KR20050055096A - Phamaceutical composition comprising poria cocas wolf, cyperus rotundu, pinellia ternata tenore et breit, citrus nobilis, euphoria longana, nymphaea nelumbo l., aucklandia lappa dene, gardenia jasminoides for. grandiflora as main ingredients - Google Patents

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Abstract

본 발명은 물추출물에 존재하는 백복령(Poria cocas Wolf), 향부자(Cyperus rotundu), 반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.), 진피(Citrus nobilis), 용안육(Euphoria longana), 연자육(Nymphaea nelumbo L.), 목향(Aucklandia lappa Dene), 치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora)의 분말이나 또는 이의 물에서 선택된 용매로 추출한 엑스로 조성된 의약 조성물이며 본 조성물은 심혈관계질환인 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상의 치료에 탁월한 의약적 조성물을 가진다.The present invention is present in the water extract (Poria cocas Wolf), Cyperus rotundu, Pinja (Pinellia ternata Tenore et Breit.), Dermis (Citrus nobilis), Euphoria longana, Nyphaea nelumbo L. A pharmaceutical composition consisting of extracts from powders of Aucklandia lappa Dene, Gardenia jasminoides for grandiflora, or water selected from them.The composition is composed of cardiovascular diseases such as hypertension, hypertension, stroke, and myocardial infarction. It has a pharmaceutical composition that is excellent for the treatment of symptoms caused by angina and thrombus.

Description

백복령, 향부자, 반하, 진피, 용안육, 연자육, 목향, 치자를 주성분으로 함유하는 의약 조성물{Phamaceutical composition comprising Poria cocas Wolf, Cyperus rotundu, Pinellia ternata Tenore et Breit, Citrus nobilis, Euphoria longana, Nymphaea nelumbo L., Aucklandia lappa Dene, Gardenia jasminoides for. grandiflora as main ingredients} Pakaceutical composition comprising Poria cocas Wolf, Cyperus rotundu, Pinellia ternata Tenore et Breit, Citrus nobilis, Euphoria longana, Nymphaea nelumbo L., Aucklandia lappa Dene, Gardenia jasminoides for. grandiflora as main ingredients}

본 발명은 백복령(Poria cocas Wolf), 향부자(Cyperus rotundu), 반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.), 진피(Citrus nobilis), 용안육(Euphoria longana), 연자육(Nymphaea nelumbo L.), 목향(Aucklandia lappa Dene), 치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora)의 의약 조성물을 주성분으로 심혈관계질환인 고혈압, 고지혈증, 중풍, 심근경색, 협심증같은 심혈관계질환 및 혈전에 의한 증상의 치료에 탁월한 의약적 조성물을 함유하는 약학적 효능에 관한 것이다. The present invention includes Poria cocas Wolf, Cyperus rotundu, Pinellia ternata Tenore et Breit., Dermis (Citrus nobilis), Euphoria longana, Nyphaea nelumbo L., Auklandia lappa Dene) and gardenia (Gardenia jasminoides for.grandiflora) as the main component of the cardiovascular diseases such as hypertension, hyperlipidemia, stroke, myocardial infarction, angina pectoris and cardiovascular diseases such as angina and excellent medicinal composition for the treatment of symptoms caused by blood clots It relates to pharmaceutical efficacy.

현재 우리나라에서도 심혈관계질환으로 국가기간인력인 30-40대의 고급인력들이 과중한 업무로 인한 돌연사내지 심각한 심혈관질환의 증세를 호소하는 경우가 매년 증가 추세인 것으로 알려져 있다. 이러한 고혈압, 고지혈증, 협심증, 중풍, 심근경색같은 증상은 육류섭취, 흡연과다, 콜레스테롤 및 혈전에 의해으로 진행되고 유전적인 요인에 의해서도 발병되는데 현대 직장인경우 과도한 업무 스트레스가 주요인이기도 하여 사회적 손실이나 본인의 생활 지장 초래뿐만 아니라 의료부담이 많이 차지하고 있어 임상 분야에 전반적으로 활용할 수 있는 신물질의 개발이 절실히 요청되고 있는 실정이다. It is known that the number of senior workers in their 30s and 40s, who are national workers, complain of sudden or severe cardiovascular disease due to heavy work. Symptoms such as hypertension, hyperlipidemia, angina pectoris, stroke and myocardial infarction are caused by meat intake, excessive smoking, cholesterol and blood clots, and are also caused by genetic factors. Excessive work stress is a major factor in modern workplaces. Not only does it cause a lot of problems, but also a lot of medical burdens, the development of new materials that can be used in the overall clinical field is urgently required.

