 또는 그의 기능적 균등물을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 적당한 발현 벡터, 즉, 삽입된 코딩 서열의 전사 및 번역에 필요한 요소를 함유하는 벡터에 삽입할 수 있다. 당업계 숙련자에게 잘 알려진 방법들을 사용해서 관심 폴리펩티드를 코딩하는 서열 및 적당한 전사 및 번역 제어 요소를 함유하는 발현 벡터를 제작할 수 있다. 이들 방법은 시험관내 재조합 DNA 기술, 합성 기술 및 생체내 유전자 재조합을 포함한다. 이러한 기술은 예를 들어 문헌(샘브룩, 제이.(Sambrook, J.) 등(1989), Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press, Plainview, N.Y.; 및 오수벨, 에프.엠.(Ausubel, F.M.) 등(1989) Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York, N.Y.)에 기재되어 있다.

발현 벡터에 존재하는 "제어 요소" 또는 "조절 서열"은 숙주 세포 단백질과 상호작용하여 전사 및 번역을 수행하는 벡터의 비번역 영역, 즉 인핸서, 프로모터, 5' 및 3' 비번역 영역이다. 이러한 요소는 강도 및 특이성이 다양할 수 있다. 사용되는 벡터 시스템 및 숙주에 좌우해서, 구성적 및 유도성 프로모터를 포함하는 적당한 전사 및 번역 요소를 어떠한 개수라도 이용할 수 있다.

포유동물 세포에서는, 많은 바이러스 기반 발현 시스템을 일반적으로 이용할 수 있다. 예를 들어, 아데노바이러스가 발현 벡터로 사용되는 경우, 관심 폴리펩티드를 코딩하는 서열을 후기(late) 프로모터 및 3 부분으로 나누어진 리더 서열로 이루어진 아데노바이러스 전사/번역 복합체 내에 결찰시킬 수 있다. 감염된 숙주 세포에서 폴리펩티드를 발현할 수 있는 생존가능 바이러스를 얻는 데에는 게놈의 비필수 E1 또는 E3 영역에서의 삽입을 이용할 수 있다(로간, 제이.(Logan, J.) 및 쉔크, 티.(Shenk, T.)(1984) Proc. Natl. Acad. Sci. 81:3655-3659). 추가로, 포유동물 숙주 세포에서의 발현을 증가시키는 데에는 라우스 육종 바이러스(RSV) 인핸서와 같은 전사 인핸서를 이용할 수 있다.

또, 관심 폴리펩티드를 코딩하는 서열의 더 효율적인 번역을 달성하는 데에는 특이적 개시 신호를 이용할 수 있다. 이러한 신호는 ATG 개시 코돈 및 인접 서열을 포함한다. 폴리펩티드를 코딩하는 서열, 그의 개시 코돈, 및 상류 서열을 적당한 발현 벡터에 삽입하는 경우, 추가의 전사 또는 번역 제어 신호가 필요하지 않을 수 있다. 그러나, 코딩 서열 또는 그의 일부만 삽입되는 경우에는, ATG 개시 코돈을 포함하는 외인성 번역 제어 신호가 제공되어야 한다. 게다가, 개시 코돈은 전체 인서트의 번역을 보장하기 위해 정확한 판독 프레임에 있어야 한다. 외인성 번역 요소 및 개시 코돈은 다양한 천연 및 합성 기원으로부터 유래될 수 있다. 발현 효율은 문헌(샤프, 디.(Scharf,D.) 등(1994) Results Probl. Cell Differ. 20:125-162)에 기재된 것들과 같은 사용되는 특정 세포계에 적절한 인핸서의 함입에 의해 증진시킬 수 있다.

폴리뉴클레오티드에 의해 코딩되는 생성물의 발현을 생성물에 특이적인 다클론 또는 단일클론 항체를 이용하여 검출 및 측정하기 위한 다양한 프로토콜이 당업계에 알려져 있다. 예로는 효소 결합 면역흡착 검정법(ELISA), 방사 면역 검정법(RIA), 및 형광 활성 세포 선별법(FACS)을 포함한다. 어떤 주어진 폴리펩티드 상의 2 개의 비간섭 에피톱에 대해 반응성인 단일클론 항체들을 이용하는 2-부위 단일클론 기반 면역검정법이 몇몇 응용에서는 바람직할 수 있지만, 경쟁 결합 검정도 이용할 수 있다. 이들 검정 및 다른 검정들은 다른 문헌들 중에서도 햄프톤, 알.(Hampton,R.) 등의 문헌(1990; Serological Methods, a Laboratory Manual, APS Press, St. Paul. Minn.) 및 매독스, 디.이.(Maddox, D.E.) 등의 문헌(1983; J. Exp. Med. 158:1211-1216)에 기재되어 있다.

제약 조성물 및 방법

원한다면, 본 명세서에 기재된 화합물은 항미생물, 항바이러스 및 항진균 화합물 또는 치료제, 다양한 DNA 기반 치료제, RNA 기반 치료제, 폴리펩티드 기반 치료제와 같은 다른 치료 양식과 함께 및(또는) 다른 면역 효과기(immunoeffector)와 함께 조합해서 투여할 수 있다. 사실상, 추가 성분(들)이 표적 세포 또는 숙주 조직과 접촉할 때 유의한 유해 효과를 일으키지 않는다면, 본질적으로는 다른 어떠한 성분도 포함시킬 수 있다. 따라서, 조성물은 실행되는 본 발명의 특별한 실시태양(들)을 위해 필요한 또는 요망되는 다양한 다른 작용제(agent)와 함께 전달시킬 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 제약 조성물은 1 개 이상의 치료 단백질을 코딩하는 DNA, 안티센스 RNA, 리보자임 등을 포함할 수 있거나, 또는 그와 함께 사용할 수 있다.

한 양상으로서, 항원의 보조적 또는 증진 효과를 제공하기 위해, 즉 환자 또는 대상자의 면역 반응을 증진시키기 위해, 본 발명의 화합물 및 이를 포함하는 조성물을 항원과 함께 투여할 수 있다. 다른 한 양상으로서, 본 발명의 화합물 자체의 치료 효과를 위해, 본 발명의 화합물 및 조성물을 외인성 항원 부재하에 투여한다.

본 발명의 화합물 또는 조성물을 외인성 항원 없이 투여하는 다른 한 양상에서, 본 발명은 진핵성 대상자, 특히 동물, 바람직하게는 사람의 감염 질환을 치료, 호전 및(또는) 실질적으로 예방하는 방법을 제공한다. 미생물 공격에 대한 선천성 면역 반응에서 TLR 매개 신호전달이 중요하다고 하면, 이러한 경로를 선택적으로 최소한의 독성으로 자극할 수 있는 능력은 폭넓은 범위의 감염원에 대한 예방적 및(또는) 치료적 치료 양식을 위한 강력한 접근법을 나타낸다.

본 명세서에 기재된 방법들은 본질적으로는 세균, 바이러스, 기생충 및 진균을 포함하는 어떠한 유형의 감염원에 대해서도 적용할 수 있다. 예를 들면, 본 발명은 슈도모나스(Pseudomonas), 에쉐리키아(Escherichia), 클렙시엘라(Klebsiella), 엔테로박터(Enterobacter), 프로테우스(Proteus), 세라티아(Serratia), 칸디다(Candida), 스태필로코시(Staphylococci), 스트렙토코시(Streptococci), 클라미디아(Chlamydia), 마이코플라즈마(Mycoplasma) 및 많은 다른 것들로부터의 종에 의한 세균성 감염의 예방적 및(또는) 치료적 치료에 유용하다. 본 발명에 따라 치료될 수 있는 예시적인 바이러스성 병태는 예를 들어 인플 루엔자 바이러스, 아데노바이러스, 파라인플루엔자 바이러스, 리노바이러스, 호흡기 합포체 바이러스(RSV), 헤르페스 바이러스, 사이토메갈로바이러스, B형 및 C형 간염 바이러스 및 기타 등등에 의해 발생하는 것들을 포함한다. 예시적인 진균은 예를 들어 아스페르길리스(Aspergillis), 칸디다 알비칸스(Candida albicans), 크립토코쿠스 네오포르만스(Cryptococcus neoformans), 코시디오이데스 이미투스(Coccidioides immitus) 및 기타 등등을 포함한다.

한 예시적인 실시태양에서, 본 발명은 특히 병원성(nosocomial) 세균 및 바이러스 감염과 같은 감염을 발달시켰거나 또는 발달시킬 위험이 있는 대상자, 특히 면역 저하 대상자의 치료 방법을 제공한다. 매년 4 천만명의 입원자 중 약 2 백만명이 그들이 머무르는 동안 병원성 감염을 발달시키고, 이들 중 약 1 %, 또는 약 4 십만명의 환자가 병원성 폐렴을 발달시키고, 이들 중 7000 명이 넘는 환자가 죽는다. 이 때문에 병원성 폐렴이 병원에서 획득한 감염으로 인한 사망의 주원인이다. 따라서, 이 실시태양은 병원성 감염 치료에 있어서 효과적인 예방적 접근을 위한 중요한 필요를 충족시킨다.

한 관련 실시태양에서, 본 발명은 기회성 감염으로부터 또는 억압된 또는 잠복 감염의 재활성화로부터 폐렴을 발달시켰거나 또는 발달시킬 위험이 있는 HIV 양성 환자와 같은 면역 저하 환자를 위한 예방적 치료를 제공한다. 1992년에, 미국에서만도 AIDS 환자에게서 약 20,000건의 주폐포자충(Pneumocystis carinii) 감염이 발생했음이 보고되었다. 추가로, 모든 AIDS 환자의 60 - 70%가 그들이 병을 앓고 있는 동안의 어느 시점에서 주폐포자충을 얻는다. 따라서, 이 실시태양에서 본 발명은 이러한 위험 집단에 효과적인 예방 방법을 제공한다.

다른 한 관련 실시태양에서는, 본 발명의 방법을 예를 들어 낭포성 섬유증 환자, 만성 폐쇄성 폐질환 환자 및 다른 면역 저하 및(또는) 공공시설에 수용된 환자를 포함하는, 면역 저하될 수 있고(있거나) 감염 질환을 발달시킬 위험이 있을 수 있는 다른 환자 집단을 치료하는 데에 사용한다.

