KR20060007077A - 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판유도체 분석방법 - Google Patents

고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판유도체 분석방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20060007077A
KR20060007077A KR1020040054322A KR20040054322A KR20060007077A KR 20060007077 A KR20060007077 A KR 20060007077A KR 1020040054322 A KR1020040054322 A KR 1020040054322A KR 20040054322 A KR20040054322 A KR 20040054322A KR 20060007077 A KR20060007077 A KR 20060007077A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
hydroxy
diphenylpropane
high performance
performance liquid
liquid chromatography
Prior art date
Application number
KR1020040054322A
Other languages
English (en)
Inventor
김락현
이용화
박홍순
한상길
Original Assignee
주식회사 엘지생활건강
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 엘지생활건강 filed Critical 주식회사 엘지생활건강
Priority to KR1020040054322A priority Critical patent/KR20060007077A/ko
Publication of KR20060007077A publication Critical patent/KR20060007077A/ko

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/74—Optical detectors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
    • G01N2030/027—Liquid chromatography

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)

Abstract

본 발명은 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판 유도체 분석방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 옥타데실 실란기를 고정상으로 하고 메탄올 수용액을 이동상으로 포함하는 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판 유도체 분석방법에 관한 것이다.
고성능 액체 크로마토그래피, 분석, 1,3-디페닐프로판 유도체