본 질환같은 고혈압, 고지혈증, 중풍, 심근경색, 협심증같은 심혈관계질환은 현대 의료기술로 혈전에 의해 치유가 많이 향상되어 회복속도가 높은편이지만 이 질환들은 콜레스테롤이나, NO, 혈전, 심근조직의 유전적 결함에 의해 세포내에 많은 생화학적 변화를 나타내는데 이들 변화의 대부분은 미토콘드리아 장애(mitochondrial dysfunction), 산소유리기 혹은 지질관산화(lipid peroxidation)의 축적, 핵산합성의 억제, 전해질 균형의 변화와 관련되어 사람이나 동물에서 심부전을 비롯하여 심경색등을 유발한다는 보고가 된 바 있는데 심근세포의 괴사에 관한 질환의 병인에 대한 기전을 비롯하여 치료방법의 접근에 대한 활발한 연구가 진행중에 있다. 심혈관계 치료제의 제약시장 주도에 힘을 실어 준 것은 1990년대에 뛰어난 약효를 자랑한 스타틴계열(statin drug)의 항고지혈증(anticholesterol) 치료제와 안지오텐신 II 저해제(angiotensin II inhibitors) 계열의 약물이 기존의 약물을 대신했기 때문이다. 비즈니스 커뮤니케이션사의 보고서는 심혈관계 치료제를 아드레날린 억제제(adrenergic inhibitors), 아드레날린 자극제(adrenergic stimulators), 안지오텐신전환효소 저해제(angiotensin converting enzyme inhibitors;ACE inhibitors), 안지오텐신 II 저해제, 베타차단제(beta blockers), 칼슘채널 차단제(calcium channel blockers), 항혈전 치료제(antithrombics), 이뇨제(diuretics), 스테로이드 및 스테로이드성 글루코사이드(steroidal glycosides),혈관확장제(vasodilators),혈압상승제(vasopressor), 그리고 기타약물 등이 생산되고 있다고 보고하였다. 한편, Millenium Pharmaceuticals, Inc은 atherosclerosis, hypertension, restenosis, 및 arterial inflammation 등의 심혈관계 질환 치료와 관련된 생리활성 물질로는 혈관 내피세포 성장인자(vascular endothelial growth factor), 안지오포이에틴-1(angiopoietin-1), 섬유아세포 성장인자(fibroblast growth factor)들이 있는데, 상기 물질에 대한 유전자 발견, 재조합 및 단백질 생산은 허혈성 질환치료를 위한 치료제로 개발이 진행되고 있으며 의약 산업에 유용할 것으로 보인다. 이러한 혈관생성 인자와 관련한 특허로 (PCT:US 1995/05659호, PCT:AU 1996/000094호, PCT:US1997/15471호, KR10-1999-0005259호, 국내특허 10-2000-0053812) 등이 있다. 심장에 대한 혈액의 공급이 장애를 받을 때, 세포들은 심장에 대한 혈액의 공급을 늘일 수 있도록 새로운 혈관의 성장을 유도하는 화합물을 생성함으로써 반응하는데, 혈액 공급이 제대로 안 되는 심장 근육 세포의 반응들 중 하나는 혈관 내피 성장인자(VEGF; Vascular Endothelial Growth Factor)를 암호화하는 유전자의 활성화를 포함한다. 예컨대, 티셔 등의 미국특허 제 5,194,596호에 개시되어 있고, (국내특허출원1999-0005259호)는 신규한 안지오포이에틴-5 유전자 및 이를 이용한 재조합 혈관생성 단백질 생산에 관한 것으로, 사람과 생쥐의 심장 cDNA 라이브러리(library)로부터 신규한 안지오포이에틴-5 유전자 염기서열과 아미노산 서열을 분리, 동정하여 포유동물발현 벡터에 삽입한 예, 혈압상승억제 펩타이드 유전자를 이용한 형질전환 토마토로 국내특허출원1998-0009097(1998년03월17일; 대한민국 농촌진흥청)경우는 사람의 카제인 단백질 유래로 혈압상승 억제 활성을 가진 펩타이드의 유전자를 합성하고, 또한 식물체내에서 그 발현을 증가시키고 발현 산물을 안정화하기 위하여 토마토의 유비퀴틴 유전자를 분리하여 혈압상승 억제 펩타이드 유전자와 결합시키고 발현 강화 조절 부위 등을 재조합한 식물 형질전환 운반체를 제작하여 특허등록된 것과 심혈관에 관한 실험적 연구로는 남등이 인삼이 혈압강하 효과와 심박수의 증가현상에 대해 보고하였고 한 등은 혈관내피세포를 자극하여 NO합성효소의 활성을 증가시킨다고 보고하였으며, 유 등이 고려인삼추출물이 혈관평활근의 이완작용있다고 보고하였다. 한편 한의학적인 측면에서 한 등이 심근세포에서 실소산이 활성기에 대한 방어효과를, 허 등이 생맥산에서 대동맥 평활근에서의 NO생성에 관한 연구를 보고하였는데 치유할 수 있다고 예측된다.Cardiovascular diseases such as hypertension, hyperlipidemia, stroke, myocardial infarction, and angina pectoris are modern medical technologies, and the healing rate is improved by blood clots. However, these diseases are associated with cholesterol, NO, blood clots and myocardial tissue. Many biochemical changes in cells are caused by red defects, most of which are associated with mitochondrial dysfunction, accumulation of oxygen free or lipid peroxidation, inhibition of nucleic acid synthesis, and changes in electrolyte balance. In addition, there have been reports of causing heart failure and cardiac infarction in animals, and active researches on the approach of treatment methods including the mechanism of the pathogenesis of diseases related to cardiomyocyte necrosis are ongoing. The pharmaceutical market of cardiovascular therapeutics has helped lead the anti-hyperlipidemic drugs of statin drugs and angiotensin II inhibitors in the 1990s. Because instead. Business Communications reports that cardiovascular drugs include adrenergic inhibitors, adrenergic stimulators, angiotensin converting enzyme inhibitors (ACE inhibitors), angiotensin II inhibitors, beta blockers, calcium channels Calcium channel blockers, antithrombics, diuretics, steroids and steroidal glycosides, vasodilators, vasopressors, and other drugs are being produced. Reported. Millenium Pharmaceuticals, Inc., on the other hand, is a bioactive substance related to cardiovascular diseases such as atherosclerosis, hypertension, restenosis, and arterial inflammation, including vascular endothelial growth factor and angiopoietin-1. 1), fibroblast growth factors (fibroblast growth factors), gene discovery, recombination and protein production for the material is being developed as a treatment for the treatment of ischemic diseases and seems to be useful in the pharmaceutical industry. Patents related to such angiogenesis factors include (PCT: US 1995/05659, PCT: AU 1996/000094, PCT: US1997 / 15471, KR10-1999-0005259, and Korean Patent 10-2000-0053812). . When the blood supply to the heart is impaired, the cells respond by producing compounds that induce the growth of new blood vessels to increase the blood supply to the heart. One includes activation of genes encoding Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF). For example, US Pat. No. 5,194,596 to Tisher et al. (Domestic Patent Application 1999-0005259) relates to the production of a novel angiopoietin-5 gene and recombinant angiogenic proteins using the same. A novel angiopoietin-5 gene sequence and amino acid sequence were isolated and identified from a cardiac cDNA library, and inserted into a mammalian expression vector. In the case of -0009097 (March 17, 1998; Rural Development Administration of Korea), a casein protein derived from human is synthesized a gene of peptide having inhibitory activity to increase blood pressure, and also to increase its expression in plants and stabilize expression products Isolate the ubiquitin gene of tomato and bind it to the peptide for inhibiting blood pressure rise, Experimental studies on cardiovascular and manufacturing of combined plant transgenic carriers reported that Ginseng reported blood pressure lowering effect and increased heart rate in ginseng. Han et al. Stimulated vascular endothelial cells to stimulate NO synthase activity. It was reported that the ginseng extract reported that the ginseng extract had a relaxing effect on vascular smooth muscle. On the other hand, Han et al reported a study on the protective effect of silicic acid on activator activity in cardiomyocytes, and Huh et al. On NO production in aortic smooth muscle in saline malic acid.

본 발명자들은 고혈압, 고지혈증, 중풍, 심근경색, 협심증같은 심혈관계질환와 혈전에 의한 제증상에 사용될 수 있는 한방제제에 관하여 오랜 연구를 행하여 왔다. 그 결과 백복령(Poria cocas Wolf), 향부자(Cyperus rotundu), 반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.), 진피(Citrus nobilis), 용안육(Euphoria longana), 연자육(Nymphaea nelumbo L.), 목향(Aucklandia lappa Dene), 치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora)을 주성분으로 함유하는 고혈압, 고지혈증, 중풍, 심근경색, 협심증같은 심혈관계질환와 혈전에 의한 증상치료의 의약 조성물의 분말이나 또는 물에서 선택된 용매로 추출한 엑스가 분자생물학적 실험에서 고혈압, 고지혈증, 중풍, 심근경색, 협심증같은 심혈관계질환와 혈전에 의한 제증상을 억제하는 놀라운 사실을 발견하여 본 발명을 완성하였다.The present inventors have conducted a long study on herbal preparations that can be used for symptoms of cardiovascular diseases and blood clots such as hypertension, hyperlipidemia, stroke, myocardial infarction and angina pectoris. As a result, Poria cocas Wolf, Cyperus rotundu, Pinellia ternata Tenore et Breit., Dermis (Citrus nobilis), Euphoria longana, Nyphaea nelumbo L., Auklandia lappa Dene ), X-molecules extracted from powders of pharmaceutical compositions for treating cardiovascular diseases and blood clots, including hypertension, hyperlipidemia, stroke, myocardial infarction, and angina pectoris, containing gardenia jasminoides for grandiflora In the biological experiments, the present inventors have found surprising facts that suppress symptoms of cardiovascular diseases and blood clots such as hypertension, hyperlipidemia, stroke, myocardial infarction and angina.

본 발명에 함유하는 약제인 백복령(Poria cocas Wolf)은 적송의 뿌리에 기생하고 적복령은 곰솔 뿌리에 기생한다. 그리고 솔뿌리를 둘러싼 것을 복신이라고 한다. 맛은 달고 심심하며 성질이 평(平)하여 보(補)하는 작용이 있고 이뇨작용을 하지만 강하지 않다. 옛날부터 강장제로 사용되었다. 폐경(肺經)·비경(脾經)·심경(心經)·신경(腎經)·방광경(膀胱經)에 작용하여 비장을 보하고 가래를 삭이며 정신을 안정시킨다. 약리실험 결과에 의하면 이뇨작용과 혈당량을 낮추는 작용, 진정작용 등을 하는 것으로 밝혀졌으며 면역 부활작용을 하는 것으로도 알려져 있다. Baekbokyeong (Poria cocas Wolf), which is the drug contained in the present invention, is parasitic on the root of red pine and reddish green is parasitic on the root of Gomsol. And what surrounds the pine root is called blessed. Taste is sweet and boring, and the nature of the flat (보) has a working effect and diuretic, but not strong. It has been used as a tonic since ancient times. It works on menopause, parenteral, heart, nerve, and bladder to protect the spleen, sputum, and stabilize the mind. The results of pharmacological experiments have been shown to act as a diuretic, lowering blood sugar, sedation, etc., and is also known as an immune resurrection.