본 발명의 다른 한 양상에서는, 본 발명의 화합물 및 조성물을 부비강염, 만성 비부비동염, 천식, 아토피성 피부염 및 건선과 같은 알레르기성 장애 및 병태를 치료, 호전 또는 실질적으로 예방하는 방법에 이용한다(외인성 항원 없이). 이러한 접근은 IL-4 생성 또는 IL-4 활성에 대한 과민반응성을 특징으로 하는 상동적 알레르기형 사이토킨 반응과 경쟁할 수 있는 표적 세포로부터 사이토킨 생성을 활성화할 수 있는 화합물의 능력에 적어도 부분적으로 기반을 둔다. 본 명세서에 기재된 일부 단당류 및 이당류 화합물의 투여로 항원 프로세싱 및 제시 세포 뿐만 아니라 다른 세포로부터의 IFN-감마 및 IL-12 발현이 일어나고, 결과적으로 IL-4, 5, 6, 10 및 13과 같은 알레르기성 반응과 관련된 사이토킨의 하향 조절이 일어난다.

본 발명의 다른 한 양상에서는, 본 발명의 화합물 및 조성물을 자기면역 질환 및 병태의 치료 방법에 사용한다(외인성 항원 없이). 이 실시태양에서 사용하기 위한 화합물은 대표적으로는 어떤 주어진 병태와 관련된 자기면역 반응이 호전되거나 또는 실질적으로 예방되도록 1 개 이상의 톨 유사 수용체, 특히 Tlr2 및(또는) Tlr4에 길항작용하거나, 그것을 억제하거나 또는 다른 방식으로 부정적으로 조절할 수 있는 것들로부터 선택할 수 있다. 예를 들면, 이 실시태양에 의해 제공되 는 방법은 염증성 장 질환, 류마티스성 관절염, 만성 관절염, 다발성 경화증 및 건선과 같은 병태의 치료에 이용할 수 있다.

또, 본 발명의 화합물은 면역화된 동물에서의 항체 생성을 증진시키고, 사이토킨의 생성을 자극하고, 세포독성 T-임파구 반응을 포함하는 세포 매개 면역 반응을 자극하는 보조제 및 면역 효과기로 사용할 수 있다.

본 발명의 방법, 예를 들어, 개체의 면역 반응을 성취하기 위한 방법에서는, 본 발명의 화합물 및 조성물을 주사 또는 섭취용의 제약학적으로 허용되는 담체와 함께 제제화할 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 "제약학적으로 허용되는 담체"는 활성 성분의 면역조절 활성을 방해하지 않고, 그것이 투여될 환자에게 독성이 없는 매질을 의미한다. 제약학적으로 허용되는 담체는 수중유 또는 유중수 에멀젼, 수성 조성물, 리포좀, 마이크로 구슬 및 마이크로좀을 포함한다. 예를 들어, 담체는 본 발명의 화합물이 구체(sphere) 또는 입자 매트릭스 내에 있거나 또는 구체 또는 입자의 표면에 흡착된 마이크로 구체 또는 마이크로 입자일 수 있다. 또, 담체는 트리에틸아민, 트리에탄올아민, 또는 제제를 사실상 알칼리성이 되게 하는 다른 작용제를 함유하는 수용액 또는 수성 미셀 분산액, 또는 수산화알루미늄, 수산화칼슘, 인산칼슘 또는 티로신 흡착질을 함유하는 현탁액일 수 있다. 또, 담체는 모든 용매, 분산 매질, 비히클, 코팅, 희석제, 항균 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연제, 완충제, 운반 용액, 현탁액, 콜로이드 등을 포함할 수 있다. 제약 활성 물질을 위한 이러한 매질 및 작용제의 사용은 당업계에 잘 알려져 있다. 어떠한 통상의 매질 또는 작용제든 그것이 활성 성분과 상용성이 없는 경우를 제외하고는, 그 것을 치료 조성물에 사용하는 것으로 고려한다.

비경구, 즉 복강내, 피하 또는 근육내 투여할 수 있는 본 발명의 화합물의 제제는 다음 바람직한 담체를 포함한다. 피하용으로 바람직한 담체의 예는 인산염 완충 염수(PBS) 용액, 및 USP 주사용수 중의 0.01 - 0.1% 트리에탄올아민을 포함한다. 근육내 주사용으로 적당한 담체는 10% USP 에탄올, 40% 프로필렌 글리콜, 및 나머지로 5% 덱스트로스와 같은 허용되는 등장성 용액을 포함한다.

정맥내용으로 바람직한 담체의 예는 10% USP 에탄올, 40% USP 프로필렌 글리콜 및 나머지로 USP 주사용수를 포함한다. 또 다른 허용되는 담체는 10% USP 에탄올 및 USP 주사용수를 포함하고; 또 다른 허용되는 담체는 USP 주사용수 중의 0.01 - 0.1% 트리에탄올아민이다. 제약학적으로 허용되는 비경구용 용매는 활성 성분을 제거함이 없이 5 마이크론 필터를 통해 여과될 수 있는 용액 또는 분산액을 제공하는 것이다.

본 발명의 조성물의 바람직한 투여 방법은 점막 투여, 특히 비내 투여 또는 흡입 투여(폐 투여)이다. 폐 약물 전달은 액체 연무기, 에어로졸 기반 정량 흡입기(MDI) 및 건조 분말 분산 장치를 포함해서 몇 가지 상이한 접근에 의해 달성할 수 있다. 이러한 유형의 투여에 사용하기 위한 조성물은 대표적으로 건조 분말 또는 에어로졸이다. 본 발명의 바람직한 투여 방법인 에어로졸 투여의 경우, 조성물은 흡입기에 의해 전달되고, 이들 중 몇 가지 유형을 아래에 기재한다.

건조 분말은 활성 성분 이외에도 담체, 흡수 증진제, 및 임의로, 다른 성분을 함유한다. 담체는 예를 들어 단당류, 이당류 또는 다당류, 당 알콜 또는 다른 폴리올이다. 적당한 담체는 락토스, 글루코스, 라피노스, 멜레지토스, 락티톨, 말티톨, 트레할로스, 수크로스, 만니톨 및 전분을 포함한다. 락토스, 특히 그의 일수화물 형태가 특히 바람직하다. 또, 폴리펩티드, 계면활성제, 알킬 글리코시드, 지방산의 아민염 또는 인지질과 같은 흡수 증진제도 포함한다. 제제의 성분은 대표적으로 미분 형태이어야 하고, 즉, 레이저 회절 기기 또는 쿨터 카운터(coulter counter)로 측정할 때 부피 중위 입경(volume median diameter)이 일반적으로 약 30 내지 약 200 마이크론이어야 한다. 원하는 입자 크기는 당업계에 알려진 방법, 예를 들어 밀링(milling), 미세화(micronization) 또는 직접 침전을 이용하여 얻을 수 있다.

비내 투여 경로는 많은 다른 투여 형태에 비해 많은 이점을 본 발명의 화합물에 제공한다. 예를 들면, 비내 투여의 한가지 이점은 편리성이다. 주사 시스템은 피하 주사기의 멸균을 필요로 하고, 공공 수용시설에서는 의료 인력이 오염된 침에 우연히 찔림으로써 질환에 걸릴 수 있는 위험을 염려하게 만든다. 공공수용시설에 사용한 침 및 주사기의 안전한 폐기를 위한 엄격한 요건도 부담시켜야 한다. 이와 대조적으로, 비내 투여는 환자 및 주치 의료 인력의 편에서는 시간을 거의 필요로 하지 않고, 공공수용시설에 대해서는 주사보다 부담을 훨씬 덜 준다.

비내 투여의 제 2의 중요한 이점은 약물 전달 시스템에 대한 환자의 수용도이다. 비내 투여는 비침입성으로 인식되고, 통증이 수반되지 않으며, 유의한 후유증이 없고, 증상을 보이는 환자에게는 신속한 경감에 대한 희열을 발생시킨다. 이것은 환자가 어린이일 때 특히 유리하다. 다른 한 중요한 가치는 환자가 코 스프 레이의 규정된 투여량(들)을 자가 투여할 수 있다는 점이다.

비내 투여를 위해서는, 본 발명의 조성물을 액상물 또는 고상물로 제제화할 수 있다. 이러한 조성물은 1 개 이상의 보조제, 비막을 가로지르는 침투에 의한 활성 성분 흡수 증진제, 및 (액상 조성물의 경우) 수성 희석제, 예를 들어 물을 함유할 수 있다. 별법으로, 희석제는 인산염 완충제와 같은 수성 완충제를 포함할 수 있다. 추가로, 조성물은 임의로 1 개 이상의 다가 알콜, 및 예를 들어 젠타마이신, 바시트라신(0.005%) 또는 크레졸과 같은 1 개 이상의 방부제를 포함할 수 있다. 조성물은 어토마이저(atomizer), 연무기, 스프레이어, 드롭퍼(dropper), 또는 용액과 비점막의 접촉을 확실하게 하는 다른 장치를 이용함으로써 스프레이 형태로 비강에 투여할 수 있다. 이 장치는 환자가 사용할 수 있는 간단한 코 스프레이어와 같은 간단한 것일 수 있거나, 또는 의사 진료실 또는 의료 시설에서 사용할 수 있는 조성물을 더 정확하게 분배하기 위한 더 정교한 기기일 수 있다.

코용 분말 조성물은 원하는 입자 크기를 갖는 활성 작용제 및 부형제를 혼합함으로써 제조할 수 있다. 첫째, 활성 작용제 및 시클로덱스트린 부형제의 용액을 제조한 후, 침전, 여과 및 분쇄한다. 또한, 동결 건조에 의해 용매를 제거한 후, 제약 문헌으로부터 알려진 통상의 기술을 이용함으로써 원하는 입자 크기로 분말을 분쇄하는 것도 가능하다. 최종 단계는 직경이 바람직하게는 30 내지 200 마이크론인 입자를 얻기 위한 크기 분류, 예를 들어 체질(sieving)에 의한 크기 분류이다. 분말은 코 취입기(insufflator)를 사용해서 투여할 수 있거나, 또는 그것은 흡입 또는 취입 장치에 설치된 캡슐에 둘 수 있다. 침을 캡슐을 통해 통과시켜서 캡슐 의 위와 아래에 구멍을 만들고, 공기를 보내서 분말 입자를 내뿜는다. 또한, 분말 제제는 불활성 가스의 제트 스프레이로 투여할 수 있거나 또는 액상 유기 유체에 현탁할 수 있다.