Description

고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판 유도체 분석방법{METHOD OF ANALYSING 1.3-DIPHENYLPROPAN DERIVATIVES USING HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY}
도 1은 본 발명에 따른 방법으로 1,3-디페닐프로판 유도체를 분석한 결과를 나타낸 크로마토그램이다.
도 2는 비교예의 방법으로 1,3-디페닐프로판 유도체를 분석한 결과를 크로마토그램이다.
[발명이 속하는 기술분야]
본 발명은 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판 유도체 분석방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 옥타데실 실란기를 고정상으로 하고 메탄올 수용액을 이동상으로 포함하는 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판 유도체 분석방법에 관한 것이다.
[종래기술]
멜라닌은 색소 세포 내에 존재하는 티로시나제(Tyrosinase)에 의하여 티로신 (Tyrosine)으로부터 전환된 도파(DOPA), 도파퀴논(Dopaquinone)의 비효소적인 산화반응을 통하여 형성되다. 멜라닌은 피부에 분포되어 신체를 보호하는 중요한 기능을 가지지만 반면에 이의 과잉생산은 피부암(Melanoma)과 밀접한 관계가 있으며 피부흑화를 유발하며 기미, 주근깨 등을 생성시킨다. 따라서, 멜라닌의 과잉생산을 예방하기 위한 화장품과 약제의 개발이 활발히 이루어지고 있다.
멜라닌의 과잉생산 예방용 물질로서, 종래에는 하이드로 퀴논(Hydroquinone)이 주로 사용되었다. 그러나, 하이드로퀴논은 색소의 변성, 치사 또는 세포의 기능을 손상시키는 등의 부작용으로 인하여, 한국, 일본 등에서는 화장품으로 사용이 금지되어 있는 실정이다(J. Soc. Cosmet. Chem., 42, 362 (1991)). 그외, 하이드로퀴논의 당 유도체인 알부틴(Arbutin)이 상기한 목적으로 상품화되기도 하나 효과가 미약한 단점이 있으며, 아스코빅산(Ascobic Acid) 및 코지산(Kojic Acid)은 안정성이 좋지 않은 문제점이 있다.
상기에 언급한 바와 같이, 특정 효과를 위하여 사용되는 화합물은 안정성이 매우 중요하며, 이를 확인하기 위한 분석방법이 요구된다. 천연물의 분리, 의약품의 정제 및 기타 화학물질의 정제 등에 광범위하게 사용되는 분석방법으로는, 각종 고체 또는 액체를 고정상(stationary phase)으로 하고 기체 또는 액체를 이동상(mobile phase)으로 하여 이동상이 고정상을 통과토록 하면서 투입된 시료가 이동상과 고정상 사이에서 흡착성 또는 분배계수의 차를 이용하여 시료를 성분별로 분리하는 크로마토그래피가 있다.
크로마토그래피는 다양한 종류가 개발되어 시판되고 있으나, 시료의 최적 분 리 및 분석조건은 획일적으로 정의 또는 결정될 수 없으므로, 분석하고자 하는 시료의 물리적 성질, 즉 고정상과 이동상 사이에서의 분배계수, 분자량 및 이온성 등에 따라 분석 조건을 최적화하는 과정이 필수적으로 요구된다.
일례로, 1,3-디페닐프로판 유도체를 분석하고자 기존에 제시된 플라보노이드계 화합물의 분석방법, 즉 옥타 실란(C8)기를 고정상으로 이용하고 물과 아세토니트릴 혼합용매를 이동상으로 사용한 고성능 액체 크로마토그래피를 시도되었으나, 고정상의 비극성도가 낮고 이동상의 종류 및 조성이 적절치 못하여 1,3-디페닐프로판 유도체를 성공적으로 분리 및 분석하기 어려웠다. 따라서, 분리 또는 분석하고자 하는 물질에 가장 적합한 분석방법의 확립이 요구되는 바이다.
따라서, 본 발명은 1,3-디페닐프로판 유도체를 옥타데실 실란기를 고정상으로 하고 물, 인산 및 메탄올 혼합용매를 이동상으로 하는 고성능 액체 크로마토그래피 분석방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한 본 발명은 시료내 1,3-디페닐프로판 존재유무 및 함량을 정확하고 신속하게 분석할 수 있는 분석방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 1,3-디페닐프로판 유도체를 고성능 액체 크로마토그래피로 분석하는 방법으로서, 옥타데실 실란기가 충진된 분리관을 갖는 고성능 액체 크로마토그래피에 55 내지 75 부피 %의 메탄올 수용액을 이동상으로 사용하여 크로마토그래피를 수행하는 것을 포함하는 1,3-디페닐프로판 유도체 분석방법을 제공한다.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 1,3-디페닐프로판 유도체 분석방법에 관한 것이다.
본 발명에서 언급하는 1,3-디페닐프로판 유도체는 하기 화학식 1로 표시되며, 일례로 4-[3-하이드록시-3-(2,5-디하이드록시-3,4,6 트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올, 4-[3-(2,5-디하이드록시-3,4,6 트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올, 4-[3-하이드록시-3-(5--하이드록시-2-메톡시-3,4,6-트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올, 4-[3-(2-메톡시-5-하이드록시-3,4,6-트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올 및 4-[3-하이드록시-3-(2-하이드록시-5메톡시-3,4,6-트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올이 있다.
(화학식 1)
Figure 112004030872604-PAT00001