향부자(Cyperus rotundu)는 7∼8월에 적색 꽃이 피고 꽃이 2줄로 달리며 10월에 열매가 익는다. 한방에서는 괴근을 통경·진통·감기·조경·건위·경풍·하리·지해·신경통·폐결핵·부인병 등에 사용하는데 주요성분은 정유 Cyperene, Cyperol 등이며 약용부위는 근경으로서 주용도는 예로부터 중국, 인도 등지에서 부인병의 선약으로 일컬어져 온 약재로서 월경불순, 산전산후 두통, 통경(通經), 정혈(精血), 신경안정, 체력강화, 만성 위기능 쇠약, 신경성 소화불량, 식욕 감퇴 등에 특효가 있는 것으로 인정되어 왔다.Cyperus rotundu has red flowers in July-August and flowers in two rows and ripens in October. In oriental medicine, the tuber is used for pain relief, pain relief, cold, landscaping, health, gust, hari, sea, neuralgia, pulmonary tuberculosis, women's diseases, etc. The main ingredients are essential oils such as Cyperene and Cyperol. This medicine has been mentioned as a predecessor of gynecological diseases in Korea. It is effective for menstrual irregularities, postpartum headache, pain, pain, blood pressure, nerve stabilization, physical weakness, chronic gastrointestinal dysfunction, nervous dyspepsia, and loss of appetite. Has been recognized.

반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.)는 근경(根莖)을 반하(半夏)라 한다. 성분으로는homogentisic acid, β-sitosterol-3-o-β-D-glucoside, choline(줄기), ephedrine, arabiana, dihydroxybenzaldehyde등으로 약효는 치습(治濕), 구토, 담궐, 두통, 각기, 痰多, 反胃, 위내정수, 지해구(止咳嘔)에 쓰이며, 줄기, 잎은 나력에 외용(外用)한다. 민간약으로 반하를 생강즙에 담구었다가 임신구토, 구토에 사용하였다고 한다.Pinellia ternata Tenore et Breit. Refers to rhizome (根 夏). Ingredients include homogentisic acid, β-sitosterol-3-o-β-D-glucoside, choline, ephedrine, arabiana and dihydroxybenzaldehyde. It is used in the anti, gastric constant, Jihaegu (구), stems and leaves are external to the force. As a folk medicine, half marinated in ginger juice was used for pregnancy vomiting and vomiting.

진피(Citrus nobilis)는 성미가 온(溫), 고(苦), 신(辛)하며 청피는 익지 않은 귤의 껍질을 말린 것이고 진피 또는 귤피는 익은 귤의 껍질을 건조한 것이다. 신선한 귤껍질은 맛이 맵기 때문에 가능하면 오래묵은 것을 사용하는 것이 좋으며 그래서 오래묵은 귤껍질을 진피(陳皮)라고 한다. 진피는 비타민 C, 구연산이 풍부하게 들어있으며 모세혈관 강화작용을 갖는 비타민 P인 헤스페리딘(Hesperidine)도 들어있다. 진피의 성분중 limonene은 정유의 90% 이상을 차지하며 serotonin, hesperidine 등 flavonoids성분을 다량 함유하고 있다. 진피의 주약리작용은 코의 후각반사에 의한 외분비선의 분비, 지방소화효소인 lipase의 활성증가, 항알레르기효과, 자궁근의 수축 억제, 진정효과, 모세혈과 투과성 억제와 모세혈관 강화에 의한 동맥경화 및 고혈압 예방효과 등이다. 진피의 성질은 따뜻하고 무독하며 맛은 맵고 쓰다. 한방에서 진피는 고미건위약 및 진해거담약, 발한약으로 주로 사용된다. The dermis (Citrus nobilis) is mild, hot and sour, and the dermis is dried tangerine peel and the dermis or tangerine is dried tangerine peel. Fresh tangerine peel tastes good, so it is better to use old one if possible, so the old tangerine peel is called dermis (陳皮). The dermis is rich in vitamin C, citric acid and hesperidine, a vitamin P that is capillary potentiating. Limonene accounts for over 90% of essential oils and contains a large amount of flavonoids such as serotonin and hesperidine. The main pharmacological action of the dermis is secretion of exocrine gland by nose olfactory reflection, increase of lipase activity, anti-allergic effect, suppression of contraction of uterine muscle, sedative effect, inhibition of capillary and permeability and capillary strengthening Hardening and hypertension prevention effect. The nature of the dermis is warm and nontoxic, the taste is hot and bitter. In Chinese medicine, the dermis is mainly used as goyang placebo, antitussive expectorant, and antiperspirant.

지실(Poncirus trifoliata Rafinesque)는 익지 않은 열매를 지실(枳實)라 하고 성분으로 과실에 isosakuranin, naringin, citriforlioside, poncirin이 꽃에 limonene, linalool이 잎에 skimmianine등이 함유. 약효로는 식적불화(食積不和), 위하수, 담음(痰飮), 흉복비만창통(胸腹滿脹通), 거담(去痰), 소식(小食), 행기관중(行氣寬中), 성한미고(性寒味苦)로서 방향성 고미건위약으로 위부창만(胃部脹滿), 위장무력성 소화불량, 알레르기성 체질, 위내가스제거, 자궁하수, 내장이완성 무력증에 쓰인다. The fruit (Poncirus trifoliata Rafinesque) is called raw fruit and contains isosakuranin, naringin, citriforlioside and poncirin in the flowers, limonene in the flowers, and skimmianine in the leaves. Medicinal benefits include food discord, stomach and sewage, mudfish, chest obesity cramps, expectoration, news, small intestine, This is a medicinal herb that is a directional high-density placebo. It is used for gastric ulcer, gastrointestinal dyspepsia, allergic constitution, gastric gas removal, uterine sewage and visceral dysfunction.

용안육(Euphoria longana)은 신경 과민이나 과로로 인해 심장과 비장이 허해 생긴 불면, 건망증 등의 증상에 좋고 건망증과 공포증을 다스리고 지혜를 돕는데도 좋고 vitamina,b1, Tartaric acid, 포도당27%, 서당, 유기산, 사포닌 등이 함유되어 있는데 대추(산조인)과 함께 진정 진경약으로 비슷하 고 약리작용으로 옴균을 억제하는 작용을 나타내며, 강장 작용, 항산화 작용, 면역 기능 활성화 작용이 있으며 소화기 질환을 다스리고, 부인의 백대하를 제거시키며, 관상 동맥 질환, 내이성(內耳性)어지럼증에 유효율을 높인다고 한다. Euphoria longana is good for symptoms such as insomnia caused by nerve hypersensitivity or overwork, insomnia and other conditions.It is also good for the treatment of forgetfulness and phobia and for wisdom.27% of vitamina, b1, Tartaric acid, glucose, organic sugar, organic acid , Saponin, etc., and jujube (Sanjoin) is similar to sedative antifungal and pharmacological action to inhibit S. germ, tonic action, antioxidant action, immune function activation action, digestive diseases, gynecological It is said to be effective in removing coronary artery disease and coronary artery disease and dysentery.

연자육(Nymphaea nelumbo L.)은다년생 수초식물로서, 뿌리가 굵고 짧으나 수염뿌리가 상당히 많이 발생한다. 성분은 Ellagic acid, Gossypitrin, Nymphaeine으로 구성하고 꽃을 지혈, 강장제로 사용한다. 성기능이 약해서 유정, 몽정이 있을 때는 물론이고 부인의 흰색 대하증과 신경이 예민하여 가슴이 뛰고 잘 놀라며 잠을 못자는 증상, 소화기능이 허약하여 설사를 할 때도 우수한 치료효과를 자양, 강장식품으로서 마음을 안정시키고 신장의 기능을 도우며 여성들에게도 좋아서 식품원료, 한방차등으로 다양하게 활용되고 있다. Nyphaea nelumbo L. is a perennial herbaceous plant with thick and short roots but with a large number of beard roots. The composition is composed of Ellagic acid, Gossypitrin, Nymphaeine and flowers are used as hemostasis and tonic. It has weak sexual function, and there are oil wells and dreams, as well as your wife's white malaise and nerves are sensitive, so your heart beats, surprises and can't sleep, and your digestive function is weak. It stabilizes and helps kidney function and is also good for women and is being used in various ways as food raw materials and herbal teas.