한 특별한 실시태양에서, 제약 조성물은 제어 또는 지속 방출 시스템으로 전달할 수 있다. 한 실시태양에서는, 제어 또는 지속 방출을 달성하기 위해 펌프를 이용할 수 있다(예를 들어, 랭거(Langer),Science,249:1527-1533(1990); 세프톤(Sefton),1987,CRC Crit.Ref.Biomed.Eng. 14:10; 부쉬왈드(Buschwald) 등,1980,Surgery 88:507; 사우덱(Saudek) 등,1989 N.Eng.J.Med.321:574). 다른 한 실시태양에서는, κ-오피오이드 수용체 효현제 및(또는) 오피오이드 길항제의 제어 또는 지속 방출을 달성하기 위해 중합체 물질을 사용할 수 있다(참조: 예를 들어, Medical Applications of Controlled Release, 랭거 및 와이즈(Wise) 편집, CRC Press, 미국 플로리다주 보카 래톤, 1974); Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance, 스몰렌(Smolen) 및 볼(Ball) 편집, Wiley, 미국 뉴욕(1984); 랭거 및 페파스(Peppas), 1983, J. Macromol. Sci. Rev. Macrol. Chem. 23:61; 또한, 레비(Levy) 등, 1985 Science 228:190; 듀링(During) 등, 1989, Ann. Neurol. 25:351; 호워드(Howard) 등,1989, J.Neurosurg. 7 1:105; 미국 특허 5,679,377; 미국 특허 5,916,597; 미국 특허 5,912,015; 미국 특허 5,989,463; 미국 특허 5,128,326; PCT 공개 WO 99/12154, 및 PCT 공개 WO 99/20253). 지속 방출 제제에 사용되는 중합체의 예는 폴리(2-히드록시 에틸 메타크릴레이트), 폴리(메틸 메타크릴레이트), 폴리(아크릴산), 폴리(에틸렌-코-비닐 아세테이트), 폴리(메타크릴산), 폴리글리코리드(PLG), 폴리안히드라이드, 폴리(N-비닐 피롤리돈), 폴리(비닐 알콜), 폴리아크릴아미드, 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리악티드(PLA), 폴리(락티드-코-글리코리드)(PLGA), 및 폴리오르토에스테르를 포함하지만, 열거된 것에 제한되는 것은 아니다. 바람직한 한 실시태양에서, 지속 방출 제제에 사용되는 중합체는 불활성이고, 침출성 불순물이 없고, 저장 안정성이 있고, 멸균성이고, 생체분해성이다. 또 다른 한 실시태양에서는, 제어 또는 지속 방출 시스템을 치료 표적에 근접해서 놓을 수 있고, 따라서 체계적 투여량의 일부만을 필요로 한다(참조: 예를 들어, 굿슨(Goodson), Medical Applications of Controlled Release, vol.2, pp.115-138(1984)).

이러한 제약 조성물과 함께 사용하기 위한 담체는 생체적합성이고, 또한 생체분해성일 수 있다. 몇몇 실시태양에서, 제제는 바람직하게는 상대적으로 일정한 수준의 활성 성분 방출을 제공한다. 그러나, 다른 실시태양에서는, 투여하자마자 바로 더 신속한 방출 속도가 요망될 수 있다. 이러한 조성물의 제제는 공지 기술을 이용하는 당업계 보통의 기술 수준 내에 있다. 이 점에서 유용한 예시적인 담체는 폴리(락티드-코-글리콜리드), 폴리아크릴레이트, 라텍스, 전분, 셀룰로오스, 덱스트란 등의 마이크로 입자를 포함한다. 다른 예시적인 지연 방출 담체는 비액상 친수성 코어(예: 가교된 다당류 또는 올리고당류) 및 임의로, 인지질과 같은 친양쪽성 화합물을 포함하는 외층을 포함하는 초분자 바이오벡터를 포함한다(참조: 예를 들어, 미국 특허 5,151,254 및 PCT 출원 WO 94/20078, WO 94/23701 및 WO 96/06638). 지속 방출 제제에 함유되는 활성 화합물의 양은 주입(implantation) 부위, 방출 속도 및 예상 기간, 및 치료 또는 예방할 병태의 성질에 좌우된다.

본 발명의 화합물은 개체의 면역 반응을 성취하거나 또는 증진시키기 위해 유효량 또는 제약학적 유효량으로 개체에게 투여한다. 본 명세서에서 사용되는 "유효량" 또는 "제약학적 유효량"은 비히클 또는 음성 대조군을 능가하는 반응을 나타내는 양이다. "보조적 유효량"는 항원과 함께 투여할 때 항원 단독이 일으키는 반응을 능가하는 반응을 나타내는 문제의 화합물의 양이다. 환자에게 투여하는 본 발명의 화합물의 정확한 투여량은 사용되는 특정 화합물, 투여 경로, 제약 조성물 및 환자에 좌우될 것이다. 예를 들어, 항체 반응을 증진시키기 위해 피하 투여할 때, 사용되는 화합물의 양은 대표적인 70 ㎏ 체중 성인 환자에게 투여하는 것을 기준으로 할 때, 1 내지 약 250 ㎍, 바람직하게는 약 25 내지 약 50 ㎍이다.

다른 한 실시태양에서, 본 발명의 예시적인 면역성 조성물, 예를 들어, 면역성 및(또는) 백신 조성물은 폴리펩티드가 현장에서 생성되도록 1 개 이상의 상기한 폴리펩티드를 코딩하는 DNA를 포함한다. 상기한 바와 같이, 폴리뉴클레오티드는 당업계 보통의 기술을 가진 자에게 알려져 있는 다양한 어떠한 전달 시스템으로도 투여할 수 있다. 사실상, 롤란드(Rolland)의 문헌(Crit. Rev. Therap. Drug Carrier Systems 15:143-198,1998) 및 거기에 인용된 참고 문헌에 기재된 것들과 같은 많은 유전자 전달 기술이 당업계에 잘 알려져 있다. 물론, 적당한 폴리뉴클레오티드 발현 시스템은 환자에게서의 발현을 위한 필요한 조절 DNA 조절 서열(예: 적당한 프로모터 및 종결 신호)을 함유할 것이다.

따라서, 몇몇 실시태양에서는, 본 명세서에 기재된 면역성 폴리펩티드를 코 딩하는 폴리뉴클레오티드를 많은 공지의 바이러스 기반 시스템 중 어떠한 시스템이라도 이용해서 발현을 위해 적당한 포유동물 숙주 세포에 도입한다. 한 예시적인 실시태양에서는, 레트로바이러스가 유전자 전달 시스템에 편리하고 효과적인 플랫폼을 제공한다. 본 발명의 폴리펩티드를 코딩하는 선택된 뉴클레오티드 서열은 당업계 공지 기술을 이용해서 벡터에 삽입하고 레트로바이러스 입자에 패키지화할 수 있다. 이어서, 재조합 바이러스를 단리하고, 대상자에게 전달할 수 있다. 많은 예시적인 레트로바이러스 시스템이 기재되어 있다(예를 들어, 미국 특허 5,219,740; 밀러(Miller) 및 로스만(Rosman)(1989) BioTechniques 7:980-990; 밀러, 에이.디.(Miller, A.D.)(1990) Human Gene Therapy 1:5-14; 스카르파(Scarpa) 등(1991) Virology 180:849-852; 번즈(Burns) 등(1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:8033-8037; 및 보리스-로리(Boris-Lawrie) 및 테민(Temin)(1993) Cur.Opin.Genet.Develop. 3:102-109).

게다가, 많은 예시적인 아데노바이러스 기반 시스템도 또한 기재되어 있다. 숙주 게놈에 통합되는 레트로바이러스와는 달리, 아데노바이러스는 염색체외적으로 존속하고, 따라서 삽입 돌연변이 유발과 관련된 위험을 최소화시킨다(하지-아메드(Haj-Ahmad) 및 그라함(Graham)(1986) J. Virol. 57:267-274; 베트(Bett) 등(1993) J. Virol. 67:5911-5921; 미터레더(Mittereder) 등(1994) Human Gene Therapy 5:717-729; 세쓰(Seth) 등(1994) J.Virol. 68:933-940; 바르(Barr) 등(1994) Gene Therapy 1:51-58; 버크너, 케이.엘.(Berkner, K.L.)(1988) BioTechniques 6:616-629; 및 리취(Rich) 등(1993) Human Gene Therapy 4:461-476).

또한, 폴리뉴클레오티드 전달을 위해 다양한 아데노 부속 바이러스(AAV) 벡터 시스템도 개발되었다. AAV 벡터는 당업계에 잘 알려진 기술을 이용해서 쉽게 제작할 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 5,173,414 및 5,139,941; 국제 공개 WO 92/01070 및 WO 93/03769; 렙코우스키(Lebkowski) 등(1988) Molec. Cell. Biol. 8:3988-3996; 빈센트(Vincent) 등(1990) Vaccines 90(Cold Spring Harbor Laboratory Press); 카터, 비.제이.(Carter, B.J.)(1992) Current Opinion in Biotechnology 3:533-539; 무지크즈카, 엔.(Muzyczka, N.)(1992) Current Topics in Microbiol. and Immunol. 158:97-129; 코틴, 알.엠.(Kotin, R.M.)(1994) Human Gene Therapy 5:793-801; 쉘링(Shelling) 및 스미드(Smith) (1994) Gene Therapy 1:165-169; 및 조우(Zhou) 등(1994) J. Exp. Med. 179:1867-1875를 참고한다.

유전자 전이에 의해 본 발명의 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 전달하는 데 유용한 추가의 바이러스 벡터는 백시니아 바이러스(vaccinia virus) 및 조류 폭스바이러스와 같은 폭스 바이러스과로부터 유래되는 것들을 포함한다. 예를 들면, 신규 분자를 발현하는 백시니아 바이러스 재조합체는 다음과 같이 제작할 수 있다. 먼저, 폴리펩티드를 코딩하는 DNA를 적당한 벡터에 그것이 백시니아 프로모터, 및 티미딘 키나제(TK)를 코딩하는 서열과 같은 플랭킹 백시니아 DNA 서열에 인접하도록 삽입한다. 이어서, 이 벡터를 이용해서 세포를 형질감염시키고, 이것을 동시에 백시니아로 형질감염시킨다. 동종 재조합은 관심 폴리펩티드를 코딩하는 유전자 외에 백시니아 프로모터를 바이러스 게놈에 삽입하는 기능을 한다. 이 결과 얻은 TK.sup.(-) 재조합체는 5-브로모데옥시우리딘 존재 하에서 세포를 배 양하고 그에 내성인 바이러스 플라크를 골라냄으로써 선택할 수 있다.

백시니아 기반 감염/형질감염 시스템은 유기체의 숙주 세포에서 본 명세서에 기재된 1 개 이상의 폴리펩티드의 유도성 일시발현 또는 동시발현을 제공하는 데 편리하게 이용할 수 있다. 이 특별한 시스템에서는, 먼저, 세포를 박테리오파지 T7 RNA 중합효소를 코딩하는 백시니아 바이러스 재조합체로 시험관내 감염시킨다. 이 중합효소는 그것이 T7 프로모터를 갖는 주형만을 전사한다는 점에서 절묘한 특이성을 나타낸다. 감염 후, 세포를 T7 프로모터에 의해 관심 폴리뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드들로 형질감염시킨다. 백시니아 바이러스 재조합체로부터 세포질에서 발현된 중합효소는 형질감염된 DNA를 RNA로 전사하고, 이어서 이것을 숙주 번역기에 의해 폴리펩티드로 번역한다. 이 방법은 많은 양의 RNA 및 그의 번역 생성물의 고수준의 일시적 세포질 생성을 제공한다. 예를 들어, 엘로이-스테인(Elroy-Stein) 및 모스(Moss)의 문헌(Proc. Natl. Acad. Sci. USA(1990) 87:6743-6747; 푸에르스트(Fuerst) 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA(1986) 83:8122-8126)을 참조한다.