상기 화학식 1식에서,
상기 ㆍㆍㆍㆍ 는 이중결합 또는 단일결합이고,
R1은 수소 또는 C1-C10 의 알킬이고,
R2는 C1-C5 의 알킬 또는 C1-C5 의 알콕시 알킬이고,
R3는 수소 또는 C1-C7 의 알킬이고,
R4는 수소, 하이드록시 또는 옥소이고,
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C5 의 알킬이다.
본 발명에 따른 1,3-디페닐프로판 유도체 분석방법은, (a) 고성능 액체 크로마토그래피의 고정상으로서 최적 비극성을 갖는 분리관을 연결하는 분리관 설정단계, (b) 시료를 분리관으로 이동시키는 이동상 설정단계, (c) 이동상의 압력을 조절하는 이동상 유속 조절단계 및 (d) 분리관을 통하여 용출되는 용출물을 검출기로 유입시켜 검출하는 검출단계를 포함한다.
분리관 설정단계에서, 분리관에 사용하는 고정상은 옥타데실 실란(C18)기이다. 상기 옥타데실 실란기는 본 발명에 따른 1,3-디페닐프로판 유도체를 분리하기에 최적인 극성을 갖고 있다. 상기 극성 고정상이 충진된 분리관은 상용적으로 구입하여 사용할 수 있다.
이동상 설정단계에서, 이동상은 메탄올 수용액일 수 있으며, 예컨대 메탄올 수용액은 55 내지 75 부피 %의 메탄올 및 잔량의 물을 포함할 수 있다. 상기 물은 인산이 2 내지 5 부피%로 더욱 포함된 것일 수 있다. 상기 인산은 크로마토그래피시 피크 테일링(peak tailing)을 억제하여 정량성을 향상시킨다. 상기 메탄올 수용액에 메탄올 함량이 55 부피% 미만인 경우 용매의 극성이 크고 분리관에서 시료가 머무르는 시간이 길어져 분석시 많은 시간이 소요될 수 있으며, 메탄올의 함량이 75 부피% 초과하는 경우 용매의 극성이 낮고 시료가 분리관에서 머무르는 시간 이 짧아져 1,3-디페닐프로판 유도체를 분리하기 어려울 수 있다. 그러나, 상기 이동상의 혼합비율은 상기에 한정되진 않는다.
상기 이동상 유속 조절 단계에서, 유속은 이동상의 압력 및 분석시간을 고려하여 적절한 범위로 설정할 수 있다. 일례로, 유속은 이동상의 압력인 2000 내지 2500 psi로 유지되는 0.8 내지 1.3 ㎖/min 일 수 있다. 유속이 1.3 ㎖/min 보다 높은 경우 이동상의 압력이 2500 psi에 비하여 높아져 장시간 사용하는 경우 기기에 무리가 생길 수 있으며, 유속이 0.8 ㎖/min 보다 낮은 경우 분석시간이 길어질 수 있다.
검출단계에서, 분리관을 통하여 용출되는 용출물은 UV/VIS 검출기로 유입되도록 설정되며, 이때 검출파장은 260 내지 300 nm일 수 있다. 상기 파장이 260 nm 미만이거나, 300 nm 초과하는 경우 1,3-디페닐프로판 유도체의 분리 효율이 낮을 수 있다. 상기 UV/VIS 검출기는 빛을 흡수할 수 있는 시료에 일정 파장의 빛을 쬐어 흡수가 일어나는 정도에 따라 검출하는 통상의 검출기이다.
상기에서 언급한 고성능 액체 크로마토그래피 분석방법을 이용하여, 1,3-디페닐프로판 유도체를 효과적으로 분리 및 분석할 수 있으며, 또한 수득한 크로마토그램에서 체류 시간이 5.0분에서 11.0분까지 얻어지는 피크를 표준물질의 피크와 비교하여 정량분석할 수 있다.
이하 본 발명의 실시예를 기재한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 보호범위는 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
(실시예 1-3)
실시예 1 내지 3의 화장품(스킨, 로션, 에센스)에 메탄올에 녹여 0.45 ㎛ 여과막으로 여과하여 시료로 사용하였다. 고성능 액체 크로마토그래피 장치는 미합중국 소재 휴렛 팩커드사의 HP 1100 시리즈를 사용하였다.
고성능 액체 크로마토그래피 장치의 부타 실란(C4)기가 충진된 휴렛 팩커드의 Zorbax C18 분리관(150 x 4.6 mm, HP, USA)에, 0.1 %의 인산이 첨가된 물: 메탄올이 35:65의 부피비로 혼합된 용매를 흘려주어 평형화시키고, 시료를 투입하여 분석하였다. 유속은 1 ㎖/min으로 하고, 검출은 280 nm의 UV/VIS에서 실시하였다. 상기 시료의 고성능 액체 크로마토그래피 분석결과는 도 1에 도시하였다.
도 1의 크로마토그램에 나타난 바와 같이, 시료내 존재하는 1,3-디페닐프로판 유도체인, 4-[3-하이드록시-3-(2,5-디하이드록시-3,4,6 트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올이 분리 및 분석되었다. 이에, 상기 크로마토그램에서 나타난 피크를 합한 후 검량선을 그려, 정량분석하였다. 정량분석 결과는 하기 표 1에 나타내었다.
구 분 1,3-디페닐프로판 유도체의 함량 (중량%) 검출량(중량%) 회수율( %)
실시예 1 1.00 1.01 101
실시예 2 0.70 0.69 99
실시예 3 0.50 0.49 98
(비교예)
실시예 1-3과 동일한 방법으로 시료를 준비하여 고성능 액체 크로마트그래피 실시하였다. 이때 이동상으로 아세토니트릴: 물이 15: 85부피비율로 혼합된 수용액을 사용하였고, 고정상으로는 옥타 실란(C8)기를 사용하였으며, 유속은 1.0 ㎖/min으로 수행하였다. 검출은 280 nm의 UV/VIS 검출기로 실시하였고, 그 결과는 도 2의 크로마토그램으로 나타내었다.
도 2에서, 1,3-디페닐프로판 유도체는 고정상으로 옥타 실란을 이용하고 이동상으로 아세토니트릴 및 물의 혼합용매를 사용하여 크로마토그래피하는 조건에서는 분리되지 않음을 확인할 수 있었다.
상기에 언급한 바와 같이, 본 발명은 1,3-디페닐프로판 유도체의 분석방법을 제공하여, 시료에 포함된 1,3-디페닐프로판 유도체를 정확하고 용이하게 정량할 수 있으며, 이를 이용하여 1,3-디페닐프로판 유도체의 안전성을 쉽게 검사할 수 있다.