용골(Fossilia Ossis Mastodi)은 대형척추동물의 골격의 화석으로 미감하고 주로 calcium이 함유하고 진경안신하고, 고정하며 수검효과가 소염기능이 있다. Keel (Fossilia Ossis Mastodi) is a fossil of skeletons of large vertebrates. It is mainly calcium-containing, hard-relief, fixed, and has an anti-inflammatory effect.

목향(Aucklandia lappa Dene)은 뿌리와 뿌리줄기에 있는 정유(1~5%)를 식혀 결정을 얻는데, 이것을 헬레닌이라고 합니다. 그리고 이눌린, 프세우도 이눌린, 사포닌, 쓴맛물질, 등이 있습니다. 그밖에 스코플레틴, 움벨리페론등이 있습니다. 가슴통증, 이질, 구토에 좋고, 뿌리의 달임액은 가래를 내보내는 작용이 강합니다. 또한 항염작용, 항진된 장운동과 분비작용을 억제합니다. 정유는 방부작용, 항염작용이 있습니다. 가래약, 건위약, 이뇨약, 발한약으로 기관지염, 폐결핵 등 여러가지 호흡기 질병에 쓰입니다. Aucklandia lappa Dene cools the essential oil (1-5%) in the roots and rhizomes to obtain crystals, called helenin. And inulin, pseudo inulin, saponins, bitter substances, etc. Others include Scoplatin and Umbeliferon. Good for chest pain, dysentery, vomiting, and the root decoction has a strong effect of letting out phlegm. It also inhibits anti-inflammatory, increased intestinal motility and secretion. Essential oils have antiseptic and anti-inflammatory properties. It is used for various respiratory diseases including bronchitis and pulmonary tuberculosis.

치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora)는 열매를 치자라고 하며 한방에서는 불면증과 황달의 치료에 쓰고 소염, 지혈 및 이뇨의 효과가 있다. 음식물의 착색제로 쓰고, 옛날에는 군량미의 변질을 방지하기 위해 치자물에 담갔다가 쪄서 저장하였다고 한다.       Gardenia (Gardenia jasminoides for.grandiflora) is called fruit gardenia, and oriental medicine is used to treat insomnia and jaundice and has anti-inflammatory, hemostatic and diuretic effects. It is used as a colorant for food, and in the old days, it was stored in gardenia water and steamed to prevent the deterioration of military taste.

동서양에 의거해서 천연약제를 근거로 많은 치료성과를 거두고 있으므로 본 발명자는 한방 생약으로부터 전래 내려오는 약제에서 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상의 치료에 유용한 약물을 개발하게 되었다.Because of the many therapeutic results based on natural medicines based on the East and West, the present inventors have developed drugs useful for the treatment of symptoms caused by hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina pectoris and thrombus in the medicines derived from herbal medicines. .

본 발명은 백복령(Poria cocas Wolf), 향부자(Cyperus rotundu), 반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.), 진피(Citrus nobilis), 용안육(Euphoria longana), 연자육(Nymphaea nelumbo L.), 목향(Aucklandia lappa Dene), 치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora)을 주성분으로 함유하는 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상의 치료의 의약 조성물또는 그의 엑스를 주성분으로 함유하고 선택된 용매로 추출한 엑스가 첨가된 조성물이 분자생물학적 및 동물 실험에서 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증과 혈전에 의한 증상을 억제하는 놀라운 효과를 보이는 결과를 제공하는 것이다.The present invention includes Poria cocas Wolf, Cyperus rotundu, Pinellia ternata Tenore et Breit., Dermis (Citrus nobilis), Euphoria longana, Nyphaea nelumbo L., Auklandia lappa Dene), the pharmaceutical composition for the treatment of symptoms caused by hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina pectoris and thrombus containing as the main ingredient Gardenia jasminoides for grandiflora, or X as its main ingredient and extracted with a selected solvent The added compositions provide surprising results in the suppression of symptoms caused by hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina pectoris and thrombus in molecular biological and animal experiments.

본 발명의 다른 목적은 백복령(Poria cocas Wolf), 향부자(Cyperus rotundu), 반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.), 진피(Citrus nobilis), 용안육(Euphoria longana), 연자육(Nymphaea nelumbo L.), 목향(Aucklandia lappa Dene), 치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora)을 주성분으로 함유하는 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상의 치료의 의약 조성물 또는 그의 엑스를 주성분으로 함유하고 선택된 용매로 추출한 엑스 첨가를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is Poria cocas Wolf, Cyperus rotundu, Pinellia ternata Tenore et Breit., Citrus nobilis, Euphoria longana, Nyphaea nelumbo L. (Aucklandia lappa Dene), Gardenia jasminoides for.grandiflora, the main component of the treatment of symptoms of hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina and thrombus or its extract as a main component and selected solvent It is to provide the extracted X addition.

상기 생약성분은 각각 분말화하거나, 또는 각각 단독으로 추출하여 엑스를 얻고 이들 엑스를 혼합하거나 또는 필요한 생약성분을 합하고 함께 추출하여도 좋다.Each herbal ingredient may be powdered, or each may be extracted alone to obtain an extract, and these extracts may be mixed or the necessary herbal ingredients may be combined and extracted together.

추출은 사용되는 용매의 비점온도가지 가열하여 행할수 있다.Extraction can be performed by heating to the boiling point temperature of the solvent used.

가열시간은 1시간 내지 12시간 바림직하게는 2시간 내지 6시간 행한다.Heating time is performed for 1 to 12 hours preferably 2 to 6 hours.

다음에 실시예 및 실험예로서 본 발명을 더욱 상세히 기재하며, 이들이 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Next, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Experimental Examples, which do not limit the scope of the present invention. It does not limit the scope of the invention.

실시예 1 Example 1

1. 등 한방약제 총건조중량이 1,000 g되게 중량하여 3차 증류수(또는 정제수)로 10배의 부피로 배합하여 80℃ 조건하에 6시간동안 서서히 열을 가하여 최종적인 부피가 2,000 ml이 되게 한 다음, 이를 감압 농축하여 동결 건조시켜 250g의 동결건조 중량을 얻었다(이하 : 활력생이라 명명) (도 1). 1.Weigh the total dry weight of herbal medicine such as 1,000 g, and mix it with volume of 10 times with tertiary distilled water (or purified water), and gradually heat it for 6 hours under 80 ℃ condition to make the final volume 2,000 ml. Then, it was concentrated under reduced pressure and freeze-dried to obtain a freeze-dried weight of 250g (hereinafter referred to as vitality) (Fig. 1).

2. 물 추출물에서 추출, 분리 정제되는 조성물이다. 본 발명에서는 이러한 추출방법에서 건조중량을 각각 1,000 g을 증류수 10,000 ml에 섞어서 80 ℃ 끊는 수조에, 12시간 중탕한 후 가제로 여과, 추출하여 나온 여과액을 끓는 수욕상에서 6시간 환류 추출하였고 같은 방법으로 1회 더 추출하였다. 이를 다시 감압 농축하여 동결건조하여 250g정도의 건조중량을 획득하였다. 본 발명의 물추출물 엑스를 분리, 정제하는 공정을 제공하는 것은 또 다른 목적으로 한다. 2. A composition that is extracted and separated from the water extract. In the present invention, 1,000 g of dry weight in each of the extraction methods was mixed in 10,000 ml of distilled water, and the resulting filtrate was filtered and extracted by filtering with gauze for 12 hours in a water bath at 80 ° C. in a boiling water bath for 6 hours under reflux. Extracted once more. It was concentrated under reduced pressure again and lyophilized to obtain a dry weight of about 250 g. It is another object of the present invention to provide a process for separating and purifying water extracts X.