별법으로, 파울폭스 바이러스(fowlpox virus) 및 카나리폭스 바이러스(canarypox virus)와 같은 조류 폭스 바이러스도 관심 코딩 서열을 전달하는 데 이용할 수 있다. 포유동물 병원체로부터 면역원을 발현하는 재조합 조류 폭스 바이러스는 비조류 종에 투여할 때 방어 면역성을 제공하는 것으로 알려져 있다. 조류 폭스속의 구성원들이 감수성 조류종에서만 생산적으로 복제하고 따라서 포유동물 세포에서는 감염성이 없기 때문에 조류 폭스 벡터의 사용은 사람 및 다른 포유동물 종에 특히 바람직하다. 재조합 조류 폭스 바이러스를 생산하는 방법은 당업계에 알려져 있고, 백시니아 바이러스 생산에 관해서 상기한 바와 같이 유전자 재조합을 이용한다. 예를 들어, WO 91/12882; WO 89/03429; 및 WO 92/03545를 참조한다.

또한, 미국 특허 5,843,723; 6,015,686; 6,008,035 및 6,015,694에 기재된 벡터들과 같은 많은 알파바이러스 벡터 중 어느 것이라도 본 발명의 폴리뉴클레오티드 조성물 전달에 이용할 수 있다. 또한, 베네주엘라말 뇌염(Venezuelan Equine Encephalitis;VEE)에 기반을 둔 몇몇 바이러스도 이용할 수 있고, 이들의 예시적인 예는 미국 특허 5,505,947 및 5,643,576에서 찾을 수 있다.

게다가, 마이클(Michael) 등의 문헌 (J. Biol. Chem.(1993) 268:6866-6869) 및 와그너(Wagner) 등의 문헌(Proc. Natl. Acad. Sci. USA(1992) 89:6099-6103)에 기재된 아데노바이러스 키메릭 벡터와 같은 분자 컨쥬게이트 벡터도 본 발명 하의 유전자 전달에 이용할 수 있다.

이들 바이러스 기반 전달 시스템 및 다른 바이러스 기반 전달 시스템에 대한 추가의 예시적인 정보는 예를 들어 피셔-호치(Fisher-Hoch) 등의 문헌(Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:317-321,1989); 플렉스너(Flexner) 등의 문헌(Ann. N.Y. Acad. Sci. 569:86-103,1989); 플렉스너 등의 문헌(Vaccine 8:17-21,1990); 미국 특허 4,603,112, 4,769,330 및 5,017,487; WO 89/01973; 미국 특허 4,777,127; GB 2,200,651; EP 0,345,242; WO 91/02805; 버크너(Berkner)의 문헌(Biotechniques 6:616-627,1988); 로젠펠드(Rosenfeld) 등의 문헌(Science 252:431-434,1991); 콜즈(Kolls) 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:215-219,1994; 카스-에이슬러(Kass- Eisler) 등의 문헌(Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:11498-11502,1993; 구즈맨(Guzman) 등의 문헌(Circulation 88:2838-2848,1993); 및 구즈맨 등의 문헌(Cir. Res. 73:1202-1207,1993)에서 찾을 수 있다.

몇몇 실시태양에서는, 폴리뉴클레오티드를 표적 세포의 게놈에 통합할 수 있다. 이 통합은 동종 재조합에 의해 특이적 위치 및 방향에 있을 수 있거나(유전자 치환), 또는 그것은 무작위로 비특이적 위치에 통합될 수 있다(유전자 보강). 추가의 실시태양에서는, 폴리뉴클레오티드가 DNA의 분리된 에피좀 세그먼트로서 세포에 안정하게 유지될 수 있다. 이러한 폴리뉴클레오티드 세그먼트 또는 "에피좀"은 숙주 세포 사이클과는 독립적으로 또는 그와 동기화하여 유지 및 복제를 허용하기에 충분한 서열을 코딩한다. 발현 컨스트럭트(construct)를 세포에 전달하고 세포에서 폴리뉴클레오티드가 잔류하는 방식은 사용된 발현 컨스트럭트의 유형에 의존한다.

본 발명의 다른 실시태양에서는, 폴리뉴클레오티드를 예를 들어 울머(Ulmer) 등의 문헌(Science 259:1745-1749,1993)에 기재되고 코헨(Cohen)(Science 259:1691-1692,1993)에 의해 검토된 바와 같은 "네이키드"(naked) DNA로 투여/전달한다. 네이키드 DNA의 도입(uptake)은 세포로 효율적으로 수송되는 생체분해성 비드 상에 DNA를 코팅함으로써 증가시킬 수 있다.

다른 한 실시태양에서는, 본 발명의 조성물을 입자총(particle bombardment) 접근법을 이용해서 전달할 수 있고, 이 접근법 중 다수가 기재되어 있다. 한 예시적인 예로, 가스 구동 입자 가속은 파우더젝트 파마슈티칼즈 피엘씨(Powderject Pharmaceuticals PLC)(영국 옥스포드) 및 파우더젝트 백신즈 인크.(Powderject Vaccines Inc.)(미국 위스콘신주 매디슨)에 의해 제조된 것들과 같은 장치로 달성할 수 있고, 이들의 몇 가지 예가 미국 특허 5,846,796; 6,010,478;5,865,796; 5,584,807; 및 EP 특허 0500 799에 기재되어 있다. 이러한 접근은 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드 입자와 같은 현미경적 입자의 건조 분말 제제가 휴대형 장치에 의해 생성된 헬륨 가스 내에서 고속으로 가속화되고, 입자들을 관심 표적 조직으로 추진시키는 무침 전달(needle-free delivery) 접근법을 제공한다.

한 관련 실시태양에서, 본 발명의 조성물의 가스 구동 무침 주사에 유용할 수 있는 다른 장치 및 방법은 바이오젝트, 인크.(Bioject, Inc.)(미국 오레건주 포틀랜드)에 의해 제공되는 것들을 포함하고, 이들의 몇 가지 예가 미국 특허 4,790,824; 5,064,413; 5,312,335; 5,383,851; 5,399,163; 5,520,639 및 5,993,412에 기재되어 있다.

본 발명의 몇몇 실시태양에서, 제약 조성물은 바람직하게는 우세하게 Th1 타입의 면역 반응을 유도하는 것이다. 높은 수준의 Th1-타입 사이토킨(예: IFN-γ, TNFα, IL-2 및 IL-12)은 투여되는 항원에 대해 세포 매개 면역 반응 유도를 촉진하는 경향이 있다. 이와 대조적으로, 높은 수준의 Th-2 타입 사이토킨(예: IL-4, IL-5, IL-6 및 IL-10)은 체액성 면역 반응 유도를 촉진하는 경향이 있다. 본 명세서에 기재된 면역성 조성물을 적용한 후, 환자는 Th1- 및 Th2-타입 반응을 유도하는 면역 반응을 지지할 것이다. 반응이 우세하게 Th1-타입인 바람직한 한 실시태양에서, Th1-타입 사이토킨의 수준은 Th2-타입 사이토킨의 수준보다 더 큰 정도로 증가할 것이다. 이러한 사이토킨의 수준은 표준 검정을 이용해서 쉽게 사정할 수 있다. 별법으로, 또는 추가로, 높은 수준의 Th2-타입 사이토킨(예: IL-4, IL-5, IL-6 및 IL-10)이 몇몇 치료적 응용에 요망될 수 있다. 이들 사이토킨의 수준은 표준 검정을 이용해서 쉽게 사정할 수 있다. 사이토킨과에 대한 검토를 위해서는 모스맨(Mosmann) 및 코프맨(Coffman)의 문헌(Ann. Rev. Immunol. 7:145-173,1989)을 참조한다.

Th1-타입 사이토킨 유도에 사용하기 위한 예시적인 조성물은 예를 들어 WO 96/02555, WO 99/33488 및 미국 특허 6,008,200 및 5,856,462에 기재된 것과 같은 CpG 함유 올리고뉴클레오티드(여기서, CpG 디뉴클레오티드는 메틸화되지 않음)들의 조합을 포함한다. 또한, 면역 자극 DNA 서열도 예를 들어 사토(Sato) 등의 문헌(Science 273:352,1996)에 기재되어 있다. 다른 적당한 면역 자극제는 QS21(아퀼라 바이오파마슈티칼스 인크.(Aquila Biopharmaceuticals Inc.)과 같은 사포닌, 및 관련 사포닌 유도체 및 그의 모방체를 포함한다.

다양한 추가의 면역 자극제 중 어느 것이라도 본 발명의 조성물에 포함시킬 수 있다. 예를 들어, 관심 면역 반응을 더 조절하기 위해 GM-CSF, 인터페론 또는 인터루킨과 같은 사이토킨을 포함시킬 수 있다. 추가로, 몬타니드 ISA 720(Montanide ISA 720)(세픽(Seppic), 프랑스), SAF(키론(Chiron), 미국 캘리포니아주), ISCOMS(CSL), MF-59(키론), SBAS 시리즈 보조제(예: SBAS-2 또는 SBAS-4, 스미쓰클라인 비참(SmithKline Beecham)(벨기에 릭센사르트)으로부터 입수가능함), 및 엔한짐™(Enhanzym™) 면역 자극제(코릭사(Corixa), 미국 몬타나주 해밀톤)를 사용할 수 있다. 폴리옥시에틸렌 에테르 면역자극제가 WO 99/52549A1에 기재되어 있고, 또한 사용할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 종종 1 개 이상의 완충제(예: 중성 완충 염수 또는 인산염 완충 염수), 탄수화물(예: 글루코스, 만노스, 수크로스 또는 덱스트란), 만니톨, 단백질, 폴리펩티드 또는 글리신과 같은 아미노산, 항산화제, 정균제, EDTA 또는 글루타티온과 같은 킬레이트화제, 보조제(예: 수산화알루미늄), 제제가 수여자의 혈액과 등장성, 저장성 또는 약한 고장성이 되게 하는 용질, 현탁화제, 증점제 및(또는) 방부제를 더 포함할 것이다. 별법으로, 본 발명의 조성물은 동결건조물로서 제제화될 수 있다.