Claims (7)

1,3-디페닐프로판 유도체를 고성능 액체 크로마토그래피로 분석하는 방법으로서,
옥타데실 실란기가 충진된 분리관을 갖는 고성능 액체 크로마토그래피에 55 내지 75 부피 %의 메탄올 수용액을 이동상으로 사용하여 크로마토그래피를 수행하는 것을 포함하는 1,3-디페닐프로판 유도체 분석방법.
제 1항에 있어서,
상기 방법은 크로마토그래피 수행으로 수득한 크로마토그램의 피크를 합산한 다음 검량선을 그려서 1,3-디페닐프로판 유도체의 함량을 정량분석하는 것을 더욱 포함하는 방법.
제 1항에 있어서, 상기 1,3-디페닐프로판 유도체는 하기 화학식 1로 표시되는 것인 방법:
(화학식 1)
Figure 112004030872604-PAT00002
상기 화학식 1식에서,
상기 ㆍㆍㆍㆍ 은 이중결합 또는 단일결합이고,
R1은 수소 또는 C1-C10 의 알킬이고,
R2는 C1-C5 의 알킬 또는 C1-C5 의 알콕시 알킬이고,
R3는 수소 또는 C1-C7 의 알킬이고,
R4는 수소, 하이드록시 또는 옥소이고,
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C5 의 알킬이다.
제 1항 또는 3항에 있어서, 상기 1,3-디페닐프로판 유도체는 4-[3-하이드록시-3-(2,5-디하이드록시-3,4,6 트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올, 4-[3-(2,5-디하이드록시-3,4,6 트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올, 4-[3-하이드록시-3-(5--하이드록시-2-메톡시-3,4,6-트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올, 4-[3-(2-메톡시-5-하이드록시-3,4,6-트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올 및 4-[3-하이드록시-3-(2-하이드록시-5메톡시-3,4,6-트리메틸-페닐)-프로필]-벤젠-1,3-디올로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
제 1항에 있어서, 상기 메탄올 수용액은 인산이 2 내지 5 부피%로 포함된 물에 메탄올이 55 내지 75 부피%로 혼합된 것인 방법.
제 1항에 있어서, 상기 이동상은 0.8 내지 1.3 ㎖/min의 유속을 갖는 방법.
제 1 항에 있어서, 상기 크로마토그래피는 분리관으로부터 용출되는 용출물을 260 nm 내지 300 nm의 파장을 갖는 UV/VIS 검출기로 검출하는 방법.
KR1020040054322A 2004-07-13 2004-07-13 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판유도체 분석방법 KR20060007077A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020040054322A KR20060007077A (ko) 2004-07-13 2004-07-13 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판유도체 분석방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020040054322A KR20060007077A (ko) 2004-07-13 2004-07-13 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판유도체 분석방법

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20060007077A true KR20060007077A (ko) 2006-01-24

Family

ID=37118453

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020040054322A KR20060007077A (ko) 2004-07-13 2004-07-13 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판유도체 분석방법