상기와 같은 일련의 건조 과정에 수득되는 물엑스는 각각 후술하는 바와 같이 고혈압, 고지혈증, 중풍, 심근경색, 동맥경화, 협심증같은 심혈관계 질환 치료효과를 가지고 있기 때문에 물엑스는 본 발명의 조성물에서 유효성분으로 사용될 수 있다.Water extract obtained in the series of drying as described above is effective in the composition of the present invention because it has a therapeutic effect of cardiovascular diseases such as hypertension, hyperlipidemia, stroke, myocardial infarction, arteriosclerosis, angina as described below Can be used as a component.

실시예 2Example 2

백복령(Poria cocas Wolf), 향부자(Cyperus rotundu), 반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.), 진피(Citrus nobilis), 용안육(Euphoria longana), 연자육(Nymphaea nelumbo L.), 목향(Aucklandia lappa Dene), 치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora)을 주성분으로 함유하는 고혈압, 고지혈증, 중풍, 심근경색, 동맥경화, 협심증같은 심혈관계 질환 치료의 의약 조성을 실시예 1과 같은 방법으로 물로 추출하여 엑스를 얻는다.Poria cocas Wolf, Cyperus rotundu, Pinellia ternata Tenore et Breit., Dermis (Citrus nobilis), Euphoria longana, Nyphaea nelumbo L., Akklandia lappa Dene, The pharmaceutical composition of the treatment of cardiovascular diseases such as hypertension, hyperlipidemia, stroke, myocardial infarction, arteriosclerosis, angina pectoris containing Gardenia jasminoides for grandiflora as a main ingredient is extracted with water in the same manner as in Example 1 to obtain X.

실시예 3Example 3

백복령(Poria cocas Wolf)1 내지 10%중량분, 향부자(Cyperus rotundu)1 내지 10%중량분, 반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.)1 내지 10%중량분, 진피(Citrus nobilis)1 내지 10%중량분, 용안육(Euphoria longana)1 내지 10%중량분, 연자육(Nymphaea nelumbo L.)1 내지 10%중량분, 목향(Aucklandia lappa Dene)1 내지 10%중량분, 치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora)1 내지 10%중량분을 주성분으로 함유하는 고혈압, 고지혈증, 중풍, 심근경색, 동맥경화, 협심증같은 심혈관계 질환 치료의 의약 조성물 실시예 2와 같이 물로 추출하여 분말을 얻는다. 1-10% by weight of Poria cocas Wolf, 1-10% by weight of Cyperus rotundu, 1-10% by weight of Pinellia ternata Tenore et Breit., 1-10% by weight of the dermis (Citrus nobilis) By weight, Euphoria longana 1 to 10% by weight, 1 to 10% by weight of Nyphaea nelumbo L., 1 to 10% by weight of Mokyang (Aucklandia lappa Dene), Gardenia jasminoides for grandiflora Pharmaceutical composition for the treatment of cardiovascular diseases such as hypertension, hyperlipidemia, stroke, myocardial infarction, arteriosclerosis and angina containing 1 to 10% by weight as a main component, and extracted with water as in Example 2 to obtain a powder.

실험 예1 심박수 측정 및 혈관수축력 실험Experimental Example 1 Heart rate measurement and vasoconstriction test

각군별로 흰쥐 6마리를 정상군, 비선택적 NOS억제제인 N-nitro-L-arginine methyl ester (NAME : 50 mg/KG)를 매일 피하주사한 대조군 그리고 활력산경우는 매일 약물과 NAME를 투여하고 14일째된 흰쥐로부터 심장대동맥을 잘라 취한 후 냉각한 Krebs 용액(119mM NaCl, 4.6 mM KCl, 15mM Na₂CO₃, 1.5mM CaCl₂, 1.2mM MgCl₂, 1.2mM NaH₂PO₄, 11mM glucose) 에 담그고 혈관 주위의 지방과 결체조직을 조심스럽게 제거한후 5mㅣ의 길이로 잘랐다. 대동맥 절편을 37℃ 의 5ml 이중병 안에 현수하고 Krebs 용액에 95% O₂- 5%CO₂를 계속 공급하여 주었다. 혈관의 수축력은 force transducer에 연결하여 physiograph로 기록하였다. 혈관의 기본장력(resting tension)이 안정적으로 1.5g을 유지할 때까지 수차례 장력을 조절하면서 15분마다 새로운 Krebs용액으로 갈아주면서 혈관을 90분 이상 안정화시킨 후 25mM KCl을 함유한 Krebs 용액으로 최고 수축력을 측정한 후 혈관을 세척하고 다시 혈관을 30분이상 안정화시킨 후 실험하고자 하는 약물의 수축작용을 측정하였는데 정상군은 1.3±0.2 g, L-NAME 투여군은 2.1±0.5 g 그리고 활력생은 1.4±0.3 g의 수축이 일어나 특히 활력생군에서 유의성 있게 감소하였다(도 2). Six rats in each group were treated with normal and non-selective NOS inhibitor N-nitro-L-arginine methyl ester (NAME: 50 mg / KG) daily. The cardiac aorta was cut out from the rats of the day 1 and submerged in a cooled Krebs solution (119 mM NaCl, 4.6 mM KCl, 15 mM Na₂CO₃, 1.5 mM CaCl₂, 1.2 mM MgCl₂, 1.2 mM NaH₂PO₄, 11 mM glucose) After careful removal, it was cut to a length of 5m ㅣ. The aortic sections were suspended in 5ml double bottles at 37 ° C and 95% O₂-5% CO₂ was supplied continuously to the Krebs solution. The contractile force of blood vessels was recorded in a physiograph connected to a force transducer. Change the tension several times until the vessel's rest tension is maintained at 1.5 g, and then change it to a new Krebs solution every 15 minutes, stabilize the vessel for more than 90 minutes, and then use the Krebs solution containing 25 mM KCl for maximum contraction force. After the blood vessels were washed and the blood vessels were stabilized again for at least 30 minutes, the contraction of the drug to be tested was measured. The normal group was 1.3 ± 0.2 g, the L-NAME group was 2.1 ± 0.5 g and the vital group was 1.4 ±. Shrinkage of 0.3 g occurred and was significantly reduced, particularly in the vital group (FIG. 2).

실험예 2 혈소판 혈장 응집력 및 혈전형성 억제능력 측정 Experimental Example 2 Measurement of Platelet Plasma Cohesion and Thrombosis Formation Ability

혈액으로부터 항응고를 위해 0.38% sodium citrate 와 1% glucose를 사용하여 백혈구, 적혈구 등 혈소판이외의 혈구세포들은 원심분리기를 사용하여 침전시켜 제거하고 대부분의 혈소판은 상등액인 혈장에 남아 있도록 하여 PRP (platelet rich plasma)를 조제하기 위해 200 x g에서 10분간 원심분리하여 상등액 혈소판 혈장(PRP)을 조제한 다음 10 mM HEPES buffer (pH7.4 : 140 mM NaCl, 5mM NaHCO3, 0,5mM MgCl2, 3mM KCl, 140 mM glucose)가 들어 있는 혈소판 혈장 160㎕에 20㎕ 검색시료액을 넣고 37℃ 에서 2분간 배양하고 혈소판 응집 유도물질인 collagen(C) 내지 thrombin(T) 20㎕을 첨가하여 세척한 혈소판을 시험관에서 혈장에 재현탁시켜 2 mM calcium이 들어 있는 10 nM thrombin이나 collagen (100 ㎍/ml)으로 반응시켜 약물을 처리하고 30분간 실온에서 반응을 지켜 혈전반응을 유도한 결과 정상군은 혈전이 거의 나타나지 않는 반면 대조군(T+C)은 강하게 혈전이 유도되었으나 활력생경우 감소하는 경향을 보였다(도 3).Using anti-coagulation from blood, 0.38% sodium citrate and 1% glucose were used to precipitate and remove non-platelet cells such as leukocytes and erythrocytes using a centrifuge, and most of the platelets remained in the supernatant plasma. In order to prepare rich plasma, supernatant platelet plasma (PRP) was prepared by centrifugation at 200 xg for 10 minutes, followed by 10 mM HEPES buffer (pH7.4: 140 mM NaCl, 5 mM NaHCO3, 0,5 mM MgCl2, 3 mM KCl, 140 mM). Into a platelet plasma containing glucose), 20 μl of the test sample solution was added and cultured for 2 minutes at 37 ° C., and platelets washed by adding 20 μl of collagen (C) to thrombin (T), which are inducers of platelet aggregation, were washed in a plasma tube. Resuspended and reacted with 10 nM thrombin or collagen (100 ㎍ / ml) containing 2 mM calcium to treat the drug and keep the reaction at room temperature for 30 minutes to induce thrombosis. On the other hand it does not appear the control group (T + C) is decreased when energy production, but thrombus is induced strongly (Fig. 3).