본 명세서에 기재된 제약 조성물은 밀봉된 앰풀 또는 바이알과 같은 단위투여량 또는 다회투여량 용기에 제공할 수 있다. 이러한 용기는 대표적으로는 사용할 때까지 제제의 멸균성 및 안정성을 보존하는 방식으로 밀봉한다. 일반적으로, 제제는 오일 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액 또는 에멀젼으로 저장할 수 있다. 별법으로, 제약 조성물은 사용 직전에 멸균 액상 담체 첨가만을 필요로 하는 냉동 건조 상태로 저장할 수 있다.

예를 들어, 경구, 비경구, 정맥내, 비내 및 근육내 투여 및 제제를 포함하는 다양한 치료 양식으로 본 명세서에 기재된 특정 조성물을 사용하기 위한 적당한 투여 및 치료 양식의 개발은 당업계에 잘 알려져 있고, 이들 중 몇몇은 일반적인 예시 목적으로 아래에서 간략하게 기재한다.

몇몇 응용에서, 본 명세서에 기재된 제약 조성물은 동물에게 경구 투여로 전 달할 수 있다. 이러한 경우, 이들 조성물은 불활성 희석제와 함께 또는 동화할 수 있는 식용 담체와 함께 제제화할 수 있거나, 또는 이들은 경질 또는 연질 외피 젤라틴 캡슐에 봉입될 수 있거나, 또는 이들은 정제로 압축될 수 있거나, 또는 이들은 식이요법 음식물과 함께 직접 혼입될 수 있다.

활성 화합물은 부형제와 함께 혼입할 수 있고, 섭취가능 정제, 구강 정제, 트로키, 캡슐, 엘리시르, 현탁액, 시럽, 웨이퍼(wafer) 등의 형태로 사용할 수 있다(참고: 예를 들어, 매티오위츠(Mathiowitz) 등, Nature 1997 Mar 27;386(6623); 410-4; 후앙(Hwang) 등, Crit Rev Ther Drug Carrier Sits 1998;15(3):243-84; 미국 특허 5,641,515; 미국 특허 5,580,579 및 미국 특허 5,792,451). 또한, 정제, 트로키, 알약, 캡슐 등은 다양한 추가 성분 중 어느 것이라도 함유할 수 있고, 예를 들어 트라가칸트 검, 아카시아, 옥수수 전분 또는 젤라틴과 같은 결합제; 인산이칼슘과 같은 부형제; 옥수수 전분, 감자 전분, 알긴산 등과 같은 붕해제; 스테아르산마그네슘과 같은 윤활제; 및 수크로스, 락토스 또는 사카린과 같은 감미제, 또는 페퍼민트, 윈터그린(wintergreen) 오일 또는 체리향과 같은 풍미제를 첨가할 수 있다. 투여 단위형이 캡슐인 경우, 그것은 상기 유형의 물질 이외에 액상 담체도 함유할 수 있다. 다양한 다른 물질이 코팅으로서 또는 투여 단위의 물리적 형태를 다르게 개질시키기 위해 존재할 수 있다. 예를 들어, 정제, 알약 또는 캡슐을 쉘락, 당 또는 양자 모두로 코팅시킬 수 있다. 물론, 어떠한 투여 단위형을 제조하든 거기에 사용되는 물질은 어느 것이든 제약학적으로 순수하고, 사용되는 양에서는 실질적으로 비독성이어야 한다. 추가로, 활성 화합물은 지속 방출 조제물 및 제제에 혼입시킬 수 있다.

대표적으로, 이들 제제는 약 0.1 % 이상의 활성 화합물을 함유할 것이고, 하지만 물론 활성 성분(들)의 백분율은 달라질 수 있고, 편리하게는 총 제제의 중량 또는 부피의 약 1% 또는 2% 내지 약 60% 또는 70% 또는 그 이상일 수 있다. 당연히, 각각의 치료적으로 유용한 조성물 중의 활성 화합물(들)의 양은 본 발명의 화합물의 주어진 어떠한 단위 투여로도 적당한 투여량이 얻어지는 방식으로 제조할 수 있다. 이러한 제약 제제를 제조하는 업계의 숙련자는 용해도, 생체이용성, 생물학적 반감기, 투여 경로, 생성물 저장 수명과 같은 인자 뿐만 아니라 다른 약물학적 가치를 생각해 낼 것이고, 이처럼, 다양한 투여 및 치료 양식도 바람직할 수 있다.

경구 투여용의 경우, 별법으로, 본 발명의 조성물을 구강세정제, 치약, 구강 정제, 경구 스프레이, 또는 설하 경구 투여 제제의 형태로 1 개 이상의 부형제와 함께 혼입할 수 있다. 별법으로, 활성 성분은 붕산나트륨, 글리세린 및 중탄산칼륨을 함유하는 것과 같은 경구 용액에 혼입하거나 또는 치약에 분산하거나 또는 치료적 유효량으로 물, 결합제, 연마제, 풍미제, 발포제 및 보습제를 포함할 수 있는 조성물에 첨가할 수 있다. 별법으로, 조성물은 혀 밑에 놓거나 또는 다른 방법으로는 입 안에서 용해될 수 있는 정제 또는 용액 형태로 만들 수 있다.

몇몇 상황에서는, 본 명세서에 기재된 제약 조성물을 비경구, 정맥내, 근육내 또는 심지어는 복강내 전달하는 것이 바람직할 것이다. 이러한 접근은 당업계 숙련자에게 잘 알려져 있고, 이들 중 몇몇은 예를 들어 미국 특허 5,543,158; 미국 특허 5,641,515 및 미국 특허 5,399,363에 추가로 기재되어 있다. 몇몇 실시태양에서는, 유리 염기 또는 약물학적으로 허용되는 염으로서의 활성 화합물의 용액을 히드록시프로필셀룰로오스와 같은 계면활성제와 적당히 혼합된 물 중에서 제조할 수 있다. 또, 분산액은 글리세롤, 액상 폴리에틸렌 글리콜 및 이들의 혼합물 중에서 및 오일 중에서 제조할 수 있다. 보통의 저장 및 사용 조건 하에서 이들 조제물은 일반적으로 미생물의 성장을 방지하기 위해 방부제를 함유할 것이다.

주사용으로 적당한 예시적인 제약 형태는 멸균 수용액 또는 수분산액, 및 멸균 주사 용액 또는 분산액으로 즉석 조제하기 위한 멸균 분말(예를 들어, 미국 특허 5,466,468 참조)을 포함한다. 모든 경우에서, 제약 형태는 멸균성이어야 하고, 용이한 주사가능성질(syringability)이 존재하는 정도까지 유동성이어야 한다. 그것은 제조 및 저장 조건 하에서 안정하여야 하고, 세균 및 진균과 같은 미생물의 오염 작용에 대해 보호되어야 한다. 담체는 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올(예: 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액상 폴리에틸렌 글리콜 등), 이들의 적당한 혼합물 및(또는) 식물성 오일을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 적절한 유동성은 레시틴과 같은 코팅의 사용에 의해, 분산액의 경우에는 필요한 입자 크기 유지에 의해 및(또는) 계면활성제 사용에 의해 유지시킬 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산, 티메로살 등에 의해 촉진될 수 있다. 많은 경우에서, 등장성 작용제, 예를 들어 당 또는 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직할 것이다. 주사가능 조성물의 연장된 흡수는 흡수 지연 작용제, 예를 들어 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴을 조성 물에 사용함으로써 일으킬 수 있다.

한 실시태양에서, 수용액으로 비경구 투여하는 경우, 용액은 필요하면 적당히 완충시켜야 하고, 먼저, 액상 희석제가 충분한 염수 또는 글루코스로 등장성이 되게 한다. 이들 특별한 수용액은 정맥내, 근육내, 피하 및 복강내 투여에 특히 적합한다. 이와 관련해서, 사용될 수 있는 멸균 수성 매질은 본 발명의 개시 내용에 비추어 당업계 숙련자가 알게 될 것이다. 예를 들어, 1 회분 투여량을 1 ㎖의 등장성 NaCl 용액에 용해해서, 1000 ㎖의 대량 피하 주사 유체(hypodermoclysis fluid)에 첨가하거나 또는 제안된 주입 부위에 주사할 수 있다(참고: 예를 들어, "Remington's Pharmaceutical Sciences", 제15판, 1035-1038 페이지 및 1570-1580). 치료받는 대상자의 상태에 좌우되어 투여량에 약간의 변화가 반드시 일어날 것이다. 게다가, 사람에 투여하기 위해서는, 물론, 조제물은 멸균성, 발열성 및 FDA의 생물학적 약제 기준(FDA Office of Biologics standards)이 요구하는 일반적 안정성 및 순도 기준을 충족시키는 것이 바람직할 것이다.

본 발명의 다른 한 실시태양에서는, 본 명세서에 기재된 조성물을 중성 또는 염 형태로 제제화할 수 있다. 예시적인 제약학적으로 허용되는 염은 예를 들어 염산 또는 인산과 같은 무기산, 또는 아세트산, 옥살산, 타르타르산, 만델산 등과 같은 유기산과 형성된 산 부가염(단백질의 유리 아미노기와 형성됨)을 포함한다. 유리 카르복실기와 형성된 염은 예를 들어 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘 또는 철 수산화물과 같은 무기 염기, 및 이소프로필아민, 트리메틸아민, 히스티딘, 프로카인 등과 같은 유기 염기로부터 유래될 수 있다. 제제화시, 용액은 투여 제제와 상용성 이 있는 방식으로, 치료적으로 유효한 양으로 투여될 것이다.

몇몇 실시태양에서, 제약 조성물은 비내 스프레이, 흡입 및(또는) 다른 에어로졸 전달 비히클로 전달할 수 있다. 코 에어로졸 스프레이를 이용해서 유전자, 핵산 및 펩티드 조성물을 직접 폐에 전달하는 방법은 예를 들어 미국 특허 5,756,353 및 미국 특허 5,804,212에 기재되어 있다. 마찬가지로, 비내 마이크로입자 수지(타케나가(Takenaga) 등, J Controlled Release 1998년 3월2일; 52(1-2:81-7) 및 리소포스파티딜-글리세롤 화합물(미국 특허 5,725,871)을 이용한 약물 전달도 제약 업계에 잘 알려져 있다. 마찬가지로, 폴리테트라플루오로에틸렌 지지 매트릭스 형태의 예시적인 경점막 약물 전달은 미국 특허 5,780,045에 기재되어 있다.

몇몇 실시태양에서는, 본 발명의 조성물을 적당한 숙주 세포/유기체에 도입하기 위해 리포좀, 나노캡슐, 마이크로 입자, 지질 입자, 소포(vesicle) 등을 사용한다. 특히, 본 발명의 조성물은 지질 입자, 리포좀, 소포, 나노 구체 또는 나노 입자 등에 캡슐화하여 전달용으로 제제화할 수 있다. 별법으로, 본 발명의 조성물은 이러한 담체 비히클의 표면에 공유결합 또는 비공유결합에 의해 결합될 수 있다.