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20060007077A (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104965018A (zh) * 2015-07-03 2015-10-07 湖北博凯医药科技有限公司 采用毛细管电泳分离-二极管阵列检测技术拆分外消旋2-氯丙酸的方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104965018A (zh) * 2015-07-03 2015-10-07 湖北博凯医药科技有限公司 采用毛细管电泳分离-二极管阵列检测技术拆分外消旋2-氯丙酸的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ocaña-González et al. New developments in the extraction and determination of parabens in cosmetics and environmental samples. A review
Mullett et al. Multidimensional on-line sample preparation of verapamil and its metabolites by a molecularly imprinted polymer coupled to liquid chromatography–mass spectrometry
Xu et al. Determination of formaldehyde in beverages using microwave-assisted derivatization and ionic liquid-based dispersive liquid–liquid microextraction followed by high-performance liquid chromatography
Mei et al. Determination of trace bisphenol A in complex samples using selective molecularly imprinted solid-phase extraction coupled with capillary electrophoresis
Ghambari et al. Low-density solvent-based dispersive liquid–liquid microextraction followed by high performance liquid chromatography for determination of warfarin in human plasma
Gago-Martı́nez et al. Further improvements in the application of high-performance liquid chromatography, capillary electrophoresis and capillary electrochromatography to the analysis of algal toxins in the aquatic environment
Shu et al. Determination of vanillin in milk powder by capillary electrophoresis combined with dispersive liquid-liquid microextraction
KR20180011473A (ko) 헛개나무 추출물의 품질 평가방법
Gonda et al. Quantification of main bioactive metabolites from saffron (Crocus sativus) stigmas by a micellar electrokinetic chromatographic (MEKC) method
Gomez et al. Solid phase extraction/cyclodextrin-modified micellar electrokinetic chromatography for the analysis of melatonin and related indole compounds in plants
Co et al. Degradation effects in the extraction of antioxidants from birch bark using water at elevated temperature and pressure
Jin et al. Ion chromatography-atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry for the determination of trace chlorophenols in clam tissues
Carrasco‐Pancorbo et al. Capillary electrophoresis‐electrospray ionization‐mass spectrometry method to determine the phenolic fraction of extra‐virgin olive oil
Masson Influence of organic solvents in the mobile phase on the determination of carboxylic acids and inorganic anions in grape juice by ion chromatography
Ding et al. Simultaneous determination of flavonoid and alkaloid compounds in Citrus herbs by high-performance liquid chromatography–photodiode array detection–electrospray mass spectrometry
Šalamoun et al. Determination of methotrexate and its metabolites 7-hydroxymethotrexate and 2, 4-diamino-N10-methylpteroic acid in biological fluids by liquid chromatography with fluorimetric detection
Saarinen et al. Screening and determination of β-blockers, narcotic analgesics and stimulants in urine by high-performance liquid chromatography with column switching
Du et al. Determination of 43 pesticide residues in intact grape berries (Vitis vinifera L.) by using an ultrasound-assisted acetonitrile extraction method followed by LC–MS/MS
del Pilar Godoy-Caballero et al. Sensitized synchronous fluorimetric determination of trans-resveratrol and trans-piceid in red wine based on their immobilization on nylon membranes
KR20060007077A (ko) 고성능 액체 크로마토그래피를 이용한 1,3-디페닐프로판유도체 분석방법
Jin et al. Analysis of indandione anticoagulant rodenticides in animal liver by eluent generator reagent free ion chromatography coupled with electrospray mass spectrometry
Wu et al. Determination of moutan tannins by high‐performance liquid chromatography and capillary electrophoresis
Hassan et al. Dispersive liquid-liquid microextraction of parabens from pharmaceuticals and personal care products prior to their determination using HPLC-DAD
CN108490086B (zh) 利用液相色谱-离子淌度差分质谱联用技术定量分析福大赛因同分异构体的方法
Šafra et al. Determination of Phenolic Acids in Herba Epilobi by ITP–CE in the Column-Coupling Configuration

Legal Events

Date Code Title Description
WITN Withdrawal due to no request for examination