실험예 3 ECV304 혈관내피세포 생존율Experimental Example 3 ECV304 Vascular Endothelial Cell Survival Rate

본 실험에 사용된 세포주인 ECV304는 충북대 의과대 정규보 교수으로부터 분양받아 계대배양시켜 5% FBS가 함유한 DMEM 배지에 penicillin/streptomycin을 첨가하여 flask 내지 cell culture용 dish에 배양하면서 103 세포를 6-well plate에 분주하고 37℃ 에서 하룻밤 배양하여 80%정도 조밀차게 배양한 다음 serum free medium으로 2번 세척한 후 1 ml SFM을 첨가하고 10 nM thrombin이나 collagen (100 ㎍/ml)으로 반응시켜 약물을 처리하여 심혈관계의 혈관손상을 유도하여 세포생존율을 조사하기 위해 정산군, agonist를 처리한 대조군 그리고 agonist와 활력생을 처리한 실험군으로 구분하여 37℃ 에 12시간 배양한 다음 각군의 배양액 100 ㎕를 96-well plate에 옮기고 pyruvate substrate (NADH 1mg/ml)를 20 ㎕씩 가한 다음, 상온에서 2분간 혼합후 37℃ 에서 30분간 더 흔들었다. 발색시약(color reagent, Sigma 505-2)를 20㎕씩 가한후 상온에서 20분간 혼합다음 0.4N NaOH를 100㎕씩 가하고 상온에서 15분간 더 혼합후 ELISA reader로 흡광도를 측정하였다. 모든 실험은 최소한 3회 수행하였으며 대조군은 백분율로 (% Control)로 표시하였으며 통계학적 유의성은 t-test에 의한 P<0.05의 유의성으로 나타내었고 그 결과로 혈관 내피세포의 정상군, 혈소판 활성 유도물질인 collagen 와 thrombin 20㎕에 의해 괴사를 유도하여 활력생을 첨가한 투여군의 괴사 저해능력에서 정상군은 내피세포의 괴사가 100% 이내로 유도되지만 활력생경우에는 괴사정도가 50% 저해되는 약물범위인 IC50가 약 25 ㎍/ml정도였으며 두 유도물질의 첨가에 의해 세포괴사를 유도하지만 활력생에 의해 내피세포의 괴사가 저해됨을 사료된다(도 4).The cell line ECV304 used in this experiment is a 10 3 cells were cultured on a dish for flask to cell culture by the addition of penicillin / streptomycin in DMEM medium containing 5% FBS by subculture receive pre-sale from excessive regular beam professor of Chungbuk 6 Dispense in a well-well plate, incubate overnight at 37 ° C, incubate at 80% density, wash twice with serum free medium, add 1 ml SFM, and react with 10 nM thrombin or collagen (100 ㎍ / ml). Induced vascular damage of the cardiovascular system by treatment in order to investigate the cell survival rate, divided into the control group, the control group treated with agonist, and the experimental group treated with agonist and vitality, incubated for 12 hours at 37 ℃ and then 100 μl of each group Was transferred to a 96-well plate and 20 μl of pyruvate substrate (NADH 1mg / ml) was added thereto, followed by mixing at room temperature for 2 minutes and shaking at 37 ° C. for 30 minutes. After 20 μl of color reagent (Sigma 505-2) was added and mixed for 20 minutes at room temperature, 100 μl of 0.4N NaOH was added and mixed for 15 minutes at room temperature, and then absorbance was measured by ELISA reader. All experiments were performed at least three times, and the control group was expressed as a percentage (% Control). The statistical significance was indicated as P <0.05 by t-test, and as a result, the normal group of vascular endothelial cells and platelet activity inducer. Necrosis induced by necrosis by collagen and thrombin 20μl in the necrosis inhibiting ability of the group to which vigor was added, the normal group induced the necrosis of endothelial cells within 100%, but in the vigorous case, the degree of necrosis was inhibited by 50%. IC 50 was about 25 [mu] g / ml and the necrosis of endothelial cells was inhibited by the activation of apoptosis by the addition of two inducers (Fig. 4).

실험예 4 ECV304 혈관내피세포의 Tunel assayExperimental Example 4 Tunel assay of ECV304 vascular endothelial cells

혈관내피세포인 ECV304를 통해 agonist인 thrombin을 심혈관계의 혈관손상을 유도하여 세포사 억제효과를 조사하기 위해 정산군, agonist를 처리한 대조군 그리고 agonist와 활력생을 처리한 실험군으로 구분하여 37℃ 에 12시간 배양한 다음 cover glass에 분주하고 하룻밤 배양한 다음 약물농도가 25 ㎍/ml농도가 되도록 가한 다음 6시간후에 세포사를 억제하는지 조사하기 Tunel assay방법을 수행하였다. 배지를 제거하고 PBS로 세척한 다음 세포를 4% p-formaldehyde로 12시간동안 4 에서 고정시킨 다음 0.5% Tween 20, 0.2% BSA ( bovine serum albumin)을 첨가하여 실온에서 15분간 침투과정을 실시하고 PBS로 3회 세척을 실시하고 세포내 염색체 DNA nick 말단을 표지하기 위해 terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)용액( TdT완충액, biotin-dUTP, TdT=18:1:1) 5㎕를 떨어 뜨려서 37℃ 에서 1시간 유지하고 증류수로 3회 세척한다음 blocking 용액인 0.5% BSA를 50㎕정도 첨가하여 실온에서 10분간 정치하여 놓는 다음 streptoavidine-FITC용액 50㎕첨가하여 30분간 실온에서 유지하고 PBS로 3회 세척한 다음 slide glass 위에 mounding 용액을 약간 떨어뜨리고 엎어놓고 형광현미경하에서 관찰하여 녹색의 형광염색 유무를 판정하여 세포사를 확인하였으며 정상군, 혈소판 활성 유도물질인 collagen와 thrombin에 의해 괴사를 유도한 대조군, 활력생25 ㎍/ml을 처리한 투여군의 세포핵을 조사한 결과 정상군은 미미하게 Tunel assay의 반응을 보인 반면 대조군은 강한 녹색형광을 보임으로 세포핵의 절단이 유도되었다는 결과를 보였고 활력생은 녹색형광신호가 감소하는 경향을 보였다(도 5). To investigate the effect of thrombin, agonist on cardiovascular injury by inducing cardiovascular damage through ECV304, vascular endothelial cells, the control group was treated with agonist-treated control group and agonist and vigor-treated experimental group. After incubation for 4 hours, the cells were dispensed on a cover glass, incubated overnight, and the drug concentration was added to a concentration of 25 ㎍ / ml. After 6 hours, Tunel assay was performed to investigate whether cell death was inhibited. After removing the medium and washing with PBS, the cells were fixed at 4 for 4 hours with 4% p-formaldehyde, and then infiltrated at room temperature for 15 minutes by adding 0.5% Tween 20 and 0.2% BSA (bovine serum albumin). Wash 3 times with PBS and drop 5 µl of terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) solution (TdT buffer, biotin-dUTP, TdT = 18: 1: 1) to label intracellular chromosomal DNA nick ends. Maintain time and wash 3 times with distilled water, add 50μl of 0.5% BSA blocking solution, leave at room temperature for 10 minutes, add 50μl of streptoavidine-FITC solution, keep at room temperature for 30 minutes and wash 3 times with PBS. Next, drop the mounding solution on the slide glass, place it upside down, and observe it under the fluorescence microscope to determine the presence of green fluorescence staining. The cell death was confirmed by necrosis by the normal group, collagen and thrombin. Investigation of the nucleus of the treated control group and the treated group treated with 25 ㎍ / ml induced the cell nucleus cleavage by the control group showing a strong green fluorescence while the control group showed a strong green fluorescence. The green fluorescence signal showed a tendency to decrease (FIG. 5).