잠재적인 약물 담체로서 리포좀 및 리포좀 유사 조제물의 형성 및 사용은 일반적으로 당업계 숙련자에게 알려져 있다(참고: 예를 들어, 라식(Lasic), Trends Biotechnol 1998년 7월;16(7):307-21; 타카쿠라(Takakura), Nippon Rinsho 1998년 3월;56(3):691-5; 찬드란(Chandran) 등, Indian J Exp Biol. 1997년 8월 ;35(8):801-9; 마르갈리트(Margalit), Crit Rev Ther Drug Carrier Syst. 1995;12(2-3):233-61; 미국 특허 5,567,434; 미국 특허 5,552,157; 미국 특허 5,565,213; 미국 특허 5,738,868; 및 미국 특허 5,795,587).

리포좀은 T 세포 현탁액, 1차 간세포 배양물 및 PC 12 세포를 포함해서, 정상적으로는 다른 절차에 의해 형질감염시키기 어려운 많은 세포 유형과 함께 성공적으로 사용되어 왔다(레네이센(Renneisen) 등, J Biol Chem. 1990년 9월 25일;265(27):16337-42; 뮬러(Muller) 등, DNA Cell Biol. 1990년 4월;9(3):221-9). 게다가, 리포좀은 바이러스 기반 전달 시스템에 대표적인 DNA 길이 제한이 없다. 리포좀은 유전자, 다양한 약물, 방사 치료제, 효소, 바이러스, 전사 인자, 다른 자리 입체성 효과인자(allosteric effector) 등을 다양한 배양 세포주 및 동물에 도입하는 데 효과적으로 사용되어 왔다. 게다가, 리포좀의 사용은 전신 전달 후의 자기면역 반응 또는 허용되지 않는 독성과 연관있는 것으로 보이지 않는다.

몇몇 실시태양에서, 리포좀은 수성 매질에 분산된 인지질로부터 형성되고, 다층판 동심성 이층 소포(다층판 소포(MLV)라고도 불림)를 자발적으로 형성한다.

별법으로, 다른 실시태양에서, 본 발명은 본 발명의 조성물의 제약학적으로 허용되는 나노캡슐 제제를 제공한다. 나노캡슐은 일반적으로 화합물을 안정하고 재생가능한 방식으로 가둘 수 있다(참고: 예를 들어, 퀸타나르-게레로(Quintanar-Guerrero) 등, Drug Dev Ind Pharm. 1998년 12월;24(12):1113-28). 세포내 중합체 과부하로 인한 부작용을 피하기 위해, 이러한 극미세 입자(약 0.1 ㎛ 크기)를 생체내에서 분해될 수 있는 중합체를 사용해서 설계할 수 있다. 이러한 입자는 예를 들어 문헌(쿠브레르(Couvreur) 등, Crit Rev Ther Drug Carrier Syst. 1988;5(1):1-20; 멀렌(Muhlen) 등, Eur J Pharm Biopharm. 1998년 3월;45(2):149-55; 잠바욱스(Zambaux) 등, J Controlled Release. 1998년 1월 2일;50(1-3):31-40; 및 미국 특허 5,145,684)에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

암 치료

암 치료를 위한 면역학적 접근은 암 세포가 이상 또는 외래 세포 및 분자에 대한 체내 방어를 회피할 수 있고, 이 방어가 잃어버린 장소를 되찾도록 치료적으로 자극하는 것이라는 인식에 기반을 둔다(예를 들어, 클레인(Klein), Immunology(Wiley-Interscience, 623-648, New York, 1982). 다양한 면역 효과기가 종양의 성장을 직접 또는 간접적으로 억제한다는 많은 최근의 관찰은 결국 암 치료에 대한 이러한 접근에 대한 관심을 부활시켰다(예를 들어, 재거(Jager) 등, Oncology 2001;60(1):1-7; 레너(Renner) 등, Ann Hematol 2000년 12월;79(12):651-9).

항종양 세포 면역성 및 체내로부터의 종양 세포 제거와 연관된 기능을 갖는 4 개의 기본적인 세포 유형은 i) 비자기 침입자 세포를 동정 및 표지하기 위해 면역글로불린을 혈장으로 분비하는 B-임파구; ii) 면역글로불린 코팅 표적 침입자 세포를 용해 및 가공할 책임이 있는 보체 단백질을 분비하는 단핵구; iii) 종양 세포 파괴, 항체 의존성 세포독성 및 자연 사멸을 위한 두 가지 메카니즘을 갖는 자연 킬러 임파구; 및 iv) 항원 특이적 수용체를 가지고 상보적 마커 분자를 갖는 종양 세포를 인식하는 능력을 갖는 T- 임파구이다(쉬레이버, 에이취.(Schreiber, H.), 1989, Fundamental Immunology, 더블유.이.폴(W.E.Paul) 편집,923-955).

암 면역 치료는 일반적으로 체액성 면역 반응, 세포 면역 반응 또는 양자 모두를 유도하는 것에 초점을 맞춘다. 게다가, 항체 또는 세포독성 CD8⁺ T 세포를 부차적으로 유도하기 위해서는 CD4⁺ T 헬퍼 세포의 유도가 필요하다는 것이 잘 확립되어 있다. 암세포에 대해 선택적이거나 또는 이상적으로 특이적인 폴리펩티드 항원은 암에 대한 면역 반응을 유도하기 위한 강력한 접근을 제공하고, 본 발명의 중요한 한 양상이다.

따라서, 본 발명의 추가의 양상에서는, 본 명세서에 기재된 제약 조성물을 암에 대한 면역 반응을 자극하는 데 사용할 수 있다. 이러한 방법에서는, 본 명세서에 기재된 제약 조성물을 환자, 대표적으로는 온혈 동물, 바람직하게는 사람에게 투여한다. 환자는 암을 앓을 수도 있고 앓지 않을 수도 있다. 제약 조성물 및 백신은 1차 종양의 수술 제거 및(또는) 방사 치료 또는 통상의 화학 치료 약물의 투여와 같은 치료 전 또는 후에 투여할 수 있다. 위에서 논의한 바와 같이, 제약 조성물의 투여는 정맥내, 복강내, 근육내, 피하, 비내, 피부내, 항문, 질, 국소 및 경구 경로를 포함하는 적당한 어떠한 방법으로도 행할 수 있다.

몇몇 실시태양에서, 면역 치료는 치료가 면역 반응 개질제(예: 상기한 폴리펩티드 및 폴리뉴클레오티드) 투여로 종양에 대해 반응하는 내인성 숙주 면역 시스템의 생체내 자극에 의지하는 활성 면역 치료일 수 있다.

본 명세서에 기재된 치료 조성물의 투여 경로 및 빈도 뿐만 아니라 투여량은 개체마다 다를 것이고, 표준 기술을 이용해서 쉽게 확립할 수 있다. 일반적으로, 제약 조성물 및 백신은 주사(예를 들어, 피부내, 근육내, 정맥내 또는 피하)에 의해, 비내(예를 들어, 흡기에 의해) 또는 경구 투여할 수 있다.

바람직하게는, 1 내지 10 회분의 투여량을 52주에 걸쳐서 투여할 수 있다. 바람직하게는, 6 회분의 투여량은 1 개월 간격으로 투여하고, 그 후에 주기적으로 추가 접종(booster vaccination)을 할 수 있다. 개별 환자마다 다른 프로토콜이 적합할 수 있다. 적당한 투여량은 상기한 바와 같이 투여할 때 항종양 면역 반응을 촉진할 수 있고 기저(즉, 비처리) 수준보다 10 - 50% 이상 더 높은 화합물의 양이다. 이러한 반응은 환자에게서 항종양 항체를 측정함으로써 또는 시험관내에서 환자의 종양 세포를 사멸시킬 수 있는 세포용해 효과기 세포의 백신 의존적 생성에 의해 모니터할 수 있다. 또, 이러한 백신은 백신 비접종 환자에 비해 백신 접종 환자에게서 개선된 임상 경과(예를 들어, 더 빈번한 관해, 완전 또는 부분 또는 더 오랜 무질환 생존)가 나타나게 하는 면역 반응을 일으킬 수 있어야 한다. 일반적으로, 1 개 이상의 폴리펩티드를 포함하는 제약 조성물 및 백신의 경우, 1회분 투여량에 존재하는 각 폴리펩티드의 양은 약 25 ㎍ 내지 5 ㎎/㎏(숙주)의 범위이다. 적당한 투여량 크기는 환자의 체격에 따라 달라지겠지만, 대표적으로는, 약 0.1 mL 내지 약 5 mL의 범위일 것이다.

일반적으로, 적당한 투여 및 치료 양식은 치료 및(또는) 예방 이득을 제공하기에 충분한 양의 활성 화합물(들)을 제공한다. 이러한 반응은 비치료 환자에 비해 치료 환자에게서 개선된 임상 경과(예: 더 빈번한 관해, 완전 또는 부분 또는 더 오랜 무질환 생존)를 확립함으로써 모니터할 수 있다. 종양 단백질에 대한 이미 존재하는 면역 반응의 증가는 일반적으로 개선된 임상 경과와 상관 관계가 있다. 이러한 면역 반응은 일반적으로 치료 전후에 환자에게서 얻은 시료를 이용해서 수행할 수 있는 표준 증식, 세포 독성 또는 사이토킨 검정을 이용해서 평가할 수 있다.

오직 예시의 목적으로 제공한 다음 비제한 실시예 및 시험예를 이용해서 본 발명을 더 기술한다. 본 명세서에 인용된 모든 참고 문헌은 전내용을 참고로 혼입한다.

실시예 1

1차 지방 아실 사슬 개질

이 실시예는 가변적 길이의 1 차 지방 아실 사슬을 단독으로 또는 가변적 2 차 지방산 사슬과 함께 갖는 1 차 지방산 유도체의 제조를 기술한다. 예를 들어, 화합물 1a-c 및 2a-c는 짧은(C₆) 및 중간 길이(C₁₀) 사슬 1 차 지방산이 짧은, 중간 길이 또는 긴 사슬 2 차 지방산과 결합되어 있다.

이들 화합물은 잘 확립된 세린 아글리콘(R₁=CO₂H)을 이용하거나, 또는 별법 으로, 화학적으로 더 안정하고 이온화가능한 세리놀 포스페이트 아글리콘 단위(R₁=CH₂OPO₃H₂)를 이용해서 제조한다. 세릴/세리놀 포스페이트 선택은 공지의 세릴 유도체 (3a), (3b)와 신규 세리놀 포스페이트 (4a), (4b)의 생물학적 활성 비교에 기초할 것이다.