실험예 5 심장세포의 조직분석법Experimental Example 5 Tissue Analysis of Heart Cells

흰쥐심장 주변부인 동맥내피세포의 조직괴사가 약물에 의해 보호를 받았거나 괴사가 일어났는지 존재를 확인하기 위해 정상군, NAME(50 mg/KG)로 2주간 피하주사한 대조군과 활력생을 경구투여한 군으로 흰쥐를 ketamin으로 마취한 다음 절개한 후 심장동맥을 중심으로 주변부를 paraffin 포매를 실시하여 면역조직화학 염색을 수행하였다. 2주간 약물을 경구투여를 실시한 후 교살하여 심장 조직부위를 formalin으로 고정한 후 5 ㎛ 두께로 microtome으로 절단하고 연속절편을 2N HCl용액에서 20분간 반응시켜 DNA-denaturation을 수행하고 0.1M borate 완충액을 처리하여 안정시킨 후 비특이적인 면역반응을 억제하기 위해 0.01%의 proteinase K (DAKO, Denmark)가 포함된 0.5% bovine serum albumin을 1시간동안 반응시켰다. 다음 1차항체인 iNOS와 CPP는 4℃ 냉장실에서 12시간동안 반응시켰다. Horseradish peroxidase-antibody가 표지된 avidin biotin complex (ABC: Vector Lab, USA)에 1시간동안 실온에서 반응시킨 후 0.05% 3,3-diaminobenzidine (DAB : Sigma)과 0.01% HCl이 포함된 0.05M Tris-HCl완충액 (pH 7.4)에서 발색시킨 후 광학현미경으로 H/E염색은 100X 현미경하에서 관찰하였는데 심장동맥을 중심으로 주변부의 동맥이 잘 발달되어 있지만 L-NAME처리군은 괴사가 진행되어 소실되거나 파괴된 흔적이 보였는데, 특히 주변 혈관내피세포의 두께가 감소하는 대조군과 달리 약물처리군은 세포증식을 유도하는데 기인하여 두께가 정상군과 유사한 결과를 보였다. 또한 혈관주변의 파괴정도를 관찰해보면 대조군은 혈관이 괴사로 인한 파괴가 일어나지만 활력생은 정상군과 유사하게 내피세포의 분포도가 균일하게 유지함을 알 수 있었다. 한편 도 6서처럼 대조군의 동맥부 주변부에는 iNOS가 강하게 갈색반응을 보이는 것을 보아 세포괴사가 강하게 유도됨을 알수 있었고 대조군이 혈관 주변부에서 강하게 갈색반응을 보이는 것은 NAME에 의한 내피세포의 세포사가 강하게 진행함이 사료되고 이에 반해 활력생은 약하게 발현되는 경향을 보였다. 이러한 결과로 유추해볼 때 혈관주변의 파괴는 CPP3가 동시에 발현을 유도하는 것을 추측되는데 L-NAME에 의한 내피세포의 세포사는 iNOS에 의한 NO영향으로 세포사내지 괴사가 유도되어 동맥경화나 심장조직의 파열로 인한 심근경색이나 심장마비가 발생될수 있다는 가설에서 활력생이 이를 억제하는 성분이 함유됨을 사료된다. To confirm the presence of necrosis or tissue necrosis of arterial endothelial cells in the periphery of the rat heart, oral administration of the control group and vitals administered subcutaneously with NAME (50 mg / KG) for 2 weeks. In one group, rats were anesthetized with ketamin, and then dissected and paraffin embedded around the coronary artery to perform immunohistochemical staining. After oral administration of the drug for 2 weeks, strangulation was performed to fix the cardiac tissue area with formalin, cut into microtome with a thickness of 5 μm, and serial sections were reacted for 20 minutes in 2N HCl solution to perform DNA-denaturation and 0.1M borate buffer treatment. After stabilizing the cells, 0.5% bovine serum albumin containing 0.01% proteinase K (DAKO, Denmark) was reacted for 1 hour to suppress nonspecific immune responses. The next primary antibody, iNOS and CPP, were reacted for 12 hours in a 4 ° C. cold room. Horseradish peroxidase-antibody-labeled avidin biotin complex (ABC: Vector Lab, USA) reacted at room temperature for 1 hour at 0.05M Tris- containing 0.05% 3,3-diaminobenzidine (DAB: Sigma) and 0.01% HCl. After staining with HCl buffer (pH 7.4), H / E staining was observed under the optical microscope under 100X microscope. The periarterial artery was well developed around the coronary artery, but the L-NAME treatment group lost or destroyed due to necrosis. In particular, unlike the control group in which the thickness of peripheral vascular endothelial cells was reduced, the drug treatment group showed similar results to the normal group due to the induction of cell proliferation. In addition, when the degree of vascular periphery was observed, the control group caused the destruction of blood vessels due to necrosis, but the vitality of the endothelial cells was maintained uniformly, similar to the normal group. On the other hand, iNOS showed a strong brown reaction in the periphery of the control arteries as shown in FIG. 6, indicating that the cell necrosis was strongly induced, and that the control showed a strong brown reaction at the periphery of the blood vessels. In contrast, the livestock tended to be weakly expressed. These results suggest that CPP3 induces the expression of perivascular disruption at the same time. Endothelial cell death by L-NAME is induced by NO-induced NO death by iNOS, leading to cell death and necrosis. The hypothesis that myocardial infarction or cardiac arrest may occur is thought to contain a component that inhibits vitality.

이상의 실험결과로부터 확인되는 바와 같이, 본 발명의 활력생의 의약조성물은 탁월한 약학적으로 심혈관계질환인 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상의 치료효과를 가진다. 따라서, 본 발명은 심혈관계질환인 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상의 치료에 약학적 효능으로서 유용하게 사용될 수 있다. 본 발명의 약학적 효능으로 환자의 성별, 나이, 질병의 정도 등에 의하여 그 사용량이 달라질 수 있으나, 본 발명의 조성물을 물이나 유기용매로 추출하지 않고, 생약 자체를 사용하는 경우에는 일일 1.0g 내지 50g의 양을 사용할 수 있으며, 엑스의 형태로 사용될 경우에는 일일 10mg 내지 1000mg을 일일 1회 내지 수회 투여할 수 있다. As confirmed from the above experimental results, the active pharmaceutical composition of the present invention has excellent pharmacological effects of treating hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina pectoris and thrombosis. Therefore, the present invention can be usefully used as a pharmaceutical effect in the treatment of symptoms caused by cardiovascular diseases hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina pectoris and thrombus. The amount of the drug may vary depending on the sex, age, and severity of the patient due to the pharmacological effects of the present invention. However, when the herbal medicine itself is used without extracting the composition of the present invention with water or an organic solvent, the amount of the drug may be 1.0 g per day. An amount of 50 g may be used, and when used in the form of X, 10 mg to 1000 mg per day may be administered once to several times per day.

본 발명의 화합물은 심혈관계질환인 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상에 효능을 가지는 기존에 이미 약제로 사용되고 있는 칼슘길항제, 레닌 억제제중에서 선택된 1종 이상의 약물을 더 함유하고, 여기에 약제학적으로 통상으로 허용되는 부형제, 보조제, 희석제, 등장화제, 보존제, 활탁제, 용해보조제와 함께등과 같은 약물과 병용하여 사용될 수도 있다.The compound of the present invention further contains at least one drug selected from calcium antagonists and renin inhibitors, which are already used as drugs, having an effect on symptoms caused by cardiovascular diseases such as hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina pectoris and thrombus. It may also be used in combination with drugs such as excipients, adjuvants, diluents, isotonic agents, preservatives, suspending agents, solubilizing agents, and the like, which are pharmaceutically conventionally acceptable thereto.