1차 사슬 개질 화합물 유도체는 합성 종료 무렵에서 아미드- 및 에스테르 결합 아실옥시산의 도입을 허용하는 CAI(common advanced intermediate)를 사용해서 상기한 방법 (B1 - 존슨 등의 미국 특허 6,355,251)의 변형에 의해 합성한다(반응식 I). 이 합성에서 초기 단계는 어셉터(acceptor) (6)을 공지 테트라아세테이트 (5)(글루코사민으로부터 4 단계로 제조함)로 글리코실화해서 β-글리코시드 (7)을 생성하고, 글리코시드 (7)을 CAI (8)(R₁ = CO₂Bn의 경우에 최대한으로 활용됨)로 전환시키는 것이다. 선택적 4-O-아실화 및 N-탈보호/아실화로 헥사아실 유도체 (9)를 얻고, 이것을 포스포릴화 및 디블록킹(deblocking)을 이용해서 3 - 4 단계로 생성물 (1a-c) 또는 (2a-c)로 전환시킨다.

필수적인 (R)-3-n-알카노일옥시알칸산은 적당한 3-옥소 메틸 에스테르로부터 출발해서 키간(Keegan) 등의 문헌 (Tetrahedron:Asymmetry;7(12):3559-3564, 1996)에 따라서 제조한다. 생성물 (1) 및 (2)의 높은 화학적 및 부분입체이성질적 순도는 실리카겔 상에서 정상 크로마토그래피(normal phase chromatography)에 의해 또는 별법으로 세파덱스(Sephadex) LH-20 겔 상에서 셀룰로오스 크로마토그래피 또는 액체-액체 분배 크로마토그래피를 이용해서 달성한다. 단리된 트리에틸암모늄 염의 순도는 분광분석(IR, ¹H 및 ¹³C NMR) 및 물리적 수단(연소 분석, FAB-MS) 뿐만 아니라 HPLC에 의해 확립한다.

실시예 2

글리실 및 포스포노옥시에틸(PE) 화합물

이 실시예는 화합물 (3a), (3b) 및 화합물 (4a), (4b)와 거의 위치이성질체 관계인 글리실 화합물 (11a), (11b) 및 포스포노옥시에틸(PE) 화합물 (12a), (12b)의 합성을 기술한다.

이들 화합물은 반응식 I에 개요한 것보다 더 수렴적인 합성에 의해 대부분 쉽게 제조할 수 있고, 여기서는 은 이온 존재 하에서 흔한 C₆ 또는 C₁₀ 글리코실 도너 (13)을 적당한 N-아실화(또는 별법으로, N-Troc 보호(나타나 있지 않음)) 억셉터 단위 (14) 또는 (15)와 커플링시켜서 β-글리코시드 (16)을 얻는다(반응식 II). 글리신 억셉터 (14)는 불루수(Bulusu) 등의 문헌(J Med Chem;35(19):3463-3469,1992)에 따라서 에탄올아민 및 벤질(또는 t-부틸) 브로모아세테이트로부터 제조한 후, N-아실화 또는 보호시킨다. 포스페이트 (15)는 N-아실화(또는 보호된) 디에탄올아민의 모노포스포릴화에 의해 제조한다. β-글리코시드 (16)의 Troc-보호된 아글리콘(쟝(Jiang) 등, Tetrahedron; 58(43):8833-8842,2002)의 경우 N-탈보호/아실화 또는 N,N-디아실화 및 이 결과 얻은 헥사아실화 유도체(17)의 페닐 및 다른 보호기의 절단은 원하는 화합물 (11a), (11b) 및 (12a), (12b)를 생성할 것으로 예상되고, 이것을 실리카 또는 LH-20 겔 또는 DEAE 셀룰로오스 상에서의 크로마토그래피 정제 후에 그의 트리에틸암모늄염으로 단리 및 특성화한다.

화합물 (16)은 신규하고, 본 발명의 다른 양상을 형성한다.

실시예 3

2차 에테르 지질

이 실시예는 바람직하지 못한 대사 및(또는) 수성 가수분해에 대해 내성이 있는 (R)-3-알킬옥시테트라데칸산 유도체 (18a), (18b)의 합성을 기술한다. 화합물 (18a), (18b)를 합성하기 위해서는, 먼저, 화합물(3a), (3b) 또는 대응하는 세리놀 포스페이트(4a), (4b)에 존재하는 2차 지방산의 에테르 지질 유사체를 제조하여야 한다. 반응식 III에 역합성 방식으로 나타낸 바와 같이, 표적 분자 (18a), (18b)의 합성은 반응식 I의 CAI(common advanced intermediate) (8)의 선택적 3-O-아실화로부터 시작하고 (R)-3-헥실옥시테트라데칸산 또는 (R)-3-데실옥시테트라데칸산을 대응하는 아실옥시산 대신 사용하고 중간체 9(R₂ = C₆ 또는 C₁₀ 알킬, n=9)를 거쳐 진행함으로써 달성할 수 있다. 필수적인 알킬옥시산(19)는 아실옥시산 합성의 중간체인 (R)-3-히드록시테트라데칸산 또는 그의 펜아실 에스테르로부터 공지 방법에 의해 > 50% 전체 수율로 합성한다(키간(Keegan) 등, Tetrahedron:Asymmetry;7(12):3559-3564,1996; 와타나베 (Watanabe) 등, Carbohydr Res;332(3):257-277,2001; 쟝(Jiang), Bioorg Med Chem Lett;12(16):2193-2196,2002; 크리스트(Christ) 등, 미국 특허 5,530,113(1996)).

실시예 4

1차 및 2차 에테르 지질

이 실시예는 C-3 당 위치의 1차 에테르 지질 뿐만 아니라 3 개의 2차 에테르 지질을 함유하는 화합물 20a,20b를 기술한다. 이 화합물들은 글리코실 도너 (13)의 합성(반응식 II)의 중간체인 아세토니드 (21)을 알킬옥시산(19)의 알콜 전구체로부터 1 단계로 생성되는 술포네이트 (22)로 알킬화하여 디에테르 (23)을 얻음으로써 합성한다(반응식 IV). 4,6-관능화 및 아노머 활성화는 글리코실 클로라이드 (24)를 제공하고, 이어서, 이것을 N-아실화 단계에서 대응하는 알킬옥시산을 사용하여 반응식 II에서처럼 처리한다. 다른 반응식으로는, 2-아지도⁴² 또는 2-트리플루오로아세트아미도⁴⁵ 유도체를 3-O-알킬화 단계에서 사용할 수 있다.

실시예 5

C-6 개질 화합물

이 실시예는 블록킹된 6-히드록실 또는 플루오로와 같은 6-치환체를 갖는 화합물을 기술한다. 이 실시예에서는, 메틸 에테르 또는 플루오로기를 세릴 또는 세리놀 포스페이트 화합물 (25a), (25b) 및 (26a), (26b)와 함께 사용한다. 상기한 바와 같이, 이 화합물들은 또한 본 발명의 한 양상을 형성한다.

이 화합물은 반응식 V에 나타낸 바와 같이 디올 (7)로부터 제조한다. 아세토니드 (21)로부터 2 단계로 얻은 중간체 (27)을 공지 방법(크리스트 등, 미국 특허 5,530,113(1996); 와타나베 등, Carbohydr Res;333(3):203-231,2001)에 의해 6-위치에 관능화해서 알콜 (28)을 얻는다. 알콜 (28)을 2 단계로 클로라이드 (29)로 전환하고 반응식 II에 따라 정교화(elaboration)하여 표적 분자 (25a), (25b) 및 (26a), (26b)를 제공한다. 상기 실시예 4에 기재한 바와 같은 1차 및(또는) 2차 에테르 결합을 갖는 화합물을 이 실시예에 기재한 바와 같이 개질하여 분자를 화학적 및 효소적 분해에 대해 추가 보호한다.

상기 실시예는 본 발명을 단지 예시하는 것으로 이해한다. 사용되는 조성물 및(또는) 방법을 일부 변경할 수 있고, 이것도 여전히 본 발명의 목적을 달성한다. 이러한 변경은 청구된 발명의 범위 내에 있는 것으로 본다.

본 발명의 화합물은 면역 반응을 증진시키는 데 이용될 뿐만 아니라 감염 질환, 자기면역 질환 또는 알레르기성 병태를 호전 또는 실질적으로 예방하는 데 이용된다.

Claims

하기 화학식 (I)을 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염.

<화학식 I>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
제 1 항에 있어서, X 및 Y가 산소인 화합물.
제 2 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 C₆-C₁₄ 포화 지방족 아실기로부터 독립적으로 선택되고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기인 화합물.
제 3 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 9 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 화합물.
제 3 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 화합물.
제 1 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, R₁은 COOH 또는 CH₂OPO₃H₂이고, R₁, R₂ 및 R₃는 각각 C₆ 포화 아실기임)
제 1 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, R₁은 COOH 또는 CH₂OPO₃H₂이고, R₁, R₂ 및 R₃는 각각 C₁₀ 포화 아실기임)
제 1 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, R₁은 COOH 또는 CH₂OPO₃H₂이고, R₁, R₂ 및 R₃는 각각 C₁₄ 포화 아실기임)
제 1 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, R₁은 COOH 또는 CH₂OPO₃H₂이고, R₁, R₂ 및 R₃는 각각 C₆ 포화 아실기임)
제 1 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, R₁은 COOH 또는 CH₂OPO₃H₂이고, R₁, R₂ 및 R₃는 각각 C₁₀ 포화 아실기임)
제 1 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, R₁은 COOH 또는 CH₂OPO₃H₂이고, R₁, R₂ 및 R₃는 각각 C₁₄ 포화 아실기임)
하기 화학식 (II)를 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염.

<화학식 II>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₁, R₂ 및 R₃ 는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄는 H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; q는 1이고, R₇은 COOH이거나, 또는 q는 2이고, R₇은 OPO₃H₂이고; R₈ 및 R₉는 동일하거나 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택되고,

다만, R₇이 COOH이면, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂ 중 1 개 이상은 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기임)
제 12 항에 있어서, q가 2이고, R₇이 OPO₃H₂인 화합물.
제 12 항에 있어서, q가 1이고, R₇이 COOH인 화합물.
제 14 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택되는 화합물.
제 12 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 동일한 기인 화합물.
제 12 항에 있어서, X 및 Y가 산소인 화합물.
제 17 항에 있어서, q가 2이고, R₇이 OPO₃H₂인 화합물.
제 17 항에 있어서, q가 1이고, R₇이 COOH인 화합물.
제 17 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₄ 포화 지방족 아실기로부터 선택되고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 9 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기인 화합물.
제 20 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₀ 포화 지방족 아실기로부터 선택되는 화합물.
제 17 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 화합물.
제 12 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, R₁, R₂ 및 R₃는 각각 포화 C₆ 아실기임)
제 12 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, R₁, R₂ 및 R₃는 각각 포화 C₁₀ 아실기임)
제 12 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, R₁, R₂ 및 R₃는 각각 포화 C₆ 아실기임)
제 12 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, R₁, R₂ 및 R₃는 각각 포화 C₁₀ 아실기임)
하기 화학식 (III)을 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염.