본 발명의 화합물과 상기의 약물을 병용하면, 기존 약물의 상용량을 줄일 수 있고, 따라서 기존 약물들이 가지는 문제점들을 경감시킬 수 있다.By using the compound of the present invention and the above drug, it is possible to reduce the normal dose of the existing drug, thereby reducing the problems with the existing drugs.

본 발명의 화합물은 약제학적으로 통상으로 사용되는 부형제, 보조제, 무통화제, 등장화제, 보존제 및 기타 약제학적으로 통상으로 허용되는 보조제와 혼합하고 약제학적으로 통상으로 허용되는 제제형태로 제제화하여 약학적 제제를 제조할 수 있다. 이러한 약제학적 제제형태로는 주사제, 액제, 정제, 캡슐제, 산제, 시럽제 등으로 제제화 할 수 있다.The compounds of the present invention are mixed with excipients, adjuvants, analgesics, isotonic agents, preservatives and other pharmaceutically acceptable adjuvants used in the pharmaceutical industry, and formulated in the form of pharmaceutically acceptable formulations for pharmaceutical preparation. Formulations may be prepared. Such pharmaceutical preparations may be formulated into injections, solutions, tablets, capsules, powders, syrups and the like.

다음에 제제실시예로서 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.Next, the present invention will be described in more detail as formulation examples.

제제실시예 1 Formulation Example 1

실시예 1 의 물엑스 분말 500mg500 mg of water extract powder of Example 1

유당 100mgLactose 100mg

전분 100mgStarch 100mg

테르페나딘 적량Terpenadine

상기의 성분을 혼합하고 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.The above components are mixed and tableted according to a conventional method for producing tablets to produce tablets.

제제실시예 2 Formulation Example 2

실시예 1의 물엑스 분말 500mWater extract powder 500m of Example 1

유당 100mgLactose 100mg

전분 50mgStarch 50mg

Cetirizine 적량Cetirizine appropriate amount

상기의 성분을 혼합하고 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.The above components are mixed and tableted according to a conventional method for producing tablets to produce tablets.

제제실시예 3Formulation Example 3

실시예 1의 물엑스 분말 500mg500 mg of water extract powder of Example 1

유당 100mg Lactose 100mg

지르텍 2 mgZirtec 2 mg

상기의 성분을 혼합한 후 내부가 폴리에틸렌클로라이드로 코팅된 지포에 충진하고 씰링하여 산제를 제조한다.After mixing the above components, the inside is filled with a polyethylene coated coated chloride and sealed to prepare a powder.

제제실시예 4Formulation Example 4

실시예 1의 엑스 500mgX 500mg of Example 1

이상에서 상세히 설명한 바와 같이 백복령(Poria cocas Wolf), 향부자(Cyperus rotundu), 반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.), 진피(Citrus nobilis), 용안육(Euphoria longana), 연자육(Nymphaea nelumbo L.), 목향(Aucklandia lappa Dene), 치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora)을 주성분으로 함유하는 심혈관계질환인 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상치료의 의약 조성물분말이나 또는 물에서 선택된 용매로 추출한 엑스를 주성분으로 함유하는 조성물은 심혈관계질환인 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상에 탁월한 약학적 효능이 있다.As described in detail above, Poria cocas Wolf, Cyperus rotundu, Pinellia ternata Tenore et Breit., Dermis (Citrus nobilis), Euphoria longana, Nyphaea nelumbo L., Mokhyang (Aucklandia lappa Dene), a pharmaceutical composition for treating symptomatic diseases caused by hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina pectoris and blood clots, which are cardiovascular diseases, which contains Gardenia lapoide (Gardenia jasminoides for grandiflora) as a main ingredient. The composition containing the extracted X as a main component has excellent pharmaceutical effects on the symptoms of cardiovascular diseases such as hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina pectoris and blood clots.

도 1은 의약조성물인 활력생의추출과정에 따르는 건조중량을 회수하는 방법을 나타낸 것이다.Figure 1 shows a method for recovering the dry weight according to the extraction process of the active compound as a pharmaceutical composition.

도 2은 활력생이 심장 수축력 완화정도를 나타낸 것이다.Figure 2 shows the vitality of the heart contractility relief.

도 3은 활력생이 혈소판응집 억제효과를 나타낸 것이다.Figure 3 shows the vitality of the platelet aggregation inhibitory effect.

도 4은 활력생이 혈관내피세포 괴사억제정도를 나타낸 것이다Figure 4 shows the vitality of the vascular endothelial necrosis inhibition

도 5은 tunel assay를 통해 확인한 세포사 억제효과를 나타낸 것이다Figure 5 shows the cell death inhibitory effect confirmed by the tunel assay

도 6은 심장조직 괴사에 관계하는 단백질발현을 나타낸 것이다Figure 6 shows the protein expression related to heart tissue necrosis

Claims (2)

백복령(Poria cocas Wolf)1 내지 10%중량부, 향부자(Cyperus rotundu)1 내지 10%중량부, 반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.)1 내지 10%중량부, 진피(Citrus nobilis)1 내지 10%중량부, 용안육(Euphoria longana)1 내지 10%중량부, 연자육(Nymphaea nelumbo L.)1 내지 10%중량부, 목향(Aucklandia lappa Dene)1 내지 10%중량부, 치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora) 1 내지 10%중량부에서 분말 또는 이의 물에서 선택된 용매로 추출한 엑스를 함유한 심혈관계질환인 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상의 치료에 탁월한 약학적 조성물.1-10% by weight of Poria cocas Wolf, 1-10% by weight of Cyperus rotundu, 1-10% by weight of Pinellia ternata Tenore et Breit., 1-10% by weight of the dermis (Citrus nobilis) Parts by weight, 1 to 10% by weight of Euphoria longana, 1 to 10% by weight of Nyphaea nelumbo L., 1 to 10% by weight of Aurlandia lappa Dene, Gardenia (Gardenia jasminoides for. Grandiflora) A pharmaceutical composition excellent in the treatment of symptoms caused by hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina and thrombus, which is a cardiovascular disease containing x extracted with a solvent selected from powder or water at 1 to 10% by weight. 백복령(Poria cocas Wolf)1 내지 10%중량부, 향부자(Cyperus rotundu)1 내지 10%중량부, 반하(Pinellia ternata Tenore et Breit.)1 내지 10%중량부, 진피(Citrus nobilis)1 내지 10%중량부, 용안육(Euphoria longana)1 내지 10%중량부, 연자육(Nymphaea nelumbo L.)1 내지 10%중량부, 목향(Aucklandia lappa Dene)1 내지 10%중량부, 치자(Gardenia jasminoides for. grandiflora)1 내지 10%중량부 또는 이의 물에서 선택된 용매로 추출한 엑스를 함유한 심혈관계질환인 고질혈증, 고혈압, 중풍, 심근경색, 협심증와 혈전에 의한 증상의 치료에 탁월한 약학적 효능1-10% by weight of Poria cocas Wolf, 1-10% by weight of Cyperus rotundu, 1-10% by weight of Pinellia ternata Tenore et Breit., 1-10% by weight of the dermis (Citrus nobilis) Parts by weight, 1 to 10% by weight of Euphoria longana, 1 to 10% by weight of Nyphaea nelumbo L., 1 to 10% by weight of Aurlandia lappa Dene, Gardenia (Gardenia jasminoides for. Grandiflora) Excellent pharmaceutical efficacy in the treatment of symptoms caused by hypertension, hypertension, stroke, myocardial infarction, angina pectoris and thrombus, which is a cardiovascular disease containing X extracted with 1 to 10% by weight or a solvent selected from water thereof
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