<화학식 III>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 포화 지방족 기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로 부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
제 27 항에 있어서, X 및 Y가 산소인 화합물.
제 28 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₄ 포화 지방족 기로부터 선택되고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 9 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기인 화합물.
제 29 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₀ 포화 지방족 기로부터 선택되는 화합물.
제 27 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 화합물.
제 27 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, n은 1 또는 5이고, R₆는 COOH 또는 CH₂OPO₃H₂임)
제 32 항에 있어서, n이 1인 화합물.
제 32 항에 있어서, n이 5인 화합물.
하기 화학식 (IV)를 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염.

<화학식 IV>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군 으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 포화 지방족 기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
제 35 항에 있어서, X 및 Y가 산소인 화합물.
제 36 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₄ 포화 직쇄 지방족 기로부터 선택되는 화합물.
제 36 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 9 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기인 화합물.
제 36 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 화합물.
제 35 항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물.

(상기 식에서, n은 1 또는 5이고, R₆는 COOH 또는 CH₂OPO₃H₂임)
하기 화학식(V)를 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염.

<화학식 V>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군 으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기 또는 직쇄 포화 지방족 기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈은 포스포노이고; R₁₃은 F 또는 O-PG이고; PG는 히드록실 보호기이고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
제 41 항에 있어서, X 및 Y가 산소인 화합물.
제 42 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₄ 포화 지방족 아실기 및 C₆-C₁₄ 직쇄 포화 지방족 기로부터 선택되고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 9 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기인 화합물.
제 43 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 화합물.
제 41 항에 있어서, X 및 Y가 산소이고, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₄ 포화 지방족 아실기 및 C₆-C₁₄ 직쇄 포화 지방족 기로부터 선택되고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 각각 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기인 화합물.
제 40 항에 있어서, R₁₃이 -OCH₃인 화합물.
제 40 항에 있어서, R₁₃이 F인 화합물.
하기 화학식의 화합물.

(상기 식에서, TCBOC는 2,2,2-트리클로로-1,1-디메틸에틸 클로로포르밀 보호기를 나타내고; Troc는 2,2,2-트리클로로에톡시카르보닐 보호기를 나타내고, R₁ 및 R₃는 C₆ 또는 C₁₀ 포화 지방족 아실기이고, R₇은 보호된 카르복실 또는 포스페이트기 임)
(a) 유효량의 하기 화학식 (I)을 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염; 및

(b) 제약학적으로 허용되는 담체

를 포함하는 제약 조성물.

<화학식 I>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포 노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
제 49 항에 있어서, X 및 Y가 산소인 조성물.
제 50 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 C₆-C₁₄ 포화 지방족 아실기로부터 독립적으로 선택되고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기인 조성물.
제 51 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 9 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 화합물.
제 51 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 조성물.
제 51 항에 있어서, 점막 투여에 적합한 조성물.
제 51 항에 있어서, 비내 투여에 적합한 조성물.
제 51 항에 있어서, 항원을 더 포함하고, 보조적 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 염을 포함하는 조성물.
(a) 유효량의 하기 화학식 (II)를 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염; 및

(b) 제약학적으로 허용되는 담체

를 포함하는 제약 조성물.

<화학식 II>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₁, R₂ 및 R₃ 는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄는 H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; q는 1이고, R₇은 COOH이거나, 또는 q는 2이고, R₇은 OPO₃H₂이고; R₈ 및 R₉는 동일하거나 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택되고,

다만, R₇이 COOH이면, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂ 중 1 개 이상은 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기임)
제 57 항에 있어서, q가 2이고, R₇이 OPO₃H₂인 조성물.
제 57 항에 있어서, q가 1이고, R₇이 COOH인 조성물.
제 59 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 선택되는 조성물.
제 57 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 동일한 기인 조성물.
제 57 항에 있어서, X 및 Y가 산소인 조성물.
제 62 항에 있어서, q가 2이고, R₇이 OPO₃H₂인 조성물.
제 62 항에 있어서, q가 1이고, R₇이 COOH인 조성물.
제 62 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₄ 포화 지방족 아실기로부터 선택되고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 9 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기인 조성물.
제 65 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₀ 포화 지방족 아실기로부터 선택되는 조성물.
제 62 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 조성물.
제 57 항에 있어서, 점막 투여에 적합한 조성물.
제 57 항에 있어서, 비내 투여에 적합한 조성물.
제 57 항에 있어서, 항원을 더 포함하고, 보조적 유효량의 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 염을 포함하는 조성물.
(a) 유효량의 하기 화학식 (III)을 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염; 및

(b) 제약학적으로 허용되는 담체

를 포함하는 제약 조성물.

<화학식 III>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q 는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 포화 지방족 기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
제 71 항에 있어서, X 및 Y가 산소인 조성물.
제 72 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₄ 포화 지방족 기로부터 선택되고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 9 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기인 조성물.
제 73 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₀ 포화 지방족 기로부터 선택되는 조성물.
제 71 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 조성물.
제 71 항에 있어서, 점막 투여에 적합한 조성물.
제 71 항에 있어서, 비내 투여에 적합한 조성물.
제 71 항에 있어서, 항원을 더 포함하고, 보조적 유효량의 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 염을 포함하는 조성물.
(a) 유효량의 하기 화학식 (IV)를 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염; 및

(b) 제약학적으로 허용되는 담체

를 포함하는 제약 조성물.

<화학식 IV>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 포화 지방족 기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
제 79 항에 있어서, X 및 Y가 산소인 조성물.
제 80 항에 있어서, R₁, R₂ 및 R₃가 독립적으로 C₆-C₁₄ 포화 직쇄 지방족 기로부터 선택되는 조성물.
제 80 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 9 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기인 조성물.
제 80 항에 있어서, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂가 독립적으로 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기인 조성물.
제 79 항에 있어서, 점막 투여에 적합한 조성물.
제 79 항에 있어서, 비내 투여에 적합한 조성물.
제 79 항에 있어서, 항원을 더 포함하고, 보조적 유효량의 화학식 (II)의 화합물 또는 그의 염을 포함하는 조성물.
(a) 유효량의 하기 화학식(V)를 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되 는 염; 및

(b) 제약학적으로 허용되는 담체

를 포함하는 제약 조성물.

<화학식 V>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기 또는 직쇄 포화 지방족 기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈은 포스포노이고; R₁₃은 F 또는 O-PG이고; PG는 히드록실 보호기이 고, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
유효량의 하기 화학식 (I)을 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 대상자에게 투여하는 것을 포함하는 대상자의 면역 반응을 증진시키는 방법.

<화학식 I>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
제 88 항에 있어서, 상기 대상자에게 외인성 항원을 투여하는 것을 더 포함하는 방법.
유효량의 하기 화학식 (I)을 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 대상자에게 투여하는 것을 포함하는 대상자의 감염 질환, 자기면역 질환 또는 알레르기성 병태를 호전시키거나 또는 실질적으로 예방하는 방법.

<화학식 I>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q 는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
유효량의 하기 화학식 (II)를 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 대상자에게 투여하는 것을 포함하는 대상자의 면역 반응을 증진시키는 방법.

<화학식 II>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄는 H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; q는 1이고, R₇은 COOH이거나, 또는 q는 2이고, R₇은 OPO₃H₂이고; R₈ 및 R₉는 동일하거나 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택되고,

다만, R₇이 COOH이면, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂ 중 1 개 이상은 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기임)
제 91 항에 있어서, 상기 대상자에게 외인성 항원을 투여하는 것을 더 포함하는 방법.
유효량의 하기 화학식 (II)를 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 대상자에게 투여하는 것을 포함하는 대상자의 감염 질환, 자기면역 질환 또는 알레르기성 병태를 호전시키거나 또는 실질적으로 예방하는 방법.

<화학식 II>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 지방 아실 잔기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄는 H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; q는 1이고, R₇은 COOH이거나, 또는 q는 2이고, R₇은 OPO₃H₂이고; R₈ 및 R₉는 동일하거나 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택되고,

다만, R₇이 COOH이면, R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂ 중 1 개 이상은 1 내지 10 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 지방족 기임)
유효량의 하기 화학식 (III)을 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 대상자에게 투여하는 것을 포함하는 대상자의 면역 반응을 증진시키는 방법.

<화학식 III>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 포화 지방족 기이고, R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
제 94 항에 있어서, 상기 대상자에게 외인성 항원을 투여하는 것을 더 포함하는 방법.
유효량의 하기 화학식 (III)을 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 대상자에게 투여하는 것을 포함하는 대상자의 감염 질환, 자기면역 질환 또는 알레르기성 병태를 호전시키거나 또는 실질적으로 예방하는 방법.

<화학식 III>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 포화 지방족 기이고, R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
유효량의 하기 화학식 (IV)를 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 대상자에게 투여하는 것을 포함하는 대상자의 면역 반응을 증진시키는 방법.

<화학식 IV>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q 는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 포화 지방족 기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)
제 97 항에 있어서, 상기 대상자에게 외인성 항원을 투여하는 것을 더 포함하는 방법.
유효량의 하기 화학식 (IV)를 갖는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염을 대상자에게 투여하는 것을 포함하는 대상자의 감염 질환, 자기면역 질환 또는 알레르기성 병태를 호전시키거나 또는 실질적으로 예방하는 방법.

<화학식 IV>

(상기 식에서, X는 수직 방향 또는 수평 방향 자리의 O 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되고; Y는 O 및 NH로 이루어지는 군으로부터 선택되고; n, m, p 및 q는 0 내지 6의 정수이고; R₁, R₂ 및 R₃는 동일하거나 또는 상이하고, 1 내지 약 20 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 포화 지방족 기이고, 여기서 R₁, R₂ 또는 R₃ 중 하나는 임의로 수소이고; R₄ 및 R₅는 동일 또는 상이하고, H 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₆ 및 R₇은 동일 또는 상이하고, H, 히드록시, 알콕시, 포스포노, 포스포노옥시, 술포, 술포옥시, 아미노, 메르캅토, 시아노, 니트로, 포르밀 및 카르복시, 및 이들의 에스테르 및 아미드로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R₈ 및 R₉는 동일 또는 상이하고, 포스포노 및 H로 이루어지는 군으로부터 선택되고, R₈ 및 R₉ 중 1 개 이상은 포스포노이고; R₁₀, R₁₁ 및 R₁₂는 1 내지 11 개의 탄소 원자를 갖는 직쇄 비치환 포화 지방족 기로부터 독립적으로 선택됨)